CS276627B6 - Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) TUL. CCM 8059 - Google Patents
Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) TUL. CCM 8059 Download PDFInfo
- Publication number
- CS276627B6 CS276627B6 CS891802A CS180289A CS276627B6 CS 276627 B6 CS276627 B6 CS 276627B6 CS 891802 A CS891802 A CS 891802A CS 180289 A CS180289 A CS 180289A CS 276627 B6 CS276627 B6 CS 276627B6
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- alkaloids
- ergocryptine
- ccm
- sclerotia
- tul
- Prior art date
Links
- 241000221751 Claviceps purpurea Species 0.000 title claims abstract description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims description 5
- 229950001817 alpha-ergocryptine Drugs 0.000 claims abstract description 18
- YDOTUXAWKBPQJW-UHFFFAOYSA-N alpha-Ergocryptinine Natural products C1=CC(C=2C(N(C)CC(C=2)C(=O)NC2(C(=O)N3C(C(N4CCCC4C3(O)O2)=O)CC(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=CNC3=C1 YDOTUXAWKBPQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- YDOTUXAWKBPQJW-NSLWYYNWSA-N alpha-ergocryptine Chemical compound C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@]2(C(=O)N3[C@H](C(N4CCC[C@H]4[C@]3(O)O2)=O)CC(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=CNC3=C1 YDOTUXAWKBPQJW-NSLWYYNWSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 241000576755 Sclerotia Species 0.000 abstract description 15
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 abstract description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 12
- 229960003133 ergot alkaloid Drugs 0.000 abstract description 7
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 abstract 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- UJYGDMFEEDNVBF-UHFFFAOYSA-N Ergocorninine Natural products C1=CC(C=2C(N(C)CC(C=2)C(=O)NC2(C(=O)N3C(C(N4CCCC4C3(O)O2)=O)C(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=CNC3=C1 UJYGDMFEEDNVBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WVVSZNPYNCNODU-CJBNDPTMSA-N Ergometrine Natural products C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@@H](CO)C)C2)=C3C2=CNC3=C1 WVVSZNPYNCNODU-CJBNDPTMSA-N 0.000 description 2
- ZAGRKAFMISFKIO-UHFFFAOYSA-N Isolysergic acid Natural products C1=CC(C2=CC(CN(C2C2)C)C(O)=O)=C3C2=CNC3=C1 ZAGRKAFMISFKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WVVSZNPYNCNODU-XTQGRXLLSA-N Lysergic acid propanolamide Chemical compound C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@H](CO)C)C2)=C3C2=CNC3=C1 WVVSZNPYNCNODU-XTQGRXLLSA-N 0.000 description 2
- XQUUDUKVJKNJNP-OGGGUQDZSA-N ergocornine Chemical compound C([C@H]1N(C)C2)C([C]34)=CN=C4C=CC=C3C1=C[C@H]2C(=O)N[C@@]1(C(C)C)C(=O)N2[C@@H](C(C)C)C(=O)N3CCC[C@H]3[C@]2(O)O1 XQUUDUKVJKNJNP-OGGGUQDZSA-N 0.000 description 2
- 229960001405 ergometrine Drugs 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- ZAGRKAFMISFKIO-QMTHXVAHSA-N lysergic acid Chemical compound C1=CC(C2=C[C@H](CN([C@@H]2C2)C)C(O)=O)=C3C2=CNC3=C1 ZAGRKAFMISFKIO-QMTHXVAHSA-N 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241001558929 Sclerotium <basidiomycota> Species 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N bromocriptine Chemical compound C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@]2(C(=O)N3[C@H](C(N4CCC[C@H]4[C@]3(O)O2)=O)CC(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=C(Br)NC3=C1 OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 238000012794 pre-harvesting Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Vynález se týká oborů mikrobiologie, my- '
kologie, biotechnologie a farmaceutického
průmyslu.
Očelem vynálezu je optimalizace surovinové
základny pro výrobu alfa-ergokryptinu
a jeho polosyntetických derivátů. Jako
surovinová základna slouží sklerocia námele,
obsahující námelové alkaloidy.
Uvedeného účelu se dosáhne vypěstováním
a použitím sklerocií nového průmyslového
kmene mikroorganismu Claviceps purpurea
(Fr.) Tul. CCM 8059. Sklerocia jsou získávána
v množství průměrně 665 kg/ha a obsahují
námelové alkaloidy v množství 0,45
až 0,82 % sušiny. Ve sklerociích je minimálně
95,6 % sumy alkaloidů tvořeno alfa-
-ergokryptinem.
Description
Vynález se týká nového průmyslového kmene mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., vyznačujícího se při polní kultivaci na žitě vysokým obsahem alfa-ergokryptinu, minimálním zastoupením nežádoucích doprovodných alkaloidů a velmi vysokými hektarovými výnosy námelové drogy.
Alfa-ergokryptin je námelový alkaloid s významnými léčivými účinky. V terapeutické praxi je používán většinou v determinované směsi s jinými námelovými alkaloidy, případně samostatně. Alfa-ergokryptin je dále základní substancí pro výrobu polosyntetických derivátů, vyznačujících se rozšířenými a novými fyziologickými účinky.
Alfa-ergokryptin může být získáván ze sklerocií houby kultivované paraziticky v polní kultuře na žitě či jiných obilovinách nebo fermentačními postupy. Pomocí těchto postupů, popsaných v odborné a patentové literatuře, je dosud získávána směs alkaloidů, ve které je alfa-ergokryptin více či méně zastoupen.1 Pro přípravu léčebných substancí o přesně definovaném složení a pro výrobu polosyntetických derivátů je nezbytné mít k disposici vysoce čistý alfa-ergokryptin. Hlavním nedostatkem popsaných způsobů výroby alfa-ergokryptinu jsou nezbytné složité izolační operace, při nichž odpadají i dále neupotřebitelné toxické minoritní námelové alkaloidy.
Tyto nedostatky do určité míry odstranil vynález (čs. autorské osvědčení č. 222150), kterým je nový průmyslový kmen CCM F-672, produkující námelovou drogu s velmi čistým alfa-ergokryptinem. Jeho nedostatkem je však ve srovnání s některými jinými vyšlechtěnými kmeny relativně průměrný obsah námelových alkaloidů a zejména nízký hektarový výnos, způsobující vyšší náklady na získání drogy polní kultivací.
Uvedené nedostatky kmenů námele pro polní a fermentační produkci alfa-ergokryptinu odstraňuje (do značné míry) vynález, jímž je nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., uložený v Cs. sbírce mikroorganismů University J. E. Purkyně, Brno, tř. Obránců míru 10, pod označením CCM 8059.
Hlavní výhodou nového kmene je při kultivaci na žitě velmi vysoký hektarový výnos sklerocií, který při recentně užívané agrotechnice pěstování dosahuje minimálně 572 kg/ /ha a průměrně 665 kg/ha a vysoká produkce sumy alkaloidů ve sklerociích, která dosahuje průměru 0,52 % (minimum 0,45 %) sušiny biomasy. Další výhodou nového kmene je velmi nízká tvorba doprovodných alkaloidů, které tvoří nejvýše 4,4 % sumy alkaloidů a vysoké zastoupení alfa-ergokryptinu, který tvoří minimálně 95,6 % sumy alkaloidů. Vlastnosti nového kmene umožňují získat při polním pěstování drogu (sklerocia) s nižšími náklady, než při pěstování dosud užívaného kmene CCM F-672, při současné úspoře orné půdy, potřebné k produkci stejného množství drogy. Při využití této drogy k výrobě produktů na bázi alfa-ergokryptinu dojde k zefektivnění postupů extrakce a izolace zejména snížením spotřeby materiálu, energie a pracnosti.
Popis vlastností nového kmene Claviceps purpurea (Fr.) Tul. CCM 8059:
Při saprofytní kultivaci na sladinovém agarem ztuženém médiu tvoří houba kolonie z typického sfaceliového vzdušného mycelia. Mycelium je poměrně bohatě větvené, bílé, s postranními hyfami ukončenými konidiogenními buňkami. Konidie mají průměrné rozměry 7,8 x 6 mikrometrů. Starší kultury od 10. až 14. dne kultivace jsou velmi slabě béžovofialově pigmentované.
Při parazitní kultivaci na žitě tvoří houba zpočátku světle béžová, později tmavá, černofialově pigmentovaná sklerocia o váze v rozmezí 0,018 až 0,110 g (průměr 0,069 g) . Sklerocia obsahují námelové alkaloidy v množství od 0,45 % do 0,82 % sušiny biomasy při průměru 0,52 %. Minimálně 95,6 % sumy alkaloidů je tvořeno alfa-ergokryptinem (průměrně tvoří 97,1 % sumy). Zbytek, nejvýše 4,4 % sumy, je tvořen doprovodnými alkaloidy ergometrinem, stopami kyseliny lysergové a ergokorninem.
Nový produkční kmen byl vyšlechtěn z původního produkčního kmene CCM F-672. Sklerocium tohoto kmene, obsahující 0,50 % sumy alkaloidů, bylo převedeno do saprofytní kultuJ .
CS 276627 B6 ' 2 / -2-1 ry a vytvořené konidie byly ozařovány UV zářením o výionu 15 J.m .s po dobu 220 sekund, kdy přežívalo 0,76 % konidií. Po ozařování byla suspenze konidií monosporicky rozizolována. Postup UV-mutageneze a monokonidiové izolace byl za stejných podmínek opakován pětkrát. Potom byly kultury z jednotlivých monokonidiových izolátů naočkovány na žito. Byl proveden screening podle intenzity infekce a obsahu alkaloidů v průměrném vzorku. U kultur, vykazujících oproti mateřskému kmeni zvýšení vypočtených hektarových výnosů a zvýšení obsahu alkaloidů, byle analyzována jednotlivá sklerocia. Z analyzovaných sklerocií bylo pro další šlechtění vybráno sklerocium obsahující 0,56 % sumy alkaloidů. Sklerocium bylo převedeno do saprofytní kultury a připravená suspenze konidií byla podrobena postupu UV- mutageneze a monokonidiové izolace popsané výše opakovaně třikrát. Takto získané kultury monokonidiových izolátů byly naočkovány na žito. Na základě hodnocení infekceschopnosti kultur a analytického stanovení alkaloidů ve sklerociích byl vybrán kmen označený CCM 8059, který je předmětem vynálezu a vyznačuje se výše uvedenými vlastnostmi. Stabilita vlastností byla potvrzena opakovanou kultivací na žitě ve dvou vegetačních obdobích celkem na 6 rozdílných lokalitách.
Způsob kultivace nového kmene pro získání výchozí suroviny k izolaci alfa-ergokryptinu je doložen v příkladě použití, aniž by se tímto příkladem jakkoli omezovaly vlastnosti nového kmene, způsob jeho kultivace a použití ve výrobě.
Příklad použití:
Z potřebného objemu saprofytní kultury kmene CCM 8059 se připraví vodná suspenze konidií. Suspenzí konidií se pomocí očkovacího stroje naočkují klasy žita ve fázi metání tak, že na plochu 1 ha se použije 5.10^ živých konidií. Po 38 denním růstu se provede předsběr a po dalším 17 denním růstu konečný sběr narostlých sklerocií námele.
Z jednoho hektaru žita bylo získáno 665 kg suchých sklerocií námele, obsahujících 0,56 % sumy alkaloidů, ze které bylb 96,9 % tvořeno alfa-ergokryptinem, 3,1 % bylo tvořeno ergometrinem, ergokorninem a kyselinou lysergovou. Získaná droga byla vyextrahována, extrakty byly zčásti použity pro výrobu čistého alfa-ergokryptinu do finálních lékových forem, zčásti pro polosyntetickou výrobu 2-brom-alfa-ergokryptinu.
Claims (1)
- PATENTOVÉ NÁROKYNový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Pr.) Tul. CCM 8059 produkující alfa-ergokryptin.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS891802A CS276627B6 (cs) | 1989-03-23 | 1989-03-23 | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) TUL. CCM 8059 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS891802A CS276627B6 (cs) | 1989-03-23 | 1989-03-23 | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) TUL. CCM 8059 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS180289A3 CS180289A3 (en) | 1992-03-18 |
| CS276627B6 true CS276627B6 (cs) | 1992-07-15 |
Family
ID=5353323
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS891802A CS276627B6 (cs) | 1989-03-23 | 1989-03-23 | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) TUL. CCM 8059 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS276627B6 (cs) |
-
1989
- 1989-03-23 CS CS891802A patent/CS276627B6/cs not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS180289A3 (en) | 1992-03-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101662392B1 (ko) | 흰목이 버섯 재배용 배지 및 흰목이 버섯 재배방법 | |
| CN110122193B (zh) | 一种稳定高含量多糖的蛹虫草栽培方法 | |
| US3224945A (en) | Process for the production of ergot alkaloids | |
| CS276627B6 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) TUL. CCM 8059 | |
| CS276359B6 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL.CCM 8057 | |
| CZ2019790A3 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM8865 | |
| CZ283773B6 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea /Fr./ Tul. | |
| US4369252A (en) | Fermentation process for the preparation of ergot alkaloids, primarily ergocornine and β-ergocryptine | |
| CN1212387C (zh) | 从虫草体分离培养的细棒束孢sx－1及其培养方法和用途 | |
| CS225272B1 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL, CCM F-721 | |
| US3219545A (en) | Microbiological production of lysergic acid derivatives | |
| US3314961A (en) | Heterocyclic carboxylic acids and their production | |
| CZ279533B6 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea /Fr./ Tul. | |
| CZ279877B6 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM 8058 | |
| CN113115684B (zh) | 富硒栽培土及其应用 | |
| CN109055239A (zh) | 冬虫夏草菌丝快速培养方法 | |
| CS239883B1 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismů druhu Claviceps purpurea (Fr) TUL. CCM F-745 | |
| RU2118661C1 (ru) | Штамм гриба claviceps purpurea (fr.) tul. - продуцент эргокриптинов | |
| Malinka | Saprophytic cultivation of Claviceps | |
| CZ287130B6 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul. | |
| KR20200042701A (ko) | 쿠메스트롤 함량이 증가된 콩과 식물 배양근의 생산 방법 | |
| CS239884B1 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) TUL. CCM F-734 | |
| CZ2023105A3 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM9309 | |
| RU2188231C1 (ru) | Штамм гриба claviceps purpurea (fr.) tul. bkm-f-3662d -продуцент эргокорнама | |
| CS272562B1 (cs) | Průmyslový kmenhouby Clavicepa purpurea (Pr.) Tul. 88-EP/1988 pro přípravu elymoklaviau |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20040323 |