CS225272B1 - Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL, CCM F-721 - Google Patents

Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL, CCM F-721 Download PDF

Info

Publication number
CS225272B1
CS225272B1 CS164582A CS164582A CS225272B1 CS 225272 B1 CS225272 B1 CS 225272B1 CS 164582 A CS164582 A CS 164582A CS 164582 A CS164582 A CS 164582A CS 225272 B1 CS225272 B1 CS 225272B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
ergocryptine
beta
alpha
alkaloids
tul
Prior art date
Application number
CS164582A
Other languages
English (en)
Inventor
Zdenek Rndr Malinka
Pavel Ing Harazim
Jiri Phmr Spacil
Original Assignee
Malinka Zdenek
Harazim Pavel
Spacil Jiri
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Malinka Zdenek, Harazim Pavel, Spacil Jiri filed Critical Malinka Zdenek
Priority to CS164582A priority Critical patent/CS225272B1/cs
Publication of CS225272B1 publication Critical patent/CS225272B1/cs

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Vynález se týká nového průmyslového kmene Claviceps purpurea (Fr.) TUL., vyznačující ee při polní kultivaci na žité tvorbou námele s vysokým obsahem alfa-ergokryptinu a beta-ergokryptinu.
Alfa-ergokryptin a beta-ergokryptin jsou významnými léčivými substancemi a výchozími látkami pro přípravu polosyntetických derivátů s rozšířeným spektrem léčivých účinků. Strukturu alfa-ergokryptinu popsali poprvé Stolí a Hofmann (Helv. Chinu Acta 26, 1570, 1943), strukturu beta-ergokryptinu popsal poprvé Schlientz se sp. (Experientia 23, 991, 1967).
V současné době jsou v terapii používány lékové formy námelových alkaloidů e přesně definovaným poměrem alfa-ergokryptinu ku beta-ergokryptinu 2 : 1. Ero výrobu alfa a beta-ergokryptinu v průmyslovém měřítku jsou dosud využívány kmeny Claviceps purpurea (Fr.) TUL. nesoucí označení ELO 2 (Strnadové K., Kybal J., Folia Microbiol.
19, 272 - 280, 1974) a CCM F-508 (Strnadové K., Kybal J;, autorské osvědčení č. 176 803, 1976). Tyto kmeny produkují při ktiltivaci na žitě'v narostlých sklerociích předevěím směs ergokorninu s alfa a beta-ergokryptinem v poměru přibližně 1,2 : 1 a řadu doprovodných alkaloidů v menším množství (ergometrin, laktamové deriváty ergotoxinových alkaloidů, ergotamin). Poměr alfa-ergokryptinu ku beta-ergokryptinu je u těchto kmenů
225 272
225 272 · 1 až 7 : 1. Průměrný hmotnostní obsah alkaloidů ve sklerociích těchto kmenů je 0,424 % sušiny, z toho ergokornin a ergokryptlny tvoří 70 až 80 % a doprovodné alkaloidy 20 až 30 % celkové sumy alkaloidů.
V terapeutické praxi Široce používané lékové forny, obsahující ergokornin, alfa a beta-ergokryptin a ergokrlatin obsahují přesně definovaný poměr složek ergokornin ku ergokryptinu ku ergokrlatin 1 s 1 : 1 a poměr alfa-ergokryptln ku beta-ergokryptin 2 : 1. Ergokornin a ergokryptlny jsou získávány ze sklerocií kmenů PLO 2 a CCM F-508, ergokristin je získáván ze sklerocií jiného kmene námele označeného MY. Za současného stavu je pro výrobu výěe zmíněných lékových forem limitujícím faktorem nízký obsah beta-ergokryptinu ve sklerociích kmenů PLO 2 a CCM F-5O8. Při výrobě těchto lékových forem nemohou být ergokornin a alfa-ergokryptin plně využity a zůstávají jako komerčně nevyužitelný odpad. Separační a izolační operace, které oddělují ze směsi alkaloidů alfa-ergokryptin a ergokornin ee snahou zachovat původní kvantum beta-ergokryptinu jaou ztrátové a značně prodražují tuto část výroby. Je vyvinut způsob fermentační přípravy námelových alkaloidů e řízeným poměrem ergokornlnu, alfa-ergokryptlnu a beta-ergokryptinu (Kybal J., Malinka Z., Herezím P., Stuchlík J. Spáčil J., Svoboda E., autorské osvědčení č. 202 613, 1980), který je však dosud devizově náročný a vhodný zejména pro operativní pokrytí poptávky po některém z uvedených alkaloidů.
Uvedené nedostatky výše zmíněných kmenů námele a fermentačního způsobu výroby beta-ergokryptinu odstraňuje do značné míry vynález, jímž je nový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL., uložený v československé sbírce mikroorganismů University J.E. Purkyně, Brno, Tř. Obránců míru 10 pod označením CCM F-721. Uvedený kmen Je předmětem tohoto vynálezu.
Hlavní výhodou nového kmene je při kultivaci na žité vysoká produkce suny alkaloidů ve sklerociích, která dosahuje průměru 0,56 % sušiny biomasy, snížená tvorbě doprovodných alkaloidů, které tvoří průměrně 8 % sumy alkaloidů a vysoká tvorba žádoucích alkaloidů alfa a beta-ergokryptinu (průměrně 92 % suqy alkaloidů) a zejména vysoké tvorba dosud nedostatkového beta-ergokryptinu, který je tvořen ve eměei s alfa-ergokryptlnem v poměru průměrně 1 : 1,15. Tento poměr alfa a beta-ergokryptinu umožňuje zhodnotit i dosud nevyužitelné zásoby přebytečného alfa-ergokryptinu a ergo komínu.
Popis vlastností nového kmene:
Při eaprofytlckém růstu na sladinové půdě ztužené agarem tvoří houba kolonie z typického sfaceliového vzdušného mycelia. Mycelium má hyfy bohatě větvené a postranní hyfy jsou ukončené konidlogenními buňkami. Bohatě tvořené konldle mají průměrné rozměry 7x4 mikrometru. Mycelium je téměř bílé, starší kultury Jeou slabě růžovofialově pigmentované. Při parazitlckém růstu na žité tvoří houba středně
225 272 tmavá, hnědofialově pigmentovaná eklerocle o váze v rozmezí 0,09 až 0,56 g.
Ve ekleroclích, vznikajících při parazitickém růstu na žitá jsou blosyntetlcky tvořeny námelové alkaloidy v množství 0,36 až 0,73 % sušiny biomasy při průměrném obsahu 0,56 %. 90 až 95 % sumy alkaloidů je tvořeno aašsí alfa a beta-ergokryptinu při pomšru elfe-ergokryptinu ku beta-ergokryptinu 0,9 : 1 až 1,8 : 1 s průměrem 1,15 · 1. Doprovodné alkaloidy jsou ergokornin, ergokryptamy, ergometrin a ergosin tvořící dohromady 5 až 10 % sumy alkaloidů.
Nový průmyslový produkční kmen Claviceps purpurea (Fr.) TUL. byl vyšlechtěn z původního produkčního kmene PLO 2. Sklerocium tohoto kmene bylo převedeno do saprofytické kultury, byla provedena monokonidiová izolace, od jednotlivých monokonidiových izolátů připravena suspense konidií, která byla ozařována UV zářením o výkonu 15 <J . m2. s“1 po dobu 240 sekund. Živé konidie byly opětně monosporicky izolovány á suspense konidií opětně ozařována UV zářením o stejném výkonu po uvedenou dobu.
Celý postup ozařování kombinovaný monokonidiovou izolací byl opakován 5 krát. Po ukončeném ozařování bylo získáno 1 117 monokonidiových izolátů, které byly jednotlivě testovány na tvorbu akleroeií na žitě. Získaná sklerocia byla zanalyzována pro zjištění tvorby námelových alkaloidů. Z vybraných sklerocií, u nichž se projevila průkazně zvýšená tvorba suny alkaloidů, zvýšená tvorba beta-ergokryptinu provázené sníženou tvorbou ergokorninu nebo alfa-ergokryptinu byly připraveny saprofytické kultury, dále monokonidiové izoléty a ty opět ozařovány UV zářením. Postup ozařování kombinovaný s monokonidiovou izolací byl opakován 3 krát. Po ukončeném ozařování bylo získáno 453 monokonidiových izolátů, které byly jednotlivě testovány na růst na žitě. Ze získaných sklerocií byl vybrán kmen, který se vyznačuje snížením tvorby ergokorninu a doprovodných alkaloidů na minimum, zvýšenou tvorbou beta-ergokryptinu, zvýšenou tvorbou celkové sumy alkaloidů ve sklerociích a uspokojivými výnosy při produkčním pěstování na žitě. Genetická stabilita uvedených vlastností byla potvrzena opakovaným pěstováním na žitě ve dvou vegetačních obdobích. Tento kmen je předmětem vynálezu.
Způsob kultivace nového kmene pro získání výchozí suroviny k izolaci námelových alkaloidů je dále doložen v příkladě použití, aniž by se jím způsob kultivace, použití a vlastnosti nového kmene jakkoli omezovaly.
Příklad použití:
Ze eaprofytlckých kultur kmene na ztužené sladinové živné půdě se připraví suspense konidií, kterou se naočkuje 6 až 8 kg předem vysterilizovených vlhkých obilek s přídavkem terciárního citronanu amonného, která jsou umístěny ve'vhodných lahvích nebo obalech opatřených zátkou z buničité vaty. Naočkované žitné oblíky se inkubují 18 až 28 dni při teplotě 22 až 28 °C. Během této doby prorostou žitné oblíky sfaceliovým myceliem, které vytváří značné množství konidií. Takto připravená
225 272 očkovací látka se uchovává při teplotě 2 až 10 °C. Konidie z této očkovací látky se bezprostředně před infekcí šita suspendují ve vodě. Příslušně neředěnou suspensí koníci ií se pomocí očkovacího stroje naočkují klasy žita ve fázi metání na ploše 1 ha. Po 35 až 60 denním růstu na žitě se provede postupný opakovaný sběr narostlých sklerocií námele. Z 1 ha žita bylo získáno 207 kg suchých sklerocií námele, obsahujících v průměru 0,56 % sumy alkaloidů, že které bylo 92 % tvořeno směsi elfa a bsta-ergokryptinu s poměrem alfa-ergokryptin ku beta-ergokryptin 1,15 J 1.
Získaná droga byla vyextrahovaná, alfa-ergokryptin a beta-ergokryptin byly vyizolovány a použity pro výrobu ergotoxinu.

Claims (1)

  1. PŘEDMĚT VYNÁLEZU
    Nový průmyslový kmen mikroorganismu Clavicepe purpurea (Fr.) TUL., CCM F-721., vytvářející v polní kultuře na žitě sklerocia s obsahem sumy alkaloidů nejméně 0,36 % vztaženo na sušinu biomasy, s obsahem alfa a beta-ergokryptinu minimálně 90 % sumy alkaloidů a ae vzájemným poměrem alfa-ergokryptinu ku beta-ergokryptinu 0,9 : 1 až 1,8 : 1.
    Vytiskly Moravské tiskařské závody, provoz 12, Leninova 21, Olomouc
    Cena: 2,40 Kčs
CS164582A 1982-03-11 1982-03-11 Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL, CCM F-721 CS225272B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS164582A CS225272B1 (cs) 1982-03-11 1982-03-11 Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL, CCM F-721

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS164582A CS225272B1 (cs) 1982-03-11 1982-03-11 Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL, CCM F-721

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS225272B1 true CS225272B1 (cs) 1984-02-13

Family

ID=5351318

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS164582A CS225272B1 (cs) 1982-03-11 1982-03-11 Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL, CCM F-721

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS225272B1 (cs)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007051651A1 (en) * 2005-11-07 2007-05-10 Ivax Pharmaceuticals S.R.O. INDUSTRIAL PRODUCING STRAIN OF THE FUNGUS CLAVICEPS PURPUREA (Fr.) Tul.
CZ309511B6 (cs) * 2019-12-19 2023-03-15 Teva Czech Industries S.R.O. Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM8865

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007051651A1 (en) * 2005-11-07 2007-05-10 Ivax Pharmaceuticals S.R.O. INDUSTRIAL PRODUCING STRAIN OF THE FUNGUS CLAVICEPS PURPUREA (Fr.) Tul.
CZ309511B6 (cs) * 2019-12-19 2023-03-15 Teva Czech Industries S.R.O. Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM8865

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Azcón Germination and hyphal growth of Glomus mosseae in vitro: effects of rhizosphere bacteria and cell-free culture media
JP7360465B2 (ja) エルゴチオネインを産生する菌株及びそのスクリーニングのための方法
KR20070015568A (ko) 중국동충하초 무성형균박쥐나방다모포의 공업발효생산방법
US5681738A (en) Use of 10-oxo-trans-8-decenoic acid in mushroom cultivation
CN112970512A (zh) 一种中温栽培虎奶菇菌核的方法
CS225272B1 (cs) Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL, CCM F-721
US5349121A (en) Biologically pure mushroom culture and method for mushroom cultivation
CN101238208A (zh) 真菌麦角菌(Fr.)Tul.的工业生产菌株
Sethi et al. Growth and betaine formation in Medicago sativa tissue cultures
CZ2019790A3 (cs) Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM8865
CS276359B6 (cs) Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL.CCM 8057
CZ287130B6 (cs) Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul.
CA1154699A (en) FERMENTATION PROCESS FOR THE PREPARATION OF ERGOT ALKALOIDS, PRIMARILY ERGOCORNINE AND .beta.- ERGOCRYPTINE
CZ283773B6 (cs) Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea /Fr./ Tul.
CS276627B6 (cs) Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) TUL. CCM 8059
CZ239691A3 (en) novel industrial strain of micro-organisms claviceps purpurea (fr.) tul., ccm 8058
CZ2023105A3 (cs) Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM9309
CZ279533B6 (cs) Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea /Fr./ Tul.
Irintoto et al. Effect of humic acid on callus culture of slash pine (Pinus elliottii Engelm)
JP3542945B2 (ja) ハタケシメジの人工栽培方法
RU2118661C1 (ru) Штамм гриба claviceps purpurea (fr.) tul. - продуцент эргокриптинов
Malinka Saprophytic cultivation of Claviceps
Křen et al. Claviceps purpurea (Ergot): Culture and Bioproduction of ergot alkaloids
RU2188231C1 (ru) Штамм гриба claviceps purpurea (fr.) tul. bkm-f-3662d -продуцент эргокорнама
CS242138B1 (cs) Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Pr.) TUL. CCM P-755