CZ282334B6 - Vysokoprodukční kmen mikroorganismu penicillium chrysogenum CCM 8196 - Google Patents
Vysokoprodukční kmen mikroorganismu penicillium chrysogenum CCM 8196 Download PDFInfo
- Publication number
- CZ282334B6 CZ282334B6 CZ952411A CZ241195A CZ282334B6 CZ 282334 B6 CZ282334 B6 CZ 282334B6 CZ 952411 A CZ952411 A CZ 952411A CZ 241195 A CZ241195 A CZ 241195A CZ 282334 B6 CZ282334 B6 CZ 282334B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- strain
- penicillium chrysogenum
- production
- ccm
- nmg
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 241000228150 Penicillium chrysogenum Species 0.000 title claims abstract description 20
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title abstract description 6
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims description 14
- 229930195708 Penicillin V Natural products 0.000 claims description 4
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 claims description 4
- 229940056367 penicillin v Drugs 0.000 claims description 4
- BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N phenoxymethylpenicillin Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)COC1=CC=CC=C1 BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims description 4
- WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N phenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1 WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 16
- 239000003279 phenylacetic acid Substances 0.000 abstract description 8
- 229960003424 phenylacetic acid Drugs 0.000 abstract description 8
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 abstract description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 8
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 8
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 8
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 8
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 7
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 6
- ZRKWMRDKSOPRRS-UHFFFAOYSA-N N-Methyl-N-nitrosourea Chemical compound O=NN(C)C(N)=O ZRKWMRDKSOPRRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 5
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 5
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 4
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- GWYQHLHNMNYPPL-UHFFFAOYSA-N 2-(nitrosomethyl)guanidine Chemical compound NC(=N)NCN=O GWYQHLHNMNYPPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- -1 ammonia ions Chemical class 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 239000006225 natural substrate Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NGHVIOIJCVXTGV-ALEPSDHESA-N 6-aminopenicillanic acid Chemical compound [O-]C(=O)[C@H]1C(C)(C)S[C@@H]2[C@H]([NH3+])C(=O)N21 NGHVIOIJCVXTGV-ALEPSDHESA-N 0.000 description 1
- NGHVIOIJCVXTGV-UHFFFAOYSA-N 6beta-amino-penicillanic acid Natural products OC(=O)C1C(C)(C)SC2C(N)C(=O)N21 NGHVIOIJCVXTGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000002829 nitrogen Chemical class 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002960 penicillins Chemical class 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 239000007362 sporulation medium Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002132 β-lactam antibiotic Substances 0.000 description 1
- 229940124586 β-lactam antibiotics Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Vysokoprodukční kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM 8196 (NMG FOK 15). Kmen byl získaný selekcí mutantů vznikajících působením chemických mutagenů a působením zvýšené koncentrace kyseliny fenyloctové na spory při submersní kultivaci. Následující pasivní selekcí byl získaný kmen Penicillium chrysogenum CCM 8196 (NMG-FOK 15) produkující víc než 35 000 IU PEN G/ml za 168 hod. kultivace v bankách při vzdušnění při 25 .sup.o.n.C.ŕ
Description
(57) Anotace:
Vysokoprodukční kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM 8196 (NMG FOK 15). Kmen byl získaný selekcí mutantů vznikajících působením chemických mutagenů a působením zvýšené koncentrace kyseliny fenyloctové na spory při submersní kultivaci. Následující pasivní selekcí byl získaný kmen Penicillium chrysogenum CCM 8196 (NMG FOK 15) produkující víc než 35 000 IU PEN G/ml za 168 hodin kultivace v bankách při vzdušnění při 25 °C.
Vysokoprodukční kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM 8196
Oblast techniky
Vynález se týká vysokoprodukčního kmenu mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM 8196 (NMG-FOK 15) produkujícího penicilín G ve vyšších koncentracích než doposud používané kmeny.
Dosavadní stav techniky
Celosvětový objem výroby penicilínů se neustále zvyšuje, kromě jeho přímého využívání při léčbě se velká část produkce používá jako surovina pro výrobu 6-aminopenicilánové kyseliny a polosyntetických β-laktámových antibiotik. Zvýšení produktivity používaných produkčních kmenů je ekonomicky nejvýhodnější způsob zvyšování objemu výroby. Značnou zásluhu na zvýšení produkční schopnosti kmenů má rozvoj metod šlechtění, které se opírají o selekci náhodných mutantú, indukovaných pomocí vhodných chemických a fyz. mutagenů. Okruh používaných mutagenů se vybírá podle jejich účinku tak, aby docházelo k zvyšování produkce a nedošlo přitom ke zhoršování životaschopnosti mikroorganismů.
Před uvedením současného vynálezu byly známé jiné kmeny produkující Penicilín VaG většinou na bázi Penicillium chrysogenum. Důležitou vlastností produkčních kmenů je jeho produktivita a udržení produkční aktivity, pokud možno v co nejdelším kultivačním čase. Produkční kmeny používané v současnosti produkují do fermentačního média přibližně do 60 000 IU/ml penicilínu při kultivační době kolem 120 až 200 hodin.
Je znám kmen Penicillium chrysogenum CCM F-558 popsaný v Čs. autorském osvědčení č. 187216 produkující PEN G a V za 120 hodin s výtěžností 19 000 IU/ml penicilínu na půdě se sacharózou a sójovou moukou.
Dále je znám kmen Penicillium chrysogenum CCM F-569 popsaný v Čs. autorském osvědčení č. 199 980 produkující 24 000 IU/ml PEN G a V za 175 hodin kultivace na půdě s pharmamedií a sacharózou. Charakteristickou vlastností tohoto kmene je jeho schopnost růstu a produkce i při vysoké koncentraci amoniakálních iontů, reprenzentováných v živných půdách dusíkatými látkami, například síranem amonným, močovinou a podobně. Je známa jeho schopnost dosahovat vysokých produkcí penicilinu i na depotním uhlíkatém zdroji v živné půdě, například na laktóze. Tímto bylo dosaženo zjednodušení řízení fermentačního procesu oproti technologii založené na nepřetržitém dávkování sacharózy jako uhlíkatého zdroje.
Dalším známým kmenem je kmen Penicillium chrysogenum CCM F 647 popsaný v Čs. autorském osvědčení č. 200944 produkuje 24 000 IU/ml za 164 hodin kultivace. Vlastností tohoto kmene je jeho vysoká stabilita, neztrácí produkční schopnost pasážování na pevných půdách do IV. generace. Tento kmen produkuje ve zvýšené míře V, G penicilín jeho předností je, že nemá specifické požadavky na zdroj uhlíku.
Kmen Penicillium chrysogenum Thom byl získaný dlouhodobým působením P-flourfenylalanínu a ozářením, produkuje okolo 22 000 IU/ml za 164 hodin.
Podstata vynálezu
Uvedené nedostatky výše zmíněných dosud známých kmenů do značné míry odstraňuje vynález,
- 1 CZ 282334 B6 jímž je nový vysokoprodukční kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM 8196 (interní označení MNG-FOK 15) produkující zvýšenou koncentraci penicilínu V ale i penicilínu G vybraných klonů tohoto kmene, uložený v Cs. sbírce mikroorganismů u Masarykovy university v Brně, Tvrdého 14 pod číslem CCM 8196.
Kmen Penicillium chrysogenum CCM 8196 (interní označení NMG-FOK 15) byl získán působením chemických mutagenů a působením zvýšené koncentrace kyseliny fenyloctové na spory při submersní kultivaci z východního kmene CCM F-760. Následující pasivní selekcí byl získán kmen Penicillium chrysogenum CCM 8196 (NMG-FOK 15) produkující 35 000 IU PEN G/ml. za 168 hodin. Kultivace probíhala v baňkách při provzdušňování při teplotě 25 °C.
Postup šlechtění je popsaný na následujícím schématu, na kterém je znázorněna genealogická linie vedoucí k novému produkčnímu kmenu:
Penicillium chrysogenum
CCM F-760
PS
CCM F-760-9
NMU
NMU XXXI/7
NMG
NMG XV/19 i
FOK
NMG FOK-15
Vysvětlení zkratek:
PS - pasivní selekce
NMU - působení nitrozometylmočoviny
NMG - působení nitrozometylguanidínu
FOK - působení kyseliny fenyloctové
Nitrozometylmočovina byla aplikovaná v konečné koncentraci 6 mg/ml. Sporová suspenze v citrofosfátovém pufru pH 6,0 byla míchaná v uzavřených Erlenmayerových baňkách. Po přidání mutagenů byly odebrané vzorky ve vhodných časových intervalech a to 30-60 min. a po příslušném ředění vyočkované na Petriho misky se sporulační půdou.
Při aplikaci nitrozometylguanidínu byla použitá koncentrace mutagenu 1 mg/ml v konečné mutační směsi. Doba aplikace byla od 15-60 min. za míchání v uzavřených Erlenmayerových baňkách, pH mutační směsi bylo pufrované citrofosfátovým pufrem o pH 6,0. V určitých časových intervalech byly odebrané vzorky a ředěné až na neúčinnou koncentraci NMG a vyočkované na Petriho misky se sporulační půdou.
Do 500 ml varné banky se přidá 40 ml živné půdy obsahující sacharózu, com-steep, síran amonný, dusičnan sodný, uhličitan vápenatý a soli anorganického dusíku, 0,25 % kyseliny fenyloctové. Po vysterilizování se půda naočkuje 2 ml suspenzí spor kmene Penicillium chrysogenum. Nechá se kultivovat na třepacím stroji při obrátkách 230/min. při teplotě 25 °C.
o
Po 48 h kultivace se kultura vyočkuje na sporulační agarovou půdu v Petriho miskách a nechá se kultivovat 8-10 dnů při teplotě 25 °C.
Spory pro pasivní selekci byly připraveny ředěním sterilní destilované vodě a vyočkované na Petriho misce se sporulační půdou.
Tímto způsobem aplikace mutagenů působením kyseliny fenyloctové a pasivní selekce byl získán izolát NMG FOK 15.
Izoláty byly hodnoceny podle následujícího schématu:
izolovaná kolonie na Petriho misce šikmý agar vegetativní inokulum submersní kultivace
Izoláty byly hodnoceny ve dvou pokusech před zakonzervováním ave třech pokusech po konzervaci. Konzervy slouží k dlouhodobému uchovávání sporového materiálu a umožňují zachování růstových a produkčních schopností kmene.
Stanovení účinnosti penicilínu bylo vypracováno spektrofotometrickou imidazolovou metodou.
Morfologická charakteristika
Kmen vytváří při monosporickém rozsevu na sporulační půdě typu glycerín-melasa kolonie o velikosti cca 12 mm za dobu 9 dní kultivace při 25 °C. Ve středu kolonie se vytváří kruhovitý kráter, od tohoto středového kruhovitého kráteru do okraje je kolonie zvrásněná. Barva spor je béžová. Kultura dobře a rychle sporuluje na různých typech sporulačních půd a i na přírodních substrátech, například ječmen, rýže a podobně. Počet spor v jednom ml suspenze, která se získá smytím Endovy zkumavky se šikmým agarem s 10 ml vody se pohybuje kolem 1.10 ml.'1. Kmen uchovávaný při teplotě +5 °C na agarových půdách je stabilní 5 až 6 týdnů, na přírodních substrátech několik měsíců minimálně však tři měsíce, v lyofilizovaném stavu cca pět roků a tekutém dusíku více jak pět let. Pro přípravu inokula se může použít půda obsahující sacharózu, glukózu jako zdroj uhlíku a kukuřiční extrakt jako zdroj organického dusíku. Růst inokula je cca 48 h při teplotě 25 °C. Maximální produkce s tímto kmenem se dosáhne na fermentační půdě obsahující laktózu anebo sacharózu a sójovou mouku, kukuřičný extrakt anebo pharmamedia, zdroj síry, anorganického dusíku a prekurzor. Kmen vykazuje dobrou odolnost vůči mechanickému namáhání má poměrně vysoké nároky na přenos kyslíku aje citlivý na pokles rozpuštěného kyslíku v médiu pod 10% nasycení.
Fyziologická charakteristika
Optimální teplota 25 °C, optimální pH 6,3 až 7,0 jedná se o aerobní mikroorganismus, který zkvašuje glukózu, fruktózu, sacharózu, laktózu. Dobře hydrolyzuje škrob i bílkoviny, dusičnany redukuje. K růstu vyžaduje biotin, z aminokyselin fenylalanín.
Výhody vysokoprodukčního kmene Penicillium chrysogenum CCM 8196 spočívají vtom, že dosahuje vyšší produkci oproti výchozímu kmenu. Je méně citlivý na změny koncentrace kyseliny fenyloctové v živné půdě a proto je výhodný pro biosyntézu penicilínu V v podmínkách
-3 CZ 282334 B6 průmyslové produkce, přičemž jeho hlavní výhodou je vyšší produkční schopnost, když za 168 h kultivace je možné dosáhnout výtěžnosti 35 000 IU/ml. Kmen také není enormně citlivý na mechanické namáhání, což je výhodné při průmyslovém využití, neboť nedochází k poškozování mycelia. Z těchto důvodů je vhodný pro použití v průmyslových fermentorech.
Příklady provedení vynálezu
Příklad č. 1
Sacharózová inokulační půda v 500 ml varných bankách s náplní 60 ml se naočkuje sporovou suspenzí a kultivuje se při 25 °C na rotačním třepacím stroji 40 h. Narostlým vegetativním inokulem se naočkovaly a kultivovaly v rotačním třepacím stroji produkční banky se živnou půdou obsahující laktózu, pharmamedií, síran amonný, uhličitan vápenatý aprekurzor, kyselinu fenyloctovou.
Fermentace uvedeným způsobem trvala 8 dní. Maximální produkce byla dosažena v 7. dni fermentace. Produkční schopnost kmene, na který je uplatňovaný patentový nárok je následující:
kmen část kultivace__________PNC G PNC V interní označení j/ml j/ml
NMG FOK 15 35 100 33 100
Průmyslová využitelnost
Nový vysokoprodukční kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM 8196 (NMG FOK 15) je možné využít při průmyslové výrobě penicilínu G a V.
Claims (1)
- PATENTOVÉ NÁROKYVysokoprodukční kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM 8196 produkující penicilín G a penicilín V.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ952411A CZ282334B6 (cs) | 1995-09-18 | 1995-09-18 | Vysokoprodukční kmen mikroorganismu penicillium chrysogenum CCM 8196 |
| SK556-96A SK278906B6 (sk) | 1995-09-18 | 1996-04-30 | Vysokoprodukčný kmeň mikroorganizmu penicillium ch |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ952411A CZ282334B6 (cs) | 1995-09-18 | 1995-09-18 | Vysokoprodukční kmen mikroorganismu penicillium chrysogenum CCM 8196 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ241195A3 CZ241195A3 (en) | 1996-06-12 |
| CZ282334B6 true CZ282334B6 (cs) | 1997-06-11 |
Family
ID=5464906
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ952411A CZ282334B6 (cs) | 1995-09-18 | 1995-09-18 | Vysokoprodukční kmen mikroorganismu penicillium chrysogenum CCM 8196 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ282334B6 (cs) |
| SK (1) | SK278906B6 (cs) |
-
1995
- 1995-09-18 CZ CZ952411A patent/CZ282334B6/cs not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-04-30 SK SK556-96A patent/SK278906B6/sk not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ241195A3 (en) | 1996-06-12 |
| SK55696A3 (en) | 1997-07-09 |
| SK278906B6 (sk) | 1998-04-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101245362B (zh) | 发酵法生产多肽类抗生素安来霉素的方法 | |
| US5492818A (en) | Method of producing L-glutamic acid by fermentation | |
| RU2001949C1 (ru) | Штамм гриба TRICHODERMA REESEI - продуцент целлюлолитических ферментов | |
| US5334517A (en) | Microbial process for the production of trans-4-hydroxy-L-proline | |
| Elisashvili et al. | Extracellular polysaccharide production by culinary-medicinal Shiitake mushroom Lentinus edodes (Berk.) Singer and Pleurotus (Fr.) P. Karst. species depending on carbon and nitrogen source | |
| US4248967A (en) | Enzymic complexes adapted to convert racemic hydantoins into optically active aminoacids, and their applications | |
| CZ282334B6 (cs) | Vysokoprodukční kmen mikroorganismu penicillium chrysogenum CCM 8196 | |
| CZ282335B6 (cs) | Vysokoprodukční kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM 8197 | |
| US4369252A (en) | Fermentation process for the preparation of ergot alkaloids, primarily ergocornine and β-ergocryptine | |
| SI9600120A (en) | New and improved fermentative procedure for the production of clavulanic acid and its salts | |
| US4968610A (en) | Process for the preparation of chanoclavine | |
| JP2009505681A (ja) | 酸代謝産物生成の調節 | |
| IL30058A (en) | Process for preparing antibiotic a10388(pyrrolnitrin) | |
| KR100446110B1 (ko) | 세팔로스포린 c 생산 미생물 | |
| JP4268857B2 (ja) | 微生物によるｄ−グルコサミンの製造法 | |
| US4939089A (en) | Process for the preparation of festuclavine | |
| SU1509402A1 (ru) | Штамм гриба @ продуцент @ -галактозидазы | |
| RU1797624C (ru) | Способ получени белкового корма | |
| KR810001113B1 (ko) | 담자균류의 증식방법 | |
| CZ245694A3 (en) | Novel industrial production strain of claviceps paspali micro-organism | |
| Ali et al. | Optimization of Cephalosporin C Production by Cephalosporium acremonium C-10 using Stationary Culture | |
| KR830002916B1 (ko) | 발효에 의한 세팔로스포린 제법 | |
| RU1272699C (ru) | Штамм гриба aureobasidium pullulans 23 - продуцент полисахарида аубазидана | |
| Salama et al. | A preliminary study of production of antimicrobial substances by Penicillium purpurogenum | |
| SK35794A3 (en) | Microorganism strain of penicillium chrysogenum ccm 8157 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20010918 |
|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20120918 |