CS270544B1 - Myši lymfocytárny hybridóm VU IIH3 - Google Patents
Myši lymfocytárny hybridóm VU IIH3 Download PDFInfo
- Publication number
- CS270544B1 CS270544B1 CS889004A CS900488A CS270544B1 CS 270544 B1 CS270544 B1 CS 270544B1 CS 889004 A CS889004 A CS 889004A CS 900488 A CS900488 A CS 900488A CS 270544 B1 CS270544 B1 CS 270544B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridoma
- iih3
- influenza
- cells
- virus
- Prior art date
Links
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 title claims abstract description 20
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 4
- 101900222562 Influenza A virus Nucleoprotein Proteins 0.000 claims description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 abstract description 2
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 7
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 description 4
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 4
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 1
- 108090001074 Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 230000003322 aneuploid effect Effects 0.000 description 1
- 208000036878 aneuploidy Diseases 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 108700010900 influenza virus proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 210000002729 polyribosome Anatomy 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000003156 radioimmunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Riešeni^ sa týká myšieho lymfocytárneho
hybridómu, produkujúceho protilátku
podtriedy IgG 1 proti qukleoprotelnu virusu
chřipky Hybridóm je uložený v
zbierke hybridomov Vlrologickáho ústavu
SAV v Bratislavě pod označením VU IIH3.
Description
CS 270 544 Bl 1
Vynález sa týká myšiaho lymfocytárneho hybridómu, t j . hybridného jednobunkovóhoorganizmu( zostrojeného buňkovou fúziou myšej myelómovej linie Sp2/0 a myšej elezinovejbuňky, produkujúceho protilátku proti vlrueu chřipky A.
Protilátky voči proteinem virusu chřipky sa dotaraz pripravujú tak, že virus resp.jeho izolovaná proteiny sa opakované injikujú ako antigón pokusným zvieratám, najčastaj-Sie králikora, mySlam, alebo fretkám. Sérum takto imunizovaných zvierat, odobraté po ur-čitej dobo p^sobenia antigénu, slúži ako zdroj protilátek, používaných prsdovšetkým překvantitatlvnu alebo kvalitatlvnu analýzu antigénu - virusu chřipky - vo výskůma a v imu-nodiagnostickej praxi.
Tento postup, nazývaný konvenčnou lmunizáciou, mé nlekoZko nevýhod. V séra imuni-zovaných zvierat sa nachádza haterogénna zmes protilátek, ktorých spektrum Je v každomjednotlivom organizme rožne a neopakovatelné. Organizmus spravidla vytvoří okrem protiló-tok voči žiadanému antigénu 1 protilátky voči nečistotám antigénového preparátu, ktorá jepotřebná zo sér odstraňovat vysycovanlm. Výrobné Šarže konvenčných sér sa preto dajú taž-ko Standardizoval a bývajú v Sirokom rozmedzl kvality. Pre výrobu každéj šarže třeba pri-pravit čistý imunizačný antigén a SalSie antlgény na vysýtenie balastných protilétok pro-ti nečistotám.
Uvedené nedostatky vySSie zraieneného a doslal používaného postupu odpadnú, ak jek dispozlcii hybridem, produkujúci monoklonélu protilátku proti nukleoprotelnu virusuchřipky A, uložený v zbierke hybrldómov Virologického ústavu SAV v Bratislavě, Mlýnské dolina 1, pod označením VU IIH3.
Uvedený hybridem bol získaný zposobom známým z odbornej literatúry (Kohler, 6.,Milstein, C.s Contlnuoue cultures of fused cella secreting antibody of predefined speci-ficlty, Nátuře 2S6 (1975), 495« Gerhard. W.t Fusion of cells in suspension and outgrowthof hybride in conditloned medium. In: Monoclonal antibodies. Hybride: A New Dimensionin Biological Analyses. R. H. Kennet, T. O. McKearn, K. B. Bechtol, eds., New York. Ple-nům Prase (1980), 370.) klonováním súboru hybridných buniek po fúzii myšej myelómovejlinie Sp2/0 a buniek, získaných zo sleziny mySl kmeňa BALB/c, imunizovaných virusom chripky A/0unedin/4/73 (H3N2). Výhodou hybridómu podZa vynálezu je, že produkuje homogénnu protilátku, tzv. mono-klonálnu protilátku, ktorá je schopná Specificky reagovat s nukleoproteinom chřipkovéhovirusu typu A. Hybridóm VU IIH3 možno kultivovat in vitro v médlach vhodných pre živočiš-né buňky, alebo in vivo v peritoneélnej dutině myši kmeňa BALB/c. Z konzerv, uchovanýchv kvapalnom dusíku, možno zahajit produkciu protilátky bez ňalšej imunizácie antigénom. Přiklad
Pre účel pomnoženia hybridómových buniek in vivo sa aplikovalo 5xl06 buniek do pe-ritoneélnej dutiny mySl. Pre lepSle uchytenie aplikovaných buniek bola myš 15 dni předprenoeom buniek hybridómu premedikovaná parafinovým olejom (0,5 ml intraperitoneálne).
Po 20 dňoch rastu hybridómu v peritoneélnej dutině bole myš zabitá a vyprodukovaná asci-tické tekutina odobraté. Celkom sa získalo 9 ml ascltickej tekutiny obsahujúcej 6 mg/mlimunoglobullnu. Ascitické tekutina, obsahujúca produkt hybridómu VU IIH3, vykazovala vradioimunoanalytickom teste špeclflckú vazbu k virusom chřipky typu A (napr. subtyp Hl,H2, H3), ale nie voči typu B, a v radioimunoprecipitačnom teste sa viazala ná nukleopro-tein virusu chřipky A.
In vitro rastů buňky hybridómu ako polosuspenzné kultúra. Majů tvar (guZatý) a vel' kost charakteristické pre myelómové buňky, obsahujú fúzované buňkové jadré, sú aneuploid- né. Buňky hybridómu VU IIH3 majú ultraštruktúrny obraz typických myelómových buniek, kde prevažujúcou organelou sú volné a na membrány viazané polyribozómy. Základným kultivač-
ným médiom je Oulbeccova modifikécia Eaglovho mlnimélneho esenciélneho média (Oulbecco. R
Claims (1)
- 2 CS 270 544 Bl a Freeman, G., Virology 8 (1959), 396). Toto médium označované ako DMEM, je pre kultivá-ciu hybridómu doplněné gentamycincm a inaktivovaný prekolostrálnym séroa (10%, Bioveta,Ivanovice na Hané). Hybridám je kultivovaný pri 37 °C - jeho středná generačná doba jepřibližné 24 h. Produkovaná protilátka je monoklonálny imunoglobulin podtriedy IgG 1. Hybridóm VU IIH3 sa može priemyselne využívat ako zdroj protilátky proti nukleo-protelnu (nukleokapsidovému proteinu) virusu chřipky A v metodách analytických, prepa-rativnych alebo diagnostických a tos 1) pri kvantitativnom a kvalitatlvnom vyhodnocovaní přítomnosti nukleoprotelnu virusuchřipky A vo vyéetrovanom materiáli (napr. klinické vzorky), 2) pri vyhodnocovaní epidemiologickéj situácie, 3) pri purifikácii nukleoprotelnu virusu chřipky A, 4) ako zdroj protilátky jedinej podtriedy (Ig6 1) pre přípravu sér Specifických pře uve-dené podtriedu. PŘED Μ E T VYNÁLEZU Myči lymfocytárny hybridóm VU IIH3, produkujúci monoklonálnu protilátku podtriedyIgG 1 proti nukleoprotelnu virusu chřipky A, i
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS889004A CS270544B1 (cs) | 1988-12-29 | 1988-12-29 | Myši lymfocytárny hybridóm VU IIH3 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS889004A CS270544B1 (cs) | 1988-12-29 | 1988-12-29 | Myši lymfocytárny hybridóm VU IIH3 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS900488A1 CS900488A1 (en) | 1989-11-14 |
| CS270544B1 true CS270544B1 (cs) | 1990-07-12 |
Family
ID=5441342
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS889004A CS270544B1 (cs) | 1988-12-29 | 1988-12-29 | Myši lymfocytárny hybridóm VU IIH3 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS270544B1 (cs) |
-
1988
- 1988-12-29 CS CS889004A patent/CS270544B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS900488A1 (en) | 1989-11-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH0630617B2 (ja) | ジゴキシンに対し高い親和性を有するモノクロ−ナル抗体 | |
| US4752582A (en) | Monoclonal antibodies to human glycophorin A and cell lines for the production thereof | |
| CS270544B1 (cs) | Myši lymfocytárny hybridóm VU IIH3 | |
| CS270543B1 (cs) | Myši lymfocytáeny hybridóm VU 2-L/5 | |
| KR880005258A (ko) | Ifn-오메가에 대한 모노클로날 항체, 이들의 제조방법, 및 ifn-오메가의 정제 및 탐지를 위한 이들의 용도 | |
| CS270542B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu cf2 | |
| JP3091974B2 (ja) | ８―ハイドロキシ―２’―デオキシグアノシンのモノクローナル抗体及びその製造法並びにモノクローナル抗体を生産するハイブリッド細胞 | |
| CS269049B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridome vu 315/4 | |
| CS269050B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridome vu vih7 | |
| CN112094345B (zh) | 可应用于肿瘤细胞捕获的小鼠抗免疫球蛋白关联βCD79b的单克隆抗体 | |
| CS267393B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn b13 | |
| CS270537B1 (cs) | Myši lymfoeytárny hybridóm VÚ 144/1-2 | |
| CS267392B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridom vu ifn al 6 | |
| CS267391B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn g8 | |
| CS270538B1 (cs) | Myši lymfocytárny hybridóm VÚ 159/1-9 | |
| CS267394B1 (cs) | Myší lymfocytámy hybridóm VÚIFN BBA6 | |
| CS270193B1 (cs) | Myší lymfocytárny hybridům VÚ 303/4 | |
| CS270194B1 (cs) | Myší lymfocytárny hybridem VÚ 499/1 | |
| RU2031117C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus musculus - продуцент моноклональных антител к вирусу простого герпеса i типа | |
| CS240846B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS IN - 04 | |
| CS270195B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu 809/5 | |
| CS271292B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu 440/2 | |
| JPH0272894A (ja) | 単クローン性抗体及びこれを用いるアコニチン系アルカロイドの測定法 | |
| CS222781B1 (en) | Electromotor with friction brake with decreased noise | |
| CS243348B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridem IMG-CZAS HTF-21 |