CS270538B1 - Myši lymfocytárny hybridóm VÚ 159/1-9 - Google Patents
Myši lymfocytárny hybridóm VÚ 159/1-9 Download PDFInfo
- Publication number
- CS270538B1 CS270538B1 CS888158A CS815888A CS270538B1 CS 270538 B1 CS270538 B1 CS 270538B1 CS 888158 A CS888158 A CS 888158A CS 815888 A CS815888 A CS 815888A CS 270538 B1 CS270538 B1 CS 270538B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- type
- hybridoma
- glycoprotein
- herpes simplex
- simplex virus
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Riešenie ea týká myšieho lymfocytárneho hybridómu, produkujúceho monoklonálnu protilátku proti glykoproteínu gB virusu Herpes simplex typ 1 a typ 2, uloženého v zbierke nybridomov Vlrolofickeho ústavu SAV v Bratislavě pod označením VÚ 159/1-9. Mongklonálna protilátka produkovaná hybridomom VÚ 159/1-9 je vhodná na diagnostické účely v imunofluorascančnom teste /IF/, v rédioimunoanalytickom taste /RIA/, imunoenzymatickej analýze /ELISA/ a v rádioimunoprecipitačnom teste, na stanovenie přítomnosti a množstva virusového antigénu v tastovanom materiále. Oe vhodná aj na imunoafinitnú purifikáciu glykoproteínu gB z extraktov infikovaných buniek.
Description
CS 270 538 B1 1
Vynález ea týká hybridómu, t.j. hybridného jednobunkového organizmu, zostrojené-ho fúziou myšej myelómovaj buňky Sp2/0 a myšej slezinovej lymfoidnej buňky, produkujú-cej protilátku voči glykoproteinu gB virusu Herpes simplex typ 1 a typ 2.
Ooposiař sa protilátky voči virusu Herpes simplex připravovali tak, že virus puri-fikovaný alebo nepurifikovaný, reep. Jeho izolovaná proteiny boli opakovaná injikovanápokusným zvieratám, najčaetejěie králikom, myšiam alebo morčatám. Sérum takto imunizo-vaných zvierat, odebraná po viacerých dávkách antigánu, slúžilo ako zdroj protilátok,používaných najma pra kvalitativny dokaž antigánu - virusu Herpes simplex - v základnomvýskume a v imunodiagnostickej praxi (Kalimo K.O.K., Marttila R.O., Granfore K., Vilja-nen M.K.: Solid-phese radioimmunoassay of human immunoglobulin M and immunoglobulin Gantibodies against Herpes simplex virus type 1 capeid, envelope and excreted antigens.Infect. Immun. 15/1972/, 883-889; Lesso □ ., Hana L., Matis O.t Reactions of immune seraagainst the nucleocapsid, envelope and whole Herpes simplex virus type 1. Acta virol.20/1976/. 48-52). Tento postup nazývaný konvenčnou imunizéciou ma niekoXko nevýhod. Vsére imunizovaných zvierat sa nachádza heterogánna zmes protilátok, ktorých spektrumje v každom organizme iná a neopakovatelná. Organizmus vytvoří okrem protilátek vočižiadanámu antigánu aj protilátky voči nečistotám buňkového původu nachádzajúcim sa v an-tigáne. Tieto protilátky Je potřebné zo sér odstraňovat vysycovanlm. Výrobné Šarže kon-venčných antisér sa preto dajú tažko Standardizovat a bývajú v čirokom rozmedzi kvality.Pre výrobu kvalitnej Šarže séra třeba připravit čistý lmunizačný antigén v dostatočnommnožetve, čo je najma u virusu Herpes simplex postup náročný na materiál a technické vy-bavenie laborátória. V poslednom čase sa čoraz častéjSie použlvajú na diagnostikovanieherpetickýoh infekcii monoklonálne protilátky, tzv. typovospoločné, ktoré sú schopné re-agovat 8 oboma typmi virusu Herpes simplex. .
Uvedené nevýhody dotsraz používaných postupov sa nevyskytni!, ak je k dispozici! hy-bridómova buňková linia produkujúca typovospoločné monoklonálnu protilátku voči glyko-proteínu gB virusu Herpes simplex typ 1 a typ 2, ktorá je uložená v zbierke hybridómovVirologického ústavu SAV, Mlýnská dolina 1, Bratislava pod označením VÚ 159/1-9.
Uvedený hybridóa bol získaný ep$eobom známým z odbornéj literatúry (Kohler G., Mil-stein, G.: Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specifΙ-οί ty. Nátuře 256, /1975/, 495., Gerhard, W.t Fusion of cells in suspension and outgrowthof hybride in conditioned medium. Monoclonal antibodies; A new dimension in Biologicalanalyses, Kennett R. H. a spol., eds. New York, Plenům Press (1980Ú, 370.).
Hybrldné buňky získané po fúzii myčích myelómovych Sp2/0 buniek a buniek získaných zosleziny myči BALB/c lmunizovanej zmesou purifikovaných vlrusov Herpes simplex typ 1 atyp 2, boli klonované a po otestovaní bol vybraný klon VÚ 159/ 1-9. Výhodou hybridóeu je, že produkuje homogénnu protilátku, tzv. monoklonálnu proti-látku, ktorá je schopná čpecificky reagovat s glykoprotelnom gB virusu Herpes simplextyp 1 a typ 2. Hybridóa VÚ 159/1-9 možno kultivovat in vitro v médiach vhodných pre ži-vočišné buňky alebo in vivo v peritoneálnej dutině myči kmeňa B.LB/c. Z konzerv zmra-zených buniek uchovaných v kvapalnom dusíku, možno začat produkciu protilátky bez dal-šej. imunizácie zvierafa antlgénom. Přiklad
Za účelom zlskania vačšieho množstva monoklonalnej protilátky VÚ 159/1-9 kultivá-ciou hybridómovych buniek in vivo, 5xlO6 buniek sa aplikovalo do peritoneálnej dutinymyši. Pre lepšie uchytenie buniek bola myš 15 dni před aplikáciou buniek premedikovanáparafinovým olejom (0,5 ml intraperitoneálne na 1 myš). Po 10 dňoch rastu hybridómu vperitoneálnej dutině, bola myš zabitá a vyprodukovaná ascitická tekutina odobrané. Tým-to postupem možno priemerne získat asi 7 ml ascitickej tekutiny obeahujúcej 8 mg/ml
Claims (2)
- I CS 270 538 B1 protilátky. Ascilitická tekutina obsahujúca produkt hybridómu VÚ 159/1-9 vykazovala Spe-cifická vazbu k virusu Herpes simplex typ 1 a typ 2 v rádioimunoanalytickom teste /RIA/a v imunosnzymatickaj analýze /ELISA/. Metodou rádioimunoprecipitácie a alsktroforózyv polyakrylamidovom géli sa zistila vazba monoklonálnej protilátky na glykoprotein gB virusu Herpes simplex typ 1 a typ
- 2. Buňky hybridómu VÚ 159/1-9 rastu in vitro ako polosuspsnzná kultára. Majů gulatýtvar a velkost charakteristická pre myelómove buňky. Obsahujů fázované buňkové jadrá,sá aneuploidne. Buňky hybridómu VÚ 159/1-9 májů ultračtruktúrny obraz typických myelómo-vych buniek, kde převážujúcou organelou sú volné a na membránu viazané polyribozómy.Základným kultivačným médiom je Dulbeccova modifikácia Eagleovho minimálneho esenciál-neho média (Oulbecco, R., Frsema, G., Virology £/1959/.396). Toto médium, označované akoDMEM, je pre kultiváciu hybridómu doplněné gentamycinom a inaktivovaným prekolostrélnymtelacim sérora (10%, Bioveta, Ivanovice na Hané). Hybridóm je kultivovaný pri 37 °C v at-mosféře 5% C02· 3eho generačná doba je přibližné 24 h. Produkovaná protilátka je monokloálny imunoglobulin podtriedy IgGl. Hybridóm VÚ 159/1-9 raože byt využívaný ako zdroj protilátky voči glykoproteinu gBvirusu Herpes simplex typ 1 a typ 2, ktorá sa dá použit na kvalitativny dokaž přítomnos-ti virusu Herpes simplex typ 1 a typ 2 vo vyáetrovanom materiále, na kvantitativné sta-novenie množstva infikujúceho virusu rssp. glykoproteinu gB, pri vyhodnocováni epidemio-logickej situácie, na purifikaciu glykoproteinu gB z extraktov infikovaných buniek pomo-cou imunoafinitnej chromatografie a ako zdroj protilátky jedinej podtriedy (IgGl) prepřípravu antisér Specifických pre uvedená podtriedu. PREDMET VYNÁLEZU Myái lymfocytérny hybridóm VÚ 159/1-9, produkujáci monoklonálnu protilátku podtrie-dy IgGl voči glykoproteinu gB virusu Herpes simplex typ 1 a typ 2.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888158A CS270538B1 (cs) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myši lymfocytárny hybridóm VÚ 159/1-9 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888158A CS270538B1 (cs) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myši lymfocytárny hybridóm VÚ 159/1-9 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS815888A1 CS815888A1 (en) | 1989-11-14 |
| CS270538B1 true CS270538B1 (cs) | 1990-07-12 |
Family
ID=5431792
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS888158A CS270538B1 (cs) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myši lymfocytárny hybridóm VÚ 159/1-9 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS270538B1 (cs) |
-
1988
- 1988-12-09 CS CS888158A patent/CS270538B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS815888A1 (en) | 1989-11-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pereira et al. | Type-common and type-specific monoclonal antibody to herpes simplex virus type 1 | |
| Walsh et al. | Monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus proteins: identification of the fusion protein | |
| US4716104A (en) | Detecting presence of HCMV-specific IgM | |
| Yeargan et al. | Rapid subtyping of equine herpesvirus 1 with monoclonal antibodies | |
| Halk et al. | Production of monoclonal antibodies against three ilarviruses and alfalfa mosaic virus and their use in serotyping | |
| JPH0630617B2 (ja) | ジゴキシンに対し高い親和性を有するモノクロ−ナル抗体 | |
| US20030129587A1 (en) | Antigen/antibody specificity exchanger | |
| CA1339830C (en) | Human monoclonal antibody to lymphadenopathy associated virus | |
| CN115806611B (zh) | 抗新型冠状病毒n蛋白的抗体及其应用 | |
| KR910016346A (ko) | 광견병 바이러스에 대한 사람 모노클로날 항체, 이의 제조방법 및 용도 | |
| Bolognesi et al. | Immunological properties of avian oncornavirus polypeptides | |
| Yamanishi et al. | Antigenic differences between two viruses, isolated in Japan and Korea, that cause hemorrhagic fever with renal syndrome | |
| US4752582A (en) | Monoclonal antibodies to human glycophorin A and cell lines for the production thereof | |
| Forghani et al. | Serological reactivity of some monoclonal antibodies to varicella-zoster virus | |
| US5130232A (en) | Monoclonal antibody immunoassay kit for avian reticuloendotheliosis virus | |
| CS270538B1 (cs) | Myši lymfocytárny hybridóm VÚ 159/1-9 | |
| Flaegstad et al. | Neutralization test for BK virus: plaque reduction detected by immunoperoxidase staining | |
| US5183755A (en) | Anti-human papillomavirus monoclonal antibody, hybridoma producing the same and process for preparing the same | |
| Kao et al. | Monoclonal antibodies for the rapid diagnosis of respiratory syncytial virus infection by immunofluorescence | |
| CN116655779A (zh) | 新型冠状病毒抗体及其应用 | |
| Herrmann et al. | Preparation and characterization of monoclonal antibodies to enteric adenovirus types 40 and 41 | |
| KR880005258A (ko) | Ifn-오메가에 대한 모노클로날 항체, 이들의 제조방법, 및 ifn-오메가의 정제 및 탐지를 위한 이들의 용도 | |
| WO1995008575A1 (en) | Monoclonal antibodies specific for feline infectious peritonitis virus | |
| CS270537B1 (cs) | Myši lymfoeytárny hybridóm VÚ 144/1-2 | |
| Dawson et al. | Monoclonal antibodies to hepatitis A virus |