CS267394B1 - Myší lymfocytámy hybridóm VÚIFN BBA6 - Google Patents
Myší lymfocytámy hybridóm VÚIFN BBA6 Download PDFInfo
- Publication number
- CS267394B1 CS267394B1 CS885268A CS526888A CS267394B1 CS 267394 B1 CS267394 B1 CS 267394B1 CS 885268 A CS885268 A CS 885268A CS 526888 A CS526888 A CS 526888A CS 267394 B1 CS267394 B1 CS 267394B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridoma
- human
- bba6
- antibody
- mouse
- Prior art date
Links
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 title abstract description 20
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 108010078049 Interferon alpha-2 Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102100039350 Interferon alpha-7 Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 abstract description 9
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 abstract description 9
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 abstract description 7
- 241001529936 Murinae Species 0.000 abstract description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 abstract description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 abstract description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 abstract description 3
- 101000959794 Homo sapiens Interferon alpha-2 Proteins 0.000 abstract description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 abstract description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 abstract description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 2
- 238000009739 binding Methods 0.000 abstract 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 abstract 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 abstract 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 4
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101001054328 Mus musculus Interferon beta Proteins 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 101001054334 Homo sapiens Interferon beta Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 230000003322 aneuploid effect Effects 0.000 description 1
- 208000036878 aneuploidy Diseases 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 210000002729 polyribosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Riešenie sa týká myšieho lymfocytárneho
hybridómu produkujúceho širokospektrálnu
protilátku voči 1’udskému a myšiemu fibroblastovému
interferónu beta a proti 1’udské-
mu rekombinantnému interferónu alfa 2, uloženého
v zbierke hybridómov Virologického
ústavu SAV v Bratislavě pod označením VÚ IFN BBA6. Monoklonálna protilátka hybridómu
VÚ IFN BBA6 je vhodná na stanovenie
přítomnosti uvedených typov interferónov
na základe inhibicie ich biologickej aktivity
v interferón-neutralizačných testoch alebo na
základe špecifickej vázobnej reakcie v imunoenzymatických
testoch. Je vhodná aj na účely
preparatívne pre čistenie 1’udského a myšieho
interferónu beta a I’udského interferónu alfa
2 metodou imunoafinitnej chromatografie. Monoklonálnu
protilátku možno využiť aj na pří
pravu sér Specifických k myšiemu imunoglobulínu
podtriedy IgG2a.
Description
(57) Riešenie sa týká myšieho lymfocytárneho hybridómu produkujúceho širokospektrálnu protilátku voči fudskému a myšiemu fibroblastovému interferónu beta a proti fudskému rekombinantnému interferónu alfa 2, uloženého v zbierke hybridómov Virologického ústavu SAV v Bratislavě pod označením VÚ IFN BBA6. Monoklonálna protilátka hybridómu VÚ IFN BBA6 je vhodná na stanovenie přítomnosti uvedených typov interferónov na základe inhibície ich biologickej aktivity v interferón-neutralizačných testoch alebo na základe špecifickej vázobnej reakcie v imunoenzymatických testoch. Je vhodná aj na účely preparatívne pre čistenie 1’udského a myšieho interferónu beta a I’udského interferónu alfa 2 metódou imunoafinitnej chromatografie. Monoklonálnu protilátku možno využiť aj na přípravu sér Specifických k myšiemu imunoglobulínu podtriedy IgG2a. CS 267 394 Bl 1
Vynález sa týká nového hybridómu, t. j. hybridného jednobunkového organizmu, zostrojeného buňkovou fúziou myšej myelómovej linie NSO a myšej slezinovej lymfoidnej buňky, nrodukujúcej širokospektrálnu protilátku proti fudskéinu interferónu beta, myšieinu inteiíerónu beta a 1’udskému interferónu alfa 2.
Doposial’ sa protilátky voči interferónom vyrábajú tak, že sú jednotlivé typy interferónov opakované injikované ako antigén pokusným zvieratám, najčastejšie králikom alebo ovciam. Sérum takto imunizovaných zvierat, odobrané po určitej době pósobenia antigénu, slúži ako zdroj protilátok, používaných predovšetkým pre kvantitatívnu alebo kvalitatívnu analýzu antigénu — jednotlivých interferónov — vo výskume a v imunodiagnostickej praxi. Tento postup, nazývaný konvenčnou imunizáciou, má niekofko nevýhod. V sére imunizovaných zvierat sa nachádza heterogénna zmes protilátok, ktorých spektrum je v každom jednotlivom organizme rózne a neopakovatefné. Organizmus spravidla vytvoří okrem protilátok voči žiadanému antigénu i protilátky voči nečistotám antigénového preparátu, ktoré je potřebné zo sér odstraňovat’ vysycovaním. Výrobně šarže konvenčných sér sa preto dajú ťažko standardizovat’ a bývajú v širokom rozmedzí kvality. Pre výrobu každej šarže třeba pripraviť čistý imunizačný antigén a ďalšie antigény na vysýtenie balastných protilátok proti nečistotám.
Uvedené nedostatky vyššie zmieneného a doposial’ používaného postupu odpadnú, ak je k dispozícii hybridóm, produkujúci monoklonálnu širokospektrálnu protilátku voči fudským interferónom beta, alfa 2 a voči myšiemu interferónu beta uložený v zbierke hybridómov Virologického ústavu SAV v Bratislavě, Mlýnská dolina 1, pod označením VÚ IFN BBA6.
Uvedený hybridóm bol získaný spósobom známým z odbornej literatúry (Kóhler, G., Milstein, C.: Continuous cultures of fuse celíš secreting antibody of predefined specificity. Nátuře, 256, /1975/, 495; Gerhard, W.: Fusion of cells in suspension and outgrowth of hybrids in conditioned medium. In: Monoclonal antibodies. Hybrids: A New Dimension in Biological Analyses. R. H. Kennet, T. J. McKearn, Κ. B. Bechtol, eds., New York, Plenům Press, /1980/, 370) klonováním súboru hybridných buniek po fúzii myšej myelómovej linie NSO a buniek, získaných zo sleziny myší kmeňa BALB/c, imunizovaných preparátoru 1’udského interferónu beta. Výhodou hybridómu jc, žc produkuje homogénnu protilátku, tzv. rnonoklonálnu protilátku, ktorá je schopná specificky reagovat' s 1’udskými interferónmi beta, alfa 2 alebo s myším interferónom beta. Hybridóm VÚ IFN BBA6
Claims (2)
- PREDMET VY Myší lymfocytárny hybridóm VÚ IFN BBA6 produkujúci širokospektrálnu rnonoklonálnu protilátku podtriedy IgG2a proti 1’udskému 2 možno kultivovať in vitro v médiách vhodných pre živočišné buňky, alebo in vivo v peritoneálnej dutině myší kmeňa BALB/c. Z konzerv, uchovaných v kvapalnom dusíku, možno zahájíť produkciu protilátky bez ďalšej imunizácie aiitigónoni. Příklad Pre účel pomnoženia hybridómových buniek in vivo sa aplikovalo 5 χ 106 buniek do peritoneálnej dutiny myší. Pre lepšie uchytenie aplikovaných buniek bola myš 15 dní před prenosom buniek hybridómu premedikovaná parafínovým olejom (0,5 ml intraperitoneálne). Po 20 dňoch rastu hybridómu v peritoneálnej dutině bola myš zabitá a vyprodukovaná ascitická tekutina odobratá. Ceikom sa získalo 7 ml ascitickej tekutiny, ktorá obsahovala 8 mg/ml imunoglobulínu. Ascitická, tekutina, obsahujúca produkt hybridómu VÚ IFN BBA6 specificky inhibovala antivírusovú a antiproliferatívnu aktivitu fudského fíbroblastového interferónu beta, myšieho fíbroblastového interferónu beta a fudského rekombinantného interferónu alfa
- 2. Monoklonálna protilátka vykazovala aj Specifická vazbu s jednotlivými interferónmi v imunoenzymatických testoch. In vitro rastů hybridómy ako polosuspenzná kultúra. Majú tvar (gufatý) a vefkosť charakteristické pre myelómové buňky, obsahujú fúzované buňkové jadrá, sú aneuploidné. Buňky hybridómu VÚ IFN BBA6 majú ultraštruktúrny obraz typických myelómových buniek, kde prevažujúcou organelou sú vofné a na membrány viazané polyribozómy. Základným kultivačným médiom je Dulbeccova modifikácia Eaglovho minimálneho esenciálneho média (Dulbecco, R. a Freetnan, G., Virology 8 /1959/, 396). Toto médium, označované ako DM EM, je pre kultiváciu hybridómu doplněné gentamycínom a inaktivovaným koňským sérom (10%, Elán cloně, Bratislava). Hybridóm je kultivovaný pri 37 °C — jeho středná generačná doba je přibližné 24 hod. Produkovaná protilátka je monoklonálny imunoglobulín podtriedy IgG2a. Hybridóm VÚ IFN BBA6 móže byť priemyslovo využívaný ako zdroj širokosppektrálnej protilátky voči 1’udskému a myšiemu fibroblastovému interferónu beta a proti 1’udskému rekombinantnému interferónu alfa 2 pri kvantitatívnom alebo kvalitatívnom vyhodnocovaní přítomnosti jednotlivých typov interferónov vo vyšetrovanom materiáli. Monoklonálnu protilátku je možné využiť aj pri purifikácii jednotlivých typov interferónov v imunoafinitnej chromatografii alebo ako zdroj protilátky jedinej podtriedy (IgG2a) pre přípravu sér specifických pre uvedenú podtriedu. NÁLEZU a myšiemu fibroblastovému interferónu beta a voči 1’udskému rekombinantnému interferónu alfa 2.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS885268A CS267394B1 (cs) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | Myší lymfocytámy hybridóm VÚIFN BBA6 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS885268A CS267394B1 (cs) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | Myší lymfocytámy hybridóm VÚIFN BBA6 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS526888A1 CS526888A1 (en) | 1989-06-13 |
| CS267394B1 true CS267394B1 (cs) | 1990-02-12 |
Family
ID=5397248
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS885268A CS267394B1 (cs) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | Myší lymfocytámy hybridóm VÚIFN BBA6 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS267394B1 (cs) |
-
1988
- 1988-07-22 CS CS885268A patent/CS267394B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS526888A1 (en) | 1989-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bossie et al. | IFN-γ enhances secretion of IgG2a from IgG2a-committed LPS-stimulated murine B cells: implications for the role of IFN-γ in class switching | |
| US4594325A (en) | High fusion frequency fusible lymphoblastoid cell line | |
| GB2113715A (en) | Process for the production of human mono-clonal antibodies | |
| IE50418B1 (en) | Cell lines,process for preparing them and process for producing antibodies | |
| IL100365A (en) | Monoclonal antibodies against human tumor necrosis factor alpha and pharmaceutical compositions containing said monoclonal antibodies | |
| NISHINAKA et al. | Two chicken B cell lines resistant to ouabain for the production of chicken monoclonal antibodies | |
| JPS59116231A (ja) | 抗−インタ−ロイキン−２単クロ−ン抗体 | |
| JPS5955185A (ja) | ５−ブロモ及び５−ヨ−ドデオキシウリジンに対して特異的なモノクロ−ナル抗体を分泌するハイブリド−マ並びに細胞増殖測定用試薬 | |
| EP0265384A2 (en) | Monoclonal antibodies to a colony stimulating factor | |
| CS267394B1 (cs) | Myší lymfocytámy hybridóm VÚIFN BBA6 | |
| Ichikawa et al. | Monoclonal antibodies to choline acetyltransferase of rat brain | |
| CS267392B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridom vu ifn al 6 | |
| CS267391B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn g8 | |
| CS267393B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn b13 | |
| Baker Jr et al. | Development of a human monoclonal antibody from a Graves' disease patient that identifies a novel thyroid membrane antigen. | |
| NZ245428A (en) | Monoclonal antibodies specific for sulphonyl ureas | |
| CS270544B1 (cs) | Myši lymfocytárny hybridóm VU IIH3 | |
| CS270542B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu cf2 | |
| CS270543B1 (cs) | Myši lymfocytáeny hybridóm VU 2-L/5 | |
| EP0259585A1 (en) | Monoclonal antibodies specific to surface receptor for IgE and hybrid cell lines producing these antibodies and use thereof | |
| CS269050B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridome vu vih7 | |
| CS269049B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridome vu 315/4 | |
| CS277142B6 (en) | Murine hybridoma ifna1-48 producing a monoclonal antibody | |
| SU1685997A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS.мUSсULUS L. - продуцент моноклональных антител к тиреотропному гормону человека | |
| RU2059721C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus musculus l., используемый для получения моноклональных антител к тиреотропному гормону человека |