CS269049B1 - Mouse lymphocytar hybridome vu 315/4 - Google Patents
Mouse lymphocytar hybridome vu 315/4 Download PDFInfo
- Publication number
- CS269049B1 CS269049B1 CS888954A CS895488A CS269049B1 CS 269049 B1 CS269049 B1 CS 269049B1 CS 888954 A CS888954 A CS 888954A CS 895488 A CS895488 A CS 895488A CS 269049 B1 CS269049 B1 CS 269049B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- influenza
- virus
- nucleoprotein
- hybrid
- hybridoma
- Prior art date
Links
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 9
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 5
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 4
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 claims description 3
- 101900222562 Influenza A virus Nucleoprotein Proteins 0.000 claims description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 claims 1
- 108090001074 Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 claims 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims 1
- 230000003322 aneuploid effect Effects 0.000 claims 1
- 208000036878 aneuploidy Diseases 0.000 claims 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 claims 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 claims 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 claims 1
- 210000002729 polyribosome Anatomy 0.000 claims 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 claims 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 241001500351 Influenzavirus A Species 0.000 description 1
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 108700010900 influenza virus proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
CS 269 049 Bl 1
Vynález aa týká myšieho lymfocytárneho hybridámu, t.J. hybridného jedno-buňkového organizau, zostrojeného buňkovou fúziou myšej myelámovej linie Sp2/0a myšej slezinovej buňky, produkujúceho protilátku proti virusu chřipky A,
Protilátky voči proteinem virusu chřipky sa doteraz připravujú tak, ževirus resp. jeho izolované proteiny sa opakované injikujú ako antigén pokus-ným zvieratáp nejčastejšie králikom, myšiam, alebo fretkám. Sérum takto imunizo-vaných zvierat, odobraté po určitej době posďbenia antigénu, slúži ako zdrojprotilátek, používaných predovšetkým pře kvantitativnu alebo kvalitativnu analý-zu antigénu - virusu chřipky - vo výskume a v imunodiagnostickej praxi.
Tento postup, nazývaný konvenčnou imunizáciou, mé niekolko nevýhod, V séreimunizovaných zvierat sa nachádza heterogénna zmes protllátok, ktorých spektrumJe v každom jednotlivom organizme rožne a neopakovatelné. Organizmus spravidlavytvoří okrem protilátek voči žiadanému antigénu i protilátky voči nečistotámantigánového preparátu, ktoré Je potřebná zo sér odstraňovat vysycovanim, Výrobněšarže konvenčných sér sa preto dajú fažko Standardizovat a bývejú v širokom roz-medzi kvality. Pre výrobu každej šarže třeba připravit čistý imunizačný antigéna ďalšie antigény na vysýtenie balastných protllátok proti nečistotám.
Uvedené nedostatky vyššie zmieneného a dosial používaného postupu odpadní,ak je k dispozícii hybridám, produkujúci monoklonálnu protilátku proti nukleopro-teinu virusu chřipky A, uložený v zbierke hybridámov Virologického ústavu SAVv Bratislavě, Mlýnská dolina 1. pod označením VU 315/4,
Uvedený hybridám bol získaný sposobom známým z odbornej literatúry (KdňlerG,, Milstein. C,: Continuous cultures of fused cells secreting antibody of pre-defined specificity. Nátuře, 256, (1975), 495: Gerhard. W.: Fusion Of cells insuspension and autgrowth of hybrids in conditloned medium, In; Monoclonal antibo-dies, Hybrids; A New Oimension in.Biological Analyses. R. H. Kennet, T.3. McKearn, K.B. Bechtol, eds., New York, Plenům Press (1980), 370.) klonovanim súboru hy-bridných buniek po fúzii myšej myelámovej linie 3p2/0 a buniek, získaných zo sle-ziny myši kmeňa BALB/c, imunizovaných virusom chřipky A/Dunedin/4/73 (H3N2). Výhodou hybridámu podlá vynálezu je, že produkuje hémogénnu protilátku,tzv, monoklonálnu protilátku, ktorá je schopná Specificky reagovat s nukleoprotei-nom chřipkového virusu typu A, Hybridám VU 315/4 možno kultivovat in vitrov mádiách vhodných pre živočišné buňky, alebo in vivo v peritoneálnej dutině myšíkmeňa BALB/c, 2 konzerv, uchovaných v kvapalnom dusíku, možno zahájit produkciuprotilátky bez áaíšej imunizácie antigénom. Přiklad
Pre účel pomnoženia hybridámových buniek in vivo sa aplikovalo 5 x 106 bu-niek do peritoneálnej dutiny myši. Pre lepšie uchytenie aplikovaných buniek bolamyš 15 dni před přenosem buniek hybridámu premedikovaná parafinovým olejom(0,5 ml intraperitoneálne), Po 20 dňoch rastu hybridámu v peritoneálnej dutině bolamyš zabitá a vyprodukovaná ascitická tekutina odobratá, Celkom sa získalo 8 mlascitickej tekutiny obsahujúcej 5 mg/ml imunoglobulínu. Ascitická tekutina, obsa-hujíce prádukt hybridámu VU 315/4, vykazovala v radioimunoanalytickom taste Spe-cifická vazbu k virusom chřipky typu A (napr. subtyp Hl, H2, H3), ala nie vočitypu B, a v radioimunoprecipitačnom teste sa viazala na nukleoprotein virusu chřip-ky A.
Claims (1)
- 2 CS 269 049 Bl In vitro restu buňky hybridúmu ako polosuspenzná kultíra. Mají tvar (gula»tý) a velkost charakteristické pra myelúmové buňky, obsahují fúzované buňkovéJadrá, sú aneuploidné, Buňky hybridúmu VU 3XS/4 mají ultraštruktírny obraz typic»kých myelůmových buniek, kde pravažajícou organelou sú volné a na neobrány viaza-né polyribozůmy. Základným kultivačným médiom Je Dulbeccova nodifikécia Eaglov-ho minimálneho aaanciálneho média (Dulbacco, R. a Fraeman,G., Virology 8 (1959),396). Toto nédiun, označované ako DMEM, Je pře kultivéciu hybridúmu doplněnégentamycinom a inaktivovaným prekolostrálnym aérom (10%. Bioveta, Ivanovice naHané). Hybridům Je kultivovaný pri 37 °C - Jeho středná generačná doba Je pri-bllžne 24 h. Produkovaná protilátka Je monoklonálny imunoglobulin podtriedyigGl. Hybridům VU 315/4 sa nože priemyselne využíval ako zdroj protilátky protinukleoproteinu (nukleokapsidovému proteinu) virusu chřipky A v metůdach analytických,preparativnych alebo diagnostických a to; 1) pri kvantitativnon a kvalitativnom vyhodnocováni pritomnosti nukleoproteinuvirusu chřipky A vo výšetrovanom materiál! (napr. klinické vzorky), 2) pri 'vyhodnocováni epidemiologickej situácie, 3) pri purifikácii nukleoproteinu virusu chřipky A, 4) ako zdroj protilátky jedinej podtriedy (IgG 1) pre pripravu sér Specifických , pre uvedení podtriedu. PREDMET VYNALEZU Myši lymfocytárny hybridům VU 315/4, produkujíc! monoklonálnu protilátkupodtriedy IgG 1 proti nukleoproteinu virusu chřipky A,
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888954A CS269049B1 (en) | 1988-12-29 | 1988-12-29 | Mouse lymphocytar hybridome vu 315/4 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888954A CS269049B1 (en) | 1988-12-29 | 1988-12-29 | Mouse lymphocytar hybridome vu 315/4 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS895488A1 CS895488A1 (en) | 1989-08-14 |
| CS269049B1 true CS269049B1 (en) | 1990-04-11 |
Family
ID=5440817
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS888954A CS269049B1 (en) | 1988-12-29 | 1988-12-29 | Mouse lymphocytar hybridome vu 315/4 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS269049B1 (cs) |
-
1988
- 1988-12-29 CS CS888954A patent/CS269049B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS895488A1 (en) | 1989-08-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7013051B2 (ja) | 牛妊娠関連グリコタンパク質１に特異的に結合する抗体及びその用途 | |
| Bolognesi et al. | Immunological properties of avian oncornavirus polypeptides | |
| JPS5955185A (ja) | ５−ブロモ及び５−ヨ−ドデオキシウリジンに対して特異的なモノクロ−ナル抗体を分泌するハイブリド−マ並びに細胞増殖測定用試薬 | |
| CN118978587B (zh) | 抗h10亚型流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体2g9及其应用 | |
| GB2144147A (en) | Monoclonal antibody having only one light chain which will bind a specific antigen | |
| CS269049B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridome vu 315/4 | |
| Margni et al. | The proportion of symmetric and asymmetric IgG antibody molecules synthesized by a cellular clone (hybridoma) can be regulated by placental culture supernatants | |
| CS269050B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridome vu vih7 | |
| CS270544B1 (cs) | Myši lymfocytárny hybridóm VU IIH3 | |
| CS270543B1 (cs) | Myši lymfocytáeny hybridóm VU 2-L/5 | |
| CS270542B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu cf2 | |
| JP2009508087A (ja) | モノクローナル抗体試薬 | |
| CN112094345B (zh) | 可应用于肿瘤细胞捕获的小鼠抗免疫球蛋白关联βCD79b的单克隆抗体 | |
| Steinitz et al. | The presence of non-isotype-specific antibodies in polyclonal anti-IgE reagents: demonstration of their binding to specifically selected Epstein-Barr virus-transformed cell lines | |
| JP2003302401A (ja) | 高性能モノクローナル抗ハプテン抗体による迅速高感度測定法 | |
| JPH0272894A (ja) | 単クローン性抗体及びこれを用いるアコニチン系アルカロイドの測定法 | |
| CS240846B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS IN - 04 | |
| CZ280894B6 (cs) | Myší lymfocytární hybridom BLV-01 | |
| CS267391B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn g8 | |
| CS263122B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridorn produkující protilátku pr >ti lidskému alfa-1'etoproteinu | |
| CS267392B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridom vu ifn al 6 | |
| CS267394B1 (cs) | Myší lymfocytámy hybridóm VÚIFN BBA6 | |
| CS270537B1 (cs) | Myši lymfoeytárny hybridóm VÚ 144/1-2 | |
| CS267393B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn b13 | |
| CS228858B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti prasečímu imunoglobulinu 6 |