CS269049B1 - Myší lymfocytárny hybridám VU 315/4 - Google Patents

Myší lymfocytárny hybridám VU 315/4 Download PDF

Info

Publication number
CS269049B1
CS269049B1 CS888954A CS895488A CS269049B1 CS 269049 B1 CS269049 B1 CS 269049B1 CS 888954 A CS888954 A CS 888954A CS 895488 A CS895488 A CS 895488A CS 269049 B1 CS269049 B1 CS 269049B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
hybridoma
virus
influenza
hybrid
mouse lymphocyte
Prior art date
Application number
CS888954A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Other versions
CS895488A1 (en
Inventor
Eva Rndr Csc Vareckova
Tatiana Rndr Betakova
Pavol Rndr Csc Ragac
Marta Rndr Miklosova
Original Assignee
Vareckova Eva
Tatiana Rndr Betakova
Ragac Pavol
Miklosova Marta
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vareckova Eva, Tatiana Rndr Betakova, Ragac Pavol, Miklosova Marta filed Critical Vareckova Eva
Priority to CS888954A priority Critical patent/CS269049B1/cs
Publication of CS895488A1 publication Critical patent/CS895488A1/cs
Publication of CS269049B1 publication Critical patent/CS269049B1/cs

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

CS 269 049 Bl 1
Vynález aa týká myšieho lymfocytárneho hybridámu, t.J. hybridného jedno-buňkového organizau, zostrojeného buňkovou fúziou myšej myelámovej linie Sp2/0a myšej slezinovej buňky, produkujúceho protilátku proti virusu chřipky A,
Protilátky voči proteinem virusu chřipky sa doteraz připravujú tak, ževirus resp. jeho izolované proteiny sa opakované injikujú ako antigén pokus-ným zvieratáp nejčastejšie králikom, myšiam, alebo fretkám. Sérum takto imunizo-vaných zvierat, odobraté po určitej době posďbenia antigénu, slúži ako zdrojprotilátek, používaných predovšetkým pře kvantitativnu alebo kvalitativnu analý-zu antigénu - virusu chřipky - vo výskume a v imunodiagnostickej praxi.
Tento postup, nazývaný konvenčnou imunizáciou, mé niekolko nevýhod, V séreimunizovaných zvierat sa nachádza heterogénna zmes protllátok, ktorých spektrumJe v každom jednotlivom organizme rožne a neopakovatelné. Organizmus spravidlavytvoří okrem protilátek voči žiadanému antigénu i protilátky voči nečistotámantigánového preparátu, ktoré Je potřebná zo sér odstraňovat vysycovanim, Výrobněšarže konvenčných sér sa preto dajú fažko Standardizovat a bývejú v širokom roz-medzi kvality. Pre výrobu každej šarže třeba připravit čistý imunizačný antigéna ďalšie antigény na vysýtenie balastných protllátok proti nečistotám.
Uvedené nedostatky vyššie zmieneného a dosial používaného postupu odpadní,ak je k dispozícii hybridám, produkujúci monoklonálnu protilátku proti nukleopro-teinu virusu chřipky A, uložený v zbierke hybridámov Virologického ústavu SAVv Bratislavě, Mlýnská dolina 1. pod označením VU 315/4,
Uvedený hybridám bol získaný sposobom známým z odbornej literatúry (KdňlerG,, Milstein. C,: Continuous cultures of fused cells secreting antibody of pre-defined specificity. Nátuře, 256, (1975), 495: Gerhard. W.: Fusion Of cells insuspension and autgrowth of hybrids in conditloned medium, In; Monoclonal antibo-dies, Hybrids; A New Oimension in.Biological Analyses. R. H. Kennet, T.3. McKearn, K.B. Bechtol, eds., New York, Plenům Press (1980), 370.) klonovanim súboru hy-bridných buniek po fúzii myšej myelámovej linie 3p2/0 a buniek, získaných zo sle-ziny myši kmeňa BALB/c, imunizovaných virusom chřipky A/Dunedin/4/73 (H3N2). Výhodou hybridámu podlá vynálezu je, že produkuje hémogénnu protilátku,tzv, monoklonálnu protilátku, ktorá je schopná Specificky reagovat s nukleoprotei-nom chřipkového virusu typu A, Hybridám VU 315/4 možno kultivovat in vitrov mádiách vhodných pre živočišné buňky, alebo in vivo v peritoneálnej dutině myšíkmeňa BALB/c, 2 konzerv, uchovaných v kvapalnom dusíku, možno zahájit produkciuprotilátky bez áaíšej imunizácie antigénom. Přiklad
Pre účel pomnoženia hybridámových buniek in vivo sa aplikovalo 5 x 106 bu-niek do peritoneálnej dutiny myši. Pre lepšie uchytenie aplikovaných buniek bolamyš 15 dni před přenosem buniek hybridámu premedikovaná parafinovým olejom(0,5 ml intraperitoneálne), Po 20 dňoch rastu hybridámu v peritoneálnej dutině bolamyš zabitá a vyprodukovaná ascitická tekutina odobratá, Celkom sa získalo 8 mlascitickej tekutiny obsahujúcej 5 mg/ml imunoglobulínu. Ascitická tekutina, obsa-hujíce prádukt hybridámu VU 315/4, vykazovala v radioimunoanalytickom taste Spe-cifická vazbu k virusom chřipky typu A (napr. subtyp Hl, H2, H3), ala nie vočitypu B, a v radioimunoprecipitačnom teste sa viazala na nukleoprotein virusu chřip-ky A.

Claims (1)

  1. 2 CS 269 049 Bl In vitro restu buňky hybridúmu ako polosuspenzná kultíra. Mají tvar (gula»tý) a velkost charakteristické pra myelúmové buňky, obsahují fúzované buňkovéJadrá, sú aneuploidné, Buňky hybridúmu VU 3XS/4 mají ultraštruktírny obraz typic»kých myelůmových buniek, kde pravažajícou organelou sú volné a na neobrány viaza-né polyribozůmy. Základným kultivačným médiom Je Dulbeccova nodifikécia Eaglov-ho minimálneho aaanciálneho média (Dulbacco, R. a Fraeman,G., Virology 8 (1959),396). Toto nédiun, označované ako DMEM, Je pře kultivéciu hybridúmu doplněnégentamycinom a inaktivovaným prekolostrálnym aérom (10%. Bioveta, Ivanovice naHané). Hybridům Je kultivovaný pri 37 °C - Jeho středná generačná doba Je pri-bllžne 24 h. Produkovaná protilátka Je monoklonálny imunoglobulin podtriedyigGl. Hybridům VU 315/4 sa nože priemyselne využíval ako zdroj protilátky protinukleoproteinu (nukleokapsidovému proteinu) virusu chřipky A v metůdach analytických,preparativnych alebo diagnostických a to; 1) pri kvantitativnon a kvalitativnom vyhodnocováni pritomnosti nukleoproteinuvirusu chřipky A vo výšetrovanom materiál! (napr. klinické vzorky), 2) pri 'vyhodnocováni epidemiologickej situácie, 3) pri purifikácii nukleoproteinu virusu chřipky A, 4) ako zdroj protilátky jedinej podtriedy (IgG 1) pre pripravu sér Specifických , pre uvedení podtriedu. PREDMET VYNALEZU Myši lymfocytárny hybridům VU 315/4, produkujíc! monoklonálnu protilátkupodtriedy IgG 1 proti nukleoproteinu virusu chřipky A,
CS888954A 1988-12-29 1988-12-29 Myší lymfocytárny hybridám VU 315/4 CS269049B1 (sk)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS888954A CS269049B1 (sk) 1988-12-29 1988-12-29 Myší lymfocytárny hybridám VU 315/4

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS888954A CS269049B1 (sk) 1988-12-29 1988-12-29 Myší lymfocytárny hybridám VU 315/4

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS895488A1 CS895488A1 (en) 1989-08-14
CS269049B1 true CS269049B1 (sk) 1990-04-11

Family

ID=5440817

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS888954A CS269049B1 (sk) 1988-12-29 1988-12-29 Myší lymfocytárny hybridám VU 315/4

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS269049B1 (cs)

Also Published As

Publication number Publication date
CS895488A1 (en) 1989-08-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0119736A2 (en) Two-site immunoassays using monoclonal antibodies of different classes or subclasses and test kits for performing same
CN102675463B (zh) 一种多菌灵单克隆抗体及其制备方法与应用
CN105838681A (zh) 一株抗地塞米松特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株c3及其应用
CN114989144A (zh) 一种苯醚甲环唑半抗原、完全抗原、抗体及其制备方法和应用
Ichikawa et al. Monoclonal antibodies to choline acetyltransferase of rat brain
Nagao et al. Development and characterization of monoclonal antibodies reactive with paraquat
CS270543B1 (cs) Myši lymfocytáeny hybridóm VU 2-L/5
CS269050B1 (sk) Myši lymfocytárny hybridům VU VIH7
CS270544B1 (cs) Myši lymfocytárny hybridóm VU IIH3
EP0119859A2 (en) Monoclonal antibodies, processes for their preparation and methods for their use
CS270542B1 (sk) Myái lymfocytárny hybridóm VU CF2
RU93019968A (ru) Штамм гибридных культивируемых клеток животного mus musculus - продуцент моноклональных антител к с-концевой части белка р24 вируса иммунодефицита человека i типа
RU2059721C1 (ru) Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus musculus l., используемый для получения моноклональных антител к тиреотропному гормону человека
CN116609522A (zh) 一种基于抗体识别的农药残留快速检测方法
SU1682390A1 (ru) Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L - продуцент моноклональных антител к миоглобину человека
JPH0272894A (ja) 単クローン性抗体及びこれを用いるアコニチン系アルカロイドの測定法
Dandliker et al. Kinetic investigations of antigen-antibody and hapten-antibody reactions
CS240846B1 (cs) Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS IN - 04
CS253240B1 (cs) Myší lymfocytární hybridom HBslC6B12
RU93018332A (ru) Штамм гибридных культивируемых клеток d-22 мыши линии balb/c, используемых для получения моноклональных антител к дигоксину
CS272889B1 (en) Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8
RU93018329A (ru) Штамм гибридных культивируемых клеток 1а9 мыши линии balb/c, используемых для получения моноклональных антител к фенобарбиталу
CZ280894B6 (cs) Myší lymfocytární hybridom BLV-01
CS255642B1 (cs) Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B
CS252792B1 (cs) Myší lymfocytární hybridom HBs 720^A?