CS267391B1 - Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn g8 - Google Patents
Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn g8 Download PDFInfo
- Publication number
- CS267391B1 CS267391B1 CS885265A CS526588A CS267391B1 CS 267391 B1 CS267391 B1 CS 267391B1 CS 885265 A CS885265 A CS 885265A CS 526588 A CS526588 A CS 526588A CS 267391 B1 CS267391 B1 CS 267391B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridoma
- mouse
- interferon gamma
- ifn
- antibody
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Riešenie sa týká myšieho lymfocytárneho hybridómu produkujúceho protilátku voči l’udskému leukocytárnemu interferónu gama, uloženého v zbierke hybridómov Virologického ústavu SAV v Bratislavě pod označením VÚ IFN G8. Monoklonálna protilátka hybridó mu VÚ IFN G8 je vhodná na stanovenie pří tomnosti interferónu gama na základe inhibície jeho biologíckej aktivity v interferón-neutralizačných testoch. Monoklonálna protilátka je vhodná aj na přípravu sér Specifických k myšiemu imonoglobulínu podtriedy IgGl.The solution relates to murine lymphocyte antibody-producing hybridoma to human leukocyte interferon gamma deposited in the Virological Hybridoma Collection Institute of SAS in Bratislava under the designation of IFI G8. Hybrido monoclonal antibody IFI G8 is suitable for the determination of incidence of interferon gamma by inhibition its biological activity in interferon-neutralizing tests. The monoclonal antibody is also suitable for the preparation of mouse-specific sera immunoglobulin IgG1 subclass.
Description
(57) Riešenie sa týká myšieho lymfocytárneho hybridómu produkujúceho protilátku voči l’udskému leukocytárnemu interferónu gama, uloženého v zbierke hybridómov Virologického ústavu SAV v Bratislavě pod označením VÚ IFN G8. Monoklonálna protilátka hybridómu VÚ IFN G8 je vhodná na stanovenie přítomnosti interferónu gama na základe inhibície jeho biologíckej aktivity v interferón-neutralizačných testoch. Monoklonálna protilátka je vhodná aj na přípravu sér Specifických k myšiemu imonoglobulínu podtriedy IgGl. CS 267391 B1 CS 267 391 Bl 1(57) The present invention relates to a murine lymphocyte hybridoma producing an antibody to human leukocyte interferon gamma deposited in the hybridoma collection of the Institute of Virology of SAS in Bratislava under the designation of IFI G8. The monoclonal antibody hybridoma VU IFN G8 is useful for determining the presence of interferon gamma by inhibiting its biological activity in interferon-neutralization assays. The monoclonal antibody is also suitable for the preparation of sera specific for mouse immunoglobulin IgG1 subclass. EN 267391 B1 EN 267 391 B1 1
Vynález sa týká nového hybridómu, t. j. hybridného jednobunkového organizmu, zostrojeného buňkovou fúziou myšej myelómovej linie NSO a myšej slezinovej lymfoidncj buňky, produkujůcej protilátku proti Fudskému interíerónti gama.The present invention relates to a novel hybridoma, i.e. a hybrid unicellular organism, constructed by cellular fusion of a mouse myeloma lineage NS0 and a mouse spleen lymphoid cell producing an antibody against the human gamma interferon.
Doposial’ sa protilátky voči interferónu gama vyrábajú tak, že je interferón opakované indikovaný ako antigén pokusným zvieratám, najčastejšie králikom alebo ovcíam. Sérum takto imunizovaných zvierat, odobrané po určitej době pósobenia antigénu, slúži ako zdroj protilátok, používaných predovšetkým pre kvantitatívnu alebo kvalitatívnu analýzu antigénu — interferónu gama — vo výskume a v imunodiagnostickej praxi. Tento postup, nazývaný konvenčnou imunizáciou, má niekoíko nevýhod. V sére imunizovaných zvierat sa nachádza heterogénna zmes protilátok, ktorých spektrum je v každom jednotlivom organizme rózne a neopakovatelné. Organizmus spravidla vytvoří okrem protilátok voči žiadanému antigénu i protilátky voči nečistotám antigénového preparátu, ktoré je potřebné zo sér odstraňovať vysycovaním. Výrobně šarže konvenčných sér sa preto dajú ťažko štandardizovať a bývajú v širokom rozmedzí kvality. Pre výrobu každej šarže třeba pripraviť čistý imunizačný antigén a ďalšie antigény na vysýtenie balastných protilátok proti nečistotám.To date, interferon gamma antibodies have been produced such that the interferon is repeated as an antigen to experimental animals, most often to rabbits or sheep. The serum of the animals so immunized, taken after a certain period of antigen uptake, serves as a source of antibodies used primarily for quantitative or qualitative analysis of the interferon gamma antigen in research and immunodiagnostic practice. This process, called conventional immunization, has several drawbacks. There is a heterogeneous mixture of antibodies in the serum of immunized animals, the spectrum of which is unique and unrepeatable in each individual organism. As a rule, in addition to antibodies to the desired antigen, the organism will produce antibodies to the antigen preparation impurities that need to be removed from the sera by saturation. Consequently, production batches of conventional sera are difficult to standardize and are in a wide range of quality. To produce each batch, a clean immunization antigen and other antigens need to be prepared to saturate the ballast antibodies against impurities.
Uvedené nedostatky vyššie zmieneného a doposial’ používaného postupu odpadnú, ak je k dispozícii hybridóm, produkujúci monoklonálnu protilátku voči Fudskému interferónu gama uložený v zbierke hybridómov Virologického ústavu SAV v Bratislavě, Mlýnská dolina 1, pod označením VÚ 1FN G8.The aforementioned drawbacks of the aforementioned and hitherto used process are omitted when a hybridoma producing a monoclonal antibody to human interferon gamma deposited in the hybridology collection of the Institute of Virology of SAS in Bratislava, Mlýnská dolina 1, under the designation VÚ 1FN G8, is available.
Uvedený hybridóm bol získaný spósobom známým z odbornej literatúry (Kóhler, G., Milstein, C.: Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity. Nátuře, 256, /1975/, 495; Gerhard, W.: Fusion of cells in suspension and outgrowth of hybrids in conditioned medium. In: Monoclonal antibodies. Hybrids: A New Dimension in Biological Analyses. R. H. Kennet, T. J., McKearn, Κ. B. Bechtol, eds., New York, Plenům Press, /1980/, 370) klonováním súboru hybridných buniek po fúzii myšej myelómovej linie NSO a buniek, získaných zo sleziny myší kmeňa BALB/c, imunizovaných preparátom íudského leukocytárneho interferónu gama. Výhodou hybridómu je, že produkuje homogénnu protilátku, tzv. monoklonálnu protilátku, ktorá je schopná špecificky reagovať s interferónom gama. Hybridóm VÚ IFN G8 možno kultivovať in vitro v médiách vhodných pre živočišné buňky, alebo in vivo v peritoneálnej dutině myší kmeňa BALB/c. Z konzerv, uchovaných v kvapalnom dusíku, možno zahájiť produkciu protilátky bez ďalšej imunizácie antigénom. 2 neálnej dutiny myší. Pre lepšie uchytenie aplikovaných buniek bola myš 15 dní před prenosom buniek hybridómu premedikovaná parafínovým olejom ÍO,5 ml intraperitoneálne). Po 20 dňoch rastu hybridómu v peritoneálnej dutině bola myš zabitá a vyprodukovaná ascitická tekutina odobratá. Celkom sa získalo 7 ml ascitickej tekutiny, ktorá obsahovala 8 mg/ml itnunoglobulínu. Ascitická tekutina, obsahujúca produkt hybridómu VÚ IFN G8 špecificky inhibovala antivírusovú a antiproliferatívnu aktivitu íudského interferónu gama.Said hybridoma was obtained by a method known from the literature (Kóhler, G., Milstein, C .: Continuous cultures of fused cells secreting antibody predefined specificity. Nature, 256, / 1975 /, 495; Gerhard, W .: Fusion of cells in suspension and outgrowth of hybrids in conditioned medium Hybrids: A New Dimension in Biological Analysis RH Kennet, TJ, McKearn, B. B. Bechtol, eds., New York, Plenum Press, / 1980/370 ) by cloning a set of hybrid cells after fusion of mouse myeloma line NSO and spleen cells of BALB / c mice immunized with human leukocyte interferon gamma preparation. The advantage of a hybridoma is that it produces a homogeneous antibody, the so-called monoclonal antibody, which is capable of specifically reacting with interferon gamma. The V1 IFN G8 hybridoma can be cultured in vitro in media suitable for animal cells, or in vivo in the peritoneal cavity of BALB / c mice. From the cans stored in liquid nitrogen, antibody production can be initiated without further antigen immunization. 2 neural cavities of mice. For better attachment of the applied cells, the mice were pre-treated with paraffin oil 10.5 ml intraperitoneally 15 days prior to hybridoma cell transfer. After 20 days of hybridoma growth in the peritoneal cavity, the mouse was killed and the produced ascites fluid collected. A total of 7 ml of ascitic fluid was obtained which contained 8 mg / ml of immunoglobulin. The ascitic fluid containing the hybridoma product of the IFN G8 hybridoma specifically inhibited the antiviral and antiproliferative activity of human interferon gamma.
In vitro rastů hybridómy ako polosuspenzná kultúra. Majú tvar (guíatý) a veíkosť charakteristické pre myelómové buňky, obsahujú fúzované buňkové jadrá, sú aneuploidné. Buňky hybridómu VÚ IFN G8 majú ultraštruktúrny obraz typických myelómových buniek, kde prevažujúcou organelou sú volné a na membrány viazané polyribozómy. Základným kultivačným médiom je Dulbeccova modifikácia Eaglovho minimálneho esenciálneho média (Dulbecco, R. a Freeeman, G., Virology 8 /1959/, 396). Toto médium, označované ako DMEM, je pre kultiváciu hybridómu doplněné gentamycínom a inaktivovaným koňským sérom (10%, Elán cloně, Bratislava). Hybridóm je kultivovaný pri 37 °C — jeho středná generačná doba je přibližné 24 hod. Produkovaná protilátka je monoklonálny imunoglobulín podtriedy IgGl.In vitro growths of hybridomas as a semi-suspension culture. They are shaped (round) and the size characteristic of myeloma cells, containing fused cell nuclei, is aneuploid. IFN G8 hybridoma cells have an ultrastructural image of typical myeloma cells, where free and membrane-bound polyribosomes are the predominant organelle. The basic culture medium is Dulbecco's modification of Eagle's minimal essential medium (Dulbecco, R. and Freeeman, G., Virology 8/1959 /, 396). This medium, referred to as DMEM, is supplemented with gentamycin and inactivated horse serum (10%, Elan clone, Bratislava) to cultivate the hybridoma. The hybridoma is cultured at 37 ° C - its mean generation time is about 24 hours. The antibody produced is a monoclonal immunoglobulin of the IgG1 subclass.
Hybridóm VÚ IFN G8 móže byť priemyslovo využívaný ako zdroj protilátky proti fudskému leukocytárnemu interferónu gama pri kvantitatívnom alebo kvalitatívnom vyhodnocovaní přítomnosti interferónu gama vo vyšetrovanom materiáli, alebo ako zdroj protilátky jedinej podtriedy (IgGl) pre přípravu sér specifických pre uvedenú podtriedu.The VU IFN G8 hybrid may be industrially used as a source of anti-human leukocyte interferon gamma antibody in quantitative or qualitative evaluation of the presence of interferon gamma in the investigated material, or as a single subclass (IgG1) antibody source for the production of said subclass specific sera.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS885265A CS267391B1 (en) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn g8 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS885265A CS267391B1 (en) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn g8 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS526588A1 CS526588A1 (en) | 1989-06-13 |
CS267391B1 true CS267391B1 (en) | 1990-02-12 |
Family
ID=5397219
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS885265A CS267391B1 (en) | 1988-07-22 | 1988-07-22 | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn g8 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CS (1) | CS267391B1 (en) |
-
1988
- 1988-07-22 CS CS885265A patent/CS267391B1/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CS526588A1 (en) | 1989-06-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Marshak-Rothstein et al. | Properties and applications of monoclonal antibodies directed against determinants of the Thy-1 locus | |
US4594325A (en) | High fusion frequency fusible lymphoblastoid cell line | |
JPH03236794A (en) | Preparation of human monoclonal antibody | |
EP0014519A2 (en) | Cell lines, process for preparing them and process for producing antibodies | |
Groves et al. | Veterinary sources of nonrodent monoclonal antibodies: interspecific and intraspecific hybridomas | |
CS267391B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn g8 | |
CS267393B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn b13 | |
CS267392B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridom vu ifn al 6 | |
ES2005194A6 (en) | Human anti-Rhesus D producing heterohybridomas. | |
CS267394B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridoma vu ifn bba6 | |
Ainai et al. | Renewal of EBV-hybridoma method: efficient generation of recombinant fully human neutralizing IgG antibodies specific for tetanus toxin by use of tetroma cells | |
CS270543B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu 2-l/5 | |
CS270544B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu iih3 | |
CS270542B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu cf2 | |
EP0259585A1 (en) | Monoclonal antibodies specific to surface receptor for IgE and hybrid cell lines producing these antibodies and use thereof | |
CS269050B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridome vu vih7 | |
CS269049B1 (en) | Mouse lymphocytar hybridome vu 315/4 | |
CS277142B6 (en) | Murine hybridoma ifna1-48 producing a monoclonal antibody | |
CS276567B6 (en) | Murine hybridoma ifna2-n7 producing a monoclonal antibody | |
SU1685997A1 (en) | Strain of hybridous cultured mammalian cells mus musculus l - a producer of monoclonal antibodies to human thyrotropin | |
CS276204B6 (en) | Mouse hybridoma ifna1-118 producing monoclonal antibody binding the human interferon alpha 1 | |
CS276203B6 (en) | Mouse hybridoma ifna2-n10 producing monoclonal antibody binding the human interferon alpha 2 | |
Buser | Molecular dynamics of monoclonal antibody production in high density perfused bioreactors | |
CS223535B1 (en) | Mice lymfocytarous hybridon | |
YOSHINARI et al. | Long-term Production of Human Monoclonal Antibodies by Five Human—Mouse Heterohybridomas in a Serum-Free Medium |