CS226036B2 - Method of preparing b mg 162-af2 antibiotic - Google Patents
Method of preparing b mg 162-af2 antibiotic Download PDFInfo
- Publication number
- CS226036B2 CS226036B2 CS816592A CS659281A CS226036B2 CS 226036 B2 CS226036 B2 CS 226036B2 CS 816592 A CS816592 A CS 816592A CS 659281 A CS659281 A CS 659281A CS 226036 B2 CS226036 B2 CS 226036B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- bmg
- antibiotic
- agar
- culture medium
- strain
- Prior art date
Links
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title claims description 37
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 17
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 27
- GDVNLLJNADMLLR-BBRMVZONSA-N Spergualin Chemical compound NCCCNCCCCNC(=O)[C@H](O)NC(=O)C[C@@H](O)CCCCN=C(N)N GDVNLLJNADMLLR-BBRMVZONSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 11
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 5
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims description 4
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 claims description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 3
- 239000012608 weak cation exchange resin Substances 0.000 claims description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 18
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 8
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 abstract description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 49
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 32
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 32
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 32
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 26
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 25
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 24
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 22
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 20
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 17
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 16
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 13
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 13
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 13
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 12
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 10
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 9
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 9
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 9
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 9
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 9
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 9
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 8
- 241000894007 species Species 0.000 description 7
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- QIAFMBKCNZACKA-UHFFFAOYSA-N N-benzoylglycine Chemical compound OC(=O)CNC(=O)C1=CC=CC=C1 QIAFMBKCNZACKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 6
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 6
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 5
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hcl hcl Chemical compound Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- -1 rhaooose Chemical compound 0.000 description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 4
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 4
- 208000006268 Sarcoma 180 Diseases 0.000 description 4
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 4
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 4
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical compound CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- BTNMPGBKDVTSJY-UHFFFAOYSA-N keto-phenylpyruvic acid Chemical compound OC(=O)C(=O)CC1=CC=CC=C1 BTNMPGBKDVTSJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 4
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N Gluconic acid Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 3
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001903 2-oxo-3-phenylpropanoic acid Substances 0.000 description 2
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 2
- 241000193764 Brevibacillus brevis Species 0.000 description 2
- 241000193417 Brevibacillus laterosporus Species 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 208000007093 Leukemia L1210 Diseases 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 2
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 2
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- DEDGUGJNLNLJSR-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C(O)=CC1=CC=CC=C1 DEDGUGJNLNLJSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 229940034982 antineoplastic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 2
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 2
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- RXKJFZQQPQGTFL-UHFFFAOYSA-N dihydroxyacetone Chemical compound OCC(=O)CO RXKJFZQQPQGTFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000003517 fume Substances 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 2
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 2
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 description 2
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- MKNQNPYGAQGARI-UHFFFAOYSA-N 4-(bromomethyl)phenol Chemical compound OC1=CC=C(CBr)C=C1 MKNQNPYGAQGARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NGZUCVGMNQGGNA-UHFFFAOYSA-N 7-[5-(2-acetamidoethyl)-2-hydroxyphenyl]-3,5,6,8-tetrahydroxy-9,10-dioxoanthracene-1,2-dicarboxylic acid 7-[5-(2-amino-2-carboxyethyl)-2-hydroxyphenyl]-3,5,6,8-tetrahydroxy-9,10-dioxoanthracene-1,2-dicarboxylic acid 3,5,6,8-tetrahydroxy-7-[2-hydroxy-5-(2-hydroxyethyl)phenyl]-9,10-dioxoanthracene-1,2-dicarboxylic acid 3,6,8-trihydroxy-1-methyl-9,10-dioxoanthracene-2-carboxylic acid Chemical compound Cc1c(C(O)=O)c(O)cc2C(=O)c3cc(O)cc(O)c3C(=O)c12.OCCc1ccc(O)c(c1)-c1c(O)c(O)c2C(=O)c3cc(O)c(C(O)=O)c(C(O)=O)c3C(=O)c2c1O.CC(=O)NCCc1ccc(O)c(c1)-c1c(O)c(O)c2C(=O)c3cc(O)c(C(O)=O)c(C(O)=O)c3C(=O)c2c1O.NC(Cc1ccc(O)c(c1)-c1c(O)c(O)c2C(=O)c3cc(O)c(C(O)=O)c(C(O)=O)c3C(=O)c2c1O)C(O)=O NGZUCVGMNQGGNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000607534 Aeromonas Species 0.000 description 1
- 241000607519 Aeromonas sp. Species 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000056139 Brassica cretica Species 0.000 description 1
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 1
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 1
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 1
- 241001660259 Cereus <cactus> Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241001337994 Cryptococcus <scale insect> Species 0.000 description 1
- 102000000634 Cytochrome c oxidase subunit IV Human genes 0.000 description 1
- 108050008072 Cytochrome c oxidase subunit IV Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241001646716 Escherichia coli K-12 Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 101001018097 Homo sapiens L-selectin Proteins 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 1
- 102100033467 L-selectin Human genes 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(CCNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 241000231139 Pyricularia Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 241000831652 Salinivibrio sharmensis Species 0.000 description 1
- 241000192023 Sarcina Species 0.000 description 1
- 101000912874 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) Iron-sensing transcriptional repressor Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004133 Sodium thiosulphate Substances 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 241001467018 Typhis Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- VLSOAXRVHARBEQ-UHFFFAOYSA-N [4-fluoro-2-(hydroxymethyl)phenyl]methanol Chemical compound OCC1=CC=C(F)C=C1CO VLSOAXRVHARBEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000002814 agar dilution Methods 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- TWFZGCMQGLPBSX-UHFFFAOYSA-N carbendazim Chemical compound C1=CC=C2NC(NC(=O)OC)=NC2=C1 TWFZGCMQGLPBSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035425 carbon utilization Effects 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical group 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229940023913 cation exchange resins Drugs 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 230000000994 depressogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940120503 dihydroxyacetone Drugs 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000007922 dissolution test Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 239000003546 flue gas Substances 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 150000002314 glycerols Chemical class 0.000 description 1
- JEGUKCSWCFPDGT-UHFFFAOYSA-N h2o hydrate Chemical compound O.O JEGUKCSWCFPDGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004926 indolenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- FBAFATDZDUQKNH-UHFFFAOYSA-M iron chloride Chemical compound [Cl-].[Fe] FBAFATDZDUQKNH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 1
- SVIFGEVWHFNGCZ-UHFFFAOYSA-N n-[2-[di(propan-2-yl)amino]ethyl]-2-(2-oxopyrrolidin-1-yl)acetamide;hydron;chloride Chemical compound Cl.CC(C)N(C(C)C)CCNC(=O)CN1CCCC1=O SVIFGEVWHFNGCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000006395 oxidase reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229940075930 picrate Drugs 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-M picrate anion Chemical compound [O-]C1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 1
- GNBVPFITFYNRCN-UHFFFAOYSA-M sodium thioglycolate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)CS GNBVPFITFYNRCN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940046307 sodium thioglycolate Drugs 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- ZBCAZEFVTIBZJS-UHFFFAOYSA-M sodium;2-benzamidoacetate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)CNC(=O)C1=CC=CC=C1 ZBCAZEFVTIBZJS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 108010050327 trypticase-soy broth Proteins 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001173 tumoral effect Effects 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
- C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
- C07C279/14—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/832—Bacillus
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
(54) Způsob výroby antibiotika BMG 162-aF2
Vrnález se týká způsobu výroby nového antibiotika BMG-116-aF2 vzorce
X c-NH-(ck2)4-ch-ch2-co
| NH | .OH NH 1 CH-OH CO-№H-(CH2)4-NH-(CH2)3-NH2 |
a jeho farmaceuticky vhodných solí. ·
Podstata vynálezu je v tom, že se kmen mikroorganismů druhu Badlus leterosporus kultivuje aerobně v kapalné živné půdě ' obsahhjící zdroje dusíku a uhlíku a anorganické soli, při teplotě 15 až 40 °C a při pH 5,0 ež 8,2, po dobu potřebnou k nahromadění dostatečného množžtví antibiotika BMG 162-eF2, načež se entibiotilmn BMG 162-aF2 z kultivačního prostředí izoluje a popřípadě převede v jeho farmaceuticky vhodnou sůl.
Jako kmene mikroorganismů produbijícího anti-bicikum BMG 162-eF2 se používá druhu Becillus laterosporus BMG l62-eF2, FERM-P 5230, ATCC 31932 nebo BeaiUus leterosporus OUT 8139 nebo jeho varianty.
Izolace antibiotika BMG 162-aF2 z kultivačního prostředí se provádí pomocí sloupcové clnromaaoogrfie za pouužtí slabých katexových pryskyřic, maaících kerboxylovou skupinu jako aktivní skupinu. Antibiotkkm BMG 162-aF2 adsorbované, ne ketexové pryskyřici se eluuje vodným roztokem kyseliny nebo soli. '
Jako příklad kmene mikroorganismů produlnxjícího entibiotikm BM(GaF2 a patřícího k rodu ' BcCllus lze uvést ' kmen BcCIlue BMG 162-aF2, který byl izolován ze vzorků půdy shromážděných autory tohoto vynálezu v prostoru hory Mt. Teihei v prefektuře Tochigi v Japonsku v srpnu roku 197β.
Kultivační a texonomické chíαrekieгistiib zmíněného kmene BMG l62-eF2 jsou popsány níže.
1. . Mikroskopická. morfologie
Kmen BMG 162-eF2 je becd vytanuje! nekonstantní Gramovu barevnou reakci a vytvářející spory a tyčinky o velikosti obvykle 0,6 až 0,8 дт krát 2 až 3,5 дт. Uvedený bacil má rovněž postranní bičíky a vykazuje aktivní pothbbivost. Spory jsou eliptické, jejich převládající poloha je centrální, jejich rozměry 0,5 až 0,7 )um krát 1,0 až 1,5 дт, a tyčinka je zřetelně zvětšená. Spora má na své boční straně část (parespOTální tělísko), které se dobře vybarvuje ve tvaru kanoe krystalovou violetí, a je rezistentní vůči teplu. Spora se nevybervuje barvivý stáými vůči kyselinám.
2. růstu na různých živných půdách
Všechny ·inkubace při těchto testech byly prováděny piři 37 °C^ s výjimkou inkubace ne živné želetinové půdě.
a) Rst na živné agarové desce
Kolonie jsou matné, neprůhledné, kuletého tvaru, jejich okraj je neprairiLdelný a je hnědavě bílý.
b) · Rist ne Šikmém živrném agaru
Růst je rozptýlený a rozmnožený po povrchu šikmé plochy agaru, povrch kolonií se zdá neprůhledný a suchý. Barva kultury je hnědavě bílá.
o) Rist ne tekuté živné půdě
Kultivační prostředí se v prvém' dnu po inkubaci v celém objemu zakalí a ve druhém dnu začne na povrchu narůstat blána. Ve třetím dnu potáhne blána celý povrch, prostředí se vyčeří, a mmceliím se vysráží u dna testovací zkumavky.
d) Růst na živné želatině
PH · inkubování při 20 °C se v prvém dnu objevuje kolem vpichu rozmnožování mikroorganismů. Ve druhém dnu dojde k depresi uvedeného rozmnožování. Asi od šestého dne začíná želatina v prostředí ztekucorat. Alternativně, při ^kubování při 30 °C, · začne ve druhém dnu narůstat blána a ve čtvrtém dnu začne prostředí ztekucovet. Ztekucení želatiny v prostředí je skončeno v sedmém dnu.
e) Růst na BCP mléku
Asi od pátého dne po inkubaci v přítomnosti brrmk'esrlrvé červeně (BCP) se červené barva mění ne modrou, a asi od dvanáctého dne začíná peptrnizere.
f) Růst na Sabouraudově glukosovér.i agaru a v Seboureldoáě glukosové živné půdě
Na šikmém Saboureu^dově glukosovém agaru (obsahujícím 10 g peptonu, 40 g glukosy, 15 g agaru a 1 000 ml deiriisc>vcné vody, pH neupravováno) a v tekuté Sebrшraldráě glukosové živné půdě (rbsohilící stejné složky jako výše s výjimkou agaru), při 30 °C a p:ři 37 . °C, nebyl ▼ tekuté Živné půdě pozorován žádný růst a na ŠUmém agaru se objcěrtl slabý růst v jeho spodní šásU.
3. Fyziologické vlastnosti
Pokud není specificky uvedeno jinak, byly inkubace prováděny při teplotě 37 °C.
a) Redukce dusičnanů
V prostředí hLtrátové živná půdy (obsahujjcí 10 g masového výluhu, 10 g peptonu, 5 g chloridu sodného, 1 g dusičnanu draselného β I 000 ml deionisované vody a majcí pH 7,2) byl detegován dusitan ve vSech kultivačních půdách v prvém, třetím a pátém dnu inkubace. Specificky v pátém dnu tyla pozorována významné reakce, a když bylo reakční činidlo přidáno do kultivační půdy, vznikla červenavě hnědá sraženina.
b) Denitrifikeční reakce
Při provedení testu na derdtrifikační reakci způsobem popsaným Koinagatou a spolupracovníky (viz m^nnorsafi T. Hasegawy, Taxonomy and Iádnnificetion of Mcroorgenisma', str. 223, vydveael The Un^ve^ty of Tokyo Prese, 19*75) byl získán negativní výsledek.
e) MR -test
V kultivačním prostředí obsahujícím 5 g glukosy, 7 g peptonu, 5 g chloridu sodného a 1 -000 ml deionisované vody, naaícím pH 7,5, po inkubaci při 30 °C, byl v prvém, druhém a pátém dnu proveden test s meeylčervení (MR. Ve všech testovaných případech byl test - pozitivní.
d) VB test
V kultivačním prostředí obsahujícím 5 g glukosy, 7 g peptonu, 5 g chloridu sodného a 1 000 ml deionisované vody, maaícím pH 7,5, po inkubaci při 30 °C, byl v prvém, druhém a pátém dnu proveden Voge8Ův-Pro8kaunrův (VP) test; ve všech testovaných případech byl test negativní.
e) Tvorba indolu
V kultivačním prostředí obsahujícím 20 g polypeptonu, 5 g chloridu sodného a 1 000 ml deionisované vody a maaícím pH 7,,4 nebyla v prvním a druhém dnu kultivace pozorována tvorba indolu, ale v pátém dnu byla pozorována.
f) Tvorba sirovodíku
Ne TSI agaru (agar s trojím druhem cukru a se železem: 3 g extraktu z hovězího mase, 3g kvasnlčného výluhu, 15 g peptonu, 5 g protedzového peptonu, 10 g laktosy, 10 g sacharosy, 1 g - glukosy, 0,2 g síranu železnatého, 5 g chloridu sodného, 0,3 g sirnatanu sodného, 12 g agaru, 0,024 g fenolové červeně a 1 000 ml destilované vody; pH 7,2) - po dobu - 7 dnů inkubace nebyla pozorována tvorba sirovodíku.
g) tyddolýza škrobu
Mikroorganismus byl kultivován na živné agarové desce nbsahujjcí 0,2 % rozpustného škrobu, a v 1., 2., 3., 5·, 6., 13. a 15· dnu bylo provedeno na proužcích agaru testování rozto/ kem jodu v jodidu draselném; v žádném případě nebyl pozorován rozklad škrobu.
h) Využívání kyseliny citrónové
Ha Kosařově citrátové živné půdě a ne Christensenově agaru nebyl během pěti dnů pozorován žádný růst.
i) Využívéné anorganických zdrojů dusíku pro růst
Byly provedeny testy kultivace po přidání zdrojů dusíku (1 g dusičnanu sodného, 0,76 g síranu amonného nebo 1,7 g glutamátu sodného) к základnímu živnému prostředí (obsahujícímu 10 g glukosy, 1 g dihydrogenfosforečnenu sodného, 0,5 g heptahydrátu síranu hořečnatého 0,2 g chloridu draselného o 1 000 ml deionisovené vody, majícímu pH 7,2), a v žádném případě z testovaných zdrojů dusíku nebyl pozorován růst·
j) Tvorba barviv
Po inkubaci přes noc na Kingově agaru A (obsahujícím 20 g peptonu, 1,4 g chloridu hořečnatého, 10 g síranu amonného, 15 g agaru a 1 000 ml destilované vody; pH 7,2) byla kulture ponechána stát při teplotě místnosti po dobu 6 dnů, popřípadě na Kingově agaru В (20 g peíptonu, 1,5 g hydrogenfosforečnenu draselného, 1,5 g síranu hořečnatého, 15 g agaru, 1 000 ml destilované vody; pH 7,2) po dobu 6 dnů; v žádném z obou případů nebyle pozorována tvprbe rozpustného barviva.
i-'.'· ·.;
k^Ureáza
Při kultivaci kmene na ureázové živné půdě (2 g peptonu, 30 g močoviny, 5 g chloridu sodného, 9 g dihydrogenfosforečnenu draselného, 3 g hydrogenfosforečnenu sodného, 0,01 g fenolové Červeně a 1 000 ml destilované vody; pH 6,2) po dobu 24 hodin byl výsledek testu ne ureázu negativní.
l) 0xidáza čerstvá kultura na Šikmém živném agaru (kultivovaná přes noc) vykazuje pozitivní oxidázovou reakci při zkouěce cytochromovým oxidézovým papírkem (vyráběný firmou Nissui Co.).
m) Kataláza čerstvá kultura na Šikmém agaru (kultivovaná přes noc) způsobuje pěnění a vykazuje pozitivní reakci při katelázovém testu za použití 3½ vodného peroxidu vodíku.
n) Podmínky růstu
Po dobu 24 hodin byla testována schopnost růstu mikroorganismu ne tekuté živné půdě při pH 3,0, 4,0, 5,0, 6,0, 6,8, 7,8, 8,2 a 8,8 po předchozí sterilizaci; růst byl pozorován při pH 5,0 až 8,2. Optimální pH pro růst je v rozmezích pH 6,0 až 7,8. Podobně byl během 24hodinové inkubace testován růst při teplotě 9 °C, 15 °C, 20 °C, 24 °C, 27 °C, 30 °C, 37 °C, 40 °C, 45 °C a 50 °C; růst byl pozorován při teplotě v rozmezí od 15 do 40 °C. Optimální teplota pro růst leží v okolí 37 °C.
o) Vliv kyslíku
Po suspendování kultury do živného agaru obsahujícího 1 % glukosy, a po ztuhnutí směsi ve formě hluboké vrstvy agaru, byl pozorován dobrý růst kultury kolem povrchu uvedeného prostředí. Na TEP agaru (7 g rostlinného výluhu, 5 g kvasničného extraktu, 3 g masového výluhu, 10 g peptonu, 10 g triptonu, 3 g sojového peptonu, 3 g glukosy, 2,5 g díhydrogenfosforečnanu draselného, 2 g chloridu sodného, 0,3 g hydrochloridu L-cysteinu, 0,3 g thioglykolátu sodného, 14 g agaru a 1 000 ml destilované vody; pH 7,2) za anaerobních podmínek byl pozorován růst.
p) O-F test (Hu^t^ův-lLiJfsonův test)
V obou případech, jak aerobních, tak;anaerobních podmínek, byla glukosa rozkládána a tvořila se kyselina.
q) Vyžívání zdrojů uhlíku
Při test ování schopno o ti kmene vyžívat Uhlíkatých sloučenin, za použíií metody popsané Iizukou a Kommgatou (viz mo^ografi T. Hasegamy, Toxonooy and IdenOificetioo of McroorgarOstn, str. 230, vyda^iel The Unveessty of Tokyo Press, 1975)» byly pro růst využívány glukosa, glycerin a janteran sodný, zatímco- octan sodný, -citřeo sodný- a perahydroxybenzoát sodný nebyly využívány.
r) Tvorba kyselin a plynných zplodin z cukrů
Kmen BMG 162-eF2 byl nanesen v pruzích na Šikoé agary, které byly připraveny sterinním přidáním různých roztoků cukrů, separátně vysteriliaoraných, k základnímu kultivačnímu prostředí (skládajícímu se z 1 g hydrogertfosforečnanu amonného, 0γ2 g chloridu sodného, 0,2 g heptahydrátu síranu horečnatého, 0,2 g kvasničného extraktu, 15 g agaru, 4 ml 0,% vodného roztoku bromkkeeolové červeně a 1 000 ni deiooisovaoé vody; pH 7,2), tak, aby konečná koncentrace příslušného cukru byle 1%.,- a poté ztuhnutím směsi. Tvorba kyselin byla sladována po dobu ' - 40 dnů. Kyselina se tvořila z D-glukosy, D-monosy, D-fruktosy, D-morntu, maatosy, trehalosy a glycerinu, ale ne z D-xlosy, L-arabinosy, D-galaktosy, rhaooosy, D-sorbitu, . ioositu, l^aktosy, - secharosy, rafinosy a ze šllarobu.
Ne druhé straně, ze pouuití Duehgm^чvy trubice, byla teatorána tvorba plynných zplodin po přidání různých cukrů, stejných, jek bylo uvedeno výše, k základní živné půdě, skládající se z 10 g peptonu, 5 g chloridu sodného, 0,008 g broothymolové modře a 1 000 ml deiori.zované - vody (mající pH 7,2); každý test byl sledován po dobu dvou týdnů. Z žádného z testovaných cukrů se netvořily plynné zplodiny·
s) Oddační test s kyselinou glukonovou
Za pocítí glukonátové živné půdy (2 g dihydrogeunfosf oredianu draselného, 0,5 g síranu hořečoatého, 5 g chloridu sodného, 0,5 g síranu ao torného, 10 g glukooátu draselného a 1 000 ml destilované vody; pH 6,3) byl test оедоtivní.
t) Tvorba dihydroxyacetoou
Po inkubaci na živné půdě obsahhjjcí 10 g kvasničného extraktu, 20 g glycerinu, 15 g agaru a 1 000 ml delo^-sované vody, majcí pH 7,0, po dobu 3, 5, 10 a 24 dnů, nebyla - při zkoušce Fehliigoovýo činidlem v žádném z testovaných vzorků pozorována tvorba dihydroxyacetonu.
u) Reezsteoce vůči chloridu sodnému
Po - .οθ^Ι^! kmene do^-živné půdy připravené přidáním chloridu sodného k základnímu živnému roztoku obsahujícímu 10 g tryptikasy (Typticase^ BBL) a 1 000 ol deionisované vody, ' o pH 7,0, tak, aby koncentrace chloridu sodného v jednotlivých kultivačních prostředích byla 2, 5 a 7%, bylo sledováno rozmnožování kmene na povrchu kultury po dobu 4 dnů. V základním - živném prostředí se 2 S chloridu sodného bylo pozorováno rozmnožování koteoe, ale v prostředích s více oež 2 * chloridu sodného oebyl růst pozorován.
v) Test na rozklad kyseliny hipurové
Po inkubaci kmene po dobu 4 dnů v živné půdě (pH 7,4) připravené přidáním 10 g hipurátu sodného do 1 000 ol srdečního iofusního živného roztoku (zo. Difco) tyl při testování roztokem chloridu železného pozorován rozklad kyseliny hipurové.
226036 б
w) Test na fenylpyrohroznovou kyselinu (ΡΡΛ test)
Po silné inokulaci na šikaý agar obsahující 3 g kvesničného extraktu, 2 g DL-fenylelaninu, 1 g hydrogenfosfořečněnu sodného, 5 в chloridu sodného, 12 g agaru a 1 000 nl deioni8ováné vody a mající pH 7,3, e poté po inkubaci po dobu 24 hodin, byl test na kyselinu fenylpyrohroznovou ze použití 10% roztoku chloridu želez!tého negativní.
z) Test na rozpouštění tyrosinu
Při inkubaci kmene na tyrosinovém agaru (obsahujícím 1 000 ml živného agaru a 5 g tyrosinu; pH 7,2) při 30 °C a 37 °C po dobu 2 ež 4 dnů bylo pozorováno rozpouštění tyrosinu.
Shora uvedené vlastnosti lze shrnout následujícím způsobem. Kmen BMG l62-eF2 je bacil fakultativně anaerobní, vykazující nekonstantní Gremovu barevnou reakci, vytvářející spory, mající postranní bičíky a projevující pohyblivost. Spora je eliptické s centrální polohou, má na své boční straně část (parasporální tělísko), která se dobře vybarvuje ve tvaru kanoe krystalovou violetí, a má rezistentní vlastnosti vůči teplu. Tyčinky jsou zřetelně zvětšené a spora se nevybarvuje barvivý stálými v kyselém prostředí. Kmen se rozrůstá a rozmnožuje na agarové živné půdě a tvoří blánu v tekutém živném prostředí. Ztekucuje želatinu e peptonisuje BCP mléko po změně zbarvení přítomné bromkresolové červeně na modré. V tekuté Sebouraudově glukosové živné půdě nebyl pozorován růst tohoto kmene, ele byl pozorován slabý růst na Saboureudově glukosovém agaru. Kmen redukuje dusičnany, jeho denitrifikeční reakce je negativní, MR test je pozitivní, VP test negativní. Indol nyl detegován v pátém dnu kultivace, Birovódík se při pěstování nevytváří. Kmen nerozkládá škrob e nevyužívá kyseliny citrónovou. Výsledky ureázového testu jsou negativní, oxidázového testu pozitivní a katalázového testu negativní. Růst byl pozorován v rozmezí pH ód 5,0 do 8,2, optimální pH pro růst je 6,0 ež 7,8.
Růst byl dále pozorován v rozmezí teplot od 15 °C do 40 °C e optimální teplota pro růst je přibližně 37 °C. Růst byl rovněž pozorován za aerobních podmínek. Mikroorganismus rozkládá glukosu za oxidačních a fermentečních podmínek, a vytváří kyseliny. Vytváří kyseliny a netvoří plynné zplodiny z D-glukosy, D-manosy, D-fruktosy, D-menitu, maltosy, trehelosy a glycerinu. Neoxiduje ani kyselinu glukonovou, ani glycerin ze vzniku dihydroxyасеtonu. Nerozkládá kyselinu hipurovou, nepůsobí ne fenylalenin a rozpouští tyrosin. V kultivačním prostředí obsahujícím více než 5 % chloridu sodného nebyl pozorován růst kmene.
Ne základě shora uvedených charakteristik bylo zjištěno, že tento kmen petří do rodu Bacillus, speciálně к druhu Becillus firmn, B. leterosporus, B. brevis nebo B. spheericus, které tvoří skupinu druhů, které mají společné následující charakteristiky: kataléze je pozitivní, dihydroxyeceton se nevytváří, jek je popsáno v Bergeyově příručce o determineční bakteriologii (Bergey*s Manuel of Determinative Becteriology, osmé vydání, str. 542; R. E. Buchanan a N. E. Gibbons, The Willlams Wilkins Company, Baltimore, 1974). Charakter kmene BMG l62-aF2 ve srovnání se čtyřmi shora uvedenými druhy je uveden v tabulce 1.
Tabulka 1
Srotmání kmene BMG 162-aF2 s jemu podobnými druhy
Charakteristika B. firmus B. leterosporus B. brevis B. spheericus BMG 162-aF2
Spory_
Tver E £ E S eliptický.
Rozšiřuje sporengium odlišně - ♦ + ++
Převládající postaveníC
CT potoačování tabulky 1
| Chhαikkteistika 1 | 3. firmus | B. laterosporus | B | . bravis | B. sphaerieus | BMG 162-kF2 |
| Tvorba látek z glukosy | ||||||
| kyseliny * (slabě) | + | + | nebo - | - . | + | |
| plynných zplodin | - | - | -. | - | - | |
| acetoinu - | - - | - | - | - | - | |
| Tyčinky | ||||||
| šířka, a™ ( | ),6 až 0,9 | 0,5 až 0,Š | 0, | ,6 až 0,9 | 0,6 až 1 | 0,6 kž 0,8 |
| délka, '(um 1 | 1,2 až 4 | 2 až 5 | 1 | ,5 až 4 | 1,5 «5 | 2 až 3,5 |
| Gramová reakce | + | dav | dav | dav | dav | |
| Snadno vyb^rv-telné | ||||||
| tělísko, připojené | , чЪ | |||||
| na jednu stranu spory | - | + (+) | - | - | 4 | |
| Pohhbiivost | d | + | + | + | + | |
| Teplota potřebná pro | ||||||
| růst, °C | ||||||
| maadmální | 40 až 45 | 35 až 50 | 40 až 60 | 30 až 45 | 40 | |
| minimální | 5 až 20 | 15 až 20 | 10 až 35 | 5 až 15 | 15 | |
| Tvorba kyseliny 2; arabinosy k xylosy | d | . — - | ||||
| maaitolu | + | + ' | d | - | + | |
| Hcdolysk Škrobu | + | - | - | - | - | |
| Růst | ||||||
| na anaerobním agaru | - | + | - | - . | + | |
| v 7% roztoku NeCl | + | - | - | d | - | |
| v > ' tekuté Skboureu- | 4 | |||||
| dově glukosové půdě | - | -CÍ)b | d | d | + | |
| na Sabo^audově glu- | ||||||
| koso vém agaru | - | |||||
| Vytváření | ||||||
| alkalické reakce na | ||||||
| V-P živné půdě | - | - | + | + | - · | |
| Tvorba indolu | - | d | - | - | + | |
| Redukce NO^- nk NO2 | + | + | d | - | při 5denní | |
| Rozklad | 4 | |||||
| keseinu | + | + | + | d | + | |
| tyrosinu | d | + | + | - | ||
| Deeminece fesblаlenisu | d | - | + | . — |
Poznámky k tabulce 1
E - eliptický nebo cylindrický tvar; S - kulovitý nebo téměř tailovitý tvar; C - centrální; T - terminální nebo aubterminélní; CT - centrální až terminální; změny uvnitř nebo mezi kmeny: + = pozitivní pro 90 až 100 % z kmene; - = negativní pro .. 90 až 100 % z kmene; d = rozdílná reakce, pozitivní pro 11 až 89 % z kmene; v = charakktristika nekonstantní v jednom kmenu.
b) exp^l^iLme^st^l^)^Jí výs^člek
Jak je zřejmé z tabulky 1, kmen BMG 162-aF2 je velmi podobný k druhu Bcdlus latérosporus. Roozdl mezi kmenem BMG 162-aF2 a B. Laterosporus je pouze ten, že se jeden od druhého liší v popisu vzhledu růstu na Sabouraudově glukosovém agaru.
Když autoři bynálezu dootali od Dr. Ryozo Azurny z National Institute of Animel Heelth, Japonsko, kmen B. laterosporuš, vyzkrnižteli ho a porovnal s kmenem uvedeným v tomto vynálezu. Z výsledku vzájemného porovnání jasně vyplynulo, že oba kmeny mají tělísko vybarrmjící se ve tvaru kanoe (část vybaarvjící se ve tvaru kanoe; perasparální tělísko) na toční straně jejich spor, které je významnou chM^aatterstikou těchto druhů. A dále bylo zjištěno, že . růst obou kmenů ne Sabouraudově gltkosovém agaru je navzájem shodný. Vzhledtm k výše uvedenému byl kmen BMG 162-kF2 označen jako Bkdlus laterosporus BMG l62-eF2.
, Zmíněný kmen ' BMG 162-aF2 tyl dále dne 12. října 1979 uložen ▼ japonské autorizované sbírce kultur - ve Výskané· ústavu pro fermenitnC, zastupitelství pro průmyslovou vědu a technologgi, Ingg·, mfiěto Chibia, Japonsko, pod úložtym číslem FERM - P ' 52'30, a potom tyl dne
31. července 1981 rovněž uložen v Amercké sbírce typových kultur (A^eetčan Type C^tum Collection) v Perklawn D*ive, RookiVlln, Mar^nd, USA, pod úložtym číslem 31932.
Předložený vynález pokrývá pouuití věech kmenů shora uvedeného kmenu a jeho variant, a kmenů náležejících k rodu Bacilus, které produkuj gntibiotkkm BMG 162-eF2.
Účelem předloženého vynálezu je zaajstit substanci nového antibiotika BMG 162-aF2, uaoožnt její výrobu a výrobu nových antineoplaeticky působících prostředků nbsa^ULjícícU zuíněné nové aitibiotiUш jako, účinnou složku a posléze poskytnout metodu k léčení nádorových nneDOoniní u teplokrevných živočichů.
Účel a podstata tohoto vynálezu jsou déle' objasněny v následujícím popisu.
Způsob výroby antibiotika BMG 162-aF2 za pouužtí shora zmíněných ιηϋϋΜέΙϋί^ kmenů je uveden níže.
V přiloženým obrázcí^ je ne obr. 1 znázorněno 'н-NMR spektrum ty (hro chlorid antibiotika BMG 162-eF2 v (CD-JgSO, za pouužtí tntremenylsilenu jako vnitřního standardu (příJ 1 -5 stroj 100 MHz. Na obr. 2 je znázorněno ^C-IMR spektrum ty &Ό chloridu antibioUk BMG 162-aF2 v D,0 za pio^žtí tntramenyl8tl8nj jako vnějšího standardu (25 MH). Ne obr. 3 je znázorntao spektrum tyíhrochlwhdu antibioUk BMG 162-aF2 v Dg0 za ^uužtí NH^ jako vnějšího standardu (10 MH). Na obr. 4 je znázorněno infračervené absorpční spektrm hydrochlOTidu antibiotika BMG 162-aF2 v tabletě bromidu draselného.
Aliibtotkkш BMG 162-eF2 lze podle vynálezu vyrábět tím způsobem, že se spory nebo tyčinky kmene mllkrnnrrant8mu z rodu Bacilus, produkujícího toto antibiotikm, nebo jeho nutant, aerobně kutivují v kultivačním prostředí obsahujícím živné látky. Pro účely tohoto vynálezu lze obecně jako živných složek kultivačního prostředí používat těch substancí, které se - obvykle užívají při kltivaci běžných beakeerí. Tak například lze jako zdrojů dusíku používat, komerčně - dostupných dusíkatých látek, jako peptonu, medového výluhu, kukuřičného výluhu, moučky z bavlníkových semen, podzemi^-cové moučty, sojové moučky, kvesničného extraktu, N-Z aminu, tycdrolysátu keseinu, dusičnanu sodného, dusičnanu amorného, síranu amornrého aipodobných. Jako zdrojů uhlíku lze pouuívat komerčně dostupných glycerinů, sncUarnsy, Škrobu, glukosy, maltosy, Meks a dalších glycidů, a rovněž tuků a olejů. Jako doplňkových solí lze používat chloridu sndnéhonfnsf,orečnanů, uhličitanu vápenatého, síranu hořečnatého a jiných anorganických solí. Je-li třeba, lze ve stopových přidávat rovněž další soli kovů a daaší pomocné látky, pokud jsou vy užívány kmenem produkujícím aitibioiikm BMG l62-aF2 a pokud nejsou ne újmu produkci zmíněného antibiotika.
Při způsobu podle vynálezu lze používat jakýchkoiv živných látek užívaných obecně při kultivaci bakteri, pokud jsou asimilove^l^ kmenem produk^ícím gntibiotikm BMG 162-aF2 pro produkci uvedeného antibiotika.
Pro produkci antibiotika BMG 162-aF2 v širokém - - měřítku lze s výhodou pouuíret tekutých živných půd. Kuutivaci lze provádět při - jakékoliv teplotě, při které - je kmen produkuje! anti-bicikum BMG 162-aF2 schopný růst a produkovat toto gnetbiotkkш, ale s výhodou se pro inkubaci používá teploty v rozmmzí od 20 do 35 °C. Vhodné pH kultivačního prostředí je 5,0 až 8,2, s výhodou v rozmmzí 6,0 až 7,8. Kuutivace se provádí po dobu pootačuuíci k produkci a nahromadění dostatečného mmi0žtví antibiotika BMG 162-aF2 v živné - půdě nebo tekutém živném prostředí. Tak například produkce a gkumDlacn antibiotika BMG 162<-eF2 byla pozorována při jednodenní inkubaci na rotační třepačce při 27 °C za aerobních podrnmnek, za ponjití tekuté živné půdy ob8ahujjcí 2,0 % glycerinu, 2,0 % glukosy, 1,0 % peptonu, 0,3 % kvasnlčného extraktu, 0,2 % uhličitanu vápenatého (nejvýUoddiěβí pH je přibližně 7,4), která byla předem vysterilizována a pak'inokulována aporaai a tyčinkami vypěstovanými na Šikmé agarové kultuře kmene BMG 162«aF2.
MoosSví vyniklého antibiotika BMG 162-aF2 lze testovat standardní cylindříkovou metodou používanou běžně pro ho&iiocení známých antibiotik, za použití Bcillus subbilis ko testovacího mikroorganismu.
Při kiltivaci kmene mikroorganismů z rodu Bcillus, produloiuícího antibiotikum BMG 162-aF2, lze kromě shora uvedeného pastování» na rotační třepačce podívat pro výrobu v Širokém měřítku kultivace ve fermentačních nádobách nebo v kultivačním tanku. V případě kultivace v širokém měřítku se kmen s výhodou pěstuje v kapalné živné půdě popsané výše po dobu 20 až 40 ho<dLn, ze třepání, a živná půdě se s výhodou inokuluje 0,5 až 2,0 % (objemovými) očkovacího 'roztoku.
Po skončení fermentece se zre^e^ovaná živná půda zfiltruje a z filtrátu se antibiotika BMG 162-aF2 izoluje sloupcovou itaromaCigreffí, za pouužtí iontoměničové pryskyřice majcí zbytek karboxylové kyseliny jako aktivní skuptou. Jako zmíněných slabých katexových pryskyřic lze používat Amerlitu IRC-50 ™ a C(G50™ (obchodní značky katexových pryskyřic, jejichž aktivita je způsobena výhradně karboxylovou skupinou; výrobek firmy Rohm & Haas Co.), nebo towaeitu CP*® (obchodní značka pro katexovou prysk^ic^ jejíž aktivita je zpisotona skupinami karboxylové kyseliny a sulfonové kyseliny; výrobek firmy Bayer Ltd.) nebo CM-Sephe(obvodní značto pro iarboxymmeyldextreo» tetex vyré^ný firmou nharmmaie Fine Cheιη1οίΗ.β.), dostupných v H-formě, . Na-formě, P^-formě a ve smíšených formách. ArtiM-otkum BMG l62-aF2 adsorbované na některé ze zmíněných pryskyřic’se eluuje vodným roztokem kysseiny, jako kyseliny chlorovodíkové, kyseliny octové a podobnými, nebo vodnými roztoky solí, jako roztokem chloridu sodného.
K získání antibiotika BMG l62-aF2 v čisté, formě lze používat znémých extremních, sepaocčoícI a čisticích metod, jeko gelové fiir^ce., ultoacаotoifrg;aie a -shora uvedených metod použivoCíiíih iont©měničových pryskyřic, při vhodném -komminowání nebo opakování zmíněných způsobů.
Vzhledem k tomu, že со^Ь.о^Цш BMG !62-eF2 je ve formě volné báze nestálé, připravuje se ve formě svého hydrochloridu. Hydoothorid je hygroskopický, takže tvoří hydráty. - Fyzikálně chemické vlastnosti hydrátu hydrochloridu antibiotika BMG 162 eF2 jsou následnicí:
Teplotu tání hydrochloridu nelze stcoovOt vzhledem k jeho extrémní hyρroskioCčnooSi. HydOohlorid vykazuje specifickou optickou rotaci^ — - -11° (c = 1,0, voda).
Elementární anelýzy: Pro C^H--?0- . 3 HC1 .2 ^0
Vypooteno: 37,20 % C, 8,08 % H, 17,B6 % N, 19,38%Cl;
Nalezeno: 37,00 % C. 7,89 % H, 17,02 » N, 18,61%Cl.
Jeho 'н-NMR spektrum je znázorněno na obr. 1, - a '3C-NMR spektrum na obr. 2. V jeho 15N-IMR spektru, které je znázorněno na obr. 3, lze pozorovat sedm atomů dusíku (3 atomy dusíku v guarn.dylové skupině se jeví jako signál o dvou vrcholech). Ultrafialové absorpční spektrum vykazuje pouze koncovou absorpcc. Infračervené spektrum je znázorněno ne obr. 4.
Hyřdoohlorid antibiotika BMG 162-aF2 je lehce rozpustný ve vodě a v metanolu, ale těžko rozpustný nebo nerozpustný v etanolu, аtřlaiаiátu, chloroformu . a v benzenu. Dává p^2^1^<íívoí o^nhřdiigovou» eekoguchiho - a R^c^ť^o^o^vv^-^^i^^hovu reakci. Při ten^^ste^é hhroιmαtorofii ne Avvcelu® (ιmlk·o0kOřSaliciá cernose), v rozpouštědlové soustavě but8no0-př‘idio-iy8elioa , octová-voda (6:411j3) nebo iutanoO-eicool-vodc (4:1:2) dává hydrochlorid antibiotika BMG 162eaF2 jednu skvrnu o Ry = 0,14, popřípadě Rp = 0,20. Při vysokovoltové eleкioofooesа ne papíře (3 500 V, 15 - minnu), za coužití sísí rozpouštědel kyselina mrrvenčí - kyselina octo226036 vá - voda (1:3:36) vykážuje antibiotikum BMG 162-aF2 relativní potyblivoat (vzhlede· k slaninu jako 1,00) 1,70 až 1,74.
B.ologické vlastnosti antibiotika' 'BMG 162-aF2 jsou popsány níže. Jek je uvedeno v tabulkách 2-1 až 2-3, vykazuje hyfrochlorid antibiotika BMG 162-aF2 pouze slabou inhiliční účinnost vůči gre·pozitivní· a gramnagativní· bakterií·. Z tabulek 3 až 7 vyplývá, že antibiotikum BMG 162-aF2 má pozoruhodný léčebný účinek a vliv na prodloužení doby přeiž.tí u ·τίί s experimentální·1 nádory, jak s leukérní L-1210 a EIr4, tak s ' Eur lichoty· ascl^^iCký^· nádore· a se sarkome· 180, a je zřejmé, že zlíněné οι^Η^οΗ^· je vhodné jako antineoplesHeky účinná látka.
1. Altlblkitriέlní účinnost antibiotika BMG 162-aF2
Altiliztitam BMG 162-aF2 rná slabou antibakkeriální účinnost a rni^irnái^íí inhUiční koncentrace vůči různý· bakterií· na živné· agaru jsou uvedeny v tabulkách 2-1 až 2-3. Testování bylo prováděno agarovou zřeSovací rnetodou za pouMtí tydrochloridu antibiotika BMG ' 162-eF2. Jek je zřejmé z ' tabulky 2-1, uvedené a]ntibioiikm inhlbuje slabě gra·pooitivní a gra·negetivní bakterie.
Tabulka 2-1
A ИЬнО kterém aktivita antibiotika BMG i62-aF2
| Testovaný ·itarzzrgani8·us | M^rniní inhibiční koncentrace (mg/ml . 102) |
| 1. Staph^lococcus aureus FDA209P | 100 |
| 2. Staph;^lococcus eureus Smith | 12,5 |
| 3. Шcroczccks flavus FDA16 | 25 |
| 4. Mcrococcus lysodelkticus IFO3333 | 100 |
| 5. Sarcina IuIsi PCI1001 | 100 |
| 6. Bacilus anthrecis | 25 |
| 7. Bacilus subUlis NRRL B-558 | 100 |
| 8. BafUus subbHis PCI219 | 6,25 |
| 9. Bacilus cereus AAGC10702 | >100 |
| 10. Corynebacteriírn bovis 1810 | 50 |
| 11. EBCherichia coli NIHJ | >100 |
| 12. Escherichia coli K-12 | 100 |
| 13· Escherichia coli ML629 | >100 |
| 14. Shigella dysenteriee JS11910 | 100 |
| 15. Stih-gella flexneri 4bJS11811 | >100 |
| 16. Shigella soniei JS11746 | >100 |
| 17. Salrnonelle typhi T-63 | >100 |
| 18. SalrnoneHe e^t^ť^i^rtidis | >100 |
| 19. Próteus vulgeris 0X19 | 12,5 |
| 20. Próteus ·1ιγ01118 IFM 0M-9 | >100 |
| 21. Próteus ριΙ^ιγ! ΦΙ311 | >100 |
| 22. Próteus nHgni (31466 | >100 |
| 23. Serretla rn^^í^^^cens | >100 |
| 24. Pseudo^e^s an^^osa A3 | >100 |
| 25. Kle^ieUa plnk·orйal PCI602 | >100 |
| 26. MechuíicÍ!· s·eegnmais ATCC607 | >100 |
Pobitá živná půda: živný agar
Teplota: při .37 °C
Tabulka 2-2
Atibekteriální aktivita antibiotika BMG !62-aF2
| Testovaný mikroorganismus | Midmální inhibiční koncentrace (m&/ml . 102) |
| 1. Aeroaornks punctete LAM1 646 | >100 |
| 2. Aeromonas srlmonecidk ATCC14174 | >100 |
| 3. Aeromonas sp. (KT-444) | >100 |
| 4. Vítalo ^^^111^1^ NCBM6 | 50 |
| 5- Psrudomonas fluorescens | >100 |
| 6. Psrudomonas lectaymens | 50 |
| 7. Erwinik aroideie | 50 |
PouUitá živné půda: živný agar Teplota: pM 27 °C.
Tabulka 2-3
ΑηηΐΝ№^Γ1έ1ηί účinnost antibiotika BMG l62-aF2
| Testovaný mikroorganismus | Minminí in^^bičňí' koncentrace («/1 . 102) |
| 1.Candidk tropic^Hs F-1 | >100 |
| 2. Candidk pseudotiopPccalt N17494 | >100 |
| 3. Candidk albicens 3147 | >100 |
| 4. Candidk Yu-1200 | >100 |
| 5. Candidk krusei, N17492 | 100 |
| 6. Skcchkromyces cernev-sike | 100 |
| 7. Cryptococcus nrogormans | 100 |
| 8. Helminthosporiím oryzae | 100 |
| 9. Pyricularie rnryzer | 100 |
| 10. Peniculrrik ^remen^se sesekli | 100 |
| 11 .Xetihomonθs citri | 100 |
| 12. Xanthomones oryzre | 100 |
| 13. AAspegUlus niger | 100 |
| 14. Trichophyion asteroides 429 | 100 |
| 15. Tгichophyiot | 100 |
Použitá živné půda: živný agar + 1 % glukosy Teplota: při 27 °C
2. AntneopPestická účinnost antibiotika BMG 162-kF2
a) Účirnnost vůči měí leukémii L 1210 (systém i. p. - i. p.)
Skupině osmi myších samic CDF^ 6 až . 7 týdnů starých byly itirepгritonгáltě inokulovány lrukrmické, bunky L 1210 v mn^žtví 10^ buněk/0,25 ml/myš. Zr 24 hodin tylo zahájeno podévéní hydrochloridu antibiotika BHG 162-eF2, rozpuštěného ve fyziologickém roztoku soli, intreperitoneélně jednou denně kontinuálně po dobu 9 dnů, a byla sledována úmrtnost pokusných zvířat a stupeň prodloužení doby jejich života.
Jak vyplývá z výsledků uvedených v tabulce 3, vykázalo antibiotCkum BMG l62-eF2 léčebný účinek a účinek na prodloužení doby živote'myší s leukémií L 1210.
Tabulka 3
Účinnost antibiotika BMG 162-aF2 vůči myší leukémii L 1210 (i. p. - i. p. systém)
| Dávka (mg/kg/den) | Průměrná doba přežžtí (dny.) léčených zvířat ----------------------- x 100 | Počet ryší přežívajících 60 dnů |
| průměrná doba přežžtí (dny) kontrol | počet myší testovaných | |
| 50 | 295X | 0/8 |
| 25 | 334 | 0/8 |
| 12,5 | 586 | 4/8 |
| 6,25 | 732 | 8/8 |
| 3,13 | 441 | 3/8 |
| 1 ,56 | 301 | 1/8 |
| 0,78 | 107 | 0/8 |
x 1 7 objevují se toxické příznaky
Průměrné doba přežití kontrolních zvířat: 8,2 dnů
b) Účinnost vůči myší leukémii L 1210 (systém s. c. - i. p.)
Skupině pě-ti myyích samic druhu CDF. , starých 6 eř 7 týdnů, byly injkkovény ryší leu* Ε 1 kerické buňky L 1210 v dávce 109 buněVO^S rl/myš, subkutánně ne stranu břicha, e za hodin bylo zahájeno podávání hydrochloridu antibiotika BMG 162-eF2 ve fyziologickér roztoku soli, intreperitoneálně jednou denně kontinuálně po dobu 9 dnů. Byle sledována úmrtnost mrší a stupeň prodloužení dpby jejich života. Jek vyplývá z údajů v tabulce 4, vykázalo antibioUum BMG 162-aF2 silný terapeutický účinek e účinek ne prodloužení doby živote pokusných . · zvířat, stejně jeko výše v pokusu . · a).
Tabulka 4
Účinnost antibiotika BMG 162-eF2 vůči myší leukémii L 1210 (s. c. - i. p. systém)
| _. Dávka (rr/kg/den) | Průměrná doba přežžtí (dny) léčených zvířat · — — -------— x 1 00 průměrná doba přežžtí (dny) kontrol | Počet ryší přežívajících 30 dnů |
| počet mSi léčených | ||
| 50 | >309 | 5/5 |
| 25 | >309 | 5/5 |
| 12,5 | >309 | 5/5 |
| 6,25 . | >240 | 3/5 |
| 3,13 | 120 | 0/5 |
| 1 ,56 | 105 | 0/5 |
Průměrné doba přežžtí kontrolních zvířat: 9,7 dnů
c) Účinnost vůči myší leukémii EL-4
Skupině pěti myších samic druhu C^yBL/6, 10 týdnů starých, byly intreperitoneálně inokulovány buňky myší leukemie EL-4 v množství 105 buněk/0,25 ml/myš, a za 24 hodin bylo zahájeno podávání hj'drochloridu antibiotika BMG 162-aF2 ve fyziologickém roztoku soli intraperitoneálně jednou denně kontinuálně po dobu 9 dnů. Byle sledována úmrtnost myší a stupeň prodloužení jejich života. Jak je zřejmé z údajů uvedených v tabulce 5, vykázalo antibiotikum BMG l62-aF2 rovněž terapeutický účinek a účinnost na prodloužení doby živote pokusných zvířat s leukémií EL-4.
Tabulko 5
Účinnost antibiotika BMG 162-eF2 vůči myší leukémii EL-4
| Dávka | Průměrná dobo přežití (dny) léčených zvířat |
| (mg/kg/den) | Průměrná doba přežití (dny) kontrol |
| 5 | 193 |
| 2,5 | 1 64 |
| 1,25 | 159 |
| 0,625 | 130 |
| 0,313 | 131 |
Průměrná doba přežití kontrolních zvířat: 11,0 dnů
d) Účinnost vůči myšímu Ehrlichovu ascltlckému tumoru skupině čtyř myších samic druhu ICR, 6 týdnů starých, byly intreperitoneálně lnokulovány buňky Ehrlichove escitického tumoru (2 x 106 buněk/0,^5 ml/piyš) e po 24 hodinách bylo zahájeno podávání hydrochloridu antibiotika BMG 162-eF2 ve fyziologickém roztoku soli ve formě lntraperitoneálních injekcí jednou denně kontinuálně po dobu 9 dnů. Byl sledován stupeň prodloužení doby života pokusných zvířat. Jak vyplývá z údajů uvedených v tabulce 6, vykázalo antibiotikum BMG 162-aF2 rovněž protirakovinnou účinnost vůči Ehrlichovu escitickému tumoru.
Tabulka 6
Účinnost antibiotika BMG 162-aF2 vůči myšímu Ehrlichovu escitickému tumoru
| Dávka (mg/kg/den) | Průměrná doba přežití (dny) léčených zvířat |
| Průměrná doba přežití (dny) kontrol | |
| 50 | 54* |
| 25 | 72x |
| 12,5 | 170x |
| 6,25 | 336 |
| 3,13 | 186 |
| 1 Ы6 | Lžl |
objevují se toxické příznaky
Průměrná doba přežl/tí kontrolních zvířat: 13,8 dnů
e) Účinnost vůči sarkomu 180
Skupině Čtyř myších samic druhu ICR, 6 týdnů sterých, byly intreperitoneálně inokulovány buňky myšího sarkomu 180 (2 x 10^ buněk/0,25/myŠ) a po 24 hodinách bylo zahájeno podávání hydrochloridu antibiotika BMG 162-eF2 ve fyziologickém roztoku soli ve formě intraperitcneálních injekcí jednou denně kontinuálně po dobu 9 dnů. Byl testován stupeň prodloužení doby života pokusných zvířat. Jak vyplývá z tabulky 7, antibiotikum BMG !62-aF2 rovněž má entineoplastický účinek vůči sarkomu 180.
Tabulka 7
Účinnost antibiotika BMG 162-aF2 vůči myšímu sarkomu 180
| Dávka (mg/kg/den) | Průměrné doba přežijí íckny) léčených zvířat |
| JL 1 v v Průměrná doba přežití (dny) kontrol | |
| 50 | 53X |
| - 12,5 | 27 9X |
| 6,25 | 181x |
| 3,13 | 243 |
| 1 ,56 | 220 |
x) ' objevují se toxické příznaky
Průměrné doba přežití kontrolních zvířat: 13,8 dnů
3. Ataitní toxicita antibiotika BMG l62-aF2 *
Při . injekčním podání hytdrochloridu antibiotika BMG 162-aF2.. myším samicím druhu - ICR, sterým 4 týdny, byle nelezene střední smrtná dávka LD^q vyšší nei 80 mg^kg·
Aitibiotkkum BMG 162-aF2 mé shore popsané fyzikálně chemické a biologické vlastnosti. Vzhledem k tomu, ie v mmletaule antibiotika BMG 162-bF2 je obseien spermi&Ln, který je společný řadš níže uvedených antibiotik, podobá se attibioilkum BMG 162-aF2 bleomycinu, produkovanému mikroorganismem Strepoomyces verticillus, attibloiiůům LL-EM 123P, y, a y^ produkovaným rnikroorgansstDem Noocadia, edeninu produkovanému mikroorgamimmem' cecillus toerds a laterspporaminu produkovanému mikroorganismy Bccilus.
Jelikož struktura antibiotika BMG 162-eF2 je známé a odpovídá shora - uvedenému vzorci I, je zřejmé, ie se toto antibioiktaim liší od bleomycinu, antibiotik LL-íM 123β, a y2 a od edeninu, jejichž struktura je rovnši známá. Dále se liší od lateropporeminu (viz The JowrnBl of AAnibbotics 29, 390 ai 393 /1976/), a to v infrвBevvtném spektru, v rozpustnosti v alkoholu, v antibaktrriálním spektru a ve stautečnossi, ie látka sumárního vzorce CgR^N^O, která je souččstí lateroppořeminu a která dává pooztivní Sakeguchiho reakci, není obsaiena v rozkladných produktech antibiotika BMG l62-aF2. Jb tedy potvrzeno, ie antibioiiuum.BMG 162-eF2 jr novým anntibioiiBem.
Z výše uvedených výsledků vyplývá, ir antibioikum BMG l62-aF2 vykazuje cheaaateerstickou an.titвspltsticksu účinnost vůči leukémii u teplokrevných iivočichů, včetně lidí, a rovnši vůči sarkmmům a jiným nádorům, a ir mé relativně nízkou toXcitu. A^nt-hbiotika BMG 162-aF2 lze proto používat jako výskajícího antinrsplastCcγý..půssbícíhs léčiva.
Pokud se týká farmaceutických přípravků a způsobů podávání antibiotika BMG 162-aF2 jako antinroplasticky účinné látky, lzr na nš aplikovat různé o sobš známé metody. K terapeutickým účelům ho lzr podávat injrkčnš, orálnš jebo rektálnš. Pokud jde o farmaceutické přípravky obsahující attibioiiUus BMG l62-aF2z lze jr formulovat vr formš injekcí, prášků, grandi, tablet, čípků a podobných.
Při výrobš zmínšných farmaceutických přípravků lzr, je-li třrba, . poiŽívat jakýchkoliv farmaceuticky vhodných pomocných látek, jako pevných nebo kapalných nosičů, stabilizátorů, antisrptik, látek odstraňujících boSesStL, emmugátorů a podobných, pokud jsou inertní vůči antibiotiku BMG l62-aF2.
Tak například v konkrétním případě, pří výrobě injekčního farmaceutického přípravku, se antibioiiUm BMG 162-aF2, výhodně Ve formě příslušné ve vodě rozpustné soli, jako hydrochloridu, rozpistí spolu s vhodným cukrem, jako manitolem, v destilované vodě a roztok se rozdělí do malých nádobek, výhodně injekčních ampulek, nebo se může zmíněný roztok dále zlyofLlizovat a před použitím rozpstit ve fyziologckkém roztoku soli nebo v destilované vodě na roztok vhodný pro injekční aplikaci.
Ve farmaceutických přípravcích může obsah účinné látky kolísat v širokém rozmezí podle druhu přípravku; obecně obsahují 0,01 ež 100 hmoonootních %, výhodně 0,1 až 70 hmot. %, . . .
antibiotika BMG · 162-aF2, a zbytek, to je 0 až 99,99 hmot. %, výhodně 99,9 ež 30 hmot. %, tvoří farmaceuticky vhodné nosiče. V případě injekčního přípravku je vhodný následnicí poměr složek:
aitibioiiUm BMG 166-aF2., 0,1 až 99,0 hmot. % cukry 991 až 5,,0 hmot. % chlorid sodný 0 a až 99,9 hmot. %
Μοζβίνί podávaného antibiotika BMG 162-aF2 kolísá podle symptomů nemooi; obvykle se používá u dospělých v dávce 0,01 až 800 mg denně, výhodně v dávce 0,1 až 600 mg denně, Je-li třeba ho podávat kontinuálně, lze denní dávku snížit.
Ve farmaceutických přípravcích se aotibioiij1m BMG 162-aF2 obvykle používá ve formě svých solí, jako hyidrochloridu a podobiýchm vhodných pro terapeutické ponHií.
Způsoby výroby nového antibiotika BMG 162-aF2 jsou blíže objasněny v následujících příkladech, které však rozsah vynálezu nijak neomezil. V příkladech jsou koncentrace látek, pokud není uvedeno jinak, udány v hmotnostní procentech.
P řík led 1
Pět litrů tekuté živné půdy obsah^íc! 2,0 % glycerinu, 2,0 % dextrinu, 1,0 % sojového peptonu (znyčky Etezto-soytonz, výrobek firmy Difco LaborZtores), 0,3% kvasnič^ného extraktu (výrobek firmy D^igo-Elj^o-^Kagaku Co., Ltd.), : 0,2 % síranu amoorného a 0,2 % uhličitanu vápenatého, upravené na pH 7,4, se umíítí v podílech po 125 ml v Sakaguchiho fermentačních nádobách o objemu 500 m.. Po vy sterilizování se obsah buněk 1 % předem připravené očkovací látky (kmen BoHlus laterosporus BMG 162-aF2 FERM-P 5230, ATCC 31932/ zz šikmého živného agaru sz pěstuje 2 dny v živné půdě stejného složení jak uvedeno výše) a (mikroorganismus se kultivuje 5 dnů při 28 °C.
Pak se zfermentovaná směs zfiltrujz, získaný filtrát (4 900 ml) se nalije nz sloupec (500 poměru 5^ cm) Amber litu IRC-50G9 (výroBk firmy Rohm a Ha as Co^ směs Na+ typu spolu s H+ typem v po^ru 7j3) a účinná látka se nezdsortojz. Sloupec sz promyjz vodou a účinná látka sz zluujz 2 000 ml 1,0 N kyseliny chlorovodíkové. ELuát sz zneuuralizujz 10 N roztokem hycdrotidu sodného na pH 6, zneutralizovzný roztok se zředí čtyřnxáoobkem vody a nalije ne sloupzc (400 ml, prtoěr 4,3 cm) Szphadztu C-225® protek firmy pham(^cia Fine Chezmccas; předem nabobtnalý s vodou), na kterém sz účinná látka naadsortojz.'Účinná látka se zluujz 0,3 M vodným roztokem chloridu sodného. Frakce obsshhuící účinnou látku se spooí a rozpouštědlo se oddezsilujz k suchu za sníženého tlaku. Odjpirzk sz digzrujz s 5 ml metanolu a nerozpuštěný chlorid sgdný sz odlltrujz. Filtrát sz na lije ne sloupec (445 ml, průměr 2,6 cm) Sephadetu LH-20<9 (obchodní značka dextranu určeného pro gelovou filtraci s'organickými rozpouštědly; výrobek firmy Pharmacia Fine . Chezmccas; předem nzbobtnalý s rrtantier) a produkt se zz . sloupce zluujz metanolem.
Zz spojených frakcí obsah^ících žádanou účinnou látku sz tdeezSilujz rozpouštědlo zz sníženého tlaku a získá sz 460 mg čistého hythrochloridu antibiotika BMG 162-aF2 vz formě bílého prášku.
Př 1 kl e d 2
Živná půda (10 li-trůl· obsahující 2,0 % glycerinu, 2,0 % dextrinu, 1,0 % sojového peptonu (značky Bato-soytone™ , výrobek firmy Dlfco Lbbrreorrie), 0,3 % kvasničného extraktu (výrobek firmy D^igo-^E-l^y^c^^^Kbgeku Co., Ltd.), 0,2 % síranu amoirného, 0,2 % uhličitanu vápenatého a 0,03 % silkoonoráho oleje jako upravená na pH 7,4, se vnese do nerezového fermentačního tanku o objemu 30 litaů a obsah se sterilizuje 20 minut při téplotě 120 °C. Po ochlazení fermentoru se půda asepticky iookullje 125 ml očkovací kultury kmene BcCHus l^a^l^e^r^c^i^I^o^rus BMG 162-aF2 FERM-P 5230, ATCC 31932, produjtlícíhr antibiotkuím BMG 162-aF2, vypěstované - ze . třepání po dobu 48 hodin. Za - provzduěnorání a při teplotě 28 °C, se provede kultivace uvedeného mikroorganismu ve fermentoru (výchozí rychlost provzdušnováoí 15 litarů za minutu, počet otáček míchadle 450 ze minutu; po 16 hodinách kultivace rychlost provzdušnování 10 litrů . ze minutu a 350 otáček ze mi^utt^), a po 40 hodinách se zře^e^ovaný obsah zfilmuje. Zíзkabnýfii’trát (9 500 ml) se chromaéooprafuje na sloupci Amberlitu IRC-5C® a pak CM-ephadexu C-25^ , v podstatě steOrým způsobem jako v ' příkladu 1.
(r)
Sloupec CM-ephadexu 0-25^ se eluuje 4 litry 0,3 M vodného roztoku chloridu sodného. Jímej se frakce po 290 kapkách a získají se dva poddly frakcí účinnou látku:
poddl I (frakce číslo ' 14 až 63) ' a poddl II (frakce číslo 64 až 154). Aktivní frakce podílu II, které neobsahují látku absorb^^jc! při 280 nm, se spooí (1 660 ml) a k roztoku se přidá ze účelem adsorbování- účinné složky 33 - g aktivního ulU-í. Akklvní uIU-Í se odfiltruje, promyje se vodou a botieiottlιm BMG 162-eF2 se eluuje- 500 ml 0,05 N roztoku kyseliny chlorovodíkové v 80% vodném metanolu.
^uát se neutralizuje Anteelitem IR-45® (výrotee Roum a Heas OH” forma) a po odfiltrování enexu a odddesilování rozpouštědel za sníženého tlaku se získá 305 mg hydrochloridu antibiotika BMG 162-aF2. Spojené aktivní frakce podílu I, obsahuuící látku absorbující při pH 280 nm, se odpaří k suchu, odparek se extrahuje metanolem, extrakt se rozpustí v 1 litru deionizoveoé vody e^roztok se rehhlobbbogrβfuje ne sloupci (400 ml, průměr trubice 4,3 cm) CM-ephedexu C-25® za ^uMbí grbfi.eotrvě e^ce 0 až 1 M roztokem Floridu sodného (celkem 4 litry). Frakce obsahuuící účinnou látku se spoj a rozpouštědlo se odddesiluje k suchu. Olperek se vyextrahuje m^ba^ol^e^m a meeanolický roztok se nanese na sloupec (780 ml, průměr 2,8 cm) Septadexu LH-20. Sloupec se eluuje metanolem ze účelem odstranění chloridu sodného a po odpaření rozpouštědla se získá 670 mg čistého hycdrochloridu anOibLotika BMG 162-eF2. Celkový výtěžek 975 mg hydr ©chloridu antibiotika BMG 162-eF2.
Příklad 3
K roztoku 150 mg hydrochloridu antibiotika BMG 162-eF2, získaného postupem popsaným v příkladu 2, v1 ul mmtanolu se přidá 1 ml nasyceného roztoku kyseliny pikrové v tamtanolu a směs se zahřeje k varu. Rozpouštědlo se odpádí, odparek se za účelem odstranění přebytku kyseliny pikrové promyje benzenem a et^^lem, a po přetarysbalováoí surového produktu ze smm8Í- vody s etbnoleb se získá 62 mg krystalického pikrátu antibiotika BMG 162-aF2.
P ř -.í k 1 a d 4 '
Injekce
V 970 hmoonootních dílech přečištěné vody sé rozpučí 30 hmoonootních dílů hyddoohUooidu anbleiotita BMG 162-aF2 připraveného způsobem popsaným v příkladu 1 a roztok se přefiHnje přes bakk, ekologický filtr značky Mllipore fiter--GS-type. Zárodků prostý filtrát se ploí v dávkách po 1 g do injekčních ami^p^lzí o obsahu 10 ml a obsah se lyorilizuje. Získají se suché lyofiizooveoé injekce obsahuuící po 30 mg hydrochloridu antibiotika BMG 162-aF2.
Příklad 5
Granule hmoonostních dílů hydrochloridu antibiotika BMG 162-aF2 připraveného způsobem popsaným v příkladu 1, 600 hnoonootaích dílů lgttsgy, 330 hooonoostoích dílů krystalické calulosy a 20 hmoonootních dílů lydroзχrJPoopSlclulssy se navzájem důkladně promííí, směs ae slisuje za pouužtí válcového kompresoru (značky B^^H^r^r-C^ť^op^c^tor ™) a produkt se rozdrtí oa granule, které se proijí síty na velikost částeček v rozmezí 1,59 až 0,42.
Příklad 6
Tablety hmotnostních dílů hydrochloridu antibiotika BMG 162-aF2 připraveného způsobem . popsaným v příkladu 1, 20 h^oot^c^o^it^:ích dílů tarystalioické laktosy, 147 hmoonootních dílů krystalioické celul^osy a 3 h^oot^o^fi^s^t^:í díly st^ranu hořačcatého se proioísí oa V-oixéru a smés se lisuje oa tablety obsah^jcí 300 mg - hydrochloridu antibiotika BMG 162-aF2.
Příklad 7
Postupem popsaným v příkladu 1 sa kultivuje standardní koen Bedlus ljtero8psrui, který je uložen va Faeulty of &og.neericg, Osake UrCwasity, Osake, Japonsko, pod deposiiOiío ČísOeo-OUT 8139. Získá se 4,4 litru živného filtrátu. Jelikož uvadaný kmen produkuje kromě antibiotika BMG 162-aF2 současně také v oleji rozpustná antibiotika, vySís^ se antibiotikum BMG 162-aF2 následujícím způsobem: živný filtrát se vlijr do sloupce (310 ol, Na* typu) Amber li tu IRC--50® , sloupec sa prooyje vodou a aktivní slo^a se eluuje 0,5 N-HC1. Aktivní poddly (podíly mea^í aotioitaObiální aktivitu proti ' Brdlus subttills PCI 219) se spojí (1 480 ol) a 1 N-NaOH. HLuát se smíchá se 4,4 g aktivního uhlí. Směs se nechá stát 30 minut, a potom se fdtrujr, aby se odstr^nio aktivní mí. ΛΑΗνηί Pili sa smíchá s 30 ol 50% vodného acetonu a aktivní složka se vyextrahuje při pH 2,0. Tento extrakční postup se opakuje dvakrát. Extrakty se spojí a zatnutí za sníženého tlaku oa 45 - ol. KoncenOrát se upraví na pH 7 8, smíchá sa se 45 ml n-butanolu a podrobí extrakci za současného třepáií. Vodná vrstva sa oddděí, její pH se upraví oa hodnotu 5,0 a smíchá z vodou, aby vniklo 200 ol roztok. Roztok se nelije ca sloupec (1W ol, Na* typu) C-Bphadexu —-25 ™ a sloupec se promyje vodou a potom se vyvdCjí roztokem chloridu sodného s lineárně se zvyšující se - tancenO.ire<cí od culy do 1,2 M. Eluované aktivní podíly se spojd a vysuší za sníženého tlaku, čímž se získá bílý prášek. Bílý práiak se extrahuje metanolem a extrakt se vlijr ne sloupec (55 ml) Sephadexu 2LH-20 suspendovaného v omtanolu a sloupec se vyvdají motanolam. Výsladné aktivní podíly se spojí a vysuší za sníženého tlaku, čímž se získá
5,8 mg bílé visko^cí látky. Teto látka vykazuje stejcé protonové NMR spektrum a stejcé ultračervecé absorpční spektrum jako - 001^4.0^^0 BMG 16,2-aF2.
Claims (3)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU1. Způsob výroby jntiiistitg BMG 162-aF2 vzorceC-NH-ÍCH2)a-CH-CHj-COI 24 I 2 I NH OH NHICH-OHIC<O-NH- (CH2) 4-NH- (0¾) 3~NH2 a jeho farmaceuticky vhodných solí, vyznačující se tím, že se mikroorganismus Becillus leterosporus BMG 162-aF2, FERM-P 5230, ATCC 31932 nebo OUT 6139 kultivuje aerobně, v kapalné živné půdě obsahující zdroje dusíku a uhlíku a anorganické soli, při teplotě 15 až 40 °C a při pH 5,0 až 6,2, načež se antibiotikum BMG 162-aF2 z kultivačního prostředí izoluje a popřípadě převede v jeho farmaceuticky vhodnou sůl.
- 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se izolace antibiotika BMG 162-eF2 z kultivačního prostředí provádí pomocí sloupcové chromatografie ze použití slabých katexových pryskyřic, majících karboxylovou skupinu jako aktivní skupinu·
- 3. Způsob podle bodu 2 vyznačující se tím, že se antibiotikum BMG 162-aF2 adsorbované ne ketexové pryskyřici eluuje vodným roztokem kyseliny nebo soli.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55123585A JPS5748957A (en) | 1980-09-08 | 1980-09-08 | Novel antibiotic bmg 162-af2, its preparation and carcinostatic agent comprising it as active ingredient |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS226036B2 true CS226036B2 (en) | 1984-03-19 |
Family
ID=14864227
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS816592A CS226036B2 (en) | 1980-09-08 | 1981-09-07 | Method of preparing b mg 162-af2 antibiotic |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4416899A (cs) |
| JP (1) | JPS5748957A (cs) |
| KR (1) | KR870001373B1 (cs) |
| AT (1) | AT376239B (cs) |
| AU (1) | AU523222B2 (cs) |
| BE (1) | BE890229A (cs) |
| CA (1) | CA1175763A (cs) |
| CH (1) | CH655498B (cs) |
| CS (1) | CS226036B2 (cs) |
| DE (1) | DE3134353C2 (cs) |
| DK (1) | DK157890C (cs) |
| ES (1) | ES8302090A1 (cs) |
| FR (1) | FR2489819A1 (cs) |
| GB (1) | GB2084999B (cs) |
| HU (1) | HU188077B (cs) |
| IT (1) | IT1209896B (cs) |
| NL (1) | NL8104069A (cs) |
| SE (1) | SE450836B (cs) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS57185254A (en) | 1981-05-11 | 1982-11-15 | Microbial Chem Res Found | Novel carcinostatic substances and their preparation |
| JPS57192347A (en) * | 1981-05-18 | 1982-11-26 | Microbial Chem Res Found | N-(4-(3-aminopropyl)aminobutyl)-2,2-dihydroxyethanamide and its synthesis |
| JPS5862152A (ja) * | 1981-10-08 | 1983-04-13 | Microbial Chem Res Found | Ｎ−〔４−（３−アミノプロピル）アミノブチル〕−２−（ω−グアニジノ脂肪酸アミド）−２−ヒドロキシエタンアミドおよびその誘導体ならびにその製造法 |
| JPS5942356A (ja) * | 1982-09-02 | 1984-03-08 | Microbial Chem Res Found | スパガリン関連化合物およびその製造法 |
| JPS60185758A (ja) * | 1984-03-02 | 1985-09-21 | Microbial Chem Res Found | フエニレン基を有するスパガリン関連化合物およびその製造法 |
| US4851446A (en) * | 1984-11-13 | 1989-07-25 | Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai | Immunosuppressing method |
| JPS61134312A (ja) * | 1984-12-06 | 1986-06-21 | Microbial Chem Res Found | 移植免疫抑制剤並びに抗アレルギ−剤 |
| JPS61165322A (ja) * | 1985-01-14 | 1986-07-26 | Microbial Chem Res Found | スパガリン類の注射用凍結乾燥製剤 |
| ES2039213T3 (es) * | 1986-04-04 | 1993-09-16 | Microbial Chemistry Research Foundation | Procedimiento para producir nuevos compuestos relacionados con espergualina. |
| JP2873340B2 (ja) * | 1988-04-29 | 1999-03-24 | 武田薬品工業株式会社 | 抗生物質ｔａｎ―１０５７，その製造法および用途 |
| JPH0776204B2 (ja) * | 1988-07-01 | 1995-08-16 | 寳酒造株式会社 | スパガリン類の精製法 |
| JPH0263181U (cs) * | 1988-10-27 | 1990-05-11 | ||
| US4990536A (en) * | 1989-04-03 | 1991-02-05 | Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha | Immunopotentiator and spergualin-related compound therefor |
| US5162581A (en) * | 1989-05-29 | 1992-11-10 | Takaru Shuzo Co., Ltd. | Crystalline deoxyspergualin, process for its preparation and suppository containing the same |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2998438A (en) * | 1958-03-31 | 1961-08-29 | Merck & Co Inc | Eulicin and process for production |
| US3617448A (en) * | 1967-10-03 | 1971-11-02 | Research Corp | Antibiotic and methods of producing and using it |
| US3743580A (en) * | 1970-04-28 | 1973-07-03 | Microbial Chem Res Found | Antibiotic,negamycin,and processes for the preparation thereof |
| US4163796A (en) * | 1977-12-14 | 1979-08-07 | The Dow Chemical Company | Stabilized aqueous amide antimicrobial composition |
| US4328229A (en) * | 1978-03-29 | 1982-05-04 | Taiho Pharmaceutical Company Limited | Anti-cancer composition for delivering 5-fluorouracil to cancer tissues |
| US4226808A (en) * | 1979-08-17 | 1980-10-07 | Schering Corporation | 1-Aryl-2-dihalogenodeuterioalkanoylamido-1,3-propanediol antibacterial agents |
-
1980
- 1980-09-08 JP JP55123585A patent/JPS5748957A/ja active Granted
-
1981
- 1981-08-26 GB GB8126019A patent/GB2084999B/en not_active Expired
- 1981-08-27 SE SE8105079A patent/SE450836B/sv not_active IP Right Cessation
- 1981-08-28 US US06/297,458 patent/US4416899A/en not_active Expired - Lifetime
- 1981-08-31 DE DE3134353A patent/DE3134353C2/de not_active Expired
- 1981-09-01 HU HU812518A patent/HU188077B/hu not_active IP Right Cessation
- 1981-09-02 NL NL8104069A patent/NL8104069A/nl not_active Application Discontinuation
- 1981-09-02 AU AU74892/81A patent/AU523222B2/en not_active Ceased
- 1981-09-03 CH CH567881A patent/CH655498B/de not_active IP Right Cessation
- 1981-09-04 IT IT8149237A patent/IT1209896B/it active
- 1981-09-04 CA CA000385239A patent/CA1175763A/en not_active Expired
- 1981-09-04 KR KR1019810003293A patent/KR870001373B1/ko not_active Expired
- 1981-09-04 BE BE0/205871A patent/BE890229A/fr not_active IP Right Cessation
- 1981-09-04 FR FR8116856A patent/FR2489819A1/fr active Granted
- 1981-09-07 CS CS816592A patent/CS226036B2/cs unknown
- 1981-09-07 DK DK394281A patent/DK157890C/da active
- 1981-09-07 ES ES505256A patent/ES8302090A1/es not_active Expired
- 1981-09-07 AT AT0386081A patent/AT376239B/de not_active IP Right Cessation
-
1982
- 1982-08-20 US US06/410,160 patent/US4474880A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATA386081A (de) | 1984-03-15 |
| ES505256A0 (es) | 1983-01-01 |
| CH655498B (cs) | 1986-04-30 |
| DK394281A (da) | 1982-03-09 |
| AT376239B (de) | 1984-10-25 |
| AU523222B2 (en) | 1982-07-15 |
| DK157890B (da) | 1990-02-26 |
| AU7489281A (en) | 1982-03-18 |
| IT1209896B (it) | 1989-08-30 |
| US4416899A (en) | 1983-11-22 |
| KR870001373B1 (ko) | 1987-07-24 |
| CA1175763A (en) | 1984-10-09 |
| NL8104069A (nl) | 1982-04-01 |
| SE450836B (sv) | 1987-08-03 |
| FR2489819B1 (cs) | 1985-02-15 |
| FR2489819A1 (fr) | 1982-03-12 |
| DE3134353C2 (de) | 1986-03-13 |
| DE3134353A1 (de) | 1982-04-22 |
| BE890229A (fr) | 1982-01-04 |
| IT8149237A0 (it) | 1981-09-04 |
| GB2084999A (en) | 1982-04-21 |
| US4474880A (en) | 1984-10-02 |
| ES8302090A1 (es) | 1983-01-01 |
| GB2084999B (en) | 1984-06-13 |
| KR830007834A (ko) | 1983-11-07 |
| SE8105079L (sv) | 1982-03-09 |
| DK157890C (da) | 1990-07-23 |
| HU188077B (en) | 1986-03-28 |
| JPS6316380B2 (cs) | 1988-04-08 |
| JPS5748957A (en) | 1982-03-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kodama et al. | Bacterial production of saxitoxin | |
| KR850001503B1 (ko) | 항생물질 A-4696인자B_1,B_2,B_3,C_1a,C_3 및 E_1의 제조방법 | |
| CS226036B2 (en) | Method of preparing b mg 162-af2 antibiotic | |
| CA1208148A (en) | Cl-1577 antibiotic/antitumor compounds and their production | |
| NO149239B (no) | Offshore-konstruksjon. | |
| HU199900B (en) | Method for producing new biologically active materials notated ll-f 28249 and veterinary preparatives said materials as active agents as well as nematocide insecticide and acaricide preparatives containing said materials as active agents | |
| Borkott et al. | Symbiosis with bacteria enhances the use of chitin by the springtail, Folsomia candida (Collembola) | |
| DE2843702A1 (de) | Neue antibiotische substanz und ihre herstellung durch zuechtung eines streptomyces | |
| EP0187722B1 (en) | Antibiotics called "chloropolysporins b and c", a process for their preparation, and their therapeutic and veterinary use | |
| JPS6244553B2 (cs) | ||
| KR950005134B1 (ko) | 펩타이드 항생제 | |
| JPH01193269A (ja) | 発酵培地中より単離された駆虫剤として活性のあるパラハークアミド誘導体 | |
| US3832287A (en) | Dipeptide antibiotic and method for the production thereof | |
| US3592925A (en) | Antibiotics ah272alpha2 and ah272beta2 and process for producing same | |
| US4868203A (en) | Bacterial substance and pharmaceutical composition thereof | |
| DE2109854A1 (de) | Cephalosporin-Derivate | |
| PL87754B1 (cs) | ||
| DE3136675A1 (de) | Neues peptid und dessen herstellung | |
| JPH06116159A (ja) | ネンジュモ抽出物 | |
| US3683072A (en) | A methobottromycin and process for treating poultry infections | |
| CA1046965A (en) | Naphthyridinomycin antibiotics from streptomyces | |
| JPS6040837B2 (ja) | 抗生物質チオストレプトンの製造法 | |
| US3155583A (en) | Antibiotic narangomycin and method of production | |
| JPS6328080B2 (cs) | ||
| US5017561A (en) | Antibotic 6270B and its use as an anticoccidiosis agent and a feed additive |