CS207693B2 - Method of making the antibiotic a 40104 - Google Patents
Method of making the antibiotic a 40104 Download PDFInfo
- Publication number
- CS207693B2 CS207693B2 CS788006A CS800678A CS207693B2 CS 207693 B2 CS207693 B2 CS 207693B2 CS 788006 A CS788006 A CS 788006A CS 800678 A CS800678 A CS 800678A CS 207693 B2 CS207693 B2 CS 207693B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- factor
- antibiotic
- factors
- medium
- culture
- Prior art date
Links
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title claims abstract description 60
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 19
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 18
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 17
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 10
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 14
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 abstract description 11
- 241001237959 Clitopilus Species 0.000 abstract description 10
- ZRZNJUXESFHSIO-VYTKZBNOSA-N pleuromutilin Chemical compound C([C@H]([C@]1(C)[C@@H](C[C@@](C)(C=C)[C@@H](O)[C@@H]2C)OC(=O)CO)C)C[C@]32[C@H]1C(=O)CC3 ZRZNJUXESFHSIO-VYTKZBNOSA-N 0.000 abstract description 8
- ZRZNJUXESFHSIO-UHFFFAOYSA-N Pleuromutilin Natural products CC1C(O)C(C)(C=C)CC(OC(=O)CO)C2(C)C(C)CCC31C2C(=O)CC3 ZRZNJUXESFHSIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 3
- -1 D-xylose acetal derivative of pleuromutilin Chemical class 0.000 abstract description 3
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 abstract description 3
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 abstract description 3
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 abstract description 2
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 229910014585 C2-Ce Inorganic materials 0.000 abstract 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 24
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 102000003712 Complement factor B Human genes 0.000 description 16
- 108090000056 Complement factor B Proteins 0.000 description 16
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 13
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 10
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 6
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 5
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 241001430197 Mollicutes Species 0.000 description 4
- 241000606860 Pasteurella Species 0.000 description 4
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 4
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 4
- 241000194022 Streptococcus sp. Species 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 239000012485 toluene extract Substances 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 3
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- 240000003183 Manihot esculenta Species 0.000 description 3
- 235000016735 Manihot esculenta subsp esculenta Nutrition 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000588652 Neisseria gonorrhoeae Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000202915 Spiroplasma citri Species 0.000 description 3
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 3
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000002814 agar dilution Methods 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 239000002026 chloroform extract Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 2
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 2
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 2
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 2
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- WOEPIQOANYGRGK-RJMJUYIDSA-N (2R,3R,4S,5R,6S)-2-(hydroxymethyl)-6-[(2R,3S,4R,5R)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane-3,4,5-triol propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O WOEPIQOANYGRGK-RJMJUYIDSA-N 0.000 description 1
- VEMLQICWTSVKQH-BTVCFUMJSA-N (2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O VEMLQICWTSVKQH-BTVCFUMJSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186046 Actinomyces Species 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 1
- 241000282994 Cervidae Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100326341 Drosophila melanogaster brun gene Proteins 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N Methicillin Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2[C@@H](C(O)=O)C(C)(C)S[C@@H]21 RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N 0.000 description 1
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 description 1
- 241000204045 Mycoplasma hyopneumoniae Species 0.000 description 1
- 241000202942 Mycoplasma synoviae Species 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- 241000206591 Peptococcus Species 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- OBUUFWIMEGVAQS-UHFFFAOYSA-N Pleuromutenol Natural products CC1C(O)C(C)(C=C)CC(O)C2(C)C(C)CCC31C2C(=O)CC3 OBUUFWIMEGVAQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000382353 Pupa Species 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000589886 Treponema Species 0.000 description 1
- RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N Trifluoroethanol Chemical compound OCC(F)(F)F RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 1
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical class CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 239000004088 foaming agent Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229960003085 meticillin Drugs 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 150000002888 oleic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000008775 paternal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 229940075427 peptone,dried Drugs 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 229960002771 retapamulin Drugs 0.000 description 1
- STZYTFJPGGDRJD-NHUWBDDWSA-N retapamulin Chemical compound C([C@H]([C@@]1(C)[C@@H](C[C@@](C)(C=C)[C@@H](O)[C@@H]2C)OC(=O)CS[C@@H]3C[C@H]4CC[C@H](N4C)C3)C)C[C@]32[C@H]1C(=O)CC3 STZYTFJPGGDRJD-NHUWBDDWSA-N 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 108010050327 trypticase-soy broth Proteins 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/18—Acyclic radicals, substituted by carbocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/02—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using fungi
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Botany (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu výroby antibiotik, a to komplexu A-40104 faktorů А, В, C a D aerobní fermentací Clitopilus pseudopinsitus za submerzních podmínek. Bylo možno izolovat individuální faktory А, В a C. Faktor C komplexu A-40104 je známé antibiotikum pleuromutilin. Faktory А а В komplexu A-40104 jsou nová antibiotika, příbuzné pleuromutilinu. Faktor A, hlavní nový faktor je derivát pleutomutilínu a D-xylozy a mé formu acetalu. Faktory A a B, jejich 19,20-dehydroderiváty a peralkanoylové deriváty faktorů А а В o 2 až 6 atomech uhlíku v álkanoylové části a peralkanoylové deriváty 19,20-dihydroderivátů faktorů A a B,v nichž alkanoylová skupina obsahuje 2 až 6 atomů uhlíku jsou účinné proti grampozitivním a gramnegativním bakteriím,anaerobním bakteriím а Мусopiasrnatům.
Antibiotikum pleuromutilinu bylo izolováno roku 1951 a je popsáno v publikaci Kvanagh a další ÍProc. Nati. Acad. Soc. 37. 570 až 574 (1951)]. Pleuromutilin je možno vyjádřit následujícím vzorcem
Alkalickou hydrolýzou pleuromutilinu vzniká sloučenina známá jako mutilin, který je možno vyjádřit následujícím vzorcem
Byla připravena celá řada pleuromutilinových derivátů [švýcarský patent δ, 572 894 (Derwent č. 26553X), nizozemský patent č. 69,11083 (Derwent č. 40,642), Knauseder a další, US patent 2. 3 716 579, Egger a další, US patent č. 3 919 290, Brandl a další, US patent Č. 3 949 079, Riedl, US patent č. 3 979 423, Baughn a další, US patent δ. 3 987 194, Egger a dalšf, US patent č. 4 032 530, K. Riedl, Studies on PlewronuUilin and Some of Its Deelvatives, J. Anntbbotics 22, 132 až 139, (1976;), H. Egger a H. Kinshagen, New Pleurornuttlin Ueeivatives with Enhanced Annimiirobial Aectvity. I. Sy^nt^h^s^i-s, J. АШbiotics 29, 915 až 922 (1976) a II. Structure-Accivity Cooireations, iiid., 923 až 927 (197i6), F. Knauseder and E. Brandl, Pleuromotilits: Fermeenation, Structure and Bio syn thesis, J. Annibiotics 29. 125 až 131 (1976), J. Drews a dalSf, AAnimicrobial Acii^v-ties of 81.723 hfu, a New Pleuiommttlit Derivatiie, AAniuierob. Agents and Chemmoherapy 2, 507 až 516 (1975)].
Nyní bylo zjištěno, že existují další dvě nová antibiotika, které náleží rovněž do skupiny pleuroιmttlitu. Mimoto bylo možno navrhnout nový způsob výroby plruromutilinu.
Způsobem podle vynálezu je možno získat nové antibiotika ze skupiny'^komplexu A-40104 s to faktoru A, B a D, předmětem vynálezu je rovněž nový způsob výroby faktorů A, B, C a D komplexu A-40104. Tyto faktory mmjí ' cenné antibiotické spektrum, které zahrnuje grampozztivní, grsmmtrаSiiní a anaerobní bakterie, mimoto však rovněž organismy typu Mcoplasaa. Nová antibiotika jsou vhodná k léčbě onemmonění drůbeže, která byla způsobena mycoplasmaty a k léčbě disrntrrir vepřů, která byla způsobena Trepo^ma hyodyssnterise.
Předmětem vynálezu je způsob výroby komplexu A-40104 s obsahem faktorů A, B, D a pLruipmmtilitu, vyz^aujcí se tím, že se kultivuje Clitopilus pseudooinnitus NRRL 11179 v živném prostředí s obsahem využitelného zdroje uhlíku, dusíku a anorganických solí v submmrzní kultuře za aerobních podmínek 2 a více dnů při teplotě 20 až 33 °C.
Faktor A antibiotika A-40104
Faktor A antibiotika A-40104 krystalizuje z chloroformu a má teplotu tání 117 až 120 °C. E:nmirický vzorec faktoru A antibiotika A-40104 je C27H4g0g, j ak bylo stanoveno rleoertártí analýzou, mooeeku.ární hmoonost je 5Ю, jak bylo stanoveno hmoonootní spektrouVííií.
Absorpční, spektrum faktoru A antibiotika A-40104 v ultrefSаOivém světle ve trifluoreihstolu má absorpční maximum při 284 nm ( ε 32).
Spektrum faktoru A antibiotika A-40104 při cirkulármím dichroismu v trifuuorethanolu má následující maxima:
Δε = +2,84 při 200 nm Δε = +1,72 pří 295 nm.
Faktor A antibiotika A-40104 má následnicí specifickou otéčivost;
[a]*5 -14° (c = 1(0> C^OH).
Elektrometnickou titrací faktoru A antibiotika A-40104 v 66% vodném roztoku dimetlhylformamidu je možno prokázat nepříoomnost titoovatelných skupin.
Absorpční spektrum faktoru A antibiotika A-40104 v KBr je znázorněno na obr. 1 na přiložených výkresech. Abborpční maxima je možno pozorovat při následujících' frekvencích: ( -1) · (cm ) :
590, 3 500, 3 450 (široké)* 3 280 (široké), 2 990, 2 980, 2 960, 2 940, 2 920, 2 890,
860, 1 770, 1 730, 1 645, 1 465, 1 447, 1 420, 1 380, 1 330, 1 310, 1 274, 1 240, 1 220,
160, 1 111, 1 093, 1 070, 1 060, 1 040, 1 014, 984, 900, 940, 921, 900, 860, 760, 742,
698, 674, 603, 030 a 442.
Faktor A antibiotika A-40104 je rozpustný v alkoholech, například methiMiolu nebo ethanolu, částečně rozpustný v chloroformu a nerozpustný ve vodě.
Podle svých fyzikálních a chemických vlastností je faktor děpodobně beta,D-xylopyralosylaceSonový derivát pleuromuttlinu
A antibiotika A-40104 pravs následujícím vzorcem:
Faktor B antibiotika A-40104
je bílá amoofní látka, která Tento faktor tvoří pouze 0,01 se vyskytuje v malém mmnžství až 0,1 % účinnosti antibio' Faktor B antibiotika A-40104 v antibioiccéém komplexu A-40104.
tického komplexu A-40104. Při hmoonDotní spektrsmeerii faktoru B antibiotika A-40104 bylo prokázáno, že faktor má uoSelkl.érní hmoonost 394. Při srovnávání vrcholů uoSltkltlrtlí.ho iontu a některých fragmentáních iontů je možno usuzovat na to, Že faktor B antibiotika A-40104 má empirický vzorec C22H34°6‘
Vrchol při m/e 318 (Ο2ΟΗ3Οθ3) ve hmotnostním spektru faktoru B je analogický vrcholu při m/e 302 ve spektru plttrouuttlilt, což znamená, že další atom kyslíku ve faktoru B » je umístěn patrně na jádře a nikoli na postranním řetězci. Fragment m/e 163 je společný faktoru B a pleurommttlinu. Malý vrchol při m/e 240 (C-j H^O) ve spektru pleurommttlinu je posunut směrem k m/e 261 (C^Hg^Og) ve spektru faktoru B.
* Faktor B antibiotika A-40104 obsahuje tři hydroxylové skupiny, které jsou schopné acylace. Působením pyridinu tvoří například faktor B antibiotika A-40104 triacetyoový derivát při současném působeni anhydridu kyseliny octové, čímž vzniká sloučenina se složením CggHjgOg a s m^o<^lk^lť^i^ní hmotností 020, čímž je možno prokázat, že další atom kyslíku ve faktoru B antibiotika A-40104 je v hydroxylové skupině.
Absorpční spektrum faktoru B antibiotika A-40104 v infračerveném světle v KBr je znázorněno na obr. 2 na přiložených výlk-esech. Ne όΑΤτβζη^δί abscprční maxima je možno pozorovat pH násle^uj^ch fre^encfoh (cm-'):
420 (široký), 2 940, 2 880, 1 730, 1 660, 1 402, 1 380, 1 370, 1 300, 1 280, 1 233, 1 102,
094, 1 020, 997, 967, 933, 912, 888, 702 a ' 660.
V závislosti na fyzikálních a chemických vlastnostech je možno pro faktor B antibiotika
A-40104 předpokkádat následujcí vzorec:
Čtyři individuální faktory antibiotického komplexu A-40104 je od sebe možno.oddělit a identifikovat chromatooraficky. Faktory je m^i^no oddělit například chromattorafií na tenké vrstvi silikagelu (Merek, DarrnaSadt) při použití chloroformu a methanolu v pommru 9:1 jako rozpouštědla a Micrococcus luteus jako biologického indikátoru. Přibližné hodnoty Rf pro faktory A až D antibiotika A-40104 jsou uvedeny v tabulce I.
Tbulka I
Faktor
A
B
C
D
Hodnota Rf
0,21 , 0,36
0,52
0,67
Faktory je možno od sebe odc^lit také chrumaaoogrfií na papíře, například Watman č. 1, přičemž se užije jako rozpouštědlo voda nasycená butanolem a Micrucoccus luteus jako detekční organismus. Přibližné hodnoty Rf pro faktory A až D antibiotika A-40104 v uvedeném systému jsou uvedeny v následuiící tabulce II.
Tabulka II
Faktor Hodnota Rf
A0,64
B0,51
C0,37
D ·0,31
Způsob výroby antibi. otckkého komplexu A-40104
Vynález se týká způsobu výroby aitibiotického komplexu A-40104 a tím i způsobu výroby faktorů A a B antibiotika A-40104 a známého antibiotika pleuromuttlinu. Tento způsob spočívá v tom, že se pěstuje kmen Clitopilus pseudooináitus náležející do čeledi Basidiouyctes v β^ι^Γζηί kultuře za aerobních podmínek ve vhodném živném prostředí tak dlouho, až vznikne dostatečné mnoství antibiotika. Aátbiotiiký komplex a jednooiivé faktory se izolují různými způsoby po izolaci a čištění, tak jak jsou v oboru běžné.
Kmen Clitopilus pseudooinsstus, vhodný pro produkci antibiotika A-40104 byl získán z centraalbureau voor Schiaaalcužtures (CBS) v Nizozemí. CBS kultura (CBS 270.36) byla klasifkkována jako Octojuga pseudoupinsSta. Rodové jméno Clitopilus, které je synonym®® pro Octojuga bude dále užíváno k označení užitého mikroorganismu. Schopnost této kultury vyrábět antibiotium nebyla až dosud známa. Tato schopnost k produkci antibiotika A-40104 byla zjištěna při široce založených zkouškách s různými typy mikroorganismů.
Kmen Clitopilus pseudoopnnstus, kterého je možno užít k produkci faktorů A a B — batika A-40104 a k produkci pl·euruaažtltnu byl uložen ve veřejné sbírce kultur Northern
Marketing and Nutrition Research Division, US Department of Agriculture, Agricultural Research Service, Peoria, Illinois 61604, odkud je možno jej získat pod číslem NRRL 11179»
Stejně jako je tomu u jirých mikroorganismů, vlastnosti kultury Clitopilus pseudopinsitus NRRL 11179, která produkuje antibioteim A-40104 různým variacím. Například různé umělé varianty a mutanty kmene NRRL 11179 je možno získat působením různých známých mutagenů, jako jsou ultrafialové paprsky, paprsky X, vysokofrekvenční vlny, radioaktivní paprsky a chemické látky. Všechny přírodní i umělé varianty a mu^nty které maaí v podstatě stejné vlastnosti jako Clitopilus pseudopinsstus NRRL 11179 a produkují antibioiiuum A-40104 je možno užít při provádění způsobu podle vynálezu.
Živné prostředí, jehož se užije k pěstování CCitopilus pseudoppnnitus NRRL 11179 r může být velmi různé. Z hospodárných důvodů a pro získání optimálního výtěžku i pro snadnou izolaci jsou však výhodná některá zvláštní živná prostředí Při fermentaci ve velkém měřítku je například výhodným uhlphydkáOovým zdrojem glukóza, dextrin z tapioky, škrob a kukuřičný olej, i když je možno užít také glycerin, maatózu, fruktózu a další zdroje. Dalšími výhod* nými zdroji uhlíku jsou soli kyseliny olejové a laurové a lecitin. Výhodnými zdroji dusíku jsou sójová mouka nebo extrakt z kvasnic. Dalšími vhodnými zdroji dusíku jsou kvasnice, mouka z bavlníkových sem^n, arašídová mouka, pepton z masa, sušené krmivo pro psy. Přestože anorganické soli nejsou pro růst a produkci antibiotika podstatné, je možno přidávat rozpustné soli, které obsahují sodík, hořčík, vápník, amonný ion, chloridový ion, uhličitanový ion, síranový ion, dusičnanový ion apod. Produkci antibiotika je možno zlepšit například přidáním 0,05 % MgSO^HgO a 0,2 % CaCO3 do živného prostředí.
Do živného prostředí by měly být přidávány také základní stopové prvky, které jsou nutné pro růst a vývoj mikroorganismu. Tyto stopové prvky se obvykle běžně vyskytují jako nečistoty v ostatních živných složkách prostředí v mnšožsví, které je dostatečné vzhledem k růsooým požadavkům mikroorganismu.
Někdy může být zapotřebí přidat malé mnnožtví, tj. přibližně 0,2 mlllitr pro^pě^vé^ činidla, například polypropylenglykolu, protože zejména při fermentaci ve velkém měřítku se pěnění stává problémem.
Pro výrobu větších mnnožtví antibiotika A-40104 je vhodné užít fermentaci v submerzní kultuře za aerobních podmínek ve velkých tancích. Malé mnnožtví antibiotika A-40104 je možno získat v třepacích lahvích. Protože období lag je obvykle velmi dlouhé při produkci antibiotika ve velkých tankách při pouužtí malého mnnožtví kultury jako očkovacího mattriálu, je výhocknjší užít vegetativní očkovací [mateřá]., který obsahuje větší mnnožtví buněk v aktivním růsonvém stádiu. Veertáttvsí očkovací maateiál se připraví tak, že se naočkuje malý objem živného prostředí fragmenty mycceia, čímž se získá čerstvé, aktivní rostoucí kultura mikroorganismu. Vvegtativní očkovací mati'j.ál se pak přenese do většího tanku, živné prostředí, užité pro růst vegetativního očkovacího maatriálu může být stejné, jako pro pěttpvásí ve většim měříteu, je však m^ižno užít, i. odlíšn^o ^vn^o prostředí.
Milkioorgtntsmus Clitoiillt iseujdp-itlsttus, který produkuje A-40104 je možno pěstovat v teplotním rozmezí 20 až 33 °C. K optimální produkci antibiotika A-40104 docbází při teplotách v blízkosti 30 °C.
Jak je obvyklé při aerobní fermentaci v tubmeezních kulturách, vhání se do živného prostředí za stálého míchání sterilní vzduch. K účinnému růstu mikroorganismu je nutno dostatečně provzdušnovat a míchat prostředí tak, aby hladina rozpuštěného kyslíku se udržovala co nejblíže k hodnotě 80®. Nižší úroveň rozpuštěného kyslíku snižuje produkci faktorů A a C antibiotika A-40‘04, jjší je tento vliv u faktoru A.
V průběhu fermentace dochází nejprve k produkci faktoru C antibiotika A-40104, faktor A antibiotika A-40H-4 se objevuje později. Vhodná inkubacní doba pro produkci faktoru A antibiotika A-40104 je proto přibližně 12 dnů. Přidáním kukuřičného oleje k živnému prostředí se podporuje přeměna faktoru C na faktor A v průběhu fermentace. Za podmínek, které jsou optimální pro produkci faktoru antibiotika A-40104 docHází k tomu, že faktor A tvoří 70 až 90 % veěkerého vyprodukovaného antibiotika.
Po vzniku . antibiotického komplexu A-40104 při pěstování v submmrzní kultuře za aerobních podmínek je možno jednotlivé svrchu popsané faktory z fermentačního prostředí izolovat známými. způsoby, které se běžně v oboru užívají. Anntbiotika produkovaná v průběhu fermentace se nacházejí v živném prostředí. K mrχimálníru výtěžku antibiotika A-40104 je tedy možno dospět komtbnací různých mmtod, jako jsou filtrace, extrakce zfiltovaaného živného prostředí a absorpční Zvláště výhodné je postupovat tak, že se zfiltovvané živné prostředí extrahuje nejprve toluenem a pak chloroformem. Faktor C antibiotika A-40104 se izoluje z toluenového extraktu a faktor A antibiotika A-40104 se izoluje z chloroformového extraktu. Faktor B antibiotika A-40104, které se vyskytuje v menším ííoossví se oddělí absorpční ihromratorrfií v průběhu čištění faktoru A antibiotika A-40104.
Pevný poddl kultury, to znamená směs živného prostředí a mcceia je možno užít bez extrakce a dělení, avšak s výhodou po odstranění vody jako zdroj antibiotika A-40104. Naaříklad je možno po provedené Oerrentaci sušit tento [materá! lyofilizací a přímo míit na přídatné krmivo.
Je možno také postupovat tak, že se po odddlení živného prostředí a m^cceia zOiltovvané živné prostředí lyofilizuje, čímž se rovněž získá antibiotický komplex A-40104 ve formě, kterou je možno přímo pouužt pro včlenění do prídatného krm.vá.
V průběhu výroby antibiotika A-40104 a izolace jeho jednotlivých antibiotcclých faktorů je výhodné sledovat tyto postupy chrommaco^^cky. Je například výhodné užít chromatografii na tenké vrstvě silikagelu při pouustí siísí chloroformu a methanolu v poměru 9:1 jako rozpouštědla a Mic^^ccus luteus jako biologického indikátoru.
Účinnost antibiotika A-40104
A-40104 a jeho faktory A a B iohibují růst různých pathogenních mikroorganismů, zejména gramíooitivníih bakterí. Zvváště vhodný je faktor A. MinUání iohibičmí koncentrace (MIC) pro faktor A a pro různé bakterie jsou uvedeny v agarovém .ředění v následující tabulce III.
Tabulka III
MIC Qig/ml)
Mikroorganismus
A-40104 faktor A
Staphylococcus aureus 3055 <0,5 Staphclocoiius aureus 3074 <0,5 Strepto^occ^s fsecalis <0,5 Boutdjeela bronchiseptica <0,5
AA0ibiottUul A-4014 je účinné také proti rikruurganSsmům, které jsou odolné proti jiným antibiotiku. V následující tabulce IV je uvedeno shrnutí výsledků, které byly získány na agarových plotnách při pouustí disků s antibiotteer A-40104 při pouustí různých mikroorganismů, a to v případě faktorů A a B. Účinnost těchto faktorů byla měřena jako průměr zóny inhibice v mm. Průměr disku byl v každém případě 6,35 mm.
Tabulka IV Průměr zón (mm)
Mikroorgani smus | Koncentrace Qug/disk) | A-40104 faktor A | A-40104 faktor В |
Staphylococcus aureus 30551 | 100 | 1 1 O | 27,1 |
Staphylococcus aureus 3055^ | IC | 27,2 | 18,9 |
Staphylococcus aureus 30742 | 100 | 29,2 | 25,4 |
Staphylococcus aureus 3074^ | 10 | 25,4 | 13,5 |
Staphylococcus aureus 3130^ | 100 | 34,0 | 29,5 |
Staphylococcus aureus 3130^ | 10 | 29,2 | 19,0 |
Streptococcus pyogenes | 100 | 27,0 | 23,0 |
Streptococcus pyogenes 4 | 10 | 21 ,0 | 19,0 |
Streptococcus sp. 9960^ | 100 | 8,7 | 0 |
Streptococcus sp. 9960^ | 10 | Q | 0 |
Diplococcus pneumoniae | 100 | 20,0 | 17,0 |
Diplococcus pneumoniae | 1 0 | 14,0 | 12,0 |
citlivý na 1 penicilín G penicilín-G г as i;: t en tní methicilin resistentni skupina A skupina D
Z tabulky V je zřejmé, že faktor A antibiotika A-40104 je možno srovnat s příznivým výsledkem s ampicilinem v radě pokusů ín vitro, které byly provedeny při použití z řeči ovací řady na agarových plotnách.
Tabulka V
Mikroorgani smus
MIC Qug/ml)
A-40104 faktor A Ampicilin
Streptococcus pyogenes
Streptococcus sp. X-66 (skupina D)
Streptococcus sp. 9960 (skupina D) Neisseria gonorrhea
Neisseria gonorrhea Sand.
Neisseria gonorrhea Lind.
Hemophilus influenzae Brun1 Hemophilus influenzae Dick.
Hemophilus inluenzae Laiv.1
Hemophilus influenzae 251
Hemophilus influenzae 259
Hemophilus influenzae 260 <0,01
0,5
0,5
0,07
0,5
0,7
0,7
0,7 <0,01
0,8
0,6
0,5
0,07
0,5
0,5
0,5
0,5
Faktor A antibiotika A-40104 má antimikrobiální účinnost in vivo proti experimentálním bakteriálním infekcím. Dvě dávky byly podány myším, pozorovaná účinnost byla měřena jako ED^q, tj. dávka v mg/kg, která chrání 50 % pokusných zvířat, jak bylo popsáno v publikaci Warren Wick a další, J. Bacteriol. 81 , 233 až 235 (1961). Hodnoty Εϋ^θ byly shrnuty v následující tabulce VI.
207693 8
Tabulka VI
Účinnost faktoru A antibiotika A-40104
Ж,krccI^g^E^nSmlUS | Cesta podání | W50*2 | Způsol | d infekce |
Staphylococcus aureus 3055 | podkožně | 15,7 | 1,260 | x intraperi- toneálně |
Streptococcus pyogenes C203 | podkožně | 3.6 | 195 | x kD^ ^trape^toneálně |
Streptococcus pneumoniae Park I | podkožně | 21 ,5 | 1,280 | x LDjq intrkperitoneH-ně |
Faktory A-40104 | rovněž inhibují | růst různých | anaerobních bakkerií. |
V tásleduuící tabulce VII je shrnuta účinnost faktoru A antibiotika A-40104, tak jak byla stanovena standardní zredovací řadou na agarovém prostředí.
Tabulka VIII
MIC Qg/ml)x
Mikroorganismus
Actinomyces | ^гссГИ | * 0,5 |
Clostriduím | pe^^ng^s | 8 |
dostr^um | septicum | 8 |
Elbaaterium | ae^ac^s | 16 |
Peptococcus | as aa c caa^y ti cus | *0,5 |
Pepi^o^us | převod | *0,5 |
PepPostгrptcccccus anaerobius | 7 | |
PepPostrrptococcus intermedius | *0^ | |
Ba^ero^es | fragilis 111 | 8 |
fragilis 1877 | 8 | |
íBktrrciUet | fragilis 1936B | 8 |
Ba^ero^es | thetaioaaomicron | 7 |
mee aninogmicus 1856/28 | 4 | |
meranincgrnicus 2773 | 4 | |
vulgátis | 4 | |
Ba a des | corrcdens | 8 |
Fusobaaterium | symbiosum | 4 |
Fusobacterim | í0,5 |
* MIC stanovy zřeSovací metodou na agaru. Koncové body byly odečítány po 24 hodinách inkubace.
Zvláštní výhodou a^d-b-otik A-40104 je poměrně nízká toxicita. Například LD^q pro faktor A při i^n1^:^í^p^ei'itn^ť^álnm podání u myši je vyšší než 300 mg/kg.
Účinnost proti mykoplasmatům je zvláště důležitým hlediskem ddшikrcbiélní účinnosti annibiotika A-40104. Mykoplasmata jsou pathogernií pro člověka a různá zvířata. Je proto zapoořebí účinných látek pro prevenci a léčbu těchto onemocnění u drůbeže, vepřů a skotu.
V násseddjící tabulce IX jsou uvedeny minimální inhibiční koncentrace faktoru A, antibictika A-40104 proti různým mykoplasmatům při stanovení zřeáovací řadou in vitro.
Tabulka IX
Minimální inhibiční koncentrace
Mikroorganismus
A-40104 faktor A
Mycoplasma galiieepičum <0,78
Mycoplasma synoviae
Myccplasma hyorhinia
Mycoplasma hyopneumoniae <0,78
1,56
0,195 t Diležitým hlediskem je použití antibiotika A-40104 k léčbě dysenterie vepřů. Jak bylo vysvětleno V. E. Brownem v US patentu č. 4 041 175, je pleurornutilin účinný při léčbě dysenterie vepřů. Nyní bylo zjištěno, ie antibioiStum A-401 04, vyrobené způsobem podle vynálezu je účinné proti Treponema hyoddssenteiae, to jest proti mikroorganismu, který • obvykle působí dyseeneeii vepřu- Účinnost byla stanovena in vitro, přičemž bylo užito dávek 50, 5,0, 0,5 a 0,05 na agarových plotnách s tryptikázou a sójou s obsahem 5% ^fibrnnova^ krve skotu. Povrch agaru byl očtován 0,1 ml 10-1 ředění suspenze T. hyodysenteriae. Plotny byly inkubovány za anaerobních podmínek čtyři dny a pak byly vyhodnoceny na přítomnost nebo růst hemmaybicktch t^a^ť^iac^nem^a;. Při tomto pokusu bylo prokázáno, že faktor A antibiotika A-40104 inhibuje růst T. hyodyseentriae v konccenraci 50, 5,0 a 0,5 jug/ml agaru.
Při pouští k léčbě dysennerie vepřů je možno podat antibioikuum A-40104 vepřům perorálně ve formě tablet, kíapssí, prášku apod. Je možno připravit veterinární prostředek, který obsahuje inertní nosič a jako účinnou složku antibioikkm A-40104. Výhodným způsobem podání je však včlenění antibiotika A-40104 do krmivá pro vepře.
Mimoto je možno anti-bicikum A-40104, vyrobené způsobem podle vynálezu užít proti druhu Pasteuuella. P. miltocida je například příčinou infekcí dýchacích cest u skotu, drůbeže a vepřů. P. hemuUySica je nejda šitější příčinou onemoonění dýchacích cest u skotu. Účinnost faktoru A proti Pasteurella byla stanovena standardním způsobem in vitro. VVsledky jsou uvedeny v tabulce X
Mikroorgani smus mic Qug/mi)
Faktor A, A-40104
Pasteurella multociУa (skot) Pasteurella mmutocida (krocan) Pasteurella hemooyyica
6,25
125
25,0
Je také možno vyrobbt farmaceutický prostředek, který by obsahoval inertní nosič a jako účinnou složku antibioiSlm A-40104 a byl by účinný prolti pathogenním mikroorganim^ů^m u člověka.
Dalším d^leži.ý^m hУediskeu je účinnost antibiotika A-40104 proti Spiroplasma citri. Spiroplasma citri je příčinou onemoonění citruoových plodů, další spiroplasmata nepříznivě ovlivňují růst kuklice. Při pokusech in vitro se SpiropУassa citri byYo zjištěno, že faktor A antibiotika A-40104 inhibuje S. citri v dávkách 0,01 ppm.
AAtibiotika A-40104 jsou také účinná proti organismům, které způsobuj onemoonění rostlin. NNaříkiad při apyikaci na list nebo do půdy je faktor A antibiotika A-40104 účinný proti piisním u fazoií i u ječmene, a to zejména při aplikaci do půdy, kdy ' je faktor A antibiotika A-40104 účinný v dávce 100 ppm, což znamená, ' že sloučeniny mmaí zřejmě system^^u účinnost. S^stemieká účinnost antibiotik je zviáště výhodná při potyačovéní organismů, pathogenních pro rostliny nebo Spiroplasmat.
Vynález bude osvětlen následujícími příklady.
Přikladl
A. Fermentace antibiotika A-40104 ve třepacích lahvích
Zralá kultura Clitopilus pseudopinsitus NRRL 1179 na Šikmém agaru se odebere sterilním nástrojem a asepticky se přenese na Šikmý agar následujícího složení.
Složka | Množství |
sacharóza melasa kukuřičný výluh sladový extrakt k2hpo4 enzymaticky hydrolyzovaný kasein* promytý agar deionizovaná voda do | 25 g * 36 g 6 g 10 g 2« · 10 g 25 g 1 litru |
* N-Z Čase, Humko, Sheffield, Norwich, N.Y.
Naočkovaný šikmý agar se inkubuje 14 dní při teplotě 30 °C. Zralá kultura na šikmém agaru se odebere sterilním nástrojem a mycelium z plochy přibližně 5 cm se užije к naočkování 50 ml vegetativního živného prostředí následujícího složení:
Složka | Množství |
glukóza dextrin z tapioky* práSkovaný sójový hydrolyzátxx vvv frakce pivovarských kvasnic voda z vodovodu do | 10 g 10 g 10 g 5 g 1 litru |
pH prostředí je 5,3 a je nutno ho připravit na 6,9 přidáním hydroxidu sodného x Stadex 11, A. E. Staley, Decatur, 111.
xx HySoy T. Humko Shefield, Norwich, N. Y. $ xxx Amber BYF300, Amber Laboratories, Juneau, Wisc.
Naočkované vegetativní prostředí se inkubuje v Erlenmeyerových baňkách o obsahu 250 ml při teplotě 25 °C 96 hodin na rotační třepačce při výkyvu 5 cm a při 250 otáčkách za minu- <
tu.
Inkubované vegetativní prostředí je možno užít přímo к inkubaci vegetativního živného prostředí ve druhém stupni. S výhodou je toto prostředí možno skladovat do dalšího použití tak, že se kultura skladuje nad kapalným dusíkem . К tomuto účelu se kultura dělí do malých lékovek tak, že do každé lékovky se uloží 4 ml inkubovaného vegetativního živného prostředí a 2 ml roztoku glycerinu a laktózy následujícího složení:
Složka | Množství |
glycerin laktóza deionizovaná voda do | 300 g 150 g 1 litru |
Připravené suspenze se skladují do použití nad kapalným dusíkem.
ml takto připravené skladované suspenze se užije к naočkování 50 ml vegetativního živného prostředí o složení, jaké bylo svrchu uvedeno pro vegetativní živné prostředí. Kultura se pak inkubuje v Erlenmeyerových baňkách se širokým hrdlem o obsahu 250 ml 4 dny při teplotě 25 °C na rotační třepačce s výkyvem 5 cm při 250 otáčkách za minutu.
B. Fermentace v tanku
Aby bylo možno získat větší objem očkovacího materiálu, užije se 10 ml svrchu uvedeného vegetativního prostředí z prvního stupně к naočkování 400 ml vegetativního živného prostředí z druhého stupně. Prostředí mé totéž složení, jaké bylo svrchu uvedeno pro vegetativní živné prostředí. Toto prostředí se inkubuje v Erlenmeyerových baňkách o obsahu 2 litry se širokým hrdlem 48 hodin při teplotě 25 °C na rotační třepačce při výkyvu 5 cm a 250 otáčkách za minutu.
800 ml takto inkubovaného vegetativního prostředí z druhého stupně se užije к naočkování 100 litrů sterilního produkčního prostředí následujícího složení:
Složka glukóza glycerin dextrin z tapioky sušené krmivo pro psy* extrakt z kvasnic
KC1
MgS04.7H20
FeSO4.7H2O
MnCl2.4H2O
ZnSO4.7H2O
CaCO^ deionizovaná voda do
Množství g/litr
0,5
0,1
0,05
0,05
0,1 litru pH se upraví na 5,0 4 N kyselinou chlorovodíkovou.
* Purina Dog Chow, Talston,Purina Co., St. Louis, Mo. 63188
Naočkované produkční prostředí se fermentuje ve fermentačním tanku o obsahu 165 litrů při teplotě 30 °C přibližně 12 dní. Fermentační prostředí se provzdušňuje sterilním vzduchem, přičemž se udržuje hladina rozpustného kyslíku na hodnotě 80 %.
Příklad 2
Fermentace se provádí stejným způsobem jako v příkladu 1, avšak užije se vegetativního živného prostředí následujícího složení:
Složka
Množství g/litr dextróza 5 galaktóza 5 glycerin 5 rozpustný škrob 5 extrakt z kvasnic 2 sušené krmivo pro psy* 5 sójový olej 2
Složka kukuřičný olej kh2po4
MgSOr7H2O
FeSO4.7H2O
CaCO^
MtfCL2.4H20
ZnSO4.7H2O deionizovaná voda do
MoOství g/litr
0,5 Ol
1,0
0,05
0,05 litru
Prostředí má pH 5,7 a je nutno jej upravit na pH 5,0 přidáním 4 N kyseliny chlorovodíkové.
* Pirina Dog Chow
Příklad 3
Fermentace se provádí stenem způsobem jako v příkladu 1, avšak užije se fermentačního prostředí následujícího složení:
Složka
Moosíví g/litr glukóza drt ze sójových bobů
MgSO4.7H2O
СаСОз deionizovaná voda do
7,5
1,0
2,0 litru
Prostředí má pH 7,4 a je nutno jej upravvt na 6,5 přidáním 4 N kyseliny chlorovodíkové.
Příklad 4
Izolace faktoru A a C antibiotika A-40104
500 litrů fermentačního prostředí, získaného způsobem podle příkladu 3 se zfiltruje, se jako pomocný prostředek při filtraci užije iofusorioiá hlinka, (Hyďlo Supper-cel, Johns-Maanílle Products Coor·), čímž se získá 3 640 litrů filtrátu. Mycceiální ' koláč se promyje deionizovanou vodou, čímž se získá dalších 1 820 litrů filtrátu. Filtráty se slijí a úhrnné mnnožtví filtrátu . 5 460 litrů se extrahuje bez úpravy pH polovičním objemem toluenu, čímž se po hodinové extrakci získá 2 500 litrů toluenového extraktu.
Tento toluenový extrakt obsahuje převážně faktor C annibiotika A-40104,to jest pleuromuuilin. Toluenový extrakt se zahnutí na objem 23 litry*
Dochází ke kryytalizaci 1 943 g faktoru C antibiotika A-40104 a vzniklé krystaly se oddělí filtrací. Matečný louh se zanuutí na objem 8 litrů a po kryytalizaci se oddělí další podíl 282 g faktoru C. Maaečný louh se znovu zahuutí na objem 6 litrů a chladí se na teplotu 4 °C po dobu 72 hodin, čímž se získá dalších 158 g faktoru C. Matečný louh se pak zahusaž na viskózní olejbvitou kapalinu, tato kapalina se rozputí v 6 litrech diethyletheru a roztok se chladí na teplotu 4 °C po dobu 72 hodin, čímž se získá ještě 112 g faktoru C antibiotika A-40104.
Vodný roztok, zbýv^í po toluenové extrakci se pak extrahuje hodinu polovičním objemem chloroformu. Takto získaný chloroformový extrak se zahustí na objem 10 litrů a pak se chladí na teplotu 4 °C po dobu 72 hodin. Kryytaly se odddlí filtrací, čímž se získá 588 g faktoru A antibiotika A-40104.
Příklad 5
Izolace komplexu A-40104 a faktoru B
214 litrů fermentačního prostředí, získaného způsobem, popsaným v příkladu 1 se zfiltruje při pouUití prostředku, usnacdíuUícího filtraci, čímž se získá 119 litrů filtrátu. Myceliální koláč se promyje vodou, čími se získá dalších 80 litrů filtrátu. Filtráty se slijí a 199 litrů takto získaného maateiálu se dvakrát extrahuje bez úpravy pH, pokaždé 80 litry ethylacetátu. Ethylacetátové extrakty se slijí a zahustí se ve vakuu na objem přibližné 2 litrů. Ke sraženině aktivníno komplexu se přidá 20 litrů hexanu. Takto vysrážený komplex se oddělí filtrací a pak se znovu rozpustí ve 300 ml ethylacetátu a znovu vyssráií hexanem. Sraženina se promyje hexanem a pak se usuší, čímž se získá 27,3 g antibiotického komplexu A-40104, který obsahuje faktory A, B, C.
g tohoto komplexu se rozpuutí ve 40 ml chloroformu. Chloroformový roztok se zfiltruje a filtrát se chromatoggafuje na otevřeném skleněném sloupci o rozměrech 5,6 x x 28 cm s náplní silikagelu (Woolm). Sloupec se naplní silikagelem v chloroformu, pak se promývá chlorffrrmem při průtokové rychlosti 2 ml za minutu, přičemž se odeebrají frakce o objemu 20 ml. U frakce č. 7 se rozpouštědlo změní e užije se směsi chloroformu a methanolu v poměru 95:5, u frakce č. 28 se rozpouštědlo opět změní na směs chloroformu a methanolu v poměru 9:1· Frakce č. 72 až 120 se slijí a odpaří do sucha ve vakuu, čímž se získají 4 g práškovitého matteiálu.
Daaší podíl fermentačního prostředí se zpracovává stejným způsobem, čímž se získá ještě 6 g stejného maateiálu. Oba vzorky se smísí a k 10 g takto získaného maatriálu se přidá 100 ml chloroformu. Maaeriálem, nerozpusnným v chloroformu je 1,6 g faktoru A antibiotika A-40104, tento mat^e^r^i^l se odddlí filtrací a filtrát se chromaaoggafuje na otevřeném skleněném sloupci o rozměrech 5,8 x 48 cm s náplní silikagelu (Woolm). Sloupec se plní suspenzí silikagelu v chloroformu, promyje se chlor ofrmmem a pak se vymývá směsí chloroformu a methanolu v poměru 97,5:2,5, přičemž se oddeírají frakce o objemu 20 ml při průtokové rychlosti 4 ml za minutu. Frakce č. 156 až 190 se slijí a odpaří dosucha ve vakuu. Odparek se rozpustí v malém objemu chloroformu, k roztoku se přidá hexan, čímž dojde k vysrážení výsledného produktu. Sraženina se odddlí filtrací a usuší se, čímž se získá 99 mg faktoru B antibiotika A-40104.
Claims (2)
1. Způsob výroby antibiotika A-40104 ve formě komplexu s obsahem faktorů A, B, D a pleuromuutlinu, vyzna^ící se tím, že se kultivuje CCitopilus pseudooinnitus NRRL 11179 v živném prostředí s obsahem vyižitelného zdroje uhlíku, dusíku a anorganických solí v submerz- ní kultuře za aerobních podmínek 2 a více dnů při teplotě 20 až 33 °C a výsledné antibiotikum se izoluje.
2. Způsob podle bodu 1 vyznatuSící se tím, že se fermentační prostředí zfiltruje s přísadou pomocného prostředku pro usnadnění filtrace, filtrát se extrahuje ethylacetáeem, přidá se hexan a výsledné antibiotkum A-40104 ve formě směsi se odcdl-í filtrací.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS80429A CS207694B2 (cs) | 1977-12-08 | 1980-01-22 | Způsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US05/858,505 US4129721A (en) | 1977-12-08 | 1977-12-08 | A-40104 antibiotics and process for production thereof |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS207693B2 true CS207693B2 (en) | 1981-08-31 |
Family
ID=25328466
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS788006A CS207693B2 (en) | 1977-12-08 | 1978-12-04 | Method of making the antibiotic a 40104 |
Country Status (28)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4129721A (cs) |
EP (1) | EP0002589B1 (cs) |
JP (1) | JPS5498701A (cs) |
AR (1) | AR224355A1 (cs) |
AT (1) | AT362060B (cs) |
AU (1) | AU4216378A (cs) |
BE (1) | BE872488A (cs) |
CA (1) | CA1135641A (cs) |
CH (2) | CH640265A5 (cs) |
CS (1) | CS207693B2 (cs) |
DD (1) | DD140477A5 (cs) |
DE (1) | DE2861930D1 (cs) |
DK (1) | DK147659C (cs) |
ES (1) | ES475853A1 (cs) |
FI (2) | FI59420C (cs) |
FR (1) | FR2411204A1 (cs) |
GB (1) | GB2009739B (cs) |
GR (1) | GR72460B (cs) |
HU (1) | HU179464B (cs) |
IE (1) | IE47532B1 (cs) |
IL (1) | IL56114A0 (cs) |
IT (1) | IT1100672B (cs) |
LU (1) | LU80617A1 (cs) |
NZ (1) | NZ189081A (cs) |
PH (1) | PH14843A (cs) |
PL (1) | PL211491A1 (cs) |
PT (1) | PT68858A (cs) |
ZA (1) | ZA786871B (cs) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4518691A (en) * | 1982-07-14 | 1985-05-21 | Repligen Corporation | In vitro enzymatic process for preparing glucuronides of ester-containing anticholinergics |
AT400674B (de) * | 1991-07-24 | 1996-02-26 | Biochemie Gmbh | Pharmazeutische pleuromutilin-zubereitung |
GB0218578D0 (en) * | 2002-08-09 | 2002-09-18 | Glaxo Group Ltd | Novel method |
TWI762573B (zh) | 2017-02-10 | 2022-05-01 | 奧地利商納畢瓦治療有限責任公司 | 截短側耳素之純化 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE1249657B (cs) * | 1964-04-17 | |||
US3949079A (en) * | 1964-04-17 | 1976-04-06 | Biochemie Ges.M.B.H. | Antibiotic derivatives |
-
1977
- 1977-12-08 US US05/858,505 patent/US4129721A/en not_active Expired - Lifetime
-
1978
- 1978-11-30 DK DK539178A patent/DK147659C/da not_active IP Right Cessation
- 1978-12-04 AR AR274675A patent/AR224355A1/es active
- 1978-12-04 FI FI783708A patent/FI59420C/fi not_active IP Right Cessation
- 1978-12-04 CS CS788006A patent/CS207693B2/cs unknown
- 1978-12-04 IL IL56114A patent/IL56114A0/xx unknown
- 1978-12-04 BE BE1009171A patent/BE872488A/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-12-04 FR FR7834108A patent/FR2411204A1/fr active Granted
- 1978-12-04 PT PT68858A patent/PT68858A/pt unknown
- 1978-12-04 FI FI801015A patent/FI801015A7/fi not_active Application Discontinuation
- 1978-12-04 PH PH21881A patent/PH14843A/en unknown
- 1978-12-04 AU AU42163/78A patent/AU4216378A/en active Pending
- 1978-12-04 NZ NZ189081A patent/NZ189081A/xx unknown
- 1978-12-05 CA CA000317427A patent/CA1135641A/en not_active Expired
- 1978-12-06 PL PL21149178A patent/PL211491A1/xx unknown
- 1978-12-06 IT IT30656/78A patent/IT1100672B/it active
- 1978-12-06 AT AT871478A patent/AT362060B/de not_active IP Right Cessation
- 1978-12-06 LU LU80617A patent/LU80617A1/xx unknown
- 1978-12-07 GR GR57812A patent/GR72460B/el unknown
- 1978-12-07 GB GB7847588A patent/GB2009739B/en not_active Expired
- 1978-12-07 JP JP15189878A patent/JPS5498701A/ja active Pending
- 1978-12-07 IE IE2420/78A patent/IE47532B1/en unknown
- 1978-12-07 HU HU78EI824A patent/HU179464B/hu not_active IP Right Cessation
- 1978-12-07 ES ES475853A patent/ES475853A1/es not_active Expired
- 1978-12-07 CH CH1249578A patent/CH640265A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1978-12-07 EP EP78300768A patent/EP0002589B1/en not_active Expired
- 1978-12-07 ZA ZA786871A patent/ZA786871B/xx unknown
- 1978-12-07 DE DE7878300768T patent/DE2861930D1/de not_active Expired
- 1978-12-08 DD DD78209625A patent/DD140477A5/de unknown
-
1982
- 1982-11-22 CH CH679682A patent/CH643298A5/fr not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SU1151218A3 (ru) | Способ получени антибиотика-макролида | |
JPH0734740B2 (ja) | 抗菌性cl−1577を生産できる放線菌 | |
JPS5878598A (ja) | 抗生物質LL―C23024βおよびイオタを生産することが可能な微生物 | |
IE841760L (en) | Antibiotics produced by kibdelosporangium aridum | |
HU190360B (en) | Process for preparing macrolide antibiotics | |
US4247542A (en) | A-40104 Antibiotics and process for production thereof | |
CS207693B2 (en) | Method of making the antibiotic a 40104 | |
EP0084826A2 (en) | Antibiotic compound | |
US4291021A (en) | Novel macrolide antibiotics and preparation thereof | |
SU517265A3 (ru) | Способ получени азотсодержащего антибиотика | |
SU751332A3 (ru) | Способ получени антибиотического комплекса а-35512 | |
FR1465395A (fr) | Composé nouveau, la décoyinine et son procédé de fabrication | |
HU190358B (en) | Process for preparing enduracidin | |
US4670260A (en) | Antibiotic for animal feeds | |
CN1068049C (zh) | 一种用吸水链霉菌生产抗生素的新方法 | |
EP0042172B1 (en) | Antibiotic compounds, pharmaceutical compositions containing such compounds, process for production thereof | |
FI78731C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av polyeterantibiotika x-14889 a, b, c och d. | |
US4346075A (en) | Antibiotic DC-11 and process for production thereof | |
US3598819A (en) | Quinoxaline derivatives and process for producing the same | |
EP0001287A1 (en) | Antibiotic No. 2-200, process for its production and pharmaceutical compositions containing Antibiotic No. 2-200 | |
EP0259778B1 (de) | Antibiotisch wirksames Gentisinsäurederivat | |
KR820002138B1 (ko) | A-40104 항생물질의 제조방법 | |
SE437917B (sv) | Djurfoder innehallande en ny kemisk forening som befremjar tillvexten och forbettrar fodertillgodogorandet hos djur | |
US5192748A (en) | Antibiotics unphenelfamycin and phenelfamycins A-D | |
CS207694B2 (cs) | Způsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A |