CS207694B2 - Způsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A - Google Patents
Způsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A Download PDFInfo
- Publication number
- CS207694B2 CS207694B2 CS80429A CS42980A CS207694B2 CS 207694 B2 CS207694 B2 CS 207694B2 CS 80429 A CS80429 A CS 80429A CS 42980 A CS42980 A CS 42980A CS 207694 B2 CS207694 B2 CS 207694B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- factor
- antibiotic
- medium
- fermentation
- culture
- Prior art date
Links
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title claims description 48
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 12
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 32
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 15
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 241001237959 Clitopilus Species 0.000 claims description 10
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 19
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 15
- ZRZNJUXESFHSIO-VYTKZBNOSA-N pleuromutilin Chemical group C([C@H]([C@]1(C)[C@@H](C[C@@](C)(C=C)[C@@H](O)[C@@H]2C)OC(=O)CO)C)C[C@]32[C@H]1C(=O)CC3 ZRZNJUXESFHSIO-VYTKZBNOSA-N 0.000 description 12
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 10
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 10
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZRZNJUXESFHSIO-UHFFFAOYSA-N Pleuromutilin Natural products CC1C(O)C(C)(C=C)CC(OC(=O)CO)C2(C)C(C)CCC31C2C(=O)CC3 ZRZNJUXESFHSIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 6
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 5
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 4
- 241000202915 Spiroplasma citri Species 0.000 description 4
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 4
- 241000194022 Streptococcus sp. Species 0.000 description 4
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 241000606124 Bacteroides fragilis Species 0.000 description 3
- 241000589893 Brachyspira hyodysenteriae Species 0.000 description 3
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 3
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 3
- 240000003183 Manihot esculenta Species 0.000 description 3
- 235000016735 Manihot esculenta subsp esculenta Nutrition 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001430197 Mollicutes Species 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000588652 Neisseria gonorrhoeae Species 0.000 description 3
- 241000606860 Pasteurella Species 0.000 description 3
- 241000606856 Pasteurella multocida Species 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 3
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 241000206591 Peptococcus Species 0.000 description 2
- 241001135223 Prevotella melaninogenica Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 2
- RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N Trifluoroethanol Chemical compound OCC(F)(F)F RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000002814 agar dilution Methods 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000002026 chloroform extract Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 2
- 229940051027 pasteurella multocida Drugs 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 2
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000012485 toluene extract Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- WOEPIQOANYGRGK-RJMJUYIDSA-N (2R,3R,4S,5R,6S)-2-(hydroxymethyl)-6-[(2R,3S,4R,5R)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane-3,4,5-triol propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O WOEPIQOANYGRGK-RJMJUYIDSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186046 Actinomyces Species 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000606125 Bacteroides Species 0.000 description 1
- 241000606123 Bacteroides thetaiotaomicron Species 0.000 description 1
- 241000588807 Bordetella Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000193468 Clostridium perfringens Species 0.000 description 1
- 241000193466 Clostridium septicum Species 0.000 description 1
- 241001262170 Collinsella aerofaciens Species 0.000 description 1
- 241000270722 Crocodylidae Species 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- 101100326341 Drosophila melanogaster brun gene Proteins 0.000 description 1
- 241000588878 Eikenella corrodens Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 241000605909 Fusobacterium Species 0.000 description 1
- 241000605952 Fusobacterium necrophorum Species 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N Methicillin Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2[C@@H](C(O)=O)C(C)(C)S[C@@H]21 RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N 0.000 description 1
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 1
- 241000204045 Mycoplasma hyopneumoniae Species 0.000 description 1
- 241000202942 Mycoplasma synoviae Species 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- 241000192035 Peptostreptococcus anaerobius Species 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241001474728 Satyrodes eurydice Species 0.000 description 1
- 241000202917 Spiroplasma Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 1
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- LNNWVNGFPYWNQE-GMIGKAJZSA-N desomorphine Chemical compound C1C2=CC=C(O)C3=C2[C@]24CCN(C)[C@H]1[C@@H]2CCC[C@@H]4O3 LNNWVNGFPYWNQE-GMIGKAJZSA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical class CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229940047650 haemophilus influenzae Drugs 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- -1 methanol or ethanol Chemical class 0.000 description 1
- 229960003085 meticillin Drugs 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 150000002888 oleic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- 229940075427 peptone,dried Drugs 0.000 description 1
- 229940074571 peptostreptococcus anaerobius Drugs 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu výroby antibiotika A-40104 faktoru A.
Tento faktor je derivát pleuromutilinu a D-xylózy a mé formu acetalu.
Antibiotikum pleuromutilln bylo izolováno roku 1951 a je popsáno v publikaci Kvanagh a další [Proč. Nati. Acad. Soc. 37. 570 až 574 (1951)]. Pleuromutilln je možno vyjádřit následujícím vzorcem
Alkalickou hydrolýzou pleuromutilinu vzniká sloučenina známá jako mutllin, který je možno vyjádřit následujícím vzorcem
OH
Byla připravena celé řada pleuromutilinových derivátů [švýcarský patent č. 572 894 (Derwent č. 26553X), nizozemský patent δ. 69,11083 (Derwent ¢. 40,642), Knauseder a další, US patent č. 3 919 290, Brandl a další, US patent δ. 3 949 079, Riedl, US patent δ.
979 423, Baughn a další, US patent č. 3 987 194, Egger a další, US patent δ. 4 032 530,
K. Riedl, Studies on Pleuromutilin and Some of Its Derivatives, J. Antibiotics 29. ,32 až 139, (1976), H. Egger a H. Relnshagen, New Pleuromutilin Derivatives wlth Enhanced Antimicrobial Aetivity. I. Sýnthesis, J. Antibiotics 22, 915 až 922 (1976) a II. Struoture-Activity Correlations, ibid., 923 až 927 ¢1976), F. Knauseder and E. Brandl, Pleuromutilinsí Fermentation, Structure and Biosynthesis, J. Antibiotics 22, ,25 až 131 (1976), J. Drews.a další, Antimicrobial Activitcs of 81.723 hfu, a New Pleuromutilin De rivative, Antimierob. Agents and Chemitherapy 2, 507 až 516 (1975)1.
Nyní bylo zjištěno, že existují další dvě nové antibiotika, která náleží rovněž do skupiny pleuromutilinu. Mimoto bylo možno navrhnout nový způsob výroby pleuromutilinu.
Předmětem vynálezu je způsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A, vyznačující se tím, že se pěstuje Clitopilus pseudopinsitus NRKL 11179 v živném prostředí s obsahem využitelných zdrojů uhlohydrétů, dusíku a anorganických soli v submerzní kultuře za aerobních podmínek alespoň dva dny při teplotě 20 až 33 °C a po skončené fermentaci se živné prostředí extrahuje chloroformem a antibiotikum A-40104 faktor A se z extraktu izoluje.
Fyzikální vlastnosti faktoru A antibiotika A-40104
Faktor A antibiotika A-40104 krystalizuje z chloroformu a má teplotu tání ,17 až 120 °C. Empirický vzorec faktoru A antibiotika A-40104 je ¢27^42^9’ ^elc 'W3·0 st®noveno elementární analýzou, molekulární hmotnost je 510, jak bylo stanoveno hmotovou spektrometrií.
Absorpční spektrum faktoru A antibitoika A-40104 v ultrafialovém světle ve trifluořethanolu mé absorpční maximum při 284 nm (e 32).
Spektrum faktoru A antibiotika A-40,40 při cirkulárnim dichroismu v trifluorethanolu má následující maxima:
Δε = +2,84 při 200 nm Δε = +172 při 295 nm.
Faktor A antibiotika A-40104 má následující specifickou otáčivost:
[n]25 _i4° (c = 1 ,o, C2H5OH).
Elektrometriekou titrací faktoru A antibiotika A-40140 v 66% vodném roztoku dimethylformamidu je možno prokázat nepřítomnost titrovatelných skupin.
Absorpční spektrum faktoru A antibiotika A-40,04 v KBr je znázorněna na obr. 1 na přiložených výkresech. Absorpční maxima je možno pozorovat při následujících frekvencích:
(cm-1)
| 3 590, 3 500, 3 450 (široké), | 3 280 | (široké) | , 2 990, 2 980, 2 960, 2 940, 2 920, 2 890, | |
| 2 860, 1 755, 1 735, | 1 645, 1 | 465, 1 | 447, 1 | 420, 1 380, 1 330, 1 310, 1 274, 1 240, 1 220, |
| 1 160, 1 117, 1 093, | 1 070, 1 | 060, 1 | 1 040, 1 | 014, 984, 955, 940, 921, 905, 865, 760, 742, |
698, 674, 603, 530 a 442.
Faktor A antibiotika A-40104 je rozpustný v alkoholech, například methanolu nebo ethanolu, částečně rozpustný v chloroformu a nerozpustný ve vodě.
Podle svých fyzikálních a chemických vlastností je faktor A antibiotika A-40104 pravděpodobně beta,D-xylopyranosylaoetonový derivát pleuromutilinu s následujícím vzorcem:
Kmen Clitopilus pseudopinsitus, vhodný pro produkci antibiotika A-40104 faktoru A byl získán z Centraalburesu voor Schimmelcultures (CBS) v Nizozemí. CBS kultura (CBS 270.36) byla klasifikována jako Octojuga pseudopinsite. Rodové jméno Clitopilus, které je synonymem pro Octojuga bude dále užíváno k označení užitého mikroorganismu. Schopnost této kultury vyrábět antibiotikum nebyla až dosud známa. Tato schopnost k produkci antibiotika A-40104 byla zjištěna při široce založených zkouškách s různými typy mikroorganismů.
Kmen Clitopilus pseudopinsitus, byl uložen ve veřejné sbírce Kultur Northern Marketing and Nutrition Research Division, US papartmen of Agriculture, Agricultural Research Service, Peoria, Illinois 61604, odkud je možmo jej získat pod číslem NRRL 11179.
Stejně jako je tomu u jiných mikroorganismů, vlastnosti kultury Clitopilus pseudopinsitus NRRL 11179, která produkuje antibiotikum A-40104 faktor A podléhají různým variacím. Například různé umělé varianty a mutanty kmene NRRL 11,79 je možno získat působením různých známých mutagenů, jako jsou ultrafialové paprsky, paprsky X, vysokofrekvenční vlny, radioaktivní paprsky a chemické látky. Všechny přírodní i umělé varianty a mutanty, které mají v podstatě stejné vlastnosti jako Clitopilus pseudopinsitus NRRL ,1,79 a produkují antibiotikum A-40140 je možno užít při provádění způsobu podle vynálezu.
živné prostředí, jehož se užije k pěstování Clitopilus pseudopinsitus NRRL 11179 může být velmi různé, Z hospodárných důvodů a pro získáni otpimálního výtěžku i pro snadnou izolaci jsou však výhodná některé zvláštní živná prostředí. Při fermentaoi ve velkém měřítku je například výhodným uhlohydrétovým zdrojem glukóza, dextrin z tapioky, škrob a kukuřičný olej, i když je možno užit také glycerol, maltózu, fruktózu a další zdroje. Dalšími výhodnými zdroji uhlíku jsou soli kyseliny olejové a laurové a lecitin. Výhodnými zdroji dusíku jsou so'jové mouka nebo extrakt z kvasnic.
Dalšími vhodnými zdroji dusíku jsou kvasnice, mouka z bavlníkových semen, arašídové mouka, pepton z masa, sušené krmivo pro psy. Přestože anorganické soli nejsou pro růst a produkci antibiotika podstatné, je možno přidávat rozpustné soli, které obsahují sodík, hořčík, vápník, amonný ion, chloridový ion, uhličitanový ion, síranový ion, dusičnanový ion apod. Produkci antibiotika je možno zlepšit například přidáním 0,05 % MgSO^.7H2O a 0,2 % CaCO^ do živného prostředí.
Do živného prostředí by měly být přidávány také základní stopové prvky, které jsou nutné pro růst a vývoj mikroorganismu. Tyto stopové prvky se obvykle běžně vyskytují jako nečistoty v ostatních živných látkách prostředí v množství, které je dostatečné vzhledem k růstovým požadavkům mikroorganismu.
Někdy může být zapotřebí přidat malé množství, tj. přibližně 0,2 ml/litr protipěnivého činidla, například polypropylenglykolu, protože zejména při fermentaci ve velkém měřítku se pěnění stává problémem.
Pro výrobu větěioh množství antibiotika A-40140 faktoru A je vhodné použít fermentaci v submerzní kultuře za aerobních podmínek ve velkých tankách. Malé množství antibiotika A-40104 faktoru A je možno získat v třepaeích lahvích. Protože období lag je obvykle velmi dlouhé při produkci antibiotika ve velkých tankách při použití malého množství kultury jako očkovacího materiálu, je výhodnější užít vegetativní očkovací materiál, který obsahuje větěí množství buněk v aktivním růstovém stádiu.
Vegetativní očkovací materiál se připraví tak, že se naočkuje malý objem živného prostředí fragmenty mycelia, čímž se získá čerstvé, aktivní rostoucí kultura mikroorganismu. Vegetativní očkovací materiál se pak přenese do většího tanku. Živné prostředí, užité pro růst vegetativního očkovacího materiálu může být stejné, jako pro pěstování ve větěím měřítku, je však možno užít i odlišného živného prostředí.
Mikroorganismus Clitopilus pseudopinsituš, který produkuje antibiotikum A-40104 faktor A je možno pěstovat v teplotním rozmezí 20 až 33 °C. K optimální produkci antibiotika A-40104 dochází při teplotách v blízkosti 30 °C.
Jak ja obvyklé při aerobní fermentaci v submerzních kulturách, vhání se do živného prostředí za stálého míchání sterilní vzduch. K účinnému růstu mikroorganismu je nutno dosta tečně provzdušňovat a míchat prostředí tak, aby hladina rozpuštěného kyslíku se udržovala co nejblíže k hodnotě 80 %. NižSí úroveň rozpuštěného kyslíku snižuje produkci faktoru A.
Vhodné inkubační doba pro produkci faktoru A antibiotika A-40140 je přibližně 12 dní. Přidáním kukuřičného oleje k živnému prostředí se podporuje přeměna faktoru C na faktor A v průběhu fermentace. Za podmínek, které jsou optimální pro produkci faktoru antibiotika A-40104 dochází k tomu, že faktor A tvoří 70 až 90 % veškerého vyprodukovaného antibiotika.
Zfiltrované živné prostředí se extrahuje chloroformem a faktor A antibiotika A-40104 se izoluje z chloroformového extraktu.
Účinnost antibiotika A-40104 faktoru A
Antibiotikum A-40104 faktor A inhibuje růst různých pathogenních mikroorganismů, zejména grampozitivních bakterií. Minimální inhibiční koncentrace (MIC) pro faktor A a pro různé bakterie jsou uvedeny v agarovém ředění v následující tabulce III
Tabulka III
MIC Qug/ml)
Mikroorganismus A-40104 faktor A
Staphylococus aureus 3055 <0,5
Staphylococcus aureus 3074 <0,5
Streptococeus faecalis <0,5
Bordetella bronehiseptica <0,5
Antibiotikum A-40104 faktor A je účinné také proti mikroorganismům, které jsou odolné proti jiným antibiotikům. V následující tabulce IV je uvedeno shrnutí výsledků která byly získány na agarových plotnách při použití disků s antibiotikem A-40104 faktoru A při použití různých mikroorganismů. Účinnost byla měřena jako průměr zóny inhibice v mm. Průměr disku byl v každém případě 6,35 mm·
IV
Průměr zón (mm)
| Mikroorgani smus | Koncentrace (jug/disk) | A-40104 faktor A |
| Staphylococcus aureus 30551 | 100 | 31,2 |
| Staphylococcus aureus 30551 | 10 | 27,2 |
| Staphylococcus aureus 30742 | 100 | 29,2 |
| Staphylococcus aureus 30742 | 10 | 25,4 |
| Staphylococcus aureus 3130^ | 1 00 | 34,0 |
| Staphylococcus aureus 3130^ | 10 | 29,2 |
| A, Streptococcus pyogenes | 100 | 27,0 |
| Streptococcus pyogenes | 10 | 21 ,0 |
| Streptococcus sp. 9960^ | 100 | 8,7 |
| Streptococcus sp. 9960^ | 10 | 0 |
| Diplococcus pneumoniae | 100 | 20,0 |
| Diplococcus pneumoniae | 10 | 14,0 |
citlivý na ’ penicilín G penicilin-G resistentní methicilin resistentní skupina A skupina D
Z tabulky V je zřejmé, že faktor A antibiotika A-40104 je možno srovnat s příznivým výsledkem s ampicilinem v řadě pokusů in vitro, které byly provedeny při použití zřeňovací řady na agarových plotnách.
Tabulka
| k a V | MIC | |
| ((Ug/ml) | ||
| Mikroorganismus | A-40104 faktor A | Ampicilin |
| Streptococcus pyogenes | <0,01 | <0,01 |
| Streptococcus sp. X-66 (skupina D) | 0,5 | 0,8 |
| Streptococcus sp. 9960 (skupina D) | 70 | 0,6 |
| Neisseria gonorrhea | 0,5 | 0,5 |
| Neisseria gonorrhea Sand. | 0,07 | 0,07 |
| Neisseria gonorrhea Lind. | 0,5 | 0,5 |
| Hemophilus influenzae Brun’ | 2 | 0,5 |
| Hemophilus influenzae Dick.1 | 2 | 0,5 |
| Hemophilus influenzae Laiv.1 | 4 | 0,5 |
| Hemophilus influenzae 2512 | 0,7 | 70 |
| Hemophilus influenzae 2592 | 0,7 | 70 |
| Hemophilus influenzae 2602 | 0,7 | 70 |
Faktor A antibiotika A-40104 má antimikrobiální účinnost in vivo proti experimentálním bakteriálním infekcím. Dvě dávky byly podány myším, pozorovaná účinnost byla měřena jako ED50’ dávka v mg/kg, která chrání 50 % pokusných zvířat, jak bylo popsáno v publikaci ďarren tVick a další, J. Bacteriol. 81 , 233 až 235 (1961). Hodnoty byly shrnuty v následující tabulce VI.
Tabulka VI
Účinnost faktoru A antibiotika A-40104
Mikroorganismus
Staphyloeocous aureus 3055 Streptococcus pyogenes C203 Streptoooocus pneumoniae Park I
| Cesta podání | ^50* | Způsob infekce |
| podkožně | 15,7 | 1 ,260 x intraperitoneálně |
| podkožně | 3,6 | 195 x LDjq intraperitoneálně |
| podkožně | 21,5 | 1,280 x LD^q intraperitoneálně |
Faktor A antibiotika A-40104 rovněž inhibuje růst různých anaerobních bakterií.
V následující tabulce VIII je shrnuta účinnost faktoru A antibiotika A-40104, tak jak byla stanovena standardní zředevací řadou na agarovém prostředí.
| a b | u 1 k a | VIII | |
| Mikroogranismus | MIC (jug/ml)* | ||
| Actinomyces israelli | *0,5 | ||
| Clostridium perfringens | 8 | ||
| Clostridium septicum | 8 | ||
| Eubacterium aerofaciens | 16 | ||
| Peptococcus prevoti | *0,5 | ||
| Peptococcus asaccharolytious | * 0,5 | ||
| Peptostreptococcus anaerobius | 2 | ||
| Peptostreptoeoccus intermedius | *0,5 | ||
| Bacteroides fragilis 111 | 8 | ||
| Bacteroides fragilis 1877 | 8 | ||
| Bacteroides fragilis 1936B | 8 | ||
| Bacteroides thetaiotaomicron | 2 | ||
| Bacteroides melaninogenicus 1856/28 | 4 | ||
| Bacteroides melaninogenicus 2736 | 4 | ||
| Bacteroides vulgaris | 4 | ||
| Bacteroides corrodens | 8 | ||
| Fusobacterium symbiosum | 4 | ||
| Fusobacterium necrophorum | *0,5 | ||
| MIC | stanoveny | zřeSovací metodou na agaru. Koncové body | byly odečítány po 24 hodinách |
| inkubace. |
LD^q pro faktor A při intraperltoneálním podání u myší je vySší než 300 mg/kg.
Účinnost proti mykoplasmatům je zvláště důležitým hlediskem antimikrobiální účinnosti antibiotika A-40104 faktoru A. Mykoplasmata jsou pathogenní pro člověka a různá zvířata. Je proto zapotřebí účinných látek pro prevenci a léčbu těchto onemocnění u drůbeže, vepřů a skotu.
V následující tabulce IX jsou uvedeny minimální inhibiční koncentrace faktoru A, antibiotika A-40104 proti různým mykoplasmatům při stanovení zřeSovací řadou in vitro.
Tabulka IX
Minimální inhibiční koncentrace
Mikroorganismus
A-40104 faktor A
Mycoplasma galiisepticum Mycoplasma synoviae Myooplasma hyorhinia Mycoplasma hyopneumoniae <0,78 <0,78
1,56 0,195
Důležitým hlediskem je použití antibiotika A-40104 faktoru A k léčbě dysenterie vepřů. Jak bylo vysvětleno W. E. Brownem v US patentu č. 4 041 175, je pleuromutilin účinný při léčbě dysenterie vepřů. Nyní bylo zjištěno, že antibiotikum A-40104 faktor A, vyrobené způsobem podle vynálezu je účinné také proti Treponema hyodysenteriae, to jest proti mikroorganismu, který obvykle působí dysenterii vepřů. Účinnost byla stanovena in vitro, přičemž bylo užito dávek 50, 5,0, 0,5 a 0,05jug/ml na agarových plotnách s tryptikézou a sójou s obsahem 5 % defibrinované krve skotu. Povrch agaru byl očkován 0,1 ml 10' ředění suspenze T. hyodysenteriae. Plotny byly inkubovány za anaerobních podmínek čtyři dny a pak byly vyhodnoceny na přítomnost nebo růst hemolytiokých treponemat. Při tomto pokusu bylo prokázáno, že faktor A antibiotika A-40104 inhibuje růst T. hyodysenteriae v koncentraci 50, 5,0 a 0,5 jug/ml.
Při použití k léčbě dysenterie vepřů je možno podat antibiotikum A-40104 faktor A vepřům perorálně ve formě tablet, kapslí, prášku apod. Je možno připravit veterinární prostředek, který obsahuje inertní nosič a jako účinnou složku antibiotikum A-40104.
Výhodným způsobem podání je však včlenění antibiotika A-40104 faktoru A do krmivá pro vepře.
Mimoto je možno antibiotikum A-40104, faktor A, vyrobené způsobem podle vynálezu užít proti druhu Pasteurella. P. multocida je například příčnou infekcí dýchacích cest u skotu, drůbeže a vepřů. P. hemolytica je nejčastější příčinou onemocnění dýchacích cest u skotu. Účinnost faktoru A proti Pasteurella byla stanovena standardním způsobem in vitro. Výsledky jsou uvedeny v tabulce X.
Tabulka X
MIC Qug/ml)
Mikroorgani smus
Faktor A - A-40104
Pasteurella multocida (skot) Pasteurella multocida (krocen) Pasteurella hemolytica
6,25
12,5
25,0
Je také možno vyrobit farmaceutický prostředek, který by obsahovat inertní nosič a jako účinnou složku antibiotikum A-40104 a byl by účinný proti pathogenním mikroorganismům u člověka.
Dalším důležitým hlediskem je účinnost antibiotika A-40104 proti Spiroplasma citri. Spiroplasma citri je příčinou onemocněni citrusových plodů, další epiroplasmata nepříznivě ovlivňují růst kukuřice. Při pokusech in vitro se Spiroplasma citri bylo zjištěno, že faktor A antibiotika A-40104 inhibuje S. citri v dávkách 0,01 ppm.
Antibiotikum A-40104 faktor A je také účinný proti organismům, které způsobují onemocnění rostlin. Například při aplikaci na list nebo do půdy je faktor A antibiotika A-40104 účinný proti plísním u fazolí i u ječmene, a to zejména při aplikaci do půdy, kde je faktor
A antibiotika A-40104 účinný v dávce 100 ppm, což znamená, že sloučeniny mají zřejmě eystemiekou účinnost. Systemieká účinnost antibiotik je zvláště výhodná při potlačování organismů, pathogenníoh pro rostliny nebo Spiroplasmat.
Vynález bude osvětlen následujícími příklady.
Přiklad 1
A. Fermentace antibiotika A-40104 ve třepacích lahvích
Zralé kultura Clitopilus pseudopinsitus NRRL 11179 na šikmém agaru se odebere sterilním nástrojem a asepticky se přenese na šikmý agar následujícího složení:
| Složka | Množství |
| sacharóza | 25 g |
| melasa | 36 g |
| kukuřičný výluh | 6 g |
| sladový extrakt | 10 g |
| k2hpo4 | 2 g |
| enzymaticky hydrolyzovený kasein* | 10 g |
| promytý agar | 25 g |
| deionizovaná voda do | 1 litru |
* N-Z Čase, Humko Sheffield, Norwich, N.Y.
Naočkovaný šikmý agar se inkubuje 14 dní při teplotě 30 °C. Zralá kultura na šikmém p
agaru se odebere sterilním nástrojem a mycelium z plochy přibližně 5 cm se užije k naočkování 50 ml vegetativního živného prostředí následujícího složení:
Složka Množství glukóza 1 0 g dextrin z tapioky* 10 g práškovaný sójový hydrolyzát** 10 g frakce pivovarských kvasnic*** 5 g voda z vodovodu do 1 litru pH prostředí je 5,3 a je nutno ho upravit na 6,9 přidáním hydroxidu sodného * Stadex 11, A. E. Staley, Decatur, 111.
** HySoy T. Humko Sheffield, Nerwich, N. Y.
*** Amber BYF300, Amber Laboratories, Juneau, Wisc.
Naočkované vegetativní prostředí se inkubuje v Erlenmeyerových baňkách o obsahu 250 ml při teplotě 25 °C 96 hodin na rotační třepačce při výkyvu 5 cm a při 250 otáčkách za minutu.
Inkubované vegetativní prostředí je možno užít přímo k inkubaci vegetativního živného prostředí ve druhém stupni. S výhodou je toto prostředí možno skladovat do dalšího použití tak, že se kultura skladuje nad kapalným dusíkem. K tomuto účelu se kultura dělí do malých lékovek tak, že do každé lékovky se uloží 4 ml inkubovaného vegetativního živného prostředí a 2 ml roztoku glycerinu a laktózy následujícího složení:
Složka
Množství glycerin 100 g laktóza 150 g deionizovaná voda do 1 litru
Připravené suspenze se skladují do použití nad kapalným dusíkem.
ml takto připravené skladované suspenze se užije k naočkování 50 ml vegetativního živného prostředí o uložení, jaké bylo svrchu uvedeno pro vegetativní živné prostředí. Kultura se pak inkubuje v Erlenmeyerových baňkách se širokým hrdlem o obsahu 250 ml 4 dny při teplotě 25 °C na rotační třepačce s výkyvem 5 cm při 250 otáčkách za minutu.
B. Fermentace v tanku
Aby bylo možno získat větší objem očkovacího materiálu, užije se 10 ml svrchu uvedeného vegetativního prostředí z prvního stupně k naočkování 400 ml vegetativního živného prostředí z druhého stupně. Prostředí mé totéž složení, jaké bylo svrchu uvedeno pro vegetativní živné prostředí. Toto prostředí se inkubuje v Erlenmeyerových baňkách o obsahu 2 litry se širokým hrdlem 48 hodin při teplotě 25 °C na rotační třepačce při výkyvu 5 cm a 250 otáčkách za minutu.
800 ml takto inkubovaného vegetativního prostředí z druhého stupně se užije k naočkování 100 litrů sterilního produkčního prostředí následujícího složení:
| Složka | Množství g/litr |
| glukóza | 15 |
| glycerin | 5 |
| dextrin z tapioky | 30 |
| sušené krmivo pro psyx | 25 |
| extrakt z kvasnic | 5 |
| KC1 | 1 |
| MgS04.7H20 | 0,5 |
| FeS04.7H20 | 0,1 |
| MnCl2.4H2Q | 0,05 |
| ZnSO2.7H2O | 0,05 |
| CaCO^ | 0,1 |
| deionizovaná voda do | 1 litru |
pH se upraví na 5,0 4N kyselinou chlorovodíkovou.
* Purina Dog Chow, Talston Purina Co., St. Louis, Mo. 63188
Naočkované produkční prostředí se fermentuje ve fěrmentačním tanku o obsahu 165 litrů při teplotě 30 °C přibližně 12 dní. Fermentační prostředí se provzdušňuje sterilním vzduchem, přičemž se udržuje hladina rozpustného kyslíku na hodnotě 80 %.
Příklad 2
Fermentace se provádí stejným způsobem jako v příkladu 1, avšak užije se vegetativního živného prostředí následujícího složení:
Složka
Množství g/litr dextróza 5 galaktóza 5 glycerin 5 rozpustný škrob 5 extrakt z kvasnic 2 sušené krmivo pro psyx 5 sójový olej 2 kukuřičný olej 2
Složka
ΚΗ2Ρ04
MgSO4.7H2O
PaSO4.7H2O
CaCOj
MgCl2.4H2O ZnS04.7H20 deionizovaná voda do
Prostředí mé pH 5,7 a je nutno jej upravit kové.
* Purina Dog Chow
Přiklad 3
Množství g/litr
0,5 0,1 1,0 0,05 0,05 1 litru na pH 5,0 přidáním 4N kyseliny chlorovodíFermentace se provádí stejným způsobem jako v příkladu 1, avšak užije se fermentačního prostředí následujícího složení:
Složka
Množství g/litr glukóza drt ze sójových bobů
MgS04.7H20
CaCOj deionizovaná voda do
7,5 1 ,0 2,0 litru
Prostředí má pH 7,4 a je nutno jej upravit na 6,5 přidáním 4N kyseliny chlorovodíkové .
Příklad 4
Izolace faktoru A antibiotika A-40104
500 litrů fermentačního prostředí, získaného způsobem podle příkladu 3 se zfiltruje, přičemž se jako pomocný prostředek při filtraci užije infusoriová hlinka, (Hyflo Supper-cel Johns-Manville Products Corp.), čímž se získá 3 640 litrů filtrátu. Myceliální koláč se promyje deionizovanou vodou, čímž se získá dalších 1 820 litrů filtrátu. Filtráty se slijí a úhrnné množství filtrátu 5 460 litrů se extrahuje bez úpravy pH polovičním objemem toluenu, čímž se po hodinové extrakci získá 2 500 litrů toluenového extraktu. Tento toluenový extrakt obsahuje převážné faktor C antibiotika A-40104 to jest pleuromutilin.
Vodný roztok, zbývající po toluenové extrakci se pak‘extrahuje hodinu polovičním objemem chloroformu. Takto získaný chloroformový extrakt se zahustí na objem 10 litrů a pak se chladí na teplotu 4 °C po dobu 72 hodin. Krystaly se oddělí filtrací, čímž se získá 588 g faktoru A antibotika A-40104.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUZpůsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A, vyznačující se tím, že se pěstuje Clitopilus pseudopinsitus NEEL 11179 v živném prostředí s obsahem využitelných zdrojů uhlohydrétů, dusíku a anorganických solí v submerzní kultuře za aerobních podmínek alespoň 2 dny při teplotě 20 až 33 °C a po skončené fermentaci se živné prostředí extrahuje chloroformem a antibiotikum A-40104 faktor A se z extraktu izoluje.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS80429A CS207694B2 (cs) | 1977-12-08 | 1980-01-22 | Způsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/858,505 US4129721A (en) | 1977-12-08 | 1977-12-08 | A-40104 antibiotics and process for production thereof |
| CS788006A CS207693B2 (en) | 1977-12-08 | 1978-12-04 | Method of making the antibiotic a 40104 |
| CS80429A CS207694B2 (cs) | 1977-12-08 | 1980-01-22 | Způsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS207694B2 true CS207694B2 (cs) | 1981-08-31 |
Family
ID=25746544
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS80429A CS207694B2 (cs) | 1977-12-08 | 1980-01-22 | Způsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS207694B2 (cs) |
-
1980
- 1980-01-22 CS CS80429A patent/CS207694B2/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3952095A (en) | Novel antibiotic and a process for the production thereof | |
| US4115552A (en) | Factor A and B of antibiotic A-4696 | |
| JPH0631279B2 (ja) | 抗菌／抗腫瘍性化合物およびその製法 | |
| US4064233A (en) | Antibiotic A-4696 | |
| US4559301A (en) | Process for preparing macrocin derivatives | |
| US3995027A (en) | Anti-viral method in animals | |
| IE46719B1 (en) | Thienamycin derivatives | |
| HU190360B (en) | Process for preparing macrolide antibiotics | |
| US4247542A (en) | A-40104 Antibiotics and process for production thereof | |
| EP0345735A2 (en) | Glycoside antibiotics BU-3608D and BU-3608E | |
| US3049534A (en) | Antibiotic and process of producing the same | |
| US4129721A (en) | A-40104 antibiotics and process for production thereof | |
| CS207694B2 (cs) | Způsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A | |
| HU190358B (en) | Process for preparing enduracidin | |
| EP0009636A2 (en) | 3-Chloro-6-hydroxy-5-methylbenzoic acid derivatives, corresponding pharmaceutical preparations, growth promoting compositions, the use of the compounds for promoting growth in certain animals and their manufacture | |
| US4770876A (en) | Microbiological production of livestock growth-promoting agent | |
| FI78731C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av polyeterantibiotika x-14889 a, b, c och d. | |
| CA1054082A (en) | Antibiotic | |
| US4476139A (en) | Discovery of antibiotic L-681,217 in fermentation broth | |
| US3598819A (en) | Quinoxaline derivatives and process for producing the same | |
| PL185620B1 (pl) | Sposób wytwarzania kwasu klawulanowego | |
| IL38693A (en) | Antibiotic a-4696 | |
| DE3511753A1 (de) | Verwendung von efomycinen als wachstumsfoerderer, efomycine und ihre herstellung | |
| NO772766L (no) | Nytt antibiotikum. | |
| US4262002A (en) | Discovery of A73A, a new efrotomycin-like antibiotic in fermentation broth |