PL185620B1 - Sposób wytwarzania kwasu klawulanowego - Google Patents
Sposób wytwarzania kwasu klawulanowegoInfo
- Publication number
- PL185620B1 PL185620B1 PL97329291A PL32929197A PL185620B1 PL 185620 B1 PL185620 B1 PL 185620B1 PL 97329291 A PL97329291 A PL 97329291A PL 32929197 A PL32929197 A PL 32929197A PL 185620 B1 PL185620 B1 PL 185620B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- source
- fermentation
- phosphorus
- nitrogen
- concentration
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 42
- HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N Clavulanic acid Natural products OC(=O)C1C(=CCO)OC2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 28
- HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N clavulanic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1C(=C/CO)/O[C@@H]2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N 0.000 title claims abstract description 27
- 229960003324 clavulanic acid Drugs 0.000 title claims abstract description 27
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 62
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 62
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 61
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims abstract description 38
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims abstract description 38
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 37
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 30
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 18
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims abstract description 7
- 241000894007 species Species 0.000 claims abstract 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 claims description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 claims description 8
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 claims description 8
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 7
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 5
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- PHYFQTYBJUILEZ-IUPFWZBJSA-N triolein Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PHYFQTYBJUILEZ-IUPFWZBJSA-N 0.000 claims description 4
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 4
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 3
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 2
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 claims description 2
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 claims description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical group [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- BAECOWNUKCLBPZ-HIUWNOOHSA-N Triolein Natural products O([C@H](OCC(=O)CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC)C(=O)CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC BAECOWNUKCLBPZ-HIUWNOOHSA-N 0.000 claims 1
- PHYFQTYBJUILEZ-UHFFFAOYSA-N Trioleoylglycerol Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC PHYFQTYBJUILEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 7
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 6
- 241000187180 Streptomyces sp. Species 0.000 description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 5
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 5
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 5
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 5
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 4
- ABVRVIZBZKUTMK-JSYANWSFSA-M potassium clavulanate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)[C@H]1C(=C/CO)/O[C@@H]2CC(=O)N21 ABVRVIZBZKUTMK-JSYANWSFSA-M 0.000 description 4
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- -1 alkali metal salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 3
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 3
- YTPMCWYIRHLEGM-BQYQJAHWSA-N 1-[(e)-2-propylsulfonylethenyl]sulfonylpropane Chemical compound CCCS(=O)(=O)\C=C\S(=O)(=O)CCC YTPMCWYIRHLEGM-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 2
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 241000424942 Streptomyces clavuligerus ATCC 27064 Species 0.000 description 2
- 241001655322 Streptomycetales Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N nitrogen oxide Inorganic materials O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 description 2
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 description 2
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 3-(N-morpholino)propanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCCN1CCOCC1 DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- 229910016502 CuCl2—2H2O Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 229910017234 MnSO4 H2O Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910017237 MnSO4-H2O Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910017228 MnSO4—H2O Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000187215 Streptomyces jumonjinensis Species 0.000 description 1
- WKDDRNSBRWANNC-ATRFCDNQSA-N Thienamycin Chemical compound C1C(SCCN)=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@H]([C@H](O)C)[C@H]21 WKDDRNSBRWANNC-ATRFCDNQSA-N 0.000 description 1
- WKDDRNSBRWANNC-UHFFFAOYSA-N Thienamycin Natural products C1C(SCCN)=C(C(O)=O)N2C(=O)C(C(O)C)C21 WKDDRNSBRWANNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960004920 amoxicillin trihydrate Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003781 beta lactamase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 1
- 229940126813 beta-lactamase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- ISPYRSDWRDQNSW-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate monohydrate Chemical compound O.[Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O ISPYRSDWRDQNSW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 239000012092 media component Substances 0.000 description 1
- 229960003753 nitric oxide Drugs 0.000 description 1
- 229910017464 nitrogen compound Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002830 nitrogen compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000019391 nitrogen oxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 239000002132 β-lactam antibiotic Substances 0.000 description 1
- 229940124586 β-lactam antibiotics Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/188—Heterocyclic compound containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen atoms and oxygen atoms as the only ring heteroatoms
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
1. Sposób wytwarzania kwasu klawulanowego lub jego soli, przez fermentacje gatunku Streptomyces produkujacego kwas klawulanowy w brzeczce fermentacyjnej zawierajacej przyswajalne zródla wegla i azotu oraz zródlo fosforu, znamienny tym, ze w fazie wzro- stowej fermentacji dodaje sie dalsze zródlo fosforu utrzymujac stezenie fosforu w zakresie 0,0015% do 0,15% i ewentualnie w trakcie fermentacji dodaje sie dalsze zródla przyswa- jalnego wegla i azotu, po czym z brzeczki fermentacyjnej wyodrebnia sie kwas klawula- nowy lub jego sól. PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania kwasu klawulanowego.
Kwas klawulanowy jest powszechnie przyjętą nazwą dla kwasu (2R,5R,Z)-30(2hydroksyetylideno)-7-okso-4-oksa-1-azabicyklo-[3.2.0]heptano-2-karboksylowego. Kwas ten i jego sole z metalami alkalicznymi oraz estry stanowią aktywne inhibitory beta laktamazy
185 620 produkowanej przez niektóre mikroorganizmy Gram dodatnie oraz Gram ujemne. Poza inhibitowaniem beta laktamazy, kwas klawulanowy i jego sole z metalami alkalicznymi mają również działanie synergiczne z antybiotykami penicylinowymi i cefalosporynowymi. Kwas klawulanowy i jego sole są stosowane w preparatach farmaceutycznych w celu zapobiegania dezaktywacji antybiotyków beta laktamowych. Preparaty dostępne w handlu zawierają klawulanian potasu w połączeniu z trójwodzianem amoksycyliny. Klawulanian potasu jest bardziej trwały niż womy kwas lub inne sole.
Kwas klawulanowy otrzymuje się przez fermentację mikroorganizmów takich jak szczepy Streptomyces, na przykład S.clavuligerus NRRL 3585, S.jumonjinensis NRRL 5741 i S.katsurahamanus IFO 13716 oraz Streptomyces sp.P6621 KERM P2804. Wodne hodowle otrzymane po fermentacji oczyszcza się i zatęża zgodnie ze znanymi sposobami, na przykład przez filtrację i oczyszczanie chromatograficzne, jak opisano w opisie patentowym GB 1508977, a następnie ekstrakcję wodnego roztworu rozpuszczalnikiem organicznym, otrzymując roztwór zanieczyszczonego kwasu klawulanowego w rozpuszczalniku.
W publikacjach W095/23870 i W096/28452 ujawniono ulepszony sposób przemysłowy oczyszczania kwasu klawulanowego i wytwarzania klawulanianu potasu. Rozwój mikroorganizmu produkującego antybiotyk może obejmować dwie fazy, fazę wzrostową, w której produkowana jest biomasa i następnie fazę stacjonarną, podczas której nie następuje wzrost. Metabolity wtórne takie jak antybiotyki zwykle produkowane są podczas fazy stacjonarnej.
Procesy produkcyjne zasilane składnikami pożywek podczas fermentacji są dobrze znane w produkcji antybiotyków i były uznane za korzystne przy wytwarzaniu kwasu klawulanowego. Kontrola i utrzymanie pożądanych poziomów źródeł przyswajalnego azotu i węgla w brzeczce fermentacyjnej są dobrze zilustrowane przez J. S. Lee i wsp., Kor. Jour. Microbiol. 1978, tom 15, nr 1, str. 21-29, który opisał ulepszenie procesu fermentacyjnego w celu wytwarzania penicyliny, poprzez regulację dodawania źródeł przyswajalnego azotu i węgla zgodnie z potrzebami mikroorganizmów w fermentorze. G.Lilley i wsp. J.Chem.Tech. Biotechnol. 1981, tom 31, str. 127-134 wykazali, że produkcja antybiotyków przy użyciu gatunku Streptomyces może być regulowana przez zmianę stężenia źródeł przyswajalnego azotu i węgla oraz źródła fosforu. Na przykład, wytwarzanie tienamycyny w fermentorze nie rozpocznie się dopóki stężenie fosforu nie zbliży się do zera. W opisie EP 182522 przedstawiono zastosowanie ciągłego lub przerywanego dodawania źródła przyswajalnego węgla podczas fermentacji S. Clavuligerus NRRL 3585. Regulowanie ilości amoniaku ujawniono w WO 96/18743. Jednak ciągły proces fermentacji nie został ujawniony w celu wytwarzania kwasu klawulanowego.
Wynalazek bazuje na nieoczekiwanym stwierdzeniu, że utrzymywanie stężenia fosforu podczas fermentacji gatunku Streptomyces produkującego kwas klawulanowy w brzeczce fermentacyjnej zawierającej źródła przyswajalnego źródła węgla i azotu w pewnych określonych i regulowanych granicach wybitnie zwiększa wydajność kwasu klawulanowego w procesie.
Sposób wytwarzania kwasu klawulanowego lub jego soli, przez fermentację gatunku Streptomyces produkującego kwas klawulanowy w brzeczce fermentacyjnej zawierającej przyswajalne źródła węgla i azotu oraz źródło fosforu, polega na tym, że w fazie wzrostowej fermentacji dodaje dalsze źródło fosforu utrzymując stężenie fosforu w zakresie 0,0015% do 0,15% i ewentualnie w trakcie fermentacji dodaje się dalsze źródła przyswajalnego węgla i azotu, po czym z brzeczki fermentacyjnej wyodrębnia się kwas klawulanowy lub jego sól.
Proces ten korzystnie prowadzi się w sposób periodyczny, przy ciągłym lub nieciągłym dodawaniu źródła fosforu.
Podczas całej fazy wzrostowej reguluje się poziom fosforu, zaś po ustaniu fazy wzrostowej pozwala się na obniżenie stężenia fosforu, zazwyczaj następuje to po 40 godzinnym okresie fermentacji. Przez okres fermentacji do 40 godziny utrzymuje się stężenie fosforu w zakresie 0,0015% do 0,15%, korzystnie w zakresie 0,002 do 0,15%. Po 40 godzinnym okresie fermentacji zaprzestaje się dodawania źródła fosforu.
185 620
Jako źródło fosforu stosuje się fosforan sodu, fosforan potasu, dwuwodorofosforan sodu, dwuwodorofosforan potasu, wodorofosforan sodu, wodorofosforan potasu lub ich mieszaniny, korzystnie dwuwodorofosforan sodu w stężeniu około 0,008%.
W przypadku stwierdzenia niedoboru źródła węgla lub azotu w tracie fermentacji można uzupełnić te braki poprzez dodanie przyswajalnego źródła węgla i/lub źródła azotu w trakcie fermentacji.
Stężenie źródła przyswajalnego węgla można dobrać przez przeprowadzenie rutynowych prób zależnie od charakterystyki użytego szczepu Streptomyces. Jako źródło węgla korzystnie stosuje się trioleinian gliceryny, glicerynę i skrobię kukurydzianą. Udział źródła węgla takiego jak gliceryna, trioleinian gliceryny lub skrobia kukurydziana w materiale wyjściowym może być wyższy od 5% a dalsze ilości źródła węgla mogą być dodawane w trakcie fermentacji, zgodnie ze zwykłą procedurą zasilania szarży.
W początkowym środowisku fermentacyjnym jako źródło przyswajalnego azotu na ogół stosuje się mączkę sojową lub siarczan amonu i takie dalsze źródło przyswajalnego azotu ewentualnie dodaje się do brzeczki fermentacyjnej w trakcie fermentacji. Korzystnym źródłem przyswajalnego azotu jest mączka, na przykład sojowa lub z nasion bawełny. Ilość przyswajalnego azotu korzystnie wynosi 0,5 do 15%, korzystniej 1,5 do 7,5%. Zwykle ilość azotu jest większa niż 5%.
Alternatywnie lub dodatkowo do fermentora można wprowadzić amoniak. Amoniak stosuje się również do regulowania pH brzeczki fermentacyjnej w trakcie procesu fermentacji. Jednak stwierdzono, że stosowanie amoniaku zarówno jako wyłącznego źródła przyswajalnego azotu jak i do regulacji pH jest niepożądane. Wysokie stężenie amoniaku może zatruć mikroorganizm a zbyt niskie pH powoduje mniej efektywną biosyntezę kwasu klawulanowego. Zgodnie z tym, korzystnym źródłem przyswajalnego azotu jest na przykład mączka sojowa dodana do wyjściowej pożywki a w przypadku zapotrzebowania na dalszy azot w trakcie prowadzonej fermentacji dostarczana jest sól amonowa taka jak siarczan amonu.
Zgodnie z korzystnym aspektem wynalazku, do regulacji pH stosowany jest wolny związek azotu, korzystnie wodorotlenek amonu. Powoduje to późniejsze obniżenie poziomu biomasy niż w przypadku, gdy amoniak jest jedynym źródłem azotu i regulatorem pH.
Stosowane w niniejszym opisie określenie „stężenie fosforu” oznaczane jest jako % wagowy/objętościowy równoważnika fosforu w odniesieniu do ilości zawartego związku przyswajalnego fosforu.
Stężenie fosforu korzystnie utrzymywane jest poniżej limitu 0,15% wagowo/objętość podczas fazy wzrostowej, po której można pozwolić na zmniejszenie stężenia fosforu. Faza wzrostowa dla typowej fermentacji kwasu klawulanowego trwającej w sumie 5 do 6 dni może być zakończona w ciągu około 40 godzin. Korzystnie pozwala się na obniżenie stężenia fosforu do niskiej wartości, korzystnie do zera po 40 godzinnej fermentacji.
Regulowanie ilości przyswajalnego fosforu zgodnie z wynalazkiem, może zapewnić nieoczekiwanie wysokie wydajności kwasu klawulanowego.
Przeprowadzono próby porównawcze rozwiązania według wynalazku z innymi sposobami wytwarzania kwasu klawulanowego, w szczególności z rozwiązaniami według opisów patentowych US 4 110 165, GB 1 571 888, EP 182 522 i obecnego wynalazku, w których bądź stosowano źródło fosforu, bądź dodatkowe wprowadzanie składników pożywek hodowlanych w trakcie trwającej fermentacji.
Brzeczka fermentacyjna może być poddana obróbce tak jak ujawniono w WO 95/23870 lub innymi znanymi sposobami za pomocą których wytwarza się klawulanian potasu o wysokiej czystości.
Wynalazek opisano dalej w nawiązaniu do załączonych przykładów, które w żadnym przypadku nie ograniczają zakresu wynalazku.
Przykład I.
A) Hodowla Streptomycetes sp. P. 6621 FERM P 2804.
Dobór i utrzymanie szczepu
185 620
Najproduktywniejsze klony Streptomyces sp. PP 6621 FERM P 2804 utrzymano metodami selekcyjnymi. Najproduktywniejsze hodowle tego mikroorganizmu przechowywano i następnie stosowano jako źródło dla następnych cyklów selekcji.
Kolonię Streptomycetes sp. P. 6621 FERM P 2804 aseptycznie przeniesiono do sterylnego naczynia ceramicznego ze sterylną wodą (2 cm3) i homogenizowano. Kawałki grzybni przeniesiono na skos agarowy i inkubowano do dojrzałości (przez 10 do 14 dni) w termostacie w temperaturze 25°C.
Po 8 do 10 dniach powierzchnia agarowa była przerośnięta szaro-zidoną grzybnią bakteryjną. Zarodniki zeskrobano z powierzchni, aseptycznie zaszczepiono do wegetatywnej pożywki nasiennej i inkubowano na wytrząsarce przez 24 godziny przy 250 obr/min i w temperaturze 25 ± 1°C.
Homogeniczną zawiesinę zarodników ze skosu agarowego można przechowywać w odtłuszczonym mleku (które może być stosowane jako pożywka ochronna) przez więcej niż dwa miesiące.
Po zakończeniu etapu wegetatywnego, część hodowli aseptycznie przeniesiono do pożywki fermentacyjnej i inkubowano na obrotowej wytrząsarce przez 96 godzin. Po zakończeniu etapu fermentacji przeprowadzono analizę na zawartość kwasu klawulanowego. Hodowle, które dały najwyższą wydajność użyto jako inokulum laboratoryjne w fermentorze.
Całe postępowanie prowadzono w warunkach aseptycznych.
Szczepy mogą być przechowywane na skosie agarowym w temperaturze 4°C maksymalnie przez 4 tygodnie, w odtłuszczonym mleku w tych samych warunkach przez 2 miesiące a szczepy liofilizowane można przechowywać w temperaturze 4°C przesz okres 1 roku.
Skład pożywek dla selekcji szczepu do zaszczepienia w fermentorze Pożywki dla skosów i szalek Petriego
Skład
Dekstryna
KHoPOą
MgSO4-7H2O
NaCl (NH4)2SO4
CaCO,
Pierwiastki śladowe Agar
Woda demineralizowana do
Ilość 10 g 1 g 1 g 1 g Ig 4g 1 cm3 20 g ,
1000 cm3
Kompozycję sporządzono metodami klasycznymi.
Pierwiastki śladowe Skład
CaCl2-2H2O
MgCl2-6H2O
NaCl
FeCl3-6H2O
ZnCl2
CuCl2-2H2O MnSO4-H2O Woda demineralizowana
Ilość 10,0 g 10,0 g 10,0 g 3,0 g 0,5 g 0,5 g 0,5 g do 1000 cm3
Pożywki wegetatywne dla selekcji szczepu Skład Ilooć
Skrobia kukurydziana Mączka sojowa KH2PC4
Estol (Priolube 1435) Woda z kranu
10,0 g 20,0 g
0,6 g 5,0 g do 1000 em3.
185 620
Pożywki fermentacyjne dla selekcji szczepu
Skład Ilość
Skrobia kukurydziana 9,6g
Mączka sodowa 33,5g
KH2PO4 l,2g
Estol (Priolube 1435) 22,0 g
Gliceryna 5,0 g
Kwas morfolinopropanosulfonowy 12,0g
Pierwiastki śladowe 12,0 g
Woda z kranu do 1000 cm .
Przygotowanie inokulum laboratoryjnego
Do hodowli w celu przygotowania laboratoryjnych materiałów inokulacyjnych pobrano hodowlę ze skosu agarowego. Wybrany skos agarowy napełniono aseptycznie sterylna wodą (10 cmg), zarodniki zeskrobano i homogenizowano w sterylnym naczyniu ceramicznym. Roztwór zarodników użyto jako inokulum laboratoryjne.
Faza wegetatywna w tanku przed-posiewowym
Pożywki dla tanku przed-posiewowego
Objętość tanku przed-posiewowego = 500 1
Objętość pożywki =350 1
Skład Ilość
Skrobia kukurydziana 7,0 kg
Mączka sojowa 7,0 g
NaH,PO4 0J8gkg
Estol (Priolube 2435)* 0,7 kg
Synperonic 0,150 kg
Woda z kranu do 350 1 * zamiast estolu można użyć olej sojowy
Inokulum zostało przeniesione do pożywki którą wysterylizowano w tanku przedposiewowym i schłodzono sterylnym powietrzem do temperatury 28°C. Faza wegetatywna trwała od 50 do 70 godzin w temperaturze 28 ± 1°C, pod ciśnieniem 30 kPa przy napowietrzaniu za pomocą powietrza sterylnego i ze zgodnymi mieszaninami.
| Parametry wzrostu w tanku przed-posiewowym | |||
| Czas/h | pH | PMV% | Odbarwienie/min |
| 0 | 7,20 | — | — |
| 4 | 7,25 | 10 | >5 |
| 10 | 7,35 | 8 | >5 |
| 16 | 7,30 | 10 | >5 |
| 22 | 7,20 | 16 | 4 |
| 28 | 7,02 | 17 | 2,5 |
| 34 | 6,85 | 18 | 0,5 |
| 39 | 6,66 | 20 | 0,3 |
| 45 | 6,60 | 21 | 0,5 |
| 51 | 6,52 | 22 | 1,0 |
| 56 | 6,39 | 22 | 1,0 |
| 61 | 6,45 | 20 | 1,3 |
| Legenda: pH = wartość pH próbki PMV% = % objętościowy hodowli w próbce |
Odbarwienie = czas potrzebny na odbarwienie barwnika metylenowego
185 620
Faza wegetatywna w posianym fermentorze
Pożywki dla fermentora z posiewem
Objętość fermentora z posiewem = 7500 1
Objętość pożywki = 4500 1
Skład Ilość
Skrobia kukurydziana 9(00 kg
Mączka sojowa 90,0 0
NaH2PO4 2,4 kg
Estol- (Priolube 1435)* 9 kg
Synperonic 0,5 kg
Woda do 45001 * zamiast estolu można użyć olej sojowy
Fazę wegetatywną z przed-posiewowego tanku przeniesiono pod ciśnieniem do pożywki uprzednio wysterylizowanej w fermentorze posiewowym i ochłodzono sterylnym powietrzem do temperatury 28°C. Powietrze sterylizowano na filtrach o wielkości porów 0,2 pm.
Faza wegetatywna trwała od 10 do 20 godzin w temperaturze 28 ± 1°C, pod ciśnieniem 30 kPa, przy napowietrzaniu sterylnym powietrzem i stałym mieszaniu.
Rozwój monitorowano za pomocą analizy pH, PMV%, odbarwienie barwnika metylenowego i przez mikroskopowe badanie próbek.
Parametry rozwodu w tanku przed-posiewowym
| Czas/h | EH | PMV% | Odbarwienie/min |
| 0 | 7,20 | -- | — |
| 6 | 7,10 | 15 | >5 |
| 12 | 6,87 | 20 | 1,^ |
| 16 | 6,65 | 22 | o,:3 |
Legenda:
pH = wartość pH próbki
PMV% = % objętościowy hodowli w próbce
Odbarwienie = czas potrzebny na odbarwienie barwnika metylenowego
B). Fermentacja periodyczna Streptomyces sp. P 6621 FERM P 2804 w fermentorze
Pożywki dla fermentorów
Objętość fermentora = 90.0001
Objętość pożywki = 60.000 1
Skład Ilość
| Skrobia kukurydziana | 570 kg |
| Mączka sojowa | 2300 kg |
| NaCl | 6 kg |
| Estol (Priolube 1435)* | 1680 kg |
| NaH2PO4 | 5 kg |
| MgCl2-6H2O | 7 kg |
| FeCl3-6H2O | 1,6 kg |
| ZnCl2 | 0,5 kg |
| MnSO4-H2O | 0,1 kg |
| Synperonic | 225 kg |
| Woda | do 60 m3 |
Legenda:
- Estol jest rodzajową nazwą trioleinianu gliceryny: (Priolube 1435 zarejestrowany znak towarowy Unichem GmbH, Niemcy)
- Synperonic (zarejestrowany znak towarowy ICl W. Brytania) jest propylenoglikolowym środkiem przeciwpieniącym * zamiast Estolu może być stosowany olej sojowy.
4700 1 hodowli Streptomyces sp. P 6621 FERM P2804 w fazie wegetatywnej wzrostu z fermentora posiewowego zaszczepiono przez sterylne przeniesienie do sterylnej wyjściowej
185 620 pożywki (60.000 1) w 90.000 1 fermentorze ze stali nierdzewnej wyposażonym w mieszanie i dostarczanie sterylnego powietrza przez filtry o średnicy porów 0,2 pm. Pożywki fermentacyjne i wszystkie rury wlotowe wysterylizowano i schłodzono do temperatury 24°C za pomocą powietrza sterylnego. Fazę fermentacyjną w fermentorze posiewowym utrzymywano w temperaturze 24 do 25°C pod ciśnieniem 30 kPa. Brzeczkę mieszano i napowietrzano w trakcie całej fermentacji a pH pożywek utrzymywano przez dodawanie 25% wodnego roztworu wodorotlenku amonu przy wartości 6,8 - 6,9. Fermentacja trwała 96 godzin a uzyskane stężenie kwasu klawulanowego wynosiło 3580 mg/l.
W trakcie fermentacji Streptomyces sp. P 6621 FERM P 2804 dodawano źródło fosforu i źródło przyswajalnego azotu (500 kg mączki sojowej w 5000 1 wody i 25% wodnego roztworu wodorotlenku amonu) jak następuje:
Stężenie źródeł przyswajalnego fosforu i azotu w brzeczce fermentacyjnej
Czas Stężenie fosforu (% wag/obj) Stężenie azotu (% wag/obj)
| 0 | 0,035 | 1,73975 |
| 8 | 0,030625 | 1,692286 |
| 16 | 0,0095 | 1,331 |
| 24 | 0,005188 | 0,9785 |
| 32 | 0,004638 | 0,5527 |
| 40 | 0,003638 | 0,69945 |
| 48 | 0,000863 | 0,9128 |
| 56 | 0,000863 | 0,8475 |
| 64 | 0 | 0,709 |
| 72 | 0 | 0,653625 |
| 80 | 0 | 0,571 |
| 88 | 0 | 0,47675 |
| 96 | 0 | 0,53825 |
| 104 | 0 | 0,7555 |
| 112 | 0 | 0,77025 |
| 120 | 0 | 0,673375 |
| 128 | 0 | 0,78725 |
| 136 | 0 | 0,734625 |
| 144 | 0 | 0,8985 |
Stężenie fosforu po 51 godzinach fermentacji było poniżej granicy wykrywalności.
Wartość pH osiągnięta w pierwszych godzinach rozwoju hodowli wzrosła prawie do
7,5. W tym czasie fosfor był zużywany i rozpoczęła się produkcja kwasu klawulanowego. Z tego powodu pH obniżyło się i konieczna była regulacja pH pożywek w celu utrzymania poziomu pH na wartości optymalnej.
Przykład II
Przedłużenie fazy wegetatywnej fermentacji przez zastosowanie siarczanu amonu jako źródła przyswajalnego azotu i wodorotlenku sodu jako czynnika regulującego pH.
Pożywkę stosowaną w takich samych proporcjach jak w przykładzie 1B umieszczono w fermentorach ze stali nierdzewnej (każdy po 500 1). Fermentację w pierwszym fermentorze prowadzono w takich samych warunkach jakie opisano w przykładzie 1B. Warunki fermentacji w drugim fermentorze różniły się od opisanych w przykładzie 1B tylko tym, że dodano do brzeczki fermentacyjnej 11% wodny roztwór siarczanu amonu w ilości 9 cm3/l w okresie między 40 a 60 godziną po zaszczepieniu. Wartość pH utrzymywano na pożądanym poziomie za pomocą wodorotlenku sodu. Po 60 godzinie wstrzymano dodawanie źródła azotu. Lepkość brzeczki fermentacyjnej, która jest proporcjonalna do ilości biomasy, była analizowana w trakcie fermentacji.
185 620
Szarża 1, lepkość (mPa-s)
Szarża 2, lepkość (mPa-s)
| 474 | 551 |
| 728 | 714 |
| 948 | 998 |
| 995 | 1076 |
| 936 | 12^26 |
| 824 | 863 |
| 628 | 873 |
185 620
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 60 egz. Cena 2,00 zł.
Claims (15)
- Zastrzeżenia patentowe1. Sposób wytwarzania kwasu klawulanowego lub jego soli, przez fermentację gatunku Streptomyces produkującego kwas klawulanowy w brzeczce fermentacyjnej zawierającej przyswajalne źródła węgla i azotu oraz źródło fosforu, znamienny tym, że w fazie wzrostowej fermentacji dodaje się dalsze źródło fosforu utrzymując stężenie fosforu w zakresie 0,0015% do 0,15% i ewentualnie w trakcie fermentacji dodaje się dalsze źródła przyswajalnego węgla i azotu, po czym z brzeczki fermentacyjnej wyodrębnia się kwas klawulanowy lub jego sól.
- 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że prowadzi się proces periodyczny, przy ciągłym lub nieciągłym dodawaniu źródła fosforu.
- 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że po ustaniu fazy wzrostowej pozwala się na obniżenie stężenia fosforu.
- 4. Sposób według zastrz. 1 albo 4, znamienny tym, że pozwala się na obniżenie stężenia fosforu po 40 godzinnym okresie fermentacji.
- 5. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że przez okres fermentacji do 40 godziny utrzymuje się stężenie fosforu w zakresie 0,0015% do 0,15%.
- 6. Sposób według zastrz. 5, znamienny tym, że stężenie fosforu utrzymuje się z zakresie 0,002 do 015%.
- 7. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że po 40 godzinnym okresie fermentacji zaprzestaje się dodawania źródła fosforu.
- 8. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako źródło fosforu stosuje się fosforan sodu, fosforan potasu, dwuwodorofosforan sodu, dwuwodorofosforan potasu, wodorofosforan sodu, wodorofosforan potasu lub ich mieszaniny.
- 9. Sposób według zastrz. 8, znamienny tym, że jako źródło fosforu stosuje się dwuwodorofosforan sodu.
- 10. Sposób według zastrz. 1 albo 9, znamienny tym, że w wyjściowej brzeczce fermentacyjnej jako źródło fosforu stosuje się dwuwodorofosforan sodu w stężeniu około 0,008%.
- 11. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że w przypadku dodawania przyswajalnego źródła węgla w trakcie fermentacji, jako źródło węgla stosuje się trioleinian gliceryny, glicerynę i skrobię kukurydzianą.
- 12. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że w początkowym środowisku fermentacyjnym jako źródło przyswajalnego azotu stosuje się mąkę sojową lub siarczan amonu i taicie dalsze źródło przyswajalnego azotu ewentualnie dodaje się do brzeczki fermentacyjnej w trakcie fermentacji.
- 13. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że źródło przyswajalnego azotu stosuje się w stężeniu 0,5% do 15% w przeliczeniu na azot.
- 14. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się źródło przyswajalnego azotu, z dodatkiem amoniaku.
- 15. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się źródło przyswajalnego azotu jest wolne od amoniaku.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SI9600120A SI9600120A (en) | 1996-04-12 | 1996-04-12 | New and improved fermentative procedure for the production of clavulanic acid and its salts |
| PCT/GB1997/001007 WO1997039137A1 (en) | 1996-04-12 | 1997-04-11 | Process for the preparation of clavulanic acid |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL329291A1 PL329291A1 (en) | 1999-03-15 |
| PL185620B1 true PL185620B1 (pl) | 2003-06-30 |
Family
ID=20431824
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL97329291A PL185620B1 (pl) | 1996-04-12 | 1997-04-11 | Sposób wytwarzania kwasu klawulanowego |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0906446A1 (pl) |
| JP (1) | JP2001503244A (pl) |
| AU (1) | AU2516497A (pl) |
| CA (1) | CA2251596A1 (pl) |
| PL (1) | PL185620B1 (pl) |
| RU (1) | RU2188868C2 (pl) |
| SI (1) | SI9600120A (pl) |
| WO (1) | WO1997039137A1 (pl) |
| ZA (1) | ZA973139B (pl) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2101658B1 (es) * | 1995-11-23 | 1998-03-01 | Antibioticos Sa | Nuevo procedimiento de produccion de acido clavulanico y sus sales. |
| AR015825A1 (es) * | 1997-05-28 | 2001-05-30 | Gist Brocades Bv | Produccion fermentativa de acido clavulanico bajo condiciones controladas de fosfato |
| CA2342181A1 (en) * | 1998-09-29 | 2000-04-06 | Dsm N.V. | Fermentation of clavulanic acid at a controlled level of ammonia |
| US6440708B1 (en) | 1998-09-29 | 2002-08-27 | Dsm N.V. | Fermentation of clavulanic acid at a controlled level of ammonia |
| EP2589663A1 (en) | 2011-11-04 | 2013-05-08 | LEK Pharmaceuticals d.d. | Process for production of clavulanic acid |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4110165A (en) * | 1974-04-20 | 1978-08-29 | Beecham Group Limited | Process for the production of clavulanic acid |
| US4144242A (en) * | 1975-02-07 | 1979-03-13 | Glaxo Laboratories Limited | Process for the purification of clavulanic acid |
| GB1563103A (en) * | 1975-10-13 | 1980-03-19 | Beecham Group Ltd | Process for the preparation of clavulanic acid |
| GB1571888A (en) * | 1977-02-04 | 1980-07-23 | Glaxo Lab Ltd | Clavulanic acid production |
| NZ213963A (en) * | 1984-10-27 | 1989-01-06 | Antibioticos Sa | Production of clavulanic acid |
-
1996
- 1996-04-12 SI SI9600120A patent/SI9600120A/sl not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-04-11 PL PL97329291A patent/PL185620B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1997-04-11 EP EP97916544A patent/EP0906446A1/en not_active Withdrawn
- 1997-04-11 RU RU98120408/13A patent/RU2188868C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1997-04-11 JP JP53684297A patent/JP2001503244A/ja active Pending
- 1997-04-11 CA CA002251596A patent/CA2251596A1/en not_active Abandoned
- 1997-04-11 AU AU25164/97A patent/AU2516497A/en not_active Abandoned
- 1997-04-11 WO PCT/GB1997/001007 patent/WO1997039137A1/en not_active Ceased
- 1997-04-14 ZA ZA973139A patent/ZA973139B/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2516497A (en) | 1997-11-07 |
| ZA973139B (en) | 1998-08-05 |
| EP0906446A1 (en) | 1999-04-07 |
| JP2001503244A (ja) | 2001-03-13 |
| PL329291A1 (en) | 1999-03-15 |
| CA2251596A1 (en) | 1997-10-23 |
| WO1997039137A1 (en) | 1997-10-23 |
| SI9600120A (en) | 1997-12-31 |
| RU2188868C2 (ru) | 2002-09-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhang et al. | Development of a defined medium fermentation process for physostigmine production by Streptomyces griseofuscus | |
| HK26696A (en) | Preparation of clavulanic acid and its salts and esters | |
| JPH04360895A (ja) | Ｆｏ−１２８９ａ物質およびその製造法 | |
| EP0803576B1 (en) | Process for the production of lipstatin and tetrahydrolipstatin | |
| JP3313730B2 (ja) | クラブラン酸及び／又はその塩を生産するための方法 | |
| PL185620B1 (pl) | Sposób wytwarzania kwasu klawulanowego | |
| JP4623766B2 (ja) | アカルボース調製のためのオスモル濃度制御発酵法 | |
| US5985624A (en) | Process for the fermentative preparation of clavam derivatives whereby the levels of ammonia and urea in the fermentation medium are kept low | |
| JPS6257316B2 (pl) | ||
| US4202819A (en) | 2-(3-Alanyl)clavam antibiotic | |
| US4369252A (en) | Fermentation process for the preparation of ergot alkaloids, primarily ergocornine and β-ergocryptine | |
| US20080318289A1 (en) | Fermentation Processes for the Preparation of Tacrolimus | |
| US5278053A (en) | Method of producing a polyether antibiotic from actinomadura fibrosa sp. nov. NRRL 18348 and actinomadura sp. NRRL 18880 | |
| EP2287324A2 (en) | Fermentation processes with low concentrations of carbon- and nitrogen-containing nutrients | |
| US6197560B1 (en) | Metabolic controlled fermentation procedure for the manufacture of lovastatin hydroxy acid | |
| US6500651B1 (en) | Metabolic controlled fermentation procedure for the manufacture of lovastatin hydroxy acid | |
| KR100446110B1 (ko) | 세팔로스포린 c 생산 미생물 | |
| CN119932132A (zh) | 一种克拉维酸的发酵方法 | |
| KR830002916B1 (ko) | 발효에 의한 세팔로스포린 제법 | |
| SI9600121A (sl) | Postopek za pripravo klavulanske kisline in njenih soli | |
| WO2004005275A1 (en) | Fed batch solid state fermentation for the production of hmg-coa reductase inhibitors | |
| WO2007029082A2 (en) | An improved fermentation process for preparing ascomycin | |
| GB1571888A (en) | Clavulanic acid production | |
| CZ241295A3 (en) | High-production strain of penicillium chrysogenum ccm 8197 micro-organism | |
| CS207694B2 (cs) | Způsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20060411 |