CN87103752A - 制备一种抑制或消灭单细胞生物的组合物的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种制备方法，可制备一种抑制或消灭单细胞生物和/或病毒的物质或者药剂或者化妆品，用于局部避孕，抗生素治疗，防腐等技术领域；另外还提供了一种制备此物质中所含的化合物的方法，并提供了抑制或消灭至少一种单细胞生物和/或至少一种病毒的方法。

Description

本发明是关于抑制或消灭单细胞生物如原虫、微生物、细菌、配子、真菌等和病毒的发明。因此，本发明可用于局部避孕、抗生素治疗、防腐以及药物化妆品和消毒的技术领域。

下文中的对单细胞生物或病毒的“抑制”是指阻制它们的增殖或者使它们不能完成某些通常完成的功能。“消灭”是指对单细胞生物或病毒的杀死作用而言。

本发明所讲的“物质”（下文同）是指具有某种特定的功能的化合物，或者共同具有某种功能的一组化合物，而这些化合物能成为产品的组成成分，而这种产品通常与一种或更多的赋形剂组合并可能与其它物质组合。同样，这里“产品”通常是指可使用的成品。因此，一种成品通常是由至少一种赋形剂和数种物质组成，每一种物质是由一种或数种具有相同的或一定的功能的化合物组成的。“物质”可能相当于某种实际物质，但是对于复杂的合剂来讲则可能相当于纯理论的和功能性的。因为合剂的各种化合物具有多种作用，或者它们的作用相互干扰。化合物、物质、产品的功能分类不一定与产品的制造方法和实际中得到的合剂相一致。这里和下文所讲的“成分”通常是指某种药品或化妆品的设计而言。

能抑制或消灭单细胞生物的物质，不论在生物制品、药品、化妆品领域，或者在更广阔的领域和消毒或其它领域，都是已知的。

特别是杀精子成分是从美国专利4，339，411和4，359，475中得知的。

可用于人类局部避孕的许多化合物也是已知的。特别是已知有些能降低界面能力的物质（即季铵化合物，壬苯聚醇，脂肪酸的酰氨乙基甘氨酸酯衍生物，甲基牛磺酸钠含氧盐）和某些其它化合物如硝酸苯汞、对

烷基苯基聚氧乙烯醚或多糖乙醚三钠盐，对单细胞生物具有抑制或消灭作用，尤其具有杀精子作用。

这些物质对精子具有机械作用（如制动作用），也是已知的。美国专利4，368，186记述了这些作用，而且“poloxamer”与精子抑制剂相结合，由于控制了这一产品的凝胶化作用和加溶作用，使之具有加成作用或协同作用，从而提高抑制的效力。

局部避孕成分也是已知的，特别是含有这些化合物的杀精子成分。这些成分可局部使用，用以抑制配子特别是人和动物的精子的受精能力。这些已知成分，包括抑制剂在溶液内或者在药用赋型剂（决定于剂型）内有一个高于最小抑制浓度（MIC）的浓度。大家知道，为了使0.2毫升精液内所有精子在少于5秒钟内全部被杀死（按照国际计划生育联合会（IPPF）的标准制定的全杀精子实验条件），1毫升药品内杀精子有效成分的浓度必须高于或相等于有效成分的最小抑制浓度（MIC）。化合物的MIC决定于这些化合物本身以及使用的条件，也就是含有这一成分的剂型。

含有至少一种能抑制或消灭至少一种单细胞生物的主要有效组分的药物或化妆品成分和含有这种成分的药品化妆品是已知的。

在防腐和消毒领域内，有许多有效组分囟素（氯或碘的衍生物等…），醛类，醇类，酚类，金属（银，铜，汞，锌盐…），脒，双胍类，二苯脲，氧化剂（过氧化氢，高锰酸钾…），染料，能降低界面张力的物质以及湿润剂（阳离子的，阴离子的，两性的或有机的）。

含有抑制或消灭作用的物质的防腐剂和/或消毒剂和/或杀原虫剂和/或杀真菌剂和/或抗生素和/或杀病毒剂，以及这些物质或成分的制造方法也是已知的。

这些已知的物质或成分，一般来讲是符合要求的，但是在实际使用方面却存在一些问题。

这些问题主要如下：

第一，一般要求对单细胞生物或病毒具有完全的抑制或消灭效果，也就是在实际应用条件下要求抑制率或消灭率达到100%。但是，不采取严格的使用方法，或者有效组分的剂量有限制，则不可能达到这种效果。

其次，一般要求对一种或更多的单细胞生物或病毒，也就是对配子或病原体具有杀伤作用，而不产生短期和/或长期不良副作用（杀伤其它单细胞生物，刺激作用，对环境破坏…）。但是，普经发现，在解决上述第一个问题所需的剂量常常产生长期副作用（通常与经常使用有关）和甚至短期副作用（间歇地使用时）。在医学上发现，某种阈剂量和某种有效组分有致畸胎和/或致癌作用。在消毒领域曾发现，对被消毒的物品有某些不良作用。

本发明的目的是在一定浓度的具有抑制或消灭作用的主要有效组分条件下，不增加其浓度，就能提高某物质或成分的抑制或消灭能力。本发明的另一目的是减少主要有效组分的浓度，而不降低这种物质或组分的抑制或消灭能力，以及为了避免副作用和更好地控制对各种单细胞生物和病毒的选择性作用。

本发明的目的尤其在于提供一种新的药物或化妆品成分，特别是用于局部使用的避孕药以及一种药品或含本组合物的成品，这种药品或成品可间歇使用、经常使用和持续的长期使用，而不产生致畸胎或致癌的副作用，并且效率达百分之百，也就是无效的百分数在统计学上等于零或者无统计学意义，在常规使用上无需采取特别防范措施。

本发明的目的还在于提供一种可局部使用的避孕药品，使用方便，有效率达百分之百，也就是它们的某些效果类似口服避孕的效果，而没有不良副作用。

本发明的目的还在于提供一种化合物，它可以局部避孕方法给药。最后，本发明的另一目的是减少药品、化妆品或消毒剂、特别是防腐剂、抗生素、抗菌剂、杀原虫剂、杀真菌剂、杀精子剂、杀病毒剂等所含的具有抑制或消灭单细胞生物或病毒的有效组分的剂量。

本发明是关于具有抑制或消灭至少一种单细胞生物或病毒、特别是原虫、微生物、细菌、配子、真菌或其它微生物的物质，这种物质含有至少一种具有抑制或消灭单细胞生物或病毒的有效组分和至少一种具有抑制或消灭至少一种与单细胞生物或病毒有关的酶的组分，后一组分是一种激活剂，对前一种有效组分具有协同作用。

对至少一种有关的酶具有抑制或消灭作用的下文叫做“激活组分”或“激活剂”的组分最好是一种能阻止配对的酶和底物起作用的物质。

但是令人感到意外地发现，这种物质最好是能自发地或者在酶作用后能释放出阴离子F^-的氟化物。还发现，有的主要有效组分本身能够释放一种激活组分，而这种激活组分本身也是一种能抑制或消灭至少一种单细胞生物或病毒的有效组分。

更确切地讲，这种氟化物本身具有抑制或消灭单细胞生物和病毒的能力，它对有关的主要有效组分具有协同作用。

本发明的特点是提供一种可局部使用的避孕成分，特别是杀精子成分和赋形剂;这些成分含有至少一种能释放阴离子F^-的化合物，而F^-则是一种能直接或强化抑制或消灭配子的有效组分。

本发明还提供一种药品、防腐剂和/或消毒剂、特别是可局部使用的防腐剂和/或抗原虫剂、特别是可局部使用的抗原虫剂和/或杀真菌剂、特别是可局部使用的杀真菌剂和/或抗生素、特别是可局部使用的抗生素和/或杀病毒产品、一种化妆品、特别是局部使用的化妆品如合成肥皂或乳剂、一种避孕品（它可局部使用，与配子接触）、特别是卵囊剂、乳膏剂、凝胶剂、溶液、泡沫剂、片剂、可溶性胶囊剂、塞剂、阴道栓剂，这些药剂根据本发明含有一种物质或一种成分。

这里和下文所讲的“局部”和派生词，是指这一产品可用于特定的部位，即阴道或其它解剖部位，使其作用在近似阴道环境内产生，杀伤与之接触的单细胞或病毒，从而有别于全身用药（即口服或肠胃外用药）。

本发明的物质、成分、药品、化合物既能局部使用，又能全身用药。例如，本发明的杀精子剂可以局部使用。此外，要想克服致病的单细胞生物对常规治疗产生抗药作用，本发明的药剂还可全身用药。

本发明还是关于含有至少一种主要有效组分和至少一种能释放阴离子F^-（一种主要有效组分的激活剂）的氟化物的成分的化妆品的发明;使用能释放阴离子F^-的氟化物（作为上述主要有效组分的激活剂）的物质。根据本发明使用一种物质或成分来制造一种药品，这种药品可作抗生素和/或杀原虫剂和/或杀菌和/或杀真菌剂和/或防腐剂和/或杀病毒剂;根据本发明使用一种物质或成分来制造一种人或动物用的局部避孕剂，特别是抑制或消灭配子的避孕剂。

本发明还提供一种能抑制或消灭至少一种单细胞生物、特别是原虫、微生物、细菌、配子、真菌或消毒的物质或成分，其特点是把一种能抑制或消灭上述单细胞生物或病毒的主要有效组分与至少一种能抑制或消灭单细胞生物或病毒有关的一种酶系统的组分组成合剂，而后一组分则是前一主要有效组分的激活剂。

本发明还提供一种含有离子氟的化合物，根据本发明可用于生物局部避孕，特别是可用作人或动物局部避孕药，或者作为一种物质或一种成分。

根据本发明，一种能抑制或消灭至少一种上述单细胞生物或病毒有关的酶的激活组分，通过对配对的酶和底物作用的阻断，使上述单细胞生物或病毒对外来的攻击，特别是对上述能抑制或消灭上述单细胞生物或病毒的主要有效组分的作用产生高度敏感。已清楚知道，每个单细胞生物或病毒本身都是一种重要的酶系统。此外，单细胞生物或者病毒在某些情况下（如对抗抗生素时）还能释放某些特殊酶（如破坏青霉素的内酰胺酶），以消灭某些功能。这些酶叫做“保护性酶”。本发明的目的在于抑制这些酶的功能，从而为有效组分对单细胞生物发挥作用创造最佳条件，以使单细胞生物裂解。这与以前的技术相比具有很多优点，它一方面能满足上述目的，另一方面通过对某种酶或某组酶的作用，能选择地作用于某一单细胞生物或某一类单细胞生物。对于病毒来讲，本发明的目的在于抑制它们的组成和/或复制所需的酶。下文所讲的“有关酶”是指单细胞生物和/或病毒的重要的酶和/或保护性酶而言。

本发明已确定，离子状态的氟F^-特别有效，而且作为对抗有关酶的激活组分具有良好作用，并且在极小浓度下即能发挥作用。还有，离子状态氟F^-是极普通的物质，价廉，而且使用比较方便。它的制造和利用容易掌握，它的副作用可以用剂量来控制。

本发明提供一种抑制或消灭至少一种单细胞生物或病毒，特别是原虫、微生物、细菌、配子、真菌等的方法，为此使用至少一种能抑制或消灭单细胞生物的主要有效组分和至少一种能抑制或消灭至少一种与上述单细胞生物或病毒有关的酶;后一组分是一种激活剂，对前一种有效组分具有协同作用。这种方法包括本发明至少一种物质或成分的使用方法。

本发明是关于致病性或非致病性单细胞生物（如原虫、细菌、真菌、配子）和病毒的抑制和消灭。本发明主要有二种用途：用于化妆品或药品方面（例如下文所讲的作为杀精子剂或杀病菌剂的例子），或用于其它方面，如农业、消毒等（下述例子）。在所有这些用途中，本发明所有的物质含有至少一种能抑制或消灭单细胞生物或病毒的主要有效组分和至少一种能抑制或破坏至少一种该生物或病毒有关的酶的组分;后一组分是对前一组分有协同作用的激活剂。

激活组分的效用在于消除该生物或病毒的酶系统的作用。

这样，发明者发现，这种激活组分最好是一种能阻止配对的酶和底物起作用的物质，最好是由氟化物释放出的阴离子F^-，例如从一种氟的金属微生物释放出的氟离子。曾发现氟化钠、氟化钙、氟化钾、氟化铝、氟化锡、氟化铵或氟磷酸钠等有良效。例如下列单细胞生物或病毒可以作为本发明的消灭对象：

配子（精子，卵子）

革兰氏阳性球菌，如葡萄球菌和链球菌

革兰氏阴性球菌，如沐球菌

革兰氏阳性杆菌

革兰氏阴性杆菌，如大肠杆菌或大肠埃希氏菌

耐酸性细菌，如分支杆菌，耻垢分支杆菌螺旋菌，如螺旋体，密螺旋体

其它细菌，如衣原体

鞭毛原虫，如毛滴虫

酵母菌类，如白色含珠菌

病毒或后病毒类，如人免疫缺陷病毒，疱疹病毒

例如至少有一种单细胞生物或病毒有关的下列酶类是本发明的消除对象（表Ⅰ）

表1

酶    底物

碱性磷酸酶    磷酸-2-萘酯

酯酶（C4）    丁酸-2-萘酯

酯酶，脂酶（C8）    辛酸-2-萘酯

脂酶（C14）    十四烷酸-2-萘酯

亮氨酸芳基酰胺酶    L-亮氨酰基-2-萘基酰胺

缬氨酸芳基酰胺酶    L-缬氨酰基-2-萘基酰胺

胱氨酸芳基酰胺酶    L-胱氨酰基-2-萘基酰胺

胰蛋白酶    N-苯甲酰基DL精氨酸-2-

萘基酰胺

α-胰凝乳蛋白酶    N-戊二酰基苯丙氨酸-2-

萘基酰胺

酸性磷酸酶    磷酸-2-萘酯

萘酚-AS-B1-磷酸水解酶    萘酚-AS-B1-磷酸酯

α-半乳糖苷酶    6-溴-2-萘基αD-吡喃半乳糖

苷

β-半乳糖苷酶    2-萘基-βD-吡喃半乳糖苷

μ-葡糖苷酸酶    萘酚AS-B1-βD-葡糖苷酸

β-葡糖苷酶    2-萘基-αD-吡喃葡糖苷

β-葡糖苷酶    6-溴-2-萘基-βD-吡喃葡糖

苷

N-乙酰基β氨基葡糖苷酶    1-萘基-N-乙酰基-βD-氨

基葡糖苷

α-甘露糖苷酶    6-溴-2-萘基-αD-吡喃甘露

糖苷

α-岩藻糖苷酶    2-萘基-d1-吡喃岩藻糖苷

本发明的物质或成分的主要有效组分可以是一种能降低界面张力的阳离子表面激活剂、阴离子表面激活剂、两性表面激活剂或非离子表面激活剂，最好是季铵类。作为阳离子表面激活剂的例子有氯苄烷铵或其它烷基苄烷。阴离子表面激活剂的例子有甲基牛磺酸钠含氧盐。作为两性表面激活剂的例子有胺乙基甘氨酸酯的脂肪酸衍生物。作为非离子性表面激活剂的例子有壬苯聚醇。主要有效组分也可以是硝酸苯基汞，或对-

烷基苯基聚氧乙烯醚，或多糖乙醚三钠盐，或其它（卤、醛、醇、酚、酸、金属、脒、双胍、二苯脲、氧化剂、染料等）。

各种试验证明，单用激活组分也直接对单细胞生物或病毒起作用。但是，合用激化组分和主要有效组分有协同作用，即效果比二者的总和要大。

激活组分或激活剂的效力可以用最低抑制浓度（MIC）（即在一定时间内抑制或消灭单细胞生物或病毒所需的有效组分的浓度）来测量。

本发明的物质中活化性氟化合物所放出的阴离子F^-的浓度低于无主要有效组分时的阴离子F^-的最低抑制浓度。

同样地，本发明的物质中有效组分的浓度可以低于没有激活成分时主要有效组成的最低抑制浓度。因此，本发明的物质的总的效力至少等于浓度大于或等于MIC的阴离子F^-或主要有效组分的效力。

此外，主要有效组分本身也可能放出象阴离子F^-那样的激活组分。本发明的物质或成分可以包括作用相同或不同的几种主要有效组分和/或几种激活组分，而这些激活组分至少对一种酶起作用。

本发明的物质或成分可以用多种方法生产，并可以根据其使用方法而局部使用或全身给药。

本发明产品的最好用途是作为各种治疗用的药物。实际上，抑制或消灭单细胞生物或病毒的问题是治疗使用中愈来愈多遇到的问题。这可以对付一些病原体，此时的产品是抗生素和/或抗原虫剂和/或杀菌剂和/或抗真菌剂和/或防腐剂和/或抗病毒剂，或对付一些非病原体如配子，特别是局部避孕时用来消除精子。

本发明的物质或成分也可以不成其为药品的剂量和浓度用于化妆品中。

例如，氟化物或甚至主要有效组分的浓度可以降低到低于区别药品和化妆品的阈限值，而不降低产品的效力。

本发明的物质或成分也可以用于既非化妆品，也非药品的产品，例如作为抗真菌剂、抗原虫剂、防腐剂、抗菌剂等用于农业，也可以作为表面消毒剂用。

本发明的现知实用是用于雄性和/或雌性哺乳动物的生殖器上，作为杀精子和/或杀菌剂以防治性病。

有效组分最好用氯苄烷胺和壬苯聚醇9。激活组分最好用氟的金属衍生物，如氟化钠。各种剂型都可以用，如软胶囊剂、乳膏剂、凝胶剂、溶液、泡沫剂、片剂、可溶性胶囊剂、栓剂、阴道栓剂等。

所用的有效组分和激活组分的剂量决定于剂型，因为只有在活体中产生的实际浓度是决定效力的重要因素。

这些剂量必须变动于最低抑制浓度和引起副作用的最大浓度之间。局部使用时必须避免对用药部位的刺激作用。全身使用时必须避免中毒浓度。

这样，活体中的氯苄烷铵浓度最好是1.2%（按重量计），阴离子F^-的浓度最好是0.5%（按重量计）。

下面报告本发明的几种用法，它们是用几种单细胞生物试验过的。

1.本发明的局部避孕使用：

本发明提供了一种局部使用的杀精子药品，它能杀死或抑制与之接触的精子。

本发明的杀精子药品可以有各种剂型：片剂、软胶囊剂、乳膏剂、胶囊剂、可溶性胶囊剂、塞剂、泡沫剂、阴道栓剂，在性交前放入阴道内，以杀死或抑制精子，使它们不能和卵子接触以免卵子受精。

本发明的成品的成分至少含有一种化合物，能释放阴离子F^-的化合物，作为一种直接杀死或促进杀死精子的有效组分。

本发明的一种化合物在溶解时能释放阴离子F^-，特别是在溶液中时。例如，一种氟的金属衍生物，如氟化钠、氟化钙、氟化钾、氟化铝、氟化锡、氟化铵、氟磷酸钠等，或一种有机氟化物，如氟化胺。

例如，为测定化合物的杀精子活性，可按照IPPF试验法标准，采用总体杀精子试验。本法在于求得化合物的最小抑制浓度，称之为MIC（以重量百分数表示），该化合物在1ml溶液中导致0.2ml精液内所含精子在5秒钟以内全部死亡。该实验至少在来自不同供体的6份精液中进行，同时要满足IPPF试验法最低限度的条件：

样品年令：2小时。

每mm的密度：5000万个精子。

流动性：在35～37℃测定时，50%精子能迅速向前移动。

粘度：精液容易液化，不呈丝状，肉眼观察均匀，收集于消毒玻璃管内，密封，于37℃保存。

发明者发现，在这些条件下，按照IPPF试验法，当滴定度为5ppm（例如5mg/l）时，氟离子具有100%杀精子活性。

本发明的第一个变动，药用杀精子成分至少包括一个能发生氟离子的氟化合物，作为特有的具抑制或破坏能力的活性成分。当要求得到能100%抑制的成分时，F^-的滴度超过4.5ppm更有利，最好是5ppm。

再者，发明者已经发现，氟离子除有直接杀精子活性外，还有加强杀精子化合物强度的活性。因此，按照本发明的成分，一方面要由一种基本的杀精子活性成分，如阳离子、阴离子、两性离子或非离子表面活性剂组成，以降低界面的表面张力，甚至对甲基苯基聚氧乙烯醚、多糖乙醚三钠或其他;二方面，按照本发明，至少要由一种能发生氟离子的氟化合物组成;再一方面，要由药用赋形剂和多种不同的普通添加剂（抗氧剂等）组成。

按照本发明，复合成分中基本活性成分的浓度可低于不含F^-离子的基本活性成分的MIC值，然而该复合组份仍达到100%抑制程度，即满足IPPF总体杀精子试验法。按照本发明，复合成分包括几种能抑制配子的基本活性成分的混合物和/或几种不同氟化合物的混合物。

下文所示百分数均为重量百分数。

本发明用于局部避孕最好的实施例如下：

软胶囊：

氯化苄烷铵    1.20%

阴离子F^-（例如氟化钠） 0.50%

赋形剂：半合成甘油酯，可可脂，明胶或甘油以及纯洁水，抗氧剂，防腐剂。

霜剂和乳：

氯化苄烷铵    1.20%

阴离子F^-（例如氟化钠） 0.50%

赋形剂：蒸馏水或纯洁水，致湿剂，乳化剂，稳定剂，抗氧剂，防腐剂（按照所需要的粘度和pH，含有上述赋形剂量的比例可以变换）。

油膏和香膏剂润发脂：

氯化苄烷铵    1.20%

阴离子F^-（例如氟化钠） 0.50%

赋形剂：蒸馏水或纯洁水，乳化剂，脂肪类化合物的赋形剂（凡士林，羊毛脂，羊毛凡士林，硬脂凡士林），稳定剂，抗氧剂，防腐剂（按照所需要的粘度和pH，含有上述赋形剂量的比例可以变换）。

凝胶：

氯化苄烷铵    1.20%

阴离子F^-（例如氟化钠） 0.50%

赋形剂：可与阳离子表面活性剂配伍的可溶性纤维素衍生物，蒸馏水或纯洁水，甘油，山梨糖醇，抗氧剂，防腐剂（按照所需要的粘度和pH，含有上述赋形剂量的比例可以变换）。

可溶性胶囊制剂：

氯化苄烷铵    1.20%

阴离子F^-（例如氟化钠） 0.50%

赋形剂：聚乙烯醇，甘油，山梨糖醇，丙二醇，蒸馏水或纯洁水，抗氧剂。

片剂：

氯化苄烷铵    20mg/片

阴离子F^-（例如氟化钠） 10mg/片

赋形剂：乳糖，硬脂酸镁，纤维素，淀粉，柠檬酸，碳酸氢钠。

合成肥皂：

氯化苄烷铵    2%

阴离子F^-（例如氟化钠） 1%

赋形剂：可与季铵配伍的起泡剂和润湿剂（例如两性表面活性剂，如甜菜碱或氨基甜菜碱），软化剂，稳定剂，抗氧剂，防腐剂。

溶液：

氯化苄烷铵    0.50%

阴离子F^-（例如氟化钠） 0.25%

赋形剂：蒸馏水或纯洁水，乙醇，抗氧剂，甘油，山梨糖醇，防腐剂（按照所需要的pH，含有上述赋形剂量的比例可以变换）。

比较试验1：

不同已知杀精子化合物的MIC，用IPPF试验法进行测定。下述试验结果是以1ml组分与0.2ml精液（来自不同供体的6份精液）反应，测得在5秒钟内导致精子全部死亡的杀精子化合物的最小浓度。

杀精子化合物    MIC（%重量百分数）

对-烷基苯基聚氧乙烯醚    0.006

多糖乙醚三钠盐    0.007

阴离子表面活性剂    1

（甲基牛磺酸钠含氧盐）

阳离子表面活性剂    0.006

（氯化苄烷铵）

非离子表面活性剂    0.006

（壬苯聚醇9）

两性表面活性剂    0.001

（甘氨酸酰氨基乙酯衍生物

于脂肪酸上）

试验2：

同样的总体杀精子IPPF试验按下述步骤进行，已含0.0001%（重量百分数）氟离子（F^-）的1ml组分与0.2ml精液（来自不同供体的6份精液）反应，测求5秒钟内导致精子全部死亡的杀精子化合物的最小浓度。

杀精子化合物    MIC（%重量百分数）

对-

烷基苯基聚氧乙烯醚 0.003

多糖乙醚三钠盐    0.0025

阴离子表面活性剂    0.50

（甲基牛磺酸钠含氧盐）

阳离子表面活性剂    0.002

（氯化苄烷铵）

非离子表面活性剂    0.003

（壬苯聚醇9）

两性表面活性剂    0.005

（脂肪酸的酰氨乙基甘氨酸酯）

显而易见，由于在组分中添加了可离子化的氟，使已知杀精子成分的抑制功能大大改进。因此，按照本发明，一个复合成分可含很少量的基本活性杀精子成分，特别在浓度上低于无氟离子时此种活性成分的最小抑制浓度。

另外，缔合于基本活性成分上的氟离子浓度也是非常低的，低于氟离子的最小抑制浓度。

例如，发明者发现，0.003%氯化苄烷铵溶液及0.0001%氟离子溶液按IPPF试验都未具有杀死全部精子的活性，而既含0.003%氯化苄烷铵又含0.0001%氟离子的溶液，能满足IPPF试验法。因此观察到了协同效应。

试验3：

本试验是与上述试验1与2相同的，但为了复合氟离子，添加了硼酸钠，这样氟离子的杀精子效应完全消失，因此证实了仅仅氟离子是杀精子效应的活化剂或加强剂。

试验4：

在前述（试验1～3）相同条件下，不同过氟化氯化苄烷铵用作基本杀精子化合物。过氟化氯化苄烷铵显示出相似于氯化苄烷铵之一的杀精子活性。另外在试验3条件下，存在硼酸钠时，其活性仍然一致，说明了氟固定在苯核上未被解离。

试验3和4指出，基本活性成份的加强性仅在氟离子存在下产生。

为按照本发明生产药用杀精子产品，使成为具有氟离子给定浓度以及基本活性成分给定浓度的溶液，可以得到实现，并与赋形剂结合起来，后者按照所要生产的剂型选定。在片剂的情况中，能发生氟离子的基本活性成分和化合物与赋形剂结合在一起成为初级产品的形式。

比较试验5：

该体外试验在包括氯化苄烷铵（作为基本活性成分）在内的制剂上进行，通过在体外保护模拟体内的实际条件之后测定氯化苄烷铵的MIC值（提取，增溶……）。

该试验在无活性成分存在下进行，导致以下结果：

剂型    氯化苄烷铵的MIC（%重量百分数）

软胶囊    0.0063

霜剂    0.0083

塞剂    0.0075

片剂    0.0095

可溶性胶囊剂    0.0080

凝胶    0.0080

百分率相当于溶液中氯化苄烷铵的重量比例，该溶液用于体外杀精子试验（按IPF试验法），并经模擬后得到，该比例通过滴定样品测得，样品取自该溶液。

试验6：

采用与比较试验5中同样条件，但是，取自每一种剂型的样品，最初所含氟离子（以重量计）为0.45%。得下列结果：

剂型    氯化苄烷铵的MIC（%重量百分数）

软胶囊    0.0023

霜剂    0.0030

塞剂    0.0025

片剂    0.0025

可溶性胶囊剂    0.0017

凝胶    0.0033

Ⅱ）本发明用于抗菌，抗生，特别用于对付性传染病（SID），应用本发明最好的实施例为作为皮肤病学用的抗菌剂，有以下一些：

霜剂和乳：

氯化苄烷铵    1.20%

阴离子F^-（例如氟化钠） 0.50%

赋形剂：蒸馏水或纯洁水，致湿剂，乳化剂，稳定剂，抗氧剂，防腐剂（按照所需要的粘度和pH，含有上述赋形剂量的比例可以变换）。

油膏和香膏剂（润发脂）：

氯化苄烷铵    1.20%

阴离子F^-（例如氟化钠） 0.50%

赋形剂：蒸馏水或纯洁水，乳化剂，脂肪类化合物的赋形剂（凡士林，羊毛脂，羊毛凡士林，硬脂凡士林），稳定剂，抗氧剂，防腐剂（按照所需要的粘度和pH，含有上述赋形剂量的比例可以变换）。

合成肥皂

氯化苄烷铵    2%

阴离子F^-（例如氟化钠） 1%

赋形剂：可与季铵配伍的起泡剂和润湿剂（例如，两性表面活性剂，如甜菜碱或氨基甜菜碱），软化剂，稳定剂，抗氧剂，防腐剂。

溶液：

氯化苄烷铵    0.50%

阴离子F^-（例如氟化钠） 0.25%

赋形剂：蒸馏水或纯洁水，乙醇，抗氧剂，甘油，山梨糖醇，防腐剂（按照所需要的pH值，含有上述赋形剂量的比例可以变换）。

应用本发明最好的实施例为在皮肤病学中作为局部抗生素用，有以下一些：

溶液：

红霉素碱    4%

阴离子F^-0.5%

赋形剂：乙醇，丙二醇，蒸馏水。

凝胶：

红霉素碱    4%

阴离子F^-0.5%

赋形剂：乙醇，羟丙基纤维素，蒸馏水，甘油。

香膏剂（润发脂）：

新霉素碱    0.35%

阴离子F^-0.50%

或者，杆菌肽    50，000    IU%

阴离子F^-0.50%

或者，盐酸土霉素    3%

阴离子F^-0.50%

或者，盐酸金霉素    3%

阴离子F^-0.50%

赋形剂：凡士林，凡士林油，羊毛脂。

霜剂：

硫酸新霉素B    2.5%

阴离子F^-0.50%

赋形剂：丙二醇，聚氧乙二醇，蒸馏水。

应用本发明最好的实施例为作为耳鼻喉科学用局部抗生素，有以下一些：

眼用香膏剂：

金霉素    1%

阴离子F^-0.50%

或者，土霉素    0.50%

阴离子F^-0.25%

赋形剂：凡士林，凡士林油，羊毛脂。

鼻用溶液：

硫酸新霉素B    1.25%

阴离子F^-0.50%

赋形剂：蒸馏水，柠檬酸，氯化钠。

为增加局部抗生疗法制剂的活性，加进0.10%的氯化苄烷铵是有利的。

应用本发明最好的实施例为在妇科学中，特别用来对付性传染病（SID），在“本发明在局部避孕中的应用”项目内，以及下列各目下已经加以叙述，如“软胶囊”，“霜剂”，“油膏和香膏剂”，“凝胶”，“片剂”，“合成肥皂”和“溶液”。

淋病奈瑟氏球菌：

所用病菌来自医院的分离物。

被测试物质的稀释范围：

溶剂：双蒸无菌水

几何比范围为2

剂量：2000～1.56（更少些）μg/ml

每份稀释物的2ml液体与18ml浓密的优选的培养基混合，琼脂糖培养基经加进补加物G强化后，可用于淋球菌的分离（巴斯得研究院）：

处方：小马血清    165ml

酵母提取物    100ml

红细胞提取物    235ml

葡萄糖溶液    0.65ml

蒸馏水    加至500ml

淋球菌的培养基：2000ml巴斯德培养基+500ml补加物G。

那些培养基和活性物质的稀释液结合起来，形成了研究杀菌活性的手段。活性物质在佩特里细菌培养皿中的终浓度约为800～0.156μg/ml。所用的悬浮液系在肉汤培养基中培养24小时后的生理盐水稀释液，置于层流罩内的合成板的凹孔内，在每一个如此制备的凹孔内，对菌株进行研究（用多头接种器）。每一个培养皿在37℃温箱内放24及48小时后作检查。

MIC的测定：淋球菌株在平皿上展开（在平皿上稀释），其中某一些作为对照株，不含被测试的物质。

从每毫升10个菌落形成单位中取出5μl，沉积于凝胶糖平皿上，后者完全带或不带被测试物质（经18小时培养的淋球菌，悬浮于索伦森溶液内。在36℃孵育48小时，然后在平皿上观察淋球菌生长或生长不足的情况。

白色含球菌：

方法学与淋病奈瑟氏球菌的基本相同，但有以下不同点：

-在双蒸无菌水中稀释范围为2000～1.56μg/ml。每一稀释液的0.5ml加到4.5ml液体Roiron培养基中。

-用念珠菌属培养基（24小时/Roiron培养基）接种，或用对照株接种（Roiron培养基）。在24和48小时期间，于37℃温箱内进行孵育。在t＝24小时以及t＝48小时时，在显微镜下观察载玻片和盖玻片之间的一滴液滴。通过计算酵母数目和测定杀菌剂MIC值来表示其结果。在对照管中，测定耐药百分数。

阴道毛滴虫：

方法学与白色念珠菌的相同。

衣原体：

接种物：由衣原体宿主细胞或Mac    Coy细胞组成。它们被保存在-80℃。用于试验的细胞浓度为2～2.5×10个细胞/ml。细胞层在一定完全培养基内制得。

被测试物质用双蒸无菌水稀释，递增范围的几何比为2。

所用的一种方法由F.Catalan.P.Sednaoui，A.Milovanovic教授（巴黎A.Fournier研究所）提供。

1ml被测试物质的稀释液与1ml细胞悬浮液（Mac    Coy细胞）混合，然后在37℃温箱内孵育1小时和24小时，再将0.2ml混合物置于池内平皿里。将平皿离心（2000转/小时），在37℃孵育1小时。然后用含有0.5mg/l放线菌酮的新培养基0.2ml代替原来的培养基，平皿在37℃孵育48小时。细胞层用甲醇固定，全面地用单克隆抗体染色，并用异硫氰酸荧光素（FITC）。然后，在反向落射荧光显微镜下观察存在于Mac    Coy细胞中的包涵物。

所以，被测试物质的毒性首先被测定，并注意到全面考虑宿主细胞的完整性。

绿脓杆菌：

用两个菌株制备浓厚的溶液。

在0.85%（以重量计）氯化钠等渗溶液中的悬浮体。

检查悬浮液所包含的相同数目的细菌：在半乳聚糖培养基中，通过原来浓厚溶液的连续稀释液的划沟接种（1μl环脊）的正规技术（几何比为10）。在37℃孵育18小时。

溶液中被测试物质于双蒸无菌水内制备稀释液，几何比为2的稀释范围（例如，2000～0.015μg/ml）。

绿脓杆菌细菌悬浮体的混合物（同样源出于AFNOR标准），具有恒定的浓度（4×10⁷个细菌/ml），以及活性物质按递减次序的稀释（2000～0.015μg/ml）。

孵育或接触时间：1小时，24小时和48小时（于37℃）。

对每一个活性物质稀释液的试验要加倍。

观察成活数，记录有关对照株的平均数，后者与试验组的同时培养。

密螺旋体，Gardnerella属，杜克雷氏杆菌，链球菌和金黄色葡萄球菌：

所采用的方法学为F.Catalan，P.Sednaoui，A.Milovanovic等教授（A.Fournier研究所）叙述的一种方法。

比较试验7：

单用氯化苄烷铵和单用壬苯聚醇，得下述结果：

菌株    最小抑制浓度（MIC）

单用氯化苄烷铵

淋球菌    1.15mg/l

密螺旋体    70mg/l

阴道毛滴虫    1.3mg/l

白色念珠菌    50mg/l

衣原体    100mg/l

加德菌（Gardnerella）    50mg/l

杜克雷氏杆菌    75mg/l

链球菌    15mg/l

绿脓杆菌    31.25mg/l

金黄色葡萄球菌    1.56mg/l

菌株    最小抑制浓度（MIC）

单用壬苯聚醇

密螺旋体    75mg/l

绿脓杆菌    50mg/l

金黄色葡萄球菌    4mg/l

链球菌    20mg/l

试验8：

如前例作类同试验，在氟离子存在下进行，得下述结果：

菌株    最小抑制浓度（MIC）

氯化苄烷铵+F^-1μg/ml

淋球菌    0.60mg/l

密螺旋体    56mg/l

阴道毛滴虫    0.9mg/l

白色念珠菌    35mg/l

衣原体    85mg/l

加德菌（Gardnerella）    41mg/l

杜克雷氏杆菌    62mg/l

链球菌    9mg/l

绿脓杆菌    18mg/l

金黄色葡萄球菌    1.1mg/l

菌株    最小抑制浓度（MIC）

壬苯聚醇+F^-1μg/ml

密螺旋体    60mg/l

绿脓杆菌    35mg/l

金黄色葡萄球菌    2.5mg/l

链球菌    15mg/l

比较试验9：

本试验采用含氯化苄烷铵的物质，不带活化组分，而有血清蛋白的情况下进行，得下述结果：

菌株    血清蛋白浓度    最小抑制浓度（MIC）

单用氯化苄烷铵

粪链球菌    0    15mg/ml

30mg/ml    15mg/ml

60mg/ml    16mg/ml

90mg/ml    68mg/ml

淋病奈瑟氏菌    0    1.5mg/ml

30mg/ml    1.5mg/ml

60mg/ml    1.5mg/ml

90mg/ml    9mg/ml

本试验显示血清蛋白对氯化苄烷铵效能的不利效果。

比较试验10：

本试验在试验9同样条件下进行，但在组分中有氟离子，得下述结果：

菌株    血清蛋白浓度    最小抑制浓度（MIC）

氯化苄烷铵+F^-1μg/ml

粪链球菌    0    9mg/ml

30mg/ml    9mg/ml

60mg/ml    9mg/ml

90mg/ml    21mg/ml

淋病奈瑟氏菌    0    0.6mg/ml

30mg/ml    0.6mg/ml

60mg/ml    0.6mg/ml

90mg/ml    1.2mg/ml

本试验显示氟离子有助于降低血清蛋白的不利效果。

比较试验11：

本试验在体外对制剂剂型进行研究（条件相似于试验5及6），所用的产物含氯化苄烷铵为活性成分，但不带活化成分。得下述结果：

菌株    制剂剂型    最小抑制浓度（MIC）

单用氯化苄烷铵

淋球菌    软胶囊    23.65mg/l

片剂    15.62mg/l

阴道毛滴虫    软胶囊    11.80mg/l

片剂    15.60mg/l

通过模拟所得存在于液体中的浓度，用于本试验。

试验12：

本试验以比较试验11中的相同条件，含0.5%（以重量计）氟离子的产物进行，得下述结果：

菌株    制剂剂型    最小抑制浓度（MIC）

氯化苄烷铵+0.5%F^-

淋球菌    软胶囊    5mg/l

片剂    3mg/l

阴道毛滴虫    软胶囊    5mg/l

片剂    3mg/l

Ⅲ）本发明在灭菌领域的应用

该领域涉及对与细菌接触过的地板，表面，仪器……的灭菌处理。

应用本发明最好的实施例如下：

应用    氯化苄烷铵    氟离子    赋形剂

手表皮    0.1%    0.25%    纯洁水或乙醇

制成100%

被灭菌的仪器    1.0%    0.50%    纯洁水制成100%

纺织品    0.05%    0.025%    纯洁水制成100%

仪器    1.0%    0.50%    10%乙醇或纯洁水

（如温度计）    制成100%

表面洁净    0.1%    0.25%    纯洁水制成100%

（如房间、地

板……）

试验按照“AFNOR    NFT    72-150，March    81”标准进行，以氯化苄烷铵，然后以壬苯聚醇作为活性成分。

所用中和剂如下：3%吐温80（V/V）和0.3%卵磷脂（M/V）。培养基pH值为7.2。

比较试验13：

该试验在无活化成分存在下进行：

菌株    最小抑制浓度（MIC）

单用氯化苄烷铵

铜绿假单胞菌CNCM    A22    31.25mg/l

大肠埃希氏菌CNCM    54    127    6.57mg/l

金黄色葡萄球菌，源出于    1.56mg/l

牛津    CNCM    53    154

粪链球菌    CNCM    5    855    4mg/l

耻垢分枝杆菌CNCM    7    326    30mg/l

菌株    最小抑制浓度（MIC）

单用壬苯聚醇

铜绿假单胞菌CNCM    A    22    50mg/l

大肠埃希氏菌    54    127    8mg/l

金黄色葡萄球菌，源出于    4mg/l

牛津    CNCM    53    154

粪链球菌    CNCM    5    855    7mg/l

耻垢分枝杆菌CNCM    7    326    65mg/l

试验14：

该试验与前相同，但有阴离子F^-作为活化成分存在。

菌株    最小抑制浓度（MIC）

氯化苄烷铵+F^-1μg/ml

铜绿假单胞菌CNCM    A    22    18mg/l

大肠埃希氏菌CNCM    54    127    3mg/l

金黄色葡萄球菌，源出于    1.1mg/l

牛津    CNCM    53    154

粪链球菌    CNCM    5    855    3.6mg/l

耻垢分枝杆菌CNCM    7    326    26mg/l

菌株    最小抑制浓度（MIC）

壬苯聚醇+F^-1μg/ml

铜绿假单胞菌CNCM    A    22    35mg/l

大肠埃希氏菌CNCM    54    127    6.5mg/l

金黄色葡萄球菌，源出于    2.5mg/l

牛津    CNCM    53    154

粪链球菌    CNCM    5    855    5.5mg/l

耻垢分枝杆菌    CNCM    7    326    50mg/l

Ⅳ    本发明在美容学中的应用

本发明在美容学中最好的实施例于下文中叙述：

以下剂型可在美容学中显示出来：霜剂，乳，香膏剂，溶液，泡沫浴，合成肥皂，洗发剂，被人们熟悉的洗液，灭菌洗液。

赋形剂的处方与药物制剂相同，但氯化苄烷铵及阴离子F^-的浓度不同。前者最可取浓度为0.2%，后者为0.1%。

化学活性成分或天然来源的活性成分也可配入处方，其浓度要符合美容学的要求。

霜剂和乳可呈连续水相（油包水或水包油的乳剂）或者在温热时呈糊状，在水中自行稀释。

多种不同的赋形剂可参考上述例子，在不受限制和预示方式下，下列产物为合适：

致湿剂：甘油，丙二醇，二甘醇，乙二醇，山梨糖醇，聚氧二醇。

乳化剂：硬脂酸钠，蜂腊，山梨糖酯，聚氧乙烯，乙二醇酯，脂肪醇，三乙醇胺，羊毛脂吐温，乙二醇硬脂酸酯和聚乙二醇。

稳定剂：硬脂酸乙二醇，藻酸软脂醇酯，果胶，树胶，多元醇的脂肪酸酯，可溶性纤维素酯类。

抗氧剂;酒石酸，柠檬酸和抗坏血酸。

防腐剂：硼酸，苯甲酸，过苯甲酸以及它们的甲酯或丙酯，含碱的或不含碱的。

pH值：所有这些处方当pH值在4.5～6.5之间特别有效。为达到此范围，主要应用柠檬酸。

Claims (37)

1、抑制或消灭至少一种单细胞生物(特别是象原虫、微生物、细菌、配子、真菌或其它病毒)的物质或成分的生产工艺，其中至少有一种抑制或消灭上述单细胞生物或病毒的基本有效组份，并和至少一种抑制或消灭与上述生物或病毒有关的酶系统的组份相混合，而上述后一种组份却是上述前一种基本有效组份的激活剂。

2、依照权利要求1的工艺，其中具有激活作用的组份（以下简称激活组份-译注）是一种对配对的酶/底物作用的阻滞剂。

3、依据权利要求1的工艺，其中激活组份是一种能放出阴离子F^-的氟化物，最好是氟的金属衍生物，象氟化钠、氟化钙、氟化钾、氟化铝、氟化锡、氟化铵、或氟磷酸钠等。

4、依照权利要求3的工艺，包括使用由氟化物放出的阴离子F^-浓度，它低于不含基本有效组份的阴离子F^-的最低抑制浓度（MIC）。

5、依照权利要求1的工艺，包括使用基本有效组份的浓度，它低于不含激活组份的基本有效组份的最低抑制浓度（MIC）。

6、依照权利要求1的工艺，包括使用基本有效组份，它本身就能放出一种激活组份。

7、依照权利要求1的工艺，包括使用激活组份，它本身是一种抑制或消灭至少一种单细胞生物或病毒的有效组份。

8、药物成分的生产工艺，包含使用至少一种基本有效组份和至少一种能放出阴离子F^-的氟化物，而其功能在于增强一种或几种基本有效组份的作用效率。

9、化妆品成分的生产工艺，包含配伍用至少一种基本有效组份和至少一种能放出阴离子F^-的氟化物，而其功能在于增强一种或几种基本有效组份的作用效率。

10、局部避孕药成分特别是杀精子药成分的生产工艺，包含使用至少一种作为直接或促进抑制或消灭配子的有效组份的能放出阴离子F^-的化合物以及一种赋形剂。

11、依照权利10的工艺，包含使用唯一的一种抑制或消灭配子的有效组份，它是用至少一种能放出阴离子F^-的氟化物制成的。

12、依照权利要求11的工艺，包含使用成分中的F^-滴度超过4.5ppm，最好在5ppm左右，以便依照国际计划生育联合会（IPPF）的全部杀精子药试验达到100%杀精子活性。

13、依照权利要求10的工艺，包含使用至少另一种作为抑制或消灭配子的基本有效组份的化合物，其抑制或消灭能力随加入阴离子F^-而增强。

14、依照权利要求1的工艺，包含使用作为基本有效组份的一种季铵。

15、依照权利要求1的工艺，包含使用一种表面活化剂，它可以是阳离子的（最好是氯化苄烷铵或其它的烷基苄烷铵），或是阴离子的（最好是甲基牛磺酸钠含氧盐），或是两性的（最好是脂酸上的酰胺基乙基甘氨酸酯衍生物，或是非离子的（最好是壬苯聚醇），上述表面活化剂是一种基本有效组份。

16、依照权利要求1的工艺，包含使用硝酸苯汞或对

烷基苯基聚氧乙烯醚，或多糖乙醚三钠作为基本有效组份。

17、在一种化妆品中使用的成分包括至少一种基本有效组份和至少一种能放出阴离子F^-的氟化物作为上述几种基本有效组份的激活剂组份。

18、使用能放出阴离子F^-的氟化物生产至少包括一种基本有效组份的物质，而氟化物是这基本有效组份的激活剂。

19、使用依照权利要求1的工艺生产的物质或成分来生产用作抗生素和/或抗原虫药和/或杀菌药和/或抗真菌药和/或防腐药和/或抗病毒药的药物。

20、使用依照权利要求1的工艺生产的物质，来生产人用或动物用的特别是抑制或消灭配子的局部避孕药。

21、含有离子化氟的化合物用于生物的局部避孕方法，特别是用于人或动物的局部避孕药或用于依照权利要求1的工艺生产的物质或成分。

22、依照权利要求21用于抑制或消灭配子的成分的化合物。

23、依照权利要求21的化合物，其中含有氟的金属衍生物，象氟化钠、氟化钙、氟化钾、氟化铝、氟化锡、氟化铵，或氟磷酸钠，或其它。

24、依照权利要求21的化合物，其中含有能自发地或在酶作用后放出阴离子F^-的有机氟化物。

25、抑制或消灭至少一种单细胞生物或病毒，特别是象原虫、微生物、细菌、配子、真菌等的过程，包括使用至少一种抑制或消灭上述单细胞生物的基本有效组份，和至少一种抑制或破坏与上述生物或病毒有关的一种酶的组份，上述后一种组份是上述前一种有效组份的激活剂（最好是有协同效应）。

26、依照权利要求25的工艺，包括使用对配对的酶/底物作用的阻滞剂。

27、依照权利要求25的工艺，包括使用作为激活组份的至少一种能放出阴离子F的氟化物，最好是一种氟的金属衍生物，象氟化钠、氟化钙、氟化钾、氟化铝、氟化锡、氟化铵、或氟磷酸钠，或其它。

28、依照权利要求27的工艺，包括使用由氟化物放出的阴离子F^-浓度，它低于不含基本有效组份的阴离子F^-的最低抑制浓度（MIC）。

29、依照权利要求25的工艺，包括使用基本有效组份浓度，它低于不含激活组份的该基本有效组分的最低抑制浓度（MIC）。

30、依照权利要求25的工艺，包括使用本身能放出一种激活组份的基本有效组份。

31、依照权利要求25的工艺，包括使用一种激活组份，它本身是抑制或消灭至少一种单细胞生物或病毒的有效组份。

32、依照权利要求27的工艺，包括使用成分中的F^-浓度超过4.5ppm，最好在5ppm左右，以便依照国际计划生育联合会（IPPF）的全部杀精子药试验达到100%杀精子活性。

33、依照权利要求25的工艺，包括使用作为基本有效组份的一种季铵。

34、依照权利要求25的工艺，包括使用一种表面活化剂，它可以是阳离子的（最好是氯苄烷铵或其它烷基苄烷铵），或是阴离子F^-的（最好是甲基牛磺酸钠含氧盐），或是非离子的（最好是壬苯聚醇），或是两性的（最好是脂酸上的酰胺基乙基甘氨酸酯衍生物），上述表面活化剂是一种基本有效组份。

35、依照权利要求25的工艺，包括使用硝酸苯汞或对

烷基苯基聚氧乙烯醚或多糖乙醚三钠作为基本有效组份。

36、一种包括离子化氟的化合物（最好是氟的金属衍生物或是一种有机氟化物）用于生物局部避孕方法，特别是在依照权利要求25的工艺中用于人或动物的局部避孕药产品。

37、在抑制或消灭配子的成分中使用一种包含离子化氟（最好是氟的金属氧化物或有机氟化物）的化合物。