CN86100959A - 蛋白质的分级分离方法 - Google Patents
蛋白质的分级分离方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN86100959A CN86100959A CN86100959.2A CN86100959A CN86100959A CN 86100959 A CN86100959 A CN 86100959A CN 86100959 A CN86100959 A CN 86100959A CN 86100959 A CN86100959 A CN 86100959A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fraction
- protein
- compound
- value
- glutathione
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 81
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims description 84
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 84
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 title description 6
- -1 sulfite compound Chemical class 0.000 claims abstract description 43
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 37
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 claims abstract description 36
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 28
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 26
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Natural products OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 claims abstract description 16
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 235000021118 plant-derived protein Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims abstract description 9
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 83
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 44
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 claims description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 11
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 10
- AOSFMYBATFLTAQ-UHFFFAOYSA-N 1-amino-3-(benzimidazol-1-yl)propan-2-ol Chemical compound C1=CC=C2N(CC(O)CN)C=NC2=C1 AOSFMYBATFLTAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N Sulphur dioxide Chemical compound O=S=O RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 claims description 6
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 claims description 5
- QIJRTFXNRTXDIP-UHFFFAOYSA-N (1-carboxy-2-sulfanylethyl)azanium;chloride;hydrate Chemical compound O.Cl.SCC(N)C(O)=O QIJRTFXNRTXDIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960001305 cysteine hydrochloride Drugs 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 4
- VOXZROYPJOCCFH-GEMLJDPKSA-N (2s)-2-amino-5-[[(2r)-1-(carboxymethylamino)-1-oxo-3-sulfanylpropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O VOXZROYPJOCCFH-GEMLJDPKSA-N 0.000 claims description 3
- PQUCIEFHOVEZAU-UHFFFAOYSA-N Diammonium sulfite Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S([O-])=O PQUCIEFHOVEZAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 3
- PCAXGMRPPOMODZ-UHFFFAOYSA-N disulfurous acid, diammonium salt Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O PCAXGMRPPOMODZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims 8
- 235000003969 glutathione Nutrition 0.000 claims 6
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 38
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 37
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 21
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 21
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 21
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 20
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 20
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 14
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 11
- 229940079827 sodium hydrogen sulfite Drugs 0.000 description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 9
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 8
- 238000011017 operating method Methods 0.000 description 7
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 6
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 6
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 6
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 5
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 239000010408 film Substances 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- DJEHXEMURTVAOE-UHFFFAOYSA-M potassium bisulfite Chemical compound [K+].OS([O-])=O DJEHXEMURTVAOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229940099427 potassium bisulfite Drugs 0.000 description 2
- 235000010259 potassium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 2
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 2
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 2
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 2
- 229940071440 soy protein isolate Drugs 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 1
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 1
- 101000767750 Carya illinoinensis Vicilin Car i 2.0101 Proteins 0.000 description 1
- 101000767759 Corylus avellana Vicilin Cor a 11.0101 Proteins 0.000 description 1
- 101000622316 Juglans regia Vicilin Jug r 2.0101 Proteins 0.000 description 1
- 101000767757 Pinus koraiensis Vicilin Pin k 2.0101 Proteins 0.000 description 1
- 101000767758 Pistacia vera Vicilin Pis v 3.0101 Proteins 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 150000001944 cysteine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- WBZKQQHYRPRKNJ-UHFFFAOYSA-L disulfite Chemical compound [O-]S(=O)S([O-])(=O)=O WBZKQQHYRPRKNJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000015168 fish fingers Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 230000037039 plant physiology Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- RWPGFSMJFRPDDP-UHFFFAOYSA-L potassium metabisulfite Chemical compound [K+].[K+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O RWPGFSMJFRPDDP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940043349 potassium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010263 potassium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- BHZRJJOHZFYXTO-UHFFFAOYSA-L potassium sulfite Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])=O BHZRJJOHZFYXTO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019252 potassium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L sulfite Chemical compound [O-]S([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/14—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from leguminous or other vegetable seeds; from press-cake or oil-bearing seeds
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
一种用于对大豆蛋白等植物蛋白进行分级分离的方法，该法包括使植物蛋白原料的水溶液系统接受还原条件的处理，例如接受一种亚硫酸盐化合物、一种谷胱甘肽化合物或半胱氨酸化合物的处理，或者在pH值位于中性或碱性范围的条件下接受电解还原处理，然后在20℃或更低的温度下将该系统的pH值调至5.5-7.0，使该系统分离成为一个可溶性或分散性的级分和一个不溶性或沉淀性的级分。
Description
本发明叙述一种蛋白质的分级分离方法，着重叙述大豆蛋白等食用植物蛋白的分级分离方法。
到目前为止，生产大豆分离蛋白的方法是对大豆蛋白原料的水溶液进行适当处理，使之分离成为水溶性或分散性的级分和不溶性或沉淀性级分（这种不溶性残渣称为“豆渣”或“大豆渣浆”），然后调节水溶性或分散性级分的PH值至4-5（通常是4.2-4.6）之间，进行等电点沉淀，再对沉淀进行中和和干燥等适当处理，制成符合需要的大豆蛋白级分。
值得顺便提到的是，大豆蛋白和其他许多植物蛋白一样，是由多种具有高级复杂结构的蛋白质级分所组成的。例如，依据不同蛋白质级分具有不同沉降常数的超速离心法对大豆蛋白进行分级分离的结果表明，大豆蛋白可分离成为2S、7S、11S和15S等多种蛋白质级分。这些级分的物理性质各不相同，而且是由多种亚基所组成，例如7S蛋白质分有三个亚基，11S蛋白质级分有十二个亚基等。许多研究表明，这些蛋白质级分及其亚基的本质（即它们的高级结构和亚基之间的相互作用等等）会随环境条件（如离子强度、PH值、温度和浓度等等）的变化而变化，它们的性质也随之发生变化。
利用以上这些事实，人们对大豆蛋白和其他植物蛋白的分级分离提出了多种多样的方法。利用这些方法分离得到的大豆蛋白，即使它们所处的条件（如离子强度、PH值、某些盐的存在、浓度、温度和操作步骤的差异等等）差别甚少，但它们在物理性质、功能特性和化学性质方面仍会有很大的差别。这些差别不仅来源于上述各种蛋白质级分（如7S、11S等）在数量比例方面的变化，而且来源于高级结构方面的变化以及蛋白质各个级分和或亚基相互作用的变化等等。
在这些已知的植物蛋白的分级分离方法中，有《日本特许公报》发表的第48-56843号专利，它透露了采用稀钙盐溶液分离大豆蛋白11S级分和7S级分的方法。《日本特许公报》第49-31843专利透露了制备大豆蛋白7S级分的方法，该方法是在PH值等于1.2-4.0的情况下利用氯化钠或氯化钾的作用把不溶性级分除去。《日本特许公报》第51-86149号专利透露了利用PH值约等于5.1-5.9的水对油料种子等植物蛋白原料的浆液进行处理，从而提取出一种热凝聚的带有粘性的蛋白质。《日本特许公报》第55-124457号专利透露了制备大豆蛋白7S级分的方法，该法是在PH值等于5.40-5.85时进行蛋白质的提取，并在PH值等于4.5时进行等电点沉淀。《日本特许公报》第55-153562号专利透露了制备大豆蛋白制品的方法，该方法是在PH值为6.0-7.0时从大豆蛋白分离出第一个级分，在PH值为5.0-5.6时分离出第二个级分，在PH值为4.0-4.8时分离出第三个级分，并对第二个级分和第三个级分再作进一步的分离。《日本特许公报》第56-64755号专利透露了制备蛋白质制品的一种方法，该法是采用PH值约等于6.5的水溶性提取介质对植物蛋白进行提取，在等电点的情况下使之沉淀，然后在115-145°F的温度下进行加热浓缩，使制品的干物质含量达到44%或者更多。《日本特许公报》第57-132844号专利透露了制备分离蛋白质的方法，该方法是在PH值为6.5-8.0和存在亚硫酸根离子的情况下从植物蛋白的水溶性浆液中提取出一种级分，然后进行干燥。《日本特许公报》第58-36345号专利透露了分离7S级分和11S级分的方法，该法是将等电点沉淀得到的植物蛋白水溶性浆液的PH值调节到5.0-5.6，同时将盐浓度调节为0.01-0.2M。
此外，关于大豆蛋白分级分离的实验性方法还有以下的文献报告：Roberts，R.C.和Briggs，D.R.发表的文章，载于Cereal Chem.（谷物化学），42卷第71-85页（1965年），Eldrige，A.C.和Wolf，W.J.，载Cereal Chem.（谷物化学），44卷第645-652页（1967年）;Wolf，W.J.和Sly，D.A.，载Cereal Chem.（谷物化学），44卷第653-668页（1967年）;Tkanh，V.H.等，载Plant Physiol.（植物生理学）56卷第19-22页（1975年）。特别值得提出的是关于Thanh V.H.的报告，该报告透露了分离大豆蛋白的7S球蛋白的方法，它使用含有β-巯基乙醇（PH7.8）的三羟甲基氨基甲烷缓冲液来对大豆粉进行提取，然后在每分钟10000转的转速下进行离心，除去不溶性物质，将上清液的PH值调节至6.6，进行透析，在每分钟10000转的转速下离心，分离出粗制的11S级分和7S级分，将7S级分进行等电点沉淀并洗涤，然后冷冻干燥。Yamauchi，F.等人在Agric，Biol.Chem.（农业生物化学）第39卷（1975年）上发表的报告说，他们利用洗涤、中和和溶于缓冲溶液等方法从与Thanh等人同样的粗制11S级分中分离出大豆蛋白的11S级分。
但是，这些已知的植物蛋白的分级分离方法并不十分适用于工业方面的应用，特别是不大适用于大豆分离蛋白的工业化生产。
因此，为了克服这些已知方法的缺点，本专利发明者进行了深入的研究。根据本发明者的研究，这些已知方法尚存在着种种问题，例如：①仅仅采用无机酸等物质去调节三羟甲基氨基甲烷缓冲液的PH值是很难将粗制的11S级分与粗制的7S级分分离的;②象三羟甲基氨基甲烷缓冲液和β-巯基乙醇等化学试剂是不能用于食品工业的;③特别是β-巯基乙醇，由于具有强烈的不愉快气味，不可能用于食品工业;④使用离心力较低的连续式工业离心机（例如沉降式离心机）是很难将沉淀性浆状物质（粗制的11S级分）和溶液状物质（粗制的7S级分）成功地分离的，因为用离心法除去不溶性物质后将PH值调至6.6时所得到的溶液具有很大的粘性。
研究发现，这些问题可采用以下方法去解决：①在PH值为6.5或更高数值的条件下，用含有亚硫酸盐化合物、谷胱甘肽化合物或半胱氨酸化合物的水溶液系统处理植物蛋白原料;②在温度为20℃或者更低的温度下将该系统的PH值调到5.5-7.0，使之分离成可溶性或分散性的级分和不溶性或沉淀性的级分。使用这种操作步骤，可以制得风味和滋味均极为优良但性质上却各不相同的蛋白质制品。特别是在使用含有糖类的大豆蛋白时，可使用工业连续离心机（如沉降式离心机等）使各种级分容易地分离开来。
除此以外，研究还发现，采用电解还原法处理植物蛋白原料的水溶液也可以容易而有效地将7S蛋白级分和11S蛋白级分分离开来，而不会出现上述的问题。在这一方面，虽然Komeyasu，M.等人在Nippon Shokuhin Kogyo Gakkaishi（《日本食品工业学会志》）第三十卷第十期第589-598页（1983年）上透露了大豆蛋白的电解还原法，但他们并没有建议采用电解还原法来分离7S蛋白质级分和11S蛋白质级分。
本发明的目的之一是提供一种对大豆蛋白进行分级分离的新方法，这种方法可用于这类蛋白制品的工业化生产。
本发明的又一个目的是提供一种新的可用于分离植物蛋白的7S级分与11S级分的方法。
当人们熟练地掌握下述的带有附图说明的生产工艺以后，本发明的这些目的和它的优越性将会明显地表露出来。
图1说明在下文介绍的实例1中所获得的每一种蛋白质级分的水悬浮液的浊度和蛋白质浓度的关系。
图2说明在下文介绍的实例1中所获得的一种蛋白质级分的产率与亚硫酸钠和脱脂大豆比率之间的关系。
图3说明在下文介绍的实例4中所获得的11S蛋白质级分的产率与电解还原时间的关系。
图4是在下文介绍的实例4中所获得的蛋白质级分的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱。
图5是在下文介绍的实例2中所获得的蛋白质级分的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱。
图6是一种酸沉淀蛋白质级分的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱。
本发明的第一部分就是提供一种对植物蛋白进行分级分离的方法，该法包括在PH值为6.5或更高数值的情况下用亚硫酸盐化合物、谷胱甘肽化合物或半胱氨酸化合物处理植物蛋白原料的水溶液系统，然后将所得混合物在温度为20℃或者更低的情况下将其PH值调节为5.5-7.0，使蛋白质分离成为两个级分：一个是可溶性或分散性级分（在下文中，有时把它简称为可溶性级分），另一个是不溶性或沉淀性级分（在下文中，有时把它简称为不溶性级分）。这些级分可以容易地采用以下的常规方法对它们进行分离：过滤法或离心法，特别是使用连续工业离心机（如沉降式离心机等）。分离得到的每一个级分可采用洗涤、等电点沉淀、中和与干燥等常规方法使之纯化。
本发明的第二个部分就是提供一种改进的将植物蛋白分离成为7S级分和11S级分的方法，这种方法是将含有7S和11S蛋白质级分的植物蛋白原料的水溶液系统进行电解还原，电解还原时的PH值最好是在中性或碱性的范围。电解还原可以象上面第一个部分所述的那样，在含有少量的亚硫酸盐化合物、谷胱甘肽化合物、半胱氨酸化合物或硫酸盐化合物的情况下进行。然后，可以将经过处理的混合物在温度为20℃或者更低的情况下将其PH值调节为5.5-7.0，使之分离成为主要是由7S蛋白质级分组成的可溶性级分和主要是由11S蛋白质级分组成的不溶性级分。和上述一样，这些级分可以容易地采用常规方法使之分离，分离得到的每一种级分也可用常规方法进行纯化。
从上述可以清楚地看出，本发明的第三个部分就是提供一种对植物蛋白进行分级分离的方法，该方法是在PH值位于中性或碱性的范围内对植物蛋白的水溶液系统进行电解还原，然后在温度为20℃的情况下将该混合物的PH值调至5.5-7.0，使混合物分离成为可溶性级分和不溶性级分。
在本发明中，任何含有一种或多种所需植物蛋白级分的物料均可用作植物蛋白的原料。可用作本发明的植物蛋白原料的具体例子有：大豆、油菜籽、花生和棉籽等油料种子，也包括来自这些油料种子的蛋白质饼粕。考虑到原料的供应和经济问题，最好能使用大豆或含有大豆其他物质的大豆蛋白质，如大豆片、脱脂大豆、豆乳（包括脱水豆乳）、大豆浓缩蛋白或大豆分离白等。
特别要指出的是，本发明的第一部分所用的原料最好是既含有所需要的蛋白质级分也含有不溶性碳水化合物的物料（如大豆本身、脱脂大豆、大豆浓缩蛋白等等，这些物料称为“okara”），因为这样的原料可以更容易地把可溶性级分与不溶性级分分离开来。在本发明的第二部分，所使用的原料最好是含有较少不溶性碳水化合物的物料（如豆乳等）。不过，植物蛋白原料所含的不溶性物质均可在本发明方法的任何阶段中予以除去。举例来说，不溶性物质可以在使用本发明方法之前予以除去，也可以在将该水溶液系统的PH值调至5.5-7.0之后，把溶液分为可溶性级分和不溶性级分，然后把不溶性级分除去。
在本发明的第一部分中，我们是使用亚硫酸盐化合物、谷胱甘肽化合物或半胱氨酸化合物来处理植物蛋白原料的。
亚硫酸盐化合物可使用任何能在水溶液系统中释放出亚硫酸根离子的化合物，这些化合物的具体例子有：亚硫酸、碱性金属的亚硫酸盐（如亚硫酸钾和亚硫酸钠）、亚硫酸铵、碱性金属的亚硫酸氢盐（如亚硫酸氢钾和亚硫酸氢钠）、亚硫酸氢铵、碱性金属的焦亚硫酸盐（如焦亚硫酸钾、焦亚硫酸钠）、焦亚硫酸铵、碱性金属的偏亚硫酸氢盐（如偏亚硫酸氢钾和偏亚硫酸氢钠）、偏亚硫酸氢铵、偏亚硫酸氢铵与二氧化硫的混合物等。亚硫酸盐化合物所使用的数量随原料的蛋白质含量而变化，但一般说来，亚硫酸盐化合物的用量宜为大豆原料重量的0.5%或者更多一点，最好能采用大豆蛋白原料重量的1.0%或者更多一点的数量，当亚硫酸盐化合物的用量少于0.5%（重量比）时，所制得的可溶性级分的蛋白质纯度（亦即所制得的可溶性级分的蛋白质专一性）就会下降。考虑到这种化合物的作用效果和经济成本，亚硫酸盐化合物的用量最多不超过大豆蛋白原料重量的1.0%即已足够。
关于谷胱甘肽化合物和半胱氨酸化合物的实际例子有：谷胱甘肽、谷胱甘肽盐类如盐酸谷胱甘肽、半胱氨酸、半胱氨酸盐类如盐酸半胱氨酸等。一般来说，这些化合物的用量为每100克大豆蛋白原料使用5毫摩尔或者更多一点，最好使用10毫摩尔或者更多一点。这些化合物的用量最多不超过每100克大豆蛋白原料50毫摩尔即已足够。与传统方法使用的巯基乙醇相比，这些化合物没有任何强烈的气味，它们能使蛋白质制品具有极优良的滋味和气味，而不存在任何卫生问题。
使用上述化合物对蛋白原料进行处理是在蛋白原料的分散液或悬浊液等水溶液系统中进行的，PH值为6.5或者更高，较好的是采用7.1-9，最好能采用7.5-8.5。该系统的PH值可采用常规方法进行调节，例如可采用氢氧化钠或碳酸钠等碱性化合物以及盐酸等酸类物质。当PH值低于6.5时，上述化合物将不发生任何作用，而且可溶性级分的产率下降。另一方面，如果PH值大于9，由于碱性条件的关系，可能会产生一种明显的异味。这种处理可以在适于溶解蛋白质或从蛋白原料中提取蛋白质的现有的混合器或搅拌器中进行。在该水溶液系统中，蛋白质原料的浓度并无特殊的限制，当浓度较低时，有利用于蛋白质的溶解和提取。不过，如果蛋白质原料浓度太低，就难以把不溶性级分与可溶性级分分离开来。因此，蛋白质原料的浓度最好是它的水溶液系统总重量的3%或者更多一点（重量比），在通常情况下，可采用8-20%的数值（重量比）。
在本发明的第二部分中提到了要对蛋白质原料的水溶液系统进行电解还原处理。这种处理就是把蛋白质原料置于还原的条件下，而这种条件是利用电解还原作用而在阴极附近产生的，所使用的水溶液系统可和本发明第一部分所采用的完全一样。
电解还原作业可使用已知的电解还原装置进行。这种装置通常是由装有阴极的阴极池和装有阳极的阳极池组成，在两个池之间，有一薄膜相隔或是把两者桥接起来。这个隔膜可使用任何能够让离子通过的材料，例如，可以使用超滤膜（UF），反向渗透膜（RO），半透膜，粘土板或陶土圆筒等陶磁材料，也可以使用制成凝胶状态的高分子材料或含有电解质的琼脂薄膜等等。将蛋白质原料的水溶液系统加入阴极池中，采用常规的方法即可使之发生还原反应。阴极池中水溶液系统的PH值最好位于中性至碱性的范围。
还原反应的程度和速度可以容易地采用调节电流密度、电极电位或电解还原时间来进行控制。例如，当还原反应是按每100毫升豆乳用100毫安的电流进行电解还原时，大约需要六小时就可获得所需的还原程度，在这种情况下，如果增加电流密度或提高电极电位，电解还原时间就可以减少。
除此而外，添加少量氧化还原电势低的物质或者在电解还原条件下能使氧化还原电势降低的物质也可以缩短电解还原时间。这些物质的具体例子有：上面提到的亚硫酸盐化合物、谷胱甘肽化合物、半胱氨酸化合物以及硫酸盐化合物（如硫酸钠）等，硫酸盐化合物在水溶液中能释放出硫酸根离子。举例来说，当每100毫升豆乳添加了10毫克亚硫酸氢钠（SBS）时，只需要4小时就可以达到上述6小时电解还原时间所能达到的还原程度。如果SBS（亚硫酸氢钠）的添加量增加为60毫克，则可在2小时左右就可达到同样的还原程度。
本发明的第二部分内容具有以下优点：（1）可以在不使用或只使用少量的不宜在食品中使用的化学物质的情况对植物蛋白进行分级分离;（2）该水溶液系统的PH值可以在不添加任何碱性物质的情况下维持在中性或碱性的范围，因为在电解还原条件下，该系统的PH值将位于这个范围;（3）可以容易地对主要是由7S蛋白质级分构成的级分和主要是由11S蛋白质级分构成的级分进行分离。
从上述可以清楚地看出，在本发明所采用的方法中，植物蛋白原料是在水溶液系统中并在还原条件以及PH值最好位于中性或碱性的范围内受到处理的。
按照本发明第一部分或第二部分所述的步骤，在还原条件下经过上述处理的水溶液系统随后便在温度为20℃或者更低的情况下把它的PH值调到5.5-7.0，最好是6.0-6.9，从而使之分离成为主要由7S蛋白质级分构成的可溶性级分（以下简称为S-1级分）和主要由11S级分构成的不溶性级分（以下简称为P-1级分）。当PH值低于5.5时，S-1级分的产率下降;如果PH值大于7.0，P-1级分将难于沉淀，而且S-1级分的纯度下降。如果温度高于20℃，S-1级分与P-1级分的分离将变得困难。水溶液系统的温度必需保持在冻结点以上，因为如果发生冻结，就难以对各个级分进行分离。
对所得级分进行分离可采用已知的方法进行，如过滤、薄膜分离和离心分离等。特别是，可以采用连续式离心机（如沉降式离心机和喷嘴分离器等）等设备而容易地实现S-1级分和P-1级分的连续分离作业。当然，也可以采用分批作业式的离心机。如果在还原条件处理以后的水溶液系统的PH值未能调节到5.5-7.0，就很难把S-1级分与P-1级分分离，除非使用转速高达10000转/分的高速离心力才能使它们分离，这个转速比工业离心机的转速高得多（如沉降式离心机的转速为2000-2500转/分）。
由此制得的S-1级分还含有不是7S蛋白质级分的其他水溶性成分，如乳清（上层清液）等，这些成分可直接当作7S蛋白乳来使用。如果需要也可以采用现有的工艺对这些成分进行分离，以获得粗制的7S蛋白质级分。
当P-1级分含有“豆渣（okara）”等不溶性物质时，这些不溶性物质可以直接当作11S蛋白质浓缩物来使用，如果需要，也可以采用现有的工艺从这些不溶性物质中分离出粗制的11S蛋白质级分。比较理想的情况是，将由此制得的P-1级分制成温热的水溶液系统，从而获得11S蛋白质级分处于分散状态或溶解状态的级分（以下简称为S-2级分）。为了使S-2级分处于良好的分散状态或溶解状态，温热水溶液系统的温度应为11℃或者更高，较好的数值是21℃或者更高，最好是30°-60℃，该系统的PH值应为6或者更高，最好是6.7-9。S-2级分可直接当作粗制的11S蛋白质级分来使用。
除此而外，利用上法制得的S-1，P-1和S-2级分，还可采用已知的工艺使之浓缩和干燥，制成性质和普通分离蛋白不同的植物分离蛋白。例如，可以采用等电点沉淀法对每一个级分进行浓缩，回收所得的沉淀，必要时还可用水洗涤沉淀以除去各种杂质。也可以采用超滤薄膜来进行浓缩。另一种浓缩方法是，将每一个级分进行等电点沉淀，把所得沉淀中和后，再采用HTST（高温短时杀菌）和UHT（超高温杀菌）等已知工艺对沉淀进行灭菌处理，或者将所得沉淀进行酶学处理。在一般情况下，最好把所需的制品分离并制成无菌和干燥的产品。
下面介绍的实验将表明，利用上述方法制得的分离蛋白产品与普通制品相比，在性质上有许多不同的地方，因此，这些制品将会有广泛的应用。
下面叙述的实施例、参考例和实验将对本发明作出更详细的说明，但这决不意味着这是构成对本发明应用范围的限制。在以下的实施例、参考例和实验中，所有的“分”均是指重量分量，除非另有说明。
实例1
将脱脂大豆（90分）、水（900分）和亚硫酸氢钠（1.26分）混合，在PH值的7.8的条件下搅拌30分钟。向混合物中加入6N盐酸，使该混合物的PH值变为6.25，将混合物用冷水冷却，在5℃或更低的温度下让该混合物静置30分钟。用沉降式离心机在每分钟2500转的转速下将混合物离心，使混合物分离成为可溶性级分（S-1级分）和不溶性级分（D-1）。将S-1级分的PH值调节为4.5，进行等电点沉淀，把沉淀分离出来，向沉淀中加入水500分，将混合物搅匀，用水洗涤，然后在和上述条件相同的情况下进行离心，收集沉淀下来的级分，将这个级分进行中和，在135℃下加热30秒钟，再进行喷雾干燥，制得一干燥制品（12.6分，以下简称D-1级分）。
另一方面，将上述获得的P-1级分加入温水（500份）中，水温要维持50℃，PH值为8.0，用沉降式离心机将所得沉淀除去，收集所得级分（以下简称S-2级分）。将S-2级分的PH值调至4.5，进行等电点沉淀，将所得沉淀中和、加热和喷雾干燥，得到一干燥产品（12.8分，以下简称D-2级分）。
在生产过程中以及所制得的产品，即S-1，S-2，D-1和D-2级分，均未察觉有任何不愉快的气味。
实验1
对实例1制得的D-1级分和D-2级分与常规方法制得的大豆分离蛋白（SPI）在性质方面进行比较。
大豆分离蛋白（SPI）的制备。
向实例1所用的脱脂大豆（1分）中加入水（10分），将混合物搅匀，用离心机把“豆渣”除去，将所得豆乳进行等电点沉淀，得到凝乳状沉淀，向沉淀内加入水（10份），用水洗涤该混合物，中和以后，按实例1的同样操作步骤进行加热和喷雾干燥，制得大豆分离蛋白（SPI）。
氮溶解度指数（NSI）的测定
将被测样品（3.5克）分散于水（100毫升）中，在40℃下搅拌（450转/分）60分钟。将所得混合物在2500转/分的转速下进行离心，收集第一次上清液，所得沉淀按同样的操作步骤再次进行处理，收集第二次上清液，将两部分上清液合并，用凯氏定氮法测定上清液和原来样品的粗蛋白含量。合并以后的上清液的粗蛋白含量与整个样品的粗蛋白含量的百分比，就是该样品的氮溶解度指数（NSI）。测定结果表明，D-1级分和D-2级分的氮溶解度指数分别为92和93，这些数值和大豆分离蛋白的氮溶解度指数一样高。
凝胶形成能力和粘度的测定
向粉状样品（12克）中加入水或2.5%的氯化钠溶液（88毫升），将混合物在1200转/分的转速下匀浆3分钟，用离心法在2500转/分的转速下离心去泡沫10分钟，然后在80℃下加热30分钟。使用凝乳测定仪（日本IIO K.K.公司制造）测定所得凝胶的强度（克/厘米2），或者使用Brookfield粘度计（日本东京Keiki K.K.公司制造）测定所得凝胶的粘度（厘泊），结果如表1所示。
表1
级分名称 不加氯化钠的凝胶 加氯化钠的凝胶
D-1级分 61克/厘米2100，000厘泊
D-2级分 91克/厘米24，480厘泊
大豆分离蛋白质 74克/厘米2100，000厘泊
从表1可知，D-1级分在加有氯化钠时其凝胶十分脆弱，如果不加氯化钠，则具有很高的粘度。另一方面，D-2级分在加有氯化钠时其凝胶的强度很高，如果不加氯化钠，其粘度甚低。
透明度的测定
在600毫米处测定了含有D-1级分、D-2级分或大豆分离蛋白的各种浓度的水悬浊液的浊度（光密度），每一种级分或大豆分离蛋白的浊度与浓度的关系如图1所示。
这些试验的结果表明，与大豆分离蛋白相比，D-1级分和D-2级分在凝胶形成能力、粘度和透明度等方面是与大豆分离蛋白不同的。需要顺便指出的是，D-2级分能形成白色的较硬的凝胶，这种凝胶和日本一种典型的鱼糕制品（称为“Kamaboko”）十分相似。
实例2
按照与实例1完全相同的操作步骤制备D-2级分，但亚硫酸氢钠的重量与脱脂大豆的重量比例是变化的，图2表示出D-2级分的产率与该重量比例之间的关系。在图2中，D-2的产率采用相对数值表示，假定实例1中D-2级分的产率等于100。
从图2可以看出，亚硫酸氢钠与脱脂大豆的重量比至少应等于0.5%，最好是1.0%或者更多一些。此外，从图中还可清楚地看出，如果不使用亚硫酸氢钠，就很难将D-1与D-2级分分离开来。
实例3
按照实例1完全相同的操作步骤制备D-1与D-2级分，唯一的例外之处是按每100克脱脂大豆使用15毫摩尔的盐酸半胱氨酸或谷胱甘肽来取代亚硫酸氢钠。表2例出了D-2级分的产率。在表2中，产率采用相对数值表示，假定实例1中D-2级分的产率等于100。
表2
D-2级分的产率
实例1 100
盐酸半胱氨酸 88
谷胱甘肽 97
参考实例1
向脱脂大豆（1份）内加入63毫克分子的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液，该缓冲液含有10毫克分子的β-巯基乙醇（PH7.8，15份），将此混合物搅拌并在10000转/分的转速下离心以除去不溶性杂质（“豆渣”）。用2N盐酸将可溶性级分的PH，值调至6.6，用冰水冷却在2-3℃下静置3小时，再用沉降式离心机将该级分分离成为一个分散性级分和一个沉淀性级分，但未能成功。然后，使用分批作业式离心机（10000转/分）将该级分分离成为上清液（S-1级分）和沉淀两部分，将沉淀分散于磷酸缓冲液（PH7.6）中以制备S-2级分。结果发现，S-1和S-2级分由于含有巯基乙醇，两者都具有不愉快的气味，而且还含有缓冲液，因此，它们不宜用于食品方面的用途。
实例4
向脱脂大豆中加入体积为其15倍的水，在PH值为6.8的条件下将混合物搅拌1小时制成豆乳。将豆乳（300毫升）放入电解还原仪器的阴极池内，在阳极池内则加入0.4M氯化钠溶液（300毫升）。用含有0.4M氯化钠的1.5%琼脂桥接管将阴极池和阳极池联接起来。在阴极池中的液体不断受到搅拌的情况下进行电解还原8小时（电流数值：100毫安/100毫升豆乳）。
随着电解还原时间的增加，PH值也会上升（在两小时内，PH值由7上升为8.7），此时应加入2N盐酸使PH值位于7.0-7.5的范围。
电解还原完成以后，将豆乳的PH值调至6.2，用冰水冷却在10℃或更低的温度下静置2小时以形成沉淀，用2500转/分的离心法收集所得沉淀，测定沉淀的数量。图3表示出电解还原时间和沉淀回收数量的关系。在图3中，沉淀的数量是用相对数值表示的，假定电解还原6小时后所回收的沉淀数量等于100。
从图3可以看出，沉淀是在电解还原进行了2小时以后才开始形成的，如果不进行电解还原，就不会形成沉淀。
将沉淀分散于中性温水中，在PH4.5的条件下进行电等点沉淀，所得沉淀经水洗、中和、在140℃加热20秒钟，然后干燥，制得一种主要由11S蛋白质级分组成的分离蛋白。另一方面，在电解还原时获得的分散性级分也要在PH4.5的条件下进行等电点沉淀，所得沉淀经水洗、中和、在140℃加热20秒钟，然后干燥，制得一种主要是由7S蛋白质组成的分离蛋白。
参考实例2
用63mM（毫克分子）的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液对脱脂大豆进行提取，该缓冲液含有10mM（毫克分子）的β-巯基乙醇（PH7.8），提取是在搅拌状态下持续进行一小时，然后在10000转/分的转速下离心15分钟，把“豆渣”除去;用2N盐酸将提取液的PH值调至6.6，用冰水冷却使温度降为2-3℃维持3小时后，在10000转/分的转速下离心20分钟，以获得一种主要是由11S蛋白质级分组成的不溶性级分和一种主要是由7S蛋白质级分组成的可溶性级分。将不溶性级分溶于磷酸缓冲液中（PH7.6），然后进行等电点沉淀，所得沉淀经过水洗、中和、制得一种主要是由11S蛋白制级分组成的蛋白质级分。将可溶性级分进行等电点沉淀以便把上清液除去，所得沉淀经过水洗、中和、制得一种主要是由7S蛋白质级分组成的蛋白质级分。
实验2
将实例4制得的主要是由11S蛋白质级分组成的分离蛋白和参考实例2制得的主要是由11S蛋白质级分组成的级分进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺电泳，所用方法是按照Laemmly U.K.，Nature，227，680，1970和Weber，K.与Osborn，.M，J.B.C.，244，4406，1969所发表的方法进行。所得电泳图谱如图4和图5所示。
作为参考比较，在实例4中利用等电点沉淀和水洗方法从豆乳制得的酸沉淀蛋白质的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺电泳图谱。
根据电泳图谱的着色情况并进行定量测定后得知，实例4的主要是由11S蛋白质级分组成的分离蛋白，其所含的11S蛋白质级分的数量为88%（重量比），而实例4的主要是由7S蛋白质级分组成的分离蛋白，其所含的7S蛋白质级分的数量为88%（重量比）。
实例5
按与实例4完全相同的操作步骤对豆乳进行处理，唯一的例外就是向豆乳加入亚硫酸氢钠。
当用相对的数值表示主要是由11S蛋白质级分组成的分离蛋白的产率时，我们是把实例4中电解还原进行6小时以后的产率作为100的。当每100毫升豆乳使用10毫克亚硫酸氢钠时，该分离蛋白的产率是：电解还原之前为14，电解还原2小时后为56，电解还原4小时后为100;如果每100毫升豆乳使用60毫克亚硫酸氢钠，则电解还原前为75，电解还原2小时后为100。这就是说，使用亚硫酸氢钠可以改善电解还原的效率，即便在电解还原时间减少的情况下也是如此。研究还进一步发现，电解还原处理可以减少亚硫酸氢钠的用量，因而也就减少了亚硫酸氢钠在产品中残留的数量。
实例6
按照实例4的步骤处理豆乳，唯一的例外是向豆乳加入半胱氨酸。当要使主要是由11S蛋白质级分组成的分离蛋白的产率达到实例4中电解还原6小时后的同样数值时，如果每100毫升豆乳使用10毫克半胱氨酸，则所需电解还原时间只有5小时，如果每100毫升豆乳使用30毫克半胱氨酸，则电解还原时间只需3小时。
Claims (14)
1、一种对植物蛋白进行分级分离的方法，其特征在于该法包括在PH值为6.5或者更高的情况下用一种亚硫酸盐化合物、一种谷胱甘肽化合物或一种半胱氨酸化合物去处理植物蛋白原料的水溶液系统，然后将所得混合物在20℃或更低的温度下将其PH值调至5.5-7.0，将该混合物分离成为一个可溶性或分散性的级分和一个不溶性或沉淀性的级分。
2、一种按照权利要求1所叙述的方法，其中所指的植物蛋白是大豆蛋白。
3、一种按照权利要求1所叙述的方法，在该方法中，亚硫酸盐化合物从以下一组化合物中选择：亚硫酸、碱金属亚硫酸盐、亚硫酸铵、碱金属亚硫酸氢盐、亚硫酸氢铵、碱金属焦亚硫酸盐、焦亚硫酸铵、碱金属偏亚硫酸氢盐、偏亚硫酸氢铵和二氧化硫。
4、一种按照权利要求1所叙述的方法，在该方法中，谷胱甘肽化合物或半胱氨酸化合物从以下化合物中选择：谷胱甘肽、盐酸谷胱甘肽、半胱氨酸和盐酸半胱氨酸。
5、一种按照权利要求1所叙述的方法，在该方法中，还进一步包括对不溶性级分进行分离，把不溶性级分分散于温水中，以除去其中的沉淀。
6、一种按照权利要求1所叙述的方法，在该方法中，还进一步包括对可溶性级分进行分离，它对可溶性级分进行等电点沉淀处理，把沉淀分离出来，所得沉淀经过中和、加热、最后把它干燥。
7、一种对由7S和11S蛋白质级分组成的植物蛋白进行分级分离的方法，该方法包括对植物蛋白原料的水溶液系统进行电解还原处理。
8、一种按照权利要求7所叙述的方法，其中所指的植物蛋白是大豆蛋白。
9、一种按照权利要求7所叙述的方法，在该方法中，电解还原处理是在存在着一种亚硫酸盐化合物、一种硫酸盐化合物、一种谷胱甘肽化合物或一种半胱氨酸化合物的情况下进行的。
10、一种按照权利要求7所叙述的方法，在该方法中，亚硫酸盐化合物从以下一组化合物中选择：亚硫酸、碱金属亚硫酸盐、亚硫酸铵、碱金属亚硫酸氢盐、亚硫酸氢铵、碱金属焦亚硫酸盐、焦亚硫酸铵、碱金属偏亚硫酸氢盐、偏亚硫酸氢铵和二氧化硫。
11、一种按照权利要求7所叙述的方法，在该方法中，硫酸盐化合物、谷胱甘肽化合物或半胱氨酸化合物从以下化合物中选择：硫酸钠、谷胱甘肽、盐酸谷胱甘肽、半胱氨酸和盐酸半胱氨酸。
12、一种按照权利要求7所叙述的方法，在该方法中，还进一步包括在PH值为5.5-7.0和在20℃或更低的温度下对该系统进行电解还原处理，使该系统分离成为一个可溶性或分散性的级分和一个不溶性或沉淀性的级分。
13、一种对植物蛋白进行分级分离的方法，该方法是使植物蛋白原料的水溶液系统在PH值位于中性或碱性范围的情况下接受还原条件的处理，然后在20℃或更低的温度下把该系统的PH值调至5.5-7.0，使该系统分离成为一个可溶性或分散性的级分和一个不溶性或沉淀性的级分。
14、一种按照权利要求13所叙述的方法，其中所指的植物蛋白是大豆蛋白。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2792585A JPS61187755A (ja) | 1985-02-14 | 1985-02-14 | 大豆蛋白の製造法 |
| JP27925/1985 | 1985-02-14 | ||
| JP7725785A JPH0720981B2 (ja) | 1985-04-11 | 1985-04-11 | 蛋白の分画法 |
| JP77257/1985 | 1985-04-11 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN86100959A true CN86100959A (zh) | 1986-08-13 |
| CN1008684B CN1008684B (zh) | 1990-07-11 |
Family
ID=26365929
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN86100959A Expired CN1008684B (zh) | 1985-02-14 | 1986-02-14 | 蛋白质的分级分离方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4771126A (zh) |
| CN (1) | CN1008684B (zh) |
| BE (1) | BE904225A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102803567A (zh) * | 2009-06-03 | 2012-11-28 | 协和发酵生化株式会社 | 制造还原型谷胱甘肽的方法 |
| CN104419949A (zh) * | 2013-08-22 | 2015-03-18 | 李旻谚 | 水解氨基酸制备方法 |
| CN108294164A (zh) * | 2018-03-29 | 2018-07-20 | 江南大学 | 一种工业化制备大豆蛋白的7s蛋白的方法及系统 |
| CN116349769A (zh) * | 2023-03-08 | 2023-06-30 | 东北农业大学 | 一种利用中强电场提高大豆11s球蛋白聚集特性的方法 |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5273773A (en) * | 1987-07-06 | 1993-12-28 | Katayama Chemical Works Co., Ktd. | Protein partial degradation products |
| DE3871260D1 (de) * | 1987-07-06 | 1992-06-25 | Katayama Chemical Works Co | Partielles abbauprodukt von proteinen, verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung. |
| US5274079A (en) * | 1987-07-27 | 1993-12-28 | Katayama Chemical Works Co., Ltd. | Protein partial degradation products that are useful as surface active agents and dispersing agents |
| US4857343A (en) * | 1988-08-23 | 1989-08-15 | Continental Can Company, Inc. | Process for the low temperature pasteurization of liquid comestibles |
| US5281353A (en) * | 1991-04-24 | 1994-01-25 | Allergan, Inc. | Compositions and methods for disinfecting/cleaning of lenses and for destroying oxidative disinfectants |
| NZ242358A (en) * | 1991-05-10 | 1994-03-25 | Allergan Inc | Use of thiol compounds to inhibit deposits on a contact lens |
| CN1064370C (zh) * | 1994-10-22 | 2001-04-11 | 王崴 | 一种植物蛋白质的提取方法及用途 |
| ES2152066T3 (es) * | 1996-03-28 | 2001-01-16 | Fuji Oil Co Ltd | Procedimiento para producir un hidrolizado de proteina de habas de soja y productos carnicos y bebidas que usan el mismo. |
| WO1998044807A1 (en) * | 1997-04-04 | 1998-10-15 | Monsanto Company | High beta-conglycinin products and their use |
| US6171640B1 (en) | 1997-04-04 | 2001-01-09 | Monsanto Company | High beta-conglycinin products and their use |
| JP3649126B2 (ja) | 1999-03-30 | 2005-05-18 | 不二製油株式会社 | 大豆７ｓグロブリンと１１ｓグロブリンの分画および製造法 |
| MXPA02010643A (es) * | 2000-04-26 | 2004-05-17 | Land O Lakes Inc | Un metodo de tratamiento de proteinas de soya y un producto de proteina de soya producido mediante este metodo. |
| US7186425B2 (en) * | 2000-09-29 | 2007-03-06 | Fuji Oil Company, Ltd. | Composition for diminishing neutral fat in blood |
| CN1237890C (zh) * | 2000-10-02 | 2006-01-25 | 不二制油株式会社 | 分级大豆蛋白及其生产方法 |
| WO2004009731A1 (ja) * | 2002-07-23 | 2004-01-29 | Fuji Oil Company, Limited | 抗酸化剤及びその製造方法 |
| US7608292B2 (en) | 2003-10-14 | 2009-10-27 | Land O'lakes Purina Feed Llc | Method of processing soy protein |
| US20050112244A1 (en) * | 2003-11-26 | 2005-05-26 | Hall Alex F. | Container having separate cells for protection and display of produce |
| US20060057275A1 (en) * | 2004-09-16 | 2006-03-16 | Shaowen Wu | Process for the preparation of glycinin-rich and beta-conglycinin-rich protein fractions |
| WO2006034524A1 (en) * | 2004-09-30 | 2006-04-06 | The University Of Queensland | Method of producing a liquid phase protein |
| US20070224335A1 (en) * | 2006-03-22 | 2007-09-27 | Shaowen Wu | Stable soy protein beverage composition |
| EP1860959A2 (en) * | 2005-03-22 | 2007-12-05 | Solae, LLC | A stable soy protein beverage composition |
| US20070054031A1 (en) * | 2005-09-02 | 2007-03-08 | Keshun Liu | Methods of extracting, concentrating and fractionating proteins and other chemical components |
| US8877281B2 (en) * | 2005-09-21 | 2014-11-04 | Burcon Nutrascience (Mb) Corp. | Preparation of canola protein isolate involving isoelectric precipitation |
| CA3009504A1 (en) * | 2015-12-24 | 2017-06-29 | The Dannon Company, Inc. | Use of a lactase in the preparation of a strained fermented dairy product |
| ES2981717T3 (es) * | 2017-03-20 | 2024-10-10 | Imi Tami Institute For Res And Development Ltd | Nuevo procedimiento para la extracción de proteínas de materia de plantas o algas |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US1245983A (en) * | 1916-12-11 | 1917-11-06 | Sadakichi Satow | Process of making celluloid-like substances. |
| US4208260A (en) * | 1978-05-09 | 1980-06-17 | Du Pont Of Canada, Limited | Treatment of comminuted proteinaceous material under the influence of an electric field |
| US4435438A (en) * | 1980-12-29 | 1984-03-06 | A. E. Staley Manufacturing Company | Soy isolate suitable for use in imitation cheese |
| US4346122A (en) * | 1980-12-29 | 1982-08-24 | A. E. Staley Manufacturing Company | Low-viscosity, high-NSI, heat-gelling soy isolates |
| US4368151A (en) * | 1981-08-10 | 1983-01-11 | A. E. Staley Manufacturing Company | 7S And 11S vegetable protein fractionation and isolation |
| US4370267A (en) * | 1981-08-10 | 1983-01-25 | A. E. Staley Manufacturing Company | Fractionation and isolation of 7S and 11S protein from isoelectrically precipitated vegetable protein mixtures |
| US4386110A (en) * | 1982-01-08 | 1983-05-31 | Hiroshima Prefecture | Electrical treatment method of soybean protein |
| US4551274A (en) * | 1983-08-22 | 1985-11-05 | Ralston Purina Company | Electrolytic treatment of vegetable protein |
-
1986
- 1986-02-13 BE BE0/216265A patent/BE904225A/fr not_active IP Right Cessation
- 1986-02-14 CN CN86100959A patent/CN1008684B/zh not_active Expired
-
1987
- 1987-06-19 US US07/063,748 patent/US4771126A/en not_active Expired - Fee Related
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102803567A (zh) * | 2009-06-03 | 2012-11-28 | 协和发酵生化株式会社 | 制造还原型谷胱甘肽的方法 |
| CN102803567B (zh) * | 2009-06-03 | 2015-06-03 | 协和发酵生化株式会社 | 制造还原型谷胱甘肽的方法 |
| US9249517B2 (en) | 2009-06-03 | 2016-02-02 | Kyowa Hakko Bio Co., Ltd. | Process for production of reduced glutathione |
| CN104419949A (zh) * | 2013-08-22 | 2015-03-18 | 李旻谚 | 水解氨基酸制备方法 |
| CN108294164A (zh) * | 2018-03-29 | 2018-07-20 | 江南大学 | 一种工业化制备大豆蛋白的7s蛋白的方法及系统 |
| CN108294164B (zh) * | 2018-03-29 | 2022-02-01 | 江南大学 | 一种工业化制备大豆蛋白的7s蛋白的方法及系统 |
| CN116349769A (zh) * | 2023-03-08 | 2023-06-30 | 东北农业大学 | 一种利用中强电场提高大豆11s球蛋白聚集特性的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1008684B (zh) | 1990-07-11 |
| BE904225A (fr) | 1986-05-29 |
| US4771126A (en) | 1988-09-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN86100959A (zh) | 蛋白质的分级分离方法 | |
| JP4406286B2 (ja) | 油料種子蛋白質単離物の連続製造方法 | |
| JP3756153B2 (ja) | 油糧種子タンパク質単離物の製造 | |
| JP4383345B2 (ja) | カノーラ油料種子粕からのタンパク質の抽出 | |
| CN86105139A (zh) | 制作低肌醇六磷酸盐大豆分离蛋白的方法 | |
| RU2336717C2 (ru) | Белковый изолят из семян льна и способ его получения | |
| PL184927B1 (pl) | Sposób wytwarzania proszkowego izolatu białkowego | |
| CA1207755A (en) | 7s and 11s vegetable protein fractionation and isolation | |
| CN102123606A (zh) | 由低芥酸菜子油料种子制备低芥酸菜子蛋白质分离物（“blendertein”） | |
| CN1212333C (zh) | 大豆分离蛋白的清洁生产方法 | |
| JPH1156248A (ja) | 油糧種子から高濃度油脂含有物と未変性タンパク質を分離、製造する方法 | |
| AU2003275628B2 (en) | Fractionated soybean protein and process for producing the same | |
| JP2720646B2 (ja) | ７ｓ蛋白の分画法 | |
| EP3599884B1 (en) | Novel process for extraction of protein from plant or algal matter | |
| CN101052309A (zh) | 用电渗析对大豆衍生材料进行去杂味的方法 | |
| JP2002020781A (ja) | 油糧種子から高濃度油脂含有物と未変性たんぱく質を分離、製造する方法 | |
| JPH0365138B2 (zh) | ||
| SU736938A1 (ru) | Способ получени белкового кормового продукта | |
| CN1091904A (zh) | 无蛹臭无盐食用蚕蛹蚕白粉的提取工艺 | |
| RU95108825A (ru) | Способ получения соевого концентрата | |
| CN114845559A (zh) | 一种用于制备未变性植物蛋白分离物的方法 | |
| IE62295B1 (en) | Whey protein fractions | |
| CHAKRABORTY | Functional Properties of Coconut Protein Isolate Obtained by | |
| BG62313B1 (bg) | метод за изолиране на млечносуроватъчни белтъци | |
| HU186957B (en) | Process for the large scale treatment of animal blood into a product for human utilization |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C13 | Decision | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| C17 | Cessation of patent right |