CN114845559A - 一种用于制备未变性植物蛋白分离物的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于制备高质量植物蛋白质分离物的方法，该方法允许在最终产品中保持起始材料中的蛋白质的天然生物活性的营养价值和特定功能性；本发明还涉及通过该方法获得的植物蛋白质分离物及其在食品行业中的用途。

Description

一种用于制备未变性植物蛋白分离物的方法

技术领域

本发明总体上涉及植物原料的加工领域，并且更准确地说，它涉及一种用于制备高质量植物蛋白质分离物的方法，其允许在最终产品中保持起始植物原料的蛋白质的营养价值和特定功能。本发明还涉及通过该方法获得的未变性植物蛋白质分离物及其在食品行业中的应用。

背景技术

近年来，在工业成品和工业半成品产品中，消费者对保证植物来源并保留起始原料的质量特性、以及其生物价值和其自然功能性、还适当考虑到环境状况的产品的需求也在增加。

为了追求具有这些特性的产品，起始植物材料显然必须经受处理，这些处理反过来又必须不仅保证处理后产品的所期望的生态学，而且还要保证方法本身的条件和用于执行它的试剂和溶剂的所期望的生态学。目前，所使用的生产方法的质量、其环境可持续性和最终产品中原料特性的保存，特别是在食品行业中-以及在诸如畜牧业的相关行业中-代表了工业化国家市场的主要需求。

在过去的几十年中，人类和动物饮食中补充剂的使用也已增加，特别是蛋白质补充剂的使用。这些补充剂以蛋白质分离物或浓缩物的形式分别具有相对于干物质按重量计约90％或70％的蛋白质含量，这些补充剂原样使用并通常以粉末形式作为补充剂使用。或者它们被用于工业中，不仅增加食品的蛋白质含量，还通过由它们展现的液体和脂质的保留以及它们的乳化能力来改善它们的稠度，特别是具有改进生面团的能力。目前，蛋白质分离物已经存在于几种常用产品中，诸如，动物饲料、早餐谷物、甜点、产品、肉类替代品、酱汁和汤。

普遍用于从植物原料(诸如，大豆)开始生产蛋白质分离物的方法是基于将原料悬浮于水性介质中，随后分离不溶性组分，主要是不溶性碳水化合物，并随后等电沉淀蛋白质、随后通过离心来分离蛋白质沉淀物。蛋白质组分的沉淀通常是通过加入盐酸将水性溶液的pH调至蛋白质的等电点(pH 4.5左右)来实施的[1]。沉淀物一旦分离并可能被中和，就会呈现为浓稠的奶油状，然后通常通过使用高温的技术将其干燥，以使该过程更快且在工业上可持续。用这些技术获得的产品是粉末形式并可具有高蛋白质含量。然而，这些蛋白质分离物中的蛋白质质量受到生产方法的影响，特别是受第一步中在水中悬浮使用的NaOH的影响，这导致最终蛋白质分离物中的高钠含量。此外，最终蛋白质分离物的质量还受到在该生产方法中加入强矿物酸(诸如HCl)用于在等电点的沉淀以及受最终干燥步骤使用高温的影响。在这样的情况下，在最终蛋白质分离物中发现了氯化物，并检测到存在蛋白质的变性，随之带来它们功能性的损失。变性是指结构和化学表面活性的改变，涉及空间化学变化，和与原本与蛋白质本身相互作用的分子之间的相互作用的变化，以及因此的生物功能的改变以及工艺能力中的改变，其中该功能允许被利用。影响这些方法的经济和环境可持续性的另一个缺点是，总是与使用强酸有关，因此需要在该方法的后续步骤中通过加入强碱来中和，从中形成盐，随后必须通过反复洗涤和使用大量水来消除。

通过使用超滤作为从蛋白质材料开始分离蛋白质组分的唯一方法，而不是用强酸在等电点沉淀，可以获得更大程度的蛋白质保存[2]。用这种方法获得的蛋白质分离物的产率也更高，但是由于高能耗，超滤方法的时间和固有成本上的不足，因此使得在工业上不适用于大规模生产。

由于这些原因，迄今为止，仍然需要提供一种植物蛋白质分离物的生产方法，该方法是生态的，但具有简单的工业实用性，能够提供高产量高质量的产品，其中起始蛋白质保有其天然形式，具有它们在起始原料中所具有的营养和功能特性。

发明内容

现在，申请人已发现具有高蛋白质含量的植物原料，特别是植物种子，诸如，大豆或豌豆种子，如果根据下文详细描述的方法溶解在水中并用弱有机酸和用CO₂沉淀，导致最终产品是蛋白质分离物。它具有非常高的蛋白质含量，还保持了起始植物原料中同样蛋白质的功能性。

有利地，在该制备方法中使用的所有试剂和溶剂对人无毒或对环境无害，因此它们不存在与使用安全和操作它们的操作者的健康有关的问题；此外，它们不会在最终产品中留下有毒痕迹或残留物。

因此，本发明的主题是如所附权利要求中的第一项所限定的用于制备蛋白质分离物的方法。

如所附的独立权利要求12、13和14中限定的，可通过该方法获得的蛋白质分离物、它们在食品领域中作为蛋白质补充剂的用途、以及包含本蛋白质分离物的产品，代表本发明的进一步的主题。

根据本发明的用于制备蛋白质分离物的方法、由此获得的蛋白质分离物、它们的用途以及包含蛋白质分离物的食物产品的进一步的重要特征在以下具体实施方式中进行说明。

附图说明

图1：通过对在以下实施例2中描述的阶段iv)结束时本方法的末端浆液(endsera)中含有的蛋白质级分和用HCl的比较试验的蛋白质级分的SDS-PAGE电泳获得的电泳图谱；

图2a：通过傅里叶变换红外光谱(FT-IR)获得的商业豌豆蛋白质的光谱图；

图2b：如以下实施例3中所描述的通过本方法获得的豌豆蛋白质分离物的FT-IR光谱图。

具体实施方式

在以下描述中，除非另有说明，否则百分比量表示为相对于包含它们的组合物的总重量的重量百分比。

申请人惊奇地发现，从植物蛋白材料开始，特别是从植物种子或谷物(诸如，大豆、豌豆种子、玉米胚芽、荞麦及其混合物)开始，采用简单且工业上可扩展的制备方法，是有可能获得在蛋白质含量和蛋白质功能性保存方面上质量优良的蛋白质分离物的。本发明的范围还包括非种子或谷粒形式的起始材料，只要它们是植物蛋白材料，即具有高蛋白质含量的材料，通常高于干物质的10重量％，诸如，苜蓿。

本发明的方法允许获得仅植物来源的蛋白质分离物，其中“蛋白质分离物”是指具有以干物质计约90重量％或更高的蛋白质含量的产品。在本发明的上下文中，“未变性蛋白质分离物”是指其中所含有的蛋白质基本上未变性的蛋白质分离物。

根据本发明的用于从植物蛋白材料开始制备未变性蛋白质分离物的方法包括以下步骤：

i)用脉冲压力混合系统在压力下将所述植物蛋白材料在扩散器中悬浮于pH高于7的水中，形成碱性水悬浮液；

ii)处理步骤i)中形成的所述碱性水悬浮液以分离固体残余物，所述固体残余物包含其中所含的淀粉和纤维，并获得基本上不含纤维和淀粉的水性悬浮液；

iii)向步骤ii)中获得的水性悬浮液加入弱有机酸，直到达到6.5至3.0的pH；

iv)在CO₂压力下将步骤iii)中获得的酸化悬浮液引入溶解器中，从而形成凝胶状蛋白质团块和乳清；

v)将乳清与所述凝胶状蛋白质团块分离，并将其除气；

vi)将步骤v)中获得的除气的凝胶状团块脱水以获得所需的蛋白质分离物，

其中，从i)到vi)的每个步骤在室温下或在65℃以下的温度的任何情况下实施。

在步骤i)中溶解于水中之前，优选采用合适的手段使起始蛋白质材料经受干燥、去皮和/或压碎。对于种子，压碎具有使种子的种皮(pericarp，果皮)脱离的作用，优选通过重力法或用低压的气流将其去除，仅溶解存在于种皮内的种子。压碎之后可以用pH为7.2至8.5的碱化水进行调节步骤，例如，进行5分钟至12小时的时间范围，直到种子的胚乳达到15至22％的湿度。如此处理的种子可在合适的磨机中进一步研磨直至获得颗粒，例如，具有小于50μm的平均粒径，其可在步骤i)中更容易地溶解。

本方法的步骤i)中的蛋白质材料的悬浮是用pH优选为7.5至9.5的碱化水来实施，例如通过向水加入Ca(OH)₂来获得。所用的水量优选地使获得蛋白质材料(优选为颗粒形式)与水的体积比率在1:5至1:30。在该步骤中可以使用搅拌或混合手段来有利于和加速溶解。本方法的混合有利地用脉冲压力混合系统实施。在本发明的一个方面，该系统使用离心泵将混合物加压4-6bar的压力，并将其送至位于扩散器锥体底部的蓄积罐，从该蓄积罐引出通往混合喷嘴的管。这些喷嘴集成在文丘里型喷射器中，并具有径向和切向角，由此它们吸入喷射器的底部部分的液体，从而将导致低压。将提供混合和提取效果，并且在喷射器的顶端部分，将产生喷嘴体积流速的3到4倍的体积流速。由于流速的增加，本方法的脉冲混合系统加快了提取过程并确定了混合物在扩散器的整个体积内的总混合，而无需引入压缩空气或技术气体。然而，扩散器内的压力通常保持在0.5到4bar。

依据起始材料，水性悬浮液通常在反应器中保留用于混合的范围在5分钟至3小时的时间。

本方法的步骤ii)中的纤维和淀粉的分离可以根据本领域任何具有普通知识的专家容易识别的技术来实施，诸如，通过合适的膜过滤或离心/倾析。从水性悬浮液中分离出的纤维和淀粉内容可以被回收用于其他加工和用途，而蛋白质悬浮液则经受后续的酸化步骤iii)。

本发明方法的优点之一是保存了存在于起始植物材料中的蛋白质的功能性：它们在本方法的条件下不变性，而是保有其天然形式。这对于蛋白质分离物的食品用途特别理想，因为它可以保证获得良好确定的产品，该产品将具有起始材料的蛋白质特性，并且营养和功能价值高于采用变性过程获得的已知产品。由此得出采用该方法获得的蛋白质分离物的有用性，不仅是作为蛋白质补充剂本身，而且还作为食物产品中的工艺辅助剂，以便通过借用该方法的工艺特征来增强蛋白质的生物功能性。

如上所述，已知方法大量使用强酸从起始蛋白质材料提取蛋白质，这对蛋白质具有变性作用。而在本方法中，提取步骤iii)中通过向起始蛋白质材料的水性溶液加入弱有机酸(优选选自柠檬酸、酒石酸和它们的混合物)来获得蛋白质等电点的pH。

柠檬酸是三质子有机酸，而酒石酸是二质子有机酸；这些是弱酸，并因此，在本方法的应用条件下，它们保证了经处理的蛋白质原料中的蛋白质不变性，这与现有技术的用强酸的处理不同。柠檬酸和酒石酸在弱有机酸中是优选的，因为它们也存在于自然界中、在植物和果实中，并且分别存在三个和两个羧酸基团作为结合点，根据本发明人，这有利于倾析蛋白质。不希望受限于理论，在本发明的方法中，使用二质子酸、或者甚至更好的三质子酸，允许产生晶格并使蛋白质聚集体更重，从而有利于蛋白质的倾析速度，而无需破坏它们的结构。

在随后的步骤iv)中，将酸化的悬浮液在CO₂压力下引入溶解器中，操作压力优选为0.5至80bar，以便进一步将pH校正在6.5至3的值内。蛋白质材料的溶解率和凝胶状蛋白质团块与乳清的分离率因此非常高，并且也获得了凝胶状团块和乳清间更好的分离。

在本方法的特定实施方案中，酸化前的悬浮液和/或CO₂溶解器出口处的乳清用合适的过滤手段过滤，并丢弃滤液。例如，酸化前的悬浮液可以用平均孔隙率小于10μm的压滤器或真空过滤器过滤，而CO₂反应器出口处的末端乳清可以用孔隙率小于20kDa的膜过滤。将含有未沉淀蛋白质的截留物加回到加入柠檬酸前的提取液流。可替代的，可以通过倾析器将提取物与任何留在悬浮液中的纤维和淀粉分离，然后在CO₂反应器中酸化并使用增加的压力以便将pH降低到待离析的蛋白质级分的等效等电点之后被澄清。在从乳清中分离出凝胶状蛋白质团块后，解吸CO₂且随后提取物再次通过倾析器经受离心分离，收获已至少部分中和的蛋白质分离物，而无需使用碱和进一步的洗涤。还收获了具有能源利益的或用于农学中的液体乳清，作为奶牛喂养、育肥牛和养猪的饲料组分。蛋白质离析和分离后获得的乳清可引导至能源链(厌氧发酵)，或通过真空浓缩机或孔隙率低于1000Da的膜浓缩，以获得产品，具有3-4倍浓缩的干物质含量。因此，它们可用于农艺目的，如有机肥料、植物刺激剂，照此或加入足够等分的微量营养素或在其用合适的微生物菌株发酵和/或补充后，以便改进它们的植物刺激剂性能。在又一可替代的方案中，该截留物可以在蒸发器/浓缩器中浓缩，适于获得具有足够干物质含量的糖基质，适于配制用于农业、畜牧业和能源用途的产品。

该方法的步骤vi)中的脱水可以根据各种已知的替代干燥技术来实施，总是在蛋白质的非变性条件下实施。这些条件可以很容易地被本领域技术人员在各种可用的方法中识别出。适用于本方法的步骤vi)中的干燥技术的非限制性实例是用环形脱水器、用转鼓或流化床干燥器脱水。在本方法的优选实施方案中，步骤vi)中的脱水在受控气氛下实施，或者更好的是在真空下，在薄膜蒸发器中在50℃以下的温度下实施。

本发明方法的所有步骤都可以在室温下实施。当室温以上的温度可能有利于该方法时，特别是步骤i)的扩散和溶解和/或步骤vi)的脱水时，优选工作温度将不超过65℃，以避免任何由于加热而蛋白质变性的风险。在本发明的一方面中，步骤vi)通过在真空环境中通过旋转叶片将待脱水的凝胶状蛋白质团块分布在配备有外部加热夹套的容器的内壁上来实施。这样，凝胶状团块中所含的水在短时间内被蒸发，在特殊的热交换器中冷凝，并因此可以容易地回收并在溶解步骤i)中重复使用。

由于它们的特性，柠檬酸和CO₂代表了用于生态方法中的理想产品，诸如本发明的那些，不需要使用任何其他对环境有害的溶剂或试剂，或者可能仍在最终产品中留下有害杂质。除其他外，柠檬酸也自然存在于许多植物中，并甚至因其防腐属性而被加入到许多食品中。此外，该方法简单安全，在工业水平上易于扩展；特别是，它不需要使用高温。该方法的这方面、以及避免使用在已知方法中通常使用的强酸和碱，都允许获得具有高蛋白质含量的最终产品。蛋白质的原始功能性也很大程度上保存下来，因此相对于在或多或少变性条件下采用已知方法获得的蛋白质分离物，具有改进的营养和功能特性。

相对于起始原料中所含蛋白质的总重量，以干物质表示，由该方法可获得的分离的蛋白质的提取产率高于蛋白质的80重量％。由于在本方法中可用的温和条件，本分离物中的蛋白质也保持了它们在起始材料中的独特性，诸如，在来源种属的物候期期间细胞中和贮藏器官(种子)中所具备的生物功能。事实上，本方法允许避免存在于起始植物材料中的蛋白质变性，既通过在沉淀阶段不使用强矿物酸也通过使获得的蛋白盐不经受随后的用碱性物质的洗涤和中和的循环。除了保持天然蛋白质特性的这一主要优点之外，本方法的特征还在于比已知方法更简单、减少水的使用以及最终商业分离物中没有污染。已知方法中的这种污染是由于使用碱用于中和在强酸性条件下提取的蛋白盐而引起的。此外，本方法的各个阶段中使用的温度也最大程度地限制天然蛋白质的热变性，且因此也帮助保存了它们的自然生物和工艺功能性。

用本发明的方法获得的颗粒形式的脱水的蛋白质分离物，具有在10到100微米的粒径和小于5％的水分含量。依据所用的起始植物材料和分离的pH，本蛋白质分离物的颜色可以从灰白色到稻草黄色到淡绿色变化。干燥的蛋白质分离物是高度吸湿的，能够相对于无水重吸收5至20倍的水，在分散水相或润湿表面上对脂肪物质具有高分散和乳化能力。本蛋白质分离物还显示出高增稠、结合能力，能够产生或多或少的薄泡沫，这取决于培养基中蛋白质的浓度和空气夹杂系统的类型。如果加热到65℃以上的温度持续可变时间，该蛋白质分离物产生变性形式，这会使与之相互作用的结构整体化，失去其原始特性，但会稳定其结构。

此外，如以下实验部分中所示，本蛋白质分离物的特征在于不含氯化物以及降低的钠含量，相对于干燥分离物的总重量钠含量在0至0.02重量％。

采用本发明的方法可获得的蛋白质分离物的这些特征使其特别有用于作为蛋白质补充剂的用途。另一方面，它可以用在工业上，以增加食品的蛋白质含量，特别是那些用于儿童或用于不含动物蛋白的饮食，并由于其乳化能力而改善生面团的稠度。

下面通过实施例来描述本发明，但不限于此，但应理解，所描述的试剂的数量和百分比以及反应器的类型和更一般地所使用的条件可以变化，但仍保持在本发明的范围内。

实施例1

从大豆制备蛋白质分离物

预先在室温下风干的大豆，干物质含量为87重量％，已经用反转轧辊压光机压碎，并通过重力法去除种子的种皮。通过在30分钟的时间加入pH为8的碱化水对破碎的种子进行调理，使干物质含量达到78重量％。压碎并调理过的种子已用磨机研磨，设计为不会加热种子到50℃以上，因而获得平均粒径在10至70μm的颗粒。

然后，在受控的pH和与水的重量比为1:15的情况下，将获得的粉送至扩散器，并在5bar的压力下在其中保持40分钟的时间。扩散器的内含物被送至过滤系统(板式过滤器、溢流过滤器(flood filter)、旋转真空过滤器)或送至一系列过滤系统，或者通过倾析器，以便将纤维与还含有被扩散器溶解的蛋白质的液相分离。然后液体提取物加入柠檬酸和/或酒石酸，直到获得6.3的pH。经pH校正的提取物随后在特殊的溶解器中在CO₂压力下反应，达到20bar的压力，然后是80bar，以便获得与待离析蛋白质级分的等电点相容的两个pH值。在液体提取物在惰性气体反应器中停留期间，通过引入CO₂实现了一系列压力峰值。离开CO₂反应器的液体在受控压力环境中经受二氧化碳解吸，然后送至倾析器，将蛋白质级分与乳清分离，乳清含有水、糖、诸如蔗糖、水苏糖、毛蕊花、棉子糖、部分可溶性亲水性纤维、低分子量蛋白质、游离氨基酸蛋白胨和微量核酸。

在解吸CO₂后已经中和的蛋白质团块被送至真空干燥器在50℃以下的温度下操作，使水含量达到低于5重量％的百分比。由于干燥器内的负压，仍被困在蛋白质分离物的凝胶状团块中的部分CO₂被释放，增加了最终干燥的产品的失水率和孔隙率，具有与其再溶解和/或水合速度相关的优点。将通过过滤从提取物中获得的大豆纤维用环形脱水器干燥，获得与起始大豆中蛋白质的总重量相比蛋白质含量高于80重量％的干燥蛋白质分离物。

实施例2

用本方法获得的蛋白质分离物的表征

将用以上实施例1中描述的本发明方法获得的蛋白质分离物与使用已知提取方法从相同起始材料开始获得的蛋白质分离物进行比较，其中实施用HCl直接酸化代替本方法的步骤iii)和iv)。

下表1中所示的结果示出，对于两个不同的沉淀pH值，与现有技术方法相比，采用本发明的提取方法对起始基质中存在的蛋白质的回收率更高。

表1

此外，通过SDS-PAGE电泳获得的两个方法的末端浆液中所含蛋白质级分的电泳图谱(图1)突出了通过不同沉淀方法获得的分子量的分布不同。特别是，电泳分析示出盐酸的使用是如何不允许沉淀低分子量蛋白质的，这与本方法相反。

实施例3

自其他植物原料制备蛋白质分离物及其表征

使用不同的植物原料，即，豌豆种子、鹰嘴豆、兵豆、荞麦和玉米胚芽，在与上述实施例1中描述的相同条件和相同试剂下重复上述实施例1中描述的方法。蛋白质含量方面的结果也相同。如上所述，乳清和废纤维已被回收，并且在豌豆种子、鹰嘴豆、兵豆和荞麦的情况中，也可以回收一部分淀粉。

分析豌豆蛋白质分离物并与商业豌豆蛋白质比较钠(Na)含量、氯化物(Cl)含量和蛋白质天然状态。

用本方法获得的蛋白质显示出比商业样品更低的Na含量，而本发明的分离物中完全不存在的氯化物，是存在于商业样品中的。

下表2以钠或氯化物含量相对于干分离物总重量的重量％来示出这些结果。

表2

通过傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析评估蛋白质的二级结构，其结果显示在图2a(商业豌豆蛋白质)和2b(本发明的蛋白质分离物)中。该研究证实，本发明的提取方法不改变蛋白质的二级结构，这与商业豌豆蛋白质样品发现的一致。

实施例4

用本发明的蛋白质分离物制备食物产品

如上述实施例1和3中描述制备的蛋白质分离物已用于制备各种食物产品，特别是不含鸡蛋的蛋黄酱，冰淇淋，使用软质小麦粉而不用鸡蛋的烘焙产品和发酵产品，用无麸质粉(特别是玉米粉、米粉及其组合)而不用鸡蛋的意大利面，不含鸡蛋的奶油冻，不含人造黄油的纯素制品，不加面粉、鸡蛋或增稠剂且在烹饪期间不释放水的肉为基础的制品，不含麸质且无蛋的酥脆面包屑。根据所制备产品的类型，蛋白质分离物的添加量占成分总重量的0.5至8重量％，在任何情况下都在生面团的可加工性、最终产品的稳定性和稠度方面获得了极好的结果。

至此已经参照其优选实施方案描述了本发明。应当理解，可能存在涉及相同发明核心的其他实施方案，如由以下列出的权利要求的范围所定义。

参考书目

[1]Liu KS(1997),Soybeans:Chemistry,Technology and Utilization,(Primera Edicion),Singapore,International Thomson Publishing Asia.

[2]Taherian A.,Mondor M.&Lamarche F.(2012).Enhancing NutritionalValues and Functional Properties of yellow pea protein in via membraneprocessing.Cultivation,Varieties and Nutritional Uses:Chapter 1.ISBN:978-1-61942-866.

Claims (14)

1.一种用于从植物蛋白材料开始制备未变性蛋白质分离物的方法，包括以下步骤：

i)使用脉冲空气混合系统在压力下将所述植物蛋白材料在扩散器中悬浮于pH高于7的水中，从而形成碱性水性悬浮液；

ii)处理步骤i)中形成的所述碱性水性悬浮液以便分离包含其中所含的纤维和淀粉的固体残余物，以获得基本上不含淀粉和纤维的水性悬浮液；

iii)向步骤ii)中形成的碱性水性悬浮液加入有机弱酸，直至pH范围在6.5至3.0；

iv)将来自步骤iii)的酸化悬浮液引入CO₂溶解器中，从而形成凝胶状蛋白团块和乳清；

v)将乳清与所述凝胶状蛋白团块分离并将其除气；

vi)将来自步骤v)的所述除气的凝胶状蛋白团块脱水以获得所需的蛋白质分离物，

其中，从i)到vi)的每个步骤在室温下或无论如何在低于65℃的温度下实施。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述植物蛋白材料选自苜蓿和植物种子或谷粒，诸如，大豆种子、豌豆种子、鹰嘴豆、玉米胚芽、荞麦，及它们的混合物。

3.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤iii)中的所述弱有机酸选自柠檬酸、酒石酸及它们的混合物。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在所述步骤i)中使用的水的量为使得获得蛋白材料和水之间的体积比范围在1:5到1:30。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤i)中的所述悬浮是用脉冲空气混合系统实施范围在5分钟至3小时的时间。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中将步骤iv)中的所述酸化悬浮液在0.5至80bar范围的操作压力下引入CO₂溶解器中。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤vi)中的所述脱水在无氧气氛和在真空下实施。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述步骤vi)在低于50℃的温度下在薄膜蒸发器中真空下实施。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，进一步包括，在所述步骤i)中的悬浮之前，所述蛋白材料的干燥、去皮和/或压碎处理，任选地随后用pH范围为7.2至8.5的碱化水在范围在5分钟到12小时时间的调节步骤。

10.根据权利要求6所述的方法，还包括将所述蛋白材料压碎直到获得优选具有低于50μm的颗粒平均尺寸的颗粒。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤ii)中对碱性水性悬浮液的所述处理以分离纤维和淀粉是通过合适的膜过滤或通过离心和倾析来实施的。

12.可通过如权利要求1-11中所限定的制备方法获得的未变性植物蛋白质分离物，所述蛋白质分离物不含氯化物并具有相对于干分离物的总重量为0至0.02重量％的钠含量。

13.如权利要求12中所限定的未变性植物蛋白质分离物的用途，本身作为蛋白质补充剂或作为工艺辅助剂添加到食物产品。

14.一种供人或宠物用途的食物产品，包含如权利要求12中所限定的未变性植物蛋白质分离物。

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