CN1997649A - 组蛋白脱乙酰基酶的抑制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及可用于抑制组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)酶活性的一系列化合物。本发明还提供了使用所述化合物在细胞中抑制组蛋白脱乙酰基酶的方法，以及使用所述HDAC抑制剂治疗细胞增殖性疾病和症状的方法。此外，本发明提供了包括HDAC抑制化合物和药学可接受的载体的制药组合物。

Description

组蛋白脱乙酰基酶的抑制剂
相关申请的交叉引用
[0001]
本申请要求2004年3月26日提交的美国临时申请第60/556,828号的优先权，其完整引入本文以供参考。
技术领域
[0002]
本发明涉及组蛋白脱乙酰基酶的抑制。更特别地，本发明涉及用于抑制组蛋白脱乙酰基酶酶活性的化合物和方法。
背景技术
[0003]
在真核细胞中，核DNA与组蛋白结合形成被称作染色质的紧密复合物。这些组蛋白构成真核物种中通常被高度保存的一类碱性蛋白质。被称作H2A、H2B、H3和H4的核心组蛋白结合形成蛋白质核。DNA盘绕在该蛋白质核周围，其中组蛋白的碱性氨基酸与DNA的带负电的磷酸根基团相互作用。大约146对DNA碱基对缠绕在组蛋白核周围以构成核小体粒子，即染色质的重复结构模体。
[0004]
Csordas，Biochem.J.，286：23-38(1990)描述了对组蛋白进行N-末端赖氨酸残基的ε-氨基的转译后乙酰化，这是被组蛋白乙酰基转移酶(HAT1)催化的反应。乙酰化中和了赖氨酸侧链的正电荷，并被认为影响了染色质结构。实际上，Taunton等，Science，272：408-411(1996)描述了通过组蛋白高度乙酰化使转录因子更容易接近染色质模板。Taunton等人进一步提出，已经发现在基因组的转录不活跃区域中富集乙酰基化不足(underacetylated)的组蛋白。
[0005]
组蛋白乙酰基化是一种可逆改性，被称作组蛋白脱乙酰基酶(HDACs)的一类酶会催化去乙酰基化反应。为具有HDAC活性的蛋白质编码的基因序列的分子克隆已经确定存在一组离散的HDAC酶异构体。Grozinger等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，96：4868-4873(1999)提出将HDACs分成两类，第一类以酵母Rpd3-类蛋白质为代表，第二类以酵母Hdal-类蛋白质为代表。Grozinger等人还指出人类HDAC1、HDAC2和HDAC3蛋白质属于第一类HDACs的成员，并公开了名为HDAC4、HDAC5和HDAC6的新型蛋白质，它们属于第二类HDACs的成员。Kao等，Genes&Dev.，14：55-66(2000)公开了HDAC7，第二类HDACs的新成员。Van den Wyngaert，FEBS，478：77-83(2000)公开了HDAC8，第一类HDACs的一个新成员。Zhou，X.等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.98(19)，10572-10577(2001)公开了HDAC9的克隆和表征。Kao，H.Y.等，J.Biol.Chem.277(1)，187-193(2002)公开了哺乳动物HDAC10的分离和表征。Gao L.等，J. Biol.Chem.277(28)：25748-55(2002)公开了HDAC11的克隆和功能性表征。
[0006]
Richon等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95：3003-3007(1998)公开了用曲古柳菌素A(TSA，从吸水链霉菌中分离出的天然产品)和用合成化合物辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)抑制HDAC活性。Yoshida和Beppu，Exper.Ccell Res.，177：122-131(1988)指出，TSA使大鼠成纤维细胞在细胞周期的G1和G2期停滞，从而牵涉细胞周期调节中的HDAC。实际上，Finnin等，Nature，401：188-193(1999)指出TSA和SAHA抑制了细胞生长，诱发末端分化，并防止小鼠体内形成肿瘤。Suzuki等，美国专利第6,174,905号、EP 0847992、JP 258863/96、和日本申请第10138957号，公开了诱发细胞分化并抑制HDAC的苯甲酰胺衍生物。Delorme等，WO 01/38322和PCT/IB01/00683公开了起到HDAC抑制剂作用的其它化合物。
[0007]
这些发现表明，HDAC活性的抑制代表了一种干涉细胞周期调节的新途径，并且HDAC抑制剂在细胞增殖性疾病或症状的治疗中具有很大的治疗潜力。迄今为止，现有技术中只知道很少的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。因此需要确定其它HDAC抑制剂并确定有效的HDAC抑制活性所需的结构特征。
发明内容
[0008]
本发明提供了治疗细胞增殖性疾病的化合物和方法。本发明提供了组蛋白脱乙酰基酶酶活性的新型抑制剂。
[0009]
在第一方面，本发明提供了可用作组蛋白脱乙酰基酶抑制剂的化合物。
[0010]
在第二方面，本发明提供了包括本发明的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂和药学可接受的载体、赋形剂或稀释剂的组合物。
[0011]
在第三方面，本发明提供了在细胞中抑制组蛋白脱乙酰基酶的方法，包括使需要抑制组蛋白脱乙酰基酶的细胞与本发明的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂接触。
[0012]
在第四方面，本发明提供了治疗细胞增殖性疾病的方法。
[0013]
上述内容仅仅概括了本发明的某些方面，但在本质上不是限制性的。下面将更充分地描述这些方面和其它方面以及具体实施方式。
具体实施方式
[0014]
本发明提供了抑制组蛋白脱乙酰基酶酶活性的化合物和方法。本发明还提供了治疗细胞增殖性疾病和症状的组合物和方法。本文引用的专利和科学文献确立了本领域技术人员可获得的知识。本文引用的授权专利、申请和参考文献经此引用以供参考，相当于每一文献具体且单独地经此引用并入本文。在不一致的情况下，以本公开为主。
[0015]
为了本发明的目的，使用下列定义(除非明确地另行说明)：
[0016]
本文所用的术语“组蛋白脱乙酰基酶”和“HDAC”是指从组蛋白N-末端的赖氨酸残基的ω-氨基上去除乙酰基的一类酶中的任何一种。除非上下文中另行注明，术语“组蛋白”是指来自任何物类的任何组蛋白，包括H1、H2A、H2B、H3、H4和H5。优选的组蛋白脱乙酰基酶包括I类和II类酶。优选地，组蛋白脱乙酰基酶是人类HDAC，包括但不限于HDAC-1、HDAC-2、HDAC-3、HDAC-4、HDAC-5、HDAC-6、HDAC-7、HDAC-8、HDAC-9、HDAC-10和HDAC-11。在一些其它优选的实施方式中，组蛋白脱乙酰基酶来自原生动物或真菌来源。
[0017]
术语“组蛋白脱乙酰基酶抑制剂”和“组蛋白脱乙酰基酶的抑制剂”用于指具有本文所定义的结构的化合物，其能够与组蛋白脱乙酰基酶相互作用并抑制其酶活性。“抑制组蛋白脱乙酰基酶的酶活性”是指降低组蛋白脱乙酰基酶从组蛋白上去除乙酰基的能力。在一些优选的实施方式中，这种组蛋白脱乙酰基酶活性的降低至少为大约50％，更优选至少大约75％，再优选至少大约90％。在其它优选的实施方式中，组蛋白脱乙酰基酶活性降低至少95％，更优选至少99％。
[0018]
优选地，这种抑制是特效的，也就是在比产生另一种不相干的生物效应所需的抑制剂浓度低的浓度下，组蛋白脱乙酰基酶抑制剂降低了组蛋白脱乙酰基酶从组蛋白上去除乙酰基的能力。优选地，组蛋白脱乙酰基酶抑制活性所需的抑制剂浓度比产生不相干的生物效应所需的浓度低至少2倍，更优选低至少5倍，再优选低至少10倍，最优选低至少20倍。
[0019]
为简化起见，在整篇文章中，化学部分主要定义为涉及一价化学部分(例如烷基、芳基、等等)。但是，在本领域技术人员清楚的适当的结构状况下，这些术语也用于表示相应的多价部分。例如，尽管“烷基”部分通常是指一价基团(例如CH3-CH2-)，但在某些情况下，二价连接部分可以是“烷基”，在这种情况下，本领域技术人员能够认识到烷基是二价基团(例如-CH2-CH2-)，相当于术语“亚烷基”。(类似地，在需要二价部分并被称作“芳基”的情况下，本领域技术人员能够认识到，术语“芳基”是指相应的二价部分，亚芳基。)所有原子都理解为具有用于形成健的正常价数(即，碳4，氮3，氧2，硫2、4或6，取决于硫的氧化态)。有时，一个部分可以被定义为，例如，(A)a-B-，其中a是0或1。在这种情况下，当a是0时，该部分是B-，当a是1时，该部分是A-B-。
[0020]
术语“烃基”是指直链、支链、或环状烷基、链烯基、或炔基，它们各自如本文中所定义。“C0”烃基用于指共价键。因此，“C0-C3-烃基”包括共价键、甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、丙基、丙烯基、丙炔基、和环丙基。
[0021]
本文所用的术语“烷基”是指含有1至12个碳原子、优选1-8个碳原子、更优选1-6个碳原子的直链和支链的脂族基团，其任选被一个、两个或三个取代基取代。优选的烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和己基。“C0”烷基(如在“C0-C3-烷基”中那样)为共价键(类似“C0”烃基)。
[0022]
本文所用的术语“链烯基”是指含有一个或多个碳-碳双键，且含有2至12个碳原子、优选2-8个碳原子、更优选2-6个碳原子的不饱和直链或支链脂族基团，其任选被一个、两个或三个取代基取代。优选的链烯基包括但不限于乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、和己烯基。
[0023]
本文所用的术语“炔基”是指含有一个或多个碳-碳三键，且含有2至12个碳原子、优选2-8个碳原子、更优选2-6个碳原子的不饱和直链或支链脂族基团，其任选被一个、两个或三个取代基取代。优选的炔基包括但不限于乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、和己炔基。
[0024]
“亚烷基”、“亚烯基”或“亚炔基”是位于两个其它化学基团之间并用于连接这两个基团的如上定义的烷基、链烯基或炔基。优选的亚烷基包括但不限于亚甲基、亚乙基、亚丙基、和亚丁基。优选的亚烯基包括但不限于亚乙烯基、亚丙烯基、和亚丁烯基。优选的亚炔基包括但不限于亚乙炔基、亚丙炔基、和亚丁炔基。
[0025]
本文所用的术语“环烷基”包括含有3至12个碳、优选3至8个碳、更优选3至6个碳的饱和及部分不饱和的环状烃基，其中环烷基还可任选被取代。优选的环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基、和环辛基。
[0026]
术语“杂烷基”是指链中的一个或多个碳原子被选自O、S和N的杂原子取代的如上定义的烷基。
[0027]
“芳基”基团是含有一至三个芳环的C6-C14芳族部分，其任选被取代。该芳基优选为C6-C10芳基。优选的芳基包括但不限于苯基、萘基、蒽基、和芴基。“芳烷基”或“芳基烷基”基团包含共价连接到烷基上的芳基，任一个都可独立地任选被取代或不被取代。该芳烷基优选为(C1-C6)烷基(C6-C10)芳基，包括但不限于苄基、苯乙基、和萘甲基。
[0028]
“杂环”基团(或“杂环基”)为含有大约3至大约14个原子的任选取代的非芳族单-、双-、或三环结构，其中一个或多个原子选自N、O和S。双环杂环的一个环或三环杂环的两个环可以是芳族的，如在茚满和9，10-二氢蒽中那样。杂环基任选在碳上被氧或被上列取代基之一取代。杂环基还可独立地在氮上被烷基、芳基、芳烷基、烷基羰基、烷基磺酰基、芳基羰基、芳基磺酰基、烷氧基羰基、芳烷氧基羰基取代，或在硫上被氧或低级烷基取代。优选的杂环基包括但不限于环氧基、吖丙啶基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、噻唑烷基、噁唑烷基、噁唑酮基、和吗啉代。在某些优选的实施方式中，杂环基稠合到芳基、杂芳基、或环烷基上。此类稠合杂环的例子包括但不限于四氢喹啉和二氢苯并呋喃。尤其排除在此术语范围外的是那些成环的O或S原子与另一个O或S原子相邻的化合物。
[0029]
本文所用的术语“杂芳基”是指下述任选取代的基团——其含有5至14个环原子，优选5、6、9或10个环原子；在环状阵列(array)中含有6、10或14个pi电子；以及除了碳原子，还含有一个或多个选自N、O和S的杂原子。例如，杂芳基可以是嘧啶基、吡啶基、苯并咪唑基、噻吩基、苯并噻唑基、苯并呋喃基和二氢吲哚基。优选的杂芳基基团包括但不限于噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、氧芴基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、四唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、和异噁唑基。
[0030]
“杂芳烷基”或“杂芳基烷基”基团包括与烷基共价连接的杂芳基，任一个都可独立地任选地被取代或不被取代。优选的杂烷基包括C1-C6烷基和含有5、6、9或10个环原子的杂芳基。尤其排除在此术语范围外的化合物是含有相邻的成环O和/或S原子的化合物。优选的杂芳烷基的例子包括吡啶基甲基、吡啶基乙基、吡咯基甲基、吡咯基乙基、咪唑基甲基、咪唑基乙基、噻唑基甲基、和噻唑基乙基。
[0031]
“亚芳基”、“亚杂芳基”、或“亚杂环基”基团是位于两个其它的化学基团之间并用于连接这两个基团的如前定义的芳基、杂芳基、或杂环基。
[0032]
优选的杂环基和杂芳基包括但不限于吖啶基、吖辛因基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基(benzothiofuranyl)、苯并噻吩基(benzothiophenyl)、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、苯并二氢吡喃基、苯并吡喃基、噌啉基、十氢喹啉基、2H，6H-1，5，2-二噻嗪基、二氢呋喃并[2，3-b]四氢呋哺、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、假吲哚基(indolenyl)、二氢吲哚基、中氮茚基、吲哚基、3H-吲哚基、异苯并呋喃基、异苯并二氢吡喃基、异吲唑基、异二氢氮茚基、异氮茚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、亚甲二氧基苯基、吗啉基、1，5-二氮杂萘基、八氢异喹啉基、噁二唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、唑烷基、噁唑基、唑烷基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩氧硫杂环己二烯基(phenoxathiinyl)、吩噁嗪基、2，3-二氮杂萘基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并噁唑、吡啶并咪唑、吡啶并噻唑、吡啶基(pyridinyl)、吡啶基(pyridyl)、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2H-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、四唑基、6H-1，2，5-噻二嗪基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、苯硫基、三嗪基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，5-三唑基、1，3，4-三唑基、和呫吨基。
[0033]
在本文中，当一个部分(例如，环烷基、烃基、芳基、杂芳基、杂环基、脲，等等)被描述成“任选取代的”时，这是指该基团任选具有一个至四个，优选一个至三个，更优选一个或两个非氢取代基。适宜的取代基包括但不限于卤素、羟基、氧代(例如，成环-CH-被氧取代即为-C(O)-)、硝基、卤代烃基、烃基、芳基、芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、氨基、酰氨基、烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、氨基烷基、酰基、羧基、羟烷基、链烷磺酰基、芳基磺酰基、磺胺基、链烷磺胺基、芳基磺胺基、芳烷基磺胺基、烷基羰基、酰氧基、氰基、烷基硫代、脲基、和脲基烷基。本身未被进一步取代(除非明确地另行注明)的优选的取代基是：
[0034]
(a)卤素、氰基、氧基、烷基、烷氧基、烷基硫代、卤代烷氧基、氨基烷基、氨基烷氧基、羧基、甲酰基、硝基、氨基、脒基、氨基甲酰基、胍基、C3-C7杂环、杂环基烷基、杂环基羰基、羟基烷基、烷氧基烷基，
[0035]
(b)C1-C5烷基或链烯基或芳基烷基亚氨基、氨基甲酰基、氨基甲酸酯、叠氮基、酰胺基、巯基、羟基、羟烷基、烷基芳基、芳基烷基、C1-C8烷基、C1-C8链烯基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基羰基、芳氧基羰基、C2-C8酰基、C2-C8酰氨基、C1-C8烷基硫代、芳基烷基硫代、芳硫基、杂芳硫基、C1-C8烷基亚硫酰基、芳基烷基亚硫酰基、芳基亚硫酰基、C1-C8烷基磺酰基、芳基烷基磺酰基、芳基磺酰基、C0-C6 N-烷基氨基甲酰基、C2-C15 N，N-二烷基氨基甲酰基、C3-C7环烷基、芳酰基、芳氧基、杂芳氧基、芳基烷基醚、C3-C7杂环基烷基醚、芳基、稠合到环烷基或杂环或其它芳基环上的芳基、C3-C7杂环基、杂芳基、芳基氨基甲酰基、或者稠合到或螺-稠合到环烷基、杂环基或芳基上的任意这些环，其中可以进一步被取代的前述任何基团进一步任选被上文(a)中所列的一个或多个部分取代；以及
[0036]
(c)-(CH2)s-NR30R31，其中s为0(在此情况下，氮直接键合到被取代的部分上)至6，且R30和R31各自独立地为氢、氰基、氧代、酰胺基、脒基、C1-C8羟烷基、C1-C3烷基芳基、芳基-C1-C3烷基、C1-C8烷基、C1-C8链烯基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳基-C1-C3烷氧基羰基、C2-C8酰基、C1-C8烷基磺酰基、芳基烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳酰基、芳基、环烷基、杂环基、或杂芳基，其中上述每个基团进一步任选再被一个上文(a)中所列的部分取代；或
[0037]
R30和R31跟与它们相连的N一起形成杂环基或杂芳基，它们各自任选被1至3个来自上文(a)的取代基取代。
[0038]
此外，在环状部分(即，环烷基、杂环基、芳基、杂芳基)上的取代基包括稠合到本环部分上以形成双-或三-环稠环体系的5-6元单环和9-14元双环部分。例如，任选取代的苯基包括但不限于以下：
Figure A20058001611200261
[0039]
环状部分(即环烷基、杂环基、芳基、杂芳基)上的优选取代基还包括式-K1-N(H)(R10)的基团，其中
[0040]
K1是化学键或C1-C4亚烷基；
[0041]
R10选自Z’和-Ak2-Z’，其中
[0042]
Ak2是C1-C4亚烷基；且
[0043]
Z’是环烷基、芳基、杂芳基、或杂环基，它们各自任选被取代，并且它们各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上。
[0044]
环状部分(例如芳基、杂芳基、环烷基、杂环基、或稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上的任何这些环、或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上的任何这些环)上特别优选的取代基包括1、2或3个独立地选自下列基团的基团：
[0045]
a)烷氧基、氰基、氨基、氧基、卤代烷基、卤素、烷基、R50-C(O)-N(R32)-、R50-O-C(O)-N(R32)-、R50-NH-C(O)-N(R32)-、R50-NH-C(O)-O-、(R32)(R33)N-烷基-、(R32)(R33)N-烷基-O-、(R32)(R33)N-亚烯基-N(R32)-、N(R32)-芳基-N(R32)-C(O)-芳基-烷基-N(R32)-；
[0046]
其中R50是环烷基、杂环基-C1-C6烷基-、R32R33N-烷基-、或烷基；
[0047]
b)芳基-C0-C6烷基-、杂芳基-C0-C6烷基-、环烷基-C0-C6烷基-、杂环基-C0-C6烷基-、芳基-C0-C6烷基-N(R32)-、芳基-C(O)-、杂芳基-C0-C6烷基-N(R32)-、杂环基-C0-C6烷基-N(R32)-、芳基-O-、杂芳基-O-、芳基-S-、杂芳基-S-、芳基-SO2-、杂芳基-SO2、芳基-C(O)N(R32)-、杂芳基-C(O)N(R32)-、杂芳基-C(H)(SO2-杂芳基)-N(R32)-；
[0048]
其中R32和R33独立地为H或C1-C6烷基，或R32和R33和与它们相连的N一起构成杂环基或杂芳基；
[0049]
并且其中段落[0045]-[0048]中所述的任何环进一步任选被1、2或3个独立地选自烷基、烷氧基、硫代烷氧基、烷基-SO2-、氨基、卤素、氰基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷氧基烷基、COOH、烷酰基、链烷酸酯、NO2、羟基、卤代烷氧基、(R32)(R33)N-C0-C6烷基-、(R32)(R33)N-C0-C6烷基-O-、(R32)(R33)N-C(O)-、杂芳基、烷基-C(O)N(R32)-、芳基-O-、(R32)(R33)N-SO2-、芳基、和(R32)(R33)N-烷基-C(O)N(R32)-的基团取代。
[0050]
“卤代烃基”是其中的一个至所有氢已经被一个或多个卤素取代的烃基部分。
[0051]
本文所用的术语“卤素”或“卤代”是指氯、溴、氟或碘。本文中所用的术语“酰基”是指烷基羰基或芳基羰基取代基。术语“酰胺基”是指连接在氮原子上的酰胺基团(即，R-CO-NH-)。术语“氨基甲酰基”是指连接在羰基碳原子上的酰胺基团(即，NH2-CO-)。酰氨基或氨基甲酰基取代基的氮原子进一步被取代。术语“亚磺酰氨基”是指通过硫或氮原子连接的亚磺酰取代基。术语“氨基”是要包括NH2、烷基氨基、芳基氨基、和环氨基。本文所用的术语“脲基”是指取代或未取代的脲部分。
[0052]
本文所用的术语“基团(radical)”是指含有一个或多个不成对电子的化学部分。
[0053]
被取代的部分是其中一个或多个氢已经独立地被另一个化学取代基取代的部分。作为非限制性的例子，取代苯基包括2-氟苯基、3，4-二氯苯基、3-氯-4-氟苯基、2-氟-3-丙基苯基。作为另一个非限制性的例子，取代N-辛基包括2，4-二甲基-5-乙基-辛基和3-环戊基-辛基。包括在此定义中的是被氧取代形成羰基(-CO-)的亚甲基(-CH2-)。
[0054]
如上所述的“未取代”部分(例如未取代环烷基、未取代杂芳基，等等)是指不含任何任选取代基的如上所定义的部分，在其它方面都对其使用上文中该部分的定义。因此，例如，当“芳基”包括苯基和被卤素取代的苯基时，“未取代芳基”不包括被卤素取代的苯基。
[0055]
在整篇说明书中，确定了一个或多个化学取代基的优选实施方式。优选实施方式的组合也是优选的。例如，段落[0080]描述了式(1a)的化合物中Cy的优选实施方式，且段落[0079]描述了化学式(1a)的化合物中W的优选实施方式。因此，Cy如段落[0080]中所述且W如段落[0079]中所述时的式(1)的化合物也被视为在本发明的范围内。
[0056]
本发明的一些化合物可具有手性中心和/或几何异构中心(E-和Z-异构体)，并且要理解的是，本发明包括所有这些光学、非对映异构体和几何异构体。本发明还包括本文公开的化合物的所有互变异构形式。如果本发明的化合物包括手性中心，则本发明包括这些化合物的光学纯的异构体、这些化合物的富含对映体的混合物、和这些化合物的外消旋混合物。
[0057]
本发明的化合物可以以体内可水解酯或体内可水解酰胺的形式施用。含有羧基或羟基的本发明的化合物的体内可水解酯是，例如，在人体或动物体内水解以产生母体酸或醇的药学可接受的酯。对于羧基合适的药学可接受的酯包括C1-6-烷氧基甲基酯(例如，甲氧基甲基)、C1-6-烷酰氧基甲基酯(例如，新戊酰氧基甲基)、2-苯并[c]呋喃酮基酯、C3-8-环烷氧基羰基氧基C1-6-烷基酯(例如，1-环己基羰基氧基乙基)；1，3-二氧杂环戊烯-2-酮基甲基酯(1，3-dioxolen-2-onlymethyl esters)(例如，5-甲基-1，3-二氧杂环戊烯-2-酮基甲基)；以及C1-6-烷氧基羰基氧基乙基酯(例如，1-甲氧基羰基氧基乙基)，并可以在该发明的化合物中的任何羧基上形成。
[0058]
含有羟基的本发明的化合物的体内可水解酯包括例如磷酸酯的无机酯和a-酰氧基烷基醚，以及由于酯的体内水解而断裂产生母体羟基的相关化合物。α-酰氧基烷基醚的例子包括乙酰氧基甲氧基和2，2-二甲基丙酰氧基-甲氧基。对于羟基的体内可水解酯形成基团的选择包括烷酰基、苯甲酰基、苯基乙酰基和取代苯甲酰基和苯基乙酰基、烷氧基羰基(以产生碳酸烷基酯)、二烷基氨基甲酰基和N-(N，N-二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲酰基(以产生氨基甲酸酯)、N，N-二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。苯甲酰基上的取代基的例子包括从环氮原子经由亚甲基连接到苯甲酰基环的3-或4-位上的吗啉代和哌嗪基。对于含有羧基的本发明的化合物的体内可水解酰胺合适的意义为，例如，N-C1-6-烷基或N，N-二-C1-6-烷基酰胺，例如N-甲基、N-乙基、N-丙基、N，N-二甲基、N-乙基-N-甲基或N，N-二乙基酰胺。
化合物
[0059]
在第一方面，本发明提供了组胺脱乙酰基酶的新型抑制剂。在第一个实施方式中，组胺脱乙酰基酶的新型抑制剂表示为式(1)：
Figure A20058001611200301
[0060]
及其药学可接受的盐，其中
[0061]
X选自化学键、L、W-L、L-W、L-W-L、和L-W’-L-W’，其中
[0062]
Cy是芳基、杂芳基、环烷基或杂环基，它们各自任选被取代，并且各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代；
[0063]
W在每种情况下是S、O、C＝O、-NH-C(＝O)-NH-、-NHSO2-、或N(R9)，其中R9选自氢、烷基、羟基烷基、和叔丁氧基羰基；
[0064]
W’在每种情况下独立地为化学键、S、O、或NH；且
[0065]
L在每种情况下独立地为化学键或C1-C4亚烷基；或
[0066]
Ar是亚芳基或杂亚芳基，它们各自任选被取代；
[0067]
q是0或1；且
[0068]
T是NH2或OH；
[0069]
条件是当Cy为萘基时，X是-CH2-，Ar是苯基，且q是0或1，T不是OH。
[0070]
在按照段落[0059]的化合物的一些优选实施方式中，q是1，且T是NH2。
[0071]
段落[0070]的实施方式的优选化合物包括下述化合物——其中Ar为亚苯基且Cy-X-为
[0072]
在按照段落[0059]的化合物的一些优选实施方式中，q是0。
[0073]
在优选实施方式中，本发明的HDAC抑制剂包含具有式(1a)的段落[0072]的化合物：
Figure A20058001611200312
[0074]
及其药学可接受的盐，其中
[0075]
Cy是芳基、杂芳基、环烷基或杂环基，它们各自任选被取代，且它们各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代；
[0076]
W是S、O或N(R9)，其中R9是氢或C1-C6-烷基；
[0077]
R8是H或C1-C4烷基；且
[0078]
T是NH2或OH。
[0079]
在按照段落[0073]的化合物的一些优选实施方式中，W是NH或S。
[0080]
按照本发明，特别是段落[0079]的优选化合物包括下述化合物——其中Cy选自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、和苯并三唑基，它们各自任选被取代。
[0081]
按照段落[0080]的优选化合物包括结构1a-1的那些化合物：
[0082]
及其药学可接受的盐，其中W是NH或S；P、Q、M、G和U独立地为CH或N，条件是P、Q、M、G和U中不超过两个是N，且在包含P、Q、M、G和U的环中，环S或O不与另一环S或O相邻；R8是H或C1-C4烷基；且A和B如下所定义。
[0083]
按照段落[0080]的优选化合物包括结构1a-2的那些化合物：
[0084]
及其药学可接受的盐，其中W是S或NH；R8是H或C1-C4烷基；且A和B如下所定义。
[0085]
按照段落[0080]的优选化合物包括结构1a-3的那些化合物：
[0086]
及其药学可接受的盐，其中W是S或NH；且A和B如下所定义。
[0087]
按照段落[0085]的优选化合物包括W为NH时的那些化合物。
[0088]
按照段落[0080]的优选化合物包括结构1a-4的那些化合物：
Figure A20058001611200332
[0089]
及其药学可接受的盐，其中W是S或NH；D是N-R10或S，E是N或C-A；R8和R10独立地为H或C1-C4烷基；且A和B如下所述。
[0090]
按照段落[0088]的优选化合物包括W为NH时的那些化合物。
[0091]
按照段落[0081]的优选化合物包括式1a-5的那些化合物：
Figure A20058001611200333
[0092]
及其药学可接受的盐。
[0093]
按照段落[0091]的优选化合物包括W为NH时的那些化合物。
[0094]
按照段落[0073]和[0079]的优选化合物还包括下述化合物——其中W是NH且Cy是喹喔啉基、邻苯二甲酰亚胺基、或苯并间二氧杂环戊烯基(benzodioxolyl)，它们各自任选被A和/或B取代，其中A和B如下所定义。
[0095]
在进一步优选的实施方式中，本发明的HDAC抑制剂包含具有式(1b)的段落[0059]的化合物：
Figure A20058001611200341
[0096]
及其药学可接受的盐，其中
[0097]
Cy是芳基、杂芳基、环烷基或杂环基，它们各自任选被取代，并且各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代；
[0098]
X是L、W-L、或L-W，其中
[0099]
W在每种情况下是S、O或NH；且
[0100]
L是-CH2-；
[0101]
Y是N或CH；
[0102]
Z是O、S、NR12或CH2；
[0103]
R12是H或C1-C4烷基；且
[0104]
T是NH2或OH。
[0105]
在按照段落[0095]的化合物的一些优选实施方式中，T是NH2。
各自按照段落[0095]和[0105]的优选化合物包括X是-S-CH2-、-NH-CH2-或-CH2-NH-时的那些化合物。
按照段落[0095]、[0105]和0的优选化合物包括Cy是芳基或杂芳基(它们各自任选被取代)时的那些化合物。
[0106]
按照段落[0095]-0的优选化合物包括Cy是苯基、吡啶基、嘧啶基、或苯并噻唑基(它们各自任选被取代)时的那些化合物。
[0107]
各自按照段落[0095]-[0106]的优选化合物包括Cy被A和/或B取代时的那些化合物，其中A和B如段落[0185]中所定义。
[0108]
各自按照段落[0095]-[0106]的优选化合物包括下述化合物——其中Cy任选被一个、两个或三个独立地选自烷氧基、酰基、吗啉代、或任选被烷氧基取代的苯基的基团取代。
[0109]
在进一步优选的实施方式中，本发明的HDAC抑制剂包含具有式(1c)的段落[0059]的化合物：
[0110]
及其药学可接受的盐，其中
[0111]
Cy是芳基、杂芳基、环烷基、或杂环基，它们各自任选被取代，并且各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代；
[0112]
X是L、W-L、或L-W，其中
[0113]
W在每种情况下是S、O或NH；且
[0114]
L是-CH2-；
[0115]
Y是N或CH；
[0116]
Z是O、S、NR12或CH2；
[0117]
R12是H或C1-C4烷基；且
[0118]
T是NH2或OH。
[0119]
在按照段落[0109]的化合物的一些优选实施方式中，T是NH2。
[0120]
各自按照段落[0109]-[0119]的优选化合物包括X是-S-CH2-、-NH-CH2-或-CH2-NH-时的那些化合物。
[0121]
各自按照段落[0109]-[0120]的优选化合物包括Cy是芳基或杂芳基(它们各自任选被取代)时的那些化合物。
[0122]
各自按照段落[0109]-[0121]的优选化合物包括Cy是苯基、吡啶基、嘧啶基、或苯并噻唑基(它们各自任选被取代)时的那些化合物。
[0123]
各自按照段落[0109]-[0122]的优选化合物包括Cy被A和/或B取代时的那些，其中A和B如段落[0185]中所定义。
[0124]
各自按照段落[0109]-[0122]的优选化合物包括下述化合物——其中Cy任选被一个、两个或三个独立地选自烷氧基、卤代烷氧基、酰基、吗啉代、或任选被烷氧基取代的苯基的基团取代。
[0125]
在进一步优选实施方式中，本发明的HDAC抑制剂包含具有式(1d)的段落[0059]的化合物：
[0126]
及其药学可接受的盐，其中
[0127]
Cy是芳基、或杂芳基，它们各自任选被取代，并且各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代；且
[0128]
T是NH2或OH。
[0129]
在按照段落[0125]的化合物的一些优选实施方式中，T是NH2。
[0130]
各自按照段落[0125]-[0129]的优选化合物包括下述化合物——其中Cy是任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基，它们各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代。
[0131]
各自按照段落[0125]-[0130]的优选化合物包括下述化合物——其中Cy是：
[0132]
在进一步优选的实施方式中，本发明的HDAC抑制剂包括具有式(1e)的段落[0059]的化合物：
Figure A20058001611200382
[0133]
及其药学可接受的盐，其中
[0134]
Cy是芳基、杂芳基、环烷基、或杂环基，它们各自任选被取代，并且各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代；且
[0135]
T是NH2或OH。
[0136]
在按照段落[0132]的化合物的一些优选实施方式中，T是NH2。
[0137]
各自按照段落[0132]-[0136]的优选化合物包括下述化合物——其中Cy是杂环基或杂芳基，它们各自任选被取代，并且各自包含至少一个氮原子作为环的一部分。
[0138]
各自按照段落[0132]-[0137]的优选化合物包括Cy通过氮原子键合到苯基上的那些化合物。
[0139]
各自按照段落[0132]-[0137]的优选化合物包括Cy是杂环基(其任选被取代)时的那些化合物。
[0140]
各自按照段落[0132]-[0137]和[0139]的优选化合物包括Cy是哌啶基或哌嗪基(它们各自任选被取代)时的那些化合物。
[0141]
各自按照段落[0132]-[0140]的优选化合物包括下述化合物——其中Cy任选被一个或两个独立地选自A和B的取代基取代，其中A和B如段落[0185]中所定义。
[0142]
各自按照段落[0132]-[0140]的优选化合物包括下述化合物——其中Cy任选被一个或两个独立地选自下式的取代基取代：
Figure A20058001611200391
[0143]
按照段落[0072]的优选化合物包括下述化合物——其中Ar是亚苯基、吲哚基或二氢吲哚基，它们各自任选被取代，且X不存在、是CH2、-O-CH2-、-S-CH2-、-S-C(CH3)(H)-、或-N(R9)-CH2-。
[0144]
按照段落[0143]的优选化合物包括下述化合物——其中Ar是吲哚基或二氢吲哚基，X是CH2或-N(R9)-CH2-，且Cy是：
或
Figure A20058001611200393
[0145]
按照段落[0143]的优选化合物包括下述化合物——其中Ar是亚苯基，X是-S-CH2-、或-S-C(CH3)(H)-，且Cy是：
[0146]
其中Y选自：
Figure A20058001611200402
[0147]
按照段落[0145]的优选化合物包括下述化合物——其中Y’是H，且Y’是：
Figure A20058001611200403
[0148]
按照段落[0143]的优选化合物包括式(1f)的那些化合物：
Figure A20058001611200404
[0149]
按照段落[0148]的优选化合物包括下述化合物——其中Cy是杂环基或杂芳基，它们各自任选被取代，并且它们各自含有至少一个氮原子作为环的一部分。
[0150]
按照段落[0149]的优选化合物包括Cy通过氮原子键合到苯基上的那些化合物。
[0151]
按照段落[0148]的优选化合物包括下述化合物——其中Cy是：
或
[0152]
按照段落[0148]的优选化合物包括式(1f-1)的那些化合物
[0153]
及其药学可接受的盐，其中T是OH或NH2，且A如下所定义。
[0154]
按照段落[0152]的优选化合物包括T为NH2时的那些化合物。
[0155]
按照段落[0143]的优选化合物包括下述化合物——其中Ar是亚苯基，X是-O-CH2-，且Cy是：
[0156]
在进一步优选的实施方式中，本发明的HDAC抑制剂包括具有式(1g)的段落[0059]的化合物：
[0157]
及其药学可接受的盐，其中
[0158]
Cy是芳基、或杂芳基、环烷基、或杂环基，它们各自任选被取代，并且各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代；
[0159]
X是L、W-L、或L-W，其中
[0160]
W在每种情况下是S、O或NH；且
[0161]
L是-CH2-；
[0162]
T是NH2或OH。
[0163]
按照段落[0156]的优选化合物包括Cy是任选取代的杂芳基时的那些化合物。更优选地，Cy是任选取代的嘧啶基。同样优选地，Cy是用吡啶基取代的嘧啶基。
[0164]
按照段落[0156]的优选化合物还包括X是-NH-CH2-时的那些化合物。
[0165]
按照段落[0156]的优选化合物还包括T是NH2时的化合物。
[0166]
按照段落[0059]的优选化合物包括式(1h)的那些化合物：
Figure A20058001611200422
[0167]
及其药学可接受的盐，其中W是S、O或NH，且A和B如下所述。
[0168]
按照段落[0166]的优选化合物包括W是NH时的那些化合物。
[0169]
按照段落[0166]的优选化合物包括A是任选取代的吡啶基或任选取代的苯基时的那些化合物。
[0170]
按照段落[0166]的优选化合物包括B是H或卤素时的那些化合物。优选地，卤素是氯。
[0171]
按照段落[0059]的优选化合物包括式(1i)的那些化合物：
[0172]
及其药学可接受的盐，其中W是S、O或NH，且R40是H或C1-C6烷基。
[0173]
按照段落[0171]的优选化合物包括W是NH时的那些化合物。
[0174]
按照段落[0171]的优选化合物包括R40是H时的那些化合物。
[0175]
按照段落[0171]的优选化合物包括R40是甲基时的那些化合物。
[0176]
在进一步优选的实施方式中，本发明的新型组蛋白脱乙酰基酶抑制剂是式(2)的化合物
[0177]
及其药学可接受的盐，其中
[0178]
Cy2是芳基或杂芳基，它们各自任选被取代，并且其中芳基和杂芳基各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代；
[0179]
X选自：共价键、C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(CO)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(NR7)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(S)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(O)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(SO)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(SO2)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(NH)-(CO)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(CO)-(NH)-C0-C4-烃基、-NH-CO-NH-、-NH-CS-NH-、-O-CO-O-、-O-CS-O-、-NH-C(NH)-NH-、-S(O)2-N(R7)-、-N(R7)-S(O)2-、-NH-C(O)-O-、和-O-C(O)-NH-，
[0180]
其中R7选自氢、C1-C5-烷基、芳基、芳烷基、酰基、杂环基、杂芳基、SO2-烷基、SO2-芳基、CO-烷基、CO-芳基、CO-NH-烷基、CO-NH-芳基、CO-O-烷基和CO-O-芳基，它们各自任选被取代，
[0181]
n是0至4，
[0182]
Y是N或CH，
[0183]
T是NH2或OH。
[0184]
式(2)的化合物含有手性中心(表示为星号(*))。本发明包括式(2)化合物的外消旋混合物和富含对映体的混合物，以及式(2)化合物的光学纯的异构体。优选地，在富含对映体的混合物中，存在高于或等于80％的一种对映体，更优选高于90％、95％、或98％。
[0185]
基团A和B相同或不同，并独立地选自H、卤素、C1-C4烷基、包括氨基烷氧基、卤代烷氧基和杂芳基烷氧基的任选取代的烷氧基、烷氧基烷基、卤代烷基、氨基、硝基、烷基硫代、酰基氨基、氨基甲酰基、或下列基团：
Figure A20058001611200451
Figure A20058001611200461
合成
优选按照反应方案A所示的程序制备式(1)的化合物，其中Ar是吡啶亚基(pyridylene)，且X包含-N(R9)-。用胺RNH2处理二溴吡啶XIII或XIV以分别制造氨基溴吡啶XV或XVI。在一氧化碳下，用二乙酰氧基钯、二苯膦二茂铁、DMF、二异丙基乙胺、和苯二胺处理XV或XVI，分别产生苯胺基(anilinyl)酰胺XVII或XVIII。
在氮气下用丙烯酸叔丁酯、二异丙基乙胺、二苄基丙酮钯、和三邻甲苯基膦(POT)在DMF中处理XV或XVI，分别产生化合物XIX和XX。通过与三氟乙酸在二氯甲烷中反应，将XIX或XX的酯部分水解以分别产生XXI或XXII中的相应的酸部分。用苯二胺、BOP和三乙胺处理酸XXI或XXII，分别产生苯胺基酰胺XXIII或XXIV。
反应方案A
Figure A20058001611200481
优选按照反应方案B所示的合成路线制备化合物，其中X包含-O-C(O)-NH-。因此，将甲醇XXV与在DMF中的羰基二咪唑(CDI)、三乙胺和1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)一起加入溴苄胺中，以制造化合物XXVII。苯胺基酰胺XXVIII制造中的其余合成步骤如上文对反应方案A所述。
反应方案B
Figure A20058001611200482
优选按照反应方案C所示制备化合物，其中X包含-N(R9)-。在存在碳酸钾的DMF溶液的情况下，使胺XXIX与对溴苄基溴反应以制造溴苄胺XXX。用硝基丙烯酰基苯胺、二苄基丙酮钯、POT、和二异丙基乙胺在DMF中处理XXX，产生硝基酰苯胺XXXI。通过在甲醇和水中用氯化亚锡进行处理，将硝基酰苯胺XXXI转化成相应的苯胺基酰胺XXXII。
用低聚甲醛在甲酸中处理胺XXXI，产生甲胺XXXIII。然后通过在甲醇和水中用氯化亚锡进行处理，将XXXIII中的硝基酰苯胺部分转化成XXXIV中相应的苯胺基酰胺部分。
反应方案C
Figure A20058001611200491
或者，可以按照反应方案D所示的合成路线制备化合物，其中X包含-N(R9)-。用盐酸处理在甲醇中的羧酸XXXV以制造酯XXXVI。通过在60℃于DMF中用三乙胺、甲氧基苄基氯、碘化钠和碳酸钾之类的催化剂进行处理，将XXXVI中的伯胺部分转化成XXXVI中的仲胺部分。如上文对反应方案A所述，通过用氢氧化钠、THF和甲醇处理，然后用在DMF中的BOP、三乙胺和苯二胺处理，将酯XXXVI转化成苯胺基酰胺XXXVII。
反应方案D
优选按照反应方案E所示的程序制备化合物，其中X包含或-C(O)-NH-。将胺68加入在DMF中的卤代芳基化合物XXXVIII或XXXIX和碳酸钾中，分别产生芳基胺XL或XLI。然后使用与上文反应方案A-D所述类似的程序制备苯胺基酰胺XLII或XLIII。
反应方案E
Figure A20058001611200503
优选如反应方案F所示制备例如XLVII和XLIX的化合物。将二溴吡啶与二氨基乙烷结合以制造胺XLIV。用在甲醇和水中的靛红酸酐LV处理胺XLIV，然后在甲酸中回流，产生化合物XLVI。用苄基氨基二乙酸和乙酸酐的反应产物处理胺XLIV，得到化合物XLVIII。然后通过与上文反应方案A-E中所述类似的程序，将溴吡啶基胺XLVI和XLVIII分别转化成相应的二烯苯胺基酰胺XLVII和XLIX。
反应方案F
Figure A20058001611200511
优选按照反应方案G所示的合成路线制备例如LIV的化合物。用氨基茚满和二异丙基乙胺处理三氯三嗪以制造二氯氨基三嗪L。用溴苄胺和二异丙基乙胺进行处理，产生二氨基氯三嗪LI。添加氨气和二噁烷，产生三氨基三嗪LII。用保护的丙烯酰基苯胺、三乙胺、POT和二苄基丙酮钯进行处理，然后产生二烯苯胺基酰胺LIII，将其用三氟乙酸脱保护以产生最终产物LIV。
反应方案G
Figure A20058001611200512
优选按照反应方案H所示的程序制备式(1)的化合物，其中Ar是喹啉亚基(quinolylene)，且X包含-N(R9)-。用三氟甲烷磺酸酐在吡啶中处理含有的二甲基氨基吡啶(DMAP)的二羟基喹啉LV，产生双(三氟甲烷磺酰氧基)-喹啉LVI。用对甲氧基苄胺处理LVI，产生氨基喹啉LVII。然后使用与上文所述类似的程序制备苯胺基酰胺LVIII和LIX。
反应方案H
优选如反应方案I所示制备化合物，其中X包含硫原子。使用与上文对反应方案D所述类似的程序将溴化物LX转化成二芳基酯LXI。通过用氢氧化锂之类的氢氧化物碱进行处理，将酯LXI转化成相应的酸LXIV。或者，可以用氯乙基吗啉、碘化钠、碳酸钾、三乙胺和碘化四丁铵(TBAI)在DMF中处理酯LXI以制造酯LXIII，然后将其转化成酸LXIV。在存在BOP试剂、三乙胺和二甲基甲酰胺(DMF)的情况下，用1，2-亚苯基二胺处理酸，将酸LXIV转化成苯胺基酰胺LXV。
反应方案I
或者，可以按照反应方案J所示的程序制备化合物，其中X包含硫原子。使用与上文所述类似的程序制备硫烷基苯胺基酰胺LXVIII。
反应方案J
Figure A20058001611200532
优选按照反应方案K所示的合成途径制备化合物，其中X包含-N(R9)-。按照与上文所述类似的合成步骤制备氨基苯胺基酰胺LXXI。
反应方案K
Figure A20058001611200533
可以如反应方案L所示制备化合物，其中X包含硫原子。使亚苯基二胺与二碳酸二叔丁酯反应，然后与碘苯甲酸、二甲基氨基丙基乙基碳二亚胺、羟基苯并三唑和三乙胺反应，以提供保护的苯胺基酰胺LXXII。使用与上文所述类似的程序，将LXXII的碘化物部分转化成LXXIII的甲酯部分。通过用氢化二异丁基铝(DIBAL-H)之类的还原剂进行处理，将LXXIII的甲酯部分转化成LXXIV的羟基部分。添加杂环基硫氢基化合物Het-SH以及三苯膦和二乙基偶氮二羧酸酯，将LXXIV的羟基部分转化成LXXV的硫烷基部分。用三氟乙酸将LXXV脱保护以产生硫烷基苯胺基酰胺LXXVI。
反应方案L
Figure A20058001611200541
按照反应方案M所示的合成路线制备化合物，其中X是化学键。由此，用芳基硼酸、苯、乙醇、碳酸钠水溶液和三苯膦钯处理氯代芳基苯胺基酰胺LXXVII，产生二芳基苯胺基酰胺LXXVIII。
反应方案M
可以按照反应方案N所示的程序制备例如LXXXI的化合物。由此，用对氨基甲基苯甲酸处理在乙酸中的苯-1，2-甲醛LXXIX以产生苯甲酸LXXX。通过用羟基苯并三唑、二氯化乙烯、和亚苯基二胺进行处理，将酸LXXX转化成相应的苯胺基酰胺LXXXI。
反应方案N
优选按照反应方案O所示的程序制备例如LXXXVI和LXXXIX的化合物。将邻苯二甲酸酐LXXXV和对氨基甲基苯甲酸在乙酸中合并，以制造中间体羧酸，使用与上文所述类似的程序将其转化成苯胺基酰胺LXXXVI。
在乙酸中将4-(2-氨基乙基)苯酚加入邻苯二甲酸酐LXXXV中，产生羟基化合物LXXXVII。通过用氢化钠、THF、DMF和苯基氨基双三氟甲磺酸酯进行处理，将LXXXVII的羟基转化成LXXXVIII的三氟甲磺酸基。按照与上文对反应方案3所述类似的程序，处理LXXXVIII，产生苯胺基酰胺LXXXIX。
反应方案O
优选按照反应方案P所示的合成路线制备例如XCI-XCVI的化合物。用在水和三乙胺中的对氨基甲基苯甲酸处理靛红酸酐XC，然后用甲酸处理，产生中间体羧酸，使用与上文所述类似的程序将其转化成苯胺基酰胺XCI。
或者，用在水和三乙胺中的对氨基甲基苯甲酸处理靛红酸酐XC，然后用盐酸和亚硝酸钠处理，产生中间体羧酸，使用与上文所述类似的程序将其转化成苯胺基酰胺XCII。
或者，用在水和三乙胺中的对氨基甲基苯甲酸处理靛红酸酐XC，产生苯甲酸XCIII。用氢氧化钠、二噁烷、氯代甲酸甲酯和甲醇处理XCIII，产生中间体喹唑啉二酮羧酸，然后使用与如上所述类似的程序将酸部分转化成XCIV的苯胺基酰胺部分。或者，在DMF中用碳酸钾和甲基碘处理中间体喹唑啉二酮羧酸以制造中间体苯甲酸甲酯，通过用氢氧化钠、甲醇和水进行处理，将其转化成中间体苯甲酸。然后使用与上文所述类似的程序将苯甲酸转化成相应的苯胺基酰胺XCV。
或者，用乙酸酐，然后用乙酸处理XCIII，产生中间体羧酸，使用与上文所述类似的程序将其转化成苯胺基酰胺XCVI。
反应方案P
优选如反应方案Q所示制备例如C的化合物。用在二氯甲烷中的硫代羰基二咪唑处理烷基胺XCVII，然后用氢氧化铵处理，产生硫脲XCVIII。用在二噁烷中的甲氧基丙烯酸甲酯和N-溴琥珀酰亚胺处理硫脲XCVIII，制造噻唑酯IC。使用与上文所述类似的程序将酯IC转化成相应的苯胺基胺C。
反应方案Q
Figure A20058001611200571
可以按照R中所示的合成路线制备化合物，其中X是化学键且Cy含有氨基取代基。由此，按照与上文所述类似的程序处理保护的碘代芳基苯胺基酰胺CI，产生二芳基苯胺基酰胺CII。通过用伯胺和三乙酰氧基硼氢化钠处理，然后用冰醋酸处理，将CII中的醛部分转化成相应的仲胺部分。使用与上文所述类似的程序将所得化合物脱保护以产生CIII。
反应方案R
Figure A20058001611200572
可以如反应方案S所示制备化合物，其中X包含亚炔基部分。用氯化三苯膦钯、碘化亚铜和1-乙炔基环己胺处理保护的碘代芳基苯胺基酰胺CI，产生炔基芳基苯胺基酰胺CIV。将CIV中的伯胺部分转化成相应的仲胺，并使用与上文所述类似的程序将苯胺部分脱保护以产生CV。
反应方案S
反应方案T
Figure A20058001611200582
优选按照反应方案T所示的合成路线制备例如CVIII的化合物。在存在二异丙基乙胺的情况下，用4-氨基苯甲酸甲酯处理二氯氨基三嗪CVI，以制造二氨基三嗪CVII。加入氨气和二噁烷，然后皂化并进行肽偶联，以产生CVIII。
反应方案U
优选按照反应方案U所示的合成路线制备例如CX的化合物。进行三氯氨基三嗪与各种溴化烷基镁的格氏反应，然后在存在二异丙基乙胺的情况下用4-氨基苯甲酸甲酯进行处理，产生烷基氨基三嗪CIX。然后使用与上文所述类似的合成方法将酯CIX转化成相应的苯胺基酰胺CX。
反应方案V
如反应方案V所示，二氯三嗪的胺化产生CXI。使用乙烯基锡烷进行Stille偶联，产生CXII。用保护的碘代酰苯胺、三乙胺、POT和二苄基丙酮钯进行处理，产生苯胺基酰胺，将其用三氟乙酸脱保护以提供链烯CXIII。链烯的氢化产生最终化合物CXIV。
反应方案W
优选按照反应方案W所示的合成路线制备例如CXVIII的化合物。用三溴化硼处理甲氧基氨基苯并三唑，产生相应的酸CXV。在存在偶氮二羧酸二乙酯和三苯膦的情况下，使用羟乙基吗啉进行Mitsunobu反应，产生胺CXVI。使用苯基硅烷和锡催化剂，用4-甲酰基苯甲酸甲酯进行还原性胺化，产生酯CXVII。与上文所述类似地，进行皂化然后进行通常的肽偶联，产生所需的酰苯胺CXVIII。
反应方案X
Figure A20058001611200611
用硫化氢处理4-甲基氰基苯甲酸，产生CXIX，在存在1，3-二氯丙酮的情况下对其进行环化以产生CXX。用吗啉进行处理，然后使用标准条件进行肽偶联，产生CXXI。
反应方案Y
Figure A20058001611200621
优选按照合成反应方案Y制备例如CXXIII和CXXVII的化合物。用溴甲基苯甲酸甲酯在存在NaOMe和苯基肼的情况下连续处理乙酰丙酮，然后皂化，产生中间体酸CXXII。使这种材料以标准方式与1，2-二氨基苯偶联以产生CXXIII。
用溴甲基苯甲酸甲酯在存在NaOMe和1∶1混合物AcOH-HCl(conc.)的情况下连续处理乙酰丙酮，产生中间体酸CXXIV。在存在碱的情况下与硫和丙二腈(malonodinitrile)进行酮酸反应，产生噻吩CXXV，使用标准程序将其转化成所需CXXVII。
反应方案Z
Figure A20058001611200631
优选按照合成反应方案Z制备例如CXXX的化合物。用羟胺处理4-羟基甲基苯甲酸，产生偕胺肟CXXVIII，其在用乙酸酐处理时转化成噁二唑CXXIX。使后者与1，2-二氨基苯以标准方式偶联以产生CXXX。
反应方案AA
Figure A20058001611200632
优选按照反应方案AA所示的合成路线制备例如CXXXIII的化合物。用亚硫酰氯处理4-甲酰基苯甲酸，产生酰基氯，使其与保护的酰苯胺偶联以产生CXXXI。使用苯基硅烷和锡催化剂，用二甲氧基苯胺进行还原性胺化，产生保护的酰苯胺CXXXII。用异氰酸酯处理，然后用三氟乙酸脱保护，产生脲基酰苯胺CXXXIII。
制药组合物
在第二方面，本发明提供了包含本发明的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂和药学可接受的载体、赋形剂或稀释剂的制药组合物。本发明的化合物可以通过本领域公知的任何方法配制，并可以制备成通过任何途径给药，包括但不限于，肠道外、口服、舌下、经皮、局部、鼻内、气管内、或直肠内。在某些优选的实施方式中，本发明的化合物在医院装置中通过静脉内给药。在某些其它优选的实施方式中，优选通过口服途径给药。
载体的特性取决于给药途径。本文所用的术语“药学可接受的”是指与生物系统(例如细胞、细胞培养物、组织或有机体)相容并且不会干扰活性成分的生物活性效力的无毒材料。由此，除了抑制剂、稀释剂、填料、盐、缓冲剂、稳定剂、增溶剂以外，本发明的组合物还可以含有本领域公知的其它材料。在例如Remington’s PharmaceuticalSciences，第18版，ed.A.Gennaro，Mack Publishing Co.，Easton，PA，1990中描述了药学可接受的制剂的制备。
本文所用的术语药学可接受的盐是指保持上述化合物的所需生物活性，并表现出最小程度或完全没有不需要的毒理学作用的盐。这些盐的例子包括但不限于，与无机酸(例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸和类似物)形成的酸加成盐，以及与有机酸(例如乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、苹果酸、抗坏血酸、苯甲酸、单宁酸、双羟萘酸、藻酸、聚谷氨酸、萘磺酸、萘二磺酸、和聚半乳糖醛酸)形成的盐。这些化合物也可以作为本领域技术人员已知的药学可接受的季盐施用，其具体包括式-NR+Z-的季铵盐，其中R是氢、烷基或苄基，并且Z是补偿离子，包括氯离子、溴离子、碘离子、-O-烷基、甲苯磺酸根、甲基磺酸根、磺酸根、磷酸根、或羧酸根(例如苯甲酸根、琥珀酸根、乙酸根、羟乙酸根、马来酸根、苹果酸根、柠檬酸根、酒石酸根、抗坏血酸根、苯甲酸根、桂皮酸根(cinnamoate)、mandeloate、benzyloate和二苯基乙酸根)。
活性化合物包含在药学可接受的载体或稀释剂中，其量在不会对受治疗的患者造成严重毒性作用的情况下，足以将治疗有效的量输送给患者。对于所有上述症状，活性化合物的优选剂量范围为每天大约0.01至300毫克/千克，优选0.1至100毫克/千克，更通常为每天每千克受者体重0.5至大约25毫克。典型的局部剂量为在适当载体中0.01-3％wt/wt。可以根据待输送的母体化合物的重量，计算药学可接受的衍生物的有效剂量范围。如果衍生物本身表现出活性，可以如上使用衍生物的重量或通过本领域技术人员已知的其它方式估算有效剂量。
组蛋白脱乙酰基酶的抑制
在第三方面，本发明提供了抑制细胞中组蛋白脱乙酰基酶的方法，包括使需要抑制组蛋白脱乙酰基酶的细胞与本发明的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂接触。由于本发明的化合物抑制了组蛋白脱乙酰基酶，它们对于组蛋白脱乙酰基酶在生物过程中所起作用的体外研究是有用的研究工具。此外，本发明的化合物选择性地抑制了HDAC的某些异构体。
组蛋白脱乙酰基酶的酶活性的测量可以使用已知方法进行。例如，Yoshida等，J.Biol.Chem.，265：17174-17179(1990)描述了通过在曲古柳菌素A处理的细胞中检测乙酰化组蛋白来评定组蛋白脱乙酰基酶的酶活性。Taunton等，Science，272：408-411(1996)类似地描述了使用内源和重组HDAC-1测量组蛋白脱乙酰基酶酶活性的方法。
在一些优选实施方式中，组蛋白脱乙酰基酶抑制剂与细胞中的所有组蛋白脱乙酰基酶相互作用并降低其活性。在按照本发明的这一方面的一些其它优选实施方式中，组蛋白脱乙酰基酶抑制剂与细胞中非全部的组蛋白脱乙酰基酶相互作用并降低其活性。在某些优选的实施方式中，相对于其它组蛋白脱乙酰基酶，该抑制剂在更大程度上与一种组蛋白脱乙酰基酶(例如HDAC-1)或组蛋白脱乙酰基酶的子类(例如HDAC-1、HDAC-2和HDAC-3)相互作用并降低其活性。在抑制剂优先降低组蛋白脱乙酰基酶子类的活性时，该子类中每一成员活性的降低可以相同或不同。如下所述，某些特别优选的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂是，与参与肿瘤形成的组蛋白脱乙酰基酶相互作用并降低其酶活性的抑制剂。某些其它优选的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂，与真菌组蛋白脱乙酰基酶相互作用并降低其酶活性。
优选地，按照本发明的第三方面的方法抑制了接触细胞的细胞增殖。术语“抑制细胞增殖”用于指与未接触的细胞相比，组蛋白脱乙酰基酶抑制剂对与该抑制剂接触的细胞生长的阻滞能力。可以使用Coulter Cell Counter(Coulter，Miami，FL)或血细胞计数器计算接触和未接触细胞的数量，从而评定细胞增殖。当细胞实体生长(例如，实体瘤(solid tumor)或器官)时，可以用测径器测量生长并将接触细胞的生长尺寸与未接触细胞的相比较，从而评定细胞增殖。
优选地，与未接触细胞的生长相比，与抑制剂接触的细胞的生长被抑制了至少50％。更优选地，100％抑制了细胞增殖(也就是接触细胞在数量上不会增加)。最优选地，术语“抑制细胞增殖”包括接触细胞与未接触细胞相比，数量或尺寸的降低。因此，根据本发明的抑制接触细胞中细胞增殖的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂，可以导致接触细胞的生长阻滞、生长停滞(arrest)、程序细胞死亡(也就是凋亡)、或坏死细胞死亡。
本发明的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂的细胞增殖抑制能力，可以使一群异步生长细胞同步。例如，本发明的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂可用于使在体外生长的一群非肿瘤细胞停滞在细胞周期的G1或G2期。这种同步可以，例如，识别出在细胞周期的G1或G2阶段表达的基因和/或基因产品。培养细胞的这种同步还可用于测试新转染方案的效力，其中转染效力不等并取决于被转染的细胞的特定细胞周期阶段。使用本发明的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂可以使细胞群体同步化，从而有助于检测出增强的转染效力。
在一些优选的实施方式中，接触细胞是肿瘤细胞。术语“肿瘤细胞”用于指表现出异常细胞生长的细胞。优选地，肿瘤细胞的异常细胞生长是增长的细胞生长。肿瘤细胞可以是增生细胞、在体外表现出缺乏生长的接触抑制的细胞、不能在体内转移的良性瘤细胞、或能够在体内转移并且在试图去除之后可以再生的癌细胞。术语“肿瘤形成”用于指诱发细胞增殖，这导致肿瘤生长。在一些实施方式中，组蛋白脱乙酰基酶抑制剂诱发接触细胞中的细胞分化。由此，肿瘤细胞在与组蛋白脱乙酰基酶抑制剂接触时可能被诱导分化，从而产生在系统发育学上比接触细胞更高级的非肿瘤子细胞。
在一些优选实施方式中，接触细胞是在动物体内。由此，本发明提供了一种治疗动物的细胞增殖性疾病或症状的方法，包括对需要这种治疗的动物施用治疗有效量的本发明的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。优选地，动物是哺乳动物，更优选地，是驯养的哺乳动物。最优选地，该动物是人。
术语“细胞增殖性疾病或症状”是指以异常细胞生长，尤其是异常增长的细胞增殖为特征的任何症状。这种细胞增殖性疾病或症状的例子包括但不限于，癌症、再狭窄、和牛皮癣。在特别优选的实施方式中，本发明提供了一种抑制动物体内的肿瘤细胞增殖的方法，包括对体内存在至少一个肿瘤细胞的动物施用治疗有效量的本发明的组蛋白脱乙酰基酶。
预计本发明的一些化合物对来自原生动物来源的组蛋白脱乙酰基酶具有抑制活性。因此，本发明还提供了一种治疗或预防原生动物疾病或感染的方法，包括对需要这种治疗的动物施用治疗有效量的本发明的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。优选地，该动物是哺乳动物，更优选为人。优选地，按照本发明的该实施方式使用的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂，对原生动物组蛋白脱乙酰基酶的抑制程度高于其对哺乳动物组蛋白脱乙酰基酶的抑制程度，特别是高于其对人类组蛋白脱乙酰基酶的抑制程度。
本发明进一步提供了一种治疗真菌疾病或感染的方法，包括对需要这种治疗的动物施用治疗有效量的本发明的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。优选地，该动物是哺乳动物，更优选为人。优选地，按照本发明的该实施方式使用的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂对真菌组蛋白脱乙酰基酶的抑制程度高于其对哺乳动物组蛋白脱乙酰基酶的抑制程度，特别是高于其对人类组蛋白脱乙酰基酶的抑制程度。
术语“治疗有效量”是指足以在对象细胞内抑制组蛋白脱乙酰基酶活性的剂量，或在对象体内足以抑制细胞增殖或足以诱发细胞分化的剂量。可以通过任何途径给药，包括但不限于，肠道外、口服、舌下、经皮肤、局部、鼻内、气管内或直肠内。在某些特别优选的实施方式中，本发明的化合物在医疗装置中经静脉给药。在某些其它优选实施方式中，给药优选通过口服途径进行。
当全身性给药时，组蛋白脱乙酰基酶抑制剂优选以足以使抑制剂的血浓度达到大约0.01μM至大约100μM，更优选大约0.05μM至大约50μM，再优选大约0.1μM至大约25μM，仍更优选大约0.5μM至大约25μM的剂量给药。对于局部给药，比这低得多的浓度可以是有效的，也可以容许高得多的浓度。本领域技术人员可以认识到，产生治疗效果所需的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂的剂量可以根据组织、器官或待治疗的特定动物或患者的不同而有很大的变动。
在本发明的第三方面的某些优选实施方式中，该方法进一步包括使细胞与抑制组蛋白脱乙酰基酶表达的反义寡核苷酸接触。核酸级抑制剂(nucleic acid level inhibitor)(例如反义寡核苷酸)与蛋白级抑制剂(protein level inhibitor)(即，组蛋白脱乙酰基酶酶活性抑制剂)的结合使用产生更好的抑制效果，由此与单独使用任一种抑制剂时所需的量相比，降低了获得给定抑制效果所需的抑制剂量。按照本发明的这一方面的反义寡核苷酸与编码HDAC-1、HDAC-2、HDAC-3、HDAC-4、HDAC-5、HDAC-6、HDAC-7、和/或HDAC-8的RNA或双链DNA的区域互补(例如，对于HDAC-1参见GenBank Accession NumberU50079，对于HDAC-2参见GenBank Accession Number U31814，以及对于HDAC-3参见GenBank Accession Number U75697)。
为了本发明的目的，术语“寡核苷酸”包括两个或多个脱氧核糖核苷、核糖核苷、或2’-取代核糖核苷残基、或其任何组合的聚合物。优选地，这些寡核苷酸含有大约6至大约100个核苷残基，更优选大约8至大约50个核苷残基，最优选大约12至大约30个核苷残基。核苷残基可以通过许多已知的任何核苷酸间键合而互相连接。这种核苷间键合包括但不限于，硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、烷基膦酸酯、烷基硫代膦酸酯、磷酸三酯、氨基磷酸酯、硅氧烷、碳酸酯、羧基甲酯、乙酰胺酯(acetamidate)、氨基甲酸酯、硫醚、桥接氨基磷酸酯、桥接膦酸亚甲酯、桥接硫代磷酸酯和砜核苷酸间键合。在某些优选实施方式中，这些核苷间键合可以是磷酸二酯、磷酸三酯、硫代磷酸酯、或氨基磷酸酯键、或它们的结合。术语寡核苷酸还包括含有化学改性的碱或糖和/或含有额外取代基(包括但不限于亲油基、插入剂、二胺和金刚烷)的聚合物。
为了本发明的目的，术语“2’-取代核糖核苷”包括下述核糖核苷——其中，戊糖部分2’位上的羟基被取代以产生2’-O-取代的核糖核苷。优选地，这种取代是用含1-6个饱和或不饱和碳原子的低碳烷基或用芳基或含2-6个碳原子的烯丙基进行的，其中这些烷基、芳基或烯丙基可以未取代或被取代，例如被卤素、羟基、三氟甲基、氰基、硝基、酰基、酰氧基、烷氧基、羧基、烷氧羰基、或氨基取代。术语“2’-取代核糖核苷”还包括其中的2’-羟基被氨基或被卤素基团(优选氟基)取代的核糖核苷。
本发明的这一方面中使用的特别优选的反义寡核苷酸包括嵌合寡核苷酸和杂种寡核苷酸。
为了本发明的目的，“嵌合寡核苷酸”是指含有一种以上核苷间键合的寡核苷酸。这种嵌合寡核苷酸的一个优选例子是含有硫代磷酸酯、磷酸二酯或二硫代磷酸酯区域，优选包含大约2至大约12个核苷酸，和烷基膦酸酯或烷基硫代膦酸酯区域的嵌合寡核苷酸(参看，例如Pederson等，美国专利第5,635,377和5,366,878号)。优选地，这些嵌合寡核苷酸含有至少三个选自磷酸二酯和硫代磷酸酯键、或它们的结合的连续核苷间键合。
为了本发明的目的，“杂种寡核苷酸”是指含有一种以上核苷的寡核苷酸。这种杂种寡核苷酸的一个优选例子包括核糖核苷酸或2’-取代的核糖核苷酸区域，优选包含大约2至大约12个2’-取代的核苷酸，和脱氧核糖核苷酸区域。优选地，这种杂种寡核苷酸含有至少三个连续的脱氧核糖核苷，还含有核糖核苷、2’-取代的核糖核苷，优选2’-O-取代的核糖核苷，或它们的结合(参看，例如，Metelev和Agrawal，美国专利第5,652,355号)。
本发明中使用的反义寡核苷酸的确切核苷酸序列和化学结构可以改变，只要该寡核苷酸保留其抑制相关基团表达的能力。这可以容易地通过测试特定反义寡核苷酸是否有活性来确定。对此可用的化验法包括测定对基因产品编码的mRNA的数量、用于基因产品的蛋白质印迹(Western blotting)分析化验法、用于酶活性基因产品的活性化验法、或软琼脂生长化验法、或报道基因构造化验法、或体内肿瘤生长化验法，所有这些都在本说明书或Ramchandani等(1997)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94：684-689中有详细描述。
本发明中使用的反义寡核苷酸可以方便地在合适的固体载体上使用公知的化学方法合成，包括H-膦酸酯化学法、亚磷酰胺化学法、或H-膦酸酯化学法与亚磷酰胺化学法的结合(也就是对某些循环使用H-膦酸酯化学法，并对其它循环使用亚磷酰胺化学法)。合适的固体载体包括用于固相寡核苷酸合成的任何标准固体载体，例如可控孔度玻璃(CPG)(参看，例如Pon，R.T.(1993)Methods in Molec.Biol.20：465-496)。
特别优选的寡核苷酸具有大约13至大约35个核苷酸的核苷酸序列，其包括表A所示的核苷酸序列。其它特别优选的寡核苷酸具有表A所示的核苷酸序列的大约15至大约26个核苷酸的核苷酸序列。
表A
 Oligo  靶  登记号  核苷酸位置  序列  基因中位置
 HDAC1 AS1HDAC1 AS2HDAC1 MM  Human HDAC1Human HDAC1Human HDAC1  U50079U50079U50079  1585-16041565-15841585-1604  5’-GAAACGTGAGGGACTCAGCA-3’5’-GGAAGCCAGAGCTGGAGAGG-3’5’-GTTAGGTGAGGCACTGAGGA-3’  3’-UTR3’-UTR3’-UTR
 HDAC2 ASHDAC2 MM  Human HDAC2Human HDAC2  U31814U31814  1643-16221643-1622  5’-GCTGAGCTGTTCTGATTTGG-3’5’-CGTGAGCACTTCTCATTTCC-3’  3’-UTR3’-UTR
 HDAC3 ASHDAC3 MM  Human HDAC3Human HDAC3  AF039703AF039703  1276-12951276-1295  5’-CGCTTTCCTTGTCATTGACA-3’5’-GCCTTTCCTACTCATTGTGT-3’  3’-UTR3’-UTR
 HDAC4 AS1HDAC4 MM1HDAC4 AS2HDAC4 MM4  Human HDAC4Human HDAC4Human HDAC4Human HDAC4  AB006626AB006626AB006626AB006626  514-33514-337710-297710-29  5-GCTGCCTGCCGTGCCCACCC-3’5’-CGTGCCTGCGCTGCCCACGG-3’5’-TACAGTCCATGCAACCTCCA-3’5’-ATCAGTCCAACCAACCTCGT-3’  5’-UTR5’-UTR3’-UTR3’-UTR
 HDAC5 AS  Human HDAC5  AF039691  2663-2682  5’-CTTCGGTCTCACCTGCTTGG-3’  3’-UTR
 HDAC6 ASHDAC6 MM  Human HDAC6Human HDAC6  AJ011972AJ011972  3791-38103791-3810  5’-CAGGCTGGAATGAGCTACAG-3’5’-GACGCTGCAATCAGGTAGAC-3’  3’-UTR3’-UTR
 HDAC7 AS  Human HDAC7  AF239243  2896-2915  5’-CTTCAGCCAGGATGCCCACA-3’  3’-UTR
 HDAC8 AS1HDAC8 AS2  Human HDAC8Human HDAC8  AF230097AF230097  51-701328-1347  5’-CTCCGGCTCCTCCATCTTCC-3’5’-AGCCAGCTGCCACTTGATGC-3’  5’-UTR3’-UTR
下列实施例将进一步阐述本发明的一些优选实施方式，并且不限制本发明的范围。
实施例
反应方案1
实施例1：
N-(2-氨基-苯基)-3-[4-({(2-羟基-乙基)-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基}- 甲基)-苯基]-丙烯酰胺(6)
步骤1：3-(4-甲酰基-苯基)-丙烯酸甲酯(1)
向4-甲酰基肉桂酸(15.39克，87.36毫摩尔)在1，2-二氯乙烷(100毫升)中在室温的搅拌悬浮液中，分别加入浓硫酸(8毫升)和无水MeOH(15毫升)下。将反应混合物回流18小时，冷却至室温并浓缩。将残留物用AcOEt稀释，并用H2O、饱和NaHCO3水溶液、H2O和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并再次浓缩。通过快速色谱法在硅胶上提纯粗产物(洗脱剂AcOEt/己烷：20/80→30/70)以获得浅黄色粉末状标题化合物2(9.75克，51.26毫摩尔，59％收率)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)：10.04(s，1H)，7.91(d，J＝7.9Hz，2H)，7.80-7.60(m，3H)，6.56(d，J＝15.8Hz，1H)，3.84(s，3H)。
步骤2：3-(4-{[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]-甲基}-苯基)-丙烯酸甲酯 (2)
在室温下将NaBH(OAc)3(3.87克，17.35毫摩尔)加入到在氮气下的1(3.00克，15.77毫摩尔)和色胺(2.78克，17.35毫摩尔)在无水1，2-二氯乙烷(200毫升)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌39小时，倒入10％的K2CO3溶液中，并用CH2Cl2萃取。将有机层浓缩形成残留物，通过快速色谱法在硅胶上提纯残留物(MeOH/CH2Cl2，10/90)，并在AcOEt/己烷混合物中共沉淀以获得黄色固体状标题化合物2(4.39克，13.13毫摩尔，83％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：10.78(s，1H)，7.70-7.62(m，3H)，7.49(d，J＝8.0Hz，1H)，7.39(d，J＝8.2Hz，2H)，7.33(dt，J＝8.0，0.9Hz，1H)，7.13(d，J＝2.2Hz，1H)，7.06(ddd，J＝7.0，7.0，1.2Hz，1H)，6.96(ddd，J＝6.9，6.9，1.1Hz，1H)，6.62(d，J＝16.0Hz，1H)，3.79(s，2H)，3.75(s，3H)，2.91-2.78(m，4H)，2.18(bs，1H)。
步骤3：3-[4-({[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-[2-(1H-吲哚-3-基)- 乙基]-氨基}-甲基)-苯基]-丙烯酸甲酯(3)
向在室温下、在氮气下2(2.82克，8.44毫摩尔)和二异丙基乙基胺(2.21毫升，12.66毫摩尔)在无水DMSO(22毫升)中的搅拌溶液中，加入(2-溴-乙氧基)-叔丁基-二甲基硅烷(2.17毫升，10.12毫摩尔)。将反应混合物在50-55℃加热24小时，倒入水中并用CH2Cl2萃取。有机层经MgSO4干燥，过滤，并浓缩。通过快速色谱法在硅胶上(AcOEt/CH2Cl2，15/85，加入几滴NH4OH)提纯粗产物以获得暗橙色油状的标题化合物3(4.06克，8.24毫摩尔，97％收率)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)：7.95(bs，1H)，7.70(d，J＝15.8Hz，lH)，7.58-7.30(m，6H)，7.18(t，J＝7.5Hz，1H)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H)，7.00(bs，1H)，6.43(d，J＝16.2Hz，1H)，3.88-3.68(m，7H)，3.04-2.66(m，6H)，0.88(bs，9H)，0.04(bs，6H)。
步骤4：3-[4-({[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-[2-(1H-吲哚3-基)- 乙基]-氨基}-甲基)-苯基]-丙烯酸(4)
在室温下，在化合物3(3.18克，6.45毫摩尔)在THF(40毫升)中的搅拌溶液，加入LiOH.H2O(677毫克，16.14毫摩尔)在水(20毫升)中的溶液。24小时后，浓缩反应混合物，用水稀释，并用1N HCl酸化至pH为5-6。形成沉淀物，将其过滤分离，用水洗涤并干燥，获得米色固体状标题化合物4(2.43克，5.08毫摩尔，79％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：12.34(bs，1H)，10.75(s，1H)，7.63(d，J＝8.2Hz，2H)，7.59(d，J＝15.8Hz，1H)，7.44-7.35(m，3H)，7.32(d，J＝8.0Hz，1H)，7.11(d，J＝2.3Hz，1H)，7.05(td，J＝7.5，1.0Hz，1H)，6.92(td，J＝7.4，0.9Hz，1H)，6.51(d，J＝15.8Hz，1H)，3.79(s，2H)，3.69(t，J＝6.4Hz，2H)，2.93-2.74(m，4H)，2.69(t，J＝6.2Hz，2H)，0.88(s，9H)，0.05(s，6H)。
步骤5：N-(2-氨基-苯基)-3-[4-({[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙 基]-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-氨基}-甲基)-苯基]-丙烯酰胺(5)
向在室温下、在氮气下4(1.30克，2.72毫摩尔)在无水DMF(20毫升)中的搅拌溶液中，分别加入Et3N(330微升，3.26毫摩尔)和BOP反应物(1.32克，2.99毫摩尔)。30分钟后，逐滴添加1，2-苯二胺(352毫克，3.26毫摩尔)、Et3N(1.14毫升，8.15毫摩尔)在无水DMF(3毫升)中的溶液。3小时后，将反应混合物倒入NH4Cl的饱和水溶液中，并用AcOEt萃取。用饱和NH4Cl、水和盐水洗涤萃取物，经MgSO4干燥，过滤，浓缩并通过快速色谱法在硅胶上提纯(MeOH/CH2Cl2，5/95，加入几滴NH4OH)，获得作为黄色粘性泡沫的标题化合物5(1.49克，2.62毫摩尔，96％收率)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：10.78(s，1H)，9.40(s，1H)，7.59(d，J＝8.0Hz，2H)，7.58(d，J＝15.8Hz，1H)，7.45(d，J＝7.9Hz，2H)，7.40(t，J＝7.7Hz，2H)，7.35(d，J＝8.4Hz，1H)，7.14(s，1H)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H)，7.05-6.85(m，3H)，6.79(d，J＝7.9Hz，1H)，6.62(t，J＝7.5Hz，1H)，4.98(bs，2H)，3.80(s，2H)，3.71(t，J＝6.2Hz，2H)，2.95-2.75(m，4H)，2.71(t，J＝6.2Hz，2H)，0.89(s，9H)，0.05(s，6H)。
步骤6：N-(2-氨基-苯基)-3-[4-({(2-羟基-乙基)-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]- 氨基}-甲基)-苯基]-丙烯酰胺(6)
向在氮气下，-20℃的5(1.49克，2.62毫摩尔)在无水THF(30毫升)中的搅拌溶液中，加入TBAF溶液(2.88毫升，2.88毫摩尔，1.0M的THF溶液)。将反应混合物经1小时升温至室温，并继续搅拌22小时。加入MeOH，将反应混合物浓缩，用AcOEt稀释，并用NaHCO3的饱和水溶液、H2O、NH4Cl的饱和水溶液和盐水连续洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残留物通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/CH2Cl2，5/95→10/90，加入几滴NH4OH)提纯，并用AcOEt/CH2Cl2/己烷的混合物研制，获得浅黄色固体状的标题化合物6(956毫克，2.10毫摩尔，80％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：10.76(s，1H)，9.39(s，1H)，AB system(δA＝7.58，δB＝7.44，JAB＝8.0Hz，4H)，7.56(d，J＝15.7Hz，1H)，7.42-7.34(m，2H)，7.33(d，J＝8.0Hz，1H)，7.12(d，J＝2.3Hz，1H)，7.05(td，J＝7.2，1.2Hz，1H)，6.98-6.90(m，2H)，6.90(d，J＝15.8Hz，1H)，6.77(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，6.60(ddd，J＝7.5，7.5，1.4Hz，1H)，4.98(bs，2H)，4.43(t，J＝5.4Hz，1H)，3.78(s，2H)，3.56(td，J＝6.3，5.6Hz，2H)，2.94-2.84(m，2H)，2.82-2.74(m，2H)，2.68(t，J＝6.5Hz，2H)。
反应方案2
Figure A20058001611200751
实施例2：
N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-2-基氨 基}-甲基)-苯甲酰胺(10a)
步骤1：(2-氯-嘧啶-4-基)-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-胺(7)
向在室温下、在氮气下2，4-二氯嘧啶(500毫克，3.36毫摩尔)在无水DMF(10毫升)中的搅拌溶液中，分别缓慢加入i-Pr2Net(1.06毫升、6.10毫摩尔)和3，4-二甲氧基苯乙胺(531微升、3.05毫摩尔)。24小时后，用AcOEt稀释反应混合物，并用NH4Cl饱和水溶液和盐水连续洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残留物通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/CH2Cl2：2/98→5/95)提纯，获得浅黄色油状标题化合物7a(744毫克，2.53毫摩尔，83％收率)。
步骤2：4-({4-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-2-基氨基}-甲基)- 苯甲酸甲酯(8)
在密封烧瓶中，将7(744毫克，2.53毫摩尔)、4-(氨基甲基)苯甲酸甲酯(628毫克，3.80毫摩尔)和i-Pr2Net(882微升，5.07毫摩尔)在异丙醇(50毫升)中的混合物加热至120-125℃7天(在此期间，向反应混合物中加入过量的4-(氨基甲基)苯甲酸甲酯)。将反应混合物冷却至室温，浓缩，并通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/CH2Cl2，5/95→10/90，加几滴NH4OH)提纯，获得作为橙色粘性泡沫的标题化合物8(671毫克，1.59毫摩尔，63％收率)。
步骤3：4-({4-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-2-基氨基}-甲基)- 苯甲酸(9)
向化合物8(670毫克，1.59毫摩尔)在THF(15毫升)中在室温的搅拌溶液中，加入LiOH.H2O(166毫克，3.97毫摩尔)在水(5毫升)中的溶液。24小时后，将反应混合物浓缩，用水稀释，并用2N HCl酸化(pH为5-6)。生成沉淀，将沉淀过滤分离，用水漂洗并干燥，获得米色固体状的标题化合物9(600毫克，1.47毫摩尔，93％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：AB system(δA＝7.87，δB＝7.41，J＝8.2Hz，4H)，7.68-7.58(m，1H)，7.12-6.56(m，5H)，5.75(d，J＝5.5Hz，1H)，4.53(d，J＝6.3Hz，2H)，3.74 and 3.72(2s，6H)，3.48-3.30(m，2H)，2.80-2.60(m，2H)。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶 -2-基氨基}-甲基)-苯甲酰胺(10a)
向在室温下、在氮气下9a(300毫克，0.73毫摩尔)在无水DMF(10毫升)中的搅拌溶液中，分别加入Et3N(123微升，0.88毫摩尔)和BOP反应物(358毫克，0.81毫摩尔)。30分钟后，逐滴加入1，2-苯二胺(95毫克，0.88毫摩尔)、Et3N(307微升，2.20毫摩尔)在无水DMF(2毫升)中的溶液。搅拌整夜后，将反应混合物倒入NH4Cl的饱和水溶液中，并用AcOEt萃取。连续用饱和NH4Cl、水和盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残留物通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/CH2Cl2：5/95 →10/90加几滴NH4OH)提纯，并在AcOEt/MeOH/己烷的混合物中共沉淀，获得米色固体状的标题化合物10a(280毫克，0.56毫摩尔，76％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.60(s，1H)，AB system(δA＝7.91，δB＝7.43，J＝8.0Hz，4H)，7.71-7.58(m，1H)，7.17(d，J＝7.4Hz，1H)，7.20-7.00(m，2H)，6.98(t，J＝7.5Hz，1H)，6.86(d，J＝8.0Hz，1H)，6.84-6.64(m，3H)，6.61(t，J＝7.4Hz，1H)，5.76(d，J＝5.3Hz，1H)，4.90(bs，2H)，4.54(d，J＝6.1Hz，2H)，3.74(s，6H)，3.50-3.35(m，2H)，2.80-2.62(m，2H)。
实施例3-11：
采用如对化合物10a、实施例2(反应方案2)所述相同的程序制备实施例3-11(化合物10b-10j)。
表1
Figure A20058001611200771
Figure A20058001611200781
反应方案3
Figure A20058001611200801
实施例12：
N-(2-氨基-苯基)-4-([2，3’]联吡啶-6-基氨基甲基)-苯甲酰胺(13a) 步骤1：[2，3’]联吡啶-6-基胺(11)
在室温下，2-氨基-6-溴吡啶(5.38克、31.09毫摩尔)、2，4，6-(3-吡啶基)-环三硼氧烷(3.80克，12.07毫摩尔)和Na2CO3水溶液(100毫升，0.4M)的混合物在乙腈(100毫升)搅拌脱气悬浮液中，加入Pd(PPh3)4(1.70克，1.47毫摩尔)。反应混合物在氮气下在95℃下加热1至2天，冷却至室温并过滤。滤液浓缩，并通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/CH2Cl2：5/95→10/90加几滴NH4OH)提纯，并用AcOEt/CH2Cl2/己烷的混合物共沉淀，获得浅黄色固体状的标题化合物11(4.091克，23.90毫摩尔，77％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ(ppm)：9.16(dd，J＝2.2，0.8Hz，1H)，8.57(dd，J＝4.7，1.6Hz 1H)，8.33-8.28(m，1H)，7.54-7.44(m，2H)，7.14(dd，J＝7.3，0.5Hz，1H)，6.49(dd，J＝8.2，0.4Hz1H)，6.12(bs，2H)。
步骤2：4-([2，3’]联吡啶-6-基氨基甲基)-苯甲酸甲酯(12)
将苯基硅烷(2.34毫升，19.28毫摩尔)用两天时间分三部分加入到在室温的11(3.00克，17.52毫摩尔)、4-甲酰基苯甲酸甲酯(4.62克，28.11毫摩尔，1.5-2.0当量)和二氯化二丁锡(160毫克，0.53毫摩尔)的混合物在无水THF(15毫升)中的搅拌悬浮液中。搅拌2至7天后，将反应混合物过滤，滤液浓缩，并通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/CH2Cl2，2/98→10/90)提纯，获得浅黄色固体状的标题化合物12(5.50克，17.22毫摩尔，98％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ(ppm)：9.11(dd，J＝2.3，0.7Hz，1H)，8.55(dd，J＝4.7，1.8Hz 1H)，8.29-8.24(m，1H)，7.93(d，J＝8.4Hz，2H)，7.57-7.40(m，5H)，7.18(d，J＝7.2 Hz，1H)，6.59(d，J＝8.2Hz 1H)，4.69(d，J＝6.1Hz，2H)，3.85(s，3H)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-([2，3’]联吡啶-6-基氨基甲基)-苯甲酰胺(13a)
按照与实施例2，步骤3和4(反应方案2)中相同的程序分两步由12制得米色固体状的标题化合物13a(实施例12)。1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ(ppm)：9.60(s，1H)，9.16(dd，J＝2.2，0.9Hz，1H)，8.56(dd，J＝4.8，1.7Hz 1H)，8.31(ddd，J＝7.8，2.3，1.7Hz，1H)，7.95(d，J＝8.2Hz，2H)，7.57-7.48(m，3H)，7.46(ddd，J＝8.0，4.7，0.8Hz，1H)，7.42(t，J＝6.1Hz，1H)，7.19(dd，J＝7.2，0.6Hz，1H)，7.17(dd，J＝7.3，1.0Hz，1H)，6.98(td，J＝7.5，1.4，1H)，6.79(dd，J＝7.8，1.4Hz 1H)，6.65-6.57(m，2H)，4.90(bs，2H)，4.69(d，J＝6.1Hz，2H)。
实施例13-16：
使用如对化合物13a、实施例12(反应方案3)所述相同的程序制备实施例13-16(化合物13b-13e)。
表2
Figure A20058001611200821
反应方案4
Figure A20058001611200832
实施例17：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-噻吩-3-基-嘧啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(16a) 步骤1：2-氯-4-噻吩-3-基-嘧啶(14)
在3-噻吩硼酸(500毫克，3.91毫摩尔)和2.4-二氯嘧啶(1.16克，7.81毫摩尔)在乙腈(20毫升)中的溶液中，加入0.4 M的Na2CO3溶液(20毫升)，然后加入Pd(PPh3)4(450毫克，0.39毫摩尔)。将悬浮液脱气，并在氮气下在90℃下加热16小时，冷却，浓缩并用EtOAc萃取。将有机层连续用饱和NH4Cl溶液、盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法在硅胶上(EtOAc/CH2Cl2：2/98)提纯残留物，获得标题化合物14(680毫克，3.46毫摩尔，88％收率)。1H NMR：(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.56(d，J＝5.2Hz，1H)，8.19(dd，J＝3.2，1.2Hz，1H)，7.66(dd，J＝5.2，1.2Hz，1H)，7.46(d，J＝5.2Hz，1H)，7.43(dd，J＝5.2，2.8Hz，1H)。
步骤2：4-[(4-噻吩-3-基-嘧啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酸甲酯(15)
在14(680毫克，3.46毫摩尔)和4-(氨基甲基)苯甲酸甲酯(686毫克，4.51毫摩尔)在无水1，4-二噁烷(10毫升)中的溶液中，加入DIPEA(1.50毫升，8.65毫摩尔)，在密封管中，将混合物在130℃加热48小时。在真空下去除溶剂，将残留物用EtOAc/Et2O的混合物研制，形成固体，将其过滤收集并干燥。将该材料通过快速色谱法在硅胶上(EtOAc/CH2Cl2：30/70)提纯，获得标题化合物15(540毫克，1.66毫摩尔，48％收率)。1H NMR：(400MHz，DMSO-D6)δ(ppm)：8.29-8.23(m，2H)，7.88(d，J＝8.4Hz，2H)，7.84-7.77(m，1H)，7.69-7.59(m，2H)，7.52-7.43(m，2H)，7.03(d，J＝5.2Hz，1H)，4.60(d，J＝6.4Hz，2H)，3.81(s，3H)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-噻吩-3-基-嘧啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰 胺(16a)
按照与实施例2，步骤3和4(反应方案2)中相同的程序分两步由15制得米色固体状的标题化合物16a(实施例17)。1H NMR：(400MHz，DMSO-D6)δ(ppm)：9.59(s，1H)，8.32-8.27(m，2H)，7.91(d，J＝8.0Hz，2H)，7.83(t，J＝6.4Hz，1H)，7.71(d，J＝4.8Hz，1H)，7.68-7.63(m，1H)，7.54-7.44(m，2H)，7.15(d，J＝8.0Hz，1H)，7.06(d，J＝5.2Hz，1H)，6.96(td，J＝7.6，1.6Hz，1H)，6.77(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)，6.59(td，J＝7.6，1.2Hz，1H)，4.89(s，2H)，4.62(d，J＝6.4Hz，2H)。
实施例18-24：
使用如对化合物16a、实施例17(反应方案4)所述相同的程序制备实施例18-24(化合物16b-16h)。
表3
Figure A20058001611200851
Figure A20058001611200852
Figure A20058001611200861
反应方案5
Figure A20058001611200871
实施例25：
N-(2-氨基-苯基)-({4-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基]-嘧啶-2-基氨基}- 甲基)-苯甲酰胺(22a)
步骤1：2-氯-4-(4-甲氧基-苯基)-嘧啶(17)
在4-甲氧基苯基硼酸(3.0克，19.7毫摩尔)和2，4-二氯嘧啶(5.9克，39.0毫摩尔)在无水乙腈(120毫升)中的溶液中，加入0.4M的Na2CO3溶液(120毫升)，然后加入Pd(PPh3)4(400毫克，0.35毫摩尔)。将悬浮液脱气并在90℃加热16小时，冷却并浓缩，制得沉淀物，过滤收集沉淀，用水洗涤，干燥，并通过快速色谱法在硅胶上(EtOAc/CH2Cl2：5/95)提纯，获得标题化合物17(4.25克，19.3毫摩尔，97％收率)。
步骤2：4-(2-氯-嘧啶-4-基)-苯酚(18)
在0℃，在17(3.7克，16.8毫摩尔)在无水二氯甲烷(42毫升)中的溶液中，加入三溴化硼(3.17毫升，33.5毫摩尔)。将混合物在室温下剧烈搅拌16小时，冷却至0℃。倒入冰-水并继续搅拌30分钟。浓缩反应混合物以形成沉淀，将其过滤收集，用水洗涤，干燥并通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/CH2Cl2：2/98)提纯，获得标题化合物18(3.28克，15.9毫摩尔，94％收率)。1H NMR：(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：10.26(s，1H)，8.66(d，J＝5.6Hz，1H)，8.05(td，J＝8.4，1.6Hz，2H)，7.96(d，J＝5.6Hz，1H)，6.90(td，J＝8.4，1.6Hz，2H)。
步骤3：4-{2-[4-(2-氯-嘧啶-4-基)-苯氧基]-乙基}-吗啉(19)
在18(1.8克，8.71毫摩尔)在丙酮(80毫升)中的溶液中，分别加入4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐(1.95克，10.5毫摩尔)、碘化钾(360毫克，2.2毫摩尔)和碳酸钾(6.0克，44.0毫摩尔)。将反应混合物回流16小时并浓缩。用水稀释残留物，并将水相用EtOAc萃取两次。将合并的有机萃取液经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，以形成残留物，将残留物通过快速色谱法在硅胶上(EtOAc/CH2Cl2，50/50到MeOH/CH2Cl2：2/98)提纯，获得标题化合物19(2.7克，8.4毫摩尔，96％收率)。
步骤4：4-({4-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基]-嘧啶-2-基氨基}-甲基)-苯甲 酸甲酯(20)
在19(2.7克，8.4毫摩尔)和4-(氨基甲基)苯甲酸甲酯盐酸盐(2.7克，13.5毫摩尔)在无水甲苯(33毫升)中的溶液中，加入碳酸铯(8.2克，25.3毫摩尔)，然后加入Pd2(dba)3(464毫克，0.51毫摩尔)和rac-BINAP(473毫克，0.76毫摩尔)。将溶液脱气，并在100℃加热16小时。反应混合物在水和EtOAc之间分相，并将相分离。连续用盐水洗涤有机层，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩形成残留物，将残留物通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/CH2Cl2：2/98)提纯，获得标题化合物20(1.9克，4.2毫摩尔，50％收率)。
步骤5：4-({4-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基]-嘧啶-2氨基}-甲基-苯甲 酸(21)
在20(1.9克，4.2毫摩尔)在THF(8毫升)、MeOH(8毫升)和水(4毫升)的混合物中的溶液中，加入NaOH(373毫克，9.3毫摩尔)。将混合物在40℃加热16小时，随即添加1N HCl酸化至pH为6，浓缩，并在高真空下干燥，获得标题化合物21，其不经进一步提纯即使用。
步骤6：N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基]-嘧啶-2-基 氨基}-甲基)-苯甲酰胺(22a)
在21(来自前面步骤的粗产物)在无水乙腈(50毫升)中的溶液中，加入1，2-苯二胺(1.83克，16.9毫摩尔)，然后加入Et3N(2.65毫升，19.0毫摩尔)、HOBt.H2O(1.03克，7.6毫摩尔)和EDCI.HCl(1.62克，8.5毫摩尔)。将混合物在室温下搅拌72小时，过滤以去除盐类，将滤液浓缩以形成残留物，将残留物通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/CH2Cl2：2/98至5/95)提纯。用EtOAc/CH2Cl2的混合物研制此材料，获得白色固体状的标题化合物22a(696毫克，1.3毫摩尔，在两步内产率3 1％)。1H NMR：(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.55(s，1H)，8.25(d，J＝5.2Hz，1H)，8.00(d，J＝8.4Hz，2H)，7.88(d，J＝8.4Hz，2H)，7.77(t，J＝6.4Hz，1H)，7.44(d，J＝7.2Hz，2H)，7.11(d，J＝7.6Hz，1H)，7.07(d，J＝5.2Hz，1H)，7.01(d，J＝8.4Hz，2H)，6.92(td，J＝7.6，1.6Hz，1H)，6.73(dd，J＝8.0，1.6Hz，1H)，6.55(td，J＝7.4，1.2Hz，1H)，4.85(s，2H)，4.61(d，J＝5.6Hz，2H)，4.13(t，J＝5.6Hz，2H)，3.55(t，J＝4.4Hz，4H)，2.68(t，J＝5.6Hz，2H)，2.45(t，J＝4.4Hz，4H)。
实施例26：
N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[3-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯基]-嘧啶-2-基氨 基}-甲基)-苯甲酰胺盐酸盐(22b)
按照与实施例25，步骤1-6(反应方案5)中相同的程序，以3-甲氧基苯基硼酸为原料，并用2-(二甲基胺)氯乙烷盐酸盐作为步骤3中的烷基化反应物，分6步制得标题化合物22b。将该化合物溶解在MeOH和EtOAc的混合物中并加入1N HCl在Et2O中的溶液，由此获得盐酸盐形式的该化合物。滤出白色沉淀，用EtOAc洗涤，并在高真空下干燥。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.31(d，J＝5.2Hz，1H)，7.91(d，J＝7.6Hz，2H)，7.50(d，J＝7.6Hz，1H)，7.45(d，J＝8.4Hz，2H)，7.32(t，J＝8.0Hz，1H)，7.34-7.28(m，1H)，7.05(td，J＝7.6，1.6Hz，1H)，7.00-6.96(m，1H)，6.97(d，J＝4.8Hz，1H)，6.82-6.77(m，2H)，6.04(bs，1H)，4.74(d，J＝6.0Hz，2H)，4.11(t，J＝5.2Hz，2H)，2.94(t，J＝5.2Hz，2H)，2.45(s，6H)。
实施例27：
N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基]-嘧啶-2-基氨基}- 甲基)-苯甲酰胺(22c)
按照与实施例25(步骤1-6，反应方案5)中相同的程序，以3-甲氧基苯基硼酸为原料，并用4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐作为步骤3中的烷基化反应物，分6步制得标题化合物22c。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.54(s，1H)，8.31(d，J＝5.2Hz，1H)，7.92-7.83(m，3H)，7.65-7.52(m，2H)，7.45(d，J＝6.4Hz，2H)，7.35(t，J＝8.4Hz，1H)，7.15(d，J＝5.2Hz，1H)，7.11(d，J＝6.8Hz，1H)，7.03(d，J＝6.8Hz，1H)，6.92(td，J＝7.6，1.2Hz，1H)，6.73(dd，J＝7.6，1.2Hz，1H)，6.55(t，J＝6.8Hz，1H)，4.85(s，2H)，4.61(d，J＝6.0Hz，2H)，4.14-4.06(m，2H)，3.55(t，J＝4.8Hz，4H)，2.70(t，J＝5.6Hz，2H)，2.50-2.44(m，4H)。
实施例28：
N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[4-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯基]-嘧啶-2-基氨 基}-甲基)-苯甲酰胺(22d)
按照与实施例25(步骤1-6，反应方案5)中相同的程序，以4-甲氧基苯基硼酸为原料，并用2-(二甲基胺)氯乙烷盐酸盐作为步骤3中的烷基化反应物，分6步制得标题化合物22d。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：10.52-10.35(bs，1H)，9.97(s，1H)，8.29(d，J＝5.2Hz，1H)，8.06(d，J＝8.8Hz，2H)，7.96(d，J＝8.0Hz，2H)，8.10-7.85(m，1H)，7.52-7.40(m，2H)，7.31(t，J＝7.6Hz，1H)，7.20-7.00(m，5H)，6.96-6.88(m，1H)，4.70-4.58(m，2H)，4.45-4.38(t，J＝4.8Hz，2H)，3.54-3.46(m，2H)，2.83(s，6H)。
反应方案6
实施例29：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(26a) 步骤1：3-二甲基氨基-1-吡嗪-2-基-丙烯酮(23a)
将乙酰基吡嗪(5克，40.9毫摩尔)在N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(10.9毫升，81.8毫摩尔)和Et3N(5.7毫升)中的溶液在110℃加热16小时。停止加热，在使其冷却至室温的同时形成沉淀。用叔丁基甲基醚稀释悬浮液；将固体过滤分离，并用叔丁基甲基醚洗涤。用相同溶剂研制此材料，将其滤出并干燥，获得黄色固体状的标题化合物23a(5.9克，33.3毫摩尔，81％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.09(s，1H)，8.73(d，J＝2.4Hz，1H)，8.66(dd，J＝2.4，1.6Hz，1H)，7.84(d，J＝12.4Hz，1H)，6.30-6.20(m，1H)，3.19(s，3H)，2.93(s，3H)。
步骤2：4-胍基甲基-苯甲酸甲酯二水合物(24)
在4-(氨基甲基)苯甲酸甲酯盐酸化物(5克)在无水乙醇(25毫升)中的溶液中，加入1H-吡唑-1-羧基脒(carboxamidine)盐酸盐(4.4克)，然后加入DIPEA(13.0毫升)，将混合物回流3小时。在真空下去除乙醇。在剧烈搅拌下，在残留的粘性油中加入NaHCO3饱和溶液(50毫升)，然后加入300毫升水(所得pH为9)。生成白色固体，并继续搅拌1小时。将此材料滤出，用水(200毫升)和叔丁基甲基醚(50毫升)洗涤并干燥，获得白色粉末状的标题化合物24(4.7克，91％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：7.91(d，J＝8.0Hz，2H)，7.39(d，J＝8.0Hz，2H)，4.39(s，2H)，3.83(s，3H)，3.80-2.80[m，4H+2H2O(经元素分析测定)]。
步骤3，方法A：4-[(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酸(25a)
将24(6.2克，25.4毫摩尔)和23a(3.0克，16.9毫摩尔)在无水甲醇(40毫升)中的悬浮液搅拌并加热以回流10分钟，然后缓慢加入95％甲醇钠(3.65克，67.6毫摩尔)在甲醇(40毫升)中的溶液。回流24小时后，加入20毫升的2.5N NaOH水溶液，继续保持回流24小时。混合物冷却至室温，减压去除甲醇，加入100毫升水，将所得混合物用AcOEt萃取。分离水相并用2N HCl酸化至pH 5-6以形成沉淀，将其过滤收集，用水洗涤并干燥，获得所需的白色固体羧酸25a(4.55克，14.8毫摩尔，87％)。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰 胺(26a)
向25a(1克，3.3毫摩尔)在无水乙腈(35毫升)中的溶液中，加入1，2-苯二胺(0.88克，8.1毫摩尔)，然后加入Et3N(2.7毫升，19.1毫摩尔)、HOBt.H2O(803毫克，5.9毫摩尔)和EDCI.HCl(1.89克，9.9毫摩尔)。将混合物在室温下搅拌16小时以形成悬浮液，将其过滤收集，用MeCN、水并再用MeCN连续洗涤，用MeOH研制，过滤并干燥，获得标题化合物26a(730毫克，1.84毫摩尔，55％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.57(s，1H)，9.43(s，1H)，8.75(d，J＝4.8Hz，2H)，8.49(d，J＝5.2Hz，1H)，8.11(t，J＝5.2Hz，1H)，7.91(d，J＝8.4Hz，2H)，7.59-7.37(m，2H)，7.44(d，J＝5.2Hz，1H)，7.12(d，J＝7.6Hz，1H)，6.94(td，J＝7.6，1.6Hz，1H)，6.75(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)，6.57(t，J＝7.2Hz，1H)，4.86(s，2H)，4.66(d，J＝5.2Hz，2H)。
实施例30：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-吡啶-2-基-嘧啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(26b)
按照与实施例29，步骤1，2和4(反应方案6)中相同的程序制备化合物26b。对于步骤3，采用方法B：
步骤3，方法B：4-[(4-吡啶-2-基-嘧啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酸(25b)
在24(0.85克，4.83毫摩尔)和3-二甲基氨基-1-吡啶-2-基-丙烯酮23b(1.0克，4.83毫摩尔)在i-PrOH(20毫升)中的溶液中，加入分子筛(0.2克，4_，粉末，＞5微米)。将反应混合物回流16小时，随后通过塞里塑料垫过滤混浊溶液。将母液浓缩至其体积的一半，形成固体，将其过滤收集并干燥，获得浅黄色结晶材料(0.62克，1.94毫摩尔，40％收率)。将该化合物(0.456克，1.43毫摩尔)溶解在THF(3毫升)、MeOH(3毫升)和水(1.5毫升)的混合物中，然后加入NaOH(0.125克，3.14毫摩尔)，将反应混合物在40℃搅拌16小时，冷却至室温，加入1N HCl(3.2毫升)以酸化至pH 5-6，并浓缩以去除有机溶剂。形成沉淀物，过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，获得标题化合物25b(0.542克，1.37毫摩尔，96％收率)。
实施例31-33：
采用如对化合物26a(实施例29，反应方案6)所述相同的程序制备实施例31-33(化合物26b-26d)。
表4
Figure A20058001611200941
Figure A20058001611200942
反应方案7
实施例34：
5-{2-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基氨基]-嘧啶-4-基}-吡啶-2-羧酸二 甲基酰胺(29a)
步骤1：6-二甲基氨基甲酰基-烟酸(27)
在室温下、在氮气下，在吡啶-2，5-二羧酸二甲酯(10.1克，51.6毫摩尔)和MgBr2(4.75克，25.8毫摩尔)在THF(200毫升)中的悬浮液中，用10分钟逐滴添加二甲胺溶液(51.6毫升，103.2毫摩尔，2N在THF中)。将反应混合物搅拌过夜，用1N HCl(52毫升)和H2O(50毫升)骤冷，用EtOAc(200毫升×3)萃取。将有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗制残留物溶解在DMF(10毫升)、AcOEt(50毫升)、MeOH(20毫升)和DCM(50毫升)的混合物中，使形成的溶液部分蒸发以产生结晶材料，将其过滤去除。收集母液并蒸发形成固体，将其溶解在THF(67毫升)和MeOH(67毫升)的混合物中。在该溶液中加入NaOH(2.95克，73.7毫摩尔)在H2O(33.5毫升)中的溶液。将反应混合物在40℃加热数小时，酸化(pH 3)以形成固体沉淀，过滤收集沉淀并干燥.，获得标题化合物27(4.937克，在两步中收率为50％)。
步骤2：5-乙酰基-吡啶-2-羧酸二甲基酰胺(28)
将27(4.937克，25.41毫摩尔)、SOCl2(2.41毫升，33毫摩尔)和DMF(0.9毫升，5.1毫摩尔)在CH2Cl2(51毫升)中的悬浮液回流3小时。将反应混合物冷却至室温，并蒸发至干。将残留物悬浮在甲苯中，并加入Et3N(4.25毫升，30.5毫摩尔)。将所得悬浮液经两个小时通过插管输送到(canulated)搅拌的和预先制得的丙二酸二甲酯(3.49毫升，30.5毫摩尔)、MgCl2(1.742克，18.3毫摩尔)、Et3N(10.2毫升，73.2毫摩尔)在甲苯(25毫升)中的悬浮液中。将所得反应混合物搅拌过夜，并用1N HCl(50毫升)和水(50毫升)骤冷，并用EtOAc(200毫升×3)萃取。将合并的有机层用盐水(100毫升)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。将滤液蒸发至干，获得棕色油(5.21克)，将其溶解在DMSO(15.4毫升)和H2O(0.62毫升)中，然后在130℃加热2小时，冷却至室温，用H2O(100毫升)稀释，用EtOAc萃取。用盐水(100毫升)洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残留物通过快速色谱法在硅胶上(AcOEt/己烷，70/30至100/0)提纯，获得棕色结晶固体状的标题化合物28(430毫克，9％收率)。
步骤3：5-{2-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基氨基]-嘧啶-4-基}-吡啶-2- 羧酸二甲基酰胺(29a)
按照与实施例29，步骤1，3(方法B)和4(反应方案6)中相同的程序，分4步制得米色固体状的标题化合物29a。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.57(s，1H)，9.20(s，1H)，8.50(m，1H)，8.41(d，J＝4.9Hz，1H)，8.04(m，1H)，7.89(d，J＝7.8Hz，2H)，7.65(m，1H)，7.46(m，2H)，7.29(d，J＝5.1Hz，1H)，7.11(d，J＝7.4Hz，1H)，6.93(m，1H)，6.74(m，1H)，6.56(m，1H)，4.86(s，2H)，4.65(m，2H)，3.02(s，3H)，2.94(s，3H)。
实施例35：
N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[6-(吗啉-4-羰基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-甲 基)-苯甲酰胺(29b)
使用如对化合物29a、实施例34(反应方案7)所述相同的程序制备标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.55(s，1H)，9.21(s，1H)，8.52(m，1H)，8.42(d，J＝4.9Hz，1H)，8.03(t，J＝6.2Hz，1H)，7.90(d，J＝8.0Hz，2H)，7.71(d，J＝8.0Hz，1H)，7.47(m，2H)，7.29(d，J＝5.1Hz，1H)，7.12(d，J＝7.6Hz，1H)，6.93(m，1H)，6.74(d，J＝7.8Hz，1H)，6.56(m，1H)，4.85(s，2H)，4.64(d，J＝4.9Hz，2H)，3.66(s，4H)，3.55(m，2H)，3.44(m，2H)。
反应方案8
Figure A20058001611200971
实施例36：
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(2-甲基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-甲基}-苯甲 酰胺(31a)
步骤1：1-(2-甲基-吡啶-3-基)-乙酮(30a)
按照与实施例34，(步骤2，反应方案7)中相同的程序，以92％的收率由2-甲基烟酸制得棕色结晶固体状的标题化合物30a。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(2-甲基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-甲 基)-苯甲酰胺(31a)
按照与实施例29，步骤1、3(方法B)和4(反应方案6)中相同的程序，分4步由30a制得米色固体状的标题化合物31a(实施例36)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.57(s，1H)，8.46(m，1H)，8.40(m，1H)，7.54(t，J＝6.4Hz，1H)，7.88(d，J＝8.2Hz，2H)，7.75(d，J＝6.3Hz，1H)，7.40(d，J＝7.8Hz，2H)，7.29(m，1H)，7.11(d，J＝7.2Hz，1H)，6.93(m，1H)，6.79(d，J＝4.9Hz，1H)，6.73(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，6.55(m，1H)，4.86(s，2H)，4.48(d，J＝6.3Hz，2H)，2.66-2.82(m，3H)。
实施例37：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-吡啶-4-基-嘧啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(31b)
使用如对化合物31a(实施例36，反应方案8)所述相同的程序制备标题化合物31b。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.56(s，1H)，8.70(d，J＝5.3Hz，2H)，8.44(d，J＝5.1Hz，1H)，8.05(t，J＝6.3Hz，1H)，7.98(d，J＝6.1Hz，2H)，7.90(d，J＝8.2Hz，2H)，7.47(bs，2H)，7.27(d，J＝5.1Hz，1H)，7.12(d，J＝7.6Hz，1H)，6.93(m，1H)，6.74(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，6.56(m，1H)，4.86(s，2H)，4.64(d，J＝5.9Hz，2H)。
反应方案9
实施例38：
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-甲基}- 苯甲酰胺(34a)
步骤1：1-(6-氯-吡啶-3-基)-乙酮(32)
将丙二酸二甲酯(7.8毫升，68.3毫摩尔)、MgCl2(3.872克，40.7毫摩尔)、Et3N(19.1毫升，136.9毫摩尔)在甲苯(15毫升)中的悬浮液在室温下在氮气下搅拌2小时。通过导管在该混合物中加入6-氯-烟酰氯(3.872克，40.7毫摩尔)和Et3N(4.25毫升，30.5毫摩尔)在甲苯(46毫升)中的悬浮液。将所得反应混合物搅拌过夜，用1N HCl(100毫升)和水(100毫升)骤冷，并用EtOAc萃取。用盐水(100毫升)洗涤有机层，并经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，制得白色结晶材料(6.5克)，将其溶解在DMSO(9毫升)和H2O(0.37毫升)的混合物中，在130℃加热5小时，冷却至室温，并用水(10毫升)处理。过滤收集形成的沉淀物，用水漂洗并干燥，获得浅黄色结晶固体状的标题化合物32(1.8克，28％收率)。
步骤2：1-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)-乙酮(33a)
将32(1.25克，7.9毫摩尔)和吗啉(2.20毫升，25.2毫摩尔)在EtOH(22毫升)中的溶液回流12小时，随即蒸发至干燥。残留物溶解在EtOAc(200毫升)中，用饱和的NaHCO3(50毫升×2)和盐水(50毫升)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发，获得浅黄色固体的标题化合物33a(1.66克，定量收率)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]- 甲基}-苯甲酰胺(34a)
按照与实施例29，步骤1、3(方法B)和4(反应方案6)中相同的程序，分4步制得米色固体状的标题化合物34a(实施例38)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.57(s，1H)，8.84(s，1H)，8.24(d，J＝5.3Hz，1H)，8.18(m，1H)，7.90(d，J＝7.3Hz，2H)，7.78(m，1H)，7.46(d，J＝7.8Hz，2H)，7.13(m，1H)，7.08(d，J＝5.3Hz，1H)，6.95(d，J＝7.6Hz，1H)，6.91(m，1H)，6.75(d，J＝7.8Hz，1H)，5.57(dd，J＝7.2，7.6Hz，1H)，4.87(s，2H)，4.61(d，J＝6.1Hz，2H)，3.70(m，4H)，3.56(m，4H)。
实施例39：
N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨 基}-甲基)-苯甲酰胺(34b)
按照如对化合物34a(实施例38，反应方案9)所述相同的程序制备化合物34b。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.55(s，1H)，8.81(d，J＝2.2Hz，1H)，8.22(d，J＝5.3Hz，1H)，8.14(t，J＝8.6Hz，1H)，7.89(d，J＝8.2Hz，2H)，7.75(t，J＝6.2Hz，1H)，7.45(d，J＝8.0Hz，2H)，7.12(d，J＝7.4Hz，1H)，7.05(d，J＝5.3Hz，1H)，6.93(m，1H)，6.88(d，J＝8.2Hz，1H)，6.74(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，6.56(m，1H)，4.87(s，2H)，4.62(d，J＝6.5Hz，2H)，3.59(m，4H)，2.38(m，4H)，2.21(s，3H)。
反应方案10
实施例40：
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(1-氧基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-甲基}-苯甲 酰胺(36)
步骤1：1-(1-氧基-吡啶-3-基)-乙酮(35)
在室温下，在1-吡啶-3-基-乙酮(ethanone)(1.00克，8.3毫摩尔)在CH2Cl2(8.3毫升)中的溶液中，加入MTO(甲基三氧铼，113毫克，0.45毫摩尔)并将反应混合物冷却至15℃。经20分钟逐滴添加H2O2水溶液(30％，1.13毫升，9.96毫摩尔)，将反应混合物在15℃搅拌5小时，并冷却至0℃。加入Na2S2O3水溶液(20％，20毫升)，将混合物搅拌10分钟，用EtOAc萃取。收集水层，并冻干以形成固体材料，将其通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/CH2Cl2，10/90)提纯，获得标题化合物35(1.3克，定量收率)。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(1-氧基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-甲 基}-苯甲酰胺(36)
按照与实施例29，步骤1、3(方法B)和4(反应方案6)中相同的程序，分4步由35制得浅黄色固体状的标题化合物36(实施例40)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.61(s，1H)，8.81(bs，1H)，8.45(m，1H)，8.33(d，J＝5.1Hz，1H)，8.12(bs，1H)，7.99(d，J＝7.8Hz，1H)，7.93(d，J＝8.0Hz，2H)，7.55(t，J＝7.0Hz，1H)，7.50(m，2H)，7.29(d，J＝5.1Hz，1H)，7.16(d，J＝7.4Hz，1H)，6.97(m，1H)，6.78(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)，6.60(m，1H)，4.91(s，2H)，4.67(d，J＝6.3Hz，2H)。
反应方案11
实施例41：
N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[4-(2-二甲基氨基-乙氧基)-3-氟-苯基]-嘧啶-2-基 氨基}-甲基)-苯甲酰胺(41)
步骤1：4-(4-苄氧基-3-氟-苯基)-2-氯-嘧啶(37)
按照与实施例25，步骤1(反应方案5)中相同的程序，以4-苄氧基-3-氟苯硼酸为原料制得标题化合物37。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.60(d，J＝5.2Hz，1H)，7.90(dd，J＝12.0，2.4Hz，1H)，7.84-7.80(m，1H)，7.54(d，J＝5.2Hz，1H)，7.48-7.32(m，5H)，7.10(t，J＝8.4Hz，1H)，5.24(s，2H)。
步骤2：4-{[4-(4-苄氧基-3-氟-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-甲基}-苯甲酸甲酯 (38)
按照与实施例17(步骤2，反应方案4)中相同的程序由37制得标题化合物38。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.23(d，J＝4.4Hz，1H)，7.98(d，J＝8.4Hz，2H)，7.78(dd，J＝12.4，2.0Hz，1H)，7.67(ddd，J＝8.0，2.0，1.2Hz，1H)，7.47-7.29(m，7H)，7.01(t，J＝8.4Hz，1H)，6.88(d，J＝5.6Hz，1H)，6.06-5.95(m，1H)，5.18(s，2H)，4.75(d，J＝6.4Hz，2H)，3.90(s，3H)。
步骤3：4-{[4-(3-氟-4-羟基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-甲基}-苯甲酸甲酯 (39)
向在室温下、在N2下38(950毫克，2.14毫摩尔)在EtOAc(100毫升)中的脱气溶液中，加入10％Pd/C(220毫克，0.21毫摩尔)。将混合物氢化5天(1标准大气压，气球)，经塞里塑料垫过滤，用MeOH和EtOAc洗涤，将滤液浓缩，获得标题化合物39(450毫克，1.27毫摩尔，59％收率)。
步骤4：4-({4-[4-(2-二甲基氨基-乙氧基)-3-氟-苯基]-嘧啶-2-基氨基}-甲 基)-苯甲酸甲酯(40)
在39(450毫克，1.27毫摩尔)在丙酮(25毫升)中的溶液中，加入2-(二甲基氨基)氯乙烷盐酸盐(220毫克，1.53毫摩尔)，然后加入碘化钾(53毫克，0.32毫摩尔)和碳酸钾(878毫克，6.35毫摩尔)。将反应混合物回流20小时，然后加入NH4Cl的饱和溶液，将混合物的pH调节至8，减压去除丙酮。过滤收集生成的固体，用水洗涤，干燥并通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/DCM/NH4OH：10/89/1)提纯，获得标题化合物40(525毫克，1.24毫摩尔，97％收率)。
步骤5：N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[4-(2-二甲基氨基-乙氧基)-3-氟-苯基]-嘧 啶-2-基氨基}-甲基)-苯甲酰胺(41)
按照与实施例25，步骤5和6(反应方案5)中相同的程序，分两步由40制得米色固体状的标题化合物41(实施例41)。1H NMR：(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.55(s，1H)，8.27(d，J＝5.2Hz，1H)，7.95-7.75(m，5H)，7.50-7.35(m，2H)，7.25(t，J＝8.0Hz，1H)，7.14-7.06(m，2H)，6.92(t，J＝7.6Hz，1H)，6.72(d，J＝8.0Hz，1H)，6.54(t，J＝7.6Hz，1H)，4.85(s，2H)，4.60(d，J＝5.2Hz，2H)，4.17(t，J＝5.6Hz，2H)，2.66(t，J＝5.6Hz，2H)，2.21(s，6H)。
反应方案12
实施例42：
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(4-吗啉-4-基甲基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-甲基}- 苯甲酰胺(44)
步骤1：4-(2-氯-嘧啶-4-基)-苯甲醛(42)
按照与实施例25，步骤1(反应方案5)中相同的程序，以4-甲酰基苯基硼酸为原料制得标题化合物42。1H NMR：(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：10.11(s，1H)，8.73(d，J＝4.8Hz，1H)，8.27(td，J＝8.4，1.6Hz，2H)，8.03(td，J＝8.4，1.6Hz，2H)，7.73(d，J＝4.8Hz，1H)。
步骤2：4-[4-(2-氯-嘧啶-4-基)-苄基]-吗啉(43)
在室温下，在42(950毫克，4.35毫摩尔)和吗啉(455微升，5.21毫摩尔)在无水1，2-二氯乙烷(10毫升)中的溶液中，加入AcOH(2滴)，然后加入NaBH(OAc)3(1.1克，5.21毫摩尔)，将混合物搅拌16小时。向反应混合物中加入10％的K2CO3溶液，然后加入二氯甲烷，分离各相。用CH2Cl2萃取水相，并经无水Na2SO4干燥有机层，过滤形成残留物，将其通过快速色谱法在硅胶上(EtOAc/CH2Cl2：20/80)提纯，获得标题化合物43(460毫克，1.59毫摩尔，36％收率)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(4-吗啉-4-基甲基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]- 甲基}-苯甲酰胺(44)
按照与实施例2，步骤2-4(反应方案2)中相同的方法，分3步由43制得标题化合物44，并加入1N HCl在Et2O中的溶液以使其溶解在二氯甲烷和EtOAc的混合物中，由此分离盐酸盐形式的标题化合物44。将沉淀滤出，用EtOAc洗涤，并在高真空下干燥。1H NMR (400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.33(d，J＝5.2Hz，1H)，8.00-7.93(m，1H)，7.95(d，J＝8.0Hz，2H)，7.85(d，J＝8.0Hz，2H)，7.47(d，J＝8.0Hz，2H)，7.44(d，J＝8.0Hz，2H)，7.29(d，J＝8.4Hz，1H)，7.07(td，J＝7.6，1.2Hz，1H)，7.00(d，J＝5.2Hz，1H)，6.85-6.78(m，2H)，5.83(t，J＝6.0Hz，1H)，4.78(d，J＝6.0Hz，2H)，3.74(t，J＝4.0Hz，4H)，3.59(s，2H)，2.51(bs，4H)。
反应方案13
Figure A20058001611201051
实施例43：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(47) 步骤1：4-[(2-氯-嘧啶-4-基氨基)-甲基]苯甲酸甲酯(45a)和4-[(4-氯-嘧 啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酸甲酯(45b)
将2，4-二氯嘧啶(4.51克，30.3毫摩尔)、4-氨基甲基-苯甲酸甲酯(5.00克，30.3毫摩尔)、DIPEA(10.4毫升，60.6毫摩尔)在i-PrOH(60毫升)和DMF(40毫升)中的混合物回流5小时。将反应混合物蒸发至干后，将残留物通过快速色谱法在硅胶上(EtOAc/己烷：40/60→60/40+1％的Et3N)提纯，获得标题化合物45a(3.454克，41％收率)和45b(1.52克，14％产率，被原材料污染)。
45a，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：8.45(bs，1H)，7.90-7.94(m，3H)，7.42(d，J＝8.4Hz，2H)，6.53(d，J＝5.9Hz，1H)，4.58(d，J＝5.3Hz，2H)，3.83(s，3H))。
45b，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：8.27(t，J＝6.5Hz，1H)，8.21(bs，1H)，7.88(d，J＝8.2Hz，2H)，7.40(d，J＝8.2Hz，2H)，6.69(d，J＝5.1Hz，1H)，4.55(bs，2H)，3.82(s，3H)。
步骤2：4-[(2-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酸甲酯(46)
在室温下，在3-吡啶环硼氧烷(189毫克，0.60毫摩尔)、45a(500毫克，1.81毫摩尔)、Pd(OAc)2(41毫克，0.18毫摩尔)和PPh3(95毫克，0.36毫摩尔)在DME(1.8毫升)中的悬浮液中，加入Na2CO3(590毫克，溶于最少量水中，5.60毫摩尔)。将反应混合物用氮气吹扫并回流4天，蒸发至干，并通过快速色谱法在硅胶上(EtOAc/己烷：30/70+1％的Et3N)提纯，获得浅黄色固体状的标题化合物46(152毫克，26％收率)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酰 胺(47)
按照与实施例34，步骤3(反应3和4)(反应方案7)中相同的程序，分两步由46制得米色固体状的标题化合物47(实施例43)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.50(s，1H)，9.30(d，J＝1.6Hz，1H)，8.54(dd，J＝4.7，1.6Hz，1H)，8.46(ddd，J＝8.0，2.0，2.0Hz，1H)，8.11(dd，J 6.3，6.1Hz，2H)，7.85(d，J＝8.2Hz，2H)，7.38-7.43(m，3H)，7.05(m，1H)，6.86(m，1H)，6.67(dd，J＝7.9，1.5Hz，1H)，6.49(m，2H)，4.79(s，2H)，4.66(s，2H)。
实施例44：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(49) 步骤2：4-[(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酸甲酯(48a)
在密封烧瓶中，将45a(2.50克，9.0毫摩尔)、吗啉(0.95毫升，10.8毫摩尔)和i-Pr2NEt(3.12毫摩尔)在i-PrOH(18.0毫升)中的混合物在120℃加热过夜，冷却至室温。生成沉淀物，将其过滤收集，用i-PrOH洗涤并干燥，获得标题化合物48(2.96克，定量收率)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酰 胺(49)
按照与在实施例34，步骤3(反应3和4)(反应方案7)中相同的程序，分两步由48制得米色固体状的标题化合物49(实施例44)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.56(s，1H)，7.89(d，J＝8.2Hz，2H)，7.72(d，J＝5.7Hz，1H)，7.56(bs，1H)，7.40(d，J＝8.2Hz，2H)，7.13(d，J＝7.8Hz，1H)，6.94(m，1H)，6.75(m，1H)，6.57(m，1H)，5.83(bs，1H)，4.87(s，2H)，4.51(bs，2H)，3.56(s，8H)。
反应方案14
Figure A20058001611201071
实施例45：
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(6-甲基硫烷基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-甲 基}-苯甲酰胺(53)
步骤1：5-溴-2-甲基硫烷基-吡啶(50)
向-78℃在氮气下2，5-二溴吡啶(5.00克，21.11毫摩尔)在无水甲苯(300毫升)中的搅拌溶液中，缓慢加入n-BuLi溶液(10.13毫升，25.33毫摩尔，2.5M在己烷中)。在-78℃下2小时后，加入二甲二硫(2.47毫升，27.44毫摩尔)。将反应混合物在-78℃搅拌1小时，并升温至室温，用饱和NH4Cl骤冷以形成两相体系。将有机层分离，用饱和NH4Cl、H2O和盐水洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法在硅胶上(AcOEt/己烷，5/95)提纯残留物，获得作为浅黄色油状液体的标题化合物50(2.74克，13.43毫摩尔，64％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：8.49(dd，J＝2.3，0.6Hz，1H)，7.60(dd，J＝8.5，2.4Hz，1H)，7.09(dd，J＝8.6，0.8Hz，1H)，2.57(s，3H)。
步骤2：5-(2-甲基硫烷基-吡啶基)-硼酸(51)
向-40℃在氮气下50(2.74克，13.43毫摩尔)和硼酸三异丙酯(3.72毫升，16.11毫摩尔)在无水甲苯/THF(20毫升/5毫升)的混合物中的搅拌溶液中，逐滴添加n-BuLi溶液(6.98毫升，17.45毫摩尔，2.5M在己烷中)。在-40℃搅拌1小时后，将混合物升温至室温，并用2N HCl骤冷。将所得悬浮液过滤；将沉淀物用H2O和AcOEt漂洗。用1N NaOH中和滤液(pH7)，并用AcOEt萃取。将有机层和沉淀物合并，蒸发溶剂，用MeCH-MeOH研制固体残留物，获得浅黄色固体状的标题化合物51(1.84克，10.88毫摩尔，81％收率)。
步骤3：4-{[4-(6-甲基硫烷基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-甲基}-苯甲酸 (52)
在室温下在51(593毫克，3.51毫摩尔)、45b(500毫克，1.80毫摩尔)和Na2CO3溶液(15毫升，0.4M)的混合物在乙腈(15毫升)中的脱气搅拌悬浮液中，加入Pd(PPh3)4(126毫克，0.11毫摩尔)。将反应混合物在氮气下在90-95℃加热24小时。然后加入1M NaOH(量)，并再继续加热2小时。冷却至室温后，将反应混合物过滤，用AcOEt萃取滤液，收集水层，过滤，浓缩并用2N HCl酸化(pH为5-6)。生成沉淀，将其过滤收集并干燥，获得米黄色固体状的标题化合物52(396毫克，1.12毫摩尔，62％收率)。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(6-甲基硫烷基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨 基]-甲基}-苯甲酰胺(53)
按照与实施例2，步骤4(反应方案2)中相同的程序，由52一步制得米色固体状的标题化合物53(实施例45)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.60(s，1H)，9.12(d，J＝1.8Hz，1H)，8.39(d，J＝5.3Hz 1H)，8.29(bd，J＝8.0Hz，1H)，7.98(t，J＝6.4Hz，1H)，7.94(d，J＝8.2Hz，2H)，7.56-7.38(m，3H)，7.24(d，J＝5.1Hz，1H)，7.17(d，J＝7.0Hz，1H)，6.98(td，J＝7.5，1.4Hz，1H)，6.79(dd，J＝7.9，1.3Hz 1H)，6.60(td，J＝7.2，1.2Hz，1H)，4.90(s，2H)，4.67(bd，J＝6.3Hz，2H)，2.60(s，3H)。
反应方案15
实施例46：
N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨 基}-甲基)-苯甲酰胺(58a)
步骤1：2-(5-溴-吡啶-2-基)-丙-2-醇(54a)
在-78℃在氮气下2，5-二溴吡啶(2.00克，8.44毫摩尔)在无水甲苯(100毫升)中的搅拌溶液中，缓慢加入n-BuLi溶液(4.05毫升，10.13毫摩尔，2.5M在己烷中)。在-78℃下2小时后，加入丙酮(806微升，10.98毫摩尔)。搅拌1小时后，将反应混合物升温至0℃，并用饱和NH4Cl骤冷。形成两相体系；分离有机层，用饱和NH4Cl、H2O和盐水洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法在硅胶上(AcOEt/CH2Cl2：20/80)提纯残留物，获得浅黄色油状液体的标题化合物54(1.37克，6.34毫摩尔，75％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：ABX System(δA＝7.32，δB＝7.82，δX＝8.58，JAB＝8.4Hz，JBX＝2.3Hz，JAX＝0Hz，3H)，4.47(bs，1H)，1.57(s，6H)。
步骤2：5-溴-2-(1-甲氧基甲氧基-1-甲基-乙基)-吡啶(55)
在0℃在氮气下54(1.36克，6.29毫摩尔)和i-Pr2Net(2.19毫升，12.59毫摩尔)在无水二氯甲烷(20毫升)中的搅拌溶液中，缓慢加入氯甲基甲基醚(1.17毫升，14.63毫摩尔)。30分钟后，将反应混合物升温至室温，搅拌两天，浓缩并通过快速色谱法在硅胶上(AcOEt/己烷：5/95)提纯，获得浅黄色油状液体的标题化合物55(1.56克，6.00毫摩尔，95％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：ABX System(δA＝7.50，δB＝7.80，δX＝8.60，JAB＝8.4Hz，JBX＝2.4Hz，JAX＝0.8Hz，3H)，4.73(s，2H)，3.41(s，3H)，1.64(s，6H))。
步骤3：5-(2-[1-甲氧基甲氧基-1-甲基-乙基]-吡啶基)-硼酸(56)
在-50℃在氮气下55(2.90克，11.15毫摩尔)和硼酸三异丙酯(3.09毫升，13.38毫摩尔)在无水甲苯/THF(20毫升/5毫升)混合物中的搅拌溶液中，经10分钟逐滴加入n-BuLi溶液(7.87毫升，13.38毫摩尔，1.7M在己烷中)。在-50℃下45分钟后，使混合物升温至室温，并用-30℃的2N HCl(30毫升)骤冷。滗析后，用1N NaOH将水层的pH调节至7，并用AcOEt萃取。将萃取液蒸发，将残留物在真空下干燥，获得浅灰色粘性泡沫状的标题化合物56a(2.33克，10.37毫摩尔，93％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：ABX System(δA＝7.55，δB＝8.11，δX＝8.83，JAB＝7.8Hz，JBX＝1.8Hz，JAX＝0.9Hz，3H)，8.32(s，2H)，4.68(s，2H)，3.31(s，3H)，1.56(s，6H))。
步骤4：4-({4-[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-甲 基)-苯甲酸(57a)
在室温下，在56(550毫克，2.44毫摩尔)、45b(510毫克，1.84毫摩尔，不纯)和Na2CO3水溶液(10毫升，0.4M)的混合物在乙腈(15毫升)中的脱气搅拌悬浮液中，加入Pd(PPh3)4(106毫克，0.09毫摩尔)。在氮气下，将反应混合物在95-100℃加热24小时，冷却至室温，过滤，将滤液浓缩，用水稀释，用AcOEt洗涤，用2N HCl(25毫升)酸化，并在60℃下温热4小时。将反应混合物冷却至室温，用NaOH将pH调节至5-6。生成沉淀，将其过滤收集，用水洗涤并干燥，获得浅黄色固体状的标题化合物57a(303毫克，0.83毫摩尔，45％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：12.82(bs，1H)，9.20-9.08(m，1H)，8.46-8.32(m，2H，included at 8.40 ppm，d，J＝5.1Hz)，7.98(t，J＝6.2Hz，1H)，7.90(d，J＝8.2Hz，2H)，7.84-7.72(m，1H)，7.58-7.42(m，2H)，7.25(d，J＝5.1Hz，1H)，5.34(s，1H)，4.67(d，J＝5.7Hz，2H)，1.50(s，6H)。
步骤5：N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)-吡啶-3-基]-嘧啶 -2-基氨基}-甲基)-苯甲酰胺(58a)
按照与实施例2，步骤4(反应方案2)中相同的程序，由57a一步制得米色固体状的标题化合物58a(实施例46)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.60(s，1H)，9.15(d，J＝2.0Hz，1H)，8.45-8.35(m，2H，included at 8.41 ppm，d，J＝5.1Hz)，8.00(t，J＝6.4Hz，1H)，7.94(d，J＝8.2Hz，2H)，7.79(bd，J＝8.2Hz，1H)，7.58-7.43(m，2H)，7.25(d，J＝5.1Hz，1H)，7.16(d，J＝7.4Hz，1H)，6.98(td，J＝7.6，1.5Hz，1H)，6.78(dd，J＝8.0，1.4Hz 1H)，6.60(t，J＝7.4Hz，1H)，5.37(s，1H)，4.90(s，2H)，4.68(d，J＝5.7Hz，2H)，1.50(s，6H)。
实施例47：
N-(2-氨基-苯基)-4-({4-[6-(1-甲氧基甲氧基-1-甲基-乙基)-吡啶-3-基]-嘧 啶-2-基氨基}-甲基)-苯甲酰胺(58b)
按照与实施例46，步骤4(注意：在60℃下无加酸水解)和5(反应方案15)中相同的程序，分两步由56a制得米色固体状的标题化合物58b(实施例47)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.61(s，1H)，9.18(s，1H)，8.50-8.32(m，2H，included at 8.42 ppm，d，J＝5.1Hz)，8.02(t，J＝6.0Hz，1H)，7.94(d，J＝8.0Hz，2H)，7.72(bd，J＝7.6Hz，1H)，7.59-7.42(m，2H)，7.26(d，J＝5.1Hz，1H)，7.16(d，J＝7.8Hz，1H)，6.98(td，J＝7.6，1.4Hz，1H)，6.79(d，J＝7.8Hz，1H)，6.60(t，J＝7.4Hz，1H)，4.91(s，2H)，4.72(s，2H)，4.68(d，J＝5.3Hz，2H)，3.32(s，3H)，1.60(s，6H)。
反应方案16
实施例48：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-甲基硫烷基-6-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]- 苯甲酰胺(61a)
步骤1：4-[(6-氯-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酸甲酯(59)
将4，6-二氯-2-(甲基硫代)嘧啶(657毫克，3.37毫摩尔)或4，6-二氯-2-(R)-嘧啶、4-(氨基甲基)苯甲酸甲酯.HCl(744毫克，3.69毫摩尔)和i-Pr2NEt(2.34毫升，13.43毫摩尔)在无水THF/DMF(10毫升/2毫升)混合物中的搅拌悬浮液在氮气下在70-80℃加热24小时。将混合物冷却至室温，倒入饱和NaHCO3溶液中，并用AcOEt萃取。用水、饱和NH4Cl、H2O和盐水洗涤有机层，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法在硅胶上(洗脱液AcOEt/CH2Cl2，30/70，随后40/60)提纯残留物，获得浅灰色粉末状的标题化合物59a(929毫克，2.87毫摩尔，85％收率)。
步骤2：4-[(2-甲基硫烷基-6-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酸 (60)
在室温下在59(925毫克，2.86毫摩尔)、2，4，6-(3-吡啶基)-环三硼氧烷(360毫克，1.14毫摩尔)和Na2CO3水溶液(20毫升，0.4M)的混合物在乙腈(20毫升)中的脱气搅拌悬浮液中，加入Pd(PPh3)4(165毫克，0.14毫摩尔)。在氮气下，将反应混合物在95℃下加热一至二天。在反应混合物中加入1M NaOH(5毫升)，再保持加热1小时。将混合物冷却至室温并过滤。用AcOEt萃取滤液，将水层分离，浓缩，并用2NHCl酸化(pH为5-7)。生成沉淀，将其过滤收集并干燥，获得浅灰色固体状的标题化合物60(770毫克，2.19毫摩尔，76％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：12.89(bs 1H)，9.15(bs，1H)，8.72-8.64(m，1H)，8.39-8.20(m，2H)，7.93(d，J＝8.4Hz，2H)，7.58-7.40(m，3H)，6.84(s，1H)，4.69(d，J＝5.1Hz 2H)，2.48(bs，3H)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-甲基硫烷基-6-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)- 甲基]-苯甲酰胺(61a)
按照与实施例2，步骤4(反应方案2)中相同的程序，由60一步制得米色固体状的标题化合物61a(实施例48)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.64(s，1H)，9.16(bs，1H)，8.68(dd，J＝4.7，1.6Hz1H)，8.45-8.25(m，1H)，8.27(t，J＝5.9Hz，1H)，7.97(d，J＝8.2Hz，2H)，7.58-7.42(m，3H)，7.17(d，J＝7.6Hz，1H)，6.98(td，J＝7.5，1.4Hz，1H)，6.85(s，1H)，6.79(dd，J＝7.9，1.1Hz 1H)，6.61(t，J＝7.2Hz，1H)，4.92(s，2H)，4.69(bs，2H)，2.50(s，3H)。
实施例49-50：
使用如对化合物61a(实施例48、反应方案16)所述相同的程序制备实施例49、50(化合物61b-c)。
表5
Figure A20058001611201141
Cmpd  Ex  R 名称 表征
61b  49  H N-(2-氨基-苯基)-4-[(6-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.64(s，1H)，9.19(bs，1H)，8.69 (d，J＝3.7Hz 1H)，8.56(s，1H)，8.36(d，J＝6.3Hz，1H)，8.20(t，J＝6.0Hz，1H)，7.96(d，J＝8.0Hz，2H)，7.52-7.40(m，3H)，7.17(d，J＝7.0Hz，1H)，7.13(s，1H)，6.98(t，J＝7.5Hz，1H)，6.79(d，J＝7.6Hz 1H)，6.61(t，J＝7.5Hz，1H)，4.92(s，2H)，4.71(bs，2H).
61c  50  NH2 N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-氨基-6-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.63(s，1H)，9.08(d，J＝1.8Hz，1H)，8.63(dd，J＝4.7，1.6Hz 1H)，8.24(d，J＝7.8Hz，1H)，7.96(d，J＝8.0Hz，2H)，7.63(bs，1H)，7.54-7.43(m，3H)，7.17(d，J＝7.2Hz，1H)，6.98(td，J＝7.6，1.2Hz，1H)，6.79(d，J＝6.8Hz 1H)，6.61(t，J＝7.5Hz，1H)，6.38(s，1H)，6.19(bs，2H).4.92(s，2H)，4.65(bs，2H).
反应方案17
Figure A20058001611201142
实施例51：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(6-吡啶-3-基-吡嗪-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(63) 步骤1：4-[(6-氯-吡嗪-2-基氨基)-甲基]-苯甲酸甲酯(62)
将2，6-二氯吡嗪(500毫克，3.36亳摩尔)、4-(氨基甲基)苯甲酸甲酯.HCl(744毫克，3.69毫摩尔)和i-Pr2NEt(2.05毫升，11.75毫摩尔)在无水THF/DMF混合物(10mL/2mL)中的搅拌悬浮液在氮气下在90℃加热24小时。将混合物冷却至室温，倒入饱和NH4Cl水溶液中，并用AcOEt萃取。用H2O和盐水洗涤有机层，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法在硅胶上(AcOEt/CH2Cl2：20/80→30/70)提纯残留物，获得浅黄色固体状的标题化合物62(300毫克，1.08毫摩尔，32％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：8.18(t，J＝6.0Hz，1H)，7.97(s，1H)，AB system(δA＝7.95，δB＝7.49，JAB＝8.5Hz，4H)，7.75(s，1H)，4.58(d，J＝5.9Hz，2H)，3.87(s，3H)。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-[(6-吡啶-3-基-吡嗪-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰 胺(63)
按照与实施例48，步骤2和3(反应方案16)中相同的程序，分两步由62制得浅灰色粉末状的标题化合物63(实施例51)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.62(s，1H)，9.19(dd，J＝2.3，0.8Hz，1H)，8.62(dd，J＝4.7，1.6Hz 1H)，8.40(s，1H)，8.36(ddd，J＝8.4，2.0，2.0Hz，1H)，8.06(s，1H)，8.01-7.92(m，3H)，7.54(d，J＝8.2Hz，2H)，7.51(ddd，J＝7.8，4.7，0.8Hz，1H)，7.16(bd，J＝6.7Hz，1H)，6.98(td，J＝7.6，1.5Hz，1H)，6.78(dd，J＝8.0，1.4Hz 1H)，6.60(td，J＝7.5，1.3Hz，1H)，4.91(s，2H)，4.71(d，J＝6.1Hz，2H)。
反应方案18
实施例52：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(6-吗啉-4-基-哒嗪-3-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(66) 步骤1：4-(6-氯-哒嗪-3-基)-吗啉(64)
在配有回流冷凝器的50毫升烧瓶中加入吗啉(2.93毫升，33.5毫摩尔)和3，6-二氯哒嗪(5.00克，33.5毫摩尔)。将混合物在90℃加热6小时，所得固体在EtOAc、水和饱和NH4Cl之间分相。将有机层分离，经无水Na2SO4干燥，过滤并蒸发，获得标题化合物64(5.3克，26.5毫摩尔，79％收率)。
步骤2：4-[(6-吗啉-4-基-哒嗪-3-基氨基)-甲基]苯甲酸甲酯(65)
在64(2.0克，10.0毫摩尔)和4-(氨基甲基)苯甲酸甲酯盐酸盐(2.2克，11.0毫摩尔)在i-PrOH(200毫升)中的溶液中，加入NH4Cl(2.14g，40.0mmol)。将反应混合物在150℃加热72小时并浓缩。将残留物溶于水，并萃取水相\将水相分离，用1N NaOH(pH8)处理并用EtOAc萃取。将萃取液经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残留物通过快速色谱法在硅胶上(MeOH/CH2Cl2：2/98至5/95)提纯，获得标题化合物65(270毫克，0.82毫摩尔，8％收率)。1H NMR：(400MHz，CDCl3)δ(ppm)：7.97(d，J＝8.0Hz，2H)，7.42(d，J＝8.0Hz，2H)，6.90(d，J＝9.2Hz，1H)，6.69(d，J＝9.2Hz，1H)，5.16-5.06(bs，1H)，4.67(s，2H)，3.90(s，3H)，3.82(t，J＝4.8Hz，4H)，3.41(t，J＝4.8Hz，4H)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-[(6-吗啉-4-基-哒嗪-3-基氨基)-甲基]-苯甲酰 胺(66)
按照与实施例2，步骤3和4(反应方案2)中相同的程序，分两步由65制得米色固体状的标题化合物66(实施例52)。1H NMR：(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.57(s，1H)，7.89(d，J＝8.0Hz，2H)，7.42(d，J＝8.0Hz，2H)，7.15-7.12(m，1H)，7.13(d，J＝9.6Hz，1H)，6.94(t，J＝7.6Hz，1H)，6.88(t，J＝6.0Hz，1H)，6.83(d，J＝9.6Hz，1H)，6.75(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)，6.57(t，J＝8.0Hz，1H)，4.86(s，2H)，4.54(d，J＝6.4Hz，2H)，3.69(t，J＝4.8Hz，4H)，3.24(t，J＝4.8Hz，4H)。
反应方案19
实施例53
N-(2-氨基-苯基)-4-[2-氧-2-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-乙基]-苯甲酰胺 (71)
步骤1：4-氰基甲基-苯甲酸(68)
按照J.Med.Chem.1997，40，377-384中所述的程序，以4-氯甲基苯甲酸(67)为原料制得标题化合物。
步骤2：4-羧基甲基-苯甲酸甲酯(69)
按照J.Med.Chem.1998，41，5219-5246中所述的程序制得浅灰色固体状的标题化合物(85％收率)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：12.49(s，1H)，7.89(d，J＝1.8Hz，2H)，7.39(d，J＝8.2Hz，2H)，3.84(s，3H)，3.79(s，2H)。
步骤3：4-[2-氧-2-(4-[吡啶-2-基-哌嗪-1-基)-乙基]-苯甲酸甲酯(70)
按照实施例1，步骤5(反应方案1)中所述的程序，制得浅黄色固体状的标题化合物70(70％收率)。1H-NMR(DMSO)δ：8.36(d，J＝4.7Hz，2H)，7.89(d，J＝8.4Hz，2H)，7.38(d，J＝8.4Hz，2H)，6.65(t，J＝4.8Hz，1H)，3.87(s，2H)，3.83(s，3H)，3.71-3.66(m，4H)，3.60-3.53(m，4H)。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-[2-氧-2-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-乙基]-苯甲 酰胺(71)
按照实施例1步骤4和5中所述的程序制得浅灰色固体状的标题化合物71(225毫克，69％)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.62(s，1H)，8.36(d，J＝4.7Hz，2H)，7.90(d，J＝8.0Hz，2H)，7.36(d，J＝8.2Hz，2H)，7.13(d，J＝6.8Hz，1H)，6.95(td，J＝7.5，1.4Hz，1H)，6.76(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，6.70(t，J＝4.8Hz，1H)，6.57(tdd，J＝7.6，1.4Hz，1H)，4.90(s，2H)，3.87(s，2H)，3.72-3.68(m，4H)，3.62-3.55(m，4H)。
实施例54
N-(2-氨基-苯基))-4-(5-氯-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基甲基)-苯甲酰胺(74) 步骤1：4-[(2-氨基-4-氯-5-氟-苯基氨基甲酰基)-甲基]-苯甲酸甲酯(72)
按照实施例1，步骤5(反应方案1)中所述的程序制得橙色油状标题化合物72(69％收率)。LRMS：336.1(计算值)，337.5(实测值)。
步骤2：4-(5-氯-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基甲基)-苯甲酸甲酯(73)
将化合物72(333毫克，0.99毫摩尔)溶于AcOH(10毫升)，并将溶液回流24小时。将AcOH蒸发，并将残留物溶于AcOEt，用NH4Cl水溶液、NaHCO3和盐水洗涤，经MgSO4干燥。将EtOAc蒸发，获得褐色粉末状的标题化合物73(297毫克，95％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：7.90(d，J＝1.8Hz，2H)，7.88(d，J＝1.9Hz，1H)，7.66(d，J＝7Hz，1H)，7.51(d，J＝9.8Hz，2H)，4.26(s，2H)，3.32(s，3H)。
LRMS：318.1(计算值)，319.4(实测值)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-(5-氯-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基甲基)-苯甲酰胺 (74)
按照实施例1，步骤4和5中所述的程序制得黄色固体状的标题化合物74(53％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.59(s，1H)，7.91(d，J＝8.0Hz，2H)，7.67(d，J＝6.9Hz，1H)，7.51(d，J＝9.7Hz，1H)，7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，7.13(d，J＝7.2Hz，  1H)，6.74(td，J＝7.6Hz，1H)，7.52(dd，J＝4.7，4.7Hz，1H)，6.57(dd，J＝7.0，1.4Hz，2H)，4.87(s，2H)，4.26(s，2H)。
反应方案20
Figure A20058001611201191
实施例55
N-(2-氨基-苯基)-4-(2，4-二氧-1，4-二氢-2H-噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-基甲基)- 苯甲酰胺(77)
按照如专利申请WO 03/024448中所述相同的程序，以2-氨基-噻吩-3-羧酸甲酯为原料经中间体75和76(反应方案20)制得标题化合物77(69％收率)。1H NMR(DMSO)δ(ppm)：9.59(s，1H)，7.88(d，J＝8.2Hz，2H)，7.38(d，J＝8.2Hz，2H)，7.18-7.11(m，3H)，7.45(bs，1H)，6.94(td，J＝7.6，1.6Hz，1H)，6.75(dd，J＝7.8，1.4Hz，1H)，6.57(td，J＝7.5，1.4Hz，1H)，5.09(s，2H)，4.87(bs，2H)。LRMS：392.1(计算值)，393.4(实测值)。
反应方案21
实施例56
N-(2-氨基-苯基)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-2，4-二氧-1，4-二氢-2H-噻吩 并[3，2-d]嘧啶-3-基甲基]-苯甲酰胺(80)
按照如专利申请WO03/024448中所述相同的程序，以3-氨基-噻吩-2-羧酸甲酯为原料经中间体78和79制得黄色固体状的标题化合物80。1H NMR(DMSO)δ(ppm)：9.60(s，1H)，8.22(d，J＝5.5Hz，1H)，7.89(d，J＝8.2Hz，2H)，7.41-7.39(m，3H)，7.13(d，J＝7.4Hz，1H)，6.95(td，J＝7.6，1.6Hz，1H)，6.75(dd，J＝7.8，1.6Hz，1H)，6.57(td，J＝7.4，1.2Hz，1H)，5.16(s，2H)，4.88(bs，2H)，4.23(m，2H)，2.81(m，2H)。LRMS：463.2(计算值)，464.4(实测值)。
反应方案22
Figure A20058001611201211
实施例57
{5-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基]-3-氰基-4-甲基-噻吩-2-基}-氨基 甲酸-2-吗啉-4-基-乙酯(83)
步骤1：4-[4-氰基-3-甲基-5-(2-吗啉-4-基-乙氧基羰基氨基)-噻吩-2-基甲 基]-苯甲酸(82)
在5℃将羟乙基吗啉(114微升，1.28毫摩尔)加入到羰酰二咪唑(207毫克，1.28毫摩尔)在无水THF(10毫升)中的溶液中。移除冷却，将反应混合物在室温下搅拌1小时，并在室温下经导管添加到到4-(5-氨基-4-氰基-3-甲基-噻吩-2-基甲基)-苯甲酸(81，350毫克，1.28毫摩尔)(如专利申请WO03/024448中所述)和DBU(382微升，2.56毫摩尔)在无水THF(20毫升)中的溶液中。将合并的混合物搅拌3小时。将THF蒸发，并将残留的固体残渣悬浮在水中，用浓HCl酸化(pH为4)，并过滤收集。用25毫升丙酮研制此材料，产生标题化合物82(85毫克，15％收率)。LRMS：429.5(计算值)430.4(实测值)。
步骤2：{5-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基]-3-氰基-4-甲基-噻吩-2- 基}-氨基甲酸-2-吗啉-4-基-乙酯(83)
按照实施例1，步骤5中所述的程序制得固体标题化合物83(26％收率)。1H NMR：(300MHz，DMSO-d6，δ(ppm)：9.61(s，1H)，7.92(d，J＝7.91，2H)，7.34(d，J＝7.91，2H)，7.15(d，J＝7.47，1H)，6.97(t，J＝7.03，1H)，6.77(d，J＝7.03，1H)，6.59(t，J＝7.47，1H)，4.88(brs，2H)，4.22(t，J＝5.50，2H)，4.10(s，2H)，3.55(t，J＝4.40，4H)，2.56(t，J＝5.50，2H)，2.43-2.39(m，4H)，2.18(s，3H)。LRMS：519.6(计算值)。520.5(实测值)。
反应方案23
实施例58
N-(2-氨基-苯基)-4-(4-氰基-5-丙酰基氨基-噻吩-2-基甲基)-苯甲酰胺 (87)
步骤1：4-(3-氧-丙基)-苯甲酸甲酯(84)
按照J.Org.Chem.；1992；57(11)；3218-3225中所述的程序，由4-碘代苯甲酸甲酯制得标题化合物84。
步骤2：4-(5-氨基-4-氰基-噻吩-2-基甲基)-苯甲酶甲酯(85)
硫(309毫克，4.22毫摩尔)和4-(3-氧-丙基)-苯甲酸甲酯(84)(812毫克，4.22毫摩尔)在DMF(4毫升)中的在0℃的悬浮液中，缓慢加入Et3N(353微升，2.53毫摩尔)。将反应混合物在室温下搅拌1小时，并缓慢添加丙二腈(279毫克，4.22毫摩尔)在DMF(6毫升)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌16小时，倒入300毫升冰/水中以产生橙色沉淀，将其过滤，用冷水漂洗并干燥，获得橙色固体状的标题化合物85(1.04克，90％)。LRMS：272.1(计算值)；265.0(实测值)。
步骤3、4：N-(2-氨基-苯基)-4-(4-氰基-5-丙酰基氨基-噻吩-2-基甲基)- 苯甲酰胺(87)
按照如专利申请WO03/024448中所述用于类似化合物的相同程序，以氰基化合物85为原料经中间体86制得黄色固体状的标题化合物87(63％收率)。1H NMR(DMSO)δ(ppm)：11.26(s，1H)，9.61(s，1H)，7.92(d，J＝7.5Hz，2H)，7.39(d，J＝7.5Hz，2H)，7.15(d，J＝7.5Hz，1H)，6.95(s，2H)，6.77(d，J＝8.0Hz，1H)，6.58(m，1H)，5.76-5.75(m，1H)，4.88(s，2H)，4.12(s，2H)，2.50(m，3H)，1.05-1.03(m，3H)。LRMS：404.1(计算值)，405.1(实测值)。
实施例59
{5-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基]-3-氰基-噻吩-2-基}-氨基甲酸-2- 吗啉-4-基-乙酯(89)
类似于化合物87，实施例58(反应方案23)，以氰基化合物85为原料经中间体88制得黄色固体状的标题化合物89(15％收率)。1H NMR：(300MHz，DMSO-d6，δ(ppm)：9.60(bs，1H)，7.91(d，J＝7.8Hz，2H)，7.38(d，J＝8.2Hz，2H)，7.13(d，J＝7.8Hz，1H)，6.97-6.93(m，2H)，6.76(dd，J＝7.8，1.2Hz，1H)，6.58(ddd，J＝7.4，7.4，1.2Hz，1H)，4.89(bs，2H)，4.22(t，J＝5.5Hz，2H)，4.12(s，2H)，3.55(t，J＝4.7Hz，4H)，2.56(t，J＝5.7Hz，2H)，2.41(m，4H)。
实施例60
4-(5-氨基-4-氰基-噻吩-2-基甲基)-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺(90)
按照与实施例1步骤4和5中所述相同的程序，以化合物85为原料制得橙色固体状的标题化合物90(67％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.60(bs，1H)，7.90(d，J＝8.2Hz，2H)，7.33(d，J＝8.2Hz，2H)，7.13(d，J＝6.7Hz，1H)，7.03(bs，1H)，6.95(ddd，J＝7.6，7.6，1.6Hz，1H)，6.76(dd，J＝6.6，1.6Hz，1H)，6.58(ddd，J＝7.4，7.4，1.7Hz，1H)，6.52(s，1H)，4.89(bs，2H)，3.95(s，2H)。LRMS：348.1(计算值)；349.2(实测值)。
实施例61
2-氨基-5-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基]-噻吩-3-羧酸酰胺(92) 步骤2：4-(5-氨基-4-氨基甲酰基-噻吩-2-基甲基)-苯甲酸甲酯(91)
按照与实施例58步骤2(用2-氰基-乙酰胺取代丙二腈)中所述相同的程序制得黄色固体状的标题化合物91(88％收率)。LRMS：304.1(计算值)；305.1(实测值)。
步骤3-4：2-氨基-5-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基]-噻吩-3-羧酸酰胺 (92)
以化合物91为原料并按照与实施例1步骤4和5中所述相同的程序，制得橙色固体的标题化合物92(54％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.62(s，1H)，7.90(d，J＝8.2Hz，1H)，7.32(d，J＝8.2Hz，1H)，7.14-7.12(m，3H)，6.95(td，J＝7.6，1.6Hz，1H)，6.84(s，1H)，6.76(dd，J＝7.8，1.2Hz，1H)，6.58(td，J＝7.4，1.2Hz，1H)，4.87(s，2H)，3.93(s，2H)。LRMS：366.1(计算值)；367.4(实测值)。
实施例62
N-(2-氨基-苯基)-4-(4-氰基-噻吩-2-基甲基)-苯甲酰胺(94) 步骤4：4-(4-氰基-噻吩-2-基甲基)-苯甲酸(93)
以氰基化合物为原料并按照实施例1，步骤4(酯水解)中所述的程序和Tetrahedron Lett.；2001；42(32)；5367-5370中所述的程序(脱氨基)，制得棕色固体状的标题化合物93(76％收率)。LRMS：243.1(计算值)，244.3(实测值)。
步骤5：N-(2-氨基-苯基)-4-(4-氰基-噻吩-2-基甲基)-苯甲酰胺(94)
按照与实施例1步骤5中所述相同的程序由化合物93制得橙色固体状的标题化合物94(41％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.61(bs，1H)，8.38(d，J＝1.4Hz，1H)，7.92(d，J＝8.0Hz，2H)，7.40(d，J＝8.2Hz，2H)，7.33(d，J＝1.4Hz，1H)，7.13(d，J＝6.8Hz，1H)，6.95(td，J＝7.6，1.6Hz，1H)，6.75(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，6.57(td，J＝7.4，1.2Hz，1H)，4.89(bs，2H)，4.27(s，2H)。LRMS：333.1(计算值)；334.4(实测值)。
反应方案24
Figure A20058001611201251
实施例63
4-(3-氨基-4-氰基-吡唑-1-基甲基)-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺(97) 步骤1：4-(3-氨基-4-氰基-吡唑-1-基甲基)-苯甲酸甲酯(95)
在3-氨基-1H-吡唑-4-腈(1.211克，11.21毫摩尔)在无水DMF(20毫升)中的溶液中，加入K2CO3(5.414克，39.24毫摩尔)。将悬浮液在室温下搅拌5分钟，并用对溴甲基苯甲酸甲酯(2.568克，11.21毫摩尔)处理，在100℃搅拌2.5小时，冷却并过滤。将滤液蒸发以形成油状残渣，将其溶于混合物Et2O-丙酮并在-10℃放置过夜。生成结晶材料，将其用热的EtOAc研制，再次在-10℃放置整夜，并过滤收集以形成标题化合物95(675毫克，24％收率)。LRMS：256.3(计算值)，257.3(实测值)。
步骤2：4-(3-氨基-4-氰基-吡唑-1-基甲基)-苯甲酸(96)
在NaOH(343毫克，8.58毫摩尔)在水(10毫升)和MeOH(20毫升)的混合物中的溶液中，加入酯95(732毫克，2.86毫摩尔)。将反应混合物回流2分钟，并在室温下再搅拌2小时。减压去除MeOH，将剩余的水溶液用浓HCl酸化(pH为3-4)以生成沉淀，将其过滤收集以获得标题化合物(96)(640毫克，92％收率)。LRMS：242.2(计算值)，241.1(实测值)。
步骤3：4-(3-氨基-4-氰基-吡唑-1-基甲基)-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺 (97)
按照与实施例1步骤5中所述相同的程序由化合物96制得白色固体状的标题化合物97。通过快速色谱法提纯粗产物，洗脱剂MeOH-CH2Cl2(2∶23)，接着用CH2Cl2研制，获得标题化合物97(58％收率)。1H NMR：(400MHz，DMSO-d6，δ(ppm)：9.61(s，1H)，8.27(s，1H)，7.92(d，J＝8.2，2H)，7.33(d，J＝8.2，2H)，7.13(d(dd)，J＝7.8，1H)，6.95(dd，J＝1.4Hz，J＝7.8Hz，1H)，6.75(dd，J＝1.2Hz，j＝7.8Hz，1H)，6.57(dd，J＝1.2Hz，7.6Hz，1H)，5.60(s，2H)，5.16(s，2H)，4.89(s，2H)。LRMS：332.4(计算值)，333.4(实测值)。
反应方案25
实施例64
5-(2，4-二甲氧基-苄基氨基)-苯并呋喃-2-羧酸-(2-氨基-苯基)-酰胺(102) 步骤1-2：5-氨基-苯并呋哺-2-羧酸甲酯(100)
按照J.Am.Chem.Soc.2000，122，(6382-6394)中所述的程序，以2-羟基-5-硝基-苯甲醛(98)为原料经中间体酯99制得标题化合物100(74％收率)。
步骤3-4：5-(2，4-二甲氧基-苄基氨基)-苯并呋喃-2-羧酸-(2-氨基-苯基)- 酰胺(102)
按照与实施例12，步骤2(反应方案3)和实施例1，步骤4和5(反应方案1)中所述相同的程序，经中间体100和101制得橙色固体状的标题化合物102(76毫克，41％)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.69(s，1H)，7.44(s，1H)，7.37(d，J＝8.8Hz，1H)，7.17-7.15(m，2H)，6.96(td，J＝7.5，1.4Hz，1H)，6.84(dd，J＝9.0，2.3Hz，1H)，6.76(dd，J＝8.0，2.3Hz，1H)，6.67(d，J＝2.3Hz，1H)，6.60-6.56(m，2H)，6.45(dd，J＝8.2，2.3Hz，1H)，5.94(t，J＝6.0Hz，1H)，4.92(s，2H)，4.15(d，J＝5.7Hz，1H)，3.83(s，3H)，3.73(s，3H)。LRMS：417.2(计算值)；418.5(实测值)。
反应方案26
实施例65
N-(2-氨基-苯基)-4-[5-(3-甲氧基-苄基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基]-苯甲酰 胺(105)
步骤1：4-[5-(3-甲氧基-苄基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基]-苯甲酸(104)
将(3-甲氧基-苯基)-乙酰氯(418毫克，2.27毫摩尔)加入到4-(N-羟基脲基甲基)-苯甲酸(103)(如专利申请WO03/024448中所述)(464毫克，2.40毫摩尔)在无水吡啶(10毫升)中的悬浮液中，并将反应混合物回流3小时，冷却，用水(10毫升)骤冷并蒸发以形成固体残渣。将此材料再溶于CH2Cl2，用木炭脱色。并以CH2Cl2-MeOH(19∶1)、CH2Cl2-丙酮(19∶1，随后9∶1)和丙酮-己烷(3∶2)为洗脱剂通过快速色谱法提纯三次，获得标题化合物104(96毫克，13％)。LRMS：324.3(计算值)，323.3[M-H]-(实测值)。
N-(2-氨基-苯基)-4-[5-(3-甲氧基-苄基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基]-苯甲酰 胺(105)
按照与实施例1步骤5(反应方案1)中所述相同的程序制得白色固体状的标题化合物105。通过快速色谱法，洗脱剂MeOH-CH2Cl2(1∶19)，随后EtOAc-CH2Cl2(1∶2)将粗产物提纯两次，以41％的产率获得标题化合物。LRMS：414.5(计算值)，415.4[MH]+(实测值)。1H NMR：(400MHz，DMSO-d6，δ(ppm)：9.61(s，1H)，7.91(d，J＝8.22，2H)，7.41(d，J＝8.22，2H)，7.25(t，J＝7.83，1H)，7.14(d，J＝6.65，1H)，6.96(m，1H)，6.89-6.84(m，3H)，6.76(dd，J＝8.02，1.37，1H)，6.58(dt，J＝7.63，1.30，1H)，4.89(s，2H)，4.29(s，2H)，4.16(s，2H)，3.73(s，3H)。
反应方案27
Figure A20058001611201281
实施例66
5-(4-氧-4H-噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基甲基)-苯并呋喃-2-羧酸-(2-氨基-苯 基)-酰胺(111)
按照专利申请WO03/024448中所述的程序，以化合物106为原料[与3H-噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-酮(108)反应]经中间体109制得标题化合物111。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.87(s，1H)；8.72(s，1H)；8.20(d，J＝5.5Hz，1H)；7.81(s，1H)；7.68(m，2H)；7.54(dd，J＝8.6，1.6Hz，1H)，7.42(d，J＝5.5Hz，1H)；7.17(d，J＝6.6，1H)；6.98(dt，J＝7.8，1.6Hz，1H)；6.77(dd，J＝8.2，1.6Hz，1H)，6.59(dt，J＝7.4，1.6Hz，1H)；5.35(s，2H)；4.96(s，2H)。LRMS：416.1(计算值)，417.4(实测值)。
实施例67
5-(4-氧-4H-噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基甲基)-苯并[b]噻吩-2-羧酸-(2-氨基- 苯基)-酰胺(112)
按照专利申请WO03/024448中所述的程序，以化合物107为原料[与3H-噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-酮(108)反应]经中间体110制得标题化合物112。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.89(s，1H)，8.74(s，1H)，8.29(s，1H)，8.21(d，J＝5.28，1H)，8.03(d，J＝8.22，1H)，7.98(s，1H)，7.51(dd，J＝8.51，1.67，1H)，7.43(d，J＝5.28，1H)，7.17(dd，J＝7.73，1.27，1H)，6.99(m，1H)，6.79(dd，J＝8.22，1.37，1H)，6.60(dt，J＝7.43，1.37，1H)，5.38(s，2H)，5.00(s，2H)。LRMS：432.1(计算值)，433.3(实测值)。
反应方案28
实施例68
步骤5：2-(4-三氟甲氧基-苄基氨基)-苯并噻唑-6-羧酸-(2-氨基-苯基)-酰 胺(117)
步骤1：2-氨基-苯并噻唑-6-羧酸甲酯(113)
按照J.Med.Chem.1997；40(105-111)中所述的程序，由4-氨基-苯甲酸甲酯制得标题化合物。
步骤2：2-氨基-苯并噻唑-6-羧酸(114)
按照实施例1步骤4中所述的程序制得标题化合物114(97％收率)。1H-NMR(DMSO)δ：12.58(s，1H)，8.23(d，J＝1.8Hz，1H)；7.85(s，2H)；7.78(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)；7.33(d，J＝7.8Hz，1H)。
步骤3：{2-[(2-氨基-苯并噻唑-6-羰基)-氨基]-苯基}-氨基甲酸叔丁酯 (115)
将酸114(1.80克，9.27毫摩尔)与(2-氨基-苯基)-氨基甲酸叔丁酯(2.31克，11.1毫摩尔)和BOP(4.91克。11.1毫摩尔)在DMF中合并。在该溶液中加入Et3N(5.16毫升，37.1毫摩尔)，将混合物在氮气下在室温搅拌过夜，在真空中浓缩，并通过快速柱色谱法提纯(30％己烷/EtOAc)。为了进一步提纯产物，使混合物在EtOAc和水之间分相，将有机层分离，经MgSO4干燥，并蒸发以获得标题化合物115(1.84克，52％)。1H-NMR(DMSO)δ：9.72(s，1H)，8.66(m，1H)；8.22(d，J＝1.8Hz，1H)；7.80(m，3H)；7.50(m，2H)；7.37(m，1H)；7.14(m，2H)；1.44(s，9H)。
步骤4：2-(4-三氟甲氧基-苯基)-苯并噻唑-6-羧酸-(2-氨基-苯基)-酰胺 (116)
在115(300毫克，0.78毫摩尔)、4-(三氟甲氧基)苯甲醛(123微升，0.86毫摩尔)和二氯化二丁锡(24毫克，0.08毫摩尔)在THF中的溶液中加入苯基硅烷(106微升，0.86毫摩尔)。将混合物在氮气下在室温搅拌整夜，加入追加的醛和苯基硅烷，持续搅拌直到原材料均不存在。蒸发去除混合物中的THF，通过快速柱色谱法(EtOAc/己烷30/70，随后50/50)提纯残留物，制得标题化合物116(314毫克，72％)。1H-NMR(DMSO)δ：9.77(s，1H)，8.89(t，J＝5.7Hz，1H)；8.69(s，1H)；8.29(d，J＝1.8Hz，1H)；7.84(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)；7.50(m，5H)；7.37(d，J＝7.8Hz，2H)；7.17(m，2H)；4.69(d，J＝5.7Hz，2H)；1.47(s，9H)。
步骤5：2-(4-三氟甲氧基-苄基氨基)-苯并噻唑-6-羧酸-(2-氨基-苯基)-酰 胺(117)
将TFA(2.0毫升)加入到116(306毫克，0.55毫摩尔)在DCM中的溶液中。将混合物在室温下搅拌4小时并浓缩。将残留物溶于EtOAc，用NaHCO3洗涤，经MgSO4干燥并再次浓缩。通过快速柱色谱法(30％己烷在EtOAc中)提纯残留物，制得黄色固体状的标题化合物117(252毫克，100％)。1H-NMR(DMSO)δ：9.56(s，1H)，8.83(t，J＝5.8Hz，1H)，8.30(d，J＝1.8Hz，1H)；7.85(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)；7.49(d，J＝8.4Hz，2H)；7.43(d，J＝8.4Hz，1H)；7.34(d，J＝8.4Hz，2H)；7.15(d，J＝7.6Hz.1H)；6.94(brt，J＝7.8Hz，1H)；6.77(d，J＝7.8Hz，1H)；6.59(t，J＝7.5Hz，1H)；4.66(d，J＝5.7Hz，2H)。LRMS：458.1(计算值)，459.2(实测值)。
反应方案29
Figure A20058001611201311
实施例69
6-(3，4-二甲氧基-苄基氨基)-苯并噁唑-2-羧酸-(2-氨基-苯基)-酰胺(120) 步骤1：5-氨基-苯并噁唑-2-羧酸甲酯(118)
按照J.Am.Chem.Soc.2000；122(6382-6394)中所述的程序由苯并噁唑-2-羧酸甲酯制得标题化合物118。
步骤2：5-(3，4-二甲氧基-苄基氨基)-苯并噁唑-2-羧酸甲酯(119)
按照与实施例68步骤4(反应方案28)中所述相同的程序制得固体标题化合物119(90％收率)。LRMS：342.1(计算值)；343.4(实测值)。
步骤4-5：6-(3，4-二甲氧基-苄基氨基)-苯并噁唑-2-羧酸-(2-氨基-苯基)- 酰胺(120)
按照与实施例1，步骤5(反应方案1)中所述相同的程序制得标题化合物120(31％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：10.06(s，1H)，7.56(d，J＝8.80，1H)，7.22(dd，J＝7.83，1.37，1H)，7.02(d，J＝1.57，1H)，6.98(m，1H)，6.92(d，J＝1.76，1H)，6.88(d，J＝1.96，1H)，6.86(d，J＝2.35，1H)，6.82(d，J＝1.96，1H)，6.78(dd，J＝7.93，1.27，1H)，6.60(m，1H)，4.99(brs，2H)，4.28(d，J＝5.48，2H)，3.76(s，3H)，3.73(s，3H)。LRMS：418(计算值)，419.5(实测值)。
反应方案30
Figure A20058001611201321
实施例70
1-(3，4，5-三甲氧基-苄基)-2，3-二氢-1H-吲哚-5-羧酸-(2-氨基-苯基)-酰胺 (122)
按照实施例68步骤4(反应方案28)中所述的程序(制造中间体121)和实施例1，步骤4和5(反应方案1)中所述的程序制得标题化合物122(33％收率)。1H-NMR(DMSO)δ：9.29(s，1H)，7.71(dd，J＝8.22，1.77，1H)，7.66(brm，1H)，7.12(dd，J＝7.93，1.47，1H)，6.93-6.89(m，3H)，6.84(dd，J＝8.22，1.96，1H)，6.75(dd，J＝8.02，1.37，1H)，6.65(d，J＝8.41，1H)，6.57(dt，J＝7.53，1.30，1H)，4.82(s，2H)，3.73(s，6H)，3.41(t，J＝8.51，2H)，2.98(t，J＝8.51，2H)。LRMS：435.2(计算值)；436.5(实测值)。
反应方案32
Figure A20058001611201331
实施例71
[6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基甲基]-(4-吗啉-4-基- 苯基)-氨基甲酸叔丁酯(126)
步骤1：3-[(4-吗啉-4-基苯基氨基)-甲基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(123)
在3-甲酰基-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(500毫克，2.46毫摩尔)、4-吗啉基苯胺(482.3毫克，2.71毫摩尔)和二氯化二丁基锡(76毫克，0.25毫摩尔)在THF中的溶液中，加入苯基硅烷(334微升，2.71毫摩尔)。将混合物在氮气下在室温搅拌过夜。从混合物中蒸发去除THF，通过快速色谱法(己烷/EtOAc，20/80)提纯残留物，获得标题化合物123(881毫克，98％)。1H-NMR(DMSO)δ：8.00(d，J＝1.0Hz，1H)，7.70(d，J＝8.2Hz，1H)；7.58(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)；7.52(d，J＝2.0Hz，1H)；6.70(d，J＝9.0Hz，2H)；6.59(d，J＝9.0Hz，2H)；5.48(t，J＝5.8Hz，1H)；4.31(d，J＝5.7Hz，2H)；3.83(s，3H)；3.68(t，J＝4.7Hz，4H)；2.86(t，J＝4.7Hz，4H)。
步骤2：3-{[叔丁氧基羰基-(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基]-甲基}-1H-吲哚-6- 羧酸甲酯(124)
将Et3N(289微升，2.08毫摩尔)逐滴加入123(689毫克，1.89毫摩尔)在THF(100毫升)中的溶液中。缓慢加入(BOC)2O，将混合物在氮气下在室温下搅拌过夜，蒸发去除THF，使残留物在水和CH2Cl2之间分相。将有机层分离，经MgSO4干燥，蒸发以生成另一残留物，通过快速柱色谱法(EtOAc/己烷，7∶3)提纯，获得标题化合物124(692毫克，79％)。1H-NMR(CDCl3)δ：8.24(m，1H)，8.09(m，1H)；7.76(dd，J＝8.2，1.4Hz，1H)；7.55(d，J＝8.8Hz，1H)；7.13(d，J＝2.5Hz，1H)；6.93(m，3H)；4.97(s，2H)；3.94(s，3H)；3.89(m，4H)；3.16(m，4H)；1.47(s，9H)。
步骤3：3-{[叔丁氧基羰基-(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基]-甲基}-1-甲基-1H- 吲哚-6-羧酸甲酯(125)
在酯124(473毫克，1.02毫摩尔)在DMF中的溶液中加入60％的NaH(45毫克，1.12毫摩尔)。将溶液在氮气下在室温搅拌一小时，冷却至0℃，用Mel(170微升，1.12毫摩尔)处理，升温至室温并在氮气下搅拌过夜。使混合物在水和AcOEt之间分相，收集有机层，经MgSO4干燥并在真空中浓缩，制得454毫克(93％)。1H-NMR(DMSO)δ：7.99(m，1H)，7.56(dd，J＝1.4，8.2Hz，1H)；7.47(m，1H)；7.27(s，1H)；6.86(d，J＝8.8Hz，2H)；6.75(d，J＝9.0Hz，2H)；4.86(s，2H)；3.83(s，3H)；3.76(s，3H)；3.67(t，J＝4.8Hz，4H)；3.01(t，J＝4.8Hz，4H)；1.37(s，9H)。
步骤4-5： [6-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吲哚-3-基甲基]-(4-吗 啉-4-基-苯基)-氨基甲酸叔丁酯(126)
按照实施例1步骤4和5(反应方案1)中所述的程序，获得固体标题化合物126(134毫克，33％)。1H-NMR(DMSO)δ：9.59(s，1H)；8.06(s，1H)；7.61(dd，J＝1.6，8.4Hz，1H)；7.48(m，1H)；7.21(s，1H)；7.15(dd，J＝7.8，1.4Hz，1H)；6.94(dt，J＝7.8，1.6Hz，1H)；6.86(m，2H)；6.76(m，3H)；6.58(dt，J＝7.4，1.4Hz，1H)；4.88(s，2H)；4.87(s，2H)；3.76(s，3H)；3.68(t，J＝4.8Hz，4H)；3.02(t，J＝4.8Hz，4H)；1.39(s，9H)。LRMS：556.2(计算值)；557.5(实测值)。
反应方案32
Figure A20058001611201352
Figure A20058001611201353
实施例72
N-(2-氨基-苯基)-4-[(6-羟基-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(134) 步骤1：(2-{4-[(6-羟基-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰基氨基}-苯基)- 氨基甲酸叔丁酯(129)
按照如反应方案3，步骤2(实施例12)中所述用于还原性胺化的程序(如专利申请WO03/024448中所述)以氨基噻唑127和醛128为原料制得标题化合物129(96％收率)。1H NMR：(acetone-d6)δ(ppm)：9.60(s，1H)，8.25(bs，1H)，7.99(d，J＝8.2Hz，2H)，7.69(d，J＝7.4Hz，1H)，7.61-7.58(m，3H)，7.39(bs，1H)，7.27(d，J＝8.6Hz，1H)，7.19(quint.d，J＝7.4，2.0Hz，2H)，7.12(d，J＝2.3Hz，1H)，6.79(dd，J＝8.6，2.7Hz，1H)，4.78(s，2H)，1.48(s，9H).m/z：491.5(MH+)。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-[(6-羟基-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰 胺(134)
按照反应方案28，步骤5(实施例68)中所述用于Boc裂解的程序，由化合物129制得标题化合物134(53％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.58(s，1H)，9.12(s，1H)，8.25(t，J＝6.3Hz，1H)，7.91(d，J＝7.8Hz，2H)，7.45(d，J＝8.2Hz，2H)，7.15(d，J＝8.6Hz，1H)7.12(s，1H)，7.02(d，J＝2.7Hz，1H)，6.94(t，J＝6.7Hz，1H)，6.75(dd，J＝8.2，1.2Hz，1H)，6.63(dd，J＝8.6，2.3Hz，1H)，6.56(t，J＝7.8Hz，1H)，4.87(s，2H)，4.59(d，J＝5.5Hz，2H).m/z：391.2(MH+)。
实施例73
N-(2-氨基-苯基)-4-{[6-(2-氯-乙氧基)-苯并噻唑-2-基氨基]-甲基}-苯甲 酰胺(135)
步骤1：[2-(4-{[6-(2-氯-乙氧基)-苯并噻唑-2-基氨基]-甲基}-苯甲酰基氨 基)-苯基]-氨基甲酸叔丁酯(130)
按照J.Med.Chem.，2002，45(6)，1300-1312中所述的程序并使用化合物129作原料，制得标题化合物130(43％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.59(bs，1H)，8.25(bs，1H)，7.99(d，J＝8.0Hz，2H)，7.69(dd，J＝7.4，1.4Hz，1H)，7.60(d，J＝8.4Hz，2H)，7.35(d，J＝8.4Hz，1H)，7.32(d，J＝2.5Hz，1H)，7.19(quint.d，J＝7.2，2.3Hz，2H)，6.91(dd，J＝8.6，2.5Hz，1H)，4.79(s，2H)，4.30(t，J＝5.3Hz，2H)，3.92(t，J＝5.5Hz，3H)，1.48(s，9H).m/z：553.5，554.5(M+，M+1)。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-{[6-(2-氯-乙氧基)-苯并噻唑-2-基氨基]-甲 基}-苯甲酰胺(135)
按照反应方案28，步骤5(实施例68)中所述用于Boc裂解的程序，由化合物130制得标题化合物135(48％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.59(s，1H)，8.39(t，J＝5.5Hz，1H)，7.92(d，J＝8.0Hz，2H)，7.46(d，J＝8.2Hz，2H)，7.35(d，J＝2.5Hz，1H)，7.27(d，J＝8.8Hz，1H)，7.13(d，J＝6.8Hz，1H)，6.94(td，J＝8.0，1.4Hz，1H)，6.83(dd，J＝8.8，6.1Hz，1H)，6.75(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，6.57(t，J＝8.6Hz，1H)，4.88(s，2H)，4.63(d，J＝6.1Hz，2H)，4.21(t，J＝5.1Hz，2H)，3.92(t，J＝5.3Hz，2H).mz：453.4，455.4(M+，M+1)。
实施例74
N-(2-氨基-苯基)-4-({6-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-苯并噻唑-2-基氨 基}-甲基)-苯甲酰胺(136)
步骤1：{2-[4-({6-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-苯并噻唑-2-基氨基}- 甲基)-苯甲酰基氨基]-苯基}-氨基甲酸叔丁酯(131)
按照J.Med.Chem.，2002，45，(6)，1300-1312中所述的程序并使用化合物130作原材料，制得标题化合物131。(91％收率)。1H NMR：(Acetone-d6)δ(ppm)：7.99(d，J＝8.2Hz，2H)，7.69(d，J＝7.2Hz，1H)，7.59(d，J＝8.6Hz，2H)，7.56(d，J＝2.0Hz，1H)，7.33(d，J＝8.8Hz，1H)，7.28(d，J＝2.5Hz，1H)，7.21(quint.d，J＝7.2，1.2Hz，2H)，7.03-6.93(m，1H)，6.87(dd，J＝8.8，2.7Hz，1H)，4.79(s，2H)，4.11(t，J＝5.9Hz，2H)，2.75(t，J＝5.7Hz，2H)，2.67-2.51(m，4H)，2.48-2.38(m，4H)，2.21(s，3H)，1.49(s，9H)。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-({6-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-苯并噻唑 -2-基氨基}-甲基)-苯甲酰胺(136)
按照反应方案28，步骤5(实施例68)中所述用于Boc裂解的程序，以化合物131为原料制得标题化合物136(60％收率)。1H NMR：(CDCl3)δ(ppm)：7.97(d，J＝7.9Hz，2H)，7.58(d，J＝7.9Hz，2H)，7.51(d，J＝8.8Hz，1H)，7.42(d，J＝8.0Hz，1H)，7.22-7.17(m，2H)，6.99-6.92(m，3H)，4.78(s，2H)，4.20-4.18(m，2H)，2.97-2.87(m，8H)，2.70-2.66(m，2H)，2.61(s，3H).m/z：517.5(MH+)。
实施例75
[2-吗啉-4-基-乙基]-氨基甲酸-2-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基氨 基]-苯并噻唑-6-基酯(137)
步骤1：[2-(4-{[6-(2-吗啉-4-基-乙基氨基甲酰氧基)-苯并噻唑-2-基氨基]- 甲基}-苯甲酰基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁酯(132)
在冷却至-78℃的在氮气氛下的p-硝基苯基氯甲酸酯(171毫克0.848毫摩尔)在THF(15毫升)中的溶液中，加入Et3N(236微升，1.70毫摩尔)。然后经导管加入中间体129(416毫克，0.848毫摩尔)在THF(4.2毫升)中的悬浮液。将所得黄色混合物在-78℃搅拌1小时并在0℃搅拌1.5小时，在40℃加热16小时并冷却至室温。然后，加入纯净4-(2-氨基乙基)吗啉(119微升，0.848毫摩尔)并将溶液搅拌4小时，加入MeOH骤冷。使其搅拌30分钟，并浓缩。将所得材料使用MeOH/DCM(3∶97)通过快速色谱法提纯，产生标题化合物132(165毫克，30％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.77(s，1H)，8.64(bs，1H)，8.56(t，J＝5.9Hz，1H)，7.90(d，J＝8.2Hz，2H)，7.60(t，J＝5.9Hz，1H)，7.50(d，J＝8.0Hz，2H)，7.50-7.48(m，2H)，7.45(d，J＝2.3Hz，1H)，7.30(d，J＝8.8Hz，1H)，7.17(t，J＝7.6Hz，1H)，7.12(t，J＝7.8Hz，1H)，6.90(dd，J＝8.2，2.0Hz，1H)，4.67(d，J＝6.0Hz，2H)，3.56(t，J＝4.1Hz，4H)，3.31(t，J＝6.1Hz，2H)，3.16(q，J＝6.1Hz，2H)，2.39(t，J＝6.8Hz，4H)，1.42(s，9H).m/z：647.7(MH+)。
步骤2：(2-吗啉-4-基-乙基)-氨基甲酸-2-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄 基氨基]-苯并噻唑-6-基酯(137)
按照反应方案28，步骤5(实施例68)中所述用于Boc裂解的程序，以化合物132为原料制得标题化合物137(55％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)：1H NMR：(DMSO-d6)：9.60(s，1H)，8.56(t，J＝6.3Hz，1H)，7.93(d，J＝8.4Hz，2H)，7.61(t，J＝5.5Hz，1H)，7.47(d，J＝7.8Hz，2H)，7.46(d，J＝2.3Hz，1H)，7.31(d，J＝8.6Hz，1H)，7.14(d，J＝6.8Hz，2H)，6.95(t，J＝6.5Hz，1H)，6.92(dd，J＝8.8，2.5Hz，1H)，6.75(d，J＝7.8Hz，1H)，6.57(t，J＝7.4Hz，1H)，4.88(s，2H)，4.66(d，J＝5.9Hz，2H)，3.57(t，J＝4.5Hz，4H)，3.33-3.31(m，2H)，2.41-2.38(m，6H).m/z：547.5(MH+)。
实施例76
N-(2-氨基-苯基)-4-{[6-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯并噻唑-2-基氨基]-甲 基}-苯甲酰胺(138)
步骤1：[2-(4-{[6-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯并噻唑-2-基氨基]-甲基}-苯 甲酰基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁酯(133)
向在室温、在氮气氛下化合物129(1.00克，2.04毫摩尔)在THF(6.8毫升)中的悬浮液中，依序加入N，N-二甲基乙醇胺(225微升，2.24毫摩尔)和三苯膦(696毫克，2.65毫摩尔)，然后加入偶氮二羧酸二异丙酯(550微升，2.65毫摩尔)。放出热量且混合物变成暗红色。将其搅拌4小时，在真空中去除THF，并使暗色残留物在EtOAc和H2O之间分相。收集有机相并用HCl 1N萃取。分离酸性萃取液，并用饱和NaHCO3水溶液在剧烈搅拌下中和。形成白色沉淀，将其过滤收集以获得标题化合物133(430毫克，37％收率)。1H NMR：(丙酮-d6)δ(ppm)：7.99(d，J＝8.4Hz，2H)，7.70(dd，J＝8.0，2.2Hz，1H)，7.59(d，J＝8.4Hz，2H)，7.56(d，J＝1.6Hz，1H)，7.33(d，J＝9.0Hz，1H)，7.27(d，J＝2.5Hz，1H)，7.19(quint.d，J＝7.8，2.4Hz，2H)，6.87(dd，J＝8.8，2.5Hz，1H)，4.80(s，2H)，4.08(t，J＝5.9Hz，2H)，2.67(t，J＝5.7Hz，2H)，2.27(s，6H)，1.48(s，9H).m/z：562.5(MH+)。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-{[6-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯并噻唑-2-基氨 基]-甲基}-苯甲酰胺(138)
按照反应方案28，步骤5(实施例68)中所述用于Boc裂解的程序，以化合物133为原料制得标题化合物138(82％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：7.96(d，J＝8.2Hz，2H)，7.53(d，J＝8.2Hz，2H)，7.32(d，J＝8.8Hz，1H)，7.23(d，J＝2.5Hz，1H)，7.17(d，J＝9.0Hz，1H)，7.07(td，J＝9.0，1.6Hz，1H)，6.90(dd，J＝8.8，2.7Hz，1H)，6.89(dd，J＝6.5，1.6Hz，1H)，6.76(t，J＝6.5Hz，1H)，4.71(s，2H)，4.10(t，J＝5.3Hz，2H)，2.79(t，J＝5.5Hz，2H)，2.36(s，6H).m/z：462.5(MH+)。
实施例77
N-(2-氨基-苯基)-4-{[6-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯并噻唑-2-基氨基]-甲 基}-苯甲酰胺(139)
按照与实施例76中所述相同的程序(两步反应序列)但是将N，N-二甲基乙醇胺换成1-哌啶乙醇(经过两个步骤为52％收率)，获得标题化合物139。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：7.96(d，J＝8.4Hz，2H)，7.53(d，J＝8.2Hz，2H)，7.36(d，J＝8.8Hz，1H)，7.32(d，J＝2.5Hz，1H)，7.17(d，J＝8.0Hz，1H)，7.07(td，J＝6.1，1.2Hz，1H)，6.97(dd，J＝8.8，2.7Hz，1H)，6.90(d，J＝7.8Hz，1H)，6.77(t，J＝7.2Hz，1H)，4.71(s，2H)，4.35(t，J＝4.9Hz，2H)，3.64-3.60(m，2H)，3.56(t，J＝4.9Hz，2H)，3.10-3.01(m，2H)，2.05-1.92(m，2H)，1.90-1.81(m，4H).m/z：502.5(MH+)。
反应方案33
Figure A20058001611201401
实施例78
N-(2-氨基-苯基)-4-[(6-硝基-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(142) 步骤1：(2-{4-[(6-硝基-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰基氨基}-苯基)- 氨基甲酸叔丁酯(141)
以化合物140和128(在专利申请WO03/024448中描述)为原料，按照反应方案2，步骤2(实施例12)中所述用于还原性胺化的程序，制得标题化合物141(66％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：9.78(s，1H)，9.28(bs，1H)，8.71(d，J＝2.5Hz，1H)，8.64(bs，1H)，8.09(dd，J＝9.0，2.5Hz，1H)，7.92(d，J＝8.2Hz，2H)，7.51(dd，J＝8.6，2.2Hz，2H)，7.46(d，J＝9.0，2H)，7.17(td，J＝7.4，1.8Hz，1H)，7.12(td，J＝7.1，1.8Hz，1H)，4.75(bs，2H)，1.42(s，9H).m/z：542.2(M+Na)。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-[(6-硝基-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰 胺(142)
按照反应方案28，步骤5(实施例68)中所述用于Boc裂解的程序使用化合物141为原料制得标题化合物142(98％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)：10.06(s，1H)，9.30(bs，1H)，8.71(d，J＝2.3Hz，1H)，8.09(dd，J＝9.0，2.3Hz，1H)，9.97(d，J＝8.2Hz，2H)，7.51(d，J＝8.2Hz，2H)，7.46(d，J＝8.8Hz，1H)，7.30(d，J＝7.0Hz，1H)，7.17(t，J＝7.8Hz，1H)，7.10(d，J＝7.8Hz，1H)，7.03(t，J＝7.2Hz，1H)，4.75(d，J＝5.5Hz，2H).m/z：420.5(MH+)。
实施例79
4-[(6-氨基-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺(144) 步骤1：(2-{4-[(6-氨基-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰基氨基}-苯基)- 氨基甲酸叔丁酯(143)
在化合物141(200毫克，0.385毫摩尔)在混合物THF/MeOH/H2O(10毫升/10毫升/10毫升)中的悬浮液中，连续加入二水合氯化锡(II)(1.35克，8.46毫摩尔)和乙酸铵(1.09克，14.12毫摩尔)。将混合物回流2天，滤除锡盐，并将滤液在真空中浓缩。使残留物在EtOAc和H2O之间分相(加入盐水以破坏乳状液)。将有机相连续用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，经MgSO4干燥，并在真空中浓缩以制得标题化合物143(145毫克，77％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：12.89(bs，1H)，10.79(s，1H)，8.12(d，J＝2.0Hz，1H)，8.05(d，J＝8.8Hz，2H)，7.90-7.68(m，3H)，7.62(d，J＝8.4Hz，2H)，7.48(bs，1H)，7.21(dd，J＝4.9，3.7Hz，1H)，4.65(s，2H).m/z：490.5(MH+)。
步骤2：4-[(6-氨基-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰 胺(144)
按照反应方案28，步骤5(实施例68)中所述用于Boc裂解的程序，使用化合物143为原料，制得标题化合物144(58％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)：9.58(s，1H)，8.09(t，J＝5.9Hz，1H)，7.91(d，J＝8.0Hz，2H)，7.45(d，J＝8.4Hz，2H)，7.13(d，J＝7.0Hz，1H)，7.05(d，J＝8.6Hz，1H)，6.94(t，J＝6.8Hz，1H)，6.81(d，J＝2.2Hz，1H)，6.75(dd，J＝6.7，1.2Hz，1H)，6.57(t，J＝6.5Hz，1H)，6.48(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，5.19(s，2H)，4.81(s，2H)，4.58(d，J＝5.9Hz，2H).m/z：390.5(MH+)。
反应方案34
Figure A20058001611201421
实施例80
N-(2-氨基-苯基)-4-[(5，6-二氟-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺 (147)
步骤1：5，6-二氟-苯并噻唑-2-基胺(145)
按照J.Het.Chem，1971，8(309-310)中所述的程序以4，5-二氟苯胺为原料，制得标题化合物145(95％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：7.78(dd，J＝10.6，8.6Hz，1H)，7.61(s，2H)，7.32(dd，J＝11.9，7.2Hz，1H).m/z：337.5(M+Na+)。
步骤2：4-[(5，6-二氟-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酸(146)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)中所述用于还原性胺化的程序，以化合物145为原料，制得标题化合物146(63％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：8.72(t，J＝5.9Hz，1H)，7.89(d，J＝8.4Hz，2H)，7.82(dd，J＝10.4，8.0Hz，1H)，7.44(d，J＝8.4Hz，2H)，7.40(dd，J＝11.9，7.4Hz，1H)，4.65(d，J＝5.7Hz，2H).m/z：315.2(MH+)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-[(5，6-二氟-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰 胺(147)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联反应的程序，以化合物146为原料制得标题化合物147(32％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)：9.59(s，1H)，8.73(t，J＝5.9Hz，1H)，7.93(d，J＝8.2Hz，2H)，7.83(dd，J＝10.4，8.0Hz，1H)，7.45(d，J＝8.2Hz，2H)，7.40(dd，J＝11.9，7.2Hz，1H)，7.13(d，J＝7.8Hz，1H)，6.94(td，J＝7.8，1.4Hz，1H)，6.75(dd，J＝7.8，1.4Hz，1H)，6.57(td，J＝7.6，1.2Hz，1H)，4.87(s，2H)，4.65(d，J＝5.9Hz，2H).m/z：411.4(MH+)。
反应方案35
Figure A20058001611201441
实施例81
N-(2-氨基-苯基)-4-{6-[3-(2-吗啉-4-基-乙基)-脲基]-苯并噻唑-2-基硫烷 基甲基}-苯甲酰胺(157)
步骤1：4-{6-[3-(2-吗啉-4-基-乙基)-脲基]-苯并噻唑-2-基硫烷基甲基}- 苯甲酸甲酯(149)
按照反应方案32，步骤1(实施例75)中所述用于形成氨基甲酸酯的程序，但是将化合物129换成化合物148(在专利申请WO03/024448中描述)，制得标题化合物149(70％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.28(bs，1H)，8.18(d，J＝2.3Hz，1H)，7.90(d，J＝8.2Hz，2H)，7.77(d，J＝8.6Hz，1H)，7.61(d，J＝8.2Hz，2H)，7.42(dd，J＝8.8，2.2Hz，1H)，4.68(s，2H)，3.82(s，3H)，3.59-3.58(m，4H)，3.33-3.32(m，2H)，3.21(q，J＝6.1Hz，2H)，2.38-2.37(m，4H).m/z：487.4(MH+)。
步骤2：4-{6-[3-(2-吗啉-4-基-乙基)-脲基]-苯并噻唑-2-基硫烷基甲基}- 苯甲酸甲酯(153)
按照反应方案1，步骤4(实施例1)中所述用于水解的程序，使用化合物149为原料，制得标题化合物153(50％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.75(bs，1H)，8.22(d，J＝2.2Hz，1H)，7.90(d，J＝8.4Hz，2H)，7.76(d，J＝8.8Hz，1H)，7.61(d，J＝8.4Hz，2H)，7.55(d，J＝6.3Hz，1H)，7.49(dd，J＝8.8，2.2Hz，1H)，4.68(s，2H)，3.58(t，J＝4.3Hz，4H)，3.34-3.32(m，2H)，3.21(q，J＝5.9Hz，2H)，2.38(t，J＝6.3Hz，4H).m/z：473.4(MH+)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)4-{6-[3-(2-吗啉-4-基-乙基)-脲基]-苯并噻唑-2- 基硫烷基甲基}-苯甲酰胺(157)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，以化合物153为原料制得标题化合物157(26％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.59(s，1H)，8.84(s，1H)，8.13(d，J＝2.2Hz，1H)，7.90(d，J＝8.2Hz，2H)，7.71(d，J＝8.6Hz，1H)，7.58(d，J＝8.2Hz，2H)，7.30(dd，J＝8.8，2.2Hz 1H)，7.12(d，J＝7.0Hz，1H)，6.94(t，J＝7.0Hz，1H)，6.74(dd，J＝8.1，1.5Hz，1H)，6.56(t，J＝7.4Hz，1H)，6.14(t，J＝4.9Hz，1H)，4.88(bs，2H)，4.66(s，2H)3.58(t，J＝4.5Hz，4H)，3.31-3.30(m，2H)，3.21(q，J＝5.7Hz，2H)，2.38(t，J＝6.3Hz，4H).m/z：563.5(MH+)。
实施例82
N-(2-氨基-苯基)-4-[6-(2-二甲基氨基-乙酰基氨基)-苯并噻唑-2-基硫烷 基甲基]-苯甲酰胺(158)
步骤1：4-[6-(2-二甲基氨基-乙酰基氨基)-苯并噻唑-2-基硫烷基甲基]-苯 甲酸甲酯(150)
在化合物148(在专利申请WO03/024448中描述)(701毫克，2.12毫摩尔)和Me2NCH2COCl.HCl(670毫克，4.24毫摩尔)在CH3CN中的悬浮液中，加入NaHCO3(356毫克，4.24毫摩尔)，然后加入Et3N(295微升，2.12毫摩尔)。将该混合物在室温搅拌24小时，在真空中浓缩并使残留物在DCM和H2O之间分相。收集水层，用NaHCO3中和并用新鲜DCM萃取，经Na2SO4干燥，并在真空中浓缩。将残留物通过快速色谱法在硅胶上提纯，产生标题化合物150(485毫克，55％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.95(s，1H)，8.41(d，J＝2.0Hz，1H)，7.91(d，J＝8.2Hz，2H)，7.79(d，J＝8.8Hz，1H)，7.63(d，J＝8.2Hz，2H)，7.63(dd，J＝8.8，2.1Hz，1H)，4.71(s，2H)，3.84(s，3H)，3.11(s，2H)，2.30(s，6H).m/z：416.4(MH+)。
步骤2：4-[6-(2-二甲基氨基-乙酰基氨基)-苯并噻唑-2-基硫烷基甲基]-苯 甲酸(154)
按照反应方案1，步骤4(实施例1)中所述用于水解的程序，使用化合物150为原料制得标题化合物154(78％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.95(s，1H)，8.41(d，J＝2.0Hz，1H)，7.86(d，J＝8.2Hz，2H)，7.79(d，J＝8.8Hz，1H)，7.63(dd，J＝9.0，2.0Hz，1H)，7.55(d，J＝8.2Hz，2H)，4.68(s，2H)，3.11(s，2H)，2.30(s，6H).m/z：402.4(MH+)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-[6-(2-二甲基氨基-乙酰基氨基)-苯并噻唑-2- 基硫烷基甲基]-苯甲酰胺(158)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物154为原料制得标题化合物158(28％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.93(s，1H)，9.59(s，1H)，8.39(d，J＝2.0Hz，1H)，7.90(d，J＝8.0Hz，2H)，7.79(d，J＝9.0Hz，1H)，7.62(dd，J＝8.8，2.2Hz，1H)，7.60(d，J＝8.2Hz，2H)，7.12(d，J＝7.6Hz，1H)，6.94(t，J＝8.0Hz，1H)，6.74(dd，J＝8.0，1.6Hz，1H)，6.56(t，J＝7.5Hz，1H)，4.88(s，2H)，4.69(s，2H)，3.09(s，2H)，2.28(s，6H).HRMS：m/z：491.1455±0.0014(M+)。
实施例83
N-(2-氨基-苯基)-4-[6-(二甲基氨基-亚甲基氨基)-苯并噻唑-2-基硫烷基 甲基]-苯甲酰胺(159)
步骤1：4-[6-(二甲基氨基-亚甲基氨基)-苯并噻唑-2-基硫烷基甲基]-苯甲 酸甲酯(151)
向在氮气氛下的三氯甲基氯甲酸酯(74微升，608毫摩尔)在THF(2毫升)中的预冷(-78℃)溶液中，经导管加入化合物148(在专利申请WO03/024448中描述)(201毫克，608毫摩尔)在THF和DMF(分别为3.5毫升，0.5毫升)的混合物中的溶液，然后加入Et3N(169微升，1.22毫摩尔)。将溶液在-78℃搅拌1小时，并在0℃搅拌2小时，并升温至室温过夜。在真空中去除溶剂，并使残留物在H2O和DCM/MeOH(9∶1)混合物之间分相，经MgSO4干燥，并在真空中浓缩，制得标题化合物151(136毫克，58％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：7.92(d，J＝8.4Hz，2H)，7.81(s，1H)，7.69(d，J＝8.6Hz，1H)，7.62(d，J＝8.2Hz，2H)，7.46(d，J＝2.2Hz，1H)，7.04(dd，J＝8.6，2.2Hz，1H)，4.68(s，2H)，3.84(s，3H)，3.04(bs，3H)，2.95(bs，3H).m/z：3 86.4(MH+)。
步骤2：4-[6-(二甲基氨基-亚甲基氨基)-苯并噻唑-2-基硫烷基甲基]-苯甲 酸(155)
按照反应方案1，步骤4(实施例1)中所述用于水解的程序，以化合物151为原料，制得标题化合物155(45％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：7.89(d，J＝8.2Hz，2H)，7.80(s，1H)，7.69(d，J＝8.6Hz，1H)，7.59(d，J＝8.2Hz，2H)，7.45(d，J＝2.2Hz，1H)，7.04(dd，J＝8.6，2.2Hz，1H)，4.67(s，2H)，3.03(bs，3H)，2.94(bs，3H).m/z：372.3(MH+)。
步骤3： N-(2-氨基-苯基)-4-[6-(二甲基氨基-亚甲基氨基)-苯并噻唑-2-基 硫烷基甲基]-苯甲酰胺(159)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物155为原料，制得标题化合物159(25％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.60(s，1H)，7.91(d，J＝8.2Hz，2H)，7.79(s，1H)，7.69(d，J＝8.6Hz，1H)，7.60(d，J＝8.2Hz，2H)，7.44(d，J＝2.2Hz，1H)，7.13(d，J＝8.0Hz，1H)，7.03(dd，J＝8.6，2.3Hz，1H)，6.95(t，J＝7.0Hz，1H)，6.75(d，J＝9.2Hz，1H)，6.57(t，J＝7.4Hz，1H)，4.89(s，2H)，4.67(s，2H)，3.02(s，3H)，2.93(s，3H).m/z：462.5(MH+)。
实施例84
N-(2-氨基-苯基)-4-{6-[N-(2-氨基-苯基)-4-苄基酰胺]-苯并噻唑-2-基硫 烷基甲基}-苯甲酰胺(160)
步骤1：N-(4-甲基苯甲酸甲酯)-苯并噻唑-2-基硫烷基甲基-苯甲酸甲酯 (152)
在化合物148(9.52克，28.8毫摩尔)在DMF(30毫升)中的溶液中，加入DCM(130毫升)和甲基-(4-溴甲基)苯甲酸酯(6.60克，28.8毫摩尔)，并将混合物在室温下搅拌16小时。在真空中将溶剂浓缩，并使所得固体在EtOAc和H2O之间分相。将有机层用HCl 1N、盐水洗涤，经MgSO4干燥并在真空中浓缩。将粗材料通过使用EtOAc/Hex(45∶55)的快速色谱法提纯，然后通过使用MeOH/DCM(2∶98)的Biotage预填充硅胶柱提纯，并在CHCl2和Et2O的混合物中结晶，然后产生标题化合物152(2.66克，19％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：7.89(d，J＝8.0Hz，2H)，7.87(d，J＝7.8Hz，2H)，7.55(d，J＝8.4Hz，2H)，7.54(d，J＝8.8Hz，1H)，7.47(d，J＝8.4Hz，2H)，6.93(d，J＝2.3Hz，1H)，6.77(dd，J＝8.8，2.5Hz，1H)，6.70(t，J＝6.1Hz，1H)，4.58(s，2H)，4.38(d，J＝6.3Hz，2H)，3.81(s，3H)，3.81(s，3H).m/z：479.4(MH+)。
步骤2：N-(4-甲基苯甲酸)-苯并噻唑-2-基硫烷基甲基-苯甲酸(156)
按照反应方案1，步骤4(实施例1)中所述用于水解的程序，使用化合物152为原料并使氢氧化锂的量翻倍，制得标题化合物156(37％收率)。m/z：451.4(MH+)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-{6-[N-(2-氨基-苯基)-4-苯甲酰胺]-苯并噻唑 -2-基硫烷基甲基}-苯甲酰胺(160)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物156为原料并使所有试剂的量翻倍，制得标题化合物160(5％收率)。1H NMR：(Acetone-d6)d(ppm)：7.98(d，J＝8.0Hz，2H)，7.96(d，J＝8.2Hz，2H)，7.63(d，J＝9.0Hz，1H)，7.62(d，J＝7.4Hz，2H)，7.55(d，J＝8.0Hz，2H)，7.28(d，J＝8.2Hz，2H)，7.04(d，J＝2.5Hz，1H)，6.99(t，J＝7.4Hz，2H)，6.91(dd，J＝8.8，2.3Hz，1H)，6.85(d，J＝7.4Hz，2H)，6.66(t，J＝7.4Hz，2H)，4.65(s，2H)，4.54(s，2H).m/z：631.5(MH+)。
反应方案36
Figure A20058001611201491
实施例85
N-(2-氨基-苯基)-4-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基氨基)-苯甲酰胺(166) 步骤1：4-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基氨基)-苯甲酸甲酯(161)
在2-氯-6-甲氧基苯并噻唑(1.00克，5.03毫摩尔)在DMF(10毫升)中的溶液中，加入4-氨基苯甲酸甲酯(760毫克，5.03毫摩尔)，然后加入粉状K2CO3(1.81克，15.09毫摩尔)。将混合物在90℃搅拌16小时，并在120℃搅拌24小时，然后在140℃搅拌3天。使其冷却至室温，并加入NaH(60％在矿物油中，201毫克，5.03毫摩尔)。将混合物在室温搅拌16小时，并用H2O骤冷。在80℃在真空中去除溶剂，并使残留物在H2O和EtOAc之间分相。用HCl 1N、饱和NaHCO3和盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，并在真空中浓缩。将粗材料通过使用EtOAc/Hex并在洗脱过程中将极性从20∶80提高至50∶50的快速色谱法提纯，产生标题化合物161(150毫克，9％收率。m/z：315.2(MH+)。
步骤2：4-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基氨基)-苯甲酸(163)
按照反应方案1，步骤4(实施例1)中所述用于水解的程序，使用化合物161为原料，制得标题化合物163(66％收率)。m/z：301.2(MH+)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基氨基)-苯甲酰胺 (166)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物163为原料，制得标题化合物166(53％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：10.62(s，1H)，9.53(s，1H)，7.98(d，J＝8.8Hz，2H)，7.84(d，J＝9.2Hz，2H)，7.57(d，J＝8.8Hz，1H)，7.47(d，J＝2.0Hz，1H)，6.59(t，J＝7.2Hz，1H)，4.89(s，2H)，3.78(s，3H).m/z：391.4(MH+)。
实施例86
N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基)-脲基]-苯甲酰胺(167) 步骤1：4-[3-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基)-脲基]-苯甲酸乙酯(162)
按照J.Med.Chem.，1979，22(1)，28-32中所述的程序，以2-氨基-6-甲氧基苯并噻唑为原料，制得标题化合物162(93％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.63(bs，1H)，7.91(d，J＝8.4Hz，2H)，7.65(d，J＝8.0Hz，2H)，7.55-7.51(m，2H)，6.98(d，J＝8.8Hz，1H)，4.28(q，J＝6.8Hz，2H)，3.79(s，3H)，1.32(t，J＝7.2Hz，3H).m/z：372.3 (MH+)。
步骤2：4-[3-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基)-脲基]-苯甲酸(164)
按照反应方案1，步骤4(实施例1)中所述用于水解的程序，使用化合物162为原料，制得标题化合物164(99％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：7.94(d，J＝8.4Hz，2H)，7.70(d，J＝8.0Hz，2H)，7.57(d，J＝8.4Hz，1H)，7.49(d，J＝2.4Hz，1H)，6.96(dd，J＝8.8，2.4Hz，1H)，3.80(s，3H).m/z：344.3(MH+)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基)-脲基]-苯甲酰胺 (167)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物164为原料，制得标题化合物167(50％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.58(s，H)，9.54(bs，1H)，7.96(d，J＝8.4Hz，2H)，7.93(s，1H)，7.63(d，J＝8.8Hz，2H)，7.54(d，J＝9.2Hz，1H)，7.52(d，J＝2.0Hz，1H)，7.14(d，J＝7.6Hz，1H)，6.98(dd，J＝8.0，1.6Hz，1H)，6.94(d，J＝8.0Hz，1H)，6.77(d，J＝8.0Hz，1H)，6.59(t，J＝7.2Hz，1H)，4.89(bs，2H)，3.80(s，3H).m/z：434.4(MH+)。
实施例87
N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基)-脲基甲基]-苯甲酰胺 (168)
步骤1：4-[3-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基)-脲基甲基]-苯甲酸(165)
按照反应方案32，步骤1(实施例75)中所述用于形成氨基甲酸酯的程序，将化合物129换成2-氨基-6-甲氧基苯并噻唑并使用4-氨基甲基苯甲酸代替4-(2-氨基乙基)-吗啉，制得标题化合物165(28％收率)。1HNMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：7.92(t，J＝8.0Hz，2H)，7.51(d，J＝8.5Hz，1H)，7.47(s，1H)，7.42(d，J＝8.5Hz，1H)，6.95(d，J＝7.0Hz，1H)，4.45(s，2H)，3.77(s，3H).m/z：358.3(MH+)。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基)-脲基甲基]-苯甲 酰胺(168)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物165为原料，制得标题化合物168(1.5％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：10.75(bs，14H)，9.63(s，1H)，7.97-7.91(m，2H)，7.53-7.43(m，3H)，7.33(s，1H)，7.16(s，1H)，6.96-6.95(m，2H)，6.78(d，J＝8.0Hz，1H)，6.60-6.58(m，1H)，4.88(bs，2H)，4.45(s，2H)，3.78(s，3H)。
反应方案37
Figure A20058001611201511
实施例88
N-(2-氨基-苯基)-4-{[5-(吡啶-2-基硫烷基)-噻唑-2-基氨基]-甲基}-苯甲 酰胺(177)
步骤1：5-(吡啶-2-基硫烷基)-噻唑-2-基胺(169)
在2-氨基-5-溴噻唑氢溴酸盐(1.00克，3.85毫摩尔)在DMF(8毫升)中的溶液中，加入2-巯基吡啶(428毫克，3.85毫摩尔)，然后加入粉状K2CO3(1.81克，15.09毫摩尔)。将混合物在80℃搅拌1小时，并在室温下搅拌16小时。在真空中在80℃去除溶剂，并使化合物在H2O和EtOAc之间分相。将水层用EtOAc萃取，并将有机相用HCl 1N萃取。将酸性萃取液用饱和NaHCO3中和，并将沉淀物用EtOAc萃取，用水洗涤，经MgSO4干燥，并在真空中浓缩，制得标题化合物169(589毫克，73％收率)。1H NMR：(Acetone-d6)δ(ppm)：8.36(s，1H)，7.66(s，1H)，7.20(s，1H)，7.12-7.05(m，2H)，6.84(s，2H).m/z：210.1(MH+)。
步骤2：4-{[5-(吡啶-2-基硫烷基)-噻唑-2-基氨基]-甲基}-苯甲酸甲酯 (173)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)中所述用于还原性胺化的程序，以化合物169为原料，制得标题化合物173(50％收率)。1H NMR：(Acetone-d6)δ(ppm)：8.37(d，J＝4.0Hz，1H)，7.99(d，J＝8.5Hz，2H)，7.83(bs，1H)，7.67(td，J＝8.0，1.5Hz，1H)，7.56(d，J＝7.5Hz，2H)，7.28(s，1H)，7.13(dd，J＝6.5，5.0Hz，1H)，7.07(d，J＝8.0Hz，1H)，4.72(bs，2H)，3.88(s，3H).m/z：358.1(MH+)
步骤3：4-{[5-(吡啶-2-基硫烷基)-噻唑-2-基氨基]-甲基}-苯甲酸(175)
按照反应方案1，步骤4(实施例1)中所述用于水解的程序，使用化合物173为原料，制得标题化合物175(81％收率)。1H NMR：(acetone-d6)δ(ppm)：8.37(d，J＝4.0Hz，1H)，7.99(d，J＝8.5Hz，2H)，7.83(bs，1H)，7.67(td，J＝8.0，1.5Hz，1H)，7.56(d，J＝7.5Hz，2H)，7.28(s，1H)，7.13(dd，J＝6.5，5.0Hz，1H)，7.07(d，J＝8.0Hz，1H)，4.72(bs，2H)，3.88(s，3H).m/z：344.0(MH+)。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-{[5-(吡啶-2-基硫烷基)-噻唑-2-基氨基]-甲 基}-苯甲酰胺(177)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物175为原料，制得标题化合物177(53％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.63(s，1H)，8.74(t，J＝5.9Hz，1H)，8.40(d，J＝3.7Hz，1H)，7.96(d，J＝8.4Hz，2H)，7.72(td，J＝7.6，2.0Hz，1H)，7.48(d，J＝7.8Hz，2H)，7.34(s，1H)，7.19-7.15(m，2H)，7.05(d，J＝8.2Hz，1H)，6.97(t，J＝8.0Hz，1H)，6.78(d，J＝7.8Hz，1H)，6.60(t，J＝7.8Hz，1H)，4.91(s，2H)，4.59(d，J＝6.1Hz，2H).mz：434.4(MH+)。
实施例89
N-(2-氨基-苯基)-4-{[5-(吡啶-2-基氧基)-噻唑-2-基氨基]-甲基}-苯甲酰 胺(178)
步骤1：5-(吡啶-3-基氧基)-噻唑-2-基胺(170)
在(NaH60％在矿物油中，169毫克，4.23毫摩尔)在DME(10毫升)中的悬浮液中，加入2-羟基吡啶(366毫克，3.85毫摩尔)。[观察到氢气释放]。然后，加入粉状K2CO3(2.31克，19.2毫摩尔)，然后逐份加入2-氨基-5-溴噻唑氢溴酸盐(1.00克，3.85毫摩尔)。将混合物在搅拌下回流16小时，并使其冷却至室温，用水骤冷，并在水和EtOAc之间分相。将水层用EtOAc萃取，并将有机相用HCl 1N萃取。将酸性萃取液用饱和NaHCO3中和并将沉淀物首先用EtOAc，然后用MeOH/CHCl3(20∶85)萃取。将合并的有机萃取液经MgSO4干燥，并在真空中浓缩。通过添加MeOH/CHCl3(5∶95)混合物，使残留物结晶，制得标题化合物170(21毫克，3％)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：9.05(dd，J＝7.2，2.0Hz，1H)，8.70(ddd，J＝9.2，6.7，2.2Hz，1H)，8.44(s，1H)，7.73(d，J＝8.8Hz，1H)，7.59(bs，2H)，7.58(td，J＝6.8，1.4Hz，1H).m/z：194.2(MH+)。
步骤2：[2-(4-{[5-(吡啶-3-基氧基)-噻唑-2-基氨基]-甲基}-苯甲酰基氨 基)-苯基]-氨基甲酸叔丁酯(173)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)中所述用于还原性胺化的程序，使化合物170与化合物128(专利申请WO03/024448中描述)反应，制得标题化合物173(46％收率)。1H NMR：(acetone-d6)δ(ppm)：9.66(s，1H)，8.30(s，1H)，7.97(d，J＝8.2Hz，2H)，7.79(ddd，J＝7.0，2.0，0.6Hz，1H)，7.68(dd，J＝7.6，1.6Hz，1H)，7.60(dd，J＝7.8，1.8Hz，1H)，7.55(d，J＝8.2Hz，2H)，7.45(ddd，J＝9.4，6.7，2.0Hz，1H)，7.27(s，1H)，7.21(td，J＝7.4，1.8Hz，1H)，7.16(dt，J＝7.4，1.8Hz，1H)，6.50(d，J＝9.2Hz，1H)，6.33(td，J＝6.7，1.4Hz，1H)，4.67(s，2H)，1.99(s，9H).m/z：518.5(MH+)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-{[5-(吡啶-2-基氧基)-噻唑-2-基氨基]-甲基}- 苯甲酰胺(178)
按照反应方案28，步骤5(实施例68)中所述用于Boc裂解的程序，使用化合物171为原料，制得标题化合物178(82％收率)。1H NMR：(acetone-d6)δ(ppm)：8.00(d，J＝8.4Hz，2H)，7.82(dd，J＝6.3，1.4Hz，1H)，7.56(d，J＝8.2Hz，2H)，7.46(ddd，J＝13.7，6.7，2.2Hz，1H)，7.30(d，J＝6.7Hz，1H)，7.28(s，1H)，6.99(td，J＝13.7，7.2Hz，1H)，6.87(dd，J＝6.7，1.2Hz，1H)，6.67(t，J＝7.2Hz，1H)，6.49(d，J＝8.8Hz，1H)，6.34(td，J＝6.7，5.3Hz，1H)，4.69(s，2H).m/z：434.4(MH+)。
实施例90
N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-吡啶-3-基-噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(179) 步骤1：4-吡啶-3-基-噻唑-2-基胺(172)
按照J.Heterocycl.Chem.，1970，7，(1137-1141)中描述的程序获得标题化合物172(94％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：8.94(dd，J＝2.3，0.8Hz，1H)，8.41(dd，J＝4.7，1.6Hz，1H)，8.18(dt，J＝8.6，1.6Hz，1H)，7.43(ddd，J＝9.0，3.9，0.8Hz，1H)，7.03(s，1H).m/z：178.1(MH+)。
步骤2：4-[(4-吡啶-3-基-噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酸甲酯(174)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)中所述用于还原性胺化的程序，使用化合物172为原料，制得标题化合物174(33％收率)。1H NMR：(Acetone-d6)δ(ppm)：9.07(dd，J＝2.3，0.8Hz，1H)，8.45(dd，J＝4.7，1.6Hz，1H)，8.16(dt，J＝8.6，1.6Hz，1H)，7.98(d，J＝8.6Hz，2H)，7.60(d，J＝8.6Hz，2H)，7.52-7.49(m，1H)，7.34(ddd，J＝7.8，4.7，0.8，1H)，7.14(s，1H)，4.76(s，2H)，3.87(s，3H).m/z：326.3(MH+)。
步骤3：4-[(4-吡啶-3-基-噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酸(176)
按照反应方案1，步骤4(实施例1)中所述用于水解的程序，使用化合物174为原料，制得标题化合物176(27％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：8.99(dd，J＝2.0，0.8，1H)，8.42(dd，J＝4.7，1.6Hz，1H)，8.23(t，J＝5.9Hz，1H)，8.11(dt，J＝8.2，2.0Hz，1H)，7.76(d，J＝8.2Hz，2H)，7.36(ddd，J＝7.8，4.7，0.8Hz，1H)，7.23(d，J＝8.2Hz，2H)，7.21(s，1H)，7.47(d，J＝5.5Hz，2H).m/z：312.3(MH+)。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-吡啶-3-基-噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰 胺(179)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物176为原料，制得标题化合物179(94％收率)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)：10.00(s，1H)，9.00(dd，J＝3.1，0.8Hz，1H)，8.43(dd，J＝4.7，1.6Hz，1H)，8.33(t，J＝6.3Hz，1H)，8.11(dt，J＝7.8，2.3Hz，1H)，7.89(d，J＝8.6Hz，2H)，7.62(dd，J＝5.9，3.5Hz，1H)，7.50(d，J＝8.6Hz，2H)，7.37(dd，J＝7.8，4.7Hz，1H)，7.26(dd，J＝5.5，3.5Hz，1H)，7.24(s，1H)，4.56(d，J＝5.9Hz，2H).m/z：402.1(MH+)。
反应方案38
Figure A20058001611201551
      化合物   实施例            X     Y
  181，184，188，192     91     (CH3)2NCH2CH2O-     F
  182，185，189，193     92     CH3O-     CH3O-
  183，186，190，194     93     F     F
  191，195     94     Cl     F
实施例91
N-(2-氨基-苯基)-4-[6-(2-二甲基氨基-乙氧基)-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基硫 烷基甲基]-苯甲酰胺(192)
步骤1：5-(2-二甲基氨基-乙氧基)-4-氟-2-硝基-苯胺(180)
在火焰干燥的圆底烧瓶中装入4，5-二氟-2-硝基苯胺(2.00克，11.49毫摩尔)和N，N-二甲基乙醇胺。加入吡啶(44毫升)，然后缓慢加入NaH(60％，在矿物油中，965毫克，24.1毫摩尔)。将混合物置于氮气氛下，在室温下搅拌16小时，并用H2O骤冷。在真空中去除溶剂，并使残留物在H2O和EtOAc之间分相。将有机层用HCl 1N萃取两次，将合并的酸性萃取液用饱和NaHCO3中和以形成沉淀物，使其静置过夜，过滤收集并使用MeOH/CHCl3在提高极性(10∶90至15∶85)的情况下通过快速色谱法提纯，制得标题化合物180(1.30克，47％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：7.76(d，J＝11.7Hz，1H)，6.53(d，J＝7.4Hz，1H)，4.19(t，J＝5.5Hz，2H)，2.84(t，J＝5.5Hz，2H)，2.37(s，6H).m/z：244.2(MH+)。
步骤2：4-(2-二甲基氨基-乙氧基)-5-氟-苯-1，2-二胺(181)
将中间体180(220毫克，0.904毫摩尔)在乙酸(3.6毫升)中的溶液脱气并放置在氮气氛下。加入催化量的Pd(OH)2，并将黑色混合物在室温下氢化(1大气压)16小时，通过塞里塑料垫过滤并用MeOH漂洗。将滤液在真空中在80℃浓缩以作为与AcONHEt3的混合物制得标题化合物181(252毫克，75％)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：6.54(d，J＝7.8Hz，1H)，6.51(d，J＝12.3Hz，1H)，4.21(t，J＝5.1Hz，2H)，3.40(t，J＝5.1Hz，2H)，2.89(s，6H).m/z：214.1(MH+)。
步骤3：6-(2-二甲基氨基-乙氧基)-5-氟-1H-苯并咪唑-2-硫醇(184)
按照J.Med.Chem.，1998，63，977-983中所述的程序，以化合物181为原料，制得标题化合物184(96％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：7.16(d，J＝1.2Hz，0.5H)，7.07(d，J＝10.4Hz，1H)，7.04(d，J＝7.2Hz，0.5H)，4.37(t，J＝4.9Hz，2H)，3.50(t，J＝5.1Hz，2H)，2.92(s，6H).m/z：256.2(MH+)。
步骤4：4-[6-(2-二甲基氨基-乙氧基)-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲 基]-苯甲酸(188)
按照反应方案27，步骤1(实施例66和67)中所述用于烷基化的程序，使化合物184与□-溴-甲苯酸反应，制得标题化合物188(100％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：12.65(s，1H)，7.92(s，1H)，7.83(d，J＝8.2Hz，2H)，7.51(d，J＝8.0Hz，2H)，7.30-7.27(m，1H)，4.58(s，2H)，4.40(t，J＝4.9Hz，2H)，3.54(t，J＝4.9Hz，2H)，2.88(s，6H).m/z：390.2(MH+)。
步骤5：N-(2-氨基-苯基)-4-[6-(2-二甲基氨基-乙氧基)-5-氟-1H-苯并咪唑 -2-基硫烷基甲基]-苯甲酰胺(192)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物188为原料，制得标题化合物192(30％收率)。1H NMR：(丙酮-d6)δ(ppm)：9.02(bs，1H)，7.95(d，J＝8.0Hz，2H)，7.61(d，J＝8.0Hz，2H)，7.27(d，J＝7.6Hz，1H)，7.28-7.10(m，2H)，6.99(td，J＝8.0，1.6Hz，1H)，6.86(dd，J＝7.8，1.2Hz，1H)，6.66(t，J＝8.8Hz，1H)，4.65(s，2H)，4.63(bs，2H)，4.22(bs，2H)，2.87(bs，2H)，2.41(s，6H).m/z：480.4(MH+)。
实施例92
N-(2-氨基-苯基)-4-(5，6-二甲氧基-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲基)-苯甲 酰胺(193)
步骤1：4，5-二甲氧基-苯-1，2-二胺(182)
将1，2-二甲氧基-4，5-二硝基苯(500毫克，2.19毫摩尔)在MeOH(10毫升)中的溶液脱气并放置在氮气氛下。将催化量的载Pd木炭(10％)用MeOH(1毫升)骤冷，并作为在MeOH中的悬浮液一下转移到溶液中。加入乙酸(1.5毫升)，并将黑色混合物置于H2气氛(1大气压)下，在室温下搅拌16小时。将混合物通过塞里塑料垫过滤并用MeOH漂洗。将滤液在真空中在80℃浓缩以制得标题化合物182(不能从产物中去除残余乙酸)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：6.23(s，2H)，3.56(s，6H).m/z：169.3.(MH+)。
步骤2：5，6-二甲氧基-1H-苯并咪唑-2-硫醇(185)
按照J.Med.Chem.，1998，63，977-983中所述的程序，以化合物182为原料，制得标题化合物185。(对于2个步骤为44％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：12.29(s，2H)，6.71(s，2H)，3.74(s，6H).m/z：211.2(MH+)。
步骤3：4-(5，6-二甲氧基-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲基)-苯甲酸(189)
按照反应方案27，步骤1(实施例66和67)中所述用于烷基化的程序，使化合物185与□-溴-甲苯酸反应，制得标题化合物189(60％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：7.83(d，J＝8.2Hz，2H)，7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，7.06(s，2H)，4.61(s，2H).m/z：345.2(MH+)。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-(5，6-二甲氧基-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲 基)1苯甲酰胺(193)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物189为原料，制得标题化合物193(148毫克，59％收率)。1HNMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：12.30(s，1H)，9.55(s，1H)，7.85(d，J＝8.0Hz，2H)，7.48(d，J＝8.4Hz，2H)，7.10(d，J＝7.8Hz，2H)，6.92(td，J＝7.2，1.6Hz，1H)，6.91-6.85(bs，1H)，6.73(dd，J＝8.2，1.2Hz，1H)，6.55(td，J＝7.8，1.6Hz，1H)，4.85(s，2H)，4.52(s，2H)，3.74(s，6H).m/z：435.5(MH+)。
实施例93
N-(2-氨基-苯基)-4-(5，6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲基)-苯甲酰胺 (194)
步骤1：4，5-二氟-苯-1，2-二胺(183)
按照与实施例92，步骤1(反应方案38)所述相同的程序，但是将1，2-二甲氧基-4，5-二硝基苯换成4，5-二氟-2-硝基苯胺，获得标题化合物183(97％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：6.53(t，J＝10.0Hz，2H).m/z：145.3(MH+)。
步骤2：5.6-二氟-1H-苯并咪唑-2-硫醇(186)
按照J.Med.Chem.，1998，63，977-983中所述的程序，以化合物183为原料，制得标题化合物186(60％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：7.48(s，0.5H)，7.13(d，J＝8.4Hz，1H)，7.11(d，J＝6.4Hz，1H)，1.99(s，1.5H).m/z：187.1(MH+)。
步骤3：4-(5，6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲基)-苯甲酸(190)
按照反应方案27，步骤1(实施例66和67)中所述用于烷基化的程序，使化合物186与□-溴-甲苯酸反应，制得标题化合物190(59％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.07(s，0.5H)，7.84(d，J＝8.0Hz，2H)，7.68(s，1.5H)，7.52(d，J＝8.2Hz，2H)，5.53-5.45(m，2H)，4.60(s，2H).m/z：321.2(MH+)。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-(5，6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲基)-苯 甲酰胺(194)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物186为原料，制得标题化合物194(39％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.59(s，1H)，7.88(d，J＝8.0Hz，2H)，7.54(d，J＝8.0Hz，2H)，7.55-7.40(m，2H)，7.13(d，J＝7.6Hz，1H)，6.95(t，J＝7.6Hz，1H)，6.76(d，J＝7.4Hz，1H)，6.58(t，J＝7.4Hz，1H)，4.61(s，2H).m/z：411.4(MH+)。
实施例94
N-(2-氨基-苯基)-4-(5-氯-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲基)-苯甲酰胺 (195)
步骤1：4-(6-氯-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲基)-苯甲酸甲酯(187)
按照反应方案27，步骤1(实施例66和67)中所述用于烷基化的程序，使6-氯-5-氟苯并咪唑-2-硫醇与4-(溴甲基)苯甲酸甲酯反应，制得标题化合物187(54％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：(parent，missingprotons：7.85(d，J＝8.4Hz，2H)，7.55(d，J＝8.4Hz，2H)，3.80(s，2H)，3.34(s，3H).m/z：351.2(MH+)。
步骤2：4-(5-氯-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲基)-苯甲酸(191)
按照反应方案1，步骤4(实施例1)中所述用于水解的程序，使用化合物187为原料，制得标题化合物191(83％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：7.88(d，J＝8.2Hz，2H)，7.67(d，J＝6.8Hz，1H)，7.55(d，J＝8.2Hz，2H)，7.53(d，J＝6.8Hz，1H)，4.65(s，2H).m/z：337.2(MH+)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-(5-氯-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲基)- 苯甲酰胺(195)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物191为原料，制得标题化合物195(62％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：12.87(bs，1H)，9.56(s，1H)，7.87(d，J＝8.0Hz，2H)，7.62-7.57(m，1H)，7.53(d，J＝8.2Hz，2H)，7.52-7.48(m，1H)，7.10(d，J＝7.8Hz，1H)，6.92(td，J＝8.0，1.6Hz，1H)，6.73(dd，J＝7.8，1.4Hz，1H)，6.55(t，J＝7.4Hz，1H)，4.86(s，2H)，4.61(s，2H).m/z：427.4(MH+)。
反应方案39
Figure A20058001611201601
实施例95
N-(2-羟基-苯基)-4-(5-甲氧基-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲基)-苯甲酰胺 (199)
步骤1：2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-苯胺(196)
在2-氨基苯酚(3.00克，27.5毫摩尔)在DCM(150毫升)中的搅拌溶液中，加入四丁基二甲基甲硅烷基氯(4.35毫升，28.9毫摩尔)和Et3N(4.02毫升，28.9毫摩尔)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将有机相用水和盐水洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残留物通过快速色谱法(5％AcOEt在己烷中)提纯以制得标题化合物196(5.56克，91％收率)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)：7.61(s，1H)，7.16(s，1H)，6.58(s，2H)，6.45(s，1H)，6.09(s，1H)，3.97(s，3H)，3.93(s，3H)，3.84(s，3H)，3.83(s，6H).m/z：224.1(MH+)。
步骤2：N-[(2-叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-苯基]-4-(5-甲氧基-1H-苯并咪 唑-2-基硫烷基甲基)-苯甲酰胺(198)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使化合物197(专利申请WO 03/024448中描述)与化合物196原料，制得标题化合物198。m/z：520.3(MH+)。
步骤3：N-(2-羟基-苯基)-4-(5-甲氧基-1H-苯并咪唑-2-基硫烷基甲基)-苯 甲酰胺(199)
在化合物198(313毫克，0.600毫摩尔)在THF(15毫升)中的搅拌溶液中，加入在THF中的TBAF 1M(1.20毫升，1.20毫摩尔)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将溶剂蒸发并将残留物溶于EtOAc，用饱和NH4Cl和盐水洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩以产生白色粉末状的标题化合物199(150毫克，61％收率)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：9.72(bs，1H)，9.49(bs，1H)，7.90(d，J＝8.1Hz，2H)，7.63(d，J＝8.1Hz，1H)，7.58(d，J＝8.8Hz，2H)，7.51(d，J＝9.5Hz，1H)，7.08-6.89(m，4H)，6.81(dd，J＝7.0，7.0Hz，1H)，4.76(s，2H)，3.81(s，3H).m/z：406.2(MH+)。
实施例96
N-(2-羟基-苯基)-4-{[6-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯并噻唑-2-基氨基]-甲 基}-苯甲酰胺(201)
按照与实施例95中所述相同的程序，将化合物197换成化合物200(专利申请WO03/024448中描述)并在最后步骤中使用1N HCl代替TBAF，制得标题化合物201(26％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：7.93(d，J＝8.5Hz，2H)，7.79(d，J＝7.5Hz，1H)，7.55(d，J＝8.0Hz，2H)，7.33(d，J＝8.5Hz，1H)，7.23(s，1H)，7.04(t，J＝7.0Hz，1H)，6.92-6.85(m，3H)，7.40(s，2H)，4.14-4.12(m，2H)，3.72-3.70(m，4H)，2.81-2.79(m，2H)，2.62-2.60(m，4H).m/z：505.5(MH+)。
反应方案40
实施例97
N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(吡啶-3-基氨基)-吡咯烷-1-基]-苯甲酰胺(206) 步骤1：4-(3-羟基-吡咯烷-1-基)-苯甲酸叔丁酯(202)
按照J.Heterocycl.Chem.，1994，31，1241中所述的程序获得标题化合物202(91％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：7.77(d，J＝9.0Hz，2H)，6.54(d，J＝9.0Hz，2H)，4.57-4.53(m，1H)，3.57-3.50(m，2H)，3.45(td，J＝9.4，3.3Hz，1H)，3.29(dd，J＝12.7，1.6Hz，1H)，2.22-2.13(m，1H)，2.10-2.03(m，1H)，1.59(s，9H).m/z：264.4(MH+)。
步骤2：4-(3-氧-吡咯烷-1-基)-苯甲酸叔丁酯(203)
按照J.Heterocycl.Chem.，1994，31，1241中所述的程序获得标题化合物203(73％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：7.74(d，J＝8.8Hz，2H)，6.67(d，J＝9.0Hz，2H)，3.75(s，2H)，3.69(t，J＝7.4Hz，2H)，2.72(t，J＝7.6Hz，2H)，1.52(s，9H).m/z：262.4(MH+)。
步骤3：4-[3-(吡啶-3-基氨基)-吡咯烷-1-基]-苯甲酸叔丁酯(204)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)中所述用于还原性胺的程序并使用3-氨基吡啶代替6-(吡啶-3-基)吡啶-2-胺(11)(76％收率)。1HNMR：(acetone-d6)δ(ppm)：8.08(d，J＝2.7Hz，1H)，7.85(dd，J＝4.3，1.6Hz，1H)，7.79(d，J＝9.0Hz，2H)，7.09(ddd，J＝8.2，4.5，0.8Hz，1H)，7.06(ddd，J＝8.2，2.7，1.6Hz，1H)，6.58(d，J＝9.0Hz，2H)，4.33(quint，J＝4.9Hz，1H)，3.79(dd，J＝10.2，6.1Hz，1H)，3.60-3.54(m，1H)，3.51-3.45(m，1H)，3.32(dd，J＝7.2，4.1Hz，1H)，2.44(sext.，J＝7.6Hz，1H)，2.18-2.11(m，1H)，1.56(s，9H).m/z：340.4(MH+)。
步骤4：4-[3-(吡啶-3-基氨基)-吡咯烷-1-基]-苯甲酸(205)
按照反应方案28，步骤5(实施例68)中所述用于Boc裂解的程序，使用化合物204为原料，制得标题化合物205(96％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)d(ppm)：8.09(d，J＝2.0Hz，1H)，8.02(d，J＝3.5Hz，1H)，7.74(d，J＝8.8Hz，2H)，7.68-7.62(m，2H)，7.29-7.26(m，1H)，6.57(d，J＝8.8Hz，2H)，4.29-4.26(m，1H)，3.71(dd，J＝10.6，5.7Hz，1H)，3.51-3.42(m，2H)，3.23(dd，J＝10.6，3.5Hz，1H)，2.35(sext.，J＝7.2Hz，1H)，2.06-1.98(m，1H).m/z：284.4(MH+)。
步骤5: N-(2-氨基-苯基)-4[3-(吡啶-3-基氨基)-吡咯烷-1-基]-苯甲酰胺 (206)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物205为原料，制得标题化合物206(10％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：8.14(s，1H)，7.96(d，J＝2.3Hz，1H)，7.86(d，J＝9.0Hz，2H)，7.77(dd，J＝4.7，1.4Hz，1H)，7.61-7.58(m，1H)，7.25(dd，J＝6.1，3.1Hz，1H)，7.18(ddd，J＝8.4，4.7，0.8Hz，1H)，7.15(dd，J＝8.0，1.6Hz，1H)，7.11(ddd，J＝8.2，2.7，1.4Hz，1H)，7.05(td，J＝7.2，1.4Hz，1H)，6.89(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，6.76(td，J＝7.6，1.4Hz，1H)，6.64(d，J＝8.8Hz，2H)，4.26(quint，J＝4.3Hz，1H)，3.78(dd，J＝10.0，6.1Hz，1H)，3.62-3.56(m，1H)，3.53-3.47(m，1H)，3.31-3.29(m，1H)，2.42(sext.，J＝7.4Hz，1H)，2.12-2.08(m，1H).m/z：374.4(MH+)。
反应方案41
实施例98
4-(2-氨基-苯并噻唑-6-基氧基甲基)-N-(2-氨基-苯基)-苯甲酰胺(209) 步骤1：{2-[4-(2-氨基-苯并噻唑-6-基氧基)-苯甲酰基氨基]-苯基}-氨基甲 酸叔丁酯(208)
按照与用于化合物133的合成(反应方案32)相同的程序，使用化合物207(专利申请WO03/024448中描述)代替二甲基氨基-乙醇并将化合物129(反应方案32)换成化合物127(在反应方案32中也提到)，制得标题化合物208(43％收率)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：9.81(s，1H)，8.66(s，1H)，7.94(d，J＝8.4Hz，2H)，7.58(d，J＝8.4Hz，2H)，7.51(d，J＝8.2Hz，2H)，7.37(d，J＝2.5Hz 1H)，7.23(d，J＝8.8Hz，1H)，7.18(td，J＝7.8，1.8Hz，1H)，7.13(td，J＝7.6，1.6Hz，1H)，6.89(dd，J＝8.6，2.5Hz，1H)，5.18(s，2H)，1.43(s，9H).m/z：491.4(MH+)。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(6-甲氧基-苯并噻唑-2-基)-脲基]-苯甲酰胺 (209)
按照反应方案28，步骤5(实施例68)中所述用于Boc裂解的程序，使用化合物208为原料，制得标题化合物209(28％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.63(s，1H)，7.96(d，J＝8.2Hz，2H)，7.54(d，J＝8.2Hz，2H)，7.37(d，J＝2.5Hz，1H)，7.23(s，2H)，7.21(d，J＝8.8Hz，1H)，7.14(d，J＝8.0Hz，1H)，6.95(td，J＝8.8，2.3Hz，1H)，6.89(dd，J＝8.6，2.5Hz，1H)，6.75(d，J＝6.7Hz，1H)，6.57(t，J＝6.7Hz，1H)，5.16(s，2H)，4.89(s，2H).m/z：391.4(MH+)。
反应方案42
Figure A20058001611201641
Figure A20058001611201642
Figure A20058001611201651
实施例99：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-甲磺酰基-苯基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(212a) 步骤1：4-[(4-甲磺酰基-苯基氨基)-甲基]-苯甲酸(211a)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)中所述的程序，使4-甲烷磺酰基-苯胺(210a)与4-甲酰基-苯甲酸反应，由此获得标题化合物。1H NMR，(DMSO)δ(ppm)：7.87(d，J＝7.6Hz，2H)，7.50(d，J＝8.2Hz，2H)，7.41(d，J＝7.6Hz，2H)，6.64(d，J＝8.0Hz，2H)，4.42(s，2H)，3.00(s，3H).LRMS：(calc.)305.4；(obt.)304.3(MH)+。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-甲磺酰基-苯基氨基)-甲基]-苯甲酰胺 (212a)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述的程序使酸211a与1，2-苯二胺反应，由此获得化合物。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.57(bs，1H)，7.90(d，J＝8.4Hz，1H)，7.50(d，J＝8.2Hz，2H)，7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，7.35(t，J＝6.0Hz，1H)，7.11(d，J＝7.6Hz，1H)，6.93(dt，J＝1.6，8.0Hz，1H)，6.73(dd，J＝1.6，8.0Hz，1H)，6.66(d，J＝8.8Hz，2H)，6.55(dt，J＝1.2，7.6Hz，1H)，4.88(bs，2H)，4.43(d，J＝6.0Hz，2H).LRMS：(calc.)395.5；(obt.)396.4(MH)+。
实施例100-113：
使用与对化合物212a，实施例99(反应方案42，表1)所述相同的程序，以芳胺210b-o为原料经中间体酸211b-o(反应方案42)制备实施例100-113(化合物212b-o)。
表6
Figure A20058001611201661
Figure A20058001611201662
Figure A20058001611201701
反应方案43
实施例114：
N-(2-氨基-苯基)-4-羟基甲基-苯甲酰胺(213)
在包含4-甲酰基苯甲酸(300毫克，1.8毫摩尔)的烧瓶中加入二氯化二丁基锡(55毫克，0.18毫摩尔)，然后加入THF(5毫升)和苯基硅烷(0.187毫升，1.8毫摩尔)。将所得混合物在室温在氮气下搅拌过夜，浓缩，并不经进一步提纯而按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述的程序用于下一步骤(与邻苯二胺偶联)，制得化合物213(378毫克，78％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.63(s，1H)，7.94(d，J＝8.0Hz，2H)，7.43(d，J＝8.5Hz，2H)，7.16(d，J＝7.5Hz，1H)，6.96(t，J＝7.0Hz，1H)，6.78(d，J＝6.5，1H)，6.59(dd，J＝7.0，7.5Hz，1H)，4.88(s，1H)，4.57(s，2H).LRMS：(calc.)242.3；(obt.)243.4(MH)+。
反应方案44
实施例115：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(3-氟-4-吗啉-4-基-苯基氨基)-甲基]-苯甲酰胺 (218a)
步骤1：4-(2-氟-4-硝基-苯基)-吗啉(215a)
在214a(3克，18.85毫摩尔)在DMF(20毫升)中的溶液中，在室温下加入吗啉(1.6毫升，18.85毫摩尔)和K2CO3(10.4克，75.4毫摩尔)。将反应混合物在60℃加热16小时，冷却，过滤，并在真空中浓缩。将残留物通过快速色谱法在硅胶上(用AcOEt/己烷(40∶60)洗脱)提纯，制得白色固体状的标题化合物215a(4.0克，89％收率)。LRMS：226.2(calc.)；227.3(obt.)(MH)+。
步骤2：3-氟-4-吗啉-4-基-苯胺(216a)
按照反应方案38，步骤1(实施例92)中所述的程序进行硝基化合物215a的催化氢化，从而获得标题化合物216a(92％收率)。LRMS：196.2(calc.)；197.2(obt.)(MH)+。
步骤3：4-[(3-氟-4-吗啉-4-基-苯基氨基)-甲基]-苯甲酸(217a)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)中所述的程序通过4-甲酰基苯甲酸酯与胺216a的反应获得标题化合物226a(91％收率)。LRMS：330.4(calc.)；331.5(obt.)(MH)+。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-[(3-氟-4-吗啉-4-基-苯基氨基)-甲基]-苯甲酰 胺(218a)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述的程序使酸217a与1，2-苯二胺反应，获得化合物218a(40％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.57(s，1H)，7.91(d，J＝7.9Hz，2H)，7.44(d，J＝7.9Hz，2H)，7.14(d，J＝7.5Hz，1H)，6.95(t，J＝7.5；7.0Hz，1H)，6.82-6.74(m，2H)，6.57(dd，J＝7.0；7.5Hz，1H)，6.37-6.30(m，2H)，4.86(bs，2H)，4.30(d，J＝5.71Hz，2H)，3.66(bs，4H)，2.80(bs，4H).LRMS：(calc.)420.2；(obt.)421.2(MH)+。
实施例116-117(化合物218b-c)：
使用如对化合物218a所述相同的程序(实施例116，反应方案44)(表3)制备实施例116-117(化合物218b-c)。
表7
Figure A20058001611201731
反应方案45
Figure A20058001611201741
实施例118
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-甲氧基-3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基氨基]-甲 基}-苯甲酰胺(222)
步骤1：4-甲氧基-3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯胺(220)
在室温下，在4-(2-氯-乙基)吗啉(2.67克，14.4毫摩尔)在溶剂混合物吡啶(5毫升)和DMF(15毫升)中的溶液中，加入胺219(2.00克，14.4毫摩尔)和K2CO3(7.96克，57.6毫摩尔)。将反应混合物在60℃加热过夜，冷却，过滤并在真空中浓缩。将残留物通过快速色谱法在硅胶上(用70∶30 AcOEt/己烷洗脱)提纯以制得标题化合物229(3.6克，100％收率)。LRMS：252.3(calc.)；253.3(obt.)(MH)+。
步骤2：4-{[4-甲氧基-3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基氨基]-甲基}-苯甲酸 (221)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)中所述的程序，使4-甲酰基苯甲酸酯与胺220反应，以获得标题化合物221(1.9克，99％收率)。LRMS：386.4(calc.)；387.4(obt.)(MH)+。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-甲氧基-3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基氨 基]-甲基}-苯甲酰胺(222)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述的程序将酸221(5.07毫摩尔)与1，2-苯二胺(5.07毫摩尔)偶联，制得标题化合物222(260毫克，11％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.59(s，1H)，7.92(d，J＝7.5Hz，2H)，7.45(d，J＝7.9Hz，2H)，7.15(d，J＝7.9Hz，1H)，6.96(dd，J＝8.5；6.5Hz，1H)，6.77(d，J＝8.5Hz，1H)，6.65(d，J＝8.5Hz，1H)，6.58(t，J＝7.5Hz，1H)，6.31(d，J＝2.5Hz，1H)，6.03(d，J＝8.5Hz，1H)，4.86(bs，2H)，4.30(d，J＝5.5Hz，2H)，3.95(dd，J＝5.9，5.5Hz，2H)，3.59(s，3H)，3.56(bs，4H)，2.63(bs，2H)，2.44(bs，4H)..LRMS：476.6(calc.)；477.6(obt.)(MH)+。
反应方案46
实施例119：
N-(2-氨基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基-苯基氨磺酰)-苯甲酰胺(224) 步骤1：N-(3，4-二甲氧基-苯基)-4-碘-苯磺酰胺(223)
按照专利申请No WO 01/38322 A1所述的程序通过使3，4-二甲氧基-苯胺与4-碘-苯磺酰基氯反应，制得标题化合物223(80％收率)。LRMS：419.2(计算值)；420.2(实测值)(MH)+。
步骤2：N-(2-氨基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基-苯基氨磺酰)-苯甲酰胺(224)
使223(705毫克，1.7毫摩尔)、1，2-苯二胺(199毫克，1.84毫摩尔)、Pd(OAc)2(0.25毫摩尔，15％)和1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁(160毫克，0.29毫摩尔)悬浮在脱气DMF(10毫升)中，用Et3N(700微升，5.04毫摩尔)处理，在70℃在CO气氛(气球)下加热18小时。在真空中蒸发DMF之后，将残留物通过快速色谱法(洗脱剂AcOEt∶己烷，3∶1)提纯，制得标题化合物224(100毫克，14％收率)。1H-NMR(CD3OD-d4)，δ(ppm)：10.05(s，1H)，9.76(s，1H)，8.06(d，J＝8.3Hz，2H)，7.79(d，J＝7.8Hz，2H)，7.11(bs，1H)，6.94(bs，1H)，6.77-6.69(m，3H)，6.54(bs，2H)，4.91(bs，2H)，3.62(s，3H)。
反应方案47
Figure A20058001611201761
实施例120：
N-(2-氨基-苯基)-4-[4-(4-甲氧基-苯基)-嘧啶-2-基硫烷基甲基]-苯甲酰胺 (228a)
步骤1：4-[4-(4-甲氧基-苯基)-嘧啶-2-基硫烷基甲基]-苯甲酸甲酯(226a)
在4-(4-甲氧基-苯基)-嘧啶-2-硫醇(225a)(1.00克，4.58毫摩尔)在DMF(30毫升)中的溶液中，加入4-溴甲基苯甲酸甲酯(1.05克，4.58毫摩尔)。将混合物在60℃加热1小时并蒸发至干以形成化合物226a，其不经提纯即用于下面的步骤。LRMS＝366.4(计算值)，367.4(实测值)。步骤2：4-[4-(4-甲氧基-苯基)-嘧啶-2-基硫烷基甲基]-苯甲酸(227a)
在室温下，在226a(4.58毫摩尔)在THF(20毫升)和MeOH(20毫升)中的搅拌溶液中加入LiOH-H2O(960毫克，22.9毫摩尔)在水(50毫升)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌18小时，在水中稀释并用1N HCl酸化(pH 5-6)以形成沉淀物，将其过滤收集，用水洗涤并干燥以制得标题化合物227a(1.64克，99％收率)。LRMS(计算值)：352.4，(实测值)：353.4。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-[4-(4-甲氧基-苯基)-嘧啶-2-基硫烷基甲基]- 苯甲酰胺(228a)
通过按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述的程序使酸227a与1，2-苯二胺偶联，获得标题化合物228a(80％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.57(bs，1H)，8.59(d，J＝5.5Hz，2H)，8.16(d，J＝7.0Hz，2H)，7.88(d，J＝8.2Hz，2H)，7.70(d，J＝5.0Hz，1H)，7.57(d，J＝8.2，2H)，7.12-7.07(m，2H)，6.93(dd，J＝8.2，7.0Hz，1H)，6.73(dd，J＝8.2，1.6Hz，1H)，6.55(dt，J＝8.6，1.1Hz，1H)，4.86(bs，2H)，4.55(s，2H)，3.83(s，3H)LRMS：(计算值)442.5；(实测值)443.5(MH)+。
实施例121-125：
使用与对化合物228a，实施例121(反应方案47，表1)所述相同的程序，以苯硫酚225b-f为原料经由中间体226b-f和227b-f(反应方案47)制备实施例121-125(化合物228b-f)。
表8
Figure A20058001611201781
Figure A20058001611201782
反应方案48
实施例126：
4-[4(2氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基氨基]-2-甲基硫烷基-嘧啶-5-羧酸酰 胺(232a)
步骤1：4-[(5-氰基-2-甲基硫烷基-吡啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酸甲酯 (230a)
在室温下，在4-氨基-2-甲基硫烷基-吡啶-5-腈(229a)(200毫克，1.2毫摩尔)在DME(10毫升)中的溶液中，加入4-溴甲基苯甲酸甲酯(274毫克，1.2毫摩尔)和K2CO3(663毫克，4.8毫摩尔)。将反应混合物在100℃加热5小时，在60℃过夜，冷却，过滤并在真空中浓缩。粗产物不经进一步提纯即用于下一反应。LRMS：314.3(计算值)；315.3(实测值)(MH)+。
步骤2：4-[(5-氨基甲酰基-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酸 (231a)
按照实施例121，步骤2(反应方案47)中所述的程序，但是将化合物226a换成化合物230a，获得标题化合物231a(227毫克，60％收率)。LRMS(计算值)：318.3，(实测值)：319.3。
步骤3：4-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基氨基]-2-甲基硫烷基-嘧啶-5- 羧酸酰胺(232a)
通过按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述程序的酸231a与1，2-苯二胺的偶联反应获得标题化合物232a(80％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.39(bs，1H)，9.35(bs，2H)，8.32(s，1H)，7.71(d，J＝8.4Hz，2H)，7.22(d，J＝8.2Hz，2H)，6.94(d，J＝7.6Hz，1H)，6.75(dt，J＝1.4，8.2，1H)，6.56(dd，J＝1.5，8.0Hz，1H)，6.39(t，J＝7.4Hz，1H)，4.54(s，2H)，2.30(s，3H)。LRMS：(计算值)408.5；(实测值)409.5(MH)+。
实施例127：
4-[4-(2-氨基-苯基氨基甲酰基)-苄基氨基]-2-吡啶-3-基-嘧啶-5-羧酸酰胺 (232b)
按照与对化合物232a，实施例126(反应方案48)所述相同的程序，以氨基腈229b为原料，经中间体230b和231b制备标题化合物232b。1HNMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.48(bs，3H)，8.86(s，1H)，8.74-8.73(m，1H)，8.64-8.61(m，1H)，8.19(bs，1H)，7.98(d，J＝8.8Hz，2H)，7.71(bs，1H)，7.60-7.57(m，3H)，7.18(d，J＝8.4Hz，1H)，7.00(t，J＝6.8Hz，1H)，6.81(d，J＝8.8Hz，1H)，6.63(t，J＝8.0Hz，1H)，4.95(d，J＝6.8Hz，2H)。
反应方案49
Figure A20058001611201811
实施例128：
N-(2-氨基苯基)-4-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺(237) 步骤1：4-[4-(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-苯甲酸叔丁酯(235)
在1-(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪(233)(500毫克，2.16毫摩尔)在DMSO中的溶液中，加入4-氟-苯甲酸叔丁酯(466毫克，2.37毫摩尔)(234)和K2CO3(1.2克，11.3毫摩尔)。将混合物在130℃加热16小时，冷却，过滤并在真空中浓缩。将残留物通过快速色谱法(洗脱剂AcOEt-己烷，40∶60至纯AcOEt)提纯，制得标题化合物244(162毫克，18％收率)。LRMS：(计算值)406.4：(实测值)407.4(MH)+。
步骤2：4-[4-(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-苯甲酸(236)
按照反应方案28，步骤5(实施例68)中所述的程序以化合物235为原料，制得标题化合物236(99％收率)。LRMS 350.3(计算值)，351.3(实测值)。
步骤3：N-(2-氨基-苯基)-4-[4-(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-苯甲 酰胺(237)
使酸236与1，2-苯二胺按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述的程序偶联，制得标题化合物237(96％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.43(bs，1H)，8.43(s，1H)，7.93(bs，2H)，7.88(d，J＝8.8Hz，2H)，7.81(dd，J＝2.4，8.8Hz，1H)，7.1 3(d，J＝8.0Hz，1H)，7.04-7.00(m，3H)，6.96(t，J＝7.6Hz，1H)，6.76(d，J＝8.0Hz，1H)，6.58(t，J＝7.6Hz，1H)，4.84(bs，2H)，3.82-3.79(m，4H)，3.44-3.40(m，4H).LRMS：(计算值)440.4；(实测值)441.4(MH)+。
反应方案50
实施例129：
N-(2-氨基-苯基)-4-({3-[3-(1，3-二氧-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-丙氧基]-4-甲 氧基-苯基氨基}-甲基)-苯甲酰胺(239)
步骤1：N-(2-氨基-苯基)-4-({3-[3-(1，3-二氧-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-丙 氧基]-4-甲氧基-苯基氨基}-甲基)-苯甲酰胺(239)
在室温下，在N-(2-氨基-苯基)-4-[(3-羟基-4-甲氧基-苯基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(212e)(586毫克，0.66毫摩尔)在DMF(10毫升)中的溶液中，加入2-(3-溴丙基)-异吲哚-1，3-二酮(238)(176毫克，0.66毫摩尔)和K2CO3(365毫克，2.64毫摩尔)。将反应混合物在100℃加热1小时，然后在60℃加热过夜，冷却，过滤并在真空中浓缩。将残留物通过快速色谱法(从AcOEt-己烷(40∶60)中洗脱)提纯，制得239(168毫克，46％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.57(bs，1H)，7.88(d，J＝8.0Hz，2H)，7.84-7.75(m，4H)，7.44(d，J＝8.0Hz，2H)，7.12(d，J＝7.2Hz，1H)，6.92(t，J＝8.8Hz，1H)，6.75(dd，J＝1.2，7.6Hz，1H)，6.57(d，J＝8.4Hz，2H)，6.27(d，J＝2.4Hz，1H)，6.00-5.93(m，2H)，4.87(s，2H)，4.27(d，J＝6.0Hz，2H)，3.89(dd，J＝5.6，6.0Hz，2H)，3.74(dd，J＝6.4，6.8Hz，2H)，3.42(s，3H)，2.06-2.01(m，2H)。LRMS：(计算值)550.4；(实测值)551.5(MH)+。
反应方案51
Figure A20058001611201831
实施例130：
4-[1-(6-乙酰基-苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基氨基)-乙基]-N-(2-氨基- 苯基)-苯甲酰胺(240)
使用与对化合物212a，实施例99(反应方案42，表1)所述相同的程序，以1-(6-氨基-苯并[1，3]-间二氧杂环戊烯-5-基)-乙酮和4-乙酰基苯甲酸(反应方案51)为原料，制备标题化合物240。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：8.69(s，1H)，7.03(d，J＝7.8Hz，2H)，6.64(d，J＝7.8Hz，2H)，6.29(dd，J＝8.3，7.8Hz，1H)，6.09(t，J＝7.8，7.3Hz，1H)，5.90(d，J＝7.8，1H)，5.72(d，J＝6.8Hz，1H)，5.70(s，1H)，5.16(d，J＝8.8Hz，1H)，4.88(s，1H)，4.84(s，1H)，4.07(bd，1H)，2.30(s，3H)，0.62(d，J＝6.83，3H)。
反应方案52
Figure A20058001611201841
实施例131
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4，5-二甲氧基-2-(3，4，5-三甲氧基-苯甲酰基)-苯基氨 基]-甲基}-苯甲酰胺(245)
步骤1：(4，5-二甲氧基-2-硝基-苯基)-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-甲醇(241)
在氮气氛下的火焰干燥圆底烧瓶中，装入5-碘-1，2，3-三甲氧基苯(2.92克，9.93毫摩尔)，并加入THF(31毫升)。将溶液冷却至-78℃，并逐滴加入t-BuLi在戊烷中的1.5M溶液(13.6毫升，20.57毫摩尔)。将混合物搅拌1小时，并在氮气氛下通过导管转移到6-硝基藜芦醛(2.02克，9.57毫摩尔)在THF(12毫升)中的预冷(-78℃)溶液中。将所得混合物搅拌2小时，并缓慢升温至0℃，用饱和NH4Cl水溶液骤冷并升温至室温。在真空中去除溶剂并使残留物在水和DCM之间分相。将有机层收集并用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并在真空中浓缩。将残留物使用EtOAc/DCM(9∶91)通过快速色谱法提纯，产生标题化合物241(1.46克，40％收率)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)：7.61(s，1H)，7.16(s，1H)，6.58(s，2H)，6.45(s，1H)，6.09(s，1H)，3.97(s，3H)，3.93(s，3H)，3.84(s，3H)，3.83(s，6H).m/z：402.4(MH+)。
步骤2：(4，5-二甲氧基-2-硝基-苯基)-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-甲酮(242)
在中间体241(1.46克，3.84毫摩尔)在无水DCM(38.5毫升)中在0℃的搅拌溶液中依序加入粉状4_分子筛(583毫克)和二铬酸吡啶盐(2.17克，5.77毫摩尔)。将混合物在室温下搅拌15小时。加入更多PDC(290毫克，0.770毫摩尔)，并将混合物再搅拌4小时，然后用醚稀释并通过塞里塑料垫过滤。将滤液浓缩，并使用EtOAc/DCM(7∶93)通过快速色谱法将棕色固体提纯，制得黄色固体状的标题化合物242(551毫克，41％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)：7.72(s，1H)，6.99(s，2H)，6.86(s，1H)，4.06(s，3H)，4.00(s，3H)，3.93(s，3H)，3.84(s，6H).m/z：378.4(MH+)。
步骤3：(2-氨基-4，5-二甲氧基-苯基)-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-甲酮(243)
在中间体199(552毫克，1.46毫摩尔)在EtOH(5.11毫升)、H2O(2.56毫升)和AcOH(5.11毫升)的混合物中的悬浮液中，加入铁粉(653毫克，11.7毫摩尔)，并在该溶液中加入2滴浓HCl。将该混合物剧烈搅拌，同时回流1小时，冷却至室温，并通过塞里塑料垫过滤。将滤液在真空中浓缩并使水性残留物在DCM和H2O之间分相。将有机层用饱和NaHCO3洗涤，经Na2SO4干燥并在真空中浓缩，制得标题化合物243(393毫克，77％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)：7.00(s，1H)，6.88(s，2H)，6.23(s，1H)，3.92(m，6H)，3.88(s，6H)，3.70(s，3H).m/z：348.4(MH+)。
步骤4：4-{[4，5-二甲氧基-2-(3，4，5-三甲氧基-苯甲酰基)-苯基氨基]-甲 基}-苯甲酸(244)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)中所述用于还原性胺化的程序，以化合物243为原料，制得标题化合物244(46％收率)。m/z：482.5(MH+)。
步骤5：N-(2-氨基-苯基)-4-{[4，5-二甲氧基-2-(3，4，5-三甲氧基-苯甲酰基)- 苯基氨基]-甲基}-苯甲酰胺(245)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)中所述用于BOP偶联的程序，使用化合物244为原料，制得标题化合物245(38％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.61(s，1H)，9.24(t，J＝5.7Hz，1H)，7.95(d，J＝8.2Hz，2H)，7.51(d，J＝8.2Hz，2H)7.13(d，J＝8.0Hz，1H)，6.98(s，1H)，6.94(td，J＝7.6，1.2Hz，1H)6.84(s，2H)，6.75(dd，J＝8.0，1.3Hz，1H)，6.57(t，J＝7.2Hz，1H)，6.35(s，1H)，4.89(s，2H)，4.62(d，J＝5.7Hz，2H)，3.79(s，6H)，3.76(s，3H)，3.73(s，3H)，3.54(s，3H).m/z：572.5(MH+)。
实施例132
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4，5-二甲氧基-2-(4-甲氧基-苯甲酰基)-苯基氨基]- 甲基}-苯甲酰胺(246)
按照与对实施例131所述相同的程序，但是将由5-碘-1，2，3-三甲氧基苯与t-BuLi获得的有机锂试剂换成市售格式试剂溴化4-甲氧基苯基镁，获得标题化合物246(8.4％总收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.62(s，1H)，9.10(t，J＝5.7Hz，1H)，7.95(d，J＝8.2，2H)，7.57(d，J＝8.8Hz，2H)，7.52(d，J＝8.2Hz，2H)，7.14(d，J＝6.6Hz，1H)，7.04(d，J＝8.8Hz，2H)，6.95(td，J＝8.2，1.6Hz，2H)，6.94(s，1H)，6.76(dd，J＝7.8，1.4Hz，1H)，6.58(t，J＝6.5Hz，2H)，6.35(s，2H)，4.90(s，2H)，4.62(d，J＝5.3Hz，2H)，3.84(s，3H)，3.76(s，3H)，3.54(s，3H).m/z：512.6(MH+)。
反应方案53
实施例133
N-(2-氨基-苯基)-4-[(1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺 (252)
步骤1：N1-甲基-4-硝基-苯-1，2-二胺(248)
用MeNH2在水中的40％w/w溶液(10毫升，128毫摩尔)处理氟化物247(5.41克，34.7毫摩尔)在DMF(40毫升)中的溶液。将混合物在90℃搅拌3小时，用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液洗涤。将有机相经MgSO4干燥，蒸发，并通过快速色谱法(洗脱剂50％EtOAc在CH2Cl2中)提纯以制得标题化合物248(5.31克，92％收率)。1H NMR：(CDCl3)δ(ppm)：7.75(dd，J＝2.6，8.8Hz，1H)，7.53(d，J＝2.6Hz，1H)，6.45(d，J＝8.8Hz，1H)，4.24(bs，3H)，2.91(s，3H).LRMS：(计算值)167.2；(实测值)168.1(MH)+。
步骤2：1-甲基-5-硝基-1H-苯并咪唑(249)
在二胺248(1.14克，6.80毫摩尔)在CH2Cl2(10毫升)中的悬浮液中，加入原甲酸三甲酯(5毫升，46毫摩尔，6.7当量)(或所选的任何其它酰化剂，6当量)，然后加入TFA(0.43毫升，5.6毫摩尔，0.8当量)，并将混合物在室温下搅拌2小时。过滤收集沉淀物，用CH2Cl2洗涤，并干燥，制得作为TFA盐的标题化合物249(1.23克，62％收率)。1H NMR：(CDCl3)δ(ppm)：8.57(d，J＝1.8Hz，1H)，8.20(dd，J＝1.8，9.2Hz，1H)，8.18(s，1H)，7.54(d，J＝9.2Hz，1H)，3.94(s，3H)。LRMS：(计算值)177.2；(实测值)178.1(MH)+。
步骤3：1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基胺(250)
通过按照反应方案25，步骤2(实施例64)所述的程序的硝基化合物249的催化氢化，获得标题化合物250。LRMS：(calc.)147.2；(obt.)148.1(MH)+。
步骤4：4-[(1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基氨基)-甲基]-苯甲酸(251)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)所述的程序，使胺250与4-甲酰基-苯甲酸反应，获得标题化合物251。1H NMR，(DMSO)δ(ppm)：8.24(s，1H)，7.89(d，J＝7.9Hz，2H)，7.49(d，J＝7.9Hz，2H)，7.35(d，J＝8.9Hz，1H)，6.80(d，J＝8.9Hz，1H)，6.61(s，1H)，4.39(s，2H)，3.77(s，3H).LRMS：(计算值)281.3；(实测值)282.3(MH)+。
步骤5：N-(2-氨基-苯基)-4-[(1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基氨基)-甲基]-苯甲 酰胺(255)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)所述的程序使酸251与1，2-苯二胺偶联，获得标题化合物252。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.57(s，1H)，8.00(s，1H)，7.91(d，J＝8.4Hz，2H)，7.51(d，J＝8.4Hz，2H)，7.28(d，J＝8.4Hz，1H)，7.15(d，J＝7.5Hz，1H)，6.96(t，J＝7.5Hz，1H)，6.76(m，2H)，6.62(s，1H)，6.57(d，J＝7.5Hz，1H)，6.17(bs，1H)，5.01(bs，2H)，4.40(s，2H)，3.73(s，3H).LRMS：(计算值)371.4；(实测值)372.4(MH)+。
实施例134-140
按照反应方案53，但是将原甲酸三甲酯换成相应的酰基氯，与实施例134(化合物252)类似地制备实施例134-140(化合物253-259)。
表9.如实施例133(反应方案53)制备的化合物的表征
Figure A20058001611201901
实施例141
N-(2-氨基-苯基)-4-(苯并噻唑-6-基氨基甲基)-苯甲酰胺(263)
反应方案54
步骤1：苯并噻唑-6-基胺(261)
按照反应方案33，化合物143(实施例79)用氯化锡(II)还原硝基化合物260，获得标题化合物261。LRMS：(计算值)150.2；(实测值)151.1(MH)+。
步骤2：4-(苯并噻唑-6-基氨基甲基)-苯甲酸(262)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)所述的程序使胺261与4-甲酰基-苯甲酸反应，获得标题化合物262。1H NMR，(DMSO)δ(ppm)：8.04(s，1H)，7.90(d，J＝8.1Hz，2H)，7.74(d，J＝8.8Hz，1H)，7.49(d，J＝8.1Hz，2H)，7.07(d，J＝1.8Hz，1H)，6.89(dd，J＝1.8，8.1Hz，1H)，4.42(s，2H).LRMS：(计算值)284.3；(实测值)285.2(MH)+。
步骤3：(2-氨基-苯基)-4-(苯并噻唑-6-基氨基甲基)-苯甲酰胺(263)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)所述的程序使酸262与1，2-苯二胺偶联，获得标题化合物263。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.59(s，1H)，8.89(s，1H)，7.93(d，J＝8.0Hz，2H)，7.75(d，J＝8.0Hz，1H)，7.50(d，J＝8.0Hz，2H)，7.14(d，J＝7.5Hz，1H)，7.08(s，1H)，6.96(t，J＝7.5Hz，1H)，6.90(d，J＝8.0Hz，1H)，6.76(m，2H)，6.58(s，1H)，4.87(bs，2H)，4.43(bs，2H).LRMS：(计算值)374.5；(实测值)375.4(MH)+。
反应方案55
Figure A20058001611201921
实施例142
N-(2-氨基-苯基)-4-[(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺 (267)
步骤1：1-甲基-5-硝基-1H-苯并三唑(264)
用NaNO2(586毫克，8.5毫摩尔)在水(10毫升)中的溶液处理二胺248(1.13克，6.76毫摩尔)和浓HCl(5.6毫升，67毫摩尔)在水(22毫升)中的0℃的搅拌悬浮液。将该混合物在相同条件下搅拌3小时，升温至室温，用KOH在水中的5％w/w溶液中和，并过滤。将固体用冷水洗涤并干燥以制得标题化合物264(975毫克，81％收率)。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.00(d，J＝1.3Hz，1H)，8.39(dd，J＝1.3，8.8Hz，1H)，8.09(d，J＝8.8Hz，1H)，4.40(s，3H)。
步骤2：1-甲基-1H-苯并三唑-5-基胺(265)
按照反应方案33，化合物143(实施例79)用氯化锡(II)还原硝基化合物260，获得标题化合物265。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：7.32(d，J＝8.8Hz，1H)，7.14(d，J＝1.7Hz，1H)，6.99(dd，J＝1.7，8.8Hz，1H)，4.21(s，3H).LRMS：(计算值)148.3；(实测值)149.3(MH)+。
步骤3：4-[(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基氨基)-甲基]-苯甲酸(266)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)所述的程序，使胺265与4-甲酰基-苯甲酸反应，获得标题化合物266。LRMS：(计算值)282.3；(实测值)283.3(MH)+。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-[(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基氨基)-甲基]-苯甲 酰胺(267)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)所述的程序使酸266与1，2-苯二胺偶联，获得标题化合物267。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.58(s，1H)，7.92(d，J＝8.0Hz，2H)，7.53(m，3H)，7.14(d，J＝8.0Hz，1H)，7.07(dd，J＝2.0，8.5Hz，1H)，6.95(t，J＝7.5Hz，1H)，6.76(d，J＝8.0Hz，1H)，6.68(s，1H)，6.61(s，2H)，4.87(bs，2H)，4.42(d，J＝6.0Hz，2H)，4.16(s，3H).LRMS：(计算值)372.4；(实测值)373.5(MH)+。
反应方案56
实施例143
N-(2-氨基-苯基)-4-[(1-甲基-2-甲基氨基-1H-苯并咪唑-5-基氨基)-甲基]- 苯甲酰胺(271)
步骤1：甲基-(1-甲基-5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)-胺(268)
用异硫氰酸甲酯(970毫克，12.9毫摩尔)处理二胺248(1.88克，11.2毫摩尔)在吡啶(20毫升)中的溶液，并将该混合物在80℃搅拌30分钟，冷却至15℃，用固体EDC(3.03克，15.8毫摩尔，1.40当量)处理，并在80℃继续加热16小时。在真空中去除吡啶后，将残留物通过快速色谱法(洗脱剂5％MeOH，在CH2Cl2中)提纯，制得标题化合物268(1.44克，62％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：8.12(d，J＝2.2Hz，1H)，7.94(dd，J＝2.2，8.8Hz，1H)，7.04(d，J＝8.8Hz，1H)，4.44(bs，2H)，3.51(s，3H)，3.04(s，3H).LRMS：(计算值)206.2；(实测值)207.1(MH)+。
步骤2：甲基-(1-甲基-5-氨基-1H-苯并咪唑-2-基)-胺(269)
按照反应方案25，步骤2(实施例64)中所述的程序，通过硝基化合物268的催化氢化，获得标题化合物269。1H NMR：(CDCl3)δ(ppm)：6.70(s，1H)，6.62(d，J＝7.9Hz，1H)，6.29(d，J＝7.9Hz，1H)，5.97(bs，1H)，3.63(bs，2H)，3.15(s，3H)，2.90(s，3H).LRMS：(计算值)176.2；(实测值)177.3(MH)+。
步骤3：4-[(1-甲基-2-甲基氨基-1H-苯并咪唑-5-基氨基)-甲基]-苯甲酸 (270)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)所述的程序使胺269与4-甲酰基-苯甲酸反应，获得标题化合物270。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：8.03(bs，1H)，7.88(d，J＝7.9Hz，2H)，7.47(d，J＝7.9Hz，2H)，7.02(d，J＝8.3Hz，1H)，6.46(d，J＝8.3Hz，1H)，6.44(s，1H)，4.35(bs，2H)，3.43(s，3H)，2.90(d，J＝3.5Hz，3H).LRMS：(计算值)310.3；(实测值)311.4(MH)+。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-[(1-甲基-2-甲基氨基-1H-苯并咪唑-5-基氨 基)-甲基]-苯甲酰胺(271)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)所述的程序使酸270与1，2-苯二胺偶联，获得标题化合物271。
1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.56(s，1H)，7.90(d，J＝7.9Hz，2H)，7.49(d，J＝7.9Hz，2H)，7.15(d，J＝7.5Hz，1H)，6.80(d，J＝8.4Hz，1H)，6.76(d，J＝8.4Hz，1H)，6.58(t，J＝7.5Hz，1H)，6.39(s，1H)，6.31(m，2H)，5.75(t，J＝5.7Hz，1H)，4.87(s，2H)，4.32(d，J＝5.7Hz，2H)，3.34(s，3H)，2.82(d，J＝4.4Hz，3H).LRMS：(计算值)400.5；(实测值)401.5(MH)+。
反应方案57
Figure A20058001611201951
实施例144
N-(2-氨基-苯基)-4-(喹喔啉-6-基氨基甲基)-苯甲酰胺(276) 步骤1：6-硝基-喹喔啉(273)
用40％乙二醛水溶液(0.85毫升，7.4毫摩尔，1.1当量)(或任何其它1，2-二羰基化合物，1.1当量)处理硝基苯胺272(1.04克，6.76毫摩尔)在2-丙醇(35毫升)中的溶液。将混合物在80℃搅拌2小时并在真空中浓缩以制得标题化合物273，其不经进一步提纯就用于下一步骤。LRMS：(计算值)175.1；(实测值)176.1(MH)+。
步骤2：喹喔啉-6-基胺(274)
按照反应方案33，化合物143(实施例79)用氯化锡(II)还原硝基化合物273，获得标题化合物274。LRMS：(计算值)145.2；(实测值)146.2(MH)+。
步骤3：4-(喹喔啉-6-基氨基甲基)-苯甲酸(275)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)所述的程序，使胺274与4-甲酰基-苯甲酸反应，获得标题化合物275。LRMS：(计算值)279.3；(实测值)280.2(MH)+。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-(喹喔啉-6-基氨基甲基)-苯甲酰胺(276)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)所述的程序使酸275与1，2-苯二胺偶联，获得标题化合物276。
1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.61(s，1H)，8.56(d，J＝2.0Hz，1H)，8.43(d，J＝2.0Hz，1H)，7.93(d，J＝8.0Hz，2H)，7.75(d，J＝9.0Hz，1H)，7.52(d，J＝8.0Hz，2H)，7.40-7.36(m，2H)，7.13(dd，J＝1.6，6.8Hz，1H)，6.95(dt，J＝1.6，8.0Hz，1H)，6.76(dd，J＝1.2，7.8Hz，1H)，6.67(d，J＝2.5Hz，1H)，6.59(dd，J＝1.2，7.8Hz，1H)，5.05(bs，2H)，4.53(d，J＝5.7Hz，2H).LRMS：(计算值)369.4；(实测值)370.4(MH)+。
实施例145
N-(2-氨基-苯基)-4-[(2，3-联吡啶-2-基-喹喔啉-6-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺 (277)
按照反应方案57中对于实施例144所述的程序，在第一步骤中使用1，2-二吡啶-2-基-乙烷-1，2-二酮代替乙二醛，制备标题化合物。
Figure A20058001611201961
1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.57(s，1H)，8.21(m，1H)，8.17(m，1H)，7.94(d，J＝8.0Hz，2H)，7.89-7.84(m，3H)，7.80(dt，J＝1.8，7.6Hz，1H)，7.55(m，3H)，7.46(dd，J＝2.3，9.0Hz，1H)，7.29-7.22(m，2H)，7.12(d，J＝7.6Hz，1H)，6.92(m，1H)，6.78(d，J＝2.3Hz，1H)，)，6.75(dd，J＝1.4，8.3Hz，1H)，6.56(t，J＝7.6Hz，1H)，4.87(bs，2H)，4.58(d，J＝6.1Hz，2H)，4.34(d，J＝4.3Hz，1H).LRMS：(计算值)523.6；(实测值)524.5(MH)+。
反应方案58
Figure A20058001611201971
实施例146
4-((2-(2-(二甲基氨基)乙基)-1，3-二氧代异二氢吲哚-6-基氨基)甲 基)-N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺(278)
步骤1：2-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-硝基异二氢吲哚-1，3-二酮(280)
用纯净N1，N1-二甲基乙烷-1，2-二胺(0.75毫升；5.8毫摩尔；1.13当量)(或相应胺，1.3当量)处理nitroftalic酐(279)(995毫克；5.2毫摩尔)在乙酸(12毫升)中的溶液。将反应混合物在100℃搅拌3小时，冷却至室温，在真空中浓缩；将残留物溶于乙酸乙酯(250毫升)并用饱和NaHCO3洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，以产生黄色固体状的化合物280(1.19克；4.5毫摩尔；87％)。LRMS：263.3(计算值)；264.2(实测值)(MH)+。
步骤2：5-氨基-2-(2-(二甲基氨基)乙基)异二氢吲哚-1，3-二酮(281)
按照反应方案25，步骤2(实施例64)中所述的程序，通过硝基化合物280的催化氢化，获得标题化合物281。LRMS：233.3(计算值)；234.2(实测值)(MH)+。
步骤3：4-((2-(2-(二甲基氨基)乙基)-1，3-二氧代异二氢吲哚-6-基氨基)甲 基)苯甲酸(282)
按照反应方案3，步骤2(实施例12)所述的程序，使胺281与4-甲酰基-苯甲酸反应，获得标题化合物282。1H NMR，(DMSO)δ(ppm)：7.89(d，J＝8.2Hz，2H)，7.78(t，J＝6.1Hz，1H)，7.53(d，J＝8.2Hz，1H)，7.43(d，J＝8.2Hz，2H)，6.91(s，1H)，4.53(d，J＝6.1Hz，2H)，3.80(t，J＝5.5Hz，2H)，3.32(bs，2H)，3.21(bs，2H)，2.74(s，6H).LRMS：367.4(计算值)；368.4(实测值)(MH)+。
步骤4：4-((2-(2-(二甲基氨基)乙基)-1，3-二氧代异二氢吲哚-6-基氨基)甲 基)-N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺(278)
按照反应方案1，步骤5(实施例1)所述的程序使酸282与1，2-苯二胺偶联，获得标题化合物278。1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.52(s，1H)，7.85(d，J＝8.0Hz，2H)，7.63(t，J＝5.9Hz，1H)，7.42(d，J＝8.2Hz，2H)，7.37(d，J＝8.2Hz，2H)，7.05(d，J＝7.2Hz，1H)，6.87(d，J＝7.2Hz，1H)，6.82(s，1H)，6.76(d，J＝8.2Hz，2H)，6.67(d，J＝7.8Hz，1H)，6.49(t，J＝7.2Hz，1H)，4.81(s，2H)，4.45(d，J＝5.9Hz，2H)，3.48(t，J＝6.3Hz，2H)，2.32(t，J＝6.3Hz，2H)，2.04(s，6H).LRMS：(计算值)457.5；(实测值)458.5(MH)+。
实施例147
N-(2-氨基-苯基)-4-[(1，3-二氧-2-吡啶-3-基甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-5- 基氨基)-甲基]-苯甲酰胺(283)
按照反应方案58中对于实施例146所述的反应序列，但在第一步骤中使用3-氨基甲基吡啶代替N，N-二甲基乙二胺，制备标题化合物。
1H NMR：(DMSO)δ(ppm)：9.60(s，1H)，8.50(s，1H)，8.44(t，J＝3.7Hz，1H)，7.92(d，J＝8.0Hz，2H)，7.76(t，J＝6.3Hz，1H)，7.62(dt，J＝2.0，3.9Hz，2H)，7.54(d，J＝8.2Hz，1H)，7.45(d，J＝8.0Hz，2H)，7.31(dd，J＝4.7，7.6Hz，1H)，7.12(d，J＝6.6Hz，1H)，6.97-6.93(m，2H)，6.85(d，J＝8.4Hz，1H)，6.75(dd，J＝1.4，8.0Hz，1H)，6.58(dt，J＝1.4，7.6Hz，1H)，4.96(bs，2H)，4.70(s，2H)，4.53(d，J＝6.3Hz，2H)，LRMS：(计算值)477.5；(实测值)478.5(MH)+。
表10.按照反应方案19-30制备的实施例148-177(化合物284-313)的表征
Figure A20058001611202011
Figure A20058001611202021
Figure A20058001611202031
Figure A20058001611202051
Figure A20058001611202071
实施例178：
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(2，4-二甲基-噻唑-5-基)-嘧啶-2-基氨基]-甲基}- 苯甲酰胺(314)
Figure A20058001611202081
使用1-(2，4-二甲基-噻唑-5-基)-乙酮(表11)作原材料代替1-吡嗪-2-基-乙酮，与化合物26a(实施例29)类似地按照反应方案6获得标题化合物。标题化合物的表征列在表12中。
表11.实施例178-188的合成中使用的杂芳基甲基酮
实施例179：
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(2H-吡唑-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-甲基}-苯甲酰胺 (315)
使用1-(2H-吡唑-3-基)-乙酮(表11)作原材料代替1-吡嗪-2-基-乙酮，按照反应方案6与化合物26a(实施例29)类似地获得标题化合物。标题化合物的表征列在表12中。
实施例180：
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(2，4-二甲基-噁唑-5-基)-嘧啶-2-基氨基]- 甲基}- 苯甲酰胺(316)
Figure A20058001611202092
使用1-(2，4-二甲基-噁唑-5-基)-乙酮(表11)作原材料代替1-吡嗪-2-基-乙酮，按照反应方案6与化合物26a(实施例29)类似地获得标题化合物。标题化合物的表征列在表12中。
实施例181：
N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(2，4-二甲基-噁唑-5-基)-嘧啶-2-基氨基]-甲基}- 苯甲酰胺(317)
步骤1：5-(2-甲基-1，3-二氧戊环-2-基)-异噁唑-3-羧酸乙酯(318)
将由5-乙酰基异噁唑-3-羧酸乙酯(2.53克，13.8毫摩尔)、乙二醇(1.29克，20.7毫摩尔)和p-TsOH(0.13克，0.69毫摩尔)构成的反应混合物在苯(50毫升)中用迪安-斯达克适配器回流24小时(反应方案59)。减压去除多数溶剂并使残留物在饱和NaHCO3和EtOAc之间分相。收集有机层，用盐水、水洗涤，并经MgSO4干燥。减压蒸发干燥的萃取液，产生油状标题化合物(3.14克，100％收率)，其不经进一步提纯即用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：6.89(s，1H)，4.35(q，J＝7.2Hz，2H)，4.07-4.01(m，2H)，4.01-3.94(m，2H)，1.70(s，3H)，1.32(t，J＝7.0Hz，3H).MS(m/z)：227.21(计算值)228.1(MH+)(实测值)。
反应方案59
步骤2：(5-(2-甲基-1，3-二氧戊环-2-基)异噁唑-3-基)-甲醇(319)
在二氧戊环318(3.14克，13.8毫摩尔)在EtOH-THF的1∶2混合物(45毫升)中的溶液中，加入NaBH4(0.68克，18.0毫摩尔)。将发那应混合物在室温下搅拌2小时，用水处理并蒸发有机溶剂。将水相用EtOAc萃取，并将合并的有机层连续用H2O和盐水洗涤，经MgSO4干燥，并减压浓缩以产生油状的标题化合物(2.39，93％收率)，其不经进一步提纯即用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：6.43(s，1H)，5.47(t，J＝5.9Hz，1H)，4.47(d，J＝5.9Hz，2H)，4.06-4.02(m，2H)，3.94-3.90(m，2H)，1.66(s，3H).MS(m/z)：185.18(计算值)186.1(MH+)(实测值)。
步骤3：1-(3-(羟基甲基)异噁唑-5-基)-乙酮(320)
在原醇319(2.39克，12.9毫摩尔)在MeOH(30毫升)的溶液中，加入10％HCl(30毫升)。将反应混合物在70℃搅拌18小时，冷却并使用1M NaOH溶液中和至pH 6。将MeOH蒸发并将所得水相用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，并减压浓缩，产生浅灰色固体状的标题化合物(1.67克，92％收率)，其不经进一步提纯即用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：7.25(s，1H)，5.62(t，J＝6.1Hz，1H)，4.56(d，J＝5.9Hz，2H)，2.56(s，3H).MS(m/z)：141.12(计算值)142.1(MH+)(实测值)。
步骤4：N-(2-氨基-苯基)-4-{[4-(2，4-二甲基-噁唑-5-基)-嘧啶-2-基氨基]- 甲基}-苯甲酰胺(317)
使用酮320(表11)作原材料代替1-吡嗪-2-基-乙酮，按照反应方案6与化合物26a(实施例29)类似地获得标题化合物。标题化合物的表征列在表12中。
实施例182：
N-(2-氨基苯基)-4-((4-(3-(羟基甲基)-5-甲基异噁唑-4-基)嘧啶-2-基氨基) 甲基)苯甲酰胺(321)
Figure A20058001611202111
步骤1：5-甲基-4-(2-甲基-1，3-二氧戊环-2-基)-异噁唑-3-羧酸甲酯(322)
按照反应方案60与二氧戊环318类似地以82％收率获得标题化合物。MS(m/z)：227.21(计算值)228.1(MH+)(实测值)。
步骤2：(5-甲基-4-(2-甲基-1，3-二氧戊环-2-基)异噁唑-3-基)甲醇(323)
按照反应方案60与甲醇319类似地以94％收率获得标题化合物。1HNMR(DMSO-d6)δ(ppm)：5.21(t，J＝5.7Hz，1H)，4.48(d，J＝5.7Hz，2H)，3.98-3.94(m，2H)，3.71-3.67(m，2H)，2.39(s，3H)，1.60(s，3H).MS(m/z)：199.20(计算值)200.1(MH+)(实测值)。
反应方案60
步骤3：1-(3-(羟基甲基)-5-甲基异噁唑-4-基)乙酮(324)
按照反应方案60与酮320类似地以77％收率获得标题化合物。1HNMR(DMSO-d6)δ(ppm)：5.45(t，J＝5.9Hz，1H)，4.66(d，J＝5.9Hz，2H)，2.66(s，3H)，2.51(s，3H).MS(m/z)：155.15(计算值)156.1(MH+)(实测值)。
步骤4：N-(2-氨基苯基)-4-((4-(3-(羟甲基)-5-甲基异噁唑-4-基)嘧啶-2-基 氨基)甲基)苯甲酰胺(317)
使用酮324(表11)作原材料代替1-吡嗪-2-基-乙酮，按照反应方案6与化合物26a(实施例29)类似地获得标题化合物。标题化合物的表征列在表12中。
实施例183，184：
N-(2-氨基苯基)-4-((4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)甲基) 苯甲酰胺(325)和N-(2-氨基苯基)-4-((4-(3-甲基-3H-1，2，3-三唑-4-基) 嘧啶-2-基氨基)甲基)苯甲酰胺(326)
Figure A20058001611202121
步骤1：1-(3H-1，2，3-三唑-4-基)乙酮(327)
在3-丁炔-2-酮(627毫克，9.21毫摩尔)在二甲苯(10毫升)中的溶液中，加入叠氮基三丁基锡(4.00克，12.0毫摩尔)。在密封烧瓶中将反应混合物在140℃搅拌3小时。蒸发二甲苯并将残留物通过快速色谱法(洗脱剂EtOAc)提纯，制得标题化合物(645毫克，63％收率)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：8.51(s，1H)，2.56(s，3H).MS(m/z)：111.10(计算值)112.1(MH+)(实测值)。
反应方案61
步骤2：(E)-3-(二甲基氨基)-1-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-4-基)丙-2-烯-1-酮 (328)和(E)-3-(二甲基氨基)-1-(3-甲基-3H-1，2，3-三唑-4-基)丙-2-烯-1- 酮(329)
使用酮327(表11)作原材料代替1-吡嗪-2-基-乙酮，按照反应方案6与化合物23a(实施例29，步骤1)类似地以24％收率获得标题化合物327和329的混合物。MS(m/z)：180.21(计算值)181.1(MH+)(实测值)。
1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)(328，主要异构体，尝试指定)：8.01(s，1H)，7.74(d，J＝12.3Hz，1H)，5.73(d，J＝12.3Hz，1H)，4.18(s，3H)，3.15(s，3H)，2.88(s，3H)。
1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)(329，次要异构体，尝试指定)：8.26(s，1H)，7.71(d，J＝10.8Hz，1H)，5.66(d，J＝12.1Hz，1H)，4.19(s，3H)，3.16(s，3H)，2.92(s，3H)。
步骤3：4-((4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)苯甲酸和 4-((4-(3-甲基-3H-1，2，3-三唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)苯甲酸(331)
使用烯胺酮(enamino ketone)328和329的混合物作原材料代替烯胺酮23a，按照反应方案6与化合物25a(实施例29，步骤3)类似地以80％收率获得标题化合物的混合物。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)(328，主要异构体tentative assignment)：12.80(s，1H)，8.33(d，J＝5.1Hz，1H)，8.17(s，1H)，7.94(t，J＝6.5Hz，1H)，7.85(d，J＝8.2Hz，2H)，7.42(d，J＝8.2Hz，2H)，7.02(d，J＝4.7Hz，1H)，4.60(d，J＝6.5Hz，2H)，4.22(s，3H).MS(m/z)：310.31(计算值)311.2(MH+)(实测值)。
步骤4：N-(2-氨基苯基)-4-((4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-4-基)嘧啶-2-基氨基) 甲基)苯甲酰胺(325)和N-(2-氨基苯基)-4-((4-(3-甲基-3H-1，2，3-三唑-4- 基)嘧啶-2-基氨基)甲基)苯甲酰胺(326)
使用酸330和331的混合物作原材料代替酸25a，按照反应方案6与化合物26a(实施例29，步骤4)类似地以53和7％收率获得标题化合物。标题化合物的表征列在表12中。
实施例185：
N-(2-氨基苯基)-4-((4-(2-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)甲 基)苯甲酰胺(332)
Figure A20058001611202141
步骤1：1-(2-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)乙酮(333)
在戊烷-2，4-二酮(1.00克，9.99毫摩尔)和N-溴琥珀酰亚胺(1.96克，10.99毫摩尔)在CHCl3(20毫升)中的溶液中，加入1，1’-偶氮双(环己烷腈)(催化量)。将反应混合物搅拌1小时，过滤，并将滤液减压浓缩。将残余物再溶于THF/Et2O的1∶1混合物(20毫升)中，然后加入吡啶-2-胺(723毫克，7.68毫摩尔)，并将反应混合物回流过夜。在冷却之后，减压去除溶剂，并将残留物通过柱色谱法(洗脱剂EtOAc，然后EtOAc-MeOH(96∶4))提纯，制得标题化合物(475毫克，35％收率)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：9.59(dt，J＝6.8，1.4Hz，1H)，7.68(dt，J＝8.8，1.2Hz，1H)，7.56(ddd，J＝8.8，6.8，1.4Hz，1H)，7.17(td，J＝6.8，1.4Hz，1H)，2.72(s，3H)，2.58(s，3H).MS(m/z)：174.20(计算值)175.1(MH+)(实测值)。
[M.Anderson，J.F.Beattie等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.：2003，13；3021-3026]
反应方案62
步骤2：N-(2-氨基苯基)-4-((4-(2-甲基基咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)嘧啶-2-基 氨基)甲基)苯甲酰胺(332)
使用酮333(表11)作原材料代替1-吡嗪-2-基-乙酮，按照反应方案6与化合物26a(实施例29)类似地获得标题化合物。标题化合物的表征列在表12中。
实施例186和187
4-((4-(2-氨基-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)-N-(2-氨基苯基)苯 甲酰胺(334)和N-(2-氨基苯基)-4-((4-(5-(2-二甲基氨基)乙酰胺基 (-3- 甲基噻吩-2-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)苯甲酰胺(335)
Figure A20058001611202152
步骤1：2-(双-Boc-氨基)-5-乙酰基-4-甲基噻唑(336)
在Boc2O(3.07克，14.1毫摩尔)和1-(2-氨基-4-甲基噻唑-5-基)(2.00克，12.8毫摩尔)在DCM(20毫升)中的溶液中，加入吡啶(1.11克，14.1毫摩尔)。将反应混合物在室温下搅拌3天。加入相同量的Boc2O并将反应混合物再搅拌3天。减压蒸发DCM，加入水，并将所得混合物用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，并减压浓缩以制得橙色油状的标题化合物(4.6克，100％收率)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：2.54(s，3H)，2.49(s，3H)，1.53(s，18H).MS(m/z)：356.44(计算值)357.1(MH+)(实测值)。
步骤2：(E)-1-[2-(双-Boc-氨基)-4-甲基噻唑-5-基]-3-（二甲基氨基)丙-2- 烯-1-酮(337)
按照对烯胺酮23a的合成所述的程序(反应方案6)，但是将1-(吡嗪-2-基)-乙酮换成酮336，以16％收率获得标题化合物。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：7.65(d，J＝12.1Hz，1H)，5.34(d，J＝12.1Hz，1H)，3.14(s，3H)，2.87(s，3H)，2.50(s，3H)，1.51(s，18H).MS(m/z)：411.52(计算值)412.3(MH+)(实测值)。
反应方案63
Figure A20058001611202161
步骤3：(E)-1-[2-(Boc-氨基)-4-甲基噻唑-5-基]-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1- 酮(338)
用NaOMe溶液(25％ww，1.9毫升)处理烯胺酮337(859毫克，2.09毫摩尔)在甲醇(12毫升)中的溶液。将反应混合物回流24小时，用NaOH溶液(1M，3毫升)处理，冷却至室温，仔细地用1M HCl中和(pH7.5-8)，并用EtOAc萃取。将萃取液经MgSO4干燥，过滤并蒸发以提供与标题化合物对应的残留物，(721毫克，超过定量收率)，其不经进一步提纯即用于下一步骤。MS(m/z)：311.40(计算值)312.1(MH+)(实测值)。
步骤4：4-((4-(2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基氨基) 甲基)苯甲酸(339)
按照对酸25a的合成所述的程序(反应方案6，步骤3)，但是将烯胺酮23a换成烯胺酮338，以18％收率获得标题化合物并且不经进一步提纯即用于下面的步骤。MS(m/z)：441.50(计算值)442.3(MH+)(实测值)。
步骤5和6：4-((4-(2-氨基-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)-N-(2- 氨基苯基)苯甲酰胺(334)
按照对化合物26a的合成所述的程序(反应方案6，步骤4，与1，2-苯二胺偶联)，然后按照对化合物117的合成所述的程序(反应方案28，步骤5，氨基脱保护)，获得标题化合物。经过两个步骤的收率为78％。标题化合物的表征列在表12中。
步骤7：4-((2-氨基-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)苯甲酸 (340)
按照对化合物117的合成所述的程序(反应方案28，步骤5，氨基脱保护)以定量收率(纯度大约90％)获得标题化合物。MS(m/z)：341.39(计算值)342.1(MH+)(实测值)。
反应方案64
Figure A20058001611202171
步骤8：4-((4-((二甲基氨基)甲基氨基甲酰基)-4-甲基噻唑-5-基)嘧啶 -2-基氨基)甲基)苯甲酸(341)
在酸340(98.1毫克，0.29毫摩尔)在吡啶(5毫升)中的溶液中加入二甲基氨基乙酰基氯盐酸盐(59.0毫克，0.37毫摩尔)。将反应混合物在室温下搅拌1天，然后加入另一份二甲基氨基乙酰基氯盐酸盐(40毫克，0.12毫摩尔)，并将混合物在40℃再搅拌1天。减压蒸发吡啶，并加入MeOH。形成固体材料，将其过滤收集并通过制备RP HPLC(柱AQUASIL C-18；5μM；230×21.2毫米；洗脱剂20-80％MeOH，在水中)提纯，制得24.5毫克标题化合物(20％收率)。MS(m/z)：426.49(计算值)427.2(MH+)(实测值)。
步骤9：N-(2-氨基苯基)-4-((4-(5-(2-(二甲基氨基)乙酰胺基)-3-甲基噻吩 -2-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)苯甲酰胺(335)
按照对化合物26a的合成所述的程序(反应方案6，步骤4)以15％收率(通过制备HPLC提纯，柱AQUASIL C-18；5μM；230×21.2毫米；洗脱剂20-80％MeOH，在水中)获得标题化合物。标题化合物的表征列在表12中。
实施例188：
4-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)-N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺(342) 步骤1.4-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯甲酸(343)
按照对化合物25a的合成所述的程序(反应方案6，步骤3)，但是将guanindine 24换成4-胍基苯甲酸(344)(Zlatoidsky P.，Maliar T.Eur.J.Med.Chem Chim.Ther.；1996，31，895-900)并将(E)-3-(二甲基氨基)-1-(吡嗪-2-基)-丙-2-烯-1-酮(23a)换成(E)-3-(二甲基氨基)-1-(吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮(345)(Zimmermann J.，Buchdunger E.，et al.Bioorg.Med.Chem.Lett.，1996，6，1221-1226)，获得标题化合物。产物收率28％。MS(m/z)：292.29(计算值)293.1(MH+)(实测值)。
反应方案65
Figure A20058001611202191
步骤2.4-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)-N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺(342)
按照对化合物26a的合成所述的程序(反应方案6，步骤4)，但是将酸25a换成酸343，以54％收率获得标题化合物。标题化合物的表征列在表12中。
反应方案65a
实施例189：
N-(2-氨基-苯基)-4-(2，4-二氧-噻唑烷-5-叉甲基)-苯甲酰胺(346) 步骤1.4-(2，4-二氧-噻唑烷-5-叉甲基)-苯甲酸(347)
将4-甲酰基-苯甲酸(1.0克，6.7毫摩尔)、噻唑烷-2，4-二酮(0.78克，6.7毫摩尔)和哌啶(1.32毫升，13.3毫摩尔)在2-甲氧基-乙醇(20毫升)中的溶液回流2小时，冷却至室温，蒸发，并将油状残留物再溶于水。将该溶液用浓HCl(pH 1-2)酸化，产生沉淀，将其过滤收集，干燥并用热丙酮研制以产生标题化合物(1.06克，64％收率)。LRMS：249.2(计算值)，248.1[M-H]-(实测值)。
步骤2.{2-[4-(2，4-二氧-噻唑烷-5-叉甲基)-苯甲酰基氨基]-苯基}-氨基甲 酸叔丁酯(348)
按照对化合物115(反应方案28)的合成所述的程序，但是将酸114换成酸347，以63％收率获得标题化合物。LRMS：439.5(计算值)，462.4[M+Na]+(实测值)。
步骤3.N-(2-氨基-苯基)-4-(2，4-二氧-噻唑烷-5-叉甲基)-苯甲酰胺(346)
按照对化合物117(反应方案28)的合成所述的程序，但是将酰胺116换成酰胺348，以37％收率获得标题化合物。1H NMR：(400 MHz，DMSO-d6，δ(ppm)：9.72(s，1H)，8.06(d，j＝8.2Hz，2H)，7.79(s，1H)，7.69(d，J＝8.4，2H)，7.14(d(dd)J＝7.8，1H)，6.95(d(dd)，J＝1.6Hz，J＝9.0，1H)，6.75(dd，J＝1.2Hz，J＝8.0Hz，1H)，6.56(t(dd)，J＝7.2Hz 1H).LRMS：339.4(计算值)，340.4[MH]+(实测值)。
实施例190：
N-(2-氨基-苯基)-4-(2，4-二氧-噻唑烷-5-基甲基)-苯甲酰胺(349) 步骤1.4-(2，4-二氧-噻唑烷-5-叉甲基)-苯甲酸甲酯(350)
将4-甲酰基-苯甲酸甲酯(1.0克，6.7毫摩尔)、噻唑烷-2，4-二酮(0.78克，6.7毫摩尔)和哌啶(0.66毫升，6.7毫摩尔)在2-甲氧基-乙醇(20毫升)中的溶液回流2小时，冷却至室温并蒸发。将残留物用CH2Cl2研制以制造结晶材料，将其过滤收集以产生标题化合物(620毫克，35％收率)。LRMS：263.3(计算值)，264.1[MH]-(实测值)。
反应方案66
步骤2.4-(2，4-二氧-噻唑烷-5-基甲基)-苯甲酸甲酯(351)
将甲酯350(615毫克，2.32毫摩尔)在MeOH(120毫升)中的溶液在10％Pd/C(615毫克，Degussa型)上在室温氢化2小时。加入另一部分Pd/C(300毫克)，并再进行3小时氢化(通过MS监测)。将反应混合物通过塞里塑料垫过滤，蒸发并将残留物通过快速色谱法(洗脱剂EtOAc-CH2Cl2(1∶2))提纯，以制造标题化合物(570毫克，92％收率)。LRMS：265.3(计算值)，266.1[MH]+(实测值)。
步骤3.4-(2，4-二氧-噻唑烷-5-基甲基)-苯甲酸(352)
用浓HCl(5毫升)处理甲酯351(250毫克，0.94毫摩尔)在AcOH(10毫升)中的溶液，并将反应混合物在120℃加热2小时，冷却并蒸发以制造固体残留物，将其再悬浮在水中并过滤收集以制得标题化合物(98毫克，41％收率)。LRMS：251.3(计算值)，250.1[M-H]-(实测值)。
步骤4.N-(2-氨基-苯基)-4-(2，4-二氧-噻唑烷-5-基甲基)-苯甲酰胺(349)
按照对化合物10a的合成所述的程序(反应方案2，实施例2)，但是将酸9换成酸352，以51％收率获得标题化合物。1H NMR：(400MHz，DMSO-d6，δ(ppm)：12.04(br s，1H)，9.62(s，1H)，7.90(d，j＝8.2Hz，2H)，7.36(d，J＝8.2，2H)，7.16(d(dd)J＝8.4，1H)，7.13(d(dd)，J＝6.7，1H)，6.95(dd，J＝1.6Hz，J＝7.8Hz，1H)，6.75(dd，j＝1.4Hz，j＝8.0Hz，1H)，6.57(dd，j＝1.4Hz，7.6Hz，1H)，4.99(dd，J＝4.7Hz，J＝9.0Hz，1H)，4.96(brs，2H)，3.45(dd，J＝4.5Hz，J＝14.1Hz，1H)，3.22(dd，J＝9.0Hz，J＝14.3Hz，1H).LRMS：341.3(计算值)，342.3[MH]+(实测值)。
反应方案67
实施例191：
(E)-N-(氨基苯基)-4-(2-(4-((2，4-二氧噻唑烷-5-叉)甲基)苯氧基)乙氧基) 苯甲酰胺(353)
步骤1：4-(2-溴乙氧基)苯甲醛(354)
在0℃，在K2CO3(4.52克，32.7毫摩尔)、1，2-二溴乙烷(10.6毫升，122.8毫摩尔)在DMF(12毫升)中的悬浮液中，加入4-羟基苯甲醛(1.0克，8.2毫摩尔)在DMF(3毫升)中的溶液。将混合物在室温下搅拌18小时，过滤并蒸发。将残留物通过硅胶柱色谱法以EtOAc-己烷梯度(EtOAc的百分比从20提高至25％)提纯，制得标题化合物(1.21克，64％收率)。1H NMR：(CDCl3)δ(ppm)：9.88(s，1H)，7.84(d，J＝8.0Hz，2H)，7.01(d，J＝8.0Hz，2H)，4.38(t，J＝6Hz，2H)，3.67(t，J＝6Hz，2H).LRMS(ESI)：(计算值)227.9，229.9；(实测值)229.1，231.3(MH)+。
步骤2：4-(2-(4-甲酰基苯氧基)乙氧基)苯甲酸甲酯(355)
在354(1.21克，5.27毫摩尔)在DMF(10毫升)中的溶液中，加入4-羟基苯甲酸甲酯(0.80克，5.27毫摩尔)和K2CO3(2.91克，21.1毫摩尔)。将所得混合物在60℃搅拌6小时，过滤并蒸发。将残留物通过硅胶柱色谱法(洗脱剂EtOAc-己烷(1∶2))提纯，制得标题化合物(0.83克，53％)。LRMS(ESI)：(计算值)300.3；(实测值)301.4(MH)+。
步骤3：(E)-4-(2-(4-((2，4-二氧噻唑烷-5-叉)甲基)苯氧基)乙氧基)苯甲酸 甲酯(356)
在355(1.59克，3.86毫摩尔)在甲苯(10毫升)中的溶液中，加入噻唑烷-2，4-二酮(542毫克，4.63毫摩尔)、苯甲酸(61.3毫克，0.50毫摩尔)和哌啶(57微升，0.58毫摩尔)。将所得混合物用迪安-斯达克适配器回流1/2小时，并冷却至室温。形成沉淀物，将其过滤收集以制得标题化合物(1.41克，92％)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：7.90(d，J＝8.8Hz，2H)，7.73(s，1H)，7.54(d，J＝8.8Hz，2H)，7.14(d，J＝8.8Hz，2H)，7.08(d J＝8.8Hz，2H)，4.42(bs，4H)，3.80(s，3H).LRMS(ESI)：(计算值)399.1；(实测值)400.0(MH)+。
步骤4：(E)-4-(2-(4-((2，4-二氧噻唑烷-5-叉)甲基)苯氧基)乙氧基)苯甲酸 (化合物357)
在甲酯356(647毫克，1.62毫摩尔)在THF(15毫升)中的溶液中加入甲醇(2毫升)、水(2毫升)和一水合氢氧化锂(340毫克，8.11毫摩尔)。将混合物在60℃加热1小时，用10％HCl溶液酸化，并用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液经MgSO4干燥，过滤并蒸发以制得标题化合物(141毫克，22％)。1H NMR：(MeOD-d4)δ(ppm)：7.97(d，J＝8.8Hz，2H)，7.75(s，1H)，7.53(d，J＝8.8Hz，2H)，7.12(d，J＝8.8Hz，2H)，7.04(d，J＝8.8Hz，2H)，4.44(4H，bs).LRMS(ESI)：(计算值)385.4；(实测值)392.3(MLi)+。
步骤5：(E)-N-(2-氨基苯基)-4-(2-(4-((2，4-二氧噻唑烷-5-叉)甲基)苯氧基) 乙氧基)苯甲酰胺(353)
将酸357(141毫克，0.37毫摩尔)、苯-1，2-二胺(40毫克，0.37毫摩尔)和BOP(161毫克，0.37毫摩尔)溶于CH3CN(5毫升)。加入三乙胺(0.73毫摩尔，203微升)，并将反应在室温下搅拌18小时。减压去除溶剂，并将残留物通过硅胶柱色谱法用EtOAc-己烷混合物以梯度洗脱(EtOAc百分比从33提高至100％)提纯，以制得标题化合物(34.2毫克，19％)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：10.00(s，1H)，8.44(s，1H)，7.96(s，1H)，7.57-7.65(m，3H)，7.49(t，J＝7.6Hz，2H)，7.36-7.43(m，2H)，7.31-7.35(m，1H)，4.59(s，2H)，4.23(s，2H)，3.74(s，3H)，3.11-3.20(m，2H)，2.37(t，J＝7.2Hz，2H)，1.60-1.71(m，2H)，1.45-1.55(m，2H)，1.32-1.43(m，2H).LRMS(ESI)：(计算值)460.5；(实测值)461.3(MH)+。
实施例192：
N-(2-氨基苯基)-4-(2-(4-((2，4-二氧噻唑烷-5-基)甲基)苯氧基)乙氧基)苯 甲酰胺(358)
步骤1：4-(2-(4-((2，4-二氧噻唑烷-5-基)甲基)苯氧基)乙氧基)苯甲酸甲酯 (359)
在356(反应方案67)(672毫克，1.68毫摩尔)在1，4-二噁烷(10毫升)中的溶液中，加入10％Pd/C(2.3克，2.18毫摩尔)。将所得混合物在氢气氛下在室温搅拌2天，通过塞里塑料垫过滤并减压浓缩以制得359(379毫克，56％)。LRMS(ESI)：(计算值)401.4；(实测值)424.2(M+Na)+.1H NMR：(CDCl3)δ(ppm)：8.15(bs，1H)，7.99(d，J＝8.8Hz，2H)，7.1 6(d，J＝8.8Hz，2H)，6.96(d，J＝8.8Hz，2H)，6.90(d，J＝8.8Hz，2H)，4.52(dd，J＝9.2，4.0Hz，1H)，4.38-4.37(m，2H)，4.32-4.32(m，2H)，3.89(s，3H)，3.45(dd，J＝14.1，4.0Hz，1H)，3.14(dd，J＝14.0，9.2Hz，1H)。
步骤2：4-(2-(4-((2，4-二氧噻唑烷-5-基)甲基)苯氧基)乙氧基)苯甲酸 (360)
在甲酯359(872毫克，2.17毫摩尔)在冰AcOH(30毫升)中的溶液中，加入浓HCl(10毫升)。将混合物在120℃加热3小时。减压去除溶剂以制得标题化合物(833毫克，99％)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：12.61(bs，1H)，12.01(s，1H)，7.91(d，J＝8.8Hz，2H)，7.19(d，J＝8.8Hz，2H)，7.08(d，J＝8.8Hz，2H)，6.95(d，J＝8.8Hz，2H)，4.91(dd，J＝9.2，4.4Hz，1H)，4.40-4.42(m，2H)，4.33-4.36(m，2H)，3.32(d，J＝4.0Hz，1H)，3.10(dd，J＝14.0，9.6Hz，1H).LRMS(ESI)：(计算值)387.4；(实测值)386.2(M-H)-。
反应方案68
Figure A20058001611202251
步骤3：N-(2-氨基苯基)-4-(2-(4-((2，4-二氧噻唑烷-5-基)甲基)苯氧基)乙 氧基)苯甲酰胺(358)
按照对化合物393所述的程序(步骤5，反应方案67，实施例191)，但是将酸357换成酸360，获得浅灰色固体状的标题化合物(57毫克，33％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.34(s，1H)，7.74-7.78(m，3H)，6.93-6.98(m，3H)，6.88(d J＝8.8Hz，2H)，6.73-6.78(m，3H)，6.57(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)，6.38(dt，J＝8.0，1.2Hz，1H)，4.68(dd，J＝8.8，4.4Hz，2H)，4.19-4.21(m，2H)，3.11(d，J＝4.4Hz，1H)，2.88(dd，J＝14.0，9.2Hz，1H).LRMS(ESI)：(计算值)477.4；(实测值)478.4(MH)+。
反应方案69
Figure A20058001611202261
表12.实施例178-188的表征
Figure A20058001611202281
Figure A20058001611202291
实施例193：
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(吡啶-3-基氨基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺(361) 步骤1：N-p-Nosyl-3-吡啶(362)
在2-氨基吡啶(3.03克，32.2毫摩尔)在THF(15毫升)中的搅拌溶液中，连续加入DCM(30毫升)、4-硝基苯磺酰基氯(1.50克，68.7毫摩尔)，和Et3N(9.88毫升，70.9毫摩尔)。溶液变成橙色，并形成沉淀。将悬浮液在室温下搅拌1小时，减压蒸发溶剂，并将固体残渣悬浮在甲醇(200毫升)中。在该悬浮液中加入极大过量(10当量)的甲醇钠，将该混合物在50℃搅拌3小时，用HCl 1N(2毫升)骤冷，并在80℃减压浓缩直至体积变成大约50毫升。将浓缩溶液用1N HCl进一步酸化直至pH值中性。形成沉淀物，将其过滤收集以制成标题化合物(7.67克，85％收率)。1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)：10.88(s，1H)，8.6(d，J＝9.0Hz，2H)，8.28(dd，J＝6.1，1.4Hz，1H)，8.27(d，J＝2.5Hz，1H)，7.50(ddd，J＝8.4，2.7，1.6Hz，1H)，7.30(ddd，J＝8.2，4.7，0.8Hz，1H).m/z：280.1(MH+)。
步骤2：4-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)苯甲酸叔丁酯(363)
在4-氟苯甲酸叔丁酯(2.17克，11.0毫摩尔)和(R)-(+)-3-吡咯烷醇(1.00克，11.5毫摩尔)在DMSO(8毫升)中的溶液中，加入碳酸钾(1.53克，11.0毫摩尔)。将混合物在130℃搅拌18小时，并倒入仍然热的搅拌水(100毫升)中。过滤收集所得浅灰色沉淀物，并在120℃干燥1.5小时以制得标题化合物(2.64克，91％收率)。1H NMR(Acetone-d6)δ(ppm)：7.78(d，J＝9.0Hz，2H)，6.54(d，J＝8.8Hz，2H)，4.58(bs，1H)，4.15(bs，1H)，3.55(dd，J＝10.36，4.7Hz，1H)，3.49(t，J＝6.8Hz，1H)，3.42(td，J＝9.2，2.3Hz，1H)，3.28(d，J＝10.8Hz，1H)，2.21-2.10(m，1H)，2.09-2.03(m，1H)，1.56(s，9H).m/z：520.3(MH+)。
步骤3：4-((S)-3-N-p-nosyl(吡啶-3-基氨基)吡咯烷-1-基)苯甲酸叔丁酯 (364)
在化合物362(6.00克，2 1.5毫摩尔)在THF(100毫升)中的溶液中，连续加入原醇363(5.66克，21.5毫摩尔)、三苯膦(6.76克，25.8毫摩尔)和偶氮二羧酸二乙酯(4.06毫升，25.8毫摩尔)。将该混合物在室温下搅拌18小时，并在真空中去除溶剂。使用EtOAc/Hex(40∶60)作洗脱剂，将残留物通过快速色谱法提纯以制得标题化合物(4.68克，42％收率)。1H NMR(DMSO-d6)d(ppm)：8.58(dd，J＝4.7，1.4Hz，1H)，8.48(d，J＝8.0Hz，2H)，8.38(d，J＝2.0Hz，1H)，8.13(d，J＝9.0，2H)，7.72(d，J＝9.0Hz，2H)，7.61(ddd，J＝8.0，2.5，1.6Hz，1H)，7.39(dd，J＝8.2，4.9Hz，1H)，6.43(d，J＝9.0Hz，2H)，5.17(quint，J＝8.2Hz，1H)，3.77(dd，J＝10.4，7.2Hz，1H)，3.36(dd，J＝10.4，6.7Hz，1H)，3.26(dd，J＝15.1，7.8Hz，1H)，3.06(td，J＝12.3，3.3Hz，1H)，2.43-2.38(m，1H)，2.02-1.94(m，1H)，1.55(s，9H).m/z：525.3(MH+)。
步骤4：4-((S)-3-(吡啶-3-基氨基)吡咯烷-1-基)苯甲酸叔丁酯(365)
在硝基化合物364(4.68克，8.92毫摩尔)在DMF(45毫升)中的溶液中，连续加入氢氧化锂(1.31克，31.2毫摩尔)和巯基乙酸(930微升，13.4毫摩尔)。将该混合物在室温下搅拌3天，在真空中在80℃去除溶剂，并使残留物在EtOAc和H2O之间分相。收集有机层并用HCl 1N萃取。收集酸层，并用饱和NaHCO3溶液中和。形成白色沉淀物，将其用EtOAc萃取。将EtOAc溶液用盐水洗涤，经MgSO4干燥，并在真空中浓缩以制得白色固体状的标题化合物(1.65克，54％收率)。1H NMR：(丙酮-d6)δ(ppm)：8.08(d，J＝2.2Hz，1H)，7.86(d，J＝4.3Hz，1H)，7.79(d，J＝9.0Hz，2H)，7.09(dd，J＝8.2，4.3Hz，1H)，7.05(ddd，J＝8.2，2.7，1.6Hz，1H)，6.57(d，J＝8.8Hz，2H)，5.54(d，J＝6.5Hz，1H)，4.32(sext，J＝5.3Hz，1H)，3.78(dd，J＝10.2，5.9Hz，1H)，3.56(dd，J＝17.0，7.2Hz，1H)，3.47(td，J＝8.0，5.1Hz，1H)，3.31(dd，J＝10.2，3.9Hz，1H)，2.44(sext.，J＝7.8Hz，1H)，2.13(sext，J＝5.1Hz，1H)，1.56(s，9H).m/z：340.3(MH+)。
步骤5：(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(吡啶-3-基氨基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺 (361)
在化合物365(19毫克，0.56毫摩尔)在DCM 500微升中的悬浮液中加入三氟乙酸(200微升)。将溶液在50℃回流3小时并在真空中浓缩以制造白色固体。将该材料溶于DMF(500微升)，并用Et3N(16微升，0.118毫摩尔)和BOP(30毫克，0.067毫摩尔)处理。将反应混合物搅拌10分钟，并加入1，2-苯二胺(7毫克，0.061毫摩尔)和另一份Et3N(23微升，0.168毫摩尔)。将该混合物在室温下搅拌2小时并在真空中在80℃去除DMF。使残留物在EtOAc和H2O之间分相。收集有机层并用1NHCl萃取，并用饱和NaHCO3中和。形成沉淀物，将其用EtOAc萃取，经MgSO4干燥，并在真空中浓缩。使用MeOH/CHCl3(7∶93)作洗脱剂，将残留物通过快速色谱法提纯，制得标题化合物(11毫克，52％收率)。1H NMR：(CD3OD)δ(ppm)：7.97(d，J＝2.7Hz，1H)，7.86(d，J＝8.8Hz，2H)，7.78(dd，J＝4.7，1.0Hz，1H)，7.18-7.10(m，3H)，7.05(td，J＝7.4，0.6Hz，1H)，6.89(dd，J＝7.8，1.2Hz，1H)，6.76(td，J＝7.4，1.4Hz，1H)，6.64(d，J＝8.8Hz，2H)，4.25(quint，J＝4.9Hz，1H)，3.77(dd，J＝10.2，6.1Hz，1H)，3.57(dd，J＝17.0，7.0Hz，1H)，3.49(td，J＝8.0，5.3Hz，1H)，3.29(q，J＝6.7Hz，1H)，2.41(sext，J＝7.2Hz，1H)，2.10(sext，J＝4.9Hz，1H).m/z：372.4(MH+)。
实施例194：
(R)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(吡啶-3-基氨基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺(366)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是将(R)-(+)-3-吡咯烷醇换成(S)-(-)-3-吡咯烷醇，获得标题化合物(108毫克，21％收率)。1H NMR：(DMSO-d6)δ(ppm)：9.34(s，1H)，8.00(d，J＝2.3Hz，1H)，7.84(d，J＝8.8Hz，2H)，7.77(dd，J＝4.7，1.2Hz，1H)，7.12(d，J＝7.6Hz，1H)，7.08(dd，J＝8.0，4.5Hz，1H)，6.99-6.97(m，1H)，6.92(t，J＝7.8Hz，1H)，6.75(d，J＝7.8Hz，1H)，6.60-6.56(m，3H)，6.17(d，J＝6.8Hz，1H)，4.81(s，2H)，4.19-4.17(m，1H)，3.71(dd，J＝10.2，6.5Hz，1H)，3.53-3.47(m，1H)，3.42-3.38(m，1H)，3.18(dd，J＝10.4，4.1Hz，1H)，2.32(sext，J＝6.3Hz，1H)，1.99(sext，J＝4.7 Hz，1H).m/z：374.2(MH+)。
实施例195：
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(吡啶-3-基氧基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺(367)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是跳过步骤1和4并将化合物362换成3-羟基吡啶，获得标题化合物(24毫克，44％收率)。1H NMR：(丙酮-d6)δ(ppm)：8.88(s，1H)，8.31(d，J＝2.9Hz，1H)，8.19(d，J＝4.7Hz，1H)，7.93(d，J＝8.8Hz，2H)，7.41(ddd，J＝8.4，2.9，1.4Hz，1H)，7.3 1(ddd，J＝8.4，4.5，0.6Hz，1H)，7.26(d，J＝7.8Hz，1H)，6.97(td，J＝7.8，1.4Hz，1H)，6.85(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，6.66(d，J＝9.0Hz，2H)，6.65(td，J＝8.0，1.4Hz，1H)，5.34-5.32(m，1H)，4.62(s，2H)，3.84(dd，J＝11.3，4.7Hz，1H)，3.6 1-3.56(m，3H)，2.50-2.34(m，2H).m/z：375.2(MH+)。
实施例196：
(R)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(吡啶-3-基氧基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺(368)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是跳过步骤1和4并将化合物362换成3-羟基吡啶并将(R)-(+)-3-吡咯烷醇换成(S)-(-)-3-吡咯烷醇，获得标题化合物(14毫克，12％收率)。1H NMR：(丙酮-d6)δ(ppm)：8.85(s，1H)，8.31(d，J＝2.9Hz，1H)，8.19(dd，J＝4.5，1.2Hz，1H)，7.93(d，J＝8.8Hz，2H)，7.42(ddd，J＝8.4，2.9，1.4Hz，1H)，7.31(ddd，J＝8.4，4.7，0.8Hz，4H)，7.26(d，J＝7.8，1.6Hz，1H)，6.97(td，J＝7.2，1.6Hz，1H)，6.85(dd，J＝7.8，1.2Hz，1H)，6.68(d，J＝8.8Hz，6.66(td，J＝7.6，1.4Hz，1H)，3.56-5.33(m，1H)，4.60(bs，2H)，3.86(dd，J＝11.3，4.7Hz，1H)，3.62-3.57(m，3H)，2.50-2.35(m，2H).m/z：375.2(MH+)。
实施例197：
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(苯基氨基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺(369)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是将化合物3-氨基吡啶换成苯胺，获得标题化合物(7毫克，16％收率)。1H NMR：(丙酮-d6)δ(ppm)：8.84(s，1H)，7.91(d，J＝8.8Hz，2H)，7.25(dd，J＝7.8，1.2Hz，1H)，7.12(t，J＝7.2Hz，2H)，6.96(dt，J＝8.0，1.4Hz，1H)，6.85(d，J＝8.0Hz，1H)，6.71(dd，J＝8.8，1.0Hz，2H)，6.66(t，J＝7.8Hz，1H)，6.62(d，J＝8.8Hz，2H)，5.26(d，J＝7.6Hz，1H)，4.60(bs，1H)，4.30(quint，J＝5.3Hz，1H)，3.79(dd，J＝10.0Hz，1H)，3.57(q，J＝9.6Hz，1H)，3.50-3.45(m，1H)，3.30(dd，J＝10.2，3.9Hz，1H)，2.42(sext，J＝6.8Hz，1H).m/z：373.1(MH+)。
实施例198：
(R)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(苯基氨基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺(370)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是将3-氨基吡啶换成苯胺并将(R)-(+)-3-吡咯烷醇换成(S)-(-)-3-吡咯烷醇，获得标题化合物(22毫克，23％收率)。1H NMR(CDCl3)δ 7.79(m，2H)，7.2-7.4(m，2H)，7.05(s，1H)，6.8(m，3H)6.65(m，2H)，6.53(m，2H)，4.24(br.s.，1H)，3.9(m，2H)，3.73(m，1H)，3.26(m，1H)，2.37(m，1H)，2.09(m，1H)m/z：373.3(MH+)。
实施例199：
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-苯氧基吡咯烷-1-基)苯甲酰胺(371)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是跳过步骤1和4并将化合物362换成苯酚，获得标题化合物(50毫克，33％收率)。1H NMR(CDCl3)δ 7.79(μ，3H)，7.3(m，3H)，7.03(m，1H)，6.96(m，1H)，6.90(d，2H，J＝8.8Hz)，6.80(m，2H)，6.54(d，J＝8.8Hz，2H)，5.08(br.s.，1H)，3.71(dd，J＝4.7Hz，J＝11.0Hz，1H)，3.6(m，3H)，2.41(m，1H)，2.31(m，1H)m/z：374.2(MH+)。
实施例200：
(S)-4-(1-(4-(2-氨基苯基氨基甲酰基)苯基)吡咯烷-1-基氧基)苯甲酸甲酯 (372)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是跳过步骤1和4并将化合物362换成4-羟基苯甲酸甲酯，获得标题化合物(143毫克，42％收率)。1H NMR(CDCl3)δ8.0(m，2H)，7.81(m，2H)，7.72(s，1H)，7.25(m，1H)，7.06(m，1H)，6.91(m，2H)，6.84(m，2H)，6.59(m，2H)，5.16(br.s.，1H)，3.9(s，3H)，3.78(m，1H)，3.60(m，3H)，2.4(m，2H)m/z：432.4(MH+)。
实施例201：
(S)-4-(1-(4-(2-氨基苯基氨基甲酰基)苯基)吡咯烷-3-基氧基)苯甲酸 (373)
将372(100毫克，0.23毫摩尔)和KOH(100毫克，1.78毫摩尔)在THF/水/MeOH的1∶1∶1混合物(6毫升)中的溶液在室温下搅拌5天。将反应混合物浓缩并在水(5毫升)和乙醚(5毫升)之间分相。弃置有机相，并使用1M HCl溶液将水相酸化至pH＝6，并用EtOAc萃取。将萃取液经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，将残留物通过快速色谱法(洗脱剂MeOH-DCM(MeOH梯度从5至20％MeOH))提纯以制得标题化合物(20毫克，21％收率)。1H NMR(DMSO)δ9.34(σ，1H)，7.85(m，4H)，7.11(d，1H，J＝7.8Hz)，7.00(d，J＝8.4Hz，2H)，6.92(d，2H，J＝7.7Hz)，6.75(d，J＝8.0Hz，2H)，6.6(m，3H)，5.26(br.s.，1H)，3.75(m，1H)，[3.34 DMSO，4H]，2.44(m，1H)，2.31(m，1H)m/z：418.4(MH+)。
实施例202：
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(3，4，5-三甲氧基苯氧基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺 (374)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是跳过步骤1和4并将化合物362换成3，4，5-三甲氧基苯酚，获得标题化合物(30毫克，21％收率)。1H NMR(CDCl3)δ 7.79(d，2H，J＝8.8Hz)，7.73(s，1H)，7.26(d，1H，J＝7.4Hz)，7.05(t，J＝7.7Hz，1H)，6.81(d，2H，J＝7.7Hz)，6.57(d，J＝8.7Hz，2H)，6.14(s，2H)，5.04(br.s.，1H)，3.88(s，6H)，3.80(s，3H)，3.71(dd，J＝4.7Hz，J＝11.0Hz，1H)，3.6(m，3H)，2.41(m，1H)，2.3 1(m，1H)m/z；464.4(MH+)。
实施例203：
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(苯并[d][1，3]二氧杂环戊烯-5-基氧基))吡咯烷 -1-基)苯甲酰胺(375)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是跳过步骤1和4并将化合物362换成苯并[d][1，3]二氧杂环戊烯-5-醇，获得标题化合物(31毫克，15％收率)。1H NMR(CDCl3)δ 8.95(s，1H)，7.87(d，2H，J＝8.0Hz)，7.80(d，J＝8.7Hz，1H)，7.67(s，1H)，7.48(s，.5H)7.04(m，1H)，6.83(m，1H)，6.71(m，1H)，6.57(d，2H)，6.48(s，1H)，6.33(m，1H)，5.93(s，2H)，4.96(br.s.，1H)，3.67(m，1H)，3.57(m，3H)，2.36(m，1H)，2.26(m，1H)m/z：418.2(MH+)。
实施例204：
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(4-苯氧基苯氧基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺(376)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是跳过步骤1和4并将化合物362换成4-苯氧基苯酚，获得标题化合物。1H NMR(CDCl3)δ 7.81(m，2H)，7.70(s，1H)，7.67(s，.5H)，7.2-7.4(m，4H)6.8-7.2(m，10H)，6.6(m，2H)，5.05(br.s.，1H)，3.6(m，1H)，3.5(m，3H)，2.41(m，1H)，2.32(m，1H)m/z：466.4(MH+)。
实施例205：
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(4-硝基苯氧基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺(377)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是跳过步骤1和4并将化合物362换成4-硝基苯酚，获得标题化合物(12毫克，6％收率)。1H NMR(CDCl3)δ8.12(d，2H，J＝9.1Hz)，7.72(d，J＝8.8Hz，2H)，7.18(d，J＝7.3Hz，1H)，6.97(t，1H，J＝7.7Hz)，6.87(d，J＝9.1Hz，2H)，6.50(d，2H，J＝8.6Hz)，5.09(br.s.，1H)，3.71(dd，J＝4.5Hz，J＝11.3Hz，1H)，3.6(m，3H2.3(m，2H)m/z：419.1(MH+)。
实施例206：
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(吡啶-2-基硫基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺(378)
按照与反应方案69，实施例193中所述相同的程序，但是跳过步骤1和4并将化合物362换成吡啶-2-硫醇，获得标题化合物(22毫克，28％收率)。1H NMR(CDCl3)δ8.44(μ，1H)，7.78(d，J＝8.8Hz，2H)，7.69(s，1H)，7.49(t，1H，J＝7.4Hz)，7.27(m，1H)，7.18(d，1H，J＝8.0Hz)，7.0-7.1(m，2H)，6.82(d，7.8Hz，2H)，6.55(d，J＝9.0Hz，2H)，4.55(m，1H)，3.9-4.0(m，3H)，3.4-3.6(m，4H)2.6(m，1H)，2.2(m，1H)m/z：391.0(MH+)。
表13.按照反应方案69制成的实施例193-206的表征
Figure A20058001611202371
Figure A20058001611202391
反应方案70
Figure A20058001611202401
实施例207：
N-(2-氨基苯基)-5-((4-(吡啶-2-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)噻吩-2-羧酰胺 (379)
步骤1：2-(5-甲酰基噻吩-2-羧酰氨基)苯基氨基甲酸叔丁酯(380)
在5-甲酰基噻吩-2-羧酸(350毫克，2.24毫摩尔)、2-氨基苯基氨基甲酸叔丁酯(467毫克，2.24毫摩尔)和三乙胺(470微升，340毫克，3.36毫摩尔)和BOP(1.1克，2.68毫摩尔)在DMF(10毫升)中的溶液在室温下搅拌2小时。将反应混合物浓缩并使用在己烷中的25％EtOAc作洗脱剂通过快速色谱法提纯，产生260毫克(33％)标题化合物。1HNMR(CDC13)δ9.95(s，1H)，9.7(br.s，1H)，7.84(d，1H，J＝8.0Hz)，7.74(m，2H)，7.15(m，2H)，6.72(s，1H)，1.56(s，9H).LRMS：(计算值)346.1；(实测值)369.1(M+Na)。
步骤2：2-(5-((4-(吡啶-2-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)噻吩-2-羧酰氨基)苯基 氨基甲酸叔丁酯(381)
将醛380(260毫克，0.75毫摩尔)、4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-胺(85毫克，0.5毫摩尔)和乙酸(100微升)在DCE(2毫升)中的溶液用NaBH(OAc)3(22毫克，1毫摩尔)处理，并将所得混合物在室温下搅拌过夜。然后加入饱和NaHCO3(5毫升)使其骤冷，并将水相用EtOAc萃取。将有机萃取液用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，制得粗产物，使用80-20％混合物EtOAc-己烷作洗脱剂通过快速色谱法将其提纯，制得标题化合物(35毫克，14％收率)。LRMS：(计算值)502.2；(实测值)503.4(M+H1)。
N-(2-氨基苯基)-5-((4-(吡啶-2-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)噻吩-2-羧酰胺 (379)
将381(35毫克，0.07毫摩尔)在DCM和TFA的1∶1混合物(4毫升)中的溶液在室温下搅拌30分钟。将反应混合物浓缩以产生固体，将其用醚研制以提供作为TFA盐的标题化合物(26毫克，75％收率)。1H NMR(MeOH-d4)δ9.31(s，1H)，8.68(s，1H)，8.66(s，1H)，8.43(d，J＝5.1Hz，1H)，7.77(d，J＝3.9Hz，1H)，7.68(m，1H)，7.1-7.5(m，6H).LRMS：(计算值)402.2；(实测值)403.3(M+H1)。
反应方案71
Figure A20058001611202411
实施例208：
N-(2-氨基苯基)-4-((3-(6-甲氧基吡啶-2-基)-1H-毗唑-5-基氨基)甲基)苯 甲酰胺(382)
步骤1：3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-胺(383)
用BuLi在己烷中的2.5M溶液(7.2毫升，17.96毫摩尔)在-78℃处理在THF(20毫升)中的MeCN(940微升，736毫克，17.96毫摩尔)，并将反应混合物在相同温度下搅拌30分钟，用6-甲氧基烟酸甲酯(2克，11.96毫摩尔)在THF(10毫升)中-78℃的溶液处理，并在室温下再搅拌2小时。然后加入水(10毫升)和1M HCl溶液(10毫升)将其骤冷。将所得混合在真空中浓缩，将残留物与一水合肼(5毫升)在EtOH(30亳升)中混合，回流2小时，冷却并减压浓缩以制得固体，使用在DCM中的10％MeOH作洗脱剂通过快速色谱法将其提纯，产生标题化合物(720毫克，32％收率)。1H NMR(MeOH-d4)δ8.39(s，1H)，7.89(d，J＝8.6Hz，1H)，6.80(d，J＝8.6Hz，1H)，5.85(s，1H)，3.91(s，3H).LRMS：(calc)190.1；(found)191.1(M+H1)。
步骤2：4-((3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1H-[吡唑-5-基氨基)甲基)苯甲酸甲酯 (384)
将胺383(720毫克，3.79毫摩尔)、4-甲酰基苯甲酸甲酯(745毫克，4.54毫摩尔)和Bu2SnCl2(230毫克，0.76毫摩尔)在无水THF(5毫升)中的溶液在室温下搅拌2小时。然后将其用PhSiH3(514微升，451毫克，4.17毫摩尔)处理，并使其在室温下再搅拌1小时。加入MeOH并剧烈搅拌45分钟，由此将反应混合物骤冷。然后将其在真空中浓缩并使用在己烷中的梯度50-100％EtOAc通过快速色谱法将残留物提纯，以制得标题化合物(672毫克，52％收率)。LRMS：(计算值)338.1；(实测值)339.2(M+H1)。
步骤3：4-((3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基氨基)甲基)苯甲酸(385)
将384(672毫克，1.99毫摩尔)和KOH(300毫克，5.35毫摩尔)在THF、MeOH和水的1∶1∶1混合物(9毫升)中的水溶液在室温下搅拌过夜。添加1M HCl将反应混合物酸化至pH＝4，并在真空中浓缩，用水研制残留物，过滤收集固体，并干燥以制得标题化合物(640毫克，99％收率)。LRMS：(计算值)324.1；(实测值)325.2(M+H1)。
步骤4：N-(2-氨基苯基)-4-((3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基氨基) 甲基)苯甲酰胺(382)
将385(640毫克，1.97毫摩尔)在MeCN(10毫升)中的溶液依次用Et3N(831微升，603毫克，5.96毫摩尔)、EDC(571毫克，2.98毫摩尔)、HOBT(334毫克，2.18毫摩尔)和1，2-苯二胺(429毫克，3.97毫摩尔)处理，并将其搅拌过夜。将反应混合物浓缩并在DCM(15毫升)和饱和NH4Cl(15毫升)之间分相。收集有机相，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。使用在DCM中的梯度3-15％MeOH通过快速色谱法将所得固体提纯，制得标题化合物(113毫克，14％收率)。1H NMR(DMSO-d6)δ 9.65(s，1H)，8.43(s，1H)，7.92(m，3H)，7.48(d，J＝8.0Hz，2H)，7.16(d，J＝7.4Hz，1H)，6.97(t，J＝7.6Hz，1H)，6.81(t，J＝8.2Hz，2H)，6.63(t，J＝7.4Hz，1H)，5.85(s，1H)，4.34(s，2H)，3.85(s，3H).LRMS：(计算值)414.2；(实测值)415.3(M+H1)。
实施例209：N-(2-氨基苯基)-4-((3-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基氨基)甲基) 苯甲酰胺(386)
按照反应方案71(实施例208)以烟酸甲酯为原料制备标题化合物。1H NMR(MeOH-d4)δ 8.80(s，1H)，8.43(d，J＝3.9Hz，1H)，8.04(m，2H)，7.94(d，J＝8.2Hz，2H)，7.53(d，J＝8.2Hz，1H)，7.43(m，1H)，7.15(d，J＝7.6Hz，1H)，7.05(t，J＝7.2Hz，2H)，6.88(d，J＝8.0Hz，1H)，6.75(t，J＝7.4Hz，1H)，5.94(s，1H)，4.45(s，2H).LRMS：(计算值)384.2；(实测值)385.2(M+H1)。
实施例210：N-(2-氨基苯基)-4-((3-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基氨 基)甲基)苯甲酰胺(387)
Figure A20058001611202432
按照反应方案71(实施例208)以3，4，5-三甲氧基苯甲酸甲酯为原料制备标题化合物。1H NMR(MeOH-d4)δ 7.92(d，J＝8.4Hz，2H)，7.53(d，J＝8.0Hz，2H)，7.16(d，J＝7.9Hz，1H)，7.06(t，J＝7.8Hz，1H)，6.93(s，2H)，6.88(d，J＝8.0Hz，1H)，6.75(t，J＝7.6Hz，1H)，5.89(s，1H)，4.45(s，2H)，3.87(s，6H)，3.77(s，3H).LRMS：(计算值)473.3；(实测值)474.4(M+H1)。
实施例211：N-(2-氨基苯基)-4-((4-氯-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1H-吡唑 -5-基氨基)甲基)苯甲酰胺(388)
Figure A20058001611202441
步骤1、2和3：4-((3-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基氨基)甲基)苯甲 酸(389)
按照反应方案71，步骤1、2和3，在第一步骤中使用3，4，5-三甲氧基苯甲酸甲酯代替6-甲氧基烟酸甲酯，获得标题化合物。LRMS：(计算值)383.1；(实测值)384.2(M+H1)。
步骤4：N-(2氨基苯基)-4-((4-氯-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基 氨基)甲基)苯甲酰胺(388)
将389(30毫克，0.08毫摩尔)在DCM和SOCl2的1∶1混合物(2毫升)中的溶液在室温下搅拌30分钟。将反应混合物浓缩并用1，2-苯二胺(18毫克，0.16毫摩尔)在THF(2毫升)中的溶液处理，并在室温下搅拌15分钟，减压浓缩以产生固体，将其通过制备HPLC(柱AQUASILC-18；5μM；230×21.2毫米；洗脱剂30-95％在水中的MeOH)提纯以制得标题化合物(8毫克，20％收率)。1H NMR(MeOH-d4)δ7.92(d，J＝8.3Hz，2H)，7.52(d，J＝8.2Hz，2H)，7.17(d，J＝7.6Hz，1H)，7.06(m，3H)，6.89(d，J＝7.8Hz，1H)，6.75(t，J＝7.2Hz，1H)，4.55(s，2H)，3.89(s，6H)，3.80(s，3H).LRMS：(计算值)507.2；(实测值)508.3(M+H1)。
反应方案72
Figure A20058001611202442
实施例212：
N-(2-氨基苯基)-4-((8-甲基-7-氧基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基) 甲基)苯甲酰胺(389)
步骤1.2-(4-(Boc-氨基甲基)苯甲酰氨基)苯基氨基甲酸叔丁酯(391)
将4-((叔丁氧基羰基氨基)甲基)苯甲酸(1克，3.98毫摩尔)在DMF(10毫升)中的溶液依次用EDC(930毫克，4.84毫摩尔)、HOBT(682毫克，4.46毫摩尔)和Et3N(670微升，489毫克，4.84毫摩尔)在室温下处理，并搅拌过夜。将反应混合物减压浓缩并在氯仿(10毫升)和水(10毫升)之间分相。收集有机相，用1M HCl(10毫升)和饱和NaHCO3(10毫升)洗涤，干燥，过滤并蒸发以形成残留物，使用在己烷中的30％EtOAc作洗脱剂，通过快速色谱法将其提纯以制得标题化合物(840毫克，51％)。LRMS：(计算值)441.2；(实测值)442.2(M+H1)。
步骤2.4-(氨基甲基)-N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺(392)
将391(840毫克，1.9毫摩尔)在DCM/TFA的2∶1混合物(6毫升)中的溶液在室温下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩以产生作为单和二-TFA盐的混合物的标题化合物。(1.33克，100％收率)。LRMS：(计算值)241.2；(实测值)242.2(M+H1)。
步骤3.N-(2-氨基苯基)-4-((8-甲基-7-氧基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-2- 基氨基)甲基)苯甲酰胺(390)
将亚砜393(Barvian，M.et al.J.Med.Chem.(2001)44(6)；1016-1016)(166毫克，0.74毫摩尔)、二胺392(535毫克，2.23毫摩尔)和三乙胺(620微升，4.46毫摩尔)在DME(3毫升)中的溶液在室温下搅拌3小时。将反应混合物浓缩并在EtOAc(5毫升)和水(5毫升)之间分相。收集有机相并连续用NH4Cl饱和溶液(5毫升)和NaHCO3饱和溶液(5毫升)洗涤，经Mg2SO4干燥，过滤并浓缩以产生残留物，将其用1∶1EtOAc/己烷溶液研制以制得标题化合物(48毫克，16％收率)。1H NMR(CDCl3)δ3.62(s，3H)，4.80(m，2H)，6.42(d，J＝10Hz，1H)，6.85(d，J＝8Hz，2H)，7.10(m，1H)，7.30(m，1H)，7.50(m，2H)，7.87(s，1H)，7.897(m，2H)，8.43(s，1H).LRMS：(计算值)400.0；(实测值)401.0(M+H1)。
实施例213：
N-(2-氨基苯基)-4-((7-氧基-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)甲基) 苯甲酰胺(394)
以通过与亚砜393类似的文献程序获得的亚砜395为原料，按照与实施例212(反应方案72)类似的方式制备标题化合物。1H NMR(DMSO)δ4.60(s，2H)，4.90(s，2H)，6.10(d，J＝10Hz，1H)，6.55(t，J＝7Hz，2H)，6.75(m，1H)，6.90(t，J＝7Hz，2H)，7.10(m，2H)，7.40(m，2H)，7.65(m，1H)，7.90(m，1H)，8.55(s，1H)，9.69(s，1H).LRMS：(计算值)386.0；(实测值)387.0(M+H1)。
反应方案73
Figure A20058001611202462
实施例214：
S)-N-(1-(4-(2-氨基苯基氨基甲酰基)苯基)吡咯烷-3-基)烟酰胺(396)
步骤1.(S)-4-(3-氨基吡咯烷-1-基)苯甲酸叔丁酯(397)
使用与反应方案69，步骤2中所述相同的程序，与氨基酯363类似地获得标题化合物。1H NMR(CDCl3)δ7.83(d，J＝8.8Hz，1H)，6.46(d，J＝8.8Hz，1H)，3.75(m，1H)，3.35-3.6(m，3H)，3.06(dd，J＝4.7Hz，J＝9.8Hz，1H)，2.26(m，1H)，1.85(m，1H)，1.57(s，9H)，LRMS：(计算值)262.1；(实测值)263.0(M+H1)。
步骤2.(S)-4-(3-(烟酰氨基)吡咯烷-1-基)苯甲酸叔丁酯(398)
将397(100毫克，0.38毫摩尔)、Et2N(160微升，1.14毫摩尔)和烟酰氯HCl盐(68毫克，0.38毫摩尔)在DCM(2毫升)中的溶液在室温下搅拌1小时，并通过加入饱和NH4Cl水溶液(5毫升)将其骤冷。分离水相，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以产生残留物，使用在DCM中的5％MeOH作洗脱剂通过快速色谱法将其提纯以制得标题化合物(110毫克，79％收率)。LRMS：(计算值)367.2；(实测值)368.1(M+H1)。
步骤3.(S)-4-(烟酰氨基)吡咯烷-1-基)苯甲酸(399)
使用与反应方案28，步骤5中所述相同的程序，与化合物117类似地获得作为单盐和二盐混合物的标题化合物。LRMS：(计算值)311.1；(实测值)312.1(M+H1)。
步骤4.(S)-N-(1-(4-(2-氨基苯基氨基甲酰基)苯基)吡咯烷-3-基)烟酰胺 (396)
将399(93毫克，0.3毫摩尔)、苯二胺(65毫克，0.6毫摩尔)、EDC(86毫克，0.45毫摩尔)、HOBT(53毫克，0.33毫摩尔)和Et3N(125微升，91毫克，0.9毫摩尔)在乙腈(2毫升)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩，并使用在DCM中的梯度5-20％MeOH作洗脱剂，通过快速色谱法将残留物提纯以制得标题化合物(24毫克，16％收率)。1H NMR(CDCl3)δ 8.97(s，1H)，8.66(d，J＝4.9Hz，1H)，8.21(d，J＝3.9Hz，1H)，7.87(d，2H，J＝8.8Hz)，7.52(dd，J＝5.1Hz，J＝8.0Hz，1H)，7.15(d，1H，J＝7.9Hz)，7.05(t，J＝8.1Hz，1H)，6.89(d，J＝7.6Hz，1H)，6.76(t，J＝7.3Hz，1H)，6.66(d，J＝9.0Hz，2H)，4.78(m，1H)，3.80(dd，J＝6.7Hz，J＝10.2Hz，1H)，3.61(m，1H)，3.49(m，1H)，3.41(m，1H)，2.4(m，1H)，2.2(m，1H).LRMS：(计算值)401.2；(实测值)402.2(M+H1)。
反应方案74
Figure A20058001611202471
实施例215：
N-(2-氨基苯基)-4-((S)-3-((S)-吡啶-2-基亚磺酰基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺 (400)
将378(15毫克，0.04毫摩尔)和mCPBA(6毫克，0.04毫摩尔)在DCM(2毫升)中的溶液在室温下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，并使用在DCM中的梯度EtOAc至5％MeOH作洗脱剂，通过快速色谱法将残留物提纯以制得标题化合物(13毫克，80％收率)。1H NMR(CDCl3)δ1H NMR(CDCl3)δ8.63(m，1H)，8.58(m，1H)，7.6-8.0(m，10H)，7.40(m，2H)，7.25(m，1H)，7.05(m，2H)，6.85(m，3H)，6.58(d，J＝8.8Hz，2H)，6.50(d，J＝11.1Hz，2H)，3.7-4.0(m，6H)，3.2-3.5(m，4H)，2.4-2.8(m，3H)，2.95(m，1H).LRMS：(计算值)406.1；(实测值)407.1(M+H1)。
化验实施例1
组蛋白脱乙酰基酶酶活性的抑制
1.人类HDAC-1
化验1.在从杆状病毒昆虫细胞表达系统中表达和提纯的克隆重组人类HDAC-1酶中，筛选HDAC抑制剂。对于脱乙酰基酶化验，将20,000cpm的[3H]-代谢标记的乙酰化组蛋白底物(M.Yoshida等，J.Biol.Chem.265(28)：17174-17179(1990))用30微克克隆重组hHDAC-1在37℃培养10分钟。加入乙酸(0.04M，最终浓度)和HCl(250mM，最终浓度)以终止反应。将混合物用乙酸乙酯萃取，并通过闪烁计数确定释放出的[3H]-乙酸的量。对于抑制研究，将酶用化合物在4℃预培养30分钟，然后开始进行酶化验。用各种化合物产生剂量响应曲线并测定产生最大抑制50％时的抑制剂浓度，由此确定HDAC酶抑制剂的IC50值。
化验2.还使用下列规程检测本发明的化合物。在该化验中，所用缓冲剂是25mM HEPES，pH 8.0、137mM NaCl、2.7mM KCl、1mMMgCl2，并且底物是在50mM DMSO储液中的Boc-Lys(Ac)-AMC。酶储液是在缓冲剂中的4.08微克/毫升。将化合物用酶(20微升，4.08微克/毫升)在室温下预培养(在2微升DMSO中，用缓冲剂稀释至13微升以转移到化验板)10分钟(35微升预培养体积)。将混合物在室温下预培养5分钟。使温度达到37℃并添加16微升底物以开始反应。总反应体积为50微升。在20分钟后加入50微升如Biomol(Fluor-de-Lys developer，Cat.#K1-105)所指示制成的显影剂以终止反应。将板在暗处于室温下培养10分钟，然后读数(λEx＝360纳米，λEx＝470纳米，在435纳米的截止滤波器)。
代表性化合物的IC50值列在表14中。使用化验1测量化合物10c、13e、16d、26b、44、47、61a、61b、63、134、138和308的HDAC活性。使用化验2测量化合物361、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377和378的HDAC活性。在表14中，“a”是指≤0.1μM的活性，“b”是指≤1μM的活性，“c”是指≤5μM的活性，而“d”是指＞5μM的活性。对于表14中的H4-Ac T24 EC vs.MS-275化验，“u”是指小于1，“v”是指1，“w”是指大于1。对于表14中的H3 Ac t24化验，“x”是指≤1μM的活性，“y”是指≤10μM的活性，而“z”是指≤20μM的活性。
2.MTT化验
在化合物处理的前一天，将HCT116细胞(2000/孔)装入96孔组织培养板中。在细胞中加入各种浓度的化合物。将细胞在5％CO2培养器中于37℃培养72小时。以0.5毫克/毫升的最终浓度加入MTT(溴化3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基四唑鎓，Sigma)，并与细胞培养4小时，然后在培养细胞上加入1体积的溶解缓冲剂(50％N，N-二甲基甲酰胺，20％SDS，pH 4.7)。在培养过夜之后，使用MR700板读数器(Dynatech Laboratories Inc.)用630纳米的基准点在570纳米处进行比色读数，由此确定溶解染料的量。按照相关细胞系的标准生长曲线，将OD值转化成细胞数。将细胞数降至经溶剂处理的细胞的50％时的浓度，被确定为MTT IC50。代表性化合物的IC50值列在表14中。在表14中。“a”是指≤0.1μM的活性，“b”是指≤1μM的活性，“c”是指≤5μM的活性。
3.通过免疫印迹法在整个细胞中的组蛋白H4乙酰化
将在培养物中生长的T24人类膀胱癌细胞与HDAC抑制剂培养16小时。在培养期之后，如M.Yoshida等(J.Biol.Chem.265(28)：17174-17179(1990))所述从细胞中提取组蛋白。将20克总组蛋白装在SDS/PAGE上，并转移到硝化纤维膜上。用对乙酰化组蛋白H-4特异性的多克隆抗体(Upstate Biotech Inc.)，然后用辣根过氧化物酶共轭二次抗体(Sigma)探测该膜。然后用Kodak膜(Eastman Kodak)进行提高的化学发光(ECL)(Amersham)检测。通过测密度法确定乙酰化H-4信号的数量。代表性数据列在表14中。数据表示为使用本发明所示化合物有效地将乙酰化H-4信号降低50％(EC50)所需的浓度，与使用对照化合物MS-275有效地将乙酰化H-4信号降低50％(EC50)所需的浓度的比率。如果显示比率为1，那么本发明的化合物与MS-275对照化合物的效力相同。如果比率低于1，那么本发明的化合物比MS-275对照化合物更有效。在Suzuki等，J.Med.Chem.1999，pp.3001-3003中可以找到关于MS-275化合物的进一步信息。
Figure A20058001611202501
4.组蛋白H3乙酰化化验
将在培养物中生长的T24人类膀胱癌细胞与HDAC抑制剂培养16小时。加入10微升Alamar Blue(BioSource，DAL1100)以测定细胞存活力。将细胞用PBS清洗一次，并用预冷至-20℃的甲醇固定10分钟。然后将细胞用PBS清洗两次。将固定的细胞用50微升PBS+0.1％TritonX-100阻滞(block)。用rabbit-anti-acetyl-H3(Upstate#06-599)作为一次抗体探测细胞，然后用goat-anti-rabbit-HRP(Sigma#A-0545)作为二次抗体探测细胞。在添加Amplex-Red之后，通过荧光计以Ex：500、Em：610，Cutoff：590(Auto PMT，15读数/孔)读取荧光。对照源自AlamarBlue的细胞存活力将荧光信号标准化。数据作为EC50列在表14中。测量MS-275的最大乙酰化信号(荧光单位)作为Emax。产生50％Emax的化合物浓度为EC50。在表14中，“x”是指≤1μM的活性，“y”是指≤10μM的活性，且“z ”是指≤20μM的活性。
表14：所选HDAC抑制剂的体外特征(profile)
Figure A20058001611202511
Figure A20058001611202551
化验实施例2
组蛋白脱乙酰基酶抑制剂对人类肿瘤异种移植物的体内抗肿瘤作用
在8至10周龄的雌性BCD1小鼠(Taconic Labs，Great Barrington，NY)的胁腹区域皮下注射2×106预处理的HCT116人类结肠直肠癌细胞、SW48结肠癌细胞、和A549肺癌细胞。在相同的裸鼠系中，通过最少三次连续肿瘤移植进行这些细胞的预处理。随后，切除大约30毫克的肿瘤片段，并皮下植入Forene麻醉(Abbott Labs，Geneva，Switzerland)下的小鼠的左胁腹区域。当肿瘤达到100立方毫米的平均体积时，用组蛋白脱乙酰基酶抑制剂的DMSO溶液以10毫克/千克的初始剂量每天进行腹膜内注射以治疗小鼠。通过按照标准规程的剂量响应试验，确定HDAC抑制剂的最佳剂量。按照标准方法在注射之后每隔一天计算肿瘤体积(例如Meyer等，Int.J.Cancer 43：851-856(1989))。相对于仅用载体(也就是不用HDAC抑制剂)进行处理的对照物，用本发明的HDAC抑制剂进行处理造成肿瘤重量和体积的明显降低。
化验实施例3
组蛋白脱乙酰基酶抑制剂和组蛋白脱乙酰基酶反义寡核苷酸对肿瘤细
胞的体内结合抗肿瘤作用
本实施例的目的是阐明本发明的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂和组蛋白脱乙酰基酶反义寡核苷酸结合使用，以提高对哺乳动物体内肿瘤生长的抑制的能力。优选地，反义寡核苷酸和HDAC抑制剂抑制了相同组蛋白脱乙酰基酶的表达和活性。
每天用含有大约0.1-30毫克/千克体重的组蛋白脱乙酰基酶反义寡核苷酸的盐水制剂处理带有植入HCT116肿瘤(平均体积100立方毫米)的小鼠。第二组小鼠每天用含有大约0.01-5毫克/千克体重的HDAC抑制剂的药学可接受的制剂进行处理。
一些小鼠既接受反义寡核苷酸又接受HDAC抑制剂。在这些小鼠中，一组可经尾血管同时静脉内注射而接受反义寡核苷酸和HDAC抑制剂。另一组可经尾血管接受反义寡核苷酸，并经皮下接受HDAC抑制剂。又一组可经皮下既接受反义寡核苷酸又接受HDAC抑制剂。类似地建立小鼠对照组，其不接受任何处理(例如仅用盐水)、仅接受错配的反义寡核苷酸、不抑制组蛋白脱乙酰基酶活性的对照化合物、和具有对照化合物的错配的反义寡核苷酸。
用测径器测量肿瘤体积。与对照物相比，用反义寡核苷酸加上本发明的组蛋白脱乙酰基酶蛋白抑制剂进行的处理明显降低了肿瘤重量和体积。
表15.％抑制(相对于载体对照物)
化合物 实施例    剂量 mg/kg 路径   加入的 动物数 HCT116 SW48 A549
10a 2 30 ip 6 16.1 23.0 -
26b 30 40 ip 6 - 75.1 74.4
26c 32 30 ip 6 88.0 89.5 -
29a 34 30 ip 6 - 70.2 31.8
31b 37 30 ip 6 39.4 47.8 -
34a 39 30 ip 6 - 25.5 67.1
58b 47 30 ip 6 29.4 34.6 -
138 76 30 ip 6 79.8 - 83.7
158 82 30 ip 6 - 43.2 42.6
194 93 30 ip 6 54.5 23.1 -
212f 104 30 ip 6 65.7 32.7 -
212h 106 30 ip 6 - 44.0 54.4
252 133 30 ip 6 70.6 25.9 -
296 161 30 ip 6 63.9 53.4 -
           序列表
<110>梅特希尔基因公司
<120>组蛋白脱乙酰基酶的抑制剂
<130>325-502PCT
<140>N/A
<141>2005-03-29
<150>US 60/556,828
<151>2004-03-26
<160>17
<170>FastSEQ for Windows Version 4.0
<210>1
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDACl区域互补的反义寡核苷酸
<400>1
gaaacgtgag ggactcagca                                20
<210>2
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDACl区域互补的反义寡核苷酸
<400>2
ggaagccaga gctggagagg                                20
<210>3
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDACl区域互补的反义寡核苷酸
<400>3
gttaggtgag gcactgagga                                20
<210>4
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC2区域互补的反义寡核苷酸
<400>4
gctgagctgt tctgatttgg                              20
<210>5
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC2区域互补的反义寡核苷酸
<400>5
cgtgagcact tctcatttcc                              20
<210>6
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC3区域互补的反义寡核苷酸
<400>6
cgctttcctt gtcattgaca                              20
<210>7
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC3区域互补的反义寡核苷酸
<400>7
gcctttccta ctcattgtgt                              20
<210>8
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC4区域互补的反义寡核苷酸
<400>8
gctgcctgcc gtgcccaccc                              20
<210>9
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC4区域互补的反义寡核苷酸
<400>9
cgtgcctgcg ctgcccacgg                              20
<210>10
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC4区域互补的反义寡核苷酸
<400>10
tacagtccat gcaacctcca                              20
<210>11
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC4区域互补的反义寡核苷酸
<400>11
atcagtccaa ccaacctcgt                              20
<210>12
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC5区域互补的反义寡核苷酸
<400>12
cttcggtctc acctgcttgg                              20
<210>13
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC6区域互补的反义寡核苷酸
<400>13
caggctggaa tgagctacag                              20
<210>14
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC6区域互补的反义寡核苷酸
<400>14
gacgctgcaa tcaggtagac                              20
<210>15
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC7区域互补的反义寡核苷酸
<400>15
cttcagccag gatgcccaca                              20
<210>16
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC8区域互补的反义寡核苷酸
<400>16
ctccggctcc tccatcttcc                              20
<210>17
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>与人类HDAC8区域互补的反义寡核苷酸
<400>17
agccagctgc cacttgatgc                              20

Claims (75)

1.式(1)的化合物或其药学可接受的盐，
Figure A2005800161120002C1
其中
Cy是芳基、杂芳基、环烷基、或杂环基，它们各自任选被取代，并且各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代；
X选自化学键、L、W-L、L-W、和L-W-L，其中
W在每种情况下是S、O、C＝O、或N(R9)，其中R9选自氢、烷基、羟基烷基、和叔丁氧基羰基；且
L在每种情况下独立地为C1-C4亚烷基；
Ar是亚芳基或杂亚芳基，它们各自任选被取代；
q是0或1；且
T是NH2或OH，
条件是当Cy为萘基时，X是-CH2-，Ar是苯基，且q是0或1，T不是OH。
2.按照权利要求1所述的化合物，其中q是1，且T是NH2。
3.按照权利要求2所述的化合物，其中Ar为亚苯基，且Cy-X-为
4.按照权利要求1所述的化合物，其中q是0。
5.按照权利要求4所述的化合物，其具有式(1a)：
Figure A2005800161120003C1
其中
W是S、O、或N(R9)，其中R9是氢或烷基；且
R8是H或C1-C4烷基。
6.按照权利要求5所述的化合物，其中Cy选自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、和苯并三唑基，它们各自任选被取代。
7.按照权利要求5所述的化合物，其具有式1a-1：
其中W是NH或S；
P、Q、M、G和U独立地为CH或N，条件是P、Q、M、G和U中不超过两个是N，且在包含P、Q、M、G和U的环中，环上的S或O不与另一环上的S或O相邻；
R8是H或C1-C4烷基；且
基团A和B相同或不同，并且独立地选自H、卤素、C1-C4烷基、包括氨基烷氧基、卤代烷氧基和杂芳基烷氧基的任选取代的烷氧基、烷氧基烷基、卤代烷基、氨基、硝基、烷基硫代、酰基氨基、氨基甲酰基、
Figure A2005800161120006C1
和
8.按照权利要求5所述的化合物，其具有式1a-2：
Figure A2005800161120006C3
其中W是S或NH；R8是H或C1-C4烷基；且A和B如权利要求7中所定义。
9.按照权利要求5所述的化合物及其药学可接受的盐，所述化合物其具有式1a-3：
Figure A2005800161120006C4
其中W是S或NH，且A和B如权利要求7中所定义。
10.按照权利要求9所述的化合物，其中W是NH。
11.按照权利要求5所述的化合物，其具有式1a-4：
Figure A2005800161120006C5
其中W是S或NH；D是N-R10或S，E是N或C-A；R8和R10独立地为H或C1-C4烷基；且A和B如权利要求7中所定义。
12.按照权利要求11所述的化合物，其中W是NH。
13.按照权利要求7所述的化合物，其具有式1a-5：
14.按照权利要求13所述的化合物，其中W是NH。
15.按照权利要求5所述的化合物，其中W是NH且Cy是喹喔啉基、邻苯二甲酰亚胺基、或苯并间二氧杂环戊烯基，它们各自任选被A和/或B取代，其中A和B如下所定义。
16.按照权利要求1所述的化合物，其具有式(1b)：
其中
X是L、W-L、或L-W，其中
W在每种情况下是S、O或NH；且
L是-CH2-；
Y是N或CH；且
Z是O、S、NH或CH2。
17.按照权利要求16所述的化合物，其中T是NH2。
18.按照权利要求16所述的化合物，其中X是-S-CH2-、-NH-CH2-或-CH2-NH-。
19.按照权利要求16所述的化合物，其中Cy是芳基或杂芳基，它们各自任选被取代。
20.按照权利要求16所述的化合物，其中Cy是苯基、吡啶基、嘧啶基、或苯并噻唑基，它们各自任选被取代。
21.按照权利要求16所述的化合物，其中Cy被A和/或B取代，其中A和B如权利要求7中所定义。
22.按照权利要求16所述的化合物，其中Cy任选被一个、两个或三个独立地选自烷氧基、酰基、吗啉代、和任选被烷氧基取代的苯基的基团取代。
23.按照权利要求1所述的化合物，其具有式(1c)：
X是L、W-L、或L-W，其中
W在每种情况下是S、O或NH；且
L是-CH2-；
Y是N或CH；且
Z是O、S、NH或CH2。
24.按照权利要求23所述的化合物，其中T是NH2。
25.按照权利要求23所述的化合物，其中X是-S-CH2-、-NH-CH2-或-CH2-NH-。
26.按照权利要求23所述的化合物，其中Cy是芳基或杂芳基，它们各自任选被取代。
27.按照权利要求23所述的化合物，其中Cy是苯基、吡啶基、嘧啶基、或苯并噻唑基，它们各自任选被取代。
28.按照权利要求23所述的化合物，其中Cy被A和/或B取代，其中A和B如权利要求7中所定义。
29.按照权利要求23所述的化合物，其中Cy任选被一个、两个或三个独立地选自烷氧基、卤代烷氧基、酰基、吗啉代、或任选被烷氧基取代的苯基的基团取代。
30.按照权利要求1所述的化合物，其具有式(1d)：
31.按照权利要求30所述的化合物，其中T是NH2。
32.按照权利要求30所述的化合物，其中Cy是：
Figure A2005800161120010C1
33.按照权利要求1唆使的化合物，其具有式(1e)：
Figure A2005800161120010C2
34.按照权利要求33所述的化合物，其中T是NH2。
35.按照权利要求33所述的化合物，其中Cy是杂环基或杂芳基，它们各自任选被取代，并且各自包含至少一个氮原子作为环的一部分。
36.按照权利要求34所述的化合物，其中Cy任选被一个或两个独立地选自A和B的取代基取代，其中A和B如权利要求7中所定义。
37.按照权利要求33所述的化合物，其中Cy任选被一个或两个独立地选自下式的取代基取代：
Figure A2005800161120010C3
38.按照权利要求4所述的化合物，其中Ar是亚苯基、吲哚基、或二氢吲哚基，它们各自任选被取代，且X不存在、是CH2、-O-CH2-、-S-CH2-、-S-C(CH3)(H)-、或-N(R9)-CH2-。
39.按照权利要求38所述的化合物，其中Ar是吲哚基或二氢吲哚基，X是CH2或-N(R9)-CH2-，且Cy是：
或
40.按照权利要求38所述的化合物，其中Ar是亚苯基，X是-S-CH2-、或-S-C(CH3)(H)-，且Cy是：
其中Y选自：
41.按照权利要求1所述的化合物，其具有式(1f)：
Figure A2005800161120011C6
42.按照权利要求41所述的化合物，其中Cy是杂环基或杂芳基，它们各自任选被取代，并且它们各自含有至少一个氮原子作为环的一部分。
43.按照权利要求42所述的化合物，其中Cy通过氮原子键合到苯基上。
44.按照权利要求41所述的化合物，其中Cy是：
Figure A2005800161120012C2
Figure A2005800161120012C3
Figure A2005800161120012C4
Figure A2005800161120012C5
或
Figure A2005800161120012C6
45.按照权利要求41所述的化合物，其具有式(1f-1)：
Figure A2005800161120012C7
其中A如权利要求7中所定义。
46.按照权利要求45所述的化合物，其中T是NH2。
47.按照权利要求38所述的化合物，其中Ar是亚苯基，X是-O-CH2-，且Cy是：
Figure A2005800161120013C1
48.按照权利要求1所述的化合物，其具有式(1g)：
Figure A2005800161120013C2
其中
Cy是芳基、或杂芳基、环烷基、或杂环基，它们各自任选被取代，并且各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代；
X是L、W-L、或L-W，其中
W在每种情况下是S、O或NH；且
L是-CH2-；
T是NH2或OH。
49.按照权利要求48所述的化合物，其中Cy是任选取代的杂芳基。
50.按照权利要求48所述的化合物，其中Cy是任选取代的嘧啶基。
51.按照权利要求48所述的化合物，其中X是-NH-CH2-。
52.按照权利要求48所述的化合物，其中T是NH2。
53.按照权利要求1所述的化合物，其具有式(1h)：
其中W是S、O、或NH，且A和B如权利要求7中所定义。
54.按照权利要求53所述的化合物，其中W是NH。
55.按照权利要求53所述的化合物，其中A是任选取代的吡啶基或任选取代的苯基。
56.按照权利要求53所述的化合物，其中B是H或卤素。
57.按照权利要求1所述的化合物，其具有式(1i)：
Figure A2005800161120014C1
其中W是S、O、或NH，且R40是H或C1-C6烷基。
58.按照权利要求57所述的化合物，其中W是NH。
59.按照权利要求57所述的化合物，其中R40是H。
60.按照权利要求57所述的化合物，其中R40是甲基。
61.式(2)的化合物
或其药学可接受的盐，其中
Cy2是芳基或杂芳基，它们各自任选被取代，并且其中芳基和杂芳基各自任选稠合到一个或多个芳基或杂芳基环上，或稠合到一个或多个饱和或部分不饱和环烷基或杂环上，这些环各自任选被取代；
X选自：共价键、C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(CO)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(NR7)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(S)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(O)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(SO)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(SO2)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(NH)-(CO)-C0-C4-烃基、C0-C4-烃基-(CO)-(NH)-C0-C4-烃基、-NH-CO-NH-、-NH-CS-NH-、-O-CO-O-、-O-CS-O-、-NH-C(NH)-NH-、-S(O)2-N(R7)-、-N(R7)-S(O)2-、-NH-C(O)-O-、和-O-C(O)-NH-，
其中R7选自氢、C1-C5-烷基、芳基、芳烷基、酰基、杂环基、杂芳基、SO2-烷基、SO2-芳基、CO-烷基、CO-芳基、CO-NH-烷基、CO-NH-芳基、CO-O-烷基和CO-O-芳基，它们各自任选被取代，
n是0至4，
Y是N或CH，且
T是NH2或OH。
62.按照权利要求61所述的化合物，其具有S立体化学。
63.按照权利要求61所述的化合物，其具有R立体化学。
64.按照权利要求1所述的化合物，选自：
N-(2-氨基-苯基)-4-[(6-羟基-苯并噻唑-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺；N-(2-氨基-苯基)-4-[(4-吡啶-4-基-嘧啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺；N-(2-氨基-苯基)-4-[3-(吡啶-3-基氨基)-吡咯烷-1-基]-苯甲酰胺；N-(2-氨基-苯基)-4-[(2-甲基硫烷基-6-吡啶-3-基-嘧啶-4-基氨基)-甲基]-苯甲酰胺；
N-(2-氨基苯基)-4-((4-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)苯甲酰胺；
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(吡啶-3-基氨基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺；
(R)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(吡啶-3-基氨基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺；
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(吡啶-3-基氧基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺；
(R)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(吡啶-3-基氧基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺；
N-(2-氨基苯基)-4-((4-(3-甲基-3H-1，2，3-三唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)甲基)苯甲酰胺；
N-(2-氨基苯基)-4-{[4-(2，4-二甲基-_唑-5-基)-嘧啶-2-基氨基]甲基}-苯甲酰胺；
(S)-N-(1-(4-(2-氨基苯基氨基甲酰基)苯基)吡咯烷-3-基)烟酰胺；
(S)-N-(2-氨基苯基)-4-(3-(吡啶-2-基硫代)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺；
N-(2-氨基苯基)-4-((S)-3-((S)-吡啶-2-基亚磺酰基)吡咯烷-1-基)苯甲酰胺；
和N-(2-氨基-苯基)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-2，4-二氧-1，4-二氢-2H-噻吩并[3，2-d]嘧啶-3-基甲基]-苯甲酰胺。
65.一种组合物，包括权利要求61所述的化合物的对映体混合物。
66.按照权利要求65所述的组合物，其中所述混合物是外消旋的。
67.按照权利要求65所述的组合物，其中所述混合物是富含对映体的。
68.一种组合物，包括权利要求1-64中任一项所述的一种或多种化合物和药学可接受的载体。
69.一种抑制细胞中组蛋白脱乙酰基酶的方法，所述方法包括使细胞与权利要求1-64中任一项所述的一种或多种化合物、或包括权利要求1-64中任一项所述的一种或多种化合物和药学可接受的载体的组合物接触。
70.一种治疗动物体内细胞增殖性疾病或症状的方法，所述方法包括对需要这种治疗的动物施用治疗有效量的权利要求1-64中任一项所述的一种或多种化合物、或包括权利要求1-64中任一项所述的一种或多种化合物和药学可接受的载体的组合物。
71.按照权利要求70所述的方法，其中所述动物是哺乳动物。
72.按照权利要求70所述的方法，其中所述动物是人类。
73.按照权利要求70所述的方法，其中所述细胞增殖性疾病或症状是癌细胞增殖。
74.一种抑制细胞中组蛋白脱乙酰基酶的方法，所述方法包括使细胞与权利要求65-67中任一项所述的组合物、或具有药学可接受的载体的权利要求65-67中任一项所述的组合物接触。
75.一种治疗动物体内细胞增殖性疾病或症状的方法，所述方法包括对需要这种治疗的动物施用治疗有效量的权利要求65-67中任一项所述的组合物、或具有药学可接受的载体的权利要求65-67中任一项所述的组合物。
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