CN1939502A - 参麦冻干粉针及其质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种注射用参麦冻干粉针的质量控制方法，该冻干粉针以红参总皂苷10－19重量份、麦冬总皂苷4－10重量份为原料，加注射用水适量使溶解，用活性炭去除热原，滤除活性炭，调节pH，除菌过滤，用注射用水补足体积，灌装，冷冻干燥，制得。本发明参麦冻干粉针的质量控制方法不仅通过对冻干粉针中有效成分人参皂苷和麦冬皂苷进行鉴别和对冻干粉针中人参皂苷Rg1和Re、麦冬皂苷D和总皂苷的含量进行测定的方法来控制冻干粉针的质量，还采用了指纹图谱测定，保证了本发明冻干粉针的质量和疗效。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药冻干粉针及其质量控制方法，特别是涉及一种参麦冻干粉针及其质量控制方法。
背景技术
中药质量控制是中药现代化进程中亟待解决的关键问题之一。目前指纹图谱已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段之一。通过现代分析手段，用指纹图谱特征可反映出中药的内在化学成分及其含量。按应用对象，可分为中药材(原料药材)指纹图谱、中药原料药(包括饮片、配伍颗粒)指纹图谱、中间体(中间产物)指纹图谱以及中药制剂指纹图谱。中药指纹图谱是推动中药行业全面进步的关键技术之一，其应用研究，对保证中成药功效，提高中药行业整体水平，促进中药农业现代化，推动中药走向世界，具有重要的现实意义。
发明内容
本发明目的在于提供一种注射用参麦冻干粉针，本发明的另一目的在于提供该冻干粉针的质量控制方法，包括鉴别、含量测定和/或指纹图谱测定方法。
本发明目的是通过如下技术方案实现的。
本发明注射用参麦冻干粉针是由如下重量份的原料制成：
红参总皂苷10-19重量份、麦冬总皂苷4-10重量份。
本发明注射用参麦冻干粉针的原料药组成优选配比为(按重量份)：
红参总皂苷18重量份、麦冬总皂苷9重量份。
本发明注射用参麦冻干粉针的原料药组成优选配比为(按重量份)：
红参总皂苷17重量份、麦冬总皂苷4.25重量份。
本发明注射用参麦冻干粉针的原料药组成优选配比为(按重量份)：
红参总皂苷18重量份、麦冬总皂苷6重量份。
本发明注射用参麦冻干粉针的原料药组成优选配比为(按重量份)：
红参总皂苷10重量份、麦冬总皂苷10重量份。
上述本发明注射用参麦冻干粉针的制备方法为：
按上述重量份称取红参总皂苷和麦冬总皂苷，加注射用水适量使溶解，用活性炭去除热原，滤除活性炭，调节pH，除菌过滤，用注射用水补足体积，灌装，冷冻干燥，即得。本发明冻干粉针每支15-45mg。
本发明参麦冻干粉针由红参和麦冬两味药物组成。红参具大补元气、复脉固脱，益气摄血之功能，麦冬具有养阴生津，润肺清心之功能，二者合用共奏益气固脱，养阴生津之功效，达到回阳救逆之目的。适用于治疗气阴两虚型之休克及冠心病的治疗。用法与用量：静脉滴注，每次1～2支，一日1～2次，或遵医嘱。临用前，先以适量灭菌注射用水充分溶解，再用5％葡萄糖注射液100ml稀释。10～15日为一疗程。
上述本发明冻干粉针的质量控制方法包括如下指纹图谱测定、鉴别和/或含量测定方法中的一种或几种。
本发明冻干粉针的指纹图谱测定方法为：
照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；
色谱条件和系统适用性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈(A)-水(B)进行梯度洗脱，流速为1mL/min；柱温30℃；使用蒸发光散射检测器；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000；
人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得；
麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得；
供试品溶液的制备方法：取本发明冻干粉针一支，加适量水溶解，转移至5mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得；
测定法：分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得；
供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于0.9，对照指纹图谱见附图1；
共有峰峰号的相对保留时间按分钟计分别为：1号峰为0.0647，2号S峰为1，3号峰为1.0309，4号峰为1.4906，5号峰为1.5701，6号峰为1.6002，7号峰为1.6309，8号峰为1.6987，9号峰为1.8062，10号峰为1.8709，10号峰为麦冬皂苷D的特征峰，11号峰为1.8906，12号峰为1.9104，13号峰为1.9448，14号峰为1.9772，15号峰为2.0281，16号峰为2.0489，17号峰为2.1261，18号峰为2.1556，19号峰为2.2827，20号峰为2.3111；
部分共有峰的峰形描述：12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减；除13和14号峰外，8号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。
上述所使用蒸发光散射检测器的漂移管温度为40℃，气体压力为2.0bar。
上述测定方法中梯度洗脱程序为：0～18min流动相A体积比由15％线性上升到20％，流动相B体积比由85％线性下降到80％，18～35min流动相A体积比由20％线性上升到21％、流动相B体积比由80％线性下降到79％，35～50min流动相A体积比由21％线性上升到37％、流动相B体积比由79％线性下降到63％，50～85min流动相A体积比由37％线性上升到60％、流动相B体积比由63％线性下降到40％；85～95min流动相A体积比由60％线性上升到80％、流动相B体积比由40％线性下降到20％。
本发明冻干粉针的鉴别方法为：
取本发明冻干粉针粉末50mg，加60％甲醇5ml，超声使溶解，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.375mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为12-18∶32-48∶18-26∶8-12的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。
所述展开剂还可以是比例为12-18∶4-6∶1-2∶0.1的乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸的混合溶液。
本发明含量测定方法包括如下方法中的一种或几种：
A.人参皂苷Rg1和Re的含量测定，照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；
色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为18∶82的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长203nm；理论塔板数按人参皂苷Re峰计算，应不低于3000；
对照品溶液的制备，精密称取人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg10.45、人参皂苷Re0.25mg的溶液，作为对照品溶液；
供试品溶液的制备，精密称取本发明冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含5mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明冻干粉针每支21mg含人参皂苷Rg1和Re总和应为2.24-3.36mg；
B、麦冬皂苷D的含量测定，照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；
色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为44∶56的乙腈-水溶液为流动相，流速为1.0ml/min；使用蒸发光散射检测器；理论塔板数按麦冬皂苷D峰计算，应不低于3000；
对照品溶液的制备，精密称取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；
供试品溶液的制备，精密称取本发明冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含6mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
测定法，分别精密吸取对照品溶液5μl、20μl和供试品溶液各50μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本发明冻干粉针每支21mg含麦冬皂苷D应为0.084-0.156mg；
C、总皂苷的含量测定
对照品溶液的制备，精密称取经60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每ml中含人参皂苷Re2mg的溶液，即得；
标准曲线的制备，精密量取对照品溶液10、20、40、60、80、100μl，分别置10ml具塞试管中，挥尽溶剂，精密加入比例为1-3∶9-7的临用新配的5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸的混合溶液1ml，于60℃水浴中放置15分钟，取出，置冰浴冷却，精密加冰醋酸5ml，摇匀，立即照分光光度法，《中国药典》2000年版一部附录V B，在544nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；
测定法，精密称取本发明冻干粉针17mg，至100ml量瓶中，加去离子水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取1ml于具塞试管中，蒸干，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入比例为1-3∶9-7的临用新配的5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸的混合溶液1ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得；
本发明冻干粉针每支21mg中含总皂苷以人参皂苷Re计应为13.6～20.4mg。
其中麦冬皂苷D的含量测定所用蒸发光散射检测器的漂移管温度为40℃，气体压力为2.0bar。
本发明参麦冻干粉针的质量控制方法不仅通过对冻干粉针中有效成分人参皂苷和麦冬皂苷进行鉴别和对冻干粉针中人参皂苷Rg1和Re、麦冬皂苷D和总皂苷的含量进行测定的方法来控制冻干粉针的质量，还采用了指纹图谱测定，保证了本发明冻干粉针的质量和疗效。
试验研究表明本发明所提供的质量控制方法尤其是指纹图谱测定方法简便、分离效果好，精密度、重复性、稳定性等都符合要求。
下述实验和实施例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1 本发明参麦冻干粉针处方筛选试验
比较筛选了单独两种皂苷两种不同灌装体积和加入不同量的骨架剂的处方，见表1。
表1 处方筛选结果
| 处方号 | 骨架剂 | 灌装体积(ml) | 成品外观 | 复溶性 |
| 123456789 | //0.4％的甘露醇1％的甘露醇6％的甘露醇14％的甘露醇1％的葡萄糖1.5％的葡萄糖0.5％的甘露醇加0.5％的葡萄糖 | 232222222 | 淡黄块状，较疏松淡黄块状，较疏松浅黄块状，略紧浅黄块状，较紧实乳白色紧实块类白色紧实块萎缩萎缩萎缩 | 良好良好良好良好良好良好/// |
因为本品主要为皂苷类成分，直接冻干即可得到较好的外形。以葡萄糖为骨架剂，出现萎缩现象；以甘露醇为骨架剂，效果较好。最终确定不加入骨架剂，一方面可降低成本，另一方面可简化鉴别和含量测定的样品处理过程。
实验例2 本发明参麦冻干粉针鉴别方法的研究
本品含人参总皂苷和麦冬总皂苷，我们采用有效部位的薄层鉴别条件对粉针鉴别方法进行了研究，确定了粉针溶解所用溶剂和点样浓度，并在一个条件下同时鉴别人参皂苷和麦冬皂苷。
一、实验方法
(一)对照品溶液及阴性溶液的配制
1、对照品溶液的配制
人参皂苷Rg1、Re对照品溶液：取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。
麦冬皂苷D对照品溶液：取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.375mg的溶液，作为对照品溶液。
2、阴性溶液的配制
以麦冬皂苷计，依照处方的理论值计算，应将点样溶液配制为每1ml含冻干粉9mg，考虑处方配制中的损失，最终确定配制为每1ml含冻干粉10mg的点样溶液，依照处方比例推算出阴性样品的浓度。
人参阴性溶液：取麦冬总皂苷，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液。
麦冬阴性溶液：取人参总皂苷，加60％甲醇制成每1ml含8mg的溶液。
(二)溶解粉针所用溶剂的选择
有效部位的研究表明，人参总皂苷易溶于60％的甲醇，而麦冬总皂苷则在纯甲醇中溶解得更好。经过冻干后，样品的溶解行为发生一定的变化，分别考察以去离子水、60％的甲醇、80％的甲醇和纯甲醇溶解样品，希望找到既易于点样又利于待鉴别成分的充分溶解和不必要成分的去除的溶剂，分别用上述溶剂配制每1ml含10mg的溶液的粉针溶液，滤过后待用。
吸取上述不同溶剂的粉针溶液和两个对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
另取上述不同溶剂的粉针溶液和两个对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(15∶5∶1∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
试验结果表明：随着溶剂中水比例的增加，人参皂苷Rg1和Re的斑点更加清晰，但点样难度也加大，因此选择60％甲醇为溶剂，既可以很好地溶解人参皂苷Rg1和Re，又便于点样。
(三)鉴别条件的最终确定
吸取60％甲醇为溶剂的样品溶液和对照品溶液及阴性溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
另吸取60％甲醇为溶剂的样品溶液和对照品溶液及阴性溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(15∶5∶1∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
结果表明以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)的混合溶液为展开剂，样品中人参皂苷Rg1、Re和麦冬皂苷D的斑点更清晰、圆整，互不干扰。
实验例3 本发明参麦冻干粉针含量测定方法的研究
一、人参皂苷Rg1和Re的含量测定
三批中试产品红参皂苷的含量测定
表2 三批中试产品红参皂苷含量测定结果
| 批号 | 人参皂苷Rg1和Re的总含量(mg/支) |
| 041208 | 2.79 |
| 041212 | 2.67 |
| 041218 | 2.86 |
根据测定结果，确定本品(每支21mg)含红参皂苷Rg1和Re总和为2.24-3.36mg。
二、麦冬皂苷D的含量测定
三批中试产品麦冬皂苷的含量测定
表3 三批中试产品麦冬皂苷含量测定结果
| 批号 | 麦冬皂苷D的含量(mg/支) |
| 041208 | 0.115 |
| 041212 | 0.108 |
| 041218 | 0.131 |
根据测定结果，同时考虑麦冬皂苷D的含量较低，确定本品(每支21mg)含麦冬皂苷D为0.084-0.156mg。
三、总皂苷的含量测定
三批中试产品红参皂苷的含量测定
精密称取供试品适量制成供试品溶液，微孔滤膜滤过，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，计算，即得。测定结果见表4。
表4 三批中试产品总皂苷含量测定结果
| 批号 | 总皂苷的含量(mg/支) |
| 041208 | 16.8 |
| 041212 | 16.0 |
| 041218 | 17.7 |
根据测定结果，确定本品每支21mg含总皂苷为13.6～20.4mg。
实验例4 本发明参麦冻干粉针指纹图谱的研究
1.参照物的选择：选择2个主要原料中的特征成分人参皂苷Rg1和麦冬皂苷D较为合适。
2.供试品的制备方法：按技术方案所述方法制备。本品为冻干粉针制剂，制剂中除了红参总皂苷和麦冬总皂苷的成分外，没有加辅料，因此在供试品的制备过程中没有必要除杂，可将样品直接溶解即可。
3.检测方法的选择：根据红参总皂苷中主要含的皂苷类化学成分的理化性质，选择HPLC方法最为合适，HPLC方法较其他方法有准确定量，误差小，重现性好，应用广泛的优点，因此优选HPLC方法。
4.检测器的选择：由于红参的皂苷类成分绝大多数都没有紫外吸收，尽管用紫外检测器在200-210nm之间做检测，也会影响皂苷类成分的检测，因此选用蒸发光散射检测器做检测，这类检测器属于质量型检测器，特别适用于没有紫外吸收的化学成分的检测，试验证明此检测器检测效果好，干扰少，较为理想。
5.色谱条件与系统适用性试验
色谱柱的考察：选择了Agilent公司的ZOBAX Eclipse XDB-C18色谱柱、ZOBAX Eetend-C18色谱柱和Waters C18色谱柱三种色谱柱进行了考察，结果以Agilent公司的ZOBAX Eclipse XDB-C18色谱柱分离效果好，峰形较好，故选用Agilent公司的ZOBAX Eclipse XDB-C18色谱柱。
流动相的考察：选择三种流动相系统：乙腈-水梯度系统、乙腈-1％冰醋酸梯度系统和甲醇-水梯度系统，结果以乙腈-水梯度系统为佳，各色谱峰分离度好，保留时间适中，故选择乙腈-水梯度系统为流动相。
流速和柱温的考察：流速和柱温对分离的影响较小，以1ml/min和30℃为流速和温度较为合适。
6.注射用参麦冻干粉针的指纹图谱相似度检测
按供试品指纹图谱检测方法，对10批参麦冻干粉针的指纹图谱进行了检测，结果10批参麦冻干粉针的指纹图谱与共有模式比较的相似度均大于90％，故规定药品的指纹相似度不低于90％。
实验例5 本发明参麦冻干粉针指纹图谱稳定性试验
取样品(批号：040725)，按正文供试品溶液的制备方法制备，分别在0，5，10，15，20小时检测指纹图谱，相似度计算结果见图2。结果表明各色谱峰的相似度均符合指纹图谱的要求。
实验例6 本发明参麦冻干粉针指纹图谱精密度试验
取样品(批号：040725)，按正文供试品溶液的制备方法制备，连续进样5次，检测指纹图谱，相似度计算结果见图3。结果表明各色谱峰的相似度均符合指纹图谱的要求。
实验例7 本发明参麦冻干粉针指纹图谱重现性试验
取样品(批号：040725)，按正文供试品溶液的制备方法制备供试品5份，检测指纹图谱，相似度计算结果见图4。结果表明各色谱峰的相对保留时间和色谱峰的相似度均符合指纹图谱的要求。
附图说明：
图1：本发明冻干粉针对照指纹图谱；
图2：本发明稳定性试验结果；
图3：本发明精密度试验结果；
图4：本发明重现性试验结果。
下述实施例均能实现上述实验例的效果。
实施例1 本发明参麦冻干粉针的制备
【处方】红参总皂苷17g 麦冬总皂苷4.25g
【制法】取红参总皂苷和麦冬总皂苷，加注射用水适量使溶解，用活性炭去除热原，滤除活性炭，调节pH，除菌过滤，用注射用水补足体积，灌装，冷冻干燥，即得1000支粉针，每支21mg。
【用法与用量】静脉滴注，每次1~2支，一日1~2次，或遵医嘱。临用前，先以适量灭菌注射用水充分溶解，再用5％葡萄糖注射液100ml稀释。10～15日为一疗程。
实施例2 本发明参麦冻干粉针的指纹图谱测定方法
照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。
色谱条件和系统适应用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱，15％～20％A(0～18min)，20％～21％A(18～35min)，21％～37％A(35～50min)，37％～60％A(50～85min)，60％～80％A(85～95min)；流速为1mL/min；柱温：30℃；蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000。
人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得。
麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备方法：取实施例1制备的本发明冻干粉针一支，加适量水溶解，转移至5mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法 分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得。
供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于0.9。对照指纹图谱见附图1。
共有峰的峰号(相对保留时间)：1(0.0647)，2(S峰)(1)，3(1.0309)，4(1.4906)，5(1.5701)，6(1.6002)，7(1.6309)，8(1.6987)，9(1.8062)，10(1.8709)(麦冬皂苷D)，11(1.8906)，12(1.9104)，13(1.9448)，14(1.9772)，15(2.0281)，16(2.0489)，17(2.1261)，18(2.1556)，19(2.2827)，20(2.3111)。
部分共有峰的峰形描述：12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减。除13和14号峰外，8号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。
实施例3 本发明参麦冻干粉针的质量控制方法
鉴别：
取实施例1制备的本发明冻干粉针粉末50mg，加60％甲醇5ml，超声使溶解，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.375mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。
指纹图谱：
照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。
色谱条件和系统适应用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱，15％～20％A(0～18min)，20％～21％A(18～35min)，21％～37％A(35～50min)，37％～60％A(50～85min)，60％～80％A(85～95min)；流速为1mL/min；柱温：30℃；蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000。
人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得。
麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备方法：取实施例1制备的本发明冻干粉针一支，加适量水溶解，转移至5mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法 分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得。
供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于0.9。对照指纹图谱见附图1。
共有峰的峰号(相对保留时间)：1(0.0647)，2(S峰)(1)，3(1.0309)，4(1.4906)，5(1.5701)，6(1.6002)，7(1.6309)，8(1.6987)，9(1.8062)，10(1.8709)(麦冬皂苷D)，11(1.8906)，12(1.9104)，13(1.9448)，14(1.9772)，15(2.0281)，16(2.0489)，17(2.1261)，18(2.1556)，19(2.2827)，20(2.3111)。
部分共有峰的峰形描述：12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减。除13和14号峰外，8号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。
实施例4 本发明参麦冻干粉针的质量控制方法
鉴别：
取实施例1制备的本发明冻干粉针粉末50mg，加60％甲醇5ml，超声使溶解，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.375mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶5∶1∶0.1的乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。
指纹图谱：
照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。
色谱条件和系统适应用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱，15％～20％A(0～18min)，20％～21％A(18～35min)，21％～37％A(35～50min)，37％～60％A(50～85min)，60％～80％A(85～95min)；流速为1mL/min；柱温：30℃；蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000。
人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得。
麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备方法：取实施例1制备的本发明冻干粉针一支，加适量水溶解，转移至5mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法 分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得。
供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于0.9。对照指纹图谱见附图1。
共有峰的峰号(相对保留时间)：1(0.0647)，2(S峰)(1)，3(1.0309)，4(1.4906)，5(1.5701)，6(1.6002)，7(1.6309)，8(1.6987)，9(1.8062)，10(1.8709)(麦冬皂苷D)，11(1.8906)，12(1.9104)，13(1.9448)，14(1.9772)，15(2.0281)，16(2.0489)，17(2.1261)，18(2.1556)，19(2.2827)，20(2.3111)。
部分共有峰的峰形描述：12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减。除13和14号峰外，8号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。
实施例5 本发明参麦冻干粉针的质量控制方法
含量测定：
A.人参皂苷Rg1和Re的含量测定 照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(18∶82)为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长203nm；理论塔板数按人参皂苷Re峰计算，应不低于3000。
对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg10.45、人参皂苷Re0.25mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密称取实施例1制备的本发明冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含5mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液。
测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明冻干粉针每支21mg含人参皂苷Rg1和Re总和应为2.24-3.36mg。
B、麦冬皂苷D的含量测定 照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水溶液(44∶56)为流动相，流速为1.0ml/min；使用蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)。理论塔板数按麦冬皂苷D峰计算，应不低于3000。
对照品溶液的制备 精密称取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密称取实施例1制备的本发明冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含6mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液。
测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl、20μl和供试品溶液各50μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明冻干粉针每支21mg含麦冬皂苷D应为0.084-0.156mg；
C、总皂苷的含量测定
对照品溶液的制备 精密称取经60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每ml中含人参皂苷Re2mg的溶液，即得。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液10、20、40、60、80、100μl，分别置10ml具塞试管中，挥尽溶剂，精密加5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml，于60℃水浴中放置15分钟，取出，置冰浴冷却，精密加冰醋酸5ml，摇匀，立即照分光光度法(《中国药典》2000年版一部附录V B)，在544nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法 精密称取实施例1制备的本发明冻干粉针17mg，至100ml量瓶中，加去离子水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取1ml于具塞试管中，蒸干，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得。
本发明冻干粉针每支21mg中含总皂苷以人参皂苷Re计应为13.6-20.4mg；
指纹图谱：
照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。
色谱条件和系统适应用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱，15％～20％A(0～18min)，20％～21％A(18～35min)，21％～37％A(35～50min)，37％～60％A(50～85min)，60％～80％A(85～95min)；流速为1mL/min；柱温：30℃；蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000。
人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得。
麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备方法：取实施例1制备的本发明冻干粉针一支，加适量水溶解，转移至5mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法 分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得。
供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于0.9。对照指纹图谱见附图1。
共有峰的峰号(相对保留时间)：1(0.0647)，2(S峰)(1)，3(1.0309)，4(1.4906)，5(1.5701)，6(1.6002)，7(1.6309)，8(1.6987)，9(1.8062)，10(1.8709)(麦冬皂苷D)，11(1.8906)，12(1.9104)，13(1.9448)，14(1.9772)，15(2.0281)，16(2.0489)，17(2.1261)，18(2.1556)，19(2.2827)，20(2.3111)。
部分共有峰的峰形描述：12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减。除13和14号峰外，8号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。
实施例6 本发明参麦冻干粉针的质量控制方法
鉴别：取实施例1制备的本发明冻干粉针粉末50mg，加60％甲醇5ml，超声使溶解，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.375mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶5∶1∶0.1的乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。
含量测定：
A.人参皂苷Rg1和Re的含量测定 照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(18∶82)为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长203nm；理论塔板数按人参皂苷Re峰计算，应不低于3000。
对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg10.45、人参皂苷Re0.25mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密称取实施例1制备的本发明冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含5mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液。
测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明冻干粉针每支21mg含人参皂苷Rg1和Re总和应2.24-3.36mg。
B、麦冬皂苷D的含量测定 照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水溶液(44∶56)为流动相，流速为1.0ml/min；使用蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)。理论塔板数按麦冬皂苷D峰计算，应不低于3000。
对照品溶液的制备 精密称取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密称取实施例1制备的本发明冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含6mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液。
测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl、20μl和供试品溶液各50μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明冻干粉针每支21mg含麦冬皂苷D应为0.084-0.156mg。
C、总皂苷的含量测定
对照品溶液的制备 精密称取经60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每ml中含人参皂苷Re2mg的溶液，即得。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液10、20、40、60、80、100μl，分别置10ml具塞试管中，挥尽溶剂，精密加5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml，于60℃水浴中放置15分钟，取出，置冰浴冷却，精密加冰醋酸5ml，摇匀，立即照分光光度法(《中国药典》2000年版一部附录V B)，在544nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法 精密称取实施例1制备的本发明冻干粉针17mg，至100ml量瓶中，加去离子水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取1ml于具塞试管中，蒸干，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得。
本发明冻干粉针每支21mg中含总皂苷以人参皂苷Re计应为13.6-20.4mg。
实施例7 本发明参麦冻干粉针的质量控制方法
鉴别：取实施例1制备的本发明冻干粉针粉末50mg，加60％甲醇5ml，超声使溶解，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.375mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。
含量测定：
A.人参皂苷Rg1和Re的含量测定 照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(18∶82)为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长203nm；理论塔板数按人参皂苷Re峰计算，应不低于3000。
对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg10.45、人参皂苷Re0.25mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密称取实施例1制备的本发明冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含5mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液。
测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明冻干粉针每支21mg含人参皂苷Rg1和Re总和应为2.24-3.36mg。
B、麦冬皂苷D的含量测定 照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水溶液(44∶56)为流动相，流速为1.0ml/min；使用蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)。理论塔板数按麦冬皂苷D峰计算，应不低于3000。
对照品溶液的制备 精密称取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密称取实施例1制备的本发明冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含6mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液。
测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl、20μl和供试品溶液各50μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明冻干粉针每支21mg含麦冬皂苷D应为0.084-0.156mg。
C、总皂苷的含量测定
对照品溶液的制备 精密称取经60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每ml中含人参皂苷Re2mg的溶液，即得。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液10、20、40、60、80、100μl，分别置10ml具塞试管中，挥尽溶剂，精密加5％香草醛冰醋酸溶液—高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml，于60℃水浴中放置15分钟，取出，置冰浴冷却，精密加冰醋酸5ml，摇匀，立即照分光光度法(《中国药典》2000年版一部附录V B)，在544nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法 精密称取实施例1制备的本发明冻干粉针17mg，至100ml量瓶中，加去离子水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取1ml于具塞试管中，蒸干，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2∶8)(临用新配)的混合溶液1ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得。
本发明冻干粉针每支21mg中含总皂苷以人参皂苷Re计应为13.6-20.4mg。
指纹图谱：
照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定。
色谱条件和系统适应用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱，15％～20％A(0～18min)，20％～21％A(18～35min)，21％～37％A(35～50min)，37％～60％A(50～85min)，60％～80％A(85～95min)；流速为1mL/min；柱温：30℃；蒸发光散射检测器(漂移管温度40℃，气体压力2.0bar)；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000。
人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得。
麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备方法：取实施例1制备的本发明冻干粉针一支，加适量水溶解，转移至5mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法 分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得。
供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于0.9。对照指纹图谱见附图1。
共有峰的峰号(相对保留时间)：1(0.0647)，2(S峰)(1)，3(1.0309)，4(1.4906)，5(1.5701)，6(1.6002)，7(1.6309)，8(1.6987)，9(1.8062)，10(1.8709)(麦冬皂苷D)，11(1.8906)，12(1.9104)，13(1.9448)，14(1.9772)，15(2.0281)，16(2.0489)，17(2.1261)，18(2.1556)，19(2.2827)，20(2.3111)。
部分共有峰的峰形描述：12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减。除13和14号峰外，8号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。
Claims (13)
1、一种注射用参麦冻干粉针，其特征在于该冻干粉针是由如下重量份的原料制成的：
红参总皂苷10-19重量份、麦冬总皂苷4-10重量份。
2、如权利要求1所述的注射用参麦冻干粉针，其特征在于该冻干粉针是由如下重量份的原料制成的：
红参总皂苷18重量份、麦冬总皂苷9重量份。
3、如权利要求1所述的注射用参麦冻干粉针，其特征在于该冻干粉针是由如下重量份的原料制成的：
红参总皂苷17重量份、麦冬总皂苷4.25重量份。
4、如权利要求1所述的注射用参麦冻干粉针，其特征在于该冻干粉针是由如下重量份的原料制成的：
红参总皂苷18重量份、麦冬总皂苷6重量份。
5、如权利要求1-4所述的任意一种注射用参麦冻干粉针，其特征在于按上述重量份称取红参总皂苷和麦冬总皂苷，加注射用水适量使溶解，用活性炭去除热原，滤除活性炭，调节pH，除菌过滤，用注射用水补足体积，灌装，冷冻干燥，即得。
6、如权利要求5所述的注射用参麦冻干粉针的质量控制方法，其特征在于该方法包括如下鉴别方法：
取参麦冻干粉针粉末50mg，加60％甲醇5ml，超声使溶解，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.375mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为12-18∶32-48∶18-26∶8-12的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。
7、如权利要求6所述的质量控制方法，其特征在于鉴别方法中所述展开剂由比例为12-18∶4-6∶1-2∶0.1的乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸的溶液代替。
8、如权利要求6所述的质量控制方法，其特征在于鉴别方法中所述展开剂为比例为15∶40∶22∶10的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水的溶液。
9、如权利要求7所述的质量控制方法，其特征在于鉴别方法中所述展开剂为比例为15∶5∶1∶0.1的乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸的溶液。
10、如权利要求6-9所述任意一种注射用参麦冻干粉针的质量控制方法，其特征在于该方法还包括如下含量测定方法中的一种或几种：
A、人参皂苷Rg1和Re的含量测定，照《中国药典》2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定；
色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为18∶82的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长203nm；理论塔板数按人参皂苷Re峰计算，应不低于3000；
对照品溶液的制备，精密称取人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg10.45、人参皂苷Re0.25mg的溶液，作为对照品溶液；
供试品溶液的制备，精密称取参麦冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含5mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
参麦冻干粉针每支含人参皂苷Rg1和Re总和应为2.24-3.36mg；
B、麦冬皂苷D的含量测定，照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；
色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为44∶56的乙腈-水溶液为流动相，流速为1.0ml/min；使用蒸发光散射检测器，检测器的漂移管温度为40℃，气体压力为2.0bar；理论塔板数按麦冬皂苷D峰计算，应不低于3000；
对照品溶液的制备，精密称取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；
供试品溶液的制备，精密称取参麦冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含6mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
测定法，分别精密吸取对照品溶液5μl、20μl和供试品溶液各50μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
参麦冻干粉针每支含麦冬皂苷D应为0.084-0.156mg；
C、总皂苷的含量测定
对照品溶液的制备，精密称取经60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每ml中含人参皂苷Re2mg的溶液，即得；
标准曲线的制备，精密量取对照品溶液10、20、40、60、80、100μl，分别置10ml具塞试管中，挥尽溶剂，精密加入比例为1-3∶9-7的临用新配的5％香草醛冰醋酸溶液—高氯酸的混合溶液1ml，于60℃水浴中放置15分钟，取出，置冰浴冷却，精密加冰醋酸5ml，摇匀，立即照分光光度法，《中国药典》2000年版一部附录V B，在544nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；
测定法，精密称取参麦冻干粉针17mg，至100ml量瓶中，加去离子水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取1ml于具塞试管中，蒸干，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入比例为1-3∶9-7的临用新配的5％香草醛冰醋酸溶液—高氯酸的混合溶液1ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得；
参麦冻干粉针每支含总皂苷以人参皂苷Re计应为13.6～20.4mg。
11、如权利要求5所述的注射用参麦冻干粉针的质量控制方法，其特征在于该方法包括如下指纹图谱测定方法：
照《中国药典》2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定；
色谱条件和系统适用性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B进行梯度洗脱，流速为1mL/min；柱温30℃；使用蒸发光散射检测器，检测器的漂移管温度为40℃，气体压力为2.0bar；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000；
人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得；
麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得；
供试品溶液的制备方法：取参麦冻干粉针一支，加适量水溶解，转移至5mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得；
测定法分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得；
供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于0.9；
对照指纹图谱的共有峰峰号的相对保留时间分别为：1号峰为0.0647，2号S峰为1，3号峰为1.0309，4号峰为1.4906，5号峰为1.5701，6号峰为1.6002，7号峰为1.6309，8号峰为1.6987，9号峰为1.8062，10号峰为1.8709，10号峰为麦冬皂苷D的特征峰，11号峰为1.8906，12号峰为1.9104，13号峰为1.9448，14号峰为1.9772，15号峰为2.0281，16号峰为2.0489，17号峰为2.1261，18号峰为2.1556，19号峰为2.2827，20号峰为2.3111；
对照指纹图谱的部分共有峰的峰形描述：12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减；除13和14号峰外，8号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。
12、如权利要求11所述的质量控制方法，其特征在于指纹图谱测定方法中梯度洗脱程序为：0～18min流动相A体积比由15％线性上升到20％，流动相B体积比由85％线性下降到80％，18～35min流动相A体积比由20％线性上升到21％、流动相B体积比由80％线性下降到79％，35～50min流动相A体积比由21％线性上升到37％、流动相B体积比由79％线性下降到63％，50～85min流动相A体积比由37％线性上升到60％、流动相B体积比由63％线性下降到40％；85～95min流动相A体积比由60％线性上升到80％、流动相B体积比由40％线性下降到20％。
13、如权利要求5所述的注射用参麦冻干粉针的质量控制方法，其特征在于该方法为：
鉴别：
取参麦冻干粉针粉末50mg，加60％甲醇5ml，超声使溶解，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1和Re对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；取麦冬皂苷D对照品，加甲醇制成每1ml含0.375mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为15∶40∶22∶10的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的三个斑点。
含量测定：
A.人参皂苷Rg1和Re的含量测定，照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；
色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为18∶82的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相，流速为1.0ml/min；检测波长203nm；理论塔板数按人参皂苷Re峰计算，应不低于3000；
对照品溶液的制备，精密称取人参皂苷Rg1对照品和人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg10.45、人参皂苷Re0.25mg的溶液，作为对照品溶液；
供试品溶液的制备，精密称取参麦冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含5mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
参麦冻干粉针每支含人参皂苷Rg1和Re总和应为2.24-3.36mg；
B、麦冬皂苷D的含量测定，照《中国药典》2000年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；
色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为44∶56的乙腈-水溶液为流动相，流速为1.0ml/min；使用蒸发光散射检测器，检测器的漂移管温度为40℃，气体压力为2.0bar；理论塔板数按麦冬皂苷D峰计算，应不低于3000；
对照品溶液的制备，精密称取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；
供试品溶液的制备，精密称取参麦冻干粉针适量，加去离子水配制成每1ml含6mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；
测定法，分别精密吸取对照品溶液5μl、20μl和供试品溶液各50μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
参麦冻干粉针每支含麦冬皂苷D应为0.084-0.156mg；
C、总皂苷的含量测定
对照品溶液的制备，精密称取经60℃减压干燥至恒重的人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每ml中含人参皂苷Re2mg的溶液，即得；
标准曲线的制备，精密量取对照品溶液10、20、40、60、80、100μl，分别置10ml具塞试管中，挥尽溶剂，精密加入比例为2∶8的临用新配的5％香草醛冰醋酸溶液—高氯酸的混合溶液1ml，于60℃水浴中放置15分钟，取出，置冰浴冷却，精密加冰醋酸5ml，摇匀，立即照分光光度法，《中国药典》2000年版一部附录V B，在544nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；
测定法，精密称取参麦冻干粉针17mg，至100ml量瓶中，加去离子水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取1ml于具塞试管中，蒸干，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入比例为2∶8的临用新配的5％香草醛冰醋酸溶液—高氯酸的混合溶液1ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液的浓度，计算，即得；
参麦冻干粉针每支含总皂苷以人参皂苷Re计应为13.6～20.4mg；
指纹图谱测定：
照《中国药典》2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定；
色谱条件和系统适用性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B按如下程序进行梯度洗脱：0～18min流动相A体积比由15％线性上升到20％，流动相B体积比由85％线性下降到80％，18～35min流动相A体积比由20％线性上升到21％、流动相B体积比由80％线性下降到79％，35～50min流动相A体积比由21％线性上升到37％、流动相B体积比由79％线性下降到63％，50～85min流动相A体积比由37％线性上升到60％、流动相B体积比由63％线性下降到40％；85～95min流动相A体积比由60％线性上升到80％、流动相B体积比由40％线性下降到20％；流速为1mL/min；柱温30℃；使用蒸发光散射检测器，检测器的漂移管温度为40℃，气体压力为2.0bar；理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计，应不低于3000；
人参皂苷Rg1对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL含0.4mg的溶液，即得；
麦冬皂苷D对照品溶液的制备：取麦冬皂苷D对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.35mg的溶液，即得；
供试品溶液的制备方法：取参麦冻干粉针一支，加适量水溶解，转移至5mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得；
测定法分别精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪中，记录90分钟的图谱，即得；
供试品指纹图谱与对照指纹图谱应在相应保留时间处出现相同色谱峰，两者相似度不低于0.9；
对照指纹图谱的共有峰峰号的相对保留时间分别为：1号峰为0.0647，2号S峰为1，3号峰为1.0309，4号峰为1.4906，5号峰为1.5701，6号峰为1.6002，7号峰为1.6309，8号峰为1.6987，9号峰为1.8062，10号峰为1.8709，10号峰为麦冬皂苷D的特征峰，11号峰为1.8906，12号峰为1.9104，13号峰为1.9448，14号峰为1.9772，15号峰为2.0281，16号峰为2.0489，17号峰为2.1261，18号峰为2.1556，19号峰为2.2827，20号峰为2.3111；
对照指纹图谱的部分共有峰的峰形描述：12和13号峰不能达到基线分离，15号峰前有一小尖峰，15、16、17号峰基本能达到基线分离，而且依次递减；除13和14号峰外，8号峰以后的峰都较小，都能达到基线分离。
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