CN1939390A - 一种药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法；由黄芪药材和三七药材经适当方法提取和灯盏花素组方，或是相应重量份黄芪、三七药材经提取精制后得到的提取物(或其有效部位)和相应重量份灯盏花素组方，制备成注射制剂和口服制剂等药剂学上允许的制剂；主要用于治疗缺血性脑中风、中风后遗症、老年痴呆、冠心病心绞痛、心功能不全、病毒性心肌炎等心脑血管疾病，本发明工艺合理可行，质量稳定可控，药效学试验表明疗效好且安全无毒副作用。

Description

一种药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种用于治疗心脑血管疾病的药物组合物，同时提供该制剂的制备方法，属于药品的技术领域。

技术背景

心脑血管疾病是一类世界性常见病和多发病，具有发病率高、复发率高、致残率高、死亡率高及并发症多的“四高一多”的难治愈疾病，且需长期或终身服药，生活质量受到严重影响，同时随着生活水平的提高，患病人群日益庞大，中、青年患者人数更是不断增加，这一严峻的形势使得研制与开发该类药物显得极为迫切。尽管目前治疗心脑血管疾病的中西药很多，但西药多有副作用；中医中药虽然凭借其在安全性方面的优势，得到了专业界人士的肯定，成为近年来心脑血管领域研究的新的热点，但迄今为止，真正起效快、疗效确切、成份明晰的治疗心脑血管疾病的中成药还很少见。为此，有必要研制开发一种安全、有效、质量可控的治疗心脑血管疾病的中药制剂，以满足医患需求。黄芪为常用中药，首载于《神农本草经》，列为上品，具有“补气升阳、益固表卫，利水消肿，托疮生肌”之功效，享有“补药之长”的美誉。其化学成分主要为单糖、多糖、皂甙、黄酮、氨基酸和微量元素等，其中多糖含量较多。药理药效研究表明黄芪具有改善心肺功能，加强心脏收缩力，扩张血管，改善微循环，抑制血小板凝集，降低血黏稠度，降低血压，降低血糖，降低血脂，抗氧化，保护血管内皮细胞、抑制微血管病变、改善糖尿病及其肾脏并发症的症状，有效降低血浆纤维蛋白原的含量，增强人体免疫力，提高人体抗应激反应能力，抑制病毒繁殖等作用。目前上市的黄芪注射液、黄芪精口服液等很受医患的青睐，作为最常用的益寿和补气中药之一，与其它中西药组方，用途广泛。灯盏花素具有增加脑血流量、降低脑血管阻力、提高血脑屏障的通透性以及对抗由二磷酸腺苷引起的血小板凝集作用，临床试验表明治疗冠心病、心绞痛疗效确切，有明显调节心脏功能，改善心脏血流动力学，增加冠脉血流量，降低心肌耗氧量的作用。三七具有降低心肌耗氧量，改善心肌缺血，抗心律失常，保护缺血性心肌细胞损伤，抑制血栓形成，降血脂、降血糖等功能，广泛用于心脑血管疾病的治疗。所以本发明采用活血化瘀的灯盏花素、三七，配以具有补气作用的黄芪组方，来研究三者组方的制剂的制备方法和在治疗心脑血管疾病中的疗效。

发明内容

本发明的目的在于公开一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，采用灯盏花素花素与三七和黄芪或其提取物组方，针对现有技术，灯盏花素、黄芪、三七在心脑血管疾病治疗方面已取得重大疗效，如灯盏花素注射液、黄芪注射液、血栓通注射液等制剂通过多年临床使用，得到了业界人士的肯定，但目前为止，没有三者组方的制剂上市，为了更利于患者选择，同时发挥三味常用中药的协同互补作用，提高心脑血管患者的生活质量，减轻患者对社会造成的压力，本申请人立题开发该组方制剂。本发明的另一个目的在于公开这种治疗心脑血管疾病的药物组合物的制备方法，包括多种注射剂型和口服剂型，有效避免了目前医患用药的剂型单一带来的不便，更大程度地满足临床医生和广大患者的选择。

本发明制剂是这样构成的：按照重量组份计算，它由灯盏花素0.1～50份、黄芪10～5000份与三七10～5000份制作而成；或是由相应重量份黄芪药材、三七药材经提取精制后得到的提取物与相应重量份灯盏花素而成。具体讲，按照重量组份计算，它由灯盏花素0.1～10份、黄芪10～1000份与三七10～1000份制作而成，或是由相应重量份黄芪药材、三七药材经提取精制后得到的提取物与相应重量份灯盏花素加适当辅料制作而成。更具体讲，按照重量组份计算，它由灯盏花素0.5～2份、黄芪50～500份与三七20～500份经提取精制制作而成，或是由相应重量份黄芪药材、三七药材经提取精制后得到的提取物与相应重量份灯盏花素加适当辅料制作而成。

本发明所述的制剂为注射剂和口服制剂；注射剂包括：直接用于注射给药的注射液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液、直接供静脉滴注的静脉输液以及用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无菌块状物；；口服制剂包括：片剂、分散片、泡腾片、口腔崩解片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、口服液体制剂、煎膏剂、浸膏剂、凝胶剂、膜剂及其他药剂学上所有可以接受的剂型。优选的制剂为直接用于注射给药的注射液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液、直接供静脉滴注的静脉输液以及用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无菌块状物、滴丸剂、胶囊剂、软胶囊剂、口腔崩解片、片剂、胶囊剂、分散片和颗粒剂。

所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物中含有皂苷类成分和黄酮类成分，按照重量百分比计算，其中皂苷类成分的含量不低于制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的1％；黄酮类成分的含量不低于制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的0.5％，制剂中的皂苷类成分和黄酮类成分和其他所有可测成分的含量之和占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量不低于25％。

所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物的制备方法是：取三七、黄芪，分别加水或乙醇提取，提取液浓缩干燥得药材粗提物，进一步采用醇沉法、水返溶法、有机溶剂萃取法、絮凝沉淀法、柱层析法的一种或几种联合使用进行适当精制，得药材精提物，将两药材粗提物或精提物和灯盏花素合并，加辅料以不同的方法制备成不同的制剂。具体讲，取三七药材，加乙醇提取，合并提取液，浓缩，进一步采用有机溶剂萃取或过大孔吸附树脂精制，浓缩干燥得三七提取物；取黄芪，加水煎煮，合并提取液，滤过，滤液过大孔吸附树脂柱，先用水和低浓度乙醇洗脱，再用高浓度乙醇过大孔吸附树脂柱进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将灯盏花素、三七提取物和黄芪提取物混合后加入辅料以不同的方法制成不同的制剂。

所述的制剂是这样制备的：取三七，加入4～12倍量40～85％乙醇回流提取1～5次，每次0.5～3.5h，合并提取液，滤过，滤液浓缩所得浸膏加1～4倍水溶解，滤过，滤液以0.2～1.0ml/g药材。min的速度过ZTC-1型大孔吸附树脂，依次用1～10倍树脂体积水和1～6倍树脂体积5～15％乙醇冲洗杂质，然后用1～7倍树脂体积的30～70％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；取黄芪，加水煎煮，合并提取液，滤过，滤液过大孔吸附树脂柱，先用水和低浓度乙醇洗脱，再用高浓度乙醇过大孔吸附树脂柱进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物取黄芪，加6～15倍量水煎煮1～5次，每次0.5～3.5小时，合并提取液，滤过，滤液过ZTC-1型大孔吸附树脂柱，先用2～8倍树脂体积水和1～5倍树脂体积5～20％乙醇洗脱，再用3～8倍树脂体积40～80％乙醇过大孔吸附树脂柱进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物将上述提取物与灯盏花素合并，加入辅料以不同的方法制成不同制剂。

所述的注射用无菌块状物是这样制备的：取三七，粉碎成粗粉，以70％乙醇回流提取2次，第一次加6倍量，回流2小时，第二次加5倍量，回流1.5小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩所得浸膏加2倍水溶解，滤过，滤液以0.6ml/g药材。min的速度过ZTC-1型大孔吸附树脂，依次用8倍树脂体积水和3倍树脂体积10％乙醇冲洗杂质，然后用6倍树脂体积的60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；取黄芪，加10倍量水煎煮3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液过ZTC-1型大孔吸附树脂柱，先用6倍树脂体积水和3倍树脂体积10％乙醇洗脱，再用5倍树脂体积60％乙醇过ZTC-1型大孔吸附树脂柱进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将灯盏花素、三七提取物和黄芪提取物合并，加入适量注射用水溶解，按体积加入2.0％的针用活性炭，煮沸，保持微沸20min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定量，调pH值6.5～8.0，煮沸，在4℃冷藏过夜，粗滤、精滤；将注射用甘露醇加注射用水配制成120mg/ml溶液，与上述药液混匀，粗滤、精滤，分装，温度-45℃，预冻时间10h；-40℃抽真空，保持8h；并在12～72小时内逐步差速梯度升温至10℃，保持2h，升温至20℃，保持2h，升温至30℃，保持2h，即得。

所述的药物组合物的制备方法中所采用的辅料包括甘露醇、半乳糖、甘氨酸、葡萄糖、氯化钠、右旋糖酐、甘油、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、山梨醇、吐温、泊洛沙姆、糊精、淀粉、交联聚维酮PVPP、CMC-Na、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、甘草炭、甜菊苷、植物油、大豆油、山梨醇、滑石粉、蜂蜡、改性淀粉、硬脂酸镁、二甲基硅油、液体石蜡中的一种或几种。

本发明涉及的灯盏花素、三七提取物和黄芪提取物还可以是市售的或者采用其他制备方法制备得到的；三七提取物还可以是皂苷类成分含量大于70％的三七总皂苷的有效部位，黄芪提取物还可以是皂苷类成分含量大于50％的有效部位。

所述的药物组合物主要用于治疗缺血性脑中风、中风后遗症、老年痴呆、冠心病心绞痛、心功能不全、病毒性心肌炎等疾病。

现有技术中，西医学对心脑血管的诊断标准尚存诸多争议，对动脉硬化发生的机理尚未完全弄清，目前比较公认的学说有“损伤应答学说”、“脂质侵润学说”、“血栓学说”、“细胞调亡学说”等等，但各自都有许多不能解释的现象。因此，临床治疗仍停留于对症处理，如调脂、降低血压、扩张血管、控制血糖、溶栓、改善营养代谢、改善微循环等。中医在治疗心脑血管疾病方面较西医具有一定的优势，同时可在人体的“多靶点”上发挥作用，通过多途径、多环节起综合治疗作用，有利于人体机体功能的恢复，尤其是在调整体内环境、改善临床症状、提高生活质量方面均有较好的疗效，如可使患者的头晕、头痛、肢麻、乏力、纳呆，甚至言语謇涩、偏瘫等症状明显好转，同时还可以预防或减轻如肝肾综合症、周围性病变等疾病。本发明采用具有活血化瘀作用、能改善的心肌供血，参与缺血心肌细胞的自身调节等作用的灯盏花素花素和三七入药，用于缓解疾病症状，缓解患者痛苦，，同时根据中医理论所讲，血瘀多由气虚而致，气虚为因，血瘀为果，故佐以黄芪用以益气，以取气行血行之效；气为血帅，气行则血行，进而疏通阻塞的血管，通行血脉，促进血行。现代药效学研究显示，本发明组方可解除血液浓粘凝聚状态，改善心脑血管微循环，增加脑细胞氧饱和度，改善血流动力学异常，同时增强机体免疫等作用，预示该组方制剂在治疗心脑血管疾病方面如冠心病、心绞痛、缺血性脑血管疾病方面具有良好的疗效，是有发展前景的药物

申请人进行了一系列实验，以证明本发明提供的药物工艺合理、疗效确切。

实验例1：药物组方有效性试验研究

本发明在组方有效性研究的基础上，进行了组方有效性的确认及拆方研究，与市售的黄芪注射液组、血塞通注射液组，灯盏花素注射液组进行了药效试验的比较，结果见表1。

                     表1组方有效性的确认及拆方研究结论

试验项目	血塞通组	灯盏花素组	黄芪组	本发明组
					药物法所致心肌缺血模型试验改善小鼠微循环试验改善血瘀模型大鼠血液流变性试验抗血小板聚集试验抗小鼠尾血栓形成试验家兔纤维蛋白溶解试验	作用明显作用一般作用明显作用明显作用明显作用一般	作用明显作用明显作用明显作用明显作用明显作用明显	作用明显作用明显作用明显作用一般作用一般作用一般	作用增强作用增强作用增强作用增强作用增强作用增强

由表1可知，三味药物配伍后，在改善心肌缺血，改善心脏血流动力学，改善微循环和血液流变性方面有明显的协同增效功能，均较单独用药要好。

实验例2：三七工艺考查

(1)提取条件考察

①提取溶剂的考察

称取三七100g，共4份，分别采用煎煮法、回流法、渗漉法、浸渍法，以三七总皂苷为指标进行考察，结果见表2。

煎煮法：取三七粗粉，加入10倍量水煎煮3次，每次1h，过滤，合并提取液，浓缩，定容，测定含量；

回流法：取三七粗粉，以70％乙醇回流提取2次，第一次加6倍量，回流2小时，第二次加5倍量，回流1.5小时，合并提取液，浓缩，定容，测定含量；

渗漉法：取三七粗粉，以70％乙醇为溶媒，参照《中国药典》2000年版一部附录IQ流浸膏剂项下试验，浸泡36h，流速为2.0ml/min.kg，收集渗漉液，回收乙醇，定容，测定含量；

浸渍法：取三七粗粉，以70％乙醇为溶媒，40℃温浸3次，每次加5倍量，温浸36h，过滤，合并滤液，回收乙醇，定容，测定含量。

                表2三七总皂苷含量测定结果

方法	三七总皂苷量(g)			均值
					煎煮法回流法渗漉法浸渍法	6.7897.0255.5624.875	6.8167.1285.6254.792	6.8057.0085.4084.901	6.8037.0545.5324.856

注：药材中三七总皂苷含量为8.1％。

由表2可以看出，三七总皂苷在水和乙醇中均有一定的溶解性，四种方法都能将三七总皂苷提取出来，但醇提效果优于水提，且回流法优于渗漉法、浸渍法；因此，选择回流提取工艺为最佳工艺。

②提取条件的优化

在提取溶剂确定的情况下，影响提取效果的主要因素有：溶剂的用量、提取时间和提取次数，因此以三七总皂苷量为考察指标，对这些主要影响因素进行考察结果见表3～5。

取三七100g，共5份，粉碎成粗粉，以40％、50％、60％、70％、85％乙醇浓度回流提取3次，每次1小时，合并提取液，浓缩，定容，测定含量，结果见表3。

                           表3三七提取溶剂浓度考察

乙醇浓度(％)	40	50	60	70	85
						三七总皂苷量(g)	6.02	6.50	7.12	7.95	7.96

由表3可知，三七在不同浓度的乙醇中总皂苷的量都较高，当乙醇浓度为70％，85％时，三七总皂苷的含量已没有明显变化，考虑节约成本等经济因素，选择70％乙醇提取。

                              表4三七提取因素考察

实验号	第一次		第二次		三七总皂苷量(g)
						用量(倍)	时间(h)	用量(倍)	时间(h)
	123456789	555666777	1.52.02.52.02.51.52.52.01.5	444555666						1.01.52.01.52.01.02.01.51.0	5.525.685.927.277.287.047.657.427.31

由表4可以看出，各种组合都可以将三七皂苷提取出来，溶剂用量越大，提取时间越长，总皂苷量越高，但是，第一次7倍量，提取2.5小时，第二次6倍量，提取2小时与第一次6倍量，提取2.0小时，第二次5倍量，提取1.5小时无显著性差异，故选择第一次6倍量，提取2.0小时，第二次5倍量，提取1.5小时作为提取条件。

实验例3精制工艺考察

取三七，粉碎成粗粉，以70％乙醇回流提取2次，第一次加6倍量，回流2小时，第二次加5倍量，回流1.5小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩所得浸膏加2倍水溶解，滤过，滤液以0.6ml/g药材。min的速度过ZTC-1型大孔吸附树脂，依次用8倍树脂体积水和3倍树脂体积10％乙醇冲洗杂质，然后用6倍树脂体积的60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；

精制方法的比较：萃取液法：精密量取三七提取物，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使溶解；精密量取三七提取液，加到已处理好的ZTC-1型树脂柱上，依次用8倍树脂体积水和3倍树脂体积10％乙醇冲洗杂质，然后用6倍树脂体积的60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，干燥，加甲醇溶解；结果见表5。

     表5精制方法的比较

精制方法	三七皂苷含量(％)
		萃取法大孔吸附树脂法	41.2155.12

由表5可知，萃取法和大孔树脂吸附法都能起到一定的纯化作用，二者比较，大孔树脂吸附法的三七皂苷含量更高，所以优选方案为采用大孔吸附树脂作为精制的方法。

由于不同型号的树脂其吸附力和比表面积都不相同，因此分离效果有所差异，本发明人对不同型号的树脂吸附三七皂苷的情况进行筛选，结果见表5。

            表6树脂型号的选择

树脂型号	载量(g药材/100g树脂)
		ZTC-1D-101D-605AB-8	61.2543.0855.1045.23.

由表6可知，不同树脂都可以吸附并分离纯化三七皂苷，相比较而言，ZTC-1型树脂的载量更大一些，因此我们确定用ZTC-1型树脂为最优方案。

实验例4：注射剂工艺研究

1、小容量注射液或注射用浓溶液成型研究

(1)活性炭用量用法考察：

注射剂在生产过程中由于溶剂、原料、容器等带有热原性物质，使注射剂的安全性降低，因此在制备注射剂的过程中需要清除热原性物质。目前除热原的方法主要有高温法、酸碱法、超滤法和吸附法，活性炭吸附法不但可以吸附热原性成分，还具有助滤和脱色的作用，在清除热原的同时可以改善制剂的外观性状，因此我们选用活性炭吸附法除热原，并对其用量进行考察。结果见下表7。

               表7活性炭用量考察表

活性炭用量(％)	膏重(g)	转移率(％)	外观
				0.20.51.0	7.287.127.02	61.4257.6854.36	红棕红红

从药液外观来看，选择活性炭用量为0.5％和1.0％的比较合适；但从转移率来判断，0.2％用量和0.5％用量略好一点，三者均可以满足注射剂的相关要求，但是综合考虑以上因素，以使用药液体积0.5％的活性炭脱色为最佳。

                 表8脱色时间考察表

时间(min)	膏重(g)	转移率(％)	外观
				203060	6.586.216.08	57.2554.7652.09	红棕红浅红

从表8可以看出，随着脱色时间的延长药液的颜色变淡，但是有效成分的转移率也相应减少，综合考虑上述因素，选用煮沸30分钟为最佳。

(2)溶液pH考察

为适应人体生理需要，同时还要考虑药液中各类成分的性质，在配液时需要对药液的pH值进行适当调整。选择野黄芩苷含量作为评价指标。

试验方法及结果：按处方量投料并按上述条件处理后，将浓缩液混合均匀，滤过，加水至1000ml，调pH值，当达到下表所示的不同pH值时，煮沸后静置过夜，观察在不同pH值条件下外观性状的变化。实验结果见表9。

                      表9配液pH值的考察(以溶液外观为考察指标)

序号	1	2	3	4	5	6	7	8	9
										配液pH煮沸pH	4.54.1	5.04.6	5.55.2	6.05.7	6.56.3	7.06.7	7.57.3	8.07.7	8.58.0
外观	出现沉淀				无明显变化				颜色加深

结果表明，药液煮沸后pH值在6.0以下的样品出现沉淀，pH值在8.5以上的样品颜色明显加深，pH值为6.5～8.0的药液相对比较稳定，外观没有明显变化。下面对其黄芪甲苷含量进行测定。结果见表10。

             表10配液pH值的考察(以野黄芩苷为考察指标)

序号	配液pH	配液时含量(％)	煮沸后pH	煮沸后含量(％)
					1234	6.57.07.58.0	9.189.189.189.18	6.36.77.37.7	9.159.129.089.05

由表10可知，药液在调整pH值前后，指标成分野黄芩苷含量没有太大变化。综合上述药液的外观性状和野黄芩苷的含量变化，确定配液时药液的pH值调在6.5～8.0之间。

2、注射用无菌块状物的冻干工艺考察

(1)支架剂种类的筛选

                      表11支架剂种类筛选

支架剂种类	支架剂∶药液(V∶V)	复溶性	成品外观
				葡萄糖半乳糖甘露醇甘氨酸右旋糖酐甘露醇、丙二醇甘氨酸、聚乙二醇右旋糖酐、山梨醇、吐温空白药液	3∶23∶23∶23∶23∶23∶23∶23∶23ml	一般好好一般好好一般好	成型，部分塌陷成型，部分塌陷成型成型，易碎成型，部分萎缩成型成型成型萎缩

由表11可知，在所筛选的辅料中，在其他条件相同的情况下，所有辅料均可制成冻干粉针，但是从成品率、成型状况和样品的复溶性角度综合考察，甘露醇和混合辅料甘露醇、丙二醇和右旋糖酐、山梨醇、吐温效果优于其他辅料，但考虑尽量减少辅料用量，选择单独使用甘露醇作为冻干支架剂。。

(2)支架剂用量筛选

将不同浓度的甘露醇溶液(60mg/ml、120mg/ml和180mg/ml)与药液以不同比例进行混合，过滤，每支西林瓶装量为3ml，冷冻干燥。结果如表11。

                               表12甘露醇用量筛选

编号	甘露醇浓度(mg/ml)	甘露醇∶药液(v∶v)	外形	复溶性	澄明度
						123	60120180	3∶23∶23∶2	部分塌陷完好完好	好好好	符合规定符合规定符合规定

由表12可知，当支架剂用量与药液的比例为3∶2时，样品性状以甘露醇浓度为120mg/ml和180mg/ml的样品比较好，60mg/ml的样品有部分塌陷，但是大部分还是成型的，但综合考虑辅料的用量和临床服用量，最佳选择甘露醇浓度为120mg/ml，甘露醇溶液与药液的体积比为3∶2。

(3)冷冻干燥条件筛选

冷冻干燥是一个比较漫长的干燥过程，需要消耗大量能源。一个理想的冻干条件不但可以节约大量能源，同时还可以缩短工时，因此我们对现有冻干条件进行优化筛选。具体条件筛选见表12。

                        表13冷冻干燥条件筛选

时间(h)温度(℃)	条件I	条件II	原条件	冷阱
					-45(预冻)-40(预冻)-35(抽真空)-35(抽真空)-30(抽真空)-25(抽真空)-20(抽真空)-15(抽真空)-10(抽真空)0(抽真空)10(抽真空)20(抽真空)	8-8-8-8-5522	-8-8-8-8-544	8-10-10-10-5533	保持-70℃

实验结果显示：条件I、II和III制得的成品外观性状和水分含量均符合标准。但是相对而言，条件II成品率稍低，条件III耗能较大，考虑到生产的实际情况，最终选定总体用时较短的条件I，即冷冻干燥条件为：预冻温度-45℃，预冻时间10h；-40℃抽真空，保持8h；再升温至-30℃，保持8h；升温至-20℃，保持8h；升温至-10℃，保持5h；升温至0℃，保持5h；升温至10℃，保持2h；升温至20℃，保持2h，即得成品。

具体的实施方式

(份为重量单位，如吨、千克、克)

实施例1：灯盏花素0.1份  黄芪10份  三七10份

取三七，粉碎成粗粉，以70％乙醇回流提取2次，第一次加6倍量，回流2小时，第二次加5倍量，回流1.5小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩所得浸膏加2倍水溶解，滤过，滤液以0.6ml/g药材。min的速度过ZTC-1型大孔吸附树脂，依次用8倍树脂体积水和3倍树脂体积10％乙醇冲洗杂质，然后用6倍树脂体积的60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；取黄芪，加10倍量水煎煮3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液过ZTC-1型大孔吸附树脂柱，先用6倍树脂体积水和3倍树脂体积10％乙醇洗脱，再用5倍树脂体积60％乙醇过ZTC-1型大孔吸附树脂柱进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将灯盏花素、三七提取物和黄芪提取物合并，加入适量注射用水溶解，按体积加入0.5％的针用活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定量，调pH值6.5～8.0，煮沸，在4℃冷藏过夜，粗滤、精滤；将注射用甘露醇加注射用水配制成120mg/ml溶液，与上述药液混匀，粗滤、精滤，分装，温度-45℃，预冻时间10h；-40℃抽真空，保持8h；并在12～72小时内逐步差速梯度升温至10℃，保持2h，升温至20℃，保持2h，即得冻干无菌块状物。经检测，制剂中的皂苷类成分和黄酮类成分的含量之和占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的72％。

实施例2：灯盏花素50份  黄芪5000份  三七5000份

取三七，加入6倍量70％乙醇回流提取3次，第一次2.0h，第二次1.5h，合并提取液，滤过，滤液浓缩所得浸膏加2倍体积的水溶解，滤过，滤液以0.8ml/g药材。min的速度过ZTC-1型大孔吸附树脂，依次用5倍树脂体积水和3倍树脂体积10％乙醇冲洗杂质，然后用5倍树脂体积的60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；取黄芪，加12倍量水煎煮3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液过ZTC-1型大孔吸附树脂柱，先用5倍树脂体积水和2倍树脂体积15％乙醇洗脱，再用5倍树脂体积70％乙醇进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将灯盏花素、三七提取物和黄芪提取物合并，加注射用水搅拌使之溶解，煮沸，调pH值至6.5～8.0之间，加入0.2％经活化的针用活性炭，煮沸吸附，除炭，精滤，滤液加注射用水至规定量，在4℃冷藏过夜，粗滤、精滤，分装到安瓿瓶中，灭菌，分装，即得直接用于注射给药的小容量注射液或注射用浓溶液。

实施例3灯盏花素10份  黄芪10份  三七50份

取三七，加入8倍量80％乙醇回流提取3次，每次1.5h，合并提取液，滤过，滤液浓缩所得浸膏加3倍体积的水溶解，滤过，滤液以0.5ml/g药材。min的速度过ZTC-1型大孔吸附树脂，依次用5倍树脂体积水和3倍树脂体积10％乙醇冲洗杂质，然后用4倍树脂体积的60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；取黄芪，加12倍量水煎煮3次，每次2.5小时，合并提取液，滤过，滤液过ZTC-1型大孔吸附树脂柱，先用5倍树脂体积水和3倍树脂体积15％乙醇洗脱，再用5倍树脂体积70％乙醇进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将灯盏花素、三七提取物、黄芪提取物合并，加注射用水溶解，加入规定量的葡萄糖，煮沸，调节pH值为6.5～8.0，加入％经活化的针用活性炭，煮沸吸附，除炭，4℃放置过夜，精滤，滤液加注射用水至规定量，分装，灭菌，即得葡萄糖静脉输液剂。

实施例4灯盏花素0.5份  黄芪50份  三七20份

取三七，加入12倍量50％乙醇回流提取4次，每次1h，合并提取液，滤过，滤液浓缩所得浸膏加3倍体积的水溶解，滤过，滤液以0.7ml/g药材。min的速度过ZTC-1型大孔吸附树脂，依次用5倍树脂体积水和3倍树脂体积12％乙醇冲洗杂质，然后用5倍树脂体积的50％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；取黄芪，加12倍量水煎煮3次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液过ZTC-1型大孔吸附树脂柱，先用4倍树脂体积水和4倍树脂体积10％乙醇洗脱，再用5倍树脂体积60％乙醇进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将灯盏花素、三七提取物和黄芪提取物合并，加注射用水搅拌溶解，滤过，滤液煮沸后按质量体积百分比加入0.5％的针用活性炭，保持微沸30分钟，稍冷过滤，滤液调pH值6.5～8.0，煮沸，4℃冷藏过夜，粗滤、精滤，加入适量经过煮沸的0.9％氯化钠溶液，用注射用水稀释至规定量，即得氯化钠输液剂。经检测，制剂中的皂苷类成分和黄酮类成分的含量之和占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的51％。

实施例5灯盏花素2份  黄芪500份  三七500份

取三七，加入10倍量65％乙醇回流提取3次，每次2.0h，合并提取液，滤过，滤液浓缩所得浸膏加2倍水溶解，滤过，滤液以0.6ml/g药材。min的速度过ZTC-1型大孔吸附树脂，依次用8倍树脂体积水和2倍树脂体积15％乙醇冲洗杂质，然后用3倍树脂体积的60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；取黄芪，加8倍量水煎煮3次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液过ZTC-1型大孔吸附树脂柱，先用6倍树脂体积水和3倍树脂体积12％乙醇洗脱，再用6倍树脂体积80％乙醇进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将灯盏花素、三七提取物和黄芪提取物合并，加入适量注射用水溶解，按体积加入1.0％的针用活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定量，调pH值6.5～8.0，煮沸，在4℃冷藏过夜，粗滤、精滤，分装到搪瓷盘中，温度-45℃，预冻时间10h；-40℃抽真空，保持8h；再升温至-35℃，保持8h；升温至-25℃，保持8h；升温至-10℃，保持4h；升温至0℃，保持4h；升温至10℃，保持2h；升温至20℃，保持2h，升温至25℃，保持2h，在无菌条件下分装到西林瓶中，即得冻干无菌粉末。

实施例6灯盏花素10份  黄芪提取物(含多糖)10份  三七提取物20份

将灯盏花素、黄芪提取物和三七提取物合并，加入适量注射用水搅拌溶解，加入1.0％(W/V)的针用活性炭，煮沸，保持微沸60min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定量，调pH值6.5～8.0，煮沸，在4℃冷藏过夜，粗滤、精滤，在进风温度为180℃，出风温度为60℃，气流速度为20m·s^-1的条件下喷雾干燥得粉末，分装，即得喷雾干燥无菌粉末。经检测，制剂中的黄酮类成分、皂苷类成分、多糖类成分的含量之和占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的26％。

实施例7灯盏花素20份  黄芪3000份  三七500份

取三七，加入8倍量80％乙醇回流提取4次，每次3.0h，合并提取液，滤过，滤液浓缩所得浸膏加2倍水溶解，滤过，滤液以0.6ml/g药材。min的速度过ZTC-1型大孔吸附树脂，依次用5倍树脂体积水和3倍树脂体积10％乙醇冲洗杂质，然后用5倍树脂体积的50％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；取黄芪，加12倍量水煎煮3次，每次2.5小时，合并提取液，滤过，滤液过ZTC-1型大孔吸附树脂柱，先用5倍树脂体积水和4倍树脂体积10％乙醇洗脱，再用4倍树脂体积65％乙醇进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将灯盏花素、黄芪提取物和三七提取物合并，加入PEG6000和聚氧乙烯单硬脂酸酯(4∶3)混合，加热熔融，搅拌均匀，转移至滴丸机，以液体石蜡为冷却剂，滴制，收集滴丸，除去表面的液体石蜡，即得滴丸剂。

实施例8灯盏花素0.5份  黄芪100份  三七200份

取三七，粉碎成粗粉，加入10倍体积60％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍药材体积的水溶解，过滤，滤液过ZTC-1型大孔吸附树脂，用4倍树脂体积水和3倍树脂体积15％乙醇冲洗杂质，然后用4倍树脂体积的60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；取黄芪，加12倍量水煎煮3次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度为1.05～1.15，加入乙醇醇沉2次，滤过，滤液回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将黄芪提取物、三七提取物和灯盏花素混合均匀，粉碎成细粉，加糊精、淀粉和硬脂酸镁适量，混匀，制粒，干燥，装胶囊，即得胶囊剂。

实施例9灯盏花素8份  黄芪总皂苷20份  三七50份

取三七，粉碎成粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用70％乙醇作溶剂，浸渍36小时后，以每分钟8ml的速度进行渗漉，收集渗漉液，渗漉液经活性炭脱色，滤过，回收乙醇并浓缩到稠膏状，加水沉淀后，乙醚脱脂收集脱脂液，浓缩至稠膏状，干燥，得三七提取物；将灯盏花素、三七提取物和黄芪总皂苷混合均匀，加入0.8倍药粉重量的植物油和1.5％的蜂蜡适量，滴制法制丸，压制即得软胶囊剂。经检测，制剂中的皂苷类成分占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的24％。

实施例10灯盏花素10份  黄芪100份  三七提取物1份

取黄芪，加12倍量水煎煮3次，每次2.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩至60℃相对密度为1.05～1.15，加入乙醇醇沉2次，第一次使含醇量达50％，第二次使含醇量达75％，合并两次乙醇液，回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，干燥得黄芪提取物；将黄芪提取物、灯盏花素和三七提取物混合，粉碎成细粉，加入交联聚乙烯吡咯烷酮和羟丙基淀粉钠(5∶4)适量，再加入适量矫味剂，压片，即得口腔崩解片。经检测，制剂中的多糖类成分占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的2.7％。

实施例11灯盏花素20份  黄芪200份  三七总皂苷5份

取黄芪，粉碎成过10目筛的粗粉，加入6倍体积70％乙醇回流提取2次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，加入3倍药材重量体积的水溶解，滤过，滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，用5倍树脂体积水和3倍树脂体积15％乙醇冲洗树脂柱，然后用50％乙醇解吸，收集50％乙醇解吸液，回收乙醇得稠膏，即得黄芪提取物；将灯盏花素、黄芪提取物和三七总皂苷混合均匀，粉碎，加入糊精和淀粉适量，混匀，制粒，干燥，压片，包衣，即得片剂。

实施例12：灯盏花素500份  黄芪提取物10份  三七提取物50份

将黄芪提取物、三七提取物和灯盏花素混合均匀，加低取代羧甲基纤维素钠与交联聚乙烯吡咯烷酮(3∶1)适量混匀，加入甜菊苷制粒、整粒，压片，即得分散片。经检测，皂苷类成分的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的3％；黄酮类成分的含量占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的92％。

实施例13灯盏花素30份  黄芪提取物5份  三七提取物2份

取灯盏花素提取物，黄芪提取物和三七提取物，加入适量淀粉与糊精，滚圆法制丸，包甘草炭，即得微丸剂。

实施例14灯盏花素1份  黄芪总皂苷1份  三七总皂苷2份

取灯盏花素提取物、黄芪总皂苷和三七总皂苷混合，加入适当辅料制软材，干燥，粉碎成细粉，加甜菊苷及淀粉适量，混匀，制粒，干燥，即得颗粒剂。

实施例15灯盏花素1份  黄芪有效部位(皂苷+多糖)2份三七总皂苷3份

将灯盏花素、三七总皂苷和黄芪有效部位(皂苷+多糖)合并，加入适量注射用水使之溶解，按体积加入1.0％的针用活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定量，调pH值6.5～8.0，煮沸，在4℃冷藏过夜，粗滤、精滤；将注射用甘露醇加注射用水配制成120mg/ml溶液，与上述药液混匀，粗滤、精滤，分装，温度-45℃，预冻时间10h；-40℃抽真空，保持8h；并在12～72小时内逐步差速梯度升温至10℃，保持2h，升温至20℃，保持2h，即得冻干粉针。

实施例16黄芪总多糖2份  灯盏花素10份  三七总皂苷5份

将灯盏花素、三七总皂苷和黄芪总多糖合并，加入适量注射用水溶解，按体积加入1.0％的针用活性炭，煮沸，保持微沸20min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定量，调pH值6.5～8.0，煮沸，在4℃冷藏过夜，粗滤、精滤；将注射用甘露醇加注射用水配制成100mg/ml溶液，与上述药液混匀，粗滤、精滤，分装，温度-45℃，预冻时间10h；-40℃抽真空，保持8h；并在12～72小时内逐步差速梯度升温至10℃，保持2h，升温至20℃，保持2h，升温至25℃，保持2h，即得冻干无菌块状物。

Claims (14)

1、一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于：按照重量组份计算，它由灯盏花素0.1～50份、黄芪10～5000份与三七10～5000份制作而成；或是由相应重量份黄芪药材、三七药材经提取精制后得到的提取物与相应重量份灯盏花素加适当辅料制作而成。

2、按照权利要求1所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于：按照重量组份计算，它由灯盏花素0.1～10份、黄芪10～1000份与三七10～1000份制作而成，或是由相应重量份黄芪药材、三七药材经提取精制后得到的提取物与相应重量份灯盏花素加适当辅料制作而成。

3、按照权利要求1或2所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于：按照重量组份计算，它由灯盏花素0.5～2份、黄芪50～500份与三七20～500份制作而成，或是由相应重量份黄芪药材、三七药材经提取精制后得到的提取物与相应重量份灯盏花素加适当辅料制作而成。

4、按照权利要求1-3任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于：本发明所述的制剂为注射剂和口服制剂；注射剂包括：直接用于注射给药的注射液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液、直接供静脉滴注的静脉输液以及用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无菌块状物；口服制剂包括：片剂、分散片、泡腾片、口腔崩解片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、口服液体制剂、煎膏剂、浸膏剂、凝胶剂、膜剂及其他药剂学上所有可以接受的剂型。

5、按照权利要求4所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于：本发明所述的制剂为直接用于注射给药的注射液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液、直接供静脉滴注的静脉输液以及用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无菌块状物、滴丸剂、胶囊剂、软胶囊剂、口腔崩解片、片剂、胶囊剂、分散片和颗粒剂。

6、按照权利要求4或5所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于：制剂中含有皂苷类成分和黄酮类成分，按照重量百分比计算，其中皂苷类成分的含量不低于制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的1％；黄酮类成分的含量不低于制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量的0.5％，注射剂中的皂苷类成分、黄酮类成分和其他所有可测成分的含量之和占制剂中扣除辅料量和水分量后的总固体量不低于25％。

7、按照权利要求1～6任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物的制备方法，其特征在于：取三七、黄芪，分别加水或乙醇提取，提取液浓缩干燥得药材粗提物，进一步采用醇沉法、水返溶法、有机溶剂萃取法、絮凝沉淀法、柱层析法的一种或几种联合使用进行适当精制，得药材精提物，将两药材粗提物或精提物和灯盏花素合并，加辅料以不同的方法制备成不同的制剂。

8、按照权利要求7所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物的制备方法，其特征在于：取三七药材，加乙醇提取，合并提取液，浓缩，进一步采用有机溶剂萃取或过大孔吸附树脂精制，浓缩干燥得三七提取物；取黄芪，加水煎煮，合并提取液，滤过，滤液过大孔吸附树脂柱，先用水和低浓度乙醇洗脱，再用高浓度乙醇过大孔吸附树脂柱进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将灯盏花素、三七提取物和黄芪提取物混合后加入辅料以不同的方法制成不同的制剂。

9、按照权利要求7或8所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物的制备方法，其特征在于：取三七，加入4～12倍量40～85％乙醇回流提取1～5次，每次0.5～3.5h，合并提取液，滤过，滤液浓缩所得浸膏加1～4倍水溶解，滤过，滤液以0.2～1.0ml/g药材.min的速度过ZTC-1型大孔吸附树脂，依次用1～10倍树脂体积水和1～6倍树脂体积5～15％乙醇冲洗杂质，然后用1～7倍树脂体积的30～70％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；取黄芪，加6～15倍量水煎煮1～5次，每次0.5～3.5小时，合并提取液，滤过，滤液过ZTC-1型大孔吸附树脂柱，先用2～8倍树脂体积水和1～5倍树脂体积5～20％乙醇洗脱，再用3～8倍树脂体积40～80％乙醇进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将三七提取物、黄芪提取物与灯盏花素合并，加入辅料以不同的方法制成不同的制剂。

10、按照权利要求7～9任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物的制备方法，其特征在于：注射用无菌块状物是这样制备的：取三七，粉碎成粗粉，以70％乙醇回流提取2次，第一次加6倍量，回流2小时，第二次加5倍量，回流1.5小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩所得浸膏加2倍水溶解，滤过，滤液以0.6ml/g药材.min的速度过ZTC-1型大孔吸附树脂，依次用8倍树脂体积水和3倍树脂体积10％乙醇冲洗杂质，然后用6倍树脂体积的60％乙醇解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃时测定相对密度为1.05～1.15，得三七提取物；取黄芪，加10倍量水煎煮3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液过ZTC-1型大孔吸附树脂柱，先用6倍树脂体积水和3倍树脂体积10％乙醇洗脱，再用5倍树脂体积60％乙醇过ZTC-1型大孔吸附树脂柱进行解吸，收集解吸液，减压回收乙醇至60℃相对密度为1.05～1.15，得黄芪提取物；将灯盏花素、三七提取物和黄芪提取物合并，加入适量注射用水溶解，按体积加入0.5％的针用活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过，滤液加注射用水至规定量，调pH值6.5～8.0，煮沸，在4℃冷藏过夜，粗滤、精滤；将注射用甘露醇加注射用水配制成120mg/ml溶液，与上述药液混匀，粗滤、精滤，分装，温度-45℃，预冻时间10h；-40℃抽真空，保持8h；并在12～72小时内逐步差速梯度升温至10℃，保持2h，升温至20℃，保持2h，即得。

11、按照权利要求7～9中任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物的制备方法，其特征在于：制剂中所采用的辅料包括甘露醇、半乳糖、甘氨酸、葡萄糖、氯化钠、右旋糖酐、甘油、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、山梨醇、吐温、泊洛沙姆、糊精、淀粉、交联聚维酮PVPP、CMC-Na、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、甘草炭、甜菊苷、植物油、大豆油、山梨醇、滑石粉、蜂蜡、改性淀粉、硬脂酸镁、二甲基硅油、液体石蜡中的一种或几种。

12、按照权利要求1～3和7～10中任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于：灯盏花素、三七提取物和黄芪提取物还可以是市售的或者采用其他制备方法制备得到的。

13、按照权利要求1～3和7～10中任意一项所述的治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于：三七提取物还可以是皂苷类成分含量大于70％的三七总皂苷的有效部位，黄芪提取物还可以是皂苷类成分含量大于50％的有效部位。

14、如权利要求1～3所述的药物组合物在制备治疗缺血性脑中风、中风后遗症、老年痴呆、冠心病心绞痛、心功能不全、病毒性心肌炎等疾病药物中的应用。