CN1730051A - 一种治疗急性胆囊炎的清胆注射剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种治疗急性胆囊炎的静脉用中药复方有效部位注射剂——清胆注射剂,主要含有从中药栀子、黄芩中提取分离得到的有效部位栀子提取物(栀子总苷)和黄芩提取物(黄芩苷),本发明也涉及制备该清胆注射剂的方法。本发明的清胆注射剂经药效学试验证明,具有明显利胆、退黄、抗胆囊炎作用,用于治疗急性胆囊炎,作用迅速,疗效确切,制剂安全性符合要求,静脉使用不良反应小。
Description
技术领域
本发明涉及一种治疗急性胆囊炎的中药复方有效部位注射剂,具体是涉及一种以栀子、黄芩天然中草药为原料提取分离有效部位栀子提取物(栀子总苷)与黄芩提取物(黄芩苷)配伍制备的可供静脉注射用的清胆注射剂,本发明也涉及该清胆注射剂的制备方法。
背景技术
近年来,急性胆囊炎的发病率呈逐年上升趋势,已成为最为常见的胆道系统疾病,该病通常起病较急,病变部位疼痛难忍,给患者带来极大的痛苦。对于急性胆囊炎的治疗,通常给予消炎利胆药口服或输液治疗,使用抗生素滴注以抗菌消炎在临床上较为普遍,但抗生素滥用带来的危害使临床医生不得不加倍小心。中医治疗急性胆囊炎研究颇多,现也有大量清利肝胆湿热的中成药用于临床,但纵观目前已用于临床治疗胆囊炎及相关疾病的中药制剂,诸如消炎利胆片、胆舒胶囊、利胆片、舒胆片等,均为口服制剂,起效缓慢、生物利用度低,难以满足该病的治疗需要,急待开发具消炎利胆作用的中药注射剂,特别是可供静脉注射用的中药复方有效部位注射剂。
栀子与黄芩配伍为中医清利肝胆湿热的有效方药,在临床上中有着广泛的应用,但却一直未见有注射剂开发与报道,特别是经过严格的提取纯化处理、可供静脉注射用的复方有效部位注射剂开发,也未见有作为治疗急性胆囊炎的注射剂开发。近年来,研究表明,栀子有明显的消炎利胆与抗菌作用,主要有效部位为以栀子苷(京尼平苷,geniposide)为主的环烯醚萜苷类成分,本申请人的研究也解决了栀子提取物的制备工艺问题,可使有效部位栀子总苷含量达80%以上。黄芩具有很强的抗菌消炎及解热作用,同时也有利胆作用,主要有效部位为以黄芩苷(Baicalin)为主的黄酮类成分,其提取分离纯化也有了较为成熟的工艺:水煎煮提取,煎液反复以酸沉淀,碱与乙醇溶解处理,可使有效部位黄芩苷含量达85%以上。
中医用药,讲究方剂配伍与药物的协同作用,处方中的药味构成与用量对于其功效有较大的影响,但现代制剂中对于有效组分的配伍研究却较少进行。本申请人的药效学研究结果证明,以栀子提取物与黄芩提取物配伍应用,制成静脉注射剂,两种药物在抗菌消炎与利胆方面有非常明显的协同作用,用于治疗急性胆囊炎时可以产生明显的互补作用,增强药物的疗效。同时,对于栀子提取物与黄芩提取物用量配比的研究也表明,两者不同配比对其药理作用有明显影响,在治疗胆囊炎方面,应以栀子提取物为主,辅以黄芩提取物。
发明内容
本发明的目的在于:针对目前治疗急性胆囊炎的中药制剂存在的问题,为临床提供一种静脉用中药复方有效部位注射剂-清胆注射剂,该注射剂活性成分明确,总固体中有效部位含量在80%以上,质量可控,疗效确切,制剂安全性符合静脉注射剂要求。
本发明的另一个目的是提供该清胆注射剂的制备方法。
本发明的清胆注射剂,其所含活性成分组成及其重量比例为:每剂量单位含栀子提取物(以栀子总苷计)60~100mg,黄芩提取物(以黄芩苷计)30~50mg;两组分的重量比为2-3∶1。
本发明的清胆注射剂,其所含活性成分组成及其重量比例优选为:每剂量单位含栀子提取物(以栀子总苷计)80mg,黄芩提取物(以黄芩苷计)40mg;两组分的重量比例为2∶1。
上述清胆注射剂的制备方法,是以栀子、黄芩天然中草药为原料,按以下步骤制备获得:
a.取栀子乙醇回流提取,合并提取液,上活性炭柱处理,收集乙醇液减压回收乙醇并浓缩,加水沉淀,过滤,滤液上大孔吸附树脂柱,先以水洗脱,弃去水洗液,继用20-50%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,减压回收乙醇并浓缩,喷雾干燥,得栀子提取物;
b.取黄芩,按照《中国药典》2005年版一部黄芩提取物的制法,制得黄芩提取物;
c.取上述栀子提取物,加注射用水使溶解,备用;再取上述黄芩提取物,加注射用水及氢氧化钠溶液使溶解。合并两种药液,加入注射用水和药用辅料,搅拌溶解,调节pH,加活性炭适量,搅匀,煮沸,滤过,滤液按制剂常规工艺制成注射剂,包括小水针、冻干粉针、大容量葡萄糖输液和大容量氯化钠输液。
本发明所述的药用辅料包含注射剂用抗氧剂、稀释剂、渗透压调节剂、赋形剂等中的一种或几种;所述的栀子提取物是以栀子总苷为主要成份的提取物,以比色法测定栀子总苷含量高于80%;所述的黄芩提取物是以黄芩苷为主要成份的提取物,以高效液相色谱法测定黄芩苷含量高于85%。
本发明的优点在于:
①作为静脉用注射剂,比其它剂型更具有药物吸收快、生物利用度高、作用迅速、适用于急性及中重度病例、静脉输注可避免二次污染等突出优点;
②作为有效部位注射剂,比其它粗提取纯化的注射剂更具有有效成分明确、质量可控,疗效高、使用安全等突出优点;
③作为复方有效部位注射剂,它相比单方注射剂更具有可发挥有效组分的协同作用以增效减毒的优点;
④本发明药物的处方组成及用量配比均是以药效学试验为依据,获得的组合物用于治疗急性胆囊炎疗效确切。
本发明对清胆注射剂及其组合物配比进行了药效学试验研究。结果表明该药物具有明显利胆、退黄、抗胆囊炎作用,其组合物栀子提取物与黄芩提取物合用比单用作用强,以栀子提取物∶黄芩提取物=2-3∶1比例配伍效果最好,作用最强。
1、对正常大鼠胆汁分泌量的影响
表1显示该药物组合物的4种配伍比例均有利胆作用,且比单用栀子提取物组和黄芩提取物组作用强。而4种配伍比例中又以栀子提取物∶黄芩提取物=2-3∶1的配伍比例利胆效果最好。
表1 清胆注射剂对大鼠胆汁流量的影响
组别 | 鼠数(只) | 胆汁流量(ml/30min) | ||||
给药前30min | 给药后30min | 60min | 90m in | 120mi n | ||
对照组 | 10 | 0.54±0.08 | 0.51±0.07 | 0.49±0.07 | 0.45±0.07 | 0.43±0.09 |
栀子提取物∶黄芩提取物=1∶2 | 10 | 0.52±0.08 | 0.57*±0.05 | 0.57*±0.07 | 0.50±0.09 | 0.47±0.09 |
栀子提取物∶黄芩提取物=1∶1 | 10 | 0.55±0.06 | 0.58*±0.05 | 0.59*±0.09 | 0.51±0.07 | 0.49±0.08 |
栀子提取物∶黄芩提取物=2∶1 | 10 | 0.55±0.10 | 0.62**±0.06 | 0.62**±0.08 | 0.54*±0.07 | 0.52±0.09 |
栀子提取物∶黄芩提取物=3∶1 | 10 | 0.55±0.09 | 0.63**±0.06 | 0.63**±0.07 | 0.53*±0.05 | 0.51±0.09 |
栀子提取物组 | 10 | 0.52±0.12 | 0.54±0.09 | 0.57*±0.08 | 0.52±0.08 | 0.47±0.10 |
黄芩提取物组 | 10 | 0.57±0.11 | 0.54±0.08 | 0.58*±0.07 | 0.47±0.10 | 0.46±0.08 |
注:各给药组与对照组比较*P<0.05 **P<0.01
2、α-萘异氰酸酯致急性黄疸模型试验
表2显示该药物组合物的4种配伍比例均有退黄作用,且比单用栀子提取物组和黄芩提取物组作用强。而4种配伍比例中又以栀子提取物∶黄芩提取物=2~3∶1的配伍比例退黄效果最好。
表2 对α-萘异氰酸酯致急性黄疸的退黄作用
组别 | 鼠数(只) | T-Bil(mg/dl) | D-Bil(mg/dl) |
正常对照组 | 10 | 0.59±0.06 | 0.27±0.09 |
模型组 | 10 | 4.98±1.35△△△ | 3.70±0.95△△△ |
栀子提取物∶黄芩提取物=3∶1 | 10 | 2.72±0.86*** | 2.36±0.71** |
栀子提取物∶黄芩提取物=2∶1 | 10 | 2.89±0.90*** | 2.34±0.78** |
栀子提取物∶黄芩提取物=1∶1 | 10 | 3.18±0.92* | 2.76±0.81* |
栀子提取物∶黄芩提取物=1∶2 | 10 | 3.22±0.91* | 2.85±0.89 |
栀子提取物组 | 10 | 3.33±0.84* | 2.91±0.97 |
黄芩提取物组 | 10 | 3.35±0.85* | 2.98±0.93 |
注:①模型组与正常对照组比较△△△P<0.001 ②各给药药组与模型组比较*P<0.05 **P<0.01
3、急性化脓性胆管炎模型试验
表3显示该药物组合物的4种配伍比例对大鼠急性化脓性胆管炎模型动物均有抗胆囊炎作用,且比单用栀子提取物组和黄芩提取物组作用强。而4种配伍比例中又以栀子提取物∶黄芩提取物=2~3∶1的配伍比例抗胆囊炎效果最好。
表3 对大鼠急性化脓性胆管炎的影响
组别 | 鼠数(只) | ALT(U/L) | AST(U/L) | 炎细胞面积(um2) |
正常对照组 | 10 | 40.10±5.86 | 230.10±25.77 | 245.36±65.89 |
模型组 | 10 | 551.20△△△±78.18 | 769.70△△△±139.12 | 5841.20△△△±1839.70 |
栀子提取物∶黄芩提取物=3∶1 | 10 | 307.53***±89.47 | 449.85***±131.23 | 2922.16**±1439.57 |
栀子提取物∶黄芩提取物=2∶1 | 10 | 310.60***±96.64 | 456.90***±123.15 | 2934.30**±1444.89 |
栀子提取物∶黄芩提取物=1∶1 | 10 | 462.80*±75.31 | 527.20**±50.25 | 3829.70*±1615.66 |
栀子提取物∶黄芩提取物=1∶2 | 10 | 464.06*±72.57 | 565.40*±105.49 | 3987.70*±1564.18 |
栀子提取物组 | 10 | 470.80*±67.09 | 587.90*±184.90 | 4026.20*±1607.46 |
黄芩提取物组 | 10 | 477.40*±66.95 | 609.40*±173.72 | 4053.00*±1599.29 |
注:①模型组与正常对照组比较△△△P<0.001 △△P<0.01
②各给药药组与模型组比较*P<0.05 **P<0.01 ***P<0.001
本发明的清胆注射剂药物经毒理试验研究证明,使用安全。
1、动物急性毒性试验显示:清胆注射剂小鼠、大鼠尾静脉注射的最大给药量均为1800mg/kg,最大给药倍数为60kg体重成人临床静脉滴注日用药量的450倍。给药后观察14天,动物均无死亡。给药后1~30min动物表现为安定,自主活动减少,1小时后恢复正常。其余未见明显异常。清胆注射剂腹腔注射给药的最大给药量均为2250mg/kg,最大给药倍数为60kg体重成人临床静脉滴注日用药量的562.5倍。腹腔注射给药后观察14天,动物均无死亡。给药后30min动物表现为耸毛、步履蹒跚、自主活动减少,3小时后恢复正常,其它未见明显异常。观察期间,给药的第一天大鼠的摄食量有所减少,此后恢复正常,处死动物后,肉眼观察重要器官(心、肝、脾、肺、肾等)均无明显异常。
2、大鼠长期毒性实验结果:
(1)一般情况及体重:给药90天和停药14天,各组动物一般情况、摄食量未见明显异常。给药49~90天,可见高剂量组和栀子组体重明显或显著下降(P<0.05或P<0.01),无性别差异。停药14天,各组均无明显差异(P>0.05)。
(2)血常规检查:给药90天高、中、低剂量组及其拆方研究组的GRA、GR%、RDWs、PLT和PCT呈剂量依赖性的显著或极显著升高(P<0.01或P<0.001),无性别差异。因这些变化在正常生理值范围,推测与该品具有止血作用有关。其它指标为散在的升高或降低,不呈剂量依赖性,推测系动物对长期注射给药的正常生理反应。
(3)PT和aPTT检查:给药90天,高、中剂量组及拆方研究组PT和aPTT分别明显或显著缩短(P<0.05或P<0.01);高、中剂量组和黄芩组雄性大鼠及高剂量组和拆方栀子组雌性大鼠PT分别明显或显著缩短(P<0.05或P<0.01),无性别差异。以上变化与本品止血作用相一致。停药14天,各组均无明显差异(P>0.05)。
(4)电解质检查:给药90天,高、中、低剂量组及拆方组可见Cl-和K-增高(P<0.01或P<0.001),但其最高升高率仅2.1%,且在正常生理值范围内,故认为无明确临床意义。停药14天,仅见拆方组Cl-、Na+、K-散在的增高或降低(P<0.01或P<0.05),且在正常生理值范围内,故认为无明确临床意义。
(5)肝功能检查:给药90天可见高、中剂量组AST、球蛋白显著或明显升高(P<0.01或P<0.05);拆方研究显示栀子组AST、T-Bil、ALB和球蛋白此显著或明显增高(P<0.01或P<0.05),而其余组未见异常,停药14天,各项指标未见明显差异(P>0.05)。
(6)肾功能检查:给药90天和停药14天,各项指标无明显差异(P>0.05)。
(7)其它生化指标检查:未见明显异常。
(8)系统尸解及脏器指数检查:给药90天,可见高剂量组和栀子组肝脏和脾脏系数明显升高(P<0.05),提示该药可能对免疫系统有一定影响。停药14天,各脏器指数指标无明显差异(P>0.05)。
(9)病理组织学检查:未见明显异常。
结论:清胆注射剂连续静脉滴注给药90天和停药14天,对大鼠血常规、电解质、PT和aPTT、生化、等均无明显影响,亦无明显延迟性毒性反应。
3、Beagle犬长期毒性试验
(1)生长发育及一般情况观察:给药期间和停药观察,动物的精神行为活动、皮毛、呼吸、循环、食欲,大小便等均未见明显异常,犬体重增长和发育未见明显影响,亦未见明显延迟性毒性反应。
(2)尿常规检查:未见明显异常。
(3)血常规检查:给药45天、90天及停药14天,个别指标存在一些散在的变化,因无明显量效关系,推测系正常生理波动。
(4)电解质检查:未见明显异常。
(5)凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间检查:给药45天和90天高、中剂量组PT与aPTT分别有显著或明显升高(P<0.01或P<0.05),分析认为与其活血化瘀作用相一致。
(6)肝功能检查:未见明显异常。
(7)肾功能检查:未见明显异常。
(8)血糖和血清胆固醇检查:未见明显异常。
(9)心电图检查:未见明显异常。
(10)活体动物骨髓检查:未见明显异常。
(11)系统尸解和脏器指数:未见明显异常。
(12)病理组织学检查:未见明显异常。
结论:清胆注射剂连续静脉滴注给药90天和停药14天,对Beagle犬尿常规、血常规、电解质、PT和aPTT、生化、心电图、骨髓检查等均无明显影响,亦无明显延迟性毒性反应。
附图说明
图1为本发明栀子提取物的标准指纹图谱
图2为本发明黄芩提取物的标准指纹图谱
图3为本发明清胆栀黄注射剂栀子的标准指纹图谱
图4为本发明清胆栀黄注射剂黄芩的标准指纹图谱
具体实施方式
下面给出最佳实施例进一步说明本发明但并不对本发明限制。
实施例1:冻干粉针剂的制备
(1)取栀子药材50kg粉碎成粗颗粒状,用80%乙醇提取3次,第一次用10倍量提取2小时,第二次用8倍量提取1.5小时,第三次用6倍量提取1小时。合并提取液,缓慢通过装有活性炭1.5kg的色谱柱,收集乙醇液,回收乙醇并浓缩至相对密度约为1.20(60℃)的清膏,加10倍量水,静置,冷藏24小时,滤过,滤液浓缩至约100L,滤过,滤液通过装有250kg预处理好的D101大孔吸附树脂柱,加水750L洗脱,弃去水溶液,继用30%乙醇700L洗脱,收集30%的乙醇洗脱液,减压回收乙醇并浓缩至相对密度约为1.12(60℃)的清膏,喷雾干燥,得栀子提取物4.6kg,以比色法测定,含栀子总苷84.0%,以高效液相色谱法测定,含栀子苷63.2%。
(2)取黄芩50kg,加水煎煮两次,第一次加10倍量水煎煮1小时,第二次加8倍量水煎煮1小时,滤过,合并滤液;以1mol/L盐酸溶液调节pH值至1.5,80℃保温1小时,静置12小时,滤过,弃去上清液,沉淀加2倍量水搅匀,再以40%氢氧化钠调节PH值至7.0,并加等量乙醇搅拌使溶解,滤过,滤液用盐酸调节pH至1.5,充分搅拌后于60℃保温30分钟,静置12小时,滤过,沉淀加2倍量水洗涤后,再以50%乙醇洗涤pH至4.0,加10倍量水,搅拌,用40%NaOH溶液调节pH至7.0,加入0.5%活性炭充分搅拌,50℃保温30分钟,加入等量乙醇搅匀,滤过,滤液用2mol/L盐酸溶液调节pH至1.0,60℃保温30分钟,静置12小时,滤过,沉淀用少量乙醇洗涤后,于60℃减压干燥,得黄芩提取物4.8Kg,以高效液相色谱法测定,含黄芩苷92%。
(3)取上述栀子提取物(以栀子总苷计)80g,加0.02mol/L磷酸二氢钠注射用水溶液800ml使溶解,备用;取上述黄芩提取物(以黄芩苷计)40g,加注射用水1000ml,加10%氢氧化钠溶液90ml使溶解,与上述溶液合并,加注射用水至4000ml,加活性炭4g,搅匀,85℃保温45分钟,放冷,滤过,滤液加注射用水至4000ml,精滤,分装成1000瓶,冷冻干燥,即得。
实施例2:小容量注射液的制备
取实施例1项下的栀子提取物(以栀子总苷计)40g,加注射用水2000ml使溶解,备用;取黄芩提取物(以黄芩苷计)20g,加注射用水500ml,加10%氢氧化钠溶液37.5ml使溶解,备用;药液合并,加热煮沸,加活性炭20g,搅匀,煮沸30分钟,滤过,滤液加注射用水至5000ml,调节pH值至6.8,精滤,分装于10ml安培瓶中,制成500瓶,熔封,灭菌,检查澄明度,包装,即得。
实施例3:大容量氯化钠注射液的制备
取实施例1项下的栀子提取物(以栀子总苷计)80g,加注射用水20000ml使溶解,备用;取黄芩提取物(以黄芩苷计)40g,加注射用水7500ml,加10%氢氧化钠溶液75ml使溶解,备用;取注射用氯化钠760g,亚硫酸氢钠150g,枸橼酸钠150g,加注射用水10000ml使溶解,与上述药液合并,加热煮沸,加活性炭30g,搅匀,煮沸30分钟,滤过,滤液加注射用水至100000ml,调节pH值至6.8,精滤,分装于100ml输液瓶中,制成1000瓶,轧盖,灭菌,检查澄明度,包装,即得。
实施例4:大容量葡萄糖注射液的制备
取实施例1项下的栀子提取物(以栀子总苷计)80g,加注射用水20000ml使溶解,备用;取黄芩提取物(以黄芩苷计)40g,加注射用水7500ml,加10%氢氧化钠溶液75ml使溶解,备用;取注射用葡萄糖5000g,亚硫酸氢钠150g,加注射用水50000ml使溶解,与上述药液合并,加热煮沸,加活性炭30g,搅匀,煮沸30分钟,滤过,滤液加注射用水至100000ml,调节pH值至6.9,精滤,分装于100ml输液瓶中,制成1000瓶,轧盖,灭菌,检查澄明度,包装,即得。
Claims (5)
1、一种治疗急性胆囊炎的静脉用中药复方有效部位注射剂-清胆注射剂组合物,其特征在于所含活性成分组成及其重量比例为:每剂量单位含栀子提取物(以栀子总苷计)60~100mg,黄芩提取物(以黄芩苷计)30~50mg;两组分的重量比为2-3∶1。
2、根据权利要求1所述的清胆注射剂组合物,其特征在于所述的注射剂包括小水针、冻干粉针、大容量葡萄糖输液和大容量氯化钠输液。
3、根据权利要求1所述的清胆注射剂组合物,其特征在于所述的栀子提取物中含有重量百分比80%以上的栀子总苷;所述的黄芩提取物是指《中国药典》2005年版一部收载的黄芩提取物,含有重量百分比85%以上的黄芩苷。
4、如权利要求1、2、3所述的清胆注射剂组合物的制备方法,其特征在于以栀子、黄芩天然中草药为原料,按以下方法制备:
a.取栀子乙醇回流提取,合并提取液,上活性炭柱处理,收集乙醇液减压回收乙醇并浓缩,加水沉淀,过滤,滤液上大孔吸附树脂柱,先以水洗脱,弃去水洗液,继用20-50%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,减压回收乙醇并浓缩,喷雾干燥,得栀子提取物;
b.取黄芩,按照《中国药典》2005年版一部黄芩提取物的制法,制得黄芩提取物;
c.取上述栀子提取物,加注射用水使溶解,备用;再取上述黄芩提取物,加注射用水及氢氧化钠溶液使溶解。合并两种药液,加入注射用水和药用辅料,搅拌溶解,调节pH,加活性炭适量,搅匀,煮沸,滤过,滤液按制剂常规工艺制成注射剂,包括小水针、冻干粉针、大容量葡萄糖输液和大容量氯化钠输液。
5、根据权利要求4所述的清胆注射剂的制备方法,其特征在于所述的药用辅料包含注射剂用抗氧剂、稀释剂、渗透压调节剂、赋形剂等中的一种或几种。
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN102940708A (zh) * | 2012-12-12 | 2013-02-27 | 重庆邮电大学 | 一种治疗上呼吸道感染的中药咀嚼片及其制备和质量检测方法 |
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2005
- 2005-04-11 CN CN 200510065828 patent/CN1730051A/zh active Pending
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102940708A (zh) * | 2012-12-12 | 2013-02-27 | 重庆邮电大学 | 一种治疗上呼吸道感染的中药咀嚼片及其制备和质量检测方法 |
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PB01 | Publication | ||
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