CN1857710A - 止咳化痰的中药糖浆剂及制备方法和质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种止咳化痰的中药糖浆剂及制备方法和质量控制方法，它主要是以鲜竹沥为原料药制成，或者与鱼腥草等其它中药配伍使用，与现有技术相比，本发明制剂清热、化痰、止咳的功效卓著，临床用于痰热咳嗽、肺热痰喘等症；所提供的糖浆剂口感好，利于服用，易为患者接受；采用分剂量服用，较液剂更方便、准确；成品经灭菌处理，密封包装，质量稳定；较液体对挥发性成分的结合更紧密，有效成分难以散失，疗效更为稳定可靠。

Description

止咳化痰的中药糖浆剂及制备方法和质量控制方法

技术领域：本发明涉及一种止咳化痰的中药糖浆剂及制备方法和质量控制方法，属于中药的技术领域。

背景技术：咳嗽是日常生活中常见的病症之一。外邪侵犯于肺引起咳嗽，临床上以风寒咳嗽、风热咳嗽、燥热咳嗽为多见。咳嗽的治疗当以祛邪为主，重视化痰顺气，使痰清气顺，肺气宣畅，则咳嗽易于治疗。中医认为，肺主气，司呼吸，外合皮毛，主宣发肃降，凡外邪犯肺，郁而化热，或热自内生，热伤肺津，炼液成痰，痰热互结，壅阻肺络，肺失宣肃，即可导致肺热咳嗽痰多，气喘胸闷等症，而痰为人体脏腑功能失调，水液代谢障碍而形成的病理产物，痰之已成，留滞体内，随气升降，无处不到，又是多种病症的致病之因，有百病多因痰作祟之说。而竹沥(又名鲜竹汁、淡竹沥、竹油等)味甘性寒，归心，肺，胃经，性极滑利，是一味豁痰力很强的中药，走窍逐痰能通达内外上下诸处。《本草衍义》曰：“竹沥行痰，通达上下百骸毛窍诸处，如痰在巅顶可降，痰在胸膈可开，痰在四肢可散，痰在脏腑经络可利，痰在膜外可行。又如癫痫狂乱，风热发痉者可定；痰厥失音，人事昏迷者可醒。为痰家之圣剂也”。因此，以鲜竹沥为原料制成的药物具有显著的清热、化痰、止咳的功效，用于肺热咳嗽痰多，气喘胸闷，中风舌强，痰涎壅盛，小儿痰热惊风等症。现有的鲜竹沥制剂以口服液居多，有口感较差，不便贮藏，挥发性成分易散失等不足之处。糖浆剂具有明显的优点：蔗糖和芳香剂能掩盖某些药物的苦味、咸味及其他不适臭味，并且有甜味，口感好，容易服用，颇受儿童欢迎；高浓度蔗糖，粘稠度大，防止细菌增长(抑菌)；更重要的是糖浆剂中少部分糖转化为葡萄糖和果糖，有还原性，能防止糖浆中药物的氧化变质，有利于药物的稳定。另外，复方鲜竹沥止咳糖浆属于复方制剂，即止咳药溶解于糖浆中，形成黏稠浆液。一方面，糖浆覆盖在发炎的咽部黏膜表面，形成保护性“薄膜”，减轻炎症反应，阻断刺激，缓解咳嗽；另一方面，止咳药被人体吸收后直接发挥镇咳作用。

发明内容：

本发明的目的在于：提供一种止咳化痰的中药糖浆剂及制备方法和质量控制方法，本发明以豁痰力很强的鲜竹沥为原料药，或与其它中药配伍使用，制成的药剂对各类咳嗽的疗效卓著；且所提供的糖浆剂口感好，易为患者接受；分剂量服用，方便准确；成品质量稳定，可防止有效成分的散失。

本发明是这样构成的：它主要以鲜竹沥为原料药制成。该糖浆剂的制备方法为：取鲜竹沥1000ml，加入蔗糖，煮沸，趁热滤过，放冷，加入苯甲酸钠，搅匀，加水至1000ml，搅匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

本发明的药物组分也可以是鲜竹沥和鱼腥草，鲜竹沥和鱼腥草的用量比例为450ml∶180g。该糖浆剂的制备方法为：取鱼腥草加3倍量水，蒸馏，收集蒸馏液250ml；另取蔗糖450g，加水煮沸0.5～2小时，滤过，滤液与鲜竹沥及鱼腥草蒸馏液混匀，加入适量防腐剂和苯甲酸钠，调节pH值至4.0-5.5，加水调整总量至1000ml，搅匀，静置，滤过，灌封，灭菌，即得。该方法制备过程中，也可将鲜竹沥与蔗糖一起煮沸20分钟，趁热滤过，放冷，再加入鱼腥草蒸馏液、适量防腐剂和苯甲酸钠。

本发明的药物组分还可以是鲜竹沥400ml、鱼腥草150g、生半夏25g、生姜25g、枇杷叶150g、桔梗75g、薄荷油1ml。该糖浆剂的制备方法为：取生姜压榨取汁，加乙醇使含醇量达65％，搅拌后，放置24小时，取上清液滤过，回收乙醇后备用；鱼腥草蒸馏，收集蒸馏液150ml，另器收集；上述二种药渣与生半夏、枇杷叶、桔梗加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮1～2小时，第二次加6倍量水煎煮0.5～2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至约420ml，放冷，加乙醇使含醇量达65％，搅拌，放置24小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加入鲜竹沥及蔗糖450g，煮沸20分钟，趁热滤过，放冷，加入上述生姜汁、鱼腥草蒸馏液、薄荷油和苯甲酸钠3g，搅匀，加水至1000ml，搅匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

以鲜竹沥为原料制成的中药糖浆剂的质量控制方法为：所述质量控制方法包括以下项目的部分或全部：

性状：本制剂为淡黄色或红棕色的黏稠液体；具竹香气，味微甘；

鉴别：(1)取本制剂作为供试品溶液；另取酪氨酸对照品，加水制成每1ml含50μg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝4∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5％茚三酮试液，于105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取含量测定项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取愈创木酚、苯酚对照品适量，分别加乙醇制成每1ml含50μg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述三种溶液各2μl，照含量测定项下的方法，注入气相色谱仪，供试品应呈现与对照品保留时间一致的色谱峰；

检查：pH值  照中国药典2005年版一部附录VII G检测，应为4.4～5.5；

总固体  精密量取本制剂25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，在105℃干燥5小时，移至干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量；遗留残渣不得低于2.0％；

相对密度  照中国药典2005年版一部附录VII A检测，应不低于1.01；

其他  应符合中国药典2005年版一部附录I糖浆剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2005年版一部附录VI E气相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用0.32mm×30m、0.25μm的弹性石英毛细管柱；程序升温：初始柱温为80℃，然后以每分钟3℃的速率升至160℃，再以每分钟20℃的速率升至240℃，保持5分钟；理论板数按愈创木酚峰计算，应不低于30000；

校正因子的测定  取正十八烷适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含80μg的溶液，作为内标溶液；另取愈创木酚对照品适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含25μg的溶液，作为对照品溶液；精密量取对照品溶液5ml、内标溶液1ml，置10ml量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，吸取2μl注入气相色谱仪，连续注样3～5次，按平均峰面积计算校正因子；

测定法  精密量取本制剂100ml，按中国药典2005年版一部附录X D挥发油测定法测定，每次加醋酸乙酯1.5ml于挥发油测定器中，提取1小时，提取5次，分别放冷，分取醋酸乙酯层并转移至同一10ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，用醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，即得；

本制剂每1ml含愈创木酚C₇H₈O₂不得少于0.40μg。

以鲜竹沥和鱼腥草为原料制成的中药糖浆剂的质量控制方法为：所述质量控制方法包括以下项目的部分或全部：

性状：本制剂为淡棕黄色至棕黄色的黏稠液体；气香，味甜；

鉴别：(1)取本制剂1滴点于滤纸上，待干后喷以0.3％茚三酮乙醇溶液，在105℃烘约5分钟，即显蓝紫色斑点；

(2)取本制剂60ml，用醋酸乙酯30ml振摇提取，提取液用5％碳酸氢钠溶液10ml洗涤，醋酸乙酯液自然挥干，残渣用甲醇0.5ml溶解，作为供试品溶液；另取鱼腥草对照药材25g，加水进行蒸馏，收集蒸馏液50ml，加醋酸乙酯20ml，振摇提取，提取液自然挥干，残渣用甲醇1ml溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝9∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(3)取本制剂30ml，用稀盐酸调节pH值至2～3，加乙醚30ml，振摇提取，提取液用5％碳酸氢钠溶液10ml洗涤，取乙醚层，自然挥干，残渣用甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取愈创木酚对照品，加甲醇制成每1ml含20μl的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.5％三乙胺与0.5％磷酸的水溶液∶乙腈＝100∶18为流动相，检测波长为220nm；分别取对照品和供试品溶液适量，注入液相色谱仪；供试品应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰；

检查：相对密度  应不低于1.03；

pH值  应为4.0～5.5；

其他  应符合中国药典2005年版一部附录I糖浆剂项下有关的各项规定；

含量测定：总氨基酸

对照品溶液的制备  精密称取105℃干燥至恒重的谷氨酸对照品10mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含谷氨酸60μg的溶液，即得；

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分置10ml具塞试管中，加水至1.0ml，分别加入0.2mol/L、pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml，1％抗坏血酸溶液0.1ml及2％茚三酮乙二醇甲醚溶液3.0ml，摇匀，用一大小合适的洁净纱布覆盖于具塞试管顶部，用线系紧，置水浴中加热15分钟取出，置冷水中冷却至室温，加60％乙醇3.0ml，摇匀，以第一份为空白，照中国药典2005版一部附录VB分光光度法试验，在570nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂装量差异项下的内容物，精密量取1ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“加pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线谱中求得供试品中总氨基酸的含量，计算，即得；

本制剂每1ml含总氨基酸以谷氨酸(C₅H₉NO₄)计不得低于8.0mg。

以鲜竹沥、鱼腥草、生半夏、生姜、枇杷叶、桔梗和薄荷油为原料制成的中药糖浆剂的质量控制方法为：所述质量控制方法包括以下项目的部分或全部：

性状：本制剂为黄棕色的黏稠液体；气香，味甜；

鉴别：(1)取本制剂1滴于层析滤纸上，喷入2％茚三酮醇溶液，在90～100℃加热3分钟，显紫色；

(2)取本制剂1ml于试管中，加硝酸5滴，加热，溶液显淡黄色，再加氨试液并稍过量，溶液即变成橙黄色；

检查：相对密度  应为1.05以上；

pH值  应为4.8～6.0；

其他  应符合中国药典2005年版一部附录I糖浆剂项下有关的各项规定；

含量测定：总氨基酸

对照品溶液的制备  精密称取105℃干燥至恒重的谷氨酸对照品10mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含谷氨酸60μg的溶液，即得；

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分置10ml具塞试管中，加水至1.0ml，分别加入0.2mol/L、pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml，1％抗坏血酸溶液0.1ml及2％茚三酮乙二醇甲醚溶液3.0ml，摇匀，用一大小合适的洁净纱布覆盖于具塞试管顶部，用线系紧，置水浴中加热15分钟取出，置冷水中冷却至室温，加60％乙醇3.0ml，摇匀，以第一份为空白，照中国药典2005版一部附录VB分光光度法试验，在570nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂装量差异项下的内容物，精密量取1ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“加pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线谱中求得供试品中总氨基酸的含量，计算，即得；

本制剂每1ml含总氨基酸以谷氨酸(C₅H₉NO₄)计不得低于0.8mg。

本发明所述的鲜竹沥为禾本科植物淡竹或绿竹及同属数种植物的鲜杆经加热后自然沥出的液体，煮沸后，加适量防腐剂制得。本发明所用鲜竹沥购于成都市中药材有限公司。

竹沥味甘性寒，归心，肺，胃经，性极滑利，走窍逐痰能通达内外上下诸处。功能清热解火，润肺滑痰，养阴滋补，利窍明目，常用于肺热痰壅，痰迷火热，痰热惊痫，中风口噤，烦闷消渴，血虚自汗诸症。鲜竹沥制剂具有良好的清热化痰、清肺止咳的功能，用于各类痰热咳嗽，其疗效卓著。

为了加强药物的疗效，本发明还将鲜竹沥与鱼腥草组合。因为鱼腥草性辛，微寒，归肺经；清热，解毒，利湿，消肿；用于肺脓肿，痰热咳嗽，肾炎水肿，白带，尿路感染，痈疖等。可治疗肺痈，痰热壅滞，咳吐脓血，以及百日咳等病症，其清热解毒的作用颇佳。将其与鲜竹沥组合，可加强药物清热、化痰、止咳的功效。

为了获得更佳的疗效，本发明药物在上述药物的基础之上还可以加入生半夏、生姜、枇杷叶、桔梗和薄荷油。因为生半夏味辛，性温，归脾、胃、肺经；具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结之功能；用于痰多咳喘、痰饮眩悸、风痰眩晕、痰厥头痛、呕吐反胃、胸脘痞闷、梅核气等症；可治脾湿痰壅之痰多咳喘气逆。生姜性温、味辛，归肺、胃、脾经；发表散寒，去湿去水，止呕祛痰，健胃进食；常用于治疗风寒感冒、胃寒呕吐、肺寒咳嗽、痰饮、喘咳、胀满、泄泻等证。枇杷叶苦，凉，归肺、胃经；清肺化痰，降气和胃；用于肺热咳嗽、咯痰不爽及慢性支管炎久咳不止等症。桔梗苦、辛，平，归肺经；宣肺，利咽，祛痰，排脓；用于咳嗽痰多，胸闷不畅，咽痛，音哑，肺痈吐脓，疮疡脓成不溃。可治痰咳喘急，咳痰不爽等症。薄荷油辛，凉，归肺、肝经；宣散风热，清头目，利咽，透疹；用于风热感冒，风温初起，头痛目赤，咽喉肿痛，风疹，麻疹，胸胁胀闷。以上五药，生半夏、枇杷叶、桔梗重在清肺化痰；生姜、薄荷油重在散风解热，共同佐助君臣之药，进一步加强了清热、化痰、止咳的功效。

与现有技术相比，本发明制剂清热、化痰、止咳的功效卓著，用于痰热咳嗽、肺热痰喘等症；所提供的糖浆剂口感好，利于服用，易为患者接受，特别是儿童易于接受；采用分剂量服用，较液剂更方便、准确；成品本身具有较高的渗透压，加入适宜的防腐剂及蔗糖，经灭菌处理，密封包装，质量稳定；采用高速搅拌分散的糖浆剂较液体对挥发性成分的结合更紧密，有效成分难以散失，疗效更为稳定可靠。

本申请人进行了一系列的实验研究，以保证本发明制剂的制备工艺和质量控制方法科学、合理、可行，从而使该制剂具有良好的疗效。

一、制备工艺研究

(一)剂型选择

本制剂由《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第4册125页收载的复方鲜竹沥液改剂而来。经市场调研：原剂型有口感较差，不便贮藏，挥发性成分易散失等不足之处，改为糖浆剂具有明显的优点：口感好，利于服用，易为患者接受，特别是儿童易于接受；采用分剂量服用，较液剂更方便、准确；成品本身具有较高的渗透压，加入适宜的防腐剂及蔗糖，经灭菌处理，密封包装，质量稳定；糖浆剂较液体粘度增大，有效成分难以散失，口服时与咽部等部位结合较为紧密，有利于疗效的发挥与保持，故立项改为糖浆剂。

(二)工艺路线的拟定

本发明处方由鲜竹沥、鱼腥草、生半夏、生姜、枇杷叶、桔梗、薄荷油七味药材组成，主要成分为挥发油、皂苷、氨基酸、有机酸等有效成份。从处方分析及参考复方鲜竹沥液质量标准，原提取工艺基本合理可行。故提取工艺参照原复方鲜竹沥液工艺，同时增加部分工艺参数的筛选。

成型工艺根据有关文献资料介绍，结合文献资料收载的其它中药糖浆剂的工艺技术，拟定了药材提取清膏与鲜竹沥、蔗糖混匀，加热，滤过；再将生姜鲜汁、鱼腥草蒸馏液、薄荷油与其混匀，滤过，灭菌，装瓶，即得。

(三)药材及辅料前处理

(1)药材净选加工：药材主要采用拣选的方法去除杂屑，备用。

(2)吸水量考察方法：称取药材250g(生半夏25g、桔梗75g、枇杷叶150g)，鱼腥草150g按不同粉碎度分组各进行三次试验：加10倍量水密闭，室温浸泡，20分钟后每10分钟取出用工具横断观察浸透情况，滤出未吸收水液，药渣称重，计算。试验结果见表1。

表1-a生半夏、桔梗、枇杷叶药材吸水量考察结果表

试验号	重量(g)	粉碎度(cm)	加水量(倍)	浸透时间(min)	吸水量(倍)
						1	250	0.5～1	10	50	2.3
2	250	1～2	10	70	2.2
						3	250	2～4	10	90	2.3

表1-b鱼腥草吸水量考察结果表

试验号	重量(g)	粉碎度(cm)	加水量(倍)	浸透时间(min)	吸水量(倍)
						a	150	2～4	10	20	2.9
b	150	4～8	10	30	2.8
						C	150	未切制	10	50	2.8

由上表可知，生半夏等药材的粉碎度为0.5～1cm时，其浸透时间与吸水量能较好地保证提取效果，且在提取过程中能保证提取液的顺利排放，避免出液口堵塞，因此粉碎药材为0.5～1cm左右为宜，鱼腥草切制2～4cm左右为宜。因上述中药材具有一定粘性，为保证粉碎的正常进行及大生产设备的顺应性，生半夏、桔梗、枇杷叶同时进行串打切制，鱼腥草单独切制，操作顺利，不粘刀具，符合现有生产设备实际条件，试验结果见表2。

表2粉碎工艺考察结果

药材	投料量(kg)	收得量(kg)	收得率(％)
				生半夏、桔梗、枇杷叶按处方比例共称取5公斤	555	4.784.814.82	95.696.296.4
鱼腥草5公斤	555	4.844.894.91	96.897.898.2

故规定串打粉碎收得率不得低于95.0％，鱼腥草粉碎收得率不得低于96.0％。

(四)提取工艺研究

1.蒸馏液提取条件筛选

(1)因素选择  蒸馏液提取效果受到加水量、提取时间等因素的影响。因原工艺已对蒸馏总量进行了选定，因此选取加水量作为因素，重点考察因素的不同水平对蒸馏液提取效果的影响。

(2)指标确定  选择出蒸馏液量为评价指标，并考虑成本及生产效率等因素进行综合选定；测定方法如下：

称取鱼腥草1000g，切制后加4、5、6、8倍量水，浸泡30分钟，以加热保证微沸蒸馏液产生时开始计时，收集蒸馏液至1000ml。

(3)试验：试验安排及结果见表3。

表3蒸馏液考察结果表

由上表可见，微沸6小时左右蒸馏液即可达到收集要求，从节约能源成本及提高生产效率的角度出发，从保证蒸馏液的蒸馏速度并考虑剩余药液尽量减少的标准出发，选择加5倍量水提取6小时。并根据此工艺条件进行验证试验。

(4)验证实验  按以上蒸馏液提取工艺条件进行验证实验，实验结果见表4。

表4蒸馏液蒸馏提取验证实验结果

方案	试验号	收液量(ml)	剩余药液量(ml)
				加5倍量水，收集蒸馏液	1	1000	979
2	1000	973
			3		1000	984

备注：考察量1000g

由重复性验证实验的结果可见蒸馏液优化组合条件提取结果收液量波动不大，剩余药液量也较少并波动不大，较稳定，又利于下一步对药渣的提取操作，可见该工艺条件是合理、可行及稳定的。

2.生姜榨汁条件筛选

结合生产设备特点，对生姜切制成1～2cm左右的小块，压榨取汁，药液用装备PE管(孔径5um)的不锈钢桶式微孔过滤器滤过后另器收集密封备用，药渣收集备用。试验结果见表5。

表5压榨工艺考察结果

药材	投料量〔kg〕	药渣收得量〔kg〕	收得率〔％〕	药汁收得量〔ml〕	收得率〔％〕
						生姜	5	3.321	66.4	1685	33.7
5	3.362	67.2	1635	32.7
					5		3.335	66.7	1664	33.2

故规定生姜压榨后药渣收得量不得低于65.0％，药汁收得率不得低于30.0％。

3.药材煎煮提取条件筛选

(1)因素选择  根据长期实践得知，中药煎煮提取效果受到加水量、提取时间、提取次数等因素的影响。因复方鲜竹沥液标准对生半夏、桔梗、枇杷叶、生姜药渣、鱼腥草药渣的提取时间、次数已选定，故选取加水量作为因素，重点考察因素的不同水平对煎煮提取效果的影响。结合生产成本、能源等方面进行综合考虑，选择因素水平。

(2)指标确定  因相关药材的测定指标经查阅相关文献无较为成熟及合理的指标成分，故以浸膏收得率为评价指标，其测定方法及结果如下：

①浸膏收得率：浸膏是固体制剂发挥疗效的物质基础，其收率高低直接影响制剂工艺，故选择提取指标合理、有效的控制手段。煎煮测定方法：称取原处方量：鱼腥草150g、生半夏25g、生姜25g、枇杷叶150g、桔梗75g投料按规定提取条件进行操作：生姜压榨汁及鱼腥草蒸馏后的药渣与生半夏、枇杷叶、桔梗加水煎煮二次，第一次1.5小时，第二次1小时，合并提取液，滤过，调整定容至1000ml，再从中取50ml，倾入已干燥称重的蒸发皿内，水浴浓缩至干，移入105℃烘箱干燥3小时，取出，置干燥器中冷却30分钟后，取出称重，计算。

(3)验证实验  按以上提取工艺条件进行验证实验，实验结果见表6：

表6煎煮加水量考察结果表

试验号	加水量(倍)		浸膏收得率(％)
				第一次	第二次
	1	6				6	18.03
2			8	6	22.84
	3	8				8	23.12
4			10	8	23.28

备注：考察量425g

由上表可知，加水量为8倍、6倍时其浸膏收得率与加水量为10、8倍时的浸膏收得率差别不大，从节约能源和成本来考虑，加水量的最佳工艺为加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮1.5小时，第二次加6倍量水煎煮1小时。并根据此条件进行验证实验，实验结果见表7：

表7煎煮加水量验证实验结果

方案	试验号	浸膏收得率(％)
			第一次加8倍量水，煎煮1.5小时；第二次加6倍量水，煎煮1小时，合并煎液，滤过	1	23.04
2	22.75
		3		22.92

备注：考察量425g

由验证实验结果可见原标准煎煮组合条件下提取结果浸膏收率波动不大，可见该提取工艺条件是合理、可行及稳定的。

综上所述水煎提取条件为：以上七味，生姜压榨取汁，加乙醇使含醇量达65％，搅拌后，放置24小时，取上清液滤过，回收乙醇后备用；鱼腥草蒸馏，收集蒸馏液150ml，另器收集。上述二种药渣与生半夏、枇杷叶、桔梗加水煎煮二次，第一次1.5小时，第二次1小时，合并煎液，滤过。

(五)分离纯化工艺研究

结合生产设备实际状况，水煎液采用板框压滤机用200目滤布滤过，滤液贮存于待滤液暂贮罐中并通过管道泵加压经过孔径为5um的PE管组合过滤器过滤，最终暂存于待浓缩罐中备用。分离考察实验结果见表8。

表8提取液过滤方式比较

过滤方式	板框(纸浆)	微孔(PE管，孔径10um)	微孔(PE管，孔径5um)
				外观性状	+	-	-
离心实验(10000r/min，30min)	离心管底部有明显沉淀附着	离心管底部有极少量沉淀附着	离心管底部未见沉淀出现

注：++：浑浊  +：微浑浊  -：澄清

实验表明：使用孔径为10um及5um的PE管过滤作为提取液的最终过滤方式，其过滤效果均符合生产要求；为了最好地保证过滤效果，考虑选择孔径为5um的PE管作为提取液的过滤介质为佳。其主要优点如下：1：孔隙率高，滤速快；2：滤过时介质不脱落，对药液无污染；3：当滤芯被杂质堵塞时，用干净压缩空气2-3kg压力进行反吹即可恢复正常过滤效果；4：过滤全过程可在密封的管道及设备中进行避免药液的污染，符合GMP相关要求；5：能耗低，无污染。

(六)浓缩工艺研究

浓缩工艺研究：按10倍处方量称取三组进行投料试验，生姜压榨取汁，加乙醇使含醇量达65％，搅拌后，放置24小时，取上清液滤过，回收乙醇后备用；鱼腥草蒸馏，收集蒸馏液1500ml，另器收集。上述二种药渣与生半夏、枇杷叶、桔梗加水煎煮二次，第一次1.5小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，采用DJZ3-1500型三效蒸发浓缩罐浓缩至约4200ml，测定其相对密度为1.15～1.20(50℃)的清膏。浓缩条件为：温度为一效84℃、二效80℃、三效70℃，真空度为一效-0.025Mpa、二效-0.045Mpa、三效-0.065Mpa。浓缩结果见表9。

表9浓缩实验结果

方案	试验号	清膏体积〔ml〕	比重〔50℃〕	清膏量〔g〕
					按标准处方称取药材，按制法项下内容进行提取、浓缩	1	4200	1.17	4947.3
2	4200	1.16	4893.6
				3		4200	1.18	4973.9

备注：考察量4250g

由实验结果可见清膏浓缩工艺中其体积、比重、重量波动不大，稳定性较好，可见该浓缩工艺条件是合理、可行及稳定的。

(七)醇沉工艺研究

由于含醇浓度及醇沉时间均已选定，结合生产设备性能，根据“慢加醇，快搅拌”的原则对醇沉相关参数进行考察，醇沉用乙醇浓度为95％，考察结果如下表10。

(1)指标确定  选择醇沉效果及离心效果两项为评价指标，其实验方法如下：

①醇沉效果：对醇沉液外观进行观察是否符合上清液清澈无浑浊，醇沉物沉淀完全的要求。实验方法：每组称取5倍处方量的生半夏、枇杷叶、桔梗及相应药渣加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮1.5小时，第二次加6倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至约2100ml，放冷，加乙醇使含醇量达65％，搅拌，放置24小时，取上清液滤过，根据大生产设备性能参数模拟调整每组电动搅拌转速至规定值及乙醇加入速率，观察上清液及沉淀状况。

②离心效果：对每组醇沉上清液取50ml按6000r/min进行高速离心30min，观察离心后沉淀物的多少判断醇沉效果，醇沉结果见表10。

表10醇沉工艺考察结果

转速(r/min)	加醇量(ml/min)	醇沉效果	离心效果
				10	10	上清液有少许杂质	沉淀较多
20	10	上清液透明较差	沉淀较多
				30	10	上清液透明、清澈	沉淀少

由上表可知：搅拌转速在30r/min时醇沉效果较好，稳定可靠，适合生产设备技术特性，可保证大生产时设备与工艺的顺应性。

(八)乙醇回收工艺研究

为了便于生产操作控制和避免有效成分损失，采用三效浓缩器减压回收乙醇并浓缩，醇回收的条件为：温度为60℃，真空度为0.08～0.1Mpa。

清膏收得体积实验测定方法：取浓缩实验中的清膏三组，每组4200ml，按醇沉条件进行醇沉后取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度1.25～1.30(60～70℃)的稠膏，放出测定体积。实验结果见表11。

表11减压回收乙醇实验结果

试验号	相对密度(60℃)	清膏体积(ml)
			1	1.25	1843
2	1.25	1857
			3	1.25	1852

备注：考察量4250g

由乙醇回收验证实验的结果可见清膏浓缩工艺中其体积、比重波动不大，稳定性较好，可见该工艺条件是合理、可行及稳定的。

(九)初混工艺研究

按制法要求，加入减压回收乙醇实验中的清膏、鲜竹沥及蔗糖置夹层罐中保持蒸汽压力为0.1Mpa，通过视镜观察液面沸腾状态，温度保持在95℃以上，沸腾20分钟，开启出液阀，通过板框压滤机过200目筛布，保存至具有刻度的配液罐中进行测量。

表12初混工艺实验结果

试验号	清膏体积(ml)	相对密度(60℃)	鲜竹沥(ml)	蔗糖量(g)	初混体积(ml)	过滤后体积(ml)	收得率(％)
								1	1843	1.25	4000	4500	7352	7012	95.38
2	1857	1.25	4000	4500	7365	7115	96.61

3

1852

1.25

4000

4500

7359

7109

96.60

备注：考察量4250g

由初混工艺实验结果可见清膏、鲜竹沥及蔗糖按处方比例混合，煮沸加热后经观察，液面会产生较多泡沫及少量絮状物质，经板框过滤后其体积波动不大，收率在95％以上，稳定性较好，可见该工艺条件是合理、可行及稳定的，符合大生产要求。

(十)成型工艺研究

1.用法用量及规格

①用法：同“复方鲜竹沥液”不改变给药途径，口服。

②用量及规格：原处方中药材总量为826g，共制成1000ml，则每1ml成品含生药材为826g÷1000ml＝0.826g/ml，用法用量为：口服，一次20ml，一日2～3次。故其每次服用药材量为0.826g/ml×20ml＝16.52g。改为糖浆剂后，保持处方量不变，清膏在相对密度为1.25(60℃)时，体积约为180ml，加鲜竹沥400ml及450g蔗糖制成的糖浆体积约730ml，加入蒸馏液150ml及生姜汁，加水至1000ml较为适宜，规格定为100ml/瓶。按每次服用生药材量不变的原则，用法用量同“复方鲜竹沥液”：口服，一次20ml，一日2～3次。则每1ml成品含生药材为826g÷1000ml＝0.826g/ml，每次服用药材量为0.826g/ml×20ml＝16.52g。改剂前后符合每次服用生药材量不变。

2.附加剂的筛选

为了提高复方鲜竹沥糖浆的稳定性，我们使用了附加剂并按剂改确定的处方量进行小试。首先，根据糖浆剂的稳定性，其次根据糖浆剂的质量要求进行筛选，还考虑到工厂的生产条件，选择成本低廉，易得的附加剂。并对附加剂的种类，用量，用法等进行了筛选，现分述于下。

(1)防腐剂的筛选  为了保证制剂的质量，防止微生物的生长繁殖，可加入防腐剂。并对防腐剂的种类、用量进行了筛选试验。取9份药液，每份100ml，加入不同浓度的山梨酸、羟苯乙酯、苯甲酸钠，按照《中国药典》2005年版二部附录XI J微生物限度检查法进行微生物培养，观察其菌落数多少，结果见表13。

表13防腐剂的筛选比较结果

防腐剂种类	山梨酸			羟苯乙酯			苯甲酸钠
										防腐剂用量(％)	0.1	0.2	0.3	0.1	0.2	0.3	0.1	0.2	0.3
细菌数	30	25	15	35	30	＜10	50	25	＜10
										霉菌数	＜10	＜10	＜10	＜10	＜10	＜10	＜10	＜10	＜10

大肠杆菌	未检出	未检出	未检出	未检出	未检出	未检出	未检出	未检出	未检出
										活满	未检出	未检出	未检出	未检出	未检出	未检出	未检出	未检出	未检出

结果表明加入0.3％的山梨酸、羟苯乙酯、苯甲酸钠均可达到防腐效果，从成本及质量安全的角度综合考虑选用0.3％的苯甲酸钠，并对加入防腐剂前后的氨基酸含量和外观性状进行了比较，结果见表14。

表14加入防腐剂前后含量变化比较

结果表明加入防腐剂后药液的外观性状和氨基酸含量没有明显的变化，可见该防腐剂合理可行。

(2)关于pH值的调整  药液的pH值对制剂的稳定性有很大的影响。因此，保证适当的pH值，可增加制剂的稳定性。取药液9份，每份100ml，用NaOH调pH值后放置(5℃)一周后再观察，试验结果见表15。

表15复方鲜竹沥糖浆pH值比较结果

pH值	3.0	3.5	4.0	4.8	5.0	5.5	6.0	6.5	7.0
										外观性状	++	+	+	-	-	-	-	+	++

注：++：浑浊  +：微浑浊  -：澄清

结果表明样品的pH值在4.8～6.0时澄清度最好，并对调pH值前后的氨基酸含量进行了比较，结果见表16。

表16复方鲜竹沥糖浆调pH值前后含量比较

PH值		4.5	5.0	5.5	6.0	6.5
							氨基酸含量(mg/ml)	调PH值前	1.13	1.12	1.12	1.11	1.12
调PH值后	1.12	1.12	1.12	1.13	1.10
						外观性状		-	-	-	-	-

注：++：浑浊  +：微浑浊  -：澄清

由表15可见，当pH值为4.8～6.0时氨基酸含量没有明显变化，此时样品最稳定。

(3)总配混合工艺研究  根据设备及生产实际，根据配制指令单向体积约18L的清膏中加入鲜竹沥40L及蔗糖45kg，煮沸20分钟，滤过，放冷，再分别加入生姜汁、鱼腥草蒸馏液15L、薄荷油100ml及苯钾酸钠300g、搅拌使溶解，调pH值至4.8～6.0，密闭罐盖，启动STAY-7.5型液压升降式高剪切分散乳化机(驱动功率7.5kw，最大处理量800L，最大转速2900r/min)，设定搅拌转速为2500r/min，分别间隔10min从出液孔取样50ml按10000r/min转速用高速离心机离心30min，并观察实验现象，实验结果见表17：

表17高速搅拌运行时间实验结果

时间(min)	10	20	30	40	50
						澄清度	-	+	+++	+++	+++
离心实验10000r/min，30min	离心后有分层现象	离心后有分层现象	离心后无分层现象，色泽均匀	离心后无分层现象，色泽均匀	离心后无分层现象，色泽均匀

注：-示不符合规定；+示较好；++示好；+++示很好

由上表可知启动STAY-7.5型高剪切分散乳化机运行30min，即可使糖浆剂达到相关质量要求，因此综合生产成本及效率等相关因素确定高速搅拌工艺参数为：搅拌转速为2500r/min，搅拌时间30min。

通过STAY-7.5型液压升降式高剪切分散乳化机在搅拌转速为2500r/min的状态下运行30min，不仅可充分混合相关物料，而且可使薄荷油及蒸馏液在分散系统中均匀分散、乳化，产品质量稳定可靠，符合相关质量要求并极大地提高了生产效率及产品质量。

(4)微孔过滤种类及孔径的选择  药液稀释加入辅料进行搅拌初配后，为保证药液的澄明度与溶解效果，应对其再进行一次过滤后进行最终的过滤，结合工厂生产实际，选用五支PE管组合作为微孔过滤的介质，滤液体积为10000ml，压力0.5Mp，重点对相关工艺参数进行了考察，实验结果见表18：

表18微孔过滤工艺参数考察

过滤方式		PE管微孔〔孔径10um〕	PE管微孔〔孔径20um〕	PE管微孔〔孔径50um〕
					氨基酸含量〔mg/ml〕	过滤前	1.11	1.12	1.11
过滤后	1.10	1.10	1.11
				过滤状况		易堵塞	正常	正常
过滤速度〔min〕		60	20						12

综合考虑糖浆剂的稳定性、澄清等质量要求与过滤速度多个因素，选用孔径为20um的PE管作为微孔过滤的介质为佳。

(5)灭菌工艺参数的筛选  按上述制备工艺制备糖浆剂一批，先灌封后在蒸汽灭菌柜中进行湿热灭菌，温度105℃，蒸气压力0.3～0.5Pa，以不同的灭菌时间为考察因素，以微生物限度为指标，结果见表19。

表19灭菌工艺研究结果

灭菌时间(min)	5	10	15	20
					微生物限度	符合规定	符合规定	符合规定	符合规定

由上表可见，灭菌5分钟微生物已符合规定。并以此条件进行验证实验。按以上灭菌条件(105℃，0.3～0.5Pa，30min)进行湿热灭菌，再观察其外观性状，测定相对密度、pH值和氨基酸含量，结果见表20。

表20灭菌工艺研究验证实验

项目	外观性状	相对密度	PH值	氨基酸含量(mg/ml)
					灭菌前	符合规定	1.24	5.4	1.10
灭菌后	符合规定	1.26	5.3	1.08

结果表明，样品经105℃湿热灭菌5分钟后，外观性状、相对密度、pH值和氨基酸含量都没有明显变化，该灭菌工艺稳定可行。

(十一)与原剂型工艺比较

复方鲜竹沥糖浆与复方鲜竹沥液工艺比较结果见表21：

表21复方鲜竹沥糖浆与复方鲜竹沥液工艺比较

项目	液剂(原剂型)	糖浆剂(新剂型)
			提取工艺	以上七味，生姜压榨取汁，加乙醇使含醇量达65％，搅拌后，放置24小时，取上清液滤过，回收乙醇后备用；鱼腥草蒸馏，收集蒸馏液150ml，另器收集。上述二种药渣与生半夏、枇杷叶、桔梗加水煎煮二次，第一次1.5小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至约420ml，放冷，加乙醇使含醇量达65％，搅拌，放置24小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇至无醇味，	以上七味，生姜压榨取汁，加乙醇使含醇量达65％，搅拌后，放置24小时，取上清液滤过，回收乙醇后备用；鱼腥草蒸馏，收集蒸馏液150ml，另器收集。上述二种药渣与生半夏、枇杷叶、桔梗加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮1.5小时，第二次加6倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至约420ml，放冷，加乙醇使含醇量达65％，搅拌，放置24小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇至无醇味，

成型工艺

加入鲜竹沥及蔗糖150g，煮沸20分钟，趁热滤过，放冷，加入上述生姜汁、鱼腥草蒸馏液、薄茶油和苯甲酸钠3g，搅匀，加水至1000ml，即得。

加入鲜竹沥及蔗糖，煮沸20分钟，趁热滤过，放冷，加入上述生姜汁、鱼腥草蒸馏液、薄荷油和苯甲酸钠3g，搅匀，加水至1000ml，即得。

在工艺条件研究中，对生半夏、枇杷叶、桔梗及相应药渣提取条件筛选，重点考察加水量不同水平对提取效果的影响，分离纯化工艺比原标准有所提高，为了保证糖浆剂的澄清度，增加了微孔滤过，浓缩工艺研究，结合工厂现有的生产设备，采取三效浓缩罐浓缩；成型工艺条件筛选，制成糖浆剂，重点对糖浆剂附加剂的筛选、糖浆剂制备方法进行了考察；原剂型存在口感较差，不便贮藏，挥发性成分易散失等不足之处，改为糖浆剂具有明显的优点：口感好，利于服用，易为患者接受；采用分剂量服用，较液剂更方便、准确；成品本身具有较高的渗透压，加入适宜的防腐剂及蔗糖，经灭菌处理，密封包装，质量稳定；采用高速搅拌分散的糖浆剂较液体对挥发性成分的结合更紧密，有效成分难以散失，疗效更为稳定可靠。

二、中试

(一)小试试制及一般质量检查

按上述工艺投料进行三批小试生产试制，其数据及一般质量检查结果见表22和表23。

表22三批小试试制数据

批号	050601	050602	050603
				投料净药材(g)	425	425	425
清膏相对密度(50℃)	1.25	1.25	1.25
				清膏体积(ml)	185	186	189
鲜竹沥(ml)	400	400	400
				蒸馏液(ml)	150	150	150
薄荷油(ml)	1	1	1
				蔗糖(g)	450	450	450
苯钾酸钠(g)	3	3	3
				理论产量(瓶)	10	10	10
实际产量(瓶)	9	9	9
				成品率(％)	90	90	90

表23三批小试样品一般质量检查结果

批号	氨基酸含量(以谷氨酸计)(mg/ml)
		050601	1.15
050602	1.11
		050603	1.07

(二)中试试制及一般质量检查

按上述复方鲜竹沥糖浆制备工艺投料进行十批中试试制，其数据及一般质量检查结果见表24和表25。

表24十批中试试制数据

批号	050701	050702	050703	051101	051102	051103	051201	060101	060102	060103
											投料净药材(kg)	4.25	4.25	4.25	4.25	4.25	4.25	4.25	4.25	4.25	4.25
清膏相对密度(50℃)	1.25	1.25	1.25	1.25	1.25	1.25	1.25	1.25	1.25	1.25
											清膏体积(ml)	1847	1853	1861	1839	1846	1863	1852	1858	1837	1849
鲜竹沥(ml)	4000	4000	4000	4000	4000	4000	4000	4000	4000	4000
											蒸馏液(ml)	1500	1500	1500	1500	1500	1500	1500	1500	1500	1500
薄荷油(ml)	10	10	10	10	10	10	10	10	10	10
											蔗糖(g)	4500	4500	4500	4500	4500	4500	4500	4500	4500	4500
苯钾酸钠(g)	30	30	30	30	30	30	30	30	30	30
											理论产量(瓶)	100	100	100	100	100	100	100	100	100	100
实际产量(瓶)	95	96	95	96	95	96	95	95	96	96
											成品率(％)	95	96	95	96	95	96	95	95	96	96

通过中试试制结果的分析，拟订的工艺路线具有可操作性，基本稳定。

表25十批中试样品一般质量检查结果

批号	装量	pH值	相对密度	微生物限度检查	氨基酸含量测定(mg/支)
						050701	符合规定	5.26	1.22	符合规定	1.03
050702	符合规定	5.52	1.26	符合规定	1.04

050703	符合规定	5.40	1.23	符合规定	1.04
						051101	符合规定	5.33	1.24	符合规定	0.99
051102	符合规定	5.23	1.25	符合规定	0.96
						051103	符合规定	5.38	1.20	符合规定	0.94
051201	符合规定	5.20	1.19	符合规定	0.94
						060101	符合规定	5.54	1.26	符合规定	1.04
060102	符合规定	5.47	1.21	符合规定	1.04
						060103	符合规定	5.58	1.23	符合规定	1.06

由上表可知，十批中试试制的样品，按照糖浆剂通则检查均符合要求，所拟定工艺是合理、可行的。

三、质量控制方法研究

(一)气相色谱法测定鲜竹沥中愈创木酚的含量

1仪器和试剂

HP6890气相色谱仪；

愈创木酚由中国药品生物制品检定所提供(供含量测定用)；鲜竹沥(市售)；试剂均为分析纯。

2方法和结果

2.1色谱条件

弹性石英毛细管柱(30m×0.32mm，0.25μm)HP-INNOWAX，氢火焰检测器。程序升温：初试80℃，以每分钟3℃升至160℃，再以每分钟20℃升至240℃，保持5mim，载气流速：每分钟2ml。分流进样，分流比：1∶1。

2.2校正因子的测定

取正十八烷适量，精密称定，加醋酸乙酯溶解并稀释成每1ml含80μg的溶液，作为内标溶液。另取愈创木酚对照品适量，精密称定，加醋酸乙酯溶解并稀释成每1ml含25μg的溶液，作为对照品溶液。精密量取对照品溶液5ml，内标溶液1ml，置10ml量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，吸取2μl注入气相色谱仪，计算校正因子。

2.3测定法

由于愈创木酚具有一定的挥发性，易溶于乙醇、乙醚、挥发油，水中也有一定的溶解度，曾比较了挥发油提取法及乙醚萃取两种提取方法，因采用乙醚提取法，提取不完全，且杂质很多，故采用挥发油提取法。但因愈创木酚具有一定的水溶性，如采用挥发油一次提取方法，不能提取完全，经试验比较采用提取5次，每次1h，便基本将所测定成分提取完全；并对不同溶剂进行了比较，结果以醋酸乙酯为提取溶剂，提取效率最高。

精密量取本制剂100ml，按挥发油测定法测定，每次加醋酸乙酯1.5ml于挥发油测定器中，提取5次，每次1小时，分别放冷，分取醋酸乙酯层并转移至同一10ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，用醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；取2μL注入气相色谱仪，测定，按内标法计算，即得。

2.4线性关系考察

精密量取愈创木酚对照品溶液(0.01992mg·ml^-1)0，1，3，5，8ml及愈创木酚对照品溶液(0.05976mg·ml^-1)5，8ml至10ml量瓶中，分别精密加入正十八烷内标溶液(0.08472mg·ml^-1)100μL，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀。分别取2μl注入气相色谱仪，以对照品与内标量的比值为横坐标，对照品与内标峰面积的比值为纵坐标，得回归方程：Y＝0.68831X-0.00902，r＝0.99995，显示进样量在0～47.808ng范围内有良好的线性关系。

2.5精密度和重复性试验

取供试品溶液重复进样，测定内标与对照品峰面积，计算两者峰面积的比值，结果RSD为0.34％(n＝6)，另取样品6份，分别测定含量，其相对平均偏差(RSD)＝0.57％(n＝6)，结果见表26。

表26重复性试验结果

序号	1	2	3	4	5	6	平均值	RSD(％)
									含量(μg.ml-1)	1.1481	1.1512	1.1405	1.1581	1.1548	1.1570	1.1516	0.57

2.6稳定性试验

取供试品与对照品溶液，间隔一定时间进样一针，测定内标与愈创木酚峰面积，计算两者峰面积的比值，显示对照品溶液与供试品溶液在40h内稳定。

2.7回收率试验

采用加样回收试验，测得样品中愈创木酚的平均回收率为99.64％，RSD＝2.1％(n＝6)，结果见表27。

表27加样回收试验结果

序号	样品量(μg)	加入量(μg)	测得量(μg)	回收率(％)	平均值(％)	RSD(％)
							1	57.5798	46.37	102.75	97.41	99.64	2.1
2	57.5798	46.37	103.48	98.99
					3	57.5798	59.76	118.66	102.21
4	57.5798	59.76	118.95	102.69
					5	57.5798	69.56	126.40	98.94
6	57.5798	69.56	125.46	97.59

2.8样品测定结果

对8批样品进行含量测定，结果见表28。

表28样品含量测定结果

批号	含量(μg.ml-1)
		1	0.962
2	0.626
		3	0.454
4	0.513
		5	0.635
6	0.701
		7	0.687
8	0.548

3结论

经上述方法学验证，该含量测定方法重现性好，灵敏度高，稳定性好，回收率高，可作为鲜竹沥的质量控制方法。

(二)分光光度法测定复方鲜竹沥糖浆中总氨基酸的含量

1仪器与试药

UV-9100紫外可见分光光度计；TG328A电子天平；DZKW-4型水浴锅；DL型超声波清洗器。

谷氨酸对照品由中国药品生物制品检定所提供；其余试剂均为分析纯。

2对照品溶液的制备

精密称取105℃干燥至恒重的谷氨酸对照品10mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含谷氨酸60μg)。

3供试品溶液的制备

供试品溶液的制备方法为：精密量取本制剂1ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。

4测定波长的选择

将谷氨酸对照品和复方鲜竹沥糖浆样品，在450～800nm间扫描，谷氨酸在570nm处有最大吸收，复方鲜竹沥糖浆样品在570nm有最大吸收，故确定以570nm为测定波长。

5缺鲜竹沥、半夏阴性溶液的制备

取缺鲜竹沥、半夏阴性样品1ml，按正文供试品溶液的制备方法制备缺鲜竹沥、半夏阴性对照溶液。

6线性关系的考察

精密量取对照品溶液(0.06624mg/ml)0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分别置10ml具塞试管中，加水至1.0ml，加0.2mol/L枸橼酸缓冲液(pH5.0)1.0ml、1％抗坏血酸溶液0.1ml、2％茚三酮乙二醇甲醚试液3.0ml，摇匀，置水浴中加热15分钟，取出，置冷水中至室温，加60％乙醇3.0ml，摇匀，以第一份为空白，照分光光度法(中国药典2005版一部附录VB)试验，在570nm波长处测定吸收度，以浓度(mg/ml)为横坐标(X)，吸光度为纵坐标(Y)绘制标准曲线。

表29标准曲线测定数据

对照品浓度(mg/ml)	0.001636	0.003271	0.004907	0.006542	0.008178
						吸光度(A)	0.309	0.568	0.828	1.073	1.355

回归方程为Y＝1.5878×10²X+4.75×10^-2；R＝0.9998，浓度在0.001636～0.008178mg/ml范围内，与吸光度呈良好线性关系(X为浓度，单位mg/ml，Y为吸光度)。

7精密度试验

取样品(批号050601)，按本发明总氨基酸含量测定项下供试品溶液的制备与测定法制备供试品溶液，重复测定六次，吸光度(A)的相对标准偏差为1.41％。结果见表30。

表30精密度考察结果

测定次数	1	2	3	4	5	6	RSD(％)
								吸光度(A)	0.452	0.448	0.465	0.457	0.451	0.449	1.41

8稳定性试验

(1)对照品溶液的稳定性考察  取谷氨酸对照品溶液，于制样后15、20、25、30、40、60分钟测定，结果见表31。

表31谷氨酸对照品溶液的稳定性考察

测定时间(min)	15	20	25	30	40	60	RSD(％)
								吸光度(A)	0.489	0.488	0.486	0.485	0.483	0.481	0.62

实验所得RSD为0.62％，说明谷氨酸对照品溶液在制样后60分钟内测定稳定。

(2)供试品溶液的稳定性考察  按本发明总氨基酸含量测定方法制备供试品溶液，于制样后不同时间进行测定，结果见表32。

表32供试品溶液的稳定性考察

测定时间(min)	15	20	25	30	40	60	RSD(％)
								吸光度(A)	0.451	0.449	0.448	0.445	0.442	0.439	1.02

实验所得RSD为1.02％，说明供试品溶液在制样后60分钟内测定稳定。

9重复性试验

按本发明总氨基酸的含量测定方法，取同一批样品(批号050601)，称取六份，进行含量测定，其中吸光度已扣除样品空白，结果见表33。

表33重复性试验

序号	吸光度(A)	总氨基酸(mg/ml)	平均值(mg/ml)	RSD(％)
					1	0.444	1.011	1.04	1.97
2	0.452	1.032
			3	0.460	1.052
4	0.447	1.019
			5	0.461	1.055
6	0.463	1.060

10回收率试验

精密量取已知含量的供试品(050601，含量1.04mg/ml)0.5ml，置50ml量瓶中，精密加入对照品(0.06624mg/ml)8ml，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置10ml具塞试管中，按正文总氨基酸含量测定方法进行含量测定，计算回收率，其中吸光度已扣除样品空白吸收，结果表明回收率的重现性好。结果见表34。

表34回收率测定结果

NO	吸光度	样品取样量(ml)	样品中总氨基酸含量(mg)	对照品加入量(mg)	实测总氨基酸含量(mg)	回收率(％)	平均回收率(％)	RSD(％)
									1	0.456	0.5	0.52	0.5299	1.0420	98.51	97.7	1.76
2	0.458	0.5	0.52	0.5299	1.0471	99.47
							3	0.455	0.5	0.52	0.5299	1.0394	98.02
4	0.449	0.5	0.52	0.5299	1.0241	95.13
							5	0.457	0.5	0.52	0.5299	1.0445	98.98
6	0.451	0.5	0.52	0.5299	1.0292	96.09

11样品测定

按照本发明总氨基酸含量测定项下的测定方法对十批产品的总氨基酸进行了测定，每批平行测定2次，结果见表35。

表35十批复方鲜竹沥糖浆总氨基酸含量测定结果表

样品批号	测定结果(mg/ml)		平均(mg/ml)
				1	2
	050701	1.02				1.03	1.03
050702			1.03	1.04	1.04
	050703	1.03				1.04	1.04
051101			1.00	0.98	0.99
	051102	0.96				0.95	0.96
051103			0.94	0.94	0.94
	051201	0.93				0.94	0.94
060101			1.04	1.04	1.04
	060102	1.04				1.03	1.04
060103			1.05	1.06	1.06

12含量限度的确定

由表35可见，十批中试产品每1ml含总氨基酸为0.94～1.06mg，平均为1.01mg/ml，考虑到本制剂含量随原料含量有一定波动及装量的影响，并考虑大生产实际，暂定本制剂每1ml含总氨基酸以谷氨酸(C₅H₉NO₄)计，不得少于0.80mg。

以上方法学研究表明，该测定方法简便易行，精密度高，重现性好，回收率高，稳定性好，可有效控制鲜竹沥糖浆剂的质量。

具体实施方式：

本发明的实施例1：鲜竹沥1000ml

取鲜竹沥，加入蔗糖，煮沸，趁热滤过，放冷，加入苯甲酸钠，搅匀，加水至1000ml，搅匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。本产品口服，一次15～30ml，一日2次。

本发明的实施例2：鲜竹沥450ml、鱼腥草180g

取鱼腥草加3倍量水，蒸馏，收集蒸馏液250ml；另取蔗糖450g，加水煮沸1小时，滤过，滤液与鲜竹沥及鱼腥草蒸馏液混匀，加入适量防腐剂和苯甲酸钠，调节pH值至4.0-5.5，加水调整总量至1000ml，搅匀，静置，滤过，灌封，灭菌，即得。本产品口服，一次30ml，一日2～3次。

本发明的实施例3：鲜竹沥450ml、鱼腥草180g

取鱼腥草加3倍量水蒸馏，收集蒸馏液250ml；另取鲜竹沥及蔗糖适量，煮沸20分钟，趁热滤过，放冷，加入上述鱼腥草蒸馏液、适量防腐剂和苯甲酸钠，搅匀，加水至1000ml，搅匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

本发明的实施例4：鲜竹沥400ml、鱼腥草150g、生半夏25g、生姜25g、枇杷叶150g、桔梗75g、薄荷油1ml

取生姜压榨取汁，加乙醇使含醇量达65％，搅拌后，放置24小时，取上清液滤过，回收乙醇后备用；鱼腥草蒸馏，收集蒸馏液150ml，另器收集。上述二种药渣与生半夏、枇杷叶、桔梗加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮1.5小时，第二次加6倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至约420ml，放冷，加乙醇使含醇量达65％，搅拌，放置24小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加入鲜竹沥及蔗糖450g，煮沸20分钟，趁热滤过，放冷，加入上述生姜汁、鱼腥草蒸馏液、薄荷油和苯甲酸钠3g，搅匀，加水至1000ml，搅匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。本产品口服，一次20ml，一日2～3次。

本发明的实施例5：以鲜竹沥为原料制成的糖浆剂的质量控制方法包括以下项目：

性状：本制剂为淡黄色或红棕色的黏稠液体；具竹香气，味微甘；

鉴别：(1)取本制剂作为供试品溶液；另取酪氨酸对照品，加水制成每1ml含50μg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝4∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5％茚三酮试液，于105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取含量测定项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取愈创木酚、苯酚对照品适量，分别加乙醇制成每1ml含50μg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述三种溶液各2μl，照含量测定项下的方法，注入气相色谱仪，供试品应呈现与对照品保留时间一致的色谱峰；

检查：pH值  照中国药典2005年版一部附录VII G检测，应为4.4～5.5；

总固体  精密量取本制剂25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，在105℃干燥5小时，移至干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量；遗留残渣不得低于2.0％；

相对密度  照中国药典2005年版一部附录VII A检测，应不低于1.01；

其他  应符合中国药典2005年版一部附录I糖浆剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2005年版一部附录VI E气相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用0.32mm×30m、0.25μm的弹性石英毛细管柱；程序升温：初始柱温为80℃，然后以每分钟3℃的速率升至160℃，再以每分钟20℃的速率升至240℃，保持5分钟；理论板数按愈创木酚峰计算，应不低于30000；

校正因子的测定  取正十八烷适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含80μg的溶液，作为内标溶液；另取愈创木酚对照品适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含25μg的溶液，作为对照品溶液；精密量取对照品溶液5ml、内标溶液1ml，置10ml量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，吸取2μl注入气相色谱仪，连续注样3～5次，按平均峰面积计算校正因子；

测定法  精密量取本制剂100ml，按中国药典2005年版一部附录X D挥发油测定法测定，每次加醋酸乙酯1.5ml于挥发油测定器中，提取1小时，提取5次，分别放冷，分取醋酸乙酯层并转移至同一10ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，用醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，即得；

本制剂每1ml含愈创木酚C₇H₈O₂不得少于0.40μg。

本发明的实施例6：以鲜竹沥为原料制成的糖浆剂的质量控制方法也可以包括以下项目：

性状：本制剂为淡黄色或红棕色的黏稠液体；具竹香气，味微甘；

鉴别：取本制剂作为供试品溶液；另取酪氨酸对照品，加水制成每1ml含50μg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝4∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5％茚三酮试液，于105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

检查：总固体  精密量取本制剂25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，在105℃干燥5小时，移至干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量；遗留残渣不得低于2.0％；

其他  应符合中国药典2005年版一部附录I糖浆剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2005年版一部附录VI E气相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验  用0.32mm×30m、0.25μm的弹性石英毛细管柱；程序升温：初始柱温为80℃，然后以每分钟3℃的速率升至160℃，再以每分钟20℃的速率升至240℃，保持5分钟；理论板数按愈创木酚峰计算，应不低于30000；

校正因子的测定  取正十八烷适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含80μg的溶液，作为内标溶液；另取愈创木酚对照品适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含25μg的溶液，作为对照品溶液；精密量取对照品溶液5ml、内标溶液1ml，置10ml量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，吸取2μl注入气相色谱仪，连续注样3～5次，按平均峰面积计算校正因子；

测定法  精密量取本制剂100ml，按中国药典2005年版一部附录X D挥发油测定法测定，每次加醋酸乙酯1.5ml于挥发油测定器中，提取1小时，提取5次，分别放冷，分取醋酸乙酯层并转移至同一10ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，用醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，即得；

本制剂每1ml含愈创木酚C₇H₈O₂不得少于0.40μg。

本发明的实施例7：以鲜竹沥和鱼腥草为原料制成的糖浆剂的质量控制方法包括以下项目：

性状：本制剂为淡棕黄色至棕黄色的黏稠液体；气香，味甜；

鉴别：(1)取本制剂1滴点于滤纸上，待干后喷以0.3％茚三酮乙醇溶液，在105℃烘约5分钟，即显蓝紫色斑点；

(2)取本制剂60ml，用醋酸乙酯30ml振摇提取，提取液用5％碳酸氢钠溶液10ml洗涤，醋酸乙酯液自然挥干，残渣用甲醇0.5ml溶解，作为供试品溶液；另取鱼腥草对照药材25g，加水进行蒸馏，收集蒸馏液50ml，加醋酸乙酯20ml，振摇提取，提取液自然挥干，残渣用甲醇1ml溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝9∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(3)取本制剂30ml，用稀盐酸调节pH值至2～3，加乙醚30ml，振摇提取，提取液用5％碳酸氢钠溶液10ml洗涤，取乙醚层，自然挥干，残渣用甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取愈创木酚对照品，加甲醇制成每1ml含20μl的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.5％三乙胺与0.5％磷酸的水溶液∶乙腈＝100∶18为流动相，检测波长为220nm；分别取对照品和供试品溶液适量，注入液相色谱仪；供试品应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰；

检查：相对密度  应不低于1.03；

pH值  应为4.0～5.5；

其他  应符合中国药典2005年版一部附录I糖浆剂项下有关的各项规定；

含量测定：总氨基酸

对照品溶液的制备  精密称取105℃干燥至恒重的谷氨酸对照品10mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含谷氨酸60μg的溶液，即得；

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分置10ml具塞试管中，加水至1.0ml，分别加入0.2mol/L、pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml，1％抗坏血酸溶液0.1ml及2％茚三酮乙二醇甲醚溶液3.0ml，摇匀，用一大小合适的洁净纱布覆盖于具塞试管顶部，用线系紧，置水浴中加热15分钟取出，置冷水中冷却至室温，加60％乙醇3.0ml，摇匀，以第一份为空白，照中国药典2005版一部附录VB分光光度法试验，在570nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂装量差异项下的内容物，精密量取1ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“加pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线谱中求得供试品中总氨基酸的含量，计算，即得；

本制剂每1ml含总氨基酸以谷氨酸(C₅H₉NO₄)计不得低于8.0mg。

本发明的实施例8：以鲜竹沥和鱼腥草为原料制成的糖浆剂的质量控制方法也可以包括以下项目：

性状：本制剂为淡棕黄色至棕黄色的黏稠液体；气香，味甜；

鉴别：(1)取本制剂1滴点于滤纸上，待干后喷以0.3％茚三酮乙醇溶液，在105℃烘约5分钟，即显蓝紫色斑点；

(2)取本制剂60ml，用醋酸乙酯30ml振摇提取，提取液用5％碳酸氢钠溶液10ml洗涤，醋酸乙酯液自然挥干，残渣用甲醇0.5ml溶解，作为供试品溶液；另取鱼腥草对照药材25g，加水进行蒸馏，收集蒸馏液50ml，加醋酸乙酯20ml，振摇提取，提取液自然挥干，残渣用甲醇1ml溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝9∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录I糖浆剂项下有关的各项规定；

含量测定：总氨基酸

对照品溶液的制备  精密称取105℃干燥至恒重的谷氨酸对照品10mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含谷氨酸60μg的溶液，即得；

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分置10ml具塞试管中，加水至1.0ml，分别加入0.2mol/L、pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml，1％抗坏血酸溶液0.1ml及2％茚三酮乙二醇甲醚溶液3.0ml，摇匀，用一大小合适的洁净纱布覆盖于具塞试管顶部，用线系紧，置水浴中加热15分钟取出，置冷水中冷却至室温，加60％乙醇3.0ml，摇匀，以第一份为空白，照中国药典2005版一部附录VB分光光度法试验，在570nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂装量差异项下的内容物，精密量取1ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“加pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线谱中求得供试品中总氨基酸的含量，计算，即得；

本制剂每1ml含总氨基酸以谷氨酸(C₅H₉NO₄)计不得低于8.0mg。

本发明的实施例9：以鲜竹沥、鱼腥草、生半夏、生姜、枇杷叶、桔梗和薄荷油为原料制成的糖浆剂的质量控制方法包括以下项目：

性状：本制剂为黄棕色的黏稠液体；气香，味甜；

鉴别：(1)取本制剂1滴于层析滤纸上，喷入2％茚三酮醇溶液，在90～100℃加热3分钟，显紫色；

(2)取本制剂1ml于试管中，加硝酸5滴，加热，溶液显淡黄色，再加氨试液并稍过量，溶液即变成橙黄色；

检查：相对密度  应为1.05以上；

pH值  应为4.8～6.0；

其他  应符合中国药典2005年版一部附录I糖浆剂项下有关的各项规定；

含量测定：总氨基酸

对照品溶液的制备  精密称取105℃干燥至恒重的谷氨酸对照品10mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含谷氨酸60μg的溶液，即得；

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分置10ml具塞试管中，加水至1.0ml，分别加入0.2mol/L、pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml，1％抗坏血酸溶液0.1ml及2％茚三酮乙二醇甲醚溶液3.0ml，摇匀，用一大小合适的洁净纱布覆盖于具塞试管顶部，用线系紧，置水浴中加热15分钟取出，置冷水中冷却至室温，加60％乙醇3.0ml，摇匀，以第一份为空白，照中国药典2005版一部附录VB分光光度法试验，在570nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂装量差异项下的内容物，精密量取1ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“加pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线谱中求得供试品中总氨基酸的含量，计算，即得；

本制剂每1ml含总氨基酸以谷氨酸(C₅H₉NO₄)计不得低于0.8mg。

本发明的实施例10：以鲜竹沥、鱼腥草、生半夏、生姜、枇杷叶、桔梗和薄荷油为原料制成的糖浆剂的质量控制方法也可以包括以下项目：

性状：本制剂为黄棕色的黏稠液体；气香，味甜；

鉴别：取本制剂1ml于试管中，加硝酸5滴，加热，溶液显淡黄色，再加氨试液并稍过量，溶液即变成橙黄色；

含量测定：总氨基酸

对照品溶液的制备  精密称取105℃干燥至恒重的谷氨酸对照品10mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含谷氨酸60μg的溶液，即得；

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分置10ml具塞试管中，加水至1.0ml，分别加入0.2mol/L、pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml，1％抗坏血酸溶液0.1ml及2％茚三酮乙二醇甲醚溶液3.0ml，摇匀，用一大小合适的洁净纱布覆盖于具塞试管顶部，用线系紧，置水浴中加热15分钟取出，置冷水中冷却至室温，加60％乙醇3.0ml，摇匀，以第一份为空白，照中国药典2005版一部附录VB分光光度法试验，在570nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂装量差异项下的内容物，精密量取1ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“加pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线谱中求得供试品中总氨基酸的含量，计算，即得；

本制剂每1ml含总氨基酸以谷氨酸(C₅H₉NO₄)计不得低于0.8mg。

Claims (10)

1.一种止咳化痰的中药糖浆剂，其特征在于：它主要是以鲜竹沥为原料药制成的。

2.如权利要求1所述止咳化痰的中药糖浆剂的制备方法，其特征在于：取鲜竹沥1000ml，加入蔗糖，煮沸，趁热滤过，放冷，加入苯甲酸钠，搅匀，加水至1000ml，搅匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

3.根据权利要求1所述止咳化痰的中药糖浆剂，其特征在于：其中原料药还有鱼腥草，鲜竹沥和鱼腥草的用量比例为450ml∶180g。

4.如权利要求3所述止咳化痰的中药糖浆剂的制备方法，其特征在于：取鱼腥草加3倍量水，蒸馏，收集蒸馏液250ml；另取蔗糖450g，加水煮沸0.5～2小时，滤过，滤液与鲜竹沥及鱼腥草蒸馏液混匀，加入适量防腐剂和苯甲酸钠，调节pH值至4.0-5.5，加水调整总量至1000ml，搅匀，静置，滤过，灌封，灭菌，即得。

5.按照权利要求4所述止咳化痰的中药糖浆剂的制备方法，其特征在于：也可将鲜竹沥与蔗糖一起煮沸20分钟，趁热滤过，放冷，再加入鱼腥草蒸馏液、适量防腐剂和苯甲酸钠。

6.根据权利要求3所述止咳化痰的中药糖浆剂，其特征在于：原料药中还有生半夏、生姜、枇杷叶、桔梗和薄荷油，各组分的用量比例为：鲜竹沥400ml、鱼腥草150g、生半夏25g、生姜25g、枇杷叶150g、桔梗75g、薄荷油1ml。

7.如权利要求6所述止咳化痰的中药糖浆剂的制备方法，其特征在于：取生姜压榨取汁，加乙醇使含醇量达65％，搅拌后，放置24小时，取上清液滤过，回收乙醇后备用；鱼腥草蒸馏，收集蒸馏液150ml，另器收集；上述二种药渣与生半夏、枇杷叶、桔梗加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮1～2小时，第二次加6倍量水煎煮0.5～2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至约420ml，放冷，加乙醇使含醇量达65％，搅拌，放置24小时，取上清液滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加入鲜竹沥及蔗糖450g，煮沸20分钟，趁热滤过，放冷，加入上述生姜汁、鱼腥草蒸馏液、薄荷油和苯甲酸钠3g，搅匀，加水至1000ml，搅匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

8.如权利要求1或2所述止咳化痰的中药糖浆剂的质量控制方法，其特征在于：所述质量控制方法包括以下项目的部分或全部：

性状：本制剂为淡黄色或红棕色的黏稠液体；具竹香气，味微甘；

鉴别：(1)取本制剂作为供试品溶液；另取酪氨酸对照品，加水制成每1ml含50μg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝4∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5％茚三酮试液，于105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)取含量测定项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取愈创木酚、苯酚对照品适量，分别加乙醇制成每1ml含50μg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述三种溶液各2μl，照含量测定项下的方法，注入气相色谱仪，供试品应呈现与对照品保留时间一致的色谱峰；

检查：pH值  照中国药典2005年版一部附录VII G检测，应为4.4～5.5；

总固体  精密量取本制剂25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，在105℃干燥5小时，移至干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量；遗留残渣不得低于2.0％；

相对密度  照中国药典2005年版一部附录VII A检测，应不低于1.01；

其他  应符合中国药典2005年版一部附录I糖浆剂项下有关的各项规定；

含量测定：照中国药典2005年版一部附录VI E气相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验用0.32mm×30m、0.25μm的弹性石英毛细管柱；程序升温：初始柱温为80℃，然后以每分钟3℃的速率升至160℃，再以每分钟20℃的速率升至240℃，保持5分钟；理论板数按愈创木酚峰计算，应不低于30000；

校正因子的测定  取正十八烷适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含80μg的溶液，作为内标溶液；另取愈创木酚对照品适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含25μg的溶液，作为对照品溶液；精密量取对照品溶液5ml、内标溶液1ml，置10ml量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，吸取2μl注入气相色谱仪，连续注样3～5次，按平均峰面积计算校正因子；

测定法  精密量取本制剂100ml，按中国药典2005年版一部附录X D挥发油测定法测定，每次加醋酸乙酯1.5ml于挥发油测定器中，提取1小时，提取5次，分别放冷，分取醋酸乙酯层并转移至同一10ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，用醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，即得；

本制剂每1ml含愈创木酚C7H8O2不得少于0.40μg。

9.如权利要求3、4或5所述止咳化痰的中药糖浆剂的质量控制方法，其特征在于：所述质量控制方法包括以下项目的部分或全部：

性状：本制剂为淡棕黄色至棕黄色的黏稠液体；气香，味甜；

鉴别：(1)取本制剂1滴点于滤纸上，待干后喷以0.3％茚三酮乙醇溶液，在105℃烘约5分钟，即显蓝紫色斑点；

(2)取本制剂60ml，用醋酸乙酯30ml振摇提取，提取液用5％碳酸氢钠溶液10ml洗涤，醋酸乙酯液自然挥干，残渣用甲醇0.5ml溶解，作为供试品溶液；另取鱼腥草对照药材25g，加水进行蒸馏，收集蒸馏液50ml，加醋酸乙酯20ml，振摇提取，提取液自然挥干，残渣用甲醇1ml溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝9∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(3)取本制剂30ml，用稀盐酸调节pH值至2～3，加乙醚30ml，振摇提取，提取液用5％碳酸氢钠溶液10ml洗涤，取乙醚层，自然挥干，残渣用甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取愈创木酚对照品，加甲醇制成每1ml含20μl的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.5％三乙胺与0.5％磷酸的水溶液∶乙腈＝100∶18为流动相，检测波长为220nm；分别取对照品和供试品溶液适量，注入液相色谱仪；供试品应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰；

检查：相对密度  应不低于1.03；

pH值  应为4.0～5.5；

其他  应符合中国药典2005年版一部附录I糖浆剂项下有关的各项规定；

含量测定：总氨基酸

对照品溶液的制备  精密称取105℃干燥至恒重的谷氨酸对照品10mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含谷氨酸60μg的溶液，即得；

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分置10ml具塞试管中，加水至1.0ml，分别加入0.2mol/L、pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml，1％抗坏血酸溶液0.1ml及2％茚三酮乙二醇甲醚溶液3.0ml，摇匀，用一大小合适的洁净纱布覆盖于具塞试管顶部，用线系紧，置水浴中加热15分钟取出，置冷水中冷却至室温，加60％乙醇3.0ml，摇匀，以第一份为空白，照中国药典2005版一部附录VB分光光度法试验，在570nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂装量差异项下的内容物，精密量取1ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“加pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线谱中求得供试品中总氨基酸的含量，计算，即得；

本制剂每1ml含总氨基酸以谷氨酸C5H9NO4计不得低于8.0mg。

10.如权利要求6或7所述止咳化痰的中药糖浆剂的质量控制方法，其特征在于：所述质量控制方法包括以下项目的部分或全部：

性状：本制剂为黄棕色的黏稠液体；气香，味甜；

鉴别：(1)取本制剂1滴于层析滤纸上，喷入2％茚三酮醇溶液，在90～100℃加热3分钟，显紫色；

(2)取本制剂1ml于试管中，加硝酸5滴，加热，溶液显淡黄色，再加氨试液并稍过量，溶液即变成橙黄色；

检查：相对密度  应为1.05以上；

pH值  应为4.8～6.0；

其他  应符合中国药典2005年版一部附录I糖浆剂项下有关的各项规定；

含量测定：总氨基酸

对照品溶液的制备  精密称取105℃干燥至恒重的谷氨酸对照品10mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含谷氨酸60μg的溶液，即得；

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分置10ml具塞试管中，加水至1.0ml，分别加入0.2mol/L、pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml，1％抗坏血酸溶液0.1ml及2％茚三酮乙二醇甲醚溶液3.0ml，摇匀，用一大小合适的洁净纱布覆盖于具塞试管顶部，用线系紧，置水浴中加热15分钟取出，置冷水中冷却至室温，加60％乙醇3.0ml，摇匀，以第一份为空白，照中国药典2005版一部附录VB分光光度法试验，在570nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂装量差异项下的内容物，精密量取1ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“加pH5.0的枸橼酸盐缓冲液1.0ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线谱中求得供试品中总氨基酸的含量，计算，即得；

本制剂每1ml含总氨基酸以谷氨酸C5H9NO4计不得低于0.8mg。