CN1807441A - 一种生产高纯度栀子苷及高色价栀子黄色素的提纯方法 - Google Patents
一种生产高纯度栀子苷及高色价栀子黄色素的提纯方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种生产高纯度栀子苷及高色价栀子黄色素的提取方法,具体地说是运用大孔吸附树脂法、硅胶柱层析法工业化生产高纯度栀子苷及高色价栀子黄色素。取栀子干果实粉末经浸提、浓缩、萃取、大孔吸附树脂工艺,再经真空干燥、硅胶柱层析法、干燥得到高纯度的白色栀子苷成品或栀子黄色素成品。本发明所得高纯度的白色栀子苷成品或栀子黄色素成品具有使用方便、安全性高、着色力的特点;栀子苷产品纯度高;生产工艺具有简便、快速、安全、低成本的特点,为栀子资源的综合利用建立了新技术途径;从而使栀子资源得到有效利用,并能提高栀子产品附加值。
Description
技术领域
本发明涉及一种生产高纯度栀子苷及高色价栀子黄色素的提取方法,具体地说是是运用大孔吸附树脂法、硅胶柱层析法工业化生产高纯度栀子苷及高色价栀子黄色素。
背景技术
栀子系龙胆目茜草科栀子属常绿灌木,属于卫药食两用资源。目前它常用于食品、医药、饲料、化工等方面,食品上仅将其作为生产色素及中药的原料,而且栀子黄的色价不高及纯度不够,极大地限制了栀子资源的有效开发及合理利用。作为一种天然食用色素,栀子黄的特点是安全性高、市场潜力巨大。随着人们对绿色无公害食品的青睐,黄栀子天然色素的需求量越来越大,应用也越来越广泛。栀子苷是从茜草科植物栀子的干燥成熟果实中运用的高科技手段提取精制而成的结晶性产品。栀子苷有多种用途,经不同条件的发酵,可以制成天然食用色素栀子兰和栀子红,也是用于治疗心血管和肝胆等疾病的原料药物。目前,对栀子的研究主要侧重于药理功能方面如护肝、利胆、抗肿瘤、降血脂、抗氧化等作用,并集中于栀子黄的提取、精制工艺研究及栀子苷在药材中的定量检测方法。在提取栀子黄的生产工艺中,所得栀子黄产品的得率和色价较低,而且栀子黄提取后的余液中所含有大量的栀子苷随废液直接排放,造成了资源的浪费。
发明内容
本发明的目的在于克服上述不足之处,从而提供一种科学的生产工艺,充分提取栀子原料中的栀子黄色素、栀子苷,并且利用大孔吸附树脂法有效分离栀子黄色素、栀子苷,得到高色价的栀子黄产品,然后运用硅胶柱层析法得到高纯度的栀子苷产品,从而使栀子资源得到有效利用,并能提高栀子产品附加值的生产高纯度栀子苷及高色价栀子黄色素的提取方法。
本发明的主要解决方案是这样实现的:
本发明生产高纯度栀子苷及高色价栀子黄色素的提取工艺如下:总料液比按质量/体积以g/ml计:
1、粉碎:栀子干果实原料经过高速粉碎机碾磨粉碎成粉末,过8~10目;粉碎机转速:100~120分/转;
2、浸提:取栀子干果实粉末用蒸馏水或(重量百分浓度)50%~70%的乙醇溶液浸提,总料液比以g/ml计为:1∶20~1∶25,提取次数为3~4次,提取温度:15℃~30℃、提取时间:2~4小时;
3、浓缩、萃取:将上述浸提液经过抽滤、旋转抽真空浓缩,相对真空度为:0.08~0.1MPa,真空浓缩温度为:38℃~45℃,再用石油醚萃取除杂,浓缩液与石油醚体积比1∶3,萃取2~3次;
4、大孔吸附树脂工艺:将上述浓缩液加样于大孔吸附树脂X-5,柱床体积为:2000ml(即1BV),柱子径高比为:58mm∶760mm,并用不同浓度的乙醇溶液进行梯度洗脱,洗脱浓度溶液为:0~95%,洗脱体积为:1BV(1BV=1个柱体积),然后进行分部收集,并用蒸馏水稀释250倍~500倍,于239nm处测定吸光度值,收集栀子苷部分;分部收集栀子黄色素部分;
5、真空干燥:收集相应栀子苷、栀子黄色素部分后,分别经旋转抽真空浓缩,绝对真空度为:0.03~0.0.05MPa,并在温度为:-50~-70℃条件下冷冻,再进行真空干燥60~80小时,干燥温度为:-30~-40℃,得到淡黄色粉末状栀子苷半成品,纯度为:45%~70%,红褐色的粗制栀子黄色素半成品,色价为:175~225。硅胶柱层析法
6、硅胶柱层析法:取上述淡黄色粉末状栀子苷半成品:3.5~5.5g,用10~15ml乙酸乙酯或氯仿溶解,在溶解液内再加入硅胶为:4~6g碾磨均匀;硅胶柱径高比为:29mm∶430mm,柱床体积为:270ml,然后上柱并用蒸溜水或甲醇-乙酸乙酯或氯仿梯度洗脱,体积比分别为:10∶0、9∶1、6∶1、3∶1,并分部收集,再用硅胶板快速定性检测,其中展开剂是氯仿或甲醇混合溶液,体积比为3∶1,并用10%硫酸乙醇溶液显色,收集相应栀子苷;栀子黄色素粉末半成品操作条件同上;
7、干燥:把收集的栀子苷或栀子黄色素在旋转抽真空干燥,相对真空度为:0.08~0.1MPa,真空干燥温度为:38℃~45℃,真空时间:1~2小时得到高纯度的白色栀子苷成品或栀子黄色素成品。
本发明与已有技术相比具有以下优点:
本发明所得高纯度的白色栀子苷成品或栀子黄色素成品具有使用方便、安全性高、着色力的特点;栀子苷产品纯度高;生产工艺具有简便、快速、安全、低成本的特点,为栀子资源的综合利用建立了新技术途径;从而使栀子资源得到有效利用,并能提高栀子产品附加值。
附图说明
图1为本发明工艺流程图。
具体实施方式
下面本发明将结合附图中的实施例作进一步描述:
实施例一:总料液比按质量/体积以g/ml计:
本发明将栀子干果实原料通过SF-200C高速粉碎机碾磨成过10目筛的粉末,准确称量栀子干果实粉末430g,用60%乙醇溶液(重量百分浓度)浸泡,其中总料液比1∶20,分四次提取,提取温度:15℃、提取时间3小时;浸提液经过过滤、回收酒精,得到浓缩液240ml,再用240ml石油醚萃取除杂三次,每次80ml。将浓缩液加样于大孔吸附树脂X-5,并依次用0%、10%、20%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、95%乙醇溶液进行梯度洗脱,洗脱体积均为1BV,分部收集,并取少量样用蒸馏水稀释250倍,于239nm处测定吸光度值,收集栀子苷部分;分部收集栀子黄色素部分。
收集相应栀子苷部分,经旋转抽真空浓缩至150ml,再冷冻至-70℃,真空干燥(其中绝对真空度为:0.05Mpa,干燥温度为:-30℃,干燥时间为:60小时),得到干燥的淡黄色栀子苷产品,纯度在65.8%;称取4.233g的栀子苷产品,用5ml乙酸乙酯溶解,再加4.5g的硅胶,碾磨均匀,上硅胶柱,并用乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱,体积比依次为10∶0、9∶1、6∶1、3∶1,洗脱体积分别为100ml、100ml、100ml、300ml,分部收集,再用HSGF硅胶板快速定性检测,其中展开剂是氯仿甲醇混合溶液,体积比为3∶1,再用10%硫酸乙醇溶液显色,收集相应栀子苷的部分,旋转抽真空干燥,得到栀子苷产品纯度为92.1%。真空干燥温度:38℃,真空度为:0.1Mpa。
收集相应栀子黄色素部分经旋转抽真空浓缩至220ml,冷冻至-70℃,真空干燥(其中绝对真空度为:0.05MPa,干燥温度为:-30℃,干燥时间为:60小时),得到干燥的红褐色栀子黄色素产品,色价为201。称取5.523g的栀子黄色素产品,用5ml乙酸乙酯溶解,再加5g的硅胶,碾磨均匀,上硅胶柱,并用乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱,体积比依次为10∶0、9∶1、6∶1、3∶1,洗脱体积分别为100ml、100ml、200ml、500ml,分部收集,再用HSGF硅胶板快速定性检测,其中展开剂是氯仿甲醇混合溶液,体积比为3∶1,并用10%硫酸乙醇溶液显色,收集相应栀子黄色素部分,旋转抽真空干燥,得到橘黄色产品,色价为:35.5。真空干燥温度:38℃,真空度为:0.1Mpa,真空时间:1小时
栀子苷的检测方法:薄层层析-紫外分光光度法(定性检测),反相高效液相法(定量计算);栀子黄的评价指标:GB 7912-87。
实施例二:总料液比按质量/体积以g/ml计:
将栀子干果实原料通过SF-200C高速粉碎机碾磨成过10目筛的粉末,准确称量栀子干果实粉末585g,用蒸馏水浸泡,其中总料液比1∶25,分3次浸提,提取温度:30℃、提取时间:2小时;浸提液过滤,浓缩至340ml,再用340ml石油醚萃取除杂,三次萃取,每次115ml;浓缩液加样于大孔吸附树脂X-5,并依次用蒸馏水、10%、20%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、95%乙醇溶液(重量百分浓度)进行梯度洗脱,洗脱体积均为:1BV,分部收集,并取少量样用蒸馏水稀释500倍,于239nm处测定吸光度值,收集栀子苷部分,分部收集栀子黄色素部分。
收集相应栀子苷部分,经旋转抽真空浓缩至175ml,冷冻至-70℃,真空干燥(其中绝对真空度为:0.05Mpa,干燥温度为:-35℃,干燥时间为:70小时),得到干燥的淡黄色栀子苷产品纯度在49.4%;称取3.549g的栀子苷产品,用4ml乙酸乙酯溶解,再加4.0g的硅胶,碾磨均匀,上硅胶柱(以下条件同实施例1),最终得到栀子苷产品纯度为:89.1%。
收集相应栀子黄色素部分经旋转抽真空浓缩至250ml,冷冻至-70℃,真空干燥(其中绝对真空度为:0.05MPa,干燥温度为:-35℃,真空时间:1.5小时),得到干燥的红褐色栀子黄色素产品,色价为:175。称取4.523g的栀子黄色素产品(以下条件同实施例1),最终得到橘黄色产品,色价为:25.5。
实施例三:总料液比按质量/体积以g/ml计:
将栀子干果实原料通过SF-200C高速粉碎机碾磨成过10目筛的粉末,准确称量栀子干果实粉末500g,用70%乙醇溶液(重量百分浓度)浸泡,其中总料液比1∶20,分四次提取,提取温度为:20℃、提取时间:4小时;浸提液过滤,回收酒精并浓缩至300ml,再用300ml石油醚分三次萃取除杂,每次100ml;浓缩液加样于大孔吸附树脂X-5(以下条件同实施例1)。
收集相应栀子苷部分,经旋转抽真空浓缩至160ml,再冷冻至-70℃,真空干燥(其中绝对真空度为:0.05Mpa,干燥温度为:-40℃,干燥时间为:80小时),得到干燥的淡黄色栀子苷产品纯度在67.7%;称取4.503g的栀子苷产品,用5ml氯仿溶解,再加4.5g的硅胶,碾磨均匀,上硅胶柱,并用氯仿-甲醇梯度洗脱,体积比依次为:10∶0、9∶1、6∶1、3∶1,洗脱体积分别为:100ml、100ml、100ml、300ml,分部收集,再用HSGF硅胶板快速定性检测,其中展开剂是氯仿甲醇混合溶液,体积比为3∶1,再用10%硫酸乙醇溶液显色,收集相应栀子苷的部分,旋转抽真空干燥,得到栀子苷产品纯度为:92.1%。真空干燥温度:38℃,真空度为:0.1Mpa。得到栀子苷产品纯度为95.7%。收集相应栀子黄色素部分经旋转抽真空浓缩至205ml,冷冻至-70℃,真空干燥(真空度为:0.05Mpa,干燥温度为:-40℃,干燥时间为:80小时),得到干燥的红褐色栀子黄色素产品,色价为:183。称取4.923g的栀子黄色素产品,用5ml氯仿溶解,再加5g的硅胶,碾磨均匀,上硅胶柱,并用氯仿-甲醇混合溶液梯度洗脱,体积比依次为:10∶0、9∶1、6∶1、3∶1,洗脱体积分别为:100ml、100ml、100ml、300ml,分部收集,再用HSGF硅胶板快速定性检测,其中展开剂是氯仿甲醇混合溶液,体积比为3∶1,并用10%硫酸乙醇溶液显色,收集相应栀子黄色素部分,旋转抽真空干燥,真空干燥温度:38℃,真空度为:0.1Mpa,真空时间:2小时。得到橘黄色产品,色价为:35.5。
Claims (1)
1、一种生产高纯度栀子苷及高色价栀子黄色素的提纯方法,其特征是提取工艺采用以下工艺步骤:总料液比按质量/体积以g/ml计:
粉碎:栀子干果实原料经过高速粉碎机碾磨粉碎成粉末,过8~10目,粉碎机转速:100~120分/转;
浸提:取栀子干果实粉末用蒸馏水或50%~70%的乙醇溶液浸提,总料液比为:1∶20~1∶25,提取次数为:3~4次,提取温度:15℃~30℃、提取时间:2~4小时;
浓缩、萃取:将上述浸提液经过抽滤、旋转抽真空浓缩,相对真空度为:0.08~0.1MPa,真空浓缩温度为:38℃~45℃,再用石油醚萃取除杂,浓缩液与石油醚体积比1∶3,萃取:2~3次;
大孔吸附树脂工艺:将上述浓缩液加样于大孔吸附树脂X-5,柱床体积为:2000ml,柱子径高比为:58mm∶760mm,并用不同浓度的乙醇溶液进行梯度洗脱,洗脱浓度溶液为:0~95%,洗脱体积为:1BV,然后进行分部收集,并用蒸馏水稀释250倍~500倍,于239nm处测定吸光度值,收集栀子苷部分;分部收集栀子黄色素部分;
真空干燥:收集相应栀子苷、栀子黄色素部分后,分别经旋转抽真空浓缩,绝对真空度为:0.03~0.0.05MPa,并在温度为:-50~-70℃条件下冷冻,再进行真空干燥60~80小时,干燥温度为:-30~-40℃,得到淡黄色粉末状栀子苷半成品,纯度为:45%~70%,红褐色的粗制栀子黄色素半成品,色价为:175~225。
硅胶柱层析法:取上述淡黄色粉末状栀子苷半成品或栀子黄色素粉末半成品:3.5~5.5g用10~15ml乙酸乙酯或氯仿溶解,在溶解液内再加入硅胶为:4~6g碾磨均匀;硅胶柱径高比为:29mm∶430mm,柱床体积为:270ml,然后上柱并用蒸馏水或甲醇—乙酸乙酯或氯仿梯度洗脱,体积比分别为:10∶0、9∶1、6∶1、3∶1,并分部收集,再用硅胶板快速定性检测,其中展开剂是氯仿或甲醇混合溶液,体积比为3∶1,并用10%硫酸乙醇溶液显色,收集相应栀子苷;栀子黄色素粉末半成品操作条件同上;
干燥:把收集的栀子苷或栀子黄色素在旋转抽真空干燥,相对真空度为:0.08~0.1MPa,真空干燥温度为:38℃~45℃,真空时间:1~2小时,得到高纯度的白色栀子苷成品或栀子黄色素成品。
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