CN104327133A

CN104327133A - 栀子果实有效成分综合提取工艺

Info

Publication number: CN104327133A
Application number: CN201410544015.4A
Authority: CN
Inventors: 孟照银; 胡润淮; 邵清松
Original assignee: ZHEJIANG TIANLU BIO-TECH Co Ltd
Current assignee: ZHEJIANG TIANLU BIO-TECH Co Ltd
Priority date: 2014-10-15
Filing date: 2014-10-15
Publication date: 2015-02-04

Abstract

本发明公开了一种栀子果实有效成分综合提取工艺，包括下述步骤：（1）、将果实粉碎成粉末，用水浸泡，得到浸泡液；（2）、将所述浸泡液进行动态逆流循环超声波提取，得到提取液；（3）、将所述提取液通过大孔吸附树脂柱A进行吸附，并得到废液A；（4）、用乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱A，得到洗脱液A，得栀子黄色素；（5）、将所述废液A经大孔吸附树脂柱B进行吸附，并得到废液B，用乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱B，得到洗脱液B，得到栀子总苷。本发明实现了栀子各有效成分综合提取，有效避免了水浸提存在的纯度低、色泽差、易糊化造成分离上困难和溶剂浸提存在的醇回收成本高，能耗大的问题；有效成分产率高，污染少，产品品质好。

Description

栀子果实有效成分综合提取工艺

技术领域

本发明属于植物利用技术领域，涉及栀子果实加工处理，尤其是涉及一种栀子果实有效成分综合提取工艺。

背景技术

栀子是我国卫生部颁布的第一批药食两用资源，我国从20世纪60年代就开始研究栀子有效成分的利用，但是至今只形成了一定的生产栀子黄色素工业规模和生产少量栀子甙产品的能力，且还存在栀子色素产品比较单一、杂质含量高、色价低、工艺流程复杂、生产成本较高的问题。同时，我国对栀子资源的利用存在着较大的浪费，如从栀子中提取栀子黄色素但浪费了栀子甙等，或者从栀子中提取栀子甙但浪费了栀子黄色素等有效成分。我国栀子种植面积大，资源丰富，遍及十几个省市，因此，进一步开展低成本、高色价栀子黄色素和高纯度栀子甙的提取工艺研究，充分利用栀子中的各种成分，深度开发栀子，获得具有市场竞争力的高附加值产品，使栀子的地方资源优势转化为产业和经济优势，对增加收入，调动生态建设的积极性具有重大意义。

为此，人们进行了长期的探索，提出了各种各样的解决方案。

专利号为CN102911513的中国专利于2014年3月12日公开了一种栀子黄色素的提取方法；专利号为CN102432651的中国专利于2012年5月2日公开了栀子苷的制备方法，包括栀子破碎- 提取- 提取液用大孔吸附树脂吸附- 洗脱树脂- 收集洗脱液- 浓缩、干燥；其中，所述大孔吸附树脂为ADS-21 型号，或ADS-17型号，或ADS-7 型号，或ADS-F8 型号的强极性大孔吸附树脂，提取后栀子药渣可以用作饲料添加剂或肥料，可以通过一次的强极性大孔吸附树脂吸附分离，无需再经脱色、脱味处理工序，就可获得纯度高的栀子苷产品。上述两个发明中均采用现有技术中特定型号的树脂吸附，吸附效果不理想，操作较繁琐，流程长，有效成分损失相对增多，提高了提取成本。而且这两个发明中对栀子中单一（栀子黄或栀子苷）成分的提取，而对其它有效成分造成极大浪费，即使对提取后栀子药渣作饲料添加剂或肥料用，也不能充分、有效利用栀子果实里的资源。

专利号为CN102732050的中国专利于2012年10月17日公开了一种从栀子果实中提取栀子色素的方法，经粉碎脱皮、提取、浓缩、过滤、大孔树脂纯化、洗脱、浓缩、干燥等工艺制备得到栀子黄色素和栀子苷，栀子苷再通过生物工程技术、膜过滤和酸沉淀法制备栀子蓝色素或栀子红色素，在降低了栀子黄色素的生产成本，同时提高了原料的综合利用水平等作用。本发明中采用的提取方法为水提或溶剂提取，存在其不足：水浸提存在纯度低、色泽差、易糊化造成分离上困难；溶剂浸提存在醇回收成本高，能耗大等问题。上述方案虽然在一定程度上实现了栀子果实成分的提取，但是仍然存在无法实现综合分离多种成分，整个过程操作较繁琐，流程长，有效成分损失相对增多，产品品质不高。

发明内容

本发明的目的是针对上述问题，提供一种能够实现栀子果实各有效成分的综合提取利用的一种栀子果实有效成分综合提取工艺，突破现有的实现产业化栀子提取工艺存在的产品单一、废水排放量大的局限，实现了栀子各有效成分综合提取，有效避免了水浸提存在的纯度低、色泽差、易糊化造成分离上困难和溶剂浸提存在的醇回收成本高，能耗大的问题；有效成分产率高，环境污染少，产品品质好。

为达到上述目的，本发明采用了下列技术方案：一种栀子果实有效成分综合提取工艺，包括下述步骤：

（1）、将栀子果实粉碎得到大小为30-100目粉末，用水浸泡1-3h，得到浸泡液；所述粉末和水的质量比为12-15:1；

（2）、将所述浸泡液进行动态逆流循环超声波提取，得到提取液；提取时间为0.5-2h，提取温度为40-60℃，超声波频率30-50kHz，超声波功率为250-350W；

（3）、将所述提取液通过大孔吸附树脂柱A进行吸附，并得到废液A；所述提取液与所述大孔吸附树脂柱A的体积比为8-10:1；

（4）、先用3-5倍大孔吸附树脂柱A体积的清水清洗所述大孔吸附树脂柱A，再用3-5倍大孔吸附树脂柱A体积的乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱A，得到洗脱液A，过滤，在压力0.09-0.10MPa，温度40-60℃的条件下真空浓缩、干燥，得成品栀子黄色素；洗脱时间15-25h；

（5）、将所述废液A经大孔吸附树脂柱B进行吸附，并得到废液B，先用2-3倍大孔吸附树脂柱B体积的清水清洗所述大孔吸附树脂柱B，再用3-5倍大孔吸附树脂柱B体积的乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱B，得到洗脱液B，过滤，在压力0.09-0.10MPa，温度40-60℃的条件下真空浓缩、干燥，得到栀子总苷；洗脱时间6-8h。

栀子黄色素是从栀子果实中提取的一类天然黄色素，其主要成分是类胡萝卜类的a-藏红花素和a-藏红花酸，是自然界唯一的水溶性胡萝卜素类色素，极易溶于水，微溶于无水乙醇及其它有机溶剂。近年来，对栀子黄色素的提取工艺研究成果主要有水浸提法、有机溶剂浸提法、微波提取法和超声波提取法，由于微波提取法不适合工业化生产，超声波提取法设备成本价格太高，因此产业化生产主要采用水浸提法和有机溶剂浸提法。其中，水提法具有工艺简单、投资少、生产成本较低等优点，但用纯水浸提，纯度低，色泽差，且易糊化造成分离上的困难，以往多数不考虑用纯水浸提。但近几年来，从经济和环保方面考虑，又开始探索水浸提的最优工艺条件；有机溶剂浸提法提取率和得率均优于水提，但需考虑醇回收的成本和能耗问题。粗制栀子黄色素常因含有大量的栀子甙而易引起绿变，需进行纯化精制，截至目前，精制成果主要有层析法、膜分离法、吸附法等，其中只有吸附法实现工业化应用。

栀子甙是栀子黄色素的主要杂质之一，属环烯醚萜甙类物质，易溶于热水、甲醇、乙醇及稀碱液中，难溶于冷水、乙醚、氯仿和笨等溶剂，耐光性差。栀子甙经过在β-葡萄糖苷的作用下，水解产生栀子甙元，栀子甙元很容易与特殊氨基酸结合形成色素中间体，这些中间体在合适的条件下，在酶的作用下，受热及氧的影响，很容易聚合，使共轭键增加面发色，生成栀子蓝色素，并且通过控制不同的发酵或酶反应条件，可以制取栀子红色素。目前对于从果实中直接提取栀子甙的研究较多，其中分离纯化工艺主要包括大孔树脂吸附法、硅胶吸附法、氧化铝吸附法和氧化镁吸附法，其中工业化生产只有大孔树脂吸附法。

本发明选用专门用于纯化栀子黄、栀子苷的大孔吸附树脂，改变大孔吸附树脂传统单柱吸附工艺，得到高色价、高纯度的栀子黄和栀子苷，而且突破了现已实现产业化栀子提取工艺存在的产品单一、废水排放量大的局限，在合理控制工艺参数下，提高产量，降低成本。

作为优选，将所述废液A和/或废液B的pH调至10.0-12.0，80-100℃保温2-3小时，然后冷却至室温，用柠檬酸调pH至3.0-5.5，过滤，得到滤液；向所述滤液中加入所述滤液质量0.1-0.5%的β-葡萄糖苷酶，进行酶解反应,得到酶解液；向所述酶解液中加入丙氨酸和谷氨酸混合物，在pH4.0-6.0下，50-60℃反应60-80h，得到浓缩液一；通过超滤膜对上述浓缩液一进行超滤，得超滤液一；将超滤液一浓缩至固含量20-30％，真空干燥即得桅子红色素。

作为优选，向所述废液A和/或废液B中加入谷氨酸钠和pH值为7.0-8.0的缓冲溶液，合成得到浓缩液二，合成温度为8O-100℃，合成时间为3-5h；通过超滤膜对上述浓缩液二进行超滤，得超滤液二；将超滤液浓缩至固含量20-30％，真空干燥即得桅子蓝色素。

作为优选，所述提取液经过所述大孔吸附树脂A和/或所述废液A经过所述大孔吸附树脂B的流速为1-3BV/h，温度为45-60℃。

作为优选，所述大孔吸附树脂柱A和所述大孔吸附树脂柱B均为并联设置的3-5根。

作为优选，所述步骤（4）和所述步骤（5）中乙醇质量浓度为80%-85%。

作为优选，所述酶解反应的条件为45-50℃、pH 4.0-5.O，酶解时间为40-48h。

作为优选，缓冲溶液可以是HAc-NaAc或NH₃·H₂O-NH₄Cl或 NaH₂PO₄-Na₂HPO₄。

作为优选，所述保温的过程中补加NaOH维持pH为10-12。作为优选，步骤（6）中所述保温的过程中补加NaOH维持pH为10-12。

作为优选，所述超滤条件为室温，超滤压力为0.3-0.5ΜPa。

作为优选，所述丙氨酸和谷氨酸混合物的加入量为所述酶解液质量的0.1-1%；丙氨酸和谷氨酸的质量比为3-5:1。

与现有的技术相比，本栀子果实有效成分综合提取工艺的优点在于：

1、首次设计出了栀子黄、蓝、红色素及栀子苷综合提取纯化制备的新工艺，突破了现已实现产业化栀子提取工艺存在的产品单一、废水排放量大的局限，不仅得到了系列有效成分，而且实现了零污染零排放。

2、采用动态逆流循环超声波提取工艺，有效避免了水浸提存在的纯度低、色泽差、易糊化造成分离上困难和溶剂浸提存在的醇回收成本高，能耗大的问题。

3、选用专门用于纯化栀子黄、栀子苷的大孔吸附树脂，改变大孔吸附树脂传统单柱吸附工艺，采用串联吸附法，在通过合理控制个工艺参数，使得在同量的情况下，使成本低，产量高。

具体实施方式

实施例1：

一种栀子果实有效成分综合提取工艺，包括下述步骤：

（1）、将栀子果实粉碎得到大小为50目粉末，放入反应罐中，加入质量比为15:1的水浸泡3h，得到浸泡液；

（2）、将所述浸泡液进行动态逆流循环超声波提取，超声波频率30kHz，超声波功率为350W，在温度为40℃下、提取2h，得到提取液；

（3）、在温度为45℃下，将所述提取液以3BV/h的流速通过依次并联的3个大孔吸附树脂柱A进行吸附，并得到废液A；通过的所述提取液与所述大孔吸附树脂柱A的体积比为10:1；

（4）、先用4倍大孔吸附树脂柱A体积的清水清洗所述大孔吸附树脂柱A，再用5倍大孔吸附树脂柱A体积的浓度为80%的乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱A，得到洗脱液A，过滤，在压力0.09MPa，温度60℃的条件下真空浓缩、干燥，得成品栀子黄色素；洗脱时间15h；

（5）、在温度为50℃下，将所述废液A以1BV/h的流速依次经过并联的4个大孔吸附树脂柱B进行吸附，并得到废液B，先用2.5倍大孔吸附树脂柱B体积的清水清洗所述大孔吸附树脂柱B，再用5倍大孔吸附树脂柱B体积的乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱B，得到洗脱液B，过滤，在压力0.095MPa，温度50℃的条件下真空浓缩、干燥，得到栀子总苷；洗脱时间6.5h；

（6）、将所述废液A和/或废液BpH调至12.0，80℃保温2小时，在保温期间用NaOH维持溶液pH为12.0，然后冷却至室温，用柠檬酸调pH至5.5，过滤，得到滤液；向所述滤液中加入占所述滤液质量0.5%的β-葡萄糖苷酶，在50℃、pH 4.0条件下，酶解45h,得到酶解液；向所述酶解液中加入占所述酶解液质量的1%的丙氨酸和谷氨酸混合物，丙氨酸和谷氨酸的质量比为4:1；在pH6.0下，60℃反应60h，得到浓缩液一；通过超滤膜对上述浓缩液一在室温、压力为0.4ΜPa进行减压超滤，得超滤液一；将超滤液一浓缩至固含量20％，真空干燥即得桅子红色素；

实施例2：

一种栀子果实有效成分综合提取工艺，包括下述步骤：

（6）、向所述废液A和废液B中加入溶液质量5%的谷氨酸钠和pH值为7.5的NaH₂PO₄-Na₂HPO₄缓冲对溶液，合成得到浓缩液二，合成温度为8O℃，合成时间为3h。通过超滤膜对上述浓缩液二在室温、压力为0.4ΜPa进行减压超滤，得超滤液二；将超滤液浓缩至固含量20％，真空干燥即得桅子蓝色素。

实施例3：

（1）、将栀子果实粉碎得到大小为100目粉末，放入反应罐中，加入质量比为13:1的水浸泡3h，得到浸泡液；

（2）、将所述浸泡液进行动态逆流循环超声波提取，超声波频率50kHz，超声波功率为300W，在温度为50℃下、提取0.5h得到提取液；

（3）、在温度为50℃下，将所述提取液以2BV/h的流速通过依次并联的4个大孔吸附树脂柱A进行吸附，并得到废液A；通过的所述提取液与所述大孔吸附树脂柱A的体积比为8:1；

（4）、先用5倍大孔吸附树脂柱A体积的清水清洗所述大孔吸附树脂柱A，再用3倍大孔吸附树脂柱A体积的乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱A，得到洗脱液A，过滤，在压力0.10MPa，温度50℃的条件下真空浓缩、干燥，得成品栀子黄色素；洗脱时间20h；

（5）、在温度为60℃下，将所述废液A以2BV/h的流速依次经过并联的5个大孔吸附树脂柱B进行吸附，并得到废液B，先用2倍大孔吸附树脂柱B体积的清水清洗所述大孔吸附树脂柱B，再用4倍大孔吸附树脂柱B体积的乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱B，得到洗脱液B，过滤，在压力0.10MPa，温度60℃的条件下真空浓缩、干燥，得到栀子总苷；洗脱时间8h；

（6）、将所述废液A的pH调至10.0，100℃保温2.5小时，在保温期间用NaOH维持溶液pH为10.0，然后冷却至室温，用柠檬酸调pH至3.0，过滤，得到滤液；向所述滤液中加入占所述滤液质量0.3%的β-葡萄糖苷酶，在45℃、pH5.O条件下，酶解40h,得到酶解液；向所述酶解液中加入占所述酶解液质量的0.5%的丙氨酸和谷氨酸混合物，丙氨酸和谷氨酸的质量比为4:1；在pH4.0下，50℃反应65h，得到浓缩液一；通过超滤膜对上述浓缩液一在室温、压力为0.5ΜPa进行超滤，得超滤液一；将超滤液一浓缩至固含量25％，真空干燥即得桅子红色素；

实施例4：

（6）、向所述废液A和/或废液B中加入溶液质量3%的谷氨酸钠和pH值为7.0的NH₃·H₂O-NH₄Cl缓冲对溶液，合成得到浓缩液二，合成温度为90℃，合成时间为4h。通过超滤膜对上述浓缩液二在室温、压力为0.5ΜPa进行超滤，得超滤液二；将超滤液浓缩至固含量30％，真空干燥即得桅子蓝色素。

实施例5：

（1）、将栀子果实粉碎得到大小为30目粉末，放入反应罐中，加入质量比为12:1的水浸泡3h，得到浸泡液；

（2）、将所述浸泡液进行动态逆流循环超声波提取，超声波频率40kHz，超声波功率为250W，在温度为60℃下、提取1h得到提取液；

（3）、在温度为60℃下，将所述提取液以1BV/h的流速通过依次并联的5个大孔吸附树脂柱A进行吸附，并得到废液A；通过的所述提取液与所述大孔吸附树脂柱A的体积比为9:1；

（4）、先用3倍大孔吸附树脂柱A体积的清水清洗所述大孔吸附树脂柱A，再用4倍大孔吸附树脂柱A体积的乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱A，得到洗脱液A，过滤，在压力0.095MPa，温度50℃的条件下真空浓缩、干燥，得色价不小于400、OD值不超过0.4的成品栀子黄色素；洗脱时间15h；

（5）、在温度为45℃下，将所述废液A以3BV/h的流速依次经过并联的3个大孔吸附树脂柱B进行吸附，并得到废液B，先用3倍大孔吸附树脂柱B体积的清水清洗所述大孔吸附树脂柱B，再用3倍大孔吸附树脂柱B体积的乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱B，得到洗脱液B，过滤，在压力0.09MPa，温度40℃的条件下真空浓缩、干燥，得到栀子总苷；洗脱时间6h；将上述栀子总甙精制结晶析出含量不低于90%（HPLC）和不低于95%（HPLC）且收率不低于30%栀子甙单体；

（6）、将所述废液A和/或废液BpH调至11.0，90℃保温3小时，在保温期间用NaOH维持溶液pH为11.0，然后冷却至室温，用柠檬酸调pH至3.0-5.5，过滤，得到滤液；向所述滤液中加入占所述滤液质量0.1%的β-葡萄糖苷酶，在48℃、pH 4.5条件下，酶解48h,得到酶解液；向所述酶解液中加入占所述酶解液质量的0.1%的丙氨酸和谷氨酸混合物，丙氨酸和谷氨酸的质量比为3:1；在pH5.0下，55℃反应80h，得到浓缩液一；通过超滤膜对上述浓缩液一在室温、压力为0.3ΜPa进行减压超滤，得超滤液一；将超滤液一浓缩至固含量30％，真空干燥即得桅子红色素。

实施例6：

（6）、向所述废液A和/或废液B中加入溶液质量1%的谷氨酸钠和pH值为8.0的HAc-NaAc缓冲对溶液，合成得到浓缩液二，合成温度为100℃，合成时间为5h。通过超滤膜对上述浓缩液二在室温、压力为0.3ΜPa进行减压超滤，得超滤液二；将超滤液浓缩至固含量25％，真空干燥即得桅子蓝色素。

（7）将上述所述步骤中的得到的任何废液在压力为0.1ΜPa条件下经超滤制得果胶浓缩液，果胶浓缩液经浓度为90%的乙醇沉降获得沉降物，沉降物经干燥和粉碎制得果胶粉。

对比例1：

（5）、在温度为60℃下，将所述废液A以2BV/h的流速经大孔吸附树脂柱B进行吸附，并得到废液B，先用2倍大孔吸附树脂柱B体积的清水清洗所述大孔吸附树脂柱B，再用4倍大孔吸附树脂柱B体积的乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱B，得到洗脱液B，过滤，在压力0.10MPa，温度60℃的条件下真空浓缩、干燥，得到栀子总苷；洗脱时间8h；

（6）、将所述废液A和/或废液BpH调至10.0，100℃保温2.5小时，在保温期间用NaOH维持溶液pH为10.0，然后冷却至室温，用柠檬酸调pH至3.0，过滤，得到滤液；向所述滤液中加入占所述滤液质量0.3%的β-葡萄糖苷酶，在45℃、pH5.O条件下，酶解40h,得到酶解液；向所述酶解液中加入占所述酶解液质量的0.5%的丙氨酸和谷氨酸混合物，丙氨酸和谷氨酸的质量比为4:1；在pH4.0下，50℃反应65h，得到浓缩液一；通过超滤膜对上述浓缩液一进行超滤，得超滤液一；将超滤液一浓缩至固含量25％，真空干燥即得桅子红色素。

对比例2：

（6）、向所述废液A和/或废液B中加入溶液质量1%的谷氨酸钠，合成得到浓缩液二，合成温度为90℃，合成时间为4h。通过超滤膜对上述浓缩液二进行超滤，得超滤液二；将超滤液浓缩至固含量50％，真空干燥即得桅子蓝色素。

对比例3：

一种栀子果实有效成分综合提取工艺，包括下述步骤：

（1）、将栀子果实粉碎得到大小为150目粉末，放入反应罐中，加入质量比为5:1的水浸泡3h，得到浸泡液；

（2）、将所述浸泡液进行动态逆流循环超声波提取，超声波频率10kHz，超声波功率为200W，在温度为40℃下、提取2h，得到提取液；

（5）、在温度为50℃下，将所述废液A以1BV/h的流速经大孔吸附树脂柱B进行吸附，并得到废液B，先用2.5倍大孔吸附树脂柱B体积的清水清洗所述大孔吸附树脂柱B，再用5倍大孔吸附树脂柱B体积的乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱B，得到洗脱液B，过滤，在压力0.095MPa，温度50℃的条件下真空浓缩、干燥，得到栀子总苷；洗脱时间6.5h；

（6）、将所述废液A和/或废液BpH调至12.0，80℃保温2小时，在保温期间用NaOH维持溶液pH为12.0，然后冷却至室温，用柠檬酸调pH至5.5，过滤，得到滤液；向所述滤液中加入占所述滤液质量0.5%的β-葡萄糖苷酶，在50℃、pH 4.0条件下，酶解45h,得到酶解液；向所述酶解液中加入占所述酶解液质量的1%的丙氨酸和谷氨酸混合物，丙氨酸和谷氨酸的质量比为4:1；在pH6.0下，60℃反应60h，得到浓缩液一；通过超滤膜对上述浓缩液一在室温、压力为0.4ΜPa进行减压超滤，得超滤液一；将超滤液一浓缩至固含量20％，真空干燥即得桅子红色素。

对比例4：

一种栀子果实有效成分综合提取工艺，包括下述步骤：

（6）、向所述废液A和/或废液B中加入溶液质量5%的谷氨酸钠和pH值为7.5的NaH₂PO₄-Na₂HPO₄缓冲对溶液，合成得到浓缩液二，合成温度为8O℃，合成时间为3h。通过超滤膜对上述浓缩液二在室温、压力为0.4ΜPa进行减压超滤，得超滤液二；将超滤液浓缩至固含量20％，真空干燥即得桅子蓝色素。

对比例5：

一种栀子果实有效成分综合提取工艺，包括下述步骤：

（1）、将栀子果实粉碎得到大小为100目粉末，放入反应罐中，加入质量比为15:1的水浸泡3h，得到浸泡液；

（3）、在温度为45℃下，将所述提取液以3BV/h的流速通过1个大孔吸附树脂柱A进行吸附，并得到废液A；通过的所述提取液与所述大孔吸附树脂柱A的体积比为10:1；

（5）、在温度为50℃下，将所述废液A以1BV/h的流速经1个大孔吸附树脂柱B进行吸附，并得到废液B，先用2.5倍大孔吸附树脂柱B体积的清水清洗所述大孔吸附树脂柱B，再用5倍大孔吸附树脂柱B体积的乙醇洗脱所述大孔吸附树脂柱B，得到洗脱液B，过滤，在压力0.095MPa，温度50℃的条件下真空浓缩、干燥，得到栀子总苷；洗脱时间6.5h；

对比例6：

1）将栀子果风干，粉碎脱皮，将脱皮后的栀子仁装入容器内，加入栀子仁8 倍体积的乙醇回流提取3次，每次2小时，温度控制在50℃，得到提取液；

2）将提取液浓缩至提取液体积的1/5 ；

3）将浓缩液加入5 倍水稀释，并通过160目过滤装置进行过滤，得到澄清过滤液；

4）过滤液在温度为40℃，流速为4BV/h条件下，大孔吸附树脂D101吸附，再用6倍柱体积蒸馏水洗杂，然后用10倍柱体积20%乙醇洗脱，并接收洗脱液Ⅰ；

5）用10倍柱体积70%乙醇洗脱，并接收洗脱液Ⅱ；

6）将步骤4）得到的洗脱液Ⅰ在温度为40℃，流速为4BV/h 条件下，上大孔吸附树脂D101吸附，再用6倍柱体积蒸馏水洗杂，然后用10倍柱体积70% 乙醇洗脱，并接收洗脱液Ⅲ ；

7）步骤6）得到的洗脱液Ⅲ经超滤膜膜分离，得到透明澄清膜透过液Ⅰ；

8）步骤7）得到的膜透过液经减压浓缩，温度低于80℃，至无醇味，得栀子苷母液；

9）步骤5）得到的洗脱液Ⅱ经超滤膜膜分离，得到透明澄膜透过液Ⅱ ；

10）步骤9）得到的膜透过液Ⅱ经减压浓缩，温度低于80℃，至无醇味；浓缩膏进行冷冻，即得栀子黄色素；

11）向步骤8）得到的栀子苷母液加入20 倍1mol/L 的碱液，反应12h，保持温度80℃，

12）向步骤11）得到的栀子苷酸化母液中加入栀子苷酸化母液质量1/500 的果胶酶，加入质量体积比为1 ：30 亮氨酸（即亮氨酸质量：栀子苷酸化母液体积为1:30），反应45 小时，保持温度75℃，反应结束后，升温至105℃灭酶活；

13）反应混合液离心或者过滤；

14）将滤液打入酸沉灌，调节pH 值至3，使色素沉淀；

15）将上述酸沉混合液离心或过滤，得栀子红色素粗品；

16）将粗品加40% 碱液使其完全溶解，使其形成固含为40% 的色素溶液；

17）将上述打浆液过160 目微孔滤膜，得栀子红色素溶液；

18）将栀子红色素溶液经减压浓缩，温度低于80℃，浓缩膏进行冷冻干燥，即得栀子红色素。

对各实施例和对比例所得到的各色素的性能进行检测，结果如下：

1.栀子黄

2.栀子红：

3.栀子蓝：

通过检测结果看出，通过本发明所提供的工艺得到的栀子黄、栀子红和栀子蓝色素无论是颜色、纯度、色价上都是明显优于对比例中的，而且实施例得到色素中的杂质和溶剂残留都明显低于对比例，得到的色素安全性更好。

Claims

1.一种栀子果实有效成分综合提取工艺，其特征在于：包括下述步骤：

2.根据权利要求1所述一种栀子果实有效成分综合提取工艺，其特征在于：将所述废液A和/或废液B的pH调至10.0-12.0，80-100℃保温2-3小时，然后冷却至室温，用柠檬酸调pH至3.0-5.5，过滤，得到滤液；向所述滤液中加入所述滤液质量0.1-0.5%的β-葡萄糖苷酶，进行酶解反应,得到酶解液；向所述酶解液中加入丙氨酸和谷氨酸混合物，在pH4.0-6.0下，50-60℃反应60-80h，得到浓缩液一；通过超滤膜对上述浓缩液一进行超滤，得超滤液一；将超滤液一浓缩至固含量20-30％，真空干燥即得桅子红色素。

3.根据权利要求1所述一种栀子果实有效成分综合提取工艺，其特征在于：向所述废液A和/或废液B中加入谷氨酸钠和pH值为7.0-8.0的缓冲溶液，合成得到浓缩液二，合成温度为8O-100℃，合成时间为3-5h；通过超滤膜对上述浓缩液二进行超滤，得超滤液二；将超滤液浓缩至固含量20-30％，真空干燥即得桅子蓝色素。

4.根据权利要求1所述一种栀子果实有效成分综合提取工艺，其特征在于：所述提取液经过所述大孔吸附树脂A和/或所述废液A经过所述大孔吸附树脂B的流速为1-3BV/h，温度为45-60℃。

5.根据权利要求1所述一种栀子果实有效成分综合提取工艺，其特征在于：所述大孔吸附树脂柱A和所述大孔吸附树脂柱B均为并联设置的3-5根。

6.根据权利要求1所述一种栀子果实有效成分综合提取工艺，其特征在于：所述步骤（4）和所述步骤（5）中乙醇质量浓度为80%-85%。

7.根据权利要求2所述一种栀子果实有效成分综合提取工艺，其特征在于：所述酶解反应的条件为45-50℃、pH 4.0-5.O，酶解时间为40-48h。

8.根据权利要求2所述一种栀子果实有效成分综合提取工艺，其特征在于：所述保温的过程中补加NaOH维持pH为10-12。

9.根据权利要求2和3所述一种栀子果实有效成分综合提取工艺，其特征在于：所述超滤条件为室温，超滤压力为0.3-0.5ΜPa。

10.根据权利要求2所述一种栀子果实有效成分综合提取工艺，其特征在于：所述丙氨酸和谷氨酸混合物的加入量为所述酶解液质量的0.1-1%；丙氨酸和谷氨酸的质量比为3-5:1。