CN1771055A - 通过施用cd2拮抗剂预防或治疗t细胞恶性肿瘤的方法 - Google Patents

Abstract

本发明包括CD2拮抗剂，优选MEDI－507，其类似物、衍生物或抗原结合片段作为单剂疗法以预防、治疗、处理或改善癌症的用途，尤其是T－细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。本发明还包括CD2拮抗剂，优选MEDI－507，其类似物、衍生物或抗原结合片段与其他癌症治疗组合的用途。本发明还提供了含有CD2拮抗剂，优选MEDI－507，其类似物、衍生物或抗原结合片段的药物组合物，所含的CD2拮抗剂的量可有效预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T－细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

Description

通过施用CD2拮抗剂预防或治疗T细胞恶性肿瘤的方法

本申请要求2002年9月5日提交的美国临时专利申请号60/409,024和2002年9月12日提交的美国临时专利申请号60/410,385的优先权，它们在此处都被完整并入作为参考。

1.发明领域

本发明包括CD2拮抗剂，优选MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段用作单剂疗法以治疗、预防、处理或改善癌症的用途，尤其是T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。本发明还包括CD2拮抗剂，优选MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段与其他癌症治疗组合的用途。本发明还提供了含有CD2拮抗剂，优选MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段的药物组合物，所含的CD2拮抗剂的量可有效预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

2.发明背景

2.1癌

瘤或肿瘤是异常的不受控制的细胞生长导致的赘生物，其可以是良性或恶性的。良性肿瘤通常保持局部化。恶性肿瘤通称为癌。术语“恶性的”通常指肿瘤可以侵染或破坏邻近身体结构并扩散到远处而导致死亡(综述见Robbins和Angell，1976，Basic Pathology，第二版，W.B.Saunders Co.，Philadelphia，68-122页)。癌可以从身体的许多部位产生并且根据其起源而表现不同。癌性细胞破坏它们所起源的身体部分然后扩散到身体的其他部分，在那里它们开始新的生长并导致更多破坏。

每年120万以上的美国人患癌症。癌症是美国第二位首要死因并且如果当前趋势持续下去，预计到2010年癌症将是第一位的死因。肺癌和前列腺癌是美国男人的主要癌症杀手。肺癌和乳腺癌是美国女人的主要癌症杀手。美国每两个男性中就有一个在他的生命期间某一时间将被诊断患癌。美国每三个女性中就有一个在她的生命期间某一时间将被诊断患癌。

2.2T-细胞恶性肿瘤

已经鉴定了T-细胞来源或者与T-细胞发育相关的其他细胞的肿瘤。T-细胞淋巴增殖失调包括胸腺和胸腺后恶性。T-细胞肿瘤包括淋巴祖细胞、胸腺基质细胞或上皮细胞、胸腺细胞、T-细胞、天然杀伤(“NK”)细胞或抗原呈递细胞的肿瘤。T细胞恶性肿瘤包括急性淋巴母细胞白血病、淋巴瘤、胸腺瘤、急性淋巴母细胞白血病、何杰金氏病和非何杰金氏病。根据T-细胞怎样受到影响将淋巴瘤分类。更深入的淋巴瘤分类和类型列表可从参考文献列表并且在下文表1中总结。T-淋巴瘤包括，例如，淋巴母细胞淋巴瘤、退行性(anaplastic)大细胞淋巴瘤、外周T-细胞淋巴瘤、血管免疫母细胞淋巴瘤、血管中心型淋巴瘤(鼻T-细胞淋巴瘤)、肠T-细胞淋巴瘤，和成人T-细胞淋巴瘤/白血病，下面讨论它们中的一些。

淋巴母细胞淋巴瘤

淋巴母细胞淋巴瘤是一种主要的侵染性T-细胞淋巴瘤，其主要发生在儿童和青少年中，其中淋巴母细胞淋巴瘤占儿童期淋巴瘤的约一半。约2/3的患者是男性。在40岁以上的患者中见到第二个发病峰。淋巴母细胞淋巴瘤和淋巴母细胞白血病之间的区别部分(武断地)基于骨髓受连累的程度。主要的生物学不同是淋巴母细胞白血病主要是B-细胞疾病，不像髓外，主要是T-细胞淋巴母细胞淋巴瘤。

T-细胞幼淋巴细胞白血病(“T-PLL”)

T-细胞幼淋巴细胞白血病是一种罕见的侵染性胸腺后恶性肿瘤，具有明显的临床和形态以及细胞遗传特征(综述见Matutes E.等人，1991 Blood，78：3269-74)。T-PLL对化疗有抗性并且具有低存活期中位数(7.5月)。尽管一些患者可能最初疾病进展缓慢，但是它们最终恶化并且结果是类似的。需要新的治疗方法以改善该致命疾病的结果。

成人T-细胞白血病/淋巴瘤(“ATL”)

成人T-细胞白血病(“ATL”)是与人T细胞白血病I型病毒(HTLV-1)有关的一种T细胞恶性肿瘤。它是成熟CD4+淋巴细胞的一种侵染性致命恶性肿瘤(见综述Hatta等人，2002，Leukemia，16：1069-85；Yamada Y.1983，Blood，61：192-9)。ATL在日本南部和加勒比海盆地中普遍并且在非洲、拉丁美洲、中东和美国偶发。由于白血病细胞对常规化疗的内在抗性，ATL具有差的预后。

ATL已经被分成4个主要亚型。在相对郁积和慢性形式中，存活期中位数为2年或更长时间。在急性或淋巴瘤性形式中，存活期中位数为13个月。造血干细胞移植和化疗已经用于ATL治疗。

退行性大细胞淋巴瘤(Ki-30/CD-30)

退行性大细胞淋巴瘤(“ALCL”)可以在儿童或青年人中是全身性的或者皮肤的(皮肤内或上)。局限于皮肤的疾病生长相当缓慢(惰性)并且保持局限于皮肤，有许多自发缓解的例子——通常称为“经典”ATCL在儿童和青少年中最普遍并且具有高频率基因易位t(2；5)。原发性皮肤ALCL倾向于更多地在成年人中发生并且缺乏易位。更多病例是T-细胞或未知细胞型(null)。ALCL的全身性形式涉及淋巴结和结外部位。化疗已经用于治疗ALCL的全身性形式。

表1：T-细胞淋巴增殖性失调

T-细胞和NK-细胞肿瘤	结节淋巴细胞优势的何杰金淋巴瘤经典何杰金淋巴瘤结节性硬化经典何杰金淋巴瘤混合的细胞性经典何杰金淋巴瘤淋巴细胞-耗尽的经典何杰金淋巴瘤
		前体T-细胞肿瘤	前体T淋巴母细胞白血病淋巴瘤芽殖NK细胞淋巴瘤
成熟T-细胞和NK细胞肿瘤	T-细胞幼淋巴细胞淋巴瘤T-细胞大粒状淋巴细胞淋巴瘤侵染性NK细胞白血病成年T-细胞白血病/淋巴瘤结外NK/T细胞淋巴瘤，鼻型肠病型T-细胞淋巴瘤肝脾T-细胞淋巴瘤原发皮肤退行性大细胞淋巴瘤外周T-细胞淋巴瘤，未指定的angioimmunoblasticT-细胞淋巴瘤退行性大细胞淋巴瘤

2.3癌症治疗

当前，癌症治疗可包括手术、化疗、激素治疗和/或放疗以除去患者中的肿瘤细胞(见，例如，Stockdale，1998，″癌症患者处理原理″，Scientific American：Medicine，卷3，Rubenstein andFederman，编辑，12章，第IV节)。最近，癌症治疗也已经使用生物疗法或免疫疗法。所有这些方法都对患者造成明显的缺点。例如手术可由于患者的健康而被禁忌或者不能被患者接受。此外，手术可能没有完全除去瘤性组织。仅当瘤性组织表现出比正常组织对放射更高敏感性的时候放疗才有效，并且放疗也可以引起严重的副作用。激素治疗很少作为单一药剂施用并且虽然其可以有效，但是通常用于其他治疗已经除去大部分癌细胞后防止或延缓癌症的复发。生物学疗法/免疫疗法在数量上有限并且可产生副作用如皮疹或肿大、类似流感的症状，包括发热、寒战和疲劳、消化道问题或变态反应。

关于化疗，可以利用各种化疗剂治疗癌症。大多数癌症化疗剂通过抑制DNA合成，直接或间接通过抑制脱氧核糖核苷酸三磷酸前体的生物合成以防止DNA复制或伴随的细胞分裂而起作用(见，例如，Gilman等人，Goodman和Gilman：The Pharmacological Basis ofTherapeutics，第八版(Pergamom Press，New York，1990))。这些试剂包括烷化剂如亚硝基脲、抗代谢剂如氨甲蝶呤和羟基脲，和其他试剂如，例如，依托泊苷、campathecins、博莱霉素、阿霉素，和柔红霉素，它们尽管不一定是细胞周期特异的，但是由于它们对DNA复制的影响而在细胞周期的S期杀死细胞。其他试剂，特别是秋水仙素和长春花生物碱类，如长春花碱和长春新碱，干扰微管装配而导致有丝分裂抑制。化疗方案通常包括施用化疗剂的组合以增加治疗的效能。

尽管可以利用各种化疗剂，但是化疗有许多缺点(见，例如，Stockdale，1998，″癌症患者处理的原理″：Scientific AmericanMedicine，卷3，Rubenstein和Federman，编者，12章，10节)。几乎所有化疗剂都是有毒的，并且化疗导致明显且通常危险的副作用，包括严重恶性、骨髓抑制、免疫抑制，等。此外，即使施用化疗剂的组合，许多肿瘤细胞也对这些化疗剂是抗性的或者产生抗性。实际上，对用于治疗方案中的特定化疗剂有抗性的那些细胞通常被证明对其他药物，甚至作用机理与该特定治疗中的药物的作用机理不同的那些药物也有抗性；该现象被称为多效药物或多种药物抗性。从而，由于药物抗性，证明许多癌症是标准化疗治疗方案难治的。

强烈需要备选癌症疗法，尤其需要标准癌症治疗，如手术、放疗、化疗和激素治疗难治的癌症的疗法。此外，癌症仅被一种方法治疗是不寻常的。从而，需要开发新的癌症治疗剂和新的、更有效的治疗组合以治疗癌症。

2.4T-细胞表面抗原

T细胞通过与靶细胞和抗原呈递细胞相互作用而在免疫应答中发挥主要作用。这些相互作用是高度特异的并且依赖于T细胞上一种特异抗原受体对靶细胞或抗原呈递细胞表面上抗原的识别。各种T细胞表面蛋白，例如，抗原受体复合体CD3和辅助粘附分子如CD4、LFA-1、CDS和CD2也促进T细胞和其他细胞的受体-抗原相互作用。

T细胞上的特征性细胞表面标记物已经成为癌症治疗的靶标。已经检查了针对T-细胞表面标记物，包括CD2、CD3、CD4、CD11a和CD25的抗体例如作为免疫抑制剂(见Berlin等人，1992 Transplantation53：840；Latinne等人，1996 Int.Immunol.8：1113)。

本发明涉及CD2拮抗剂，特别是MEDI-507(识别CD2T细胞标记物的一种人源化单克隆抗体)在预防、治疗、处理，或改善癌症中的用途，特别是T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。人CD2(T11)分子是在95％以上的胸腺细胞和几乎所有外周T淋巴细胞上表达的一种50kDa的表面糖蛋白。CD2通过与靶细胞上的其主要配体CD58(或LFA-3)相互作用而作为粘附分子。针对CD2的单克隆抗体是本领域中公知的，并且它们主要针对CD2的两个位点：称为T11-1(区域2)和T11-2(区域1)(见Denning等人，1987 J.Immunology 139：2573；Peterson等人，1987 Nature：329：842)。

此处参考文献的引用或讨论将不被理解为承认这些参考文献是本发明的现有技术。

3.发明概述

本发明包括MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段作为单剂疗法以预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的用途。具体地，本发明包括MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段在治疗当前标准或实验性癌症疗法，特别T-细胞恶性肿瘤的疗法部分或完全难以治疗的受试者中的用途。本发明提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段。具体地，本发明提供了预防、治疗、处理或改善进展缓慢或侵袭性T-细胞白血病或T细胞淋巴瘤的方法，条件是该T细胞淋巴瘤不是皮肤T细胞淋巴瘤，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段。在特定实施方案中，通过对需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段预防、治疗、处理或改善了淋巴母细胞白血病、成年T-细胞白血病或何杰金氏淋巴瘤。在优选的实施方案中，通过对需要的受试者施用预防或治疗有效量的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段预防、治疗、处理或改善了非皮肤性T细胞恶性肿瘤。

本发明还提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要的受试者施用缀合治疗剂或药物的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段。可以缀合到MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段的治疗剂包括，但不限于，细胞因子、毒素、放射性元素、和抗代谢剂。在特定实施方案中，将预防或治疗有效量的缀合肿瘤相关抗原特异的抗体的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段施用于需要该治疗的受试者以预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，将预防或治疗有效量的缀合对非CD2的免疫细胞表面抗原特异的抗体或配体的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段施用于需要该治疗的受试者以预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在一些实施方案中，缀合毒素(例如细胞毒素或免疫毒素)或放射性元素的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段不被施用于需要该治疗的受试者以预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

在一个实施方案中，MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段的使用增强了癌症的标准或实验治疗方案的效能。在优选的实施方案中，MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段的使用增强了T-细胞恶性肿瘤的标准或实验治疗方案(例如，化疗、放射免疫疗法，或放疗)的效能。在另一实施方案中，MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段的使用延长了被诊断为T-细胞恶性肿瘤的受试者的存活时间。

本发明包括MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段与标准或实验性癌症疗法组合在预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途。本发明提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段，和一种或多种预防或治疗剂，优选非CD2拮抗剂的预防或治疗剂，其当前正用于，或者已经用于或者公知将用于预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。本发明还提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要的受试者施用预防或治疗有效量的缀合到治疗剂或药物的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段，和一种或多种预防或治疗剂，优选非CD2拮抗剂的预防或治疗剂，其当前正用于，或者已经用于或者公知将用于预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。可以与MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段组合使用以预防、治疗、处理或改善癌症的治疗剂的实例包括但不限于，化疗剂、治疗性抗体，和血管生成抑制剂。尤其与MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段组合使用以预防、治疗、处理或改善T-细胞恶性肿瘤的治疗剂的实例包括但不限于，Campath、抗-Tac、嘌呤类似物、戊糖苷、细胞毒性剂、抗逆转录病毒剂、三氧化二砷、α-干扰素，和抗癌剂。可以与MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段组合使用的化疗剂包括但不限于烷基化剂、抗代谢物、天然产物，和激素。本发明的组合疗法能够降低MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段的剂量和/或降低MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段施用于癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤患者以实现治疗或预防效果的施用频率。

本发明提供了按照本发明的方法使用的药物组合物，所述药物组合物含有MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段，所含的量可有效预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，还含有药学上可接受的载体。在特定实施方案中，药物组合物含有对预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状有效量的编码MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段的核酸分子和药学上可接受的载体。

本发明提供了按照本发明的方法使用的药物组合物，所述药物组合物含有缀合到治疗剂或药物的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段，所含的量可有效预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，还含有药学上可接受的载体。在一些实施方案中，这些组合物不含有缀合到毒物或放射性元素的MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段。本发明还提供了按照本发明的方法使用的药物组合物，所述药物组合物含有MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段、非CD2拮抗剂的预防或治疗剂，和药学上可接受的载体。

在各种实施方案的每一种中，可通过肠胃外施用(例如，皮内、肌内、腹膜内、静脉内和皮下施用)、硬膜外施用、局部施用和粘膜施用(例如，鼻内)，或口服施用方法施用含有MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段的药物组合物。在特定实施方案中，皮下、肌内或静脉内施用含有MEDI-507，其类似物、衍生物或抗原结合片段的药物组合物。

在备选实施方案中，本发明包括非MEDI-507的一种或多种CD2拮抗剂在预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途。本发明提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的一种或多种不同于MEDI-507的CD2拮抗剂。本发明还提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要的受试者施用缀合到治疗剂或药物的CD2拮抗剂。在一些实施方案中，用于本发明的方法和组合物中的CD2拮抗剂没有缀合毒素或放射性元素。

在特定实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要的受试者施用预防或治疗有效量的免疫特异结合含有人CD2的氨基酸残基18、55或59的CD2表位的抗体(图1)，条件是所述抗体不是MEDI-507或LO-CD2a/BTI-322。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的免疫特异结合含有人CD2的氨基酸残基18和55的CD2表位的抗体(图1)。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的免疫特异结合含有人CD2的氨基酸残基18和59的CD2表位的抗体(图1)。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的免疫特异结合含有人CD2的氨基酸残基55和59的CD2表位的抗体(图1)，条件是所述抗体不是MEDI-507或LO-CD2a/BTI-322。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的免疫特异结合人CD2或黑猩猩CD2但是不结合狒狒CD2的抗体，条件是所述抗体不是MEDI-507或LO-CD2a/BTI-322。

本发明提供了预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的非MEDI-507的一种或多种CD2拮抗剂组合其他癌症疗法。本发明还提供了含有非MEDI-507的一种或多种CD2拮抗剂的药物组合物和药盒，它们用于预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

3.1定义

如此处所用的，术语“T-细胞恶性肿瘤”指任一种T-细胞淋巴增殖失调，包括胸腺和胸腺后恶性肿瘤。T-细胞恶性肿瘤包括T-细胞起源的肿瘤。T-细胞恶性肿瘤指淋巴样祖细胞、胸腺细胞、T-细胞、NK-细胞，或抗原呈递细胞起源的肿瘤。在一些实施方案中，术语“T-细胞恶性肿瘤”指包括表达可按照本发明被靶定的CD2多肽的其他细胞类型，如与T-细胞发育、胸腺基质细胞和胸腺上皮细胞有关的细胞。T-细胞恶性肿瘤包括，但不限于，急性淋巴母细胞白血病、淋巴瘤、胸腺瘤、急性淋巴母细胞白血病、何杰金氏病和非何杰金氏病，条件是T-细胞恶性肿瘤不是皮肤T-细胞恶性肿瘤，尤其皮肤T-细胞淋巴瘤。在优选的实施方案中，T-细胞恶性肿瘤是全身性、非皮肤T-细胞恶性肿瘤。

如此处所用的，术语“附属的”和“联合”可以与“组合”或“组合的”互换使用。

如此处所用的，蛋白剂(例如，蛋白质、多肽和抗体)语境中术语“类似物”指一种蛋白剂，其具有与第二种蛋白剂类似或相同的功能但是不必含有与该第二种蛋白剂类似或相同的氨基酸序列，或者具有与该第二种蛋白剂类似或相同的结构。具有与第二种蛋白剂类似的氨基酸序列的蛋白剂满足下面条件的至少一项：(a)一种蛋白剂，其氨基酸序列与第二种蛋白剂的氨基酸序列具有至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性；(b)被核苷酸序列编码的蛋白剂，该核苷酸序列在严格条件下与编码至少5个连续氨基酸残基、至少10个连续氨基酸残基、至少15个连续氨基酸残基、至少20个连续氨基酸残基、至少25个连续氨基酸残基、至少40个连续氨基酸残基、至少50个连续氨基酸残基、至少60个连续氨基酸残基、至少70个连续氨基酸残基、至少80个连续氨基酸残基、至少90个连续氨基酸残基、至少100个连续氨基酸残基、至少125个连续氨基酸残基，或至少150个连续氨基酸残基的第二种蛋白剂的核苷酸序列杂交；和(c)被核苷酸序列编码的蛋白剂，该核苷酸序列与编码第二种蛋白剂的核苷酸序列具有至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。具有与第二种蛋白剂相似结构的蛋白剂指具有与第二种蛋白剂的相似的二级、三级或四级结构的蛋白剂。可通过本领域中技术人员公知的方法确定多肽的结构，这些方法包括，但不限于，肽测序、X-射线晶体学、核磁共振、圆二色性，和晶体电子显微术。

为了确定两个氨基酸序列或两个核苷酸序列的百分数同一性，为了最优比较目的将序列比对(例如，可以在第一个氨基酸或核酸序列中导入缺口以与第二个氨基酸或核酸序列最优比对)。然后比较相应氨基酸位置或核苷酸位置的氨基酸残基或核苷酸。当第一个序列中的一个位置被占据的氨基酸残基或核苷酸与第二个序列中相应位置的相同时，那么这两个分子在该位置是相同的。两个序列之间的百分数同一性是两个序列共有的相同位置的函数(即％同一性＝相同的重叠位置的数目/位置总数×100％)。在一个实施方案中，两个序列具有相同长度。

也可以使用数学算法确定两个序列之间百分数同一性。用于两个序列比较的数学算法的一个优选的非限制性实例是Karlin和Altschul，1990，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.87：2264-2268的算法，其在Karlin和Altschul，1993，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90：5873-5877中被改进。这种算法被并入到Altschul等人，1990，J.Mol.Biol.215：403的NBLAST和XBLAST程序中。可以用NBLAST核苷酸程序参数设置，例如得分＝100，字长＝12实施BLAST核苷酸搜索，以得到与本发明的核酸分子同源的核酸序列。可以用XBLAST核苷酸程序参数设置，例如得分＝50，字长＝3实施BLAST蛋白质搜索，以得到与本发明的蛋白质分子同源的氨基酸序列。为了得到用于比较目的的缺口比对，可以如Altschul等人，1997，NucleicAcids Res.25：3389-3402描述的利用缺口BLAST。备选地，可以用PSI-BLAST实施迭代搜索，其检测分子(Id.)之间远的关系。当利用BLAST、缺口BLAST和PSI-BLAST程序时，可以使用各自程序(例如XBLAST和NBLAST的)的默认参数(见，例如，NCBI网站)。用于序列比较的数学算法的另一优选的、非限制性实例是Myers和Miller，1988，CABIOS 4：11-17的算法。这种算法被并入到ALIGN程序(2.0版本)中，该程序是GCG序列比对软件包的一部分。当使用ALIGN程序比较氨基酸序列时，可以使用PAM120权重残基表、缺口长度罚分为12，缺口罚分为4。

可以用类似于上述的技术，允许或不允许缺口，确定两个序列之间的百分数同一性。在计算百分数同一性时，通常仅计算精确的匹配。

如此处所用的，非-蛋白剂语境中的术语“类似物”指第二种有机或无机分子，其具有与第一种有机或无机分子类似或相同的功能并且在结构上类似于该第一种有机或无机分子。

如此处所用的，术语“拮抗剂”指任一蛋白质、多肽、肽、抗体、抗体片段、大分子，或小分子(小于10kD)，其阻断、抑制、减小或中和另一分子的功能、活性和/或表达。在各种实施方案中，相对于对照如磷酸盐缓冲液(PBS)，拮抗剂将另一分子的功能、活性和/或表达减小至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％。

如此处所用的，术语“抗体”指单克隆抗体、合成的多特异性抗体、人抗体、人源化抗体、camelised抗体、单结构域抗体、嵌合抗体、单链Fvs(scFv)、单链抗体(包括双特异单链抗体)、Fab片段、F(ab’)片段、二硫键连接的Fvs(sdFv)，和抗-独特型(抗-Id)抗体(包括，例如，针对本发明抗体的抗Id-抗体)、intrabodies，和上面任一种的表位-结合片段。具体地，抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白的免疫学活性片段，即含有抗原-结合位点的分子。免疫球蛋白分子可以是任一类型(例如，IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、类别(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)或亚类。

如此处所用的，术语“CD2多肽”指CD2糖蛋白(a.k.a.T11或LFA-2)或其片段。在优选的实施方案中，CD2多肽是被免疫细胞如T-细胞和天然杀伤(“NK”)细胞表达的细胞表面50-55kDa糖蛋白。CD2多肽可来自任一物种。在一些实施方案中，CD2多肽是人或黑猩猩CD2分子。在其他实施方案中，CD2多肽不是狒狒CD2分子。CD2多肽的核苷酸和/或氨基酸序列可以在文献或公共数据库中发现，或者可以用本领域技术人员公知的克隆和测序方法确定该核苷酸和/或氨基酸序列。例如，可以在GenBank数据库中发现人CD2的核苷酸序列(见，例如，记录号X06143、AH002740和M16445)。在优选的实施方案中，CD2多肽是人CD2分子(见，例如，图1)。

如此处所用的，术语“竞争”指抑制或降低CD2结合分子，尤其LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507与CD2多肽结合的试剂，这可通过本领域技术人员熟知的竞争ELISA测定法或BIACORE测定法或者此处描述的方法评估(见，例如，5.8节)。在特定实施方案中，如通过竞争性ELISA测定法或BIAcore测定法所评估的，相对于对照如PBS，治疗或预防剂将CD2结合分子与CD2多肽的结合减小至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％。在优选的实施方案中，如通过竞争性ELISA测定法或BIAcore测定法所评估的，相对于对照如PBS，抗-CD2抗体将LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507与CD2多肽的结合减小至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％。

如此处所用的，在蛋白剂(例如，蛋白质、多肽，和抗体)语境中的术语“衍生物”指一种蛋白剂，其所含有的氨基酸序列已经通过氨基酸置换、缺失或加入的导入而被改变。如此处所用的术语“衍生物”还指一种蛋白剂，其例如通过将任一类型的分子共价粘附到该蛋白剂而被修饰。例如，但不限于，例如，通过糖基化、乙酰化、PEG化、磷酸化、酰胺化、通过公知的保护/封闭基团衍生、蛋白水解切割、连接到细胞配体或其他蛋白质等可以修饰抗体。使用本领域技术人员公知的技术通过化学修饰可以产生衍生的蛋白剂，这些技术包括，但不限于特异化学切割、乙酰化、甲酰化、衣霉素的代谢合成，等。此外，衍生的蛋白剂可以含有一种或多种非典型氨基酸。蛋白剂衍生物与其所衍生自的蛋白剂具有类似或相同的功能。

如此处所用的，非蛋白剂语境中的术语“衍生物”指基于第一种有机或无机分子的结构形成的另一种有机或无机分子。有机分子的衍生物包括，但不限于，例如，通过羟基、甲基、乙基、羧基或氨基的加入或缺失修饰的分子。有机分子也可以被酯化、烷基化和/或磷酸化。

如此处所用的，术语“有效量”指一种治疗的量，该量足够减小或改善癌症(尤其T-细胞恶性肿瘤)或者其一种或多种症状的严重性和/或持续时间，预防癌症(尤其T-细胞恶性肿瘤)或者其一种或多种症状的恶化，导致癌症(尤其T-细胞恶性肿瘤)或者其一种或多种症状退化，或者增强或提高另一种治疗(例如，预防或治疗剂)的预防或治疗效果。

如此处所用的，术语“表位”指在动物，优选哺乳动物，最优选人中具有抗原性或免疫原性活性的多肽或蛋白质的片段。具体地，如此处所用的术语“CD2表位”指在动物，优选哺乳动物，最优选人中具有抗原性或免疫原性活性的CD2多肽的片段。具有免疫原性活性的表位是引起动物中抗体应答的多肽或蛋白质的片段。具有抗原活性的表位是抗体免疫特异地结合的多肽或蛋白质的片段，该结合可通过本领域中的技术人员熟知的任一种方法，例如，通过免疫测定法测定。抗原表位不必是免疫原性的。

如此处所用的，术语“片段”指肽或多肽(包括，但不限于抗体)，其含有另一多肽氨基酸序列的至少5个邻接的氨基酸残基、至少10个邻接的氨基酸残基、至少15个邻接的氨基酸残基、至少20个邻接的氨基酸残基、至少25个邻接的氨基酸残基、至少40个邻接的氨基酸残基、至少50个邻接的氨基酸残基、至少60个邻接的氨基酸残基、至少70个邻接的氨基酸残基、至少80个邻接的氨基酸残基、至少90个邻接的氨基酸残基、至少100个邻接的氨基酸残基、至少125个邻接的氨基酸残基、至少150个邻接的氨基酸残基、至少175个邻接的氨基酸残基、至少200个邻接的氨基酸残基、或至少250个邻接的氨基酸残基。在特定实施方案中，多肽的片段保持该多肽的至少一种功能。

如此处所用的，术语“功能片段”指肽或多肽(包括，但不限于抗体)，其含有另一不同多肽氨基酸序列的至少5个邻接的氨基酸残基、至少10个邻接的氨基酸残基、至少15个邻接的氨基酸残基、至少20个邻接的氨基酸残基、至少25个邻接的氨基酸残基、至少40个邻接的氨基酸残基、至少50个邻接的氨基酸残基、至少60个邻接的氨基酸残基、至少70个邻接的氨基酸残基、至少80个邻接的氨基酸残基、至少90个邻接的氨基酸残基、至少100个邻接的氨基酸残基、至少125个邻接的氨基酸残基、至少150个邻接的氨基酸残基、至少175个邻接的氨基酸残基、至少200个邻接的氨基酸残基、或至少250个邻接的氨基酸残基，其中所述肽或多肽保持该另一不同多肽的至少一种功能。

如此处所用的，术语“融合蛋白”指一种多肽，其含有第一种蛋白质的氨基酸序列或者其功能片段、类似物或衍生物，和一种异源蛋白的氨基酸序列(即与第一种蛋白或者其功能片段、类似物或衍生物不同的第二种蛋白或者其功能片段、类似物或衍生物)。在一个实施方案中，融合蛋白含有融合(例如，可操作地连接)到异源蛋白、多肽或肽的预防或治疗剂。根据该实施方案，该蛋白、多肽或肽可以是或不是一种不同类型的预防或治疗剂。在一些实施方案中，融合蛋白含有具有CD2拮抗剂活性的蛋白、多肽或肽和异源蛋白、多肽或肽。在其他实施方案中，融合蛋白含有CD2结合分子和异源蛋白、多肽或肽。在特定实施方案中，融合蛋白含有MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段和异源多肽。根据这些实施方案，异源多肽为至少5个氨基酸残基、至少10个氨基酸残基、至少15个氨基酸残基、至少20个氨基酸残基、至少25个氨基酸残基、至少30个氨基酸残基、至少40个氨基酸残基、至少50个氨基酸残基、至少75个氨基酸残基、至少100个氨基酸残基、或至少150个氨基酸残基。

如此处所用的，术语“宿主细胞”包括用核酸分子转染的特定受试细胞和这种细胞的后代或潜在后代。这种细胞的后代由于在连续传代中可能发生突变或环境影响或者核酸分子整合到宿主基因组而可能与用该核酸分子转染的亲本细胞不同。

如此处所用的，术语“在严格条件下杂交”描述了杂交和洗涤条件，在该条件下相互具有至少60％(优选地，至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、或至少95％)相同的核苷酸序列通常保持相互杂交。这种严格条件是本领域技术人员公知的并且可以在Current Protocols in Molecular Biology，John Wiley & Sons，N.Y.(1989)，6.3.1-6.3.6中发现。在一个非限制性实例中，严格杂交条件是在6×氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中约45℃杂交，然后在0.1×SSC，0.2％SDS约68℃下洗涤一次或多次。在优选的、非限制性实例中，严格杂交条件是在6×SSC中约45℃杂交，然后在0.2×SSC，0.1％SDS，50-65℃洗涤一次或多次(例如，在50℃、55℃、60℃或65℃洗涤一次或多次)。应该理解本发明的核酸不包括在这些条件下仅杂交仅由A或T核苷酸组成的核酸序列的核酸分子。

如此处所用的，术语“免疫特异地结合抗原”和类似的术语指特异结合一种抗原或片段并且不特异结合其他抗原的肽、多肽、融合蛋白和抗体或其片段。免疫特异地结合抗原的肽或多肽可以以低亲和力结合其他肽或多肽，如通过例如，免疫测定法、BIAcore，或本领域中公知的其他测定法所确定的。免疫特异地结合抗原的抗体或片段可以与相关抗原交叉反应。优选地，免疫特异地结合抗原的抗体或片段不与其他抗原交叉反应。

如此处所用的，术语“免疫特异地结合CD2多肽”和类似术语指特异结合CD2多肽或其片段并且不特异结合其他多肽的肽、多肽、融合蛋白和抗体或其片段。免疫特异地结合CD2多肽的肽或多肽可以以低亲和力结合其他肽或多肽，如通过例如，免疫测定法、BIAcore，或本领域中公知的其他测定法所确定的。免疫特异地结合CD2多肽的抗体或片段可以与相关抗原交叉反应。优选地，免疫特异地结合CD2多肽的抗体或片段不与其他抗原交叉反应。可以通过，例如，免疫测定法、BIAcore，或本领域中公知的其他技术鉴定免疫特异地结合CD2多肽的抗体或片段。当抗体或其片段结合CD2多肽的亲和性比结合任何交叉反应抗原的亲和性更强时，该抗原或其片段特异结合CD2多肽，这可使用实验技术，如免疫测定法(RIA)和酶联免疫吸附测定法(ELISAs)确定。关于抗体特异性的讨论，见，例如，Paul，编著，1989，Fundamental Immunology第二版，Raven Press，New York，332-336页。

如此处所用的，术语“组合”指使用一种以上的疗法(例如，一种或多种预防和/或治疗剂)。术语“组合”的使用不限制预防和/或治疗剂施用于患有癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤的受试者的顺序。第一种预防或治疗剂可以在第二种治疗剂(例如，第二种预防或治疗剂)之前(例如，5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周、或12周之前)、同时，或者随后(例如，5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周、或12周之后)施用于患有癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤的受试者。

如此处所用的，蛋白剂(例如，肽、多肽、融合蛋白或抗体)中的术语“分离的”指一种蛋白剂，其基本上没有其细胞或组织来源的细胞材料或污染性蛋白，或者当该蛋白剂是化学合成时其基本上没有化学前体或其他化学药品。术语“基本上无细胞材料”包括蛋白剂制剂，其中该蛋白剂与细胞的细胞组分分开，其中该蛋白剂从该细胞分离或者重组产生。从而，基本上无细胞材料的蛋白剂包括具有小于约30％、20％、10％，或5％(按干重计)异源蛋白(此处也称为“污染性蛋白”)的蛋白剂制剂。当该蛋白剂是重组产生时，其还优选基本上无培养基，即，培养基占蛋白质制剂体积的约20％、10％，或5％以下。当通过化学合成产生蛋白剂时，其优选基本上无化学前体或其他化学药品，即，该蛋白剂从与其合成有关的化学前体或其他化学药品分离。因此，这种蛋白剂制剂所含有的不同于目标蛋白剂的化学前体或化合物小于约30％、20％、10、5％(按干重计)。在特定实施方案中，分离CD2拮抗剂或CD2结合分子。在优选的实施方案中，分离MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段。

如此处所用的，核酸分子语境中的术语“分离的”指一种核酸分子，其与存在于该核酸分子的天然来源中的其他核酸分子分离。此外，“分离的”核酸分子，如cDNA分子，当通过重组技术产生时，可以基本上无其他细胞材料或者培养基，或者当通过化学合成时，可以基本上无化学前体或其他化学药品。在特定实施方案中，分离了编码CD2拮抗剂的核酸分子。在优选实施方案中，分离了编码MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的核酸分子。

如此处所用的，术语“处理”指受试者从治疗(例如，预防或治疗剂)得到的有益效果，该治疗不导致癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤的治愈。在一些实施方案中，受试者被施用一种或多种治疗(例如，一种或多种预防或治疗剂)以“处理”癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，从而预防该癌症的发展或恶化。

如此处所用的，术语“非应答的”和“难治的”描述了用癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的当前可利用的预防或治疗剂治疗的患者，该预防或治疗剂不足够在临床上减轻与癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状相关的一种或多种症状的。通常，这些患者患有严重的、持久活动的疾病并且需要额外的治疗以改善与癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状相关的症状。

如此处所用的，术语“核酸”和“核苷酸序列”包括DNA分子(例如，cDNA、或基因组DNA)、RNA分子(例如，mRNA)、DNA和RNA分子的组合或者杂交DNA/RNA分子，和DNA或RNA分子的类似物。可以用，例如，核苷酸类似物产生类似物，该核苷酸类似物包括，但不限于，次黄苷或三苯甲基化碱基。这些类似物还可以包括含有修饰的主链的DNA或RNA分子，该修饰的主链赋予该分子有益性质如，例如，核酸酶抗性或穿过细胞膜的能力增加。核酸或核酸序列可以是单链的、双链的，并且可以含有单链和双链部分，并且可以含有三链部分，但是优选双链DNA。

如此处所用的，术语“预防剂”指可用于预防癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤的任何试剂。在一些实施方案中，术语“预防剂“指CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)。在一些其他实施方案中，术语“预防剂”不指CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)。优选地，预防剂是公知将用于，或者已经或者当前正用于预防或阻碍癌症、尤其T-细胞恶性肿瘤的发展、发作或恶化的试剂。

如此处所用的，术语“预防”、“防止”指由于施用治疗(例如，预防或治疗剂)或者治疗的组合(例如，预防和/或治疗剂的组合)导致受试者中癌症(尤其T-细胞恶性肿瘤)发展或发作的抑制或预防癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤的一种或多种症状的复发、发作或恶化。

如此处所用的，术语“预防有效量”指预防剂的量足够防止癌症(尤其T-细胞恶性肿瘤)或其一种或多种症状。

如此处所用的，“预防方案”指施用一种或多种预防剂的剂量和时间选择的方案。

如此处所用的，“方案”包括给药时间表和给药方案。此处的方案是使用方法并且包括预防和治疗方案。

如此处所用的，短语“副作用”包括治疗(例如，预防和/或治疗剂)的不需要的和不利的作用。不利的作用总是不需要的，但是不需要的作用不一定是不利的。预防和治疗剂的不利作用可以是有害的或者不舒服的或者危险的。

如此处所用的，术语“小分子”和类似术语包括，但不限于，分子量小于1,000g/mol的有机和无机化合物(即，包括异有机(heterorganic)和有机金属化合物)。在优选实施方案中，“小分子”包括分子量小于750g/mol的有机或无机化合物。在另一特定实施方案中，“小分子”包括分子量小于500g/mol的有机或无机化合物。还包括这些化合物的盐、酯，和其他药学上可接受的形式。

如此处所用的，术语“受试者”和“患者”互换使用。如此处所用的，术语“受试者”指动物，优选哺乳动物，包括，但不限于，非灵长类动物(例如，奶牛、猪、马、猫、狗、大鼠和小鼠)和灵长类动物(例如，猴，如猕猴和人)，更优选地，人。在特定实施方案中，受试者是患有癌症的人。在优选的实施方案中，受试者是患有不同于皮肤T-细胞淋巴瘤的T-细胞恶性肿瘤的人。在另一实施方案中，受试者是非人动物如鸟(例如，鹌鹑、鸡，和火鸡)，农场动物(例如，奶牛、马、猪，和绵羊)，宠物(例如，猫、狗，和豚鼠)，或者实验动物(例如，T-细胞恶性肿瘤的动物模型，如患有T-细胞恶性肿瘤的黑猩猩和小鼠)。

如此处所用的，术语“协同的”指治疗的组合(例如，预防和/或治疗剂的组合)，其比任何两种或多种单一治疗(例如，两种或多种单一预防或治疗剂)的加合效果更有效。治疗的组合(例如，预防或治疗剂)的协同效果允许使用更低剂量的一种或多种治疗(例如，一种或多种预防和/或治疗剂)和/或所述治疗施用于患有癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤的受试者的频率更低。能够使用更低剂量的治疗(例如，预防和/或治疗剂)和/或频率更低地使用所述治疗可以减少将所述治疗施用于受试者相关的毒性而不减少所述治疗在预防、治疗、处理、或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的效能。此外，协同效果可以提高疗法(例如，预防和/或治疗剂)在预防、治疗、处理、或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的功效。最后，疗法的组合(例如，预防和/或治疗剂)的协同效果可以避免或减少与任一单一疗法的使用相关的不利的或者不需要的副作用。

如此处所用的，术语“疗法”可以指用于预防、治疗、处理、或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的任何一种或多种方案、一种或多种方法和/或一种或多种试剂。在一些实施方案中，术语“疗法”指本领域中技术人员，例如，医学专业人员，如医生公知的用于预防、治疗、处理、或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的抗癌剂、生物学疗法、支持疗法和/或其他疗法。

如此处所用的，术语“治疗剂”指可用于预防、治疗、处理、或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的任何一种或多种试剂。在一些实施方案中，术语“治疗剂”指CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)。在一些其他实施方案中，术语“治疗剂”不指CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)。优选地，治疗剂是公知可用于，或者已经或者当前正用于预防、治疗、处理、或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的试剂。

如此处所用的，术语“治疗有效量”指疗法(例如，预防或治疗剂)的量，该量足够减小癌症(尤其，T-细胞恶性肿瘤)的严重性、减少癌症(尤其，T-细胞恶性肿瘤)的持续时间、改善癌症(尤其，T-细胞恶性肿瘤)的一种或多种症状、防止或延缓癌症(尤其，T-细胞恶性肿瘤)的恶化，导致癌症(尤其，T-细胞恶性肿瘤)的退化，或者增强或提高另一种疗法(例如，预防或治疗剂)的一种或多种治疗效果。

如此处所用的，术语“治疗方案”指一种或多种治疗剂的剂量和施用时间选择方案。

如此处所用的，术语“治疗”指一种或多种疗法(例如，一种或多种预防和/或治疗剂)的施用导致减轻和改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的恶化、严重性，和/或持续时间。

4.附图简述

图1.描述了人CD2氨基酸序列(SEQ ID NO：7)。

图2.用荧光-激活的细胞分选仪(“FACS”)分析MEDI-507与MET-1成人T-细胞白血病(“ATL”)细胞的结合。

图3.用MET-1白血病细胞注射并以每周4次PBS、每周4次100μg MEDI-507、每周4次100μg HAT、每周4次100μg MEDI-507与人源化抗-Tac(“HAT“)、每周1次100μg MEDI-507持续6个月施用的非肥胖糖尿病(“NOD”)/重症联合免疫缺陷(“SCID”)小鼠中人β-2微球蛋白(“β₂μ”)的平均浓度。

图4.用MET-1白血病细胞注射并以每周4次PBS、每周4次100μg MEDI-507、每周4次100μg HAT、每周4次100μg MEDI-507与HAT、每周1次100μg MEDI-507持续6个月施用的NOS/SCID小鼠和未注射MET-1白血病细胞和没有施用治疗剂的NOS/SCID小鼠的Kaplan-Meier存活图。

图5.在注射MET-1白血病细胞并以每周施用100μg MEDI-507持续6个月的NOS/SCID小鼠中观察到的人β₂μ水平的变化。

图6.MET-1FcRγ敲除的和FcRγ完整的携带ATL的NOS/SCID小鼠的Kaplan-Meier存活图。

5.发明详述

本发明包括治疗方案，其提供了比关于癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的当前的单剂疗法或组合疗法更好的预防或治疗概况(profile)。本发明提供了基于CD2拮抗剂的疗法以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。具体地，本发明提供了预防和治疗方案以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，该方案包括对需要治疗的患者施用MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原片段。

本发明还提供了用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的含有CD2拮抗剂的药物组合物和药盒。具体地，本发明提供了含有MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的药物组合物和药盒。

5.1MEDI-507、其衍生物、类似物、抗原结合片段

本发明包括MEDI-507(MedImmune，Inc.，Gaithersburg，MD；Branco等人，1999，Transplantation 68(10)：1588-1596)、其类似物、衍生物或抗原结合片段(例如，MEDI-507的一个或多个互补决定区(“CDRs”)在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途。MEDI-507在例如，国际公开号WO 99/03502、国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761和美国专利序列号09/462,140、10/091,268、和10/091,313中公开，这些文献的每一篇都在此处完整并入作为参考。MEDI-507是一种人源化IgG1κ类单克隆抗体，其免疫特异地结合人CD2多肽。用分子技术将来自大鼠单克隆抗体LO-CD2a/BTI-322的CDRs插入人IgG1框架构建MEDI-507。LO-CD2a/BTI-322具有在例如美国专利号5,730,979、5,817,311和5,951,983；以及美国申请序列号09/056,072和09/462,140(每一篇都在此处完整并入作为参考)中公开的氨基酸序列，或者通过1993年6月28日保藏在美国典型培养物保藏中心(ATCC)10801 University Boulevard，Manassas，Virginia20110-2209保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的氨基酸序列。

本发明包括免疫特异地结合本发明的CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有可变重(“VH”)结构域，其具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VH结构域的氨基酸序列。具体地，本发明包括单结构域抗体，其含有具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VH结构域的氨基酸序列的两个VH结构域。本发明还包括免疫特异地结合CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有VH CDR，其具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VH CDR的任一个的氨基酸序列。具体地，本发明包括免疫特异地结合CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有具有表2中所列VH CDRs的任一个的氨基酸序列的VH CDR。

表2.LO-CD2a/BTI-322的CDR序列

CDR	序列	SEQ ID NO：
			VH1	EYYMY	1
VH2	RIDPEDGSIDYVEKFKK	2
			VH3	GKFNYRFAY	3
VL1	RSSQSLLHSSGNTYLN	4
			VL2	LVSKLES	5
VL3	MQFTHYPYT	6

在一个实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ IDNO：1的氨基酸序列的VH CDR1的抗体用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列的VH CDR2的抗体用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ ID NO：3的氨基酸序列的VH CDR3的抗体用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在优选的实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的VH CDR1、具有SEQ IDNO：2的氨基酸序列的VH CDR2、并且具有SEQ ID NO：3的氨基酸序列的VH CDR 3的抗体用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

本发明包括免疫特异地结合CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有可变轻(“VL”)结构域，该结构域具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VL结构域的氨基酸序列。本发明还包括免疫特异地结合CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有VL CDR，其具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VL CDR的氨基酸序列。具体地，本发明包括免疫特异地结合CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有具有表2(如前)中所列的VL CDRs任一个的氨基酸序列的VL CDR。

在一个实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ IDNO：4的氨基酸序列的VL CDR1的抗体用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VL CDR2的抗体用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的VL CDR3的抗体用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在优选的实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ ID NO：4的氨基酸序列的VL CDR1、具有SEQ IDNO：5的氨基酸序列的VL CDR2、并且具有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的VL CDR 3的抗体用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

本发明包括免疫特异地结合CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有此处公开的VH结构域与此处公开的VL结构域，或者其他VL结构域的组合。本发明还包括免疫特异地结合CD2多肽的抗体在，预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有此处公开的VL结构域与此处公开的VH结构域，或者其他VH结构域的组合。

具体地，本发明包括免疫特异地结合CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的一种或多种VH CDRs和一种或多种VL CDRs。本发明还包括免疫特异地结合CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有表2中所列的一种或多种VH CDRs和一种或多种VL CDRs。更特别地，本发明包括免疫特异地结合CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有VH CDR1和VL CDR1；VH CDR1和VL CDR2；VH CDR1和VL CDR3；VH CDR2和VL CDR1；VH CDR2和VL CDR2；VH CDR2和VL CDR3；VH CDR3和VH CDR1；VH CDR3和VL CDR2；VH CDR3和VL CDR3；VH 1CDR1、VH CDR2和VL CDR1；VH CDR1、VH CDR2和VL CDR2；VHCDR1、VH CDR2和VL CDR3；VH CDR2、VH CDR3和VL CDR1、VH CDR2、VH CDR3和VL CDR2；VH CDR2、VH CDR2和VL CDR3；VHCDR1、VLCDR1和VL CDR2；VH CDR1、VL CDR1和VL CDR3；VH CDR2、VL CDR1和VL CDR2；VH CDR2、VL CDR1和VL CDR3；VH CDR3、VL CDR1和VL CDR2；VH CDR3、VL CDR1和VL CDR3；VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3和VL CDR1；VHCDR1、VH CDR2、VH CDR3和VL CDR2；VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3和VL CDR3；VH CDR1、VH CDR2、VL CDR1和VLCDR2；VH CDR1、VH CDR2、VL CDR1和VL CDR3；VH CDR1、VH CDR3、VL CDR1和VL CDR2；VH CDR1、VH CDR3、VL CDR1和VL CDR3；VHCDR2、VH CDR3、VL CDR1和VL CDR2；VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1和VL CDR3；VH CDR2、VH CDR3、VL CDR2和VL CDR3；VHCDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1和VL CDR2；VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1和VL CDR3；VHCDR1、VH CDR2、VL CDR1、VL CDR2，和VLCDR3；VH CDR1、VH CDR3、VLCDR1、VL CDR2，和VL CDR3；VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2，和VL CDR3；或者表2(如前)中所列的VH CDRs和VL CDRs的任意组合。

在一个实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ IDNO：1的氨基酸序列的VH CDR1和具有SEQ ID NO：4的氨基酸序列的VLCDR1的抗体被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的VH CDR1和具有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VL CDR2的抗体被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的VH CDR1和具有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的VL CDR 3的抗体被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ IDNO：2的氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO：4的氨基酸序列的VLCDR1的抗体被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VL CDR2的抗体被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的VL CDR3的抗体被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ IDNO：3的氨基酸序列的VH CDR3和具有SEQ ID NO：4的氨基酸序列的VLCDR1的抗体被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ ID NO：3的氨基酸序列的VH CDR3和具有SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VL CDR2的抗体被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在优选的实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并且含有具有SEQ IDNO：3的氨基酸序列的VH CDR3和具有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的VLCDR3的抗体被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

本发明包括通常分离的、编码MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的核酸分子在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途。编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有VH结构域，其具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VH结构域的氨基酸序列。在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有VH结构域，该VH结构域具有保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体VH结构域的氨基酸序列。在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507或者保藏在ATCC中保藏号为HB11423的细胞系产生的单克隆抗体的VH CDR。在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有具有表2(如前)中所列VH CDR1的氨基酸序列的VHCDR1。在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有具有表2(如前)中所列VH CDR2的氨基酸序列的VH CDR2。在再一个实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有具有表2(如前)中所列VH CDR3的氨基酸序列的VH CDR3。

在一个实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有VL结构域，该VL结构域具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VL结构域的氨基酸序列。在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有VL结构域，该VL结构域具有保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的VL结构域的氨基酸序列。在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有LO-CD2a/BTI-322、MEDI-507或保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的VL CDR。在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有具有表2(如前)中所列VL CDR1的氨基酸序列的VL CDR1。在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有具有表2(如前)中所列VL CDR2的氨基酸序列的VL CDR2。在再一个实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有具有表2(如前)中所列VL CDR3的氨基酸序列的VL CDR3。

在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VH结构域的氨基酸序列的VH结构域和具有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VL结构域的氨基酸序列的VL结构域。在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有具有保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的VH结构域的氨基酸序列的VH结构域和具有保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的VL结构域的氨基酸序列的VL结构域。在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有LO-CD2a/BTI-322、MEDI-507或保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的VH CDR和LO-CD2a/BTI-322、MEDI-507或保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的VL CDR。在另一实施方案中，编码免疫特异地结合CD2多肽的抗体的分离的核酸分子被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，所述抗体含有具有表2(如前)中所列氨基酸序列的VH CDR1、VL CDR1、VHCDR2、VL CDR2、VH CDR3、VL CDR3、或者它们的任意组合。

本发明包括免疫特异地结合CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有此处公开的VH结构域、VH CDRs、VL结构域、或VL CDRs的衍生物，其免疫特异地结合CD2多肽。可以用本领域技术人员公知的标准技术在编码本发明的抗体的核苷酸序列中导入突变，这些标准技术包括，例如，定点诱变和PCR-介导的诱变，其导致氨基酸置换。优选地，相对于原始分子，衍生物包含少于25个氨基酸置换、少于20个氨基酸置换、少于15个氨基酸置换、少于10个氨基酸置换、少于5个氨基酸置换、少于4个氨基酸置换、少于3个氨基酸置换、或少于2个氨基酸置换。在优选的实施方案中，衍生物具有在一个或多个预测的非必需氨基酸残基(即，对于抗体免疫特异地结合CD2多肽不关键的氨基酸残基)处进行的保守氨基酸置换。“保守氨基酸置换”是一种氨基酸置换，其中氨基酸残基被侧链具有类似电荷的氨基酸残基代替。本领域中已经定义了侧链具有类似电荷的氨基酸残基的家族。这些家族包括具有碱性侧链的氨基酸(例如，赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、具有酸性侧链的氨基酸(例如，天冬氨酸、谷氨酸)、具有不带电的极性侧链的氨基酸(例如，甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、具有非极性侧链的氨基酸(例如，丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸)、具有β分枝侧链的氨基酸(例如，苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和具有芳香侧链的氨基酸(例如，酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。备选地，可以通过如饱和诱变在编码序列的所有或部分序列随机导入突变，并且可以筛选所得突变体的生物学活性以鉴定保留活性的突变体。突变后，可以表达编码的抗体并确定抗体的活性。

本发明包括免疫特异地结合本发明中CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的氨基酸序列，其中在LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507可变轻(VL)结构域和/或可变重(VH)结构域中具有一个或多个氨基酸残基置换。本发明还包括免疫特异地结合本发明中CD2多肽的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途，所述抗体含有LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的氨基酸序列，其中在LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507一个或多个VL CDRs和/或一个或多个VH CDRs中具有一个或多个氨基酸残基置换。可以在体外和/或体内试验通过在LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的VH结构域、VH CDRs、VL结构域和/或VL CDRs中导入置换产生的抗体的例如，结合CD2多肽的能力，或者抑制T-细胞活化的能力，或者抑制T-细胞增殖的能力，或者诱导T-细胞裂解的能力，或者预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的能力。

在特定实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述CD2含有一段核苷酸序列，该序列与编码保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的核苷酸序列在严格条件下杂交，例如，在6×氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中约45℃与滤器-结合的DNA杂交，然后在0.2×SSC/0.1％SDS中约50-65℃洗涤一次或多次，在高度严格条件下杂交，例如，在6×SSC中约45℃与滤器-结合的核酸杂交，然后在0.1×SSC/0.2％SDS中约68℃下洗涤一次或多次，或者在本领域技术人员公知的其他严格杂交条件下杂交(见，例如，Ausubel，F.M.等人，编者，1989，Current Protocols in Molecular Biology，卷I，Green Publishing Associates，Inc.and John Wiley & Sons，Inc.，New York 6.3.1-6.3.6页和2.10.3)。

在特定实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有VH结构域或VL结构域的氨基酸序列，所述VH或VL的氨基酸序列由在严格条件下与编码LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的核苷酸序列杂交的核苷酸序列编码，严格条件，例如，在6×氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中约45℃与滤器-结合的DNA杂交，然后在0.2×SSC/0.1％SDS中约50-65℃洗涤一次或多次，在高度严格条件下杂交，例如，在6×SSC中约45℃与滤器-结合的核酸杂交，然后在0.1×SSC/0.2％SDS中约68℃下洗涤一次或多次，或者在本领域技术人员公知的其他严格杂交条件下杂交(见，例如，Ausubel，F.M.等人，编者，1989，Current Protocols in Molecular Biology，卷I，GreenPublishing Associates，Inc.and John Wiley & Sons，Inc.，NewYork 6.3.1-6.3.6页和2.10.3)。

在特定实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有VH CDR或VL CDR的氨基酸序列，所述氨基酸序列由在严格条件下与编码LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的核苷酸序列杂交的核苷酸序列编码，严格条件，例如，在6×氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中约45℃与滤器-结合的DNA杂交，然后在0.2×SSC/0.1％SDS中约50-65℃洗涤一次或多次，在高度严格条件下杂交，例如，在6×SSC中约45℃与滤器-结合的核酸杂交，然后在0.1×SSC/0.2％SDS中约68℃下洗涤一次或多次，或者在本领域技术人员公知的其他严格杂交条件下杂交(见，例如，Ausubel，F.M.等人，编者，1989，Current Protocolsin Molecular Biology，卷I，Green Publishing Associates，Inc.and John Wiley & Sons，Inc.，New York 6.3.1-6.3.6页和2.10.3)。

在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有被核苷酸序列编码的VH CDR的氨基酸序列或者VL CDR的氨基酸序列，所述核苷酸序列与编码LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的核苷酸序列在严格条件下杂交。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有被核苷酸序列编码的VH CDR的氨基酸序列或者VL CDR的氨基酸序列，所述核苷酸序列与编码表2(如前)中所列的VH CDRs或VL CDRs的任何一个的核苷酸序列在严格条件下杂交。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有被核苷酸序列编码的VH CDR的氨基酸序列或者VLCDR的氨基酸序列，所述核苷酸序列与编码保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的VH CDRs或VL CDRs的任何一个的核苷酸序列在严格条件下杂交。

在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有被核苷酸序列编码的VH CDR的氨基酸序列和VL CDR的氨基酸序列，该核苷酸序列与编码LO-CD2a/BTI-322或MEDI-507的核苷酸序列在严格条件下杂交。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有被核苷酸序列编码的VH CDR的氨基酸序列和VL CDR的氨基酸序列，所述核苷酸序列与编码表2(如前)中所列的VH CDRs和VL CDRs的任何一个的核苷酸序列在严格条件下杂交。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有被核苷酸序列编码的VH CDR的氨基酸序列或和VL CDR的氨基酸序列，所述核苷酸序列与编码保藏在ATCC中保藏号为HB11423的细胞系产生的单克隆抗体的核苷酸序列在严格条件下杂交。

在特定实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有氨基酸序列，该氨基酸序列与保藏在ATCC中保藏号为HB11423的细胞系产生的单克隆抗体的氨基酸序列具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有氨基酸序列，该氨基酸序列与MEDI-507的氨基酸序列具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有一氨基酸序列，该氨基酸序列与LO-CD2a/BTI-322的氨基酸序列具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。

在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有VH结构域的氨基酸序列，该VH结构域与MEDI-507的VH结构域至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有VH结构域的氨基酸序列，该VH结构域与LO-CD2a/BTI-322的VH结构域具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有VH结构域的氨基酸序列，该VH结构域与保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的VH结构域具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。

在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有一个或多个VH CDRs的氨基酸序列，该一个或多个VH CDRs与LO-CD2a/BTI-322的VH CDRs的任一个具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有一个或多个VH CDRs的氨基酸序列，该一个或多个VH CDRs与MEDI-507的VH CDRs的任一个具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有一个或多个VH CDRs的氨基酸序列，该一个或多个VH CDRs与表2(如前)中所列的VH CDRs的任一个具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有一个或多个VHCDRs的氨基酸序列，该一个或多个VH CDRs与保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的VH CDRs的任一个具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。

在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有VL结构域的氨基酸序列，该VL结构域与MEDI-507的VL结构域具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有VL结构域的氨基酸序列，该VL结构域与LO-CD2a/BTI-322的VL结构域具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有VL结构域的氨基酸序列，该VL结构域与保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的VL结构域具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。

在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有一个或多个VL CDRs的氨基酸序列，该一个或多个VL CDRs与MEDI-507的VL CDRs的任一个具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有一个或多个VL CDRs的氨基酸序列，该一个或多个VL CDRs与LO-CD2a/BTI-322的VL CDRs的任一个具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有一个或多个VL CDRs的氨基酸序列，该一个或多个VL CDRs与表2(如前)中所列的VL CDRs的任一个具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用免疫特异地结合CD2多肽的抗体，所述抗体含有一个或多个VLCDRs的氨基酸序列，该一个或多个VL CDRs与保藏在ATCC中保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的VL CDRs的任一个具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。

本发明包括与LO-CD2a/BTI-322或其抗原结合片段竞争结合本发明的CD2多肽的抗体的用途，用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在优选的实施方案中，本发明包括与MEDI-507或其抗原结合片段竞争结合本发明的CD2多肽的抗体的用途，用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

本发明包括MEDI-507或其抗原结合片段的衍生物在本发明的方法和组合物中的用途，其中该衍生物被修饰(即，通过任一类型的分子共价附着到该抗体)。例如，但是不作为限制，MEDI-507或其抗原结合片段的衍生物包括例如，通过糖基化、乙酰化、PEG化、磷酸化、酰胺化、通过公知的保护/封闭基团衍生、蛋白水解切割、连接到细胞配体或其他蛋白质等方法修饰的抗体。可通过公知技术实施各种化学修饰的任一种，这些技术包括，但不限于，特异化学切割、乙酰化、甲酰化、衣霉素的代谢合成，等。此外，衍生物可以含有一种或多种非典型氨基酸。

本发明包括免疫特异地结合本发明方法和组合物中的CD2多肽的抗体的用途，所述抗体含有在框架区具有突变(例如，一个或多个氨基酸置换)的MEDI-507的氨基酸序列。在一些实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体含有MEDI-507的氨基酸序列，其中在MEDI-507的VH和/或VL结构域的框架区中有一个或多个氨基酸残基置换。

本发明还包括免疫特异地结合本发明方法和组合物中的CD2多肽的抗体的用途，所述抗体含有在可变区和框架区具有突变(例如，一个或多个氨基酸置换)的MEDI-507的氨基酸序列。

5.2CD2拮抗剂

在本发明的方法和组合物中除了使用MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，还可以按照本发明使用其他CD2拮抗剂。CD2拮抗剂包括，但不限于，似蛋白质(proteinaceous)分子(例如，蛋白质、多肽(例如，可溶性CD2多肽和可溶性LFA-3多肽)、肽、融合蛋白(例如，缀合到治疗性部分的可溶的CD2多肽和缀合到治疗性部分的可溶的LFA-3多肽)，抗体(例如抗-CD2抗体)，和抗体片段)、核酸分子(例如，CD2反义核酸分子、编码似蛋白质分子的三螺旋或核酸分子)、有机分子、无机分子、小有机分子、药物，和小无机分子，它们阻断、抑制、减小或中和免疫细胞，优选T-细胞或NK细胞表达的CD2多肽的功能、活性和/或表达。CD2拮抗剂的额外的实例和特征在国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761的4.1小节，和美国专利申请号10/091,268和10/091,313(2002年3月3日提交)中公开，这些文献的每一个的内容都在此处完整并入作为参考。在一些实施方案中，按照本发明方法使用的CD2拮抗剂不是小有机分子、药物或反义分子。可以用本领域中公知的此处描述的(例如5.8小节)技术鉴定CD2拮抗剂。

在一些实施方案中，CD2拮抗剂降低患有T-细胞恶性肿瘤的受试者中CD2多肽的功能、活性和/或表达。在其他实施方案中，CD2拮抗剂直接结合CD2多肽并直接或间接调节T-淋巴细胞的活性和/或功能。在具体实施方案中，CD2拮抗剂抑制或减小患有T-细胞恶性的受试者中T-细胞活化或增殖，如通过此处描述或者本领域中技术人员熟知的标准体内和/或体外测定法确定的。在特定实施方案中，CD2拮抗剂介导患有T-细胞恶性的受试者中淋巴细胞，尤其外周血T细胞的耗尽，如通过此处描述或者本领域中技术人员熟知的标准体内和/或体外测定法确定的。在另一实施方案中，CD2拮抗剂通过利用依赖抗体的细胞毒性(ADCC)直接或间接调节T-淋巴细胞的活性和/或功能。

在一些实施方案中，在此处描述的(例如，竞争性ELISA)或者本领域中技术人员熟知的体内和/或体外测定法中，CD2拮抗剂抑制或降低CD2多肽和LFA-3之间的相互作用。在其他实施方案中，CD2拮抗剂不抑制或干扰CD2多肽和LFA-3之间的相互作用。在特定实施方案中，如通过本领域中公知的或此处描述的竞争性测定法(例如，竞争ELISA)所评估的，CD2拮抗剂将CD2多肽和LFA-3之间的相互作用减少至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或至少99％。在另一特定实施方案中，如通过本领域中公知的或此处描述的竞争性测定法(例如，竞争ELISA)所评估的，CD2拮抗剂将CD2多肽和LFA-3之间的相互作用减少30％以下、25％以下、15％以下、10％以下、或5％以下。

在一些实施方案中，如通过此处描述的或者本领域中技术人员熟知的标准体内或体外测定法所确定的，CD2拮抗剂调节细胞因子表达和/或释放。在特定实施方案中，CD2拮抗剂调节施用CD2拮抗剂的受试者的血清中细胞因子如，例如，γ干扰素(“IFN-γ”)、白介素-2(“IL-2”)、白介素-4(“IL-4”)、白介素-6(“IL-6”)、白介素-9(“IL-9”)、白介素-12(“IL-12”)、白介素-15(“IL-15”)的浓度。可通过本领域技术人员熟知的任一种技术如免疫测定法，包括，例如ELISA来测量细胞因子的血清浓度。

在优选的实施方案中，用作CD2拮抗剂的蛋白质、多肽或肽(包括抗体和融合蛋白)来自与该蛋白质、多肽或肽的受体相同的物种以便减小针对这些蛋白质、多肽或肽的免疫应答的可能性。在另一优选的实施方案中，当受试者是人时，用作CD2拮抗剂的蛋白质、多肽或肽是人的或者被人源化。

按照本发明，编码用作CD2拮抗剂的蛋白质、多肽或肽的核酸分子可被施用于患有癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤的受试者。此外，按照本发明，编码用作CD2拮抗剂的蛋白质、多肽或肽的衍生物、类似物、片段或变体的核酸分子可被施用于患有癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤的受试者。优选地，这些衍生物、类似物、变体和片段保持全长野生型蛋白质、多肽或肽的CD2拮抗剂活性。

5.2.1CD2结合分子

本发明包括被称为CD2结合分子的CD2拮抗剂在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途。如此处所用的术语“CD2结合分子”和类似术语指一种生物活性分子，其免疫特异地结合CD2多肽并且直接或间接调节淋巴细胞，尤其外周血T一细胞的活性和/或功能。在一个实施方案中，CD2结合分子直接或间接介导淋巴细胞，尤其外周血T-细胞的耗尽。在特定实施方案中，CD2结合分子结合CD2多肽并优先介导记忆T细胞(例如，CD45RO⁺T细胞)和非原初(naive)T细胞的耗尽。可通过例如，本领域技术人员熟知的免疫测定法或其他技术鉴定CD2结合分子。CD2结合分子包括，但不限于，肽、多肽、融合蛋白、小分子、模拟剂、合成药物、有机分子、无机分子，和抗体。CD2拮抗剂的额外的实例和特征在国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761的4.2小节，和美国专利申请号10/091,268和10/091,313(2002年3月3日提交)中公开，这些文献的每一个的内容都在此处完整并入作为参考。

在一个实施方案中，CD2结合分子是免疫特异地结合CD2多肽的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，CD2结合分子不是MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段或LO-CD2a/BTI-322。在优选的实施方案中，CD2结合分子是免疫特异地结合被免疫细胞如T-细胞或NK细胞表达的CD2多肽的抗体或其抗原结合片段。在另一实施方案中，CD2结合分子是免疫特异地结合的CD2多肽的多肽、肽、模拟剂、无机分子或有机分子。在另一实施方案中，CD2结合分子是免疫特异地结合CD2多肽的LFA-3肽、多肽、其衍生物或类似物。在另一实施方案中，CD2结合分子是免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白。在优选的实施方案中，CD2结合分子是免疫特异地结合被免疫细胞如T-细胞或NK细胞表达的CD2多肽的融合蛋白。在一些实施方案中，CD2结合分子不是小有机分子或药物。

在特定实施方案中，CD2结合分子免疫特异地结合人和/或黑猩猩CD2多肽但是不结合狒狒CD2多肽。在另一实施方案中，CD2结合分子免疫特异地结合含有人CD2的氨基酸残基18、55，和/或59的表位(图1)。在另一实施方案中，CD2结合分子免疫特异地结合含有人CD2的氨基酸残基18和55的表位(图1)。在另一实施方案中，CD2结合分子免疫特异地结合含有人CD2的氨基酸残基18和59的表位(图1)。在另一实施方案中，CD2结合分子免疫特异地结合含有人CD2的氨基酸残基55和59的表位(图1)。在再一个实施方案中，CD2结合分子免疫特异地结合含有人或黑猩猩CD2的氨基酸序列中一个或多个12个氨基酸残基的表位，所述氨基酸残基与狒狒CD2的氨基酸序列中发现的氨基酸残基不同。按照这些实施方案，CD2结合分子优选不是LOCD2a/BTI-322或MEDI-507。

在一些实施方案中，在此处描述的(例如，ELISA)或本领域中技术人员公知的体内和/或体外测定法中，CD2结合分子抑制或减小CD2多肽和LFA-3之间的相互作用。在其他实施方案中，CD2结合分子不抑制或干扰CD2多肽和LFA-3之间的相互作用。

5.2.1.1免疫特异地结合CD2多肽的非MEDI-507的抗体

应该认识到免疫特异地结合CD2多肽的抗体是本领域中公知的。免疫特异地结合CD2多肽的非上述MEDI-507的公知抗体的实例包括，但不限于，细胞系UMCD2产生的鼠单克隆抗体(Ancell ImmunologyResearch Products，Bayport，MN；Kozarsky等人，1993，CellImmunol.150：235-246)、细胞系RPA2.10产生的鼠单克隆抗体((Zymed Laboratories，Inc.，San Francisco，CA；Rabinowitz等人，Clin.Immunol.&Immunopathol.76(2)：148-154)、大鼠单克隆抗体LO-CD2b(国际公开号WO 00/78814A2)、和大鼠单克隆抗体LO-CD2a/BTI-322(Latinne等人，1996，Int.Immunol.8(7)：1113-1119)。

免疫特异地结合CD2多肽的抗体包括，但不限于，单克隆抗体、多特异性抗体、人抗体、人源化抗体、camelised抗体、单结构域抗体、嵌合抗体、单链Fvs(scFv)、单链抗体、Fab片段、F(ab’)片段、二硫键连接的Fvs(sdFv)，和抗-独特型(抗-Id)抗体(包括，例如，针对本发明抗体的抗Id-抗体)、和上面任一种的表位-结合片段。具体地，免疫特异地结合CD2多肽的抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性部分，即含有免疫特异地结合CD2多肽的抗原结合位点的分子。本发明的免疫球蛋白分子可以是免疫球蛋白分子的任一型(例如，IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、类别(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)或亚类。在特定实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并介导T细胞耗尽的抗体含有Fc结构域或其片段(例如，Fc结构域的CH2、CH3、和/或铰链区)。在优选的实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽并介导T细胞耗尽的抗体含有Fc结构域或其片段，该Fc结构域或其片段结合免疫细胞表达的FcR，优选FcγRIII。

在一些实施方案中，在此处描述的或本领域中技术人员公知的体内和/或体外测定法(例如，ELISA)中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体抑制或减小CD2多肽和LFA-3之间的相互作用。在其他实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体不抑制或干扰CD2多肽和LFA-3之间的相互作用。

在特定实施方案中，免疫特异地结合人和/或黑猩猩CD2多肽的抗体不结合狒狒CD2多肽。在另一实施方案中，该抗体免疫特异地结合含有人CD2的氨基酸残基18、55，和/或59的表位(图1)。在另一实施方案中，该抗体免疫特异地结合含有氨基酸残基18和55的表位(图1)。在另一实施方案中，该抗体免疫特异地结合含有氨基酸残基18和59的表位(图1)。在另一实施方案中，该抗体免疫特异地结合含有氨基酸残基55和59的表位(图1)。在再一个实施方案中，该抗体免疫特异地结合含有人CD2或黑猩猩CD2的氨基酸序列中一个或多个12个氨基酸残基的表位，所述氨基酸残基与狒狒CD2的氨基酸序列中发现的氨基酸残基不同。按照这些实施方案，该抗体优选不是LOCD2a/BTI-322或MEDI-507。

免疫特异地结合CD2多肽的抗体可以来自任何动物来源，包括鸟类和哺乳动物(例如，人、鼠、驴、绵羊、兔、山羊、豚鼠、骆驼、马，或鸡)。优选地，本发明的抗体是人或人源化单克隆抗体。免疫特异地结合CD2多肽的人抗体包括具有人免疫球蛋白的氨基酸序列的抗体和从人免疫球蛋白文库或者从表达来自人基因的抗体的小鼠分离的抗体。

免疫特异地结合CD2多肽的抗体可以是单特异的、双特异的、三特异的、或具有更大的多特异性。多特异抗体可以对CD2多肽的不同表位特异或者可以对CD2多肽以及异源表位，如异源多肽或固体支持体材料都特异。见，例如，PCR公开WO 93/17715、WO 92/08802、WO91/00360、和WO 92/05793；Tutt，等人，J.Immunol.147：60-69(1991)；美国专利号4,474,893、4,714,681、4,925,648、5,573,920和5,601,819；和Kostelny等人，J.Immunol.148：1547-1553(1992)。

本发明包括对CD2多肽具有高结合亲和性的抗体在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途。在特定实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体的缔合速率常数或k_on速率(抗体(Ab)+抗原(Ag)^kon→Ab-Ag)为至少10⁵M^-1s^-1、至少5×10⁵M^-1s^-1、至少10⁶M^-1s^-1、至少5×10⁶M^-1s^-1、至少10⁷M^-1s^-1、至少5×10⁷M^-1s^-1、或至少10⁸M^-1s^-1。在优选的实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体的k_on速率为至少2×10⁵M^-1s^-1、至少5×10⁵M^-1s^-1、至少10⁶M^-1s^-1、至少5×10⁶M^-1s^-1、至少10⁷M^-1s^-1、至少5×10⁷M^-1s^-1、或至少10⁸M^-1s^-1。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体的k_off速率(抗体(Ab)+抗原(Ag)^koff→Ab-Ag)为小于10^-1s^-1、小于5×10^-1s^-1、小于10^-2s^-1、小于5×10^-2s^-1、小于10^-3s^-1、小于5×10^-3s^-1、小于10^-4s^-1、小于5×10^-4s^-1、小于10^-5s^-1、小于5×10^-5s^-1、小于10^-6s^-1、小于5×10^-6s^-1、小于10^-7s^-1、小于5×10^-7s^-1、小于10^-8s^-1、小于5×10^-8s^-1、小于10^-9s^-1、小于5×10^-9s^-1、或小于10^-10s^-1。在优选的实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体的k_off速率为小于5×10^-4s^-1、小于10^-5s^-1、小于5×10^-5s^-1、小于10^-6s^-1、小于5×10^-6s^-1、小于10^-7s^-1、小于5×10^-7s^-1、小于10^-8s^-1、小于5×10^-8s^-1、小于10^-9s^-1、小于5×10^-9s^-1、或小于10^-10s^-1。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体的亲和常数或K_a(k_on/k_off)为至少10²M^-1、至少5×10²M^-1、至少10³M^-1、至少5×10³M^-1、至少10⁴M^-1、至少5×10⁴M^-1、至少10⁵M^-1、至少5×10⁵M^-1、至少10⁶M^-1、至少5×10⁶M^-1、至少10⁷M^-1、至少5×10⁷M^-1、至少10⁸M^-1、至少5×10⁸M^-1、至少10⁹M^-1、至少5×10⁹M^-1、至少10¹⁰M^-1、至少5×10¹⁰M^-1、至少10¹¹M^-1、至少5×10¹¹M^-1、至少10¹²M^-1、至少5×10¹²M^-1、至少10¹³M^-1、至少5×10¹³M^-1、至少10¹⁴M^-1、至少5×10¹⁴M^-1、至少10¹⁵M^-1、或至少5×10¹⁵M^-1。在再一个实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体的解离常数或K_d(k_off/k_on)为小于10^-2M、小于5×10^-2M、小于10^-3M、小于5×10^-3M、小于10^-4M、小于5×10^-4M、小于10^-5M、小于5×10^-5M、小于10^-6M、小于5×10^-6M、小于10^-7M、小于5×10^-7M、小于10^-8M、小于5×10^-8M、小于10^-9M、小于5×10^-9M、小于10^-10M、小于5×10^-10M、小于10^-11M、小于5×10^-11M、小于10^-12M、小于5×10^-12M、小于10^-13M、小于5×10^-13M、小于10^-14M、小于5×10^-14M、小于10^-15M、或小于5×10^-15M。

在特定实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体是LO-CD2a/BTI-322或其抗原结合片段(例如，LO-CD2a/BTI-322的一个或多个互补决定区(CDRs))。LO-CD2a/BTI-322具有在例如美国专利号5,730,979、5,817,311和5,951,983；以及美国申请序列号09/056,072和09/462,140(每一篇都在此处完整并入作为参考)中公开的氨基酸序列，或者1993年6月28日保藏在美国典型培养物保藏中心(ATCC)10801 University Boulevard，Manassas，Virginia20110-2209保藏号为HB 11423的细胞系产生的单克隆抗体的氨基酸序列。在备选实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体不是LO-CD2a/BTI-322或者LO-CD2a/BTI-322的抗原结合片段。

在另一特定实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体是LO-CD2b或其抗原结合片段(例如，LO-CD2b的一个或多个CDRs)。LO-CD2b具有1999年6月22日保藏在ATCC，10801 University Boulevard，Manassas，Virginia 20110-2209保藏号为PTA-802的细胞系产生的抗体的氨基酸序列，或者在，例如，Dehoux等人，2000，Transplantation 69(12)：2622-2633和国际专利公开号WO00/78814(每一篇都在此处完整并入作为参考)中公开的氨基酸序列。在备选实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的抗体不是LO-CD2b或者LO-CD2b的抗原结合片段。

5.2.1.2免疫特异地结合CD2多肽的LFA-3多肽

本发明包括免疫特异地结合CD2多肽的LFA-3肽、多肽、其衍生物和类似物作为CD2拮抗剂在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途。优选地，免疫特异地结合CD2多肽的可溶性LFA-3多肽含有至少5个、优选至少10个、至少20个、至少30个、至少40个、至少50个、至少60个、至少70个、至少80个、至少80个、或至少100个邻接的LFA-3的氨基酸残基，用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。可以从任一物种得到免疫特异地结合CD2多肽的可溶性LFA-3肽、多肽、其衍生物、和类似物。LFA-3的核苷酸和/或氨基酸序列可以在文献或公共数据库中发现，或者可以用本领域技术人员公知的克隆和测序方法确定该核苷酸和/或氨基酸序列。例如，可以在GenBank数据库中发现人LFA-3的核苷酸和氨基酸序列(见，例如，记录号E12817和CAA29622)。

在特定实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的可溶性LFA-3多肽由天然发生的LFA-3的胞外结构域或者国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到187组成。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的可溶性LFA-3多肽含有LFA-3的胞外结构域的片段(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到92、氨基酸残基1到85、氨基酸残基1到80、氨基酸残基1到75、氨基酸残基1到70、氨基酸残基1到65、氨基酸残基1到60)。

5.2.1.3免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白

本发明包括免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白作为CD2拮抗剂在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途。在一个实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域或者其片段的生物活性分子。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2和/或CH3区的生物活性分子。在再一个实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2、CH3、和铰链区的生物活性分子。按照这些实施方案，该生物活性分子免疫特异地结合CD2多肽。免疫特异地结合CD2多肽的生物活性分子包括，但不限于，肽、多肽、小分子、模拟剂、合成药物、无机分子，和有机分子。优选地，免疫特异地结合CD2多肽的生物活性分子是一种多肽，其含有至少5个、优选至少10个、至少20个、至少30个、至少40个、至少50个、至少60个、至少70个、至少80个、至少80个、或至少100个邻接的氨基酸残基，并且与免疫球蛋白分子的Fc结构域或者其片段的氨基酸序列异源。

在特定实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有LFA-3或者其片段，LFA-3或者其片段免疫特异地结合融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域或者其片段的CD2多肽。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有LFA-3或者其片段，LFA-3或者其片段免疫特异地结合融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2和/或CH 3区的CD2多肽。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有LFA-3或者其片段，LFA-3或者其片段免疫特异地结合融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2、CH3和铰链区的CD2多肽。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有LFA-3的胞外结构域(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到187)，该LFA-3的胞外结构域融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域或者其片段。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有LFA-3的胞外结构域(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到187)，该LFA-3的胞外结构域融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2和/或CH3区。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有LFA-3的胞外结构域(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到187)，该LFA-3的胞外结构域融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2、CH3和铰链区。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有LFA-3的胞外结构域的片段(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到92、氨基酸残基1到85、氨基酸残基1到80、氨基酸残基1到75、氨基酸残基1到70、氨基酸残基1到65、氨基酸残基1到60)，该片段融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域或者其片段。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有LFA-3的胞外结构域的片段(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到92、氨基酸残基1到85、氨基酸残基1到80、氨基酸残基1到75、氨基酸残基1到70、氨基酸残基1到65、氨基酸残基1到60)，该片段融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2和/或CH3区。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有LFA-3的胞外结构域的片段(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到92、氨基酸残基1到85、氨基酸残基1到80、氨基酸残基1到75、氨基酸残基1到70、氨基酸残基1到65、氨基酸残基1到60)，该片段融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2、CH3和铰链区。

在特定实施方案中，CD2结合分子是LFA-3TIP(Biogen，Inc.，Cambridge，MA)。在备选实施方案中，CD2结合分子不是LFA-3TIP。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有一多肽，该多肽的氨基酸序列与融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域或者其片段的LFA-3或其片段的氨基酸序列具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有一多肽，该多肽的氨基酸序列与融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2和/或CH3区的LFA-3或其片段的氨基酸序列具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有一多肽，该多肽的氨基酸序列与融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2、CH3和铰链区的LFA-3或其片段的氨基酸序列具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有一多肽，该多肽的氨基酸序列与融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域或者其片段的LFA-3的胞外结构域的氨基酸序列(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到187)具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有一多肽，该多肽的氨基酸序列与融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2和/或CH3区的LFA-3的胞外结构域的氨基酸序列(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到187)具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有一多肽，该多肽的氨基酸序列与融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2、CH3和铰链区的LFA-3的胞外结构域的氨基酸序列(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到187)具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有一多肽，该多肽的氨基酸序列与融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域或者其片段的LFA-3的胞外结构域的片段的氨基酸序列(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到92、氨基酸残基1到85、氨基酸残基1到80、氨基酸残基1到75、氨基酸残基1到70、氨基酸残基1到65、氨基酸残基1到60)具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有一多肽，该多肽的氨基酸序列与融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2和/或CH3区的LFA-3的胞外结构域的片段的氨基酸序列(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到92、氨基酸残基1到85、氨基酸残基1到80、氨基酸残基1到75、氨基酸残基1到70、氨基酸残基1到65、氨基酸残基1到60)具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有一多肽，该多肽的氨基酸序列与融合到免疫球蛋白分子的Fc结构域的CH2、CH3和铰链区的LFA-3的胞外结构域的片段的氨基酸序列(例如，国际申请号PCT/US02/22273和PCT/US02/06761，和美国专利申请序号10/091,268和10/091,313中SEQ ID NO：7的氨基酸残基1到92、氨基酸残基1到85、氨基酸残基1到80、氨基酸残基1到75、氨基酸残基1到70、氨基酸残基1到65、氨基酸残基1到60)具有至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％同一性。

在另一实施方案中，免疫特异地结合CD2多肽的融合蛋白含有融合到多肽的免疫球蛋白分子的Fc结构域或者其片段，所述多肽由与编码LFA-3或其片段的核苷酸序列杂交的核酸分子编码。

此外，可将抗体缀合到白蛋白使得抗体或抗体片段在体内更稳定或者在体内具有更长的半寿期。该技术是本领域中熟知的，见，例如，国际公开号WO 93/15199、WO 93/15200、和WO 01/77137；和欧洲专利号EP 413,622，所有这些文献在此处被完整并入作为参考。

5.3半寿期增加的CD2拮抗剂

本发明包括体内半寿期增加的似蛋白CD2拮抗剂(优选地，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途。具体地，本发明提供了似蛋白CD2拮抗剂(优选地，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)，其在动物，优选哺乳动物，最优选人体内的半寿期大于3天、大于7天、大于10天、优选大于15天、大于25天、大于30天、大于35天、大于40天、大于45天、大于2个月、大于3个月、大于4个月、或大于5个月。

为了延长似蛋白CD2拮抗剂(例如，肽、多肽、蛋白质、单克隆抗体、单链抗体和Fab片段)在体内的血清循环，可将惰性聚合物分子如高分子量聚乙二醇(PEG)附着到有或没有多功能连接体的抗体，这可通过将PEG位点特异地缀合到该多肽的N-或C-末端或者通过赖氨酸残基上的ε-氨基酸缀合到多肽来实现。将使用线性或分枝的聚合物衍生物，其导致生物活性损失最小。可通过SDS-PAGE和质谱密切监视缀合程度以确保PEG分子正确缀合到抗体。可通过大小排阻层析或离子交换层析将未反应的PEG与抗体-PEG缀合物分离。用本领域技术人员熟知的方法，例如，通过此处描述的免疫测定法可以例如试验PEG-衍生的抗体的结合活性以及体内效能。

也可以将一种或多种氨基酸修饰(例如，置换、插入或缺失)导入IgG恒定区，或者其FcRn结合片段(优选Fc或铰链-Fc结构域片段)产生体内半寿期增加的抗体(优选地，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)。见，例如，国际公开号WO 98/23289；国际公开号WO97/34631；和美国专利号6,277,375，所有这些文献在此处被完整并入作为参考。

5.4CD2拮抗剂缀合物

本发明提供了缀合治疗剂或药物部分的CD2拮抗剂(优选地，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)，该治疗剂或药物部分修饰了给定生物学应答，该CD2拮抗剂用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在特定实施方案中，不同于MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的CD2拮抗剂没有缀合到治疗剂或药物部分。在备选实施方案中，不同于MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的CD2拮抗剂缀合到治疗剂或药物部分。

在一些实施方案中，缀合到治疗剂或药物部分的CD2拮抗剂如，例如，抗-CD2抗体(优选地，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在其他实施方案中，未缀合到治疗剂或药物部分的CD2拮抗剂如，例如，抗-CD2抗体(优选地，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在其他实施方案中，缀合到非毒素(例如，细胞毒素或免疫毒素)、细胞毒性剂或放射性元素的治疗剂或药物部分的CD2拮抗剂如，例如，抗-CD2抗体(优选地，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

治疗性部分包括，但不限于，抗代谢剂(例如，氨甲蝶呤、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶decarbazine)；烷基化剂(例如，氮芥、thioepa苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥、亚硝脲氮芥(BCNU)和罗氮芥(CCNU)、cyclothosphamide、白消安、二溴甘露醇、链脲霉素、丝裂霉素C和顺-双氯双氨络铂(II)(DDP)，和顺铂)；安慈那环素(例如，柔红霉素(以前为道诺霉素)和阿霉素)；抗生素(例如，更生霉素(以前为放线菌素)、博来霉素、光神霉素、和氨茴霉素(AMC))；Auristatin分子(例如，Auristatin PHE、薯司他丁-1，和solastatin 10；见Woyke等人，Antimicrob.Agents Chemother.46：3802-8(2002)，Woyke等人，Antimicrob.Agents Chemother.45：3580-4(2001)，Mohammad等人，Anticancer Drugs 12：735-40(2001)，Wall等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.266：76-80(1999)，Mohammad等人，Int.J.Oncol.15：367-72(1999)，所有都在此处并入作为参考)；激素(例如，糖皮质激素、孕酮、雄激素，和雌激素)、DNA-修复酶抑制剂(例如，表鬼臼毒吡喃葡糖苷或拓扑替康)，激酶抑制剂(例如，化合物ST1571、imatinib甲磺酸盐(Kantarjian等人，Clin Cancer Res.8(7)：2167-76(2002))；细胞毒性剂(例如，紫杉醇、松胞菌素B、短杆菌肽D、溴乙啡啶、依米丁、丝裂霉素、依托泊苷、tenoposide、长春花新碱、长春花碱、秋水仙素、阿霉素、柔红霉素、二羟基炭疽菌素二酮、米托蒽醌、光神霉素、放线菌素D、1-去氢睾酮、glucorticoids、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛尔，和嘌呤霉素和它们的类似物或同系物，和在美国专利号6,245,759、6,399,633、6,383,790、6,335,156、6,271,242、6,242,196、6,218,410、6,218,372、6,057,300、6,034,053、5,985,877、5,958,769、5,925,376、5,922,844、5,911,995、5,872,223、5,863,904、5,840,745、5,728,868、5,648,239、5,587,459中公开的那些化合物)；法尼基转移酶抑制剂(例如，R115777、BMS-214662和在例如，美国专利号6,458,935、6,451,812、6,440,974、6,436,960、6,432,959、6,420,387、6,414,145、6,410,541、6,410,539、6,403,581、6,399,615、6,387,905、6,372,747、6,369,034、6,362,188、6,342,765、6,342,487、6,300,501、6,268,363、6,265,422、6,248,756、6,239,140、6,232,338、6,228,865、6,228,856、6,225,322、6,218,406、6,211,193、6,187,786、6,169,096、6,159,984、6,143,766、6,133,303、6,127,366、6,124,465、6,124,295、6,103,723、6,093,737、6,090,948、6,080,870、6,077,853、6,071,935、6,066,738、6,063,930、6,054,466、6,051,582、6,051,574、和6,040,305中公开的那些化合物)；拓扑异构酶抑制剂(例如，喜树碱、依立替康、SN-38、拓扑替康、9-氨基喜树碱、GG-211(GI147211)、DX-8951f、IST-622、rubitecan、吡唑并吖啶、XR-5000、saintopin、UCE6、UCE1022、TAN-1518A、TAN-1518B、KT6006、KT6528、ED-110、NB-506、ED-110、NB-506、和瑞必克霉素)；bulgarein；Hoescht染料33342和Hoechst染料33258、两面针碱、法格罗宁、表小檗碱、甲氧檗因、β-lapachone、BC-4-1、二膦酸盐(例如，阿仑特罗、cimadronte、氯屈膦酸二钠、替鲁膦酸钠、依替膦酸钠、伊本膦酸钠、neridronate、olpandronate、利塞膦酸钠、piridronate、氨羟二磷酸二钠、zolendronate)；HMG-CoA还原酶抑制剂(例如，洛弗斯特丁、辛伐他汀、托伐他汀、普伐他汀、氟伐地汀、斯特汀、西伐他丁、来适可、lupitor、rosuvastatin、和托伐他汀)；反义寡核苷酸(例如在美国专利号6,277,832、5,998,596、5,885,834、5,734,033和5,618,709中公开的)；腺苷脱氨酶抑制剂(例如，磷酸氟达拉滨和2-氯脱氧腺苷)、ibritumomab tiuxetan(Zevalin)；tositumomab(Bexxar))，其其药学上可接受的盐、溶剂化物、络合物，和前药。

此外，抗体或其片段可以缀合到治疗部分或药物部分，该治疗部分或药物部分改变了给定的生物学应答。治疗部分或药物部分不被认为局限于常规化学治疗剂。例如，药物部分可以是具有所希望的生物学活性的蛋白质、肽或多肽。这些蛋白质可以包括，例如，毒素如红豆毒素、蓖麻毒蛋白A、假单胞菌外毒素、霍乱毒素，或白喉毒素；蛋白质如肿瘤坏死因子、α-干扰素、β-干扰素、神经生长因子、血小板衍生生长因子、组织纤溶酶原激活物、凋亡剂，例如，TNF-α、TNF-β、AIM I(见，国际公开号WO 97/33899)、AIM II(见，国际公开号WO 97/34911)、Fas配体(Takahashi等人，1994，J.Immunol.，6：1567-1574)，和VEGF(见国际公开号WO 99/23105)和抗-血管生成剂，例如，血管抑素、内皮抑素或凝固途径的组分(例如，组织因子)；或者生物血应答修饰物如，例如，淋巴因子(例如，γ干扰素(“IFN-γ”)、白介素-1(“IL-1”)、白介素-2(“IL-2”)、白介素-5(“IL-5”)、白介素-6(“IL-6”)、白介素-7(“IL-7”)、白介素-10(“IL-10”)、白介素-12(“IL-12”)、白介素-15(“IL-15”)、白介素-23(“IL-23”)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(“GM-CSF”)，和粒细胞集落刺激因子(“G-CSF”)，或者生长因子(例如，生长激素(“GH”))，或者凝固剂(例如，钙、维生素K、组织因子，如但不限于，Hageman因子(因子XII)、高分子量激肽原(HMWK)、前激肽释放酶(PK)、凝固蛋白-因子II(凝血酶原)、因子V、XIIa、VIII、XIIIa、XI、XIa、IX、IXa、X、磷脂、血纤蛋白原的α和β链的血纤肽A和B、血纤蛋白单体)。在特定实施方案中，免疫特异地结合IL-9多肽的抗体与白三烯拮抗剂(例如，孟鲁司特、扎鲁司特、普仑司特和zyleuton)缀合。

此外，抗体可以缀合到治疗部分如放射性金属离子，如α-射线发射物如213Bi或用于将放射性金属离子，包括但不限于，¹³¹In、¹³¹LU、¹³¹Y、¹³¹Ho、¹³¹Sm缀合到多肽的大环螯合剂。在一些实施方案中，大环螯合剂是1，4，7，10-四氮杂环十二烷-N，N’，N”，N-四乙酸(DOTA)，其可以通过接头分子附着到抗体。这些接头分子是本领域中公知的并且在Denardo等人，1998，Clin Cancer Res.4(10)：2483-90；Peterson等人，1999，Bioconjug.Chem.10(4)：553-7；和Zimmerman等人，1999，Nucl.Med.Biol.26(8)：943-50中描述，这些文献的每一篇都被完整并入作为参考。

将治疗部分缀合到抗体的技术是熟知的，见，例如，Arnon等人，″用于癌症治疗中药物免疫靶定的单克隆抗体″，MonoclonalAntibodies And Cancer Therapy，Reisfeld等人(编者)，243-56页(Alan R.Liss，Inc.1985)；Hellstrom等人，″用于药物递送的抗体″，Controlled Drug Delivery(第二版)，Robinson等人(编者)，623-53页(MarcelDekker，Inc.1987)；Thorpe，″癌症治疗中细胞毒性剂的抗体载体：综述″，Monoclonal Antibodies 84：BiologicalAnd Clinical Applications，Pinchera等人(编者)，475-506页(1985)；″放射性标记的抗体在癌症治疗中治疗用途的分析、结果，和前景″，Monoclonal Antibodies For Cancer Detection And Therapy，Baldwin等人(编者)，303-16页(Academic Press 1985)，和Thorpe等人，1982，Immunol.Rev.62：119-58。

备选地，抗体可以缀合到第二抗体以形成如Segal在美国专利号4,676,980(其在此处被完整并入作为参考)中描述的抗体异共轭缀合物。

本发明还提供了缀合到诊断剂的CD2拮抗剂，优选MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段。MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段可诊断性地用于例如，监视临床试验方法中癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤的发展或恶化，以例如，确定给定治疗方案的效能。将CD2拮抗剂，优选MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段偶联到可检测物质可以方便检测。可检测物质的实例包括各种酶、辅基、荧光物质、发光物质、生物发光物质、放射性物质、发射正电子的金属，和非-放射性顺磁金属离子。使用本领域中公知的技术，可以将可检测物质直接地或者间接通过中间物(如，例如，本领域中公知的接头)偶联或缀合到抗体。见，例如，关于可以缀合到抗体的金属离子以用作根据本发明的诊断剂，见例如，美国专利号4,741,900。将抗体偶联到可检测物质可以实现这种诊断和检测，这些可检测物质包括，但不限于，各种酶，包括但不限于辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶，或者乙酰胆碱酯酶；辅基复合体如，但不限于，链霉抗生物素蛋白/生物素和抗生物素蛋白/生物素；荧光物质如，但不限于，伞形酮、荧光素、异硫氰酸荧光素、罗丹明、二氯三吖嗪胺荧光素、丹酰氯或藻红蛋白；发光物质如，但不限于，鲁米诺；生物发光物质如，但不限于，萤光素酶、萤光素和水母发光蛋白；放射性物质如，但不限于，铋(²¹³Bi)、碳(¹⁴C)、铬(⁵¹Cr)、钴(⁵⁷Co)、氟(¹⁸F)、钆(¹⁵³Gd，¹⁵⁹Gd)、镓(⁶⁸Ga、⁶⁷Ga)、锗(⁶⁸Ge)、钬(¹⁶⁶Ho)、铟(¹¹⁵In、¹¹³In、¹¹²In、¹¹¹In)、碘(¹³¹I、¹²⁵I、¹²³I、¹²¹I)、镧(¹⁴⁰La)、镥(¹⁷⁷Lu)、锰(⁵⁴Mn)、钼(⁹⁹Mo)、钯(¹⁰³Pd)、磷(³²P)、镨(¹⁴²Pr)、钷(¹⁴⁹Pm)、铼(¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re)、铑(¹⁰⁵Rh)、钌(⁹⁷Ru)、钐(¹⁵³Sm)、钪(⁴⁷Sc)、硒(⁷⁵Se)、锶(⁸⁵Sr)、硫(³⁵S)、锝(⁹⁹Tc)、铊(²⁰¹Ti)、锡(¹¹³Sn、¹¹⁷Sn)、氚(³H)、氙(¹³³Xe)、镱(¹⁶⁹Yb、¹⁷⁵Yb)、钇(⁹⁰Y)、锌(⁶⁵Zn)；使用各种正电子发射X射线断层术的正电子发射金属，和非放射性顺磁金属离子。

5.5可以与CD2拮抗剂组合用于预防或治疗癌症的试剂

本发明还提供了含有CD2拮抗剂(优选MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)和非CD2拮抗剂的一种或多种预防或治疗剂的组合物和预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，该方法包括对需要该治疗的受试者施用所述组合物。治疗或预防剂包括，但不限于，小分子、合成药物、肽、多肽、蛋白质、核酸(例如，DNA和RNA核苷酸，包括，但不限于，反义核苷酸序列、三螺旋和编码生物活性蛋白、多肽或肽的核苷酸序列)、抗体、合成的或天然无机分子、模拟剂，和合成或天然的有机分子。公知可用于或者已经用于或者当前正用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的任一种试剂都可以与按照此处描述的CD2拮抗剂组合。关于已经用于或者当前正用于治疗癌症或者其一种或多种症状的预防剂或治疗剂的信息见，例如，Hardman等人，编者，1996，Goodman & Gilman′s ThePharmacological Basis Of Basis Of Therapeutics第九版，Mc-Graw-Hill，New York和emedicine网站。

5.5.1抗癌剂和治疗性抗体

可用于本发明的各种实施方案(包括本发明的药物组合物和剂型和试剂盒)的抗癌剂的实例包括，但不限于：异恶唑醋酸、阿克拉霉素、阿可达唑盐酸盐、山油柑碱、阿多来新、阿地流津、六甲密胺、丙氨肽霉素、阿美坦醌、氨鲁米特、胺苯吖啶、阿那曲唑、氨茴霉素、天冬酰胺酶、asperlin、阿扎胞苷、azetepa、含氮霉素、巴马司他、苄替哌、比卡鲁胺、盐酸必桑郡、bisnafide二甲磺酸盐、bizelesin、博来霉素硫酸盐、白瑞夸尔钠、溴匹利明、白消安、放线菌素C、二甲睾酮、卡拉酰胺、卡比替膜、卡铂、亚硝脲氮芥、盐酸卡米诺霉素、carzelesin、cedefingol、苯丁酸氮芥、西罗里霉素、顺铂、克拉屈滨、甲磺酸克雷斯托、环磷酰胺、阿糖胞苷、氮烯唑胺、放线菌素D、盐酸柔红霉素、脱氧氮杂胞苷、dexormaplatin、dezaguanine、dezaguanine甲磺酸盐、地吖醌、多西他赛、阿霉素、盐酸阿霉素、着洛西芬、着洛西芬柠檬酸盐、丙酸甲雄烷酮、偶氮霉素、依达曲沙、依洛尼塞盐酸盐、elsamitrucin、恩络铂、恩普氨酯、依匹哌啶、盐酸表阿霉素、erbulozole、盐酸去羟阿霉素、雌莫司汀、磷雌氮芥、依他硝唑、依托泊苷、磷酸依托泊苷、氯苯乙嘧胺、盐酸法罗唑啉、fazarabine、维甲酰酚胺、5-氟脱氧尿苷、磷酸氟达拉滨、氟尿嘧啶、氟西他宾、fosquidone、佛司曲辛钠、吉西他滨、盐酸吉西他滨、羟基脲、盐酸去甲柔毛霉素、异环磷酰胺、依莫佛新、白介素II(包括重组白介素II或rIL2)、α干扰素-2a、α干扰素-2b、α干扰素-n1、α干扰素-n3、β干扰素-Ia、γ干扰素-Ib、异丙铂、盐酸依立替康、生长妥林、来曲唑、醋酸亮丙瑞林、盐酸利阿唑、洛美曲索钠、环己亚硝脲、losoxantrone盐酸盐、马丙考、美登素、盐酸氮芥、乙酸甲地孕酮、醋酸美仑孕酮、苯丙氨酸氮芥、美洛格瑞、巯嘌呤、氨甲蝶呤、氨甲蝶呤钠、氯苯氨啶、双二甲磷酰胺乙酯、米汀多酰胺、mitocarcin、丝裂红素、丝裂吉霉素、丝裂马菌素、丝裂霉素、丝裂帕菌素、米托坦、盐酸米托蒽醌、霉酚酸、洛可达唑、诺加霉素、ormaplatin、亚磺酰吡啶、紫杉醇、天门冬酰胺酶、佩里霉素、戊氮芥、硫酸培来霉素、哌磷酰胺、哌泊溴烷、哌酰硫烷、必散特隆盐酸盐、普卡霉素、plomestane、卟吩姆钠、甲基丝裂霉素、松龙苯芥、盐酸甲基苄肼、嘌呤霉素、盐酸嘌呤霉素、吡唑霉素、利波腺苷、吡鲁米特、、盐酸盐、司莫司汀、二甲二苯四氮烯、斯帕磷酸钠、稀疏霉素、盐酸锗螺胺、螺旋氮芥、螺磺铂胺、链黑霉素、链脲霉素、sulofenur、他利霉素、tecogalan钠、替加氟、teloxantrone盐酸盐、temoporfin、替尼泊苷、台罗西隆、睾内酯、硫唑鸟嘌呤、硫鸟嘌呤、噻替哌、磺嗪夫宁、替拉扎明、涛瑞米芬柠檬酸盐、甲基诺龙、磷酸曲西瑞宾、曲麦克特、三甲曲沙葡萄醛酯、曲普瑞林、盐酸九布洛唑、尿嘧啶氮芥、尿烷亚胺、vapreotide、verteporfin、硫酸长春碱、硫酸醛基长春碱、去乙酰长春酰胺、硫酸硫酸去乙酰长春酰胺、vinepidine硫酸盐、硫酸长春苷酯、硫酸长春素、长春瑞宾、硫酸异长春碱、硫酸长春氮芥、伏罗唑、折尼拉汀、新制癌菌素、盐酸正定苯酰肼。其他抗癌药物包括，但不限于：20-表-1，25-二羟基维生素D3、5-乙炔基尿嘧啶、abiraterone、阿克拉霉素、acylfulvene、adecypenol、阿多来新、阿地流津、ALL-TK拮抗剂、六甲密胺、安巴司丁、amidox、阿米斯丁、氨基乙酰丙酸、amrubicin、胺苯吖啶、anagrelide、阿那曲唑、穿心莲内酯、血管生成抑制剂、拮抗剂D、拮抗剂G、安雷利克斯、抗-背部化形态发生蛋白-1、抗雄激素、前列腺癌、抗雌激素、antineoplaston、反义寡核苷酸、艾菲地可宁氨基乙酸、凋亡基因调节剂、凋亡调节剂、脱嘌呤核酸、ara-CDP-DL-PTBA、精氨酸脱氨酶、asulacrine、阿他美坦、阿曲氮芥、axinastatin 1、axinastatin 2、axinastatin 3、azasetron、azatoxin、azatyrosine、浆果赤霉素III衍生物、balanol、巴马司他、BCR/ABL拮抗剂、benzochlorins、benzoylstaurosporine、β内酰胺衍生物、βalethine、betaclamycin B、白桦脂酸、bFGF抑制剂、比卡鲁胺、必桑郡、bisaziridinylspermine、bisnafide、bistratene A、bizelesin、breflate、溴匹利明、布朵替坦、buthionine磺基肟、钙泊三醇、calphostin C、喜树碱衍生物、金丝雀痘IL-2、卡培他滨、氨甲酰-氨基-三唑、羧基酰胺三唑、CaRest M3、CARN 700、软骨衍生的抑制剂、carzelesin、酪蛋白激酶抑制剂(ICOS)、castanospermine、杀菌肽B、西曲瑞利克斯、chlorlns、chloroquinoxaline磺胺、西卡前列素、顺式卟啉、克拉屈滨、克罗米芬类似物、克霉唑、collismycin A、collismycin B、combretastatinA4、combretastatin类似物、conagenin、crambescidin 816、克雷斯托、cryptophycin 8、cryptophycin A衍生物、curacin A、cyclopentanthraquinones、cycloplatam、cypemycin、阿糖胞苷ocfosfate、溶细胞因子、磷酸己烷雌酚、dacliximab、脱氧氮杂胞苷、dehydrodidemnin B、deslorelin、地塞米松、dexifosfamide、右丙亚胺、地吖醌、didemnin B、didox、diethylnorspermine、二氢5-氮胞苷、二氢紫杉醇、9-、dioxamycin、联苯螺旋氮芥、多西他赛、二十二醇、多拉司琼、多西氟尿啶、着洛西芬、屈大麻酚、duocarmycin SA、依布硒、ecomustine、edelfosine、edrecolomab、eflornithine、榄香烯、emitefur、表柔比星、依立雄胺、雌莫司汀类似物、雌激素激动剂、雌激素拮抗剂、依他硝唑、磷酸依托泊苷、依西美坦、法罗唑啉、fazarabine、维甲酰酚胺、非格司亭、非那雄胺、flavopiridol、氟噻司汀、fluasterone、氟达拉滨、fluorodaunorunicin盐酸盐、伏芬尼美司、福美司坦、佛司曲辛、福泰氮芥、钆texaphyrin、硝酸镓、galocitabine、加尼瑞克、明胶酶抑制剂、吉西他滨、谷胱甘肽抑制剂、hepsulfam、heregulin、六甲撑bisacetamide、金丝桃素、伊本膦酸、伊达比星、艾多昔芬、idramantone、依莫佛新、ilomastat、imidazoacridones、咪喹莫特、免疫刺激剂肽、胰岛素生长因子-1受体抑制剂、干扰素激动剂、干扰素、白介素、碘苄胍、碘阿霉素、甘薯黑疤霉醇、4-、iroplact、亚苏那啶马来酸盐、isobengazole、isohomohalicondrin B、itasetron、、F、lamellarin-N三乙酸盐、生长妥林、leinamycin、利诺司啶、香菇多糖硫酸盐、leptolstatin、来曲唑、白血病抑制因子、白细胞α干扰素、醋酸亮丙瑞林+雌激素+黄体酮、亮丙瑞林、左旋咪唑、利阿唑、线性多胺类似物、亲脂性的二糖肽、亲脂性的铂化合物、lissoclinamide 7、洛巴铂、胍乙基磷酸丝氨酸、洛美曲索、氯尼达明、losoxantrone、洛弗斯特丁、罗唑利宾、lurtotecan、镥texaphyrin、lysofylline、裂解肽、美坦辛、mannostatin A、马马司他、马丙考、脉丝平、matrilysin抑制剂、基质金属硫蛋白酶抑制剂、美洛格瑞、merbarone、meterelin、甲硫氨酸酶、灭吐灵、MIF抑制剂、米非司酮、米替福星、米英司定、错配双链RNA、丙脒腙、二溴卫矛醇、丝裂霉素类似物、米托萘胺、mitotoxin成纤维细胞生长因子-saporin、米托蒽醌、mofarotene、莫格拉司替姆、单克隆抗体、人绒毛膜促性腺激素、单磷酰基脂质A+myobacterium细胞壁sk、莫匹达谋、多种药物抗性基因抑制剂、基于多种肿瘤抑制剂1的疗法、芥子抗癌剂、mycaperoxide B、分枝杆菌细胞壁提取物、myriaporone、N-acetyldinaline、N-取代的苯甲酰胺、萘法瑞林、nagrestip、纳洛酮+喷他佐辛、napavin、naphterpin、纳妥格拉斯丁、nedaplatin、nemorubicin、neridronic酸的、中性的内肽酶、尼鲁米特、nisamycin、一氧化氮调节剂、硝基氧抗氧化剂、nitrullyn、06-苯甲基鸟嘌呤、善得定、okicenone、寡核苷酸、澳那斯酮、奥丹西隆、奥丹西隆、oracin、口服细胞因子诱导剂、ormaplatin、osaterone、奥沙利铂、oxaunomycin、紫杉醇、紫杉醇类似物、紫杉醇衍生物、palauamine、棕榈酰根霉素、帕米膦酸、panaxytriol、巴洛米芬、三羟水杨胺、泊泽尼普定、天门冬酰胺酶、peldesine、戊聚糖多硫酸钠、喷托他丁、pentrozole、perflubron、哌磷酰胺、紫苏子醇、phenazinomycin、苯乙酸盐、磷酸酶抑制剂、沙培林、盐酸毛果芸香碱、吡喃阿霉素、吡曲克辛、placetin A、placetin B、纤溶酶原活化剂抑制剂、铂络合物、铂化合物、铂-三胺络合物、卟吩姆钠、甲基丝裂霉素、泼尼松、丙基二-吖啶酮、前列腺素J2、蛋白酶体抑制剂、基于蛋白A的免疫调节剂、蛋白激酶C抑制剂、蛋白激酶C抑制剂、microalgal、蛋白质酪氨酸磷酸酶抑制剂、嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂、紫红素、吡唑并吖啶、pyridoxylated血红蛋白聚氧乙烯缀合物、raf拮抗剂、雷替曲塞、拉莫西隆、ras法尼基蛋白质转移酶抑制剂、ras抑制剂、ras-GAP抑制剂、脱甲基雷尼替卜定、铼Re 186依替膦酸钠、根霉素、核糖酶、RII retinamide、吡鲁米特、rohitukine、胞壁酰基二肽、罗喹美克、rubiginone B1、ruboxyl、safingol、saintopin、SarCNU、sarcophytol A、沙格司亭、Sdi 1模拟物、司莫司汀、衰老衍生抑制剂1、有义寡核苷酸、信号转导抑制剂、信号转导调节剂、单链抗原-结合蛋白、西作非兰、索布佐山、钠borocaptate、苯基乙酸钠、solverol、生长调节素结合蛋白、sonermin、斯帕磷酸、spicamycin D、螺旋氮芥、斯耐潘定、spongistatin 1、squalamine、干细胞抑制剂、干细胞分裂抑制剂、stipiamide、stromelysin抑制剂、sulfinosine、超活性血管活性肠肽拮抗剂、suradista、苏拉明、swainsonine、合成的糖胺聚糖、tallimustine、他莫昔芬甲碘化物、塔罗氮芥、他佐罗汀、tecogalan钠、替加氟、tellurapyrylium、端粒酶抑制剂、temoporfin、泰莫佐罗、替尼泊苷、tetrachlorodecaoxide、tetrazomine、thaliblastine、thiocoraline、血小板生成素、血小板生成素模拟物、thymalfasin、胸腺生成素受体激动剂、thymotrinan、促甲状腺素、锡乙基etiopurpurin、替拉扎明、二氯环戊二烯钛、topsentin、涛瑞米芬、全能性干细胞因素、翻译抑制剂、维甲酸、三乙酰尿苷、区西瑞宾、曲麦克特、曲普瑞林、托烷司琼、turosteride、酪氨酸激酶抑制剂、tyrphostins、UBC抑制剂、羟氨苯丁酰亮氨酸、尿殖窦-衍生的生长抑制因子、尿激酶受体拮抗体、vapreotide、variolin B、载体体系、红细胞基因疗法、velaresol、veramine、、verteporfin、长春烯碱、vinxaltine、vitaxin、伏罗唑、、折尼拉汀、zilascorb、新制癌菌素stimalamer。优选的额外的抗癌药物是5-氟尿嘧啶和甲酰四氢叶酸。

可用于本发明方法中的治疗性抗体的实例包括但不限于HERCEPTIN(Trastuzumab)(Genentech，CA)，其是用于治疗转移性乳腺癌患者的抗-HER2单克隆抗体；REOPRO(abciximab)(Centocor)，其是血小板上抗-糖蛋白IIb/IIIa受体，用于防止凝块形成；ZENAPAX(daclizumab)(Roche Pharmaceuticals，瑞士)，其是免疫抑制的、人源化抗-CD25单克隆抗体，用于防止急性肾同种异体移植排斥；PANOREX^TM，其是鼠抗-17-IA细胞表面抗原IgG2a抗体(Glaxo Wellcome/Centocor)；BEC2，其是鼠抗-独特型(GD3表位)IgG抗体(ImClone System)；IMC-C225，其是嵌合的抗-EGFR IgG抗体(ImClone System)；VITAXIN^TM，其是人源化抗-αVβ3整联蛋白抗体(Applied Molecular Evolution/MedImmune)；Campath 1H/LDP-03，其是一种人源化抗CD52IgG1抗体(Leukosite)；Smart M195，其是人源化抗-CD3抗体(Protein Design Lab/Kanebo)；RITUXAN^TM，其是嵌合的抗-CD20 IgG1抗体(IDEC Pharm/Genentech，Roche/Zettyaku)；LYMPHOCIDE^TM，其是人源化抗-CD22 IgG抗体(Immunomedics)；LYMPHOCIDE^TMY-90(Immunomedics)；Lymphoscan(Tc-99m-标记的；放射成像；Immunomedics)；Nuvion(抗CD3；Protein Design Labs)；CM3是人源化抗-ICAM3抗体(ICOSPharm)；IDEC-114是灵长类化抗-CD80抗体(IDECPharm/Mitsubishi)；ZEVALIN^TM是放射标记的鼠抗-CD20抗体(IDEC/Schering AG)；IDEC-131是人源化抗-CD40L抗体(IDEC/Eisai)；IDEC-151是灵长类化抗-CD4抗体(IDEC)；IDEC-152是灵长类化抗-CD23抗体(IDEC/Seikagaku)；SMART抗-CD3是人源化抗-CD3 IgG(Protein Design Lab)；5G1.1是人源化抗-补体因子5(C5)抗体(Alexion Pharm)；D2E7是人源化抗-TNF-a抗体(CAT/BASF)；CDP870是人源化抗-TNF-αFab片段(Celltech)；IDEC-151是灵长类化抗-CD4 IgGI抗体(IDECPharm/SmithKlineBeecham)；MDX-CD4是人抗-CD4 IgG抗体(Medarex/Eisai/Genmab)；CD20-链霉抗生物素蛋白(+生物素-钇90；NeoRx)；CDP571是人源化抗-TNF-αIgG4抗体(Celltech)；LDP-02是人源化抗-α4β7抗体(LeukoSite/Genentech)；OrthoClone OKT4A是人源化抗-CD4 IgG抗体(Ortho Biotech)；ANTOVA^TM是人源化抗-CD40L IgG抗体(Biogen)；ANTEGREN^TM是人源化抗-VLA-4 IgG抗体(Elan)；CAT-152是人抗-TGF-β2抗体(Cambridge Ab Tech)。在特定实施方案中，CD2拮抗剂与VITAXIN^TM组合使用，用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

可以用于本发明的方法和组合物中的化疗剂包括但不限于烷基化剂、抗代谢物、天然产物，或激素。用于本发明的方法和组合物中以预防、治疗、处理，或改善T-细胞恶性肿瘤的烷基化剂包括但不限于，氮芥(例如，氮芥、环膦酰胺、苯丁酸氮芥等)，烷基磺酸盐(例如，白消安)、亚硝基脲(例如亚硝脲氮芥、罗氮芥，等)，或三氮烯(decarbazine，等)。用于本发明的方法和组合物中以预防、治疗、处理，或改善T-细胞恶性肿瘤的抗代谢物的实例包括但不限于，叶酸类似物(例如，氨甲蝶呤)、或嘧啶类似物(例如，阿糖胞苷)、嘌呤类似物(例如，硫嘌呤、硫鸟嘌呤、喷托他丁)。用于本发明的方法和组合物中以预防、治疗、处理，或改善T-细胞恶性肿瘤的天然产物的实例包括但不限于，长春花生物碱类(例如，长春碱、长春花新碱)、表鬼臼脂素(例如，依托泊苷)、抗生素(例如，柔红霉素、阿霉素、博来霉素)、酶(例如，L-天冬酰胺酶)，或者生物学应答调节剂(例如，α干扰素)。

用于本发明的方法和组合物中以治疗或预防癌症的烷基化剂的实例包括但不限于，氮芥(例如，氮芥、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥、等等)、氮丙啶和甲基密胺(例如，六甲基密胺、噻替哌)、烷基磺酸盐(例如，busulfan)、亚硝基脲(例如，亚硝脲氮芥、罗氮芥、司莫司汀、链脲霉素、等等。)，或三氮烯(decarbazine、等等。)。用于本发明的方法和组合物中以治疗或预防癌症的抗代谢物的实例包括但不限于，叶酸类似物(例如氨甲蝶呤)，或嘧啶类似物(例如，氟尿嘧啶、氟尿苷、阿糖胞苷)，嘌呤类似物(例如，巯嘌呤、硫鸟嘌呤、喷托他丁)。用于本发明的方法和组合物中以治疗或预防癌症的天然产物的实例包括但不限于，长春花生物碱类(例如，长春碱、长春花新碱)、表鬼臼脂素(例如，依托泊苷、替尼泊苷)、抗生素(例如，放线菌素D、柔红霉素、阿霉素、博来霉素、普卡霉素、丝裂霉素)、酶(例如，L-天冬酰胺酶)，或者生物学应答调节剂(例如，α干扰素)。用于本发明的方法和组合物中以治疗或预防癌症的激素和拮抗剂的实例包括但不限于，肾上腺皮质类固醇(例如，泼尼松)、孕酮(例如，己酸羟孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸甲羟孕酮)、雌激素(例如，二乙基己烯雌酚、乙炔雌二醇)，抗雌激素(例如，他莫昔芬)，雄激素(例如，丙酸睾酮、氟烃甲基睾丸素)，抗雄激素(例如，氟利坦)，促性腺激素释放激素类似物(例如，醋酸亮丙瑞林)。用于本发明的方法和组合物中以治疗或预防癌症的其他试剂的实例包括铂配位络合物(例如，顺铂、carboblatin)，anthracenedione(例如，mitoxantrone)、取代脲(例如，羟基脲)、甲腙衍生物(例如，甲基苄肼)、肾上腺皮质抑制剂(例如，米托坦、氨鲁米特)。

5.5.2血管生成抑制剂

本发明包括一种或多种血管生成抑制剂与CD2拮抗剂的组合在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途。血管生成抑制剂的实例包括但不限于：血管抑素(纤溶酶原片段)；抗血管生成抗凝血酶III；Angiozyme；ABT-627；Bay12-9566；氟草胺、bevacizumab；BMS-275291；软骨-衍生的抑制剂(CDI)；CAI；CD59互补片段；CEP-7055；Col 3；Combretastatin A-4；内皮抑素(胶原XVIII片段)；粘连蛋白片段、Gro-β、卤夫酮、肝素酶、肝素多聚己糖片段、HMV833、人绒毛膜促性腺激素(hCG)；IM-862；α/β/γ干扰素；干扰素可诱导的蛋白(IP-10)；白介素-12；Kringle 5(纤溶酶原片段)；马马司他；金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)；2-甲氧雌二醇；MMI 270(CGS 27023A)；MoAbIMC-1C11；Neovastat；NM-3；Panzem；PI-88；胎盘核糖核酸酶抑制剂；纤溶酶原活化剂抑制剂；血小板因子-4(PF4)；prinomastat、促乳素16kD片段、多育曲霉素-相关蛋白质(PRP)；PTK787/ZK 222594；类视黄醇；solimastat；squalamine；SS 3304；SU5416；SU6668；SU11248；四氢皮质甾醇-S、tetrathiomolybdate、沙立度胺、凝血栓蛋白-1(TSP-1)、TNP-470、转化生长因素-β(TGF-b)、vasculostatin、vasostatin(calreticulin片段)、ZD6126、ZD 6474、法尼基转移酶抑制剂(FTI)，和二膦酸。

5.6治疗方案

本发明包括基于CD-2拮抗剂的疗法，其包括将CD2拮抗剂施用于动物，优选哺乳动物，最优选人，以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在优选的实施方案中，用于本发明的治疗方法和组合物中的CD2拮抗剂是MEDI-507、其类似物、衍生物、或抗原结合片段。在另一优选的实施方案中，本发明包括MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段作为单剂疗法在预防、治疗、处理，或改善T-细胞恶性肿瘤，或者与T-细胞恶性肿瘤相关的一种或多种症状中的用途。

本发明还包括组合疗法，其提供了比当前用于癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤或者其一种或多种症状的单剂疗法或组合疗法更好的预防和治疗概况。作为实施例，但是不作为限制，癌症疗法可以是凋亡诱导剂、细胞毒性剂、抗有丝分裂剂、微管稳定剂、微管形成抑制剂、拓扑异构酶活性剂、抗代谢剂，或DNA相互作用剂。相对于本领域中公知的癌症疗法，尤其对于T-细胞恶性肿瘤的疗法，包括例如，当前标准的和实验性化疗、激素疗法、免疫疗法、放射疗法等，本发明的方法增强了这些疗法的有效性，提高了耐受性，和/或减小了副作用。

本发明包括组合疗法，它们具有加合的效能或者加合的治疗效果。本发明还包括协同组合，其中治疗效能大于加合的效能。优选地，这些组合还减小或避免不想要的或不利的作用。在一些实施方案中，本发明包括的组合疗法相对于CD2拮抗剂或者任何其他癌症疗法单独施用改善了总体疗法。在优选实施方案中，本发明包括的组合疗法相对于MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段或者任何其他癌症疗法单独施用改善了总体疗法。在一些实施方案中，现有的或者实验性癌症疗法的剂量可以减小或者施用频率减小，这增加了患者依从性，改善了治疗并减小了不想要的或不利的作用。

本发明提供了用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的组合疗法，所述组合疗法包括对需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的一种或多种CD2拮抗剂和预防或治疗有效量的一种或多种癌症疗法。在优选的实施方案中，本发明提供了用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的组合疗法，所述组合疗法包括对需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的一种或多种MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，和预防或治疗有效量的一种或多种癌症疗法。具体地，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的一种或多种MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，和预防或治疗有效量的一种或多种癌症化疗、激素疗法、生物学疗法、免疫疗法或放射疗法。

在一些实施方案中，本发明包括CD2拮抗剂，优选MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段与基因疗法的组合在预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状中的用途。在其他实施方案中，与本发明的方法和组合物组合使用的癌症疗法是用于癌症疗法，尤其T-细胞恶性肿瘤的疗法中的另一种治疗性抗体。

在一些实施方案中，本发明提供了预防和治疗方式或方法，其包括将CD2拮抗剂，优选MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段与单独的一种或多种化疗组合或者，任选地，与激素疗法、生物学疗法/免疫疗法和/或放射疗法组合施用。考虑癌症治疗方法还包括手术与CD2拮抗剂，优选MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，和任选地，化疗、激素疗法、生物学疗法/免疫疗法和/或放射疗法组合。

在特定实施方案中，本发明提供了预防和治疗方案，该方案包括将CD2拮抗剂，优选MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段与单独的一种或多种化疗剂组合施用，该化疗剂如但不限于：阿霉素、表柔比星、环磷酰胺、5-氟尿嘧啶，氟尿嘧啶、taxanes比如多西他赛和紫杉醇、甲酰四氢叶酸、左旋咪唑、依立替康、雌莫司汀、依托泊苷、长春花碱、氮烯唑胺、亚硝基脲比如亚硝脲氮芥和环己亚硝脲、长春花生物碱、铂化合物、顺铂、丝裂霉素、长春烯碱、吉西他滨、卡铂、六甲三聚氰胺和/或拓扑替康。这些方案任选还包括施用其他癌症疗法，如但不限于放射疗法、生物学疗法、激素疗法和/或手术。

在另一特定实施方案中，本发明提供了预防和治疗方式或方案，其包括将CD2拮抗剂，优选MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段与一种或多种类型的放射疗法组合施用，如外部-束辐射治疗、放射性同位素的间质植入(I-125、钯、铱)、放射性同位素如锶-89、胸部的放射疗法、腹膜内P-32放射疗法，和/或总的腹部和骨盆放射疗法。这些方法任选还包括施用其他癌症疗法，如但不限于化疗、生物学疗法/免疫疗法、激素疗法和/或手术。

在再一个特定实施方案中，本发明提供了预防和治疗方案，该方案包括将CD2拮抗剂，优选MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段与一种或多种生物学疗法/免疫疗法或激素疗法组合施用，该生物学疗法/免疫疗法或激素疗法如他莫昔芬、醋酸亮丙瑞林或其他的LHRH激动剂、非甾族的抗雄激素(氟利坦、尼鲁米特、比卡鲁胺)、甾族的抗雄激素(环丙孕酮)、雌激素(DES、氯三芳乙烯、乙炔雌二醇、缀合的雌激素USP、DES-二磷酸)、氨鲁米特、氢化可的松、氟利坦withdrawl、黄体酮、酮康唑、泼尼松、α干扰素、白介素-2、肿瘤坏死因子-α，和/或苯丙氨酸氮芥。生物学疗法还包括细胞因子如但不限于TNF配体家族成员如可以诱导凋亡的TRAIL抗癌激动剂、结合TRAIL受体1和2或称为DR4和DR5(含有死亡结构域的受体4和5)的TRAIL抗体，以及DR4和DR5。TRAIL和TRAIL抗体、配体和受体是本领域技术人员公知的并且在美国专利号6,342,363、6,284,236、6,072,047和5,763,223中描述。这些方法可以任选还包括施用其他癌症疗法，如但不限于放射疗法、化疗和/或手术。

在一些实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善T-细胞恶性肿瘤的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，和预防或治疗有效量的T-细胞恶性肿瘤的一种或多种标准或实验性疗法。可用于本发明的方法和组合物中的T-细胞恶性肿瘤的标准或实验性疗法包括，但不限于，抗体疗法(例如，Campath；抗-Tac，HuM291(针对CD3的人源化鼠IgG2单克隆抗体)、放射标记的单克隆抗体(例如，Bexxar，Zevalin，Lym-1))、细胞因子疗法、与或不与细胞毒性剂的攻击组合化疗、造血干细胞移植，和T细胞-介导的疗法(例如，具有针对靶标抗原的抗白血病活性的CD8+T细胞，该靶标抗原包括但不限于白血病特异蛋白(例如bcr/abl、PML/RARa、EMV/AML-1)、白血病相关的蛋白(例如，蛋白酶3、WT-1、h-TERT、hdm-2))。(见Riddell等人，2002，Cancer Control，9(2)：114-122；Dearden等人，2002，Medical Oncology，19，Suppl.S27-32；Waldmann等人，2000，Hematology(Am Soc Hematol Educ Program)：394-408)。

在特定实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善T-细胞幼淋巴细胞白血病(“T-PLL”)或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者只施用预防或治疗有效量的MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，或者组合施用预防或治疗有效量的一种或多种用于T-PLL治疗的试剂，所述治疗剂包括但不限于：CAMPTH-1H(Alemtuzumab)(Dearden等人，2002，Medical Oncology，19，Suppl.S27-32)、喷托他丁、嘌呤类似物(例如，氟达拉滨、克拉屈滨)、依托泊苷、博来霉素，组合化疗，或在Dearden等人，2000，Blood，98(6)：1721-6(其在此处被完整并入作为参考)中公开的任何其他疗法。

在另一特定实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善成年T-细胞白血病(“ATL”)或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者只施用预防或治疗有效量的MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，或者组合施用预防或治疗有效量的一种或多种用于预防、治疗、处理，或改善ATL或者其一种或多种症状的试剂，所述试剂包括，但不限于：CAMPATH-1H(Alemtuzumab)(Dearden等人，2002，Medical Oncol.19 Suppl：S27-32)、蛋白酶体抑制剂PS-341(Tan等人，2002，Cancer Research，62：1083-86，其在此处被并入作为参考)、喷托他丁、人源化抗-IL-2Ra抗体(例如，人源化抗-Tac(HAT)(见Phillips等人，2000，Cancer Research，60：6977-84))、daclizumab(Zenepax)、连接到假单胞菌外毒素A的重组CD7-特异单链免疫毒素(见Peipp等人，2002，Cancer Research，62：2848-55中的描述)、细胞毒性剂(例如，deoxycoformysin(DCF)、盐酸依立替康(CPT-11)、MST-16，等)、类维生素A、抗逆转录病毒剂(例如，AZT、lamuvidine)，或三氧化二砷(见综述Bazarbachi & Hennine，2001，Virus Research，78：79-92)。

在另一实施方案中，本发明提供了预防、治疗、处理，或改善ATL或者其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者只施用预防或治疗有效量的MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，或者组合施用预防或治疗有效量的用于ATLL治疗的其他疗法，它们包括但不限于：PUVA疗法(见Takemori等人，1995，Human Cell，8(3)：121-6)、自体外周血干细胞移植后的α-干扰素疗法(FujiwaraH.，等人，2002，Acta Haematol.，107：213-219)、免疫疗法(例如，抗-Tac(Fv)-PE40KDEL；Ohno N.等人，2002，Leuk.Lymphoma，43(4)：885-8)，与细胞毒性剂的组合化疗(见综述Siegel等人，2001，Curr.Treat.Options Oncol.，2(4)：291-300)。

在另一特定实施方案中，本发明提供了在标准疗法难以治疗和/或免疫抑制的受试者中预防、治疗、处理，或改善ATL或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段单独施用或者与预防或治疗有效量的ziodvudine(AZT)和/或α干扰素组合施用。在另一特定实施方案中，还对所述患者施用针对HTLV-1的抗逆转录病毒剂。在备选实施方案中，本发明提供预防、治疗、处理，或改善ATL或其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用预防或治疗有效量的一种或多种抗-白介素-2受体单克隆抗体和预防或治疗有效量的MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段。在再一个特定实施方案中，将诱导HTLV-1阳性细胞中细胞周期抑制的试剂(例如，三氧化二砷、IFN，等)(见，Bazarbachi等人，2001，Virus Research，78(1-2)：79-92)的预防或治疗有效量与预防或治疗的MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段组合施用于ATL患者。

本发明的方法和组合物不仅可用于未受治疗的患者中，而且还可用于当前的标准和/或实验性癌症疗法(包括，但不限于，化疗、激素疗法、生物学疗法、放射疗法和/或手术)部分或完全难以治疗的患者的治疗中。在优选的实施方案中，本发明提供了用于治疗或预防癌症的治疗和预防方法，该癌症已经表现出或者可能是不包括施用CD2拮抗剂(例如，MEDI-507)的那些疗法难以治疗或者对于这些疗法不应答。在另一优选的实施方案中，本发明提供了用于治疗或预防癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的治疗和预防方法，该癌症已经表现出或者可能是包括施用MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的疗法难以治疗或者对于这些疗法不应答。

本发明提供了预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗的受试者施用一种或多种CD2拮抗剂，优选MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，和用于治疗或预防癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或其一种或多种症状的一种或多种抗-血管生成剂。

本发明组合疗法的预防或治疗剂可以同时施用于受试者。术语“同时”不限于在精确的同一时间施用预防或治疗剂，而是指CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)和其他剂顺序地并且在一定时间间隔内施用于受试者从而CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)可以与其他剂一起作用以提供比它们以别的方式施用更多的好处。例如，每种预防或治疗剂可以同时或顺序地以任一顺序在不同时间点施用；然而，如果不在同时施用，它们应该在足够近的时间内施用从而提供所希望的治疗或预防效果。每种预防或治疗剂可以分开地、以任意适宜形式和通过任意适宜途径施用。

在特定实施方案中，CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)在手术之前、同时或之后施用。优选地，手术完全除去局限化的肿瘤或者减小大肿瘤的尺寸。手术还可以作为预防措施进行或者用以减轻疼痛。

在各种实施方案中，预防或治疗剂在相隔小于1小时、相隔约1小时、相隔约1小时到约2小时、相隔约2小时到约3小时、相隔约3小时到约4小时、相隔约4小时到约5小时、相隔约5小时到约6小时、相隔约6小时到约7小时、相隔约7小时到约8小时、相隔约8小时到约9小时、相隔约9小时到约10小时、相隔约10小时到约11小时、相隔约11小时到约12小时、相隔不超过24小时或相隔不超过48小时的时间内施用。在优选的实施方案中，两种或多种组分在同一次患者拜访施用。

在其他实施方案中，几种预防或治疗剂在相隔约2到4天、相隔约4到6天、相隔约1周、相隔约1到2周、或相隔超过2周的时间内施用。在优选的实施方案中，几种预防或治疗剂在一个时间框内施用，在该时间框内两种试剂都仍然有活性。本领域技术人员将能够通过确定所施用的试剂的半寿期确定这种时间框。

在一些实施方案中，本发明的预防或治疗剂被循环地施用于受试者。循环疗法包括将第一种试剂施用一段时间，然后将第二种和/或第三种试剂施用一定时间，并重复该顺次施用。循环疗法可减小产生对一种或多种疗法的抗性，避免或减小一种或多种疗法的副作用，和/或提高治疗的效能。

在一些实施方案中，预防或治疗剂以小于约3周，每两周约1次，每10天约1次或每周约1次的周期施用。一个周期可以包括在每个周期约90分钟、每个周期约1小时、每个周期约45分钟内通过灌输施用治疗或预防剂。每个周期还可包括休息至少1周、休息至少2周、休息至少3周。所施用的周期数为约1到约12个周期，更典型地，约2到约10个周期，更典型地，约2到约8个周期。

在其他实施方案中，CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)每周或每两周施用1次；其他癌症疗法(例如，化疗、放射疗法)每天施用持续数天。在其他优选的实施方案中，癌症疗法连续施用几天到几周。在其他优选的实施方案中，癌症疗法被施用几小时到几天。预期这些方法包括几周的休息期间，在这期间不施用癌症疗法。

在其他优选的实施方案中，在有节奏的给药方案中，通过连续灌输或经常施用而无长时间休息期施用本发明的治疗和预防剂。这种有节奏的施用可包括以恒定的间隔给药而无休息期。通常，以较低剂量使用治疗剂，尤其细胞毒性剂。这些给药方案包括长时间慢性地每天施用相对低的剂量。在优选的实施方案中，较低剂量的使用可以使毒副作用最小并消除休息期。在一些实施方案中，通过长期低剂量或者连续灌输递送治疗和预防剂，递送时间为约24小时到约2天、到约1周、到约2周、到约3周、到约1个月、到约2个月、到约3个月、到约4个月、到约5个月、到约6个月。熟练的肿瘤学家可以优化这种剂量方案的日程安排。

当与其他预防和/或治疗剂组合使用时，CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)和预防和/或治疗剂可以相加地或者，更优选地，协同地作用。在一个实施方案中，CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)与相同药物组合物中的一种或多种治疗剂同时施用。在另一实施方案中，CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)与分离的药物组合物中的一种或多种治疗剂同时施用。在再一个实施方案中，CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)在另一预防或治疗剂施用之前或之后施用。本发明考虑通过相同或不同的施用途径，例如，经口和肠胃外组合施用CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)和其他预防或治疗剂。在一些实施方案中，当CD2拮抗剂(例如，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)与潜在产生不利副作用(包括，但不限于毒性)的另一种预防或治疗剂同时施用时，该预防或治疗剂可以有利地以引起不利副作用的阈值以下的剂量施用。

术语治疗有效和预防有效包括此处提供的剂量和施用频率。剂量和频率将通常还根据对每个患者特异的因素而变，这些因素包括所施用的特定治疗或预防剂、癌症的严重性和类型、施用途径，以及患者的年龄、体重、应答、和过去的病史。本领域技术人员通过考虑这些因素并按照例如文献中报导的和Physician′s Desk Reference(第56版，2002)中推荐的剂量选择适宜的方案。

5.6.1所预防或治疗的癌症的类型

本发明的抗体和含有所述抗体的组合物可用于预防、治疗、处理，或改善增殖性失调或其一种或多种症状。在特定实施方案中，增殖性失调的特征是免疫细胞(包括，但不限于，T细胞、B细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞和胎儿胸腺细胞)的异常增殖(例如，不受控制的增殖或增殖缺乏)。

此处描述的组合物和方法可用于预防、治疗或改善癌症和相关失调包括，但不限于下面的：白血病，如但不限于急性白血病、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病如成髓细胞白血病、前髓细胞白血病、骨髓单核细胞白血病、单核细胞白血病、红白血病和骨髓增生异常综合症；慢性白血病如但不限于慢性髓细胞(粒细胞)白血病、慢性淋巴细胞白血病，和毛细胞白血病；脾大性红细胞增多；淋巴瘤，如但不限于何杰金氏病，和非何杰金氏病；多发性骨髓瘤如但不限于，淤积(smoldering)多发性骨髓瘤、非分泌性骨髓瘤、骨硬化性骨髓瘤、浆细胞白血病、单发性浆细胞瘤和髓外浆细胞瘤；Waldenstrom氏巨球蛋白血症、未定重要性单克隆丙种球蛋白病、良性单克隆丙种球蛋白病、重链病、骨髓和结缔组织肉瘤如但不限于骨肉瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤、Ewing氏肉瘤、恶性巨细胞瘤、骨纤维肉瘤、脊索瘤、骨膜肉瘤、软组织肉瘤、血管肉瘤(血管肉瘤)、纤维肉瘤、卡波西肉瘤、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、淋巴管肉瘤、神经鞘瘤、横纹肌肉瘤，和滑液肉瘤；脑肿瘤如但不限于神经胶质瘤、星形细胞瘤、脑干神经胶质瘤、室管膜瘤、寡枝神经胶质细胞瘤、非神经胶质瘤、听神经瘤、颅咽管瘤、成神经管细胞瘤、脑膜瘤、松果体细胞瘤、成松果体细胞瘤，和原发性脑淋巴瘤；乳腺癌如但不限于腺癌、小叶(小细胞)癌、管内癌、骨髓乳腺癌、粘蛋白乳腺癌、管状乳腺癌、乳头乳腺癌、派杰病、和炎性乳腺癌；肾上腺癌比如但不限于pheochromocytom和肾上腺皮质癌；甲状腺癌如但不限于乳头或卵泡甲状腺癌、骨髓甲状腺癌和退行性甲状腺癌；胰腺癌如但不限于，胰岛瘤、胃泌素瘤、胰升血糖素瘤、VIP肿瘤、促生长素抑制素-分泌瘤，和类癌瘤或胰岛细胞瘤；垂体癌如但不限于库兴氏病、促乳素-分泌瘤、肢端肥大症，和糖尿病insipius；眼癌如但不限于眼黑素瘤，如虹膜黑素瘤、脉络膜黑素瘤，和睫状体黑素瘤，和成视网膜细胞瘤；阴道癌如鳞状细胞癌、腺癌，和黑素瘤；阴门癌如鳞状细胞癌、黑素瘤、腺癌、基底细胞癌、肉瘤和Paget氏病；宫颈癌如但不限于，鳞状细胞癌和腺癌；子宫癌如但不限于子宫内膜癌和子宫肉瘤；卵巢癌如但不限于，卵巢上皮癌、境界瘤、生殖细胞瘤，和基质瘤；食管癌如但不限于鳞状癌、腺癌、腺样cyctic癌、粘液表皮样癌、腺鳞癌、肉瘤、黑素瘤、浆细胞瘤、疣状癌，和燕麦细胞(小细胞)癌；胃癌如但不限于腺癌、真菌样(息肉样)溃疡、表层传播、广泛传播、恶性淋巴瘤、脂肪肉瘤、纤维肉瘤，和癌肉瘤；结肠癌；直肠癌；肝癌如但不限于肝细胞癌和肝母细胞瘤、胆囊癌如腺癌；胆管上皮癌如但不限于pappillary、结节性的，和扩散；肺癌如但不限于非小细胞肺癌、鳞状细胞癌(epidennoid癌)、腺癌、大细胞癌和小细胞肺癌；睾丸癌如但不限于germinal瘤、精原细胞瘤、退行性、经典(典型的)的精细胞非精原细胞瘤、胚胎癌、畸胎瘤癌、恶性合胞体瘤(卵黄囊瘤)、前列腺癌如但不限于，腺癌、平滑肌肉瘤，和横纹肌肉瘤；penal癌；口腔癌如但不限于鳞状细胞癌；基底癌；唾液腺癌如但不限于，腺癌、粘液表皮样癌和腺样cystic癌；咽癌如但不限于扁平细胞癌，和疣；皮肤癌如但不限于，基底细胞癌、鳞状细胞癌和黑素瘤、表层传播黑素瘤、结节性黑素瘤、雀斑恶性黑色素瘤、acrallentiginous黑素瘤；肾癌如但不限于肾细胞癌、腺癌、肾上腺样瘤、纤维肉瘤、移行细胞癌(肾盂和/或uterer)；韦尔姆斯氏瘤；膀胱癌如但不限于移行细胞癌、扁平细胞癌、腺癌、癌肉瘤。另外，癌包括粘液肉瘤、骨肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管内皮细胞肉瘤、间皮瘤、滑膜瘤、成血管细胞瘤、上皮癌、囊腺癌、支气管癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌和乳头状腺癌(这些失调的综述见Fishman等人，1985，Medicine，第二版，J.B.Lippincott Co.，Philadelphiaand Murphy等人，1997，Informed Decisions：The Complete Bookof Cancer Diagnosis，Treatment，and Recovery，Viking Penguin，Penguin Books U.S.A.，Inc.，美国)。

本发明的方法和组合也用于治疗或预防各种癌或其他异常增殖疾病，包括(但不限于)下面的：癌，包括膀胱、乳腺、结肠、肾、肝、肺、卵巢、胰腺、胃、宫颈、甲状腺的癌；包括鳞状细胞癌；淋巴谱系的造血肿瘤，包括白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、Berketts淋巴瘤；脊髓谱系的造血肿瘤，包括急性和慢性粒性白血病和早幼粒细胞性白血病；间充质来源的肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；其他瘤，包括黑素瘤、精原细胞瘤、tetratocarcinoma、成神经细胞瘤和神经胶质瘤；中枢和外周神经系统的肿瘤，包括星形细胞瘤、成神经细胞瘤、神经胶质瘤，并且许旺氏细胞瘤；间充质起源的肿瘤，包括纤维肉瘤、横纹肌肉瘤和骨肉瘤；和其他瘤，包括黑素瘤、xenodermapegmentosum、keratoactanthoma、精原细胞瘤、甲状腺卵泡癌和畸胎癌。还考虑本发明的方法和组合物还可以治疗凋亡异常导致的癌。这些癌包括但不限于滤泡性淋巴瘤、p53突变的癌、乳腺、前列腺和卵巢的依赖激素的肿瘤，和癌症前期病变如家族性的腺瘤息肉病、和骨髓发育不良综合征。在特定实施方案中，卵巢、膀胱、乳腺、结肠、肺、胰腺、或子宫中恶性肿瘤或异常增殖变化(如组织转化和发育异常)，或异常增殖失调被治疗或预防。

在优选的实施方案中，本发明的方法和组合物用于治疗和/或预防乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、肺癌和前列腺癌。

5.6.2所预防或治疗的T-细胞恶性肿瘤的类型

本发明的方法和组合物还可用于预防、治疗、处理，或改善各种T-细胞恶性肿瘤。如此处所用的，术语“T-细胞恶性肿瘤”和类似术语指任何T-细胞淋巴增殖性失调，包括胸腺和胸腺后恶性肿瘤。T-细胞恶性肿瘤包括T-细胞起源的肿瘤。T-细胞恶性肿瘤指淋巴祖细胞、胸腺细胞、T-细胞、NK-细胞，或抗原呈递细胞起源的肿瘤。T-细胞恶性肿瘤包括coomi n急性淋巴母细胞白血病、淋巴瘤、胸腺瘤、急性淋巴母细胞白血病，和何杰金氏病和非何杰金氏病，条件是淋巴瘤不是皮肤T-细胞淋巴瘤。

用本发明的方法和组合物可以预防、治疗、处理，或改善的T-细胞恶性肿瘤包括但不限于，前体T细胞成淋巴细胞白血病/淋巴瘤、外周T细胞和NK细胞瘤、T细胞幼淋巴细胞白血病(例如，小细胞和脑形的)、T细胞粒状淋巴细胞白血病、侵袭性NK细胞白血病、鼻和鼻型NK/T细胞淋巴瘤、侵染性NK细胞白血病、血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤、未指定的外周T细胞淋巴瘤(例如，淋巴上皮样的(Lennert′s)、T-区、多形的、小的、混合的、大的，和免疫母细胞的)、成人细胞白血病/淋巴瘤(例如，急性lymphomatous、慢性的、郁积的、和类似何杰金的)；退行性大细胞淋巴瘤(ALCL)(T和裸细胞类型)(例如，淋巴细胞与组织细胞的和小细胞)；肠T细胞淋巴瘤(肠病)；和肝脾γ/δT-细胞淋巴瘤。在优选的实施方案中，按照本发明预防或治疗的T-细胞恶性肿瘤是系统的、非皮肤T-细胞恶性肿瘤。

5.7药物组合物和施用方法

本发明提供了治疗、预防，和改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或其一种或多种症状的组合物。在特定实施方案中，组合物含有一种或多种CD2拮抗剂。在另一实施方案中，组合物含有编码一种或多种CD2拮抗剂的一种或多种核酸分子。在另一实施方案中，组合物含有一种或多种CD2结合分子。在另一实施方案中，组合物含有编码一种或多种CD2结合分子的一种或多种核酸分子。在优选的实施方案中，组合物含有MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段。在另一优选的实施方案中，组合物含有编码MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的核酸分子。

在特定实施方案中，本发明组合物含有非CD2拮抗剂或CD2结合分子的一种或多种预防或治疗剂，所述预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，本发明的组合物含有编码非CD2拮抗剂或CD2结合分子的一种或多种预防剂的一种或多种核酸分子，所述预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

在一个实施方案中，本发明的组合物含有一种或多种CD2拮抗剂和不同于CD2拮抗剂的一种或多种预防或治疗剂，所述预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，发明的组合物含有一种或多种CD2结合分子和不同于CD2结合分子的一种或多种预防或治疗剂，所述预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，本发明的组合物含有编码一种或多种CD2拮抗剂的一种或多种核酸分子和不同于CD2拮抗剂的一种或多种预防或治疗剂，所述预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，本发明的组合物含有编码一种或多种CD2结合分子的一种或多种核酸分子和不同于CD2结合分子的一种或多种预防或治疗剂，所述预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

在另一实施方案中，本发明的组合物含有一种或多种CD2拮抗剂和编码不同于CD2拮抗剂的一种或多种预防或治疗剂的一种或多种核酸分子，所述预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，本发明的组合物含有一种或多种CD2结合分子和编码不同于CD2结合分子的一种或多种预防或治疗剂的一种或多种核酸分子，所述预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

在另一实施方案中，本发明的组合物含有编码一种或多种CD2拮抗剂的核酸分子和编码不同于CD2拮抗剂的一种或多种预防或治疗剂的一种或多种核酸分子，所述预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一实施方案中，本发明的组合物含有编码一种或多种CD2结合分子的一种或多种核酸分子和编码不同于CD2结合分子的一种或多种预防或治疗剂的一种或多种核酸分子，所述预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

在优选的实施方案中，组合物含有MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段和一种或多种预防或治疗剂，该预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一优选的实施方案中，组合物含有编码MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的一种或多种核酸分子和一种或多种预防或治疗剂，该预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在优选的实施方案中，组合物含有MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段和编码一种或多种预防或治疗剂的一种或多种核酸分子，该预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在另一优选的实施方案中，组合物含有编码MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的一种或多种核酸分子和编码一种或多种预防或治疗剂的一种或多种核酸分子，该预防或治疗剂公知可用于、或者已经或当前正用于本发明以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

在优选的实施方案中，本发明的组合物是药物组合物。这种药物组合物含有预防或治疗有效量的一种或多种预防或治疗剂(例如，CD2拮抗剂或其他预防或治疗剂)，和一种药学上可接受的载体。在特定实施方案中，术语“药学上可接受的”指联邦或州政府的管理机构批准或者列于美国药典或者其他公知的药典中在动物，或更尤其人中使用。术语“载体”指稀释剂、佐剂(例如，弗氏佐剂(完全和不完全))、赋形剂或媒介物，其中治疗剂与其一起施用。这些药物载体可以是无菌液体，如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的油，如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当药物组合物静脉内施用时水是优选的载体。盐溶液和水性右旋糖和甘油溶液也可用作液体载体，尤其用于可注射的溶液。适宜的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、稻米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油、滑石、氯化钠、干脱脂奶、甘油、丙二醇、乙二醇、水、乙醇，等等。如果希望，该组合物还可含有少量增湿剂或乳化剂，或者pH缓冲剂。这些组合物可以采取溶液剂、悬浮剂、乳剂、片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、缓释制剂等形式。口服制剂可包括标准载体如药物级甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁，等。适宜的药物载体的实例在E.W.Martin的″Remington′s PharmaceuticalSciences″中描述。这些组合物将含有预防或治疗有效量的优选纯的形式的治疗或预防剂，以及适宜量的载体，从而提供适当施用于患者的形式。该制剂将适合施用模式。在优选的实施方案中，药物组合物是无菌的并且为适当的形式以施用于受试者，优选动物受试者，更优选哺乳动物受试者，最优选人类受试者。

各种递送系统是公知的并且可用于施用一种或多种预防或治疗剂(包括CD2结合分子)，例如，与药学上可接受的载体配制，包裹在脂质体、微粒、微胶囊中、能够表达预防或治疗剂的重组细胞、受体介导的胞吞(见，例如，Wu和Wu，J.Biol.Chem.262：4429-4432(1987))、构建作为逆转录病毒或其他载体的一部分的核酸，等。施用预防或治疗剂，或者含有预防或治疗剂的药物组合物的方法包括，但不限于，肠胃外施用(例如，皮内、肌内、腹膜内、静脉内和皮下施用)、硬膜外施用、局部施用，和粘膜(例如，鼻内或经口途径)施用。在特定实施方案中，CD2结合分子、MEDI-507和/或其他预防或治疗剂，或者药物组合物被肌内、局部或静脉内地施用。在优选的实施方案中，CD2结合分子、MEDI-507和/或其他预防或治疗剂被皮下施用。可以通过任一方便的途径，例如，通过灌输或大丸剂注射，通过上皮吸收或粘膜皮肤内层(例如，口粘膜、直肠和肠粘膜，等)施用组合物，并且该组合物可与其他生物活性剂一起施用。施用可以是全身性的或局部的。

在特定实施方案中，可能希望将本发明的药物组合物局部施用于需要治疗的区域；这可通过例如，并且不作为限制，局部灌输、注射，或者通过植入物实现，所述植入物是有孔的、无孔的，或者明胶状材料，包括膜，如sialastic膜或纤维。优选地，当施用预防或治疗剂(例如，CD2结合分子)时，必须注意所使用的材料不吸收预防剂或治疗剂。

在另一实施方案中，组合物可以在小泡，尤其脂质体中递送(见，Langer，Science 249：1527-1533(1990)；Treat等人，Liposomesin the Therapy of Infectious Disease and Cancer，Lopez-Berestein和Fidler(编者)，Liss，New York，353-365页(1989)；Lopez-Berestein，ibid.，317-327页；一般见ibid)。

在再一个实施方案中，可以以控释或缓释系统递送组合物。在一个实施方案中，可以使用泵实现控制或缓释(见Langer，如前；Sefton，1987，CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14：20；Buchwald等人，1980，Surgery 88：507；Saudek等人，1989，N.Engl.J.Med.321：574)。在另一实施方案中，可以施用聚合材料实现本发明抗体或者其片段的控释或缓释(见，例如，Medical Applications of Controlled Release，Langer和Wise(编者)，CRC Pres.，Boca Raton，Florida(1974)；Controlled Drug Bioavailability，Drug Product Design andPerformance，Smolen和Ball(编者)，Wiley，New York(1984)；Rangerand Peppas，1983，J.，Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23：61；还见Levy等人，1985，Science 228：190；During等人，1989，Ann.Neurol.25：351；Howard等人，1989，J.Neurosurg.7 1：105)；美国专利号5,679,377；美国专利号5,916,597；美国专利号5,912,015；美国专利号5,989,463；美国专利号5,128,326；PCT公开号WO99/15154；和PCT公开号WO 99/20253)。用于缓释制剂中的聚合物的实例包括，但不限于，聚(2-羟乙基甲基丙烯酸酯)、聚(甲基甲基丙烯酸酯)、聚(丙烯酸)、聚(乙烯-共-乙酸乙烯)、聚(甲基丙烯酸)、聚乙交酯(PLG)、聚酸酐、聚(N-乙烯吡咯烷酮)、聚(乙烯醇)、聚丙烯酰胺、聚(乙二醇)、聚丙交酯(PLA)、聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)、和聚原酸酯。在优选的实施方案中，用于缓释制剂中的聚合物是惰性的、无可滤出的杂质、保存时稳定的、无菌的，和生物可降解的。在再一个实施方案中，控释或缓释系统可以置于治疗靶标即，表皮的附近，从而仅需要一部分系统剂量(见，例如，Goodson，Medical Applications of Controlled Release，如前，卷2，115-138页(1984))。

控释系统在Langer(1990，Science 249：1527-1533)的综述中讨论。本领域中公知的任一技术可用于产生含有一种或多种本发明抗体或其片段的缓释制剂。见，例如，美国专利号4,526,938、PCT公开号WO 91/05548、PCT公开号WO 96/20698、Ning等人，1996，″用缓释凝胶肿瘤内放射免疫治疗人结肠癌异种移植物″Radiotherapy &Oncology 39：179-189，Song等人，1995，″长-循环乳剂的抗体介导的肺靶定″PDA Journal of Pharmaceutical Science &Technology 50：372-397，Cleek等人，1997，″bFGF抗体的生物可降解的聚合载体用于心血管应用，″Pro.Int′l.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.24：853-854，和Lam等人，1997，″用于局部递送的重组人源化单克隆抗体的微囊化，″Proc.Int′l.Symp.ControlRel.Bioact.Mater.24：759-760，这些文献的每一种都在此处完整并入作为参考。

在特定实施方案中，本发明的组合物是编码预防或治疗剂的核酸，该核酸可以体内施用以促进其编码的预防或治疗剂的表达，施用方法可以是将该核酸构建为适宜的核酸表达载体的一部分并施用该载体从而核酸成为细胞内的，例如，通过利用逆转录病毒载体(见美国专利号4,980,286)，或者通过直接注射，或者利用微粒轰击(例如，基因枪；Biolistic，Dupont)，或者用脂质或者细胞表面受体或者转染剂包被，或者通过将该核酸与类似同源框的肽连接后施用，公知该类似同源框的肽可进入细胞核(见，例如Joliot等人，1991，Proc.Nat′l.Acad.Sci.USA 88：1864-1868)，等。备选地，核酸被导入细胞内并通过同源重组掺入宿主细胞DNA中进行表达。

在特定实施方案中，本发明的组合物是编码一种或多种预防或治疗剂的一种或多种核酸，该核酸可以体内施用以促进其编码的预防或治疗剂的表达，施用方法可以是将该核酸构建为适宜的核酸表达载体的一部分并施用该载体从而核酸成为细胞内的，例如，通过利用逆转录病毒载体(见美国专利号4,980,286)，或者通过直接注射，或者利用微粒轰击(例如，基因枪；Biolistic，Dupont)，或者用脂质或者细胞表面受体或者转染剂包被，或者通过将该核酸与类似同源框的肽连接后施用，公知该类似同源框的肽可进入细胞核(见，例如Joliot等人，1991，Proc.Nat′l.Acad.Sci.USA 88：1864-1868)，等。备选地，核酸被导入细胞内并通过同源重组掺入宿主细胞DNA中进行表达。

制备本发明的药物组合物使其与计划的施用途径相容。施用途径的实例包括，但不限于，肠胃外，例如，静脉内、皮内、皮下、经口(例如，吸入)、鼻内、透皮(局部)、透粘膜和直肠施用。在特定实施方案中，按照常规方法配制该组合物作为药物组合物，其适于静脉内、皮下、肌内、经口、鼻内或局部施用于人。在优选的实施方案中，按照常规方法配制药物组合物以皮下施用于人。通常，用于静脉内施用的组合物是溶于无菌等渗水性缓冲液中的溶液。必要时，该组合物可以还包括增溶剂和局部麻醉剂如利多卡因(lignocaine)以减轻注射部位的疼痛。

如果本发明的组合物将局部施用，那么这些组合物可以以例如，软膏剂、霜剂、透皮贴剂、洗剂、凝胶剂、洗发剂、喷雾剂、气溶胶、溶液剂、乳剂，或本领域技术人员熟知的其他形式施用。见，例如，Remington′s Pharmaceutical Sciences and Introduction toPharmaceutical Dosage Forms，第四版，Lea & Febiger，Philadelphia，PA(1985)。对于非喷雾的局部剂型，通常使用粘稠到半固体到固体形式，其含有载体或与局部应用相容的一种或多种赋形剂并且具有优选大于水的动态粘滞度。适宜的制剂包括，但不限于，溶液剂、悬浮剂、乳剂、霜剂、软膏剂、粉剂、擦剂、油膏剂，等，如果希望，可以将它们消毒或者与辅助剂(例如，防腐剂、稳定剂、增湿剂、缓冲剂，或盐)混合以影响各种性质如，例如，渗透压。其他适宜的局部剂型包括可喷雾的气溶胶制剂，其中活性成分(优选与固体或液体惰性载体组合)与加压的挥发物(例如，气态推进剂，如氟里昂)混合包装，或者包装在挤压瓶中。如果希望，可以将增湿剂或致湿剂加入药物组合物和剂型中。这些额外的成分的实例是本领域中熟知的。

如果本发明的组合物将鼻内施用，那么该组合物可以配制成气溶胶形式、喷雾剂、合剂或者滴剂的形式。具体地，根据本发明使用的预防或治疗剂可以以从受压的包装或雾化器得到的气溶胶喷雾的形式方便地递送，所用的适宜推进剂为例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他适宜的气体。对于受压的气溶胶，可通过提供阀门递送计量的量来确定单位计量。用于吸入器或吹入器的例如明胶胶囊或药筒可以配制成含有该化合物和适宜的粉剂基质如乳糖或淀粉的粉剂混合物。

如果本发明的组合物将经口施用，那么可以将这些组合物配制成例如，片剂、胶囊剂、扁囊剂、gelcaps、溶液剂、悬浮剂等口服形式。通过常规方法用药学上可接受的赋形剂可以制备片剂或胶囊剂，这些赋形剂为比如结合剂(例如，预明胶化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或者羟丙基甲基纤维素)；填充剂(例如，乳糖、微晶纤维素或磷酸氢钙)；润滑剂(例如，硬脂酸镁、滑石或硅石)；崩解剂(例如，马铃薯淀粉或淀粉乙醇酸钠)；或增湿剂(例如，十二烷基硫酸钠)。通过本领域中熟知的方法可以包衣片剂。液体制剂可以采取例如，溶液剂、糖浆剂或悬浮剂的形式，或者它们以干燥产品给出，在使用前用水或适宜的载体重构。通过常规方法用药学上可接受的添加剂可以制备这些液体制剂，这些添加剂为比如悬浮剂(例如，山梨醇糖浆剂、纤维素衍生物或氢化食用脂肪)；乳化剂(例如，卵磷脂或阿拉伯树胶)；非水性载体(例如，杏仁油、油酯、乙醇或分馏的植物油)；和防腐剂(例如，甲基或丙基-对-羟基苯甲酸盐或山梨酸)。适宜时，该制剂还可以含有缓冲盐、增味剂、着色剂和增甜剂。可适宜地配制用于经口施用的制剂以缓慢释放、控释或缓释预防或治疗剂。

可以配制本发明的组合物以用于通过注射，例如，通过弹丸注射或连续灌输肠胃外施用。用于注射的制剂可以以单位剂型给出，例如，以加入防腐剂的安瓿或多剂量容器给出。这些组合物可以采用如悬浮剂、溶液剂或油性或水性载体中的乳剂的形式，并且可以含有配制剂如悬浮、稳定和/或扩散剂。备选地，活性成分可以为粉剂形式，使用前将其用适宜的载体，例如，无菌无致热原的水重构。

本发明的组合物还可以配制成栓剂或保留灌肠的直肠组合物，其例如含有常规栓剂基质如可可油或其他甘油酯。

除了前面描述的制剂，本发明的组合物还可以配制成长效制剂。可以通过植入(例如，皮下或肌内)或者通过肌内注射施用这种长效制剂。从而，例如，可以用适宜的聚合的或疏水物质(例如，作为可接受的油中的乳剂)或者离子交换树脂，或者作为难溶的衍生物，例如，作为难溶的盐配制这些组合物。

可以将本发明的组合物配制成中性的或者盐形式。药学上可接受的盐包括与阴离子如来自盐酸、磷酸、乙酸、草酸、酒石酸等的阴离子形成的盐和与阳离子如来自钠、钾、铵、钙、氢氧化铁、异丙胺、三乙胺、2-乙胺醇、组氨酸、普鲁卡因等形成的盐。

通常，本发明组合物的成分被单独提供或者混合在一起以单位剂型提供，例如，作为密封容器如安瓿或小袋中的冻干的粉剂或者无水浓缩物，该密封容器指出活性剂的量。当将通过灌输施用组合物时，可以将其用含有药物级水或盐的灌输瓶分配。当将通过注射施用组合物时，可以提供用于注射用无菌水或盐水的安瓿从而可以在施用前混合成分。

具体地，本发明提供了一种或多种预防或治疗剂或者本发明的药物组合物，其被包装在密封容器如安瓿或小袋中，该密封容器指出试剂的量。在一个实施方案中，本发明的一种或多种预防或治疗剂或者药物组合物被作为密封容器中的干燥无菌冻干粉或者无水浓缩物提供并且可以用例如，水或者盐水重构到适宜浓度后施用于受试者。优选地，本发明的一种或多种预防或治疗剂或者药物组合物被作为密封容器中的干燥无菌冻干粉提供，其单位剂量为至少5mg、更优选至少10mg、至少15mg、至少25mg、至少35mg、至少45mg、至少50mg、至少75mg、或至少100mg。本发明的冻干的预防或治疗剂，或者药物组合物应该在其原来的容器中保存在2到8℃并且本发明的预防或治疗剂，或者药物组合物重构后应该在一周内、优选5天内，72小时内、48小时内、24小时内、12小时内、6小时内、5小时内、3小时内、或1小时内施用。在备选实施方案中，本发明的一种或多种预防或治疗剂，或者药物组合物以密封容器中的液体形式提供，该密封容器指示该剂的量和浓度。优选地，在密封容器中以至少0.25mg/ml、更优选地至少0.5mg/ml、至少1mg/ml、至少2.5mg/ml、至少5mg/ml、至少8mg/ml、至少10mg/ml、至少15mg/ml、至少25mg/ml、至少50mg/ml、至少75mg/ml、或至少100mg/ml提供所施用的组合物的液体形式。该液体形式应该在2℃到8℃保存在其原来的容器中。

在优选的实施方案中，本发明提供了包装在密封容器如安瓿或小袋中的MEDI-507，该密封容器指出MEDI-507的量。在一个实施方案中，MEDI-507作为密封容器中的干燥无菌冻干粉或者无水浓缩物提供并且可以用例如，水或者盐水重构到适宜浓度后施用于受试者。优选地，MEDI-507作为密封容器中的干燥无菌冻干粉提供，其单位剂量为至少5mg、更优选至少10mg、至少15mg、至少25mg、至少35mg、至少45mg、至少50mg、至少75mg、或至少100mg。在备选实施方案中，MEDI-507以密封容器中的液体形式提供，该密封容器指示MEDI-507的量和浓度。优选地，在密封容器中以至少0.25mg/ml、更优选地至少0.5mg/ml、至少1mg/ml、至少2.5mg/ml、至少5mg/ml、至少8mg/ml、至少10mg/ml、至少15mg/ml、至少25mg/ml、至少50mg/ml、至少75mg/ml、或至少100mg/ml提供MEDI-507的液体形式。

如果希望，该组合物可以在包装或分配器装置中给出，该包装或分配器装置可以包含含有活性成分的一种或多种单位剂型。该包装可以例如含有金属或塑料薄片，如泡罩包装。该包装或分配器装置可与关于施用的使用说明书一起提供。

通常，本发明组合物的成分来自一种受试者，该受试者与这些组合物的接受者具有相同的物种起源或者物种反应性。从而，在优选的实施方案中，将人或人源化抗体施用于人类患者以进行治疗或预防。

本发明组合物的量将有效预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，该有效性可通过标准临床技术确定。用于制剂中的精确剂量将还取决于施用途径、病症的严重性，并且将根据开业医生的判断和每个患者的情况确定。可以从体外或动物模型试验系统的剂量-应答曲线外推有效剂量。

小分子的示例性剂量包括每千克受试者或样品重量小分子的毫克或微克量(例如，约1微克/千克到约500毫克/千克，约100微克/千克到约5毫克/千克，或约1微克/千克到约50微克/千克)。

对于本发明包括的抗体、蛋白质、多肽、肽和融合蛋白，施用于患者的剂量通常为0.0001mg/kg到100mg/kg患者体重。优选地，施用于患者的剂量为0.0001mg/kg到20mg/kg、0.0001mg/kg到10mg/kg、0.0001mg/kg到5mg/kg、0.0001到2mg/kg、0.0001到1mg/kg、0.0001mg/kg到0.75mg/kg、0.0001mg/kg到0.5mg/kg、0.0001mg/kg到0.25mg/kg、0.0001到0.15mg/kg、0.0001到0.10mg/kg、0.001到0.5mg/kg、0.01到0.25mg/kg、0.01到0.10mg/kg、0.1到10mg/kg、0.1到6mg/kg、0.1到5mg/kg、0.5到10mg/kg、0.5到6mg/kg、或0.5到5mg/kg患者的体重。通常，由于对外源多肽的免疫应答，在人体内人抗体比来自其他物种的抗体具有更长的半寿期。从而，通常可能需要人抗体的较低剂量和较低施用频率。此外，通过抗体修饰如，例如脂质化增强抗体的摄取和组织渗透可以减小本发明抗体或其片段的剂量和施用频率。

在一些实施方案中，对受试者施用一个或多个单位剂量的MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，单位剂量为0.1mg到20mg、0.1mg到15mg、0.1mg到12mg、0.1mg到10mg、0.1mg到8mg、0.1mg到7mg、0.1mg到5mg、0.1mg到2.5mg、0.25mg到20mg、0.25到15mg、0.25到12mg、0.25到10mg、0.25到8mg、0.25mg到7mg、0.25mg到5mg、0.25mg到2.5mg、1mg到20mg、1mg到15mg、1mg到12mg、1mg到10mg、1mg到8mg、1mg到7mg、1mg到5mg、或1mg到2.5mg。

在另一实施方案中，对受试者施用一个或多个单位剂量的MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状，单位剂量为0.1mg、0.25mg、0.5mg、1mg、1.5mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、11mg、12mg、13mg、14mg、15mg、或16mg。优选地，对癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤受试者静脉内、皮下、肌内、经口或鼻内施用MEDI-507的单位剂量。

在另一实施方案中，施用MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的预防或治疗有效量的一个或多个剂量，其中预防或治疗有效量不是对于每剂都相同。在再一个实施方案中，施用MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的预防或治疗有效量的一个或多个剂量，其中，随着治疗的进行，对所述受试者施用的预防或治疗有效量的MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的剂量增加例如，0.01μg/kg、0.02μg/kg、0.04μg/kg、0.05μg/kg、0.06μg/kg、0.08μg/kg、0.1μg/kg、0.2μg/kg、0.25μg/kg、0.5μg/kg、0.75μg/kg、0.1μg/kg、1.5μg/kg、2μg/kg、4μg/kg、5μg/kg、10μg/kg、15μg/kg、20μg/kg、25μg/kg、30μg/kg、35μg/kg、40μg/kg、45μg/kg、50μg/kg、55μg/kg、60μg/kg、65μg/kg、70μg/kg、75μg/kg、80μg/kg、85μg/kg、90μg/kg、95μg/kg、100μg/kg、或125μg/kg。

在另一实施方案中，对受试者，优选人，施用MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的预防或治疗有效量的一个或多个剂量，其中，随着治疗的进行，对所述受试者施用的预防或治疗有效量的MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的剂量减少例如，0.01μg/kg、0.02μg/kg、0.04μg/kg、0.05μg/kg、0.06μg/kg、0.08μg/kg、0.1μg/kg、0.2μg/kg、0.25μg/kg、0.5μg/kg、0.75μg/kg、0.1μg/kg、1.5μg/kg、2μg/kg、4μg/kg、5μg/kg、10μg/kg、15μg/kg、20μg/kg、25μg/kg、30μg/kg、35μg/kg、40μg/kg、45μg/kg、50μg/kg、55μg/kg、60μg/kg、65μg/kg、70μg/kg、75μg/kg、80μg/kg、85μg/kg、90μg/kg、95μg/kg、100μg/kg、或125μg/kg。在特定实施方案中，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的预防或治疗有效量每周增加，持续2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更长。

在特定实施方案中，对受试者施用CD2拮抗剂(例如，CD2结合分子)的剂量为0.1到10mg/kg/周、0.1到6mg/kg/周、0.1到5mg/kg/周、0.1到2.5mg/kg/周、0.5到10mg/kg/周、0.5到6mg/kg/周、0.5到5mg/kg/周、0.5到2.5mg/kg/周、2到10mg/kg/周、2到6mg/kg/周、2到5mg/kg/周、或4到6mg/kg/周，施用时间为2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、或更长时间。优选地，CD2拮抗剂是MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段。

在一些实施方案中，在CD2拮抗剂(例如MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)的剂量施用之前、之中和/或之后用本领域技术人员公知的或者此处描述的技术监视受试者的外周血淋巴细胞数。在特定实施方案中，在CD2拮抗剂(例如MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)的剂量施用之前、之中和/或之后用本领域技术人员公知的或者此处描述的技术监视受试者的外周血T-淋巴细胞和/或NK细胞数。对绝对平均外周血淋巴数小于1000个细胞/mm³、小于800个细胞/mm³、小于750个细胞/mm³、小于500个细胞/mm³、或小于450个细胞/mm³、小于400个细胞/mm³、或小于350个细胞/mm³的受试者不施用CD2拮抗剂(优选地，CD2结合分子，例如MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段)剂量。

已经或者当前正被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的不同于CD2拮抗剂(例如，MEDI-507)的预防或治疗剂的剂量可以用于本发明的组合疗法中。优选地，在本发明的组合疗法中所用的剂量低于已经或者当前正被用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的剂量。当前用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的试剂的推荐剂量可从本领域中的任一参考文献得到，这些参考文献包括，但不限于，Hardman等人，编者，1996，Goodman & Gilman′s The Pharmacological BasisOf Basis Of Therapeutics第9版，Mc-Graw-Hill，New York，Physician′s Desk Reference(PDR)第55版，2001，MedicalEconomics Co.，Inc.，Montvale，NJ，这些文献的每一个都在此处被完整并入作为参考。

5.7.1基因疗法

在特定实施方案中，通过基因疗法施用含有编码一种或多种预防或治疗剂的序列的核酸以预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。基因疗法指通过对受试者施用表达的或者可以表达的核酸实施治疗。在本发明的该实施方案中，核酸产生它们编码的预防或治疗剂，该预防或治疗剂介导预防或治疗效果。

可以根据本发明使用本领域中可利用的用于基因疗法的任一种方法。下面公开示例性方法。

对于基因疗法方法的一般综述，见Goldspiel等人，1993，Clinical Pharmacy 12：488-505；Wu和Wu，1991，Biotherapy3：87-95；Tolstoshev，1993，Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.32：573-596；Mulligan，Science 260：926-932(1993)；和Morgan和Anderson，1993，Ann.Rev.Biochem.62：191-217；5月，1993，TIBTECH 11(5)：155-215。可以使用的重组DNA技术的本领域中公知的方法在Ausubel等人(编者)，Current Protocols inMolecular Biology，John Wiley & Sons，NY(1993)；和Kriegler，Gene Transfer and Expression，A Laboratory Manual，StocktonPress，NY(1990)中描述。

在优选的方面，本发明的组合物含有编码预防或治疗剂的核酸，所述核酸是表达载体的一部分，该表达载体在适宜的宿主中表达该预防或治疗剂。具体地，这些核酸具有启动子，优选异源启动子，启动子可操作地连接抗体编码区，所述启动子是可诱导的或者组成性的和任选组织特异的。在另一特定实施方案中，提供了核酸分子，其中预防或治疗剂的编码序列和任何其他希望的序列侧接可以促进在基因组中所希望的位置同源重组的区域，从而提供抗体编码核酸的染色体内表达(Koller和Smithies，1989，Proc. Natl. Acad. Sci.USA 86：8932-8935；Zijlstra等人，1989，Nature 342：435-438)。在一些实施方案中，预防或治疗剂表达。在其他实施方案中，所表达的预防或治疗剂是公知用于，或者已经或者当前正用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的预防或治疗剂。在优选的实施方案中，所表达的预防或治疗剂是MEDI-507。

核酸向受试者的递送可以是直接的，其中受试者直接暴露于该核酸或携带核酸的载体，或者间接的，其中首先在体外用核酸转化细胞，然后将细胞移植到受试者。公知这两种方法分别是体内和体外基因疗法。

在特定实施方案中，体内直接施用核酸序列，其中该核酸序列表达而产生编码产物。这可以通过本领域中公知的许多方法之一实现，例如，将它们构建作为适宜的核酸表达载体的部分并将其施用从而它们成为细胞内的，例如，通过用缺陷的或者减毒的逆转录病毒或其他病毒载体感染(见美国专利号4,980,286)，或者通过裸露DNA的直接注射，或者通过施用微粒轰击(例如，基因枪；Biolistic，Dupont)，或者通过具有原位支架的基质，该基质中含有该核酸序列(见例如，欧洲专利号EP 0741 785 B1和美国专利号5,962,427)，或者用脂质或者细胞表面受体或者转染剂包被，包裹在脂质体、微粒或微囊中，或者通过将它们与公知进入细胞核的肽连接后施用，将其连接配体以受到受体-介导的胞吞(见，例如，Wu和Wu，1987，J；Biol.Chem.262：4429-4432)(其可用于靶定特异表达受体的细胞类型)，等。在另一实施方案中，可以形成核酸-配体复合体，其中配体含有融合基因病毒肽以破坏内体，从而使核酸避免被溶酶体降解。在再一个实施方案中，核酸通过靶定特定受体而被体内靶定进行细胞特异的摄入和表达(见，例如，国际公开号WO 92/06180、WO 92/22635、WO92/203 16、WO93/14188、WO 93/20221)。备选地，核酸可被导入细胞内并通过同源重组掺入到宿主细胞DNA后表达(Koller和Smithies，1989，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86：8932-8935；和Zijlstra等人，1989，Nature 342：435-438)。

在特定实施方案中，使用含有编码预防或治疗剂的核酸序列的病毒载体。例如，可以使用逆转录病毒(见，Miller等人，1993，Meth.Enzymol.217：581-599)。这些逆转录病毒含有正确包装病毒基因组并整合到宿主细胞DNA所必需的组分。编码用于基因疗法的抗体的核酸序列被克隆到一种或多种载体，其方便基因向受试者的递送。关于逆转录病毒载体的更多细节可以在Boesen等人，1994，Biotherapy 6：291-302中发现，该文献描述了使用逆转录病毒将mdr1基因递送到造血干细胞中，目的是使得干细胞对化疗更有抗性。阐明在基因疗法中使用逆转录病毒的其他参考文献是：Clowes等人，1994，J.Clin.Invest.93：644-651；Klein等人，1994，Blood83：1467-1473；Salmons和Gunzberg，1993，Human Gene Therapy4：129-141；和Grossman和Wilson，1993，Curr.Opin.Geneticsand Devel.3：110-114。

腺病毒是可用于基因疗法的其他病毒载体。腺病毒是将基因递送到呼吸上皮细胞的特别吸引人的载体。腺病毒天然地感染呼吸上皮细胞，在那里它们导致轻微疾病。基于腺病毒的递送系统的其他靶标是肝脏、中枢神经系统、内皮细胞和肌肉。腺病毒的优点是能够感染非分裂的细胞。Kozarsky和Wilson，1993，Current Opinion inGenetics and Development 3：499-503给出了关于基于腺病毒的基因疗法的综述。Bout等人，1994，Human Gene Therapy 5：3-10阐明使用腺病毒载体将基因转移到恒河猴的呼吸上皮细胞。腺病毒在基因疗法中使用的其他实例可以在Rosenfeld等人，1991，Science 252：431-434；Rosenfeld等人，1992，Cell 68：143-155；Mastrangeli等人，1993，J.Clin.Invest.91：225-234；国际公开号WO94/12649；和Wang等人，1995，Gene Therapy 2：775-783中发现。在优选的实施方案中，使用腺病毒载体。

腺相关病毒(AAV)也被提出用于基因疗法(Walsh等人，1993，Proc.Soc.Exp.Biol.Med.204：289-300；和美国专利号5,436,146)。

基因疗法的另一途径包括通过电穿孔、脂转染、磷酸钙介导的转染，或病毒感染等方法将基因转移到组织培养物中的细胞。通常，转移方法包括将可选择标记物转移到细胞。然后将细胞进行选择以分离已经摄入并且正在表达所转移的基因的细胞。然后将那些细胞递送给宿主。

在该实施方案中，在所得重组细胞体内施用之前将核酸导入细胞中。可通过本领域中公知的任一种方法实施这种导入，该方法包括但不限于转染、电穿孔、微注射、用含有核酸序列的病毒或噬菌体载体感染、细胞融合、染色体-介导的基因转移、微细胞介导的基因转移、原生质球融合，等。本领域中公知将外来基因导入细胞的许多技术(见，例如，Loeffler和Behr，1993，Meth.Enzymol.217：599-618；Cohen等人，1993，Meth.Enzymol.217：618-644；Clin.Parma.Ther.29：69-92(1985))并且可以按照本发明使用这些技术，条件是受体细胞的必要发育和生理功能不被破坏。该技术应该提供核酸向细胞的稳定转移，从而该核酸可被该细胞表达并且优选是可以遗传的和可以被其细胞子代表达。

通过本领域中公知的各种方法可以将所得重组细胞递送给受试者。优选静脉内施用重组细胞(例如，造血干细胞或祖细胞)。所用的细胞量取决于所希望的效果、患者状态等，并且可以由本领域技术人员确定。

为了基因疗法的目的核酸可以导入的细胞包括任一种希望的、可以利用的细胞类型，并且包括但不限于上皮细胞、内皮细胞、角质细胞、成纤维细胞、肌肉细胞、肝细胞；血细胞如T淋巴细胞、B淋巴细胞、天然杀伤(NK)细胞、单核细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、巨核细胞、粒细胞；各种干细胞或祖细胞，尤其造血干细胞或祖细胞，例如，从骨髓、脐带血、外周血、胎儿肝脏等得到的造血干细胞或祖细胞。

在优选的实施方案中，用于基因疗法的细胞是受试者的自体细胞。

在一个实施方案中，其中重组细胞用于基因疗法，编码预防或治疗剂的核酸序列被导入细胞，从而它们被细胞或细胞的子代表达，然后体内施用重组细胞以得到预防或治疗效果。在特定实施方案中，使用干细胞或祖细胞。可被分离并体外保持的任一种干细胞和/或祖细胞都潜在可以按照本发明的该实施方案使用(见，例如，PCT公开WO94/08598；Stemple和Anderson，1992，Cell 7 1：973-985；Rheinwald，1980，Metl.Cell Bio.21A：229；和Pittelkow和Scott，1986，Mayo Clinic Proc.61：771)。

在特定实施方案中，为了基因疗法的目的所要导入的核酸含有与编码区可操作地连接的组成性、组织特异的、或可诱导的启动子。在优选的实施方案中，为了基因疗法的目的所要导入的核酸含有与编码区可操作地连接的可诱导的启动子，从而通过控制存在可以控制核酸的表达。

5.8生物学测定和动物模型

可以测定CD2拮抗剂，尤其MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，和本发明的组合物调节T细胞活性的能力。通过测量例如，细胞因子和/或T细胞活化标记物的表达水平的改变可以确定T-细胞活化。本领域中公知的技术包括，但不限于，免疫沉淀后蛋白质印迹分析、ELISA、流式细胞术、RNA印迹分析和RT-PCR，这些技术可用于测量细胞因子和T-细胞活化标记物的表达。在优选的实施方案中，试验了CD2结合分子或本发明的组合物诱导INF-γ和/或IL-2表达的能力。

还可以测定CD2拮抗剂，尤其MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，和本发明的组合物诱导T-细胞信号的能力。可通过例如，激酶测定法和电泳迁移率变动测定法测量CD2拮抗剂或本发明的组合物诱导T-细胞信号的能力。

可以在体外和/或体内试验CD2拮抗剂，尤其MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，和本发明的组合物调节T细胞增殖的能力。例如，通过例如，³H-胸苷掺入、锥虫蓝细胞计数，和荧光激活细胞分选术(FACS)测定CD2拮抗剂或本发明的组合物调节T细胞增殖的能力。

可以在体外和/或体内试验CD2拮抗剂，尤其MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，和本发明的组合物诱导细胞裂解的能力。例如，通过例如，⁵¹Cr-释放测定法可以评估CD2拮抗剂或本发明的组合物诱导细胞裂解的能力。

可以在体外和/或体内试验CD2拮抗剂，尤其MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，和本发明的组合物介导外周血T-细胞耗尽和/或NK细胞耗尽的能力。例如，通过例如，用流式细胞术测量T-细胞数可以评估MEDI-507或本发明的组合物介导外周血T-细胞耗尽和/或NK细胞耗尽的能力。

可以以各种方法表征CD2拮抗剂(例如，结合分子)。具体地，可以分析CD2结合分子免疫特异地结合CD2多肽的能力。这种测定法可以在溶液(例如，Houghten，1992，Bio/Techniques 13：412-421)中、珠子上(Lam，1991，Nature 354：82-84)、细菌上(美国专利号5,223,409)、孢子上(美国专利号5,571,698；5,403,484；和5,223,409)、质粒上(Cull等人，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：1865-1869)或噬菌体上(Scott和Smith，1990，Science 249：386-390；Devlin，1990，Science 249：404-406；Cwirla等人，1990，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87：6378-6382；和Felici，1991，J.Mol.Biol.222：301-310)实施(这些文献的每一篇都在此处被完整并入作为参考)。可以测定已经被鉴定免疫特异地结合CD2多肽的CD2结合分子对CD2多肽的特异性和亲和性。

通过本领域中公知的任一种方法可以分析CD2结合分子对CD2多肽的免疫特异结合和与其他多肽的交叉反应性。可用于分析免疫特异结合和交叉反应性的免疫测定法包括，但不限于，竞争和非竞争测定系统，它们使用如蛋白质印迹、放射免疫测定法、ELISA(酶联免疫吸附测定法)、“三明治”免疫测定法、免疫沉淀测定法、沉淀素反应、凝胶扩散沉淀素反应、免疫扩散测定法、凝集测定法、补体-固定测定法、免疫放射分析、荧光免疫测定、蛋白质A免疫测定，等等。这些测定法是常规的和本领域中熟知的(见，例如，Ausubel等人，编者，1994，Current Protocols in Molecular Biology，卷1，John Wiley& sons，Inc.，New York，其在此处被完整并入作为参考)。下面简要描述示例性免疫测定(但是不作为限制)。

免疫沉淀方案通常包括将细胞群体在裂解缓冲液中裂解，该裂解缓冲液为例如RIPA缓冲液(1％NP-40或Triton X-100，1％脱氧胆酸钠，0.1％SDS，0.15M NaCl，0.01M磷酸钠(pH 7.2)，1％Trasylol)，其补加蛋白质磷酸酶和/或蛋白酶抑制剂(例如，EDTA、PMSF、抑酶肽、钒酸钠)，然后将目标CD2结合分子加入细胞裂解液，40℃下孵育一定时间(例如，1到4小时)，将蛋白质A和/或蛋白质G琼脂糖珠子加到细胞裂解物，在40℃孵育1小时或更长时间，在裂解缓冲液中洗涤珠子并将珠子重悬在SDS/样品缓冲液中。通过例如，蛋白质印迹分析可以评估目标CD2结合分子免疫沉淀特定抗原的能力。本领域技术人员将知道一些参数，可以修改这些参数以增加CD2结合分子与CD2多肽的结合并降低背景(例如，用琼脂糖珠子预-清除细胞裂解物)。关于免疫沉淀方案的进一步讨论，见例如，Ausubel等人，编者，1994，Current Protocols in Molecular Biology，Vol.1，John Wiley &Sons，Inc.，New York的10.16.1节。

蛋白质印迹分析通常包括制备蛋白质样品，蛋白质样品在聚丙烯酰胺凝胶中电泳(例如，8-20％SDS-PAGE，取决于抗原的分子量)，将蛋白质样品从聚丙烯酰胺凝胶转移到膜如硝酸纤维素、PVDF或尼龙膜，将膜在封闭液(含有3％BSA或无脂奶的PBS)中封闭，在洗涤缓冲液(例如，PBS-Tween 20)中洗涤膜，将膜与在封闭缓冲液中稀释的目标CD2结合分子(例如，目标抗体)孵育，在洗涤缓冲液中洗膜，将膜与在封闭缓冲液中稀释的缀合酶底物(例如，辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶)或放射性分子(例如，³²P或¹²⁵I)的抗体(其识别CD2结合分子)孵育，并检测CD2多肽的存在。本领域技术人员将了解一些参数，可以修改这些参数以增加所检测的信号比并降低背景噪音。关于蛋白质印迹方案的进一步讨论，见，例如Ausubel等人，编者，1994，CurrentProtocols in Molecular Biology，Vol.1，John Wiley & Sons，Inc.，New York的10.8.1节。

ELISAs包括制备CD2多肽，用CD2多肽包被96孔微量滴定板的孔，将缀合可检测分子如酶底物(例如，辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶)的目标CD2结合分子加入孔中并孵育一定时间，检测CD2多肽的存在。在ELISAs中，目标CD2结合分子不必一定缀合到可检测化合物；而是，可以向孔中加入缀合可检测分子的抗体(其识别目标CD2结合分子)。此外，代替用CD2多肽包被孔的是可将CD2结合分子包被孔。在该情况中，CD2多肽加入被包被的孔后，可以将缀合可检测化合物的抗体加入孔中。本领域技术人员将明白一些参数，可以修改这些参数以增强所检测的信号以及本领域中公知的ELISAs的其他变通方案。关于ELISAs的进一步讨论见，例如，Ausubel等人，编者，1994，CurrentProtocols in Molecular Biology，Vol.1，John Wiley & Sons，Inc.，New York的11.2.1节。

通过竞争性结合测定法可确定CD2结合分子与CD2多肽的结合亲和性和CD2结合分子-CD2多肽相互作用的离解率(off-rate)。竞争性结合测定法的一个实例是放射免疫测定，其包括在增量未标记的CD2多肽的存在下将标记的CD2多肽(例如，³H或¹²⁵I)与目标CD2结合分子孵育，并检测结合到标记的CD2多肽的CD2结合分子。可以通过斯卡查德图分析从数据确定CD2结合分子与CD2多肽的亲和性和结合分开率。用放射免疫测定还可以确定与另一CD2结合分子的竞争。在该情况下，在增量第二种未标记的CD2结合分子的存在下将CD2多肽与缀合标记化合物(例如，³H或¹²⁵I)的CD2结合分子孵育。

在优选的实施方案中，用BIAcore动力学分析确定CD2结合分子与CD2多肽的结合离解和离解率。BIAcore动力学分析包括分析来自芯片的CD2多肽与芯片表面上固定的CD2结合分子的结合和解离。

在另一实施方案中，CD2结合分子独特型-特异的单克隆抗体可用于检测结合到例如，T和NK细胞上CD2受体的CD2结合分子，并且可用第二抗体试剂检测细胞上的单克隆抗体。在特定实施方案中，MEDI-507独特型-特异的单克隆抗体MAb5e8d可用于检测结合到T和NK细胞上CD2受体的MEDI-507，并且可用第二抗体试剂——缀合藻红蛋白的山羊抗小鼠IgG(GAM-IgG-PE)检测细胞上的MAb 5e8d。MAbTS2-18识别CD2，但是不与MEDI-507竞争，MAb TS2-18可用于定量T和NK细胞上总CD2。作为实例，但无限制，将MEDI-507施用之前和之后从受试者收集的全血的等分试样在96孔板中与MAb TS2-18、无关的小鼠MAb、或MAb 5e8d混合。室温下孵育后，红细胞(RBCs)被裂解并通过洗涤从反应液除去裂解的RBCs。然后将样品与GAM-IgG-PE孵育。洗涤除去未结合的第二抗体后，将样品重悬在FACS缓冲液，福尔马林中固定，并进行FACS分析。数据输出可记录为平均通道荧光单位(MCF)。可以用公式：[(平均实验的MCF-平均IgG对照MCF)/(平均CD2水平对照MCF-平均IgG对照MCF)]×100计算CD2受体occumpany。

通过例如用于确定细胞培养物或实验动物中LD₅₀(50％群体的致死剂量)和ED₅₀(50％群体中治疗有效量)的标准方法可以确定本发明的治疗和/或预防方案的毒性和效能。毒性和治疗效果制剂的剂量比是治疗指标并且其可表达为比值LD₅₀/ED₅₀。优选表现出较大治疗指标的预防和/或治疗剂。尽管可以使用表现出毒副作用的预防和/或治疗剂，但是应该注意设计的递送系统将这种试剂靶向受侵袭的组织部位以使对未受感染的细胞的潜在危害最小，从而减小副作用。

从细胞培养测定法和动物研究得到的数据可用于配制用于人的预防和/或治疗剂的一系列剂量。这些剂的剂量优选位于循环浓度范围内，该浓度范围包括几乎没有或没有毒性的ED₅₀。可以根据所用的剂型和所采用的施用途径在该范围内改变剂量。对于用于本发明的任一试剂，可最初从细胞培养测定估计治疗有效量。可以配制动物模型中的剂量以实现循环血浆浓度范围，其包括如在细胞培养物中确定的IC₅₀(即，实现症状的半-最大抑制的受试化合物的浓度)。可以利用该信息更准确地确定在人中有用的剂量。通过例如，高效液相层析测量血浆中的水平。

本发明的药物组合物或预防或治疗剂的一些方面在人体中使用前优选在体外、在细胞培养系统中，和在动物模式生物，如啮齿类动物模式系统中试验所希望的治疗活性。例如，可用于确定本发明的特定药物组合物效果的测定法包括细胞培养测定法，其中患者组织样品在培养基中生长，并暴露于或接触本发明的药物组合物，然后观察该组合物对组织样品的影响。可从患者活检得到组织样品。该试验允许鉴定对每个个体患者治疗上最有效的预防或治疗剂。在各种特定实施方案中，可以用癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤相关的细胞类型的代表性细胞(例如，T细胞)实施体外测定以确定本发明的药物组合物对这些细胞类型是否具有所希望的效果。

备选地，可以用肿瘤或恶性细胞系(例如，Jurkat)筛选治疗或预防剂，而代替培养来自患者的细胞。本领域中许多标准测定法可用于评估这些细胞的存活和/或生长；例如，通过测量³H-胸苷掺入、通过直接细胞计数、通过检测公知基因如原癌基因(例如，myc)或细胞周期标记物的转录活性的变化可以测定细胞增殖；通过锥虫蓝染色可以评估细胞存活力。基于形态等的改变可以通过目视评估分化。

用于预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的治疗或预防剂在人体中试验前可以并且优选在适宜的动物模型系统中试验。可用作模型的动物包括，但不限于，大鼠、小鼠、鸡、奶牛、猴、兔、仓鼠等。本领域中公知并且广泛用于癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤的适宜的动物模型可用于检验该治疗和/或预防剂的效能和/或毒性。可用于检验该治疗和/或预防剂的效能和/或毒性的适宜的动物模型的实例包括，但不限于，长有肿瘤或者用恶性T-细胞(优选人恶性T-细胞)注射的人CD2转基因小鼠、长有肿瘤或者用恶性T-细胞(优选人恶性T-细胞)注射的重度联合免疫缺损(SCID)小鼠、长有肿瘤或者用恶性T-细胞(例如，MET-1白血病细胞)注射的非肥胖的糖尿病(NOD)/SCID小鼠。

此外，本领域中技术人员公知的任一测定法都可用于评价用于预防、治疗、处理或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的此处公开的组合疗法的预防和/或治疗效用。

5.9产生抗体的方法

通过本领域中关于抗体合成的任一种公知的方法，尤其通过化学合成或者优选通过重组表达技术可以产生免疫特异地结合抗原的抗体。

通过本领域中熟知的各种方法可以产生对抗原免疫特异的多克隆抗体。例如，人抗原可施用于各种宿主动物(包括但不限于，兔、小鼠、大鼠等)以诱导产生含有对人抗原特异的多克隆抗体。根据宿主类型，可以用各种佐剂增强免疫应答，这些佐剂包括但不限于，弗氏佐剂(完全和不完全)、矿物凝胶如氢氧化铝、表面活性物质如溶血卵磷脂、pluronic多聚醇、聚阴离子、肽、油乳剂、匙孔血蓝蛋白、二硝基苯酚，和潜在有用的人佐剂如BCG(bacille Calmette-Guerin)和小棒状杆菌(corynebacterium parvum)。这些佐剂也是本领域中公知的。

用本领域中公知的各种技术可以制备单克隆抗体，包括使用杂交瘤、重组和噬菌体展示技术，或者它们的组合。例如，用本领域中公知的并且在例如，Harlow等人，Antibodies：A Laboratory Manual，(Cold Spring Harbor Laboratory Press，第二版1988)；Hammerling，等人，：Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas 563-681(Elsevier，N.Y.，1981)(所述参考文献被完整并入作为参考)中教导的杂交瘤技术可以产生单克隆抗体。如此处所用的术语“单克隆抗体”被局限于通过杂交瘤技术产生的抗体。术语“单克隆抗体”指来自单一克隆的抗体，该克隆包括真核、原核或噬菌体克隆，并且不是其所产生的方法。

用杂交瘤技术产生和筛选特定抗体的方法是本领域中常规和熟知的。简言之，可以用非-鼠抗原免疫小鼠并且一旦检测到免疫应答，例如，在小鼠血清中检测到对该抗原特异的抗体，就收获小鼠脾脏并分离脾细胞。然后通过熟知的技术将脾细胞与任一适宜的骨髓瘤细胞，例如，来自可从ATCC得到的细胞系SP20的细胞融合。通过有限稀释选择和克隆杂交瘤。然后通过本领域中公知的方法测定杂交瘤以得到分泌能够结合本发明多肽的抗体。通过用阳性杂交瘤克隆免疫小鼠可以产生通常含有高水平抗体的腹水。

因此，本发明提供了产生单克隆抗体的方法以及通过该方法产生的抗体，该方法包括培养分泌本发明抗体的杂交瘤细胞其中，优选地，通过将从用非-鼠抗原免疫的小鼠分离的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，然后从所得融合物筛选杂交瘤以得到分泌能够结合该抗原的抗体的杂交瘤克隆。

通过本领域技术人员公知的任一种技术可以产生特异识别特定表位的抗体片段。例如，用酶如木瓜蛋白酶(以产生Fab片段)或胃蛋白酶(以产生F(ab’)2片段)对免疫球蛋白分子实施蛋白水解切割可以产生Fab和F(ab’)2片段。F(ab’)2片段片段含有可变区、轻链恒定区和CH1区以及重链CH1结构域。此外，用本领域中公知的各种噬菌体展示方法也可以产生本发明的抗体。

在噬菌体展示方法中，功能抗体结构域被展示在噬菌体颗粒表面上，该噬菌体颗粒携带编码功能抗体结构域的多核苷酸序列。具体地，从动物cDNA文库(例如，受感染组织的人或鼠cDNA文库)扩增编码VH和VL结构域的DNA序列。通过PCR将编码VH和VL结构域的DNA用scFv接头重组连接在一起并克隆到噬菌粒中。该载体在大肠杆菌中电穿孔并用辅助噬菌体感染大肠杆菌。用于这些方法的噬菌体通常是丝状噬菌体，包括fd和M13并且VH和VL结构域通常重组地融合到噬菌体基因III或基因VIII。用抗原，例如，使用标记抗原或者结合成捕捉到固体表面或珠子的抗原可以选择或鉴定表达抗原结合结构域的噬菌体，该抗原结合结构域与特定抗原结合。可用于产生本发明抗体的噬菌体展示方法的实例包括在Brinkman等人，1995，J.Immunol.Methods 182：41-50；Ames等人，1995，J.Immunol.Methods 184：177-186；Kettleborough等人，1994，Eur.J.Immunol.24：952-958；Persic等人，1997，Gene 187：9-18；Burton等人，1994，Advancesin Immunology 57：191-280；PCT申请号PCT/GB911001134；国际公开号WO 90/02809、WO 91/10737、WO 92/01047、WO 92/18619、WO93/11236、WO 95/15982、WO 95/20401，和WO97/13844；和美国专利号5,698,426、5,223,409、5,403,484、5,580,717、5,427,908、5,750,753、5,821,047、5,571,698、5,427,908、5,516,637、5,780,225、5,658,727、5,733,743和5,969,108中公开的，这些文献的每一篇都被完整并入参考文献。

如在上面参考文献中讨论的，噬菌体选择后，可以从噬菌体分离抗体编码区并将其用于产生完整抗体，包括人抗体，或者任何其他希望的抗原结合片段，并在任一适宜的宿主中表达，这些宿主包括哺乳动物细胞、昆虫细胞、植物细胞、酵母和细菌，例如，如下面描述的。使用本领域中公知的方法如国际公开号WO 92/22324；Mullinax等人，1992，Bio Techniques 12(6)：864-869；Sawai等人，1995，AJRI 34：26-34；和Better等人1988，Science 240：1041-1043(所处参考文献被完整并入作为参考)中公开的方法也可以利用重组产生Fab、Fab’和F(ab’)2片段的技术。

为了产生完整抗体，可以用PCR引物(包括VH或VL核苷酸序列、限制性位点，和保护该限制性位点的侧翼序列)扩增scFv克隆中的VH或VL序列。利用本领域中技术人员公知的克隆技术，可以将PCR扩增的VH结构域克隆到表达VH恒定区，例如人γ4恒定区的载体中，并且PCR扩增的VL结构域可被克隆到表达VL恒定区，例如人κ或λ恒定区的载体中。优选地，表达VH或VL结构域的载体含有EF-1α启动子、分泌信号、可变结构域的克隆位点、恒定结构域，和选择标记如新霉素。使用本领域中技术人员公知的技术，也可以将VH和VL结构域克隆到表达必要恒定区的载体。然后将重链转化载体和轻链转化载体共转染到细胞系以产生稳定的或者瞬时的细胞系，该细胞系表达全长抗体，例如，IgG。

对于一些用途，包括抗体在人和体外检测测定中的用途，优选使用人或嵌合抗体。尤其希望完全的人抗体用于人受试者的治疗性治疗。可以通过本领域中公知的各种方法使用从人免疫球蛋白序列得到的抗体文库可以产生人抗体，这些方法包括上述噬菌体展示方法。也见美国专利号4,444,887和4,716,111；和国际公开号WO 98/46645、WO 98/50433、WO 98/24893、WO98/16654、WO 96/34096、WO 96/33735、和WO 91/10741；这些文献的每一篇都在此处被完整并入作为参考。

也可以用转基因小鼠产生人抗体，该转基因小鼠不能表达功能内源免疫球蛋白，但是能够表达人免疫球蛋白基因。例如，可以将人重链和轻链免疫球蛋白基因复合体随机或通过同源重组导入小鼠胚胎干细胞。备选地，除了人重链和轻链基因，还可将人可变区、恒定区，和多样性区导入小鼠胚胎干细胞中。通过同源重组导入人免疫球蛋白基因座可以使小鼠重链和轻链免疫球蛋白基因单独或同时失去功能。具体地，JH区的纯合缺失防止内源抗体产生。将修饰的胚胎干细胞扩大并微注射到胚泡中以产生嵌合小鼠。然后繁殖嵌合小鼠以产生纯合后代，该纯合后代表达人抗体。用所选抗原，例如，本发明多肽的所有或部分以正常方式免疫转基因小鼠。用常规杂交瘤技术可以从免疫的转基因小鼠得到针对该抗原的单克隆抗体。转基因小鼠所含有的人免疫球蛋白转基因在B细胞分化期间重排，并随后经历类别转换和体细胞突变。从而，使用这种技术，可能产生可用于治疗的IgG、IgA、IgM和IgE抗体。关于产生人抗体的该技术的综述，见Lonberg和Huszar(1995，Int.Rev.Immunol.13：65-93)。用于产生人抗体和人单克隆抗体的该技术的详细讨论和产生这些抗体的方案见，例如，国际公开号WO 98/24893、WO 96/34096、和WO 96/33735；和美国专利号5,413,923、5,625,126、5,633,425、5,569,825、5,661,016、5,545,806、5,814,318和5,939,598，这些文献都在此处被完整并入作为参考。此外，公司如Abgenix，Inc.(Freemont，CA)和Genpharm(San Jose，CA)可以使用类似于上面描述的技术提供针对所选抗原的人抗体。

嵌合抗体是一种分子，该分子中抗体的不同部分来自不同的免疫球蛋白。产生嵌合抗体的方法是本领域中公知的。见，例如，Morrison，1985，Science 229：1202；Oi等人，1986，BioTechniques 4：214；Gillies等人，1989，J.Immunol.Methods 125：191-202；和美国专利号5,807,715、4,816,567、4,816,397和6,331,415，它们在此处被完整并入作为参考。

人源化抗体是一种抗体或其变体或其片段，该抗体或其变体或其片段能够结合预定抗原并且含有基本上具有人免疫球蛋白的氨基酸序列的框架区和基本上具有非-人免疫球蛋白的氨基酸序列的CDR。人源化抗体基本上含有所有的至少一个，通常两个可变结构域(Fab、Fab’、F(ab’)2、Fabc、Fv)，其中所有或基本上所有CDR区都相应于非-人免疫球蛋白(即供体抗体)的CDR区并且所有或基本上所有框架区都是人免疫球蛋白共有序列的框架区。优选地，人源化抗体还含有通常人免疫球蛋白的免疫球蛋白恒定区(Fc)的至少一部分。通常，该抗体将含有轻链以及至少重链的可变结构域。该抗体还可以包括重链的CH1、铰链、CH2、CH3和CH4区域。人源化抗体可选自任一类别的免疫球蛋白，包括IgM、IgG、IgD、IgA和IgE，和任一同种型，包括IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。通常，恒定区是互补固定恒定结构域，其中希望该人源化抗体表现出细胞毒性活性，并且该类别是IgG1。但不希望这种细胞毒性时，恒定结构域可以是IgG2类别的。人源化抗体可含有来自一种以上类别或同种型的序列，并且选择特定恒定结构域以优化所希望的效应子功能是本领域普通技术人员知识范围内的。人源化抗体的框架和CDR区不必精确相应于亲本序列，例如，通过至少一个残基的置换、插入或缺失可以诱变供体CDR或共有框架，从而在该位点的CDR或框架不相应于共有的或输入的抗体。然而，这些突变将不是广泛的。通常，至少75％的人源化抗体残基将相应于亲本FR和CDR序列的残基，更通常90％，最优选地大于95％。用本领域中公知的各种技术可以产生人源化抗体，这些技术包括，但不限于，CDR-嫁接(欧洲专利号EP239,400；国际公开号WO 91/09967；和美国专利号5,225,539、5,530,101和5,585,089)、饰面或表面重塑(res urfacing)(欧洲专利号EP 592,106和EP 519,596；Padlan，1991，MolecularImmunology 28(4/5)：489-498；Studnicka等人，1994，ProteinEngineering 7(6)：805-814；和Roguska等人，1994，PNAS 91：969-973)、链改组(美国专利号5,565,332)，和在例如，美国专利号6,407,213，美国专利号5,766,886，国际公开号WO 93/17105，Tan等人，J.Immunol.169：1119-1125(2002)，Caldas等人，ProteinEng.13(5)：353-360(2000)，Morea等人，Methods 20(3)：267-279(2000)，Baca等人，J.Biol.Chem.272(16)：10678-10684(1997)，Roguska等人，Protein Eng.9(10)：895-904(1996)，Couto等人，Cancer Res.55(23 Supp)：5973s-5977s(1995)，Couto等人，Cancer Res.55(8)：1717-1722(1995)，Sandhu JS，Gene150(2)：409-410(1994)，和Pedersen等人，J.Mol.Biol.235(3)：959-973(1994)中公开的技术。通常，框架区中的框架残基将被来自CDR供体抗体的相应残基置换以改变，优选改善抗原结合。通过本领域中熟知的方法鉴定这些框架置换，例如，通过CDR和框架残基的相互作用建模鉴定对抗原结合重要的框架残基，通过序列比较鉴定特定位置的不寻常框架残基(见，例如，Queen等人，美国专利号5,585,089；和Riechmann等人，1988，Nature 332：323，它们在此处被完整并入作为参考)。

通过本领域中熟知的方法可以产生单结构域抗体，例如，缺少轻链的抗体。见Riechmann等人，1999，J.Immuno.231：25-38；Nuttall等人，2000，Curr.Pharm.Biotechnol.1(3)：253-263；Muylderman，2001，J.Biotechnol.74(4)：277302；美国专利号6,005,079；和国际公开号WO 94/04678，WO 94/25591，和WO01/44301，这些文献的每一篇都在此处被完整并入作为参考。

此外，使用本领域技术人员熟知的技术，可以将免疫特异结合抗原(例如，CD2多肽)的抗体再用于产生“模拟”抗原的抗-独特型抗体。(见例如，Greenspan & Bona，1989，FASEB J.7(5)：437-444；和Nissinoff，1991，J.Immunol.147(8)：2429-2438)。

5.9.1编码抗体的多核苷酸序列

本发明提供了含有编码抗体或其片段的核苷酸序列多核苷酸，该抗体或其片段免疫特异地结合抗原(例如，CD2多肽)。本发明还包括在高严格、中等或较低严格杂交条件，例如，如前面定义的杂交条件下，与编码本发明的抗体的多核苷酸杂交的多核苷酸。

通过本领域中公知的任一技术可以得到这些多核苷酸，并且确定这些多核苷酸的核苷酸序列。可以例如从文献或者数据库如GenBank得到对CD2多肽免疫特异的抗体的核苷酸序列。因为LoCD2a/BTI-322、LO-CD2b和MEDI-507的氨基酸序列是公知的，所以可以用本领域中公知的方法确定编码这些抗体的核苷酸序列，即，公知编码特定氨基酸的核苷酸密码子以如此方式装配以产生编码该多肽的核酸。可以从化学合成的寡核苷酸装配编码该抗体的这种多核苷酸(例如，如Kutmeier等人，1994，BioTechniques 17：242中描述的)，简言之，其包括合成含有编码该抗体的序列的部分的重叠寡核苷酸的合成，使那些寡核苷酸退火并连接，然后通过PCR扩增所连接的寡核苷酸。

备选地，可以从来自适宜来源的核苷酸产生编码抗体的多核苷酸。如果不能得到含有编码特定抗体的核酸的克隆，但是该抗体分子的序列是已知的，那么可通过化学合成或者从适宜的来源(例如，抗体cDNA文库，或者从表达该抗体的任何组织或细胞，如选择表达本发明抗体的杂交瘤细胞产生的cDNA文库或者分离的核酸，优选poly A+RNA)使用可以与该序列的3’和5’末端杂交的合成引物通过PCR扩增，或者通过用对特定基因序列特异的寡核苷酸探针克隆以从例如编码该抗体的cDNA文库鉴定cDNA克隆得到编码该免疫球蛋白的核酸。通过PCR扩增产生的核酸可以通过本领域公知的任何方法克隆到可复制克隆载体中。

一旦确定了抗体的核苷酸序列，就可以用本领域中熟知的操作抗体的核苷酸序列的方法例如，重组DNA技术、定点诱变、PCR，等(见，例如，Sambrook等人，1990，Molecular Cloning，A LaboratoryManual，第二版，Cold Spring Harbor Laboratory，Cold SpringHarbor，NY和Ausubel等人，编者，1998，Current Protocols inMolecular Biology，John Wiley & Sons，NY中描述的技术，这两个文献都被完整并入作为参考)操作该抗体的核苷酸序列以产生具有不同氨基酸序列的抗体，例如，产生氨基酸置换、缺失和/或插入。

在特定实施方案中，用常规重组DNA技术将一个或多个CDRs插入框架区中。框架区可以是天然发生的或共有框架区，优选人框架区(关于人框架区列表，见，例如，Chothia等人，1998，J.Mol.Biol.278：457-479)。优选地，通过框架区和CDRs组合产生的多核苷酸编码特异结合特定抗原(例如，CD2多肽)的抗体。优选地，如前面讨论的，在框架区内可以进行一个或多个氨基酸置换，并且优选地，该氨基酸置换提高了抗体与其抗原的结合。此外，这些方法可用于对参与链内二硫键的一个或多个可变区半胱氨酸残基实施氨基酸置换或缺失以产生缺少一个或多个链内二硫键的抗体分子。多核苷酸的其他改变被本发明包括并且在本领域技术范围内。

5.9.2抗体的重组表达

免疫特异地结合抗原的抗体的重组表达需要构建含有编码该抗体的多核苷酸的表达载体。一旦得到编码本发明的抗体分子的多核苷酸，就可通过重组DNA技术使用本领域中公知的技术制备产生抗体分子的载体。见，例如，美国专利号6,331,415，其在此处被完整并入作为参考。因而，此处描述了通过表达含有抗体编码核苷酸序列的多核苷酸制备蛋白质的方法。可以用本领域中技术人员熟知的方法构建含有抗体编码序列和适宜的转录和翻译控制信号的表达载体。这些方法包括，例如，体外重组DNA技术、合成技术，和体内基因重组。从而，本发明提供了可复制的载体，其含有编码本发明的抗体分子、抗体的重链或轻链、抗体的重链或轻链可变结构域或其部分，或者重链或轻链CDR的核苷酸序列，该核苷酸序列可操作地连接启动子。这些载体可包括编码该抗体分子的恒定区的核苷酸序列(见，例如，国际公开WO 86/05807；国际公开号WO 89/01036；和美国专利号5,122,464)，并且该抗体的可变结构域可被克隆到这种载体以表达完整重链、完整轻链或完整重链和完整轻链两者。

通过常规技术将表达载体转移到宿主细胞，然后通过常规技术培养转染的细胞以产生本发明的抗体。从而，本发明包括宿主细胞，其含有编码本发明的抗体或其片段、该抗体的重链或轻链、该抗体的部分、或本发明的单链抗体的多核苷酸，该多核苷酸可操作地连接异源启动子。在关于双链抗体表达的优选实施方案中，编码重链和轻链的载体可以在宿主细胞中共表达以表达完整免疫球蛋白分子，如下详述。

各种宿主表达载体系统可用于表达本发明的抗体分子(见，例如，美国专利号5,807,715)。这些宿主表达系统不仅代表载体，通过该载体可以产生并随后纯化目标编码序列，而且还代表细胞，其当被适宜的核苷酸编码序列转化或转染时，原位表达本发明的抗体分子。这些宿主表达系统包括但不限于微生物，如用含有抗体编码序列的重组噬菌体DNA、质粒DNA或粘粒DNA表达载体转化的细菌(例如，大肠杆菌(E.coli)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis))；用含有抗体编码序列的重组病毒表达载体(例如，杆状病毒)感染的昆虫细胞；用含有抗体编码序列的重组病毒表达载体(例如，花椰菜花叶病毒花叶病毒CaMV；或烟草花叶病毒TMV)感染或者用含有抗体编码序列的重组质粒表达载体(例如，Ti质粒)转化的植物细胞系统；或者带有来自哺乳动物细胞基因组的启动子(例如，金属硫蛋白启动子)或来自哺乳动物病毒(例如，腺病毒晚启动子；牛痘病毒7.5K启动子)的重组表达构建体的哺乳动物系统(例如，COS、CHO、BHK、293、NSO和3T3细胞)。优选地，细菌细胞如大肠杆菌，更优选地，真核细胞，特别用于表达完整重组抗体分子的真核细胞被用于表达重组抗体分子。例如，中国仓鼠卵巢细胞(CHO)与一种载体如来自人巨细胞病毒的主要中早基因启动子元件联合是抗体的有效表达系统(Foecking等人，1986，Gene 45：101；Cockett等人，1990，Bio/Technology 8：2)。在特定实施方案中，组成性启动子、可诱导的启动子或组织特异的启动子调节编码免疫特异地结合一种或多种抗原的抗体的核苷酸序列的表达。

在细菌系统中，根据所要表达的抗体分子的用途可以有利地选择许多表达载体。例如，当将产生大量这种蛋白质以生产抗体分子的药物组合物时，希望载体指导融合蛋白产物的高水平表达，其中可容易地纯化融合蛋白产物。这些载体包括，但不限于，大肠杆菌表达载体pUR278(Ruther等人，1983，EMBO 12：1791)，其中抗体编码序列可以单独地连接到载体并与Lac Z编码区处于同一读框内从而产生融合蛋白；pIN载体(Inouye & Inouye，1985，Nucleic Acids Res.13：3101-3109；Van Heeke & Schuster，1989，J.Biol.Chem.24：5503-5509)；等等。pGEX载体也可用于表达外来蛋白，该外来蛋白作为与谷胱甘肽5-转移酶(GST)的融合蛋白。通常，这些融合蛋白是可溶的并且可从裂解的细胞容易地纯化，纯化方法是将融合蛋白吸附并结合到基质谷胱甘肽琼脂糖珠，然后在游离谷胱甘肽存在下洗脱。设计pGEX载体以包括凝血酶或因子Xa蛋白酶切割位点从而所克隆的靶基因可以从GST部分释放。

在昆虫系统中，苜蓿银纹夜蛾核型多脚体病毒(AcNPV)被用作载体以表达外来基因。病毒在草地夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞中生长。可将抗体编码序列单独克隆到病毒的非必需区(例如，多角体蛋白基因)并置于AcNPV启动子(例如多角体蛋白启动子)的控制下。

在哺乳动物宿主细胞中，可以利用许多基于病毒的表达系统。当用腺病毒作为表达载体时，可将目标抗体编码序列连接到腺病毒转录/翻译控制复合体，例如，晚启动子和三联前导序列。然后通过体外或体内重组将该嵌合基因插入到腺病毒基因组中。插入病毒基因组的非必需区(例如，区域E1或E3)将得到重组病毒，该病毒是可存活的并且能够在受感染的宿主中表达抗体分子(例如，见Logan & Shenk，1984，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 8 1：355-359)。为了有效翻译所插入的抗体编码序列可能还需要特定启动信号。这些信号包括ATG起始密码子和相邻序列。此外，起始密码子必须与所希望的编码序列的读框同相以确保完整插入序列的翻译。这些外源翻译控制信号和起始密码子可以是各种来源的(天然和合成的)。通过包括适宜的转录增强元件、转录终止子等可以提高表达效率(见，例如，Bittner等人，1987，Methods in Enzymol.153：51-544)。

此外，可以选择宿主细胞株系，其调节插入序列的表达，或者以所希望的特异方式修饰和加工基因产物。蛋白质的这些修饰(例如，糖基化)和加工(例如，切割)可能对于蛋白质的功能是重要的。不同宿主细胞的翻译后加工和蛋白质和基因产物的修饰具有特征性和特定机理。可以选择适宜的细胞系或宿主细胞以确保所表达的外来蛋白的正确修饰和加工。为此，可以使用真核宿主细胞，其细胞机器可以对初级转录产物正确加工、对基因产物正确糖基化和磷酸化。这些哺乳动物宿主细胞包括但不限于CHO，VERY、BHK、Hela、COS、MDCK、293、3T3、W138、BT483、Hs578T、HTB2、BT20和T47D、NS0(不内源产生任何免疫球蛋白链的鼠骨髓瘤细胞系)、CRL7030和HsS78Bst细胞。

对于重组蛋白的长期、高产率生产，优选稳定表达。例如，可以将稳定表达抗体分子的细胞系工程化。与其使用含有病毒复制原点的表达载体，不如通过受到适宜的表达控制元件(例如，启动子、增强子序列、转录终止子、多腺苷酸化位点，等)和适宜的选择标记控制的DNA转化宿主细胞。导入外来DNA后，可以让工程化细胞在富集培养基中生长1-2天，然后转到选择培养基。重组质粒中的选择标记赋予对选择的抗性并使得细胞将质粒稳定整合到它们的染色体并生长而形成转化灶，该转化灶反过来又可以被克隆并扩大成细胞系。该方法可有利地用于工程化表达抗体分子的细胞系。这些工程化的细胞系可尤其用于筛选和评价与抗体分子直接或间接相互作用的组合物。

可以使用许多选择系统，包括但不限于，单纯疱疹病毒胸苷激酶(Wigler等人，1977，Cell 11：223)、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(Szybalska & Szybalski，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA48：202)和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶(Lowy等人，1980，Cell 22：8-17)基因可分别用于tk-、hgprt-或aprt-细胞。此外，抗代谢物抗性可用作下列基因的选择基础：dhfr，其赋予氨甲蝶呤抗性(Wigler等人，1980，Natl.Acad.Sci.USA 77：357；O′Hare等人，1981，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78：1527)；gpt，其赋予霉酚酸抗性(Mulligan& Berg，1981，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78：2072)；neo，其赋予氨基糖苷G-418抗性(Wu和Wu，1991，Biotherapy 3：87-95；Tolstoshev，1993，Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.32：573-596；Mulligan，1993，Science 260：926-932；和Morgan和Anderson，1993，Ann.Rev.Biochem.62：191-217；5月，1993，TIB TECH 11(5)：155-215)；和hygro，其赋予潮霉素抗性(Santerre等人，1984，Gene 30：147)。本领域中公知的重组DNA技术的方法可常规地用于选择所希望的重组克隆，并且这些方法在例如，Ausubel等人(编者)，Current Protocols in Molecular Biology，John Wiley & Sons，NY(1993)；Kriegler，Gene Transfer and Expression，A LaboratoryManual，Stockton Press，NY(1990)；和第12和13章，Dracopoli等人(编者)，Current Protocols in Human Genetics，John Wiley& Sons，NY(1994)；ColberreGarapin等人，1981，J.Mol.Biol.150：1中描述，这些文献在此处被完整并入作为参考。

通过载体扩增可以增加抗体分子的表达水平(综述，见Bebbington和Hentschel，使用基于基因扩增的载体在哺乳动物细胞中表达克隆的基因，DNA cloning，卷3(Academic Press，New York，1987))。当表达抗体的载体系统中的标记物是可扩增的时候，宿主培养物中存在的抑制剂的水平的增加将增加该标记基因的拷贝数。因为扩增的区域与抗体基因相关联，所以抗体的产量也将增加(Crouse等人，1983，Mol.Cell.Biol.3：257)。

可以用本发明的两种表达载体共转染宿主细胞，第一种载体编码重链源自的多肽，第二种载体编码轻链源自的多肽。这两种载体可以含有相同的选择标记，其使得重链和轻链多肽的表达相等。备选地，可以使用单一载体，其编码并且能够表达重链和轻链多肽。在这种情况下，轻链应该置于重链之前以避免无毒性的重链过量(Proudfoot，1986，Nature 322：52；和Kohler，1980，Proc.Natl. Acad. Sci.USA 77：2197)。重链和轻链的编码序列可以含有cDNA或基因组DNA。

一旦通过重组表达产生了本发明的抗体分子，就可以通过本领域中任一公知方法纯化该抗体，例如，通过层析(例如，离子交换、亲和，尤其通过对蛋白质A后的特定抗原的亲和，和大小排阻柱层析)、离心、差别溶解性，或用于蛋白质纯化的任一其他标准技术纯化该抗体。此外，本发明的抗体或其片段可以与此处描述的或本领域中其他公知的异源多肽序列融合以方便纯化。

5.10产生多肽和融合蛋白的方法

通过标准重组DNA技术或通过蛋白质合成技术，例如，通过使用肽合成仪可以产生多肽和融合蛋白。例如，通过常规技术(包括自动化DNA合成仪)可以合成编码多肽或融合蛋白的核酸分子。备选地，用锚定引物可以实施基因片段的PCR扩增，该锚定引物引起两个连续基因片段之间的互补突出端，可随后将这两个基因片段退火并再扩增以产生嵌合基因序列(见，例如，Current Protocols in MolecularBiology，-Ausubel等人，编者John Wiley & Sons，1992)。此外，可将编码生物活性分子的核酸克隆到含有Fc结构域或其片段的表达载体从而该生物活性分子连接到Fc结构域或Fc结构域片段的框内。

将多肽融合或缀合到抗体的恒定区的方法是本领域中公知的。见，例如，美国专利号5,336,603、5,622,929、5,359,046、5,349,053、5,447,851、5,723,125、5,783,181、5,908,626、5,844,095和5,112,946；欧洲专利号EP 307,434；EP 367,166；EP394,827；国际公开号WO 91/06570、WO96/04388、WO 96/22024、WO 97/34631和WO 99/04813；Ashkenazi等人，1991，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88：10535-10539；Traunecker等人，1988，Nature，331：84-86；Zheng等人，1995，J.Immunol.154：5590-5600；和Vil等人，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：11337-11341，它们在此处被完整并入作为参考。

可从本领域中技术人员可得到的任何信息得到编码生物活性分子和Fc结构域或其片段的核苷酸序列(即，从Genbank、文献或通过常规克隆)。可以将编码多肽或融合蛋白的核苷酸序列插入到适宜的表达载体，即含有所插入的蛋白-编码序列的转录和翻译必需的载体。本发明中可利用各种宿主-载体系统以表达蛋白质-编码序列。这些系统包括但不限于用病毒(例如，牛痘病毒、腺病毒，等)感染的哺乳动物细胞系统；用病毒(例如，杆状病毒)感染的昆虫细胞系统；微生物，如含有酵母载体的酵母；或用噬菌体、DNA、质粒DNA或粘粒DNA转化的细菌。载体的表达元件在它们的长度和特异性上不同。取决于所用的宿主-载体系统，可以使用多种适宜的转录和翻译元件的任一种。

通过本领域中公知的任一启动子或增强子可以控制多肽或融合蛋白的表达。可用于控制编码融合蛋白的基因的表达的启动子包括，但不限于，SV40早启动子(Bernoist和Chambon，1981，Nature290：304-310)、劳氏肉瘤病毒的3’长末端重复中所含的启动子(Yamamoto，等人，1980，Cell 22：787-797)、疱疹病毒胸苷激酶启动子(Wagner等人，1981，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.78：1441-1445)、金属硫蛋白基因的调节序列(Brinster等人1982，Nature 296：39-42)、四环素(Tet)启动子(Gossen等人，1995，Proc.Nat.Acad.Sci.USA 89：5547-5551)；原核表达载体，如β-内酰胺酶启动子(Villa-Kamaroff等人，1-978，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.75：3727-3731)、或tac启动子(DeBoer等人，1983，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.80：21-25；还见″重组细菌的有用蛋白″，Scientific American，1980，242：74-94)；含有胭脂氨酸核酶启动子区的植物表达载体(Herrera-Estrella等人，Nature 303：209-213)或花椰菜花叶病毒35S RNA启动子(Gardner等人，1981，Nucl.Acids Res.9：2871)、和光合成酶核酮糖二磷酸羧化酶的启动子(Herrera-Estrella等人，1984，Nature 310：115-120)；酵母或其他真菌的启动子元件，如Gal4启动子、ADC(乙醇脱氢酶)启动子、PGK(磷酸甘油激酶)启动子、碱性磷酸酶启动子，和下面的动物转录控制区，它们表现出组织特异性并已经用于转基因动物：弹性蛋白酶I基因控制区，其在胰腺的腺泡细胞中有活性(Swift等人，1984，Cell38：639-646；Ornitz等人，1986，Cold Spring Harbor Symp.Quant.Biol.50：399-409；MacDonald，1987，Hepatology 7：425-515)；在胰腺β细胞中有活性的胰岛素基因控制区(Hanahan，1985，Nature315：115-122)；在淋巴细胞中有活性的免疫球蛋白基因控制区(Grosschedl等人，1984，Cell 38：647-658；Adames等人，1985，Nature 318：533-538；Alexander等人，1987，Mol.Cell.Biol.7：1436-1444)；在睾丸、乳腺、淋巴和肥大细胞中有活性的小鼠乳腺肿瘤病毒控制区(Leder等人，1986，Cell 45：485-495)；在肝脏中有活性的白蛋白基因控制区(Pinkert等人，1987，Genes and Devel.1：268-276)；在肝脏中有活性的α-胎蛋白(Krumlauf等人，1985，Mol.Cell.Biol.5：1639-1648；Hammer等人，1987，Science 235：53-58；在肝脏中有活性的α1-抗胰蛋白酶基因控制区(Kelsey等人，1987，Genes和Devel.1：161-171)；在骨髓细胞中有活性的β-珠蛋白基因控制区(Mogram等人，1985，Nature 315：338-340；Kollias等人，1986，Cell 46：89-94)；在脑中的少突胶质细胞中有活性的髓磷脂碱性蛋白基因控制区(Readhead等人，1987，Cell 48：703-712)；在骨骼肌中有活性的肌球蛋白轻链-2基因控制区(Sani，1985，Nature 314：283-286)；在神经元细胞中有活性的脑-来源的亲神经因子(BDNF)基因控制区(Tabuchi等人，1998，Biochem.Biophysic.Res.Com.253：818-823)；在星形细胞中有活性的胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)启动子(Gomes等人，1999，Braz J Med Biol Res 32(5)：619-631；Morelli等人，1999，Gen.Virol.80：571-583)和在下丘脑中有活性的促性腺释放激素基因控制区(Mason等人，1986，Science 234：1372-1378)。

在特定实施方案中，多肽或融合蛋白的表达受到组成性启动子的调节。在另一实施方案中，多肽或融合蛋白的表达受到可诱导的启动子的调节。多肽或融合蛋白的表达受到组织特异的启动子的调节。

在特定实施方案中，所用的载体含有启动子，其可操作地连接多肽-或融合蛋白编码核酸、一个或多个复制原点，和任选地，一个和多个可选择的标记物(例如，抗生素抗性基因)。

在哺乳动物细胞中，可以利用许多基于病毒的表达系统。当用腺病毒作为表达载体时，多肽或融合蛋白编码序列可以连接到腺病毒转录/翻译控制复合体，例如，晚启动子和三联前导序列。然后通过体外或体内重组将该嵌合基因插入到腺病毒基因组中。插入病毒基因组的非必需区(例如，区域E1或E3)将得到重组病毒，该病毒是可存活的并且能够在受感染的宿主中表达抗体分子(例如，见Logan & Shenk，1984，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81：355-359)。为了有效翻译所插入的融合蛋白编码序列可能还需要特定启动信号。这些信号包括ATG起始密码子和相邻序列。此外，起始密码子必须与所希望的编码序列的读框同相以确保完整插入序列的翻译。这些外源翻译控制信号和起始密码子可以是各种来源的(天然和合成的)。通过包括适宜的转录增强元件、转录终止子等可以提高表达效率(见，例如，Bittner等人，1987，Methods in Enzymol.153：51-544)。

可通过三种一般方法鉴定含有编码多肽或融合蛋白的基因插入序列的表达载体：(a)核酸杂交，(b)“标记”基因功能的存在或缺乏，和(c)插入序列的表达。在第一种方法中，分别用含有与编码多肽或融合蛋白的插入基因同源的序列的探针通过核酸杂交可以检测表达载体中编码多肽或融合蛋白的基因的存在。在第二种方法中，基于由于载体中编码多肽或融合蛋白的核苷酸序列的插入导致的某些“标记”基因功能(例如，胸苷激酶活性、抗生素抗性、转化表型、杆状病毒中包含体的形成，等)的存在或缺乏可以鉴定和选择重组载体/宿主系统。例如，如果编码融合蛋白的核苷酸序列插入到载体的标记基因序列，那么通过标记基因功能的缺乏可以鉴定含有编码融合蛋白插入序列的基因重组体。在第三种方法种，通过测定重组体表达的基因产物(例如，融合蛋白)可以鉴定重组表达载体。这些测定可以基于，例如，体外测定系统中融合蛋白的物理或功能性质，例如，与抗-生物活性分子抗体的结合。

此外，可以选择宿主细胞株系，该株系调节所插入序列的表达，或者以所希望的特定方式调节并加工基因产物。存在某些诱导剂时，某些启动子的表达可以升高；从而，可以控制基因工程化的融合蛋白的表达。此外，不同宿主细胞的翻译和翻译后加工和修饰(例如，蛋白质的糖基化、磷酸化)具有特征性和特定机理。可以选择适宜的细胞系或宿主细胞以确保所表达的外来蛋白的正确修饰和加工。例如，细菌系统中的表达将产生未糖基化产物，酵母中的表达将产生糖基化产物。可以使用真核宿主细胞，其细胞机器可以对初级转录产物正确加工、对基因产物正确糖基化和磷酸化。这些哺乳动物宿主细胞包括但不限于CHO，VERY、BHK、Hela、COS、MDCK、293、3T3、W138、NS0，和尤其神经元细胞系如，例如，SK-N-AS、SK-N-FI、SK-N-DZ人成神经细胞瘤(Sugimoto等人，1984，J.Natl.Cancer Inst.73：51-57)、SK-N-SH人成神经细胞瘤(Biochim.Biophys.Acta，1982，704：450-460)、Daoy人小脑成神经管细胞瘤(He等人，1992，Cancer Res.52：1144-1148)、DBTRG-05MG成胶质细胞瘤(Kruse等人，1992，InVitro Cell.Dev.Biol.28A：609-614)、IMR-32人成神经细胞瘤(Cancer Res.，1970，30：2110-2118)、1321N1人星形细胞瘤(Proc.Natl Acad.Sci.USA，1977，74：4816)、MOG-G-CCM人星形细胞瘤(Br.J.Cancer，1984，49：269)、U87MG人成胶质细胞瘤-星形细胞瘤(Acta Pathol.Microbiol.Scand.，1968，74：465-486)、A172人成胶质细胞瘤(Olopade等人，1992，Cancer Res.52：2523-2529)、C6大鼠胶质瘤细胞(Benda等人，1968，Science 161：370-371)、Neuro-2a小鼠成神经细胞瘤(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1970，65：129-136)、NB41A3小鼠成神经细胞瘤(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1962，48：1184-1190)、SCP绵羊脉络丛(Bolin等人，1994，J.Virol.Methods 48：211-221)、G355-5、PG-4猫正常星形细胞(Haapala等人，1985，J.Virol.53：827-833)、Mpf雪貂脑(Trowbridge等人，1982，In Vitro 18：952-960)，和正常细胞系，如，例如CTX TNA2大鼠正常皮质脑(Radany等人，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：6467-6471)如，例如，CRL7030和Hs578Bst。此外，不同载体/宿主表达系统可以不同程度地影响加工反应。

对于重组蛋白的长期、高产率生产，优选稳定表达。例如，可以将稳定表达抗体分子的细胞系工程化。与其使用含有病毒复制原点的表达载体，不如通过受到适宜的表达控制元件(例如，启动子、增强子序列、转录终止子、多腺苷酸化位点，等)和适宜的选择标记控制的DNA转化宿主细胞。导入外来DNA后，可以让工程化细胞在富集培养基中生长1-2天，然后转到选择培养基。重组质粒中的选择标记赋予选择抗性并使得细胞将质粒稳定整合到它们的染色体并生长而形成转化灶，该转化灶反过来又可以被克隆并扩大成细胞系。该方法可有利地用于工程化细胞系，该细胞系表达免疫特异地结合CD2多肽的多肽或融合蛋白。这些工程化的细胞系可尤其用于筛选和评价影响免疫特异地结合CD2多肽的多肽或融合蛋白的活性的化合物。

可以使用许多选择系统，包括但不限于，单纯疱疹病毒胸苷激酶(Wigler等人，1977，Cell 11：223)、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(Szybalska & Szybalski，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA48：202)和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶(Lowy等人，1980，Cell 22：8-17)基因可分别用于tk-、hgprt-或aprt-细胞。此外，抗代谢物抗性可用作下列基因的选择基础：dhfr，其赋予氨甲蝶呤抗性(Wigler等人，1980，Natl.Acad.Sci.USA 77：357；O′Hare等人，1981，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78：1527)；gpt，其赋予霉酚酸抗性(Mulligan& Berg，1981，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78：2072)；neo，其赋予氨基糖苷G-418抗性(Colberre-Garapin，等人，1981，J.Mol.Biol.150：1)；和hygro，其赋予潮霉素抗性(Santerre等人，1984，Gene 30：147)。

一旦通过重组表达产生了本发明的多肽或融合蛋白，就可以通过本领域中任一公知方法纯化该抗体，例如，通过层析(例如，离子交换、亲和，尤其通过对蛋白质A后的特定抗原的亲和，和大小排阻柱层析)、离心、差别溶解性，或用于蛋白质纯化的任一其他标准技术纯化该抗体。

试剂盒

本发明提供了药物包装或药盒，其含有一个或多个装有CD2拮抗剂的容器，CD2拮抗剂的量可有效预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。在优选的实施方案中，本发明提供了药物包装或药盒，其含有一个或多个装有MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的容器，MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段的量可有效预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。本发明还提供了含有装有一种或多种CD2拮抗剂和一种或多种其他预防或治疗剂的一个或多个容器的药物包装或药盒，一种或多种CD2拮抗剂和一种或多种其他预防或治疗剂的量可有效预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。本发明还提供了含有装有本发明的药物组合物的一种或多种组分的一个或多个容器的药物包装或药盒，本发明的药物组合物的一种或多种组分的量可有效预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。任选地，与这些容器相伴的可以是由管理药物或生物制品的生产、使用或销售的政府机构规定的形式的公告，该公告反映了该机构批准用于人的施用的生产、使用或销售。

5.12加工制品

本发明还包括完成的包装和标记的药物产品。该制品包括装在适宜的器皿或容器如玻璃瓶或其他密封容器中的适宜的单位剂量。对于适于肠胃外施用的剂型，活性成分，例如，CD2拮抗剂，尤其MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段是无菌的并且适于作为无微粒的溶液施用。换句话说，本发明包括肠胃外溶液和冻干的粉剂，它们都是无菌的，并且后者适于在注射前重构。备选地，单位剂型可以是适于经口、透皮、鼻内、或局部递送的固体。

在优选的实施方案中，单位剂型适于静脉内、肌内、鼻内、经口、局部或皮下递送。从而，本发明包括适于每种递送途径的溶液，优选无菌溶液。

对于任一种药物产品，设计包装材料和容器以保护保存和运输期间产品的稳定性。此外，本发明的产品包括关于使用或其他信息材料的教导，其建议医生、技术人员或患者怎样适当地防止、治疗、处理或改善所述疾病或失调。换句话说，产品包括指示或建议给药方案的教导，包括，但不限于，实际剂量、监视方法、总淋巴细胞、肥大细胞数、T细胞数、IgE产生，和其他监视信息。

特别地，本发明提供了加工制品，其包含包装材料，如盒子、瓶子、管、小瓶、容器、喷雾器、吹入器、静脉内(i.v.)包、封包等；和所述包装材料含有的药剂的至少一个单位剂型，其中所述药剂含有CD2拮抗剂，尤其MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，和本发明的组合物，其中所述包装材料包括教导方法，其表明通过使用特定剂量并使用如此处描述的特定给药方案，所述抗体可用于预防、治疗、处理，或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

本发明还提供了加工制品，其包含包装材料，如盒子、瓶子、管、小瓶、容器、喷雾器、吹入器、静脉内(i.v.)包、封包等；和所述包装材料含有的每种药剂的至少一个单位剂型，其中一种药剂含有CD2拮抗剂，尤其MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，本发明的组合物并且其他药剂含有第二种不同的抗体，其中所述包装材料包括教导方法，其表明通过使用特定剂量并使用如此处描述的特定给药方案，所述药剂可用于预防、治疗、处理，和/或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

本发明还提供了加工制品，其包含包装材料，如盒子、瓶子、管、小瓶、容器、喷雾器、吹入器、静脉内(i.v.)包、封包等；和所述包装材料含有的每种药剂的至少一个单位剂型，其中一种药剂含有CD2拮抗剂，尤其MEDI-507、其类似物、衍生物或抗原结合片段，或本发明的组合物，并且其中所述包装材料包括教导方法，其表明通过使用特定剂量并使用如此处描述的特定给药方案，所述药剂可用于预防、治疗、处理，和/或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状。

本发明提供了可通过本发明的方法减小或避免的副作用，这些副作用在信息材料中指出，该信息材料包含在用于预防、治疗、处理，和/或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的加工制品中。可通过本发明的方法减小或避免的副作用包括，但不限于，重要体征异常(发热、心搏过速、bardycardia、高血压、低血压)、血液学事件(贫血、淋巴细胞减少、白细胞减少、血小板减少)、头痛、寒战、眩晕、恶心、衰弱、背痛、胸痛(胸压力)、腹泻、肌痛、疼痛、搔痒、牛皮癣、鼻炎、出汗、注射部位反应，和血管舒张。因为CD2拮抗剂和本发明的组合物是免疫抑制的，长期免疫抑制可增加感染，包括机会感染的危险。长期和持续免疫抑制还可导致发生某些类型的癌症的危险增加。

此外，包含在用于预防、治疗、处理，和/或改善癌症，尤其T-细胞恶性肿瘤，或者其一种或多种症状的加工制品中的信息材料可以指出外来蛋白也可以导致变态反应，包括过敏反应，或者胞嘧啶释放综合症。信息材料应该指出变态反应可以仅表现为轻微搔痒的皮疹或者可以是严重的如红皮病、Stevens-Johnson综合症、血管炎或过敏反应。信息材料将还指出过敏反应是严重的并且偶尔是致命的超敏反应。当任何外来蛋白被注射到身体时可能发生包括过敏反应的变态反应。它们可以是轻微的表现如荨麻疹或疹到致命的系统性反应。暴露后，通常10分钟内发生过敏反应。患者可能经历感觉异常、血压过低、喉水肿、精神状态变化、脸或咽血管性水肿、气道阻塞、支气管痉挛、荨麻疹和瘙痒、血清病、关节炎、过敏性肾炎、血管球性肾炎、暂时性关节炎，或嗜酸粒细胞增多。

6.实施例

该实施例阐明了MEDI-507单独或与人源化抗-Tac(“HAT”)联合用于治疗成人T-细胞白血病(“ATL”)的效能。

6.1材料和方法

雌性NOD/SCID小鼠购买于Jackson实验室(Bar Harbor，ME)。用15×10⁶个新鲜分离的MET-1细胞注射6到12周龄的小鼠以建立白血病。将MET-1白血病细胞导入小鼠后10到14天，动物的可溶性白介素2-受体α(sIL-2Rα)(Tac，CD25)的水平为1000到10,000pg/mL。将小鼠随机分配到15组，每一组的替代肿瘤标记物——血清可溶性IL-2Rα(Tac，CD25)的水平相当。对每组小鼠静脉内施用100μg PBS、HAT、MEDI-507或MEDI-507和HAT的组合，每周施用一次，持续4周。对另一组静脉内施用100μg MEDI-507，每周施用一次，持续6个月。之所以使用每只小鼠100μg施用是因为发现该用量足够保持施用之间的周内靶标抗原的饱和。包括NOD/SCID小鼠的对照组，其不接受肿瘤或治疗剂。

在Jeffrey Ravetch(Rockefeller University，New York，NY)的实验室产生FcRγ敲除小鼠。为了研究MEDI-507的肿瘤杀伤机理中FcRγ的角色，在FcRγ敲除小鼠和FcRγ完整的NOD/SCID小鼠中使用非常大的肿瘤负载。将sIL-2Rα水平为20,000到90,000pg/mL血清(平均80,000pg/mL)(其代表大肿瘤负载)的小鼠随机分配到每组10只小鼠的研究组中。一组FcRγ敲除小鼠接受PBS，另一组接受每周4次腹膜内MEDI-507施用。在平行的两组FcRγ完整的小鼠中，一组接受PBS，另一组接受4次腹膜内100μg MEDI-507施用。

6.1.1通过ELISA测量sIL-Rα和可溶的β₂μ-微球蛋白

在全部治疗实验中，人IL-2Rα和人β₂-免疫球蛋白(β₂μ)被用作替代肿瘤标记。用从R & D Systems(Minneapolis，MN)购买的酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒测量人IL-2Rα和人β₂μ的血清浓度。按照生产商试剂盒插页中建议的实施ELISAs。

6.1.2MEDI-507与MET-1 ATL细胞结合的分析

在治疗实验实施前通过流式细胞术分析MEDI-507与CD2的结合。按照Phillips等人，2000，Cancer Res.60：6977-6984中描述的表型分析制备表型的MET-1白血病细胞。将细胞用第一抗体MEDI-507或利妥希玛(rituximab)在冰上染色30分钟，洗涤，然后用异硫氰酸荧光素(FITC)-标记的针对人免疫球蛋白G(IgG)Fc片段的抗体染色。洗涤后，用Becton Dickinson FACSort流式细胞仪(San Jose，CA)分析MET-1细胞上MEDI-507对CD2的结合。

6.1.3mAbs

人源化mAb MEDI-507(其识别CD2)由BioTransplant赠送，从Hoffmann-La Roche(Nutley，NJ)得到HAT——(daclizumab(Zenapax)针对CD25的人源化mAb。从IDECPharmaceuticals(San Diego，CA)得到利妥希玛。

6.1.4统计

通过ELISA测定法测定血清中人β₂μ并用Kaplan-Meier分析监视小鼠的存活以评估小鼠中白血病的发展。使用StatView(SASInstitute，Cary，NC)产生Kaplan-Meier累积存活图。在β₂μ水平的分析中实施不成对t检验。

6.2结果

6.2.1MET-1 ATL细胞上MEDI-507与CD2结合的阐明

使用荧光激活细胞分类术(FACS)分析，表明与B-细胞特异的抗-CD20mAb——利妥希玛的反应性相比对(图2B)，MEDI-507结合MET-1ATL细胞(图2A)。在图2A中，同种型对照用实心区域代表，而线代表人源化抗-CD2。在图2B中，实心区域是同种型对照，线代表人源化抗-CD20。

6.2.2用针对CD2的MEDI-507对ATL的有效治疗

图3是在研究的第14、28和60天患有MET-1 ATL白血病的NOD/SCID小鼠组的人β₂μ血清水平的图。图3表明通过静脉内施用100μg/周MEDI-507、HAT和MEDI-507与HAT的组合抑制了患有MET-1ATL的NOD/SCID小鼠中MET-1 ATL细胞的生长。如图3所阐明，与接受PBS的对照组相比，在4周MEDI-507(P＜0.0001)、4周HAT(P＜0.0001)、4周MEDI-507与HAT组合(P＜0.0001)、和6个月MEDI-507组(P＜0.0001)的小鼠中人β₂μ——鼠模型中的替代肿瘤标记的血清水平有显著降低。

图4是不同组小鼠的Kaplan-Meler存活图。接受每周4次HAT施用的患有MET-1 ATL的NOD/SCID小鼠的累积存活用实心圆表示。接受每周4次MEDI-507施用的患有MET-1 ATL白血病的NOD/SCID小鼠的累积存活在图4上用大菱形表示。接受每周4次MEDI-507与HAT组合施用的患有MET-1 ATL白血病的NOD/SCID小鼠的累积存活在图4上用三角形表示。接受每周4次PBS施用的患有MET-1 ATL白血病的NOD/SCID小鼠的累积存活在图4上用×表示。接受每周MEDI-507施用持续6个月的患有MET-1 ATL白血病的NOD/SCID小鼠的累积存活在图4上用小菱形表示。没有接受任何治疗剂的无MET-1 ATL白血病的NOD/SCID小鼠的累积存活在图4上用正方形表示。如图4所示，与施用PBS的小鼠相比，用MEDI-507、HAT和MEDI-507与HAT的组合治疗的小鼠的存活显著(P＜0.0001)延长。PBS组中的所有小鼠在研究的第70天死亡，而在第70天，4周MEDI-507组中67％的小鼠、4周HAT组中53％的小鼠、4周MEDI-507和HAT组合组中80％的小鼠、6个月MEDI-507组中100％的小鼠存活。6个月MEDI-507组的寿命比所有其他组的都明显更长并且与不接受肿瘤或治疗剂的小鼠无肿瘤对照组的寿命相当。在治疗开始后第180天，无肿瘤组的15只小鼠中的13只和6个月MEDI-507组中15只小鼠的13只是活的，相比4周MEDI-507组的15只中的6只和MEDI-507和HAT组合组的15只中的8只小鼠是活的。4周HAT组中所有小鼠到第114天时都死亡。

图5表明在每周给予MEDI-507持续6个月的小鼠中整个施用期间人β₂μ水平不断下降。接受6个月每周MEDI-507治疗的13只幸存小鼠中的12只在6个月末检测不到人β₂μ水平。

当研究在2个额外实验中重复时，观察到在ATL治疗中MEDI-507的相当的效能。

6.2.3FcRγ表达可能在MEDI-507作用中发挥作用

在FcRγ敲除组中，接受每周4次MEDI-507和接受PBS的动物之间的存活没有显著差异(P＞0.702)。

图6A显示了FcRγ完整的患有MET-1 ATL的NOD/SCID小鼠的Kaplan-Meier存活图。图6B显示了FcRγ被敲除的患有MET-1 ATL的NOD/SCID小鼠的Kaplan-Meier存活图。施用PBS的FcRγ被敲除的小鼠组和施用MEDI-507的FcRγ被敲除的小鼠组之间的存活没有显著的统计学差异。在治疗开始的22天内所有FcRγ被敲除的小鼠都死亡。相比，施用MEDI-507的FcRγ完整的患有ATL的NOD/SCID小鼠比施用PBS的FcRγ完整的患有ATL的NOD/SCID小鼠存活期更长。施用PBS的所有FcRγ完整的小鼠在治疗开始的30天内死亡，而施用+MEDI-507的所有FcRγ完整的小鼠在那时仍然存活。对动物存活跟踪40天，此时施用MEDI-507的FcRγ完整小鼠的10只中的8只仍然存活。从而，在该模型中，MEDI-507提供了对ATL的有效治疗，其机理可能涉及与Fcγ有关的FcRIII受体的表达。

7.等价方案

本领域中技术人员施用常规实验法将认识到，或者能够确定此处描述的本发明的特定实施方案的许多等价方案。这些等价方案旨在被下面的权利要求书包括。

在该说明书中提到的所有出版物、专利和专利申请在此处作为参考文献并入本说明书，就像每个单独的出版物、专利或专利申请在此处被特别和单独地并入作为参考一样。

序列表

<110>MedImmune，Inc

     Dingivan，Christine

     Waldmann，Thomas

<120>通过施用CD2拮抗剂预防或治疗T细胞恶性肿瘤的方法

<130>10271-116-228

<140>

<141>

<150>60/409,024

<151>2002-09-05

<150>60/410,385

<151>2002-09-12

<160>7

<170>PatentIn版本3.2

<210>1

<211>5

<212>PRT

<213>人

<400>1

Glu Tyr Tyr Met Tyr

1               5

<210>2

<211>17

<212>PRT

<213>人

<400>2

Arg Ile Asp Pro Glu Asp Gly Ser Ile Asp Tyr Val Glu Lys Phe Lys

1               5                   10                  15

Lys

<210>3

<211>9

<212>PRT

<213>人

<400>3

Gly Lys Phe Asn Tyr Arg Phe Ala Tyr

1               5

<210>4

<211>16

<212>PRT

<213>人

<400>4

Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser Ser Gly Asn Thr Tyr Leu Asn

1               5                   10                  15

<210>5

<211>7

<212>PRT

<213>人

<400>5

Leu Val Ser Lys Leu Glu Ser

1               5

<210>6

<211>9

<212>PRT

<213>人

<400>6

Met Gln Phe Thr His Tyr Pro Tyr Thr

1               5

<210>7

<211>327

<212>PRT

<213>人

<400>7

Lys Glu Ile Thr Asn Ala Leu Glu Thr Trp Gly Ala Leu Gly Gln Asp

1               5                   10                  15

Ile Asn Leu Asp Ile Pro Ser Phe Gln Met Ser Asp Asp Ile Asp Asp

            20                  25                  30

Ile Lys Trp Glu Lys Thr Ser Asp Lys Lys Lys Ile Ala Gln Phe Arg

        35                  40                  45

Lys Glu Lys Glu Thr Phe Lys Glu Lys Asp Thr Tyr Lys Leu Phe Lys

    50                  55                  60

Asn Gly Thr Leu Lys Ile Lys His Leu Lys Thr Asp Asp Gln Asp Ile

65                  70                  75                  80

Tyr Lys Val Ser Ile Tyr Asp Thr Lys Gly Lys Asn Val Leu Glu Lys

                85                  90                  95

Ile Phe Asp Leu Lys Ile Gln Glu Arg Val Ser Lys Pro Lys Ile Ser

            100                 105                 110

Trp Thr Cys Ile Asn Thr Thr Leu Thr Cys Glu Val Met Asn Gly Thr

        115                 120                 125

Asp Pro Glu Leu Asn Leu Tyr Gln Asp Gly Lys His Leu Lys Leu Ser

    130                 135                 140

Gln Arg Val Ile Thr His Lys Trp Thr Thr Ser Leu Ser Ala Lys Phe

145                 150                 155                 160

Lys Cys Thr Ala Gly Asn Lys Val Ser Lys Glu Ser Ser Val Glu Pro

                165                 170                 175

Val Ser Cys Pro Glu Lys Gly Leu Asp Ile Tyr Leu Ile Ile Gly Ile

            180                 185                 190

Cys Gly Gly Gly Ser Leu Leu Met Val Phe Val Ala Leu Leu Val Phe

        195                 200                 205

Tyr Ile Thr Lys Arg Lys Lys Gln Arg Ser Arg Arg Asn Asp Glu Glu

    210                 215                 220

Leu Glu Thr Arg Ala His Arg Val Ala Thr Glu Glu Arg Gly Arg Lys

225                 230                 235                 240

Pro His Gln Ile Pro Ala Ser Thr Pro Gln Asn Pro Ala Thr Ser Gln

                245                 250                 255

His Pro Pro Pro Pro Pro Gly His Arg Ser Gln Ala Pro Ser His Arg

            260                 265                 270

Pro Pro Pro Pro Gly His Arg Val Gln His Gln Pro Gln Lys Arg Pro

        275                 280                 285

Pro Ala Pro Ser Gly Thr Gln Val His Gln Gln Lys Gly Pro Pro Leu

    290                 295                 300

Pro Arg Pro Arg Val Gln Pro Lys Pro Pro His Gly Ala Ala Glu Asn

305                 310                 315                 320

Ser Leu Ser Pro Ser Ser Asn

                325

Claims (43)

1.治疗或改善癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗或改善的受试者施用治疗有效量的MEDI-507或其抗原结合片段。

2.治疗或改善癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗或改善的受试者施用治疗有效量的一种或多种CD2拮抗剂，条件是所述CD2拮抗剂不是MEDI-507。

3.治疗或改善癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗或改善的受试者施用治疗有效量的免疫特异地结合含有人CD2的氨基酸残基18、55或59的表位的抗体，条件是所述抗体不是MEDI-507或LO-CD2a/BTI-322。

4.权利要求3的方法，其中表位含有人CD2的氨基酸残基55和59。

5.治疗或改善癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗或改善的受试者施用治疗有效量的不抑制或干扰人CD2和LFA-3之间相互作用的CD2拮抗剂，条件是所述CD2拮抗剂不是MEDI-507或LO-CD2a/BTI-322。

6.权利要求1、2、3或5的方法，其还包括对所述受试者施用治疗有效量的一种或多种癌症疗法。

7.权利要求6的方法，其中至少一种所述癌症疗法是化疗、生物学疗法、放射疗法、激素疗法或手术。

8.治疗或改善T-细胞恶性肿瘤或其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗或改善的受试者施用治疗有效量的MEDI-507或其抗原结合片段。

9.治疗或改善T-细胞恶性肿瘤或其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗或改善的受试者施用治疗有效量的免疫特异地结合含有人CD2的氨基酸残基18、55或59的CD2表位的抗体，条件是所述抗体不是MEDI-507或LO-CD2a/BTI-322。

10.权利要求9的方法，其中表位含有人CD2的氨基酸残基55和59。

11.治疗或改善T-细胞恶性肿瘤或其一种或多种症状的方法，所述方法包括对需要该治疗或改善的受试者施用治疗有效量的不抑制或干扰人CD2和LFA-3之间相互作用的CD2拮抗剂，条件是所述CD2拮抗剂不是MEDI-507或LO-CD2a/BTI-322。

12.权利要求8的方法，其中施用所述治疗有效量的MEDI-507延长了所述受试者的存活期。

13.权利要求1、2、3、5、8、9或11的方法，其中所述受试者是人。

14.权利要求8、9或11的方法，其中所述T-细胞恶性肿瘤是前体T-细胞瘤或外周T-细胞或NK-细胞瘤。

15.权利要求8、9或11的方法，其中所述T-细胞恶性肿瘤是T-细胞慢性淋巴细胞白血病、大颗粒淋巴细胞白血病、外周T-细胞淋巴瘤、血管中心型淋巴瘤、肠T-细胞淋巴瘤、成人T-细胞白血病、成人T-细胞淋巴瘤、或退行性大细胞淋巴瘤。

16.权利要求8、9或11的方法，其中所述T-细胞恶性肿瘤不是皮肤T-细胞淋巴瘤。

17.权利要求8的方法，其中MEDI-507缀合到治疗剂或药物。

18.权利要求17的方法，其中治疗剂是异源多肽。

19.权利要求17的方法，其中治疗剂是免疫特异地结合非CD2的细胞表面受体的抗体。

20.权利要求19的方法，其中所述细胞表面受体是T-细胞或NK细胞抗原。

21.权利要求17的方法，其中治疗剂是免疫特异地结合肿瘤相关抗原的抗体。

22.权利要求2的方法，其中至少一种CD2拮抗剂缀合到治疗剂或药物，条件是所述治疗剂不是毒素或放射性元素。

23.权利要求17的方法，其中所述治疗剂是细胞毒素。

24.权利要求23的方法，其中所述细胞毒素是紫杉醇、松胞菌素B、短杆菌肽D、溴化乙锭、依米丁、丝裂霉素、依托泊苷、tenoposide、长春新碱、长春花碱、秋水仙碱、阿霉素、柔红霉素、二羟基炭疽菌素二酮、米托蒽醌、光神霉素、放线菌素D、1-去氢睾酮、糖皮质激素、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛尔、嘌呤霉素、表柔比星，或环磷酰胺。

25.权利要求8的方法，其还包括对所述受试者随后施用一剂或多剂治疗有效量的MEDI-507或其抗原结合片段。

26.权利要求8的方法，其还包括对所述受试者施用治疗有效量的用于T-细胞恶性肿瘤的一种或多种标准或实验性疗法。

27.权利要求9或11的方法，其还包括对所述受试者施用治疗有效量的用于T-细胞恶性肿瘤的一种或多种标准或实验性疗法。

28.权利要求26的方法，其中至少一种所述疗法是抗体疗法、细胞因子疗法、化疗、造血干细胞移植、T-细胞介导的疗法、生物学疗法、放射疗法、激素疗法或手术。

29.权利要求27的方法，其中至少一种所述疗法是抗体疗法、细胞因子疗法、化疗、造血干细胞移植、T-细胞介导的疗法、生物学疗法、放射疗法、激素疗法或手术。

30.权利要求26的方法，其中在MEDI-507或其抗原结合片段施用之前、同时，或之后施用所述标准或实验性疗法。

31.权利要求8的方法，其中所述受试者以前已经被施用用于T-细胞恶性肿瘤的一种或多种标准或实验性疗法进行治疗但是没有被施用MEDI-507或其抗原结合片段。

32.权利要求8的方法，其中MEDI-507或其抗原结合片段被静脉内、皮下、肌内、经口，或鼻内施用。

33.含有一种或多种CD2拮抗剂和药学上可接受的载体的药物组合物，该一种或多种CD2拮抗剂的量可有效预防、治疗、处理，或改善癌症。

34.含有一种或多种CD2拮抗剂和药学上可接受的载体的药物组合物，该一种或多种CD2拮抗剂的量可有效预防、治疗、处理，或改善T-细胞恶性肿瘤。

35.含有MEDI-507或其抗原结合片段和药学上可接受的载体的药物组合物，该MEDI-507或其抗原结合片段的量可有效预防、治疗、处理，或改善癌症。

36.含有MEDI-507或其抗原结合片段和药学上可接受的载体的药物组合物，该MEDI-507或其抗原结合片段的量可有效预防、治疗、处理，或改善T-细胞恶性肿瘤。

37.权利要求33或34的组合物，其中CD2拮抗剂不是MEDI-507。

38.权利要求33或34的组合物，其中CD2拮抗剂没有缀合到毒素或放射性元素。

39.含有免疫特异地结合含有人CD2的氨基酸残基18、55或59的CD2表位的抗体和药学上可接受的载体的药物组合物，条件是所述抗体不是MEDI-507或LO-CD2a/BTI-322，该抗体的量可有效预防、治疗、处理，或改善癌症。

40.权利要求39的组合物，其中表位含有人CD2的氨基酸残基55和59。

41.含有不抑制或干扰人CD2和LFA-3之间相互作用的CD2拮抗剂和药学上可接受的载体的药物组合物，条件是所述CD2拮抗剂不是MEDI-507或LO-CD2a/BTI-322，所述CD2拮抗剂的量可有效预防、治疗、处理，或改善癌症。

42.权利要求33、34、35、36、39、41或42的组合物，其还含有一种或多种化学治疗剂、放射治疗剂、激素治疗剂，或生物学治疗剂。

43.权利要求33或34的药物组合物，其中CD2拮抗剂不是LFA-3TIP。

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