CN1740173A

CN1740173A - 白细胞介素－1β转化酶抑制剂

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Publication number: CN1740173A
Application number: CNA2005101040219A
Authority: CN
Inventors: M·J·巴特施罗; D·比宾格顿; G·W·比米斯; W·H·弗里德曼; R·J·吉勒斯比; J·M·C·古勒克; 顾勇; D·J·劳菲; D·J·里威斯顿; S·S·马特哈路; M·D·穆里坎; M·A·穆库; R·穆都施; P·L·尼斯; A·L·C·罗比朵斯; M·苏; M·瓦那马克; K·P·威尔森; R·E·茨勒
Original assignee: Vertex Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Vertex Pharmaceuticals Inc
Priority date: 1995-12-20
Filing date: 1996-12-20
Publication date: 2006-03-01
Anticipated expiration: 2016-12-20
Also published as: US6008217A; CN100469779C; ZA9610798B

Abstract

本发明涉及新一类的化合物，其为白细胞介素－1β转化酶之抑制剂。本发明的ICE抑制剂特征在于特异的结构及物化特性。本发明也涉及含有这些化合物的药学组合物。本发明化合物及药学组合物极适于抑制ICE活性，且因此可有益地充作拮抗由IL－1－，细胞凋亡－，IGIF－，IFN－γ－调介的疾病，炎性疾病，自体免疫疾病，破环性骨骼疾病，增殖失调症，感染性疾病，退化性疾病及坏死性疾病之作用物。本发明也涉及药学组合物，经调和可用于抑制ICE活性，可治疗由白细胞介素－1－，细胞凋亡－，IGIF－及IFN－γ－调介的疾病，及利用本发明化合物及组合物降低IGIF及IFN－γ的产制。本发明也涉及制备N－酰基胺基化合物之方法。

Description

白细胞介素-1β转化酶抑制剂

本申请是同名发明专利的中国专利申请第96199828.8号的分案申请，原案的国际申请号为PCT/US96/20843，国际申请日为1996年12月20日。

本发明涉及一类新颖的化合物，其为白细胞介素-1β转化酶(ICE)的抑制剂。本发明也涉及含有这些化合物的药学组合物。本发明的化合物及药学组合物特别适于抑制ICE活性且因此可有益地用作白细胞介素-1-(IL-1)拮抗，细胞凋亡-，干扰素γ诱导因子-(“IGIF”)及干扰素-γ-(“IFN-γ”)介导疾病的拮抗剂，特别是炎性疾病，自身免疫疾病，破坏性骨骼疾病，增殖紊乱，感染性疾病及退化性疾病。本发明也涉及抑制ICE活性，及降低IGIF产生及IFN-γ产生之方法，及利用本发明化合物及组合物治疗白细胞介素-1-，细胞凋亡-，IGIF-及-IFN-γ-介导疾病的方法。本发明也涉及制备N-酰基氨基化合物的方法。

白细胞介素1(“IL-1”)为一种主要的前炎性及免疫调节性蛋白质，可刺激成纤维细胞分化及增殖，由滑膜细胞及软骨细胞产生前列腺素，胶原蛋白酶及磷脂酶，嗜碱性粒细胞及嗜酸性粒细胞的去粒作用及嗜中性粒细胞活化作用。Oppenheim，J.H.等，《今日免疫学》 Immunology Today，7，pp.45-56(1986)。如此，其涉及于慢性及急性炎症及自身免疫疾病的致病机制。如，在类风湿性关节炎中，IL-1是受损关节中炎性症状的介质，也是软骨蛋白多糖破坏的介质。Wood，D.D.等，《类风湿性关节炎》 Arthritis Rheum.26，975(1983)；Pettipher，E.J.等，《美国国家科学院进展》 Proc.Natl.Acad.Sci.UNITED STATES OF AMERICA 71，295(1986)；Arend，W.P.and Dayer，J.M.，《类风湿性关节炎》 Arthritis Rheum.38，151(1995)。IL-1也是高度强力的骨吸收剂。Jandiski，J.J.，《口腔病理学杂志》 J.Oral Path 17，145(1988)；Dewhirst.F.E.等，《免疫学杂志》 J.Immunol.8，2562 1985)。另外在破坏性骨骼疾病中称之为“破骨细胞活化因子”，如骨关节炎及多发性骨髓瘤。Bataille，R.等，《国际临床实验室研究》 Int.J.Clin.Lab.Res.21(4).283(1992)。在某些增殖紊乱中，如急性骨髓性白血病及多发性骨髓瘤，IL-1可促进肿瘤细胞生长及粘附。Bani，M.R.，《国立癌研究所学报》 J.Natl.Cancer Inst.83，123(1991)；Vidal-Vanaclocha，F.，《癌症研究》 Cancer Res.54，2667(1994)。在这些紊乱中，IL-1也可刺激其他细胞因子产生，如IL-6，其可调节肿瘤发展。(Tartour等， Cancer Res.54，6243(1994)。IL-1作为炎症反应的一部分主要由周边血液单核细胞所产生，且以二个不同的激动剂形式存在，IL-α及IL-β。Mosely，B.S.等，《国家科学院进展》 Proc.Nat.Acad.Sci.，84，pp.4572-4576(1987)；Lonnemann，G.等，《欧洲免疫学杂志》 Eur.J. Immunol.，19，pp；.1531-1536(1989)。

IL-β呈生物上不活性前体形式被合成，pIL-1β。pIL-1β缺少传统的前导序列，且并不为信号肽酶所处理。March，C.J.，《自然》Nature，315，pp.641-647(1985)。反之，pIL-1β为白细胞介素-1β转化酶(“ICE”)在Asp-116及Ala-117间解离，产生于人类血清及滑液中可见的具生物活性的C-末端片段。Sleath，P.R.，等，《生物的化学杂志》 J.Biol.Chem.，265，pp.14526-14528(1992)；A.D.Howard等，《免疫学杂志》 J.Immunol.，147，pp.2964-2969(1991)。ICE是一种半胱氨酸蛋白酶，主要位于单核细胞。其可将前体IL-β转化成成熟形式。Black，R.A.等，《FEBS通讯》 FEBS Lett.，247，pp.386-390(1989)；Kostura，M.J.等，《美国国家科学院进展》Proc.Natl.Acad.Sci.UNITED STATES OF AMERICA，86，pp.5227-5231(1989)。以ICE处理修饰也是经由经细胞膜运送成熟的IL-β所必要的。

ICE，或其同系物，似乎也与程序性细胞死亡或细胞凋亡之调控作用有关。Yuan，J.等，《细胞》 Cell，75，pp.641-652(1993)；Miura，M.等，《细胞》 Cell，75，pp.653-660(1993)；Nett-Fiordalisi，M.A.等，《细胞生物化学杂志》 J.Cell Biochem.17B，p.117(1993)。特言之，ICE或ICE同系物被视为与神经退化性疾病中细胞凋亡之调控有关，如早老性痴呆及帕金森氏病。Marx，J.和M.Baringa，《科学》 Science，259 pp.760-762(1993)；Gagliardini，V.等，《科学》 Science，263，pp.826-828(1994)。细胞凋亡抑制之治疗性应用可包括治疗早老性痴呆病，帕金森氏病，中风，心肌梗塞，脊柱萎缩及老化。

已证明ICE可调介特定组织形态中之细胞凋亡(程序性细胞死亡)。Steller，H.，《科学》 Science，267，p.1445(1995)；Whyte，M.和Evan，G.，《自然》Nature，376，p.17(1995)；Martin，S.J.和Green，D.R.，细胞Cell，82，p.349(1995)；Alnemri，E.S.，等，《生物的化学杂志》 J.Biol. Chem.，270，p.4312(1995)；Yuan，J.《当前细胞生物学观念》 Curr.Opin. Cell Biol.7，p.211(1995)。ICE基因破坏的转基因小鼠，在Fas-调介的细胞凋亡中有缺陷(Kuida，K.等，《科学》 Science 267，2000(1995))。ICE此活性和其在充作pro-IL1β处理修饰酶的角色上截然不同。可感知的是在特定组织形态中，ICE的抑制作用可能不会影响成熟IL-β的分泌，但可能会抑制细胞凋亡。

具酶活性的ICE先前已被描述是由二个亚单位p20及p10组成的杂二体(分子量分别为20kDa及10kDa)。这些亚单位经由p30形式衍生自45kDa酶原(p45)，经由一种自身催化作用的活化作用机制。Thornberry，N.A.等，《自然》 Nature，356，pp.768-774(1992)。ICE酶原已分成许多功能性区域：一个前区(p14)，一个p22/20亚单位，一个多肽连接子及一个p10亚单位。 Thornberry等，上文，Casano等，《基因组》 Genomics，20，pp.474-481(1994)。

全长的p45已由其cDNA及氨基酸序列予以鉴定。PCT申请WO91/15577及WO94/00154。p20及p10 cDNA及氨基酸序列也是已知的。 Thornberry等，上文。鼠及大鼠ICE也已定序及克隆。其有与人类ICE高度同源性的氨基酸及核酸序列。Miller，D.K.等，《纽约科学院年报》 Ann.N.Y.Acad.Sci.，696，pp.133-148(1993)；Molineaux，S.M.等《国家科学院进展》 Proc.Nat.Acad.Sci.，90，pp.1809-1813(1993)。ICE的三维结构已经由X-射线晶体学在原子解析下确定。Wilson，K.P.，等，《自然》 Nature，370，pp.270-275(1994)。活性酶呈二个p20及二个p10亚单位的四聚体形式。

另外，也存在有序列和酶之活性位点区域与人ICE相似的同系物。上述同系物包括TX(或ICE_rel-II或ICH-2)(Faucheu，等，《EMBO杂志》EMBO J.，14，p.1914(1995)；Kamens J.，等，《生物的化学杂志》 J.Biol. Chem.，270，p.15250(1995)；Nicholson等，《生物的化学杂志》 J.Biol. Chem.，270，15870(1995))，TY(或ICE_rel-III)(Nicholson等，《生物的化学杂志》 J.Biol.Chem.，270，p.15870(1995)；ICH-1(或Nedd-2)(Wang，L.等，《细胞》Cell，78，p.739(1994))，MCH-2，(Fernades-Alnemri，T.等，《癌症研究》 Cancer Res.，55，p.2737(1995)，CPP32(或YAMA或apopain)(Fernandes-Alnemri，T.等，《生物的化学杂志》 J.Biol.Chem.，269，p.30761(1994)；Nicholson，D.W.等， Nature，376，p.37(1995))，及CMH-1(或MCH-3)(Lippke，等， J.Biol.Chem.，(1996)；Fernandes-Alnemri，T.等，《癌症研究》 Cancer Res.，(1995))。这些ICE同系物以及ICE本身各自可在转染的细胞系过量表达时诱导细胞凋亡。一种以上的这些同系物为肽性ICE抑制剂Tyr-Val-Ala-Asp-氯甲基酮抑制作用的结果可造成在初级细胞或细胞系中细胞凋亡的抑制作用。Lazebnik等，《自然》 Nature，371，p.346(1994)。本说明书中所述的化合物也可抑制ICE一种或以上的同系物(见实施例5)。因此，这些化合物可用来抑制含有ICE同系物之组织形式中之细胞凋亡，但其并不含有具活性的ICE或可产生成熟的IL-β。

γ-干扰素诱导因子(IGIF)是一种约18-kDa的多肽，可刺激T-细胞产生γ-干扰素(γ-IFN)。IGIF于体内可为激活的肝巨噬细胞(Kupffer cell)及巨噬细胞产生，且于内毒素刺激时可自此细胞中出来。因此，可降低IGIF产生之化合物可用于充作此T-细胞刺激作用之抑制剂，其依次可减低这些细胞产生γ-IFN的水平。

γ-IFN是一种细胞因子，可在各样的免疫细胞上具免疫调控作用。特别地，IFN-γ与巨噬细胞的活化作用及Thl细胞选择有关(F.Belardelli，APMIS，103，P.161(1995))。γ-IFN展现其作用有部分是经由STAT及IRF途径调控基因表达而成(C.Schindler和J.E.Darnell，《年度生物化学评论》 Ann.Rev.Biochem.，64，p.621(1995)；T.Taniguchi，《癌研究与临床肿瘤学杂志》 J.Cancer Res.Clin.Oncol.，121，p.516(1995))。

缺少INF-γ或其受体的小鼠在免疫细胞功能上有许多的缺失，且可抗阻内毒性休克(S.Huang等，《科学》 Science，259.p.1742(1993)；D.Dalton等， Science，259，p.1739(1993)；B.D.Car等，《实验医学杂志》 J. Exp.Med.，179，p.1437(1994))。加上IL-12，IGIF似乎是T细胞产生γ-IFN的强力诱导物(H.Okamura等，《感染与免疫》 Infection and Immunity，63，p.3966(1995)；H，Okamura等，《自然》 Nature，378，p.88(1995)；S.Ushio等，《免疫学杂志》 J.Immunol.，156，p.4274(1996))。

已示出IFN-γ成为与各种炎症，感染性及自体免疫紊乱及疾病相关的病理的原因。因此，可减少IFN-γ产生的化合物将可用以舒缓IFN-γ相关病理之作用。

IGIF及因此的γ-IFN之生物性调节作用尚未阐明。已知IGIF以前体蛋白质形式被合成，称为“前-IGIF”。然而尚未明了前-IGIF如何被解离及其处理修饰是否具有生物学重要性。

因此，可调节前-IGIF转化成IGIF的组合物及方法可于体内用于降低IGIF及IFN-γ产生，且因此可舒缓这些造成人类紊乱及疾病原因的蛋白质的有害作用。

然而，ICE及ICE/CED-3族中其他的成员先前并未知与前-IGIF至IGIF或至体内IFN-γ产生之转化作用中有何关联。

ICE抑制剂代表一类可用于控制发炎或细胞凋亡或二者的有用的化合物。ICE的肽及肽性抑制剂已有所描述。PCT申请WO91/15577；WO93/05071；WO93/09135；WO93/14777及WO93/16710；及欧洲专利申请0547699。ICE此种肽性抑制剂已观察知可阻断小鼠发炎模型中成熟IL-1β之产生(见以下)及可抑制体外白血病细胞之生长(Estrov等，《血液》 Blood 84，380a(1994))。然而，由于其肽性本质，此抑制剂典型的特性为非期望的药理特性，如不良的细胞穿透及细胞活性，不良的口服吸收，不良的稳定性及快速的代谢。Plattner，J.J.和D.W.Norbeck，《药物发现技术》 Drug Discovery Technologies，C.R.Clark and W.H.Moos，Eds.(Ellis Horwood，Chichester，英格兰，1990)，pp.92-126。此已阻碍其发展成有效的药物。

也有报告指出非肽类化合物可于体外抑制ICE。PCT申请WO95/26958；US专利5,552,400；Dolle等，《药物化学杂志》 J.Med.Chem.，39，pp.2438-2440(1996)；然而并不清楚这些化合物是否有适合的药理分布可供治疗应用。

另外，目前制备此化合物之方法并非有益的。这些方法中使用的氢化三丁锡，是一种具有毒性且对湿气敏感之试剂。因此这些方法不适于实施，有健康危险性且会产生毒性废料丢弃问题。再者，难以纯化由这些方法制备的化合物。

因此，极需有可于体内有效抑制ICE作用之化合物，以充作预防及治疗IL-1-调介之疾病，细胞凋亡-，IGIF-，或IFN-γ-调介的疾病，以及发炎，自身免疫，破坏性骨骼，增殖，感染性或退化性疾病慢性及急性形式之作用物。制备此化合物的方法也是需要的。

本发明提供一新类型的化合物，及其药学允许的衍生物，可充作ICE之抑制剂。这些化合物也可单独使用或组合其他治疗性或预防性药品使用，如抗生素，免疫调控剂或其他抗炎剂，以治疗或预防由IL-1，细胞凋亡，IGIF或IFN-γ的调介的疾病。依据优选的具体实施方案，本发明的化合物可结合至ICE的活性位点并抑制酶的活性。额外地，与肽性ICE抑制剂比较而言，其具有经改进的细胞效力，改进的药物动力学及/或改进的口服生物利用率。

本发明的主要目的是提出一类新的化合物，为ICE抑制剂并以下化学式代表：

和

其中各取代基如本说明书所述.

本发明进一步目的是提供将羧酸与别位保护胺偶合的N-酰基氨基化合物的制法。

附图说明

图1A ICE可于体内解离前-IGIF。分析来自Cos细胞，且经所示的各种表达质粒或对照组转染的溶胞产物是否有IGIF之存在，即以SDS-PAGE分离蛋白质并以抗-IGIF抗血清免疫印迹(1道，空白的经转染细胞；2道，单独的前-IGIF；3-12道，前-IGIF组合ICE，ICE-C285S，CPP32，CPP32-C163S，CMH-1，CMH-1-C186S，Tx，Tx-C258S)。前-IGIF及18-kDa成熟IGIF之移动示于右。按kDa计之分子量示于左(实施例23)。

图1B ICE在体外可于确实的处理修饰位置上解离前-IGIF，此可由考马斯蓝对经SDS-PAGE分离的蛋白水解反应产物染色而示出(实施例23)。所使用的蛋白酶及抑制剂为：1道，缓冲溶液对照组；2道，0.1nM ICE；3道，1nM ICE；4及5道，1nM ICE分别加上10nM Cbz-Val-Ala-Asp-[(2，6-二氯苯甲酰基)氧基]甲基酮及100nM Ac-Tyr-Val-Ala-Asp-醛；6及7道，15nM CPP32分别与或无400nM Ac-Asp-Glu-VaI-Asp-醛(D.W.Nicholson等，《自然》 Nature，376，p.37(1995))；8道，100nM CMH-1；9道，10单位/毫升粒酶B；及M，按kDa计之分子量标帜。

图1C ICE解离可将无活性的前-IGIF转化成具有活性的IGIF，后者可诱导Thl辅助细胞中产生IFN-γ。未解离的(前-IGIF)，IEC解离的(前-IGIF/ICE)，CPP32-解离的(前-IGIF/CPP32)，及重组成熟IGIF(rIGIF)与A.E7 Thl细胞在12纳克/毫升(空心框)及120纳克/毫升(有阴影的框)下温育18小时，再以ELISA分析释放至细胞培养基之IFN-γ(实施例23)。A.E7细胞以缓冲溶液，单独的ICE(ICE)，或单独的CPP32(CPP32)培育，类似阴性对照组般分析。数字代表三次鉴定之平均值。

图2A成熟IGIF(18-kDa)由经前-IGIF及ICE-表达质粒共转染之Cos细胞所产生。来自Cos细胞之溶胞产物(T2)及调适培养基(右)以前-IGIF表达质粒转染，并在无(-)或有可编码野生型(ICE)或无活性突变株(ICE-C285S)ICE之表达质粒存在下。经转染的细胞以³⁵S-甲硫氨酸代谢地标记，来自溶胞产物及调适培养基之蛋白质再以抗-IGIF抗血清免疫沉淀，并以SDS-PAGE分离(实施例24)。前-IGIF及18-kDa成熟IGIF之移动示于右。按kDa计之分子量标帜示于左。

图2B在以前-IGIF及ICE-表达质粒共转染之Cos细胞侦测IFN-γ诱导活性。来自Cos细胞之溶胞产物(实心框)及调适培养基(空心框)以前-IGIF表达质粒转染，并在无(前-IGIF)或有(前-IGIF/ICE)编码野生型(ICE)之表达质粒存在下，以ELISA分析IFN-γ之水平。以缓冲溶液(空白组)或ICE-表达质粒单独的(ICE)转染的Cos细胞为阴性对照组(实施例24)。

图3A缺乏ICE之小鼠，其库弗氏细胞于IGIF运送上也有缺陷。分离野生型小鼠(ICE+/+)或ICE突变呈同种接合子之ICE缺陷小鼠(ICE-/-)之肝巨噬细胞，并以LPS充满3小时。于野生型细胞调适培养基(纳克/毫升)中之免疫反应性IGIF多肽水平以ELISA侦测(实施例25)。N.D.(无可测及的)表示IGIF浓度少于0.1纳克/毫升。

图3B缺乏ICE之小鼠，其肝巨噬细胞于IGIF运送上也有缺陷。分离野生型小鼠(ICE+/+)或ICE为同种接合子之ICE有缺陷小鼠(ICE-/-)之肝巨噬细胞，并以LPS充满3小时。经充满的细胞以³⁵S-甲硫氨酸代谢地标记，来自溶胞产物及调适培养基之蛋白质以抗-IGIF抗血清沉淀，再以SDS-PAGE分离(实施例25)。前-IGIF及18-kDa成熟IGIF之移动示于右。按kDa计之分子量示于左。

图3C ICE-缺陷小鼠之血清中含有减量的IGIF。利用ELISA分析野生型小鼠(ICE+/+)或ICE突变为同种接合子之ICE缺陷小鼠(ICE-/-)之IGIF水平(纳克/毫升)(实施例25)。

图3D ICE-缺陷小鼠之血清中含有减量的IFN-γ。利用ELISA分析野生型小鼠(ICE+/+)或ICE突变为同种接合子之ICE有缺陷小鼠(ICE-/-)之IFN-γ水平(纳克/毫升)(实施例25)。

图4经过LPS急性攻击后，ICE-缺陷小鼠之血清IFN-γ水平显著地减低。以ELISA分析野生型小鼠(实心正方形)或ICE-缺陷小鼠(实心圈)血清样品中之IFN-γ水平(纳克/毫升)，为LPS攻击后之时间(小时)函数关系。在此时期动物按摄氏度数计之温度，于野生型小鼠(空心正方形)或ICE-缺陷小鼠(空心圈)示出。

图5ICE抑制剂，AcYVAD-醛(AcYVAD-CHO)可抑制人类外周血液单核细胞(PBMC)之LPS-刺激的IL-1β及IFN-γ合成。示出IL-1β(空心正方形)及IFN-γ(空心星形)合成之呈抑制剂浓度(μM)函数关系之抑制百分率(％)。

图6化合物214e可抑制LPS-攻击小鼠的IL-1β产生。以ELISA分析CD1小鼠血清样品中之IL-1β水平(皮克/毫升)，此在LPS-攻击后进行。化合物214e于LPS-攻击后1小时经腹膜内(IP)注射投药。LPS-攻击后7小时收集血样(见实施例7)。

图7化合物217e可抑制LPS-攻击小鼠之IL-1β产生。于LPS-攻击后以ELISA分析CD1小鼠血清样品中之IL-1β水平(皮克/毫升)。化合物217e在LPS-攻击后1小时经由腹膜内(IP)注射投药。于LPS-攻击后7小时收集血液(见实施例7)。

图8化合物214e，但非化合物217e，当经口灌食时可在有LPS-攻击的小鼠中抑制IL-1β产生。此分析可侦测在如图6及7所述之相似条件下之口服吸收作用。这些结果显示214e可充作潜在口服具活性之ICE抑制剂(见实施例7)。

图9化合物214e及214e的类似物于IP投药后也可抑制IL-1β产生。这些结果于图6及7及实施例7所述之分析中获得。

图10化合物214e及214e的同系物于口服投药后(PO)也可抑制IL-1β的产生。这些结果可于图6及7及实施例7所述的分析中获得。

图11A/B化合物302及304a当口服至小鼠(50毫克/公斤，于0.5％羧甲基纤维素中)时示出可侦测之血液水平。于给药后1及7小时时收集血液样品。化合物302及304a为214e之前药，可于体内代谢成214e。化合物214e当口服时无超过0.10微克/毫升之血中水平(实施例8)。

图12化合物412f可阻断雄性DBA/1J小鼠中II型胶原蛋白诱导之关节炎之进行。(Wooley，P.H.，《酶学方法》 Methods in Enzymology，162，pp.361-373(1988)及Geiger，T.，《临床与实验风湿病学》 Clinical and Experimental Rheumatology，11，pp.515-522(1993))。化合物412f经口灌食每天二次(10，25及50毫克/公斤)间隔约7小时。以关节炎严重分值的1至4个渐强等级测定炎症。加上二个前脚的分数以得最终分数(见实施例21)。

图13化合物412d可阻断雄性DBA/1J小鼠中II型胶原蛋白诱导之关节炎之进行。结果如图12及实施例21中所述。

图14化合物696a可阻断雄性DBA/1J小鼠中II型胶原蛋白诱导之关节炎之进行。结果如图12及实施例21中所述。

缩写及定义

缩写

命名试剂或片段

Ala 丙氨酸

Arg 精氨酸

Asn 天冬酰胺

Asp 天冬氨酸

Cys 半胱氨酸

Gln 谷氨酰胺

Glu 谷氨酸

Gly 甘氨酸

His 组氨酸

Ile 异亮氨酸

Leu 亮氨酸

Lys 赖氨酸

Met 甲硫氨酸

Phe 苯丙氨酸

Pro 脯氨酸

Ser 丝氨酸

Thr 苏氨酸

Trp 色氨酸

Tyr 酪氨酸

Val 缬氨酸

Ac₂O 醋酐

n-Bu 正丁基

DMF 二甲基甲酰胺

DIEA N，N-二异丙基乙胺

EDC 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐

Et₂O 二乙醚

EtOAc 乙酸乙酯

Fmoc 9-芴基甲氧羰基

HBTU O-苯并三唑-1-基-N，N，N′， N′-四甲

六氟磷酸盐

HOBT 1-羟基苯并三唑水合物

MeOH 甲醇

TFA 三氟醋酸

Alloc 烯丙氧羰基

定义

本说明书中应用以下术语：

“γ干扰素诱导因子”或“IGIF”指可刺激IFN-γ内源性产生的一种因子。

“ICE-抑制剂”指可抑制ICE酶之化合物。ICE抑制作用可利用本说明书所述方法决定，且已列入本说明书中的参考。本领域技术人员明了体内的ICE抑制剂未必是体外ICE抑制剂。如，化合物之前药形式通常于体外分析中少有或无活性。此种前药形式可在病人体内经由代谢或其他生化过程而改变，生成体内的ICE抑制剂。

所谓“细胞因子”系指可调介细胞相互作用的分子。

“状况”指可在个体中产生有害的生物学因果关系之任何疾病，紊乱或作用。

“个体”指动物，或由动物衍生的一种以上细胞。优选动物是哺乳动物，最优选是人。细胞可呈任何形式，包括下列但不限于保留在组织中之细胞，细胞蔟集，不死的细胞(immortalized cells)，经转染或转形的细胞，及衍生自动物且已经物理上或表达型上改变之细胞。

“活性位点”指在ICE中下列任一或全部位置：底物结合位置，抑制剂可结合的位置及发生底物解离的位置。

“杂环”或“杂环的”指稳定的单或多环化合物，其视所需可含有一或二个双键，或可视所需含有一个或多个的芳族环。各杂环由碳原子及1至4个独立选自氮，氧及硫的杂原子组成。如本说明书中所用的，“氮杂原子”及“硫杂原子”，包括氮或硫的任何氧化形式，及任何碱性氮之季铵化形式。本说明书中定义的杂环包括如：嘧啶基，四氢喹啉基，四氢异喹啉基，嘌呤基，嘧啶基，二氢吲哚基，苯并咪唑基，咪唑基，咪唑啉基，咪唑烷基，喹啉基，异喹啉基，吲哚基，吡啶基，吡咯基，吡咯啉基，吡唑基，吡嗪基，喹噁啉基，六氢吡啶基，吗啉基，噻吗啉基，呋喃基，噻吩基，三唑基，噻唑基，β-咔啉基，四唑基，噻唑烷基，苯并呋喃基(benzofuranyl)，噻吗啉基砜，苯并噁唑基，氧六氢吡啶基，氧吡咯啶基，氧氮杂_基，氮杂_基，异噁唑基，四氢吡喃基，四氢呋喃基，噻二唑基，苯并间二氧杂环戊烯基，苯并噻吩基，四氢硫苯基及四氢噻吩砜基。进一步的杂环述于A.R.Katritzky和C.W.Rees编《综合杂环化学：杂环化合物的结构、反应、合成与应用》 Comprehensive Heterocyclic Chemistry：The Structure，Reactions，Synthesis and Use of Heterocyclic Compounds，卷1-8，Pergamon出版社，纽约(1984)。

“环烷基”指单或多环基，其含有3至15个碳及视所需含有一或二个双键。实例包括环己基，金刚烷基及降冰片烷基。

“芳基”指单或多环基，其含有6，10，12或14个碳其中至少一个环是芳族的。实例包括苯基，萘基及四氢萘。

所谓“杂芳族”指单或多环基，其含有1至15个碳原子及由1至4个杂原子，其各自独立选自下列包括硫，氮及氧，另外含有1至3个五或六员环，其中至少一个是芳族的。

所谓“α-氨基酸”(α-氨基酸)指自然生成的氨基酸及当制备自然生成肽类似物时常用于肽化学技艺中之其他“非蛋白质”α-氨基酸，包括D及L型。自然生成的氨基酸有甘氨酸，丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸，丝氨酸，甲硫氨酸，苏氨酸，苯丙氨酸，酪氨酸，色氨酸，半胱氨酸，脯氨酸，组氨酸，天冬氨酸，天冬酰胺，谷氨酸，谷氨酰胺，γ-羧基谷氨酸，精氨酸，鸟氨酸及赖氨酸。“非蛋白质”α-氨基酸之实例包括羟基赖氨酸，高丝氨酸，高酪氨酸，高苯丙氨酸，瓜氨酸，犬尿氨酸，4-氨基-苯丙氨酸，3-(2-萘基)-丙氨酸，3-(1-萘基)-丙氨酸，甲硫氨酸砜，叔丁基-丙氨酸，叔丁基甘氨酸，4_羟基苯基甘氨酸，氨基丙氨酸，苯基甘氨酸，乙烯基丙氨酸，丙炔基-甘氨酸，1，2，4-三唑基-3-丙氨酸，4，4，4-三氟-苏氨酸，甲状腺原氨酸，6-羟基色氨酸，5-羟基色氨酸，3-羟基犬尿氨酸，3-氨基酪氨酸，三氟甲基丙氨酸，2-噻吩基丙氨酸，(2-(4-吡啶基)乙基)-半胱氨酸，3，4-二甲氧基-苯丙氨酸，3-(2-噻唑基)-丙氨酸，鹅膏蕈氨酸，1-氨基-1-环戊烷-羧酸，1-氨基-1-环己烷羧酸，使君子氨酸，3-三氟甲基苯丙氨酸，4-三氟-甲基苯丙氨酸，环己基丙氨酸，环己基甘氨酸，硫组氨酸，3-甲氧基酪氨酸，弹性酶抑制(elastatinal)，降亮氨酸，降缬氨酸，别异亮氨酸，高精氨酸，硫脯氨酸，去氢脯氨酸，羟基-脯氨酸，异哌啶甲酸(isonipectotic acid)，高脯氨酸，环己基甘氨酸，α-氨基-正丁酸，环己基丙氨酸，氨基苯基丁酸，苯基部分的邻，间或对位上为下列一或二个所取代的苯丙氨酸：(C₁-C₄)烷基、(C₁-C₄)烷氧基、卤或硝基或亚甲二氧基，β-2-及3-噻吩基-丙氨酸，β-2-及3-呋喃基丙氨酸，β-2-，3-及4-吡啶基丙氨酸，β-(苯并噻吩基-2-及3-基)丙氨酸，β-(1-及2-萘基)丙氨酸，丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸的O-烷基化的衍生物，S-烷基化的半胱氨酸，S-烷基化的高半胱氨酸，酪氨酸之O-硫酸、O-磷酸及O-羧酸酯，3-磺基-酪氨酸，3-羧基-酪氨酸，3-二氧磷基-酪氨酸，酪氨酸的4-甲磺酸酯，酪氨酸的4-甲膦酸酯，3，5-二碘酪氨酸，3-硝基-酪氨酸，ε-烷基赖氨酸及ε-烷基鸟氨酸。这些α-氨基酸任一者均可被甲基在α位置上，卤素在α-氨基侧链任一芳基残基，或适合的保护基在侧链残基之O，N或S原子上取代。适合的保护基公开于《有机合成中的保护基团》“Protective Groups In Organic Synthesis，”T.W.Greene和P.G.M.Wuts，J.Wiley父子，纽约，纽约州，1991。

所谓“取代”指化合物中之氢原子为取代基所置换。于本发明中，将可形成部分氢键部分且其可与ICE之Arg-341之羰基氧或ICE Ser-339之羰基氧形成氢键之氢原子排除在取代作用之外。这些经排除的氢原子包括含有-NH-基者，其为-CO-基α位置，且在下图式：(a)至(t)，(v)至(z)中以-NH-表示而非X基或其他命名。

所谓“直链”指共价结合原子之连续未分支串。直链可被取代，但这些取代基非直链的一部分。

“K_i”指化合物在抑制靶酶活性上效力的数字测度，酶如ICE。K_i的较低值反映出较高的效力。K_i值由经实验决定之速率数据配合标准酶动力学方程式而衍算出来(见I.H.Segel，《酶动力学》 Enzyme Kinetics，Wiley-Interscience，1975)。

所谓“病人”在本案中指任何的哺乳动物，尤其是人类。

所谓“药学上有效剂量”指可有效治疗或舒缓病人中IL-1-，细胞凋亡-，IGIF-或IFN-γ-调介之疾病之剂量。所谓“预防有效剂量”指可有效预防或实质地减轻病人中IL-1-，细胞凋亡-，IGIF或IFN-γ-调介的疾病之剂量。

“药学允许之载剂或佐剂”指可与本发明化合物一起投予至病人之无毒性的载剂或佐剂，且其不会破坏其药理活性。

“药学允许的衍生物”表示本发明化合物或其他任何化合物之任何药学允许的盐，酯，或此酯之盐，其一旦投予至受者可提供本发明化合物(直接或间接的)或其抗-ICE活性代谢物或残基。

本发明化合物药学允许盐，如衍生自药学允许之无机及有机酸及碱者。适合的酸实例包括氢氯酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，高氯酸，延胡索酸，马来酸，磷酸，甘醇酸，乳酸，水杨酸，琥珀酸，对-甲苯磺酸，酒石酸，醋酸，柠檬酸，甲磺酸，甲酸，苯甲酸，丙二酸，萘-2-磺酸及苯磺酸。其他的酸，如草酸，本身虽然非药学允许的，但可用来制备成充作中间物之盐，以获得本发明的化合物及其药学允许的酸加成盐。衍生自适合碱之盐，包括碱金属(如钠)，碱土金属(如镁)，铵及N-(C_1-4烷基)₄ ⁺盐。

本发明也包括本说明书中所揭示化合物的任何碱性的含氮基之“季铵化反应”。碱性氮可以本领域技术人员已知的任何作用物季铵化之，包括有：低级烷基卤代物，如甲基，乙基，丙基及丁基氯，溴及碘；二烷基硫酸酯包括硫酸二甲，二乙，二丁及二戊酯；长链卤化物如癸基，月桂基，肉豆蔻基及硬脂酰基氯，溴及碘；及芳烷基卤包括苄基及苯乙基溴。水或油溶性或可分散产物可以此季铵化反应获得。

本发明的ICE抑制剂可含有一个或以上的“不对称”碳原子，且因此可呈外消旋体及外消旋混合物，单一对映体，非对映异构体混合物及个别的非对映异构体。这些化合物的所有此种异构物形式可特别地包括于本发明中。各立体区域之碳可为R或S构型。虽然在本发明书中示范的特异化合物及骨架，可以特殊的立体化学构型示出，具有在任何给定手性中心相反立体化学的化合物及骨架或其混合物也包括在此。

本发明的抑制剂可含有环结构，视所需可在碳，氮或其他原子上为各种取代基所取代。此种环结构可被单或多取代。优选的，环结构中可含有0至3个取代基。当多重取代时，各取代基可独立于其他任何取代基而选择只要取代基之组合可造成稳定化合物之形成。

本发明所包括的取代基及可变单位之组合，仅为可形成稳定化合物者。所谓的“稳定”如本说明书中所用的系指具有足以令以本领域已知方法可制造及投予至哺乳动物之稳定性的化合物。典型而言，此化合物在缺少湿气或其他化学反应性的条件下，可在40℃或以下之温度中稳定至少一周。

取代基可以各种形式代表。这些各种形式为本领域技术人员已知的，且可互换使用。例如，在苯基环上的甲基取代基，可以下列任何形式代表：

取代基的各种形式，如甲基在本说明书中可互换使用。

为了使此处所述的本发明更被了解，示出以下详细说明。

本发明的ICE抑制剂-实施方案(A)为式α：

其中：

X₁是-CH；

g是0或1；

各个J独立选自下列包括-H，-OH及-F，限制条件为当第一及第二J结合至C且该第一J是-OH，该第二J是-H；

m是0，1或2；

T是-OH，-CO-CO₂H，-CO₂H，或-CO₂H的任何生物电子等排的置换；

R₁选自下列包括下化式，其中任何环可视所需被单或多取代，于任何碳上为Q₁，于任何氮上为R₅，或于任何原子上为＝O，-OH，-CO₂H，或卤素取代；任何饱和环可视所需在一或二个键上不饱和；且其中R₁(e)及R₁(y)可视所需地苯并稠合；

R₂₀选自下列包括：

和

其中各环C独立选自下列包括苯并，吡啶并，噻吩并，吡咯并，呋喃并，噻唑并，异噻唑并，噁唑并，异噁唑并，嘧啶并，咪唑并，环戊基，及环己基：

R₃是：

-CN，

-CH＝CH-R₉，

-CH＝N-O-R₉，

-(CH₂)_1-3-T₁-R₉，

-CJ₂-R₉，

-CO-R₁₃，或

各R₄独立选自下列包括：

-H，

-Ar₁

-R₉，

-T₁-R₉，及

-(CH₂)_1，2，3-T₁-R₉；

各T₁独立选自下列包括：

CH＝CH-，

-O-，

-S-，

-SO-，

-SO₂-，

-NR₁₀-，

-NR₁₀-CO-，

-CO-，

-O-CO-，

-CO-O-，

-CO-NR₁₀-，

-O-CO-NR₁₀-，

-NR₁₀-CO-O-，

-NR₁₀-CO-NR₁₀-，

-SO₂-NR₁₀-，

-NR₁₀-SO₂-，及

-NR₁₀-SO₂-NR₁₀-；

各R₅独立选自下列包括：

-H，

-Ar₁，

-CO-Ar₁，

-SO₂-Ar₁，

-CO-NH₂，

-SO₂-NH₂，

-R₉，

-CO-R₉，

-CO-O-R₉，

-SO₂-R₉，

和

R₆及R₇一起形成一个饱和的4-8员碳环或含有-O-，-S-，或-NH-的杂环；或R7是-H且R₆是

-H，

-Ar₁，

-R₉，

-(CH₂)_1，2，3-T₁-R₉，或

α-氨基酸侧链残基；

各R₉是C_1-6直链或支链烷基，视所需可被-OH，-F或＝O单或多重取代，及视所需可被-或二个Ar₁基所取代：

各R₁₀独立选自下列包括-H或C_1-6直链或支链烷基；

各R₁₃独立选自下列包括-Ar₂，-R₄及

各Ar₁是环基，独立选自下列包括芳基其含有6，10，12或14个碳原子，具有1至3个环，环烷基其含有3至15个碳原子及1至3个环，该环烷基可视所需被苯并稠合，及杂环基含有5至15个环原子及1至3个环，该杂环含有至少一个杂原子选自-O-，-S-，-SO-，-SO₂-，＝N-及-NH-，该杂环基视所需含有一个或以上的双键，该杂环基视所需含有一个或以上的芳族环，且该环基视所需可被-NH₂，-CO₂H，-Cl，-F，-Br-，-I，-NO₂，-CN，＝O，-OH，全氟C_1-3烷基，或-Q₁所单或多取代：

各Ar₂独立选自下列，其中任何环可视所需可被-Q₁及-Q₂所单或多取代：

和

各Q₁独立选自下列包括：

-Ar₁

-O-Ar₁

-R₉，

-T₁-R₉，及

-(CH₂)_1，2，3-T₁-R₉；

各Q₂独立选自下列包括-OH，-NH₂，-CO₂H，-Cl，-F，-Br，-I，-NO₂，-CN，-CF₃，及

限制条件为当-Ar₁为Q₁基所取代，其含有一个或以上额外的-Ar₁基，该额外的-Ar₁基非为Q₁所取代；

各X独立选自下列包括＝N-，及＝CH-；

各X₂独立选自下列包括-O-，-CH₂-，-NH-，-S-，-SO-，及-SO₂-；

各X₃独立选自下列包括-CH₂-，-S-，-SO-，及-SO₂-；

各X₄独立选自下列包括-CH₂-及-NH-；各X₅独立选自下列包括及

X₆是-CH-或-N-；

各Y独立选自下列包括-O-，-S-，及-NH；

各Z独立为CO或SO₂；

各a独立为0或1；

各c独立为1或2；

各d独立为0，1或2；且

各e独立为0，1，2或3；

限制条件为当

R₁是(f)，

R₆是α-氨基酸侧链残基，且

R₇是-H，

则(aa1)及(aa2)必须为Q₁所取代；

限制条件也有当

R₁是(o)，

g是0，

J是-H，

m是1，

R₆是α-氨基酸侧链残基，

R₇是-H，

X₂是-CH₂-，

X₅是-CH-，

X₆是

且

R₃是

R₁₃是：

-CH₂-O-CO-Ar₁，

-CH₂-S-CO-Ar₁，

-CH₂-O-Ar₁，

-CH₂-S-Ar₁，或

-R₄当-R₄是-H；

则R₁(o)基之环必需为Q₁所取代或苯并稠合；且

限制条件为当

R₁是(w)，

g是0，

J是-H，

m是1，

T是-CO₂H，

X₂是O，

R₅是苄氧羰基，且

环C是苯并，

则当：

R₁₃是-CH₂-O-Ar₁且

Ar₁是1-苯基-3-三氟甲基-吡唑-5-基，其中苯基视所需可被氯原子所取代；

或当

R₁₃是-CH₂-O-CO-Ar₁，其中

Ar₁是2，6-二氯苯基时，R₃不可为-CO-R₁₃。

应用式α之具体实施方案A之优选化合物，其中R₁是(w)：

其中其他取代基如上文所述。

应用式α的具体实施方案A之一其他优选化合物，其中R₁是(y)：

其中其他取代基如上述。

具体实施方案A之更优选化合物包含式α，其中：

X₁是-CH；

g是0；

J是-H；

m是0或1且T是-CO-CO₂H，或-CO₂H任何的生物电子等排之置换，或

m是1且T是-CO₂H；

R₁选自下列包括下式，其中任何环可视所需被单或多重取代，在任何碳上为Q₁，在任何氮上为R₅，或在任何原子上为＝O，-OH，-CO₂H，或卤素所取代，且其中(e)视所需可被苯并稠合：

和

R₂₀是：

或

且c是1；

C环是苯并，视所需可被-C_1-3烷基，-O-C_1-3烷基，-Cl，-F或-CF₃所取代；

当R₁是(a)或(b)，R₅优选是-H，且

当R₁是(c)，(e)，(f)，(o)，(r)，(w)，(x)或(y)，R₅优选是：

-CO-Ar₁

-SO₂-Ar₁，

-CO-NH₂，

-CO-NH-Ar₁

-CO-R₉，

-CO-O-R₉，

-SO₂-R₉，或

-CO-NH-R₉，

R₇是-H且R₆是：-H，

-R₉，或

-Ar₁；

R₉是C_1-6直链或支链烷基，视所需可被＝O取代，且视所需可被-Ar₁取代；

R₁₀是-H或-C_1-3直链或支链烷基；

Ar₁是苯基，萘基，吡啶基，苯并噻唑基，噻吩基，苯并噻吩基，苯并噁唑基，2-二氢茚基，或吲哚基，视所需可被-O-C_1-3烷基，-NH-C_1-3烷基，-N-(C_1-3烷基)₂，-Cl，-F，-CF₃，-C_1-3烷基，或取代；

Q₁是R₉或-(CH₂)_0，1，2-T₁-(CH)_0，1，2-Ar₁，其中T₁是-O-或-S-；

各X独立选自下列包括＝N-，及＝CH-；

各X₅独立选自下列包括及

X₆是

或

限制条件为当：

R₁是(o)，

X₂是-CH₂-，

X₅是且

X₆是

则R₁(o)基之环必须为Q₁所取代或苯并稠合；且

Z是C＝O。

最优选此更优选具体实施方案之化合物为其中R₁基是：

或

且c是2；或

或

其可视所需地被苯并稠合，

且c是1或2；

限制条件为当R₁是(e4)，

g是0，

J是-H，

m是1，

T是-CO₂H，

R₅是苄氧羰基，且

c是1，

则当R₁₃是-CH₂-O-Ar₁且

Ar₁是1-苯基-3-三氟甲基-吡唑-5-基，其中苯基视所需可被氯原子所取代时；或当

R₁₃是-CH₂-O-CO-Ar₁，其中

Ar₁是2，6-二氯苯基，

且当骨架环上的2-位置为对位-氟-苯基取代时R₃不可为-CO-R₁₃；且

限制条件也有当

R₁是(e7)，

g是0，

J是-H，

m是1，

T是-CO₂H或-CO-NH-OH，

R₅是氨基酸侧链残基N原子之保护基，且

各c是1，

则当R₁₃是：

-CH₂-O-CO-Ar₁，

-CH₂-S-CO-Ar₁，

-CH₂-O-Ar₁，或

-CH₂-S-Ar₁，R₃无法为-CO-R₁₃

此具体实施方案的最优选化合物为其中：

R₁是：

或

且c是2；

m是1；

T是-CO₂H；且

R₃是-CO-R₁₃。

此具体实施方案的其他最优选化合物为其中：

R₁是：

其中

X₂是：

-O-，

-S-，

-SO₂-，或

-NH-；

当X₂是-NH-，视所需可被R₅或Q₁在X2上取代；且

环C是苯并，为-C_1-3烷基，-O-C_1-3烷基，-Cl，-F或-CF₃所取代。

本发明另一具体实施方案(B)之ICE抑制剂为式(I)：

其中：

R₁选自下列包括下列结构式：

和

环C选自下列包括：苯并，吡啶并，噻吩并，吡咯并，呋喃并，噻唑并，异噻唑并，噁唑并，异噁唑并，嘧啶并，咪唑并，环戊基，及环己基；

R₂是：

或

m是1或2；

R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)-O-R₉，

-S(O)₂-R₉，

-C(O)-CH₂-O-R₉，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-R₉，

-H，及

-C(O)C(O)-OR₁₀；

X₅是

或

Y₂是H₂或O；

X₇是-N(R₈)-或-O-；

R₆选自下列包括-H及-CH₃；

R₈选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-N(H)-R₁₀，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-OR₁₀，

-C(O)C(O)-R₁₀；

-C(O)-CH₂N(R₁₀)(R₁₀)，

-C(O)-CH₂C(O)-O-R₉，

-C(O)-CH₂C(O)-R₉，

-H，及

-C(O)-C(O)-OR₁₀；

各R₉独立选自下列包括-Ar₃及-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃所取代，其中-C_1-6烷基视所需可不饱和；

各R₁₀独立选自下列包括-H，-Ar₃，C_3-6环烷基，及视所需可被Ar₃所取代的-C_1-6直链或支链烷基，其中-C_1-6烷基视所需可不饱和；

R₁₃选自下列包括H，Ar₃，及C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃，-CONH₂，-OR₅，-OH，-OR₉，或-CO₂H所取代；

各R₅₁独立选自下列包括R₉，-C(O)-R₉，-C(O)-N(H)-R₉，或各R₅₁一起形成饱和的4-8员碳环，或含有-O-，-S-，或-NH-的杂环；

各R₂₁独立选自下列包括-H或-C_1-6直链或支链烷基；

各Ar₃是环基，独立选自下列包括含有6，10，12或14个碳原子及1及3个环的芳基，及芳族杂环含有5至15个环原子及1至3个环，该杂环含有至少一个选自-O-，-S-，-SO-，SO₂，＝N-，及-NH-之杂原子基团，该杂环视所需含有一或多个双键，该杂环视所需含有一个或以上的芳族环，且该环基视所需可为-Q₁所单或多重取代；

各Q₁独立选自下列包括-NH₂，-CO₂H，-Cl，-F，-Br，-I，-NO₂，-CN，＝O，-OH，-全氟C_1-3烷基，R₅，-OR₅，-NHR₅，OR₉，-NHR₉，R₉，-C(O)-R₁₀，及

限制条件为当-Ar₃为Q₁基取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另-Ar₃取代。

优选的，R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)-O-R₉，及

-C(O)-NH-R₁₀。

另外，R₅选自下列包括：

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-C(O)-R₁₀，

-R₉，及

-C(O)-C(O)-OR₁₀。

更优选：

m是1：

R₁₃是H或-C_1-4直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃，-OH，-OR₉，或-CO₂H取代，其中R₉是-C_1-4直链或支链烷基，其中Ar₃是吗啉基或苯基，其中苯基视所需可被Q₁所取代；

R₂₁是-H或-CH₃；

R₅₁是C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃取代，其中Ar₃是苯基，视所需可被-Q₁取代；

Ar₃是苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，吡啶基，苯并呋喃基，及吲哚基；

各Q₁独立选自下列包括-NH₂，-Cl，-F，-Br，-OH，-R₉，-NH-R₅其中R₅是-C(O)-R₁₀或-S(O)₂-R₉，-OR₅其中R₅是-C(O)-R₁₀，-OR₉，-NHR₉，及

其中各R₉及R₁₀独立地为-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃是苯基；

限制条件为当-Ar₃为Q₁基所取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另-Ar₃基所取代。

本发明另一具体实施方案(C)之ICE抑制剂为式(II)：

其中：

m是1或2；

R₁选自下列包括下式：

和

环C选自下列包括苯并，吡啶并，噻吩并，吡咯并，呋喃并，噻唑并，异噻唑并，噁唑并，异噁唑并，嘧啶并，咪唑并，环戊基，及环己基；

R₃选自下列包括：

-CN，

-C(O)-H，

-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，

-C(O)-CH₂-F，

-C＝N-O-R₉，及

-CO-Ar₂；

R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)-O-R₉，

-S(O)₂-R₉，

-C(O)-CH₂-O-R₉，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-R₉，

-H，及

-C(O)C(O)-OR₁₀，

X₅是

或

Y₂是H₂或O；

X₇是-N(R₈)-或-O-；

各T₁独立选自下列包括-O-，-S-，-S(O)-，及-S(O)₂-；

R₆选自下列包括-H及-CH₃；

R₈选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-NH-R₁₀，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-OR₁₀，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-C(O)-CH₂-N(R₁₀)(R₁₀)，

-C(O)-CH₂C(O)-O-R₉，

-C(O)-CH₂C(O)-R₉，

-H，及

-C(O)-C(O)-OR₁₀；

各R₉独立选自下列包括-Ar₃及C_1-6直链或支链烷基视所需可被Ar₃取代，其中-C_1-6烷基视所需不饱和；

各R₁₀独立选自下列包括-H，-Ar₃，C_3-6环烷基，及-C_1-6直链或支链烷基视所需可被Ar₃取代，其中-C_1-6烷基视所需不饱和；

各R₁₁独立选自下列包括：

-Ar₄，

-(CH₂)_1-3-Ar₄，

-H，及

-C(O)-Ar₄；

R₁₃选自下列包括H，Ar₃，及C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃，-CONH₂，-OR₅，-OH，-OR₉或CO₂H所取代；

-OR₁₃可选的为-N(H)-OH；

各R₂₁独立选自下列包括-H或-C_1-6直链或支链烷基；

Ar₂独立选自下列，其中任一环可视所需可被-Q₁单或多重取代；

和

其中各Y独立选自下列包括O及S；

各Ar₃是环基，独立选自下列包括含有6，10，12，或14个碳原子及1至3个环芳基，及含有5至15个环原子及1至3个环芳杂环基，该杂环含有至少一个选自-O-，-S-，-SO-，SO₂，＝N-及-NH-，-N(R₅)-，及-N(R₉)-之杂原子，该杂环视所需含有一个或以上的双键，该杂环视所需含一个或以上的芳族环，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

各Ar₄是环基，独立选自下列包括含有6，10，12或14个碳原子及1至3个环芳基，及杂环基其含有5至15个环原子及1至3个环，该杂环含有至少一个选自-O-，-S-，-SO-，SO₂，＝N-，-NH-，-N(R₅)-，及-N(R₉)-之杂原子，该杂环基视所需含有一个或以上的双键，该杂环视所需含一个或以上的芳族环，且该环状基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

各Q₁独立选自下列包括-NH₂，-CO₂H，Cl，-F，-Br，-I，-NO₂，-CN，＝O，-OH，-全氟C_1-3烷基，R₅，-OR₅，-NHR₅，OR₉，-NHR₉，R₉，-C(O)-R₁₀，及

限制条件为当-Ar₃为Q₁基所取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃为另-Ar₃取代。

此具体实施方案之优选化合物包括下列，但并不限于此：

具体实施方案C应用式(II)之优选化合物，其中R₁是(e11)且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案C应用式(II)之其他优选化合物，其中R₁是(e12)且另外取代基如上文所定义。

具体实施方案C应用式(II)之其他优选化合物，其中R₁是(y1)且另外取代基如上文所定义。

具体实施方案C应用式(II)之其他优选化合物，其中R₁是(y2)且另外取代基如上文所定义。

具体实施方案C应用式(II)之其他优选化合物，其中R₁是(z)且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案C应用式(II)之其他优选化合物，其中R₁是(w2)且其他取代基如上文所定义。

更优选的，R₁是(w2)且

m是1；

环C是苯并，吡啶并或噻吩并；

R₃选自下列包括-C(O)-H，-C(O)-Ar₂，及-C(O)CH₂-T₁-R₁₁；

R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃；

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃；

-C(O)C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-CH₂Ar₃；

-R₉，其中R₉是C_1-2烷基，为-Ar₃所取代；及

-C(O)C(O)-OR₁₀，其中R₁₀是-CH₂Ar₃；

T₁是O或S；

R₆是H；

R₈选自下列包括-C(O)-R₁₀，-C(O)-CH₂-OR₁₀，及-C(O)CH₂-N(R₁₀)(R₁₀)，其中R₁₀是H，CH₃，或CH₂CH₃；

R₁₁选自下列包括-Ar₄，-(CH₂)_1-3-Ar₄，及-C(O)-Ar₄；

R₁₃是H或-C_1-4直链或支链烷基视所需可被-Ar₃，-OH，-OR₉或-CO₂H取代，其中R₉是-C_1-4支链或直链烷基，其中Ar₃是吗啉基或苯基，其中苯基视所需可被Q₁所取代：

Ar₂是(hh)；

Y是O；

Ar₃是苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，噻唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，噻二唑基，苯并三唑基，苯并[b]苯硫基，苯并呋喃基及吲哚基；

Ar₄是苯基，四唑基，萘基，吡啶基，噁唑基，嘧啶基或吲哚基；

各Q₁独立选自下列包括-NH₂，Cl，-F，-Br，-OH，-R₉，-NH-R₅，其中R₅是-C(O)-R₂₀或-S(O)₂-R₉，-OR₅，其中R₅是-C(O)-R₁₀，-OR₉，-NHR₉，及

限制条件为当-Ar₃为Q₁基取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃基时，该额外的-Ar₃基不为另-Ar₃基所取代。

优选的此具体实施方案之化合物包括下列，但不限于此：

具体实施方案C应用式(II)之其他优选化合物，其中R₁是(e10)，X₅是CH，且其他取代基如上文定义。

具体实施方案C应用式(II)之优选化合物，其中R₁是(e10)，X₅是CH，R₃是CO-Ar₂，其他取代基如上文定义。

具体实施方案C应用式(II)之其他优选化合物，其中R₁是(e10)，X₅是CH，R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，R₁₁是-(CH₂)_1-3-Ar₄，且其他取代基如上文定义。

具体实施方案C应用式(II)之其他优选化合物，其中R₁是(e10)，且X₅是CH且

R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁；

T₁是O；且

R₁₁是-C(O)-Ar₄，

且其他取代基如上文定义。

具体实施方案C应用式(II)的其他更优选化合物，其中R₁是(e10)，X₅是CH，R₃是-C(O)-H，且另外的取代基如上文定义。

具体实施方案C应用式(II)的其他更优选化合物，其中R₁是(e10)，且X₅是CH，R₃是CO-CH₂-T₁-R₁₁，且R₁₁是-Ar₄，且其他取代基如上文定义。

具体实施方案C应用式(II)的其他更优选化合物，其中R₁是(e10)，且X₅是N，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案C应用式(II)的更优选化合物，其中R₁是(e10)，X₅是N，R₃是CO-Ar₂，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案C应用式(II)化合物的其他优选化合物，其中R₁是(e10)，X₅是N，R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，R₁₁是-(CH₂)_1-3-Ar₄，且其他取代基如上文定义。

具体实施方案C应用式(II)的其他更优选化合物，其中R₁是(e10)，且X₅是N，且

R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁；

T₁是O；且

R₁₁是-C(O)-Ar₄，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案C另外更优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，X₅是N，R₃是-C(O)-H，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案C其他更优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，且X₅是N，R₃是CO-CH₂-T₁-R₁₁，且R₁₁是-Ar₄，且其他取代基如上文所定义。

更优选的，在这些优选化合物中，R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，及

-C(O)-NH-R₁₀。

另外，于这些优选化合物中，R₅选自下列包括：

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-C(O)-R₁₀，

-R₉，及

-C(O)-C(O)-OR₁₀。

最优选的，于这些更优选化合物中：

m是1；

T₁是O或S；

R₁₃是H或-C_1-4直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃，-OH，-OR₉，或-CO₂H取代，其中R₉是-C_1-4支链或直链烷基，其中Ar₃是吗啉基或苯基，其中苯基视所需可被Q₁所取代；

R₂₁是-H或-CH₃；

Ar₂是(hh)；

Y是O，且

Ar₃是苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，吡啶基苯并呋喃基及吲哚基；

Ar₄是苯基，四唑基，吡啶基，噁唑基，萘基，嘧啶基或噻吩基；

各Q₁独立选自下列包括-NH₂，-Cl，-F，-Br，-OH，-R₉，-NH-R₅，其中R₅是-C(O)-R₁₀或-S(O)₂-R₉，-OR₅其中R₅是-C(O)-R₁₀，-OR₉，-NHR₉，及

限制条件为当-Ar₃为Q₁基取代时，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另-Ar₃基所取代。

具体实施方案B之优选化合物包括下列，但不限于此：

优选的具体实施方案C化合物包括下列但不限于此：

本发明特异化合物也包括其结构包括骨架1-22之化合物，但亦不限于此：

其中

R是

其中

R₁₃是-CH₃，-CH₂CH₃，-CH₂CH₂CH₃，-CH(CH₃)(CH₃)，-CH₂CH₂CH₂CH₃，-CH₂-CH(CH₃)CH₃，-C(CH₃)₃，-CH₂Ph，或

其中

和

各R₅₁是-CH₃，-CH₂CH₃，-CH₂CH₂CH₃，-CH(CH₃)(CH₃)，-CH₂CH₂CH₂CH₃，-CH₂-CH(CH₃)CH₃，-C(CH₃)₃，-CH₂Ph，或一起形成亚乙二氧基缩醛或亚丙二氧基缩醛；或

其中

R₅₁是-CH₃，-CH₂CH₃，-CH₂CH₂CH₃，-CH(CH₃)(CH₃)，-CH₂CH₂CH₂CH₃，-CH₂-CH(CH₃)CH₃，-C(CH₃)₃，-CH₂Ph，-C(O)-CH₃或-C(O)-Ph：

R₅在上述化合物各自中是和化合物139，214c，214e，404-413，415-491，493-501中任一者所示之R₅部分任一者相同。

本发明的特异化合物也包括含有骨架1-28之化合物，但并不限此，其中R，R₅₁及R₅如上文所定义，且其中于化合物214c，214e，404-413，415-418，422-426，430-456，458-466，468，470-471，473-491，493，495，497-501中任一者之R₅部分之-C(O)-以-CH₂-，-C(O)C(O)-或-CH₂C(O)C(O)-置换。

另一具体实施方案(D)的本发明ICE抑制剂为式(I)：

其中：

各R₅独立选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-N(R₁₀)(R₁₀)，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-O-R₉，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-R₉，

-H，

-C(O)C(O)-OR₁₀，及

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀)；

各Q₁独立选自下列包括-NH₂，-CO₂H，-Cl，-F，-Br，-I，-NO₂，-CN，＝O，-OH，-全氟C_1-3烷基，R₅，-OR₅，-NHR₅，OR₉，-N(R₉)(R₁₀)，R₉，-C(O)-R₁₀，及

限制条件为当-Ar₃为Q₁基所取代时，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃基所取代；

其它取代基与具体实施方案(B)中定义相同。

优选的，R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)-O-R₉，及

-C(O)-NH-R₁₀.

另外，R₅选自下列包括：

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-C(O)-R₁₀，

-R₉，及

-C(O)-C(O)-OR₁₀。

更优选的：

m是1：

R₁₃是H或-C_1-4直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃，-OH，-OR₉，或-CO₂H所取代，其中R₉是-C_1-4支链或直链烷基，其中Ar₃是吗啉基或苯基，其中苯基视所需可被Q₁所取代；

R₂₁是-H或-CH₃；

R₅₁是C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃是苯基，视所需可被-Q₁所取代；

各Ar₃是环基，独立选自下列包括苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，吡啶基，苯并呋喃基，及吲哚基，且该环基视所需可为-Q₁所单或多重取代；

各Q₁独立选自下列包括-NH₂，-Cl，-F，-Br，-OH，-R₉，-NH-R₅其中R₅是-C(O)-R₁₀或-S(O)₂-R₉，-OR₅其中R₅是-C(O)-R₁₀，-OR₉，-N(R₉)(R₁₀)，及

其中各R₉及R₁₀独立为-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃是苯基；

限制条件为当-Ar₃为Q₁基所取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另-Ar₃所取代。

本发明另一具体实施方案(E)之ICE抑制剂为式(II)：

其中：

各R₅独立选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)-O-R₉，

-C(O)-N(R₁₀)(R₁₀)

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-O-R₉，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-R₉，

-H，

-C(O)C(O)-OR₁₀，及

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀)；

R₁₅选自下列包括-OH，OAr₃，-N(H)-OH，及-OC_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃，-CONH₂，-OR₅，-OH，-OR₉，或CO₂H所取代；

限制条件为当-Ar₃为Q₁取代时，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃所取代；

其它取代基与具体实施方案(C)中定义相同。

具体实施方案E之优选化合物应用式(II)，其中R₁是(e11)且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他优选化合物应用式(II)，其中R₁是(e12)且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他优选化合物应用式(II)，其中R₁是(y1)且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他优选化合物应用式(II)，其中R₁是(y2)且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他优选化合物应用式(II)，其中R₁是(z)且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他优选化合物应用式(II)，其中R₁是(w2)且其他取代基如上文所定义。

更优选的，R₁是(w2)且

m是1；

环C是苯并，吡啶并，或噻吩并；

R₃选自下列包括-C(O)-H，-C(O)-Ar₂，及-C(O)CH₂-T₁-R₁₁；

R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃；

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃；

-C(O)C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃；

-R₉，其中R₉是C_1-2烷基，为-Ar₃所取代；及

-C(O)C(O)-OR₁₀，其中R₁₀是-CH₂Ar₃；

T₁是O或S；

R₆是H；

R₁₁选自下列包括-Ar₄，-(CH₂)_1-3-Ar₄，及-C(O)-Ar₄；

R₁₅是-OH或-OC_1-4直链或支链烷基视所需可被-Ar₃，-OH，-OR₉，或-CO₂H所取代，其中R₉是-C_1-4支链或直链烷基，其中Ar₃是吗啉基或苯基，其中苯基视所需可被Q₁所取代：

Ar₂是(hh)；

Y是O；

各Ar₃环基独立选自下列包括：苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，噻唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，噻二唑基，苯并三唑基，苯并[b]苯硫基，苯并呋喃基及吲哚基，且该环基视所需可为-Q₁单或多重取代；

各Ar₄环基独立选自下列包括：苯基，四唑基，萘基，吡啶基，噁唑基，嘧啶基或吲哚基，该环基视所需可为-Q₁单或多重取代；

各Q₁独立选自下列包括-NH₂，-Cl，-F，-Br，-OH，-R₉，-NH-R₅，其中R₅是-C(O)-R₁₀或-S(O)₂-R₉，-OR₅，其中R₅是-C(O)-R₁₀，-OR₉，-N(R₉)(R₁₀)，及

其中各R₉及R₁₀独立地为-C_1-6直链或支链烷基视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃是苯基；

限制条件为当-Ar₃为Q₁所取代时，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为其他-Ar₃基取代。

具体实施方案E其他优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，X₅是CH，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E的更优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，X₅是CH，R₃是CO-Ar₂，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他更优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，X₅是CH，R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，R₁₁是-(CH₂)_1-3-Ar₄，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他更优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，X₅是CH，R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，T₁是O，R₁₁是-C(O)-Ar₄，且其他取代基如上文所定义。

其他具体实施方案E的更优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，X₅是CH，R₃是-C(O)-H，且其他取代基如上文所定义。

其他具体实施方案E的更优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，且X₅是CH，R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，且R₁₁是-Ar₄，其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他更优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，X₅是N，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E的更优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，X₅是N，R₃是CO-Ar₂，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他更优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，X₅是N，R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，R₁₁是-C(CH₂)_1-3-Ar₄，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，X₅是N，且：

R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁；

T₁是O，且

R₁₁是-C(O)-Ar₄，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他更优选化合物，应用式(II)其中R₁是(e10)，X₅是N，R₃是-C(O)-H，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案E其他更优选化合物，应用式(II)，其中R₁是(e10)，且X₅是N，R₃是-CO-CH₂-T₁-R₁₁，R₁₁是-Ar₄，且其他取代基如上文所定义。

更优选的，在这些更优选化合物中，R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)-O-R₉，及

-C(O)-NH-R₁₀。

另外，在这些更优选化合物中，R₅选自下列包括：

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-C(O)-R₁₀，

-R₉，及

-C(O)-C(O)-OR₁₀。

最优选的，于这些更优选化合物中，

m是1：

T₁是O或S；

R₁₅是-OH或-OC_1-4直链或支链烷基视所需可被-Ar₃，-OH，-OR₉，或-CO₂H所取代，其中R₉是-C_1-4支链或直链烷基，其中Ar₃是吗啉基或苯基，其中苯基视所需可被Q₁所取代；

R₂₁是-H或-CH₃；

Ar₂是(hh)；

Y是O，且

各Ar₃环基独立选自下列包括苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，吡啶基，苯并呋喃基，及吲哚基，且该环基可为-Q₁所单-或多重取代；

各Ar₄环基独立选自下列包括苯基，四唑基，吡啶基，噁唑基，萘基，嘧啶基，或噻吩基，且该环基可为-Q₁单或多重取代；

其中各R₉及R₁₀独立地为-C_1-6直链或支链烷基且视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃是苯基；

限制条件为当-Ar₃为Q₁所取代时，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃基所取代。

本发明另外具体实施方案(F)之ICE抑制剂为式(III)：

其中：

R₁与R₂与具体实施方案(D)中所述相同。

具体实施方案F的优选化合物应用式(III)，其中R₁是(w2)，及其他取代基如上文所定义。

优选，当R₁是(w2)：

m是1；

环C是苯并，吡啶并，或噻吩并：

R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃；

-C(O)-O-R₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃；

-C(O)C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃；

-R₉，其中R₉是C_1-2烷基为-Ar₃所取代；及

-C(O)C(O)-OR₁₀，其中R₁₀是-CH₂Ar₃；

R₆是H；

R₈选自下列包括：-C(O)-R₁₀，-C(O)-CH₂-OR₁₀，及-C(O)CH₂-N(R₁₀)(R₁₀)，其中R₁₀是H，CH₃，或CH₂CH₃；

R₁₃是H或C_1-4直链或支链烷基，视所需可被Ar₃，-OH，-OR₉或-CO₂H所取代，其中R₉是C_1-4支链或直链烷基：其中Ar₃是吗啉基或苯基，其中苯基可视所需可被Q₁所取代；

Ar₃是苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，噻唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，噻二唑基，苯并三唑基，苯并[b]苯硫基，苯并呋喃基，及吲哚基；

限制条件为当-Ar₃为Q₁所取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃基取代。

具体实施方案F的其他优选化合物，应用式(III)，其中R₁是(e11)，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F的其他优选化合物，应用式(III)，其中R₁是(e12)，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F的其他优选化合物，应用式(III)，其中R₁是(y1)，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F的其他优选化合物，应用式(III)，其中R₁是(y2)，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F的其他优选化合物，应用式(III)，其中R₁是(z)，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F的其他优选化合物，应用式(III)，其中R₁是(e10)且X₅是CH(也在此称为e10-B)，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F其他优选化合物，应用式(III)，其中R₁是(e10)且X₅是N(在此也称为e10-A)，且其他的取代基如上文所定义。

优选的，当R₁是(e11)，(e12)，(y1)，(y2)，(z)，(e10-A)及(e10-B)，R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)-O-R₉，及

-C(O)-NH-R₁₀。

另外，当R₁是(e11)，(e12)，(y1)，(y2)，(z)，(e10-A)及(e10-B)，R₅选自下列包括：

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-C(O)-R₁₀，

-R₉，

-C(O)-C(O)-OR₁₀。及

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀)。

更优选的，R₅是R-C(O)-C(O)-OR₁₀。

另外，R₅是-C(O)-C(O)-OR₁₀。

更优选的，当R₁是(e11)，(e12)，(y1)，(y2)，(z)，(e10-A)及(e10-B)：

m是1：

R₂₁是-H或-CH₃；

R₅₁是C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃环基是苯基，该环基视所需可被-Q₁所多重或单取代；

各Ar₃环基独立选自下列包括苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，吡啶基，苯并呋喃基，或吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

其中各R₉及R₁₀独立地为-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃环基是苯基，且该环基视所需可被-Q₁单或多重取代；

限制条件为当-Ar₃为Q₁基所取代时，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃基所取代。

更优选的，于这些更优选化合物中，Ar₃环基选自下列包括：苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，苯并呋喃基及吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

本具体实施方案F呈优选形式之化合物为其中：

R₅是-C(O)-R₁₀，其中

R₁₀是Ar₃，其中Ar₃环基是苯基，该环基视所需可被下列单或多重取代：

-F，

-Cl，

-N(H)-R₅，其中-R₅是-H或-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃环基是苯基，该环基视所需可被-Q₁单或多重取代，

-N(R₉)(R₁₀)，其中R₉及R₁₀独立为-C_1-4直链或支链烷基，或

-O-R₅，其中R₅是H或-C_1-4直链或支链烷基。

更优选的Ar₃环基是苯基，视所需在3-或5-位上为-Cl或在4-位上为-NH-R₅，-N(R₉)(R₁₀)，或-O-R₅所单或多重取代。

实施方案F其他优选化合物包括其中R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且Ar₃环基选自下列包括吲哚基，苯并咪唑基，噻吩基，及苯并[b]苯硫基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代：

具体实施方案F其他优选化合包括其中R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且Ar₃环基选自喹啉基及异喹啉基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代。

具体实施方案F其他优选化合物包括其中R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃，其中Ar₃环基是苯基，为

所取代。

于具体实施方案F另一形式中，化合物如上述，进一步限制条件为当：

m是1；

R₁是(e10)；

X₅是CH；

R₁₅是-OH；

R₂₁是-H；且

Y₂是O且R₃是-C(O)-H，则R₅不可为；

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃且Ar₃环基是苯基，不为下列取代：-Q₁，4-(羧甲氧基)苯基，2-氟苯基，2-吡啶基，N-(4-甲基哌嗪基)甲基苯基，或

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃，且Ar₃环基是苯基，不为-Q₁取代；且当：

Y₂是O，R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，T₁是O，且R₁₁是Ar₄，其中Ar₄环基是5-(1-(4-氯苯基)-3-三氟甲基)吡唑基)，则R₅不可为：

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃且Ar₃环基是4-(二甲氨基甲基)苯基，苯基，4-(羧甲硫基)苯基，4-(羧乙硫基)苯基，4-(羧乙基)苯基，4-(羧丙基)苯基，2-氟苯基，2-吡啶基，N-(4-甲基哌嗪基)甲基苯基，或

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃，且Ar₃环基是苯基；

且当R₁₁是Ar₄，其中Ar₄环基是5-(1-苯基-3-三氟甲基)吡唑基)，则R₅不可为；

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃，则Ar₃环基是苯基；

且当R₁₁是Ar₄，其中Ar₄环基是5-(1-(2-吡啶基)-3-三氟甲基)吡唑基)，则R₅不可为；

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃且Ar₃环基是4-(二甲氨基甲基)苯基，或

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃，且Ar₃环基是苯基，不为-Q₁取代；且当

Y₂是O，R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，T₁是O，且R₁₁是-C(O)-Ar₄，其中Ar₄环基是2，5-二氯苯基，则R₅不可为；

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃且Ar₃环基是4-(二甲氨基甲基)苯基，4-(N-吗啉代甲基)苯基，4-(N-甲基哌嗪基)甲基)苯基，4-(N-(2-甲基)咪唑基甲基)苯基，5-苯并咪唑基，5-苯并三唑基，N-羰乙氧基-5-苯并三唑基，N-羰乙氧基-5-苯并咪唑基，或

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃，且Ar₃环基是苯基，未被-Q₁取代；且当

Y₂是H₂，R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，T₁是O，且R₁₁是-C(O)-Ar₄，其中Ar₄环基是2，5-二氯苯基，则R₅不可为；

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃，且Ar₃环基是苯基。

于具体实施方案F另一形式中，优选的化合物为其中R₂₁是-H者。

另外，优选化合物为其中R₂₁是-CH₃者。

具体实施方案F中优选化合物应用式(III)，其中R₁是(w2)且另外的取代基如上文定义。

更优选的，R₁是(w2)且

m是1；

环C是苯并，吡啶并，或噻吩并；

R₃选自下列包括-C(O)-H，-C(O)-Ar₂，及-C(O)CH₂-T₁-R₁₁；

R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃；

-C(O)O-R₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃；

-C(O)C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃；

-R₉，其中R₉是C_1-2烷基，为-Ar₃所取代；及

-C(O)C(O)-OR₁₀，其中R₁₀是-CH₂Ar₃；

T₁是O或S；

R₆是H；

R₈选自下列包括-C(O)-R₁₀，-C(O)-CH₂-OR₁₀，及-C(O)CH₂-N(R₁₀)(R₁₀)，其中R₁₀是H，CH₃，或-CH₂CH₃；

R₁₁选自下列包括-Ar₄，-(CH₂)_1-3-Ar₄，及-C(O)-Ar₄；

R₁₅是-OH或-OC_1-4直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃，-OH，-OR₉，或-CO₂H取代，其中R₉是-C_1-4支链或直链烷基，其中Ar₃是吗啉基或苯基，其中苯基视所需可被Q₁所取代：

Ar₂是(hh)；

Y是O；

各Ar₃环基独立选自下列包括苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，噻唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，噻二唑基，苯并三唑基，苯并[b]苯硫基，苯并呋喃基，及吲哚基，且该环基视所需可为-Q₁所单或多重取代；

各Ar₄环基独立选自下列包括苯基，四唑基，萘基，吡啶基，噁唑基，嘧啶基，或吲哚基，该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

限制条件为当-Ar₃为Q₁取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃基所取代。

具体实施方案F其他优选化合物，应用式(III)其中R₁是(e11)，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F其他优选化合物，应用式(III)其中R₁是(e12)，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F其他优选化合物，应用式(III)其中R₁是(y1)，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F其他优选化合物，应用式(III)其中R₁是(y2)，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F其他优选化合物，应用式(III)其中R₁是(z)，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F其他优选化合物，应用式(III)其中R₁是(e10)，X₅是CH，且其他的取代基如上文所定义。

具体实施方案F其他优选化合物，应用式(III)其中R₁是(e10)且X₅是N，且其他的取代基如上文所定义。

更优选的，于这些更优选化合物中，R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，及

-C(O)-NH-R₁₀。

另外，于这些更优选化合物中，R₅选自下列包括：

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-C(O)-R₁₀，

-R₉，

-C(O)-C(O)-OR₁₀。及

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀)。

最优选的，于这些更优选化合物中，

m是1；

R₂₁是-H或-CH₃；

各Ar₃环基独立选自下列包括苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，吡啶基，苯并呋喃基，及吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

限制条件为当-Ar₃为Q₁取代时，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另-Ar₃基所取代。

具体实施方案(F)优选化合物包括下列，但并不限于此：

另一具体实施方案(G)之本发明ICE抑制剂为式(IV)：

其中：

m是1或2；

R₁选自下列包括下列结构式：

和

R₁₅选自下列包括-OH，-OAr₃，-N(H)OH，及-OC_1-6，其中C_1-6是直链或支链烷基视所需可被Ar₃，-CONH₂，-OR₅，-OH，-OR₉或CO₂H所取代；

Ar₂独立选自下列，其中任何环可视所需可被-Q₁或苯基所单或多重取代，苯基视所需可被Q₁所取代：

和

其中各Y独立选自O及S；

且其它取代基与具体实施方案(E)中所述相同。

具体实施方案G之优选化合物应用式(IV)，其中R₁是(w2)且其他的取代基如上文所定义。

优选的，R₁是(w2)：

m是1；

环C是苯并，吡啶并，或噻吩并；

R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃；

-C(O)O-R₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃；

-C(O)C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃；

-R₉，其中R₉是C_1-2烷基为-Ar₃所取代；及

-C(O)C(O)-OR₁₀，其中R₁₀是-CH₂Ar₃；

R₆是H；

各Ar₃是苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，噻唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，噻二唑基，苯并三唑基，苯并[b]苯硫基，苯并呋喃基，及吲哚基；

限制条件为当-Ar₃为Q₁取代时，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃基取代。

具体实施方案G其他优选化合物，应用式(IV)其中R₁是(e10-A)且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案G其他优选化合物，应用式(IV)其中R₁是(e11)且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案G其他优选化合物，应用式(IV)其中R₁是(e12)，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案G其他优选化合物，应用式(IV)其中R₁是(y1)且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案G其他优选化合物，应用式(IV)其中R₁是(y2)且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案G其他优选化合物，应用式(IV)其中R₁是(z)，且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案G更优选化合物为其中R₃是-CO-Ar₂者

最优选的，当R₃是-CO-Ar₂时，Y是O。

其他更优选化合物为其中R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁且R₁₁是-(CH₂)_1-3-Ar₄。

最优选的，当R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁且R₁₁是-(CH₂)_1-3-Ar₄，T₃是O。

其他更优选化合物为其中：

R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁；

T₁是O；且

R₁₁是-C(O)-Ar₄。

其他更优选化合物为其中R₃是-C(O)-H。

其他更优选合物为其中R₃是-CO-CH₂-T₁-R₁₁且R₁₁是-Ar₄。

更优选的，当R₃是-CO-CH₂-T₁-R₁₁且R₁₁是-Ar₄，T₁是O或S。

更优选的，当R₁是(e11)，(e12)，(y1)，(y2)，(z)，(e10-A)及(e10-B)时，R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)-O-R₉，及

-C(O)-NH-R₁₀。

另外，当R₁是(e11)，(e12)，(y1)，(y2)，(z)，(e10-A)及(e10-B)时，R₅选自下列包括：

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-C(O)-R₁₀，

-R₉，

-C(O)-C(O)-OR₁₀。及

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀)。

更优选的，R₅是R-C(O)-C(O)-OR₁₀。

另外，R₅是-C(O)-C(O)-OR₁₀。

最优选的当R₁是(e11)，(e12)，(y1)，(y2)，(z)，(e10-A)及(e10-B)，：

m是1：

T₂₁是-H或-CH₃；

R₅₁是C_1-6直链或支链烷基视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃环基是苯基，该环基视所需可被-Q₁所多重或单一取代；

各Q₁独立选自下列包括-NH₂，-Cl，-F，-Br，-OH，-R₉，-NH-R₅，其中R₅是-C(O)-R₁₀或-S(O)₂-R₉，-OR₅其中R₅是-C(O)-R₁₀，-OR₉，-N(R₉)(R₁₀)，及

限制条件为当-Ar₃是为Q₁基所取代时，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃所取代。

更优选的，于这些更优选化合物中，Ar₃环基选自下列包括苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，苯并呋喃基及吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁单或多取代；

具体实施方案G优选形式之化合物，为其中R₂₁是H且其他取代基如上文所定义。

具体实施方案G另外优选形式之化合物为其中R₂₁是CH₃且其他取代基如上文所定义。

本发明另外具体实施方案(H)之ICE抑制剂为式(V)：

其中：

R₁是

R₂₁是-CH₃；

且其它取代基与具体实施方案(G)中定义相同。

具体实施方案(I)另一型化合物(型1)为式(V)：

其中：

R₁是

各R₅是-C(O)C(O)-OR₁₀；

其它取代基与具体实施方案(G)中定义相同。

另外，具体实施方案I此型化合物(型2)为其中R₂₁是-CH₃者。

具体实施方案(J)另一型化合物(型1)为式(V)：

其中：

R₁是

其它取代基与具体实施方案(G)中定义相同。

限制条件为当：

m是1；

R₁是(e10)；

X₅是CH；

R₁₅是-OH；

R₂₁是-H；且

Y₂是O且R₃是-C(O)-H，则R₅不可为；

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃且Ar₃环基是苯基，未经-Q₁，4-(羧甲氧基)苯基，2-氟苯基，2-吡啶基，N-(4-甲基哌嗪基)甲基苯基，或

-C(O)-OR₉取代，其中R₉是-CH₂-Ar₃，且Ar₃环基是苯基，未被-Q₁取代；且当：

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃，且Ar₃环基是苯基；

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃，则Ar₃环基是苯基；

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃，Ar₃环基是4-(二甲氨基甲基)苯基，或

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃，且Ar₃环基是苯基，未被-Q₁所取代；且当

Y₂是O，R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，T₁是O且R₁₁是-C(O)-Ar₄，其中Ar₄环基是2，5-二氯苯基，则R₅不可为；

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃且Ar₃环基是苯基，不为-Q₁所取代；且当

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃且Ar₃环基是苯基；

其他取代基与上述具体实施方案(G)中所述相同。

具体实施方案J另一类型化合物(形2)，其中R₂₁是-CH₃。

具体实施方案J另一类型化合物(形3)，其中R₅是-C(O)-C(O)-OR₁₀。

具体实施方案J另一类型化合物(形4)，其中R₅是-C(O)-C(O)-OR₁₀，且R₂₁是-CH₃。

具体实施方案H，I及J优选化合物应用式(V)，其中R₃是-CO-Ar₂。

更优选的，当R₃是-CO-Ar₂，Y是O。

具体实施方案H，I及J优选化合物应用式(V)，其中R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁且R₁₁是-(CH₂)_1-3-Ar₄。

更优选的，当R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁且T₁是O，R₁₁是-(CH₂)_1-3-Ar₄。

具体实施方案H，I及J优选化合物应用式(V)，其中R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，T₁是O且R₁₁是-C(O)-Ar₄。

具体实施方案H，I及J优选化合物应用式(V)，其中R₃是-C(O)-H。

具体实施方案H，I及J优选化合物应用式(V)，其中R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，且R₁₁是-Ar₄。

更优选的，当R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁且R₁₁是-Ar₄，T₁是O或S。

更优选的具体实施方案H及J化合物(形1及形2)为其中R₅选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，及

-C(O)-NH-R₁₀，

另外，更优选的具体实施方案H及J化合物(形1及形2)为其中R₅选自下列包括：

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-C(O)-R₁₀，

-R₉，

-C(O)-C(O)-OR₁₀，及

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀)，

最优选的，R₅是-C(O)-C(O)-R₁₀，

另外，R₅是-C(O)-C(O)-OR₁₀，

具体实施方案H，I(型2)及J(型2及型4)的更优选化合物为其中：

m是1；

Y₂是O；

R₁₅是-OH或-OC_1-4直链或支链烷基视所需可被-Ar₃，-OH，-OR₉，-CO₂H取代，其中R₉是-C_1-4支链或直链烷基，其中Ar₃是吗啉基或苯基，其中苯基视所需可被Q₁所取代；

Ar₂是(hh)；

Y是O；且

各Ar₃环基独立选自下列包括苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，吡啶基，苯并呋喃基，及吲哚基，且该环状基视所需可被-Q₁单或多重取代；

各Ar₄环基独立选自下列包括苯基，四唑基，吡啶基，噁唑基，萘基，嘧啶基及噻吩基，且该环基视所需可被-Q₁单或多重取代；

其中各R₉及R₁₀独立地为-C_1-6直链或支链烷基视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃环基是苯基，且该环基视所需可被-Q₁单或多重取代；

更优选的具体实施方案I(型1)及J(型3)化合物为其中：

m是1；

R₂₁是-H或-CH₃；

R₅₁是C_1-6直链或支链烷基视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃环基是苯基，该环基视所需可被-Q₁多重或单取代；

各Ar₃环基独立选自下列包括苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，吡啶基，苯并呋喃基，或吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁单或多取代；

其中各R₉及R₁₀独立地为-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃环基是苯基，且该环基视所需可被-Q₁单或多取代；

限制条件为当-Ar₃为Q₁基所取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃基所取代。

优选的，于这些更优选化合物中，Ar₃环基选自下列包括：苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，苯并呋喃基，及吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代。

具体实施方案H及J(型1及1)之优选化合物为其中：

R₃是-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁；

T₁是O；且

R₁₁是-C(O)-Ar₄，其中Ar₄环基选自下列包括四唑基，吡啶基，噁唑基，嘧啶基，及噻吩基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代。

具体实施方案H，I及J优选化合物应用式(V)，其中R₃是-CO-CH₂-T₁-R₁₁，R₁₁是-Ar₄，其中Ar₄环基是吡啶基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代。

具体实施方案J(型1)之优选化合物为其中：

R₃是-C(O)-H，且

R₅是-C(O)-R₁₀，其中

R₁₀是Ar₃，其中Ar₃环基是苯基，视所需可被下列所单或多重取代：

-F，

-Cl，

-N(H)-R₅，其中-R₅是-H或-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃是苯基，

-N(R₉)(R₁₀)，其中R₉及R₁₀独立地为-C_1-4直链或支链烷基，或

-O-R₅，其中R₅是H或-C_1-4直链或支链烷基。

更优选的，Ar₃是苯基视所需在3-或5-位上为-C1或在4位上为-NH-R₅，-N(R₉)(R₁₀)或-O-R₅所单或多重取代。

具体实施方案J其他更优选化合物(型1)为其中：

R₃是-C(O)-H；

R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且Ar₃环基选自下列包括吲哚基，苯并咪唑基，噻吩基，及苯并[b]苯硫基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

具体实施方案J其他更优选化合物(型1)为其中：

R₃是-C(O)-H；

R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且Ar₃环基选自下列包括喹啉基及异喹啉基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

具体实施方案J其他更优选化合物(型1)为其中：

R₃是-C(O)-H；

R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且Ar₃环基是苯基，为

所取代。

具体实施方案(J)优选化合物包括下列，但不限于此：

另外具体实施方案(K)之ICE抑制剂为下式：

其中：

R₁是

或

C是一环选自下列包括：苯并，吡啶并，噻吩并，吡咯并，呋喃并，噻唑并，异噻唑并，噁唑并，异噁唑并，嘧啶并，咪唑并，环戊基及环己基；环视所需可被-Q₁所单或多重取代；

R₂是：

或

m是1或2；

各R₅独立选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-N(R₁₀)(R₁₀)，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-O-R₉，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-R₉，

-H，

-C(O)C(O)-OR₁₀，及

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀)；

X₅是CH或N；

Y₂是H₂或O；

R₆选自下列包括-H及-CH₃；

R₈选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-N(H)-R₁₀，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-OR₁₀，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-C(O)-CH₂N(R₁₀)(R₁₀)，

-C(O)-CH₂C(O)-O-R₉，

-C(O)-CH₂C(O)-R₉，

-H，及

-C(O)-C(O)-OR₁₀；

各R₉独立选自下列包括-Ar₃及-C_1-6直链或支链烷基视所需可被Ar₃所取代，其中-C_1-6烷基视所需不饱和；

各R₁₀独立选自下列包括-H，-Ar₃，-C_3-6环烷基，及-C_1-6直链或支链烷基视所需可被Ar₃所取代，其中-C_1-6烷基视所需不饱和；

各R₅₁独立选自下列包括R₉，-C(O)-R₉，-C(O)-N(H)-R₉，或各R₅₁一起形成饱和的4-8员碳环或含有-O-，-S-，或-NH-的杂环；

各R₂₁独立选自下列包括-H或-C_1-6直链或支链烷基；

各Ar₃是环基独立选自下列包括芳基，其含有6，10，12或14个碳原子及1至3个环，及芳族杂环基含有5至15个环原子及1至3个环，该杂环含有至少一个选自-O-，-S-，-SO-，SO₂，＝N-，及-NH-的杂原子，且该杂环基视所需含有一个或以上的双键，该杂环基视所需含一个或以上的芳香环，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

各Q₁独立选自下列包括：-NH₂，-CO₂H，-Cl，-F，-Br，-I，-NO₂，-CN，＝O，-OH，-全氟C_1-3烷基，R₅，-OR₅，-NHR₅，OR₉，-N(R₉)(R₁₀)，R₉，-C(O)-R₁₀，及

限制条件为当-Ar₃为Q₁基取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃基所取代。

此具体实施方案之优选化合物为其中：

m是1；

C是一环选自下列包括苯并，吡啶并，或噻吩并，环视所需可被卤素，-NH₂，-NH-R₅，-NH-R₉，-OR₁₀或-R₉所单或多重取代，其中R₉是直或分支的C_1-4烷基且R₁₀是H或直或分支的C_1-4烷基；

R₆是H；

R₁₃是H或C_1-4直链或支链烷基视所需可被Ar₃，-OH，-OR₉，或-CO₂H所取代，其中R₉是C_1-4支链或直链烷基；其中Ar₃是吗啉基或苯基，其中苯基视所需可被Q₁所取代；

R₂₁是-H或-CH₃；

优选的，于这些优选具体实施方案中，R₁是(w2)且其他取代基如上文所定义。

此优选具体实施方案之化合物包括下列，但不限于此：

和

更优选的，R₈选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-CH₂-OR₁₀，及

-C(O)-CH₂C-(O)-O-R₉，

最优选的，R₈是-C(O)-CH₂-OR₁₀且R₁₀是-H或-CH₃。

另外，于此优选具体实施方案中，R₁是(e10)且X₅是CH，且其他的取代基如上文所定义。

另外，于此优选具体实施方案中，R₁是(e10)且X₅是N，且其他取代基如上文所定义。

优选的，于具体实施方案(K)的上述任一化合物中，R₅是-C(O)-R₁₀或-C(O)-C(O)-R₁₀，且其他取代基如上文所定义。

更优选的，R₁₀是-Ar₃且其他取代基如上文所定义。

更优选的，于这些优选化合物中：

R₅是-C(O)-R₁₀且R₁₀是Ar₃，

其中Ar₃环基是苯基，视所需可被下列所单或多重取代：

-R₉，其中R₉是C_1-4直链或支链烷基；

-F，

-Cl，

-O-R₅，其中R₅是H或-C_1-4直链或支链烷基。

此优选具体实施方案之优选化合物包括下列，但并不限于此：

最优选的，Ar₃是苯基，在3-或5-位上为-C1或在4-位上为-NH-R₅，-N(R₉)(R₁₀)或-O-R₅所取代。

此最优选具体实施方案的优选化合物为下列，但不限于此：

此最佳具体实施方案的其他优选化合物包括下列，但亦不限于此：

和

另外，Ar₃是苯基，可在3-或5-位上为R₉所单或多重取代，其中R₉是C_1-4直链或支链烷基；及在4-位上为-O-R₅所单或多重取代。

此最佳具体实施方案的其他优选化合物包括下列，但并不限于此：

此最优选具体实施方案的其他优选化合物包括下列：但并不限于此：

和

另外，于此优选具体实施方案中，R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且Ar₃环基选自下列包括吲哚基，苯并咪唑基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基及苯并[b]苯硫基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代。

最优选的，Ar₃环基是异喹啉基。

此最优选具体实施方案之优选化合物包括下列，但亦不限于此：

和

此最优选具体实施方案的其他优选化合物包括下列，但并不限于此：

另外，于此更优选具体实施方案中，R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且Ar₃环基是苯基，为

所取代。

此更优选具体实施方案的优选化合物包括下列，但并不限于此：

和

具体实施方案(K)的其他化合物包括下列，但亦不限于此：

本发明ICE抑制剂的另一具体实施方案(L)为下式：

其中：

R₁选自下列包括下式：

R₃选自下列包括：

-CN，

-C(O)-H，

-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，

-C(O)-CH₂-F，

-C＝N-O-R₉，及

-CO-Ar₂；

各T₁独立选自下列包括-O-，-S-，-S(O)-，及-S(O)₂-；

各R₁₁独立选自下列包括：

-Ar₄，

-(CH₂)_1-3-Ar₄，

-H，及

-C(O)-Ar₄；

R₁₅选自下列包括-OH，OAr₃，-N(H)-OH，及-OC_1-6其中OC_1-6是直链或支链烷基视所需可被Ar₃，-CONH₂，-OR₅，-OH，-OR₉，或CO₂H所取代；

Ar₂独立选自下列，其中任一环可视所需可被-Q₁或苯基所单或多重取代，苯基视所需可被Q₁所取代；

和

其中各Y独立选自下列包括O及S；

各Ar₃是环基，独立选自下列包括芳基，其含有6，10，12，或14个碳原子及1至3个环，及芳杂环基，含有5至15个环原子及1至3个环，该杂环基含有至少一个选自-O-，-S-，-SO-，SO₂，＝N-及-NH-，-N(R₅)-，及-N(R₉)之杂原子基，该杂环基视所需含有一个或以上的双键，该杂环基视所需含有一个或以上的芳香环，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

各Ar₄是环基，独立选自下列包括芳基其含有6，10，12或14个碳原子及1至3个环，及杂环基含有5至15个环原子及1至3个环，该杂环基含有至少一个选自-O-，-S-，-SO-，SO₂，＝N-，-NH-，-N(R₅)-，及-N(R₉)-之杂原子基，该杂环基视所需含有一个或以上的双键，该杂环基视所需含有一个或以上的芳香环，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

其它取代基与上述具体实施方案(K)中所述相同。

优选的，

m是1；

C是一环选自下列包括苯并，吡啶并，及噻吩并，环视所需可被卤素，-NH₂，-NH-R₅，或-NH-R₉，-OR₁₀或-R₉单或多取代，其中R₉是直或分支的C_1-4烷基，且R₁₀是-H或直或分支的-C_1-4烷基；

T₁是O或S；

R₆是H；

R₁₁是选自下列包括Ar₄，-(CH₂)_1-3-Ar₄，及-C(O)-Ar₄；

Ar₂是(hh)；

Y是O；

各Ar₃环基独立选自下列包括苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，噻唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，噻二唑基，苯并三唑基，苯并[b]苯硫基，苯并呋喃基，及吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

各Ar₄环基独立选自下列包括苯基，四唑基，萘基，吡啶基，噁唑基，嘧啶基，或吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

各Q₁独立选自下列包括-NH₂，-Cl，-F，-Br，-OH，-R₉，-NH-R₅，其中R₅是-C(O)-R₁₀或-S(O)₂-R₉，-OR₅，其中R₅是-C(O)-R₁₀，-OR₉，-NHR₉，及

此优选具体实施方案的优选化合物包括下列，但并不限于此：

和

更优选的，R₃是-C(O)-Ar₂且其他取代基如上文所述。

另外，R₃是-C(O)CH₂-T₁-R₁₁：

另外，R₃是-C(O)-H。

优选的，于具体实施方案(L)上述任一化合物中，R₈选自下列包括：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-CH₂-OR₁₀，及

-C(O)-CH₂C(O)-R₉，

更优选的，R₈是-C(O)-CH₂-OR₁₀且R₁₀是-H或-CH₃。

另外，本发明具体实施方案(L)之ICE抑制剂为下式：

其中：

m是1；

R₁是：

Y₂是H₂或O；

各T₁独立选自下列包括-O-或-S-；

R₂₁是-H或-CH₃；

Ar₂是：

其中Y是O；

各Ar₃是环基独立选自下列包括苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]苯硫基，吡啶基苯并呋喃基，及吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁单或多重取代；

各Ar₄是环基独立选自下列包括：苯基，四唑基，吡啶基，噁唑基，萘基，嘧啶基，及噻吩基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代；

各Q₁独立选自下列包括：-NH₂，-Cl，-F，-Br，-OH，-R₉，-NH-R₅其中R₅是-C(O)-R₁₀或-S(O)₂-R₉，-OR₅其中R₅是-C(O)-R₁₀，-OR₉，-NHR₉，及

限制条件为当-Ar³为Q₁取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃基所取代；

其它取代基与上述具体实施方案(L)中定义相同；

限制条件为当：

m是1；

R₁₅是-OH；

R₂₁是-H；且

Y₂是O且R₃是-C(O)-H，则R₅不可为：

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃且Ar₃环基是苯基，未被-Q₁，4-(羧甲氧基)苯基，2-氟苯基，2-吡啶基，N-(4-甲基哌嗪基)甲基苯基所取代，或

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃，Ar₃环基是苯基，未被-Q₁所取代；且当：

-H；

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃且Ar₃环基是4-(二甲氨基甲基)苯基，苯基，4-(羧甲硫基)苯基，4-(羧乙硫基)苯基，4-(羧乙基)苯基，4-(羧丙基)苯基，2-氟苯基，2-吡啶基，N-(4-甲基六氢吡嗪基)甲基苯基，或

-C(O)-OR₉，其中R₉是异丁基或-CH₂-Ar₃且Ar₃基是苯基；

且当R₁₁是Ar₄，其中Ar₄环基是5-(1-(2-吡啶基-)-3-三氟甲基)吡唑基)，则R₅不可为；

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃且Ar³环基是4-(二甲氨基甲基)苯基，或

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃，且Ar₃环基是苯基，不为-Q₁取代；且当；

-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃且Ar₃环基是4-(二甲氨基甲基)苯基，4-(N-吗啉代甲基)苯基，4-(N-甲基六氢吡嗪基)甲基)苯基，4-(N-(2-甲基)咪唑基甲基)苯基，5-苯并咪唑基，5-苯并三唑基，N-羰乙氧基-5-苯并三唑基，N-乙酯基-5-苯并咪唑基，或

-C(O)-OR₉，其中R₉是-CH₂-Ar₃且Ar₃环基是苯基。

优选的，于具体实施方案(L)上述任一化合物中，R₃是-C(O)-H，且R₅是-C(O)-R₁₀或-C(O)-C(O)-R₁₀，且其他取代基如上文所定义。

更优选的R₁₀是-Ar₃，且其他取代基如上文所定义。

更优选的于这些更优选化合物中：

R₅是-C(O)-R₁₀且R₁₀是Ar₃，其中Ar₃环基是苯基，视所需可被下列所单或多重取代：

-R₉，其中R₉是C_1-4直链或支链烷基；

-F，

-C1，

-N(H)-R₅，其中-R₅是-H或-C(O)-R₁₀，

其中R₁₀是-C_1-6直链或支链烷基，且视所需可被Ar₃所取代，其中Ar₃是苯基，

-O-R₅，其中R₅是H或-C_1-4直链或支链烷基。

此优选具体实施方案的优选化合物包括下列，但不限于此：

和

最优选的，Ar₃是苯基在3-或5-位置上为-C1及在4-位置上为-NH-R₅，-N(R₉)(R₁₀)，或-O-R₅所单或多重取代。

此最优选具体实施方案的优选化合物包括下列，但不限于此：

和

此最优选具体实施方案的其他优选化合物包括下列，但不限于此：

和

另外，Ar₃是苯基，在3-或5-位置上为-R₉所单或多取代，其中R₉是C_1-4直链或支链烷基；及在4-位置上为-O-R₅所单或多取代。

此最优选具体实施方案的优选化合物包括下列，但并不限于此：

和

此最优选具体实施方案的另外优选化合物包括下列，但亦不限于此：

另外，于此更优选具体实施方案中：

R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且Ar₃环基选自下列包括吲哚基，苯并咪唑基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基及苯并[b]苯硫基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多取代。

和

最优选的，Ar₃环基是异喹啉基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多重取代。

和

此最优选具体实施方案的另外优选的化合物包括下列，但并不限于此：

另外，于此更优选具体实施方案中，R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-Ar₃且Ar₃环基是苯基，为所取代。

此更优选具体实施方案的优选化合物包括下列但不限于此：

此更优选具体实施方案的优选化合物包括下列，但不限于此：

具体实施方案(L)其他化合物包括下列但不限于此：

具体实施方案(K)其他化合物包括下列但不限于此：

具体实施方案(L)其他化合物包括下列但不限于此：

；和

具体实施方案(K)及(L)最优选化合物为其中Ar₃环基是异喹啉基者。

本发明化合物述于共同待审的美国专利申请系列号No.08/575,641及08/598,332中，其公开结合在本说明书作为参考文献。

本发明化合物具有小于或等于约700道尔顿之分子量，且更优选在约400及600道尔顿之间。这些优选化合物可为病人口服后之血流十分容易地吸收。此口服利用率使此化合物为拮抗IL-1-，细胞凋亡-，IGIF-或IFN-γ调介的疾病口服可投予之治疗及预防疗法中之极佳作用物。应了解此发明化合物可以各种平衡形式存在，依据的条件包括：溶剂的选用，pH，本领域技术人员已知的其他。这些化合物所有的此种形式均在本发明中表达。特别地，本发明许多化合物，尤其是在R₃中含有醛或酮基及在T上含有羧酸基者，可呈半-缩酮(或半-缩醛)或水合形式。如，具体实施方案(A)化合物可呈下示之形式：

水合型半-缩酮或

半-缩醛型

依据溶剂之选用及其他本领域技术人员已知之状况，本发明化合物也可呈酰氧基缩酮，酰氧基缩醛，缩酮或缩醛形式：

酰氧基缩酮或缩酮或缩醛形式

酰氧基缩醛

此外，应了解本发明化合物的平衡形式可包括互变异构型。这些化合物的所有此种形式均自由地纳入本发明中。

应了解本发明化合物可由适合的官能基修饰以加强选择性生物学特性。此种变化为本领域中已知的，且包括可增加至特定生物系统之生物穿透性(如血液，淋巴系统，中枢神经系统)，增加口服利用率，增加溶解度以便以由注射方式投药，改变代谢及改变排泄速度。此外，化合物可变化成前药形式，如此欲求的化合物由于前药代谢作用或其他生物过程的结果可在病人体内生成。此种前药形式在体外分析法中通常少有或无活性。前药形式的某些实例包括化合物之缩酮，缩醛，肟，亚胺，及腙形式，其中含有酮或醛基，尤其是其发生在本发明化合物之R₃基时。前药形式的其他实例包括半-缩酮，半-缩醛，酰氧基缩酮，酰氧基缩醛，缩酮及缩醛形式，其述于EQ1及EQ2中。

ICE及TX裂解及由此活化前-IGIF

ICE蛋白酶先前之鉴定是经由其于体外及体内处理无活性之-IL-1β成为成熟的具活性IL-1β，一种前-致炎分子，之能力为基础。在此我们示出，ICE及其密切的同系物TX(Caspase-4，C.Faucheu等，EMBO，14，p.1914(1995))可蛋白水解地裂解无活性之前-IGIF。此处理修饰步骤需将前-IGIF转化成其具活性的成熟形式，IGIF。由ICE及可能的TX解离前-IGIF也有助于将IGIF运送出细胞。

我们首先使用质粒转染至Cos细胞之瞬时共表达来决定IC/CED-3白酶族中是否有任何已知成员可在培养细胞中将前-IGIF处理成为IGIF(实施例23)(图1A)。

图1A说明ICE解离Cos细胞中之pro-IGIF，该细胞以在活性ICE存在下可表达pro-IGIF之质粒所共转染。Cos细胞以表达质粒转染，此质粒或是单独的pro-IGIF(第2列)或组合所指示之质粒，其编码蛋白酶ICE/CED-3族之野生型或失活之突变型(第3-12列)。制备溶胞产物并以抗-IGIF抗血清行免疫印染而分析IGIF蛋白质之存在。1列含有来自空白转染细胞之溶胞产物。

pro-IGIF与ICE或TX之共同表达会造成pro-IGIF解离生成多肽，其大小和自然生成的18-kDa成熟IGIF相似。此处理修饰事件可为单一点突变所阻断，此点突变系改变催化之半胱氨酸残基，且因此使ICE及TX失去活性(Y.Gu等， EMBO，14，P.1923(1995))。

与CPP32(Caspase-3)，一种涉及于程序性细胞死亡之蛋白酶(T.Fernandes-Alnemri等，《生物的化学杂志》 J.Biol.Chem.，269，p.30761(1994)；D.W.Nicholson等，《自然》 Nature，376，p.37(19951)之共表达，可造成pro-IGIF解离生成较小的多肽，而与CMH-1(Caspase-7)，一种与CPP32极相似之同系物(J.A.Lippke等， J.Biol.Chem.，271，p.1825(1996))共表达时，则无法解离pro-IGIF至任何显著程度。因此，ICE及TX似乎可将pro-IGIF解离成大小类似自然生成的18 kDa IGIF之多肽。

接下来我们检查这些半胱氨酸蛋白酶于体外解离pro-IGIF之能力，本说明书中使用经纯化且重组之加有(His)₆之pro-IGIF为底物(实施例23)。

图1B示出pro-IGIF于体外为ICE所解离。经纯化且重组的加有(His)₆之pro-IGIF(2微克)与所示之半胱氨酸蛋白酶在ICE或CPP32抑制剂有或无下培育，如实施例23所述。解离产物以SDS-PAGE及考马斯蓝染色分析。

ICE可解离24 kDa之pro-IGIF成为二个约18kDa及6kDa之多肽。ICE解离产物系列N-端氨基酸定序显示，18kDa多肽含有和自然生成之IGIF相同的N-末端氨基酸残基(Asn-Phe-GIy-Arg-Leu)。此显示ICE可在推想之处理修饰位置上(Asp35-Asn36)解离pro-IGIF(H.Okamura等，《感染与免疫》 Infection and Immunity，63，p.3966(1995)；H.Dkamura等，《自然》 Nature，378，p.88(1995))。CPP32解离产物之N-末端氨基酸定序显示，CPP32于Asp69-Ile70处解离pro-IGIF。

ICE对pro-IGIF之解离具有高度特异性，具有1.4×10⁷M^-1s^-1(K_M＝0.6±0.1μM；K_cat＝8.6±0.3s^-1)之催化效率(K_cat/K_M)，且可为特异的ICE抑制剂(Ac-Tyr-Val-Ala-Asp-醛)及Cbz-Val-Ala-Asp-[(2，6-二氯苯甲酰基)氧基]甲基酮所抑制，(N.A.Thornberry等，《自然》 Nature，356 p.768(1992)；R.E.Dolle等，《药物化学杂志》 J.Med.Chem.，37，p.563(1994))。

图1C证明于体外ICE之解离活化pro-IGIF。未解离之pro-IGIF，ICE-或CPP32-解离之pro-IGIF产物，或重组体成熟IGIF(rIGIF)各加至A.E7细胞培养基中至12纳克/毫升或120纳克/毫升之终浓度(见，实施例23)。18小时后，培养基中之γ-IFN以ELISA定量。虽然未解离的pro-IGIF无可测及的γ-IFN诱导活性，ICE-解离的pro-IGIF在诱导Th1细胞产生γ-IFN上仍具活性。

和ICE一样的，ICE之同系物TX也可将pro-IGIF解离成类似大小之多肽。然而，其催化效力较ICE少了二倍左右。

与上述Cos细胞实验之观察一致，CPP32可在不同位置上(Asp69-Ile70)解离pro-IGIF，且生成的多肽少有γ-IFN诱导活性(图1C)。CHM-1及粒酶B各自无法解离pro-IGIF至任何显著程度。

一起地这些结果证明，于Cos细胞及于体外，ICE及TX可在推想的成熟位置上处理修饰无活性的pro-IGIF，生成具生物活性之IGIF分子。Pro-IGIF为ICE之处理修饰有助其外用

IGIF于体内为活化之肝巨噬细胞及巨噬细胞所产生，且一旦为内毒素刺激可运送出细胞(H.Okamura等，《感染与免疫》 Infection and Immunity，63，p.3966(1995)；H.Okamura等，《自然》 Nature，378，p.88(1995)。我们使用Cos细胞共表达系统(实施例23)来检查pro-IGIF于细胞外为ICE解离是否有助于成熟IGIF运送出细胞。此如同pro-IL-1β一例，其可为ICE解离成具活性之IL-1β(N.A.Thornberry等，《自然》 Nature，356，p.768(1992))。

于图2A中，Cos细胞以pro-IGIF单独的表达质粒(第2及6列)或组合编码野生型之表达质粒(3及7列)或无活性之突变ICE(4及8列)转染，并代谢地标记以³⁵S-甲硫氨酸(见实施例24)。溶胞产物(左)及调适培养基(右)以抗-IGIF抗血清免疫沉淀。免疫沉淀的蛋白质以SDS-PAGE及荧光计分析。(图2A)。

于pro-IGIF及ICE共表达之Cos细胞调适培养基中可测及大小和成熟IGIF相当之18kDa多肽，而共表达pro-IGIF及无活性ICE突变株(ICE-C285S)之Cos细胞或单独的pro-IGIF(-)则运送出仅极低水平之pro-IGIF及无可测及之成熟IGIF。我们估计约有10％成熟IGIF可自共转染的细胞中运送出来，而大于99％的pro-IGIF则留在细胞内。

我们也侦测溶胞产物及上述转染细胞之调适培养基中，γ-IFN诱导活性是否存在(见实施例24)。可于溶胞产物及共表达pro-IGIF及ICE之Cos细胞调适培养基中均测及γ-IFN诱导活性，但仅表达pro-IGIF或单独ICE之细胞则否(图2B)。

这些结果显示，ICE解离pro-IGIF有助于成熟且具活性之IGIF自细胞之运输。

Pro-IGIF是ICE体内之生理底物

为了研究生理条件下ICE于IGIF蛋白水解活化作用及运输中之角色，我们检查pro-IGIF之处理修饰及成熟IGIF自脂多糖(LPS)-活化之肝巨噬细胞中之运送，后者自疮疱丙酸杆菌Propiobacterium acnes-诱生之野生型及ICE缺陷(ICE-/-)小鼠中回收而得(实施例25)。

如图3A所示，来自ICE-/-小鼠之肝巨噬细胞于IGIF运送上有所缺陷。野生型及ICE-/-小鼠之肝巨噬细胞溶胞产物，经ELISA决定组合含有相似量之IGIF。然而，IGIF仅在野生型之调适培养基中测及，而在ICE-/-细胞中则否。因此ICE-缺陷的(ICE-/-)小鼠可合成pro-IGIF，但无法如细胞外pro-或成熟IGIF般运送之。

为决定ICE-缺失(ICE-/-)的小鼠是否可处理细胞内pro-IGIF但无法运送IGIF，于是野生型及ICE-/-小鼠之肝巨噬细胞代谢地标记以35S-甲硫氨酸，并如实施例25所述的在溶胞产物及调适培养基上进行IGIF免疫沉淀实验。这些实验证明，未经处理的pro-IGIF存在于野生型及ICE-/-肝巨噬细胞中。然而，18-kDa成熟的IGIF仅存于野生型之调适培养基中而非ICE-/-肝巨噬细胞(图3B)。此显示将处理过的IGIF运送出细胞应有活性ICE。

此外，来自野生型而非ICE-/-肝巨噬细胞之调适培养基含有IFN-γ诱导活性，此并不归因于IL-12的作用因为其对中和抗-IL-12抗体是不敏感的。ICE-/-肝巨噬细胞调适培养基中IGIF之缺少和于Cos细胞中所见的一致，在此ICE处理修饰pro-IGIF是活性IGIF运送所必要的。

图3C及3D示出，于体内ICE-/-小鼠之IGIF及IFN-γ血清水平分别有所减低。以经热灭活之疮疱丙酸杆菌备妥之野生型(ICE+/+)及ICE-/-小鼠，以LPS-攻击之(实施例26)，于LPS后3小时再以ELISA侦测所攻击小鼠血清中IGIF(图3C)及γ-IFN(图3D)之水平(实施例25)。

以疮疱丙酸杆菌及LPS刺激之ICE-/-小鼠，其血清中含有减量的IGIF(图3C)并在抗-IL-12抗体存在下无可测及之IFN-γ诱导活性。IGIF减少的血清水平似乎应为ICE-/-小鼠血清中IFN-γ显著较低的水平负责(图3D)，因为我们观察到在这些条件下，ICE-/-小鼠产生IL-12并无显著的差异。与此阐述一致的是以下发现，即来自野生型及ICE-/-小鼠之非粘附性脾细胞，当以重组活性IGIF于体外刺激时可产生类似量之IFN-γ。因此IFN-γ受损的产力并非ICE-/-小鼠T细胞中任何明显的缺陷所致的。

总而言之这些结果于体外及体内确立了ICE于处理修饰IGIF前体及于活性IGIF利用方面的一个关键性角色。

为了更详细检查IFN-γ血清水平及ICE体内活性间之相互关系，于以LPS-攻击野生型及ICE-缺失小鼠后进行时间行程(实施例26)(图4)。

图4示出于野生型小鼠中血清IFN-γ随时间经过之增加，于LPS-攻击后9-18小时发生≥17纳克/毫升之持续水平。如上述实验所预测的，于ICE-/-小鼠中γ-IFN血清水平显著较低，在相同时期时可达到2纳克/毫升之高点，此约为在野生型小鼠中所见的15％(图4)。

也观察动物关于脓毒症之临床症状，及攻击以30毫克/千克或100毫克/千克LPS(仅ICE-/-)后于野生型及ICE-/-小鼠每4小时间隔侦测体温变化。示于图4之结果显示野生型小鼠可在LPS-攻击12小时内经验到体温之显著下降(由36℃至26℃)。脓毒症之临床症状十分明显，且所有动物在24-48小时内死亡。

相反的，施以30毫克/千克LPS之ICE-/-小鼠经验到体温仅3°-4℃之下降，及极少的痛苦症状且并无致死者。施以100毫克/千克LPS之ICE-/-小鼠经验到临床症状，体温下降，死亡率和30毫克/千克LPS剂量下之野生型小鼠类似。

ICE抑制剂Ac-YVAD-CHO是IL-1β及IFN-γ产生之等强度抑制剂

由于具生物活性之IGIF其处理修饰及分泌均由ICE所调介，我们于外周血液单核细胞(PBMC)分析法中比较ICE-可逆的抑制剂(Ac-YVAD-CHO)于IL-1β及IFN-γ产生上之活性(实施例27)。

图5之结果显示Ac-YVAD-CHO ICE抑制剂在降低人类PBMCs中IL-1β及IFN-γ产生之能力具类似之强度，各为2.5μM之IC₅₀。以野生型小鼠脾细胞研究可得相似的结果。

这些发现提供额外的证据，即pro-IGIF为ICE生理上之底物，并建议ICE抑制剂将是控制IGIF及IFN-γ生理水平的有用的工具。

综合而言，我们已发现ICE可于体内及体外控制IGIF及IFN-γ水平，且ICE抑制剂可降低人类细胞中之IGIF及IFN-γ水平。这些结果已述于共同待审的美国专利申请No.08/712,878中，此揭示已列为本案之参考。组合物及方法

本发明的药学组合物及方法可用于控制体内之IL-1，IGIF及IFN-γ水平。本发明的方法及组合物因此可用于治疗或减少IL-1，IGIF-及IFN-γ所调介状况之进展，影响之严重度。

本发明化合物为ICE有效的配体。因此，这些化合物可对准及抑制于IL-1-，细胞凋亡-，IGIF-及IFN-γ-调介疾病中之事件，且因此于炎性疾病，自身免疫疾病，破坏性骨骼，增殖紊乱，感染性疾病，及退化性疫病中蛋白质之最终活性。例如，本发明化合物经由抑制ICE而可抑制由前躯体IL-1β转化成为成熟的IL-1β。由于ICE为产生成熟IL-1所必要的，此酶之抑制可有效地阻断IL-1-调介之生理作用及症状之启始，如炎症，此系经由抑制成熟IL-1产生而成。因此由抑制IL-1β前躯体活性，本发明化合物可有效地作为IL-1抑制剂。

类似地，本发明化合物可抑制前躯体IGIF转化成为成熟的IGIF。因此，经由抑制IGIF的产生，本发明化合物可有效地作为IFN-γ产生的抑制剂。

因此，本发明的一个具体实施方案是提出于个体中降低IGIF产生的方法，此方法包括对个体投予药学组合物，其中含有治疗有效剂量之ICE抑制剂及药学允许之载体。

本发明另一具体实施方案提出于个体中降低IFN-γ产生之方法，本说明书中包括对个体投予药学组合物，其中含有治疗有效剂量之ICE抑制剂及药学允许之载体。

于另一具体实施方案中，本发明方法包括对个体投予药学组合物，其中含有ICE-相关蛋白酶之抑制剂，后者可将pro-IGIF解离生成具活性的IGIF，及药学允许之载剂。此种ICE-相关之蛋白酶之一是TX，如上述。本发明因此提出方法及药学组合物，即经由投予TX抑制剂来控制IGIF及IFN-γ之水平。

也可见其他可将pro-IGIF处理修饰成具活性IGIF形式的其他ICE-相关之蛋白酶。因此可检视到这些酶之抑制剂可由本领域技术人员所鉴知，且也属于本发明范围之内。

本发明化合物可以传统方式来应用，以治疗由IL-1，细胞凋亡，IGIF或IFN-γ所调介之疾病。此种治疗方法，剂量水平及需求可由本领域技术人员自可运用之方法及技术中加以选择。如，本发明化合物可组合以药学允许之佐剂，以药学允许方式及可有效减轻疾病严重度之剂量投予至受IL-1-，细胞凋亡-，IGIF-或IFN-γ-调介疾病之苦之患者身上。

另外，本发明化合物可运用于组合物及方法中，以长期治疗或保护个体拮抗IL-1-，细胞凋亡-，IGIF-或IFN-γ-调介之疾病。化合物可单独地或加上其他本发明化合物一起应用于此组合物中，方式符合ICE抑制剂于药学组合物中之传统利用性。例如，本发明化合物可与传统应用于疫苗之药学允许之佐剂组合，并以预防上有效剂量来投予以长期保护个体拮抗IL-1-，细胞凋亡-，IGIF-或-IFN-γ-调介之疾病。

本发明化合物也可与其他ICE抑制剂共同投予，以增加拮抗各种IL-1-，细胞凋亡-，IGIF-或IFN-γ-调介疾病之治疗或预防作用。

此外，本发明化合物可组合传统的抗炎剂或基质金属蛋白酶抑制剂，脂氧酶抑制剂及IL-1β以外的细胞因子之拮抗剂。

本发明化合物也可与免疫调控剂(如bropirimine，抗-人类α干扰素抗体，IL-2，GM-CSF，甲硫氨酸脑啡肽，α干扰素，二硫氨基甲酸二乙酯，肿瘤坏死因子，naltrexone及rEPO)或与前列腺素组合投药，以预防或对抗IL-1调介之疾病症状，如炎症。

当本发明化合物与其他作用物组合治疗投予时，其可依序或同时投予至患者。另外，依据本发明之药学或预防性组合物包括本发明ICE抑制剂与其他治疗或预防作用物之组合。

本发明的药学组合物包括本发明任一化合物，及其药学允许的盐，加上任何药学允许之载剂，佐剂或溶媒。可用于本发明药学组合物中之药学允许之载剂，佐剂及溶媒包括下列但不限于此：离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，自我乳化之药物释放系统(SEDDS)如(abcd)α-生育醇聚乙二醇1000琥珀酸酯，或其他类似的聚合释放基质，血清蛋白质，如人类血清白蛋白，缓冲物质如磷酸盐，甘氨酸，山梨酸，山梨酸钾，饱和植物脂肪酸之部分甘油酯混合物，水，盐或电解质，如硫酸鱼精蛋白，磷酸氢二钠，磷酸氢钾，氯化氯，锌盐，胶态氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，以纤维素为底的物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钠，聚丙烯酸盐，蜡，聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段共聚物，聚乙二醇及羊毛脂。环糊精如α-，β-及γ-环糊精，或化学修饰之衍生物如羟烷基环糊精，包括2-及3-羟丙基-β-环糊精，或其他化学修饰之衍生物也可有益地用来加强本发明化合物之释放。

本发明之药学组合物可口服，经肠道外，经吸入喷雾，局部，经直肠，经鼻，颊，阴道或经植入之贮存所来投药。我们优选口服。本发明的药学组合物可含有任何传统上无毒性之药学允许的载剂，佐剂或溶媒。在某些例子中，调和物之pH值可以药学允许之酸，碱或缓冲物质来调整以加强所调和化合物或其释放形式之稳定性。本说明书中之肠外方式包括皮下，角质内，静脉内，肌内，动脉内，滑膜内，胸骨内，鞘内，伤口内，及颅骨内注射或输液技术。

药学组合物可呈无菌可注射制剂形式，如呈无菌可注射之水性或油性悬液。此悬液可依本领域中已知之技术来调和，利用适合的分散剂或沾湿剂(如Tween 80)及助悬剂。无菌可注射制剂也可以是于无毒性经肠外-可接受之稀释剂或溶剂中之无菌可注射溶液剂或悬液剂，如呈于1，3-丁二醇中之溶液剂。在可接受之溶媒及溶剂中，可应用的有甘露醇，水，林格氏溶液及等张的氯化钠溶液。此外，无菌之固定油类传统上可充作溶剂或助悬介质。基于此目的，任何品牌的固定油均可应用，包括合成的单或二甘油酯。脂肪酸如油酸及其甘油酯衍生物可用于制备注射剂，就如同天然的药学允许之油类，如橄榄油或蓖麻子油，尤其呈其聚氧乙基化形式。这些油溶液或悬液也可含有长链醇稀释剂或分散剂，如 Ph. Helv《瑞士药典》(Pharmacopeia Helvetica)公开者，或类似的醇。

本发明的药学组合物可以任何口服可接受之剂型口服之，包括下列但不限于此：胶囊剂，片剂，及水性悬液剂及溶液剂。于口服片剂时，常用的载剂包括乳糖及玉米淀粉。通常也可加入润滑剂，如硬脂酸镁。于以胶囊形式口服时，有用的稀释剂包括乳糖及干燥玉米淀粉。当水性悬液欲口服时，活性组份可与乳化剂及助悬剂组合。若欲求时可加入某些甜味剂及/或芳香剂及/或著色剂。

本发明的药学组合物也可呈栓剂形式供直肠投药。这些组合物之制备可由本发明化合物混合以适合的无刺激性赋形剂，其在室温下为固体但在肛温下为液体，因此可在肛门处熔化释出活性组份。此种物质包括有可可豆脂，蜂蜡及聚乙二醇，但亦不限于此。

本发明药学组合物之局部投药，于欲求之治疗涉及以局部施用易接近之区域或器官时尤其有用。欲局部应用至皮肤时，药学组合物应可以含有活性组份且悬浮或溶于载剂中之适合的油膏调和之。本发明化合物局部投药的载剂包括有矿油，液体石蜡，白石蜡，丙二醇，聚氧乙烯聚氧丙烯化合物，乳化蜡及水，但亦不限于此。另外，药学组合物可以适合的洗剂或乳剂调和，其中含有活性化合物并悬浮或溶于载剂中。适合的载剂包括矿油，山梨聚糖单硬脂酸酯，聚山梨醇60，鲸基酯蜡，鲸芳基醇，2-辛基十二烷醇，苄醇及水。本发明的药学组合物也可局部施用至较低之肠道，经由肛门栓剂调和物或适合的灌肠剂调和物。局部投药之穿皮贴剂也包括于本发明中。

本发明的药学组合物可经由鼻气雾剂或吸入方式投药。此种组合物依药学调和物本领域中熟知之技术制备，且可制备成于食盐水中之溶液剂，应用苄醇或其他适合的保藏剂，吸收促进剂以加强生物利用度，碳氧化物及/或技艺中已知之其他助溶或分散剂。

活性组份化合物介于约0.01及约100毫克/千克体重每天，优选介于约1及50毫克/千克体重每天之剂量水平，可用于预防及治疗IL-1-，细胞凋亡，IGIF及IFN-γ-调介之疾病，包括炎性疾病，自身免疫疾病，破坏性骨骼紊乱，增殖紊乱，感染性疾病，退化性疾病，坏死性疾病，骨关节炎，急性胰腺炎，慢性胰腺炎，哮喘，成人呼吸窘迫综合症，肾小球肾炎，类风湿关节炎，全身性红斑狼疮，硬皮病，慢性甲状腺炎，葛雷夫氏病，自身免疫性胃炎，胰岛素依赖型糖尿病(I型)，自身免疫性溶血性贫血，自身免疫性嗜中性粒细胞减少症，血小板减少症，慢性活动性肝炎，重症肌无力，炎性肠疾，局限性回肠炎病，牛皮癣，移植物对宿主疾病，骨质疏松症，多发性骨髓瘤-相关之骨骼紊乱，急性骨髓性白血症，慢性骨髓性白血病，转移性黑色素瘤，卡波济氏肉瘤，多发性骨髓瘤脓毒症，败血性休克，志贺氏杆菌病，阿滋海尔默氏病，帕金森氏病，脑缺血，心肌缺血，脊髓性肌肉萎缩症，多发性硬化病，AIDS-相关之脑炎，HIV-相关之脑炎，老化，秃头，及由于中风造成的神经性伤害。典型而言，本发明药学组合物可以每天给药约1至5次，或是呈连续输注方式。此种投药可充作慢性或急性治疗。可与载剂混合使用以产生单一剂量形式的活性组份量受治疗之宿主及特殊投药模式而言。典型制剂通常含有由约5％至约95％的活性化合物。优选的，此制剂含有由约20％至约80％的活性化合物。

一旦病患的状况有改善，若必要时可投予本发明化合物，组合物或组合之维持剂量。接下来，投药之剂量或频率均可减少，与症状呈函数关系，至保持改善状况之水平，而当症状舒缓至欲求水平时可停止治疗。然而，病人可能需要长期间歇之治疗，以防任何再复发或疾病征状。

至于本领域技术人员应了解，可能需要较所示低或高些之剂量。任何特殊病人之特异剂量及治疗方法均依各种因素而定，包括所应用之特定化合物活性，病人的年龄，体重，一般健康状况，性别，饮食，投药时间，排泄率，药物配合禁忌，疾病之严重性及过程，及病人对疾病之倾向及治疗医师之判断。

可以本发明化合物所治疗或预防的IL-1调介疾病包括下列，但并不限于此：炎性疾病，自身免疫疾病，破坏性骨骼疾病，增殖性紊乱，感染性疾病，及退化性疾病。可以本发明化合物治疗或预防之细胞凋亡-调介之疾病包括退化性疾病。

可治疗或预防之炎性疾病包括下列，但并不限于此：骨关节炎，急性胰腺炎，慢性胰腺炎，哮喘，及成人呼吸窘迫综合症。优选炎性疾病是骨关节炎或急性胰腺炎。

可治疗或预防之自身免疫疾病包括下列，但并不限于此：肾小球肾炎，类风湿性关节炎，全身性红斑狼疮，硬皮症，慢性甲状腺炎，葛雷夫氏病，自身免疫性胃炎，胰岛素依赖型糖尿病(I型)，自身免疫性溶血性贫血，自身免疫性嗜中性粒细胞减少症，血小板减少症，慢性活动性肝炎，重症肌无力，多发性硬化症，炎性肠疾，局限性回肠炎病，牛皮癣及移植物对宿主病。优选自身免疫病是类风湿性关节炎，炎性肠疾，局限性回肠炎病，或牛皮癣。

可被治疗或预防之破坏性骨骼紊乱包括骨质疏松症及与多发性骨髓瘤有关之骨骼紊乱。

可治疗或预防之增殖性疾病包括下列，但不限于此：急性骨髓性白血病，慢性骨髓性白血病，转移性黑色素瘤，卡波济氏肉瘤，及多发性骨髓瘤。

可治疗或预防之感染性疾病包括脓毒症，败血性休克，及志贺氏杆菌病，但并不限于此。

可以本发明化合物治疗或预防之IL-1-调介之退化性或坏死性疾病包括早老性痴呆氏病，帕金森氏病，脑缺血及心肌缺血，但并不限于此。优选，退化性疾病是早老性痴呆病。

可以本发明化合物治疗或预防之预期细胞死亡-调介之退化性疾病包括早老性痴呆氏病，帕金森病，脑缺血，心肌缺血，脊髓肌肉萎缩症，多发性硬化，AIDS-相关之脑炎，HIV-相关之脑炎，老化，秃发，及由于中风造成的神经性伤害。

本发明方法可用于治疗或减轻IGIF-或IFN-γ-调介之炎症，自身免疫，感染性，增殖性，破坏性骨骼，坏死性及退化性状况之进展，严重性或作用，包括疾病，紊乱或作用，其中状况之特征在于IGIF或IFN-γ产生之水平增高。

此种发炎状况之实例包括下列，但不限于此：骨关节炎，急性胰腺炎，慢性胰腺炎，哮喘，类风湿性关节炎，发炎性肠疾，局限性回肠炎病，溃疡性结肠炎，脑缺血，心肌缺血，及成人呼吸窘迫综合症。

优选发炎状况是类风湿性关节炎，结肠溃疡，局限性回肠炎，肝炎及成人呼吸窘迫综合症。

此种感染性状况之实例包括传染性肝炎，脓毒症，败血性休克及志贺氏杆菌病，但不限于此。

此种自身免疫状况之实例包括下列，但并不限于此：肾小球肾炎，全身性红斑狼疮，硬皮症，慢性甲状腺炎，葛雷夫氏病，自身免疫性胃炎，胰岛素-依赖型糖尿病(I型)，幼年型糖尿病，自身免疫性溶血性贫血，自身免疫性嗜中性粒细胞减少症，血小板减少症，重症肌无力，多发性硬化，牛皮癣，扁平苔癣，移植物对宿主病，急性皮肌炎，湿疹，初生硬化，肝炎，葡萄膜炎，Behcet’s病，急性皮肌炎，异位性皮肤疾病，纯红细胞成形不全，成形不全性贫血，肌萎缩性侧索硬化及肾病变综合症。

优选，自身免疫状况是肾小球肾炎，胰岛素依赖型糖尿病(I型)，幼年型糖尿病，牛皮癣，移植物对宿主疾病，包括移植排斥，及肝炎。

此种破坏性骨骼紊乱之实例包括骨质疏松症及多发性骨髓瘤-相关之骨骼紊乱。

此种增殖性状况之实例包括下列，但亦不限于此：急性骨髓性白血病，慢性骨髓性白血病，转移性黑色素瘤，卡波济氏瘤，及多发性骨髓瘤。

此种神经退化性状况之实例包括下列，但不限于此：早老性痴呆病，帕金森氏病及亨丁顿氏病。

虽然本发明集中在于此处化合物于预防及治疗IL-1，细胞凋亡，IGIF-及IFN-γ-调介之疾病之用法，本发明化合物也可充作其他半胱氨酸蛋白酶之抑制剂。

本发明化合物也可充作商品化试剂，其可有效地结合至ICE或其他半胱氨酸蛋白酶。在充作商品化试剂方面，本发明化合物及其衍生物可用于ICE及ICE同系物之生化或细胞分析中以阻断靶肽之蛋白水解，或可被衍生化以结合至稳定的树脂上充作亲和力层析应用中之范围底物。特征为商品化半胱氨酸蛋白酶抑制剂之这些及其他的用法是本领域技术人员明白的。

制备N-酰基氨基化合物之方法

本发明的ICE抑制剂可利用常规技术合成。有益的，化合物通常可自剂常含有4个以上的手性中心及许多肽连接。本发明化合物可相当容易地合成，此代表这些化合物可大规模生产之优点。

例如，本发明化合物可利用本说明书中所述之方法制备。就本领域技术人员已知的，这些方法并非于本案中所述及权利要求化合物被合成之仅有方法。进一步方法是本领域技术人员显而易见的。另外，本说明书中所述的各种合成步骤可以不同的次序或顺序进行以生成欲求化合物。

本发明也提出制备本发明化合物之优选方法。因此，于另一具体实施方案(M)提出制备N-酰基氨基化合物之方法，其中包括以下步骤：

a)在存在有惰性溶剂，三苯基膦，亲核性清除剂，及四-三苯基膦合钯(0)，于环境温度及惰性大气下混合羧酸与N-别位-保护之氨基；及

b)在a)步骤混合物中加入HOBT及EDC；并视所需包括进一步：

c)于含有酸及H₂O之溶液存在下水解b)步骤混合物，其中b)步骤混合物视所需于水解前先前浓缩。

优选，此惰性溶剂是CH₂Cl₂，DMF，或CH₂Cl₂及DMF之混合物。

优选，亲核性清除剂是双甲酮，吗啉，三甲基甲硅烷基二甲胺，或二甲基巴比妥酸。更优选的，亲核性清除剂是三甲基甲硅烷基二甲胺或二甲基巴比妥酸。

优选，溶液含有约1-90重量％之三氟醋酸。更优选的，溶液中含有约20-50重量％之三氟醋酸。

另外，溶液中含有约0.1-30重量％之盐酸。更优选的，溶液含有约5-15重量％之盐酸。

更优选的，于上述过程中，惰性溶剂是CH₂Cl₂，DMF，或CH₂Cl₂及DMF之混合物，且亲核性清除剂是双甲酮，吗啉，三甲基甲硅烷基二甲胺，或二甲基巴比妥酸。

最优选的，在上述方法中，惰性溶剂是CH₂Cl₂，DMF或二者之混合物，且亲核性清除剂是三甲基硅烷基二甲胺或二甲基巴比妥酸。

优选，N-酰基氨基化合物由下式(VIII)代表：

其中：

R₁如具体实施方案(A)所定义；

R₂是：

其中R₅₁如具体实施方案(B)所定义；

或

优选，N-别位-保护之胺是：

，其中R₅₁如上文所定义。

于优选制法中，取代基如具体实施方案(A)中所定义。

另外，N-酰基氨基化合物以式(VIII)代表，表中R₁如上具体实施方案(B)所定义，且R₂如具体实施方案(M)所定义。

优选于这些另外制法中，取代基如上具体实施方案(B)所定义。

另外，N-酰基氨基化合物由式(VIII)代表，其中R₁如上具体实施方案(C)所定义，且R₂如上具体实施方案(M)所定义。

优选于这些另外的制程中，取代基如上具体实施方案(C)所定义。

另外，N-酰基氨基化合物由式(VIII)代表，其中R₁如上具体实施方案(D)所定义，其R₂如具体实施方案(M)所定义。

优选于这些另外的制程中，取代基如具体实施方案(D)中所定义。

另外，N-酰氨基化合物由式(VIII)代表，其中R₁如上具体实施方案(E)所定义，其R₂如具体实施方案(M)所定义。

优选在这些另外的制程中，取代基如具体实施方案(E)所定义。

另外，N-酰基氨基化合物由式(VIII)代表，其中R₁如上具体实施方案(F)所定义，其R₂如具体实施方案(M)所定义。

优选于这些另外制程中，取代基如具体实施方案(F)所定义。

另外，N-酰基氨基化合物由式(VIII)代表，其中R₁如具体实施方案(G)所定义，其R₂如具体实施方案(G)所定义。

优选在这些不同制程中，取代基如具体实施方案(G)所定义。

另外，N-酰基氨基化合物由式(VIII)代表，其中R₁如具体实施方案(H)所定义，其R₂如具体实施方案(M)所定义。

优选于这些另外制程中，取代基如具体实施方案(H)所定义。

另外，N-酰基氨基化合物由式(VIII)代表，其中R₁如具体实施方案(I)所定义，其R₂如具体实施方案(M)所定义。

优选，于这些另外制程中，取代基如具体实施方案(I)所定义。

另外，N-酰基氨基化合物由式(VIII)代表，其中R₁如具体实施方案(J)所定义，且R₂如具体实施方案(M)所定义。

优选，于这些另外制程中，取代基如具体实施方案(J)所定义。

另外，N-酰基氨基化合物由式(VIII)代表，其中R₁如具体实施方案(K)所定义，且R₂如具体实施方案(M)所定义。

优选于这些另外制程中，取代基如具体实施方案(K)所定义。

另外，N-酰基氨基化合物由式(VIII)代表，其中R₁如具体实施方案(L)所定义，且R₂如具体实施方案(M)所定义。

优选于这些另外制程中，取代基如具体实施方案(L)所定义。

为了使本发明更被充份了解，示出以下实施例。这些实例仅供说明目的，不欲在任何方式下限制本发明。

实施例1

ICE之抑制作用

利用以下三种方法可得本发明化合物之抑制常数(K_i)及IC₅₀值：

1. 以UV-可见底物之酶分析法

此分析之进行以琥珀酰基-Tyr-Val-Ala-Asp-对硝基酰苯胺为底物。类似底物之合成述于L.A.Reiter(国际肽与蛋白质研究杂志Int.J.PeptideProtein Res. 43，87-96(1994))这些分析混合物中含有：

65微升缓冲溶液(10mM Tris，1mM DTT，0.1％CHAPS@pH 8.1)

10微升ICE(50nM终浓度使有～1mOD/分之速率)

5微升DMSO/抑制剂混合物

20微升400μM底物(80μM终浓度)

100微升总反应体积

可见光之ICE分析在96孔洞之微量滴定板上进行。依所列次序将缓冲液，ICE及DMSO(若有抑制剂存在下)加至孔洞内。组份在室温下孵育15分钟，于所有组份均在所有孔洞时开始。微量滴定板计读器定在37℃孵育下。经15分钟的孵育，底物直接加至孔洞中，并于发色团(pNA)释出后，在405-603毫微米及37℃下追踪20分钟。进行数据之线性配合，且以mOD/分计算速率。实验中DMSO仅于涉及抑制剂时才存在，于其他实验中以缓冲溶液制成100微升体积。

2. 以荧光底物进行的酶分析

上分析基本上依据Thornberry等，(自然Nature 356∶768-774(1992))进行，利用文献中参考之底物17。底物为：乙酰基-Tyr-Val-Ala-Asp-氨基-4-甲基香豆素(AMC)。混合以下组份：

65微升缓冲溶液(10mM Tris，1mM DTT，0.1％CHAPS@pH 8.1)

10微升ICE(2-10nM终浓度)

5微升DMSO/抑制剂溶液

20微升150μM底物(30μM终浓度)

100微升总反应体积

分析于96孔洞微量滴定板上进行。缓冲物质及ICE加至孔洞中。令组份在37℃之温控孔洞盘上孵育15分钟。经15分钟孵育后，反应加底物而开始，且在37℃下追踪反应达30分钟，系于AMC发荧光团释出后利用380毫微米之激发波长及460毫微米之发射波长进行。进行各孔洞数据之线性配合，再决定每秒荧光单位计之速率。

为决定酶抑制常数(K_i)或抑制模式(竞争性，未竞争性或非竞争性)，于各抑制剂浓度下于酶分析中所决定之速率数据，利用计算机与标准的酶动力方程式配合(见I.H.Segel，酶动力学 Enzyme Kinetics，Wiley-Interscience，1975)。

将荧光对时间数据与Morrion之演变方程式配合，进行不可逆抑制剂二次速率常数之决定。Morrison，J.F.，分子与细胞生物物理学 Mol.Cell. Biophys.，2，pp.347-368(1985)。Thornberry等已发表这些侦测ICE不可逆抑制剂速率常数之方法说明。Thornberry，N.A.，等，生物化学Biochemistry，33，PP.3923-3940(1994)。对于并无先前复合物形成可被动力学地观察，二次速率常数(K_inact)直接自K_obsvs.[I]之直线画图斜率中衍生出来。对于先前复合物之形成(与酶)可被侦测之化合物，K_obsvs.[I]之双曲线图与饱和动力学配合，以先产生K_i及k′。再以k′/K_i得到二次速率常数k_inact。

3． PBMC细胞分析法

以人类外周血液单核细胞(PBMC)之混合族群或加丰的粘附单核细胞进行

IL-1β分析法

ICE对pre-IL-1β之处理修饰可在利用各样细胞来源之细胞培养中侦测。得自健康供者之人类PBMC，可提供淋巴细胞亚型及单核细胞之混合族群，其可产生反应许多类型生理性刺激物之白细胞介素及细胞因子。来自PBMC之粘附单核细胞可提供正常单核细胞加丰之来源，以供经活化细胞产生细胞因子之选择性研究。

实验步骤：

制备受试化合物于DMSO或乙醇中之最初稀释系列，接下来稀释至RPMI-10％FBS培养基中(含有2mM L-谷氨酸，10mM HEPES，50U及50微克/毫升青霉素/链霉素)，分别在含有0.4％DMSO或0.4％乙醇中生成为最终受试浓度4x之药物。DMSO之终浓度于所有药物稀释液中为0.1％。于ICE抑制分析法中决定的受试化合物表达K_i之浓度滴度，通常可用于一次化合物筛选。

通常测试5-6份化合物稀释液，且细胞组份进行二次分析，即各细胞培养物上清液上进行二次ELISA决定。

PBMC分离及IL-1分析：

自一品托人类血液中分离的血液黄层细胞(生成40-45毫升终体积血浆加上细胞)以培养基稀释至80毫升，并在LeukoPREP分离管(BectonDickinson)上各覆上10毫升细胞悬液。在1500-1800×g下离心15分钟后，吸出血浆/培养基层再以Pasteur吸量管收集单核细胞层，并转移至15毫升圆锥的离心管(Corning)。加入培养基使体积达到15毫升，经由反转缓和地混合细胞，并以300×g离心15分钟。PBMC团块悬浮于少量培养基中，计数细胞并调整至6×10⁶细胞/毫升。

于细胞分析中，于24孔洞之扁平底组织培养盘(Corning)之各孔洞中加入1.0毫升细胞悬液，0.5毫升受试化合物稀释液，及0.5毫升LPS溶液(Sigma#L-3012；20纳克/毫升溶液制备于完全RPMI培养基中；终LPS浓度为5纳克/毫升)。所加入的0.5毫升受试化合物及LPS通常足以混合孔洞之内容物。每次实验进行三个对照混合物，有单独的LPS，溶剂赋形剂对照相，和/或额外的培养基以将最终的培养体积调至2.0毫升。细胞培养在37℃及5％CO₂存在下历16-18小时。

于培育末了，回收细胞并转移至15毫升圆锥型离心管中。经200×g下离心10分钟，上清液回收再转移至1.5毫升之Eppendorf管内。可注意到细胞团块可利用于胞液萃取物中pre-IL-1β和/或成熟的IL-1β含量之生化评估，利用西方墨点法或以pre-IL-1β特异抗血清进行之ELISA进行。

粘附性单核细胞之分离：

如上述分离及制备PBMC。培养基(1.0毫升)先加至孔洞中，再加0.5毫升PBMC悬浮液。经1小时培育后，团块小心地振摇再自各孔洞中吸出未粘附之细胞。孔洞再以1.0毫升培养基缓和洗三次及最后用1.0毫升培养基悬浮。已粘附细胞之加丰通常每孔洞得到2.5-3.0×10⁵细胞。如上述进行受试化合物，LPS之加入，细胞培育条件及上清液之处理修饰。

ELISA：

我们使用Quantikine试剂盒(R&D Systems)来侦测成熟的IL-1β。依据厂商指示进行分析。成熟的IL-1β水平于PBMC及粘附性单核细胞阳性对照组均可见到约1-3纳克/毫升。ELISA分析于LPS-阳性对照组上清液之1∶5；1∶10及1∶20稀释液上进行，以选择在受试板中上清液最适宜之稀释度。

化合物之抑制强度可以IC₅₀值表示，其为在上清液中与阳性对照组比较下所测及之成熟IL-1β50％时之抑制剂浓度。

本领域技术人员了解，于细胞分析中所得之数值，如本说明书中所述的，可依多重的因素而定，如细胞类型，细胞来源，生长条件等。

实施例2

于小鼠之药物动力学研究

肽性ICE抑制剂以大于100μ/分/千克之清除率可被快速地清除。较低清除率的化合物相较于肽性抑制剂有较为改善之药物动力特性。

利用下述方法，我们可于小鼠中获得本发明若干化合物之清除率：

样品制备及剂量

化合物溶于无菌的TRIS溶液中(0.02M或0.05M)，浓度为2.5毫克/毫升。当需确定是完全的溶液时，样品先溶于少量二甲基乙酰胺中(最多为总溶液体积之5％)，再以TRIS溶液稀释。

药物溶液投予至CD-1小鼠(Charles River Laboratories-26-31克)，以10毫升/千克之剂量体积经由尾静脉给予25毫克/千克之药物剂量。

各时间点时(通常由2分钟至2小时)小鼠每5只一组给药，于适当时间时动物再以氟烷麻醉，再经由颈静脉切断法收集至个别的经肝素化管内。血样冷却至0℃，再分离血浆并贮于-20℃直到分析为止。

生物分析

血样中药物浓度以HPLC在UV及MS(ESP)侦测下分析而决定。反相色谱法中应用由C1到C18的各种键结相，洗脱液则由水性缓冲液/乙腈混合物在等密度条件下进行。

定量则采用外标方法，其中掺有药物溶液之血浆构成校正曲线，浓度范围0.5至50微克/毫升。

分析血浆样品前，先加乙腈，甲醇，三氯乙酸或高氯酸再以10,000g离心10分钟而去蛋白质.注入20微升至50微升的样品体积以供分析。

化合物214e

给药及取样

药物溶于无菌的0.02M Tris中生成2.5毫克/毫升溶液，其再以2S毫克/千克剂量经由尾静脉投予至5只一组共11组的雄CD-1小鼠。在下列时间点时：2，5，10，15，20，30，45，60，90及120分钟，各取一组动物麻醉再采血至经肝素化之管内。分离出血浆后，贮于-20℃下直到分析为止。

分析

一份血浆(150微升)以5％高氯酸(5微升)处理再涡旋混合并令其静置90分钟再离心。生成的上清液分离再取20微升注入HPLC内以分析之。

HPLC条件

柱 100×4.6毫米 Kromasil KR 1005C4

移动相 0.1m Tris pH7.5 86％

乙腈 14％

流速 1毫升/分

侦测在210毫微米下之UV

保留时间3.4分

分析结果显示药物之平均血浆水平由～70微克/毫升(于2分钟)降至＜2微克/毫升(于90及120分钟)。

化合物217e

给药及取样

药物溶于无菌的0.02M Tris中以生成2.5毫克/毫升溶液，其再经尾静脉以25毫克/千克剂量投予至每组5只共11组的雄CD-1小鼠。在下列时间点时：2，5，10，15，20，30，45，60，90及120分钟，取一组动物麻醉并收集血样至经肝素化之管内。血浆于分离后贮于-20直到分析止。

分析

一份血浆(100微升)以乙腈(100微升)稀释，再涡旋混合20秒再离心10分钟。生成的上清液分离并取20微升注入HPLC分析之。

HPLC条件

柱 150×4.6毫米 Zorbax SBC8

移动相 0.0SM磷酸盐 72％

缓冲溶液，pH7.1

乙腈 28％

流速 1.4毫升/分

侦测 UV在210毫微米

保留时间3.0及3.6分(非对映体)

分析结果显示平均血浆浓度由～55微克/毫升(于2分钟)下降至＜0.2微克(60-120分钟)。

实施例3

肽性ICE抑制剂以大于80毫升/分钟/千克之清除率可被快速的清除。具较低清除率的化合物有较肽性ICE抑制剂更改善的药物动力学特性。

我们以下列方法可于小鼠中获得本发明若干化合物之清除率(毫升/分钟/千克)：

体内大鼠清除率分析法

于药物动力学研究前一天，在麻醉下对大鼠之颈静脉及颈动脉血管插管。M.J.Free，R.A.Jaffee；“收集血液及其他体液的插管技术”‘Cannulation techniques for the collection blood and other bodily fluids’；于动物模型 Animal Models；p.480-495；N.J.Alexander，编；AcademicPress；(1978)。药物(10毫克/毫升)经由颈静脉于溶媒中投药，溶媒中通常含有丙二醇/食盐水，及1∶1比率之100mM碳酸氢钠。动物给予10-20毫克药物/千克，再于5，7，10，15，20，30，60及90分钟时自在内的颈动脉导管采血。血液离心出血浆，并贮于-20℃下直到分析为止。进行数据之药物动力分析，利用标准的软件如RStrip(MicroMath Software，UT)和/或Pcnonlin(SCI Software，NC)行非线性回归可得到清除率数值。

分析：

大鼠血浆以等体积乙腈(含有0.1％TFA)萃取。样品再以约1,000xg离心，上清液再以梯度HPLC分析。下文描述典型的分析步骤。

200微升血浆以200微升0.1％三氟醋酸(TFA)于乙腈及10微升50％氯化锌水溶液沉淀，涡旋，再以～1000×g离心，收集上清液并以HPLC分析。

HPLC步骤：

柱： Zorbax SB-CN(4.6×150毫米)(5μ粒子大小)

柱温： 50℃

流速： 1.0毫升/分

注射体积： 75微升

移动相：A＝0.1％TFA于水及B＝100％乙腈

应用的梯度： 100％A至30％A于15.5分

0％A于16分钟

100％A于19.2分钟

波长： 214毫微米

在20，10，5，2及1微克/毫升浓度下进行标准曲线。

实施例4

IL-1β产生之全血分析

利用下述方法我们得到本发明若干化合物之IC₅₀值：

目的：

全血分析是侦测IL-1β(或其他细胞因子)及潜在抑制剂活性之简易方法。此分析系统之复杂性，加上全数的淋巴及致炎细胞类型，血浆蛋白质及红细胞之概况是人类体内生理状况之理想体外代表。

材料：

无热原之注射器(～30cc)

无热原之无菌真空管含有经冷冻干燥之Na₂EDTA(4.5毫克/10毫升管)

人类全血(～30-50cc)

1.5毫升Eppendorf管

受试化合物贮液(～25mM于DMSO或其他溶剂中)

无内毒素之氯化钠溶液(0.9％)及HBSS脂多醣(Sigma；Cat.#L-3012)贮

液，在1毫克/毫升下于HBSS中

IL-1βELISA试剂盒(R&D Systems；Cat#DLB50)

TNF αELISA试剂盒(R&D Systems；Cat#DTA50)

水浴或培育箱

全血分析之实验步骤：

将培育箱或水浴定在30℃。一份0.25毫升的血样置于1.5毫升Eppendorf管内。注：于每二份后将全血血样试管确实反转。若细胞沉降且未均匀悬浮可能会有重覆二次之差异。使用正压吸量管也可将重覆二份间之差异减至最小。

于无菌之无热原食盐水中以连续稀释方式制备药物稀释液。于ICE抑制分析中所决定的受试化合物支撑表观K_i之稀释系列通常可用于初次化合物筛选。对于极疏水性之化合物，我们之化合物稀释液系制备于得自相同血液供者之于新鲜血浆中或含有5％DMSO之PBS中，以加强溶解。

加上25微升受试化合物稀释液或溶媒对照组，并与样品缓和混合。再加5.0微升LPS溶液(250纳克/毫升贮液，新鲜制备：5.0纳克/毫升终浓度LPS)，并再次混合。管在30℃之水浴中培育16-18小时，并经常混合。另外，管子置于4rpm之旋转器内相同的培育期。此分析也可在以下对照组下二次或三次构成：阴性对照组-无LPS；阳性对照组-无受试抑制剂；溶媒对照组-实验中所用的DMSO或化合物溶剂之最高浓度。加入额外的食盐水至所有的对照组管子内，使对照组及实验全血受试样品有正常化之体积。

于培育期后，全血样品在～2000rpm之微量离心机内离心，血浆转移至新鲜的微量离心管内，再以1000×g离心使残留的血小板于必要时成团块。血浆样品可在-70℃下冷冻贮存，再以ELISA进行细胞因子水平之分析。

EIISA：

于侦测IL-1β及α-TNF中我们使用R&D System(614 McKinleyPlace N.E.Minneapolis，MN 55413)Quantikine试剂盒。分析依厂商之操作指示进行。在个别范围内我们于阳性对照组中观察到～1-5纳克/毫升之IL-1β水平。所有样品之1∶200血浆稀释倍数，使我们实验之ELISA结果足以落在ELISA标准曲线之线性范围上。若在全血分析中观察到差异，必要时可使标准稀释液更臻理想。Nerad，J.L.等，白细胞生物学杂志J.Leukoeyte Biol.，52，pp.687-692(1992)。

实施例5

ICE同系物之抑制作用

1．ICE同系物之分离

利用杆状病毒表达系统于昆虫细胞中之TX表达

我们将Tx cDNA(Faucheu等，上文，1995)继代选殖至经修饰之pVL1393转移载体，将生成的质粒(pVL1393/TX)利用病毒DNA共转染至昆虫细胞，再鉴定重组体杆状病毒。于产生高滴度之重组体病毒贮品后，利用可视之ICE分析法检查培养基中之TX活性。典型而言，以重组体病毒贮品在MOI5下感染草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(Sf9)，昆虫细胞于48小时后有4.7微克/毫升之最大表达。以ICE为分析中之标准品。

ICE或TX氨基末端T7加饰之形式也表达。原先之设计可有助于重组体蛋白质之鉴定及纯化，各种构体也可用来检查不同的表达水平及由不同同系物经验到的相对的细胞凋亡水平。在可表达ICE或TX之细胞系和以单独病毒DNA感染之细胞比较下，前者于受感染的Sf9细胞中之细胞凋亡(利用锥虫蓝排阻分析法检查)有所增加。

N-末端(His)₆-加饰之CPP32于大肠杆菌E.coli中之表达及纯化

编码CPP32多肽且始自Ser(29)之cDNA(Fernandes-Alnemri等，上文，1994)以引物行PCR扩大作用，其可在5′及3′端上均加上在架构之XhoI位置，且生成的XhoI片段连接至经XhoI-切割之pET-15b表达载体上以生成融合蛋白质之N-末端有(his)₆加饰之在架构之融合体。所预计之重组体蛋白质以MGSS HHHHHHSSG LVPRGSHMLE氨基酸序列开始，其中LVPRGS代表凝血酶解离位置，继以始自Ser(29)之CPP32。携有质粒之大肠杆菌E.coli BL21(DE3)在30℃下生长至对数期，再与0.8mM IPTG共培育。加入IPTG2小时后回收细胞，制备溶胞产物，可溶性蛋白质再以Ni-琼脂糖色谱法纯化。所有表达的CPP32蛋白质均呈经处理修饰形式。N-末端定序分析显示，处理修饰发生在Asp(175)及Ser(176)间之推想位置上。来自200毫升培养物可得约50微克的CPP32蛋白质。经活性位点滴定决定，经纯化的蛋白质完全具有活性。蛋白酶制剂在解离PARP以及合成的DEVD-AMC底物上也极具体外活性(Nicholson等，上文，1995)。

2．ICE同系物之抑制作用

ICE同系物一系列可逆抑制剂之选择性示于表1。依Wilson等(上文，1994)利用YVAD-AMC底物(Thornberry等，上文，1992)进行ICE酶分析。利用ICE底物在和ICE相同之条件下进行TX活性之分析。利用DEVD-AMC底物进行CPP32之分析(Nicholson等，上文，1995)。一般而言，对大范围之架构而言，ICE及TX间有低的选择性。受试的合成的ICE化合物无一者为CPP32有效之抑制剂。在最高浓度下分析可逆的化合物(1μM)显示并无抑制作用。

表1

化合物 K_iICE(nM) K_iTX(nM) K_iCPP32(nM)

214e 7.5 7.0±1.1 ＞1000

135a 90 55±9 ＞1000

125b 60 57±13 ＞1000

137 40 40±7 ＞1000

下文示出经选出之不可逆抑制剂使ICE及ICE同系物失去活性之二级速度常数(表2)。所研究之不可逆化合物为ICE及其同系物广谱之抑制剂。然而，某些选择性在与ICE及CPP32抑制作用比较下以不可逆化合物可观察得到。

表2

化合物 K_inact(ICE) K_inact(TX) K_inact(CPP32)

M^-1s^-1 M^-1s^-1 M^-1s^-1

138 120,000 150,000 550,000

217d 475,000 250,000 150,000

108a 100,000 25,000 nd

实施例6

细胞凋亡之抑制作用

U937细胞中Fas-诱生之细胞凋亡

评估化合物阻断抗-Fas-诱生之细胞凋亡之能力。在利用RT-PCR之预实验中，我们于未经刺激之U937细胞中侦测编码ICE，TX，ICH-1，CPP32及CMH-1之mRNA。我们使用此细胞系于细胞凋亡之研究中。U937细胞以1×10⁵细胞/毫升种入培养基中，再生长至～5×10⁶细胞/毫升。于细胞凋亡之实验中，2×10⁶细胞于1毫升RPMI-1640-10％FBS中涂布于24孔洞之组织培养盘内，并以100纳克/毫升抗-Fas抗原抗体刺激(医学与生物学实验室有限公司Medical and Biological Laboratories，Ltd.)。经过在37℃下24小时培育后，以ApoTag试剂行FACS分析来决定细胞凋亡之细胞百分率。

受试的所有化合物最初在20μM下，再以活性化合物进行滴定以决定IC₅₀值。于108a，136及138中可观察到细胞凋亡之抑制作用(在20μM下＞75％)。于217e决定出0.8μM之IC₅₀，和214e 20μM下抗-Fas-诱生之细胞凋亡无抑制作用相比较。

实施例7

充作抗炎剂时体内效力之急性分析

LPS-诱导之IL-1β产生

于施以LPS(20毫克/千克IP)之CD1小鼠中评估214e及217e之效力(每种状况下n＝6)。受试化合物制备于橄榄油∶DMSO∶乙醇(90∶5∶5)中，再于LPS后1小时经由IP注射。LPS施以7小时后采血.以ELISA侦测血清中IL-1β水平。图6之结果显示由214e分泌IL-1β之剂量依赖型抑制作用，ED₅₀约为15毫克/千克。于第二实验中可得类似的结果。也可在经217e处理之小鼠中观察到IL-1β分泌显著的抑制作用(图7)。然而，清楚的剂量反应并不明显。

化合物214e及217e(50毫克/千克)也以经口灌食方式投药以评估吸收作用。于图8之结果显示214e，非217e口服时可抑制IL-1β之分泌，建议ICE抑制剂充作抗炎剂时之口服效力潜力。

也评估214e类似物之效力，于IP投药(图9)及PO投药后在施以IPS之小鼠中进行(图10)。

表3在施以LPS小鼠于PO及IP投药后由214e类似物所致之IL-β产生之抑制％(50毫克/千克)。

表3

化合物	PO％抑制作用	IP％抑制作用
化合物	PO％抑制作用	IP％抑制作用	214e	75	78
265	27	30	214e	75	78
265	27	30	416	52	39
434	80	74	416	52	39
434	80	74	438	13	40
442	10	0	438	13	40
442	10	0	2002	-	78

表4

214e前药在LPS攻击小鼠中效力之比较：

IL-1β产生之时间曲线抑制作用

化合物投药时间

(相较于LPS攻击时间，PO，50毫克/千克)

化合物	-2小时	-1小时	0小时	+1小时
化合物	-2小时	-1小时	0小时	+1小时	214e	39^43^-^*	-^44-^-^*	80^48^-^*	55％75^11^47^*
304a	30	33	68	37	214e	39^43^-^*	-^44-^-^*	80^48^-^*	55％75^11^47^*
304a	30	33	68	37	2100e	49	54	94	66
2100a	8	71	67	58	2100e	49	54	94	66
2100a	8	71	67	58	213e	0	48	41	89
302	0	27	21	26	213e	0	48	41	89
302	0	27	21	26	2100c	0	0	85	40
2100d	42	35	52	26	2100c	0	0	85	40
2100d	42	35	52	26	2100b	0	0	47	26
2001	～6364^*	～62^*62	～5758^*	～5455^*	2100b	0	0	47	26

^*于接下来分析中所得之值

实施例8

侦测214e前药之血液水平

小鼠以化合物302及304a(50毫克/千克)之p.o.剂量投予，药物制备于0.5％羧甲基纤维素中。于给药后1及7小时时采血。以等体积含有2％甲酸之乙腈沉淀而萃取血清，再离心。上清液以液相色谱一质谱(ESI-MS)分析，利用0.03至3微克/毫升之侦测水平。化合物302及304a当口服时显示出可侦测之血液水平，214e本身当口服时未有超过0.10微克/毫升之血中水平。化合物302及304a为214e之前药，且可于体内代谢成214e(见图11)。

实施例9

我们利用实施例1-8所述之方法可得本发明化合物下列数据(见表5及6)。实施例9化合物之结构示于实施例10-17。

表5

化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克
化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克	47b	27	1800	＜600	338
47a	19	2600	5100	79	32	47b	27	1800	＜600	338
47a	19	2600	5100	79	32	135a	90	2800	5000	＞100
135b	320	1600	1700			135a	90	2800	5000	＞100
135b	320	1600	1700			125b	60	800	4500
108b	400	25000			＞100	125b	60	800	4500
108b	400	25000			＞100	137	40	1700	14000
139	350	2000				137	40	1700	14000
139	350	2000				213e	130	900	600400^*
214c	1200	5000				213e	130	900	600400^*
214c	1200	5000				214e	7.5	1600	1300	23	12
217c		1700	7000	70		214e	7.5	1600	1300	23	12
217c		1700	7000	70		217e		175	2000	＞50
220b	600	2125				217e		175	2000	＞50
220b	600	2125				223b	99	5000		＞100
223e	1.6	3000	＞20000	89		223b	99	5000		＞100
223e	1.6	3000	＞20000	89		226e	15	1100	1800	109
227e	7	234	550			226e	15	1100	1800	109
227e	7	234	550			230e		325	300	67

表5(续)

化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克
化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克	232e	1100	4500		22	26
235e	510	4750		36		232e	1100	4500		22	26
235e	510	4750		36		238e	500	4250
246	12	950	10000	31		238e	500	4250
246	12	950	10000	31		257	13	110006600^*
265	47	4300	1400	23	20	257	13	110006600^*
265	47	4300	1400	23	20	281	50	6002500^*
302	4500	＞20000	＞20000			281	50	6002500^*
302	4500	＞20000	＞20000			304a	200	1,400	240014000^*
307a	55	14500	16000			304a	200	1,400	240014000^*
307a	55	14500	16000			307b	165		14000
404	2.9	16501800^*	1100	64	24	307b	165		14000
404	2.9	16501800^*	1100	64	24	405	6.5	1700	2100
406	4	1650	2300			405	6.5	1700	2100
406	4	1650	2300			407	0.4	540	1700
408	0.5	1100	1000	41	23	407	0.4	540	1700
408	0.5	1100	1000	41	23	409	3.7	2500
410	17	2000	2800	32	20	409	3.7	2500
410	17	2000	2800	32	20	411	0.9	540	1900
412	1.3	580660^*	7001000^*		25	411	0.9	540	1900

表5(续)

化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克
化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克	413	750	6200
415	2.5	9901000^*	4503500^*	26	18	413	750	6200
415	2.5	9901000^*	4503500^*	26	18	416	12	1200	3400		47
417	8	2000	6000	33	22	416	12	1200	3400		47
417	8	2000	6000	33	22	418	2.2	10502200^*	78001800^*	13	5.9
419	280	＞8000				418	2.2	10502200^*	78001800^*	13	5.9
419	280	＞8000				420	1200	8000＞8000^*
421	200	43004600^*				420	1200	8000＞8000^*
421	200	43004600^*				422	50	2200	1200
423	10	21001800^*	1500		45	422	50	2200	1200
423	10	21001800^*	1500		45	424	45	2500	4000
425	0.8	650700^*	650			424	45	2500	4000
425	0.8	650700^*	650			426	90	45002500^*
427	180	4500			36	426	90	45002500^*
427	180	4500			36	428	280
429	7000					428	280
429	7000					430	60	＞8000
431	8	＞8000	8000			430	60	＞8000

表5(续)

化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克
化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克	432	1.6	560	2000
433	2.9	10001100^*	1100			432	1.6	560	2000
433	2.9	10001100^*	1100			434	4.9	16001200^*	18001300^*		20
435	8	4400				434	4.9	16001200^*	18001300^*		20
435	8	4400				436	7.5	2700
437	12	1800	5000			436	7.5	2700
437	12	1800	5000			438	28	1000	7002900^*		22
439	3.7	2800	32003400^*			438	28	1000	7002900^*		22
439	3.7	2800	32003400^*			440	2.3	5000	2000
441	1	2500	4500			440	2.3	5000	2000
441	1	2500	4500			442	3.2	900	2000		54
443	3.6	2800	1500			442	3.2	900	2000		54
443	3.6	2800	1500			444	15	3500	3500
445	135		4000			444	15	3500	3500
445	135		4000			446	62		3000
447	5.8	2500	1500			446	62		3000
447	5.8	2500	1500			448	130		4000
449	12	1500	320013000^*			448	130		4000
449	12	1500	320013000^*			450	5	800	22001700^*	18	12

表5(续)

化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克
化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克	451	4	1800	15009000^*
452	4.5	600800^*	6501600^*		27.3	451	4	1800	15009000^*
452	4.5	600800^*	6501600^*		27.3	453	0.65	1300	19001600^*
454	45	2500				453	0.65	1300	19001600^*
454	45	2500				455	1.2	400	28002600^*	54
456	4.5	6001300^*	6001400^*		12.7	455	1.2	400	28002600^*	54
456	4.5	6001300^*	6001400^*		12.7	457	6.2	2000	3500
458	20	2900				457	6.2	2000	3500
458	20	2900				459	5	1800
460	115	400	2400			459	5	1800
460	115	400	2400			461	47
462	40					461	47
462	40					463	14	24002800^*
464	2.5	1000	＞10002500^*			463	14	24002800^*
464	2.5	1000	＞10002500^*			465	3	1000	800
466	0.8	1400	600			465	3	1000	800
466	0.8	1400	600			467	11	1900
468	4.5	850	2500			467	11	1900

表5(续)

化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克
化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克	470	5	500	360500^*	63
471	1	750	400		17	470	5	500	360500^*	63
471	1	750	400		17	472	140
473	1	1000	400450^*			472	140
473	1	1000	400450^*			474	85
475	5.5	690650^*	400350^*	31	21	474	85
475	5.5	690650^*	400350^*	31	21	476	7	1600	2500
477	60					476	7	1600	2500
477	60					478	380
479	15	900	7002400^*			478	380
479	15	900	7002400^*			480	25	2300
481	1.2	390930^*	600500^*		34	480	25	2300
481	1.2	390930^*	600500^*		34	482	＜0.2	340	380260^*
483	1.7	900	700			482	＜0.2	340	380260^*
483	1.7	900	700			484	2	15501400^*	5000	15
485	2	900	900			484	2	15501400^*	5000	15
485	2	900	900			486	2.3	480570^*	500	37

表5(续)

化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．甍升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克
化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．甍升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克	487	2.4	650950^*	500400^*		20
488	1.5	940	750			487	2.4	650950^*	500400^*		20
488	1.5	940	750			489	6	22501700^*	15000
490	4.3	9801000^*	7001900^*			489	6	22501700^*	15000
490	4.3	9801000^*	7001900^*			491	5	2500
493	25	1200	800850^*			491	5	2500
493	25	1200	800850^*			494	15	13501500^*	7000
495	43					494	15	13501500^*	7000
495	43					496	16	15501600^*	6000
497	3.5	740	350700^*			496	16	15501600^*	6000
497	3.5	740	350700^*			498	1.5	560	500400^*
499	3.5	1200800^*	9000			498	1.5	560	500400^*
499	3.5	1200800^*	9000			605a	90	2600	＞20000
605b	45	10000		97		605a	90	2600	＞20000
605b	45	10000		97		605c	615	4500		37

表5(续)

化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克
化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克	605d	95	5100	160005100^*	33
605e	29	2250	＞10000		24	605d	95	5100	160005100^*	33
605e	29	2250	＞10000		24	605f	475	12500
605g	165	22500				605f	475	12500
605g	165	22500				605h	460	＞25000
605i	680	＞20000				605h	460	＞25000
605i	680	＞20000				605j	110	8750		71
605m	650	20000				605j	110	8750		71
605m	650	20000				605n	12	2100	＞20000	28
650o	72		18000			605n	12	2100	＞20000	28
650o	72		18000			605p	125	3200	＞20000
605q	1000					605p	125	3200	＞20000
605q	1000					605s	150	6000
605t	33					605s	150	6000
605t	33					609a	114	＞30000
609b	27	＞20000				609a	114	＞30000
609b	27	＞20000				619	300
620	35	1000	19000			619	300
620	35	1000	19000			621	7.2	1300	＞20000
622	35	1300	＞20000			621	7.2	1300	＞20000
622	35	1300	＞20000			623	9
624	300					623	9
624	300					625	105
626	260					625	105
626	260					627	43	3250	8000

表5(续)

化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克
化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克	628	36	2750	＞20000
629	230					628	36	2750	＞20000
629	230					630	270
631	805					630	270
631	805					632	148
633	92	5750	20000			632	148
633	92	5750	20000			634	1400
635	55	19003400^*	4000			634	1400
635	55	19003400^*	4000			605v	1100	＞30000
2201	9	20003700^*	3500		60	605v	1100	＞30000
2201	9	20003700^*	3500		60	2100e	250	800	600
2100a	100	1100	850			2100e	250	800	600
2100a	100	1100	850			2002	4	810860^*	701400^*	32
2100d	＞100000	＞20000	＞20000			2002	4	810860^*	701400^*	32
2100d	＞100000	＞20000	＞20000			2100c	7400	＞20000	＞20000
2100b	8000	＞20000	＞20000			2100c	7400	＞20000	＞20000
2100b	8000	＞20000	＞20000			2001	135	1800	3500
1027	4000	＞20000	＞20000		60	2001	135	1800	3500
1027	4000	＞20000	＞20000		60	1015	40	2500	1700	23

表6

化合物	荧光分析k_inactM^-1s^-1	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克
化合物	荧光分析k_inactM^-1s^-1	细胞PBMC平均IC50(nM)	全血IC50(nM)	小鼠清除率i.v．毫升/分/千克	大鼠清除率i.v．毫升/分/千克	108a	1×10⁵	17500
136	5.4×10⁵	870	2800	93		108a	1×10⁵	17500
136	5.4×10⁵	870	2800	93		138	1.2×10⁵	900	2900	116
217d	4.7×10⁵	340	4000			138	1.2×10⁵	900	2900	116
217d	4.7×10⁵	340	4000			280	4×10⁵	650	＞1000		187
283	1×10⁵	＜200	450		104	280	4×10⁵	650	＞1000		187
283	1×10⁵	＜200	450		104	284	3.5×10⁵	470	550	77	100
285	4.3×10⁵	810	1000	130	50	284	3.5×10⁵	470	550	77	100

^*数值由再分析而得。

实施例10

化合物139以类似合成47a之方法合成而得。

化合物136及138以类似合成57b之方法合成而得。

和

化合物135a，135b及137以类似合成69a之方法合成。

和

化合物813e，814c，814e，817c，817d，817e，820b，823b，823e，826e，827e，830e，832e，835e，838e，846，857，865，902，904a，907a，907b，1004-1013，1015-1045，1046-1068，1070-1091，及1093-1099以类似合成化合物264及实施例10及11中相应化合物之方法合成。

化合物47a，47b，108a，108b，125b，213e，214c，217c，217d，217e，220b，223b，223e，226e，227e，230e，232e，235e，238e，246，257，264，265，280-287，302，304a，307a及307b依下述合成。

H. N-(N-乙酰基-酪氨酰基-缬氨酰基-2-甲基哌啶基)-3-氨基-4-氧代丁酸 A步骤.N-(N-叔丁氧羰基哌可基)-4-氨基-5-苄氧基-2-氧代四氢呋喃

以类似Chapman所报告的方法(生物有机与药物化学通讯Bioorg.&Med.Chem.Lett.2，pp.613-618，(1992))进行N-叔丁氧羰基2-哌啶酸(460毫克，2.0毫摩尔)与N-烯丙氧羰基-4-氨基-5-苄氧基-2-氧代四氢呋南(530毫克，1.82毫摩尔)之反应，可得654毫克的标题化合物。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃(呈旋转异构体型)δ7.35(m，5H)，6.88(br.s，1H)，4.9-4.45(m，4H)，3.95+(br.m，2H)，3.06(m，1H)，2.9(m，1H)，2.7(br.m，1H)，2.45(m，1H)，2.2(m，1H)，1.7-1.5(m，3H)，1.45(双s，9H)。

B步骤.N-哌可基-4-氨基-5-苄氧基-2-氧代四氢呋喃

N-(N-叔丁氧羰基哌可基)-4-氨基-5-苄氧基-2-氧代四氢呋喃(654毫克)溶于15毫升的25％三氟乙酸于二氯甲烷中，在室温下搅拌。混合物浓缩生成胶状残留物。残留物溶于二氯甲烷中再以10％碳酸氢钠洗涤。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤，并浓缩生成422毫克标题化合物，呈米色固体。

¹H NMR(500Mhz，CDCl₃)δ7.38(m，5H)，7.15(d，1H)，5.55(d，1H)，4.95-4.8(m，1H)，4.78(m，1H)，4.65(d，1H)，4.45(m，1H)，3.2(m，0.5H)，3.05(m，0.5H)，2.95(m，0.5H)，2.85(m，0.5H)，2.65(m，1H)，2.55-2.38(m，1H)，1.95(m，H)，1.8(m，1H)，1.6(m，2H)，1.38(m，2H)。

C步骤. N-(N-乙酰基-酪氨酰基-缬氨酰基-哌可基)-4-氨基-5-苄氧基-2- 氧代四氢呋喃

N-乙酰基-酪氨酰基-缬氨酸(464毫克，1.44毫摩尔)及N-哌可基-4-氨基-5-苄氧基-2-氧代四氢呋喃(412毫克，1.3毫摩尔)各溶于5毫升之二甲基甲酰胺及二氯甲烷中，再冷却至0℃。冷却溶液中加入1-羟基苯并三唑(HOBT；210毫克，1.56毫摩尔)再加1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDC；326毫克，1.7毫摩尔)。搅拌18小时后，混合物以乙酸乙酯稀释，再以水，10％硫酸氢钠，10％碳酸氢钠，及水洗涤。有机层浓缩生成粗制固体，再以快速层析(SiO₂)纯化并以94∶6∶1的(二氯甲烷∶异丙醇∶吡啶)洗脱得到370毫克标题化合物。

¹H NMR(500MH，CD₃OD(呈非对映立体异构及旋转异构体形))δ7.35(m，5H)，7.05(m，2H)，6.68(m，2H)，5.65&5.25(m，1H)，4.9-3.95(m，8H)，3.4-2.6(m，4H)，2.5-2.1(m，1H)，1.98(s，1H)，1.9(s，1H)，1.85(s，1H)，1.8-1.6(m，2H)，1.55-1.3(m，4H)，0.95-0.85(m，6H)。

D步骤. N-(N-乙酰基-酪氨酰基-缬氨酰基-哌可基)-3-氨基-4-氧代丁酸

于100毫克N-(N-乙酰基-酪氨酰基-缬氨酰基-哌可基)-4-氨基-5-苄氧基-2-氧代四氢呋喃于10毫升甲醇之溶液中，加入60毫克Pd(OH)₂/C，且混合物置于汽球之氢气氛中。混合物经由Celite过滤，并浓缩生成白色固体。此粗制固体溶于2毫升甲醇中，再以二乙醚研磨生成26毫克的标题化合物。

¹H NMR(500Mhz，CD₃OD(呈非对映立体异构体以及旋转异构体形)δ7.1(m，2H)，6.7(m，2H)，5.2(br.m，1H)，4.8-3.6(m，6H)，3.2-2.5(m，4H)，2.5-2.1(m，1H)，1.95(三个s，3H)1.9-1.3(m，6H)，1.1.-0.7(m，6H)。K. N-[N-乙酰基-酪氨酰基-缬氨酰基-(4-苄氧基)脯氨酰基]-3-氨基-4-氧代丁酸。

A步骤. N-(N-烯丙氧羰基-4-苄氧基脯氨酰基)-3-氨基-4-氧代丁酸叔丁酯半卡巴腙

标题化合物之制备系将N-烯丙氧羰基-4-苄氧基脯氨酸及3-氨基-4-氧代丁酸叔丁酯半卡巴腙(T.L.Graybill等，206届美国化学会全会论文摘要Abstracts of papers，206th National Meeting of the American ChemicalSociety，摘要Abstract MEDI-235。芝加哥Chicago，IL.(1993))在如上报告(化合物H，C步骤)之类似肽偶合条件下反应。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ9.05(br.s，1H)，7.85(br.m，1H)，7.4-7.2(m，5H)，7.15(br.s，1H)，6.55(br.s，1H)，5.9(m，1H)，5.1-4.9(br.m，2H)，4.65-4.4(m，4H)，4.2(br.m，1H)，3.75-3.5(m，2H)，2.75-2.55(m，2H)，2.5(br.m，1H)，2.25(br.m，1H)1.4(s，9H)。

B步骤. N-(N-乙酰基-酪氨酰基-缬氨酰基-(4-苄氧基脯氨酰基))3-氨基- 4-氧代丁酸叔丁酯半卡巴腙

标题化合物之制备系将N-乙酰基-酪氨酰基-缬氨酸与N-(N-烯丙氧羰基-4-苄氧基脯氨酰基)-3-氨基-4-氧代丁酸叔丁酯半卡巴腙，由化合物H，A步骤所报告之反应条件下反应。

¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ7.35-7.2(m，6H)，7.0(d，2H)，6.65(d，2H)，4.85(m，1H)，4.6-4.45(m，4H)，4.3(br.m，1H)，4.15(m，1H)，3.7(m，1H)，2.95(m，1H)，2.75-2.6(m，3H)，2.35(m，1H)，2.1(m，1H)，1.9(s，3H)，1.4(s，9H)，0.95(d，3H)，0.90(s，3H)。

C步骤. N-(N-乙酰基-酪氨酰基-缬氨酰基-(4-苄氧基脯氨酰基))-3-氨基- 4-氧代丁酸

N-(N-乙酰基-酪氨酰基-缬氨酰基-(4-苄氧基脯氨酰基))-3-氨基-4-氧代丁酸叔丁酯半卡巴腙(270毫克)溶于10毫升25％三氟乙酸于二氯甲烷，再于室温下搅拌3小时。混合物浓缩以生成固体残留物。残留物溶液10毫升的甲醇∶乙酸∶37％甲醛(3∶1∶1)混合物中，再于室温下搅拌1小时。混合物浓缩且生成的残留物以快速层析(SiO₂)纯化，以二氯甲烷/甲醇/甲酸(100∶5∶0.5)洗脱以生成37毫克标题化合物。

¹H NMR(500MHz，CD₂OD(呈1∶1半缩醛之非对映立体异构混合物))δ7.4-7.25(m，5H)，7.0(d，2H)，6.65(d，2H)，4.65-4.05(m，7H)，3.75-3.4(m，2H)，3.05-2.3(m，5H)，2.2-1.95(m，2H)，1.90(s，3H)，1.0(d，3H)，0.95(d，3H)。

(a)x＝O

(b)x＝H₂

_(44a)。

(1S，9S)9-氨基-6，10-二氧代-八氢-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸叔丁酯(690毫克；2.32毫摩尔；GB2128984)于二噁烷(16毫升)及水(4毫升)之溶液，在0℃下加入固体碳酸氢钠(292毫克；3.48毫摩尔)再逐滴加入3-苯基丙酰氯(470毫克；2.78毫摩尔)。混合物在室温下搅拌2小时，再加入更多的碳酸氢钠(200毫克；2.38毫摩尔)及3-苯基丙酰氯(100毫克；0.6毫摩尔)。混合物再于室温下搅拌2h，以乙酸乙酯(50毫升)稀释，以饱和的碳酸氢钠洗涤(2×25毫升)，再干燥(MgSO₄)并浓缩。残留物以快速层析纯化(0-50％乙酸乙酯/氯仿)且最后以乙醚研磨使结晶，得到860毫克(86％)白色固体mp.137-138℃；[α]_D ²³-95.1°(c 0.549，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3327，1736，1677，1664，1536，1422 1156；¹H NMR(CDCl₃)δ7.24(5H，m)，6.50(1H，d，J＝7.5)，5.24(1H，m)，4.90(1H，m)，4.60(1H，m)，3.44(1H，m)，2.93(2H，m)，2.84(1H，m)，2.64(1H，m)，2.54(2H，m)，2.26(2H，m)，1.70(4H，m)，1.70(9H，s).MS(FAB，m/z)：430(M⁺+1)，374，242，105，91。

(44b)。如44a般制备自(1S，9S)9-氨基-八氢-10-氧代-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂，-1-羧酸叔丁酯(Attwood等，《化学会志》 J.Chem.Soc.Perkin1，pp.1011-19(1986))，得到810毫克(81％)无色油：[α]_D ²³-33.5(c0.545，CH₂Cl₂)；IR(液膜)3334，2935，1737，1728，1659，1642；¹H NMR(CDCl₃)δ7.24(5H，m)，6.75(1H，d，J＝6.7)，5.27(1H，m)，4.92(1H，m)，3.39(1H，m)，3.03(4H，m)，2.55(3H，m)，2.33(1H，m)，2.17(1H，m)，1.80(5H，m)，1.47(9H，s)，1.39(1H，m)。MS(FAB，m/z)∶416(M⁺+1)，360，211，143，97。(1S，9S)6，10-二氧代-八氢-9-(3-苯基丙酰氨基)-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸(45a)。对(1S，9S)6，10-二氧代-八氢-9-(3-苯基丙酰氨基)-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂，-1-羧酸叔丁酯(44a)(800毫克；1.863毫摩尔)于无水二氯甲烷(5毫升)在0℃之溶液中加入三氟醋酸(5毫升)。溶液在室温下搅拌3小时再浓缩。加无水乙醚(10毫升)至残留物中再于真空下移去。此过程重覆三次以生成晶状固体。固体以乙醚研磨并过滤生成590毫克(85％)的白色晶状固体：m.p.196-197.5℃；[α]_D ²³-129.5°(c0.2，CH₃OH)；IR(KBr)3237，1729，1688，1660，1633，1574，1432，1285，1205；¹HNMR(CD₃OD)δ8.28(1H，d，J＝7.4)，7.22(5H，m)，5.32(1H，dd，J＝5.9，2.9)，4.75(1H，m)，4.51(1H，m)，3.50(1H，m)，3.01(1H，m)，2.91(2H，m)，2.55(2H，m)，2.29(3H，m)，1.95(2H，m)，1.71(2H，m)。分析C₁₉H₂₃N₃O₅之计算值：C，61.12；H，6.21；N，11.25。实测值：C，60.80；H，6.28；N，10.97。MS(FAB，m/z)374(M⁺+1)，242，105，91。

(45b)。制备自(1S，9S)八氢-10氧代-9-(3-苯基丙酰氨基)-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸叔丁酯(44b)，系以化合物45a所述之方法，生成657毫克(96％)的45b，呈晶状固体：mp.198-202℃；[α]_D ²³-86.2°(c0.5，CH₃OH)；IR(KBr)3294，2939，1729，1645，1620，1574，1453，1214；¹HNMR(CD₃OD)δ7.92(1H，d，J＝7.9)，7.20(5H，m)，5.29(1H，m)，4.90(1H，m)，3.47(1H，m)，3.08(2H，m)，2.90(2H，m)，2.55(3H，m)，2.36(1H，m)，1.81(5H，m)，1.43(2H，m)。MS(FAB，m/z)360(M⁺+1)，211，143，91。(46a)。对(1S，9S)6，10-二氧代-八氢-9-(3-苯基-丙酰氨基)-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸(45a)662毫克；1.773毫摩尔)于无水二氯甲烷(9毫升)及无水二甲基甲酰胺(3毫升)之溶液中，于室温下加入双(三苯膦)钯化氯(30毫克)及(3S，2R，S)-3-烯丙氧羰基氨基-2-苄氧基-5-氧代四氢呋喃(Chapman，生物有机与药物化学通讯 Bioorg.Med.Chem.Lett.，2，pp.613-18(1992))(568毫克；1.95毫摩尔)再逐滴加入氢化三正丁锡(1.19克；4.09毫摩尔)。加1-羟基-苯并三唑(479毫克，3.546毫摩尔)至混合物中，且混合物冷却至0℃再加1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(408毫克；2.128毫摩尔)。混合物在室温下搅拌3.25小时，再以乙酸乙酯(50毫升)稀释，以稀盐酸(20毫升)洗二次，以饱和的碳酸氢钠洗二次(20毫升)，以盐水洗一次再干燥(MgSO₄)及浓缩。生成的油以快速层析纯化(0-100％乙酸乙酯/氯仿)生成810毫克(81％)的46a，呈异头物之混合：mp.92-94℃；IR(KBr)3311，1791，1659，1651，1536；¹H NMR(CDCl₃)δ7.49，6.56(1H，2d，J＝6.7，7.8)，7.29(10H，m)，6.37，6.18(1H，2d，J＝7.7，7.6)，5.56，5.34(1H，d，s，J＝5.2)，5.08-4.47(6H)，3.18-2.80(5H)，2.62-2.28(5H)，2.04-1.53(5H)。MS(FAB，m/z)，563(M⁺+1)，328，149，91。

(46b)，制备自45b，以46a所述方法得到790毫克(96％)为玻璃状：mp.58-60℃；IR(KBr)3316，2940，1793，1678，1641，1523，1453，1120；¹HNMR(CDCl3)δ7.28(10H，m)，6.52，6.42(1H，2d，J＝7.2，7.1)，5.53，5.44(1H，d，s，J＝5.2)，5.35(1H，m)，4.6-4.9，4.34(4H，m)，3.1-2.8(6H，m)，2.6-2.1(7H)，1.95-1.05(5H)。MS(FAB，m/z)，549(M⁺+1)，400，310，279，91。

(47a)。[3S，2R，S，(1S，9S)]N-(2-苄氧基-5-氧代四氢呋喃-3-基)-6，10-二氧代-八氢-9-(3-苯基丙酰氨基)-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酰胺(46a)205毫克；0.364毫摩尔)，10％Pd/c(200毫克)及甲醇(20毫升)的混合物在氢下之大气压力下搅拌5小时。混合物过滤再浓缩生成154毫克(90％)，玻璃状：mp.116-118℃；[α]_D ²³-140°(c0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3323(br)，1783，1731，1658，1539，1455，1425；¹H NMR(CD₃OD)δ7.21(5H，m)，5.17(1H，m)，4.73(1H，m)，4.50(2H，m)，4.23(1H，m)，3.38(1H，m)，3.06(1H，m)，2.91(2H，m)，2.73-2.18(6H，m)及2.01-1.59(5H，m)。分析C₂₃H₂₇N₄O₂+H₂O之计算值：C，56.32；H，6.16；N，11.42。实测值：C，56.29；H，6.11；N，11.25。MS(FAB，m/z)473(M⁺+1)，176，149，105，91。

(47b)，制备自46b，利用47a之方法。残留物以快速层析纯化(0-10％甲醇/氯仿)以生成65毫克(52％)的玻璃状物：m.p.87-90℃；[α]_D ²³-167.0°(c0.1，甲醇)；IR(KBr)3329，2936，1786，1727，1637；¹H，NMR(CD₃OD)δ7.23(5H，m)，5.29(1H，m)，4.83(1H，m)，4.59(1H，d，J＝3.6)，4.29(1H，m)，3.3-3.0(3H，m)，2.91(2H，m)，2.70-2.34(5H，m)，2.19(2H，m)，1.75(4H，m)，1.36(2H，m)。分析C₂₃H₃₀N₄O₆+0.5H₂O之计算值：C，59.09；H，6.68；N，11.98。实测值：C，58.97；H，6.68N，11.73。MS(FAB，m/z)459(M⁺+1)，310，149，105，91。

R₁ R₂ R₃

H H

-CH₂-Ph H

(56a)。乙酸(55a)(WO 93 21213)于THF(2毫升)在室温下搅拌并以1-羟基苯并三唑(60毫克，0.448毫摩尔)及二甲氨基丙基-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(47毫克，0.246毫摩尔)处理。5分钟后加水(2滴)并继续搅拌20分钟。加入氯化双(三苯膦)钯(II)(6毫克)继以3-(烯丙氧羰氨基)-4-氧代-5-(2，6-二氯苯甲酰基-氧基)戊酸叔丁酯(WO 93 16710)(103毫克，0.224毫摩尔)于THF(1毫升)之溶液。在室温下以1小时逐滴加入氢化三丁锡(0.09毫升，0.336毫摩尔)。混合物再搅拌3小时并倒入乙酸乙酯中，以1M HCl，NaHCO₃水溶液，盐水洗涤，于MgSO₄上干燥再真空浓缩。残留物以戊烷研磨再丢弃上清液。留下的固体以快速层析纯化(50％乙酸乙酯/己烷)生成标题化合物92毫克(63％)，呈无色油状：[α]_D＝29-29.6°(c 1.1，CH₂Cl₂)；IR(液膜)3377，3365，3332，3312，1733，1691，1650，1599，1515，1366，1261，1153，1068，747；¹H NMR(CDCl₃)68.09(1H，d，J＝6.8)，7.84(1H，s)，7.58(1H，d，J＝8.3)，7.33(8H，m)，7.02(1H，dd，J＝6.9，1.7)，6.33(1H，t，J＝7.2)，5.20(2H，s)，5.12(2H，m)，4.89(1H，dt)，4.65(2H，m)，2.80(2H，m)，1.38(9H，s)。

(56b)，以(56a)所述方法制备，得到标题化合物(66％)为无色油状：IR(液膜)3364，3313，1738，1688，1648，1600，1566，1514，1433，1369，1254，1152；¹H NMR(CDCl₃)δ8.40(1H，d，J7.6)，8.30(1H，s)，7.28(13H，m)，6.20(1H，d，J＝7.6)，5.12(2H，q)，4.86(1H，m)，4.65(2H，q)，4.06(2H，s)，3.07-2.61(6H，m)，1.39(9H，s)。

R¹ R² R³

H H

-CH₂-Ph H

(57a；O)。酯56a(210毫克，0.356毫摩尔)于二氯甲烷(0.5毫升)冷却至0℃，再以三氟醋酸(0.5毫升)处理，搅拌并加温至20℃历30分钟。溶液于减压下蒸发至干，再溶于二氯甲烷中并浓缩(x3)。残留物以乙酸乙酯研磨并以乙醚稀释生成标题化合物162毫克(85％)呈无色固体：m.p.165-8℃(分解)；[α]_D ²³-38.8°(c 0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3332，3275，1723，1658，1649，1597，1581，1562，1526，1432，1385，1258，1218，1206；¹H NMR(d₆-DMSO)δ8.96(1H，d.J＝7.3)，8.34(1H，s)，7.85(1H，dd，J＝7.3)，7.58(3H，m)，7.35(5H，m)，6.29(1H，t，J＝7.3)，5.26(2H，m)，5.15(2H，s)，4.69(3H，m)，2.75(2H，m)。分析C₂₇H₂₃N₃O₉Cl₂之计算值：C，53.66；H，3.84；N，6.95。实测值：C，53.36；H，3.90；N，6.81。M.S.(+FAB)；604(M⁺+1)，285，241，195，173，149，91。

(57b；P)，以57a之方法制备，得到标题化合物(78％)，呈无色晶体：m.p.116-120℃(分解)；[α]_D ²⁶-41.1°(c 0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3299，1739，1715，1689，1666，1645，1598，1563，1518，1432，1209，1151；¹H NMR(d₆-DMSO)δ9.24(1H，s)，8.88(1H，d，J＝7.6)，8.18(1H，d，J＝7.7)，7.60(3H，m)，7.26(10H，m)，6.06(1H，d，J＝7.7)，5.23(2H，Abq)，4.69(3H，m)，3.93(2H，s)，2.78(6H，m)。分析C₃₅H₃₁N₃O₈Cl₂.H₂O之计算值：C，59.16；H，4.68；N，5.91。实测值：C，59.38；H，4.53；N，5.84。M.S.(+FAB)；694，(Cl＝35，37)，(M⁺+1)；692(Cl＝35，35)，(M⁺+1)。

(a)R¹＝OCH₃，R²＝H

(b)R¹＝H，R²＝OCH₃

(65a)。2-硝基-6-甲氧基苯酚(2.62克，15.5毫摩尔)(EP 333176)及10％Pd/c(130毫克)于乙醇(50.0毫升)之混合物在H₂气氛下搅拌75分钟。混合物经由Celite_过滤再立即以对甲苯磺酸(32.0毫克)及原甲酸三乙酯(6.45毫升，38.8毫摩尔)处理，再于N₂气氛下回流加热。经20小时后，对甲苯磺酸(30.0毫克)及三乙基原甲酸酯(6.45毫升，38.8毫摩尔)加入。共44小时的加热后，将反应冷却再于真空下减量。生成的残留物以快速层析纯化(25∶75乙酸乙酯/己烷)得到1.97克(85％)标题化合物为黄色固体：m.p.28-31℃；IR(液膜)1629，1497，1434，1285，1097；¹H NMR(CDCl₃)δ8.09(1H，s)，7.40(1H，d，J＝8.0)，7.28(1H，t，J＝8.0)，6.89(1H，d，J＝8.0)，4.02(3H，s)；¹³C NMR(CDCl₃)δ152.84，145.82，142.50，139.99，125.75，113.42，108.80，56.97。分析C₈H₇N₁O₂.0.1H₂O；C，63.65；H，4.81；N，9.29。实测值：C，63.43，H，4.88，N，9.05。M.S.(+FAB)；150(M¹+1)。

(65b)。对4-羟基苯并噁唑(2.00克14.8毫摩尔)(Musser等，药物化学杂志 J.Med.Chem.，30，pp.62-67(1987))于丙酮(80.0毫升)之悬液中加入无水K₂CO₃(2.25克，16.3毫摩尔)再加碘甲烷(1.38毫升，22.2毫摩尔)。反应在N₂下回流加热4.5小时，再过滤并真空下减量生成粗制产物。生成的残留物以快速层析纯化(25∶75乙酸乙酯/己烷)得到2.0克(91％)标题化合物，呈白色晶状固体：m.p.72-74℃；IR(KBr)3089，1619，1610，1503，1496，1322，1275，1090，1071，780，741；¹H NMR(CDCl₃)δ8.02(1H，s)，7.32(1H，t，J＝8.0)，7.18，(1H，d，J＝8.0)，6.81(1H，d，J＝8.0)，4.04(3H，s)。分析C₈H₇NO₂：C，64.42；H，4.73；N，9.39。实测值：C，64.40；H，4.84；N，9.31；m/z(EI)149(M⁺+1，100％)。

(66a)。向65a(548.6毫克，3.68毫摩尔)于无水THF(18.5毫升)在-78℃，N₂下之搅拌溶液，逐滴加入1.56M正丁基锂/己烷(2.47毫升，3.86毫摩尔)可产生黄色溶液。经在-78℃下搅拌20分钟后，加入呈固体之无水MgBr₂OEt₂(1.045克，4.05毫摩尔)。生成的非均相混合物加温至-45℃再搅拌15分钟。反应混合物再冷却至-78℃，并逐滴加入(S)-Alloc-Asp(叔丁基)H(946.4毫克，3.68毫摩尔)于THF(18.5毫升)之溶液。反应在-78℃下搅拌30分钟，加温至0℃再搅拌1小时。生成的均相反应加温至室温并搅拌16小时。反应以5％碳酸氢钠(3.5毫升)中止再中止，之后THF于真空下移去。生成的水性残留物以二氯甲烷(x 6)萃取。混合的萃取物以盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤并真空下减量生成1.8克粗制产物。快速层析(40∶60乙酸乙酯/己烷)得到1.21克(81％)标题化合物，呈油状，为C-4非对映立体异构之混合体：IR(CH₂Cl₂)3425，2983，1725，1504，1290，1157，1101；¹H NMR(CDCl₃)δ7.35-7.19(2H，m)，6.89-6.81(1H，m)，6.00-5.57(2H，m)，5.32-5.05(3H，m)，4.68-4.35(3H，m)，4.01(3H，s)，2.86-2.59(2H，m)，1.45(9H，s)，1.41(9H，s)；¹³C NMR(CDCl₃)δ171.18，171.09，165.80，165.30，156.71，156.60，145.65，142.76，142.71，140.82，140.72，133.23，125.81，125.72，118.41，118.21，113.07，112.87，108.95，82.16，70.28，69.98，66.52，66.39，57.03，52.57，52.29，37.83，36.86，28.65。分析C₂₀H₂₆N₂O₇.0.6H₂O∶C，57.57；H，6.57；N，6.72。实测值：C，57.49，H，6.34，N，6.60。M.S.(+FAB)；407(M⁺+1)；351，307，154。

(66b)，依66a所述方法制备，得到1.29克(26％，依回收之起始物为68％)标题化合物，呈油状为C-4非对映立体异构混合物：IR(CH₂Cl₂)3400，1725，1625，1505，1369，1354，1281，1263，1226，1158，1092，1048；¹H NMR(CDCl₃)δ7.34-7.24(1H，m)，7.16(1H，d，J＝8.2)，6.79(1H，d，J＝7.9)，6.00-5.50(2H，m)，5.30-5.05(3H，m)，4.70-4.35(4H，m)，4.02(3H，s)，2.90-2.45(2H，m)，1.45-1.41(9H，2x s)。分析C₂₀H₂₆N₂O₇.0.4H₂O之计算值：C，58.07；H，6.53；N，6.77。实测值：C，58.09；H，6.41；N，6.63。M.S.(+FAB)；407(M⁺+1，88％)；351(100)。

(67a)。向66a(481.9毫克，1.19毫摩尔)及Ac-Tyr(^tBu)-Val-Ala-OH(586.3毫克，1.30毫摩尔)于二氯甲烷(3.5毫升)及DMF(3.5毫升)之搅拌溶液中加入氯化双(三苯膦)合钯(II)(18.0毫克)，再逐滴加入氢化三丁锡(0.80毫升，2.96毫摩尔)。加入羟基苯并三唑(320.4毫克，2.37毫摩尔)且混合物冷却至0℃。加入1-乙基-3-[3-(二甲氨基)丙基]碳化二亚胺盐酸(278.2毫克，1.42毫摩尔)，且令混合物加温至室温并搅拌16.5小时。反应以乙酸乙酯稀释，并以1M硫酸氢钠洗二次，以饱和的碳酸氢钠，水及盐水洗二次。有机层干燥(MgSO₄)，过滤并真空下减量以生成2.0克粗制产物。快速层析(95∶5二氯甲烷/甲醇)得到844.0毫克(94％)的标题化合物，呈白色固体：m.p.205℃；IR(KBr)3399，3304，2977，1729，1643，1506，1367，1290，1161；¹HNMR(d₆-DMSO)δ8.24-7.78(4H，m)，7.43-7.32(2H，m)，7.23(2H，d，J＝8.5)，7.16-7.07(1H，m)，6.93(2H，d，J＝8.5)，6.52，6.40(1H，2x d，J＝5.5，J＝5.0)，5.03，4.78-4.49，4.45-4.16(5H，brt，2x m)，4.05，4.04(3H，2x s)，3.08-2.35(14H，m)，2.11-1.89(1H，m)，1.83(3H，s)，1.49-1.32，1.15，1.0-0.81(27H，s，2x m，J＝7.0)；¹³C NMR(d₆-DMSO)δ175.55，175.18，173.88，173.75，173.05，169.23，157.28，148.55，146.16，143.21，136.63，133.55，128.87，127.17，115.78，111.92，84.02，81.50，71.40，61.15，60.05，57.79，53.39，51.62，43.76，40.52，34.58，32.52，31.60，26.35，23.11，22.71，21.76。分析C₃₉H₅₅N₅O₁₀.0.5H₂O之计算值：C，61.40；H，7.40；N，9.18。实测值：C，61.43；H，7.31；N，9.07。M.S.(+FAB)；754(M⁺+1)；698，338，267。

(67b)，依67a之方法制备，得到1.05克(94％)标题化合物，呈细碎白色粉末：m.p.210-213℃(dec)；IR(KBr)3284，2977，1736，1691，1632，1536，1505，1452，1392，1367，1258，1236，1161，1091；¹H NMR(d₆-DMSO)δ8.20-7.75(4H，m)，7.40-7.10(4H，m)，7.00-6.80(3H，m)，6.45，6.34(1H，2xd，J＝5.3，J＝5.0)，5.00-4.10(5H，m)，4.00，3.99(3H，2x s)，3.00-2.25(4H，m)，1.95(1H，m)，1.78(3H，s)，1.39-0.80(27H，m)。分析C₃₉H₅₅N₅O₁₀.0.5H₂O之计算值：C，61.40；H，7.40；N，9.18。实测值：C，61.58；H，7.38；N，8.91。M.S.(+FAB)；754(M⁺+1，30％)；72(100)。

(68a)。加Dess-Martin试剂(1.082克，2.55毫摩尔)(Ireland等，有机化学杂志 J.Org.Chem.，58.p.2899(1993)；Dess等，有机化学杂志 J.Org. Chem.48，pp.415514156(1983))至醇67a(641.0)毫克，0.85毫摩尔)于二氯甲烷(46.0毫升)之搅拌悬液中。生成的混合物搅拌1小时再分配于饱和的硫代硫酸钠：饱和的碳酸氢钠(1∶1，86.0毫升)及乙酸乙酯(86.0毫升)之间。生成的有机相再依序以下列洗涤，饱和的硫代硫酸钠：饱和的碳酸氢钠(1∶)，饱和的碳酸氢钠，及盐水。有机相干燥(MgSO₄)，过滤，并真空下减量以生成660.0毫克的粗制产物。快速层析(94∶6二氯甲烷/甲醇)得到636.0毫克(100％)标题化合物为白色固体：m.p.209℃；[α]_D ²⁴-21.8°(c 0.16，甲醇)；IR(KBr)3395，3294，2977，1722，1641，1535，1505，1161；¹H NMR(CDCl₃)δ8.43-8.16(1H，m)，7.97-7.62(2H，m)，7.49-7.14(3H，m)，7.08-6.95(3H，m)，6.89-6.73(2H，m)，5.81-5.68(1H，m)，5.16-4.86(2H，m)4.53(1H，brt)，4.03(3H，s)，3.16-2.84(4H，m)，2.11-1.84(4H，m)，1.46-1.14(21H，m)，0.92-0.78(6H，m)；¹³CNMR(CDCl₃)δ186.28，173.39，171.90，171.19，171.03，169.89，156.43，154.75，146.32，142.88，140.98，132.31，130.54，126.98，124.73，114.95，111.42，82.44，78.71，58.92，57.20，54.91，53.47，48.77，39.43，38.15，32.79，29.44，28.60，23.55，20.27，19.70，19.34，M.S.(+FAB)；752(M⁺+1)；696，336，265。

(68b)，依酮68a所述方法制备，其得到420毫克(55％)标题化合物，呈白色固体：m.p.211-213℃(dec)；[α]_D ²⁴-23.9°(c 0.82，甲醇)；IR(KBr)3277，3075，1723，1690，1632，1530，1506，1392，1366，1269，1234，1160，1094；¹H NMR(CDCl₃)δ8.15(1H，brs)，7.7(2H，brs)，7.46(1H，t，J＝8.3)，7.24(2H，d，J＝8.3)，7.10(1H，brs)，7.03(2H，d，J＝8.3)，6.83(3H，m)，5.74(1H，q，J＝6.9)，5.00(2H，m)，4.51(1H，t，J＝7.0)，4.07(3H，s)，3.20-2.95(4H，m)，2.00(4H，m)，1.42(3H，d，J＝6.8)，1.35(9H，s)，1.23(9H，s)，0.86(6H，d，J＝6.7)。M.S.(+FAB)；752(M⁺+1，7％)；72(100)。

(69a； R)。酯68a(600.0毫克，0.80毫摩尔)于1∶1二氯甲烷及三氟醋酸(65.0毫升)混合物之溶液，在N₂无水气氛下搅拌1小时。溶液再于真空下减量，以乙醚吸收并再次减量。此过程重覆6次以生成粗制产物为掺白色固体。快速层析(梯度95∶5至80∶20二氯甲烷/甲醇)得到420.8毫克(83％)标题化合物，呈吸潮性白色固体。产物为三种异体于CD₃OD之混合物，含有酮型(c 50％)及其酰氧酮型(在C-4上的二种异构体(c 50％)：m.p.在150℃上分解：[α]_D ²⁴-33.2°(c 0.17，甲醇)；IR(KBr)3300，1715，1658，1650，1531，1517，1204；¹H NMR(CD₃0D)δ7.46-7.19(2H，m)，7.16-6.91(3H，m)，6.70-6.59(2H，m)，5.62-5.49(1H，m)，5.00-4.72(1H，obscurred m)，4.69-4.51(1H，m)，4.49-4.08(2H，m)，4.05-3.89(3H，m)，3.16-2.47(4H，m)，2.05-1.78(4H，m)，1.41-1.11，1.05-0.70(9H，2x m)。分析C₃₁H₃₇N₅O₁₀.3H₂O之计算值：C，53.67；H，6.25；N，10.10。实测值：C，53.76；H，5.56；N，10.28。M.S.(+FAB)；640(M⁺+1)；435，147。

(69b，S)，依酸69a之方法制备，其得到具吸潮性标题化合物252毫克(96％)。产物为三种异构体于CD₃OD之混合物，含有酮型，及其酰氧之缩酮形式(二个C-4上之异构体)。产物为在d₆-DMSO中之单一异构体：m.p.200-203℃(dec.)；[α]_D ²⁴-38.0°(c 0.23，甲醇)；IR(KBr)3289，2968，1718，1713，1658，1634，1548，1517，1506，1461，1453，1393，1369，1268，1228，1174，1092；¹H NMR(d₆-DMSO)δ9.20(1H，brs)，8.71(1H，d，J＝6.2)，8.10(2H，m)，7.83(1H，d，J＝8.7)，7.61(1H，t，J＝8.2)，7.46(1H，d，J＝8.2)，7.08(3H，m)，6.65(2H，d，J＝8.3)，5.50(1H，q J＝6.5)，4.50(1H，m)，4.37(1H，m)，4.20(1H，m)，4.05(3H，s)，3.09-2.77(4H，m)，1.94(1H，m)，1.79(3H，s)，1.23(3H，d，J＝7.0)，0.82(6H，m)。分析C₃₁H₃₇N₅O₁₀.1.5H₂O∶C，55.85；H，6.05；N，10.51。实测值：C，55.21；H，5.69；N，10.13。M.S.(+FAB)；640(M⁺+1，22％)；107(100)。

(99)。5-(2，6-二氯苯基)噁唑(2.71克，12.7毫摩尔；以类似四面体通讯 Tet. Lett.23，p.2369(1972)的方法制备)于四氢呋喃(65毫升)之溶液，在氮气氛下冷却至-78℃。对此溶液中加入正丁基锂(1.5M于己烷之溶液，8.5毫升，13.3毫摩尔)并在-78℃下搅拌30分钟。加入镁化溴醚化物(3.6克，13.9毫摩尔)且溶液令其加温至-45℃历15分钟。反应冷却至-78℃，再逐滴加入醛58(3.26克，12.7毫摩尔；Graybill等，国际蛋白质研究杂志 Int. J.Protein Res.，44，p.173-182(1993))于四氢呋喃(65毫升)。反应搅拌25分钟，再令其加温至-40℃并搅拌3小时，再于室温下1小时。反应加5％NaHCO3(12毫升)中止并搅拌3小时。于真空下移去四氢呋喃，且生成的残留物以二氯甲烷萃取。有机层以饱和的氯化钠溶液萃取，再于硫酸镁上干燥，过滤及浓缩以生成6.14克标题化合物。纯化生成4.79克(80％)99：¹H NMR(CDCl₃)δ1.45(s，9H)，2.7-2.5(m，2H)，2.8(dd，1H)，4.2，4.4(2x d，IH)，4.7-4.5(m，3H)，5.35-5.1(m，2H)，5.6，5.7(2x d，1H)，6.0-5.8(m，1H)，7.2(m，1H)，7.3(m，1H)，7.4(m，2H)。

a R＝H

b R＝COCH₂CH₂Ph

c R＝CH₂Ph

(104a)。无水氯化氢泡腾至(3(S)-叔丁氧羰基氨基-2-氧代-2，3，4，5-四氢-苯并[b][1，4]二氮杂_-1-基)乙酸甲酯(103，1克，2.86毫摩尔)于25毫升乙酸乙酯之溶液中2分钟，再于室温下搅拌1小时。反应蒸发得到2-氧代-3(S)-氨基-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]二氮杂_-1-基醋酸甲酯盐酸盐，呈白色固体。盐酸盐及氢化肉桂酸(0.47克，3.15毫摩尔)溶入20毫升二甲基甲酰胺中，并冷却至0℃。二异丙基乙胺(1毫升，5.72毫摩尔)加至溶液中，再加N-羟基苯并三唑及1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐。经在室温下搅拌18小时后，混合物以150毫升乙酸乙酯稀释，再以10％硫酸氢钠，10％碳酸氢钠，及盐水洗涤。有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤，并蒸发生成粗制固体，其再以快速层析纯化并以7∶3乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱得到600毫克(55％)标题化合物呈白色固体。¹H NMR(CDCl₃)δ7.3-6.85(9H，m)，6.55-6.0(1H，d)，4.88-4.82(1H，m)，4.72-4.65(1H，d)，4.28-4.22(1H，m)，3.95-3.9(1H，m)，3.78(3H，s)，3.65(1H，br，s)，3.28-3.2(1H，m)，2.95-2.84(2H，m)，2.55-2.4(2H，m)。

(105a)。(3(S)-(3-苯基丙酰氨基)-2-氧代-2，3，4，5-四氢-苯并[b][1，4]二氮杂_-1-基)乙酸甲酯(104a)溶于90％甲醇。加氢氧化锂-水合物至反应中，反应在室温下搅拌4小时。反应于真空下蒸发以生成白色固体。此溶于20毫升水中，再酸化至pH5，并以乙酸乙酯萃取以生成304毫克(88％)标题化合物为白色固体。¹H NMR(CDCl₃)δ7.5-6.9(11H，m)，4.92-4.8(1H，m)，4.7-4.58(1H，d)，4.38-4.25(1H，d)，3.88-3.78(1H，m)，3.45-3.25(1H，m)，3.05-2.85(2H，m)，2.55-2.45(2H，m)。

(106a)。N-[1-(2-苄氧基-5-氧代四氢呋喃-3-基氨甲酰基-甲基)-2-氧代-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b][1，4]二氮杂_-3-基]-3-苯基丙酰胺，以制备化合物H(A步骤)之方法制备自105a，得到390毫克(93％)产物，呈非对映立体异构体。¹H NMR(CD₃OD)δ7.58-7.22(14H m)，5.78-5.73(0.5H，d)，5.64(0.5H，s)，5.0-4.72(4H，m)，4.54-4.42(2H，m)，3.82-3.76(0.5H，m)，3.68-3.62(0.5H，m)，3.28-3.21(0.5H，m)，3.19-3.12(0.5H，m)，3.07-2.98(2H，m)，2.78-2.48(4H，m)。生成的产物以制备化合物H(D步骤)之方法转化成106a，得到标题化合物呈白色固体(17％)：¹H NMR(CD₃OD)δ7.54-6.98(9H，m)，5.58-5.44(1H，m)，4.8-4.2(4H，m)，3.96-3.3(2H，m)，3.30-3.05(1H，m)，2.98-2.25(5H，m)。

(104b)。无水的氯化氢泡腾至(3(S)-叔丁氧羰基氨基-2-氧代-2，3，4，5-四氢-苯并[b][1，4]二氮杂_-1-基)醋酸甲酯(103，1克，2.86毫摩尔)于25毫升乙酸乙酯的溶液中历2分钟，再于室温下搅拌1小时。反应蒸发得到2-氧代-3(S)-氨基-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]二氮杂_-1-基乙酸甲酯盐酸盐为白色固体。盐酸盐悬浮于20毫升二氯甲烷中再冷却至0℃。加三乙胺(1.6毫升，11.5毫摩尔)至悬液中，再逐滴加入二氢肉桂酰氯(0.9毫升，6毫摩尔)。混合物加温至室温再搅拌18小时。混合物以25毫升二氯甲烷稀释，再以50毫升水洗二次及以50毫升盐水洗一次。有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤，并蒸发生成黏稠的黄色油，再以快速层析纯化并以1∶1乙酯乙酯/二氯甲烷洗脱得到1.35克(92％)标题产物为白色固体。¹H NMR(CDCl₃)δ7.45-7.02(14H，m)，6.37-6.32(1H，d)，4.78-4.72(1H，m)，4.52-4.3(3H，m)，3.82-3.77(1H，m)，3.74(3H，s)，3.03-2.87(4H，m)，2.58-2.45(2H，m)，2.45-2.35(1H，m)，2.25-2.16(1H，m)。

(105b)。[2-氧代-5-(3-苯基丙酰基)-3-(3-苯基丙酰氨基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]二氮杂_-1-基]乙酸甲酯(104b；680毫克，1.32毫摩尔)以水解105a之步骤水解得到645毫克(98％)标题化合物呈白色固体。¹H NMR(CDCl₃)δ7.58(1H，br，s)，7.5-7.42(1H，m)，7.35-6.95(14H，m)，4.95-4.88(1H，m)，4.64-4.55(1H，d)，4.54-4.45(1H，t)，4.15-4.05(1H，d)，3.75(1H，m)，3.05-2.75(4H，m)，2.58-2.45(2H，m)，2.45-2.28(1H，m)，2.25-2.14(1H，m)。

(106b)。[2-氧代-5-(3-苯基丙酰基)-3-(3-苯基丙酰氨基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]二氮杂_-1-基]乙酸及3-氨基-4-氧代丁酸叔丁酯半卡巴腙，以化合物K(A步骤)之制备步骤偶合以生成350毫克(85％)白色固体。¹H NMR(CDCl₃)δ9.05(1H，br，s)，7.58-7.55(1H，d)，7.5-7.35(1H，m)，7.35-6.95(14H，m)，6.75-6.72(1H，d)，6.25(1H，br.s)，5.25(1H，bs，s)，4.95-4.88(1H，m)，4.8-4.72(1H，m)，4.55-4.4(2H，m)，3.92-3.88(1H，d)，3.73-3.68(1H，m)，2.95-2.8(4H，m)，2.8-2.72(1H，m)，2.62-2.55(1H，m)，2.55-2.45(2H，m)，2.4-2.32(1H，m)，2.2-2.12(1H，m)，1.45(9H，s)。4-氧代-3-{2-[2-氧代-5-(3-苯基丙酰基)-3-(3-苯基丙酰氨基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]二氮杂_-1-基]-乙酰基氨基}丁酸叔丁酯半卡巴腙，如化合物K(C步骤)制备之方法去保护之得到118毫克(47％)的标题化合物呈白色固体。¹H NMR(CD₃OD)δ7.48-6.95(14H，m)，4.65-4.15(6H，m)，3.5-3.4(1H，m)，2.85-2.72(4H，m)，2.65-2.5(1H，m)，2.5-2.34(3H，m)，2.34-2.15(2H，m)。

(104c)。[2-氧代-3-(3-苯基丙酰氨基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]二氮杂_-1-基]乙酸甲酯(104a；500毫克，1.31毫摩尔，碳酸钙(155毫克，1.58毫摩尔)及苄基溴(170微升，1.44毫摩尔)以10毫升二甲基甲酰胺吸收，再加热至80℃历8小时。混合物以150毫升乙酸乙酯稀释，再以50毫升水洗4次。有机层于无水硫酸钠上干燥，过滤并蒸发生成黏稠的黄色油状物，其以快速层析纯化并以二氯甲烷/乙酸乙酯(8∶2)洗脱以生成460毫克(75％)标题化合物呈白色固体。¹H NMR(CDCl₃)δ7.34-7.05(14H，m)，6.32-6.28(1H，d)，4.84-4.76(1H，d)，4.76-4.70(1H，m)，4.43-4.37(1H，d)，4.26-4.18(1H，d)，4.06-4.00(1H，d)，3.79(3H，s)，3.45-3.37(1H，m)，3.02-2.95(1H，m)，2.90-2.82(2H，m)，2.5-2.34(2H，m)。

(105c)之制备系以实施例105a之方法水解酯(102c)而得，生成450毫克(98％)的标题化合物为白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ7.5-7.05(14H，m)，6.4(1H，br.s)，4.85-4.55(2H，m)，4.5-4.21(2H，m)，4.12-3.92(1H，d)，3.45-3.3(1H，m)，3.1-2.8(3H，m)，2.55-2.28(3H，m)。(106c)。[5-苄基-2-氧代-3(S)-(3-苯基丙酰氨基)-2，3，4，5-四氢-苯并[b][1，4]二氮杂_-1-基]乙酸及3(S)-氨基-4-氧代丁酸叔丁酯半卡巴腙，以化合物K(步骤A)制法的偶合，并得到260毫克(85％)的白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ7.35-7.0(15H，m)，4.94-4.88(1H，m)，4.68-4.58(1H，d)，4.57-4.52(1H，m)，4.41-4.34(1H，d)，4.3-4.23(1H，d)，4.1-4.04(1H，d)，3.18-3.11(1H，m)，3.09-2.98(1H，m)，2.78-2.72(2H，t)，2.65-2.57(1H，m)，2.42-2.33(3H，m)。

3(S)-{2-[5-苄基-2-氧代-3(S)-(3-苯基丙酰氨基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]二氮杂_-1-基]乙酰氨基}-4-氧代丁酸叔丁酯半卡巴腙，如化合物K之制法(C步骤)般去保护，得到168毫克(81％)的标题化合物为白色固体。¹H NMR(CD₃OD)δ7.37-7.0(14H，m)，4.75-4.62(1H，m)，4.6-4.45(2H，m)，4.4-4.21(2H，m)，4.15-3.95(2H，m)，3.15-3.0(2H，m)，2.82-2.67(2H，m)，2.65-2.52(1H，m)，2.5-2.32(3H，m)。

(107a)。生成之半卡巴腙系以化合物105b与3-(烯丙氧羰基氨基)-4-氧代-5-(2，6-二氯苯甲酰氧基)戊酸叔丁酯(WO 93 16710)如化合物56a偶合而制备，生成256毫克(58％)标题化合物，呈白色固体。¹H NMR(CDCl₃)δ7.45-7.04(17H，m)，6.45-6.34(2H，m)，5.28-5.21(1H，m)，5.1-5.0(1H，m)，4.95-4.90(1H，m)，4.75-4.70(1H，m)，4.55-4.44(1H，m)，4.32-4.22(1H，dd)，3.99-3.85(1H，dd)，3.85-3.76(1H，m)，3.06-2.83(5H，m)，2.83-2.74(1H，m)，2.6-2.44(2H，m)，2.43-2.33(1H，m)，2.24-2.15(1H，m)，1.45(9H，s)。(108a)制备自107a，利用化合物57a所述之方法，得到156毫克(68％)标题化合物呈白色固体。¹H NMR(CD₃OD)δ7.5-6.9(17H，m)，5.16-5.02(1H，dd)，4.88-4.71(2H，m)，4.62-4.44(2H，m)，4.42-4.28(2H，m)，4.27-4.18(1H，m)，3.47-3.41(1H，m)，2.90-2.60(5H，m)，2.46-2.4(2H，m)，2.39-2.18(2H，m)。

(108b)以化合物69a所述之方法制备，得到标题化合物(50％)呈白色固体。¹H NMR(CD₃OD)δ7.41-6.88(17H，m)，5.6-5.55(0.5H，t)，5.48-5.43(0.5H，t)，4.64-4.45(2H，m)，4.45-4.30(1H，m)，3.93(1.5H，s)，3.90(1.5H，s)，3.47-3.34(1H，m)，3.10-2.85(2H，m)，2.84-2.63(5H，m)，2.6-2.4(2H，m)，2.3-2.1(2H，m)。

(123)。氟化钾(273毫克，4.70毫摩尔)及2-氯苯基甲基硫醇(373毫克，2.35毫摩尔)先后加至(3S)N-(烯丙氧基羰基)-3-氨基-5-溴-4-氧代-戊酸叔丁酯(122；749毫克，2.14毫摩尔；WO 93 16710)于二甲基甲酰胺(20毫升)之搅拌溶液中。混合物搅拌3.5小时，加水中止(50毫升)再以乙酸乙酯萃取(2×50毫升)。混合的有机萃取物以水(4×50毫升)再以盐水(50毫升)洗涤。之后干燥(MgSO₄)并浓缩生成油状物，以快速层析纯化(10-35％乙酸乙酯/己烷)生成832毫克(91％)无色固体：m.p.45-6℃；[α]_D ²⁰-19.0°(c 1.0，CH₂Cl₂)；IR(液膜)3340，2980，2935，1725，1712，1511，1503，1474，1446，1421，1393，1368，1281，1244，1157，1052，1040，995，764，739；¹H NMR(CDCl₃)δ7.36(2H，m)，7.21(2H，m)，5.91(2H，m)，5.27(2H，m)4.76(1H，m)，4.59(2H，d)，3.78(2H，s)，3.36(2H，m)，2.91(1H，dd)，2.74(1H，dd)，1.43(9H，s)。分析C₂₀H₂₆ClNO₅S之计算值：C，56.13；H，6.12；N，3.27；S，7.49。实测值：C，56.08；H，6.11；N，3.26；S，7.54。MS(C.I.)430/28(M⁺+1，3％)，374/2(100)。

(124a)。6-苄基-1，2-二氢-2-氧代-3-(3-苯基丙酰氨基)-吡啶基乙酸(52b；300毫克，0.76毫摩尔)于THF(7毫升)以1-羟基苯并三唑(205毫克，1.52毫摩尔)及1-(3-二甲氨基丙基-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐)搅拌。3分钟后，加水(12滴)且混合物搅拌10分钟再以(3S)N-(烯丙氧羰基)-3-氨基-5-(2-氯苯基甲硫基)-4-氧代戊酸叔丁酯(123)(325毫克，0.76毫摩尔)，氯化双(三苯膦)合钯(II)(20毫克)及氢化三丁锡(0.6毫升，2.28毫摩尔)处理。混合物在室温下搅拌5小时，倒入乙酸乙酯中再以1M HCl水溶液(x2)，碳酸氢钠水溶液，盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。残留物以戊烷研磨再丢弃上清液。层析(硅胶，50％乙酸乙酯/己烷)得到无色的泡沫状物(439毫克，81％)：[α]_D ²¹-18.3°(c 0.5，CH₂C1₂)；IR(KBr)3356，3311，1722，1689，1646，1599，1567，1513，1367，1154；¹H NMR(CDCl₃)δ8.39(1H，d)，8.23(1H，s)，7.24(14H，m)，6.16(1H，d)，4.95(1H，m)，4.63(2H，m)，4.02(2H，s)，3.74(2H，s)，3.27(2H，s)，2.85(6H，m)，1.40(9H，s)。分析C₃₉H₄₂ClN₃O₆S之计算值：C，65.39；H，5.91；N，5.87。实测值：C，65.51；H，5.99；N，5.77。

(124b)以类似124a之相似方法制备自硫醚123及3S(1S，9S)-3-(6，10-二氧代-1，2，3，4，7，8，9，10-八氢)-9-(3-苯基丙酰氨基)-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸(45a)，得到452毫克(50％)无色泡沫：mp 55-7℃[α]_D ²²-94.0°(c0.12，CH₂Cl₂)：IR(KBr)3288，2934，1741，1722，1686，1666，1644，1523，1433，1260，1225，1146，757；¹H NMR(CDCl₃)δ7.35(3H，m)，7.20(7H，m)，6.46(1H，d)，5.21(1H，m)，4.97(2H，m)，4.56(1H，m)，3.75(2H，s)，3.25(3H，m)，2.93(5H，m)，2.71(1H，dd)，2.55(2H，m)，2.30(1H，m)，1.92(3H，m)，1.66(2H，m)，1.42(9H，s)。分析C₃₅H₄₃ClN₄O₇S.0.25H₂O之计算值：C，59.73；H，6.23；Cl，5.04；N，7.96；S，4.56。实测值：C，59.73；H，6.19；Cl，5.10；N，7.79；S，4.58。MS(-FAB)697(M-1，100)。

(125a)。3-(2-(6-苄基-1，2-二氢-2-氧代-3-(3-苯基丙酰氨基)-1-吡啶基)乙酰基-氨基-5-(2-氯苯基甲硫基)-4-氧代戊酸叔丁酯(124a)(400毫克，0.56毫摩尔)于二氯甲烷(3毫升)，在0℃下以三氟醋酸(3毫升)处理再于0℃下搅拌1小时及室温下0.5小时。溶液浓缩再溶于二氯甲烷并再浓缩。此步骤重覆三次。残留物于乙醚中搅拌1小时并过滤生成无色固体(364毫克，99％)：165-7℃；[α]_D ²²-27.7°(c 0.2，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3289，1712，1682，1657，1645，1593，1562，1527，1497，1416，1203，1182；¹H NMR(CDCl₃)δ8.47(1H，d)，8.21(1H，s)，7.70(1H，d)，7.22(14H，m)，6.24(1H，d)，5.03(1H，m)，4.65(2H，m)，4.06(2H，s)，3.69(2H，m)，3.23(2H，m)，2.88(6H，m)。(125b)，以类似125a之方法制备自叔丁酯124b，得到362毫克(93％)无色粉末：mp 76-80℃；[α]_D ²¹-134°(c 0.10，MeOH)；IR(KBr)3309，2935，1725，1658，1528，1445，1417，1277，1219，1175；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.80(1H，d)，8.19(1H，d)，7.31(9H，m)，5.09(1H，m)，4.74(1H，m)，4.63(1H，m)，4.35(1H，m)，3.76(2H，m)，3.28(3H，m)，2.80(5H，m)，2.52(4H，m)，2.16(2H，m)，1.90(3H，m)。分析C₃₁H₃₅Cl₂N₄O₇S.0.25H₂O之计算值：C，57.49；H，5.53；N，8.65；S，4.95。实测值：C，57.35；H，5.43；N，8.45；S，4.88。MS(-FAB)641(M-1，100)。

2-氯苯基甲基碘。2-氯苯基甲基溴(4克，19.47毫摩尔)及NaI(14克，97.33毫摩尔)于丙酮(40毫升)之混合物在回流下搅拌1小时。反应混合物冷却，过滤并真空浓缩。残留物以己烷研磨再过滤。溶液真空浓缩，且生成的油以快速层析(硅胶，己烷)纯化得到标题化合物(4.67克，63％)呈油状：¹H NMR(CDCl₃)δ7.34(4H，m)，4.54(2H，s)。

(201)。(3S)N-(烯丙氧羰基)-3-氨基-5-羟基-4-氧代戊酸叔丁酯(81，Chapman，等，生物有机及药物化学通讯 Bioorg.& Med.Chem.Lett.，2，PP.613-618(1992)0.144克，0.5毫摩尔)及2-氯苯基甲基碘(0.569克，1.5毫摩尔)于CH₂Cl₂(4毫升)与氧化银(0.231克，1毫摩尔)剧烈搅拌，并在38℃下加热40小时。反应混合物冷却，过滤并蒸发滤液。残留物以快速层析纯化(硅胶，0-20％乙酸乙酯于己烷)得到产物呈无色油状(0.138克，67％)；[α]_D ²⁴+3.9°(c 1.3，CH₂Cl₂)；¹H NMR(CDCl₃)δ7.37(4H，m)，5.88(2H，m)，5.26(2H，m)，4.69(2H，s)，4.57(3H，m)，4.50(1H，d)，4.35(1H，d)，3.03(1H，dd)，2.76(1H，dd)，1.42(9H，s)。

(203)。2，4-二氯-6-硝基苯酚(203，40克含有20％水汽)于EtOAc(500毫升)的溶液，利用MgSO₄干燥，过滤且滤块以少量EtOAc洗涤。加入Pt/C(5％硫化物化-2克)且混合物氢化直到H₂停止吸收为止。加入原甲酸三乙酯(160毫升)及对甲苯磺酸(160毫克)且混合物回流4小时。冷却及以过滤移去耗尽之催化剂后溶液以饱和的NaHCO₃溶液，水及盐水洗涤，以MgSO₄干燥再蒸发至干。以己烷研磨得到固体，过滤收集，以己烷洗再干燥得到标题化合物(25.5克，88％)为晶状固体：mp 98-99℃；IR(KBr)3119，1610，1590，1510，1452，1393，1296，1067，850；¹H NMR(CDCl₃)δ8.16(1H，s)，7.69(1H，d，J＝1.9)，7.42(1H，d，J＝1.9)；分析C₇H₃Cl₂NO之计算值：C，44.72；H，1.61；N，7.45；Cl，37.70。实测值：C，44.84；H，1.69；N，7.31；Cl，37.71。

(204)。溴化镁之制备系将Mg(7.45克，0.30摩尔)于THF(516毫升)与I₂(50毫克)及1，2-二溴乙烷(26.3毫升，57.3克，0.30摩尔)在回流下反应2小时，再冷却至-40℃。在上述经由导管快速加入2-锂-5，7-二氯苯并口噁唑在70℃之溶液(由5，7-二氯苯并噁唑(203，28.9克，0.154摩尔)及丁基锂(100毫升，1.52M于己烷)于THF(150毫升)在-70℃下制备)。混合物在-40℃下搅拌1小时，再冷却至-70℃，之后加入(3S)N-(烯丙氧羰基)-3-氨基-4-氧代丁酸叔丁酯(Chapman，等，生物有机与药物化学通讯 Bioorg. & Med.Chem.Lett.，2，PP.613-618(1992))(20.3克，0.078摩尔)于THF(160毫升)之溶液，于低于-60℃下进行。令反应加温至环境温度，搅拌16小时再加氯化铵溶液中止，并以1∶1己烷∶乙酸乙酯600毫升萃取。有机溶液以水及盐水洗涤，以MgSO₄干燥并蒸发成糖浆状(52.9克)。快速层析(SiO₂250克-11份的1∶1己烷∶CH₂Cl₂×2，CH₂Cl₂，5％EtOAc于CH₂Cl₂，10％EtOAc于CH₂Cl₂，20％EtOAc于CH₂Cl₂)得到不纯产物24.6克，其再进一步层析(SiO₂1∶1己烷∶乙醚)得到标题化合物，呈金黄-棕色玻璃状物(22.7克，64％)；IR(液膜)3343，2980，1723，1712，1520，1456，1398，1369，1254，1158，993；¹H NMR(CDCl₃)δ7.60(1H，m)，7.37(1H，m)，5.72(1H，m)，5.64(0.5H，d)，5.10(2.5H，m)，4.7-4.3(4H，m)，2.9-2.6(2H，m)，1.46及1.42(9H混合的，2xs)。MS ES⁺Da/e 445(M+1)⁺Cl3562％，447(M+1)⁺Cl 3740％，389 100％。

(205a)。向THF(200毫升)及水(100毫升)含有NaHCO₃(16.6克，0.2摩尔)之混合物中加入谷氨酸叔丁酯(10克，49.2毫摩尔)。再以20分钟逐滴加入氯甲酸烯丙酯(6.8毫升，64毫摩尔)。混合物搅拌2小时，以EtOAc萃取，以饱和碳酸氢盐溶液，水及饱和盐水溶液洗涤，干燥并蒸发成油205a(9.5克，67.2％)：[α]_D ²⁰-6°(c1.5，MeOH)¹H NMR(D₆-DMSO)δ6.10(1H，d)，5.96-5.88(1H，m)，5.31-5.12(2H，m)，4.45(2H，m)，3.90-3.84(1H，t)，2.18(2H，m)，1.85-1.76(2H，m)，1.36(9H，s)。

(205b)，以类似205a之制备方法得到无色油状(6.27克，88％)：[α]_D ²⁰+16°(c 0.095，MeOH)；IR(KBr)3678，3332，3088，2980，2937，1724，1530，1453，1393，1370，1331，1255，1155，1056，995，935，845，778，757，636，583；¹H NMR(CDCl₃)δ9.24(1H，宽s)，5.94-5.79(1H，m)，5.58(1H，d)，5.33-5.17(2H，m)，4.55(2H，d)，4.38-4.31(1H，m)，2.41-1.95(4H，m)，1.42(9H，s)；分析C₁₃H₂₁NO₆之计算值：C，54.35；H，7.37；N，4.88。实测值：C 54.4；H，7.5；N，4.8。

(206a)。向205a(3.6克，12.5毫摩尔)于THF(100毫升)之溶液，在0℃下加入N-甲基吗啉(1.5毫升，13毫摩尔)再加氯甲酸异丁酯(1.1毫升，13毫摩尔)。15分钟后，此混合物加至-78℃下NaBH₄(0.95克，25毫耳)于THF(100毫升)及MeOH(25毫升)之悬液中。在-70℃下2小时后，混合物加醋酸中止，以Et0Ac稀释，以饱和的碳酸氢盐溶液洗3次，再以水及饱和的盐溶液洗涤，干燥再蒸发。快速层析(2％MeOH于CH₂Cl₂)得到206a呈无色油状(2.4克，70％)：[α]_D ²⁰-10°(c 3.88，CH₂Cl₂)；¹H NMR(CDCl₃)δ5.84(1H，m)，5.34-5.17(3H，m)，4.56-4.53(2H，m)，3.68-3.59(2H，m)，2.98(1H，m)，2.40-2.30(2H，t)，1.84-1.78(2H，m)，1.43(9H，s)；分析C₁₃N₂₃N₅之计算值：C，57.13；H，8.48；N，5.12。实测值：C，57.1；H，8.6；N，6.0。

(206b)，以类似206a之方法制备，得到标题化合物呈浅黄色油状(3.42克，57％)[α]_D ²⁰+14(c 0.166，MeOH)；IR(KBr)3341，3083，2976，2936，2880，1724，1533，1454，1419，1369，1332，1251，1156，1062，997，933，846，777，647；¹H NMR(CDCl₃)δ5.98-5.81(1H，m)，5.35-5.10(3H，m)，4.55(2H，d)，3.70-3.56(3H，m)，2.50-2.47(1H，宽s)，2.37-2.30(2H，m)，1.89-1.74(2H，m)，1.44(9H，s)；分析C₁₃H₂₃NO₅之计算值：C，57.13；H，8.48；N，5.12。实测值：C，56.9；H，8.6；N，5.6。

(207a)。向DMSO(1.51克，19.3毫摩尔)于CH₂Cl₂(25毫升)于-70℃之溶液中加入_酰氯(1.34克，19.3毫摩尔)。在-70℃下10分钟后，(206a)(2.4克，8.8毫摩尔)于CH₂Cl₂(10毫升)之溶液逐滴加入，且混合物搅拌于-70℃下15分钟。加入二异丙基乙胺(3.4克，26.3毫摩尔)且混合物在-25℃下搅拌15分钟，再以EtoAc(50毫升)稀释并以2M硫酸氢钠溶液洗涤，浓缩生成油状物，可立即使用勿需再纯化：¹H NMR(CDCl₃)δ9.5(1H，s)，6.0-5.5(2H，m)，5.5-5.1(2H，m)，4.5(2H，m)，4.2(1H，m)，2.4-2.10(2H，m)，2.05(2H，m)，1.36(9H，s)。

(207b)，以类似207a之方法制备，得到油状物(2.95克，96％)，此可使用于下一步骤中勿需进一步纯化：[α]_D ²⁰+21°(c 0.942，(MeOH)；¹H NMR(CDCl₃)δ9.58(1H，s)，6.05-5.80(1H，m)，5.57(1H，宽s)，5.35-5.18(2H，m)，4.56(2H，d)，4.34-4.24(1H，m)，2.38-2.16(3H，m)，1.96-1.73(1H，m)，1.43(9H，s)。

(208a)。向207a(2.39克，8.8毫摩尔)于MeOH(20毫升)之溶液中加入醋酸钠(0.72克，8.8毫摩尔)及半卡巴肼(0.98克，8.8摩尔)，搅拌过夜，浓缩并以CH₂Cl₂(100毫升)稀释，以水洗，干燥再浓缩。快速层析(2％MeOH于CH₂Cl₂)得到208a(2.10克，73％)呈油状：[α]_D ²⁰-21(c 2.55°，CH₂Cl₂)；¹H NMR(CDCl₃)δ9.98(1H，s)，7.27(1H，d)，5.8(1H，m)，5.5(1H，d)，5.35-5.19(2H，m)，4.58(2H，m)，4.14(1H，m)，2.37(2H，t)，2.09(1H，m)，2.0-1.75(2H，m)；分析C₁₄H₂₄N₄O₅之计算值：C，51.21；H，7.37；N，17.06。实测值：C，50.2；H，7.3；N，16.1。

(208b)，以类似208a之方法制备，得到玻璃状油(2.37克，66％)[α]_D ²⁰+30°(c 0.26，CHCl₃)；IR(KBr)3476，3360，2979，2923，1700，1586，1527，1427，1394，1369，1338，1253，1156，1060，997，929，846，775；1H NMR(CDCl₃)δ9.87(1H，s)，7.09(1H，d)，6.05-5.75(3H，m)，5.58(1H，d)，5.32-5.16(2H，m)，4.54(2H，d)，4.35(1H，m)，2.32-2.26(2H，m)，2.15-1.55(2H，m)，1.41(9H，s)；分析C₁₄H₂₄N₄O₅之计算值：C，51.21；H，7.37；N，17.06。实测值：C，151.0；H，7.5；N，16.7。

211 (b)R¹＝MeSO₂ 212 (b)R¹＝MeSO₂

(c)R¹＝MeCO (c)R¹＝MeCO

(d)R¹＝PhCH₂OCO (d)R¹＝PhCH₂OCO

(e)R¹＝PhCO (e)R¹＝PhCO

(f)R¹＝Fmoc (f)R¹＝Fmoc

(211b)。9-氨基-6，10-二氧代-1，2，3，4，7，8，9，10-八氢-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸叔丁酯(GB 2，128，984；831毫克，2.79毫摩尔)及二异丙基乙胺(1.22毫升，6.99毫摩尔，2.5当量)于CH₂Cl₂(10毫升)之溶液，在氮下以甲磺酰氯(237微升，3.07毫摩尔，1.1当量)处理。混合物搅拌1小时，以EtOAc(71毫升)稀释，并以饱和的NaHCO₃(50毫升)及饱和的氯化钠水溶液(30毫升)洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。快速层析(10-35％EtOAc于CH₂Cl₂)得到211b(806毫克，77％)呈无色固体：mp 68-70℃；[α]_D ²³-109(c 1.09，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3270，2980，2939，1735，1677，1458，1447，1418，1396，1370，1328，1272，1252，1232，1222，1156，1131，991；¹H NMR(CDCl₃)δ6.15(1H，d)，5.31(1H，m)，4.65-4.11(2H，m)，3.47(1H，m)，2.99(3H，s)，2.89(1H，m)，2.72-2.51(2H，m)，2.34(1H，m)，2.26(1H，m)，2.05-1.62(4H，m)，1.47(9H，s)；分析C₁₅H₂₃N₃O₆S之计算值：C，47.97；H，6.71；N，11.19；S，8.54。实测值：C，48.28；H，6.68；N，10.86；S，8.28。MS(+FAB)376(M⁺+1，66％)，320(100)。

(211c)。醋酐(307毫克，3.01毫毫耳)加至9-氨基-6，10-二氧代-1，2，3，4，7，8，9，10-八氢-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸叔丁酯(GB 2，128，984；813.7毫克，2.74毫摩尔)，二异丙基乙胺(884毫克，6.84毫摩尔)及CH₂Cl₂(20毫升)之搅拌混合物中。混合物保持1小时再以EtOAc稀释，以NaHCO₃溶液再以盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩生成无色油状。产物以快速层析纯化(0.5-8％MeOH/CH₂Cl₂)得到211c(804毫克，71％)无色粉末：mp 162-3℃；[α]_D ²³-109(c 1.03，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3358，2974，1733，1693，1668，1528，1462，1431，1406，1371，1278，1271，1250，1233，1217，1154，1124；¹H NMR(CDCl₃)δ6.32(1H，d)，5.29-5.25(1H，m)，4.98-4.85(1H，m)，4.68-4.58(1H，m)，3.55-3.39(1H，m)，2.91-2.66(2H，m)，2.39-2.18(2H，m)，2.03(3H，s)，1.88-1.64(4H，m)，1.47(9H，s)；分析C₁₆H₂₅N₃O₅之计算值：C，56.62；H，7.43；N，12.38。实测值：C，56.62；H，7.43；N，12.36；MS(+FAB)340(M⁺+1，40％)，284(100)。

(211d)。氯甲酸苄酯(1.07克)逐滴加至冰冷却(1S，9S)9-氨基-6，10-二氧代-1，2，3，4，7，8，9，10-八氢-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸叔丁酯(GB2，128，984；1.55克，5.21毫摩尔)，NaHCO₃(0.66克，7.82毫摩尔)，二噁烷(32毫升)及水(8毫升)之搅拌中的混合物中。混合物在5℃下保持15分钟，再于室温下2小时。混合物以EtOAc(50毫升)稀释，以饱和的NaHCO₃溶液洗二次，干燥(MgSO₄)并浓缩。油状残留物以快速层析纯化生成211d(1.98克，88％)无色油状：[α]_D ²⁴-56.4(c 1.0，CH₂Cl₂)；IR(薄膜)3325，2979，2946，1728，1677，1528，1456，1422，1370，1340，1272，1245，1156，1122，1056，916，734，699；¹H NMR(CDCl₃)δ7.29(5H，m)，5.81-5.72(1H，m)，5.26-5.20(1H，m)，5.05(2H，s)，4.69-4.51(2H，m)，3.48-3.36(1H，m)，2.81-2.51(2H，m)，2.34-2.19(2H，m)，1.90-1.54(4H，m)，1.41(9H，s)；分析C₂₂H₂₉N₃O₆.H₂O：C，58.79；H，6.92；N，9.35。实测值：C，59.10；H，6.57；N，9.25；MS(ES+)454(M⁺+Na，87％)，432(M⁺+1，100)。

(211e)。苯甲酰氯(1.61克，11.47毫摩尔)于CH₂Cl₂(15毫升)的溶液，逐滴加至(1S，9S)9-氨基-6，10-二氧代-1，2，3，4，7，8，9，10-八氢-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羰酸叔丁酯(GB 2，128，984；3.1克，10.43毫摩尔)，无水CH₂Cl₂(20毫升)及二异丙基乙胺(4.54毫升，26.06毫摩尔)之搅拌冰冷却混合物中。混合物保持在冷处1小时，再置室温下0.5小时。混合物以CH₂Cl₂稀释，以盐水洗二次，干燥(MgSO₄)再浓缩。残留物以快速层析纯化(0-5％甲醇于CH₂Cl₂中)得到211e(4.0克，96％)的无色玻璃状：mp 74-76℃；[α]_D ³⁰-75.0°(c 0.12，CH₂Cl₂)。IR(KBr)3350，2979，2938，1736，1677，1662，1536，1422，1276，1250，1155；¹H NMR(CDCl₃)δ8.72(2H，m)，7.53-7.40(3H，m)，7.07(1H，d，J＝7.2)，5.30(1H，dd，J＝3.0，5.8)，5.12(1H，m)，4.66(1H，m)，3.51(1H，m)，2.90(2H，m)，2.38(1H，dd，J 13.2，6.8)，2.25(1H，m)，1.9(2H，m)，1.70(1H，m)。分析C₂₁H₂₇N₃O₅.0.5H₂O之计算值：C，61.45；H，6.88；N，10.24。实测值：C，61.69；H，6.71；N，10.18。

(211f)，以类似211e方式制备，除了使用9-芴基甲基氯甲酸酯代替苯甲酰氯，得到白色玻璃状固体211f(2.14克，89％)：mp 190-192℃；[α]_D ²⁵-81.5°(c 0.1，CH₂Cl₂)。IR(KBr)3335，2977，1731，1678，1450，1421，1246，1156，742；¹H NMR(CDCl₃)δ7.60(2H，m)，7.57(2H，m)，7.50-7.26(4H，m)，5.60(1H，d，J＝7.8)，5.28(1H，m)，4.67(2H，m)，4.38(2H，m)，4.23(1H，m)，3.59-3.41(1H，m)，2.92-2.65(2H，m)，2.41-2.21(2H，m)，1.95-1.58(4H，m)，1.47(9H，s)。MS(ES-，m/2)520(M⁺+1，97％)，179(100％)。

(212b)，依化合物212e之相同方法合成(635毫克，85％)，呈无色粉末：mp 209-12℃；[α]_D ²⁴-132(c 0.12，MeOH)；IR(KBr)3308，2940，1717，1707，1699，1619，1469，1456，1442，1417，1391，1348，1339，1330，1310，1271，1247，1222，1175，1152，1133，993，976；¹H NMR(CD₃OD)δ5.35(1H，m)，4.58-4.48(1H，m)，4.46-4.36(1H，m)，3.60-3.42(1H，m)，3.01-2.87(1H，m)，2.95(3H，s)，2.55-2.39(1H，m)，2.32-2.20(2H，m)，2.09-1.89(2H，m)，1.78-1.62(2H，m)；分析C₁₁H₁₇N₃O₆S之计算值：C，41.37；H，5.37；N，13.16；S，10.04。实测值：C，41.59；H，5.32；N，12.57；S，9.76；MS(ES-)。C₁₁H₁₈N₃O₆S(MH⁺)之精确质量数：320.0916。实测值：320.0943。

(212c)，制备自211e，如212e之相同方法呈以玻璃状固体(595毫克，77％)：mp＞250℃；[α]_D ²⁴-153(c 0.10，MeOH)；IR(KBr)3280，2942，1742，1697，1675，1650，1616，1548，1470，1443，1281，1249，1202，1187，1171；¹H NMR(CD₃OD)δ5.35-5.31(1H，m)，4.81-4.71(1H，m)，4.61-4.46(1H，m)，3.59-3.44(2H，m)，3.11-2.94(1H，m)，2.58-2.39(1H，m)，2.36-2.19(2H，m)，2.11-1.83(3H，m)，1.99(3H，s)，1.78-1.56(2H，m)；分析C₁₂H₁₇N₃O₅：C，50.88；H，6.05；N，14.83。实测值：C，50.82；H，6.02；N，14.58；MS(ES-)282(M-1，100％)：C₁₂H₁₈N₃O₅(MH⁺)之精确质量数：284.1246。实测值：284.1258。

(212d)，制备自211d，利用如化合物212e之相同方法呈无色晶体(170毫克，97％)：mp 60-100℃；[α]_D ²²-103(c 0.10，MeOH)；IR(KBr)3341，2947，1728，1675，1531，1456，1422，1339，1272，1248，1221，1174，1122，1056，982，699；¹H NMR(CDCl₃)δ7.35(5H，s)，5.65(1H，d)，5.48-5.40(1H，m)，5.10(2H，s)，4.76-4.57(2H，m)，3.49-3.30(2H，m)，2.92-2.59(2H，m)，2.40-2.27(2H，m)，1.97-1.67(4H，m)；MS(ES-)374(M-1，100％)。C₁₈H₂₂N₃O₆(MH⁺)之精确质量数：376.1509。实测值：376.1483。C₁₈H₂₁N₃O₆Na(NMa⁺)之精确质量数：398.1328。实测值：398.1315。

(212e)。THF(20毫升)加至叔丁酯211e之冰冷搅拌溶液中(4.15克，10.34毫摩尔)于无水CH₂Cl₂(20毫升)。混合物保留冷处历1.5小时，再于室温下2.5小时，之后浓缩。TFA经由残留物CH₂Cl₂/乙醚及乙醚溶液之重覆浓缩而移去。残留物以醚最终研磨而生成212e，3.05克(85％)的白色玻璃状固体：mp 118-126℃；[α]_D ²⁴-70.5°(c 0.1，CH₂Cl₂)。IR(KBr)3361，2943，1737，1659，1537，1426，1220，1174；¹H NMR(CDCl₃)δ7.80(2H，m)，7.54-7.33(4H，m)，8.83(brs)，5.44(1H，m)，5.26-5.13(1H，m)，4.66(1H，m)，3.59-3.41(1H，m)，2.97，2.76(2H，2m)，2.36(2H，m)，1.98(2H，m)，1.75(2H，m)。MS(ES-，m/z)344(M-1，100％)。

(212f)，制备自211f，以如211e之相同方法得96％产率：mp 120-126℃；[αl_D ²⁵-72.5°(c 0.1，CH₂Cl₂)。IR(KBr)3406，2950，1725，1670，1526，1449，1421，1272，1248，1223，1175，761，741；¹H NMR(CDCl₃)δ7.76(2H，m)，7.62-7.26(4H，m)，6.07，5.76(2H，brs，d，d，J＝2.9)，5.46，5.36(1H，2m)，4.79-4.54(2H，m)，4.77(2H，m)，4.21(1H，m)，3.41(1H，m)，2.89(1H，m)，2.69(1H，m)，2.35(2H，m)，1.98，1.73(4H，2m)。MS(ES^-，m/z)462(M⁺-1，50％)，240(100％)。

(213) (c)R¹＝MeCO (214) (c)R¹＝MeCO

(e)R¹＝PhCO (e)R¹＝PhCO

(213c)，合成自212c，以如化合物213e之相同方法得到非对映立体异构体之混合物(193毫克，36％)呈无色晶体：IR(KBr)3272，1799，1701，1682，1650，1555，1424，1412，1278，1258，1221，1122，937；¹H NMR(CDCl₃)δ7.41-7.28(5H，m)，6.52(0.5H，d)，6.38(0.5H，d)，6.22(0.5H，d)，5.57(0.5H，d)，5.36(0.5H，s)，5.10-5.05(1H，m)，5.00-4.45(5.5H，m)，3.19-2.84(3H，m)，2.72-2.56(1H，m)，2.51-2.25(2H，m)，2.02(3H，s)，1.98-1.70(3H，m)，1.66-1.56(3H，m)；分析C₂₃H₂₈N₄O₇：C，58.47；H，5.97；N，11.86。实测值：C₂₃H₂₈N₄O₇之计算值：C，58.47；H，5.97；N，11.86。实测值：C，58.37；H，6.09；N，11.47.MS(ES-)471(M-1，100％)。C₂₃H₂₉N₄O₇(MH⁺)之精确质量数：473.2036；实测值：473.2012。C₂₃H₂₈N₄O₇Na(Mna⁺)之精确质量数：495.1856；实测值：495.1853。

(213e)。氢化三丁锡(2.2毫升，8.18毫摩尔)逐滴加至酸212e(1.95克，5.6毫摩尔)，(3S，2RS)3-烯丙氧羰基氨基-2-苄氧基-5-氧代四氢呋喃(Chapman，生物有机及药物化学通讯 Bioorg.& Med.Chem.Lett.，2，pp.615-618(1992)；1.80克，6.16毫摩尔)及(Ph₃P)₂PdCl₂(50毫克)于无水CH₂Cl₂(36毫升)在无水氮及搅拌下之溶液中。5分钟后，加入1-羟基苯并三唑(1.51克，11.2毫摩尔，6.72毫摩尔)，于冷却后(冰/H₂O)再加乙基二甲氨基丙基碳化二亚胺盐酸盐(1.29克，6.72毫摩尔)。5分钟后，冷却浴移去且混合物保持在室温下4小时，以EtOAc稀释，以1M HCl，盐水，NaHCO₃饱和水溶液及盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。快速层析(硅胶，0-90％EtOAc/CH₂Cl₂)得到白色固体的产物，(2.34克，78％)：IR(KBr)3499，1792，1658，1536，1421，1279，1257，1123，977，699；¹H NMR(CDCl₃)δ7.81(2H，m)，7.54-7.34(8H，m)，7.1，6.97，6.89，6.48(2H，m，d，J 7.7，d，J＝7.5，d，J＝7.6)，5.57，5.28(1H，d，J＝5.2，s)，5.23-5.07(2H，m)，4.93-4.42，3.22-2.70，2.51-2.26，2.08-1.69，1.22(15H，5m)。分析C₂₈H₃₀N₄O₇.0.5H₂O之计算值：C，61.87；H，5.75；N，10.32。实测值：C，62.02；H，5.65；N，10.25。(214c)，合成自213c，利用和自213e合在214e之相同方法，生成无色晶体(140毫克，99％)：mp 90-180℃；[α]_D ²²-114(c 0.10，MeOH)；IR(KBr)3334，3070，2946，1787，1658，1543，1422，1277，1258；1H NMR(d⁶-DMSO)δ8.66(1H，m)，8.18(1H，d)，6.76(1H，s)，5.08(1H，m)，4.68(1H，m)，4.30(1H，m)，2.92-2.70(2H，m)，2.27-2.06(3H，m)，1.95-1.72(4H，m)，1.85(3H，s)，1.58(2H，m)；MS(ES-)381(M-1，100％)；C₁₆H₂₃N₄O₇(MH⁺)之精确质量数：383.1567。实测值：383.1548。

(214e)。213e(2.29克，4.28毫摩尔)，10％Pd/c(1.8克)及MeOH(160毫升)之混合物，在H₂及大气压力下搅拌6.3小时。经过滤及浓缩后，以新鲜催化剂重覆氢化作用(1.8克)历5小时。于过滤及浓缩后，残留物以二乙醚研磨，过滤并以乙醚充分洗涤得到214e，呈白色固体(1.67克，88％)mp143-147℃；[α]_D ²³-125°(c 0.2，CH₃OH)。IR(KBr)3391，1657，1651，1538，1421，1280，1258；¹H NMR(CD₃OD)δ7.90(2H，m)，7.63-7.46(3H，m)，5.25(1H，m)，5.08-4.85(1H，m)，4.68-4.53(2H，m)，4.33-4.24(1H，m)，3.62-3.44，3.22-3.11，2.75-2.21，2.15-1.92，1.73-1.66(11H，5m)。分析C₂₁H₂₄N₄O₇.H₂O之计算值：C，54.54；H，5.67；N，12.11。实测值：C，54.48；H，5.63；N，11.92。

(d)R₁＝PhCH₂OCO

(e)R₁＝PhCO

(215c)，合成自214c，以如化合物215e之相同方法，得到非对映立体异构体之混合物，呈白色玻璃状固体(398毫克，84％)IR(KBr)3338，2977，1738，1658，1562，1541，1433，1368，1277，1150；¹H NMR(CDCl₃)δ7.36-7.32(3H，m)，6.91(1H，d)，6.30(1H，d)，5.15-5.09(1H，m)，5.01-4，88(1H，m)，4.61-4.44(2H，m)，4.37-4.08(3H，m)，3.32-3.18(1H，m)，3.04-2.89(1H，m)，2.82-2.51(4H，m)，2.39-2.29(1H，m)，2.08-1.64(4H，m)，2.02(3H，s)；分析C₂₈H₃₄N₄Cl₂O₉之计算值：C，52.26；H，5.64；N，8.71。实测值：C，52.44；H，5.87；N，8.16。MS(ES-)645/3/1(M-1，26％)，189(81)，134(100)。C₂₈H₃₆N₄Cl₂O₉Na(MNa⁺)之精确质量数计算值：643.1938：实测值：643.1924。C₂₈H₃₆N₄Cl₂O₉Na(MNa⁺)之精确质量数：665.1757。实测值：665.1756。

(215d)，合成自214d，以如化合物215e之相同方法得到非对映立体异构体之混合物(657毫克，70％)呈玻璃状白色固体：IR(KBr)3420，3361，2975，2931，1716，1658，1529，1434，1367，1348，1250，1157，1083，1055；¹H NMR(CDCl₃)δ7.32(8H，m)，7.14(1H，d)，5.81(1H，d)，5.15(1H，m)，5.07(2H，s)，4.74-4.65(1H，m)，4.58-4.22(4H，m)，4.15-4.06(1H，m)，3.72(1H，m)，3.32-3.21(1H，m)，3.04-2.94(1H，m)，2.69-2.52(3H，m)，2.33-2.27(1H，m)，1.95-1.59(4H，m)，1.28(9H，s)；分析C₃₄H₄₀N₄Cl₂O₁₀.0.5H₂O之计算值：C，54.70；H，5.54；N，7.50。实测值：C，54.98；H，5.59；N，7.24。MS(ES-)737/5/3(M-1，22％)，193/1/89(100)。C₃₄H₄₁N₄Cl₂O₁₀(MH⁺)之精确质量数735.2120。实测值：735.2181。

(215e)，氢化三丁锡(4.6毫升；11.4毫摩尔)逐滴加至(3S，4RS)(N-烯丙氧羰基)-3-氨基-5-(2，6-二氯苯甲酰氧基)-4-羟基戊酸叔丁酯(以类似Revesz等，四面体通讯 Tetrahedron.Lett.，35，PP.9693-9696(1994)的方法制备(2.64克；5.7毫摩尔)(Ph₃P)₂PdCl₂(50毫克)，CH₂Cl₂(100毫升)及DMF(20毫升)在室温下之搅拌混合物中。混合物再搅拌10分钟，之后加入1-羟基苯并三唑(1.54克，11.4毫摩尔)。混合物冷却至0℃，再加入乙基二甲氨基丙基羰化二亚胺盐酸(1.31克；6.84毫摩尔)。混合物保持在此温度下15分钟，再于室温下17小时。混合物以EtOAc(300毫升)稀释，以1M Hcl(2×100毫升)，饱和的NaHCO₃水溶液(3×100毫升)及盐水(2×100毫升)洗涤，干燥(MgSO₄)及浓缩。残留物以快速层析纯化(2-5％(MeOH/CH₂Cl₂))得到3.24克(81％)的215e，为玻璃状固体：mp 106-110℃；IR(KBr)3354，1737，1659，1531，1433，1276，1150；¹H NMR(CDCl₃)δ7.80(2H，dd，J＝7.9及1.5)，7.75-7.26(6H，m)，7.14-6.76(2H，m)，5.30-5.02(2H，m)，4.63-4.11(5H，m)，3.44-3.26(2H，m)，3.10-2.30(5H，m)，2.10-1.60(5H，m)，1.44(9H，s)；分析C₃₃H₃₈Cl₂N₄O₉.0.75H₂O之计算值：C，55.12；H，5.54：N，7.79；Cl，9.86。实测值：C，55.04；H，5.34；N，7.80；Cl，10.24。MS(ES+)709/7/5(M+1)，378(59)，324(64)，322(100)。

(216c)，以化合物216e之相同方法合成自215c。呈玻璃状白色固体(300毫克，83％)：mp 80-125℃；[α]_D ²³-89.1(c 1.08，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3356，2979，2935，1740，1659，1532，1434，1369，1276，1260，1151；¹H NMR(CDCl₃)δ7.39-7.32(3H，m)，7.13(1H，d)，6.34(1H，d)，5.22-5.17(1H，m)，5.11(1H，d)，5.04(1H，d)，4.99-4.88(2H，m)，4.64-4.52(1H，m)，3.29-3.11(1H，m)，3.05-2.67(4H，m)，2.39-2.29(1H，m)，2.02(3H，s)，1.98-1.75(4H，m)，1.46(9H，s)；分析C₂₈H₃₄N₄Cl₂O₉之计算值：C，52.42；H，5.34；N，8.73。实测值：C，52.53；H，5.70；N，7.85。MS(ES-)643/41/39(M-1，100％)。C₂₈H₃₅N₄Cl₂O₉(MH⁺)之精确质量数：641.1781。实测值：641.1735。分析C₂₈H₃₄N₄Cl₂O₉Na(Mna⁺)之计算值：663.1601。实测值：663.1542。

(216d)，以如化合物216e之相同方法合成自215d，得到216d呈白色玻璃状固体(688毫克，68％)；mp 90-170℃；[α]_D ²⁵-83.4(c 1.01，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3338，2933，1736，1670，1525，1433，1417，1368，1258，1151，1056，1031；¹H NMR(CDCl₃)δ7.33(8H，m)，7.18(1H，d)，5.65(1H，d)，5.19(1H，m)，5.09(2H，s)，4.98-4.86(1H，m)，4.82-4.49(2H，d)，3.30-3.07(1H，m)，3.05-2.59(4H，m)，2.42-2.27(1H，m)，2.18-1.59(5H，m)，1.42(9H，s)；MS(ES-)737/5/3(M，13％)，185(100)。

(216e)。Dess-Martin试剂(3.82克；9.0毫摩尔)加至醇215e(3.17克；4.5毫摩尔)于CH₂Cl₂(100毫升)之搅拌溶液中。混合物搅拌1小时，以EtOAc(300毫升)稀释，再以1：1饱和的Na₂S₂O₃及饱和的NaHCO₃(100毫升)混合物洗涤及以盐水洗涤(100毫升)。混合物干燥(MgSO₄)再浓缩。残留物以快速层析纯化，得到2.2克(70％)的216e，呈无色固体：mp 102-107℃；[α]_D ³²-82.5(c 0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3374，2937，1739，1661，1525，1433，1275，1260，1152；¹H NMR(CDCl₃)δ7.85-7.78(2H，m)，7.57-7.32(6H，m)，7.09(1H，d，J＝7.9)，7.01(1H，d，J 7.3)，5.25-5.16(1H，m)，5.16-5.05(1H，m)，5.15(1H，d)，5.05(1H，d)，4.99-4.90(1H，m)，4.68-4.54(1H，m)，3.31-3.17(1H，m)，3.17-2.72(4H，m)，2.45-2.35(1H，m)，2.30-1.66(5H，m)，1.44(9H，s)；分析C₃₃H₃₆Cl₂N₄O₉.0.5H₂O之计算值：C，55.62；H，5.23；N，7.86；Cl，9.95。实测值：C，55.79；H，5.15；N，7.80；Cl，9.81。MS(ES+)729/7/5(M+Na)，707/5/3(M+1)，163(100％)。

(217c)，如化合物217e之相同方法合成自216c，呈玻璃状白色固体(166毫克，66％)：mp 85-175℃；[α]_D ²⁵-156(c 0.13，MeOH)；IR(KBr)3373，2929，1742，1659，1562，1533，1433，1412，1274，1266，1223，1197，1145，1138；¹H NMR(CD₃OD)δ7.38(3H，s)，5.14-5.03(1H，m)，4.49-4.32(2H，m)，3.50-3.27(1H，m)，3.11-2.92(1H，m)，2.84-2.62(2H，m)，2.46-2.11(2H，m)，2.05-1.46(5H，m)，1.92(3H，s)；分析C₂₄H₂₆N₄Cl₂O₉.H₂O：C，47.77；H，4.68；N，9.29。实测值：C，47.75；N，4.59；N，9.07。MS(ES+)627/5/3(M+K)，21％)，611/9/7(M+Na，87)，589/7/5(M⁺+1，71)，266(100)；C₂₄H₂₇N₄Cl₂O₉(MH+)之精确质量数：585.1155。实测值：585.1134。

(217d)，以如化合物217e之相同方法合成自216d，得到217d呈白色玻璃状固体(310毫克，96％)：mp 85-110℃；[α]_D ²⁴-85.9(c 0.13，MeOH)；IR(KBr)3351，2945，1738，1669，1524，1433，1258，1147，1057；¹H NMR(CD₃OD)δ7.56(4H，m)，7.45(5H，m)，5.32(2H，m)，5.20(2H，s)，4.76-4.48(3H，m)，3.65-3.38(3H，m)，3.27-3.09(2H，m)，3.03-2.89(2H，m)，2.65-2.24(3H，m)，2.19-1.62(5H，m)；MS(ES-)679/7/5(M-1，100％)；C₃₀H₃₁N₄Cl₂O₁₀(MH⁺)之精确质量数：677.1417。实测值：677.1430。

(217e)，TFA(25毫升)逐滴加至酯216e(2.11克，3.0毫摩尔)之冰冷搅拌溶液中。混合物在0℃下搅拌20分钟，再于室温下1小时。混合物蒸发至干，再以乙醚共蒸发三次。加入无水乙醚(50毫升)并过滤可得1.9克(98％)的217e，呈无色固体：mp 126-130℃；[α]_D ³⁰-122.0(c 0.1，MeOH)；IR(KBr)3322，1740，1658，1651，1532，1433，1277，1150；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.87(1H，d，J＝7.4)，8.61(1H，d，J＝7.8)，7.92-7.86(2H，m)，7.65-7.43(6H，m)，5.25-5.12(3H，m)，4.94-4.60(2H，m)，4.44-4.22(1H，m)，3.43-3.10(1H，m)，3.00-2.52(3H，m)，2.45-2.10(3H，m)，2.10-1.75(2H，m)，1.75-1.50(2H，m)；分析C₂₉H₂₈Cl₂N₄O₉.1H₂O之计算值：C，52.34；H，4.54；N，8.42；Cl，10.66。实测值：C，52.02；H，4.36；N，8.12；Cl，10.36。MS(ES-)649/7/5(M-1)，411(100％)。

(218b)，以类似化合物215e之方法制备自酸212b及99，得到非对映立体异构混合物(865毫克，80％)呈无色固体：IR(KBr)3298，2974，1723，1659，1544，1518，1430，1394，1370，1328，1273，1256，1156，1134；¹H NMR(CDCl₃)δ7.45-7.28(4H，m)，7.26-7.15(2H，m)，5.26-5.10(2H，m)，4.80-4.67(1H，m)，4.59-4.42(2H，m)，3.32-3.17(1H，m)，2.96(3H，2xs)，2.93-2.79(1H，m)，2.71-2.53(4H，m)，2.38-2.28(1H，m)，2.07-1.81(4H，m)；分析C₂₈H₃₅N₅Cl₂O₉S.0.5H₂O之计算值：C，48.21；H，5.20；N，10.03。实测值：C，48.35；H，5.26；N，9.48。MS(ES+)714/2/0(M+Na，25％)，692/90/88(M⁺+1，51)，636/4/2(38)，246(100)。C₂₈H₃₆N₅C1₂O₉S(MH⁺)之精确质量数：688.1611。实测值：688.1615。

(219b)，以类似化合物216e之方法制备自218b，呈掺白色粉末(675毫克，81％)：mp 100-200℃；[α]_D ²⁴-84.9(c 1.01，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3336，2978，2936，1719，1674，1510，1433，1421，1369，1329，1274，1257，1155，991，789；¹H NMR(CDCl₃)δ7.47-7.38(4H，m)，7.24(1H，d)，5.61-5.53(1H，m)，5.48(1H，d)，5.38-5.30(1H，m)，4.67-4.45(2H，m)，3.48-3.18(2H，m)，3.04-2.90(2H，m)，2.97(3H，s)，2.69-2.54(1H，m)，2.42-2.32(1H，m)，2.22-2.15(1H，m)，2.07-1.93(3H，m)，1.71-1.65(2H，m)，1.38(9H，s)；分析C₂₈H₃₃N₃Cl₂O₉S之计算值：C，48.98；H，4.84；N，10.20；S，4.67。实测值：C，48.73；H，4.95；N，9.65；S，4.54。MS(ES+)692/90/88(M⁺+1，100％)，636/4/2(71)。C₂₈H₃₄N₅Cl₂O₉S(MH⁺)之精确质量数：686.1454。实测值：686.1474。

(220b)，以类似化合物217e之方式制备自219b，呈浅乳色粉末(396毫克，87％)：mp 100-200℃；[α]_D ²⁷-129(c 0.12，MeOH)；IR(KBr)3310，3153，1713，1667，1557，1510，1432，1421，1329，1273，1258，1221，1193，1153，1134，992，789；¹H NMR(d₆DMSO)δ7.88(1H，s)，7.81-7.60(4H，m)，5.49-5.28(1H，m)，5.24-5.14(1H，m)，4.46-4.22(2H，m)，3.30-3.03(2H，m)，2.97-2.76(3H，m)，2.96(3H，s)，2.46-2.24(1H，m)，2.16-2.05(1H，m)，2.03-1.78(3H，m)，1.68-1.46(2H，m)；MS(ES-)632/30/28(M-1，68％)，149/7/5(100)。C₂₄H₂₆N₅Cl₂O₉S(MH⁺)之精确质量数：630.0828。实测值：630.0852。

(221b)，以类似化合物215e之相同方法，制备自酸212b及(3S，4RS)N-(烯丙氧羰基)-3-氨基-4-羟基-4-(5，7-二氯苯并噁唑-2-基)丁酸叔丁酯(204)，得到非对映立体异构体之混合物(460毫克，70％)呈玻璃状：IR(液膜)3325，1725，1664，1453，1399，1373，1327，1274，1256，1155；¹H NMR(CDCl₃)δ7.57(1H，m)，7.36(2H，m)，6.06(1H，t)，5.29(2H，m)，4.79(1H，m)，4.47(1H，m)，3.23(1H，m)，2.97及2.94(3H合并，2x s)，2.9-2.4(4H，m)，2.30(1H，m)，1.96(4H，m)，1.41及1.37(9H合并，2x s)。MS ES Da/e 660(M-1)^-Cl³⁵100％，662(M-1)^-Cl³⁷。

(221e)，以类似化合物215e所用之方法，制备自酸(212e)及(3S，4RS)N-(烯丙氧羰基)-3-氨基-4-羟基-4-(5，7-二氯苯并噁唑-2-基)丁酸叔丁酯(204)，得到非对映立体异构混合物(613毫克，87％)呈玻璃状：IR(film)3328，1729，1660，1534，1454，1422，1399，1276，1254，1155；¹H NMR(CDCl₃)δ7.80(2H，d)，7.60-7.35(5H，m)，7.05(2H，m)，5.13(3H，m)，4.74(1H，m)，4.51(1H，m)，3.25(1H，m)，3.1-2.6(5H，m)，2.33(1H，m)，2.1-1.5(5H，m)，1.43及1.41(9H combined，2x s)。MS ES⁺Da/e 688(M+1)⁺Cl³⁵55％，690(M+1)⁺Cl³⁷35％，328100％。(222b)，以类似化合物216e之方法制备自221b，呈无色玻璃(371毫克，86％)：[α]_D ²⁶-81.0(c 0.1，CH₂Cl₂)：IR(KBr)3324，2979，2936，1726，1664，1394，1370，1328，1155，991；¹H NMR(CDCl₃)δ7.78(1H，d)，7.57(2H，m)，5.87(1H，d)，5.69(1H，m)，5.47(1H，m)，4.55(2H，m)，3.24(2H，m)，3.0(5H，m+s)，2.59(1H，m)，2.39(1H，m)，2.2-1.7(4H，m)，1.65，(1H，m)，1.40(9H，s)。

(222e)，以类似化合物216e之相同方法制备自221e，得到无色玻璃(480毫克，84％)：[α]_D ²⁵-86.4°(c 0.1CH₂Cl₂)；IR(KBr)3337，2978，2938，1728，1657，1534，1456，1422，1395，1370，1277，1250，1154；¹H NMR(CDC1₃)δ7.80(3H，m)，7.50(4H，m)，7.20(1H，d)，7.02(1H，d)，5.60(1H，m)，5.28(1H，m)，5.15(1H，m)，4.11(1H，m)，3.34(2H，m)，2.96(3H，m)，2.40(1H，m)，2.20(1H，m)，1.92(2H，m)，1.67(2H，m)，1.38(9H，s)。MSES^-Da/e 684(M-1)^-Cl³⁵47％，686(M-1)^-Cl³⁷32％。

(223b)，以类似化合物217e之方法制备自222b，可得掺白色固体(257毫克，78％)：[α]_D ²⁵-105.7°(c 0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3321，1723，1663，1407，1325，1151，992；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.96(1H，d)，8.18(1H，d)，7.96(1H，d)，5.50(1H，m)，5.15(1H，m)，4.30(2H，m)，3.06(2H，m)，2.87(5H，m+s)，2.29(1H，m)，1.99(4H，m)，1.56(2H，m)。

(223e)，以类似化合物217e所用方法，制备自222e，得到浅乳色固体(311毫克，78％)：mp 167-180℃；[α]_D ²³-88.6°(c 0.1CH₂Cl₂)；IR(KBr)3331，1724，1658，1534，1458，1421，1279，1256，991；¹H NMR(CDCl₃)δ7.77(4H，m)，7.4(5H，m)，5.57(1H，bs)，5.33(1H，bs)，5.47(1H，q)，4.56(1H，bd)，3.60(2H，m)，3.20(3H，m)，2.76(1H，m)，2.36(1H，dd)，2.0(3H，m)，1.66(1H，m)。MS ES Da/e 628(M-1)^-Cl³⁷7％，630(M-1)^-Cl³⁷2.3％，584100％。

224e R₁＝PhCO，X＝S 226e R₁＝PhCO，X＝S

225e R₁＝PhCO，X＝O 227e R₁＝PhCO，X＝O

(224e)。1-羟基苯并三唑(0.23克，1.71毫摩尔)及乙基二甲氨基丙基碳化二亚胺盐酸盐加至酸212e(0.295克，0.853毫摩尔)于THF(5毫升)之搅拌溶液中。5分钟后加水(0.5毫升)，再7分钟后，加入(3S)3-烯丙氧羰基氨基-5-(2-氯-苯基)甲硫基-4-酮戊酸叔丁酯(123，0.478克，1.02毫摩尔)及(PPh₃)₂PdCl₂(20毫克)于THF(2毫升)之溶液。再以20分钟逐滴加入氢化三丁锡(0.65毫升，2.33毫摩尔)。混合物保持4.5小时，再以EtOAc稀释，以1MHCl，盐水，NaHCO₃饱和水溶液再以盐水洗涤。混合物干燥(MgSO₄)及浓缩。残留物以己烷研磨数次，其再倾滗及丢弃，再以快速层析纯化(10-100％EtOAc/CH₂Cl₂)得到0.2克(35％)的白色玻璃状固体mp 70-72℃；

[α]_D ²⁶-82.5°(c0.02，CH₂Cl₂)。IR(KBr)3404，1726，1660，1534，1524，1422，1277，1254，1154；¹H NMR(CDCl₃)δ7.83-7.78(2H，m)，7.7，7.75-7.32，7.26-7.20(7H，3m)，7.12(1H，d，J＝8.2)，7.01(1H，d，J＝7.3)，5.23-5.08(2H，m)，5.03-4.94(1H，m)，4.62(1H，dt，J＝14.5)，3.78(2H，m)，3.38-3.29(1H，m)，3.26(2H，s)，3.06-2.82(4H，m)，2.71(1H，dd，J＝17.2，4.5)，2.39(1H，dd，J＝13.2，6.5)，2.15-1.83，1.73-1.63(5H，m)，1.45(9H，s)。分析C₃₃H₃₉ClN₄O₇S之计算值：C，59.05；H，5.86；N，8.35。实测值：59.00；H，5.80；N，7.92。

(225e)，利用类似化合物224e之方法，制备自酸212e及(3S)N-(烯丙氧羰基)-3-氨基-5-(2-氯苯基甲氧基)-4-氧代戊酸叔丁酯(201)，得到40毫克(23％)的玻璃状固体：¹H NMR(CDCl₃)δ7.83-7.73(2H，m)，7.67-7.10(9H，m)，5.23-5.09(2H，m)，4.59(1H，m)，4.45-4.22(2H，m)，3.7-3.19，3.08-2.72，2.71-2.47，2.05-1.85，1.72-1.61，1.45-1.26(20H，6m)。

(226e)，以类似化合物217e之方法，制备自224e，得到0.22克(81％)掺白色固体：mp 95-100℃；[α]_D ²³-95.6°(c0.2，CH₂Cl₂)。IR(KBr)3393，1720，1658，1529，1422，1279；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.80(1H，d，J＝7.5)，7.89(2H，m)，7.7(1H，d，J＝7.7)，7.56-7.28(7H，m)，5.10(1H，m)，4.87-4.73(2H，m)，4.39(1H，m)，3.77(2H，m)，3.44，3.35(2H，+H₂O，2m)，2.97-2.56，2.2，1.92，1.61(11H，4m)。分析C₂₉H₃₁ClN₄O₇S0.5H₂O之计算值：C，55.02；H，5.10；N，8.85。实测值：C，55.00；H，5.09；N，8.71。

(227e)，以类似217e化合物之方法，制备自225e。产物以快速层析进一步纯化(0-5％MeOH/CH₂Cl₂)得到19毫克(81％)的玻璃状固体：¹H NMR(CDCl₃)δ7.79(2H，m)，7.66-7.18(9H，m)，5.30-5.10(2H，m)，4.85(1H，m)，4.65(2H，m)，4.53(1H，m)，4.28(2H，m)，3.28，3.01，2.72，2.33，1.94，1.60(11H，m)。MS(ES^-，m/z)597(M⁺-1，100％)。

(228e)。1-羟基苯并三唑(0.23克，1.68毫摩尔)继以乙基二甲氨基丙基碳化二亚胺盐酸盐(0.21克，1.09毫摩尔)加至酸212e(0.29克，0.84毫摩尔)于CH₂Cl₂(3毫升)在室温下之搅拌溶液中。混合物保持10分钟，再加入(3RS，4RS)3-氨基-5-氟-4-羟基戊酸叔丁酯(Revesz，L.等四面体通讯Tetrahedron Lett.，52，pp.9693-9696(1994)；0.29克，1.40毫摩尔)于CH₂Cl₂(3毫升)，继以4-二甲氨基吡啶(10毫克)。溶液搅拌17小时，以EtOAc稀释，以1M HCl，盐水，饱和的NaHCO₃水溶液及再次的盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。残留物以快速层析纯化(50-100％ EtoAc/CH₂Cl₂及5％MeOH/EtoAc)得到0.25克(56％)白色玻璃状固体：IR(KBr)3343，1726，1658，1536，1426，1279，1257，1157；¹H NMR(CDCl₃)δ7.84-7.79(2H，m)，7.57-7.40(3H，m)，7.05-6.92，6.73(2H，2m)，5.17-5.04(2H，m)，4.56，4.35-4.21，4.04(5H，3m)，3.36，3.09-2.34，2.00(11H，3m)，1.46(9H，s)。分析C₂₆H₃₅FN₄O7.0.5H₂O之计算值：C，57.45；H，6.65；N，10.31。实测值：C，57.64；H，6.56；N，10.15。(229e)以类似216e化合物之方法制备自228c。经快速层析纯化(30-50％EtOAc/CH₂Cl₂)可得白色玻璃状固体之产物(0.194克，89％)：IR(KBr)3376，1728，1659，1529，1424，1279，1256，1156。

(230e)，以类似化合物217e之方法制备自229e，生成230e呈白色玻璃状固体(100％)mp 105-125℃；[α]_D ²³-9.14°(c0.72，CH₃OH)。IR(KBr)3336，1789，1737，1659，1535，1426，1279，1258，1186；¹H NMR(CD₃OD)δ7.71-7.68(2H，m)，7.37-7.23(3H，m)，5.02，4.88-4.63，4.37-4.0(6H，3m)，3.30，2.97，2.68-2.60，2.37-1.54(11H，4m)。MS(ES^-，m/z)475(M⁺-1，100％)。

(231e)。N-芴基甲氧基-羰基-3-氨基-3-氰基丙酸甲酯(EP0547699A1，385毫克，1.1毫摩尔)以17毫升二乙胺处理。经室温下搅拌1.5小时后，溶液浓缩。残留物在硅胶上层析(3％甲醇于CH₂Cl₂)并生成游离胺，呈浅黄色油状。向此油及羟基苯并三唑(297毫克，2.19毫摩尔)于DMF(5毫升)之溶液中，在0℃下加入乙基二甲氨基丙基碳化二亚胺(232毫克，1.21毫摩尔，1.1当量)再加(1S，9S)9-(苯甲酰氨基)-[6，10-二氧代-1，2，3，4，7，8，9，10-八氢-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸(212e)。在0℃下搅拌5分钟，再于室温下搅拌过夜，混合物以CH₂Cl₂稀释(50毫升)且生成的溶液相继以1M HCl(2×30毫升)，H₂O(30毫升)，10％NaHCO₃(2×30毫升)及饱和的NaCl水溶液洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。以快速层析在硅胶上纯化(3％甲醇于CH₂Cl₂)得到化合物231e(404毫克，83％)呈固体：[α]_D ²⁰-121°(c0.14，CH₂Cl₂)；¹HNMR(CDCl₃)δ7.40-7.83(5H，m)，7.38(1H，d)，6.96(1H，d)，5.27-5.07(2H，m)，4.66-4.50(1H，m)，3.79(3H，s)，3.23-2.73(6H，m)，2.47-2.33(1H，m)，2.15-1.82(4H，m)；分析C₂₂H₂₅N₅O₆之计算值：C，58.0；H，5.53；N，15.38。实测值：C，57.6；H，5.6；N，15.0。

(232e)。甲酯231e(400毫克，0.88毫摩尔)于甲醇(30毫升)及水(30毫升)之溶液，在0℃下冷却再以二异丙基乙胺处理。溶液在0℃下搅拌10分钟，再于室温下过夜。非均相的混合物浓缩且所得的固体在硅胶上层析(5％甲醇/1％甲酸于CH₂Cl₂)得到游离酸232e(170毫克，44％)呈白色固体：mp155℃(dec)；[α]_D ²⁰-117°(c0.1，MeOH)；IR(KBr)3343，3061，2955，1733，1656，1577，1533，1490，1421，1342，1279，1256，1222，1185，708；¹HNMR(D⁴-MeOH)δ7.88-7.28(5H，m)，5.20-5.03(1H，m)，4.98-4.84(2H，m)，4.75-4.53(1H，m)，4.51-4.34(1H，m)，3.45-3.22(1H，m)，3.14-2.94(1H，m)，3.14-2.94(1H，m)，2.88-2.61(2H，m)，2.53-1.50(8H，m)；分析C₂₁H₂₃N₅O₆.1.5H₂O之计算值：C，53.84；H，5.59；N，14.95；O，25.61。实测值：C，54.3；H，5.4；N，14.3。

(233e)。(1S，9S)6，10-二氧代-1，2，3，4，7，8，9，10-八氢-9-(苄氢氨基)-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸(212e)(345毫克，1.0毫摩尔)，(208a)(361毫克，1.1毫摩尔，1.1当量)及(Ph₃P)₂PdCl₂(20毫克)于CH₂Cl₂(5毫升)的溶液，以n-Bu₃SnH(0.621毫升，2.3毫摩尔，2.1当量)逐滴处理。生成的橘棕色溶液在25℃下搅拌10分钟，再加入1-羟基苯并三唑(297毫克，2.2毫摩尔，2当量)。混合物冷却至0℃再加乙基二甲氨基丙基碳化二亚胺(253毫克，1.3毫摩尔，1.2当量)。在0℃下搅拌10分钟后于室温下过夜，混合物以EtOAc(50毫升)稀释，生成的溶液相继以1M HCl(3×25毫升)，10％NaHCO₃×(3×25毫升)及饱和的NaCl水溶液洗涤，干燥(MgSO₄)再浓缩。于硅胶上快速层析(2-10％甲醇于CH₂Cl₂)得到化合物233e(280毫克，49％)为褐色固体：

[α]_D ²⁰-95(c 0.09，MeOH)；IR(KBr)3477，3333，2968，2932，1633，1580，1535，1423，1378，1335，1259，1156，1085，709；¹H NMR(CDCl₃)δ9.32(1H，s)，7.83-7.39(6H，m)，7.11-7.09(1H，m)，6.30-5.30(2H，brs)，5.17-5.05(2H，m)，4.62-4.38(2H，m)，3.30-3.15(1H，m)，3.13-2.65(2H，m)，2.46-2.19(3H，m)，2.15-1.54(8H，m)，1.42(9H，s)。

(236e)，以类似233e之方法利用(4R)N-烯丙氧羰基-4-氨基-5-氧代-戊酸叔丁酯半卡巴腙(208b，435毫克，1.33毫摩尔)可制成呈泡沫状之产物(542毫克，71％)：[α]_D ²⁰-99°(c0.19，CHCl₃)；IR(KBr)3473，3331，3065，2932，2872，1660，1580，1533，1488，1423，1370，1373，1278，1254，1224，1155，1080，1024，983，925，877，846，801，770，705；¹H NMR(CDCl₃)δ9.42(1H，s)，7.81(2H，d)，7.51-7.40(4H，m)，7.06(1H，d)，6.50-5.50(2H，宽s)，5.25-5.00(2H，m)，4.60-4.45(2H，m)，3.15-2.85(2H，m)，2.75-2.35(1H，m)，2.30-1.23(11H，m)，1.42(9H，s)。

(234e)。半卡巴腙233e(390毫克，0.68毫摩尔)于甲醇之溶液(10毫升)冷却至0℃，再以38％甲醛(2毫升)及1M HCl(2毫升)之水溶液处理。反应混合物再于室温下搅拌过夜。溶液浓缩以除去甲醇。水溶液以EtoAc萃取(30毫升)。有机溶液相继以10％NaHCO₃(30毫升)及饱和的NaCl水溶液洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。在硅胶上快速层析纯化(2-5％甲醇于CH₂Cl₂)得到234e(179毫克，51％)呈白色泡沫状：[α]_D ²⁰-101°(c0.064，MeOH)；IR(KBr)3346，2976，2934，1730，1657，1535，1456，1425，1278，1255，1156，708；¹H NMR(CDCl₃)δ9.56(1H，s)，7.88-7.38(5H，m)，7.01及6.92(2H，2d)，5.27-5.08(2H，m)，4.69-4.46(1H，m)，3.50-3.27(2H，m)，3.15-2.73(2H，m)，2.46-1.83(10H，m)，1.45(9H，s)。

(237e)，以类似234e之方法制备自236e，得到白色泡沫状(390毫克，85％)：[α]_D ²⁰-113°(c 0.242，CHCl₃)；IR(KBr)3352，3065，2974，1729，1657，1536，1489，1454，1423，1369，1338，1278，1255，1223，1156，1078，1026，981，846，709。

(235e)。叔丁酯234e(179毫克，0.35毫摩尔)于无水CH₂Cl₂(3毫升)之溶液冷却至0℃，再以三氟醋酸(2毫升)处理。生成的溶液在0℃下搅拌30分钟，再于室温下2小时。溶液浓缩，残留物以无水CH₂Cl₂(5毫升)吸收，混合物再以浓缩。此过程以更多的CH₂Cl₂(5毫升)再次重复。所得残留物于二乙醚中结晶。沉淀物收集及于硅胶管柱上纯化(5％甲醇于(CH₂Cl₂)，得到化合物235e呈白色固体(111毫克，70％)：mp 142℃(dec)；[α]_D ²⁰-85.5(c 0.062，MeOH)；IR(KBr)3409，3075，2952，1651，1541，1424，1280，1198，1136，717；¹H NMR(D₆-DMSO)δ9.40(1H，s)，8.62(2H，m)，7.96-7.38(5H，m)，5.19-5.02(1H，m)，4.98-4.79(1H，m)，4.48-4.19(1H，m)，3.51-3.11(2H，m)，3.04-2.90(2H，m)，2.38-1.46(10H，m)。

(238e)，以类似235e方法制备自237e，得到米色泡沫状(190毫克，60％)：[α]_D ²⁰-78(c 0.145，MeOH)；IR(KBr)3400，3070，2955，2925，2855，1653，1576，1541，1490，1445，1427，1342，1280，1258，1205，1189，1137，1075，1023，983，930，878，843，801，777，722；¹H NMR(D₆-DMSO)δ9.40(1H，s)，8.72-8.60(2H，m)，7.89(2H，d)，7.56-7.44(3H，m)，5.17(1H，m)，4.90-4.83(1H，m)，4.46-4.36(1H，m)，4.20-4.15(1H，m)，3.40-3.30(1H，m)，2.98-2.90(2H，m)，2.50-1.60(10H，m)。

(243)，制备自(1S，9S)9-氨基-八氢-10-氧代-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸叔丁酯(Attwood，等，化学会志，伯琴汇刊1 J.Chem Soc.，Perkin 1，pp.1011-19(1986))以211e所述之方法，得到2.03克(86％)无色泡沫状物：[α]_D ²⁵-15.9°(c 0.5，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3400，2976，2937，1740，1644，1537，1448，1425，1367，1154；¹H NMR(CDCl₃)δ7.88-7.82(2H，m)，7.60-7.38(4H，m)，5.48(1H，m)，4.98(1H，m)，3.45(1H，m)，3.22-2.96(2H，m)，2.64(1H，m)，2.43-2.27(2H，m)，1.95(2H，m)，1.82-1.36(4H，m)，1.50(9H，s)；C₂₁H₂₉N₃O₄.0.25H₂O之精确质量数：C，64.35；H，7.59；N，10.72。实测值：C，64.57；H，7.43；N，10.62。MS(ES+，m/z)388(100％，M⁺+1)。

(244)，以212e之方法制备自(1S，9S)9-苯甲酰氨基-八氢-10-氧代-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸叔丁酯(243)，得到1.52克(89％)白色粉末：mp.166-169℃(dec)；[α]_D ²⁵-56.4°(c 0.5，CH₃OH)；IR(KBr)3361，2963，2851，1737，1663，1620，1534，1195，1179；¹H NMR(D₆-DMSO)δ12.93(1H，brs)，8.44(1H，d，J＝8.4)，7.93(2H，m)，7.54(3H，m)5.46(1H，m)，4.87(1H，m)，3.12(2H，m)，2.64(1H，m)，2.27(1H，m)，1.98-1.68(7H，m)，1.40(1H，m)；分析C₁₇H₂₁N₃O₄.0.25H₂O之计算值：C，60.79；H，6.45；N，12.51。实测值：C，61.07；H，6.35；N，12.55。MS(ES+，m/z)332(58％，M⁺+1)，211(100)。

(245)，以213e所述方法制备自(1S，9S)9-苯甲酰氨基-八氢-10-氧代-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸(244)，得到601毫克(76％)的无色泡沫状：IR(KBr)3401，2945，1794，1685，1638，1521，1451，1120；¹H NMR(CDCl₃)δ7.87-7.77(2H，m)，7.57-7.14(10H，m)，5.59-5.47(2H，m)，4.97-4.32(4H，m)，3.27-1.35(14H，m)；分析C₂₈H₃₂N₄O₆.0.5H₂O之计算值：C，63.50；H，6.28；N，10.58。实测值：C，63.48；H，6.14；N，10.52。MS(ES+，m/z)521(100％，M⁺+1)。

(246)，以214e所述方法制备自[3S，2RS(1S，9S)]N-(2-苄氧基-5-氧代四氢呋喃-3-基)-9-苯甲酰氨基-八氢-10-氧代-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酰胺(245)，得到396毫克(84％)白色粉末：mp.110-115℃；[α]_D ²⁶-126.3°(c0.2，CH₃OH)；IR(KBr)3345，2943，1787，1730，1635，1578，1528，1488，1450，1429；¹H NMR(CD₃OD)δ7.88(2H，m)，7.48(3H，m)，5.55(1H，m)，4.91(1H，m)，4.56(1H，m)，4.29(1H，m)，3.41-3.05(3H，m)，2.76-2.41(3H，m)，2.28-2.01(3H，m)，1.86-1.65(4H，m)，1.36(1H，m)；分析C₂₁H₂₆N₄O₆.1.25H₂O之计算值：C，55.68；H，6.34；N，12.37。实测值：C，55.68；H，6.14；N，12.16。MS(ES-，m/z)429(100％，M⁺-1)。

(247)。正丁基锂(1.6M于己烷)(22.3毫升，35.7毫摩尔)逐滴加至(2R)-(-)-2，5-二氢-3，6-二甲氧基-2-(1-甲基乙基)吡嗪(5.8毫升，6.0克，32.4毫摩尔)于THF(250毫升)冷却至-75℃之溶液中历20分钟，加入之速率使温度可保持在-72℃以下。反应混合物在-75℃下搅拌1小时，再以30分钟加入4-甲氧基苯基-2-丁烯酸2，6-二-叔丁酯(Suzuck等李比希化学年鉴 Liebigs Ann.Chem.pp.51-61(1992))(9.9克，32.5毫摩尔)于THF(60毫升)之溶液，且于加入期间温度保持在-72℃以下。反应混合物在-75℃下保持1.5小时，在-75℃下加入冰醋酸(6毫升)于THF(25毫升)之溶液，且溶液加温至室温。溶液倒入10％NH₄Cl(300毫升)再以二乙醚萃取(3×250毫升)。混合的有机相以盐水洗(2×200毫升)，于Na₂SO₄上干燥并于减压下蒸发至干。残留的油以硅胶快速层析纯化(20％庚烷于CH₂Cl₂)得到标题化合物为浅黄色油状(13.5克，85％)：[α]_D ²⁰-64°(c0.22，MeOH)；IR(KBr)2962，2873，2840，1757，1697，1593，1460，1433，1366，1306，1269，1236，1187，1157，1126，1063，1038，1011，970，924，892，867，846，831，797，773，754；¹H NMR(CDCl₃)δ6.85(2H，s)，4.21(1H，t，J＝3.5)，3.98(1H，t，J＝3.5)，3.79(3H，s)，3.71(3H，s)，3.69(3H，s)，3.15(1H，dd，J 17.8，7.9)，2.86-2.81(1H，m)，2.58(1H，dd，J＝17.8，5.9)，2.28-2.19(1H，m)，1.33(18H，s)，1.02(3H，d，J＝6.8)，0.70(6H，dd，J＝13，6.8)。

(248)。(247)(22.4克，45.8毫摩尔)于乙腈(300毫升)及0.25N HCl(366毫升，2当量)在氮大气氛及室温下搅拌4天。乙腈在减压下蒸发并加二乙醚(250毫升)至水相中。水相之pH值以浓氨水(32％)调至pH8-9，再分相。水相以二乙醚萃取(2×250毫升)。混合的有机相于Na₂SO₄上干燥并于减压下蒸发至干。残留的油以快速层析纯化，于硅胶(2％甲醇于CH₂Cl₂)上得到所需产物，呈浅黄色油(8.2克，45％)：[α]D²⁰+20°(c 0.26，MeOH]；IR(KBr)3394，3332，3000，2962，2915，2877，2838，1738，1697，1593，1453，1430，1419，1398，1367，1304，1273，1251，1221，1203，1183，1126，1063，1025，996，932，891，866，847，800，772，745；¹H NMR(CDCl₃)δ6.85(2H，s)，3.79(3H，s)，3.74(3H，s)，3.72-3.69(1H，m)，3.05-2.85(1H，m)，2.67-2.50(2H，m)，1.32(18H，s)，0.93(3H，d，J＝7)；分析C₂₂H₃₅NO₅之计算值：C，67.15；H，8.96；N，3.56。实测值：C，67.20；H，9.20；N，3.70。

(249)。(2S，3S)3-甲基谷氨酸5-[2，6-二-叔丁基-4-甲氧基苯基]酯(248)(8.0克，20.3毫摩尔)于5N HCl(200毫升)的溶液，回流加热2小时。反应混合物在减压下蒸发至干。残留物溶于环己烷(x4)并蒸发至干(x4)，可得白色固体(7.9克，93％)：mp 230℃；[α]D²⁰+22°(c 0.27，MeOH)；IR(KBr)3423，2964，1755，1593，1514，1456，1421，1371，1303，1259，1201，1179，1138，1106，1060，966，926，861，790，710；1H NMR(MeOD)δ6.76(2H，s)，4.02(1H，d，J＝3.7)，3.67(3H，s)，3.05-2.85(1H，m)，2.80-2.55(2H，m)，1.22(18H，s)，1.09(3H，d，J＝6.3)；¹³C NMR(MeOD)δ174.5，171.4，158.6，145.2，143.1，113.2，58.3，56.3，39.8，36.9，32.5，16.6；分析C₂₁H₃₄ClNO₅之计算值：C，60.64；H，8.24；N，3.37。实测值：C，60.80；H，8.40；N，3.40。

(250)，二异丙基乙胺(4.1毫升，3.04克，23.5毫摩尔，1.25当量)及酞酐(3.5克，23.6毫摩尔，1.25当量)加至(2S，3S)3-甲基谷氨酸-5-[2，6-二-叔丁基-4-甲氧基苯酯(249)(7.8克，18.6毫摩尔)于甲苯(300毫升)之溶液中，生成的混合物回流加热3小时。于冷却至室温后，反应混合物蒸发至干，生成的油以硅胶上快速层析纯化(2％甲醇于CH₂Cl₂)得到所需之产物，呈白色泡沫状(8.35克，87％)：[α]_D ²⁰-20°(c1.04，MeOH)；IR(KBr)3480，2968，2880，1753，1721，1594，1462，1422，1388，1303，1263，1216，1183，1148，1062，1003，933，899，755，723；¹H NMR(CDCl₃)δ7.92-7.87(2H，m)，7.78-7.73(2H，m)，6.84(2H，s)，4.95(1H，d)，3.78(3H，s)，3.30-3.05(2H，m)，2.85-2.65(1H，m)，1.30(18H，s)，1.13(3H，d)。

(251)。氨基酸(250)(1.2克，2.35毫摩尔)于无水二乙醚(10毫升)之溶液以五氯化磷(0.52克，2.5毫摩尔)在室温下处理2小时。混合物浓缩并以甲苯处理数次及再次蒸发至干。生成的酰基氯溶于无水THF(5毫升)及CH₂Cl₂(5毫升)中并冷至0℃。加1-(苄氧羰基)-六氢-3-哒嗪-羧酸叔丁基酯(0.753克，2.35毫摩尔，1当量)及N-乙基吗啉(3毫升)至溶液中。反应混合物在0℃下搅拌30分钟再于室温下过夜。混合物蒸发且生成之残留物以CH₂Cl₃(30毫升)分离。溶液以1M HCl，水，10％NaHCO₃洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发。生成的白色泡沫物于硅胶上纯化(0-2％甲醇于CH₂Cl₂)得到所需之化合物251，呈浅黄色玻璃状固体(740毫克，39％)：[α]_D ²⁰-22(c0.42，MeOH)；IR(KBr)3441，2966，1725，1693，1386，1255，1221，1186，1154，1123，1063，724；¹H NMR(CDCl₃)δ7.94-7.89(4H，m)，7.56-7.28(5H，m)，6.84(2H，2s)，5.29-5.20(2H，AB)，4.91-4.81(1H，m)，4.05-3.88(1H，m)，3.78(3H，s)，3.75-3.80(1H，m)，3.28-2.95(2H，m)，2.23-1.51(6H，m)，1.45(9H，s)，1.31(9H，s)，1.28(9H，s)，1.27(3H，d)。

(254)。经保护的酸(251)(715毫克，0.893毫摩尔)于乙腈之溶液以硝酸铈(IV)铵(1.8克，3.3毫摩尔，3.7当量)于水在室温下处理4小时。加入甘露醇(600毫克，3.3毫摩尔，3.7当量)且混合物搅拌1小时。加二乙醚(50毫升)及水(30毫升)至混合物中。经倾析后，水相以二乙醚萃取(4×50毫升)。混合的有机相以水洗，干燥(MgSO₄)并浓缩。在硅胶上层析(10％甲醇于CH₂Cl₂)得到5-(1-苄氧羰基-3-叔丁氧羰基-六氢哒嗪-2-基)羰基-3-甲基-4-酞酰亚氨基戊酸(252)(360毫克，64％)：[α]_D ²⁰-49.2°(c 0.118，MeOH)。此产物可勿需再纯化使用(360毫克，0.609毫摩尔)，并于甲醇中氢化(30毫升)，利用10％Pd/C(36毫克)历3小时。反应混合物过滤，且生成的溶液浓缩以生成胺(253)呈泡沫状(270毫克，96％)[α]_D ²⁰-56.1°(c0.18，MeOH)。胺(253)溶于无水THF(10毫升)中再加五氯化磷(305毫克，1.47毫摩尔，2.5当量)。混合物再冷却至-5℃并于氮气氛下加入N-乙基吗啉。反应混合物在室温下搅拌过夜。混合物浓缩且残留物以CH₂Cl₂(20毫升)，冷水(20毫升)，1M HCl(20毫升)吸收。于倾析后，水相再以CH₂Cl₂萃取(2×20毫升)。混合的有机相以10％NaHCO₃及水洗涤，干燥(MgSO₄)再浓缩。生成的油以硅胶纯化(1％甲醇/CH₂Cl₂)得到二环化合物(254)呈固体(65毫克，25％)：[α]_D ²⁰-77°(c0.208，MeOH)；IR(KBr)3471，3434，2975，2928，1767，1723，1443，1389，1284，1243，1151，1112，720；¹H NMR(CDCl₃)δ7.94-7.69(4H，m)，5.34-5.27(1H，m)，4.89-4.66(2H，m)，3.94-3.64(2H，m)，3.02-2.84(1H，m)，2.34-2.19(2H，m)，1.94-1.61(3H，m)，1.47(9H，s)，1.14(3H，d)；分析C₂₃H₂₇N₃O₆之计算值：C，62.57；H，6.17；N，9.52。实测值：C，62.60；H，6.40；N，9.10。

(255)。二环化合物(254)(70毫克，0.16毫摩尔)于乙醇之溶液以水合肼(0.02毫升，4毫摩尔，2.5当量)处理。经室温下搅拌5小时后，混合物浓缩且生成的残留物以甲苯吸收再蒸发。残留物以2M醋酸(2毫升)处理16小时。生成的沉淀物过滤并以2M醋酸(10毫升)洗涤。滤液以固体NaHCO₃碱化，再以EtOAc萃取。有机溶液以水洗，干燥(MgSO₄)并浓缩。以快速层析在硅胶上纯化(2％甲醇/CH₂Cl₂)得到游离胺呈泡沫(50毫克，100％)。胺(50毫克，0.16毫摩尔)溶于二噁烷(1毫升)及水(0.25毫升)中，再以NaHCO₃(0.034克，0.04毫摩尔)继以苯甲酰氯(0.047毫升，0.40毫摩尔，2.8当量)处理。混合物在室温下搅拌过夜，再以EtOAc稀释(15毫升)。有机溶液以10％NaHCO₃及饱和的NaCl水溶液洗涤，干燥(MgSO₄)再浓缩。在硅胶上快速层析纯化(2％甲醇/CH₂Cl₂)可得苯甲酰胺255呈泡沫状(67毫克，100％)：¹H NMR(CDCl₃)δ7.89-7.39(5H，m)，6.79(1H，d)，5.32-5.20(1H，m)，4.98-4.82(1H，m)，4.75-4.64(1H，m)，3.84-3.65(1H，m)，3.09-2.89(1H，m)，2.45-2.18(2H，m)，2.00-1.61(4H，m)，1.48(9H，s)，1.28(3H，d)。

(257)。叔丁酯255(67毫克，0.16毫摩尔)于CH₂Cl₂之溶液，在0℃下以三氟醋酸处理(1毫升)。生成的溶液在0℃下搅拌15分钟，再于室温下1小时。溶液浓缩，残留物以无水CH₂Cl₂吸收(2×2毫升)，且混合物再次浓缩(x2)。残留物自二乙醚中结晶。沉淀物过滤得到255之游离酸，呈灰色固体(40毫克，70％)。酸(40毫克，0.11毫摩尔)，N-烯丙氧羰基-4-氨基-5-苄氧基-2-氧代四氢呋喃(Chapman，生物有机与药物化学通讯 Bioorg.& Med.Chem. Lett.，2，pp.615-18(1992)；39毫克，0.13毫摩尔，1.2当量)及(Ph₃P)₂PdCl₂(3毫克)于无水CH₂Cl₂(1毫升)及无水DMF(0.2毫升)混合物中之溶液，以n-Bu₃SnH(0.089毫升，0.33毫摩尔，3当量)逐滴处理。生成的溶液在25℃下搅拌10分钟，再加1-羟基苯并二唑(36毫克，0.266毫摩尔，2.4当量)。混合物冷却至0℃，再加乙基二甲氨基丙基碳化二亚胺(31毫克，0.16毫摩尔，1.5当量)。在0℃下搅拌10分钟，再于室温下过夜，混合物以EtOAc稀释(20毫升)且生成的溶液相继以1MHCl(2×5毫升)，10％NaHCO₃(2×5毫升)及饱和的NaCl水溶液(5毫升)洗涤，干燥(MaSO₄)并浓缩。在硅胶上快速层析(2％甲醇/CH₂Cl₂)得到非对映立体异构(256)之混合物，呈灰色固体(50毫克，82％)。此产物(256)勿需再纯化使用(50毫克，0.091毫摩尔)并于甲醇中(5毫升)以10％Pd/C(30毫克)氢化24小时。反应混合物过滤且生成的溶液再浓缩。于硅胶上快速层析(2-20％甲醇/CH₂Cl₂)得到化合物257(9毫克，21％)呈白色固体：¹H NMR(D⁴-MeOH)δ7.88-7.29(5H，m)，5.18-4.99(1H，m)，4.59-4.35(3H，m)，4.26-4.11(1H，m)，3.65-3.41(2H，m)，3.18-2.91(1H，m)，2.62-1.47(8H，m)，1.29-1.00(3H，2d)(缩醛及半缩醛之混合物)。MS(ES-)457。

(259)。丙烯酸苄酯(1.13毫升，7.34毫摩尔)加至苯甲酰肼(285)(1.0克，7.34毫摩尔)于异丙醇(28毫升)之搅拌悬液中。混合物回流20小时，冷却至室温再浓缩。残留物以快速层析纯化(20％EtOAc/CH₂Cl₂)得到259(1.098克，50％)呈油状，于静置后可结晶：mp 65℃；IR(KBr)3283，1723，1644，1316，1201，1156；¹H NMR(CDCl₃)δ8.32-8.18(1H，m)，7.81-7.70(2H，m)，7.57-7.23(8H，m)，5.36-4.92(1H，brm)，5.11(2H，s)，3.26(2H，t，J＝6.5)，2.59(2H，t，J＝6.5)；¹³C NMR(CDCl₃)δ172.12，167.27，135.65，132.54，131.66，128.45，128.10，128.06，126.84，66.31，47.33，33.31；分析C₁₇H₁₈N₂O₃之计算值：C，68.44；H，6.08；N，9.39。实测值：C，68.42；H，6.10；N，9.38。MS(ES+)321(M+Na，38％)，299(M⁺+1，100)。

(260)。六氢哒嗪-1，3-二羧酸(3S)-1-苄基3-叔丁酯(Hassall等化学会志， J. Chem.Soc.Perkin 1，p.1451-1454(1979))(925.3毫克，2.89毫摩尔)及二异丙基乙胺(0.70毫升，4.0毫摩尔)于1.93M光气(17.96毫升，34.7毫摩尔)之甲苯溶液，在室温下搅拌45分钟，再浓缩留下黄色固体。在此固体中加入甲苯(18毫升)，酰肼(259)(861.6毫克，2.89毫摩尔)及二异丙基乙胺(0.70毫升，4.0毫摩尔)。混合物在室温下搅拌2.75小时，再浓缩。生成的残留物以EtOAc吸收，以1M HCl，盐水洗涤，再干燥(MgSO₄)，过滤及浓缩得到2.15克粗制物质。快速层析(40％EtOAc于己烷)得到1.65克(89％)标题化合物，呈白色泡沫状：mp.40℃；[α]_D ²⁴-55.78°(c0.40，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3436，2930，1733，1689，1455，1412，1367，1258，1156，697；¹HNMR(CDCl₃)δ8.54-8.23(0.5H，m)，7.97-7.09(15.5H)，5.16-4.80(4H，m)，4.66-4.32(1H，m)，4.24-3.55(3.3H，m)，3.50-3.26(0.4H，m)，3.19-2.49(2.3H，m)，2.11-1.43(6H，m)，1.32-1.05(7H，m)；分析C₃₅H₄₀N₄O₈·0.5H₃2之计算值：C，64.31；H，6.32；N，8.57。实测值：C，64.18；H，6.27；N，8.56。MS(ES+)662(M+Na，84％)，645(M⁺1，100)，384(77)。

(261)。260(1.59克，2.47毫摩尔)于MeOH(142毫升)之溶液，以10％Pd/C(230.0毫克)处理，再于H₂气氛下搅拌1.5小时。混合物过滤，且溶剂蒸发生成1.04克(100％)白色泡沫。此勿需再纯化可用于下一步骤：mp＜40℃；

[α]_D ²⁰+1.6°(c 0.26，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3422，2977，2986，1728，1677，1486，1445，1396，1369，1309，1228，1155，916，716；¹H NMR(CDCl₃)δ10.0-9.7(1H，brm)，7.86(2H，d，J＝7.5)，7.62-7.38(3H，m)，7.3-5.6(2H，brm)，4.57(1H，brd，J＝4.0)，4.05-3.77(2H，m)，3.00-2.82(1H，m)，2.80-2.43(3H，m)，2.20-2.03(1H，m)，2.00-1.47(1H，m)，1.62-1.14(11H，m)；¹³CNMR(CDCl₃)δ175.00，171.17，167.62，160.68，132.39，131.77，128.67，127.38，82.27，54.38，48.04，46.35，33.62，28.02，25.68，21.61。MS(ES+)443(M+Na，68％)，421(M⁺+1)，100)，365(50)，131(61)。

(262)。向氨基酸261(1.012克，2.41毫摩尔)于无水THF(26毫升)之溶液，在0℃下加入N-乙基吗啉(597微升，4.69毫摩尔)再加PCl₅(651.3毫克，3.12毫摩尔)。反应在0℃下搅拌2小时，再加温至室温并再搅拌15.5小时。混合物浓缩，生成的残留物以EtOAc吸收，以1M HCl，饱和的NaHCO₃，盐水洗二次，再干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。快速层析(20％EtOAc/CH₂Cl₂)可得727.3毫克(75％)标题化合物，呈白色泡沫：[α]_D ²⁶+51.0°(c0.20，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3436，2979，1733，1670，1483，1437，1420，1299，1243，1156；¹H NMR(CDCl₃)δ8.70(1H，s)，7.78(2H，d，J＝7.0)，7.57-7.32(3H，m)，5.08(1H，dd，J＝2.5，5.5)，4.59-4.43(1H，m)，4.08-3.69(3H，m)，3.07-2.84(1H，m)，2.57-2.35(1H，m)，2.34-2.14(1H，m)，2.07-1.43(3H，m)，1.48(9H，s)；¹³C NMR(CDCl₃)δ172.41，169.04，166.35，158.35，132.24，132.03，128.61，127.31，82.77，55.41，54.07，41.57，32.21，28.04，24.97，20.37；分析C₂₀H₂₆N₄O₅之计算值：C，59.69；H，6.51；N，13.92。实测值：C，59.53；H，6.53；N，13.84。MS(ES+)425(M+Na，71％)，403(M⁺+1，100)，145(41)。

(263)。酯262(720.0毫克，1.80毫摩尔)于1∶1CH₂Cl₂及TFA(150毫升)混合物中之溶液，在无水大气下搅拌1.3小时。溶液再于真空下减量，E₂tO吸收并再次减量。此过程重覆六次以生成粗制产物，为掺白色固体。产物以快速层析纯化(5％MeOH/CH₂Cl₂)得到520.0毫克(83％)标题化合物，呈白色泡沫：[α]_D ²⁵+59.5°(c1.82，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3435，3266，2956，1732，1664，1524，1486，1440，1302；¹H NMR(CDCl₃)δ9.13(1H，s)，7.77(2H，d，J＝7.5)，7.57-7.32(3H，m)，5.27-5.16(1H，m)，4.62-4.43(1H，m)，4.09-2.70(3H，m)，3.14-2.89(1H，m)，2.59-2.43(1H，m)，2.38-2.20(1H，m)，2.14-1.89(1H，m)，1.82-1.59(2H，m)；¹³C NMR(CDCl₃)δ173.65，172.28，166.44，158.42，132.44，131.31，128.61，127.39，54.83，54.01，42.11，31.79，24.42，20.29；MS(ES-)345(M-H⁺，100％)，161(45)。

(264)。向酸263(300.0毫克，0.87毫摩尔)及(2RS，3S)-3-烯丙氧羰基氨基-2-苄氧基-5-氧代四氢呋喃(Chapman， Bioorg.& Med.Chem.Lett.2，pp.615-18(1992))(277.6毫克，0.95毫摩尔)于无水CH₂Cl₂(2.5毫升)及无水DMF(2.5毫升)在rt下之溶液加入双(三苯膦)钯化氯(13.0毫克)，再加三-正-丁基锡化氢(466.0微升，1.73毫摩尔)。反应搅拌5分钟，再加1-羟基苯并三唑(234.1毫克，1.73毫摩尔)且混合物冷却至0℃，再加1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(204.5毫克，1.04毫摩尔)。令混合物加温至rt，再搅拌16.5小时。混合物以EtOAc稀释，以1M NaHSO₃，饱和的NaHCO₃(x2)，H₂O再来是盐水洗涤。有机层干燥(MgSO₄)，过滤及浓缩。残留物以快速层析纯化(5％MeOH/CH₂Cl₂)得到358.3毫克(77％)标题化合物，呈白色固体：IR(KBr)3435，1791，1665，1526，1421，1285；¹HNMR(CDCl₃)δ8.76及8.49(1H，2 x s)，7.92-7.73(2H，m)，7.62-7.24(8.5H，m)，6.86(0.5H，d，J＝8.0)，5.53及5.33(1H，d，J＝5.5，s)，4.95-4.34(5H，m)，4.04-3.54(3H，m)，3.03-2.64(2H，m)，2.49-2.14(2H，m)，2.11-1.46(4H，m)；MS(ES+)558(M+Na，100％)，536(M⁺+1，78)，404(58)。

(265)。264(350.0毫克，0.65毫摩尔)，10％Pd/C(350毫克)及甲醇(36毫升)的混合物在H₂气氛下搅拌6.5小时。混合物过滤且溶剂蒸发。加入Et₂O并再次移去溶液。此过程重覆四次以移去283毫克(97％)标题化合物，呈白色晶状固体：mp羧酸盐高于140℃；[α]_D ²⁶+33.5°(c0.18，MeOH)；IR(KBr)3428，1663，1528，1487，1437，1288；¹H NMR(D₆-DMSO)δ10.56(1H，s)，8.71-8.57(1H，m)，7.88-7.81(2H，m)，7.65-7.46(3H，m)，4.97-4.85(1H，m)，4.38-4.0(3H，m)，3.88-3.52(3H，m)，2.91-2.71(2H，m)，2.50-2.38(1H，m)，2.35-2.21(1H，m)，2.10-1.94(1H，m)，1.93-1.49(3H，m)；¹³C NMR(D₆-DMSO)δ173.66，172.49，169.97，169.89，164.96，157.62，132.35，131，85，128.39，127.32，53.81，52.69，40.90，33.17，31.60，24.40，24.13，19.24；MS(ES-)。

(266)。(2S)3-苄氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基丙酸二环己基胺盐(3克，5.8毫摩尔)于二氯甲烷(200毫升)之溶液，以1M HCl溶液洗四次，干燥(MgSO₄)再浓缩。生成的油再溶于无水二氯甲烷(35毫升)，冷却至0℃并以三氟醋酸处理(35毫升)，此溶液在0℃下搅拌1.5小时再蒸发至干。加二氯甲烷(50毫升)至残留物再于真空下移去。此过程重覆六次以生成白色固体。白色固体悬浮在甲苯中(50毫升)，以粉末状酞酐(940毫克，6.35毫摩尔)处理并再回流18小时。生成的溶液浓缩生成油，其以快速层析纯化(2-10％甲醇/二氯甲烷)得到266，2.01克(94％)呈白色粉末：IR(KBr)3600-2500br，1776，1714，1530，1469，1455，1392，1263，1131，722；¹H NMR(CDCl₃)δ7.83(2H，m)，7.72(2H，m)，7.29(5H，m)，5.41(1H，m)，5.03(2H，s)，3.90(2H，m)；MS(ES-)，367(M-1)。

(267)。酸266(1.32克，3.58毫摩尔)于无水乙醚(37毫升)之悬浮液，以五氯化磷(1.04克，5毫摩尔)处理，再于室温下搅拌2小时。溶液过滤以移去未反应之五氯化磷，再蒸发至干。残留物以无水甲苯(25毫升)处理再蒸发。此过程重覆数次。生成的油溶于无水二氯甲烷(25毫升)，冷却至0℃再以(3S)1-苄氧羰基哒嗪-3-羧酸叔丁酯(1.15克，3.58毫摩尔)于无水二氯甲烷(2毫升)继以5％碳酸氢钠水溶液(25毫升)处理。混合物在室温下快速搅拌20小时，再以乙酸乙酯(100毫升)稀释，并以1M HCl酸化至pH2。有机相以稀HCl溶液再以盐水洗，干燥(MgSO₄)并浓缩。生成的油以快速层析纯化(2-20％乙酸乙酯/二氯甲烷，再以10-20％甲醇/二氯甲烷)得到(267)，1.25克(52％)呈白色粉末：IR(KBr)3367，2955，1722，1517，1455，1387，1369，1251，1153，721；¹H NMR(CDCl₃)δ7.81(2H，m)，7.74(2H，m)，7.63(1H，brs)，7.31(10H，m)，5.46-4.76(5H，m)，4.07-3.54(4H，m)，2.4(1H，m)，2.0-1.6(3H，m)，1.40(9H，s)；MS(ES+)，671(M+1)，693(M+Na)。

(268)。酯267(50毫克，0.074毫摩尔)于甲醇(15毫升)之溶液以10％Pd/C(50毫克)处理再于室温及大气压力下氢化24小时。混合物充分抽空以移去氢，再以37％甲醛水溶液处理(18毫克，0.22毫摩尔)并在氮下搅拌2小时。混合物过滤，蒸至干且产物以快速层析纯化(4-100％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到26814.5毫克(48％)呈油状：¹H NMR(CDCl₃)δ7.85(2H，m)，7.71(2H，m)，5.78(1H，dd，J＝10，5)，4.99(1H，dd，J＝6.1，1.5)，4.07(1H，d，J＝10.6)，3.49(1H，dd，J＝14，5)，3.39(1H，d，J＝10.3)，3.24(1H，dd，J＝14，10.2)，3.17(2H，m)，2.39(1H，m)，1.84-1.46(3H)，1.51(9H，s)；MS(ES+)，415(M+1)，437(M+Na)。

化合物280-283以类似制备226e之方法制备自212b。化合物284-227以类似制备217e之方法制备。

(306a)，以类似208a之方法制备，除了使用2，6-二氯苯基甲氧基胺(以类似306b之方法制备)替代半卡巴肼生成870毫克(定量)呈澄清的油。

(306b)，以类似208a之步骤制备，除了使用2-(苯基)乙氧基胺(US 5 346 911)替代半卡巴肼生成395毫克(定量)的澄清油。

(307a)以类似233e之步骤制备，除了以306a替代207a，得到23毫克(23％)的307a，呈白色固体。

(307b)以类似233e之步骤制备，除了以306b替代207a，生成43毫克(48％)的307b，呈白色固体。

(308a)，以类似由234e制备235e之方法制备自307a，得到15.2毫克(74％)

白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ0.9(m)，1.3(s)，1.7(m)，1.8(m)，2.0(m)，2.1-2.2(m)，2.3(dd)，2.4-2.5(m)，2.6(m)，2.7-2.8(m)，3.1(m)，3.3(m)，3.4-3.5(m)，4.5(m)，4.9(m)，5.1(m)，5.3(d)，5.4(s)，6.8(d)，7.2-7.5(m)，7.8(dd)，8.4(dd)。

(308b)，以类似由234e制备235e之方法制备自307b，得到25.2毫克(68％)的白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ1.2(m)，1.6-1.7(m)，2.0-2.1(m)，2.2(m)，2.3(m)，2.5(m)，2.6-2.7(dd)，2.9(t)，3.0(t)，3.1(m)，3.3-3.5(m)，4.2(t)，4.25(m)，4.5(m)，5.2(t)，5.3(t)，6.7(d)，7.1-7.2(m)，7.35(dd)，7.4(m)，7.5(m)，7.8(dd)，8.3(dd)。

(302)。

A步骤：301以类似605a(A步骤)之步骤制备，除了使用212e替代603a外，得到540毫克(34％)白色固体。

B步骤：302。301(50.7毫克；0.091毫摩尔)于2.8毫升MeOH/HOAc/37％甲醛水溶液(5∶1∶1)之溶液在rt下搅拌5.5小时，反应再于真空下浓缩至0.7毫升。残留物溶于3毫升CH₃CN中，再浓缩至0.7毫升(3x)，溶于甲苯中并真定浓缩至0.7毫升(2x)，再浓缩至干。层析(快速，SiO₂，5％异丙醇/CH₂Cl₂)得到302(45.5毫克，78％)呈白色固体：¹H NMR(DMSO-d₆)δ1.0-1.15(m，2H)，1.4(s，9H)，1.65(m，2H)，1.9-2.1(m，2H)，2.15-2.4(m，3H)，2.55(m，1H)，2.7-3.0(m，2H)，4.3-4.6(m，2H)，4.9(m，1H)，5.2(m，1H)，7.4-7.6(m，2H)，7.8-8.0(m，2H)，8.6(m，1H)，8.8(m，1H)，9.4(s，1H)。

(304a)。

A步骤：302(90毫克；0.18毫摩尔)于10毫升MeOH之溶液，以原甲酸三甲酯(1毫升)及对甲苯磺酸-水合物(5毫克，0.026毫摩尔)处理，且反应搅拌20小时。反应以3毫升饱和的NaHCO₃水溶液处理，再于真空下浓缩。残留以EtOAc吸收，并以稀的NaHCO₃水溶液洗涤，于MgSO₄上干燥再真空浓缩生成80毫克的303a。

B步骤：303a溶于2毫升TFA中，再于室温下搅拌15分钟。反应溶于CH₂Cl₂中并真空浓缩(3x)。层析(快速，Si2O，1％至3％MeOH/CH₂Cl₂生成43毫克(64％)的304a，呈白色固体：¹H NMR(CDCl₃)δ1.55-1.8(m，2H)，1.9-2.15(m，4H)，2.25-2.5(m，2H)，2.7-3.3(m，4H)，3.45，3.6(s，s，3H)，4.4，4.75(2m，1H)，4.6(m，1H)，4.95，5.4(t，d，1H)，5.1-5.2(m，1H)，6.45，7.05(2d，1H)，6.95(m，1H)，7.45(m，2H)，7.5(m，1H)，7.85(m，2H)。

实施例11

化合物214e，404-413，415-445，446-468，470-491，及493-499依实施例11及表7所述地合成。

A步骤。合成401。TentaGel S^_NH₂树脂(0.16毫摩尔/克，10.0克)置于有筛孔之玻璃漏斗内，并以DMF(3×50毫升)，10％(v/v)DIEA于DMF (2×50毫升)及最后DMF(4×50毫升)洗涤。加充分的DMF至树脂得到浆状物，再加400(1.42克，2.4毫摩尔，制备自(3S)-3-(芴基甲氧羰基)-4-氧代丁酸叔丁酯，依据A.M.Murphy et.al.美国化学会志 J.Am. Chem.Soc.，114，3156-3157(1992))，1-羟基苯并三唑-水合物(HOBT·H₂O；0.367克，2.4毫摩尔)，O-苯并三唑-1-基-N，N，N，N′-四甲基鎓六氟磷酸盐(HBTU；0.91克，2.4毫摩尔)及DIEA(0.55毫升，3.2毫摩尔)。反应混合物在rt下搅动过夜，利用腕臂式震荡器。树脂在有孔玻璃漏斗上以吸空过滤法分离，再以DMF(3×50毫升)洗涤。未反应的氨基与树脂与20％(v/v)Ac₂O/DMF(2×25毫升)直接在漏斗中反应盖帽(10分/洗涤)。树脂先以DMF(3×50毫升)及CH₂Cl₂(3×50毫升)洗涤，再于真空下干燥过夜以生成401(11.0克，定量产率)。

B步骤。合成402。树脂401(6.0克，0.16毫摩尔/克，0.96毫摩尔)于有孔玻璃漏斗中以DMF(3×25毫升)洗涤而泡胀。Fmoc保护基再以25％(v/v)六氢吡啶/DMF(25毫升)10分钟(间歇搅拌)及新鲜的六氢吡啶试剂(25毫升)20分钟解析。树脂再以DMF(3×25毫升)及N-甲基吡咯烷酮(2×25毫升)洗涤。树脂转移至100毫升烧瓶后，N-甲基吡咯烷酮加入以得淤浆，再加212f(0.725克，1.57毫摩尔)，HOBT·H₂O(0.25克，1.6毫摩尔)，HBTU(0.61克，1.6毫摩尔)及DIEA(0.84毫升，4.8毫摩尔)。反应混合物在rt下搅动过夜，利用腕臂震荡器。树脂处理及以20％(v/v)Ac₂O/DMF如401中所述般加盖，得到402(6.21克，定量产率)。

C步骤。全成403。此化合物制备自树脂402(0.24克，0.038毫摩尔)，利用Advanced ChemTech 396多肽合成仪。自动化之循环包括以DMF(3×1毫升)洗涤树脂，以25％(v/v)六氢吡啶/DMF(1毫升)去保护3分钟，再以新鲜试剂(1毫升)历10分钟以生成树脂403。树脂以DMF(3×1毫升)及N-甲基吡咯烷酮(3×1毫升)洗涤。

D步骤。方法1。

(409)。树脂403以0.4M噻吩-3-甲酸及0.4M HOBT于N-甲基吡咯烷酮(1毫升)，0.4M HBTU于N-甲基吡咯烷酮(0.5毫升)及1.6M DIEA于N-甲基吡咯烷酮(0.35毫升)之溶液酰化，且反应在rt下震荡2小时。酰化步骤重覆。最后，树脂以DMF(3×1毫升)，CH₂Cl₂(3×1毫升)洗涤，再于真空下干燥。醛自树脂中解离，并以95％TFA/5％H₂O(v/v，1.5毫升)在rt下处理30分钟而整体地去保护。于以解离试剂(1毫升)洗涤树脂后，混合的滤液加至冷的1∶1Et₂O∶戊烷(12毫升)中，且生成的沉淀物以离心及倾析法分离。生成的团块再溶于10％CH₃CN/90％H₂O/0.1％TFA(15毫升)中并冷冻干燥以得粗制的409，呈白色粉末。化合物以半制备式反相HPLC纯化，利用Rainin Microsorb^TM C18管柱(5微米，21.4×250毫升)，以线型CH₃CN梯度(5％-45％)洗脱，内含有0.1％TFA(v/v)历45分钟，于12毫升/分。汇集含有欲求产物之流分，并冷冻干燥生成409(10.8毫克，63％)。

D步骤。方法1A.合成418。依类似方法1之步骤，树脂403，以4-(1-芴基甲氧羰基氨基)苯甲酸酰化并重覆，Fmoc基如C步骤般移去，游离胺以20％(v/v)Ac₂O于DMF(1毫升)及1.6M DIEA于N-甲基吡咯烷酮(0.35毫升)在rt下乙酰化2小时。重覆此乙酰化步骤。醛自树脂中解离得到418(3.2毫克)。

D步骤。方法1B.合成447。依循如方法1A之步骤。树脂403以0.4M 4-(1-芴基甲氧羰基氨基)苯甲酸酰化。酰化步骤重覆一次。Fmoc基如上般移去，且游离胺与1M甲烷磺酰氯于CH₂Cl₂(0.5毫升)及1M吡啶于CH₂Cl₂(0.60毫升)在rt下反应4小时。醛自树脂上解离得到447(10.0毫克)。

D步骤。方法2，合在214e。依循如方法1之类似步骤，树脂403以0.5M苯甲酰氯于N-甲基吡咯烷酮(1毫升)及1.6M DIEA于N-甲基吡咯烷酮(0.35毫升)中，以rt酰化2小时。酰化步骤重覆。醛自树脂中解离得到214e(5.1毫克，30％)。

D步骤。方法3.合成427。依循类似方法1之步骤，树脂403与1.0M苯磺酰氯于CH₂Cl₂(0.5毫升)及1M吡啶于CH₂Cl₂(0.60毫升)在rt下反应4小时。反应重覆。醛自树脂中解离得到427(7.2毫克，40％)。

D步骤。方法4。合成420。依循类似方法1之步骤，树脂403与0.5M异氰酸甲酯于N-甲基吡咯烷酮(1毫升)及1.6M DIEA于N-甲基吡咯烷酮(0.35毫升)反应，rt下2小时。反应重覆，醛自树脂中解离得到420(8.3毫克，55％)。

D步骤。方法5.合成445。依循方法1之类似步骤，树脂403以0.27M咪唑-2-甲酸(1毫升)于2∶1DMF∶H₂O(有1当量DIEA)及1M 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDC)于2∶1N-甲基吡咯烷酮/H₂O(0.35毫升)于rt下3小时而酰化。醛自树脂中解离得到445(9.5毫克)。分析HPLC方法：

(1)Waters DeltaPak C18，300A(5微米，3.9×150毫米)。直线CH₃CN梯度(5％-45％)含有0.1％TFA(v/v)于1毫升/分下历14分钟。

(2)Waters DeltaPak C18，300A(5微米，3.9×150毫米)。直线CH₃CN梯度(0％-25％)含有0.1％TFA(v/v)于1毫升/分下历14分钟。

(3)Waters DeltaPak C18，300A(5微米，3.9×150毫米)。等密度洗脱，以0.1％TFA/水(v/v)在1毫升/分下。

(4)Waters DeltaPak C18，300A(5微米，3.9×150毫米)。直线CH₃CN梯度(0％-30％)含有0.1％TFA(v/v)于1毫升/分下历14分钟。

(5)Waters DeltaPak C18，300A(5微米，3.9×150毫米)。直线CH₃CN梯度(0％-35％)含有0.1％TFA(v/v)以1毫升/分历14分钟。

表7

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

表7(续)

实施例12

化合物605a-j，605m-q，605s，605t及605v如下述地合成。

化合物编号	R₂	R₅
化合物编号	R₂	R₅	605a/103	H	CH₃
600b	H	CH₂Ph	605a/103	H	CH₃
600b	H	CH₂Ph	600c	CH₃	CH₂Ph

(600a/103)。

A步骤。(2S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-硝基苯基-氨基)-丙酸。(2S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-氨基丙酸(10克，49毫摩尔)，2-氟硝基苯(5.7毫升，54毫摩尔)，及NaHCO₃(8.25克，98毫摩尔)加至130毫升DMF，并在80℃下加热18小时。反应真空下蒸发以生成粘稠的橘色残留物，其溶于300毫升H₂O中再以Et₂O萃取(3×150毫升)。水溶液以10％NaHSO₄酸化至pH5，并以EtOAc萃取(3×250毫升)。混合的萃取物在无水Na₂SO₄上干燥，过滤，并蒸发生成12.64克(83％)标题化合物，呈橘色无晶形固体：¹HNMR(CD₃OD)δ8.15-8.10(1H，d)，7.54-7.48(1H，t)，7.13-7.08(1H，d)，6.73-6.65(1H，t)，4.45-4.35(1H，m)，3.9-3.8(1H，dd)，3.65-3.55(1H，dd)，1.45(9H，s)。

B步骤。(2S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-氨基苯基氨基)-丙酸。(2S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-硝基苯基氨基)丙酸(12.65克，40.5毫摩尔)及0.5克10％Pd/C于100毫升MeOH之混合物，在1大气压之氢气下搅拌4小时。溶液经由Celite 545过滤，且滤液真空下蒸发生成11.95克标题化合物，呈定量产率为暗棕色固体，即可使用勿需再纯化：¹H NMR(CD₃OD)δ6.75-6.70(3H，m)，6.65-6.58(1H，m)，4.35-4.3(1H，m)，3.6-3.38(2H，m)，1.45(9H，s)。

C步骤。(3S)-2-氧代-3-叔丁氧羰基氨基-1，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_。1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(8.54克，44.5毫摩尔)加至(2S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-氨基苯氨基)丙酸(11.95克，40.5毫摩尔)于100毫升DMF之冷却(0℃)溶液，并搅拌18小时。反应倒入700毫升EtOAc中，再以100毫升H₂O洗4次。有机层在无水Na₂SO₄上干燥，过滤，并蒸发生成棕色固体，其以快速层析纯化，并以3∶7EtOAc/己烷洗脱得到8克(71％)标题化合物：¹H NMR(CD₃OD)δ7.78(1H，s)，7.02-6.95(1H，m)，6.88-6.82(1H，m)，6.82-6.78(1H，m)，6.75-6.70(1H，m)，5.8-5.7(1H，d)，4.55-4.45(1H，m)，3.95(1H，s)，3.9-3.82(1H，m)，3.48-3.40(1H，m)，1.45(9H，s)。

D步骤。(600a/103)。1.0M双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(3.4毫升，3.4毫摩尔)于THF之溶液，逐滴加至(3S)-2-氧代-3-叔丁氧羰基氨基-2，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_-(0.94克，3.38毫摩尔)于20毫升无水THF之-78℃溶液，并搅拌30分钟。将溴乙酸甲酯(0.44毫升，4毫摩尔)逐滴加至反应混合物中，再加温至RT。反应以100毫升EtOAc稀释，再以0.3N KHSO₄(50毫升)，H₂O(2×50毫升)及盐水洗涤。合并的有机层在无水Na₂SO₄上干燥，过滤，并蒸发生成胶状物，再以快速层析纯化，以3∶7EtOAc/己烷洗脱生成0.98克(83％)标题化合物，呈白色固体。¹H NMR(CD₃Cl)δ7.15-7.07(2H，m)，6.98-6.94(1H，m)，6.88-6.84(1H，d)，5.62-5.55(1H，d)，4.71-4.65(1H，d)，4.65-4.6(1H，m)，4.33-4.27(1H，d)，3.96-3.90(1H，m)，3.78(3H，s)，3.44-3.37(1H，m)，1.4(9H，s)。(600b)。以类似600a/103(D步骤)之制法，除了使用溴醋酸苄酯替代溴醋酸甲酯之外，定量产率得到600b。

(600c)。

A步骤。(2S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-硝基-3，5-二甲基苯氨基)-丙酸。以类似制备600a/103之方法(A步骤)，除了使用2-氟-4，6-二甲基-硝基苯替代2-氟硝基苯得到欲求化合物，产率93％。

B步骤。(2S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-氨基-3，5-二甲基苯基氨基)-丙酸。(2S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-硝基-3，5-二甲基苯基氨基)丙酸，转化成标题化合物，呈定量产率，如600a/103之制法(B步骤)。

C步骤。2-氧代-(3S)-3-叔丁氧羰基氨基-2，3，4，5-四氢-7，9-二甲基-1H-1，5-苯并二氮杂_。(2S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-氨基-3，5-二甲基苯基氨基)-丙酸(763毫克，2.36毫摩尔)及N-甲基吗啉(483毫克，4.78毫摩尔)于60毫升无水THF之0℃溶液，以氯甲酸异丁酯逐滴处理(352毫克，2.5毫摩尔)。反应在0℃下搅拌2小时，于RT下1小时并倒入EtOAc。混合物以5％NaHSO₄水溶液，NaHCO₃饱和水溶液，及NaCl饱和水溶液洗涤，在NaSO₄上干燥并真空下浓缩。层析(快速，SiO₂，10％至25％至50％EtOAc/CH₂Cl₂)得到490毫克(68％)欲求产物。

D步骤。(600c)。(2S)-2-叔丁氧羰基胺基-3-(2-氨基-3，5-二甲基苯基-氧基)丙酸，以类似600b之制法转化成600c，75％。

(602a)。

A步骤。无水HCl泡腾至(3S)-2-氧代-3-叔丁氧羰基氨基-2，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_-1-醋酸甲酯(600a/103，4.0克，11.4毫摩尔)于20毫升CH₂Cl₂中历20分钟，再于RT下搅拌1小时。反应蒸发生成(3S)-2-氧代-3-氨基-2，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_-1-醋酸甲酯盐酸盐，呈白色固体。

B步骤。白色固体溶于70毫升DMF中再加苯甲酸(1.5克，12.3毫摩尔)。反应于冰/H₂O中冷却，再以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸(2.4克，12.5毫摩尔)1-羟基苯并三唑(1.7克，12.6毫摩尔)及二异丙基乙胺(3.0克，23.2毫摩尔)处理。反应在RT及氮气氛下搅拌18小时，再倒入H₂O中。水性混合物以EtOAc萃取(2x)。混合的有机层以0.5N NaHSO₄水溶液，H₂O，饱和的NaHCO₃水溶液，H₂O及饱和的NaCl水溶液洗涤，于MgSO₄上干燥再于真空下浓缩。层析(快速，SiO₂，10％至30％EtOAc/CH₂Cl₂)得到3.4克(85％)的(3S)-2-二氧代-3-(苯甲酰氨基)-2，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_-1-醋酸甲酯，呈白色固体。

C步骤。 A方法。(602a)。(3S)-2-氧代-3-(苯甲酰氨基)-2，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_-1-醋酸甲酯(200毫克，0.57毫摩尔)于CH₂Cl₂(10毫升)之溶液，以三乙胺(199毫克，1.13毫摩尔)及3-苯基丙酰氯(114毫克，0.68毫摩尔)处理。反应在RT下搅拌30分，再以CH₂Cl₂稀释。溶液以10％HCl水溶液，饱和的NaHCO₃水溶液，NaCl饱和水溶液洗涤，于Na₂SO₄上干燥并于真空下浓缩以生成240毫克(87％)的602a呈白色泡沫。

C步骤。 B方法。(602g)。(3S)-2-氧代-3-(苯甲酰氨基)-2，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_-1-醋酸苄酯(600b)(465毫克，1.10毫摩尔)于CH₂Cl₂(5毫升)之0℃溶液，以乙酰乙酸于1毫升CH₂Cl₂处理，再缓缓加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(431毫克，2.2毫摩尔)于2毫升CH₂Cl₂，于N₂大气下。15分钟后反应倒入EtOAc中，以饱和的5％NaHSO₄水溶液洗涤，于Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。层析(快速，SiO₂，0％至10％至25％MeOH/CH₂Cl₂)得到580毫克(3S)-2-氧代-3-(苯甲酰氨基)-5-乙酰乙酰基-2，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_-1-醋酸苄酯，呈白色固体。

C步骤。 C方法。(602j)。(3S)-2-氧代-3-(苯甲酰氨基)-2，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_-1-醋酸苄酯(600b)(461毫克，1.07毫摩尔)于THF(5毫升)及饱和NaHCO₃(2.5毫升)之剧烈搅拌的0℃液，以氯甲酸甲酯(151毫克，1.6毫摩尔)之THF溶液(0.25毫升)处理，且反应在RT下搅拌45分钟。反应倒入CH₂Cl₂中，再以水洗，于Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。层析(快速，SiO₂，0％至10％MeOH/CH₂Cl₂)得到525毫克的602j，呈白色固体。步骤C。 D方法。(602p)。602a/103(400毫克/1.1毫摩尔)及异氰酸苄基酯(166毫克，1.2毫摩尔)于10毫升CH₂Cl₂及10毫升DMF之溶液，在80℃下加热3天。反应冷却至RT再倒入H₂O中并以EtOAc萃取(2x)。混合的有机层以H₂O洗(4x)，再以饱和的NaCl洗，于MgSO₄上干燥并于真空下浓缩。层析(快速，SiO₂，50％至80％EtOAc/己烷)得到440毫克(80％)602p，呈白色固体。

C步骤。 E方法。(602v)。(3S)2-氧代-3-氨基-5-(3-苯基丙酰基-2，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_-1-醋酸甲酯盐酸(560毫克，1.34毫摩尔)，苄醛(146毫克，1.34毫摩尔)及醋酸钠(220毫克，2.68毫摩尔)于甲醇(20毫升)之溶液，以4_筛(2克)及NaCNBH₃(168毫克，2.68毫摩尔)处理。反应搅拌2.5小时，以10％HCl水溶液酸化至pH2，再以Et₂O洗涤(2×75毫升)。有机层真空浓缩得到油。层析(快速，SiO₂，0至35％EtOAc/CH₂Cl₂)得到250毫克(40％)602v，呈澄清油。

步骤D。 A方法。(603a)。(3S)-2-氧代-3-苯甲酰氨基-5-(3-苯基丙酰基)-2，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_-1-醋酸甲酯(602a)；1.25克，2.57毫摩尔)溶于11毫升THF，MeOH及H₂O(5∶5∶1)中，再以LiOH·H₂O(42毫克，0.62毫摩尔)处理并于RT下搅拌64小时。反应于真空下浓缩，以H₂O稀释并以1N HCl水溶液酸化以生成230毫克的603a，呈白色固体。

步骤D。 B方法。(603d)。(3S)-2-氧代-3-(苯甲酰氨基)-5-乙酰基-2，3，4，5-四氢-1H-1，5-苯并二氮杂_-1-乙酸苄酯(602d；510毫克，1.08毫摩尔)及5％Pd/C(250毫克)于MeOH(10毫升)之混合物在H₂(1大气压下)搅拌0.5小时。反应过滤且真空浓缩得到410毫克的603d，呈白色固体。

表8化合物如表9所述地制备，利用实施例12之方法。

表8

表9

表10化合物如表11所述地制备，利用实施例12方法。

表10

化合物编号	R₂	R₃	R₄	R₅
化合物编号	R₂	R₃	R₄	R₅	602n	H	CH₃C(O)	萘基-2-C(O)	CH₂Ph
602o	CH₃	CH₃C(O)	PhC(O)	CH₂Ph	602n	H	CH₃C(O)	萘基-2-C(O)	CH₂Ph
602o	CH₃	CH₃C(O)	PhC(O)	CH₂Ph	602t	H	3-CH₃PhCH₂C(O)	PhC(O)	CH₂Ph
602u	H	CH₃C(O)	Fmoc	CH₂Ph	602t	H	3-CH₃PhCH₂C(O)	PhC(O)	CH₂Ph
602u	H	CH₃C(O)	Fmoc	CH₂Ph	602v	H	PhCH₂CH₂CO	PhCH₂	CH₃

表11

No.	起始物质	1)C步骤R₃X方法(％产率)	3)C步骤R₄X方法(％产率)	D步骤方法(％产率)
No.	起始物质	1)C步骤R₃X方法(％产率)	3)C步骤R₄X方法(％产率)	D步骤方法(％产率)	603n	602k	CH₃C(O)ClA(quant.)	naphthylene-2-C(O)ClA(70)	B(quant.)
603o	602l	CH₃C(O)ClA(quant.)	PhC(O)ClA(73)	B(quant.)	603n	602k	CH₃C(O)ClA(quant.)	naphthylene-2-C(O)ClA(70)	B(quant.)
603o	602l	CH₃C(O)ClA(quant.)	PhC(O)ClA(73)	B(quant.)	603t	602k	3-CH₃PhCH₂C(O)ClA(quant.)	PhC(O)ClA(93)	B(95)
603u	602k	CH₃C(O)ClA(quant.)	Fmoc-ClC(82)	C(98)	603t	602k	3-CH₃PhCH₂C(O)ClA(quant.)	PhC(O)ClA(93)	B(95)
603u	602k	CH₃C(O)ClA(quant.)	Fmoc-ClC(82)	C(98)	603v	600a/103	PhCH₂CH₂C(O)ClA	PhCHOE(40)	A(95)

表12化合物如下述方法制备。

表12

(605a)。

A步骤。(3S)-3-(1-芴基甲氧羰基氨基)-4-氧代丁酸叔丁酯半卡巴腙(210毫克。0.45摩尔，以类似苄氧羰基同系物之Graybill等，国际蛋白质研究杂志 Int.J.Protein Res.，44，pp.173-82(1994)所述方式)溶于10毫升DMF及2毫升二乙胺中，再搅拌2小时。反应于真空下浓缩生成(3S)-3-氨基-4-氧代丁酸叔丁酯半卡巴腙。上述残留物及603a(200毫克，0.42毫摩尔)于5毫升DMF及5毫升CH₂Cl₂之0℃溶液，以1-羟基苯并三唑(57毫克，0.42毫摩尔)及1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(98毫克，0.51毫摩尔)处理。反应在RT下搅拌18小时，倒入EtOAc(75毫升)再以0.3NKHSO₄水溶液，NaHCO₃饱和水溶液及NaCl饱和水溶液洗涤，于NaSO₄上干燥及真空浓缩。层析(快速，SiO₂，0％-4％MeOH/0/1％NH₄OH/CH₂Cl₂)生成240毫克(83％)的604a。

B步骤。604a与10毫升33％TFA/H₂O搅拌4小时，再于真空中浓缩。残留物溶于7毫升MeOH/醋酸/37％甲醛水溶液(5∶1∶1)中，并搅拌18小时。层析(逆相C18，4.4毫米ID×25厘米，15％至70％CH₃CN/0.1％TFA/H₂O)得到32毫克(16％)的605a呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD，呈半缩醛非对映立体异构形式)δ7.85-7.78(2H，d)，7.5-7.32(6H，m)，7.32-7.28(1H，m)，7.18-6.98(5H，m)，4.92-4.85(2H，m)，4.5-4.32(2H，m)，4.31-4.20(2H，m)，3.7-3.6(1H，m)，2.90-2.75(2H，m)，2.65-2.5(1H，m)，2.48-2.25(3H，m)。

以下化合物以相似方法制备：

(605b)。148毫克(33％)呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ7.9-6.9(m，16H)，4.9(s，2H)，4.5(m，1H)，4.4(m，2H)，3.75(s，1H)，3.6(dd，1H)，3.45(dd，1H)，2.7(m，1H)，2.5(m，1H)。

(605c)。319毫克(56％)呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ7.9-6.9(m，16H)，5.1(m，1H)，4.9(dd，1H)，4.7(m，1H)，4.6(dd，1H)，4.4(m，2H)，4.05(m，1H)，2.7(m，1H)，2.5(m，1H)。

(605d)。190毫克(38％)呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ1.9(d，H)，2.4(m，1H)，2.65(m，1H)，3.7(m，1H)，4.25(m，1H)，4.45(m，2)，4.8-5.05(m，3H)，7.3-7.7(m，7H)，7.9(d，2H)。

(605e)。250毫克(78％)：¹H NMR(CD₃OD)δ1.87(bs)，1.95(s，2H)，2.1(bs)，2.4(m，2H)，2.65(m，2H)，3.59(bs)，3.75(bs)，3.87(bs)，4.19(m)，4.37(m)，4.50-4.78(bm)，4.92(m)，5.27(bs)，7.41-7.58(m，7H)，及7.87ppm(d，2H)。

(605f)。210.5毫克(46％)呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ7.9-7.4(m，9H)，5.1(m，1H)，4.9(m，1H)，4.6(dd，1H)，4.4(m，2H)，4.1(d，1H)，3.8(m，1H)，3.5(q，1H)，2.7(m，1H)，2.5(m，1H)，2.0(m，3H)，1.2(t，1H)，0.9(d，3H)，0.8(d，3H)。

(605g)。81毫克(19％)白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ7.9-7.3(m，11H)，4.9-4.8(m，2H)，4.6-4.4(m，3H)，4.3(m，1H)，3.75(q，1H)，3.55(d，1H)，2.7(m，1H)，2.5(m，1H)，2.05(s，3H)。

(605h)。227毫克(54％)呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ2.5(m，1H)，2.7(m，1H)，3.55(s，3H)，3.8-4.0(m，2H)，4.4(m，1H)，4.6-4.8(m，2H)，4.95(d，1H)，5.1(m，1H)，7.3-7.7(m，7H)，7.9(d，2H)，8.6(d，1H)。

(605i)。150毫克(37％)，白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ7.9-7.3(m，12H)，5.1(m，1H)，4.65(t，1H)，4.55(dd，1H)，4.35(m，1H)，4.1(d，1H)，3.9(q，1H)，3.45(q，1H)，2.7(m，1H)，2.5(m，1H)，2.25(s，3H)。

(605j)。234毫克(44％)呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ7.9-7.4(m，12H)，5.0(m，1H)，4.8-4.5(m，3H)，4.4(m，1H)，4.3(t，1H)，3.9-3.75(m，2H)，3.6(s，3H)，2.7(m，1H)，2.5(m，1H)。

(605m)。64.5毫克(34％)呈白色固体：¹H NMR(DMSO-d₆，呈半缩醛之非对映异构形式和醛之开环形式)δ9.48(0.2H，s)，8.85-8.72(1H，m)，8.65-8.60(0.8H，d)，8.30-8.26(0.2H，d)，7.95-7.88(2H，d)，7.6-7.45(6H，m)，7.44-7.38(1H，m)，5.78-5.75(0.2H，d)，5.48(0.6H，s)，4.85-4.70(2H，m)，4.62-4.54(1H，d)，4.50-4.40(2H，m)，4.25-4.14(1H，m)，3.9-3.85(1H，m)，3.16(3H，s)，3.05-2.3(2，m)。

(605n)。103毫克(17％)呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ1.9(s，3H)，2.5(m，1H)，2.65(m，1H)，3.75(m，1H)，4.3(m，1H)，4.5-4.7(m，3H)，4.85-5.1(m，2H)，7.3-7.65(m，6H)，7.85-8.05(m，4H)，8.45(s，1H)。

(605o)。42毫克(12％)呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD，呈半缩醛之非对映立体异构型)δ7.85-7.74(2H，m)，7.5-7.44(1H，m)，7.43-7.35(4H，m)，5.6-5.05(2H，m)，4.82-4.42(2H，m)，4.40-3.95(2H，m)，3.6-3.5(1H，m)，2.7-2.38(2H，m)，2.32(3H，s)，2.27(3H，s)，1.92(3H，s)。

(605p)。165毫克(37％)呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ2.45(m，¹H)，2.7(m，1H)，3.8(m，1H)，4.15-4.5(m，4H)，4.5-4.75(m，2H)，4.8-5.0(m，2H)，7.1-7.7(m，12H)，7.9(d，2H)。

(605q)。210毫克(66％)¹H NMR(CD₃OD)δ1.95(s，2H)，2.4(m，2H)，2.65(m，2H)，3.29(s，3H)，3.78(m)，3.87(bs)，4.0(d，1H)，4.32(m)，4.50-4.15(m)，4.95(m)，5.27(bs)，7.45-7.65(m，7H)，及7.89ppm(d，2H)。

(605s)。128毫克(19％)白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ8.5-7.4(m，13H)，5.0(m，1H)，4.7(m，1H)，4.5(m，2H)，4.45-4.4(m，3H)，3.8-3.7(m，2H)，2.7(m，1H)，2.5(m，1H)。

(605t)。132毫克(24％)呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ7.8-6.7(m，13H)，4.9(t，1H)，4.75(dd，1H)，4.2(dd，1H)，4.1(m，2H)，3.8(dd，1H)，3.6(q，1H)，3.45(dd，1H)，3.3(dd，1H)，2.6(m，1H)，2.3(m，1H)，2.15(s，3H)。

(605v)。88毫克(28％)呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ7.63-7.51(2H，m)，7.5-7.35(7H，m)，7.25-7.10(3H，m)，7.1-7.02(2H，m)，5.04-4.96(1H，m)，4.75-4.57(2H，m)，4.38-4.26(2H，m)，4.24-4.12(2H，m)，4.10-4.02(1H，d)，4.88-4.80(1H，m)，2.90-2.80(2H，m)，2.78-2.63(1H，m)，2.55-2.35(2H，m)，2.34-2.22(1H，m)。

表13化合物述于下。

#	R₂	R₃	R₄	R₆	R₆
#	R₂	R₃	R₄	R₆	R₆	609a	H	PhCH₂CH₂C(O)	PhCH₂CH₂C(O)	Cl	Cl
609b	H	CH₃C(O)	PhC(O)	Cl	Cl	609a	H	PhCH₂CH₂C(O)	PhCH₂CH₂C(O)	Cl	Cl

(609a)。

A步骤。204(223毫克，0.5毫摩尔)及603r(300毫克，0.36毫摩尔)于4毫升DMF及4毫升CH₂Cl₂之溶液，以(Ph₃P)₂PdCl₂(10毫克)，1-羟基苯并三唑(135毫克，1.0毫摩尔)及1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(115毫克，0.6毫摩尔)处理。逐滴加氢化三正丁锡(219毫克，0.75毫摩尔)至反应中并搅拌18小时。反应倒入EtOAc中并以10％NaHSO₄水溶液，NaHCO₃饱和水溶液及NaCl饱和水溶液洗涤，于Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。层析(快速，SiO₂，0％至50％EtOAc/己烷)得到360毫克(86％)的607a呈泡沫状。

B步骤。607a(360毫克)于5毫升CH₂Cl₂之溶液，逐滴加至1，1，1-三乙酰基-1，1-二氢-1，2-苯并二氧代-3(1H)-酮(362毫克，0.85毫摩尔)于20毫升CH₂Cl₂之悬浮液中。反应搅拌4.5小时，以CH₂Cl₂稀释再以1∶1饱和的NaHCO₃水溶液/Na₂S₂O₃饱和水溶液混合物，饱和的NaHCO₃水溶液(2x)及饱和的NaCl水溶液洗涤，于Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。层析(快速，SiO₂，20％EtOAc/CH₂Cl₂)得到340毫克(95％)酮608a。

C步骤。608a(300毫克，0.36毫摩尔)溶于25毫升25％TFA/CH₂Cl₂中，再于RT下搅拌5小时并真空浓缩。层析(快速，SiO₂，0-5％MeOH/CH₂Cl₂)得到118毫克(42％)的609a，呈白色固体：¹H NMR(CD₂OD)δ7.62-6.65(16H，m)，4.85-4.7(1H，m)，4.68-4.42(2H，m)，4.40-4.15(2H，m)，3.48-3.28(1H，m)，3.0-2.9(1H，m)，2.9-2.6(4H，m)，2.55-2.18(3H，m)，2.16-1.96(2H，m)。

(609b)制备自603d，以类似609a之方法得到287毫克(43％总和产率)呈白色固体：¹H NMR(DMSO-d₆)δ1.6(s，3H)，2.7-3.1(m，2H)，3.45(m，1H)，4.4(t，1H)，4.7(m，2H)，4.95(m，1H)，5.2，5.4(2s，1H)，7.2-7.65(m，8H)，7.9(d，2H)，8.8(t，1H)，8.9，9.1(2s，1H)，12.6(br，1H)。

(612)，以类似607a之方法(仅A及C步骤)利用603m(150毫克，0.36毫摩尔)替代603r，及(3S)-3-(烯丙氧羰基氨基)-4-氧代-5-(2，6-二氯苯甲酰氧基)戊酸叔丁酯(110；160毫克，0.36毫摩尔，WO 93/16710)替代606a，得到612(56％)呈白色固体：¹H NMR(CDCl₃)δ7.85-7.10(12H，m)，5.4-4.65(4H，m)，4.6-4.15(4H，m)，3.10-2.72(5H，s&m)。

实施例13

化合物619-635依据实施例13及表14所述合成。

619-635之合成。

A步骤。614之合成。TentaGel S^_NH₂树脂(0.16毫摩尔/克，10.0克)置于多孔之玻璃漏斗中，并以二甲基甲酰胺(3×50毫升)，10％(v/v)二异丙基乙胺(DIEA)于二甲基甲酰胺(2×50毫升)及最后的二甲基甲酰胺(4×50毫升)洗涤。加充分量的二甲基甲酰胺至树脂中，以得淤浆，再加400(1.42克，2.4毫摩尔，制备自(3S)-3-(芴基甲氧羰基)-4-氧代丁酸叔丁酯，依A.M.Murphy等美国化学杂志 J.Am.Chem.Soc.，114，3156-3157(1992)制备)，1-羟基苯并三唑水合物(HOB T.H₂O；0.367克，2.4毫摩尔)O-苯并三唑-N，N，N，N′-四甲基鎓六氟磷酸盐(HBTU；0.91克，2.4毫耳)及DIEA(0.55毫升，3.2毫摩尔)。反应混合物在室温下利用腕臂震荡器搅动过夜。树脂在多孔玻璃漏斗上经吸空过滤分离，再以二甲基甲酰胺洗涤(3×50毫升)。未反应的氨基再加盖，即树脂与20％(v/v)醋酐/二甲基甲酰胺(2×25毫升)在漏斗中直接反应(10分钟/洗涤)。树脂以二甲基甲酰胺(3×50毫升)及二氯甲烷(3×50毫升)洗涤，再于真空下干燥过夜生成614(11.0克，定量产率)。

B步骤。616之合成。树脂614(3.0克，0.16毫摩尔/克，0.48毫摩尔)于多孔玻璃漏斗中以二甲基甲酰胺(3×15毫升)洗涤而泡胀。Fmoc保护基再以25％(v/v)六氢吡啶/二甲基甲酰胺(15毫升)解离10分钟(间歇搅拌)，再以新鲜的六氢吡啶试剂解离20分钟。树脂再以二甲基甲酰胺(3×15毫升)及N-甲基吡咯烷酮(2×15毫升)洗涤。树脂转移至100毫升烧瓶后，加N-甲基吡咯烷酮以得淤浆，再加603u(0.736克，0.72毫摩尔)HOBT·H₂O(0.112克，0.73毫摩尔)，HBTU(0.27克，0.73毫摩尔)及DIEA(0.26毫升，1.5毫摩尔)。反应混合物在室温下利用腕臂震荡器搅动过夜。树脂以20％(v/v)醋酐于二甲基甲酰胺中之处理及加盖，如614所述地进行以生成616(3.13克，定量产率)。

C步骤。617之合成。此化合物制备自616(0.24克，0.038毫摩尔)，利用Advanced ChemTech 396多肽合成仪进行。自动化循环包括有以二甲基甲酰胺(3×1毫升)洗涤树脂，以25％(v/v)六氢吡啶/二甲基甲酰胺(1毫升)去保护3分钟，再以新鲜试剂(1毫升)历10分钟以生成树脂617。树脂以二甲基甲酰胺(3×1毫升)及N-甲基吡咯烷酮(3×1毫升)洗涤。

D步骤。方法1。(624)。树脂617以0.4M噻吩-3-羧酸及0.4M HOBT于N-甲基吡咯烷酮(1毫升)溶液，0.4M HBTU于N-甲基吡咯烷酮(0.5毫升)及1.6M DIEA于N-甲基吡咯烷酮(0.35毫升)溶液酰化，且反应在室温下搅拌2小时。酰化步骤重覆。最后，树脂以二甲基甲酰胺(3×1毫升)，二氯甲烷(3×1毫升)洗涤，再于真空中干燥。醛自树脂上解离，再以95％TFA/5％H₂O(v/v，1.5毫升)在室温下整体处理30分钟而去保护之。树脂以解离试剂(1毫升)洗涤后，混合的滤液加至冷的1∶1乙醚∶戊烷(12毫升)中(生成的沉淀物离心及倾析分离之。生成的团块溶于10％乙腈/90％H₂O/0.1％TFA(15毫升)中，再冷冻干燥以得粗制的624，呈白色粉末。化合物以半制备式RP-HPLC纯化，利用Rainin Microsorb^TM C18管柱(5微米，21.4×250毫米)，并以线性乙腈梯度洗脱(5％-45％)含有0.1％TFA(v/v)历45分钟，12毫升/分。含有欲求产物之流分汇集再冷冻干燥得到624(10.0毫克，54％)。

D步骤。1A之方法。合成627。依循方法1之相似步骤，树脂617以4-(1-芴基甲氧羰基氨基)苯甲酸酰化并重覆之。Fmoc基如C步骤所述地移去，且游离胺以20％(v/v)乙酐于二甲基甲酰胺(1毫升)及1.6M DIEA于N-甲基吡咯烷酮(0.35毫升)在室温下酰化2小时。重覆乙酰化步骤。醛自树脂中解离得到627(4.2毫克，20％)。

D步骤。方法2.合成632。依循方法1之相似步骤，树脂617以0.5M肉桂酰基氯于N-甲基吡咯烷酮(1毫升)及1.6M DIEA于N-甲基吡咯烷酮(0.35毫升)在室温下酰化2小时。酰化步骤重覆。醛自树脂中解离得到632(11.1毫克，58％)。

D步骤。方法3。合成629。依循方法1之类似步骤，树脂617与1.0M苯磺酰氯于二氯甲烷(0.5毫升)及1M吡啶于二氯甲烷(0.60毫升)中于室温下反应4小时。反应重覆。醛自树脂解离得到629(4.7毫克，24％)。

分析HPLC方法

(1)Waters DeltaPak C18，300A(5微米，3.9×150毫米)。线性乙腈梯度(5％-45％)含有0.1％TFA(v/v)历14分钟，于1毫升/分下。

表14

表14(续)

表14(续)

表14(续)

表14(续)

实施例14

化合物1605a-j，1605m，1605n，1605p，1605t及1605v如下述地合成。

(3S)N-(2-氧代-3-叔丁氧羰基氨基-2，3，4，5-四氢-1H-吡啶并[3，4-b][1，4]-二氮杂_(1600)。

A步骤。(2S)2-叔丁氧羰基氨基-3-(3-硝基吡啶-2-基氨基)丙酸，以类似600a/103合成之2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-硝基苯基-氨基)丙酸A步骤方法制备，除了使用3-氯-3-硝基吡啶替代2-氟硝基苯，得到4.05克(64％)黄色固体。

B步骤。(2S)2-叔丁氧羰基氨基-3-(3-氨基吡啶-2-基氨基)丙酸，以类似600a/103合成之(2S)2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-氨基苯基氨基)丙酸之B步骤制备，得到3.68克(定量)的暗色固体。

C步骤。(2S)2-叔丁氧羰基氨基-3-(3-氨基吡啶-2-基氨基)丙酸甲酯。(2S)2-叔丁氧羰基氨基-3-(3-氨基吡啶-2-基氨基)丙酸(360毫克，1.21毫摩尔)及MeOH(59毫克，1.82毫摩尔)于无水CH₂Cl₂(20毫升)之溶液，以4-二甲氨基吡啶(DMAP，163毫克，1.33毫摩尔)及1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(280毫克，1.45毫摩尔)处理。反应搅拌18小时，以EtOAc(150毫升)稀释，以水(2x)，饱和的NaHCO₃及饱和的NaCl水溶液洗涤，于Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。层析(快速，SiO₂，0至5％MeOH/CH₂Cl₂)得到250毫克(67％)标题化合物呈浅褐色固体。

D步骤。

(1600)。(2S)2-叔丁氧羰基氨基-3-(3-氨基吡啶-2-基氨基)丙酸甲酯(70毫克，0.225摩尔)及25％甲醇钠/MeOH(130微升，0.56毫摩尔)于无水MeOH(4毫升)之溶液加热至60℃16小时。反应在真空下浓缩，残留物溶于2毫升H₂O中再以EtOAc萃取(3x)。混合的萃取物在Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。层析(快速，SiO₂，0至3％MeOH/CH₂Cl₂)得到7.5毫克(3％)的1600，呈浅褐色固体。¹H NMR(CD₃OD)δ7.96-7.92(1H，d)，7.75-7.65(1H，br.s)，7.14-7.08(1H，d)，6.73-6.65(1H，m)，5.83-5.75(1H，br.s)，5.4-5.25(1H，br.s)，4.6-4.5(1H，m)，3.95-3.84(1H，m)，3.55-3.48(1H，m)，1.4(9H，s)。

E步骤。1601制备自1600，依循600a/103制备之D步骤方法。

1603之合成。1603制备自1601，依循自600合成603之方法。

1605之合成。1605制备自1603，依由603制备605之方法。

表15

1605	R₃	R₄
1605	R₃	R₄	a	PhCH₂CH₂CO	PhCO
b	PhCH₂CO	PhCO	a	PhCH₂CH₂CO	PhCO
b	PhCH₂CO	PhCO	c	PhCO	PhCO
d	CH₃CO	PhCO	c	PhCO	PhCO
d	CH₃CO	PhCO	e	CH₃OCH₂CO	PhCO
f	(CH₃)₂CHCH₂CO	PhCO	e	CH₃OCH₂CO	PhCO
f	(CH₃)₂CHCH₂CO	PhCO	g	CH₃COCH₂CO	PhCO
h	CH₃OCOCO	PhCO	g	CH₃COCH₂CO	PhCO
h	CH₃OCOCO	PhCO	i	CH₃COCO	PhCO
j	CH₃OCO	PhCO	i	CH₃COCO	PhCO
j	CH₃OCO	PhCO	m	CH₃SO₃	PhCO
n	CH₃CO	萘基-2-CO	m	CH₃SO₃	PhCO
n	CH₃CO	萘基-2-CO	p	PhCH₂NHCO	PhCO
t	3-CH₃PhCH₂CO	PhCO	p	PhCH₂NHCO	PhCO
t	3-CH₃PhCH₂CO	PhCO	v	PhCH₂CH₂CO	PhCH₂

实施例15

化合物1610-1621制备自1600，以由600a/103及600b制备化合物619-635所用之类似方法。

其中于化合物1610-1621，

aR₃＝CH₃C(O)-

bR₃＝CH₃OCH₂C(O)-；

实施例16

化合物含有骨架(e11)，(y1)，(y2)，(z)及(e12)可如下述地合成。骨架R₁之合成，其中R₁是(e11)且Y₂是＝O。

骨格R₁之合成，其中R₁是(y1) Y₂＝0

骨格R₁之合成，其中R₁是(y2)且其中Y₂是H₂且X₇是O

骨格R₁之合成，其中R₁是(y2)Y₂＝0且X₇是NH

骨格R₁之合成，其中R₁是(y2)Y₂是H₂且X₇是NH

骨格R₁之合成，其中R₁是(z) Y₂是O

骨格R₁之合成，其中R₁是(e12) Y₂＝0

实施例17

化合物2001，2002，2100a-e及2201之制备如下述。

(2000)。对9-氨基-6，10-二氧代-1，2，3，4，7，8，9，10-八氢-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸叔丁酯(GB 2，128，984；340毫克，1.15毫摩尔)于CH₂Cl₂之溶液中，加入苯甲酰基甲酸(260毫克，1.7毫摩尔)，HOBT(230毫克，1.7毫摩尔)及EDC(340毫克，1.7毫摩尔)。生成的混合物在环境温度下搅拌16小时，倒入1N HCl中再以CH₂Cl₂萃取。有机萃取物进一步以饱和的NaHCO₃洗涤，于MgSO₄上干燥并浓缩生成1999，呈浅黄色固体。固体溶于CH₂Cl₂(25毫升)及TFA(25毫升)中并搅拌过夜，再真空浓缩生成560毫克的2000，呈油状。

(2001)合成自2000，以类似化合物213e之方法得到410毫克(63％)的2001，呈白色固体；¹H NMR(CDCl₃；非对映立体异构体之混合物)δ8.25(1H，d)，8.23(1H，d)，7.78(1H，dd)，7.65(1H，bm)，7.50(2H，m)，7.40-7.25(4H，m)，6.55(1H，d)，5.57(1H，d)，5.10(1H，t)，5.05-4.95(2H，m)，4.90(1H，d)，4.80(1H，d)，4.72(1H，bm)，4.65(1H，m)，4.55(1H，m)，4.45(1H，t)，3.25(1H，m)，3.15(1H，m)，3.00(2H，bm)，2.90(1H，dd)，2.70(1H，m)，2.47(1H，dd)，2.45(1H，m)，2.35(1H，m)，2.00-1.75(4H，m)，1.60(1H，bm)。

(2002)。化合物2001(58.6毫克，0.10毫摩尔)以5毫升TFA/MeCN/水(1∶2∶3)处理，并在室温下搅拌6.5小时。反应以乙醚萃取。水层以利用MeCN共沸移去水方式浓缩。产物悬浮于CH₂Cl₂，于真空下浓缩并以乙醚沉淀得到46.8毫克(99％)的2002，呈白色固体：¹H NMR(CD₃OD)δ9.05(0.25H，d)，8.15(1H，d)，7.68(1H，t)，7.64(0.25H，d)，7.55(3H，t)，7.35(0.5H，m)，5.22(1H，t)，4.90(1H，m)，4.58(1H，dd)，4.50(1H，m)，4.28(1H，bm)，3.45(1H，m)，3.10(1H，bt)，2.68(1H，ddd)，2.60-2.45(2H，m)，2.30(1H，dd)，2.15-2.05(2H，m)，1.90(2H，bm)，1.68(1H，bm)。

(2100a)。214e(101毫克，0.23毫摩尔)于异丙醇(10毫升)之溶液，在室温下以催化剂量之对甲苯磺酸(10毫克)搅拌。75分钟后，反应混合物倒入饱和的NaHCO₃中再以CH₂Cl₂萃取。混合的萃取物于Na₂SO₂上干燥并浓缩。快速层析(SiO₂，CH₂Cl₂至EtOAc)得到56毫克(51％)的2100a，呈白色固体：¹H NMR(CDCl₃；非对映立体异构体之混合)δ7.9-7.8(2H，m)，7.6-7.5(1H，m)，7.5-7.4(2H，m)，7.1(0.5H，d)，6.9(0.5H，d)，6.4(0.5H，d)，5.6(0.5H，d)，5.3(0.5H，s)，5.2-5.1(1H，m)，4.95(0.5H，m)，4.75-4.5(1.5H，m)，4.35(0.5H，tt)，4.1(0.5H，m)，3.98(0.5H，m)，3.3-2.75(4H，m)，2.5-2.4(2H，m)，2.25(1H，m)，2.1-1.9(3H，m)，1.75-1.55(2H，m)。

(2100b)。214e(16毫克，0.036毫摩尔)于乙醇(2毫升)之溶液在室温下以催化剂量之对甲苯磺酸(2毫克)处理。5天后，反应混合物倒入饱和的NaHCO₃中再以CH₂Cl₂萃取。混合的萃取物于Na₂SO₂上干燥并浓缩。快速层析(SiO₂，CH₂Cl₂∶EtOAc 95∶5v/v)得到16毫克(81％)的2100b，呈白色固体：¹H NMR(CDCl₃)δ7.85-7.74(2H，m)，7.55-7.38(3H，m)，7.04-6.95(1H，d)，6.61-6.48(1H，d)，5.15-5.08(1H，m)，4.63-4.53(1H，m)，4.52-4.45(1H，m)，4.42-4.35(1H，m)，4.15-4.05(2H，m)，3.74-3.60(2H，m)，3.57-3.42(2H，m)，3.39-3.28(1H，m)，3.03-2.93(1H，m)，2.92-2.82(1H，m)，2.65-2.52(2H，m)，2.42-2.25(1H，m)，2.20-1.88(4H，m)，1.76-1.50(2H，m)，1.35-1.10(9H，m)。

(2100c)。214e(165毫克，0.37毫摩尔)于甲醇(5毫升)之溶液在室温下与催化剂量的对甲苯磺酸(17.5毫升)共搅拌。4天后，反应混合物以EtOAc稀释，再以10％NaHCO₃(3x)及盐水洗涤。混合的萃取物于Na₂SO₄上干燥并浓缩。快速层析/SiO₂，EtOAc)得到127毫克(68％)的2100c，呈白色固体：¹HNMR(CDCl₃)δ7.82(2H，d)，7.55-7.50(1H，m)，7.47-7.43(2H，m)，7.02(1H，d)，6.53(1H，d)，5.20-5.10(1H，m)，4.56-4.50(1H，m)，4.45-4.50(1H，each，two m)，3.69(3H，s)，3.41(3H，s)，3.43(3H，s)，3.35-3.25(1H，m)，3.06-2.98(1H，m)，2.94-2.83(1H，m)，2.65-2.53(2H，m)，2.35-2.32(1H，m)，2.15-2.07(1H，m)，2.00-1.89(3H，m)，1.75-1.56(2H，m)。

(2100d)。214e(53毫克，0.12毫摩尔)于异丙醇(5毫升)之溶液，在50℃下与催化剂量的对甲苯碘酸(5毫克)共搅拌。3天后，反应混合物倒入饱和的NaHCO₃中再以CH₂Cl₂萃取。混合的萃取物于Na₂SO₄上干燥及浓缩，快速层析(Si₂O，CH₂Cl₂∶EtOAc(4∶1至1∶1v/v)得到49毫克(68％)的2100d，呈白色固体：¹H NMR(CDCl₃)δ7.85(2H，d)，7.50-7.43(1H，m)，7.41-7.35(2H，m)，7.02(1H，d)，6.47(1H，d)，5.13-5.07(1H，m)，5.00-4.9(1H，m)，4.61-4.55(2H，m)，4.37-4.30(1H，m)，3.80-3.70(1H，m)，3.90-3.80(1H，m)，3.42-3.35(1H，m)，3.03-2.93(1H，m)，2.91-2.81(1H，m)，2.62-2.50(2H，m)，2.38-2.33(1H，m)，2.12-2.06(1H，m)，1.97-1.81(3H，m)，1.70-1.60(2H，m)，1.28-1.05(18H，m)。

(2100e)合成自302，经由合成304a之方法，得到2100e，除了使用乙醇及原甲酸三乙酯替代甲醇及原甲酸酯三甲之外。层析(SiO₂，5％乙醇/CH₂Cl₂)得到92毫克(68％)的白色固体：¹H NMR(CDCl₃；非对映体之混合物)δ7.90-7.80(2H，m)，7.60-7.50(1H，m)，7.50-7.40(2H，m)，7.30(0.5H，d)，7.00(0.5H，d)，6.50(0.5H，d)，5.50(0.5H，d)，5.20-5.10(1.5H，m)，4.95(0.5H，m)，4.75-4.65(0.5H，m)，4.65-4.50(1H，m)，4.38(0.05H，t)，4.00-3.90(0.5H，m)，3.85-3.75(0.5H，m)，3.75-3.65(0.5H，m)，3.65-3.55(0.5H，m)，3.30-2.70(4H，m)，2.50-2.35(2H，m)，2.30(1H，d)，2.15-1.90(3H，m)，1.80-1.60(2H，m)，1.25-1.20(3H，two t)。

(2201)合成自600b，利用合成自605b之方法得到2001：¹H NMR(CDCl₃)δ8.30-8.22(1H，m)，8.05-7.98(1H，d)，7.96-7.83(1H，m)，7.77-7.68(1H，m)，7.67-7.40(7H，m)，5.12-5.02(1H，m)，4.98-4.41(5H，m)，4.38-4.24(1H，m)，4.07-4.00(1H，d)，3.92-3.80(2H，m)，3.32(3H，s)，2.75-2.60(1H，m)，2.58-2.35(1H，m)。

实施例18

我们利用本说明书中所述之方法得到本发明所选定化合物的以下数据(表16，见实施例7；表17及18，见实施例1-4)。本发明化合物之结构及制备述于实施例28-31中。

表16前药于受LPS攻击小鼠中效力之比较：IL-1β产生之抑制作用。示出以本发明化合物处理后IL-1β产生之抑制百分率，为LPS挑战后之时间函数关系(“-”表示在相对时间下无数值得到)。

化合物投予时间(相对于LPS挑战时间，PO，50毫克/千克)

化合物	-2h -1h 0h +1h
化合物	-2h -1h 0h +1h	213f	(-4) - 8 -
213h	9 - 53 -	213f	(-4) - 8 -
213h	9 - 53 -	213i	(-11) - 62 -
213k	0 - 68 -	213i	(-11) - 62 -
213k	0 - 68 -	213l	(-18) - 80 -
213m	26 - 42 -	213l	(-18) - 80 -
213m	26 - 42 -	213o	4 - 8 -
213p	21 - 29 -	213o	4 - 8 -
213p	21 - 29 -	213q	17 - 91 -
213r	59 - 37 -	213q	17 - 91 -
213r	59 - 37 -	213x	0 - 78 -
213y	29 - 50 -	213x	0 - 78 -
213y	29 - 50 -	214e	39 - 70 7543 44 48 11- - - 47
214k	12 - 31 -	214e	39 - 70 7543 44 48 11- - - 47
214k	12 - 31 -	214l	0 - 54 -
214m	0 - 17 -	214l	0 - 54 -
214m	0 - 17 -	214w	11 - 91 -
264l	0 - 23 -	214w	11 - 91 -
264l	0 - 23 -	404	- - - 5655 - 6 -

化合物	-2h -1h 0h +1h
化合物	-2h -1h 0h +1h	412	0 - 0 -11 - 37 -
418	- - - 6425 - 52 -	412	0 - 0 -11 - 37 -
418	- - - 6425 - 52 -	434	- - - 800 - 63 -
450	0 - 35 -	434	- - - 800 - 63 -
450	0 - 35 -	452	- - - 7028 - 89 -
456	- - - 5641 - 69 -	452	- - - 7028 - 89 -
456	- - - 5641 - 69 -	470	0 - 36 -
471	0 - 34 -	470	0 - 36 -
471	0 - 34 -	475	0 - 15 -
481	27 - 0 -	475	0 - 15 -
481	27 - 0 -	486	19 - 15 -
487	17 - 20 -	486	19 - 15 -
487	17 - 20 -	528	25 - 67 -
550f	0 - 50 -	528	25 - 67 -
550f	0 - 50 -	550h	55 - 73 -
550i	(-10) - 23 -	550h	55 - 73 -
550i	(-10) - 23 -	550k	36 - 34 -
550l	9 - 38 -	550k	36 - 34 -
550l	9 - 38 -	550m	45 - 52 -
550n	19 - 65 -	550m	45 - 52 -
550n	19 - 65 -	550o	19 - 64 -
550p	30 - 60 -	550o	19 - 64 -
550p	30 - 60 -	655	0 - 68 -
656	31 - 16 -	655	0 - 68 -
656	31 - 16 -	662	41 - 75 -
668	- - - 53	662	41 - 75 -
668	- - - 53	695a	49 - 78 -
1015	15 - 28 -	695a	49 - 78 -
1015	15 - 28 -	2001	64 62 58 55
2001a	10 - 16 -	2001	64 62 58 55
2001a	10 - 16 -	2002	5 - 87 -
2100h	34 - 32 -	2002	5 - 87 -
2100h	34 - 32 -	2100i	19 - 74 -
2100j	48 41 0 33	2100i	19 - 74 -
2100j	48 41 0 33	2100k	30 50 32 72
2100l	52 - 28 -	2100k	30 50 32 72
2100l	52 - 28 -	2100m	40 - 42 -
2100n	21 9 64 73	2100m	40 - 42 -
2100n	21 9 64 73	2100o	31 44 68 64

表17利用实施例1-4所述方法所得的本发明选定化合物之数据。

化合物	UV-可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v.ml/min/kg
化合物	UV-可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v.ml/min/kg	213f			3000
213g			2200			213f			3000
213g			2200			213h			1500
213i			1100			213h			1500
213i			1100			213j
213k			2000			213j
213k			2000			213l			2000
213m			2500			213l			2000
213m			2500			213o		5000	3300
213p			＜300			213o		5000	3300
213p			＜300			213q			＜300
213r			＜300			213q			＜300
213r			＜300			213v	0.5	1,100	1100	41	23
213x		4500	2500			213v	0.5	1,100	1100	41	23
213x		4500	2500			213y			930
214j	4.2	2500	6000			213y			930
214j	4.2	2500	6000			214k	0.2	500	580		22
214l	6	1900	1100		12	214k	0.2	500	580		22
214l	6	1900	1100		12	214m	1.5	530	2200		33.4
214w	0.6	620	370		15	214m	1.5	530	2200		33.4
214w	0.6	620	370		15	246b	30000	＞30000		87
264l			3000			246b	30000	＞30000		87
264l			3000			265a	2600	25000
265c	1100	4500			32	265a	2600	25000
265c	1100	4500			32	265d	500	1500			35
265f	1200				24	265d	500	1500			35
265f	1200				24	280b		13000
280c		10000			86	280b		13000
280c		10000			86	280d		25000
283b		1750			41	280d		25000
283b		1750			41	283c		4000			50

表17(续)

化合物	可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v.ml/min/kg
化合物	可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v.ml/min/kg	283d		＞8000	10000
308c	3000					283d		＞8000	10000
308c	3000					308d	3000
500	25	1800	1800			308d	3000
500	25	1800	1800			501	2.5	1800	1600
505c		1500				501	2.5	1800	1600
505c		1500				505d		＞20000
505f		550				505d		＞20000
505f		550				510a	65	200		267
510d	2300	＞20000				510a	65	200		267
510d	2300	＞20000				511c	730	＞20000		78	40
528			2200			511c	730	＞20000		78	40
528			2200			550f			1100
550h			1800			550f			1100
550h			1800			550i			1400
550k			3000			550i			1400
550k			3000			550l			750
550m			2000			550l			750
550m			2000			550n			＜300
550o		450	3000			550n			＜300
550o		450	3000			550p			2900
550q			700			550p			2900
550q			700			640	155	2250	3900
642	35	8000	2900			640	155	2250	3900
642	35	8000	2900			645	150
650	550	4000				645	150
650	550	4000				653	30	2300	6000
655						653	30	2300	6000
655						656	0.6	2100	1600		2.9
662	0.5	1800	800		2.75	656	0.6	2100	1600		2.9
662	0.5	1800	800		2.75	668	9	5200	3700		29
669	14		10000			668	9	5200	3700		29
669	14		10000			670			4500
671	5	2000	2500		33.2	670			4500
671	5	2000	2500		33.2	677			610
678	5	2700	2200			677			610
678	5	2700	2200			680

表17(续)

化合物	UV-可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v.ml/min/kg
化合物	UV-可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v.ml/min/kg	681	9	3000	5000
682			1300			681	9	3000	5000
682			1300			683	400	＞20000	＞20000
684	15	5000	2800			683	400	＞20000	＞20000
684	15	5000	2800			686	4	4000	9000
688a			3000			686	4	4000	9000
688a			3000			688b			1300
689a	0.8	910	2500			688b			1300
689a	0.8	910	2500			689b	2.2	600	2000
690a			1600			689b	2.2	600	2000
690a			1600			690b
691a	2.1	2900	1200		9.9	690b
691a	2.1	2900	1200		9.9	691b	11.5	1,900	1400
692a						691b	11.5	1,900	1400
692a						692b			1800
693						692b			1800
693						694	3	2600	2100
695a						694	3	2600	2100
695a						695b
695c			2500			695b
695c			2500			696	4.5	2000	2900	13
700	275					696	4.5	2000	2900	13
700	275					701	90
702	45	＞5000	20000			701	90
702	45	＞5000	20000			703	5	1400	20000
704	30	2600	9800			703	5	1400	20000
704	30	2600	9800			705	5	2300	3200
706	5	2400	5800			705	5	2300	3200
706	5	2400	5800			707	180
708	140					707	180
708	140					709	10	2100	14000
710	110					709	10	2100	14000
710	110					711	175
910	10	3400	3800			711	175
910	10	3400	3800			911	9	3500	1900
912	10	4200	3800			911	9	3500	1900
912	10	4200	3800			913	4.5	2400	7000

表17(续)

化合物	UV-可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v.ml/min/kg
化合物	UV-可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v.ml/min/kg	914	5.2	2600	2800
915	11.5	＞8000	1900			914	5.2	2600	2800
915	11.5	＞8000	1900			918	7		1150
919	4	2000	4300			918	7		1150
919	4	2000	4300			920	16	2100	3000
921	8.5	1800	3000			920	16	2100	3000
921	8.5	1800	3000			1018	170	4000	5500	9.1
1052	100	2500			16	1018	170	4000	5500	9.1
1052	100	2500			16	1053	27	2000	＞20000	34
1056	170				17	1053	27	2000	＞20000	34
1056	170				17	1075	120	5000	5500	14.5
1095	360	6000			28	1075	120	5000	5500	14.5
1095	360	6000			28	1105	250	3500	3000
1106	75	4000	1700			1105	250	3500	3000
1106	75	4000	1700			1107	65
1108	22	1400	2600			1107	65
1108	22	1400	2600			1109	80
1110	45					1109	80
1110	45					1111	18	6050	4400
1112	3.5	1800	2300			1111	18	6050	4400
1112	3.5	1800	2300			1113	290
1114	125					1113	290
1114	125					1115	250
1116	215					1115	250
1116	215					1117	35	1700	1300
1118	380					1117	35	1700	1300
1118	380					1119	515
1120	95					1119	515
1120	95					1121	170
1122	400					1121	170
1122	400					1123	30	2,400	4500
1124	270					1123	30	2,400	4500
1124	270					1125	55	2300	9000
2001a			3000			1125	55	2300	9000
2001a			3000			2100f
2100g						2100f
2100g						2100h			2000

表17(续)

化合物	UV-可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v.ml/min/kg
化合物	UV-可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v.ml/min/kg	2100i
2100j	30000		12000			2100i
2100j	30000		12000			2100k	520	4000	600
2100l		750	2200			2100k	520	4000	600
2100l		750	2200			2100m
2100n	670	770	4000			2100m
2100n	670	770	4000			2100o	670	1150	1500

我们利用本说明书中所述方法(见实施例1-4)得到以下本发明选定化合物之数据(表18)。本发明化合物之结构及制备示于实施例28-31。

表18

化合物	荧光分析kinactm^-1s^-1	细胞PBMC平均IC50(nM)	人类全血IC50(nM)	小鼠清除率，i.v.毫升/分/千克	大鼠清除率，i.v.毫升/分/千克
化合物	荧光分析kinactm^-1s^-1	细胞PBMC平均IC50(nM)	人类全血IC50(nM)	小鼠清除率，i.v.毫升/分/千克	大鼠清除率，i.v.毫升/分/千克	286	370000	300	1600	119
505b	190000	1500	2100	161	196	286	370000	300	1600	119
505b	190000	1500	2100	161	196	505c	420000	9000	1000

实施例19

充作抗炎剂之效力体内急性分析法

于表19之结果显示，412f，412d及696a于利用乙醇/PEG/水，β-环糊精，labrosoL/水或cremophor/水充作载体口服后可在LPS-攻击之小鼠中抑制IL-1β的产生。化合物于施以LPS之时给药。策略述于实施例7。

表19于LPS-攻击小鼠中IL-1β产生之抑制率(％)。

化合物	10毫克/千克剂量	25毫克/千克剂量	50毫克/千克剂量
化合物	10毫克/千克剂量	25毫克/千克剂量	50毫克/千克剂量	412f	17％	25％	32％
412e	5％	17％	61％	412f	17％	25％	32％
412e	5％	17％	61％	696a	0	45％	52％

实施例20

小鼠角叉菜胶腹膜发炎

小鼠以10毫克角叉菜胶(carrageenan)于0.5毫升食盐水经腹膜内(IP)注射而诱生发炎(Griswold等，炎症 Inflammation，13，pp.727-739(1989))。药物于乙醇/PEG/水，β-环糊精，labrosol/水或cremophor/水载体中再经口灌食投药。投予角叉菜胶4小时后处死小鼠，再以2毫升含有5单位/毫升肝素之食盐水IP注射。于腹部缓和按摩后切一小切口，收集内容物再记录体积。样品保持在冰上直到离心(130xg，8分钟，4℃)以移去细胞物质，且生成的上清液贮于-20℃下。以ELISA决定腹水中之IL-1β水平。

表20之结果显示前药412f可于角叉菜胶攻击之小鼠于口服药物后抑制IL-1β产生。化合物214e当以50毫克/千克口服时不会抑制IL-1β产生。

表20 412f及412d于施以角叉菜胶攻击小鼠中对IL-1β产生之抑制率(％)。

剂量(毫克/千克)	化合物412f	化合物412d
剂量(毫克/千克)	化合物412f	化合物412d	1	30％	0
10	54％	32％	1	30％	0
10	54％	32％	25	49％	31％
50	73％	36％	25	49％	31％
50	73％	36％	100	75％	53％

实施例21

II型胶原蛋白-诱导之关节炎

于雄性DBA/1J小鼠中诱发II型胶原蛋白诱生之关节炎，如Wooley和Geiger(Wooley，P.H.，酶学方法 Methods in Enzymology，162，pp.361-373(1988)及Geiger，T.，临床与实验风湿病学 Clinical and Experimental Rheumatology，11，pp.515-522(1993))所述。小鸡胸骨II型胶原蛋白(4毫克/千克于10mM醋酸)以等体积的Freund’s完全佐剂(FCA)乳化，系在二个10毫升玻璃注射器及16号双毂针间重覆抽逆(400)而成。小鼠于21天后在尾基部之对-侧边处皮内注入胶原白乳剂(50微升；100微升CII/小鼠)而使免疫之。药物经口灌食每天二次约距7小时(10，25及50毫克/千克)。所使用之溶媒包括乙醇/DEG/水，β-环糊精，labrosol/水或cremophor/水。在CII追加免疫接种2小时内开始药物之治疗。在二个前爪记录发炎情况，按逐渐严重度记1至4，并累记记分得最终记分。

于图12，13及14之结果显示，前药412f，412d及696a可于口服至小鼠后抑制由胶原蛋白-诱生之关节炎发炎。化合物214e当口灌食一天一次时(50毫克/千克)并不会抑制发炎。

实施例22

体内生物利用度之决定

药物于乙醇/PEG/水，β-环糊精，labrosol/水或cremophor/水中口服投予(10-100毫克/千克)至大鼠(10毫升/千克)。于给药后0.25，0.50，1，1.5，2，3，4，6及8小时后自颈动脉中抽血，离去血浆再贮于-70℃直到分析。利用酶分析决定醛浓度。利用RStrip(MicroMath Software，UT)经非线性回归进行数据之药物动力分析。可如下决定药物之生物利用度值：(前药口服后之药物AUC/药物i.v.给药后之药物AUC)×(i.v.剂量/p.o.剂量)×100％。

表21之结果显示前药412f，412d及696a当口服时可得显著的血中药物水平且有良好的药物利用度。当口服时并未测及214e之血中水平。

表21 412f，412d，696a及214e之大鼠中之口服生物利用度。

化合物	剂量(毫克/千克)	Cmax(微克/毫升)	药物利用率(％)
化合物	剂量(毫克/千克)	Cmax(微克/毫升)	药物利用率(％)	412f	25	2.4	32
412d	25	2.6	35	412f	25	2.4	32
412d	25	2.6	35	696a	50	1.2	10
214e	45	0.2	0.9％	696a	50	1.2	10

实施例23

ICE解离及活化pro-IGIF

ICE及ICE同系物表达质粒

0.6kb编码全长鼠pro-IGIF之cDNA(H.Okamura等，自然Nature，378，p.88(1995)连接至哺乳动物表达载体pCDLSRα(Y.Takebe等，分子及细胞生物学 Mol.Cell Biol.，8，p.466(1988))。

一般而言，编码活性ICE(上文)或三个ICE-相关酶TX，CPP32，及CMH-1，于pCDLSR α表达载体之质粒(3微克)，(C.Faucheu等， EMBO，14，p.1914(1995)；Y.Gu等， EMBO，14，p.1923(1995)；J.A.Lippke等，(美)生物化学杂志 J.Biol.Chem.，271，p.1825(1996))利用DEAE-右旋糖酐方法(Y.Gu.等，EMBO杂志 EMBO J.，14，p.1923(1995))转染至35毫米盘中之Cos细胞次于融合状之单层中。24小时后，细胞溶解，溶胞产物接受SDS-PAGE及免疫吸渍，利用与IGIF具特异性之抗血清进行(H。Okamura等，自然 Nature，378，p.88(1995)。

使用聚合酶链反应在鼠pro-IGIF cDNA之5′及3′端引入NdeI位置，利用以下引子：

GGAATTCCATATGGCTGCCATGTCAGAAGAC(向前)及

GGTTAACCATATGCTAACTTTGATGTAAGTTAGTGAG(逆向)。生成的NdeI片段在NdeI位置处连接至大肠杆菌表达载体pET-15B(Novagen)以生成质粒，其可指令213个氨基酸多肽之合成，此肽包括有21-残基之肽(MGSS HHHHHHSSG LVPRGSHM，其中LVPRGS代表一个凝血酶解离位置)在架构上融合至pro-IGIF在Ala2之N-末端，可由质粒之DNA定序及表达蛋白质之N-末端定序证实。携有质粒之大肠杆菌株BL21(DE3)以0.8mM异丙基-1-硫-β-D-半乳糖吡喃糖苷在37℃下诱导1.5小时，回收，以微量流化作用(Microfluidic，Watertown，MA)于缓冲溶液A(20mM磷酸钠，pH7.0，300mM Nal，2mM二硫苏糖醇，10％甘油，1mM苯基甲基磺酰基氟，及2.5微克/毫升亮肽素)中溶解。溶胞产物在100,000xg下离心30分钟使澄清化。再自上清液中经Ni-NTA-琼脂糖(Qiagen)层析纯化出(His)6-加筛之pro-IGIF蛋白质，条件如厂商所建议的。

体外pro-IGIF解离反应

体外的解离反应(30微升)含有2微克经纯化的pro-IGIF，及各种浓度的经纯化蛋白酶，于含有20mM Hepes，pH7.2，0.1％ Triton X-100，2mMDTT，1mM PMSF及2.5微克/毫升亮肽素之缓冲溶液中，并在37℃下培育1小时。为粒酶B解离之条件如前述(Y.Gu等，(美)生物化学杂志 J.Biol. Chem.，271，p.10816(1996))。解离产物以16％凝胶上之SDS-PAGE及考马斯蓝染色分析，并接受N-末端氨基酸定序，利用ABI自动化肽定序仪，条件则如厂商所建议的。

ICE解离IGIF之动力学参数

如下决定ICE解离IGIF之动力学变数(k_cat/K_M’，K_M’，及k_cat)。将标记有³⁵S-甲硫氨酸之pro-IGIF(3000cpm，由体外TNTT⁷-偶合网状细胞溶胞系统(Promega)及pro-IGIF eDNA于pSP73载体为模板转录及翻译在60微升含有0.1至1nM重组ICE及190nM至12μM未标记之pro-IGIF之反应混合物中，以37℃培育8-10分钟。以SDS-PAGE及PhosphoImager分析决定解离产物之浓度。将速率对浓度数据与Michaelis-Menten方程式利用程序Enzifitter(Biosoft)行非线性回归配合而估计出动力学变数。

IFN-γ诱导分析

于96孔洞盘内之A.E7 Thl细胞(H.Qull和R.H.Schwartz，免疫学杂志J.Immunol.，138，p.3704(1987))1.3×10⁵细胞于0.15毫升添加有10％FBS，50μM 2-巯基乙醇及50单位/毫升IL-2之Click’s培养基中)以IGIF处理18-20小时，且培养物上清液分析INF-γ(利用ELISA(Endogen，Cambridge，MA))。

实施例24

于Cos细胞内ICE对pro-IGIF之处理修饰

如实施例23般，Cos细胞以各种表达质粒之组合转染。经转染之Cos细胞(3.5×10⁵细胞于35毫米之皿内)以1毫升无甲硫氨酸之DMEM，含有2.5％正常DMEM，1％经透析之胚牛血清及300微居里/毫升³⁵S-甲硫氨酸(³⁵S-Express Protein Labeling-Mix，新英格兰核素New EnglandNuclear)标记7小时。溶胞产物(制备于20mM Hepes，pH7.2，150mM NaCl，0.1％ Triton X-100，5mM N-乙基马来酰亚胺，1mM PMSF，2.5微克/毫升亮肽素)或调适培养基，以抗-IGIF抗体免疫沉淀，其可确认IGIF的前体及成熟形式(H.Okamura等，自然 Nature，378，p.88(1995))。SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)及荧光照相(图2A)分析免疫沉淀之蛋白质。

我们在溶胞产物及经转染细胞之调适培养基中测及IFN-γ诱导活性(图2B)。转染的Cos细胞(3.5×10⁵细胞于35毫米皿中)生长在1毫升培养基中历18小时。培养基回收并以1∶10最终稀释应用于IFN-γ诱导分析中(实施例23)。来自相同转染作用之Cos细胞团块溶解于100微升20mMHepes，pH7.0中，系冷冻-解冻达3次。溶胞产物以上述般离心而澄明之，并以1∶10稀释倍数应用于分析中。

实施例25

IGIF是ICE之生理底物

野生型(ICE+/+及ICE-/-小鼠给予热灭活的P.acnes，且于备妥后7天自小鼠中分离出肝巨噬细胞，并施以1微克/毫升LPS攻击历3小时。以ELISA侦测出调适培养基中之IGIF量。

野生型或缺乏ICE的小鼠腹膜内注入经热杀死之 p.acnes，如所述(H.Okamura等，感染与免疫 Infection and Immunity，63，p.3966(1995))。7天后备妥肝巨噬细胞，依据Tsutsui等(H.Tsutsui等， Hepato- Gastroenterol.，39，p.553(1992))除了使用nycodenz梯度替代metrizamide。于各实验，汇集2-3只动物之Kupffer细胞并培养在添加有10％胚牛血清及1微克/毫升LPS之RPMI1640中溶胞产物及调适培养基3小时后备妥。

来自野生型及ICE-1-小鼠之Kupffer细胞，代谢性标以³⁵S-甲硫氨酸，如Cos细胞一般(如实施例24所述)除了使用无甲硫氨酸之RPMI 1640以替代DMEM。在溶胞产物及调适培养基中进行IGIF免疫沉淀实验，免疫沉淀物以SDS-PAGE及荧光照相分析，如实施例23所述。见图3。

实施例26

体内IFN-γ产生之诱导

将LPS与0.5％羧甲基纤维素于PBS，pH7.4混合，以10毫克/千克剂量体积经由腹膜内注射(30毫克/千克LPS)投予至小鼠。每3小时采血历24小时，取自三个一组之ICE-缺失的或野生型小鼠。以ELISA决定血清中INF-γ水平(Endogen)。

实施例27

ICIF及INF-γ抑制分析

于本说明书中所述之ICE抑制分析中侦测ICE抑制剂对IGIF处理修饰之抑制作用(见实施例1及表22)。

人类PBMC分析

人类血液黄层细胞得自供血者，并于LeukoPrep管中内离心分离出周边血液单核细胞(PBMC)(Becton-Dickinson，Lincoln Park，NJ).PBMC(加至(3×10⁶/孔洞)24孔洞之Corning组织培养盘中，经37℃下培育1小时后，以缓和冲洗移去未粘附之细胞。已粘附的单核细胞以LPS(1微克/毫升)在有或无ICE抑制剂下于2毫升RPMI-1640-10％FBS中刺激。经37℃下16-18小时培育后，以ELISA定量培养物上清液中之IGIF及IFN-γ。

例如，我们利用本说明书中所述之方法可得本发明化合物412的下列数据。化合物412之结构示于下。

表22

化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)
化合物	UV-可见光Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	412	1.3	580

实施例28

本发明化合物可以各种方法制备。以下说明一个较佳的方法：

向A(1.1当量)于CH₂Cl₂(或DMF，或CH₂Cl₂∶DMF(1∶1))之溶液中加入三苯膦(0-0.5当量)，亲核性清除剂(2-50当量)及四(三苯膦)化钯(O)(0.05-0.1当量)，于惰性气氛(氮或氩)及环境温度下。10分钟后，上述反应混合物视所需地浓缩，再加入酸A-I或A-II于CH₂Cl₂(或DMF或CH₂Cl₂∶DMF(1∶1))之溶液，再加入HOBT(1.1当量)及EDC(1.1当量)。生成的反应混合物令其在环境温度下搅拌1至48小时，以生成偶合产物C-I或C-II。

于上述过程中可使用各种亲核性清除剂：Merzouk和Guibe，四面体通讯 Tetrahedron Letters，33，pp.477-480(1992)；Guibe和Balavoine，有机化学杂志 Journal of Organic Chemistry，52，pp.4984-4993(1987))。可使用的优选的亲核性清除剂包括：双甲酮，吗啉，三甲基硅烷基二甲胺及二甲基巴比妥酸。更优选的亲核性清除剂为三甲基硅烷基二甲胺(2-5当量)及二甲基巴比妥酸(5-50当量)。当亲核性清除剂是三甲基硅烷基二甲胺时，上述反应混合物必需是浓缩，再加入A-I或A-II。

本发明其他化合物可如下流程所述，由水解由C-I及C-H代表之化合物成由H-I及H-II代表之化合物而制备：

水解可在各种条件下进行，只要条件中包括有酸及H₂O。可使用的酸包括对甲苯磺酸，甲烷磺酸，硫酸，高氯酸，三氟乙酸，及氢氯酸。如，三氟乙酸(1-90重量％)或氢氯酸(0.1-30重量％)于CH₃CN/H₂O(H₂O1-90重量％)，于0-50℃间，可利用。

实施例29

化合物213f，213g，213h，213i，213j，213k，213l，213m，214f，214g，214h，214i，214j，214k，214l，214m，550f，550g，550h，550i，550j，550k，550l及550m可如下制备。

(213f)合成自212f，利用自212e制备213e之方法得到504毫克的213f，呈黄色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ1.10(br.m，0.25H)，1.30(br.m，2H)，1.50(br.m，1H)，1.65(br.m，1.5)，1.80(br.m，0.25H)，1.90(br.m，0.25H)，1.95(br.m，0.5H)，2.05(br.m，0.25H)，2.15(m，1H)，2.3(m，1H)，2.5(br.m，1H)，2.6(dd，1H)，2.8(m，1H)，3.1(br.s，3H)，3.15(br.m，1H)，3.32(br.s，3H)，3.5(m，1H)，4.5(b r.m，1H)，4.62(d，0.25H)，4.72(m，3H)，4.95(m，1H)，5.1(br.t，0.25H)，5.15(br.t，0.75H)，5.7(d，1H)，6.75(d，2H)，7.35(br.s，5H)，7.75(d，2H)。

(213g)合成自212g，利用自212e制备213e之方法得到400毫克的213g，¹H NMR(CD₃OD)δ1.5(br.m，1H)，1.65(b r.m，2H)，1.70(br.m，0.25H)，1.90(br.m，1H)，1.95(br.m，1H)，2.05(br.m，0.25H)，2.10(m，1H)，2.3(m，1H)，2.5(m，2H)，2.59(d，1H)，2.6(d，1H)，2.78(d，1H)，2.8(d，1H)，2.93(br.s，4H)，3.05(br.m，1H)，3.15(br.m，0.25H)，3.3(br.s，3H)，3.5(m，2H)，4.5(br.m，2H)，4.65(d，1H)，4.7(br.m，2H)，4.95(br.m，1H)，5.15(br.t，0.25H)，5.2(br.t，0.75H)，5.2(d，1H)，6.95(d，1H)，7.15(d，1H)，7.25(br.s，1H)，7.3(br.t，2H)，7.45(b r.s，6H)。

(213h)合成自212h，利用自212e制备213e之方法得到296毫克的213h，¹H NMR(CDCl₃)δ1.55-1.68(m，1H)，1.7-2.05(m，3H)，2.3-2.5(m，2H)，2.65-2.8(m，1H)，2.85-2.93(m，1H)，2.95-3.25(m，3H)，4.44-4.65(m，2H)，4.68-4.82(m，1H)，4.9-4.95(d，1H)，5.05-5.18(m，2H)，5.28(s，0.5H)，5.55-5.58(d，0.5H)，6.52-6.58(d，0.5H)，6.7-6.76(m，2H)，6.82-6.85(d，0.5H)，7.3-7.4(m，5H)，7.52-7.58(m，1H)，7.75(s，0.5H)，7.8(s，0.5H)。

(213i)合成自212i，利用由212e制备213e之方法得到1.1克的213i，¹HNMR(CDCl₃)δ1.55-2.05(m，6H)，2.26-2.5(m，2H)，2.68-2.82(m，1H)，2.85-2.92(m，1H)，2.95-3.25(m，2H)，3.82(s，1.5H)，3.85(s，1.5H)，4.4-4.65(m，2H)，4.7-4.78(m，1H)，4.88-4.95(m，1H)，5.05-5.23(m，1H)，5.28(s，0.5H)，5.55-5.58(d，0.5H)，6.6-6.65(m，1H)，6.8-6.84(m，1H)，6.9-6.95(m，3H)，7.3-7.45(m，4H)，7.78-7.85(m，2H)。

(213j)合成自212j，利用由212e制备213e之方法，得到367毫克的213j，¹H NMR(CDCl₃)δ1.55-2.05(m，12H)，2.25(d，1H)，2.35(m，1H)，2.48(m，2H)，2.75(m，2H)，2.9(m，1H)，2.95-3.25(m，5H)，4.45(t，1H)，4.5-4.6(m，4H)，4.7(m，1H)，4.75(d，1H)，4.88(m，1H)，5.05(m，2H)，5.15(q，1H)，5.3(s，1H)，5.58(d，1H)，6.5(d，1H)，6.9(d，1H)，7.05(d，1H)，7.25-7.35(m，5H)，7.6(s，2H)，7.7(s，2H)。

(213k)合成自212k，利用自212e制备213e之方法得到593毫克的213k，¹H NMR(CD₃OD)δ1.5(m，1H)，1.6-1.7(m，2H)，1.75-1.95(m，4H)，2.15(m，2H)，2.3(m，1H)，2.6(m，1H)，2.7(m，1H)，3.05(m，2H)，3.15(m，1H)，3.5(m，2H)，4.45(m，2H)，4.65(d，1H)，4.7(m，1H)，4.95(m，1H)，5.15(m，1H)，5.4(s，1H)，5.7(d，1H)，7.3(m，5H)，7.85(s，2H)。

(213l)合成自212l，利用自212e制备213e之方法，得到133毫克的213l，¹H NMR(CDCl₃)δ1.55-1.7(m，1H)，1.75-2.05(m，3H)，2.25(s，1.5H)，2.27(s，1.5H)，2.3-2.48(m，2H)，2.7-2.83(m，1H)，2.85-2.94(dd，1H)，2.95-3.25(m，2H)，4.42-4.65(m，2H)，4.68-4.85(m，1H)，4.88-4.95(m，1H)，5.05-5.18(m，2H)，5.32(s，0.5H)，5.55-5.6(d，0.5H)，6.48-6.55(d，1H)，6.88-6.92(d，1H)，7.0-7.04(d，0.5H)，7.15-7.2(d，0.5H)，7.3-7.4(m，4H)，7.64-7.78(m，2H)，7.88-7.94(m，1H)，8.45-8.56(m，1H)。

(213m)合成自212m，利用由212e制备213e之方法，得到991毫克的213m，¹H NMR(CDCl₃)δ1.5-2.15(m，5H)，2.2-2.55(m，3H)，2.6-3.3(m，4H)，3.95(2s，3H)，4.45-4.7(m，2H)，4.7-4.85(m，1H)，4.80-4.95(m，1H)，5.05-5.25(m，1H)，5.3(s，0.5H)，5.6(d，0.5H)，6.55(d，0.5H)，6.85(d，0.5H)，7.0(d，0.5H)，7.25-7.6(m，5.5H)，7.75(s，1H)，7.85(s，1H)。

(550f)合成自212f，利用由212e制备213e之方法，得到420毫克的550f，呈掺白色固体，¹H NMR(CDCl₃)δ1.2-1.25(br.t，3H)，1.35(m，1H)，1.55(br.m，1H)，1.88-2.02(br.m，4H)，2.3(d，1H)，2.35(m，1H)，2.45(m，1H)，2.55-2.75(m，3H)，3.0(s，6H)，3.25(m，1H)，3.55(m，1H)，3.65(m，1H)，3.75(m，1H)，3.9(m，1H)，4.3(t，1H)，4.55(m，2H)，4.68(br.m，1H)，3.9(m，1H)，4.3(t，1H)，4.55(m，2H)，4.68(br.m，1H)，4.95(br.m，1H)，5.1(br.m，2H)，5.45(d，1H)，6.5(m，2H)，7.7(m，2H)。

(550h)合成自212h，利用由212e制备213e之方法，得到195毫克的550h，呈白色固体，¹H NMR(DMSO-d₆)δ1.1-1.18(2t，3H)，1.6-1.7(m，2H)，1.88-2.05(m，2H)，2.1-2.5(m，3H)，2.48-2.56(m，1H)，2.75-2.8(m，0.75H)，2.88-3.08(m，1.25H)，3.25-3.4(m，1H)，3.55-3.8(m，2H)，4.35-4.45(m，1H)，4.55-4.62(m，1H)，4.8-4.88(m，1H)，4.98-5.03(m，0.25H)，5.1-5.13(m，0.75H)，5.33(s，0.25H)，5.58-5.6(d，0.75H)，5.9-6.0(br.s，2H)，6.8-6.85(d，1H)，7.58-7.62(d，1H)，7.82(s，1H)，8.22-8.28(d，1H)，8.48-8.52(d，0.75H)，8.72-8.76(d，0.25H)。

(550i)合成自212i，利用由212e制备213e之方法得到135毫克的550i，¹H NMR(CDCl₃)δ1.18-1.28(2t，3H)，1.6-1.75(m，1.5H)，1.9-2.1(m，3.5H)，2.22-2.3(d，0.5H)，2.38-2.47(m，1.5H)，2.7-2.8(m，0.5H)，2.8-2.93(m，1H)，2.94-3.15(m，1.5H)，3.15-3.28(m，1H)，3.55-3.62(q，0.5H)，3.62-3.73(q，0.5H)，3.78-3.88(q，0.5H)，3.88(s，3H)，3.9-3.95(q，0.5H)，4.33-4.4(m，0.5H)，4.5-4.55(m，1H)，4.68-4.76(m，0.5H)，4.9-4.95(m，0.5H)，5.1-5.2(m，1.5H)，5.18(s，0.5H)，5.48-5.52(d，0.5H)，6.48-6.55(d，0.5H)，6.85-6.9(m，1H)，6.9-6.95(m，2H)，7.34-7.38(d，0.5H)，7.78-7.85(m，2H)。

(550k)合成自212k，利用由212e制备213e之方法得到174毫克的550k，呈白色固体，¹H NMR(DMSO-d₆)δ1.15(2t，3H)，1.6-1.75(m，2H)，1.9-2.05(m，2H)，2.1-2.4(m，5H)，2.5-2.55(m，1H)，2.7-2.8(m，0.5H)，2.85-3.0(m，1H)，3.0-3.1(m，0.5H)，3.55-3.7(m，1H)，3.7-3.8(m，1H)，4.2(t，0.5H)，4.35-4.45(m，0.5H)，4.55-4.65(m，0.5H)，4.8-4.9(m，0.5H)，5.05(t，0.5H)，5.15(t，0.5H)，5.35(s，0.5H)，5.6(d，0.5H)，7.95(s，2H)，8.5(d，0.5H)，8.65(d，1H)，8.75(d，0.5H)，10.9(br.s，1H)。

(550l)合成自212l，利用由212e制备213e之方法，得到151毫克的550l，¹H NMR(CDCl₃)δ1.2-1.28(2t，3H)，1.6-1.72(m，1.5H)，1.88-2.15(m，3.5H)，2.22-2.28(m，0.5H)，2.28(s，3H)，2.38-2.48(m，1.5H)，2.66-2.92(m，1.5H)，2.95-3.14(m，1.5H)，3.2-3.34(m，1H)，3.56-3.63(q，0.5H)，3.63-3.72(q，0.5H)，3.8-3.85(q，0.5H)，3.9-3.95(q，0.5H)，4.32-4.38(m，0.5H)，4.5-4.62(m，1H)，4.68-4.75(m，0.5H)，4.88-4.92(m，0.5H)，5.08-5.2(m，1.5H)，5.18(s，0.5H)，5.46-5.5(d，0.5H)，6.5-6.55(d，0.5H)，6.98-7.05(m，1H)，7.42-7.48(d，0.5H)，7.63-7.78(m，2.5H)，7.9-7.94(d，0.5H)，8.44-8.52(m，1H)。

(550m)合成自212m，利用由212e制备213e之方法得到301毫克的550m，呈白色固体，¹H NMR(CDCl₃)δ1.2-1.35(2t，3H)，1.5-1.8(m，2H)，1.9-2.15(5H)，2.25(d，0.5H)，2.4-2.5(m，2H)，2.65-2.8(m，0.5H)，2.8-3.0(m，0.5H)，3.0-3.2(m，1H)，3.2-3.35(m，0.5H)，3.55-3.65(m，0.5H)，3.65-3.75(m，0.5H)，3.8-3.9(m，0.5H)，3.9-4.0(m，0.5H)，4.4-4.45(m，0.5H)，4.55-4.65(m，0.5H)，4.7-4.8(m，0.5H)，4.85-4.95(m，0.5H)，5.05-5.2(m，0.5H)，5.2(s，0.5H)，5.5(d，0.5H)，6.5(d，0.5H)，6.9(d，0.5H)，6.95(d，0.5H)，7.35(d，0.5H)，7.75(s，1H)，7.85(s，1H)。

(214j)合成自213j，利用由2001制备2002之方法，得到62毫克的214j，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ0.9(t，1H)，1.3(br.s，1H)，1.7(br.m，1H)，1.9(br.m，1H)，2.1(br.s，1H)，2.25(q，1H)，2.35(m，1H)，2.48(m，2H)，2.65(t，1H)，3.15(b r.t，1H)，3.5(br.m，1H)，4.3(br.s，1H)，4.55(m，2H)，4.95(t，1H)，5.25(br.s，1H)，7.6(br.s，1H)，7.85(br.s，1H)。

(214k)合成自213k，利用由2001制备2002之方法，得到80毫克的214k，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ1.6-1.7(m，1H)，1.8-2.0(m，2H)，2.0-2.1(m，2H)，2.15-2.25(m，1H)，2.3-2.4(m，1H)，2.4-2.55(m，2H)，2.6-2.75(m，1H)，3.05-3.2(m，1H)，3.4-3.6(m，2H)，4.2-4.3(m，1H)，4.45-4.6(m，1H)，4.8-5.0(m，1H)，5.1-5.2(m，1H)，7.85(s，2H)。

(214l)合成自213l，利用由2001制备2002之方法，得到91毫克的214l，呈白色固体，¹H NMR(DMSO-6₆)δ1.65(br.m，6H)，1.9(br.m，6H)，2.15(s，3H)，2.3(m，3H)，2.6-2.85(m，3H)，2.9(m，2H)，3.0(m，1H)，4.15(br.q，1H)，4.4(m，3H)，5.0(m，1H)，5.15(m，1H)，5.45(s，1H)，7.8(d，2H)，7.95(d，1H)，8.05(s，1H)，8.65(m，2H)，9.65(s，1H)。

(214m)合成自213m，利用由2001制备2002之方法，得到105毫克的214m，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ1.6-1.75(m，1H)，1.85-1.95(m，1H)，2.0-2.1(m，2H)，2.15-2.25(m，1H)，2.3-2.4(m，1H)，2.45-2.55(m，2H)，2.65-2.75(m，1H)，3.4-3.55(m，2H)，3.95(s，3H)，4.2-4.3(m，1H)，4.45-4.6(m，1H)，4.9-5.0(m，1H)，5.15-5.2(m，1H)，7.9(s，2H)。

化合物308c及308d如下制备。

(308c)合成自212e，利用由212e制备308b之方法，得到266毫克的308c，¹H NMR(CDCl₃)δ1.6-1.7(m，1H)，1.88-1.98(m，3H)，2.02-2.15(m，1H)，2.3-2.4(m，1H)，2.65-2.95(m，3H)，3.04-3.09(m，1H)，3.12-3.25(m，1H)，3.84(s，3H)，3.86(s，3H)，4.5-4.58(m，1H)，4.88-4.95(m，1H)，5.1-5.25(m，2H)，6.86-6.9(d，2H)，7.15-7.25(m，2H)，7.36-7.4(m，1H)，7.75-7.8(d，2H)。

(308d)合成自212e，利用由212e制备308b之方法，得到308d，¹H NMR(CDCl₃)δ1.55-1.65(m，1H)，1.8-2.1(m，4H)，2.3-2.4(m，1H)，2.65-2.88(m，3H)，2.9-3.3(m，3H)，4.5-4.58(m，1H)，4.88-4.95(m，1H)，5.05(s，2H)，5.1-5.2(m，1H)，6.82-6.95(m，2H)，7.02-7.15(m，2H)，7.28(m，5H)，7.45(m，1H)，7.72(d，2H)。

化合物2100f，2100g，2100h，2100i及2100j如下述地制备。

(2101a)合成自天冬氨酸烯丙氧羰氨基-β-叔丁基酯，利用Chapman之方法(生物有机与药物化学通讯Bioorg.& Med.Chem.Lett.，2，pp.615-618(1992))制备(3S，2RS)3-烯丙氧羰基氨基-2-苄氧基-5-氧代四氢呋喃，利用4-氯苄醇替代苄醇，得到1.84克的2101a，呈晶状固体。

(2100f)合成自212e，利用由212e制备213e之方法，经过2101d得到380毫克的2100f，¹H NMR(CDCl₃)δ1.8-2.0(m，10H)，2.30(d，1H)，2.31-2.5(m，3H)，2.7-2.9(m，3H)，3.05(m，2H)，3.1-3.2(m，4H)，4.45(q，1H)，4.5-4.6(m，3H)，4.7(d，2H)，4.85(d，1H)，4.9(t，1H)，5.2(t，1H)，5.15(m，2H)，5.25(s，1H)，5.55(d，1H)，6.5(d，1H)，6.9(d，1H)，6.95(d，1H)，7.25(m，3H)，7.35(t，2H)，7.45(m，2H)，7.55(1H)，7.8(m，3H)。(2101b)合成自(3S，2RS)3-烯丙氧羰基氨基-2-苄氧基-5-氧代四氢呋喃，利用自214e制备2100d之方法，并以H₂SO₄替代pTSA，得到2101b。

(2100g)合成自212e，利用由212e制备213e之方法，通过2101b得到31毫克的2100g，¹H NMR(CDCl₃)δ1.19(d)，1.94(br s)，2.00-2.12(m)，2.24(d)，2.42(dd)，2.71-2.83(m)，3.02(dd)，3.12-3.27(overlapping m)，3.93(m)，4.32-4.37(m，)，4.52-4.63(m)，4.90-4.95(m)，5.12-5.20(m)，5.28(s)，6.93(d)，7.10(d)，7.41-7.50(m)，7.51-7.58(m)，7.84(d)。

(2100h)，214e(287毫克，0.65毫摩尔)于吡啶(5毫升)之溶液，以Ac₂O处理(0.4毫升，3.62毫摩尔)。6小时后，反应混合物倒入5％NaHSO₄中并以EtOAc萃取3次。混合的有机物以盐水洗涤，于Na₂SO₄上干燥，并真空浓缩。层析(SiO₂，EtOAc)得到，19毫克的2100h，¹H NMR(CDCl₃，4种非对映立体异构体之混合)δ1.80-2.05(m)，2.12(s)，2.13(s)，2.19(s)，2.22(d)，2.67-2.75(m)，2.80-2.95(m)，3.00-3.20(m)，3.21-3.33(m)，3.50-3.95(4个分别的多重峰)，4.19(m)，4.55(m)，4.57-4.65(m)，4.69(m)，4.85-4.95(m)，5.04(m)，5.10(s)，5.10-5.22(m)，6.46(d)，6.03(s)，6.50(d)，6.58(d)，6.75(d)，6.95-7.05(m)，7.22(m)，7.30(m)，7.71(d)，7.75-7.83(m)。

(2100i)。2100b(1.5克，2.7毫摩尔)于CH₃CN(10毫升)之溶液中，于环境温度下加入1N NCl。6小时后，加入固体NaHCO₃，且产物以EtOAc萃取，于MgSO₄上干燥并真空浓缩。层析(SiO₂，30-100％CH₂Cl₂/EtOAc)得到123毫克的2100i，¹H NMR(CDCl₃)δ1.25(t，3H)，1.6-1.8(m，1H)，1.9-2.2(m，5H)，2.4-2.5(m，1H)，2.75-2.9(m，2H)，3.0-3.1(m，2H)，3.2-3.25(m，1H)，4.05-4.2(m，1H)，4.5-4.7(m，1H)，5.1-5.25(m，1H)，7.0-7.2(m，2H)，7.4-7.45(m，2H)，7.5(t，1H)，7.8(t，2H)，9.5(s，1H)。

(2100j)，合成自

2100i，利用由214e制备2100h之方法，得到347毫克的2100j，¹H NMR(CDCl₃)δ1.3(t，3H)，1.6-1.8(m，2H)，1.9-2.25(m，4H)，2.25(s，3H)，2.3-2.45(m，1H)，2.8-3.0(m，1H)，3.0-3.25(m，2H)，3.4-3.45(m，2H)，4.1-4.2(m，2H)，4.55-4.7(m，1H)，5.1-5.25(m，1H)，6.8(s，1H)，7.0-7.1(m，2H)，7.5(t，1H)，7.8(t，2H)，9.5(s，1H)。

化合物500及501述于表23。这些化合物以制备化合物404-449之相似方法制备(见实施例11)。

表23

下述的化合物(213m，213n，213o，213p，213q，213r，213s，213t，213u，213v，213w，213x及214w)，以制备化合物213b-f之类似方法制备。

化合物419，415，450，456，475，404，486，487，417，408及418也可如下述地制备。

213m-x

214w，404，408，415，

417，418，419，450，

456，475，486，487

(213n)，呈非对映立体异构体之混合物被分离(syn-anti异构体比例6∶4)(1.43克，82％)呈白色固体：mp.206-10℃；IR(KBr)3288，1787，1680，1657，1651，1619，1548，1440，1256，1135；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.75(0.4H，d)，8.55(0.6H，d)，8.45及8.43(1H，2x d)，7.50(1H，d)，7.42(1H，s)，7.40-7.27(5H，m)，7.01(1H，d)，6.11(2H，s)，5.67(0.6H，d)，5.43(0.4H，s)，5.10-5.00(1H，m)，4.90-4.59(3.5H，m)，4.45-4.25(1.5H，m)，3.47-3.20(1H，m)，3.20-2.70(2H，m)，2.65-2.35(1H，m)，2.35-2.00(3H，m)，2.00-1.75(2H，m)，1.65-1.40(2H，m)。分析C₂₉H₃₀N₄O₉之计算值：C，60.20；H，5.23；N，9.68。实测值：C，60.08；H，5.32；N，9.50。MS(ES⁺)580(M⁺+2，35％)，579(M⁺+1，00)，404(5)，367(5)，236(7)，107(5)。

(213o)，anti-异构体呈白色泡沫固体(0.73克，69％)：mp.135-40℃；

[α]_D ²¹-37.3°(c 0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3452，3310，1790，1664，1659，1650，1549，1425，1258，1121；¹H NMR(D₆-DMSO)δ10.11(1H，s)，8.77(1H，d)，8.57(1H，d)，8.01(1H，s)，7.76(1H，d)，7.55(1H，d)，7.45-7.25(6H，m)，5.43(1H，s)，5.08-5.00(1H，m)，4.95-4.73(1H，m)，4.76及4.68(2H，dd)，3.40-3.20(1H，m)，3.09(1H，dd)，3.02-2.75(1H，m)，2.45-2.06(4H，m)，2.06(3H，s)，2.00-1.75(2H，m)，1.70-1.40(2H，m)。分析C₃₀H₃₃N₅O₈·0.75H₂O之计算值：C，59.54；H，5.75；N，11.57。实测值：C，59.40；H，5.62；N，11.50。MS(ES⁺)593(M⁺+2，33％)，592(M⁺+1，100)，574(7)，487(7)，475(6)，385(9)，373(26)，318(14)，296(11)，266(10)，221(22)。

(213p)，呈泡沫状被分离(1.2克，77％)：[α]_D ²⁰-115°(c 0.20，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3368，2946，1794，1654，1609，1540，1505，1421，1277，1175，1119，980；¹H NMR(D₆-DMSO)δ10.1(1H，s)，8.80(0.5H，d，J＝6.6)，8.60(0.5H，d，J＝7.2)，8.40-8.36(1H，2d)，7.82(2H，d，J＝8.0)，7.41(5H，bs)，6.86(2H，d，J 8.6)，5.72(0.5H，d，J＝5.0)，5.49(0.5H，bs)，5.13-5.07(1H，m)，4.95-4.65(2.5H，m)，4.49-4.38(2.5H，m)，3.49-3.30(2H，m)，3.21，2.79(2H，m)，2.40-1.41(7H，m)。MS(ES⁺)551。

(213q)，呈白色玻璃状固体被分离(80％)：mp.145-149℃；[α]_D ²³-56.0°(c0.05，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3399-3319，1791，1657，1543，1420，1253，1119；¹H NMR(CDCl₃)δ9.54(1H，s)，7.65(1H，d，J＝7.9)，7.51(1H，d，J＝6.9)，7.44-7.25(7H，m)，7.18-7.06(3H，m)，5.30-5.20(1H，m)，5.27(1H，s)，4.84(1H，m)，4.79(1H，d，J＝11.4)，4.56(1H，d，J＝11.3)，4.47(2H，m)，3.28(1H，m)，3.10-2.97(2H，m)，2.71(1H，m)，2.47-2.37(1H，m)，2.26(1H，d，J＝17.9)，2.09(1H，m)，1.83，1.70，1.51(4H，3m)。

(213r)，呈非对映立体异构形式之混合物被分离(同侧：对侧异构体比例55∶45)，呈白色泡沫状固体(1.46克，89％)：mp.106-10℃；IR(KBr)3306，2947，1791，1659，1650，1535，1421，1256，1122；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.76(0.45H，d)，8.56(0.55H，d)，8.49及8.47(1H，2 x d)，7.41-7.19(9H，m)，5.67(0.55H，d)，5.43(0.45H，s)，5.11-5.02(1H，m)，4.86-4.55(3.5H，m)，4.45-4.25(1.5H，m)，3.40-3.20(1H，m)，3.20-2.70(2H，m)，2.65-2.40(1H，m)，2.34(3H，s)，2.30-1.70(5H，m)，1.65-1.40(2H，m)。分析C₂₉H₃₂N₄O₇之计算值：C，62.66；H，5.95；N，10.08。实测值：C，62.91；H，6.00；N，9.70。MS(ES⁺)550(M⁺+2，43％)，549(M⁺+1，100)，374(3)，280(4)，279(20)，118(5)。

(213s)，呈anti-异构体型被分离，呈白色泡沫状固体(0.64克，77％)：mp.137-41℃；[α]_D ²¹-48.2°(c0.05，CH₃OH)；IR(KBr)3477，3314，1791，1659，1599，1529，1499，1406，1256，1122；¹HNMR(D₆-DMSO)δ10.45(1H，s)，8.76(1H，d)，8.50(1H，d)，7.86(2H，d)，7.69(2H，d)，7.41-7.20(10H，m)，5.43(1H，s)，5.08-4.98(1H，m)，4.90-4.73(1H，m)，4.76及4.68(2H，dd)，3.67(2H，s)，3.40-3.20(1H，m)，3.09(1H，dd)，3.02-2.75(1H，m)，2.39(1H，dd)，2.30-2.00(3H，m)，2.00-1.75(2H，m)，1.70-1.40(2H，m)。分析C₃₆H₃₇N₅O₈·0.5H₂O之计算值：C，63.90；H，5.66；N，10.35。实测值：C，63.68；H，5.67；N，10.24。MS(ES⁺)669(M⁺+2，40％)，668(M⁺+1，100)，640(12)，435(18)，425(23)，403(33)，328(17)，302，(32)，274(22)，197(16)，138(17)。

(213t)呈白色泡沫状固体(0.63克，80％)：mp 159-64℃；[α]_D ²¹-37.0°(c0.05，CH₃OH)；IR(KBr)3463，3321，1790，1680，1658，1650，1644，1595，1525，1501，1408，1251，1113，933；1H NMR(D⁶-DMSO)δ10.13(1H，s)，8.76(1H，d)，8.48(1H，d)，7.85(2H，d)，7.68(2H，d)，7.40-7.25(5H，m)，5.43(1H，s)，5.08-4.95(1H，m)，4.92-4.73(1H，m)，4.76及4.68(2H，dd)，3.40-3.20(1H，m)，3.09(1H，dd)，3.02-2.75(1H，m)，2.39(1H，dd)，2.35-2.00(6H0，m)，2.00-1.75(2H，m)，1.70-1.40(2H，m)，0.93(6H，d)。分析C₃₃H₃₉N₅O₈·0.5H₂O之计算值：C，61.67；H，6.27；N，10.90。实测值：C，61.49；H，6.24；N，10.86。MS(ES⁺)635(M⁺+2，39％)，634(M⁺+1，100)，484(10)，427(9)，274(18)，268(37)，204(19)，117(13)。

(213u)，呈白色固体(81％)：mp.120-132℃；IR(KBr)3361-3334，1792，1659，1585，1536，1499，1457，1416，1340，1236，1126，989；¹H NMR(CDCl₃)δ7.39-7.29(6H，m)，7.12(1H，s)，7.03(1H，s)，6.92，6.83，6.48(approx 3H，3d，J＝8.1，7.5，8.1)，5.57(d，J＝5.3)，5.27(1H，s)，5.23-5.06，4.91-4.71，4.64-4.43，(6H，3m)，3.92，3.91，3.89，3.88(9H，4s)，3.32-2.70，2.52-2.08，1.91，1.63(1H，4m)。

(213v)，呈白色固体(78％)：mp.121-7℃；IR(KBr)3534-3331，1791，1659，1528，1420，1256，1122；¹H NMR(CDCl₃)δ8.34-8.29(1H，m)，7.98-7.87(2H，m)，7.68-7.45(4H，m)，7.34-7.24(5H，m)，7.04(d，J＝6.8)，6.78(d，J＝7.8)，6.66(d，J＝7.7)，6.48(2H，d，J＝7.5)，5.56(d，J＝5.4)，5.15(1H，s)，5.30-5.14，5.0，4.89(d，J＝11.2)，4.71-4.41(6H)，3.18-2.80，2.50-2.27，2.08-1.60(11H，3m)。

(213w)，呈非对映立体异构之混合物形式(65/35)，呈白色固体(0.9克，65％)：mp.110-115℃(分解)；IR(KBr)3409，2945，1792，1658，1606，1534，1486，1420，1330，1276，1209，1122，980，960；¹H NMR(CDCl₃)δ7.66(0.35H，d，J＝6.9)，7.46-7.20(7H，m)，6.93(0.35H，d，J＝7.7)，6.85(0.65H，d，J＝7.6)，6.73(0.65H，d，J＝7.6)，5.96(0.35H，bs)，5.85(0.65H，bs)，5.56(0.65H，d，J＝5.2)，5.28(0.35H，bs)，5.20-4.98(2H，m)，4.96-4.40(4H，m)，3.28-2.55(3H，m)，2.53-2.32(1H，m)，2.23(6H，2s)，2.03-1.40(7H，m)，MS(ES^-)577，(ES⁺)579。

(213x)，呈无色粉末(691毫克，86％)：mp.150-70℃；[α]_D ²¹-10.1°(c0.10，Me₂CO)；IR(KBr)3313，1791，1679，1654，1597，1528，1501，1457，1407，1371，1315，1255，1184，1122，933；¹H NMR(d6-DMSO)δ8.75(1H，d)，8.47(1H，d)，7.84(2H，d)，7.66(2H，d)，7.35(5H，m)，5.43(1H，s)，5.06-5.00(1H，m)，4.90-4.64(3H，m)，4.46-4.26(2H，m)，3.16-2.86(2H，m)，2.45-2.05(5H，m)，2.07(3H，s)，2.00-1.84(2H，m)，1.68-1.56(2H，m)；分析C₃₀H₃₃N₅O₈·H₂O之计算值：C，59.11；H，5.79；N，11.49。实测值：C，59.38；H，5.66；N，11.31；M.S.(ES⁺)614(100％)，592(M⁺+1.66)。

(415)，以类似214e化合物之方法制备，得到白色固体(297毫克，84％)：mp.158-62℃；[α]_D ²⁴-109.5°(c 0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2500(br)，1783，1659，1650，1538，1486，1439，1257，1037；¹H NMR(CD₃OD)δ7.48(1H，dd)，7.35(1H，d)，6.88(1H，d)，6.03(2H，s)，5.25-5.15(1H，m)，5.02-4.90(1H，m)，4.63-4.45(2H，m)，4.30-4.20(1H，m)，3.57-3.30(1H，m)，3.20-3.05(1H，m)，2.75-2.10(5H，m)，2.10-1.60(4H，m)。MS(ES+)488(M+，25％)，487(M⁺-1，100)，443(8)，387(3)，315(5)，150(6)，127(5)，113(8)。C₂₂H₂₅N₄O₉(MH⁺)之精确质量数计算值：489.1621。实测值489.1648。

(450)，以类似化合物214e之方法制备，生成白色泡沫固体(378毫克，94％)：mp.175-9℃；[α]_D ²²-91.7°(c 0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2500(br)，3319，1659，1590，1553，1427，1260；¹H NMR(CD₃OD)δ8.01(1H，d)，7.74(1H，dd)，7.58(1H，d)，7.45-7.35(1H，m)，5.25-5.15(1H，m)，5.05-4.90(1H，m)，4.60-4.45(2H，m)，4.30-4.20(1H，m)，3.55-3.30(1H，m)，3.20-3.00(1H，m)，2.75-2.20(5H，m)，2.14(3H，s)，2.20-1.60(4H)。分析C₂₃H₂₇N₅O₈·1.5H₂O之计算值：C，52.27；H，5.72；N，13.25。实测值C，52.31；H，5.86；N，12.85。MS(ES⁺)501(M+，26％)，500(M⁺-1，100)，328(2)，149(3)，113(3)。

(456)，以类似化合物214e之方法制备，得到白色固体(0.73克，72％)：mp.＞260℃；[α]_D ²⁰-66°(c 0.34，MeOH)；IR(KBr)3401，2946，1651，1584，1506，1426，1277，1257，1177；¹H NMR(D₆-DMSO)δ10.2(1H，very bs)，9.17(1H，bs)，8.65(1H，s)，8.37(1H，d，J 5.4)，7.81(2H，d，J＝8.2)，6.87(2H，d，J＝8.4)，5.24(1H，m)，4.92-4.86(1H，m)，4.41-4.32(2H，m)，3.68-3.21(3H，m)，3.12-2.79(1H，m)，2.50-1.42(7H，m)。MS(ES⁺)459。

(475)，以类似化合物214e之方法制备，得到白色固体(79％)：mp.150℃(转化)190-210℃；[α]_D ²³-97.5°(c0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3319，1658，1650，1549，1421，1256；¹HNMR(CD₃OD)δ7.61(1H，d，J＝8.0)，7.43(1H，d，J＝8.1)，7.21(2H，m)，7.05(1H，m)，5.21(1H，m)，5.07-4.77(1H，m)，4.54(2H，m)，4.23(1H，m)，3.46(1H，m)，3.14(1H，m)，2.66-1.71(9H，m)。MS(ES⁺，m/z)，482(M⁺-1，100％)。

(404)，以类似化合物214e之方法制备，得到白色固体(0.79克，86％)：mp.156-9℃；[α]_D ²⁵-119.7°(c 0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2500(br)，3387，3309，2956，1785，1659，1650，1535，1422，1278；¹H NMR(CD₃OD)δ7.46-7.15(4H，m)，5.25-5.15(1H，m)，5.02-4.90(1H，m)，4.58-4.45(2H，m)，4.30-4.20(1H，m)，3.55-3.30(1H，m)，3.20-3.05(1H，m)，2.80-2.20(4H，m)，2.41(3H，s)，2.20-1.60(5H，m)。MS(ES⁺) 458(M+，27％)，457(M⁺-1，100)，413(13)，339(8)，285(5)，134(6)，127(11)。C₂₂H₂₇N₄O₇(MH⁺)之精确质量数计算值：459.1880。实测值459.1854。

(486)，以类似化合物214e之方法制备，生成白色固体(325毫克，89％)：mp.165-9℃；[α]_D ²²-69.1°(c0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2500(br)，3318，1658，1599，1530，1505，1407，1258；¹H NMR(CD₃OD)δ7.85(2H，d)，7.69(2H，d)，7.38-7.20(5H，m)，5.25-5.15(1H，m)，5.05-4.90(1H，m)，4.57-4.45(2H，m)，4.30-4.20(1H，m)，3.70(2H，s)，3.55-3.30(1H，m)，3.20-3.00(1H，m)，2.75-1.60(9H，m)。分析C₂₉H₃₁N₅O₈·1.5H₂O之计算值：C，57.61；，H，5.67；N，11.58。实测值：C，57.81；H，5.74；N，11.47。MS(ES⁺)577(M+，33％)，576(M⁺-1，100)，502(2)。

(487)，以类似化合物214e之方法制备，得到白色泡沫固体(335毫克，93％)：mp.176-80℃；[α]_D ²²-88.0°(c 0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2500(br)，3321，2960，1781，1660，1597，1529，1407，1258，1187；¹H NMR(CD₃OD)δ7.86(2H，d)，7.69(2H，d)，5.25-5.15(1H，m)，5.05-4.90(1H，m)，4.60-4.45(2H，m)，4.30-4.20(1H，m)，3.57-3.30(1H，m)，3.20-3.00(1H，m)，2.75-1.60(12H，m)，1.00(6H，d)。分析C₂₆H₃₃N₅O₈·H₂O之计算值：C，55.61；H，6.28；N，12.45。实测值：C，56.00；H，6.37；N，12.15。MS(ES+)543(M+，31％)，542(M⁺-1，100)，498(2)，468(3)。

(417)，以类似化合物214e之方法制备，得到白色固体(0.63克，92％)：mp.145-155℃(约值，不尖锐)：[α]_D ²⁷-114.6°(c 0.11，CH₃OH)；IR(KBr)3327，1658，1586，1548，1501，1416，1341，1238，1126；¹H NMR(CD₃OD)δ7.22(2H，s)，5.21(1H，m)，5.00(1H，m)，4.56，4.49(2H，2M)，4.25(1H，m)，3.88(6H，s)，3.80(3H，s)，3.55-3.43(1H，m)，3.12(1H，m)，2.71-1.70(9H，m)。分析C₂₄H₃₀N₄O₁₀·2H₂O之计算值：C，50.52；H，6.01；N，9.82。实测值：C，50.49；H，6.05；N，9.68。MS(ES⁺，m/z 533(M⁺-1，100％)。(408)，以类似化合物214e之方法制备，得到白色固体(73％)：mp.157-165℃(不尖锐)；[α]_D ²⁷-140.5°(c 0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3325，1658，1531，1420，1278，1257；¹H NMR(CD₃OD)δ8.33-8.28(1H，m)，8.01-7.78(2H，m)，7.71(1H，d，J＝6.0)，7.59-7.52(3H，m)，5.27(1H，m)，5.12-5.03(1H，m)，4.55(2H，m)，4.25(1H，m)，3.64-3.43(1H，m)，3.24-3.12(1H，m)，2.80-1.67(9H，m)。分析C₂₅H₂₆N₄O₇·2H₂O之计算值：C，56.60；H，5.70；N，10.56。实测值：C，56.70；H，5.80；N，10.33。MS(ES⁺，m/z)，493(M⁺-1，100％)。

(214w)，如化合物214e之类似方法制备，得到210毫克(62％)的白色固体：mp.＞260℃；[α]_D ²⁰-93°(c0.20，MeOH)；IR(KBr)3401，2948，1651，1604，1559，1486，1421，1325，1276，1210；¹H NMR(D₆-DMSO)δ6.39(1H，bs)，8.29(1H，d，J＝5.9)，7.55(2H，s)，6.64(1H，d，J＝6.1)，5.79(1H，s)，5.25-5.21(1H，m)，1.90-1.82(1H，m)，4.41-3.69(2H，m)，3.47-3.20(3H，m)，2.97-2.91(1H，m)，2.23(6H，s)，2.25-1.60(7H，m)。

(550q)，利用制备213e之方法合成，得到550q。

(213y)，利用制备213e之方法合成，得到213y。

(412a)利用制备550q之方法，利用513a-1得到412a。

(412b)利用制备550q之方法，以513a-2得到412b。

(412c)利用制备550q之方法合成，利用513b-1得到412c。

(412d)利用制备550q之方法合成，利513b-2得到412d：¹H NMR(CDCl₃)δ9.5(1H，d)，8.9(1H，d)，8.5(1H，d)，7.9-7.8(2H，m)，7.8-7.65(2H，m)，6.55(1H，d)，5.55(1H，d)，5.25-5.1(2H，m)，4.75-4.65(1H，m)，4.65-4.6(1H，m)，4.4-4.3(1H，m)，3.25-3.15(1H，m)，3.15-3.05(1H，m)，2.95-2.8(2H，m)，2.55-2.4(2H，m)，2.15-1.5(14H，m)。

(412e)利用制备550q之方法合成，利用513f-1得到412e。

(412f)利用制备550q之方法合成，利用513f-2得到412f。

化合物410及412利用自604制备605之方法制备。

(410)，以快速层析纯化(5-25％甲醇于二氯甲烷)得到296毫克(94％)的无色固体：mp.90-200℃；IR(KBr)3338，3096，2950，1787，1726，1657，1546，1420，1279，1258，1125，1092，984，933；¹H NMR(CD₃OD)δ8.41(1H，d)，8.13(1H，d)，7.54-7.41(3H，m)，7.20(1H，d)，5.19-5.11(1H，m)，4.54-4.30(1H，m)，3.27(1H，m)，3.18-3.03(1H，m)，2.81-2.64(2H，m)，2.56-1.59(7H，m)。分析C₁₉H₂₂N₄O₇S·2.5H₂O之计算值：C，46.05；H，5.49；N，11.31。

实测值：C 46.36；H，5.25；N，11.10。MS(ES⁺)449(M-1，80％)，113(100)。C₁₉H₂₃N₄O₇S(MH⁺)之精确质量数计算值：451.1287。实测值：451.1295。

(412)以类似化合物605之方法制备，得到白色玻璃状固体(69％)：mp.138-141℃；[α]_D ²³-105.5°(c 0.5，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3375，1787，1659，1515，1421，1278，1256；¹H NMR(CDCl₃)δ9.32(1H，m)，8.79(1H，m)，8.47(1H，m)，7.86-7.64(4H，m)，5.31，5.18，4.59，4.37(4或5H，m)，3.55-2.76，2.49-2.39，2.05，1.65(11H，4m)。分析C₂₄H₂₅N₅O₇·1.5H₂O之计算值：C，55.17；H，5.40；N，13.40。实测值：C，54.87；H，5.22；N，13.15。MS(ES⁺，m/z)494(M⁺-1，100％)。

(502y)，利用由603制备604之方法合成，得到浅乳色粉末：mp.120-180℃；[α]_D ²³-109°(c 0.18，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3478，3327，1670，1582，1543，1421，1279，1257，1155；¹H NMR(CDCl₃，CD₃OD)δ8.04(1H，m)，7.49(1H，m)，7.38(1H，m)，7.17(1H，m)，5.17-5.01(2H，m)，4.86(1H，m)，4.61-4.50(1H，m)，3.45-3.29(2H，m)，3.21-3.03(1H，m)，2.79-2.54(3H，m)，2.43-2.33(1H，m)，2.11-1.66(5H，m)，1.44(9H，s)。分析C₂₄H₃₃N₇O₇S·H₂O之计算值：C，49.56；H，6.07；N，16.86；S，5.51。实测值：C，49.51；H，5.93；N，16.31；S，5.17。MS(ES⁺)586(100％)，564(M⁺+1，1.59)。C₂₄H₃₄N₇O₇S(MH⁺)之精确质量数计算值：564.2240。实测值：564.2267。

(502z)，以如化合物604所述之相似方法制备，得到浅黄色固体(90％)：mp.142-145℃；[α]_D ²⁴-136.5°(c 0.06，CH₂Cl₂)；¹H NMR(CDCl₃)δ9.51-9.46(1H，m)，9.11(1H，s)，8.83(1H，d，J＝7.8)，8.53(1H，d，J＝5.5)，7.89-7.83(2H，m)，7.77-7.65(2H，m)，7.55(1H，d，J＝7.2)，7.18(1H，d，J＝2.7)，5.26-5.12(2H，m)，4.87(1H，m)，4.59(1H，m)，3.25-3.12(2H，m)，2.95-2.76(2H，m)，2.59-2.38，2.18-1.94，1.70(5H，3m)，1.44(9H，s)。

利用制备550q方法制得(415a)，(415b)，(415c)，(214w-1)，(214w-2)，(214w-3)，(214w-4)，(214w-5)，(214w-6)，(214w-7)，(412g)和(412h)。

(415)，以自2001制备2002之方法合成以生成415。

(214w)，以自2001制备2002之方法合成，以生成214w。

(2100k)以如化合物213e之类似方法制备，制得非对映立体异构体之混合物(75/25)，呈白色固体(258毫克，83％)：mp.101℃；·[α]_D ²⁵-96°(c0.2，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3328，2935，2978，1732，1669，1603，1483，1450，1414，1237，1155，1082，989，755；¹H NMR(CDCl₃)δ7.84-7.80(2H，m)，7.54-7.17(8H，m)，7.06-6.99(1H，m)，6.25(1H，d，J＝7.9H)，5.41(0.75H，d，J＝5.4H)，5.31(0.25H，bs)，5.23-5.09(1H，m)，4.93-4.87(1H，m)，4.68-4.51(2H，m)，4.40-4.33(0.25H，m)，4.24-4.14(0.75H，m)，3.95-3.70(1H，m)，3.30-3.13(1H，m)，3.14-2.78(5H，m)，2.47-2.21(2H，m)，2.05-1.50(5H，m)。分析C₂₉H₃₂N₄O₇·0.5H₂O之计算值：C，62.47；H，5.97；N，10.05。

实测值：C，62.17；H，5.83；N，9.97。MS(ES⁺)549。

(2100l)，以如213e之类似方法制备，呈无色固体：mp.172-80℃；[α]_D ²³-91.5°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3290，1792，1677，1657，1642，1544，1425，1280，1259，1124，977；¹H NMR(CDCl₃)δ7.80(2H，m)，7.46(3.5H，m)，7.00(1H，d，J＝6.7)，6.48(0.5H，d，J＝7.9)，5.55(0.5H，d，J＝5.3)，5.19(2H，s+m)，4.93(0.5H，m)，4.62(1.5H，m)，4.34(1H，m)，4.18(0.5H，m)，3.28-2.70(4H，m)，2.49-2.29(2H，m)，205-1.48(15H，m)。

(2100m)，依213e之类似方法制备，(76％)呈无色固体，mp.～140℃，再熔化187-9℃；[α]_D ²³-96.9°(c0.11，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3507，3308，3251，1772，1660，1641，1566，1545，1457，1424，1346，1326，1302，1275，1258，1136，1085，1018，981；¹H NMR(CDCl₃)δ7.78(2H，m)，7.53(3H，m)，7.19(4H，m)，6.91(1H，d，J＝7.4)，6.27(1H，d，J＝7.6)，5.66(1H，d，J＝5.3)，5.10(1H，m)，4.96(1H，m)，4.75(2H，m)，4.52(1H，m)，3.08(3H，m)，3.03-2.71(5H，m)，2.48-2.31(2H，m)，1.90-1.40(4H，m)，1.22(1H，m)。

(2100n)，依化合物213e之相似方法制备，得到白色玻璃状固体(76％)；mp.112-5℃；[α]_D ²³-62.0°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3305，1789，1677，1665，1535，1422，1279，1256，1119，942，700；¹H NMR(CDCl₃)δ7.84(2H，s)，7.58-7.27(9H，m)，6.99(1H，d，J＝7.8)，5.23(1H，s)，5.23-5.11(1H，m)，4.89(1H，m)，4.76(1H，d，J＝11.3)，4.55(1H，d，J＝11.4)，4.58-4.43(2H，m)，3.30-2.96，2.81-2.69，2.46-2.37，2.16-1.66(10H，4m)，2.27(1H，d，J＝17.8)。分析C₂₈H₃₀N₄O₇·0.5H₂O之计算值：C，61.87；H，5.75；N，10.32。实测值：C，61.88；H，5.70；N，10.33。MS(ES⁺，m/z)535(M⁺+1，100％)。

(2100o)(含有约7％的(2S))，依化合物213e之类似方法制备，得到白色玻璃状固体(81％)；mp.115-7℃；[α]_D ²³-121.8°(c0.11，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3326，1792，1659，1535，1421，1278，1257，1124，978；¹H NMR(CDCl₃)δ7.82(2H，m)，7.58-7.24(8H，m)，6.90(1H，d，J＝7.3)，6.49(1H，d，J＝7.7)，5.57(1H，d，J＝5.5)，5.11(2H，m)，4.91(1H，d，J＝11.4)，4.57(1H，d，J＝11.1)，4.81-4.68(1H，m)，4.65-4.54(1H，m)，3.18-2.71，2.52-2.30，2.05-1.62(11H，3m)。分析C₂₈H₃₀N₄O₇·0.5H₂O之计算值：C，61.87；H，5.75；N，10.32。实测值：C，61.70；H，5.71；N，10.15。MS(ES⁺，m/z)535(M⁺+1，94.3％)，557(100％)。

(550n)，依化合物213e之类似方法制备，生成非对映立体异构体之混合(65/35)，呈褐色粉末(390毫克，28％)；mp.139-145℃；[α]_D ²³-104°(c0.2，MeOH)；IR(KBr)3318，2405，2369，1792，1660，1591，1549，1484，1422，1257，1117；¹H NMR(D₆-DMSO)δ10.1(1H，s)，8.80(0.65H，d，J＝6.6)，8.58(0.35H，d，J＝6.6)，8.59(1H，d，J＝7.0)，8.06(1H，bs)，7.83-7.79(1H，m)，7.61-7.57(1H，m)，7.47-7.39(1H，m)，5.61(0.35H，d，J＝5.0)，5.37(0.65H，bs)，5.17-5.14(0.35H，m)，5.08-5.06(0.65H，m)，4.92-4.86(1H，m)，4.67-4.61(0.35H，m)，4.47-4.41(0.65H，m)，4.28-4.11(1H，2m)，3.80-3.59(2H，m)，3.23-2.75(3H，m)，2.61-1.48(7H，m)，2.10(3H，s)，1.25及1.17(3H，2t，J＝5.8)。MS(ES⁺)528。

(550o)，依化合物213e之相似方法制备，得到无色的固体(1.071克，80％)；mp.155-70℃；[α]_D ²²-75.8°(c0.26，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3314，2941，1791，1658，1545，1420，1341，1312，1252，1181，1118，939，749；¹H NMR(CDCl₃)δ9.45(0.5H，s)，9.34(0.5H，s)，7.68-7.62(1H，m)，7.49-7.39(2H，m)，7.33-7.26(1H，m)，7.18-7.03(3H，m)，5.49(0.5H，d)，5.30(0.5H s)，5.26-5.13(1H，m)，4.90-4.83(0.5H，m)，4.76-4.49(1H，m)，4.42-4.35(0.5H，m)，3.97-3.74(1H，m)，3.72-3.53(1H，m)，3.35-2.64(4H，m)，2.50-2.37(1H，m)，2.20-1.82(5H，m)，1.69-1.50(2H，m)，1.30-1.19(3H，m)。

(550p)，依化合物213e之类似方法制备，以生成非对映立体异构体之混合物，呈白色泡沫(820毫克，47％)：[α]_D ²⁴-75°(c0.16，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3401，2937，1791，1657，1609，1539，1505，1423，1277，1177，1118；¹H NMR(CDCl₃)δ8.07-8.05(1H，m)，7.67(2H，d，J＝7.9)，7.38-7.29(2H，m)，6.80(2H，d，J＝8.5)，5.49(0.5H，d，J＝4.6)，5.23(0.5H，bs)，5.24-5.20(1H，m)，5.12-5.08(1H，m)，4.68-4.29(2H，m)，3.92-3.45(3H，m)，3.32-2.30(2H，m)，2.80-1.56(11H，m)，1.21(3H，t，J＝7.0H)。

(503a)，以(213e)之方法，制备自212b及(3S，4R)(N-烯丙氧羰基)-3-氨基-4-羟基-5-(1-萘甲酰基氧基)戊酸叔丁酯，得到533毫克(81％)的掺白色泡沫：[α]_D ²²-81.4°(c0.5，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3342，2976，1719，1664，1328，1278，1246，1153，1137。¹H NMR(CDCl₃)δ8.86(1H，d，J＝8.4)，8.21(1H，dd，J＝1.3，7.3)，8.03(1H，d，J＝8.1)，7.88(1H，d，J＝8.6)，7.66-7.45(3H，m)，7.23(1H，d，J＝8.6)，5.96(1H，d，J＝9.2)，5.30(1H，m)，4.59-4.33(5H，m)，4.24(1H，m)，3.96(1H，brd)，3.29(1H，m)，2.95(1H，m)，2.93(3H，s)，2.69-2.50(3H，m)，2.36(1H，m)，1.96(4H，m)，1.62(1H，m)，1.41(9H，s)。分析C₃₁H₄₀N₄O₁₀S·0.25H₂O之计算值：C，55.97；H，6.14；N，8.42。实测值：C，55.90；H，6.11；N，8.23。M.S.(ES⁺)683(M+Na，100％)，661(M+1，39)，605(78)。

(504a)，利用由215e制备216e之方法合成自503a，得到446毫克(91％)的无色泡沫：[α]_D ²¹-111.6°(c0.5，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3319，2978，2936，1723，1670，1413，1370，1329，1278，1246，1153。¹H NMR(CDCl₃)δ8.87(1H，d，J＝8.9)，8.29(1H，d，J＝7.2)，8.06(1H，d，J＝8.3)，7.90(1H，d，J＝8.2)，7.66-7.48(3H，m)，7.37(1H，d，J＝8.1)，5.61(1H，d，J＝9.0)，5.31(1H，m)，5.22(1H，AB，J＝16.9)，5.09(1H，AB，J＝16.92)，4.99(1H，m)，4.65-4.43(2H，m)，3.28(1H，m)，2.96(3H，s)，2.86(2H，m)，2.59(1H，m)，2.38(1H，dd，J＝6.8，13.2)，2.21-1.70(6H，m)，1.45(9H，s)。分析C₃₁H₃₈N₄O₁₀S·0.25H₂O之计算值：C，56.14；H，5.85；N，8.45。实测值：C，56.11；H，5.83；N，8.29。M.S.(ES⁺)657(M-1，100％)。

(286)，以217之方法制备自504a，得到356毫克(93％)的白色粉末：mp.120-123℃；[α]_D ²³-121°(c0.194，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3314，2937，1722，1663，1412，1328，1278，1245，1195，1132。¹H NMR(d₆-DMSO)δ12.63(1H，brs)，8.94(1H，d，J＝7.4)，8.78(1H，d，J＝8.6)，8.26(2H，m)，8.11(1H，d，J＝8.0)，7.77-7.62(4H，m)，5.28(2H，s)，5.21(1H，m)，4.82(1H，m)，4.44-4.29(2H，m)，3.31(1H，m)，2.98(3H，s)，2.98-2.86(2H，m)，2.72(1H，dd，J＝7.3，16.9)，2.40(1H，m)，2.24-1.84(4H，m)，1.69(2H，m)。分析C₂₇H₃₀N₄O₁₀S·H₂O之计算值：C，52.25；H，5.20；N，9.03。实测值：C，52.11；H，4.97；N，8.89。M.S.(ES⁺)601(M-1，100％)。

(503b)，以类似213e化合物之方法合成，生成掺白色粉末(671毫克，88％)：mp.90-120℃；IR(KBr)3345，2977，1727，1664，1532，1450，1423，1369，1323，1310，1276，1257，1154，1101，990，766；¹H NMR(CDCl₃)δ7.61-7.55(2H，m)，7.51-7.42(3H，m)，6.86(1H，d)，5.69(1H，d)，5.21(1H，m)，4.64-4.38(2H，m)，4.15-4.05(3H，m)，3.84(1H，s)，3.31-3.14(2H，m)，2.97-2.87(1H，m)，2.94(3H，s)，2.76(3H，s)，2.64-2.48(3H，m)，2.39-2.29(1H，m)，2.04-1.61(5H，m)。分析C₃₁H₄₁N₅O₁₁S·H₂O之计算值：C，52.46；H，6.11；N，9.87；S，4.52。实测值：C，52.34；H，5.92；N，9.56；S，4.44。MS(ES⁺)714(47％)，692(M⁺+1，84)，636(100)。

(504b)，以类似化合物216b之方法合成，得到无色粉末(601毫克，93％)：mp.75-115℃；[α]_D ²³-104°(c0.26，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3324，2977，2935，1730，1670，1525，1452，1422，1369，1317，1276，1256，1222，1155，1107，990，766；¹H NMR(CDCl₃)δ7.68-7.61(2H，m)，7.47-7.38(3H，m)，7.32-7.24(1H，m)，5.56(1H，d)，5.36-5.24(1H，m)，5.04(1H，d)，4.88(1H，d)，4.86-4.77(1H，m)，4.64-4.39(2H，m)，3.32-3.17(1H，m)，2.97-2.85(1H，m)，2.93(3H，s)，2.76(3H，s)，2.80-2.71(1H，m)，2.65-2.49(1H，m)，2.41-2.30(1H，m)，2.12-1.61(6H，m)，1.42(9H，s)。分析C₃₁H₃₉N₅O₁₁S·H₂O之计算值：C，52.61；H，5.84；N，9.90；S，4.53。实测值：C，52.94；H，5.69；N，9.72；S，4.51。MS(ES⁺)712(31％)，707(100)，690(M⁺+1，41)，634(55)。

(505b)，以类似化合物217之方法合成，得到无色粉末(499毫克，96％)：mp.95-145℃；[α]_D ²²-137°(c0.12，MeOH)；IR(KBr)3323，2936，1732，1665，1529，1452，1421，1312，1275，1256，1221，1183，1153，1135，1101，990；¹H NMR(CD₃OD)δ7.67-7.56(2H，m)，7.49-7.38(4H，m)，5.23-5.12(1H，m)，5.02(1H，d)，4.79-4.73(1H，m)，4.52-4.34(3H，m)，3.48-3.25(2H，m)，3.03-2.85(2H，m)，2.94(3H，s)，2.74(3H，s)，2.79-2.66(1H，m)，2.52-2.38(1H，m)，2.29-2.14(1H，m)，2.04-1.70(4H，m)。分析C₂₇H₃₁N₅O₁₁S·H₂O之计算值：C，49.77；H，5.18；N，10.75；S，4.92。实测值：C，49.83；H，5.01；N，10.27；S，4.84。MS(ES⁺)746(42％)，632(M-1，100)，386(60)。C₂₇H₃₂N₅O₁₁S(MH⁺)之精确质量数计算值：634.1819。实测值：634.1807。

(503c)，以类似化合物213e之方法合成，得到无色固体(446毫克，84％)：IR(KBr)3345，2976，2935，1727，1664，1603，1535，1483，1451，1416，1395，1369，1328，1297，1277，1237，1155，1135，1076，990；755；¹H NMR(CDCl₃)δ7.98-7.89(1H，m)，7.55-7.45(1H，m)，7.39-7.18(3H，m)，7.14-7.07(1H，m)，7.00-6.90(3H，m)，6.75(1H，d)，5.57-5.50(1H，m)，5.21-5.09(1H，m)，4.64-4.42(2H，m)，4.36-4.12(3H，m)，3.95-3.87(1H，m)，3.39-3.18(1H，m)，3.00-2.82(1H，m)，2.95(3H，s)，2.69-2.48(3H，m)，2.42-2.28(1H，m)，2.07-1.62(6H，m)，1.42(9H，s)。分析C₃₃H₄₂N₄O₁₁S·H₂O之计算值：C，54.99；H，6.15；N，7.77；S，4.45。实测值：C，54.95；H，5.95；N，7.34；S，4.20。MS(ES⁺)725(26％)，720(47)，703(M⁺+1，34)，433(100)，403(89)。

(504c)，以类似化合物216e之方法合成，得到无色粉末：mp.85-100℃；[α]_D ²²-91.3°(c0.52，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3328，2978，2935，1732，1669，1603，1524，1483，1450，1396，1369，1296，1276，1237，1155，1132，1082，989，755；¹H NMR(CDCl₃)δ8.03-7.98(1H，m)，7.52-7.44(1H，m)，7.37-7.07(5H，m)，7.01-6.92(3H，m)，5.52(1H，d)，5.28-5.20(1H，m)，5.06-4.84(3H，m)，4.64-4.39(2H，m)，3.32-3.14(1H，m)，2.99-2.88(1H，m)，2.94(3H，s)，2.65-2.45(2H，m)，2.39-2.29(1H，m)，2.12-1.58(6H0，m)，1.40(9H，s)。分析C₃₃H₄₀N₄O₁₁S之计算值：C，56.56；H，5.75；N，8.00；S，4.58。实测值：C，56.37；H，5.84；N，7.69；S，4.37。MS(ES⁺)723(30％)，718(100)，701(M⁺+1，23)，645(59)。

(505c)，以类似化合物217之方法合成，得到无色泡沫(252毫克，72％)：mp.90-125℃；[α]_D ²³-133°(c0.11，MeOH)；IR(KBr)3314，2938，1792，1734，1663，1604，1535，1483，1448，1415，1250，1132，756；¹H NMR(d₆-DMSO)δ8.81-8.76(1H，m)，7.92(1H，d)，7.68-7.54(2H，m)，7.41-7.25(3H，m)，7.16-6.91(4H，m)，5.13-4.98(2H，m)，4.72-4.63(1H，m)，4.37-4.21(2H，m)，2.92(3H，s)，2.90-2.60(3H，m)，2.35-2.26(1H，m)，2.17-2.05(2H，m)，1.99-1.80(2H，m)，1.61-1.50(1H，m)。分析C₂₉H₃₂N₄O₁₁S·0.5H₂O之计算值：C，53.29；H，5.09；N，8.57；S，4.90。实测值：C，53.57；H，5.18；N，8.32；S，4.75。MS(ES⁺)643(M-1，100％)。

(503d)，以类似化合物213e之方法合成，得到无色固体(563毫克，90％)：IR(KBr)3349，2978，2935，1724，1664，1583，1536，1489，1443，1370，1327，1271，1226，1189，1155，1073，990，755；¹H NMR(CDCl₃)δ7.77(1H，d)，7.67(1H，m)，7.45-7.10(6H，m)，7.00(2H，d)，5.93-5.80(1H，m)，5.36-5.30(1H，m)，4.63-4.24(5H，m)，4.15-4.09(1H，m)，3.37-3.22(1H，m)，2.98-2.74(1H，m)，2.94(3H，s)，2.70-2.47(3H，m)，2.40-2.30(1H，m)，2.15-1.60(5H，m)，1.42(9H，s)。分析C₃₃H₄₂N₄O₁₁S·H₂O之计算值：C，54.99；H，6.15；N，7.77；S，4.45。实测值：C，54.60；H，5.88；N，7.49；S，4.50。MS(ES⁺)725(19％)，720(91)，703(M⁺+1，74)，647(76)，629(100)，433(78)。

(504d)，以类似化合物216e之方法合成，得到无色粉末(466毫克，85％)：mp.75-100℃；[α]_D ²²-99.3°(c0.60，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3335，2978，2937，1728，1669，1584，1525，1487，1444，1416，1369，1328，1272，1227，1188，1155，989，754；¹H NMR(CDCl₃)δ7.82-7.77(1H，m)，7.66-7.65(1H，m)，7.46-7.32(4H，m)，7.26-7.10(2H，m)，7.04-6.98(2H，m)，5.68(1H，d)，5.37-5.31(1H，m)，5.11(1H，d)，5.02-4.88(2H，m)，4.66-4.42(2H，m)，3.35-3.17(1H，m)，2.98-2.89(1H，m)，2.96(3H，s)，2.84-2.78(1H，m)，2.72-2.47(1H，m)，2.42-2.32(1H，m)，2.14-1.58(6H，m)，1.43(9H，s)。分析C₃₃H₄₀N₄O₁₁S之计算值：C，56.56；H，5.75；N，8.00。实测值：C，56.36；H，5.82；N，7.71。MS(ES⁺)723(56％)，718(90)，701(M⁺+1，36)，645(100)。

(505d)，以类似化合物217之方法合成，得到无色泡沫(353毫克，73％)：mp.80-115℃；[α]_D ²³-138°(c，0.11，MeOH)；IR(KBr)3327，2937，1728，1666，1584，1529，1487，1443，1413，1328，1273，1227，1189，1155，1134，989，754；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.82(1H，d)，7.76-7.72(1H，m)，7.61-7.53(2H，m)，7.48-7.32(4H，m)，7.24-7.17(1H，m)，7.11-7.06(2H，m)，5.14-5.06(3H，m)，4.73-4.64(1H，m)，4.38-4.24(2H，m)，2.92(3H，s)，2.89-2.61(3H，m)，2.38-2.27(1H，m)，2.19-2.06(2H，m)，2.02-1.79(3H，m)，1.63-1.52(1H，m)。分析C₂₉H₃₂N₄O₁₁S·0.5H₂O之计算值：C，53.29；H，5.09；N，8.57；S，4.90。实测值：C，53.24；H，5.14；N，8.34；S，4.86。MS(ES⁺)643(M-1，100％)，385(62)。

(503e)，以类似化合物213e方法制备，生成掺白色固体(70)％)：mp.100-103℃；[α]_D ²⁵-84.0°(c0.05，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3459-3359，1722，1664，1514，1368，1328，1278，1247，1155；¹H NMR(CDCl₃)δ7.52(1H，m)，7.06-6.99(2H，m)，5.69(1H，d，J＝9.0)，5.23(1H，m)，4.61-4.16(6H，m)，3.36-3.19(1H，m)，2.96(3H，s)，2.67-2.49，2.42-2.32，2.06-1.89，1.69(10H，4m)，1.43(9H，s)。

(504e)，依化合物216e方法制备，生成白色固体(98％)：mp.91-98℃；[α]_D ²⁵-112.5°(c0.06，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3453-3364，1727，1668，1513，1420，1368，1245，1155；¹H NMR(CDCl₃)δ7.54(1H，d，J＝5.3)，7.18(1H，d，J＝7.18)，7.05(1H，d，J＝5.4)，5.42(1H，d，J＝8.9)，5.25(1H，m)，5.02(2H，m)，4.96-4.87(1H，m)，4.65-4.42(2H，m)，3.34-3.17(1H，m)，2.97-2.93(1H，m)，2.97(3H，s)，2.87-2.78，2.73-2.50，2.38-2.32，2.13-1.88，1.69-1.60(9H，5m)，1.44(9H，s)。

(505e)。217(0.33克，0.51毫摩尔)于无水二氯甲烷(3毫升)之溶液，在避免水汽下冷却(冰/水)。在搅拌下加入三氟醋酸(2毫升)。移去冷却浴之后，溶液保持在室温下2小时，再于真空下浓缩。残留物自二氯甲烷中蒸发三次，以二乙醚研磨再过滤。固体以快速层析纯化(硅胶，0-6％甲醇于二氯甲烷)以生成产物，呈白色玻璃状固体(0.296克，98％)：mp.110-122℃；[α]_D ²²-163.5°(c0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3514-3337，1726，1664，1513，1420，1245，1152，1134，990；¹H NMR(CD₃OD)δ7.79(1H，d，J＝5.2)，7.12(1H，d，J＝5.2)，5.20(1H，m)，5.02-4.72(2H，m，被H₂O覆盖)，4.59-4.32(3H，m)，3.48-3.29，3.08-2.75，2.50-2.41，2.31-2.22，2.08-1.89，1.72-1.63(11H，6m)，2.95(3H，s)。

化合物	R¹
化合物	R¹	506a507a	PhC(O)-
506b507b	MeS(O)₂-	506a507a	PhC(O)-
506b507b	MeS(O)₂-	506c507c	MeOC(O)-
506g507g	CH₃C(O)-	506c507c	MeOC(O)-

(506a)。212e(321毫克，0.929毫摩尔)及(3S)3-氨基-5-偶氮基-4-氧代戊酸叔丁酯(198毫克，0.929毫摩尔)于二氯甲烷(3毫升)之溶液冷却至0℃，再加N，N-二异丙基乙胺(0.16毫升，1.86毫摩尔)及[2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基鎓四氟硼酸盐(328毫克，1.02毫摩尔)。溶液在室温下搅拌过夜，以乙酸乙酯稀释再以1M NaHSO₄洗涤(x2)，1M NaHCO₃水溶液(x2)，盐水洗涤，于硫酸镁上干燥并蒸发。在硅胶上层析并以乙酸乙酯洗脱，得到506a(425毫克，85％)呈无色泡沫：[α]_D ²³-124.9°(c0.2，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3332，2111，1728，1658，1532，1421，1392，1367，1279，1256，1155；¹H NMR(CDCl₃)δ7.82(2H，m)，7.49(3H，m)，7.28(1H，d，J＝9.3)，7.05(1H，d，J＝7.3)，5.06(1H，s)，5.18(2H，m)，4.78(1H，m)，4.62(1H，m)，3.29(1H，m)，3.08-2.79(3H，m)，2.58(1H，dd，J＝16.8，5.6)，2.20-1.85(4H，m)，1.70(1H，m)，1.45(9H，s)。MS(ES⁺)539.58(M-1，97.9％)529.59(100)。

(506b)，以类似化合物506a之方法制备。74％呈黄橘色固体：mp.75℃(分解)；[α]_D ²⁰-92.0°(c0.036，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3438，2904，2113，1728，1669，1523，1368，1328，1155；¹H NMR(CDCl₃)δ7.48(1H，d，J＝8.1)，5.83-5.68(1H，m，)，5.55-5.50(1H，m)，5.43-5.14(1H，m)，4.83-4.45(3H，m)，3.40-3.19(1H，m)，2.98(3H，s)，2.92-2.30(4H，m)，2.24-1.70(6H，m)，1.43(9H，s)。

(506c)，依类似化合物506a之方法制备。得到浅黄色泡沫(405毫克，82％)：[α]_D ²⁰-144°(c0.2，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3339，2978，2958，2112，1728，1674，1530，1459，1415，1367，1274，1252，1154，1063；¹H NMR(CDCl₃)δ7.23(1H，d，J＝8.2)，5.51-5.31(2H，m)，5.21-5.16(1H，m)，4.77-4.55(3H，m)，3.68(3H，s)，3.35-3.18(1H，m)，3.04-2.51(4H，m)，2.40-2.30(1H，m)，2.09-1.66(5H，m)，1.45(9H，s)。MS(ES⁺)493。

(506g)，以类似化合物506a之方法制备。81％：[α]_D ²⁸-146.7°(c0.4，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3438，2904，2113，1728，1669，1523，1368，1328，1155；¹H NMR(CDCl₃)δ7.32(1H，d)，6.43(1H，d)，5.50(1H，s)，5.22(1H，m)，4.94(1H，m)，4.77(1H，m)，4.60(1H，m)，3.24(1H，m)，3.03-2.52(4H，m)，2.36(1H，m)，2.10-1.64(5H，m)，2.02(3H，s)，1.45(9H，s)。分析C₂₁H₂₀N₆O₇之计算值：C，52.69；H，6.32；N，17.05。实测值：C，52.51；H，6.27；N，17.36。MS(ES⁺)477(M⁺-1，100％)。

(507a)。506a(3.0克，5.55毫摩尔)于无水二氯甲烷(40毫升)冷却至0℃，再以4分钟逐滴加入30％氢溴酸于醋酸(1.1毫升，5.55毫摩尔)。混合物0℃下搅拌9分钟，再以碳酸氢钠水溶液中止。产物以乙酸乙酯萃取，以碳酸氢钠水溶液，盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发得到2.97克(92％)的无色泡沫：[α]_D ²³-82.3°(c0.23，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3333，1726，1659，1530，1458，1447，1422，1395，1368，1279，1256，1222，1155，728；¹H NMR(CDCl₃)δ7.81(2H，m)，7.50(3H，m)，7.11(1H，d，J＝8.0)，7.01(1H，d，J＝7.4)，5.20(2H，m)，5.00(1H，m)，4.06(2H，s)，3.28(1H，m)，3.20-2.70(4H，m)，2.42(1H，m)，2.10-1.85(4H，m)，1.72(1H，m)，1.44(9H，s)。分析C₂₆H₃₃N₄O₇Br·0.7H₂O之计算值：C，51.53；H，5.72；N，9.24。实测值：C，51.55；H，5.52；N，9.09。MS(ES+)595，593(M⁺+1)。

(507b)以类似化合物507a之方法制备。(68％)呈橘色泡沫：[α]_D ²⁰-135°(c0.053，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3429，2944，2935，1723，1670，1458，1408，1327，1225，1154，991；¹H NMR(CDCl₃)δ7.38(1H，d，J＝8.2)，5.69(1H，d，J＝9.3)，5.43-5.34(1H，m)，5.07-4.97(1H，m)，4.70-4.42(2H，m)，4.12(2H，s)，3.35-3.17(1H，m)，3.10-2.69(4H，m)，2.98(3H，s)，2.43-2.33(1H，m)，2.15-1.65(5H，m)，1.43(9H，s)。分析C₂₀H₃₁BrN₄O₈S之计算值：C，42.33；H，5.51；N，9.87。实测值：C，42.69；H，5.52；N，9.97。

(507c)，以类似化合物507a之方法制备，得到浅黄色泡沫(320毫克，78％)：[α]_D ²⁰-107°(c0.2，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3401，2956，1726，1670，1528，1452，1415，1395，1368，1276，1251，1155，1064；¹H NMR(CDCl₃)δ7.07(1H，d，J＝7.6)，5.47(1H，d，J＝8.1)，5.21-5.16(1H，m)，5.03-4.94(1H，m)，4.75-4.56(2H，m)，4.06(2H，s)，3.69(3H，s)，3.31-3.13(1H，m)，3.03-2.92(2H，m)，2.81-2.58(2H，m)，2.41-2.31(1H，m)，2.10-1.66(5H，m)，1.44(9H，s)。

(507g)，以类似化合物507a之方法制备，得到浅黄色泡沫(84％)：[α]_D ²²-109.6°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3324，1727，1659，1535，1458，1444，1423，1369，1279，1256，1223，1155；¹H NMR(CDCl₃)δ7.12(1H，d，J＝7.8)，6.33(1H，d，J＝7.5)，5.19(1H，m，)，4.97(2H，m)，4.58(1H，m)，4.06(2H，s)，3.20(1H，m)，3.05-2.69(4H，m)，2.35(1H，m)，2.14-1.68(5H，m)，2.03(3H，s)，1.44(9H，s)。分析C₂₁H₃₁BrN₄O₇·0.3H₂O之计算值：C，46.99；H，5.93；N，10.44。实测值：C，46.97；H，5.90；N，10.35。

(508a)。向506c(547毫克，1毫摩尔)于DMF(4毫升)之溶液中，加入氟化钾(145毫克，2.5毫摩尔，2.5当量)。经室温下搅拌10分钟后，加入2.6-二氯苯甲酸(229毫克，1.2毫摩尔，1.2当量)。在室温下反应3小时后，加入乙酸乙酯(30毫升)。溶液以碳酸氢钠饱和水溶液(30毫升)及盐水洗涤，在MgSO₄上干燥并真空浓缩以生成590毫克(90％)的浅黄色泡沫：

[α]_D ²²-85°(c0.20，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3400，2956，1737，1675，1528，1434，1414，1368，1344，1272，1197，1152，1061；¹H NMR(CDCl₃)δ7.36-7.33(3H，m)，7.04(1H，d，J＝8.0)，5.46(1H，d，J＝7.8)，5.19-5.16(1H，m)，5.08(2H，AB)，4.97-4.55(1H，m)，4.69-4.55(2H，m)，3.68(3H，s)，3.30-3.10(1H，m)，3.01-2.50(4H，m)，2.40-2.33(1H，m)，2.15-1.60(5H，m)，1.44(9H，s)。分析C₂₈H₃₄C_l2N₄O₁₀之计算值：C，51.15；H，5.21；N，8.52。实测值：C，51.35；H，5.32；N，8.56。

(284)合成自508a，利用自504制备505之方法，得到330毫克(65％)白色固体：mp.115℃(分解)：[α]_D ²⁰-107°(c0.2，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3340，2954，1738，1664，1530，1434，1272，1198，1148，1060；¹H NMR(d₆-DMSO)δ8.91(1H，d，J＝7.2H)，7.67-7.63(3H，m)，7.54(1H，d，J＝8.0)，5.24(2H，s)，5.20-5.15(1H，m)，4.79-4.70(1H，m)，4.46-4.37(2H，m)，3.58(3H，s)，3.33-3.20(1H，m)，2.94-2.55(4H，m)，2.30-1.60(6H，m)。分析C₂₄H₂₆C₁₂N₄O₁₀·H₂O之计算值：C，46.54；H，4.56；N，9.05。实测值：C，46.36；H，4.14；N，8.88。

(508b)利用如508a化合物的方法制备，得到浅黄色泡沫(460毫克，82％)：[α]_D ²²-115°(c0.20，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3413，2960，1729，1675，1528，1514，1461，1421，1368，1265，1116，1096；¹H NMR(CDCl₃)δ7.27-7.03(4H，m)，5.48(1H，d，J＝8.2)，5.20-5.14(1H，m)，5.04(2H，AB)，4.93-4.86(1H，m)，4.80-4.56(2H，m)，3.77(3H，s)，3.22-3.15(1H，m)，3.00-2.56(4H，m)，2.37(6H，s)，2.19-1.77(5H，m)，1.45(9H，s)，2.41-2.25(1H，m)。MS(ES⁺)617。

(285)，以类似化合物284之方法合成，得到白色固体(303毫克，78％)：mp.110℃(分解)；[α]_D ²⁰-128°(c0.10，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3339，2958，1731，1666，1529，1420，1266，1248，1115，1070；¹H NMR(d₆-DMSO)δ8.90(1H，d，J＝7.4)，7.54(1H，d，J＝7.9)，7.36-7.28(1H，m)，7.17-7.14(2H，m)，5.19-5.15(3H，m)，4.84-4.74(1H，m)，4.45-4.37(2H，m)，3.59(3H，s)，3.45-3.25(1H，m)，2.95-2.64(4H，m)，2.35(6H，s)，2.30-1.60(6H，m)。分析C₂₆H₃₂N₄O₁₀·H₂O之计算值：C，53.98；H，5.92；N，9.68。实测值：C，53.50；H，5.52；N，9.49。MS(ES⁺)559。

(510a)。506a(2.27克，4.2毫摩尔)于无水二氯甲烷(50毫升)之溶液，以30％氢溴酸于醋酸(1.84毫升，9.2毫摩尔，2.2当量)在氮气下之0℃时处理。在0℃下搅拌10分钟后，反应可达完全，并在介质中结晶出白色固体。固体滤出并以乙酸乙酯及二乙醚洗涤得到2.20克(100％)的[3S(1S，9S)]5-溴-3-(9-苯甲酰氨基-6，10-二氧代-1，2，3，4，7，8，9，10-八氢-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酰氨基)-4-氧代戊酸，勿需再纯化可使用：¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.87(1H，d，J＝7.3)，8.63(1H，d，J＝7.6)，7.91-7.87(2H，m)，7.60-7.44(3H，m)，6.92(1H，bs)，5.14-5.09(1H，m)，4.92-4.65(2H，m)，4.43(2H，AB)，4.41-4.35(1H，m)，3.33-3.22(1H，m)，2.98-2.90(1H，m)，2.89-2.57(2H，m)，2.35-2.15(3H，m)，1.99-1.91(2H，m)，1.75-1.60(2H，m)。溴代酮(535毫克，1毫摩尔)于无水DMF(10毫升)之溶液，与氟化钾(150毫克，2.5毫摩尔，2.5当量)在氮下处理。在室温下搅拌5分钟后，加入2-巯基噻唑(140毫克，1.2毫摩尔，1.2当量)。于过夜反应后，加入乙酸乙酯(150毫升)且有机溶液以盐水洗涤，于硫酸镁上干燥并真空减量。残留物在二乙醚中结晶，过滤并在硅胶上纯化，利用MeOH(0％-5％)于二氯甲烷之梯度。蒸发得到344毫克(60％)的白色固体：mp.90-95℃(分解)；[α]_D ²⁰-82°(c0.2，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3328，2941，1745，1659，1535，1422，1276，1255，1223，1072；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.92(1H，d，J＝7.6)，8.68(1H，d，J＝7.6)，7.98-7.90(2H，m)，7.75-7.67(1H，m)，7.64-7.50(4H，m)，5.22-5.18(1H，m)，4.95-4.74(2H，m)，4.58-4.38(3H，m)，3.52-3.19(1H，m)，3.05-2.65(4H，m)，2.40-1.50(6H，m)。分析C₂₅H₂₇N₅O₄S₂·H₂O之计算值：C，50.75；H，4.94；N，11.84。实测值：C，51.34；H，4.70；N，11.58。MS(ES⁺)572。

(509b)。507a(100毫克，0.17毫摩尔)于无水二甲基甲酰胺(1.5毫升)以1-苯基-1H-四唑-5-硫醇(33毫克，0.187毫摩尔)及氟化钾(15毫克，0.34毫摩尔)处理)。混合物在室温下搅拌2小时，以乙酸乙酯稀释，以碳酸氢钠水溶液(x2)，盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发。产物在硅胶上快速层析纯化，以乙酸乙酯洗脱得到103毫克(88％)无色泡沫：[α]_D ²³-92.2°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3334，1726，1660，1528，1501，1417，1394，1368，1279，1253，1155；¹H NMR(CDCl₃)δ7.82(2H，m)，7.60-7.40(8H，m)，7.39(1H，d，J＝8.1)，7.05(1H，d，J＝7.3)，5.26(1H，m)，5.15(1H，m)，4.99(1H，m)，4.60(2H，m)，4.30(1H，d，J＝17.2H)，3.32(1H，m)，3.10-2.75(4H，m)，2.40(1H，m)，2.24(1H，m)，1.90(3H，m)，1.75(1H，m)，1.44(9H，s)，MS(ES⁺)691.47(M⁺+1)。

(280)，利用自504制备505之方法合成。509b(98毫克，0.142毫摩尔)于二氯甲烷(1毫升)冷却至0℃，再加三氟醋酸(1毫升)。混合物在0℃下搅拌15分，在室温下30分，再于减压下蒸发。残留物以无水甲苯研磨及蒸发。在硅胶上层析并以10％甲醇于二氯甲烷洗脱，得到无色玻璃状，其自二氯甲烷/二乙醚中结晶得到62毫克(69％)的无色固体：mp.145℃(分解)；[α]_D ²²-80.9°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3400，1727，1658，1530，1501，1460，1445，1416，1280，1254；¹H NMR(CDCl₃)δ8.00(1H，m)，7.79(2H，d，J＝6.7)，7.58-7.30(9H，m)，5.25(2H，m)，4.94(1H，m)，4.53(2H，m)，4.35(1H，m)，3.35(1H，m)，3.01(3H，m)，2.73(1H，m)，2.38(1H，m)，1.98(4H，m)，1.64(1H，m)。分析C₂₉H₃₀N₈O₇S·0.2TFA之计算值：C，53.71；H，4.63；N，17.04。实测值：C，53.97；H，4.92；N，16.77。MS(ES⁺)633.55(M⁺-1)。

(509c)，以化合物509b之类似方法制备，得到无色玻璃状(34％)：[α]_D ²²-77.1°(c0.25，CH₂Cl₂)；IR(薄膜)3311，1724，1658，1603，1578，1536，1488，1458，1426，1368，1340，1279，1256，1231，1155，707；¹H NMR(CDCl₃)δ8.29(2H，m)，7.84(2H，m)，7.48(4H，m)，7.22(3H，m)，5.20(2H，m)，4.90(2H，m)，4.58(1H，m)，3.29(1H，m)，3.20-2.70(4H，m)，2.38(2H，m)，1.96(4H，m)，1.68(1H，m)，1.42(9H，s)。MS(ES⁺)608.54(M+1)。

(283)，以化合物280之类似方法制备，得到无色泡沫(100％)：mp.～125℃；[α]_D ¹⁹-84.1°(c0.1，20％MeOH/CH₂Cl₂)；IR(KBr)3401，1736，1663，1538，1489，1459，1425，1281，1258，1200，1134；¹H NMR(CD₃OD/CDCl₃)δ8.38(2H，m)，7.84-7.40(8H，m)，5.16(4H，m)，4.80(1H，m)，4.56(1H，m)，3.50(1H，m)，3.12(2H，m)，2.82(2H，m)，2.37(1H，m)，2.10-1.65(5H，m)。分析C₂₇H₂₉N₅O₈·0.4H₂O之计算值：C，51.77；H，4.61；H，4.61；N，10.41。实测值：C，52.19；H，4.93；N，9.99。

(509d)，以化合物509b之类似方法合成，得到无色的固体(49.6毫克，82％)：¹H NMR(CDCl₃)δ8.02(1H，s)，7.95-7.86(1H，m)，7.84-7.76(2H，m)，7.62-7.35(4H，m)，7.22-7.07(1H，m)，6.43(1H，d)，5.26-5.08(2H，m)，5.03-4.72(3H，m)，4.66-4.50(1H，m)，3.43-3.19(1H，m)，3.15-2.97(1H，m)，2.86-2.72(3H，m)，2.48-2.31(1H，m)，2.18-1.60(6H，m)，1.43(9H，s)。

(510d)以化合物280之类似方法合成，得到无色固体(25.7毫克，57％)：mp.140-80℃；IR(KBr)3391，2945，1733，1664，1530，1422，1363，1277，1259，1204；¹H NMR(CD₃OD)δ8.23(1H，s)，7.94(1H，d)，7.87(2H，d)，7.54-7.42(3H，m)，6.48(1H，d)，5.22-5.15(1H，m)，4.57-4.46(1H，m)，3.62-3.41(1H，m)，3.22-3.13(1H，m)，3.02-2.81(2H，m)，2.70-1.80(6H，m)。分析C₂₆H₂₈N₆O₈·1.5H₂O之计算值：C，54.30；H，5.35；N，14.61。实测值：C，54.14；H，5.35；N，13.04。MS(ES⁺)551(M-1，100％)。C₂₆H₂₉N₆O₈(MH⁺)之精确质量数计算值：553.2047。实测值：553.2080。

(505f)，以类似化合物508a之方法，利用507b及3-氯-2-羟基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮及直接以三氟醋酸水解504f，得到褐色粉末(65毫克，30％)：[α]_D ²⁰-128°(c0.10，MeOH)；IR(KBr)3414，2928，1667，1527，2459，1407，1328，1274，1153，1134；¹H NMR(MeOH)δ9.35(1H，d，J＝6.6H)，8.34(1H，t，J＝7.2H)，7.99-7.95(1H，m)，7.76-7.69(1H，m)，5.85-5.45(3H，m)，5.30-5.21(1H，m)，4.93-4.66(2H，m)，3.81-3.65(1H，m)，3.66(3H，m)，3.45-2.52(4H，m)，2.52-1.71(6H，m)。D.J.Hlasta等，药物化学杂志J.Med.Chem.1995，38，4687-4692。

(504g)以类似化合物509b之方法制备，(83％)呈无色泡沫：[α]_D ²³-112.7°(c0.2，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3312，1726，1668，1501，1413，1395，1369，1328，1276，1254，1155；¹H NMR(CDCl₃)δ7.59(5H，m)，7.48(1H，d，J＝8.0)，5.68(1H，d，J＝9.0)，5.37(1H，m)，4.95(1H，m)，4.62-4.31(4H，m)，3.36(1H，m)，2.98(3H，s)，2.88(4H，m)，2.66(1H，m)，2.42(2H，m)，1.98(1H，m)，1.75(1H，m)，1.43(9H，s)。

(280b)，以类似化合物280之方法制备(100％)得到无色泡沫：mp.120-5℃；[α]_D ²⁵-112.4°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3328，1730，1664，1529，1501，1410，1328，1277，1219，1153，1134，991；¹H NMR(CDCl₃)δ8.07(1H，d，J＝7.8)，7.58(5H，s)，6.41(1H，d，J＝9.5)，5.32(1H，m)，5.04(1H，m)，4.70(1H，d，J＝17.5)，4.60(3H，m)，3.50-2.9(3H，m)，2.98(3H，s)，2.45(2H，m)，2.06(4H，m)，1.68(1H，m)。

(504h)，以类似化合物509b之方法制备，(24％)呈无色泡沫状：[α]_D ²³-101.0°(c0.2，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3330，1727，1669，1425，1396，1369，1328，1276，1256，1231，1155，1137，991；¹H NMR(CDCl₃)δ8.28(2H，brd，J＝9.4)，7.71(1H，d，J＝7.9)，7.22(2H，s)，6.03(1H，d，J＝9.4)，5.36(1H，m)，4.95(2H，m)，4.52(2H，m)，3.29(1H，m)，3.07(3H，s)，3.23-2.75(3H，m)，2.66-2.35(2H，m)，2.30-1.60(5H，m)，1.42(9H，s)。

(283b)，以类似化合物280之方法制备，(100％)呈无色泡沫：mp.120-5℃；[α]_D ²⁵-85.2°(c0.1，CH₃OH/CH₂Cl₂)；IR(KBr)3337，1738，1667，1560，1457，1424，1326，1317，1278，1258，1200，1189，1150，1133，991；¹H NMR(CDCl₃/CD₃OD)δ8.35(2H，m)，7.54(2H，m)，5.32(2H，m)，4.83(2H，m)，4.45(2H，m)，3.43-2.77(4H，m)，2.97(3H，s)，2.42(2H，m)，2.05-1.72(5H，m)。

(508c)，依化合物509b之类似方法制备，得到544毫克(97％)的浅黄色泡沫：[α]_D ²⁰-86°(c0.19，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3426，2947，1725，1669，1551，1418，1383，1253，1155，1064；¹H NMR(CDCl₃)δ8.49(2H，d，J＝4.8)，7.13(1H，d，J＝7.9)，7.03-6.98(1H，m)，5.47(1H，d，J＝7.9)，5.23-5.19(1H，m)，5.09-5.01(1H，m)，4.84-4.51(2H，m)，4.04(2H，AB)，3.69(3H，s)，3.38-3.19(1H，m)，3.06-2.64(4H，m)，2.40-1.76(6H，m)，1.43(9H，s)。分析C₂₅H₃₄N₆O₈S之计算值：C，51.89；H，5.92；N，14.52。实测值：C，51.49；H，6.04；N，13.87。MS(ES⁺)579。

(511c)，以类似化合物280之方法制备，得到370毫克(79％)白色泡沫：mp.105℃(分解)；[α]_D ²²-94°(c0.20，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3316，3057，2957，1724，1664，1252，1416，1384，1254，1189，1063；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.85(1H，d，J＝7.8)，8.62(2H，d，J＝4.7)，7.53(1H，d，J＝8.0)，7.28-7.23(1H，m)，5.21-5.17(1H，m)，4.87-4.79(1H，m)，4.47-4.35(2H，m)，4.23(2H，AB)，3.58(3H，s)，3.30-3.21(1H，m)，2.95-2.50(4H，m)，2.35-1.60(6H，m)。分析C₂₁H₂₆N₆O₈S·H₂O之计算值：C，46.66；H，5.22；N，15.55。实测值：C，46.66；H，5.13；N，15.07。MS(ES⁺)523，(ES⁺)521。

(508d)，以类似化合物509b之方法合成得到无色固体(269毫克，87％)：mp.80-110℃；[αl_D ²³-108°(c0.60，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3315，2977，1727，1688，1527，1501，1458，1418，1368，1279，1250，1155，1064；¹H NMR(CDCl₃)δ7.70(1H，d)，7.63-7.53(5H，m)，5.84(1H，d)，5.34-5.27(1H，m)，5.05-4.92(1H，m)，4.78-4.54(3H，m)，4.38(1H，d)，3.66(3H，s)，3.37-3.19(1H，m)，3.07-2.94(1H，m)，2.91-2.82(2H，m)，2.71-2.56(1H，m)，2.40-2.30(1H，m)，2.19-2.13(1H，m)，2.08-1.68(4H，m)，1.42(9H，s)。MS(ES⁺)667(31％)，645(M⁺+1，100)，589(62)。

(280c)，以类似化合物280之方法合成，得到浅乳色固体(203毫克，85％)：mp105-130℃；[α]_D ²²-235°(c0.11，MeOH)；IR(KBr)3342，2951，1727，1667，1529，1501，1459，1416，1276，1252，1192，1062；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.89(1H，d)，7.69(5H，s)，7.50(1H，d)，5.18-5.11(1H，m)，4.79-4.69(1H，m)，4.57(2H，s)，4.42-4.32(1H，m)，3.54(3H，s)，2.92-2.63(3H，m)，2.21-1.82(5H，m)，1.65-1.57(1H，m)。MS(ES⁺)587(M-1，100％)。

(508e)，以类似化合物509b之方法合成，得到浅橘色固体(199毫克，25％)：mp80-120℃；[α]_D ²³-89°(c0.51，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3333，2978，1726，1669，1578，1536，1478，1426，1368，1277，1253，1232，1155，1064；¹H NMR(CDCl₃)δ8.41-8.18(2H，m)，7.81(1H，d)，7.26-7.20(2H，s)，5.91(1H，d)，5.24-5.16(1H，m)，5.07-4.86(3H，m)，4.81-4.51(2H，m)，3.67(3H，s)，3.34-3.16(1H，m)，3.10-2.81(3H，m)，2.72-2.54(1H，m)，2.41-2.31(1H，m)，2.07-1.62(5H，m)，1.47(9H s)。MS(ES⁺)562(M⁺+1，100％)，506(38)。

(283c)，以类似化合物280之方法合成，得到掺白色粉末(167毫克，98％)：mp90-105℃；[α]_D ²²-106°(c0.11，MeOH)；IR(KBr)3325，3070，2956，1669，1544，1423，1256，1199，1133，1062；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.95(1H，d)，8.45-8.20(2H，m)，7.53-7.45(3H，m)，5.19-5.08(3H，m)，4.70-4.62(1H，m)，4.41-4.30(2H，m)，3.53(3H，s)，2.92-2.68(3H，m)，2.22-2.06(2H，m)，1.95-1.82(2H，m)，1.63-1.53(1H，m)。MS(ES⁺)506(M⁺+1，100％)。

(512a)，如化合物509b之类似方法制备，得到(83％)无色泡沫：[α]_D ²³-129.6°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3326，1726，1664，1531，1501，1444，1415，1394，1369，1279，1254，1156；¹H NMR(CDCl₃)δ7.59(5H，s)，7.37(1H，d，J＝7.9)，6.38(1H，d，J＝7.4)，5.27(1H，m)，4.98(2H，m)，4.58(2H，d，+m)，4.28(1H，d，J＝17.2)，3.28(1H，m)，3.10-2.65(4H，m)，2.31(2H，m)，2.03(3H，s)，2.10-1.72(4H，m)，1.48(9H，s)。

(280d)，以如化合物280之相似方法制备，得到(77％)无色泡沫：[α]_D ²²-93.3°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3316，1728，1659，1531，1501，1415，1341，1278，1253，1222，1185；¹H NMR(CDCl₃)δ8.05(1H，d，J＝7.9)，7.57(5H，brs)，5.30(1H，m)，5.01(2H，m)，4.70-4.10(4H，m)，3.40-2.85(4H，m)，2.62(1H，m)，2.33(1H，m)，2.27-1.65(5H，m)，2.01(3H，s)。

(512b)，以类似化合物509b之方法制备，得到(9％)无色泡沫：IR(KBr)3333，1727，1661，1542，1427，1369，1279，1257，1232，1156；¹H NMR(CDCl₃)δ8.30(2H，m)，7.20(3H，m)，6.45(1H，，d，J＝7.4)，5.17(1H，m)，4.91(3H，m)，4.55(1H，m)，3.27(1H，m)，3.14-2.70(4H，m)，2.41(1H，m)，2.04(3H，s)，2.10-1.65(6H，m)，1.44(9H，s)。

(283d)以化合物280之类似方法制备，(100％)呈无色泡沫：[α]_D ²²-106.0°(c0.2，CH₃OH/CH₂Cl₂)；IR(KBr)3312，1735，1664，1549，1426，1279，1258，1200，1135；¹H NMR(CDCl₃)δ8.27(2H，m)，7.46(2H，m)，5.09(1H，m)，4.79(3H，m)，4.47(1H，m)，3.40(1H，m)，3.30-2.70(3H，m)，2.54(1H，m)，2.30(1H，m)，1.98(3H，s)，2.05-1.65(4H，m)。

(245b)，制备自(1S，9R)9-苯甲酰氨基-1，2，3，4，7，8，9，10-八氢-10-氧代-6H-哒嗪并[1，2-a][1，2]二氮杂_-1-羧酸，利用245之方法，得到416毫克(85％)的无色泡沫(～1∶1的非对映立体异构混合物)：IR(KBr)3392，3302，2942，1792，1642，1529，1520，1454，1119；¹H NMR(CDCl₃)δ7.79(2H，m)，7.51-7.09(10H，m)，5.52(0.5H，d，J＝5.3)，5.51(0.5H，s)，5.36(1H，m)，4.84(1H，m)，4.74-4.59(1.5H，m)，4.51(1H，m)，4.38(0.5H，m)，3.22-2.83(5H，m)，2.51(1H，m)，2.25(2H，m)，2.01-1.46(6H，m)。分析C₂₈H₃₂N₄O₆·0.75H₂O之计算值：C，62.97；H，6.32；N，10.49。实测值：C，63.10；H，6.16；N，10.21。MS(ES⁺)521(M+1，100％)。

(246b)，制备自245b，利用246之方法得到104毫克(33％)白色粉末：mp.115-119℃；[α]_D ²⁴-19.8°(c0.2，MeOH)；IR(KBr)3293，2944，1786，1639，1578，1537，1489，1450，1329，1162，1124；¹H NMR(CD₃OD)δ7.85(2H，d，J＝7.0)，7.49(3H，m)，5.49(1H，m)，4.55(1H，m)，4.30(2H，m)，3.40(1H，m)，3.19-2.89(3H，m)，2.63(2H，m)，2.16-1.81(5H，m)，1.60(3H，m)。分析C₂₁H₂₆N₄O₆·H₂O之计算值：C，56.24；H，6.29；N，12.49。实测值：C，56.54；H，6.05；N，12.29。MS(ES⁺)429(M-1，100％)。

化合物513a-j如下述制备。

(513a)，以化合物513d/e之方法制备，得到非对映立体异构之混合物(670毫克，50％)，呈油状：IR(KBr)3331，2946，1790，1723，1713，1531，1329，1257，1164，1120，1060，977，937，701；¹HNMR(CDCl₃)δ7.36-7.18(5H，m)，5.99-5.83(1H，m)，5.41-5.34(2H，m)，5.28-5.18(2H，m)，4.59-4.56(2H，m)，4.32-3.96(2H，m)，3.85-3.73(1H，m)，3.02-2.76(3H，m)，2.49-2.34(1H，m)。

(513b)，以513d/e之方法制备以生成8克(51％)非对映立体异构之混合物，呈澄清油状：[α]_D ²⁰-13°(c0.25，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3325，2959，2875，1790，1723，1535，1420，1328，1257，1120，1049，973，937；¹H NMR(CDCl₃)δ6.02-5.80(1H，m)，5.53-5.46(2H，m)，5.37-5.21(2H，m)，4.58(2H，d，j＝5.5)，4.50-4.46(0.5H，m)，4.34-4.25(1H，m)，4.19-4.12(0.5H，m)，3.06-2.77(1H，m)，2.53-2.35(1H，m)，1.85-1.50(8H，m)。分析C₁₃H₁₉NO₅之计算值：C，57.98；H，7.11；N，5.20。实测值：C，56.62；H，7.22；N，4.95。MS(ES⁺)270。

(513c)，以化合物513d/e之方法合成，得到单一异构体(20％)呈浅黄色油。[α]_D ²⁴-63.1°(c0.2，CH₂Cl₂；IR(薄膜)3338，2948，1791，1723，1529，1421，1330，1253，1122，984，929，746；¹H NMR(CDCl₃)δ7.20(4H，m)，5.87(1H，m)，5.61(1H，d，J＝5.4)，5.33-5.10(2H，m)，4.70(1H，m)，4.56(3H，m)，3.33-3.19(2H.m)，3.10-2.94(2H.m)，2.81(1H，dd，J＝8.3，17.3)，2.43(1H，dd，J＝10.5，17.3)。

(513d)及(513d/e)，经Chapman生物有机与药物化学通讯 Biorg.& Med.Chem.Lett.，2，pp.615-618(1992)所述方法制备。经乙酸乙酯萃取及以NaHCO₃洗涤后，产物干燥(MgSO₄)，过滤并蒸发生成油，其中含有产物及苄醇。加入己烷(200毫升)(每56克AllocAsp(CO₂tBu)CH₂OH中使用200毫升己烷)，且混合物搅拌并冷却过夜。此得到油状固体。倾析去水份，并保持以供层析。油状残留物溶于乙酸乙酯中，再蒸发生成油，其自10％乙酸乙酯/己烷(～500毫升)中结晶。固体过滤得到513d(12.2克，19％)：mp.108-110℃；[α]_D ²⁴+75.72°(c0.25，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3361，1778，1720，1517，1262，1236，1222，1135，1121，944，930，760；¹HNMR(CDCl₃)δ7.38(5H，m)，5.90(1H，m)，5.50(1H，s)，5.37(0.5H，m)，5.26(2.5H，m)，4.87(1H，ABq)，4.63(3H，m)，4.31(1H，m)，3.07(1H，dd)，2.46(1H，dd)。分析C₁₅H₁₇NO₅之计算值：C，61.85；H，5.88；N，4.81。实测值：C，61.85；H，5.89；N，4.80。

液体合并并蒸发生成含有苄醇之油(～200克)。加入己烷/乙酸乙酯(9∶1，100毫升)且产物以层析纯化，再以10％乙酸乙酯/己烷洗脱以移去过量的苄醇，且再来是二氯甲烷/己烷(1∶1含有10％乙酸乙酯)。此得到513e，含有一些513d(20.5克，32％)：mp.45-48℃；[α]_D ²⁴-71.26°(c0.25，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3332，1804，1691，1536，1279，1252，1125，976。¹H NMR(CDCl₃)δ7.38((5H，m)，5.91(1H，m)，5.54(1H，d，J＝5.2)，5.38(3H，m)；4.90(1H，ABq)4.60(4H，m)，2.86(1H，dd)，2.52(1H，dd)。分析C₁₅H₁₇NO₅S·0.1H₂O之计算值：C，61.47；H，5.91；N，4.78。实测值：C，61.42；H，5.88；N，4.81。

(513f)，以513d/e之方法制备，得到无色的油(152毫克，79％)：IR(薄膜)3334，2983，2941，1783，1727，1713，1547，1529，1422，1378，1331，1313，1164，1122，1060，938；¹H NMR(CDCl₃)δ6.09-5.82(2H，m)，5.50-5.18(3H，m)，4，64-4.54(2H，m)，4.27-4.16(1H，m)，3.95-3.78(1H，m)，3.73-3.56(1H，m)，3.05-2.77(1H，m)，2.56-2.37(1H，m)，1.35-1.17(4H，m)。分析C₁₀H₁₅NO₅之计算值：C，52.40；，6.60；N，6.11。实测值：C，52.16；H，6.62；N，5.99。MS(ES⁺)229(M⁺+1，100％)。

(513g)。4-二甲氨基吡啶(76.0毫克，622毫摩尔)加至2-苯氧基苯甲酰氯(579毫克，2.49毫摩尔)及517(600毫克，2.07毫摩尔)于吡啶(10毫升)之溶液中。混合物在室温下搅拌18小时，再加入盐水(25毫升)，并以乙酸乙酯(30毫升，20毫升)萃取。混合的有机萃取物以1M盐水(3x25毫升)，饱和的碳酸氢钠水溶液(2×25毫升)及盐水(25毫升)洗涤，干燥(MgSO₄)再浓缩。浅橘色油以快速柱层析纯化(1-10％丙酮/二氯甲烷)得到447毫克(44％)的无色油：IR(液膜)3375，2980，1721，1712，1602，1579，1514，1484，1451，1368，1294，1250，1234，1161，1137，1081，754；¹H NMR(CDCl₃)δ7.98-7.93(1H，m)，7.50-7.41(1H，m)，7.35-7.25(2H，m)，7.22-7.03(3H，m)，6.95(3H，d)，5.95-5.76(1H，m)，5.57(1H，d)，5.30-5.13(2H，m)，4.51(2H，d)，4.25(2H，d)，4，18-4.04(1H，m)，3.88(1H，m)，3.50(1H，m)，2.51(2H，m)，1.41(9H，s)。MS(ES⁺)508(57％)，503(76)，486(M⁺+1，45)，468(27)，412(100)。C₂₆H₃₂NO₈(MH⁺)之精确质量数计算值：486.2128。实测值：486.2158。

(513h)，制备自(3S，4R)(N-烯丙氧羰基)-3-氨基-4，5-二羟基戊酸叔丁酯，以如513g之方法生成562毫克(85％)的无色油。IR(薄膜)3418，2980，1722，1711，1512，1368，1278，1245，1198，1157，1139，¹HNMR(CDCl₃)δ8.90(1H，d，J＝8.6)，8.21(1H，dd，J＝1.2，7.3)，8.04(1H，d，J＝8.2)，7.89(1H，dd，J＝1.5，7.9)，7.67-7.46(3H，m)，5.88((1H，m)，5.49(1H，d，J＝9.0)，5.35-5.18(2H，m)，4.57-4.46(4H，m)，4.19(2H，m)，2.67(2H，m)，1.40(9H，s)。分析C₂₄H₂₉NO₇之计算值：C，65.00；H，6.59；N，3.16。实测值：C，64.74；H，6.56；N，3.09。MS(ES⁺)466(M+Na，100％)，444(M+1，39)，388(4)。

(513i)，以化合物513g之方法合成，得到无色的油(569毫克，85％)：IR(液膜)3400，1723，1712，1584，1528，1489，1443，1367，1276，1232，1190，1161，1098，1074，995，755；¹H NMR(CDCl₃)δ8.65-8.59(1H，d)，7.84-7.66(2H，m)，7.45-711(5H，m)，7.05-6.97(2H，m)，6.00-5.78(1H，m)，5.54-5.14(2H，m)，4.62-4.52(2H，m)，4.42-4.32(2H，m)，4.08-4.22(2H，m)，2.78-2.47(2H，m)，1.44(9H，s)。MS(ES⁺)508(100％)，486(M⁺+1，33。C₂₆H₃₂NO₈(MH⁺)之精确质量数计算值：486.2128。实测值：486.2121。

(513j)，以化合物513g之类似方法合成，得到浅橘色油(905毫克，91％)：IR(液膜)3418，3383，2980，1722，1711，1601，1517，1450，1424，1368，1308，1252，1154，1100，994，767，698；¹H NMR(CDCl₃)δ7.62-7.55(2H，m)，7.51-7.42(3H，m)，5.98-5.76(1H，m)，5.33-5.18(2H，m)，4.53(2H，d)，4.18(2H，d)，3.91(1H，m)，3.80(1H，m)，2.76(3H，s)，2.50(2H，m)，1.43(9H，s)。分析C₂₄H₃₀N₂O₈·0.5H₂O之计算值：C，59.62；H，6.46；N，5.79。实测值：C，59.46；H，6.24；N，5.72。MS(ES⁺)497(100％)，475(M⁺+1，15)，419(48)。

(514)依H.Matsunaga等四面体通讯 Tetrahedron Letters24，pp.3009-3012(1983)之方法制备，呈纯的非对映立体异构体形式(60％)，呈油状：[α]_D ²³-36.9°(c0.5，二氯甲烷)；IR(液膜)2982，2934，1726，1455，1369，1257，1214，1157，1068；¹H NMR(CDCl₃)δ7.31(5H，m)，4.10(1H，q，J＝6.0)，4.05-3.75(4H，m)，3.10(1H，q，J＝6.0)，2.40(2H，m)，1.42(9H，s)，1.40(3H，s)，1.34(3H，s)。

(516)。514(302克，9.00毫摩尔)及10％Pd/C(300毫克)于乙醇(30毫升)在氢下搅拌2小时。悬浮液经由Celite及0.45毫米之滤膜过滤，且滤液浓缩生成无色的油515(2.106克，95％)，勿需再纯化可使用。油(1.93克，7.88毫摩尔)溶于水中(10毫升)，再加入1.4-二噁烷及碳酸氢钠(695毫克，8.27毫摩尔)。混合物冷却至0℃，再逐滴加入氯甲酸烯丙酯(1.04克，919毫升，8.66毫摩尔)。3小时后，混合物以乙醚萃取(2×50毫升)。合并的乙醚萃取物以水(2×25毫升)及盐水(25毫升)洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩以生成无色的油。快速柱层析(10-35％乙酸乙酯/己烷)得到无色固体(2.69克，95％)：mp.64-5℃；[α]_D ²³-21°(c1.00，CH₂Cl₂；IR(KBr)3329，1735，1702；¹HNMR(CDCl₃)δ6.00-5.82(1H，m)，5.36-5.14(2H，m)，542(1H，s)，4.56(1H，d)，4.40-4.08(2H，m)，4.03(1H，m)，3.70(1H，m)，2.52(2H，m)，1.44(12H，2xs)，1.33(3H，s)；分析C₁₆H₂₇NO₆之计算值：C，58.34；H，8.26；N，4.25。实测值：C，58.12；H，8.16；N，4.19；MS(+FAB)320(M⁺+1，41％)，274(70)，216(100)。

(517)。516(2.44克，7.41毫摩尔)于80％醋酸水溶液(25毫升)之溶液在室温下搅拌24小时，再浓缩及与甲苯(2×25毫升)共沸。残留物以盐水处理(25毫升)，再以乙酸乙酯萃取(2×25毫升)。有机部分干燥(MgSO₄))，并浓缩生成无色的油。快速层析(20-80％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到无色的固体(1.99克，99％)：mp.74-5℃；[α]_D ²⁵-1.3°(c1.0，CH₂Cl₂；IR(KBr)1723，1691；¹HNMR(CDCl₃)δ6.02-5.78(2H，m)，5.35-5.16(2H，m)，4.55(2H，d)，4.16-4.04(2H，m)，2.76(2H，s)，3.56(2H，m)，2.56(2H，m)，1.43(9H，s)。分析C₁₃H₂₃NO₆之计算值：C，53.97；H，8.01；N，4.84。实测值：C，53.79；H，7.88；N，4.81；MS(+FAB)290(M⁺+1，44％)，234(100)。

实施例30

化合物1105-1125如下制备。这些化合物之物理数据列于表24中。

表24

表24(续)

表24(续)

表24(续)

表24(续)

表24(续)

表24(续)

表24(续)

步骤A。401之合成。TentaGel S^_NH₂树脂(0.25毫摩尔/克，5.25克)置于多孔的玻璃震荡器容器内，再以二甲基乙酰胺洗涤(3×15毫升)。化合物400(1.36克，2.3毫摩尔)溶于DMA中(10毫升)，再加O-苯并三唑-N，N，N′N′-四甲基鎓六氟磷酸盐(HBTU；0.88克，2.3毫摩尔)及DIEA(0.8毫升，4.6毫摩尔)。溶液转移至树脂，再加5毫升DMA。反应混合物在室温下振摇1.5小时，利用腕臂震荡器。树脂过滤并以二甲基乙酰胺洗涤(4×15毫升)。

步骤B。1102之合成。树脂401以20％(v/v)六氢吡啶/二甲基乙酰胺(15毫升)去保护10分钟(振摇)再以新鲜的六氢吡啶试剂(15毫升)洗10分钟。树脂再以二甲基乙酰胺洗涤(6×15毫升)，再以N-甲基吡咯烷酮洗涤(2×25毫升)。

化合物1101(0.979克，2.11毫摩尔)溶于二甲基乙酰胺中(8毫升)，再加HBTU(0.81克，2.1毫摩尔)及DIEA(0.75毫升，4.3毫摩尔)，且溶液加至树脂中，再加二甲基乙酰胺(4毫升)。反应混合物在室温下搅拌2小时，利用腕壁震荡器。树脂如401般处理，以生成1102。

步骤C。1103之合成。此化合物制备自树脂1102(0.040毫摩尔)，利用Advanced ChemTech 396多肽合成仪。自动化循环中包括有树脂，以二甲基甲酰胺洗涤(2×1毫升)，以25％(v/v)六氢吡啶/二甲基甲酰胺(1毫升)去保护3分钟，再以新鲜试剂(1毫升)历10分钟以生成树脂1103。树脂以二甲基甲酰胺(3×1毫升)及N-甲基吡咯烷酮(3×1毫升)洗涤。

树脂1103以0.4M羧酸及0.4M HOBT于N-甲基吡咯烷酮(0.5毫升)，0.4M HBTU于N-甲基吡咯烷酮(0.5毫升)溶液，及1.6M DIEA于N-甲基吡咯烷酮(0.25毫升)之溶液酰化，且反应在室温下震荡2小时。重复酰化步骤。最后，树脂以N-甲基吡咯烷酮(1×1毫升)，二甲基甲酰胺(4×1毫升)，二氯甲烷(5×1毫升)洗涤，再于真空下干燥。醛自树脂中解离，并以95％TFA/5％H₂O(v/v，1.5毫升)在室温下大体地去保护历30分钟。树脂以解离试剂(1毫升)洗涤后，混合的滤液加至冷的1∶1乙醚∶己烷(10毫升)中，且生成的沉淀物以离心及倾析法分离。生成的团块溶于10％乙腈/90％H₂O/0.1％TFA(5毫升)再冷冻干燥得粗制的1105-1125，呈白色粉末。化合物以半制备式RP-HPLC纯化，利用Rainin Microsorb^TM C18柱(5微米，21.4×250毫米)以含有0.1％TFA(v/v)之线性乙腈梯度(8％-48％)，在12毫升/分下洗脱30分钟。汇集含有欲求产物之流分，并冷冻干燥生成1105-1125(10.8毫克，63％)。

分析HPLC方法：

(1)Waters DeltaPak C18，300_(5微米，3.9×150毫米)。含有0.1％TFA(v/v)之线性乙腈梯度(0％-25％)，以1毫升/分历14分钟。

(2)Waters DeltaPak C18，300_(5微米，3.9×150毫米)。含有0.1％TFA(v/v)之线性乙腈梯度(5％-45％)，以1毫升/分历14分钟。

(259b)，利用自258制备259之方法合成，得到蜡质固体(87克，51％)：mp.54-55℃；IR(液膜)3324，2978，1732，1713，1455，1367，1277，1254，1171；¹HNMR(CDCl₃)δ7.35(5H，m)，6.15(1H，bs)，5.13(2H，s)，3.15(2H，t，J＝6.5)，2.54(2H，t，J＝6.5)，1.45(9H，s)。分析C₁₅H₂₂N₂O₃之计算值：C，61.21；H，7.53；N，9.52。实测值C，61.29；H，7.51；N，9.51。MS(ES⁺)295(M⁺)+1)。

(260b)，利用由259制备260之方法合成，得到胶状(81克)，可在未纯化下用于下一步骤。纯样品之分析数据：IR(液膜)3318，2976，1733，1451，1412，1393，1366，1256，1161；¹H NMR(CDCl₃)δ7.34(10H，m)，6.68(0.5H，bs)，5.11(4H，m)，4.63(0.5H，bs)，4.14(1H，m)，3.53(2H，m)，3.08(1H，m)，2.63(2H，m)，2.10-1.60(4H，m)，1.60-1.35(19H，m+2xs)。

(261b)，利用由260制备261之方法合成，得到胶状，可经快速层析纯化(1∶1乙酸乙酯/二氯甲烷)生成标题化合物261b(36.0克，79.4％历2阶段)：IR(薄膜)3267，2979，2937，1728，1668，1394，1369，1245，1159；¹H NMR(CDCl₃)δ7.6(1H，bs)，6.8(1H，vbs)，4.47(1H，bs)，3.73(2H，bs)，2.98(1H，bs)，2.66(3H，m)，2.04(1H，bs)，1.84(1H，m)，1.6-1.2(21H，m+s)。

(262b)，利用由261制备262之方法合成，得到标题化合物262b，(18.6克，54％)，呈油状：[a]_D ²⁰+47.7°(c0.236，CH₂Cl₂)；IR(液膜)3291，2978，1738，1727，1690，1678，1439，1243，1164；¹H NMR(CDCl₃)δ6.59(1H，s)，5.06(1H，m)，4.47((1H，m)，3.85(3H，m)，2.82(1H，m)，2.37(1H，m)，2.22(1H，m)，1.92(1H，m)，1.63(2H，m)，1.48及1.46(18H，2xs)。

MS(ES⁺)399(M⁺+1)。

(518)。化合物262b(2.43克，6.1毫摩尔)溶于1M氯化氢于乙酸乙酯(30毫升)，并在室温下搅拌20小时，加入固体碳酸氢钠(4克，46.5毫摩尔)及水20毫升，且混合物搅拌5分钟再分离，并以乙酸乙酯萃取水性部分。混合的有机溶液以水，饱和的盐洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。以快速层析纯化(50％乙酸乙酯/二氯甲烷-100％乙酸乙酯)得到纯产物518(1.08克，59％)呈不稳定的油：[α]_D ²⁰+82°(c0.55，CH₂Cl₂)；IR(液膜)3331，2977，1731，1680，1664，1439，1420，1315，1158；¹H NMR(CDCl₃)δ5.08(1H，m)，4.48(1H，m)，3.80(2H，Abq)，3.70(2H，bs，以D₂O交换)，3.53(1H，m)，2.75(1H，m)，2.30(2H，m)，1.88(1H，m)，1.71(2H，m)，1.47(9H，s)。

(520)。519(9.4克，35.6毫摩尔)悬浮于甲醇中(230毫升)并冷却于0℃之冰浴中。以30分钟逐滴加入亚硫酰氯(3毫升，4.89克，41.1毫摩尔)且混合物在环境温度下搅拌48小时。溶剂于30℃之真空下移去，且油性残留物溶于乙酸乙酯中(500毫升)。有机溶液以饱和的碳酸氢钠，水及盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩得到520(7.84克，79％)呈油状：[α]_D ²²-25.9°(c0.615，CH₂Cl₂)；IR(液膜)2953，1739，1703，1694，1440，1403，1357，1261，1241，1174；¹H NMR(CDCl₃)δ7.36(5Hs)，5.18(2H，s)，4.00(1H，bd)，3.73(3H，s)，3.55(1H，dd)，3.12(1H，t)，2.06(1H，m)，1.73(3H，m)。分析C₁₄H₁₇N₂O₄·0.25H₂O之计算值：C，59.46；H，6.59；N，9.91。实测值：C，59.44；H，6.46；N，10.09。

(521)。利用上文260之类似方法，制备521，96％呈粗制的油：[α]_D ²²-22.16°(c0.25，CH₂Cl₂)；IR(液膜)3316，2976，2953，1738，1726，1714，1690，1367，1260，1167；¹H NMR(CDCl₃)δ7.25(10H，m)，6.82(1H，bs)，5.10(4H，m)，4.80(1H，bs)，4.3-3.4(6H，m)，3.10(1H，m)，2.59(2H，m)，1.95(2H，m)，1.44(10H，m+s)。

(522)。利用上文261所述之类似方法，可制成522，92％呈白色固体：mp.146-148℃(分解)；[α]_D ²²+27.8°(c0.25，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3346，1740，1710，1626，1497，1290，1250，1206，1179，1159；¹H NMR(CDCl₃)δ7.60(1H，bs)，7.5-5.5(1H，vbs)，4.64(1H，bs)，3.76(5H，m+s)，3.00(1H，m)，2.70(3H，m)，2.16(1H，m)，1.92(1H，m)，1.56(1H，m)，1.46(11H，m+s)。分析C₁₅H₂₆N₄O₇之计算值：C，48.12；H，7.00；N，14.96。实测值：C，48.21；H，6.96；N，14.86。MS(ES⁺)373(M^--1)。

(523)。522(7.15克，191毫摩尔)溶于二氯甲烷(100毫升)中，其内含有二甲基甲酰胺(0.5毫升)并冷却至0℃。加入亚硫酰二氯(116毫升，2.61克，22毫摩尔)及N-乙基吗啉(4.86毫升，440毫克，38.2毫摩尔)，且混合物搅拌2小时。有机混合物以2M硫酸氢钠(50毫升)，饱和的碳酸氢钠(50毫升)及盐水(50毫升)洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。残留物以乙醚研磨得到523，呈白色固体(5.73克，84％)：mp.186-188℃(分解)；[α]_D ²²+65.3°(c0.25，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3298，2978，1750，1720，1682，1658，1455，1423，1369，1316，1241，1212，1160；¹H NMR(CDCl₃)δ6.56(1H，s)，5.17(1H，dd)，4.48(1H，bd)，3.81(3H，m)，3.75(3H，s)，2.83(1H，dt)，2.40(1H，m)，2.28(1H，m)，1.95(1H，m)，1.67(1H，m)，1.47(9H，s)。分析C₁₅H₂₄N₄O₆·1/6H₂O之计算值：C，50.13；H，6.82；N，15.59。实测值：C，50.12；H，6.71；N，15.58。MS(ES⁺)357(M+-1，46％)，301(100％)。

(524)，利用制备518之方法合成自523。

化合物262a-k可利用制备211b-f之方法合成。

(262a)。可得到443毫克(91％)的标题化合物：mp.56-7℃；[α]_D ²⁵+76°(c0.15，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3429，2979，1734，1675，1418，1369，1339，1323，1244，1164，665；¹H NMR(CDCl₃)δ8.45(1H，s)，8.00-7.59(7H，m)，4.69-4.65(1H，m)，4.25-4.12(1H，m)，4.10-3.99(1H，m)，3.73-3.55(2H，m)，2.40-2.30(1H，m)，1.99-1.91(1H，m)，1.82-1.62(2H，m)，1.48-1.46(2H，m)，1.37(9H，s)。分析C₂₃H₂₈N₄O₆S·H₂O之计算值：C，54.53；H，5.97；N，11.06。实测值：C，54.60；H，5.73；N，10.95。MS(ES⁺)489。

(262c)。120毫克(80％)无色泡沫可得到：[α]_D ²²+22.6°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3316，1732，1671，1609，1551，1455，1432，1316，1288，1245，1218，1158，1122，1023；¹H NMR(CDCl₃)δ7.16(4H，m)，6.79(1H，m)，6.60(1H，m)，5.11(1H，m)，4.59(1H，m)，3.89(2H，m)，3.77(3H，s)，3.72(2H，m)，2.85(1H，m)。

(262d)，(81％)呈

无色泡沫：[α]_D ²²+3.7°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3468，3446，3269，1734，1698，1667，1609，1555，1490，1461，1433，1423，1296，1246，1215，1173，1157，1028，756；¹H NMR(CDCl₃)δ8.23(1H，m)，7.95(1H，s)，6.95(4H，m)，5.15(1H，m)，4.60(1H，m)，3.98-3.65(4H，m)，3.89(3H，s)，2.90(1H，m)，2.48(1H，m)，2.25(1H，m)，2.05-1.65(2H，m)，1.48(9H，s)。

(262e)，呈白色泡沫状固体(155毫克，53％)：mp.53-7℃；[α]_D ²²+57.4°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3271，2978，1733，1680，1437，1314，1245，1156，¹H NMR(CDCl₃)δ7.46(1H，s)，7.42-7.20(5H，m)，5.03(1H，dd)，4.52-4.40(1H，m)，3.96-3.70(2H，m)，3.70-3.49(1H，m)，3.63(2H，s)，2.92-2.75(1H，m)，2.43-2.33(1H，m)，2.33-2.15(1H，m)，2.00-1.50(3H，m)，1.45(9H，s)。分析C₂₁H₂₈N₄O₅S·0.25H₂O之计算值：C，59.91；H，6.82；N，13.31。实测值：C，60.19；H，6.80；N，13.30。MS(ES⁺)418(M⁺+2，25％)，417(M⁺+1，100)，362(9)，361(45)。

(262f)，呈白色固体(273毫克，93％)：mp.102-6℃；[α]_D ²²+7.5°(c0.07，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3320，2979，1731，1676，1669，1601，1549，1444，1314，1240，1156；¹H NMR(CDCl₃)δ7.37-7.20(6H，m)，7.08-6.98(1H，m)，5.12(1H，dd)，4.64-4.55(1H，m)，4.02-3.78(2H，m)，3.75-3.65(1H，m)，2.94-2.75(1H，m)，2.57-2.35(1H，m)，2.35-2.20(1H，m)，2.00-1.50(3H，m)，1.48(9H，s)。分析C₂₀H₂₇N₅O₅·0.4H₂O之计算值：C，56.56；H，6.60；N，16.49。实测值：C，56.89；H，6.58；N，16.07。MS(ES⁺)419(M⁺+2，24％)，418(M⁺+1，100)，363(15)，362(81)，242(10)。

(262g)，(13g)呈白色固体(298毫克，70％)：mp.138-43℃；[α]_D ²³+69.8°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3282，2978，1733，1664，1536，1421，1310，1156，748；

¹H NMR(CDCl₃)δ9.67(1H，s)，9.53(1H，s)，7.50(1H，d)，7.30-7.15(2H，m)，7.10-7.00(1H，m)，6.93(1H，s)，5.16-5.12(1H，m)，4.60-4.50(1H，m)，4.05-3.85(2H，m)，3.85-3.70(1H，m)，3.05-2.90(1H，m)，2.55-2.35(1H，m)，2.35-2.20(1H，m)，2.00-1.85(1H，m)，1.85-1.50(2H，m)，1.47(9H，s)。分析C₂₂H₂₇N₅O₅·0.45H₂O之计算值：C，58.77；H，6.26；N，15.58。实测值：C，59.14；H，6.24；N，15.18。MS(ES⁺)433(M⁺+2，26％)，442(M⁺+1，100)，387(17)，386(79)，285(20)，229(85)，211(26)，185(15)，183(57)，139(9)。

(262h)，呈白色固体(325毫克，73％)：mp.209-12℃；[α]_D ²⁴+62.4°(c0.2，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3513，3269，2980，1731，1680，1653，1599，1531，1314，1158；¹H NMR(CDCl₃)δ9.40(1H，s)，8.75(1H，s)，7.72(2H，d)，7.47(2H，d)，5.15-5.05(1H，m)，4.55-4.45(1H，m)，4.05-3.70(3H，m)，3.00-2.80(1H，m)，2.45-2.35(1H，m)，2.30-2.15(1H，m)，2.10(3H，s)，2.00-1.80(1H，m)，1.80-1.50(2H，m)，1.48(9H，s)。分析C₂₂H₂₉N₅O₆之计算值：C，57.51；H，6.36；N，15.24。实测值：C，57.41；H，6.38；N，15.12。MS(ES⁺)461(M⁺+2，26％)，460(M⁺+1，100)，405(12)，404(55)，354(7)，285(23)，229(52)，183(22)。

(262i)，呈白色玻璃状固体(76％)：mp.85-9℃；[α]_D ²⁵+66.4°(c0.11，CH₂Cl₂)；IR(KBr)1732，1668，1607，1502，1440，1312，1295，1258，1176，1157，1025；¹H NMR(CDCl₃)δ8.25(1H，s)，7.77(2H，m)，6.90(2H，m)，5.11-5.07(1H，m)，4.55-4.48(1H，m)，4.01-3.91(2H，m)，3.86-3.78(1H，m)，3.785(3H，s)，2.98(1H，m)，2.46-2.40(1H，m)，2.26-2.20(1H，m)，2.05-1.80(1H，m)，1.70-1.64(2H，m)，1.48(9H，s)。

(262j)，呈白色晶体固体

(79％)：mp.182-3℃(分解)；[α]_D ²²+92.1°(c0.4，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3283，1732，1684，1448，1430，1404，1369，1338，1306，1285，1242，1169，1091，692：¹H NMR(CDCl₃)δ7.89(2H，d，J＝7.4)，7.76(1H，s)，7.64-7.49(3H，m)，4.83(1H，m)，4.35(1H，brd，J＝13.0)，4.00(1H，m)，3.74-3.63(2H，m)，2.39-2.26(2H，m)，2.06(1H，m)，1.50-1.41(10H，m)。分析C₁₉H₂₆SN₄O₆之计算值：C，52.04；H，5.98；N，12.78。实测值：C，52.11；H，5.95；N，12.71。MS(ES⁺)437(M⁺-1，100％)。

(262k)，(83％)：[α]_D ²²+42.3°(c0.11，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3287，2997，2935，1735，1681，1606，1501，1296，1248，1173，1155。¹H NMR(CDCl₃)δ9.23(1H，s)，7.73(2H，d)，7，38(5H，m)，6.85(2H，d)，5.08(1H，m)，5.02(2H，s)，4.48(1H，bd)，4.15-3.65(3H，m)，2.96(1H，m)，2.45-2.10(2H，m)，1.88(1H，m)，1.63(2H，m)，1.48(9H，s)。MS(ES⁺)509(M⁺+1)。

化合物263a-k利用制备212b-f之方法合成。

(263a)，348毫克(94％)呈白色泡沫状固体：mp.[α]_D ²¹+171°(c0.056，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3426，3233，2953，1734，1663，1481，1415，1340，1214，1167，1132，1075，668；¹H NMR(CDCl₃)δ8.44(1H，s)，8.00-7.60(7H，m)，4.85-4.83(1H，m)，4.25-4.00(1H，m)，4.07-3.90(1H，m)，3.70-3.46(2H，m)，2.38-2.30(1H，m)，2.12-2.01(1H，m)，1.91-1.83(1H，m)，1.46-1.26(1H，m)，1.13-1.06(1H，m)，0.90-0.77(1H，m)。MS(ES⁺)431。

(263b)。200毫克(100％)，呈白色固体。mp.155℃；[α]_D ²⁰-13°(c0.07，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3431，2935，1734，1663，1531，1435，1292，1177；¹H NMR(CDCl₃)δ9.73(1H，bs)，7.73-7.27(5H，m)，5.35-5.25(1H，m)，4.56-4.48(1H，m)，4.05-3.65(3H，m)，3.12-3.00(1H，m)，2.50-2.45(1H，m)，2.30-2.20(1H，m)，2.10-2.00(1H，m)，1.75-1.61(2H，m)。MS(ES⁺)401。

(263c)，216毫克(100+％)呈无色泡沫：[α]_D ²³ 32.5°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3326，1730，1661，1610，1555，1495，1431，1314，1288，1217，1175，1161；¹H NMR(CDCl₃)δ7.87(1H，s)，7.58(1H，s)，7.19(2H，m)，6.82(1H，m)，6.62(1H，m)，5.21(1H，m)，4.55(1H，m)，3.76(3H，s)，4.0-3.65(4H，m)，2.85(1H，m)，2.35(2H，m)，1.75(1H，m)，1.71(2H，m)。

(263d)，(100+％)呈无色泡沫：[α]_D ²⁴+11.7°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3394，3325，1666，1603，1543，1490，1463，1438，1329，1311，1292，1249，1214，1176，1119，1024，752；¹H NMR(CDCl₃)δ8.15(1H，m)，7.97(2H，m)，7.15-6.84(3H，m)，5.29(1H，m)，4.62(1H，m)，4.04-3.65(4H，m)，3.89(3H，s)，2.92(1H，m)，2.50(1H，m)，2.30(1H，m)，2.10-1.75(2H，m)。

(263e)，呈白色泡沫状固体(117毫克，98％)：mp.109-14℃；[α]_D ²⁴+82.6°(c0.06，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3700-2250(br)，3437，3274，2959，1733，1664，1481，1437，1310，1177；¹H NMR(CDCl₃)δ7.99(1H，s)，7.40-7.15(5H，m)，5.15-5.10(1H，m)，5.25-4.70(1H，bs)，4.50-4.35(1H，m)，3.95-3.50(3H，m)，3.61(2H，s)，2.93-2.78(1H，m)，2.40-2.20(2H，m)，2.10-1.80(1H，m)，1.80-1.60(2H，m)。分析C₁₇H₂₀N₄O₅S·1H₂O之计算值：C，53.96；H，5.86；N，14.81。实测值：C，54.12；H，5.50；N，14.68。MS(ES⁺)360(M⁺，21％)，359(M⁺-1，100)，196(14)，182(14)，111(7)。

(263f)，得白色泡沫状固体(199毫克，92％)：mp.149-52℃；[α]_D ²⁴+92.0°(c0.01，CH₃OH)；

IR(KBr)3700-2300(br)，3319，2956，1726，1664，1600，1548，1500，1444，1313，1238，755；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.90(1H，s)，8.24(1H，s)，7.42(2H，d)，7.30-7.20(2H，m)，7.00-6.90(1H，m)，4.98-4.92(1H，m)，4.32-4.22(1H，m)，3.80-3.55(3H，m)，2.85-2.70(1H，m)，2.30-2.20(1H，m)，2.20-2.00(1H，m)，1.90-1.35(3H，m)。分析C₁₆H₁₉N₅O₅·0.75H₂O之计算值：C，51.26；H，5.51；N，18.68。实测值：C，51.11；H，5.23；N，18.42。MS(ES⁺)361(M+，20％)，360(M⁺-1，100)，241(11)，240(89)，196(15)，175(29)，111(12)。

(263g)，呈白色固体(259毫克，92％)：mp.248-51℃；[α]_D ²⁴+94.0°(c0.01，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2300(br)3341，2956，1738，1668，1651，1529，1425，1311，1259，751；¹H NMR(D₆-DMSO)δ13.29(1H，bs)，11.72(1H，s)，10.64(1H，s)，7.65(1H，d)，7.45(1H，d)，7.26-7.15(1H，m)，7.17(1H，s)，7.10-7.00(1H，m)，5.05-4.95(1H，m)，4.40-4.25(1H，m)，3.90-3.50(3H，m)，2.88-2.75(1H，m)，2.38-2.20(1H，m)，2.20-2.00(1H，m)，1.90-1.35(3H)。分析C₁₈H₁₉N₅O₅·0.5H₂O之计算值：C，53.59；H，5.25；N，17.35。实测值：C，53.66；H，4.88；N，1711。MS(ES⁺)385(M+，23％)，384(M⁺-1，100)，298(6)，253(8)，227(10)，199(23)，196(10)，173(9)，126(21)。

(263h)，呈白色固体(282毫克：99％)：mp.210-5℃；[α]_D ²⁴+74.5°(c0.01，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2300(br)，3444，3316，2960，1664，1599，1531，1439，1301，1184；¹H NMR(D₆-DMSO)δ13.30(1H，bs)，10.50(1H，s)，10.25(1H，s)，7.80(2H，d)，7.68(2H，d)，5.00-4.90(1H，m)，4.35-4.25(1H，m)，3.90-3.40(3H，m)，2.88-2.70(1H，m)，2.35-2.25(1H，m)，2.25-1.95(1H，m)，2.08(3H，s)，1.95-1.35(3H，m)。MS(ES⁺)403(M+，10％)，402(M⁺-1，100)，358(10)，247(10)，227(16))，219(51)，198(12)，184(17)。

(263i)，呈白色玻璃状固体(约100％)，可使用勿需再纯化：¹HNMR(CDCl₃)δ9.23(1H，s)，7.72(2H，d，J＝8.8)，6.81(2H，d，J＝8.9)，5.22(1H，m)，4.51(1H，m)，3.97-3.72(2H，m)，3.81(3H，s)，3.03(1H，m)，2.51-2.46(1H，m)，2.31-2.25(1H，m)，2.03(1H，m)，1.72(2H，m)。

(263j)，呈白色固体(100％)：mp.73-83℃；[α]_D ²²+104.7°(c0.3，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3600-2500(br)3208；1734，1666，1481，1448，1416，1338，1311，1214，1171，1091，729，689；¹H NMR(CDCl₃)δ7.87(3H，m)，7.70-7.50(3H，m)，7.16(1H，brs)，4.99(1H，m)，4.37(1H，brd，J＝12.8)，3.92(1H，m)，3.67(2H，m)，2.36(2H，m)，2.13(1H，brd，J＝12.2)，1.56(3H，m)。分析C₁₅H₁₈SN₄O₆·0.25CF₃CO₂H之计算值：C，45.31；H，4.48；N，13.64。实测值：C，45.48；H，4.71；N，13.43。MS(ES⁺)383(MH⁺，100％)。C₁₅H₁₉SN₄O₆(MH⁺)之精确质量数计算值：383.1025。实测值：383.1007。

(263k)，(100％)：mp.130-142℃；IR(KBr)3272，2945，1738，1650，1611，1501，1445，1309，1255，1171；¹H NMR(CDCl₃)δ9.35(1H，s)，7.74(2H，d)，7.38(5H，m)，6.85(2H，d)，5.40(1H，bs)，5.19(1H，s)，5.02(2H，s)，4.49(1H，d)，3.92(2H，m)，3.68(1H，m)，2.99(1H，bs)，2.43(1H，bs)，2.22(1H，bs)，1.99(1H，bs)，1.68(2H，bs)。

(525l)，利用制备211之方法合成，得到白色结晶状固体(3.35克，83％)：mp.214-5℃；[α]_D ²⁰+75.2°(c0.01，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3272，2955，1747，1664，1610，1485，1443，1265，1040；¹H NMR(CDCl₃)δ8.66(1H，s)，7.32(1H，dd)，7.23(1H，d)，6.76(1H，d)，6.02(2H，s)，5.20(1H，dd)，4.55-4.45(1H，m)，4.03-3.70(3H，m)，3.78(3H，s)，3.05-2.88(1H，m)，2.47-2.35(1H，m)，2.35-2.20(1H，m)，2.10-1.90(1H，m)，1.85-1.50(2H，m)。分析C₁₈H₂₀N₄O₇·0.5H₂O之计算值：C，52.87；H，5.06；N，13.70。实测值：C，52.84；H，5.00；N，13.66。MS(ES⁺)406(M⁺+2，20％)，405(M⁺+1，100)，391(10)，162(6)，148(3)，105(2)。

(263l)，5251(3.32克，8.2毫摩尔)于四氢呋喃(60毫升)之悬浮液以LiOH·H₂O(0.69克，16.4毫摩尔，2.0当量)于水(20毫升)之溶液处理。生成的混合物搅拌1小时，浓缩，且残留物溶于水中(50毫升)。溶液以2MNaHSO₄酸化，产物以EtOAc萃取(100毫升及50毫升)。混合的萃取物以盐水洗一次(2×50毫升)，干燥(MgSO₄)再浓缩以生成263l，呈白色晶状固体(2.87克，90％)：mp.154-8℃；[α]_D ²⁰+85.6°(c0.01，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2300(br)，3248，2942，1733，1681，1658，1648，1536，1486，1440，1297，1255，1037；¹H NMR(D₆-DMSO)δ13.23(1H，bs)，10.45(1H，s)，7.45(1H，d)，7.35(1H，s)，7.03(1H，d)，6.12(2H，s)，5.00-4.93(1H，m)，4.35-4.25(1H，m)，3.0-3.40(3H，m)，2.95-2.70(1H，m)，2.40-2.25(1H，m)，2.15-2.00(1H，m)，1.91-1.40(3H，m)。分析C₁₇H₁₈N₄O₇·0.8H₂O之计算值：C，50.45；H，4.88；N，13.84。实测值：C，50.80；H，4.95；N，13.36。MS(ES⁺)390(M⁺，19％)，389(M⁺-1，100)，345(9)，204(31)，182(27)，111(12)。

(264a)，利用化合物213e之方法合成，得到白色固体(240毫克，82％)：IR(KBr)3380，3066，2947，1789，1750，1691，1454，1417，1368，1298，1262，1235，1193，1118，756，696；¹H NMR(D6，-DMSO)δ8.59(1H，d，J＝6.8)，8.48(1H，s)，8.25-8.09(3H，m)，7.85-7.75(3H，m)，7.36(5H，m)，5.39(1H，m)，4.21(2H，AB，J＝14.2)，4.53-4.49(1H，m)，4.25-4.10(2H，m)，3.65-3.44(3H，m)，3.13-2.99(1H，m)，2.43-2.16(1H，m)，1.72-0.72(7H，m)。分析C₃₀H₃₁N₅O₈S之计算值：C，57.96；H，5.03；N，11.27。实测值：C，57.28；H，5.14；N，10.48。MS(ES⁺)622。

(264c)，以如213e之类似方法制备，(55％)呈无色泡沫：mp.135-40℃；[α]_D ²²+51.6°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3314，1790，1664，1608，1543，1496，1455，1428，1325，1287，1250，1218，1160，1118；¹HNMR(CDCl₃)δ8.00(1H，d，J＝7.1)，7.66(1H，s)，7.55(1H，s)，7.28(5H，m)，7.14(2H，m)，6.87(1H，d)，J＝7.4)，6.59(1H，m)，5.42(1H，s)，4.66(5H，m)，3.90-3.65(4H，m)，3.73(3H，s)，2.98(2H，m)，2.38(2H，m)，2.01-1.65(3H，m)。

(264d)，以类似213e之方法制备(72％)呈无色泡沫：[α]_D ²²+21.4°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3302，1791，1689，1678，1664，1602，1536，1489，1461，1437，1420，1249，1119，1023，942，751；¹H NMR(CDCl₃)δ8.07(1H，d，J＝7.7)，7.82(1H，s)，7.68(1H，d，J＝6.7)，7.49(1H，s)，7.34(5H，m)，6.96(3H，m)，5.47(1H，s)，4.82(2H，d+m，J＝11.5)，4.63(1H，d，J＝11.5)，4.49(2H，m)，3.85(4H，s+m)，3.68(2H，m)，3.01(2H，m)，2.46(2H，m)，1.95(3H，m)，1.57(1H，m)。

(264e)，依制备213e之类似方法合成，得到非对映立体异构体之混合物(syn∶anti异构体比例9∶1)，呈白色玻璃状固体(128毫克，78％)：mp.103-8℃；IR(KBr)3419，3302，1793，1664，1535，1421，1327，1256，1123，973；¹H NMR(D₆-DMSO)δ10.20(0.9H，s)，9.35(0.1H，s)，8.74(0.1H，d)，8.49(0.9H，d)，7.36-7.15(10H，m)，5.67(0.9H，d)，5.44(0.1H，s)，4.85-4.75(1H，m)，4.74-4.60(1H，m)，4.77及4.63(2H，dd)，4.30-4.10(1H，m)，3.80-3.40(3H，m)，3.43(2H，s)，3.10-2.40(3H，m)，2.25-2.15(1H，m)，2.00-1.35(4H，m)。分析C₂₈H₃₁N₅O₇·0.5H₂之计算值：C，60.21；H，5.77；N，12.53。实测值：C，60.38；H，5.83；N，12.13。MS(ES⁺)551(M⁺+2，33％)，550(M⁺+1，100)，480(7)，343(8)，279(4)。

(264f)，依化合物213e之类似方法制备，得到纯的同侧-异构体，呈白色泡沫状固体(225毫克，82％)：mp.130-5℃；[α]_D ²⁴+10.8°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3316，1791，1688，1676，1664，1601，1536，1445，1314，1242，973；¹H NMR(D₆-DMSO)δ8.84(1H，s)，8.49(1H，d)，8.19(1H，s)，7.45-7.18(9H，m)，7.00-6.90(1H，m)，5.68(1H，d)，4.90-4.81(1H，m)，4.75-4.60(1H，m)，4.78及4.63(2H，dd)，4.30-4.20(1H，m)，3.75-3.55(3H，m)，2.85-2.55(3H，m)，2.25-2.15(1H，m)，2.00-1.35(4H，m)。分析C₂₇H₃₀N₆O₇·0.5H₂O之计算值：C，57.95；H，5.58；N，15.02。实测值：C，58.12；H，5.64；N，14.81。MS(ES⁺)552(M⁺+2，30％)，551(M⁺+1，100)，362(19)，299(10)，279(4)。

(264g)，以如化合物213e之类似方法制备，得到纯的对侧-异构体，呈白色固体(284毫克，80％)：mp.148-53℃；[α]_D ²⁴+72.0°(c0.1，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3404，3295，1789，1660，1536，1421，1310，1260，1122，749；¹H NMR(D₆-DMSO)δ11.72(1H，s)，10.58(1H，s)，8.73(1H，d)，7.65(1H，d)，7.58-7.27(6H，m)，7.27-7.10(1H，m)，7.17(1H，s)，7.10-7.00(1H，m)，5.46(1H，s)，4.90-4.85(1H，m)，4.77及4.68(2H，dd)，4.35-4.25(2H，m)，3.95-3.55(3H，m)，3.09(1H，dd)，2.95-2.80(1H，m)，2.47-2.25(2H，m)，2.10-1.35(4H，m)。MS(ES⁺)574(M⁺35％)，573(M⁺-1，100)，384(16)，383(69)，341(23)，327(12)，267(13)，200(22)。

(264h)，以类似化合物213e之方法制备，得到非对映立体异构体之混合(syn∶anti异构体比例9∶1)，呈白色固体(276毫克，70％)：mp.147-52℃；IR(KBr)3444，3304，1793，1665，1602，1531，1505，1423，1294，1264，1181，1123，966；¹H NMR(D₆-DMSO)δ10.41(1H，s)，10.22(1H，s)，8.71(0.1H，d)，8.48(0.9H，d)，7.78(2H，d)，7.67(2H，d)，7.35-7.30(5H，m)，5.68(0.9H，d)，5.45(0.1H，s)，4.88-4.80(1H，m)，4.75-4.60(1H，m)，4.77及4.63(2H，dd)，4.30-4.20(1H，m)，3.90-3.50(3H，m)，3.10-2.50(3H，m)，2.35-2.20(1H，m)，2.07(3H，s)，2.05-1.35(4H，m)。分析C₂₉H₃₂N₆O₈·1H₂O之计算值：C，57.04；H，5.61；N，13.76。实测值：C，56.79；H，5.50；N，13.53。MS(ES⁺)594(M⁺+2，34％)，593(M⁺+1，100)，387(8)，386(38)，358(8)，162(19)。

(264i)，以类似化合物213e之方法制备，得到白色固体(70)％：mp.116-118℃；IR(KBr)3315，2951，1793，1664，1607，1502，1258，1177；¹HNMR(CDCl₃)δ8.07(1H，s)，7.77(2H，d，J＝8.6)，7.35(5H，m)，6.94(2H，d，J＝8.5)，6.74(1H)，4.89(1H，d J＝11.1)，4.74(1H，m)，4.60(1H，d，J＝11.0)，4.48，4.41((1H，2m)，3.86(3H，s)，3.79，3.71-3.53(3H，2m)，2.87(2H，m)，2.44(1H，m)，2.18，1.91，1.68(5H，3m)。

(264j)，以类似化合物213e之方法合成，得到泡沫状(88％)：[α]_D ²⁴+74.2°(c0.36，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3332，3235，1793，1664，1537，1448，1416，1337，1169，118，1092，940，690；¹H NMR(CDCl₃)δ7.99(1H，s)，7.88(2H，d，J＝6.8)，7.64-7.48(3H，m)，7.34(5H，s)，7.13(1H，d，J＝6.9)，5.39(1H，s)，4.81(2H，m)，4.62(1H，d.J＝11.5)，4.48(1H，m)，4.33(1H，m)，3.85(1H，m)，3.59(2H，m)，3.03(1H，dd，J＝7.6，18.2)，2.49-2.28(3H，m)，1.94-1.40(4H，m)。分析C₂₆H₂₉SN₅O₈之计算值：C，54.63；H，5.11；N，12.25。实测值：C，54.42；H，5.28；N，11.62。MS(ES⁺)572(MH⁺，100％)。C₂₆H₃₀SN₅O₈(MH⁺)之精确质量数计算值：572.1815。实测值：572.1802。

(264k)，以213e之方法制备(96％)：IR(KBr)3294，2946，1793，1658，1606，1535，1501，1248，1174，1119。¹H NMR(CDCl₃)δ8.91(1H，s)，7.85(3H，m)，7.4(10H，m)，7.02(2H，d)，5.35(1H，s)，5.10(2H，s)，4.8-4.3(5H，m)，4.00(1H，bs)，3.78(2H，m)，2.90(2H，m)，2.5-1.5(6H，m)。

(264l)，以化合物213e之类似方法制备，得到非对映立体异构体之混合(同∶异异构体比例1∶1)，呈白色固体(1.72克，71％)：mp.148-60℃；IR(KBr)3314，1780，1677，1658，1651，1550，1485，1439，1258，1132，1038，943；¹H NMR(D₆-DMSO)δ10.39(1H，s)，8.71(0.5H，d)，8.49(0.5H，d)，7.44(1H，d)，7.42-7.30(6H，m)，7.03(1H，d)，6.12(2H，s)，5.68(0.5H，d)，5.45(0.5H，s)，4.90-4.82(1H，m)，4.82-4.58(2.5H，m)，4.40-4.10(1.5H，m)，3.90-3.65(2H，m)，3.65-3.43(1H，m)，3.09(0.5H，dd)，2.90-2.55(1.5H，m)，2.45-2.10(2H，m)，2.10-1.35(4H，m)。分析C₂₈H₂₉N₅O₉·0.2H₂O之计算值：C，57.67；H，5.08；N，12.01。实测值：C，58.01；H，5.33；N，11.51。MS(ES⁺)581(M⁺+2，33％)，580(M⁺，100)，374(9)，373(48)，345(12)，261(4)，239(7)，149(9)。

(265a)，以类似化合物265之方法制备，得到白色固体(37毫克，17％)：mp.126-30℃(分解)；[α]_D ²⁰+30°(c0.05，MeOH)；IR(KBr)3371，2935，1785，1663，1538，1418，1339，1164，669；¹HNMR(CD₃OD)δ8.44(1H，s)，8.06-7.50(7H，m)，7.22(1H，d，J＝8.4)，4.58-4.57(1H，m)，4.46-4.42(1H，m)，4.16-4.09(2H，m)，3.85-3.50(3H，m)，2.84-2.78(1H，m)，2.64-2.51(1H，m)，2.44-2.15(2H，m)，1.81-0.89(4H，m)。分析C₂₃H₂₅N₅O₈S·H₂O之计算值：C，50.27；H，4.95；N，12.74。实测值：C，50.33；H，5.04；N，12.60。MS(ES⁺)530。

(265c)，以化合物265之类似方法制备，(90％)呈无色固体：mp.～150℃(分解)；[α]_D ²³+94.8°(c0.1，20％MeOH/CH₂Cl₂)；IR(KBr)3330，1780，1660，1610，1550，1495，1428，1326，1287，1251，1223，1160；¹HNMR(CD₃OD)δ7.16(2H，m)，6.89(1H，d，J＝7.8)，4.58(1H，m)，4.37(2H，m)，3.76(6H，s+m)，2.95(1H，m)，2.67(1H，m)，2.33(1H，m)，2.20-1.85(3H，m)，1.66(1H，m)。

(265d)，以类似265之方法制备，(85％)呈无色固体：mp.～176-85℃(分解)；[α]_D ²³+11.0°(c0.1，MeOH)；IR(KBr)3392，3328，1784w，1665，1603，1537，1490，1462，1437，1337，1290，1290，1217，1177，1119，1023；¹H NMR(CD₃OD)δ8.02(2H，m)，6.95(4H，m)，5.05(1H，m)，4.60(2H，m)，3.92(4H，s+m)，3.00(2H，m)，2.68(1H，m)，2.39(1H，m)，2.00(4H，m)，1.69(1H，m)。

(1095)，以化合物265之类似方法制备，得到白色固体(84毫克，90％)：180-6℃；[α]_D ²²+22.3°(c0.065，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2300(br)，3287，1664，1536，1425，1261，1181；¹H NMR(CD₃OD)δ7.35-7.20(5H，m)，5.00-4.90(1H，m)，4.60-4.50(1H，m)，4.50-4.10(2H，m)，3.90-3.50(3H，m)，3.54(2H，s)，3.00-2.80(1H，m)，2.80-2.40(2H，m)，2.35-2.20(1H，m)，2.20-1.50(4H，m)。MS(ES⁺)459(M+24％)，458(M⁺-1，100)，358(27)，175(9)，149(7)，137(12)。C₂₁H₂₆N₅O₇(MH⁺)之精确质量计算值：460.1832。实测值：460.1840。

(265f)，以化合物265之类似方法制备，得到白色泡沫状固体(130毫克，88％)：mp.157-62℃；[α]_D ²⁴+41.7°(c0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2300(br)，3325，1782，1663，1547，1443，1315，1242，1181；¹H NMR(CD₃OD)δ7.40(2H，dd)，7.35-7.20(2H，m)，7.06-6.95(1H，m)，5.05-4.95(1H，m)，4.64-4.54(1H，m)，4.50-4.35(1H，m)，4.35-4.15(1H，m)，3.90-3.69(3H，m)，3.00-2.85(1H，m)，2.80-2.45(3H，m)，3.40-1.50(4H，m)。MS(ES⁺)460(M+，24％)，459(M⁺-1，100)，341(9)，340(54)，296(6)，239(9)。

(1075)，以化合物265之方法制备，得到白色固体(184毫克，83％)：mp.210-5℃；[α]_D ²⁴+43.9°(c0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2300(br)，3309，1660，1537，1423，1311，1262，1184；¹H NMR(CD₃OD)δ7.61(1H，d)，7.45(1H，d)，7.28-7.15(1H，m)，7.15-7.00(1H，m)，7.13(1H，s)，5.12-4.96(1H，m)，4.62-4.55(1H，m)，4.50-4.25(2H，m)，4.00-3.69(3H，m)，3.05-2.90(1H，m)，2.80-2.30(3H，m)，2.25-1.50(4H，m)。MS(ES⁺)484(M⁺，26％)，483(M⁺-1，100)，383(25)，245(12)，208(11)，200(21)，174(31)，137(18)。

(1018)，以化合物265之类似方法制备，得到白色固体(177毫克，82％)：mp.235-40℃；[α]_D ²³+27.3°(c0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2300(br)，3311，2957，1662，1599，1531，1318，1266，1182；¹HNMR(CD₃OD)δ7.83(2H，d)，7.69(2H，d)，5.10-4.95(1H，m)，4.64-4.55(1H，m)，4.50-4.35(1H，m)，4.32-4.22(1H，m)，4.00-3.65(3H，m)，3.05-2.90(1H，m)，2.80-2.30(3H，m)，2.15(3H，s)，2.15-1.50(4H，m)。分析C₂₂H₂₆N₆O₈·1.5H₂O之计算值：C，49.90；H，5.52；N，15.87。实测值：C，50.21；H，5.41；N，15.49。MS(ES⁺)502(M+，28％)，501(M⁺-1，100)，401(8)，218(4)，119(2)，118(5)，113(16)。

(1052)，以化合物265之方法合成，得到白色固体(0.194克，100％)：mp.138-142℃；[α]_D ²⁰+36.3°(c0.19，CH₃OH)；IR(KBr)3434-2962，1782，1660，1607，1537，1504，1441，1424，1313，1293，1258，1177；¹HNMR(CD₃OD)δ7.11(2H，d，J＝8.8)，6.90(2H，d，J＝8.9)，4.48(1H，m)，4.34，4.28(1H，2m)，4.15(1H，m)，3.75(3H，s)，3.75，3.70(3H，m)，2.88，2.49，2.28，2.23，2.00，1.86，1.79，1.58(8H，m)。

(1027)，以化合物265之类似方法合成，得到白色泡沫(88％)：[α]_D ²⁴+22.6°(c0.17，MeOH)；IR(KBr)3349，1789，1663，1537，1448，1337，1169，1092，690；¹H NMR(CD₃OD)δ7.82(2H，d，J＝7.8)，7.57(3H，m)，4.74(1H，m)，4.47(1H，m)，4.24-4.10(2H，m)，3.72-3，47(4H，m)，2.62-2.48(3H，m)，2.20(1H，m)，1.94-1.35(3H，m)。MS(ES⁺)480(M⁺-1，100％)。C₁₉H₂₄SN₅O₈(MH⁺)之精确质量计算值：482.1346。实测值：482.1325。

(1056)，以化合物265之方法制备(95％)：mp.＞300℃；IR(KBr)3392，1660，1610，1507，1442，1280，1171，1149，1133。¹H NMR(CD₃OD)δ7.74(2H，d，J＝8.7)，6.84(2H，d，J＝8.7)，4.58(1H，m)，4.41(1H，bd，J＝12.6)，4.28(1H，m)，3.85(3H，m)，2.98(1H，m)，2.8-2.3(3H，m)，2.3-1.6(4H，m)。

(1015)，以化合物265之方法制备，生成白色固体(142毫克，58％)：mp.170-5℃；[α]_D ²⁵+32.7°(c0.1，CH₃OH)；IR(KBr)3700-2500(br)，3325，2969，1784，1662，1485，1440，1292，1258，1037；¹H NMR(CD₃OD)δ7.45(1H，dd)，7.32(1H，d)，6.90(1H，d)，6.05(2H，s)，5.10-4.90(1H，m)，4.62-4.54(1H，m)，4.45-4.35(1H，m)，4.33-4.22(1H，m)，3.95-3.65(3H，m)，3.05-2.90(1H，m)，2.80-2.30(3H，m)，2.20-1.50(4H，m)。

(526)，以化合物502之方法制备，得到玻璃状固体：[α]_D ²⁰+34°(c0.13，CH₂Cl₂)；IR(KBr)3437，2929，1670，1530，1428，1288，1156；¹HNMR(CDCl₃)δ10.0(1H，bs)，9.74(1H，bs)，7.93(1H，s)，7.80-7.60(2H，m)，7.40-7.18(3H，m)，6.15-5.30(2H，bs)，5.00-4.85(2H，m)，4.50-4.25(1H，m)，3.95-3.75(3H，m)，3.12-2.78(2H，m)，2.73-1.60(7H，m)，1.36(9H，s)。分析C₂₇H₃₄N₈O₇S之计算值：C，52.76；H，5.58；N，18.23。

实测值：C，52.25；H，5.74；N，16.30。MS(ES+)615。

(1053)，以化合物214之方法制备，得到白色固体(106毫克，73％)：[α]_D ²⁰+22°(c0.10，MeOH)；IR(KBr)3428，2944，1733，1652，1532，1433，1337，1288，1186；¹H NMR(CD₃OD)δ7.95(1H，s)，7.90-7.85(2H，m)，7.43-7.35(2H，m)，4.98(1H，m)，4.65-4.52(1H，m)，4.40-4.20(2H，m)，3.85-3.70(3H，m)，3.30-3.25(3H，m)，3.03-2.85(1H，m)，2.70-2.31(3H，m)，2.10-1.55(4H，m)。MS(ES+)500(如醛之甲基缩醛)。

(528)，以化合物213e之方法制备，得到非对映立体异构体之混合(syn∶anti异构体比例1∶1)，呈乳白色泡沫状固体(1.05克，58％)：mp.124-32℃；IR(KBr)3312，2979，1790，1664，1610，1532，1485，1285，1120，1037，932；¹H NMR(D₆-DMSO)δ10.39(1H，s)，8.71(0.5H，d)，8.43(0.5H，d)，7.45(1H，d)，7.36(1H，s)，7.04(1H，d)，6.12(2H，s)，5.58(0.5H，d)，5.34(0.5H，s)，4.95-4.85(1H，m)，4.70-4.52(0.5H，m)，4.35-4.10(1.5H，m)，3.95-3.50(5H，m)，3.03(0.5H，dd)，2.90-2.55(1.5H，m)，2.46-2.20(2H，m)，2.10-2.40(4H，m)，1.16-1.13(3H，2xt)。分析C₂₃H₂₇N₅O₉·0.6H₂O之计算值：C，52.29；H，5.38；N，13.26。实测值：C，52.53；H，5.35；N，12.78。MS(ES⁺)519(M⁺+2，27％)，518(M⁺+1，100)，472(7)，374(12)，373(53)，345(14)，149(12)。

实施例31

化合物640，642，645，650，653，655，656，662，668，669，670，671，677，678，681，682，683，684，686，688a，688b，6891，689b，690a，690b，691a，691b，695a，695b，695c，692a，692b 693及694如下制备。

(638)，合成自600a，以类似化合物600a制成602m之方法，得到2.4克的638呈白色固体。

(639)。对638(630毫克，1.76毫摩尔)及2-萘基甲基溴(428毫克，1.94毫摩尔)于CH₃CN之溶液中，加入K₂CO₃(608毫克，4.4毫摩尔)。生成的混合物在环境温度下搅拌。18小时后，反应混合物以CH₂Cl₂稀释，以水再以盐水洗涤，于Na₂SO₄上干燥再真空浓缩。快速层析(SiO₂，0至20％EtOAc/CH₂Cl₂)得到450毫克的639。

(640)，以602v制成605v之方法合成，得到205毫克的640，呈白色固体，¹HNMR(CDCl₃)δ2.4-2.55(m，1H)，2.65-2.8(m，1H)，3.2(s，3H)，3.72-3.78(m，1H)，3.85-4.0(m，2H)，4.22-4.28(d，1H)，4.26-4.5(m，4H)，4.58-4.75(m，1H)，4.78-4.85(m，1H)，5.0-5.08(t，1H)，7.35-7.65(m，7H)，7.85-8.02(m，4H)。

(642)，以605m之方法合成自638，得到213毫克的642，¹H NMR(CD₃OD)δ2.5(m，1H)，2.68(ddd，1H)，3.25(s，2H)，3.3(s，3H)，3.78(m，2H)，4.0(d，1H)，4.3(m，1H)，4.6(m，2H)，4.85(br.s，2H)，7.08-7.22(m，2H)，7.35(m，1H)，7.4-7.65(m，4H)，7.7(dd，1H)，8.1(dd，1H)。

(643)。对N-乙酰基甘氨酸(200毫克，1.7毫摩尔)于含有DMF(0.005毫升)之CH₂Cl₂(2.5毫升)之悬液中，加入草酰基氯(0.450毫升，5.1毫摩尔)。在环境温度下搅拌30分钟后，混合物浓缩得到643，呈粗制产物。

(644)，以600b制成602d之方法合成自600b，利用643得到112毫克的644。

(645)，以602d制成605d之方法合成自644，得到43毫克的645，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ1.95(s，3H)，2.4(m，1H)，2.65(m，1H)，3.4(s，1H)，3.55(m，1H)，3.85(m，1H)，4.05(d，1H)，4.3(m，1H)，4.4-4.6(m，2H)，5.0(m，1H)，7.4-7.7(m，6H)，7.86-8.0(m，2H)。

(646)，以制备643之方法制备自N-Fmoc-肌氨酸，得到646呈粗制产物。

(647)，以自600b合成602d之方法合成自600b，利用646得到481毫克的647。

(648)，以由602d制备604d之方法制备自647，得到409毫克的648。

(649)。648(409毫克，0.465毫摩尔)于MeCN∶Et₂NH(4∶1，v/v)之溶液在环境温度下搅拌。45分钟后，反应混合物于真空中浓缩。快速层析(SiO₂，5％至20％MeOH于CH₂Cl₂)得到241毫克的649。

(650)，以由604制备605d之方法合成自649，得到179毫克的650，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.4-2.6(m，2H)，2.7(s，3H)，3.5(q，1H)，3.8(m，2H)，4.2-4.4(m，2H)，4.3-4.45(m，1H)，5.0-5.1(m，2H)，7.4-7.7(m，6H)，7.85-7.9(m，2H)，8.2(m，1H)。

(652)，以由600b制备602n之方法合成自600b，利用由DMF与3当量草酰氯于CH₂Cl₂溶液中反应成R³X所得之试剂，得到404毫克的652。

(653)，以由602d制备605d之方法合成自652，得到84毫克的653，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.3(m，1H)，2.55(dd，1H)，3.75(br，s，1H)，4.25-4.6(m，5H)，5.15(m，1H)，7.2-7.45(m，6H)，7.8-7.9(dd，3H)，8.1(s，1H)，8.2(m，2H)。

(654)，以由600b制备603d之方法，合成自600b得到775毫克的654。

(655)，利用制备213e之方法合成自654，得到304毫克的655，¹HNMR(CD₃OD)δ2.4(d，1H)，2.6-2.75(m，2H)，3.0(m，1H)，3.45(m，1H)，3.8(d，1H)，4.0(t，2H)，4.4(m，2H)，4.5-4.55(m，2H)，7.2-7.45(m，4H)，7.85(s，2H)。

(656)，利用由2001制备2002之类似方法合成自655。得到136毫克的656，呈白色固体。¹H NMR(CD₃OD)δ1.85(s，3H)，2.5(m，1H)，2.65(m，1H)，3.7(m，1H)，4.3(m，1H)，4.55(m，2H)，7.4-7.6(m，4H)，7.85(s，2H)。

(657)。向甘醇酸苄酯(6.0克，36.1毫摩尔)于CH₂Cl₂之溶液，经冰水浴冷却，加入氯甲酸芴基甲氧基酯(14克，1.5当量)再加二异丙基乙胺(9毫升，1.5当量)。1小时后，反应混合物倒入氯化铵饱和水溶液中，再以CH₂Cl₂萃取，于Na₂SO₄上干燥再真空浓缩。产物自MeOH中研磨可得2.2克的657为白色固体的第一种。

(658)。对657(2.2克，5.93毫摩尔)于四氢呋喃之溶液中加入5％Pd/C(220毫克)。生成的悬液在氢气氛下剧烈搅拌。90分钟后，反应混合物经由Celite过滤。滤液倒入饱和的NaHCO₃水溶液，再以EtOAc洗二次。水层再酸化，且产物以CH₂Cl₂萃取二次，于Na₂SO₄上干燥，经真空浓缩得到1.46克(88％)的658，呈白色固体。

(659)，以643之制法制备自658，得到659呈粗制产物。

(660)，合成自660b，以由600b制备604d之方法，利用659得到453毫克的660。

(661)，660(423毫克)于MeOH∶Et₂NH(1∶1，v/v)之溶液在环境温度下搅拌。10分钟后，反应混合物真空下浓缩生成少量体积。加乙醚使沉淀得到230毫克的661。

(662)，以由604制备605d之方法合成自661，得到37毫克的662，呈白色固体。

(663)。向甘醇酸苄酯(46.91克，0.282摩尔)及二异丙基乙胺(74毫升，0.423摩尔)于CH₂Cl₂之溶液，经水浴冷却，加入TIPSOTf(95克，0.31摩尔)于CH₂Cl₂之溶液。生成的混合物加温至环境温度下再倒入水中，以10％NaHSO₄水溶液洗二次，于Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。快速层析(SiO₂，0至5％EtOAc于己烷)得到71.6克的663。

(664)。对663(0.4克，1.2毫摩尔)于EtOAc之溶液中，加入10％Pd/C(33毫克)。生成的悬浮液在氢气氛下搅拌。15小时后，反应混合物经由Celite过滤，且滤液真空浓缩生成0.29克的油。此油于1，4-二噁烷之溶液加入NaHCO₃(0.5M，2.4毫升)。生成的溶液真空中自甲苯浓缩，生成664呈蜡状固体。

(665)，以制备643之方法合成自664，得到665呈粗制产物。

(666)，合成自600b，利用665以由600b制备604d之方法得到131毫克的666。

(667)。对666(131毫克，0.17毫摩尔)于四氢呋喃之溶液，经冰水浴冷却，加入氟化四丁铵(1M.0.190毫升)。2小时后，反应混合物倒入水中，以EtOAc萃取二次，于MgSO₄上干燥并真空浓缩生成63毫克的667，呈白色固体。

(668)以由604d制备605d的方法制备自667，得到668为白色固体，¹HNMR(CD₃OD)δ2.45(m，1H)，2.67(dddd，1H)，3.78(d，1H)，3.85(br.m，1H)，4.05(d，1H)，4.28(m，1H)，4.5(m，2H)，4.65(m，1H)，4.95(br.s，2H)，7.4-7.5(m，4H)，7.52-7.65(m，3H)，7.88(d，2H)。

(669)，以由600b制备605d之方法合成自600b，得到63毫克的669，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ1.90(s，3H)，2.4-2.7(m，2H)，3.6-3.7(m，2H)，3.9(s，3H)，4.2-4.4(m，2H)，4.4-4.6(m，3H)，7.4-7.8(m，4H)，7.9(s，2H)。

(670)，以自600b制备655之方法合成自600b，得到218毫克的670，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ1.7，1.75(2s，3H)，2.15，2.2(2s，6H)，2.4-2.5(m，1H)，2.6-2.75(m，1H)，3.65-3.75(m，2H)，4.2-4.3(m，2H)，4.45-4.6(m，3H)，7.35-7.6(m，4H)，7.5(s，2H)。

(671)，以自2001制备2002之方法合成自670，得到253毫克的671，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ1.9(s，3H)，2.25(s，6H)，2.4-2.5(m，1H)，2.6-2.75(m，1H)，3.65-3.75(m，2H)，4.2-4.3(m，2H)，4.45-4.6(m，3H)，7.35-7.6(m，4H)，7.5(s，2H)。

(672)，以自600b制备602n之方法，合成自600b，利用665得到1.08克的672。

(673)。向672(1.08克，1.69毫摩尔)于CH₂Cl₂之溶液中加入2.6-二甲基吡啶(0.8毫升)再加TMSOTf(1毫升，5.1毫摩尔)。1小时后反应混合物倒入NaHCO₃，并以CH₂Cl₂萃取，于MgSO₄上干燥并真空浓缩得到少量体积，其可直接用于下一反应。

(674)，以制备602b之方法合成自673，得到0.91克的674。

(675)。674(0.365克，0.5毫摩尔)于MeOH之溶液与1N NaOH(1.2毫升，1.2毫摩尔)搅拌。16小时后反应混合物于真空下浓缩，再溶于水中并以乙醚洗二次。水层以1N HCl酸化，产物以EtOAc萃取，于MgSO₄上干燥并真空浓缩得到337毫克的675，呈固体。

(676)，以制备213e之方法合成自675，得到166毫克的676，呈白色固体。

(677)。TBAF(6毫升，3毫摩尔)于HOAc(0.46毫升，8毫摩尔)之溶液加入676(0.213克，0.256毫摩尔)。16小时后反应混合物倒入EtOAc，并以NaHCO₃洗二次，以盐水洗一次再于MgSO₄上干燥并真空浓缩，生成139毫克的677，呈固体，¹H NMR(CDCl₃)δ2.4(d，1H)，2.5(dd，1H)，2.8(dd，1H)，2.92(dd，1H)，3.15(m，2H)，3.55-3.65(m，2H)，3.72(s，6H)，3.92(m，1H)，4.05(m，1H)，4.3(m，1H)，4.42(d，1H)，4.6(dd，1H)，4.65-4.8(m，2H)，4.88(d，1H)，5.55(d，1H)，6.55(m，2H)，6.75(d，1H)，7.25-7.55(m，8H)，7.75(m，2H)。

(678)，以自666制备667之方法合成，得到54毫克的678呈白色固体，¹HNMR(CD₃OD)δ2.45(m，1H)，2.7(m，1H)，3.5(m，2H)，3.75(br.s，6H)，4.05(d，1H)，4.3(m，1H)，4.51-4.6(m，2H)，4.8(br.m，2H)，6.7(d，2H)，7.4-7.5(br.m，3H)，7.6-7.65(br.m，2H)。

(680)，以由600b制备677之方法合成自600b，可得140毫克的680，呈白色固体，¹H NMR(CDCl₃)δ2.31(d，1H)，2.4(dd，2H)，2.75(dd，2H)，2.85(dd，1H)，3.36(br.s，1H)，3.45(br.s，1H)，3.6(br.t，2H)，3.82(br.m，2H)，3.95(br.d，2H)，4.35(m，2H)，4.42(d，1H)，4.55(m，1H)，4.70(d，1H)，4.82(br.s，2H)，5.5(d，1H)，6.91(d，1H)，7.25(br.m，5H)，7.35-7.46(br.m，3H)，7.5-7.6(m，2H)，8.15(br.d，2H)。

(681)，以由677制备678之方法合成自680，得到45毫克的681呈灰色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.5(m，1H)，2.7(dt，1H)，3.65-3.85(br.m，3H)，4.05(m，1H)，4.3(m，1H)，4.5-4.7(br.m，3H)，4.85(br.s，2H)，7.3(br.m，2H)，7.4-7.7(m，5H)，8.15(d，2H)。

(682)，以由600b制备655之方法合成自600b，得到495毫克的682，呈白色固体，¹H NMR(CDCl₃)δ2.00(s，3H)，2.05(s，3H)，2.47(d，1H)，2.58(dd，1H)，2.85(dd，1H)，2.89(dd，1H)，3.9(m，2H)，4.05-4.15(m，2H)，4.19(dd，1H)，4.45(m，2H)，4.55-5.05(m，8H)，5.55(d，1H)，6.85(d，1H)，7.15(d，1H)，7.25-7.55(m，10H)，7.75(d，2H)。

(683)，以由2001制备2002之方法合成自682，可得82毫克的683，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.1(s，3H)，2.5(m，1H)，2.68(m，1H)，3.8(m，1H)，4.29(dd，1H)，4.31(m，1H)，4.45(d，1H)，4.55(d，1H)，4.6(d，1H)，4.72(d，1H)，4.95(br.s，2H)，7.45(br.m，2H)，7.52-7.65(br.m，5H)，7.88(d，2H)。

(684)，以由600b制备605d之方法合成自600b，得到72毫克的684，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ1.9(s，3H)，2.25(s，6H)，2.45(m，1H)，2.6(m，1H)，3.3(s，1H)，3.7(s，3H)，4.25(m，1H)，4.45-4.6(m，3H)，7.4(br.s，2H)，7.55(br.d，4H)。

(685)以由600b制备676之方法合成自600b，得到165毫克的685。

(686)。685(165毫克，0.21毫摩尔)于THF之溶液中加入TBAF(1M，0.21毫升)。产物于反应混合物中沉淀后经由过滤分离。反相层析(10％-80％MeCN于水/0.1％TFA)得到25毫克的686，呈白色固体，¹HNMR(CD₃OD)δ2.37-2.42(m)，2.59-2.70(m)，3.60-3.89(m)，4.01(d)，4.20-4.31(m)，4.42-4.70(m)，4.80-5.05(m)，6.79(d)，7.32-7.65(m)，7.81(s)。

(687a)，利用由类似600b制备654之方法合成自600b，得到1.6克的687a。

(687b)，利用由类似600b制备654之方法合成自600b，得到1.1克的687b。

(688a)。对(3S，2R，S)-3-烯丙氧羰基氨基-2-苄氧基-5-氧代四氢呋喃(Chapman，生物有机与药物化学通讯 Biorg.Med.Chem.Lett.，2，pp.613-618(1992))(1.13克，1.2当量)于CH₂Cl₂之溶液中加入三苯膦(423毫克，0.5当量)，二甲基巴比妥酸(1.26克，2.5当量)及四-三苯膦合钯(0)，373毫克，0.1当量)。5分钟后反应混合物经由冰浴冷却，再加入687a于DMF(1.6克，1当量)，HOBT(480毫克，1.1当量)及EDC(681毫克，1.1当量)之溶液。生成的混合物在环境温度下搅拌。16小时后反应混合物倒入NaHSO₄，再以EtOAc萃取二次。有机层以NaHCO₃，盐水洗涤，于Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。层析(SiO₂，20％至100％EtOAc于CH₂Cl₂)得到880毫克的688a呈掺白色固体，¹HNMR(CD₃OD)δ2.55(dd，1H)，2.7(dd，1H)，3.0(m，1H)，3.6(m，1H)，3.75(d，1H)，3.9-4.0(m，2H)，4.3-4.45(m，3H)，4.5-4.6(m，3H)，4.7(m，2H)，5.35(s，1H)，5.55(d，1H)，7.1-7.5(m，4H)，7.85(s，2H)。

(688b)，以由687a制备688a之方法合成自687b，得到960毫克的688b，呈掺白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.6(dd，1H)，2.7(dd，1H)，3.0(dd，1H)，3.2(s，3H)，3.7(m，3H)，3.9(m，2H)，4.4-4.5(m，2H)，4.6(m，3H)，5.35(s，1H)，5.55(d，1H)，7.25(m，2H)，7.4-7.5(m，4H)。

(689a)，以由2001制备2002之方法合成自688a得到184毫克的689a，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.45(m，1H)，2.6(m，1H)，3.3(s，3H)，3.7-3.85(m，2H)，4.0(d，1H)，4.3(m，1H)，4.5-4.6(m，3H)，7.3-7.6(m，4H)，7.85(s，2H)。

(689b)，利用自2001制备2002之方法合成自688b，得到412毫克的689b，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.5(m，1H)，2.7(m，1H)，3.3(s，3H)，3.7-3.85(m，2H)，4.05(dd，1H)，4.3(m，1H)，4.6(m，2H)，7.45-7.4(m，2H)，7.5(s，2H)，7.55(m，2H)。

(690a)，利用由600b制备676，由687a制备688a，由676制备677之方法合成自600b得到863毫克的690a，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.2(s，6H)，2.45(d，0.5H)，2.6-2.9(m，1H)，3.05(dd，0.5H)，3.65-3.85(m，2H)，3.95-4.1(m，1H)，4.35-5.0(m，7H)，5.35(s，0.5H)，5.65(d，0.5H)，7.2-7.4(m，4H)，7.4-7.7(m，7H)。

(690b)，利用由600b制备677之方法合成自600b，得到200毫克的690b，¹H NMR(CD₃OD)δ2.49(d，1H)，2.65(d，1H)，2.66(d，1H)，2.85(d，1H)，2.87(d，1H)，3.05(dd，1H)，3.35(br.s，1H)，3.72(br.s，2H)，4.01(m，2H)，4.45(br.m，1H)，4.6(m，1H)，4.7(m，1H)，4.8(m，1H)，4.95(br.s，2H)，5.65(d，1H)，6.8(d，2H)，7.2-7.35(br.m，3H)，7.45(m，2H)，7.75(d，2H)。

(691a)，利用由2001制备2002之方法合成自690a，得到560毫克的691a，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.15(s，6H)，2.45(m，1H)，2.65(m，1H)，3.55(m，1H)，3.7(d，1H)，4.0(d，1H)，4.25(m，1H)，4.5-4.6(m，3H)，7.3-7.5(m，6H)。

(691b)，以由2001制备2002之方法合成自690b得到410毫克的691b，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.5(m，1H)，2.65(m，1H)，3.75(m，1H)，3.8(d，1H)，4.05(d，1H)，4.25(m，1H)，4.5(m，1H)，4.6(m，1H)，4.95(br.s，2H)，6.8(d，2H)，7.45(m，2H)，7.6(m，2H)，7.75(d，2H)。

(695a)，利用由600b制备677之方法合成自600b，得到75毫克的695a，¹H NMR(CD₃OD)δ2.2(s，6H)，2.45(m，1H)，2.6(m，1H)，3.65(m，1H)，3.75(d，1H)，4.0(d，1H)，4.28(m，1H)，4.5(m，3H)，7.4-7.6(m，6H)。

(695b)，利用由600b制备677之方法合成自600b，可生成880毫克的695b，¹H NMR(CD₃OD)δ2.1(s，3H)，2.25-2.5(m，2H)，2.8-2.92(m，0.5H)，3.15-3.2(m，0.5H)，3.45-3.6(m，2H)，3.75-3.95(m，2H)，4.15-4.25(m，1H)，4.35-4.6(m，2H)，4.6-4.88(m，3H)，5.22(s，0.25H)，5.33(s，0.25H)，5.52-5.58(d，0.5H)，7.15-7.45(m，9.5H)，7.5-7.75(m，5H)，8.3-8.35(m，0.5H)，9.08-9.18(m，1H)。

(695c)利用由600b制备677之方法合成自600b，得到840毫克的695c，¹H NMR(CDCl₃)δ2.23(s，3H)，2.26(s，3H)，2.45-2.62(m，1H)，2.8-2.9(dd，0.5H)，2.9-3.05(dd，0.5H)，3.45-3.63(m，1H)，3.64(s，1.5H)，3.68(s，1.5H)，3.78-4.05(m，2H)，4.2-4.33(m，1H)，4.4-4.63(m，2H)，4.65-4.94(m，2H)，4.95-5.1(m，1H)，5.45(s，0.5H)，5.5-5.6(d，0.5H)，6.9-6.95(d，1H)，7.25-7.7(m，12H)。

(692a)，利用由600b制备661之方法合成自600b，除了由603d制成604d之步骤例外，以由687a制备688a之方法替代得到854毫克的692a，¹H NMR(CDCl₃)δ2.45(d，1H)，2.6(m，1H)，2.7(m，1H)，3.0(m，1H)，3.5-3.7(m，4H)，4.0(q，2H)，4.45(m，3H)，4.55(m，4H)，5.35(s，1H)，5.6(d，1H)，7.2-7.5(m，9H)，7.85(s，2H)。

(692b)，利用由600b制备661之方法合成自600b，排除了自603d成604d之步骤，利用由687a制备688a之方法替代得到207毫克的692b，¹H NMR(CD₃OD)δ1.05(t，3H)，1.15(t，3H)，2.45(d，1H)，2.55(m，1H)，2.7(m，1H)，3.55(m，2H)，3.6-3.75(m，5H)，4.0(dd，2H)，4.3(d，1H)，4.4-4.7(m，5H)，5.25(s，1H)，5.5(d，1H)，7.25-7.6(m，4H)，7.85(s，2H)。

(693)，利用由600b制备688a之方法合成自600b，得到30毫克的693，¹H NMR(CD₃OD)δ1.7(s，3H)，1.8(s，3H)，2.51(d，1H)，2.6(m，1H)，2.85(m，1H)，3.0(m，1H)，3.75(b r.d，2H)，4.0-4.1(dd，2H)，4.5-5.0(m，6H)，5.45(s，1H)，5.55(s，1H)，7.15-7.85(m，14H)。

(694)，利用由2001制备2002之方法合成自691c得到380毫克的694，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.25(s，6H)，2.45(m，1H)，2.65(m，1H)，3.65(m，5H)，4.0(d，1H)，4.28(m，1H)，4.55(d，2H)，4.95(m，1H)，7.4-7.6(m，6H)。

化合物700-711可由制备化合物619-635之类似方法制备(见，实施例13)。化合物700-711之物理数据列于表25中。

化合物910-915及918-921如下述制备。这些化合物的物理数据列于表26中。

表25

表25(续)

表25(续)

表25(续)

表26

表26(续)

表26(续)

表26(续)

表26(续)

表26(续)

步骤A。401之合成。TentaGel S_NH₂树脂(0.25毫摩尔/克，6.8克)置于玻璃震荡容器内，以二甲基乙酰胺洗涤(3×20毫升)。对400(1.70克，2.9毫摩尔，制备自(3S)3-(芴基甲氧羰基)-4-氧代丁酸叔丁酯，依据A.M.Murphy et.al.美国化学会志 J.Am.Chem. Soc.，114，3156-3157(1992))于二甲基乙酰胺(15毫升)之溶液，加入O-苯并三唑-N，N，N′N′-四甲基鎓六氟磷酸(HBTU：1.09克，2.9毫摩尔)及DIEA(1.0毫升，5.7毫摩尔)。溶液加到树脂中，再加二甲基乙酰胺(5毫升)。反应混合物在室温下利用腕臂式震荡器搅动3小时。树脂以吸空过滤法分离，再以二甲基乙酰胺洗涤(6×20毫升)。树脂(7.4毫克)样品以50％甲醇于二氯甲烷充分洗涤，再于吸气下干燥。利用20％六氢吡啶/二甲基乙酰胺(10.0毫升)将Fmoc基去保护，再以UV分析溶液显示0.19毫摩尔/克之置换。

步骤B。903之合成。树脂401以20％(v/v)六氢吡啶/二甲基乙酰胺(20毫升)去保护10分钟(震荡)，再以新鲜的六氢吡啶试剂(20毫升)历10分钟。树脂再以二甲基乙酰胺洗涤(6×20毫升)。902(1.52克，2.81毫摩尔)之溶液以HBTU(1.07克，2.83毫摩尔)及DIEA(1.0毫升，5.7毫摩尔)处理，并转移至树脂，再以二甲基乙酰胺(5毫升)处理。反应混合物在室温下利用腕臂式震荡器搅拌2.5小时。树脂以吸空过滤法分离，并以二甲基乙酰胺(4×20毫升)及二氯甲烷(4×20毫升)洗涤，再于氮充气下干燥。如401所述般进行树脂之置换，并决定是0.169毫摩尔/克。

步骤C。905之合成。树脂903(7.54克，1.27毫摩尔)及双甲酮(2.19克，15.6毫摩尔)置于100毫升圆底烧瓶内，再加新鲜蒸馏的无水四氢呋喃(60毫升)。加入四(三苯膦)合钯(0)(0.32克，0.28毫摩尔)，并将以氮掩盖且密封之反应在腕臂作用之震荡器上搅动15小时。树脂过滤，以二甲基乙酰胺(4×20毫升)，二氯甲烷(4×20毫升)及二甲基乙酰胺(1×20毫升)洗涤。加充分的二甲基乙酰胺至树脂，以得淤浆，再加入吡啶(1.5毫升，18.5毫摩尔)及904(5.5毫摩尔)于二氯甲烷(10毫升)之溶液。反应在氮下震荡8小时，再过滤。树脂以二甲基乙酰胺(5×20毫升)及二氯甲烷(5×20毫升)洗涤。

步骤D。906之合成。此化合物制备自树脂905(0.24克，0.038毫摩尔)利用Advanced Chem Tech 396 Multiple Peptide合成仪。自动化循环包括：以二甲基甲酰胺(3×1毫升)洗涤，以25％(v/v)六氢吡啶/二甲基甲酰胺(1毫升)去保护历10分钟，再以新鲜试剂(1毫升)历20分钟以生成树脂906。树脂以二甲基甲酰胺(3×1毫升)及N-甲基吡咯烷酮(3×1毫升)洗涤。

步骤E。(910-922)树脂906以0.4M甲酸及0.4M HOBT于N-甲基吡咯烷酮(0.5毫升)之溶液，及1.6M DIEA于N-甲基吡咯烷酮(0.25毫升)之溶液酰化，且反应在室温下震荡2小时。树脂以N-甲基吡咯烷酮(1×1毫升)，二甲基甲酰胺(4×1毫升)，50％甲醇于二氯甲烷(5×1毫升)洗涤，再风干。醛自树脂中解离，并以95％TFA/5％H₂O(v/v，1.5毫升)在室温下处理30分钟而大体地去保护。以解离试剂(2×1毫升)洗涤树脂后，混合的滤液加至冷的1∶1乙醚∶己烷(35毫升)中，生成的沉淀物再离心及倾析地分离。生成的结块溶于乙腈(0.5毫升)及H₂O(0.5毫升)并经由0.45微米微量离心滤器过滤。化合物以半一制备式RP-HPLC纯化，利用RaininMicrosorb^TM C18管柱(5微米，21.4×250毫米)以含有0.1％TFA(v/v)之线性乙腈梯度(10％-50％)洗脱30分钟，12毫升/分。含有欲求产物之流分汇集及冷冻干燥得到910-922。

分析HPLC方法：

(1)Waters DeltaPak C18，300_(5微米，3.9×150毫米)。线性乙腈梯度(0％-25％)含有0.1％TFA(v/v)历14分钟，1毫升/分。

(2)Waters DeltaPak C18，300_(5微米，3.9×150毫升)。线性乙腈梯度(5％-45％)含有0.1％TFA(v/v)历14分钟，1毫升/分。

(696)，以由600b制备691a之方法合成自600b，得到696。¹HNMR(CD₃OD)δ2.45(m，1H)，2.7(m，1H)，3.75(d，1H)，3.95(q，1H)，4.05(d，1H)，4.3(m，1H)，4.45-4.65(m，2H)，5.05(m，1H)，7.5-7.76(m，3H)，7.7(t，1H)，7.8(t，1H)，7.98(t，1H)，8.55(d，1H)，9.1(d，1H)。

(696a)利用由600b制备690a之方法，合成自600b，得到696a。¹HNMR(CDCl₃)δ0.95(t，2H)，1.25(t，1H)，1.4(m，2H)，1.55(m，1H)，2.55(m，1H)，2.85(m，1H)，2.95(dd，1H)，3.15(m，1H)，3.55(m，1H)，3.9(m，2H)，4.35(t，1H)，4.4-4.55(m，2H)，4.75(m，1H)，4.8-5.05(m，2H)，5.45(s，1H)，5.55(d，1H)，6.85(d，1H)，7.15(d，1H)，7.2-7.5(m，5H)，7.6-7.8(m，3H)，8.45(d，1H)，9.05(d，1H)，9.35(d，1H)。

(696b)利用由600b制备690a之方法合成自600b，得到696b。¹HNMR(CDCl₃)δ0.9(m，3H)，1.15(q，3H)，1.15(m，1H)，1.65(m，1H)，2.5(m，1H)，2.8(m，1H)，2.95-3.0(m，2H)，3.6(m，2H)，3.7-3.85(m，4H)，4.0(m，2H)，4.3(m，1H)，4.55(m，1H)，4.65(m，1H)，4.85-4.95(m，1H)，5.05(m，1H)，5.35(s，1H)，5.45(d，1H)，6.85(d，1H)，7.25(d，1H)，7.35-7.85(6H)，8.85(dd，2H)，9.05(m，1H)，9.35(dd，2H)。

(696c)，利用由600b制备690a之方法合成自600b，得到696c。¹HNMR(CD₃OD)δ1.25(t，1H)，1.65(q，1H)，1.9(m，1H)，2.9(m，1H)，3.05(m，1H)，3.9(d，1H)，4.2(m，1H)，4.3(d，1H)，4.7-5.0(m，3H)，5.25(m，1H)，5.7(s，1H)，5.9(d，1H)，7.5(d，2H)，7.7-7.9(m，3H)，8.0(t，1H)，8.2(m，2H)，8.75(d，1H)，9.35(d，1H)。

(696d)，利用由600b制备690a之方法合成自600b，得到696d。¹HNMR(CDCl₃)δ0.9(t，1H)，1.2(t，1H)，1.3-1.45(m，2H)，1.6-1.8(m，4H)，2.45(m，1H)，2.8(m，1H)，3.0(m，1H)，3.4(q，1H)，3.5(d，1H)，4.0(m，2H)，4.2-4.3(m，2H)，4.55(d，1H)，4.65(m，1H)，4.9(m，1H)，5.05(m，1H)，5.4(s，1H)，5.5(d，1H)，6.8(d，1H)，7.3-7.9(m，6H)，8.5(d，1H)，9.05(d，1H)，9.4(d，1H)。

(696e)，利用由600b制备690a之方法合成自600b，得到696e。¹HNMR(CDCl₃)δ1.2(t，1H)，2.4(m，1H)，2.8(m，2H)，3.6(d，1H)，3.7(q，1H)，4.0(m，2H)，4.3(d，2H)，4.65(m，1H)，4.85(t，1H)，5.0(m，1H)，5.35(d，1H)，6.5(d，1H)，7.15-7.85(m，8H)，8.45(d，1H)，9.05(d，1H)，9.4(d，1H)。

实施例32

表27

化合物	UV-可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v..ml/min/kgg
化合物	UV-可见Ki(nM)	细胞PBMC平均IC50(nM)	人全血IC50(nM)	清除率小鼠i.v.ml/min/kg	清除率大鼠i.v..ml/min/kgg	688c	200
689b-1	3.5		2700			688c	200
689b-1	3.5		2700			696-1	0.5
696-2	0.5					696-1	0.5
696-2	0.5					697	1.8	5000
698	18		13500			697	1.8	5000
698	18		13500			699	1.1
699a-2						699	1.1
699a-2						720	2.7
721	1.3		5000			720	2.7
721	1.3		5000			722	5	5000
723	2.3		2000			722	5	5000
723	2.3		2000			724	2	1800
725	3.7		3000			724	2	1800
725	3.7		3000			726	300
727	50		2300			726	300
727	50		2300			728	300
729	28		2800			728	300
729	28		2800			730	90	8000
731	150					730	90	8000
731	150					732	5	1800
733	5		1500			732	5	1800
733	5		1500			734	9	6000
735	6		10000			734	9	6000

实施例33

化合物684a，688b-1，688c，689b-1，690a-1，696-1，696-2，696a-2，696a-1，697，697a，698，698a，699，699a，699a-1，699a-2，800及801如下述地制备。

表28

表28(续)

(690a-1)，以690a及2100b之制法合成，得到690a-1。¹HNMR(CDCl₃)δ1.15(t，6H)，1.3(t，3H)，2.25(s，6H)，2.60(d，2H)，3.50(m，2H)，3.70(m，4H)，4.05(m，2H)，4.15(m，2H)，4.30(d，1H)，4.45(m，1H)，4.50(d，1H)，4.55(d，1H)，4.70(t，1H)，5.05(m，1H)，5.30(s，1H)，6.70(d，1H)，7.10(d，2H)，7.30-7.50(m，7H)

(697a)，利用677之制法合成，得到840毫克的697a，¹H NMR(CD₃OD)δ1.78(br.s，2H)，2.48-3.58(d，0.5H)，2.6-2.7(m，0.5H)，2.8-2.9(m，0.5H)，2.92-3.03(m，0.5H)，3.55-3.8(m，2H)，3.92-4.02(d，1H)，4.25-4.3(d，0.5H)，4.37-4.42(d，0.5H)，4.43-4.48(m，0.5H)，4.55-4.65(m，1.5H)，4.7-5.12(m，5H)，5.44(s，0.5H)，5.58-5.63(d，0.5H)，6.95-8.1(m，13H)。

(697)，利用由2001制备2002之方法合成，可得140毫克的697，¹HNMR(CD₃OD)δ238-2.5(m，1H)，2.55-2.75(m，1H)，3.68-3.9(m，3H)，3.95-4.03(m，1H)，4.2-4.3(m，1H)，4.4-4.7(m，4H)，7.35-7.8(m，6H)。

(684a)，利用2100j之制法合成，可得684a，¹H NMR(500MHz，CDCl₃非对映立体异构之混合物)δ1.3(s，9H)，1.8(s，3H)，2.1(s，3H)，2.15(s，3H)，2.3(s，6H)，3.3-3.5(m，3H)，3.65(s，3H)，3.9(m，1H)，4.1(d，1H)，4.3(d，1H)，4.6-4.8(m，3H)，5.0(m，1H)，6.7(s，1H)，7.0(d，1H)，7.1(d，1H)，7.2-7.5(m，6H)。

(698a)，利用652之制法合成，得到795毫克的698a，¹H NMR(500MHz，CDCl₃非对映立体异构之混合物)δ2.8(m，2H)，4.0(m，1H)，4.5-4.8(m，4H)，5.2(m，1H)，5.5(s，1H)，5.75(d，1H)，7.3-7.85(m，11H)，7.9(t，1H)，8.2(d，1H)，8.6(m，1H)，9.3(m，1H)。

(698)，利用653之制法合成，得到225毫克的698，¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ2.4(m，1H)，2.6(m，1H)，3.9(m，1H)，4.2(m，1H)，4.3-4.7(m，4H)，5.1(m，1H)，7.3-7.5(m，4H)，7.6-7.8(m，2H)，7.8(m，2H)，8.2(d，1H)，8.5(d，1H)，9.0(d，1H)。

(699a)，利用655之制法合成，得到820毫克的699a，呈褐色固体，¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ2.60(ddd，1H)，2.90(ddd，1H)，3.20(s，3H)，3.25(s，3H)，3，70(t，1H)，3.90(m，2H)，4.20(dd，1H)，4.60(m，2H)，4.70-5.00(m，5H)，5.55(d，1H)，7.00(d，1H)，7.20-7.50(m，7H)，8.45(dd，1H)，9.0(dd，1H)，及9.35ppm(dd，1H)。

(688b-1)，利用655之制法合成得到600毫克的688b-1，¹HNMR(CDCl₃：非对映立体异构体之混合物)δ2.21(s，3H)，2.28(s，3H)，2.42-2.50(m，0.5H)，2.58-2.65(m，0.5H)，2.83-2.91(m，0.5H)，2.98-3.1(m，0.5H)，3.18(s，1.5H)，3.22(s，1.5H)，3.72-3.78(d，1H)，3.78-3.9(m，2H)，4.08-4.15(d，1H)，4.5-4.69(m，3H)，4.7-4.85(m，1H)，4.88-5.1(m，2H)，5.45(s，0.5H)，5.55-5.65(d，0.5H)，6.85-6.92(m，1H)，7.02-7.13(m，2H)，7.24-7.55(m，9H)。

(689b-1)，利用由2001制备2002之方法合成，得到689b-1，¹HNMR(CD₃OD)δ2.18(s，6H)，2.36-2.47(m，1H)，2.6-2.72(m，1H)，3.34(s，3H)，3.66-3.88(m，2H)，3.95-4.05(m，1H)，4.2-4.78(m，5H)，4.9(m，1H)，7.3-7.41(m，2H)，7.48(s，2H)，7.5-7.63(m，1H)。

(699)，由2001制备2002之方法合成，得到699，呈白色固体，¹HNMR(500MHz，CD₃OD)δ2.50(m，1H)，2.70(m，1H)，3.25(s，3H)，3.80(bd，1H)，3.90(bd，1H)，4.00(bd，1H)，4.30(m，1H)，4.50-4.70(m，3H)，4.80-4.85(bt，1H)，5.00(bm，1H)，7.40-7.55(m，5H)，7.70(bm，1H)，7.85(bm，1H)，8.00(bm，1H)，8.55(bd，1H)，及9.05ppm(bd，1H)。

(696a-1)，利用656之制法合成，得到800为黄色固体，¹H NMR(500，MHz，CDCl₃)δ2.55(ddd，1H)，2.85(ddd，1H)，3.70-3.80(m，2H)，3.95(bm，1H)，4.05(d，1H)，4.30(d，1H)，4.40-4.60(m，4H)，4.70-5.05(m，4H)，5.55(d，1H)，7.10(d，1H)，7.20-7.35(m，3H)，7.40-7.50(m，1H)，7.60-7.85(m，3H)，8.40(dd，1H)，9.10(m，1H)，及9.30pp(m，1H)。

(696a-2)，利用677之制法合成，得到204毫克的696a-2，呈白色固体，除了以下例外即如下还原硝基：硝基化合物(7.2克，20毫摩尔)于MeOH之溶液中，加入NH₄Cl(2.1克，39毫摩尔)及Zn(17克，260毫摩尔)。生成的混合物回流加热1小时，之后冷却再经Celite过滤。滤液于真空下浓缩，再以冷的1N HCl处理得到3.6克的浅红色固体。¹H NMR(CDCl₃)δ1.85(s，1H)，2.45(d，0.5H)，2.50-2.65(m，0.5H)，2.80-2.90(m，0.5H)，2.90-3.00(m，0.5H)，3.45(s，0.5H)，3.55-3.75(m，1H)，3.85-4.15(m，2H)，4.25(d，1H)，4.40-4.65(m，2H)，4.70-4.80(m，0.5H)，4.85-5.15(m，3H)，5.40(s，0.5H)，5.60(d，0-5H)，7.00(d，0.5H)，7.15-7.90(m，12.5H)，8.35-8.45(m，1H)，9.00-9.10(m，1H)，9.25-9.40(m，1H)。

(696-1)，以由2001制备2002之方法合成，得到140毫克的696-1，呈白色固体，¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ2.50(m，1H)，2.70(m，1H)，3.85(d，1H)，3.95(m，1H)，4.10(d，1H)，4.35(m，1H)，4.50-4.60(m，2H)，4.80(bm，1H)，5.00(m，1H)，7.40-7.48(m，3H)，7.65(m，1H)，7.75(t，1H)，7.85(t，1H)，8.00(d，1H)，8.55(d，1H)，及9.05ppm(d，1H)。

(696-2)，利用由2001制备2002之方法合成，得到250毫克的696-2，呈白色固体，¹H NMR(CD₃OD)δ2.40-2.55(m，1H)，2.60-2.75(m，1H)，3.80-4.00(m，2H)，4.05(d，1H)，4.20-4.35(m，1H)，4.45-4.65(m，3H)，4.80-5.10(m，2H)

(699a-1)，利用制备655之方法合成，得到699a-1，¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ2.55(ddd，1H)，2.90(ddd，1H)，3.25(s，3H)，3.28(s，3H)，3.80(bt，2H)，3.95(bm，2H)，4.25(dd，1H)，4.45-4.90(m，3H)，5.60(d，1H)，7.05-7.40(m，8H)，7.50(bm，1H)，7.65-7.85(m，2H)，8.45(d，1H)，9.1(m，1H)，及9.35ppm(m，1H)

(699a-2)，利用由2001制备2002之方法合成，得到699a-2，¹HNMR(500MHz，CD₃OD)δ2.51(m，1H)，2.70(dt，1H)，3.31(bs，3H)，3.90(bdt，1H)，3.95(bm，1H)，4.05(d，1H)，4.35(m，1H)，4.50(d，1H)，4.60(dd，1H)，4.65(dt，1H)，4.80(m，1H)，5.05(m，1H)，7.35-7.48(m，3H)，7.65(bm，1H)，7.75(t，1H)，7.82(t，1H)，8.05(d，1H)，8.55(d，1H)，及9.05ppm(d，1H)。

(688c)，利用308d之制法合成，得到800，¹H NMR(CD₃OD)δ2.2(s，6H)，2.58-2.83(m，2H)，3.28(s，3H)，3.29-3.34(m，1H)，3.68-3.80(m，2H)，3.95-4.05(dd，1H)，4.38-4.48(dd，1H)，4.82-5.00(m，2H)，5.26-5.36(m，2H)，7.22-7.65(m，10H)。

(800)，利用制备696a-1之方法合成，得到204毫克的800，呈黄色固体，¹H NMR(CDCl₃)(非对映立体异构之混合物δ1.70(s，1H)，2.40-2.80(m，7H)，2.80-2.90(m，0.5H)，2.95-3.05(m，0.5H)，3.30-3.35(m，0.5H)，3.45-3.55(m，0.5H)，3.55-3.65(m，1H)，3.80-4.05(m，2H)，4.30-4.50(m，2H)，4.55-4.65(m，1H)，4.75-4.95(m，3H)，5.45(s，0.5H)，5.55(d，0.5H)，6.70(d，0.5H)，6.90(d，0.5H)，7.15-7.80(m，10H)(801)利用由2001制备2002之方法合成，得到801。

实施例34

化合物720-73以化合物619-635之类似制法制备(见，实施例13)。化合物720-73之物理数据列于表29中。

表29

表29(续)

表29(续)

表29(续)

表29(续)

实施例35

化合物736-767系以制备化合物619-635之相似方法(见实施例13)进行制备。化合物736-767之物理数据列于表30。

表30

表30(续)

表30(续)

上实例之数据明示出依据本发明之化合物，可对IL-1β转化酶呈现出抑制活性。

本发明化合物在体外可抑制ICE，且进一步可口服递送至哺乳动物，并在治疗IL-1-，细胞凋亡之一，IGIF-及IFN-γ调介之疾病上有明显的临床利用价值。这些试验显示出化合物于体内抑制ICE之能力。

虽然我们已描述本发明许多具体实施方案，很明显的我们的基本构想可以改变以提出其他具体实施方案，其中利用本发明的产物及制法。因此，很明显地本发明的范围系由所附之权利要求所界定，而非经由实例中所示出之特异具体实施方案。

Claims

1.一种由下式代表的化合物

其中，

R₁是：

或

C是选自苯并，吡啶并，噻吩并，吡咯并，呋喃并，噻唑并，异噻唑并，噁唑并，异噁唑并，嘧啶并，咪唑并，环戊基，及环己基的环；该环视所需可为-Q₁所单或多取代；

R₂是：

或

m是1或2；

各R₅独立选自：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-N(R₁₀)(R₁₀)，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-O-R₉，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-R₉，

-H，

-C(O)C(O)-OR₁₀；和

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀)；

X₅是N；

Y₂是H₂或O；

R₆选自-H或-CH₃，

R₈选自：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O-N(H)-R₁₀，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-OR₁₀，

-C(O)C(O)-R₁₀；

-C(O)-CH₂N(R₁₀)(R₁₀)，

-C(O)-CH₂C(O)-O-R₉，

-C(O)-CH₂C(O)-R₉，

-H，及

-C(O)-C(O)-OR₁₀；

各R₉独立选自-Ar₃及-C_1-6的直链或支链烷基视所需可被-Ar₃所取代，其中-C_1-6烷基视所需不饱和；

各R₁₀独立选自-H，-Ar₃，-C_3-6环烷基，及-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃所取代，其中-C_1-6烷基视所需不饱和；

R₁₃选自H，Ar₃，及-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃，-CONH₂，-OR₅，-OH，-OR₉，或-CO₂H所取代；

各R₅₁独立选自R₉，-C(O)-R₉，-C(O)-N(H)-R₉，或各R₅₁一起形成饱和的4-8员的碳环或含有-O-，-S-或-NH-的杂环；

各R₂₁独立选自-H或-C_1-6直链或支链烷基；

各Ar₃是环基，独立选自含有6，10，12或14个碳原子及1及3个环的芳基，及含有5至15个环原子及1至3个环的芳杂环基，该杂环含有至少一个选自-O-，-S-，-SO-，SO₂，＝N-，及-NH-的杂原子，该杂环基视所需含有一个或以上的双键，该杂环基视所需含有一个或以上的芳香环，该环基视所需为-Q₁单或多取代；

各Q₁独立选自-NH₂，-CO₂H，-Cl，-F，-Br，-I，NO₂，-CN，＝O，-OH，-全氟C_1-3烷基，R₅，-OR₅，-NHR₅，-OR₉，-N(R₉)(R₁₀)，-R₉，-C(O)-R₁₀，及

限制条件为当-Ar₃为Q基所取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃所取代。

2.根据权利要求1的化合物，选自：

3.根据权利要求1的化合物，其中：

m是1；

C是选自苯并，吡啶并，或噻吩并的环，该环视所需可为卤素，-NH ₂，-NH-R₅，-NH-R₉，-OR₂₀，或-R₉所单或多取代，其中R₉是直链或支链的C_1-4烷基，且R₁₀是H或直链或支链的C_1-4烷基；

R₆是H；

R₁₃是H或C_1-4直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃，-OH，-OR₉，-CO₂H所取代，其中R₉是C_1-4直链或支链烷基；其中Ar₃是吗啉基或苯基，其中苯基视所需可被Q₁所取代；

R₂₁是-H或-CH₃；

R₅₁是C_1-6直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃所取代，其中Ar₃是苯基，视所需可被-Q₁所取代；

各Ar₃环基独立选自苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，吡唑基，噻唑基，异噁唑基，苯并三唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，咪唑基，噻二唑基，苯并[b]硫苯基，吡啶基，苯并呋喃基，及吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多取代；

各Q₁独立选自-NH₂，-Cl，-F，-Br，-OH，-R₉，-NH-R₅其中R₅是-C(O)-R₁₀或-S(O)₂-R₉，-OR₅其中R₅是-C(O)-R₁₀，-OR₉，-NHR₉，及

其中各R₉及R₁₀独立地为-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃所取代，其中Ar₃是苯基；

4.根据权利要求3的化合物，其中R₁是(w2)。

5.根据权利要求4的化合物，选自：

和

6.根据权利要求4的化合物，其中R₈选自：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-CH₂-OR₁₀，及

-C(O)-CH₂C(O)-R₉。

7.根据权利要求6的化合物，其中R₈是-C(O)-CH₂-OR₁₀，且R₁₀是-H或-CH₃。

8.根据权利要求3的化合物，其中R₁是(e10)且X₅是N。

9.根据权利要求1，3-4或6-8中任一项的化合物，其中R₅是-C(O)-R₁₀或-C(O)-C(O)-R₁₀。

10.根据权利要求9的化合物，其中R₁₀是Ar₃。

11.根据权利要求10的化合物，其中：

R₅是-C(O)-R₁₀且R₁₀是Ar₃，其中Ar₃环基是苯基视所需可被下列单或多取代：

-R₉，其中R₉是C_1-4直链或支链烷基；

-F，

-Cl，

-N(H)-R₅，其中-R₅是-H或-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃所取代，其中Ar₃是苯基，-N(R₉)(R₁₀)，其中R₉及R₁₀独立地为-C_1-4直链或支链烷基，或

-O-R₅，其中R₅是H或-C_1-4直链或支链烷基。

12.根据权利要求11的化合物，选自：

和

13.根据权利要求11的化合物，其中Ar₃是苯基，在3-或5-位上为-Cl或在4-位上为-NH-R₅，-N(R₉)(R₁₀)，或-O-R₅所单或多取代；或

在3-或5-位上为-R₉，在4-位上为-O-R₅单或多取代，其中R₉是C_1-4直链或支链烷基。

14.根据权利要求13的化合物，选自：

15.根据权利要求10的化合物，其中：

R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且该Ar₃环基选自吲哚基，苯并咪唑基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基及苯并[b]硫苯基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多取代。

16.根据权利要求15的化合物，其中Ar₃环基是异喹啉基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多取代。

17.根据权利要求16的化合物，选自：

和

18.根据权利要求10的化合物，其中R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且Ar₃环基是苯基，为所取代。

19.一种由下式代表的化合物：

其中：

m是1或2；

R₃选自下式：

C是环选自：苯并，吡啶并，噻吩并，吡咯并，呋喃并，噻唑并，异噻唑并，噁唑并，异噁唑基，嘧啶并，咪唑并，环戊基，及环己基；该环视所需可被-Q₁所单或多取代；

R₃选自：

-CN，

-C(O)-H-，

-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，

-C(O)-CH₂-F，

-C＝N-O-R₉，及

-CO-Ar₂；

各R₅独立选自：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-N(R₁₀)(R₁₀)，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-O-R₉，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-R₉，

-H，

-C(O)C(O)-OR₁₀；及

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀)；

各T₁独立选自-O-，-S-，-S(O)-，及-S(O)₂-；

R₆选自-H及CH₃；

R₈选自：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-N(H)-R₁₀，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-R₁₀，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-C(O)-CH₂N(R₁₀)(R₁₀)，

-C(O)-CH₂C(O)-O-R₉，

-C(O)-CH₂C(O)-R₉，

-H，及

-C(O)-C(O)-OR₁₀；

各R₉独立选自-Ar₈及-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃所取代，其中-C_1-6烷基视所需不饱和；

各R₁₁独立选自：

-Ar₄，

-(CH₂)_1-3-Ar₄，

-H，及

-C(O)-Ar₄；

R₁₅选自-OH，OAr₃，-N(H)-OH，及-OC_1-6，其中C_1-6是直链或支链烷基视所需可被-Ar₃，-CONH₂，-OR₅，-OH，-OR₉，或-CO₂H所取代；

Ar₂独立选自下列，其中任何一环可视所需可被-Q₁或苯基所单或多取代，视所需可被Q₁所取代；

和

其中各Y独立选自O及S；

各Ar₃是环基，独立选自芳基，其含有6，10，12，或14个碳原子及1至3个环，及芳杂环基含有5至15个环原子及1至3个环，该杂环基含有至少一个选自-O-，-S-，-SO-，SO₂，＝N-，及-NH-，-N(R₅)-，及-N(R₉)-的杂原子，该杂环基视所需含有一个或以上的双键，该杂环基视所需含有一个或以上的芳香环，且该环基视所需可被-Q₁所单或多取代；

各Ar₄是环基，独立选自芳基，其含有6，10，12或14个碳原子及1至3个环，及杂环基含有5至15个环原子及1至3个环，该杂环基含有至少一个选自-O-，-S-，-SO-，SO₂，＝N-，-NH-，-N(R₅)-，及-N(R₉)-的杂原子，该杂环基视所需含有一个或以上的双键，该杂环基视所需含有一个或以上的芳香环，且该环基视所需可被-Q₁所单或多取代；

各Q₁独立选自-NH₂，-CO₂H，-Cl-，-F，-Br，-I，-NO₂，-CN，＝O，-OH，-全氟C_1-3烷基，R₅，-OR₅，-NHR₅，-OR₉，-N(R₉)(R₁₀)，-R₉，-C(O)-R₁₀，及

20.根据权利要求19的化合物，选自：

和

21.根据权利要求19的化合物，其中：

m是1；

C是环选自苯并，吡啶并，及噻吩并，环视所需可被卤素，-NH₂，-NH-R₅或-NH-R₉，-OR₁₀或-R₉所单或多取代，其中R₉是直或分支的C_1-4烷基，且R₁₀是H或直或分支的C_1-4烷基；

T₁是O或S；

R₆是H；

R₁₁是选自：-Ar₄，-(CH₂)_1-3-Ar₄，及-C(O)-Ar₄；

Ar₂是(hh)；

Y是O；

各Ar₃环基独立选自苯基，萘基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基，噻唑基，苯并咪唑基，噻吩并噻吩基，噻二唑基，苯并三唑基，苯并[b]硫苯基，苯并呋喃基，及吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多取代；

各Ar₄环基独立选自苯基，四唑基，萘基，吡啶基，噁唑基，嘧啶基或吲哚基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多取代；

限制条件为当-Ar₃为Q₁基所取代时，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃所取代。

22.根据权利要求21的化合物，其中R₈选自：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₈，

-C(O)-CH₂-OR₁₀，及

-C(O)-CH₂C(O)-R₉。

23.根据权利要求22的化合物，其中R₈是-C(O)-CH₂-OR₁₀，且R₁₀是-H或-CH₃。

24.根据权利要求21的化合物，其中R₃是-C(O)-Ar₂；

-C(O)CH₂-T₁-R₁₁；

或-C(O)-H。

25.根据权利要求24的化合物，其中R₈选自：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-CH₂-OR₁₀，及

-C(O)-CH₂C(O)-R₉。

26.根据权利要求25的化合物，其中R₈是-C(O)-CH₂-OR₁₀，且R₁₀是-H或-CH₃。

27.一种由下式代表之化合物：

其中：

m是1或2；

R₁选自下式：

(e10-A)

R₃选自：

-CN，

-C(O)-H，

-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁，

-C(O)-CH₂-F，

-C＝N-O-R₉，及

-CO-Ar₂；

各R₅独立选自：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-N(R₁₀)(R₁₀)，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-O-R₉，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-R₉，

-H，

-C(O)C(O)-OR₁₀；及

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀)；

Y₂是H₂或O；

X₇是-N(R₈)-或-O-；

各T₁独立选自-O-，-S-，-S(O)-，及S(O)₂-；

各R₉独立选自-Ar₃及-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃所取代，其中-C_1-6烷基可视所需不饱和；

各R₁₁独立选自：

-Ar₄，

-(CH₂)_1-3-Ar₄，

-H，及

-C(O)-Ar₄；

R₁₅选自-OH，-OAr₃，-N(H)-OH，及-OC_1-6，其中C_1-6是直链或支链烷基视所需可被-Ar₃，-CONH₂、-OR₅，-OH，-OR₉，或-CO₂H所取代；

各R₂₁独立选自-H或-C_1-6直链或支链烷基；

Ar₂独立选自下列基团，其中任何环可视所需可被-Q₁或苯基所单或多取代，苯基视所需可被-Q₁所取代；

和

其中各Y独立选自O及S；

各Ar₃是环基，独立选自芳基，其含有6，10，12或14个碳原子及1及3个环，及芳杂环基含有5至15个环原子及1至3个环，该杂环基含有至少一个选自-O-，-S-，-SO-，SO₂，＝N-，及-NH-，-N(R₅)-，及-N(R₉)-之杂原子，该杂环基视所需含有一个或以上的双键，该杂环基视所需含有一个或以上的芳香环，且该环基视所需可被-Q₁单或多取代；

各Q₁独立选自-NH₂，-CO₂H，-Cl，-F，-Br，-I，-NO₂，-CN，＝O，-OH，-全氟C_1-3烷基，R₅，-OR₅，-NHR₅，-OR₉，-N(R₉)(R₁₀)，-R₉，-C(O)-R₁₀，及

28.根据权利要求19或27的化合物，选自

和

和

和

29.根据权利要求19或21-27中任一项的化合物，其中R₅是-C(O)-R₁₀或-C(O)C(O)-R₁₀。

30.根据权利要求29的化合物，其中R₁₀是Ar₃。

31.根据权利要求30的化合物，其中：

R₅是-C(O)-R₁₀，且R₁₀是Ar₃，其中Ar₃环基是苯基视所需可被下列单或多取代：

-R₉，其中R₉是C_1-4直链或支链烷基；

-F，

-Cl，

-N(H)-R₅，其中-R₅是-H或-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃所取代，其中Ar₃是苯基，

-O-R₅，其中R₅是H或-C_1-4直链或支链烷基。

32.根据权利要求31的化合物，选自：

和

33.根据权利要求31的化合物，其中Ar₃是苯基，在3-或5-位上为-Cl或在4-位置上为-NH-R₅，-N(R₉)(R₁₀)，或-O-R₅所单或多取代；或

其中Ar₃是苯基，在3-或5-位上为-R₉，在4-位上为-O-R₅所单或多取代，其中R₉是C_1-4直链或支链烷基。

34.根据权利要求33的化合物，选自：

35.根据权利要求30的化合物，其中：

R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且Ar₃环基选自吲哚基，苯并咪唑基，噻吩基，喹啉基，异喹啉基及苯并[b]硫苯基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多取代。

36.根据权利要求35的化合物，选自：

和

37.根据权利要求35的化合物，其中Ar₃环基是异喹啉基，且该环基视所需可被-Q₁所单或多取代。

38.根据权利要求37的化合物，其中化合物是：

和

39.根据权利要求30的化合物，其中R₅是-C(O)-R₁₀，其中R₁₀是Ar₃且Ar₃环基是苯基，为

所取代。

40.根据权利要求39的化合物，其中化合物是：

41.一种药物组合物，含有根据权利要求1-40中任一项记载的化合物以及药学允许的载体。

42.根据权利要求1-40中任一项记载的化合物在制备用于治疗或预防下列疾病的药物中的应用：

骨关节炎，急性胰腺炎，慢性胰腺炎，哮喘，成人呼吸窘迫综合症，感染性肝炎，肾小球肾炎，类风湿性关节炎，全身性红斑狼疮，硬皮病，慢性甲状腺炎，葛雷夫氏病，自身免疫性胃炎，胰岛素依赖型糖尿病-I型糖尿病，自身免疫性溶血性贫血，自身免疫性嗜中性粒细胞减少症，血小板减少症，慢性活动性肝炎，重症肌无力，炎性肠疾，局限性回肠炎，溃疡性结肠炎，多发性硬化，牛皮癣，扁平苔癣，移植物对宿主疾病，急性皮肌炎，湿疹，原发性肝硬化，葡萄膜炎，Behcet’s病，急性发育不全，再生障碍性贫血性贫血，肌萎缩性侧索硬化或肾病综合症，骨质疏松症，与多发性骨髓瘤有关之骨骼失调病，急性骨髓性白血病，慢性骨髓性白血病，转移性黑色素瘤，卡波济氏肉瘤，多发性骨髓瘤，脓毒症，脓毒症休克，志贺氏杆菌病，早老性痴呆病，帕金森氏病，脑缺血及心肌梗塞。

43.根据权利要求42的应用，疾病选自：

骨关节炎、急性胰腺炎、类风湿性关节炎，炎性肠疾，溃疡性结肠炎，局限性回肠炎，肝炎，成人呼吸窘迫综合症，肾小球肾炎，胰岛素依赖型糖尿病-I型糖尿病，青少年型糖尿病，牛皮癣，移植物对宿主疾病或早老性痴呆病。

44.根据权利要求1-4O中任一项记载的化合物在制备用于治疗或预防下列疾病的药物中的应用：早老性痴呆病，帕金森氏病，脑缺血，心肌梗塞，脊髓肌肉萎缩症，多发性硬化，与AIDS-有关之脑炎，与HIV有关之脑炎，老化，秃发，或由于中风造成的神经性伤害。

45.根据权利要求44的应用，其中疾病是早老性痴呆。

46.一种制备N-酰基氨基化合物的方法，此方法包括：

a)将羧酸与N-alloc-保护之胺混合，并在惰性溶剂，三苯膦，亲核性清除剂，及四-三苯膦合肥(O)存在下，于环境温度及惰性气氛下；及

b)在a)混合物中加入HOBT及EDC；并视所需含有下列进一步步骤；

c)水解b)步骤之混合物，并在含有酸及H₂O之溶液存在下，其中步骤B)混合物视所需地浓缩。

47.根据权利要求46的方法，其中的惰性溶剂是CH₂Cl₂，DMF，或CH₂Cl₂及DMF的混合物。

48.根据权利要求46的方法，其中的亲核性清除剂是双甲酮，吗啉，三甲基甲硅烷基二甲胺或二甲基巴比妥酸。

49.根据权利要求48的方法，其中的亲核性清除剂是三甲基硅烷基二甲胺或二甲基巴比妥酸。

50.根据权利要求48的方法，其中的惰性溶剂是CH₂Cl₂，DMF，或CH₂Cl₂及DMF的混合物。

51.根据权利要求50的方法，其中的亲核性清除剂是二甲基巴比妥酸。

52.根据权利要求51的方法，其中的溶液含有约1-90重量％的三氟乙酸，或约0.1-30重量％的氢氯酸。

53.根据权利要求52的方法，其中的溶液含有约20-50重量％的三氟乙酸，或约5-15重量％的氢氯酸。

54.根据权利要求46-53中任一项的方法，其中的N-酰基氨基化合物由式(VIII)代表：

其中：

R₁选自：

和

C是环选自：苯并，吡啶并，噻吩并，吡咯并，呋喃并，噻唑并，异噻唑并，噁唑并，异噁唑并，嘧啶并，咪唑并，环戊基及环己基；环视所需可被卤素，-NH₂，或-NH-R₉单或多取代；

R₂是：

或

m是1或2；

各R₅独立选自：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-N(R₁₀)(R₁₀)，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-O-R₉，

-C(O)C(O)-R₁₀，

-R₉，

-H，

-C(O)C(O)-OR₁₀；及

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀)；

X₅是N；

Y₂是H₂或O；

X₇是-N(R₈)-或-O-；

R₆选自-H或-CH₃，

R₈选自：

-C(O)-R₁₀，

-C(O)O-R₉，

-C(O)-N(H)-R₁₀，

-S(O)₂-R₉，

-S(O)₂-NH-R₁₀，

-C(O)-CH₂-OR₁₀，

-C(O)C(O)-R₁₀；

-C(O)-CH₂N(R₁₀)(R₁₀)，

-C(O)-CH₂C(O)-O-R₉，

-C(O)-CH₂C(O)-R₉，

-H，及

-C(O)-C(O)-OR₁₀；

各R₅独立选自-Ar₃及-C_1-6直链或支链烷基，视所需可被-Ar₃所取代，其中-C_1-6烷基视所需不饱和；

各R₅₁独立选自R₉，-C(O)-R₉，-C(O)-N(H)-R₉，或各R₅₁一起形成饱和的4-8员碳环或含有-O-，-S-或-NH-的杂环；

各R₂₁独立选自-H或-C_1-6直链或支链烷基；

各Ar₃是环基，独立选自芳基，其含有6，10，12或14个碳原子及1及3个环，及芳杂环基含有5至15个环原子及1至3个环，该杂环基含有至少一个选自-O-，-S-，-SO-，SO₂，＝N-，P及-NH-的杂原子，且该杂环基视所需含有一个或以上的双键，该杂环基视所需含有一个或以上的芳香环，且该环基视所需可被-Q₁所单或多取代；

各Q₁独立选自-NH₂，-CO₂H，-Cl，-F-，-Br，-I，NO₂，-CN，＝O，-OH，-全氟C_1-3烷基，R₅，-OR₅，-NHR₅，-OR₉，-N(R₉)(R₁₀)，-R₉，-C(O)-R₁₀，及

限制条件为当-Ar₃为Q₁所取代，其含有一个或以上额外的-Ar₃基，该额外的-Ar₃基不为另外的-Ar₃所取代。

55.根据权利要求46-53中任一项的方法，其中N-alloc经保护之胺是：

其中，R₅₁独立选自R₉，-C(O)-R₉，-C(O)-N(H)-R₉，或各R₅₁一起形成一个饱和的4-8员碳环或含有-O-，-S-或-NH-的杂环。

56.根据权利要求46-53中任一项的方法，其中R₁是：