CN1819837A

CN1819837A - Tamandarin类似物及其片段以及制备和使用方法

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Publication number: CN1819837A
Application number: CNA2004800133883A
Authority: CN
Inventors: 玛德琳·M.·茹利
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2003-03-21
Filing date: 2004-03-19
Publication date: 2006-08-16
Also published as: WO2004084812A3; MXPA05010064A; US20070149446A1; CA2519234A1; JP2006523214A; US8030279B2; AU2004224418A1; EP1613338A2; WO2004084812A2; EP1613338A4

Abstract

本发明涉及通式I的化合物，其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、W、X、Y和Z如本文所定义。本发明的化合物用作抗癌药。这些化合物特别用于治疗或预防癌症和肿瘤生长。本发明还涉及包括上述通式化合物的组合物。本发明还涉及使用上述通式化合物的方法。

Description

TAMANDARIN类似物及其片段以及制备和使用方法

发明背景

发明领域

本发明涉及大环缩酚肽类，包括代代宁和tamandarin类似物及其片段，它们用作抗癌药和其它目的。本发明还提供了使用这些化合物作为蛋白质合成、细胞生长、肿瘤发生和病毒感染的抑制剂和用于免疫抑制疗法和作为编程性细胞死亡增强剂的方法。本发明还提供了制备tamandarin类似物的方法。

背景技术

Tamandarins A和B为天然存在的分离自海洋被囊动物的代代宁类似物。Tamandarins A和B属于有效抑制蛋白质合成和细胞周期进展并诱导快速编程性细胞死亡的一族化合物(代代宁类-来自Didemnidaefamily)(Grubb等《生物化学与生物物理学通讯》(Biochem.Biophys，Res.Commun.)215：1130-1136(1995)；Johnson等《FEBS通讯》(FEBSLett.)383：1-5(1996)；Johnson等《细胞免疫生物学》(Immunol.CellBiol.)77：242-248(1999)；Johnson等《细胞生物化学杂志》(J.Cell.Biochem.)72：269-278(1999))。其它代代宁类，包括代代宁B、代代宁M和脱氢代代宁B也表现出细胞毒性和抑制细胞效应。

Tamandarins A和B表现出与代代宁B显示出的活性相似的生物活性。例如，参见Liang，等《美国化学协会杂志》(J.Am.Chem.Soc.)123：4469-4474(2001)。例如，tamandarin A为蛋白质合成、细胞生长和肿瘤发生的有效抑制剂。Tamandarin A在体外表现出对胰腺癌的显著活性(Liang等《有机通讯》(Org.Lett.)1：1319-1322(1999))。

对在研究或其它应用中利用tamandarins和代代宁类的显著限制在于从天然来源中获得tamandarins的供应有限和分离这些化合物的困难和费用。存在对合成tamandarins A和B和其它代代宁类似物的方法的需求。

此外，已经制备和检验了极少的tamandarins A和B衍生物或类似物。还需要其它tamandarins A和B和代代宁类的衍生物和类似物。另外，需要用于合成tamandarins和代代宁类的化合物。也需要用作蛋白质合成、细胞生长、肿瘤发生和病毒感染的抑制剂和用于免疫抑制疗法和/或作为编程性细胞死亡促进剂的其它化合物。

发明概述

本发明的第一个方面涉及通式I、IA或II的化合物。

本发明的第二个方面涉及组合物，例如包括通式I、IA或II的化合物和合适的载体或赋形剂的药物组合物。

本发明的第三个方面涉及抑制或预防癌细胞或肿瘤生长的方法，所述的方法包括使癌细胞与有效量的通式I、IA，或II的化合物接触。在一个实施方案中，该方法涉及对需要这类治疗的受试者进行治疗或预防癌症，包括对所述的受试者给予有效量的例如通式I、IA或II。

本发明的第四个方面涉及抑制或预防肿瘤发生的方法，所述的方法包括使细胞或细胞成分与有效量的通式I、IA，或II的化合物接触。在一个实施方案中，该方法涉及对需要这类治疗的受试者进行抑制或预防肿瘤发生，包括对所述的受试者给予有效量的通式I、IA或II。

本发明的第五个方面涉及抑制或预防蛋白质合成的方法，所述的方法包括使细胞或细胞成分与有效量的通式I、IA，或II的化合物接触。在一个实施方案中，该方法涉及对需要这类治疗的受试者进行抑制或预防蛋白质合成，包括对所述的受试者给予有效量的通式I、IA或II。

本发明的第六个方面涉及促进编程性细胞死亡的方法，所述的方法包括使细胞或细胞成分与有效量的通式I、IA，或II的化合物接触。在一个实施方案中，该方法涉及对需要这类治疗的受试者促进编程性细胞死亡，包括对所述的受试者给予有效量的通式I、IA或II。

本发明的第七个方面涉及提供免疫抑制疗法的方法，所述的方法包括使细胞或细胞成分与有效量的通式I、IA，或II的化合物接触。在一个实施方案中，该方法涉及对需要这类治疗的受试者提供免疫抑制疗法，包括对所述的受试者给予有效量的通式I、IA或II。

本发明的第八个方面涉及通式I、IA或II的化合物在制备用于抑制或预防癌细胞或肿瘤生长的药物组合物中的应用。

本发明的第九个方面涉及预防或治疗病毒感染的方法，所述的方法包括对需要这类治疗的受试者给予有效量的通式I、IA或II的化合物。

本发明的第十个方面涉及通式I、IA或II的化合物在制备用于本文所述的一种或多种方法的药物组合物中的应用。

本发明的第十一个方面涉及制备通式I，IA，或II化合物的方法。

附图简述

附图1是解释本文和Sakai等在《药物化学杂志》(J.Med.Chem.)39：2819-2834(1996)中所用的编号规则的Tamandarin A的结构。

发明详述

本发明的第一个方面涉及通式I的化合物：

其中：

R¹和R²独立为H或C_1-4烷基，或R¹和R²共同形成脯氨酸或高脯氨酸残基的烷基环；

R³选自氨基酸侧链、萘基甲基和第一种荧光团；

R⁴为H或CH₃；

R⁵为H、胺保护基、氨基酸残基、多肽、含有第二种荧光团的肽、与固相支持物结合的化学部分或含有约1-约50个非氢原子的部分；

R⁶为异亮氨酸侧链或缬氨酸侧链；

W为O或NH；

X为O或NH；

Y为H或羟基保护基；且

Z为C(O)或C(O)-CH(CH₃)-C(O)；

条件是如果R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R⁴为甲基，W为O，X为O，且Z为C(O)，那么R³不为异亮氨酸侧链、缬氨酸侧链、丙氨酸侧链、正亮氨酸侧链、正缬氨酸侧链、亮氨酸侧链、组氨酸侧链、色氨酸侧链、精氨酸侧链、赖氨酸侧链、第二种荧光团或任选被OH、OCH₃、CO(C₆H₅)、Br、I、F、Cl、CH₃或C₂H₅取代的苄基；或

或者，条件是如果R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R⁴为甲基且X为O，那么R³为萘基甲基。

在一个实施方案中，R¹和R²为H。在另一个实施方案中，R¹和R²为C_1-4烷基，例如甲基。在另一个实施方案中，R¹为H且R²为甲基。在另一个实施方案中，R¹为甲基且R²为H。在另一个实施方案中，R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环。即在一个实施方案中，R¹和R²共同形成1，3-戊二基。

在一个实施方案中，R³为氨基酸侧链，特别是天然存在的氨基酸的侧链。在一个实施方案中，R³为：氨基酸侧链，诸如异亮氨酸侧链，即2-丁基部分，优选具有(R)立体化学；缬氨酸侧链，即2-丙基部分；丙氨酸侧链，即甲基部分；正亮氨酸侧链，即1-丁基部分；正缬氨酸侧链，即1-丙基部分；亮氨酸侧链，即异丁基部分，优选具有(S)立体化学；苯丙氨酸侧链，即苄基部分；组氨酸侧链，即4-咪唑基甲基部分；色氨酸侧链，即3-吲哚基甲基部分；酪氨酸侧链，即4-羟基苄基部分；精氨酸侧链，即4-胍基丁基部分；和赖氨酸侧链，即4-氨基丁基部分。

在另一个实施方案中，R³为非天然存在的氨基酸的侧链。非天然存在的氨基酸是本领域中公知的。在一个实施方案中，R³为萘基甲基。或者，R³为被下列基团取代的苄基：OH；C_1-4烷氧基，诸如OCH₃和OCH₂CH₃；CO(C₆H₅)；F；Cl；Br；I；或C_1-4烷基，诸如CH₃和CH₂CH₃。

在另一个实施方案中，R³为第一种荧光团。为荧光团的部分是本领域中公知的。在一个实施方案中，所述的荧光团为如上所述进一步含有荧光团部分的氨基酸侧链(例如与上述氨基酸侧链之一连接的荧光团)。这类荧光团包括：

在一个实施方案中，R⁵为H、胺保护基、氨基酸残基、多肽或含有第二种荧光团的肽。

在一个实施方案中，本发明包括通式I的化合物，其中R⁵为氢原子或适合于保护氨基酸的胺保护基。这类保护基是本领域中公知的且在本说明书上下文中涉及。R⁵的合适的保护基包括：例如叔丁氧羰基。合适的保护基的实例可以在参考文献中找到，诸如Green和Wuts(1991，《有机合成中的保护基》(Protective Groups in Organic Synthesis)，Wiley，New York，第2版)和Bodansky(1993，《肽合成原理》(Principles ofPeptide Synthesis)，Springer，Berlin)。

在一个实施方案中，R⁵为氨基酸残基，例如亮氨酸残基或含有两个或多个氨基酸残基的多肽。在某些实施方案中，R⁵基团含有1-10个氨基酸残基。在另一个实施方案中，R⁵基团含有1、2、3、4或5个氨基酸残基。在某些情况中，所述的氨基酸残基或多肽含有一个或多个合适的保护基。这类氨基酸残基和多肽类的实例包括：

-(N-甲基)亮氨酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸；

-(N-CBz-N-甲基)亮氨酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-丙酮酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-谷氨酰胺-焦谷氨酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-谷氨酰胺-环戊酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-亮氨酸-焦谷氨酸；

(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-谷氨酰胺-环戊酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-丙氨酸-亮氨酸-焦谷氨酸；和

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-(N-甲基)丙氨酸-亮氨酸-焦谷氨酸。

在另一个实施方案中，R⁵含有N-缩水甘油基-L-脯氨酸残基。R⁵的合适值为-(N-甲基-R-亮氨酸)-S-脯氨酸-缩水甘油酸。

其它合适的R⁵基团包括那些具有如下所示结构的基团：

在另一个实施方案中，R⁵为带有约1-约15个非氢原子，例如碳、氧、氮、硫、卤素及其组合的末端非氨基酸部分。典型的基团包括那些具有如下结构的基团：

其它合适的R⁵基团包括那些具有如下结构的基团：

其中R’为H、Boc、异丁酰基、丙酮酰基(pyruvyl)或丙烯酰基。

在另一个实施方案中，R⁵为含有荧光团的肽。合适的R⁵基团包括-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-(荧光团)。其它合适的R⁵基团具有包括那些具有如下所示结构的荧光团。

在另一个实施方案中，R⁵为与支持物结合，例如共价结合的氨基酸残基、多肽或化学部分或连接基，所述的支持物例如为玻璃或硅胶板、琼脂糖珠或其它聚合物珠等。在一个实施方案中，R⁵为具有如下通式的基团：

其中SS表示固相支持物。在另一个实施方案中，所述的化学连接基或部分为有机连接基，诸如亚烷基或亚链烯基，例如含有1-20个碳原子的亚烷基或亚链烯基。在另一个实施方案中，R⁵可以表示为L-SS，其中L为二价有机连接基且SS为固相支持物。固相支持物为本领域中公知的。例如，参见MacLean等《纯化学应用》(Pure Appl.Chem.)71(12)：2349-2365(1999)。

当R⁵含有N-甲基-亮氨酸残基时，该残基的α-碳原子可以具有(R)或(S)立体化学。R⁵内的其它氨基酸残基可以具有(R)或(S)立体化学，但在一个实施方案中，它们在其α-碳原子上具有(S)立体化学。当R⁵含有乳酸残基时，该乳酸残基优选为(S)-乳酸残基。在另一个实施方案中，R⁵内非直接与通式I氮原子连接的亮氨酸(或N-甲基-亮氨酸)残基(如果存在)的每个氨基酸残基具有(S)立体化学。

在另一个实施方案中，R⁵含有荧光团部分，例如与上述氨基酸侧链之一连接的荧光团。

在一个实施方案中，Y为H。在另一个实施方案中，Y为羟基保护基。Y上可以存在的羟基保护基的实例包括烷基-取代的甲硅烷基部分、芳基-取代的甲硅烷基部分或被烷基和芳基部分取代的硅烷。有用的羟基保护基的实例为三异丙基甲硅烷基部分(TIPS)。另一个合适的保护基包括三甲代甲硅烷基。可以在通式I的Y上使用的其它羟基保护基是本领域中公知的且描述在参考文献中，诸如Green和Wuts(1991，《有机合成中的保护基》(Protective Groups in Organic Synthesis)第2版，Wiley，New York)。

第一个亚类的化合物为通式IA的化合物，其中R⁵为具有如下结构的部分：

其中：

R¹和R²独立为H或C_1-4烷基，或R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环；

R³选自氨基酸侧链和第一种荧光团；

R⁴为H或CH₃；

R⁵为H、胺保护基、氨基酸残基、多肽、含有第二种荧光团的肽、与固相支持物结合的化学部分或含有约1-约30个非氢原子的部分；

R⁶为异亮氨酸侧链或缬氨酸侧链；

X为O或NH；且

Y为H或羟基保护基；

在这第一个亚类内的一个实施方案中，R¹和R²为H。在另一个实施方案中，R¹和R²为C_1-4烷基，例如甲基。在另一个实施方案中，R¹为H且R²为甲基。在另一个实施方案中，R¹为甲基且R²为H。在另一个实施方案中，R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环。即在一个实施方案中，R¹和R²共同形成1，3-戊二基。

在这第一个亚类内的一个实施方案中，R³为氨基酸，特别是天然存在的氨基酸的侧链。在一个实施方案中，R³为：氨基酸侧链，诸如异亮氨酸侧链，即2-丁基部分，优选具有(R)立体化学；缬氨酸侧链，即2-丙基部分；丙氨酸侧链，即甲基部分；正亮氨酸侧链，即1-丁基部分；正缬氨酸侧链，即1-丙基部分；亮氨酸侧链，即异丁基部分，优选具有(S)立体化学；苯丙氨酸侧链，即苄基部分；组氨酸侧链，即4-咪唑基甲基部分；色氨酸侧链，即3-吲哚基甲基部分；酪氨酸侧链，即4-羟基苄基部分；精氨酸侧链，即4-胍基丁基部分；和赖氨酸侧链，即4-氨基丁基部分。

在这第一个亚类内的另一个实施方案中，R³为非天然存在的氨基酸的侧链。非天然存在的氨基酸是本领域中公知的。例如，合适的非天然存在的氨基酸包括，但不限于环亮氨酸、高环亮氨酸、9-蒽基-丙氨酸、3-(3-苯并噻唑基)丙氨酸、3-环己基丙氨酸、3，3-二苯基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、3-(2-呋喃基)丙氨酸和3-苯乙烯基(sytryl)丙氨酸、3-(2-噻吩基)丙氨酸、2-苯基甘氨酸、烯丙基甘氨酸、2-环己基甘氨酸、炔丙基甘氨酸、2-(三氟甲基)苯基丙氨酸等。在一个实施方案中，R³为萘基甲基。或者，R³为被OH、OCH₃和OCH₂CH₃、CO(C₆H₅)、F、Cl、Br、I或CH₃和CH₂CH₃取代的苄基。

在这第一个亚类内的另一个实施方案中，R³为第一种荧光团。在另一个实施方案中，R³含有荧光团。为荧光团的部分是本领域中公知的。在一个实施方案中，所述的荧光团为如上所述进一步含有荧光团部分的氨基酸侧链(例如与上述氨基酸侧链之一连接的荧光团)。这类荧光团包括：

在这第一个亚类内的一个实施方案中，R⁵为H、胺保护基、氨基酸残基、多肽或含有第二种荧光团的肽。

在这第一个亚类内的一个实施方案中，本发明包括通式IA的化合物，其中R⁵为氢原子或适合于保护氨基酸的胺保护基。这类保护基是本领域中公知的且在本说明书上下文中涉及。R⁵的合适的保护基包括：例如叔丁氧羰基。合适的保护基的实例可以在参考文献中找到，诸如Green和Wuts(1991，《有机合成中的保护基》(Protective Groups in OrganicSynthesis)，Wiley，New York，第2版)和Bodansky(1993，《肽合成原理》(Principles of Peptide Synthesis)，Springer，Berlin)。

在这第一个亚类内的一个实施方案中，R⁵为氨基酸残基，例如亮氨酸残基或含有两个或多个氨基酸残基的多肽。在某些实施方案中，R⁵基团含有1-10个氨基酸残基。在另一个实施方案中，R⁵基团含有1、2、3、4或5个氨基酸残基。在某些情况中，所述的氨基酸残基或多肽含有一个或多个合适的保护基。这类氨基酸残基和多肽类的实例包括：

-(N-甲基)亮氨酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸；

-(N-CBz-N-甲基)亮氨酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-丙酮酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-谷氨酰胺-焦谷氨酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-谷氨酰胺-环戊酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-亮氨酸-焦谷氨酸；

(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-谷氨酰胺-环戊酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-丙氨酸-亮氨酸-焦谷氨酸；和

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-(N-甲基)丙氨酸-亮氨酸-焦谷氨酸。

在这第一个亚类内的另一个实施方案中，R⁵含有N-缩水甘油基-L-脯氨酸残基。R⁵的合适值为-(N-甲基-R-亮氨酸)-S-脯氨酸-缩水甘油酸。

其它合适的R⁵基团包括那些具有如下所示结构的基团：

R⁵的其它合适的基团包括那些带有除外常见的20种氨基酸之-的氨基酸残基的基团。这类氨基酸的合适的实例是本领域中公知的且包括：例如羟基脯氨酸、脱氢脯氨酸、4-羧基谷氨酸、羟基赖氨酸、N，N-二甲基精氨酸、碘酪氨酸、β-丙氨酸等。在另一个实施方案中，R⁵为含有荧光团的肽。R⁵的另一个合适的基团包括-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-(荧光团)。带有荧光团的其它合适的R⁵包括那些具有如下所述结构的基团。

在另一个实施方案中，R⁵含有具有如下通式的部分：

其中R¹⁰为H、C_1-4烷基或苯基。在该亚类的一个实例中，R¹⁰为H。在该实施方案中，所述部分与形成酰胺键的大环胺基直接结合，即R⁵为如上所示的基团。在另一个实施方案中，所述部分位于R⁵的末端位置上。即所述部分通过另一个部分，例如，氨基酸残基、肽残基或连接基与胺基连接。在另一个实施方案中，如上所示的部分通过酯键与R⁵基团的剩余部分连接。例如，N-缩水甘油基-L-脯氨酸用于制备合适的R⁵部分，而这些合适的R⁵部分用于制备通式I、IA或II的化合物；或者，N-缩水甘油基-L-脯氨酸与大环的游离胺直接偶联，所述的大环例如为化合物35、脱保护的61、脱保护的74、脱保护的85或脱保护的92。在另一个实施方案中，使N-缩水甘油基-L-脯氨酸与R⁵基团的末端反应，例如如方案17中所示与脱保护的化合物63的游离胺反应。

在这第一个亚类内的另一个实施方案中，R⁵为与支持物结合，例如共价结合的氨基酸残基、多肽或化学部分或连接基，所述的支持物例如为玻璃或硅胶板、琼脂糖珠或其它聚合物珠等。在一个实施方案中，R⁵为具有如下通式的基团：

或

在这第一个亚类内的另一个实施方案中，R⁵含有荧光团部分，例如与上述氨基酸侧链之一连接的荧光团。

在这第一个亚类内的另一个实施方案中，R⁵为含有约1-约50个非氢原子，例如碳、氮、氧、硫、卤素及其混合物的部分。在这第一个亚类内的另一个实施方案中，R⁵为含有约1-约40个非氢原子的部分。在这第一个亚类内的另一个实施方案中，R⁵为含有约1-约30个非氢原子的部分。在这第一个亚类内的另一个实施方案中，R⁵为含有约1-约20个非氢原子的部分。在这第一个亚类内的另一个实施方案中，R⁵为含有约1-约10个非氢原子的部分。合适的部分包括，但不限于肽类、碳水化合物、糖类、寡糖类、类固醇、生物活性分子、脂质、核苷酸、核苷、维生素等。这类部分与大环的胺直接结合或通过有机连接基与大环的胺连接。含有约1-约50个非氢原子的其它合适的部分包括，但不限于带有一个或多个如下基团的部分：烷基、链烯基、炔基、环烷基、烷氧基、环烷氧基、卤素、氨基、硫代、酮基、芳基、杂芳基、卤代、卤代烷基、芳基、杂环、环烷基、杂芳基、烷基、链烯基、炔基、芳烷基、芳基链烯基、芳基炔基、杂芳烷基、杂芳基链烯基、杂芳基炔基、环烷基烷基、杂环烷基、羟基烷基、氨基烷基、羧基烷基、烷氧基烷基、硝基、氨基、脲基、氰基、酰氨基、羟基、巯基、酰氧基、叠氮基、烷氧基、羧基、氨基羰基、烷基巯基及其组合。

在这第一个亚类内的一个实施方案中，Y为H。在另一个实施方案中，Y为羟基保护基。Y上可以存在的羟基保护基的实例包括烷基-取代的甲硅烷基部分、芳基-取代的甲硅烷基部分或被烷基和芳基部分取代的硅烷。有用的羟基保护基的实例为三异丙基甲硅烷基部分(TIPS)。另一个合适的保护基包括三甲代甲硅烷基。可以在通式IA的Y上使用的其它羟基保护基是本领域中公知的且描述在参考文献中，诸如Green和Wuts(1991，《有机合成中的保护基》(Protective Groups in OrganicSynthesis)第2版，Wiley，New York)。

第二个亚类的化合物为通式IA的化合物，其中R⁵为使得化合物具有如下结构的部分：

其中R⁷为氢或可以酶裂解的化学部分(即酶可裂解的部分)。本文所用的酶可裂解的部分可以包括可以在有特异性酶存在下被裂解(即以化学方式被分离的)的任何化学部分。能够以化学方式使酶可裂解部分分离的酶的实例包括羧肽酶、β-内酰胺酶、β-半乳糖苷酶、青霉素V-酰胺酶、胞嘧啶脱氨酶、硝基还原酶、碱性磷酸酶、β-葡萄糖苷酸酶和催化抗体。可以引入本文所述的化合物的酶可裂解部分的实例包括头孢菌素类、β-葡萄糖苷类、磷酸盐、焦磷酸盐、β-D-半乳糖苷类、硝基苯胺、胞嘧啶、氨基甲酸酯类、肽类和氨基酸。

在该亚类内的另一个实施方案中，R⁷为酶可裂解的部分，诸如与谷氨酰胺-焦谷氨酸连接的二肽或具有如下之一结构的部分：

或

通过接触β-内酰胺酶裂解上述所示的头孢菌素。在一个实施方案中，具有上述碳水化合物结构的R⁷取代基为钠盐或钾盐形式。

在酶裂解酶可裂解部分后，所得tamandarin类似物表现出一种或多种本文所述的生理活性。本发明带有酶可裂解部分的tamandarin类似物可以任选在裂解酶可裂解部分前表现出这些活性。然而，在优选的实施方案中，所述的类似物仅在从其中裂解酶可裂解部分后表现出治疗活性。

如上所述，具有通式I结构的tamandarin类似物可以与支持物结合。对该支持物的鉴定并不关键。该支持物基本上可以为这类类似物可以通过经R⁵部分共价结合而结合的任意材料。支持物材料的实例包括结合的硅酸盐、交联琼脂糖、聚丙烯酰胺、葡聚糖和烯丙基葡聚糖。可以使用反应性化学部分通过化学方式修饰这类支持物材料以便有利于所述类似物与该支持物共价结合。这种类型的化学修饰是本领域中公知的且例如可以包括用溴化氰基团、环氧化物基团、tresyl基和羧基己基修饰支持物。制备支持物和随后使化合物与该支持物结合的方案在本领域中可以得到且可以由本领域技术人员修改以用于本文所述的tamandarin类似物。

通式IA有用的亚类化合物为含有如下基团的化合物：荧光取代基，即光反应性部分，诸如具有如下结构的部分：

或例如在R³或R⁵上的与支持物结合的部分。例如，带有这类光反应性部分的化合物是有用的或标记的蛋白质。

荧光取代基和光反应性部分在本领域中是公知的。其它合适的光反应性R⁵基团包括：

另一亚类有用的化合物为通式IA的化合物，其中R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环；R³为任选被OH、OCH₃、CO(C₆H₅)、F、Cl、Br、I、CH₃和C₂H₅中的一个或多个，优选OCH₃取代的苄基；R⁴为H；R⁵为上述实施方案中定义的任意一个；R⁶为缬氨酸侧链；X为O；且Y为H。

另一亚类有用的化合物为通式IA的化合物，其中R¹为H；R²为CH₃；R³为任选被OH、OCH₃、CO(C₆H₅)、F、Cl、Br、I、CH₃和CH₂CH₃中的一个或多个且优选OCH₃取代的苄基；R⁴为CH₃；R⁵为上述实施方案中定义的任意一个；R⁶为缬氨酸侧链；X为O；且Y为H。

另一亚类有用的化合物为通式IA的化合物，其中R¹为CH₃；R²为CH₃；R³为任选被OH、OCH₃、CO(C₆H₅)、F、Cl、Br、I、CH₃和CH₂CH₃中的一个或多个且优选OCH₃取代的苄基；R⁴为CH₃；R⁵为上述实施方案中定义的任意一个；R⁶为缬氨酸侧链；X为O；且Y为H。

另一亚类有用的化合物为通式IA的化合物，其中R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环；R³为萘基甲基；R⁴为CH₃；R⁵为上述实施方案中定义的任意一个；R⁶为缬氨酸侧链；X为O；且Y为H。

通式IA的另一亚类有用的化合物为具有如下通式的化合物：

其中R¹-R⁶、X和Y如对通式IA的化合物所定义。

本发明的另一个方面为通式II的化合物及其药物上可接受的盐：

其中R⁸如对R⁵所定义。在一个实施方案中，R⁸为H、胺保护基或-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸。

在本文所述的方法和组合物中有用的合适的新化合物的实例包括通式I、IA或II的化合物，其中：

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为苄基，R⁴为CH₃，R⁵为(N-甲基-R-亮氨酸)-S-脯氨酸-S-乳酸，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物36)；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为苄基，R⁴为CH₃，R⁵为H，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为苄基，R⁴为CH₃，R⁵为H·HCl，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物35)；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为苄基，R⁴为CH₃，R⁵为Boc，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为TIPS(化合物34)；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为苄基，R⁴为CH₃，R⁵为Boc，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为H，R⁵为(N-甲基-R-亮氨酸)-S-脯氨酸-S-乳酸，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物62)；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为H，R⁵为Boc，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物61)；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为H，R⁵为H，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为H，R⁵为(N-甲基-R-亮氨酸)-S-脯氨酸-S-丙酮酸，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物64)；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为H，R⁵为(N-甲基-R-亮氨酸)，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为H，R⁵为N-Cbz-N-甲基-R-亮氨酸，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物63)；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为H，R⁵为H·HCl，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H；

R¹为H，R²为CH₃，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为CH₃，R⁵为(N-甲基-R-亮氨酸)-S-脯氨酸-S-乳酸，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物75)；

R¹为H，R²为CH₃，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为CH₃，R⁵为Boc，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物74)；

R¹为H，R²为CH₃，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为CH₃，R⁵为H，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H。

R¹为CH₃，R²为CH₃，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为CH₃，R⁵为(N-甲基-R-亮氨酸)-S-脯氨酸-S-乳酸，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物150)；

R¹为CH₃，R²为CH₃，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为CH₃，R⁵为Boc，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物85)；

R¹为CH₃，R²为CH₃，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为CH₃，R⁵为H，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为2-萘基甲基，R⁴为CH₃，R⁵为(N-甲基-R-亮氨酸)-S-脯氨酸-S-乳酸，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物93)；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为2-萘基甲基，R⁴为CH₃，R⁵为Boc，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H(化合物92)；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为2-萘基甲基，R⁴为CH₃，R⁵为H，R⁶为缬氨酸侧链，X为O，且Y为H；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为CH₃，R⁵为(N-甲基-R-亮氨酸)-S-脯氨酸-S-乳酸，R⁶为缬氨酸侧链，X为NH，且Y为H；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为CH₃，R⁵为H，R⁶为缬氨酸侧链，X为NH，且Y为H；

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为CH₃，R⁵为Boc，R⁶为缬氨酸侧链，X为NH，且Y为H；

本发明还包括通式I、IA或II化合物的盐。术语盐指的是包括通式I、IA或II化合物的酸-和/或碱-加成的盐。可以通过将合适的酸加入到包括通式I、IA或II的化合物中形成酸加成的盐。可以通过将合适的碱加入到包括通式I、IA或II的化合物中形成碱加成的盐。所述的酸或碱基本上不会降解、分解或破坏所述通式I、IA或II的化合物。合适的盐的实例包括盐酸盐、氢溴酸盐、乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、草酸盐和琥珀酸盐。其它合适的盐包括钠盐、钾盐、碳酸盐和氨丁三醇盐。

还可以理解本发明包括通式I、IA或II的化合物的互变体。互变体是本领域众所周知的且包括酮-烯醇互变体。

通式I、IA或II的化合物还可以溶剂化，包括水合。水合可以在制备化合物或包括这些化合物的组合物期间发生或水合可以因所述化合物的吸湿性而在一定时间内发生。

通式I、IA或II的某些化合物可以为称作“前体药物”的衍生物。表达方式“前体药物”指的是与药物相比具有强化的递送特征和治疗价值并通过酶或化学过程被转化成活性药物的已知直接起作用的药物。前体药物是本发明化合物的衍生物，其带有代谢可裂解基团且通过溶解或在生理条件下成为在体内具有药物活性的本发明化合物。酸性衍生物形式可以提供在哺乳动物生物体内溶解度、组织相容性或延缓释放的优势(参见Bundgard，H.，《前体药物设计》(Design of Prodrugs)，7-9，21-24页，Elsevier，Amsterdam 1985)。前体药物包括本领域技术人员众所周知的衍生物，例如，通过使母体酸与合适的醇或酰胺类反应制备的酯类，所述的酰胺类通过使母体酸性化合物与胺反应制备。

当在任意成分或通式I中发生一次以上的任何变化时，除非另有说明，它在每次出现时的定义与在每另一次出现时的定义无关。此外，取代基和/或变化形式的组合是允许的，唯一的条件是这类组合产生稳定的化合物。

还可以理解美国专利US6,509,315中公开的化合物不包括在如上述条件中所述的本发明中。

定义

作为本文所用的下列术语中的每一个具有与其在本部分中相关的含义。

本文所用的某些氨基酸残基(特别是20种常见的氨基酸)由其完整的名称、相当于它们的三字母密码或相当于它们的单字母密码表示，如下所示：

完整名称	三字母密码	单字母密码
完整名称	三字母密码	单字母密码	天冬氨酸	Asp	D
谷氨酸	Glu	E	天冬氨酸	Asp	D
谷氨酸	Glu	E	赖氨酸	Lys	K
精氨酸	Arg	R	赖氨酸	Lys	K
精氨酸	Arg	R	组氨酸	His	H

酪氨酸	Tyr	Y
酪氨酸	Tyr	Y	半胱氨酸	Cys	C
天冬酰胺	Asn	N	半胱氨酸	Cys	C
天冬酰胺	Asn	N	谷氨酰胺	Gln	Q
丝氨酸	Ser	S	谷氨酰胺	Gln	Q
丝氨酸	Ser	S	苏氨酸	Thr	T
甘氨酸	Gly	G	苏氨酸	Thr	T
甘氨酸	Gly	G	丙氨酸	Ala	A
缬氨酸	Val	V	丙氨酸	Ala	A
缬氨酸	Val	V	亮氨酸	Leu	L
异亮氨酸	Ile	I	亮氨酸	Leu	L
异亮氨酸	Ile	I	甲硫氨酸	Met	M
脯氨酸	Pro	P	甲硫氨酸	Met	M
脯氨酸	Pro	P	苯丙氨酸	Phe	F
色氨酸	Trp	N	苯丙氨酸	Phe	F

本文所用的术语“氨基酸侧链”指的是含有不包括α-碳原子的氨基酸的所有原子、与α-碳结合的氢原子、α-羧基部分和α-胺部分的所有原子的部分。作为实例，“丙氨酸侧链”指的是甲基，“缬氨酸侧链”指的是2-丙基(或异丙基)，且3-环己基丙氨酸侧链指的是环己基甲基(即C₆H₁₁-CH₂-)。

“抑制”细胞中的过程(例如抑制蛋白质合成、抑制细胞生长、抑制细胞周期发展、抑制细胞增殖或抑制肿瘤发生)指的是该过程进行的速率减少(例如，至少10％、25％、50％、75％、90％、95％乃至100％)；该过程开始的速率减少(例如，至少10％、25％、50％、75％、90％、95％乃至100％)；或它们两者。

“促进”细胞中的过程(例如促进编程性细胞死亡)指的是该过程进行的速率增加(例如，至少10％、25％、50％、75％、90％、95％乃至100％)；该过程开始的速率增加(例如，至少10％、25％、50％、75％、90％、95％乃至100％)；或它们两者。

本文所用的术语“药物上可接受的载体”指的是可以与如本文所述的tamandarin类似物或片段合并且在合并后可以对受试者(例如人或其它动物)给药的化学组合物。

本文所用的术语“生理上可接受的”酯或盐指的是如本文所述的tamandarin类似物或片段的酯或盐形式，它与药物组合物中的其它组分相容且对该组合物所给予的受试者无害。

本文所用的药物组合物的“非肠道给药”包括给受试者的组织做物理破口并通过该组织上的破口给予药物组合物的任意给药途径。非肠道给药由此包括，但不限于通过注射组合物给予药物组合物、通过手术切口施用组合物、通过透入组织的非手术创口施用组合物等。特别地，非肠道给药包括，但不限于皮下、腹膜内、肌内、胸骨内注射和渗透析输注技术。

本文所用的术语“抗病毒活性”指的是预防细胞中的病毒复制、预防病毒感染细胞或使病毒感染细胞的生理作用逆转。抗病毒药为递送至细胞时表现出抗病毒活性的物质组合物。抗病毒药为众所周知的且描述在文献中。作为实例，认为AZT(齐多夫定)是预防人细胞中HIV复制的抗病毒药。

描述本文所用的不同化学部分的术语为本领域中的术语且本领域技术人员可以理解。

本文所用的术语“高脯氨酸”指的是在环上还含有另外的亚甲基，即含有6-元环的脯氨酸部分。

本文所用的术语“非-氨基酸部分”指的是不含氨基和羧基的部分。这类部分以上述对R⁵所述为典型。非氨基酸部分可以为例如上述所示的那些R⁵基团末端上的部分。

本文所用的术语“保护基”自身或作为另一个基团的组成部分指的是易于在需要防止所述官能基发生不需要的化学反应时与特定官能基连接(并形成被保护的官能基)且然后从所述被保护的官能基上被除去而显现出原始官能基的化学部分。例如，参见Green和Wuts(1991，《有机合成中的保护基》(Protective Groups in Organic Synthesis)，Wiley，New York，第2版，1-9页)，将该文献的全部内容引入本文作为参考。保护基的实例是本领域众所周知的。合适的保护基的实例可以在参考文献中找到，诸如Green和Wuts(1991，《有机合成中的保护基》(Protective Groups in Organic Synthesis)，Wiley，New York，第2版)和Bodansky(1993，《肽合成原理》(Principles of PeptideSynthesis)，Springer，Berlin)。保护基的具体的非限制性实例包括乙酰基、苄基、叔丁氧羰基(Boc)、苯甲酰基、二甲基异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、甲氧基甲基和苄氧羰基。与所述固体支持物连接的保护基也是合适的。

本文所用的术语“胺保护基”或作为另一个基团的组成部分指的是易于在需要防止所述胺发生不需要的化学反应时与胺基连接(并形成被保护的胺)且然后从所述被保护的胺基上被除去而显现出原始胺的化学部分。胺保护基的实例是本领域众所周知的。合适的胺保护基的实例可以在参考文献中找到，诸如Green和Wuts(1991，《有机合成中的保护基》(Protective Groups in Organic Synthesis)，Wiley，New York，第2版)和Bodansky(1993，《肽合成原理》(Principles of PeptideSynthesis)，Springer，Berlin)。胺保护基的具体的非限制性实例包括：氨基甲酸酯类，诸如叔丁氧羰基、甲氧羰基和苄氧羰基；酰胺类，诸如甲酰胺和三氟乙酰胺；和环状亚胺类，诸如N-苯二酰亚氨基。

本文所用的术语“羟基保护基”或作为另一个基团的组成部分指的是易于在需要防止所述胺发生不需要的化学反应时与羟基连接(并形成被保护的羟基)且然后从所述被保护的羟基上被除去而显现出原始羟基的化学部分。羟基保护基的实例是本领域众所周知的。合适的羟基保护基的实例可以在参考文献中找到，诸如Green和Wuts(1991，《有机合成中的保护基》(Protective Groups in Organic Synthesis)，Wiley，New York，第2版)和Bodansky(1993，《肽合成原理》(Principles ofPeptide Synthesis)，Springer，Berlin)。羟基保护基的具体的非限制性实例包括：醚类，诸如甲氧基甲基、四氢吡喃基和苄基；甲硅烷基醚类，诸如三甲代甲硅烷基和三异丙基甲硅烷基；和碳酸盐类，诸如9-芴基甲基和苄基。

尽管本文未对每一个术语提供具体的定义，但是每一个术语均为本领域技术人员可以理解。

组合物

本发明的组合物包括药物组合物，该药物组合物包括如上述所定义的通式I、IA或II的新化合物和一种或多种药物上可接受的赋形剂。本发明优选的组合物为包括选自上述一种或多种实施方案的化合物和一种或多种药物上可接受的赋形剂的药物组合物。可以按照现有技术众所周知的方式，诸如通过参考如《Remington氏药物科学》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)Mack Publishing Co.，Easton，Pa.，USA来配制包括一种或多种通式I、IA或II的化合物的药物组合物。

在本发明的一个实施方案中，所述的组合物包括选自上述各实施方案中的一种或多种的化合物的组合物。

本发明包括含有至少一种本文所述的tamandarin类似物和生理活性片段的药物组合物。这类组合物可以包括所述的类似物/片段和药物上可接受的载体。作为实例，本发明的药物组合物包括药物上可接受的载体和具有通式I、IA或II结构作为活性剂的tamandarin类似物。作为另一个实例，本发明的药物组合物包括药物上可接受的载体和下列化合物中的一种或多种：

在另一个实施方案中，本发明的药物组合物包括一种或多种其它药物活性剂，诸如其它肿瘤治疗剂，其它抗感染药等。

例如，可以在本文所述的方法中使用这类药物组合物并用于抑制蛋白质合成、细胞周期发展、肿瘤发生、生长和细胞内增殖中的一种或多种。此外，这类组合物可以在本文所述的方法中用于促进细胞中的编程性细胞死亡。

可以以口服固体制剂、眼用制剂、栓剂、气溶胶、局部用制剂或其它类似制剂的形式经全身给予用于本发明方法中的药物组合物。除活性剂外，这类药物组合物可以含有药物上可接受的载体和其它用于促进和有利于给药的组分。还可以将其它可能的制剂，诸如纳米粒、脂质体、重新包封的红细胞和基于免疫的系统用于给予本发明方法中的活性剂。

本发明包括由活性剂组成的适合于对受试者给药的药物组合物，或该药物组合物包括活性剂和一种或多种药物上可接受的载体、一种或多种其它组分或这些组分中某些的组合。活性剂可以以生理上可接受的酯或盐形式，诸如与生理上可接受的阳离子或阴离子的组合存在于药物组合物中，正如本领域中众所周知的。

可以通过任意已知方法或下文研发的方法制备本文所述的药物组合物。一般来说，这类制备方法包括下列步骤：将活性剂与载体或一种或多种其它辅助组分混合，且然后如果必要或需要，使产物成形或将其包装成所需的单一或多剂量单位。

尽管本文提供的对药物组合物的描述主要涉及在伦理上适合于对人给药，但是本领域技术人员可以理解这类组合物一般适合于对所有种类的动物给药。可以充分理解对适合于对人给药的药物组合物进行改变以便使这些组合物适合于对各种动物给药，且本领域技术人员可以设计并仅通过普通的实验来进行这类改变(如果有的话)。所关注的本发明药物组合物给药的受试者包括，但不限于人和其它灵长类以及哺乳动物，包括与商业相关的哺乳动物，诸如牛、猪、马、绵羊、猫和狗。

可以制备、包装或销售适合于口服、直肠、阴道、非肠道、局部、肺、鼻内、口含、眼用或其它给药途径的制剂形式的用于本发明的药物组合物。其它关注的制剂包括投射的纳米粒(projectednanoparticles)、脂质体制剂、含有活性剂的重新包封的红细胞和基于免疫的制剂。

可以将本发明的药物组合物作为单一单位剂量或作为多个单一单位剂量以批量方式制备、包装或销售。本文所用的“单位剂量”是包括预定量活性剂的药物组合物的个别量。活性剂的量一般等于对受试者给药的活性剂剂量或这类剂量的合适的部分，诸如这类剂量的二分之一或三分之一。

可以使用常规技术制备本发明药物组合物的控释或缓释制剂。

可以以离散的固体剂量单位的形式制备、包装或销售适合于口服给药的本发明药物组合物的制剂，包括，但不限于片剂、硬胶囊或软胶囊、扁囊剂、药片或锭剂，它们各自含有预定量的活性剂。适合于口服给药的其它制剂包括，但不限于粉剂或颗粒剂、含水或油混悬液、水溶液或油溶液或乳剂。

本文所用的“油状”液为包括含碳的液体分子且表现出低于水的极性的液体。

例如，可以通过压制或模制活性剂任选与一种或多种其它组分制备包括活性剂的片剂。可以通过在合适的装置中压制任选混合了粘合剂、润滑剂、赋形剂、表面活性剂和分散剂中的一种或多种的自由流动形式的活性剂，诸如粉末或颗粒剂来制备压制片。可以通过在合适的装置中模制活性剂、药物上可接受的载体和至少足以湿润该混合物的液体的混合物来制备模制片。用于制备片剂的药物上可接受的赋形剂包括，但不限于惰性稀释剂、成粒剂和崩解剂、粘合剂和润滑剂。已知的分散剂包括，但不限于马铃薯淀粉和羟基乙酸淀粉钠。已知的表面活性剂包括，但不限于十二烷基硫酸钠。已知的稀释剂包括，但不限于碳酸钙、碳酸钠、乳糖、微晶纤维素、磷酸钙、磷酸氢钙和磷酸钠。已知的成粒剂和崩解剂包括，但不限于玉米淀粉和藻酸盐。已知的粘合剂包括，但不限于明胶、阿拉伯胶、预凝胶化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和羟丙基甲基纤维素。已知的润滑剂包括，但不限于硬脂酸镁、硬脂酸盐、二氧化硅和滑石粉。

可以不给片剂包衣或可以使用实现在受试者胃肠道延缓崩解的已知方法给片剂包衣，由此使活性剂持续释放和吸收。作为实例，可以将诸如甘油单硬脂酸酯或二硬脂酸甘油酯这类物质用于给片剂包衣。作为另一个实例，可以使用美国专利US4,256,108、US4,160,452和US4,265,874中所述的方法给片剂包衣而形成渗透受控的释放片。片剂可以进一步包括增甜剂、矫味剂、着色剂、防腐剂或它们的组合物以便提供美观和适口的药物制剂。

可以使用生理上可降解的组成，诸如明胶制备包括活性剂的硬胶囊。这类硬胶囊包括活性剂且可以进一步包括其它组分，包括：例如惰性固体稀释剂，诸如碳酸钙、磷酸钙或高岭土。

可以使用生理上可降解的组成，诸如明胶制备包括活性剂的软胶囊。这类软胶囊包括混合有水或油介质的活性剂，所述的油介质诸如花生油、液体石蜡或橄榄油。

可以以液体形式或在使用前用水或其它合适的载体再溶解的干品形式制备、包装和销售适合于口服给药的本发明药物组合物的液体制剂。

可以使用使活性剂在含水或油载体中混悬的常规方法制备液体混悬剂。含水载体包括：例如水和等渗盐水。油载体包括：例如杏仁油；油酯类；乙醇；植物油，诸如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油；分级分离的植物油；和矿物油，诸如液体石蜡。液体混悬剂可以进一步包括一种或多种其它组分，包括，但不限于悬浮剂、分散剂或湿润剂、乳化剂、缓和剂、防腐剂、缓冲剂盐、调味剂、着色剂和增甜剂。油状混悬剂可以进一步包括增稠剂。已知的悬浮剂包括，但不限于山梨醇糖浆、氢化食用脂、藻酸钠，聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶、阿拉伯胶和纤维素衍生物，诸如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素。已知的分散剂或湿润剂包括，但不限于天然存在的磷脂类，诸如卵磷脂、烯化氧与脂肪酸、长链脂族醇、来源于脂肪酸和己糖醇的偏酯或与来源于脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物(分别例如聚氧乙烯硬脂酸酯、十七烷基乙烯氧基鲸蜡醇、聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯和聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯)。已知的乳化剂包括，但不限于卵磷脂和阿拉伯胶。已知的防腐剂包括，但不限于对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯、抗坏血酸酯和山梨酸酯。已知的增甜剂包括：例如，甘油、丙二醇、山梨醇、蔗糖和糖精。用于油状混悬液的已知增稠剂包括：例如，蜂蜡、硬石蜡和鲸蜡醇。

可以按照与液体混悬剂基本上相同的方式制备活性剂在含水或油溶剂中的液体溶液，主要的差别在于活性剂溶于而非悬浮于溶剂中。本发明药物组合物的液体溶液可以包括有关对液体混悬剂所述的各成分，可以理解悬浮剂对活性剂在溶剂中辅助溶解并非必要。含水溶剂包括：例如，水和等渗盐水。油溶剂包括：例如，杏仁油；油酯类；乙醇；植物油，诸如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油；分级分离的植物油；和矿物油，诸如液体石蜡。

可以使用已知方法制备本发明药物制剂的粉剂和颗粒剂。可以将这类制剂直接对受试者给药，例如，用于形成片剂、填充胶囊或通过向其中添加水或油载体制备含水或油混悬剂或溶液。这些制剂各自可以进一步包括分散剂或湿润剂、悬浮剂和防腐剂中的一种或多种。在这些制剂中还可以包括其它赋形剂，诸如填充剂和增甜剂、矫味剂或着色剂。

在另一个实施方案中，可以以水包油乳剂或油包水乳剂的形式制备、包装或销售本发明的药物组合物。油相可以为：植物油，诸如橄榄油或花生油；矿物油，诸如液体石蜡；或它们的组合。这类组合物可以进一步包括一种或多种乳化剂，诸如：天然存在的树胶，诸如阿拉伯胶或西黄蓍胶；天然存在的磷脂类，诸如大豆磷脂或卵磷脂；来源于脂肪酸和己糖醇酐类的组合的酯类或偏酯类，诸如失水山梨糖醇单油酸酯；和这类偏酯与环氧乙烷的缩合产物，诸如聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯。这些乳剂还可以含有其它组分，包括：例如，增甜剂或矫味剂。

在另一个实施方案中，可以以适合于直肠给药的制剂形式制备、包装或销售本发明的药物组合物。例如，这类组合物可以为栓剂、保留灌肠剂和用于直肠或结肠灌洗的溶液的形式。

可以通过将活性剂与非刺激性药物上可接受的赋形剂合并制备栓剂，所述的赋形剂在通常的室温(即约20℃)下为固体，而在受试者的直肠温度(即健康人体内的约37℃)下为液体。合适的药物上可接受的赋形剂包括，但不限于可可脂、聚乙二醇类和各种甘油酯类。栓剂可以进一步包括其它组分，包括，但不限于抗氧化剂和防腐剂。

可以通过将活性剂与药物上可接受的液体载体合并制备用于直肠或结肠灌洗的保留灌肠剂或溶液。正如本领域中众所周知的，可以使用适合于对受试者直肠解剖结构的递送装置给予灌肠剂并可将其包装在所述装置内。灌肠剂可以进一步包括各种其它组分，包括，但不限于抗氧化剂和防腐剂。

可以以适合于阴道给药的制剂形式制备、包装或销售本发明的药物组合物。例如，这类组合物可以为栓剂、浸渍的或涂敷的可插入阴道的物质，诸如棉塞、灌洗剂或用于阴道冲洗的溶液。

用化学组合物浸渍或涂敷物质的方法在本领域中是公知的且包括，但不限于使化学组合物沉积或结合在表面上的方法、在物质合成过程中将化学组合物引入该物质的结构中的方法(即使用生理可降解的物质)和使含水或油溶液或混悬液吸入吸附剂材料、随后进行干燥或不进行干燥的方法。

可以通过将活性剂与药物上可接受的液体载体合并制备用于阴道冲洗的灌洗剂或溶液。正如本领域中众所周知的，可以使用适合于对受试者阴道解剖结构的递送装置给予灌洗剂并可将其包装在所述装置内。灌洗剂可以进一步包括各种其它组分，包括，但不限于抗氧化剂、抗菌剂、抗真菌剂和防腐剂。

适合于非肠道给药的药物组合物的制剂可以包括合并有药物上可接受的载体的活性剂，所述的载体诸如为无菌水或无菌等渗盐水。可以以适合于浓注给药(bolus administration)或连续给药的形式制备、包装或销售这类制剂。可以以单位剂型的形式制备、包装或销售可注射制剂，诸如含有防腐剂的安瓿或多剂量容器形式。用于非肠道给药的制剂包括，但不限于在油或含水载体中的混悬液、溶液、乳剂、糊剂和可植入缓释或生物可降解制剂。这类制剂可以进一步包括一种或多种其它组分，包括，但不限于悬浮剂、稳定剂或分散剂。在用于非肠道给药的制剂的一个实施方案中，将活性剂制成在非肠道给予再溶解组合物前用合适的载体(例如灭菌无热原水)再溶解的干燥(即粉末或颗粒)形式。

在另一个实施方案中，以无菌可注射的含水或油混悬液或溶液形式制备、包装或销售药物组合物。可以按照公知技术配制这种混悬液或溶液，且它们除包括活性剂外，还可以包括其它组分，诸如本文所述的分散剂、湿润剂或悬浮剂。可以使用无毒性的非肠道可接受的稀释剂或溶剂，诸如水或1，3-丁二醇制备这类无菌可注射制剂。其它可接受的稀释剂和溶剂包括，但不限于林格液、等渗氯化钠溶液和固定油类，诸如合成的单酸甘油酯类或二脂酰甘油酯类。有用的其它非肠道给药制剂包括这类制剂，它们包括在脂质体制剂中为微晶形式的活性剂或作为生物可降解聚合物系统中的成分。用于缓释或植入的组合物可以包括药物上可接受的聚合物或疏水材料，诸如乳剂、离子交换树脂、微溶的聚合物或微溶的盐。

适合于局部给药的制剂包括，但不限于：液体或半液体制剂，诸如搽剂、洗剂；水包油或油包水乳剂，诸如霜剂、软膏剂或糊剂；和溶液或混悬液。例如，局部给药制剂可以包括约1％-约10％(w/w)的活性剂，不过，活性剂的浓度可以高至活性剂在溶剂中的溶解度极限。用于局部给药的制剂可以进一步包括本文所述的其它组分中的一种或多种。

可以制备、包装或销售适合于经口腔进行肺部给药的制剂形式的本发明药物组合物。这类制剂可以包括含有活性剂且具有约0.5-约7纳米且优选约1-约6纳米直径的干颗粒。便利的是这类组合物为使用装置给药的干粉形式，这类装置包括抛射剂流可以定向分散粉末的干粉贮器或使用自推进的溶剂/分配粉末的容器，诸如在密封容器中的包括溶于或悬浮于低沸点抛射剂中的活性剂的装置。在一个实施方案中，这类粉末包括颗粒，其中按重量计至少98％的颗粒具有大于0.5纳米的直径且按数量计至少95％的颗粒具有小于7纳米的直径。在另一个实施方案中，按重量计至少95％的颗粒具有大于1纳米的直径且按数量计至少90％的颗粒具有小于6纳米的直径。在一个实施方案中，干粉组合物包括固体细粉稀释剂，诸如糖，且便利的是将其制成单位剂型。

低沸点抛射剂一般包括在大气压下具有低于65°F沸点的液体抛射剂。在一个实施方案中，抛射剂可以占组合物的50-99.9％(w/w)且活性剂可以占组合物的0.1-20％(w/w)。抛射剂可以进一步包括其它组分，诸如液体非离子或固体阴离子表面活性剂或固体稀释剂(优选具有与包括活性剂的颗粒相同等级的颗粒大小)。

为肺部递送配制的本发明药物组合物还可以提供溶液或混悬液滴剂形式的活性剂。可以将这类制剂作为任选无菌的包括活性剂的含水或稀醇的溶液或混悬液形式制备、包装或销售，且便利的是可以使用任意喷雾或雾化装置给予它们。这类制剂可以进一步包括一种或多种其它组分，包括，但不限于：矫味剂，诸如糖精钠、挥发性油；缓冲剂；表面活性剂；或防腐剂，诸如甲基羟基苯甲酸酯。在一个实施方案中，通过这种给药途径提供的液滴具有约0.1-约200纳米范围的平均直径。

用作肺部递送的本文所述的制剂还用于鼻内递送本发明的药物组合物。

适合于鼻内给药的另一种制剂为包括活性剂且具有约0.2-500微米平均颗粒的粗粉。以采用鼻吸药的方式给予这类制剂，即通过从保持接近鼻孔的粉末容器中经鼻通道快速吸入。

例如，适合于鼻内给药的制剂可以包括约0.1％(w/w)-约100％(w/w)的活性剂且可以进一步包括一种或多种本文所述的其它组分。

可以以适合于口含给药的制剂形式制备、包装或销售本发明的药物组合物。例如，这类制剂可以为使用常规方法制备的片剂或锭剂形式，且例如，它们可以含有0.1-20％(w/w)的活性剂，余量包括口腔可溶解或可降解的组合物且任选为本文所述的其它组分中的一种或多种。另一方面，适合于口含给药的制剂可以包括含有活性剂的粉末或气雾化或雾化溶液或混悬液。在一个实施方案中，这类粉状、气雾化或雾化制剂在分散时具有约0.1-约200纳米的平均颗粒或液滴大小，且可以进一步包括本文所述的其它组分中的一种或多种。

在另一个实施方案中，可以以适合于眼部给药的制剂形式制备、包装或销售本发明的药物组合物。例如，这类制剂可以为滴眼剂形式，包括：例如，0.1-1.0％(w/w)的活性剂在含水或油载体中的溶液或混悬液。这类滴剂可以进一步包括缓冲剂、盐或本文所述其它组分中的一种或多种。其它有用的眼用给药制剂包括那些微晶形式或在脂质体制剂中的活性剂的制剂。

本文所用的“其它组分”包括，但不限于下列组分中的一种或多种：赋形剂；表面活性剂；分散剂；惰性稀释剂；成粒剂和崩解剂；粘合剂；润滑剂；增甜剂；矫味剂；着色剂；防腐剂；生理可降解的组合物，诸如明胶；含水载体和溶剂；油载体和溶剂；悬浮剂；分散剂或湿润剂；乳化剂；缓和剂；缓冲剂；盐；增稠剂；填充剂；乳化剂；抗氧化剂；抗生素；抗真菌剂；稳定剂；和药物上可接受的聚合物或疏水材料。本发明药物组合物中可以包括的其它的“其它组分”是本领域中公知的且例如描述在Genaro编辑，1985，《Remington氏药物科学》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)，Mack Publishing Co.，Easton，Pa.中，将该文献引入本文作为参考。

本发明药物组合物中的活性剂、药物上可接受的载体和任何其它组分的相对量随所治疗受试者的身份、大小和疾病类型和严重程度的不同而改变且进一步取决于组合物的给药途径。作为实例，该组合物可以包括0.1％-100％(w/w)的活性剂。

在另一个实施方案中，本发明涉及包括通式I、IA或II的化合物和载体的组合物，其中所述的载体适合于试验。这类载体可以包括固体载体和液体载体。适合于试验的组合物可以，但不一定是无菌的。用于试验的合适的载体实例包括二甲亚砜、乙醇、二氯甲烷、甲醇、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺等。在一个实施方案中，本发明涉及基本上由通式I、IA或II的化合物和载体合物，其中所述的载体适合于试验。

化合物和组合物的应用

如本文公开的Tamandarin类似物及其生理活性片段，诸如具有通式I、IA或II的结构的化合物可以用于影响各种生理过程。这些化合物各自可以用于抑制蛋白质合成。此外，这些化合物可以用于抑制细胞-细胞周期的发展。尽管不受任何特定操作理论的束缚，但是认为化合物的抑制细胞周期的活性可以归因于抑制蛋白质合成且可能还归因于抑制其它与DNA复制或细胞分裂相关的细胞活性。Tamandarin类似物及其活性片段还诱导细胞中的编程性细胞死亡。因tamandarin类似物和片段产生的生理活性使得这些化合物可以用于缓解各种细胞生长、增殖和存活中的一种或多种异常的疾病。这类疾病的实例包括：不同阶段的癌症，例如肿瘤发生、肿瘤生长和转移；和不同阶段的病毒感染，例如病毒颗粒感染细胞、细胞内产生病毒颗粒和病毒感染细胞的存活。此外，本发明的化合物可以用于治疗癌症(例如乳腺癌)、病毒、真菌、寄生虫和细菌感染、自身免疫病、变态反应、其它超免疫病和动脉粥样硬化。

本文公开的方法的受试者优选为动物，包括，但不限于牛、马、羊、猪、小鸡、火鸡、鹌鹑、猫、狗、小鼠、大鼠、家兔和豚鼠且更优选哺乳动物且最优选人。

本文所述的tamandarin类似物和片段可以用于抗增殖、抗肿瘤、抗病毒和免疫抑制目的。因此，本发明的另一个方面涉及抑制或预防癌细胞生长的方法，包括使所述的细胞接触有效量的通式I、IA或II的化合物。例如，这些化合物可以用于对患有蛋白质合成、细胞生长、增殖和存活异常中的一种或多种的疾病的患者给药的药物制剂或药物。这类药物可以用于治疗诸如癌症(例如乳腺癌)这类疾病。可以由本文所述的化合物表现出的抗肿瘤活性的实例包括抑制肿瘤发生、抑制转移、抑制肿瘤细胞生长、抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞编程性细胞死亡。脱氢代代宁表现出对来源于几种人实体瘤类型的细胞系，包括非小细胞肺癌和结肠肿瘤细胞系的活性，且表现出对非小细胞肺癌、黑素瘤、卵巢癌和结肠直肠癌的选择性抗肿瘤活性(Depenbrock等《英国癌症杂志》(Brit.J.Cancer)78：739-744(1998))。本文所述的tamandarin类似物和片段表现出在这些细胞系中的一种或多种细胞以及在体内相应肿瘤类型的细胞中的抗肿瘤活性。可以使用例如包括维持在美国国家癌症研究院药物筛选程序中的60种标准肿瘤细胞系中的一种或多种的标准方法对本文所述的具体tamandarin类似物或片段有关任意特定肿瘤类型的有效性进行测定。

本发明的另一个方面涉及抑制、治疗或预防病毒感染的方法，包括对需要这类治疗的受试者给予通式I、IA或II的化合物。可以由本文所述的tamandarin类似物或片段表现出的抗病毒活性的实例包括抑制病毒与细胞靶结合、抑制病毒感染细胞、抑制病毒成分的细胞合成、抑制病毒颗粒的细胞内组建、抑制病毒颗粒从感染的细胞中释放、抑制病毒感染细胞的生长、抑制病毒感染细胞的增殖和诱导病毒感染细胞的死亡(即编程性细胞死亡)。例如，本文所述的化合物的抗病毒活性可以用于治疗或预防哺乳动物的病毒感染和相关症状。作为典型，本文所述的代代宁类似物或片段可以用于治疗或预防诸如山谷热病毒、登革病毒或任意马脑炎病毒这类病毒感染。

在另一个实施方案中，本发明涉及对需要的受试者提供免疫抑制疗法的方法，包括对所述的受试者给予有效量的通式I、IA或II的化合物。可以由本文所述的tamandarin类似物或片段表现出的免疫抑制活性的实例包括抑制对免疫原(例如传染性病原体或移植细胞或组织)的细胞免疫反应和抑制对免疫原的体液免疫反应。可能需要免疫抑制的疾病的实例包括自身免疫病、移植排斥疾病(例如固体组织或骨髓移植排斥)、对植入装置(例如支架或心瓣膜)发生免疫反应、免疫过敏性和过敏反应。

在另一个实施方案中，本发明的化合物用于治疗肿瘤，包括实体瘤，诸如膀胱、乳腺、结肠、肝、卵巢、胃、胰腺、前列腺、肾的肿瘤、视网膜母细胞瘤、黑素瘤、纤维肉瘤或骨肉瘤。在另一个实施方案中，本发明的化合物用于治疗白血病或淋巴瘤，诸如前髓细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、T细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、伯基特B细胞淋巴瘤和B细胞淋巴瘤。在另一个实施方案中，本发明的化合物用于治疗经证实由该化合物所抑制的细胞系表示的癌症或肿瘤。

可以在体外对细胞或组织(例如培养的细胞或组织或在导入相同或不同动物前从一种动物中采集的细胞或组织)给予本文所述的tamandarin类似物和片段。另一方面，通过对具有所述细胞或组织的动物(例如，哺乳动物，诸如人)给予活性剂或包括该活性剂的药物组合物对体内细胞或组织给予所述的活性剂。

在本文所述方法的一个实施方案中，对动物给予本文所述的带有结合的酶可裂解基团的tamandarin类似物。在一个实施方案中，在酶可裂解基团裂解时，化合物从无活性(或低活性)形式被转化成活性(或更具活性)的形式。因此，tamandarin类似物可以在酶活性发生的身体部位上得到选择性活化。

用于裂解带有连接的酶可裂解部分的tamandarin类似物的酶可以为天然出现于动物体内部位上的酶。或者，可以给动物提供这种酶，例如作为包括该酶或编码该酶的核酸的组合物。作为另一个实例，可以使该酶与特异性结合动物体内部位上的组织(例如癌细胞，诸如白血病细胞或实体瘤细胞)偶联(例如使用交联剂共价偶联或通过作为酶-抗体融合蛋白表达)，且可以对动物给予这种抗体-酶复合物。对同一动物给予带有连接的酶-可裂解基团的tamandarin类似物导致该化合物在组织或身体部位优先活化。该化合物的生理作用由此定位于所述组织或身体部位且任何归因于活化化合物的副作用由此得到减轻或被减小到最低限度。

可以给予有效量的本发明化合物，该有效量的剂量范围在约0.01mg/kg-约300mg/kg，优选0.1mg/kg-100mg/kg体重，更优选0.1mg/kg-10mg/kg体重。可以以单一每日剂量给予本发明的化合物或可以以每日两次、三次或四次的分次剂量给予总每日剂量。确切的给药剂量和频率取决于所用的通式I、IA或II的特定化合物、所治疗的特定疾病、所治疗疾病的严重程度、特定患者的年龄、体重和一般身体情况以及个体服用的其它药物，因为这是本领域技术人员众所周知的。剂量可以随患者需求、所治疗疾病的严重程度和所用的化合物的不同而改变。

在所有给药情况中，可以理解可以如本文所述将通式I、IA或II的化合物作为包括所述化合物和药物上可接受的赋形剂的药物组合物给药。另一方面，如果合适，可以将通式I、IA或II的化合物作为纯物质给药。

在本发明的另一个方面中，可以将通式I、IA或II的化合物单独使用或与一种或多种其它药物活性剂联用(例如抗癌药、抗病毒药)。

在另一个实施方案中，本发明的化合物还用于药物开发试验。可以在试验中使用通式I、IA或II的化合物以便测定其它化合物作为抗癌药、抗病毒药或免疫抑制剂的功效和/或效能。这些试验包括体内和体外试验。本发明的化合物可以用作对照品或可以用作发现新的有用化合物和药物的前导化合物。

尽管仍然不受任何特定理论的束缚，但是认为归因于本文所述的tamandarin类似物和片段的生理活性是因这类类似物或片段与至少一种细胞成分之间的一种或多种相互作用所致。这种相互作用直接或间接导致所观察到的细胞反应。因此，本发明包括具有通式I、IA或II结构的化合物在鉴定导致个体疾病表型的一种或多种细胞成分中的应用。鉴定这类细胞成分可以表明缓解所述疾病的有效治疗过程。用于该目的的化合物的实例包括具有通式I、IA或II结构且含有荧光取代基(例如R⁵的部分)、光反应性化学部分或与支持物结合的部分的tamandarin类似物和片段。

本文所述的荧光和其它可检测标记的tamandarin类似物(及其生理活性片段)可以用于鉴定那些类似物和片段可以发挥其生理作用的细胞。例如，可以鉴定或分离吸附或结合具有具有通式I、IA或II之一结构的荧光化合物的细胞。鉴定或分离这类细胞可以用于诊断与存在这类细胞相关的疾病。鉴定或分离这些细胞还可以证实tamandarin类似物和片段中究竟哪一种化合物可有效治疗与细胞相关的疾病。

带有光反应性部分的本发明化合物用作光亲和探针。光亲和探针用于鉴定、标记和/或修饰靶蛋白。鉴定该靶蛋白用于理解疾病和细胞过程。本发明的光亲和探针用于这类目的。另外，在另一个实施方案中，本发明的光亲和探针用于调节靶蛋白或使其失活。

支持物结合的tamandarin类似物(或表现出相应生理活性的tamandarin类似物的支持物结合的片段)可以用于鉴定在表面或其它处上含有受体蛋白、糖蛋白等的细胞，所述的受体蛋白、糖蛋白等能够与所述类似物发生相互作用或与之结合。作为实例，可以通过使具有通式I、IA或II结构并与支持物连接的tamandarin类似物与特定细胞受体发生相互作用而将其用于鉴定或物理分离特征在于存在特定受体的特定类型的细胞(例如肿瘤细胞)。

在一个实施方案中，本发明的方法使用了选自上述各实施方案中的一种或多种的化合物。在另一个实施方案中，该方法使用了选自通式I、IA或II的化合物的化合物及其药物上可接受的盐，其中：

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为CH₃，R⁵为H，R⁶为缬氨酸侧链，X为NH，且Y为H；且

R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R³为4-甲氧基苄基，R⁴为CH₃，R⁵为Boc，R⁶为缬氨酸侧链，X为NH，且Y为H。

化合物的制备方法

本发明的另一个方面为合成通式I、IA或II的化合物的方法。可以按照下列方案和描述中概括的一般方法合成通式I、IA或II的化合物。如下实施例部分中提供了具体的非限制性合成实施例。

就制备本文所述的类似物和片段的方法而言，取代基R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、W、X、Y和Z具有如上述所用相同的含义。

作为本说明书中所用的，保护反应可以包括任意反应，由此一个或多个化学部分与分子的氮原子、氧原子和硫原子之一共价(但是可逆的)连接。这类连接防止了所述原子或多个原子参与不需要的化学反应，即与其它化学部分共价连接并对其它化学部分提供或接受质子和电子。由此连接的化学部分称作“保护基”。作为实例，可以使用诸如苄酯基-琥珀酰亚胺(CBZ-琥珀酰亚胺)这类试剂保护诸如D-缬氨酸这类化合物的氮原子。这种试剂在标准方案中的应用产生了被保护的D-缬氨酸，即D-N-Cbz-缬氨酸。在该化合物中，CBZ部分起胺保护基的作用且与之连接的氮原子不易于发生其它化学反应。作为可选的实例，可以使用诸如三异丙基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(TIPSOTf)这类试剂保护化合物11的羟基部分而得到化合物13(实施例1)。在该化合物上，Y为三异丙基甲硅烷基(TIPS)部分且起羟基保护基的作用，从而防止与连接该部分的氧原子的化学反应。

进行保护反应的方案和有关可以用作保护基的化学部分的综合信息为本领域中公知的且可以在参考文献中找到，诸如Green和Wuts(1991，《有机合成中的保护基》(Protective Groups in OrganicSynthesis)，Wiley，New York)或Bodansky(1993，《肽合成原理》(Principles of Peptide Synthesis)，Springer，Berlin)。

可以通过方案1和2中所示的合成途经制备本发明的某些tamandarin类似物和片段。

方案1

方案2

在所示的过程中，具有通式IV结构的化合物被转化成具有通式V结构的化合物。

如此一系列反应可以包括，但不限于保护反应、活化反应、酯化反应和酯水解反应。优选在进行酯化和水解反应前保护通式IV的胺基。制备具有通式V结构的化合物的具体实例如实施例1中所述。“APG”指的是胺保护基，诸如，但不限于苄酯基(CBZ)部分或叔丁氧羰基(BOC)部分。还可以如本文和本领域中所述使用可选的胺保护基。

制备具有通式V结构的化合物的方法中包括的活化反应的实例如实施例1中所示。该活化步骤可以包括试剂，诸如五氟苯酚(PFPOH)。还可以将不需要活化中间体的酯化反应用于制备具有通式V结构的化合物。

不包括有利于外消旋化的严格条件的本领域中公知的任何酯水解方法可以用于制备具有通式V结构的化合物。作为实例，可以使用在溶剂混合物中的强碱水解具有通式V结构的化合物，其中羧基被酯化成烷基酯，例如甲酯。本领域技术人员易于选择适合于在较适度条件下进行酯水解的试剂和条件(即包括不有利于外消旋化的条件)。

用例如烯丙基溴(例如如实施例1中所述)酯化具有通式VI结构的化合物而得到具有通式VII结构的化合物。

可以偶联具有通式V结构的化合物和具有通式VII结构的化合物(例如酯化)而得到具有通式VIII结构的化合物(例如方案1的步骤3)。任选使用催化剂、偶联试剂或酯化试剂进行这类反应。用于该反应类型的试剂和条件在本领域是公知的且以实施例1中为典型。具有通式VIII结构的Tamandarin片段表现出本文所述的药理活性中的一种或多种。

具有通式VIII结构的化合物可以被水解成具有通式IX结构的化合物。

如本文其它处所述，适合于酯水解的反应条件和试剂是本领域中公知的且易于由本领域技术人员所应用。这类水解的实例如实施例1中所述。具有通式IX结构的Tamandarin片段表现出本文所述的药理活性中的一种或多种。

具有通式IX结构的化合物的羧基可以被活化成具有通式X结构的化合物。

在通式X中，“ACT”指的是活化基团，诸如五氟苯基(PFP)部分。另一个活化基团的实例为N-羟基琥珀酰亚胺部分。可以使用诸如活化试剂、催化剂、活化基团供体等这类试剂进行化学活化。作为实例，通过共价连接PFP基团活化实施例2中所述的化合物8而得到化合物18。按照本文公开的方式活化化合物的方案是本领域中公知的。具有通式X结构的Tamandarin片段表现出本文所述的药理活性中的一种或多种。

可以使具有通式X结构的活化化合物与具有通式XI结构的第三种反应剂偶联而得到具有通式XII结构的化合物。在通式XI和XII中，SEM指的是2-(三甲代甲硅烷基)乙氧羰基。该反应的实例如实施例1中所述，其中化合物24与化合物18偶联成化合物25。例如，制备被保护肽，诸如化合物18必不可少的试剂和条件描述在Li等《美国化学协会杂志》(J.Am.Chem.Soc.)112：7659-7672(1990)中。具有通式XII结构的Tamandarin类似物表现出本文所述的药理活性中的一种或多种。

可以通过下列步骤制备本文所述的具有本文所述药理活性中的一种或多种的tamandarin类似物：除去具有通式XII结构的化合物的氨基保护基和羰基羟基保护基；和将该化合物环化成具有通式XIII结构的化合物。该过程如方案2的步骤7中所示。

该类反应的实例如实施例1中所示。可以通过使诸如具有通式XII结构的这类化合物与一种或多种试剂反应对该化合物进行化学脱保护以除去该化合物的保护基。典型的脱保护反应在本文中公开。用于使化合物脱保护的其它方案为本领域中公知且易于由本领域技术人员应用，以便对具有通式XII结构的化合物脱保护。否则，可以使用本领域中公知用于肽类的大环化的方法对具有通式XII结构的脱保护的化合物进行环化。例如，大环化的条件可以与实施例2中所述产生化合物34中所用的那些条件相似或相同。具有通式XIII结构的Tamandarin类似物表现出本文所述的治疗活性中的一种或多种。

可以除去具有通式XIII结构的化合物的一个或多个保护基而得到具有通式XIV结构的化合物。这种脱保护如方案2的步骤8中所示。具有通式XIV结构的Tamandarin类似物表现出本文所述的治疗活性中的一种或多种。

可以通过使具有通式XIV结构的化合物与带有R⁵部分的试剂偶联制备另一种活性化合物。该反应以实施例1-4中为典型。R⁵取代基可以优选在其远端上或接近其远端上(相对于大环而言)含有酶可裂解部分。这类部分可以被酶裂解，例如，羧肽酶、β-内酰胺酶、β-半乳糖苷酶、青霉素V-酰胺酶、胞嘧啶脱氨酶、硝基还原酶、碱性磷酸酶、β-葡萄糖苷酸酶和催化抗体。含有酶可裂解部分的R⁵部分的实例为-(N-甲基)亮氨酸-(S)脯氨酸-(S)乳酸-(S)谷氨酰胺-(S)焦谷氨酸。酶可裂解部分的其它实例如本文所述。其它合适的试剂包括那些带有上述具体R⁵基团的那些试剂，其中开放的化合价被官能基，例如OH取代，使得该部分含有适合于偶联大环的胺的官能基，例如COOH。

可以通过方案3中所示的合成途经制备本发明的其它tamandarin类似物和片段。

方案3

在方案3中，使通式XV的化合物与通式XVI的化合物反应而生成通式XVII的化合物。使用合适的酯化条件进行步骤10而形成通式XVII的化合物。然后使通式XVII的化合物与通式XVIII的化合物缩合成通式XIX的化合物。随后使通式XIX的化合物反应而形成通式XIII的大环。步骤12包括使胺和羧酸酯基脱保护且进一步包括大环化反应。使通式XIII的大环脱保护(其中R⁵为H)且然后与合适的部分反应而生成通式I的化合物。注意通式XIII的化合物属于通式I的范围。

当X为NH，使得酯键被酰胺键取代时，可以如方案4中所示制备含有R³、R⁴和R⁵的酰胺片断。

方案4

在方案4中，首先使通式XX的化合物与合适的胺保护基反应而生成通式XXI的化合物。例如，反应14可以使用在二噁烷中的(Boc)₂O和NaOH。然后将通式XXI的化合物酯化成通式XXII的合适的酯。合适的酯包括烷基酯，诸如甲酯。可以通过使通式XXI的化合物与诸如甲基碘这类烷基卤和诸如KHCO₃这类合适的碱反应而形成酯。然后将该酯还原成通式XXIII的醇。可以使用标准条件和试剂，诸如NaBH₄进行还原。随后将通式XXIII的化合物转化成通式XXIV的化合物，其中PG为合适的保护基，诸如叔丁基二甲基甲硅烷基、三甲代甲硅烷基或三异丙基甲硅烷基，且LG为合适的离去基，诸如甲磺酰基或甲苯磺酰基。优选步骤16包括两个步骤，其中第一个步骤为保护伯醇，而第二个步骤将仲醇转化成合适的离去基。然后使通式XXIV的化合物与氮化物，诸如NaN₃反应而形成通式XXV的化合物。在合适的条件下，例如使用H₂和乙醇中的Pd/碳使通式XXV的化合物还原成通式XXVI的胺。在合适的条件下使通式XXVI的胺与通式XXVII的酸缩合成通式XXVIII的酰胺。可以使用合适的偶联试剂，例如DCC、HOBt和NMM催化酰胺键形成。然后使通式XXVIII的酰胺脱保护而得到通式XXIX的醇，将其氧化成通式XXX的酸。用于进行步骤20和21的合适试剂和条件为本领域中众所周知。然后用通式XXX的化合物取代如方案3中所示的通式XVIII的化合物以制备通式IA的化合物，其中X为NH。

使用与用于制备本文所述通式IA化合物相似的方法制备通式I的化合物。当Z为C(O)-CH(CH₃)-C(O)且W为O或NH时，可以使用合适的HIP-异他汀类(isostatine)部分取代方案1中通式X的化合物。合适的HIP-异他汀类(isostatine)部分是已知的。例如，参见Pfizenmeyer等《生物有机药物化学通讯》(Bioorg.Med.Chem.Lett.)8：3653-3656(1998)。

tamandarin类似物和片段取代基的变化可能需要在本文所述的一般方法中适度修饰。可以理解本发明包括这类修饰，因为它们易于由合成化学领域的普通技术人员来设计。

使用标准步骤记录¹H-NMR、¹³C-NMR、IR和MS光谱。将显著的峰依次列表表示：质子数、多样性(s，单峰；d，双峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；br s，宽单峰)和以赫兹计的偶合常数。

实施例

实施例1

Tamandarin B的全合成

方案5

方案6

方案7

方案8

方案9

将D-N-Cbz-缬氨酸五氟苯基(PFP)酯(10)：D-N-Cbz-缬氨酸(9.8g，39.0mmol)溶于CH₂Cl₂(100mL)并冷却至0℃，随后添加吡啶(3.4mL，42.9mmol)和PFP-三氟乙酸酯(4.08mL，46.8mmol)。将该溶液在室温下搅拌1小时并用NH₄Cl(50mL，饱和)猝灭。用5％HCl(100mL)、NaHCO₃(100mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并蒸发溶剂。得到了产生的PFP酯10，为无色油状物(15.8g，92％)，并将其直接用于下一步。该化合物表现出与参比物23中报导相同的¹H-NMR。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1.01(d，J＝6.9Hz，3H)，1.08(d，J＝6.9Hz，3H)2.33-2.41(m，1H)，4.63-4.70(m，1H)，5.15(s，2H)，5.22(d，J＝7.8Hz，1H)，7.30-7.41(m，5H)。

(4R)-4-苄氧基羰基氨基-5-甲基-3-氧代-己酸甲酯(11)：向冷却至-78℃的PFP酯10(6g，14.4mmol)在无水THF(30mL)中的溶液中加入乙酸甲酯的烯醇锂溶液。通过在-78℃下向LDA溶液(在50mL无水THF中51.8mmol)添加乙酸甲酯(4.12mL，50.3mmol)并将所得溶液搅拌1小时制备该烯醇盐。将该反应混合物在相同温度下搅拌45分钟以上并在-78℃下用NH₄Cl(50mL)猝灭。在温至室温后，用EtOAc(mL)稀释该溶液。分离有机层并用10％HCl(100mL)、5％NaHCO₃(100mL)和NaCl(100mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/9)而得到甲酯11(2.8g，64％)，为无色油状物。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.80(d，J＝6.8Hz，3H)，1.01(d，J＝6.8Hz，3H)，2.20-2.29(m，1H)，3.51(d，J＝11.8Hz)，3.55(d，J＝17.7Hz)，3.70(s，3H)，4.41(q，J＝4.4Hz，1H)，5.09(s，2H)，5.32(d，J＝12.0Hz，1H)，7.29-7.39(m，5H)。

(3S，4R)-4-苄氧基羰基氨基-3-羟基-5-甲基己酸甲酯(12)：向冷却至-78℃的甲酯11(2.8g，9.15mmol)在HPLC MeOH(30mL)的溶液中分批加入硼氢化钾(1.72g，32mmol)。将该反应混合物在-78℃下搅拌10分钟，加热到-20℃搅拌30分钟，且然后在0℃下搅拌10分钟。用乙酸使反应猝灭至pH 7并用CH₂Cl₂(3×50mL)提取。用NaHCO₃(50mL，饱和)、NaCl(50mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并蒸发。得到醇12，为无色油状物(2.7g，98％)并将其直接用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.87(d，J＝6.7Hz，3H)，0.94(d，J＝6.7Hz，3H)，2.10-2.19(m，1H)，2.47(dd，J＝16.7和9.1Hz)，2.58(dd，J＝16.7和2.9Hz，1H)，3.11-3.20(m，1H)，3.56-3.63(m，1H)，3.68(s，3H)，3.90-3.98(m，1H)，4.64(d，J，＝7.9Hz，1H)，5.09(s，2H)，7.30-7.39(m，5H)。

(3S，4R)-4-苄氧基羰基氨基-5-甲基-3-(三异丙基-硅烷氧基)己酸甲酯(13)：向在氩气环境中冷却至0℃的粗醇12(2.7g，9.1mmol)在CH₂Cl₂(10mL)中的溶液中加入2，6-卢剔啶(2.6mL，22.7mmol)和三氟甲磺酸三异丙基甲硅烷基酯(3.6mL，13.6mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌30分钟且然后在室温下搅拌2小时并用CH₂Cl₂(25mL)稀释。分离有机层并用10％HCl(50mL)、NaHCO₃(50mL，饱和)和NaCl(50mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，乙醚/己烷2∶98-15∶85)而得到13(2.9g，70％)，为无色油状物。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.88(d，J＝6.8Hz，3H)，0.92(d，J＝6.7Hz，3H)，1.01-1.07(m，21H)，1.97-2.04(m，1H)，2.53(dd，J＝15.3和4.7Hz，1H)，2.60(dd，J＝15.2和7.5Hz，1H)，3.57(s，3H)，3.59-3.65(m，1H)，4.34-4.40(m，1H)，4.78(d，J＝10.3Hz，1H)，5.06-5.09(m，2H)，7.27-7.35(m，5H)。

(3S，4R)-4-苄氧基羰基氨基-5-甲基-3-(三异丙基-硅烷氧基)己酸(14)：向冷却至0℃的13(2.2g，4.7mmol)在50mL THF/MeOH(1∶1)中的溶液中加入1N NaOH溶液(55mL，32mmol)。将该反应体系在0℃下搅拌2小时且然后在室温下搅拌过夜。浓缩该反应混合物并用H₂O(20mL)稀释，冷却至0℃，用1N KHSO₄溶液酸化至pH 2并用EtOAc(3×20mL)提取。用NaCl(50mL，饱和)洗涤合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并蒸发。得到产生的酸14，为无色油状物(1.76g，86％)并将其直接用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.86(m，3H)，0.95(d，J＝6.7Hz，3H)，1.04-1.14(m，21H)，1.90-2.00(m，1H)，2.52-2.72(m，2H)，3.60-3.62(m，1H)，4.28-4.36(m，1H)，5.02(d，J＝10.4Hz，1H)，5.07-5.13(m，3H)，7.25-7.35(m，5H)。

(2S)-{1-(2S，3R)-[3-苄氧基羰基氨基-2-(三异丙基-硅烷氧基)己基]乙烯氧基}-3-甲基丁酸烯丙酯(16)：向冷却至0℃的酸14(1.76g，3.89mmol)在CH₂Cl₂(20mL)中的溶液中依次加入α-羟基异戊酸烯丙酯15(615mg，3.89mmol)、EDAC HCl(820mg，4.20mmol)和DMAP(94mg，0.77mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时且然后在室温下搅拌过夜。用CH₂Cl₂稀释该反应体系并用10％HCl(50mL)、NaHCO₃(50mL，饱和)和NaCl(50mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷9∶1)而得到烯丙酯16(1.2g，52％)，为无色油状物。¹H-NMR(500MHz，CPCl₃)：0.88-0.99(m，12H)，1.00-1.10(m，21H)，1.96-2.05(m，1H)，2.17-2.25(m，1H)，2.65(dd，J＝15.8和5.3Hz，1H)，2.71(dd，J＝15.8和7.3Hz，1H)，3.62-3.72(m，1H)，4.40-4.45(m，1H)，4.57-4.63(m，2H)，4.79(d，J＝4.8Hz，1H)，4.88(d，J＝10.6Hz，1H)，5.07(s，2H)，5.20-5.23(m，1H)，5.28-5.32(m，1H)，5.83-5.91(m，1H)，7.26-7.38(m，5H)。

(2S)-{1-(2S，3R)-[3-苄氧基羰基氨基-2-(三异丙基-硅烷氧基)己基]乙烯氧基}-3-甲基丁酸五氟苯基酯(18)：在室温下向烯丙酯16(1.2g，2.02mmol)在干THF(15mL)中的溶液中加入Pd(Ph₃)₄(231mg，0.20mmol)和吗啉(1.7mL，20mmol)。将该混合物搅拌过夜并浓缩该反应混合物，用CH₂Cl₂(20mL)稀释并用1N HCl(20mL)和H₂O(20mL)洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，过滤并浓缩至得到酸17。将残余物溶于CH₂Cl₂(5mL)，冷却至0℃，随后依次加入PFPOH(384mg，2.09mmol)、EDAC.HCl(45mg，72.38mmol)和DMAP(49mg，0.39mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌1/2小时且然后在室温下搅拌4小时。用CH₂Cl₂稀释该反应体系并用10％HCl(50mL)、5％NaHCO₃(50mL，饱和)和NaCl(50mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷9∶1)而得到五氟苯基酯18(0.71g，两步总计50％)，为无色油状物。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.89(d，J＝7.0Hz，3H)，0.92(d，J＝7.0Hz，3H)，1.02-1.06(m，21H)，1.06-1.11(m，6H)，2.00-2.08(m，1H)，2.31-2.40(m，1H)，2.60-268(dd，J＝15.8和4.8Hz，1H)，2.77(dd，J＝15.8和7.9Hz，1H)，3.63-3.70(m，1H)，4.40-4.45(m，1H)，4.799d，J＝10.3Hz，1H)，4.98-5.03(m，2H)，5.04-5.089m，1H)，7.26-7.34(m，5H)。

L-Cbz-N-亮氨酰-L-脯氨酸甲酯(19)：向冷却至0℃的L-Cbz-亮氨酸(902mg，3.40mmol)和L-脯氨酸甲酯盐酸盐(563mg，3.40mmol)在干CH₂Cl₂(10mL)中的溶液中加入二环己基碳化二亚胺(DCC)(912mg，4.42mmol)、1-羟基苯并三唑(HOBt)(551mg，4.08mmol)和N-甲基吗啉(NMM)(2.6mL，13.6mmol)。1小时后，将该反应体系温至室温并搅拌过夜。用乙醚(10mL)稀释该混合物并过滤。用EtOAc(25mL)稀释滤液并用和10％HCl(100mL)、NaHCO₃(100mL，饱和)和NaCl(100mL，饱和)溶液洗涤。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷2/8)而得到L-Cbz-N-亮氨酰-L-脯氨酸甲酯(1.24g，98％)，为白色泡沫。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.94(d，J＝6.6Hz，3H)，0.99(d，J＝6.5Hz，3H)，1.50-1.65(d，J＝6.5Hz，2H)，1.73-1.79(m，1H)，1.94-2.22(m，4H)，3.57-3.78(m，2H)，3.70(s，3H)，4.50-4.55(m，2H)，5.03-5.09(m，2H)，5.33(d，J＝8.8Hz，2H)，7.28-7.34(m，15H)。

L-Cbz-N-亮氨酰-L-脯氨酸(20)：向冷却至0℃的二肽酯19(887mg，2.36mmol)在THF(20mL)中的溶液中滴加LiOH(198mg，4.72mmol)在水(20mL)中的溶液。将该反应体系温至室温并搅拌过夜。在减压下浓缩所得溶液并用乙醚提取。用50％HCl将水层酸化至pH 2并用EtOAc(3×20mL)提取。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂而得到L-Cbz-N-亮氨酰-L-脯氨酸20(774mg，90％)，为白色泡沫。该化合物表现出与参比物24中报导相同的¹H-NMR。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.92(d，J＝6.5Hz，3H)，0.96(d，J＝6.5Hz，3H)，1.43-1.58(m，2H)，1.71-1.76(m，1H)，1.99-2.23(m，4H)，3.55-3.58(m，1H)，3.75-3.78(m，1H)，4.51-4.58(m，2H)，5.03-5.09(m，2H)，7.28-7.34(m，15H)。

L-Cbz-N-O-二甲基酪氨酸(21)：向在0℃下的搅拌的L-Cbz-Tyr(5.0g，15.8mmol)在THE(84mL)中的溶液中分批加入KOH细粉(8.86g，158mol)，随后添加硫酸氢四丁基铵(0.5g，按重量计10％)。然后在15分钟内滴加硫酸二甲酯(9.74mL，103mmol)。将反应体系再搅拌30分钟并加入H₂O(50mL)。在室温下搅拌5小时后，加入20％氢氧化铵水溶液(20mL)。用乙醚(100mL)稀释该反应体系，分离水层并用饱和NaHCO₃水溶液(2×40mL)提取有机层。用1M KHSO₄将合并的水层酸化至pH 1并用EtOAc(2×200mL)提取。合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。得到产生的酸21(4.3g，85％)，为黄色油状物且不经纯化将其用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：2.78和2.84(s，3H)，2.92-3.06(m，1H)，3.21-3.30(m，1H)，3.76(s，3H)，4.80-4.90(m，1H)，5.00-5.10(m，2H)，6.65-6.79(m，2H)，7.00-7.09(m，2H)，7.24-7.33(m，5H)。

L-Cbz-N，O-二甲基酪氨酸-O-L-N-Boc-苏氨酸-SEM酯：将冷却至0℃的L-Cbz-N-O-二甲基酪氨酸(21)(188mg，0.54mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液中加入Boc-Thr-O-SEM(100mg，0.45mmol)。向所得溶液中加入Et₃N(165μl，1.18mmol)、DMAP(14mg，0.11mmol)和氯甲酸异丙烯酯(60μl，0.54mmol)。将该反应体系在0℃下搅拌1小时，用Et₂O(10mL)稀释并用10％HCl(10mL)、5％NaHCO₃(10mL)和饱和NaCl(10mL)溶液洗涤。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷10∶1)而得到二肽22(131mg，43％)。¹H-NMR(200MHz，CDCl₃)：0.01(m，9H)，0.92-0.96(m，2H)，1.23-1.29(m，3H)，1.44和1.43(s，9H)，2.72和2，79(s，3H)，2，81-2.98和3.17-3.21(m，2H)，3.67-3.72(m，2H)，3.76(s，3H)，4.20-4.50(m，2H)，4.60-4.78(m，1H)，5.03-5.11(m，2H)，5.25-5.43(m，2H)，6.74-6.78(m，2H)，6.97-7.06(m，2H)，7.22-7.33(m，5H)。

L-N，O-二甲基酪氨酸-O-L-Boc-苏氨酸-OSEM(22)：向在氩气环境中的L-Cbz-N-甲基苯丙氨酸-O-Boc-苏氨酸-OSEM(231mg.0.34mmol)在MeOH中的溶液中加入Pd(OH)₂(23mg)。用H₂净化该反应体系并在氢气(1atm)环境中搅拌过夜。将该混合物通过Celite^过滤。浓缩滤液至得到化合物22(174mg，94％)，为黄色油状物。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.0(s，9H)，0.91(t，J＝8.2，2H)，1.23和1，25(d，J＝5.6Hz，3H)，1.41(s，9H)，2.31(s，3H)，2，79(s，3H)，2.82和2.83(dd，J＝14.3和6.4Hz)，3.45(t，J＝6.1Hz，1H)，3.64-3.67(m，2H)，4.48和5.23(d，J＝9.7Hz)，5.02(d，J＝5.2Hz，2H)，6.75-6.78(m，2H)，6.92-7.05(m，2H)。

L-Cbz-亮氨酰-L-脯氨酰-L-N，O-二甲基酪氨酸-O-L-Boc-苏氨酸-O-SEM(23)：向冷却至-15℃的L-Cbz-Leu-L-Pro-OH(98.4mg，0.27mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液中加入BOP-Cl(69mg，0.27mmol)，随后滴加NMM(30μL，0.27mmol)。将L-N，O-二甲基酪氨酸-O-L-Boc-苏氨酸-O-SEM(147mg，0.27mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的分相溶液冷却至-15℃并加入到反应体系中，随后添加N-甲基吗啉(NMM)(30μl，0.54mmol)。将该混合物在-15℃下搅拌15分钟，在0℃下搅拌1小时并在室温下搅拌过夜。用EtOAc(15mL)稀释该反应混合物并用10％HCl(10mL)、NaHCO₃(10mL，饱和)和NaCl(10mL，饱和)洗涤。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷3/7)而得到四肽23(130g，55％)，为淡黄色油状物。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.00(s，9H)，0.67-0.87(m，2H)，0.89-1.00(m，6H)，1.19-1.21(d，J＝6.8Hz)，1.36(d，J＝6.8Hz，3H)，1.46(s，9H)，1.54-1.99(m，7H)，2.72(s)，2.73(s，3H)，2.91-3.00(m，1H)，3.05-3.15(m)，3.50-3.55(m，1H)，3.66-3.89(m，4H)，3.75(s，3H)，4.25-4.33(m，1H)，4.41-4.61(m，2H)，4.67-4.68(m，1H)，4.62-4.75(m，1H)，4.95-5.01(dd，J＝8.5和3.2Hz)，5.01-5.17(m，2H)，5.27-5.62(m，3H)，7.16-7.42(m，10H)，7.81(m，1H)，8.00(m)。

L-亮氨酰-L-脯氨酰-L-N，O-二甲基酪氨酸-L-N-Boc-苏氨酸-O-SEM(24)：向在氩气环境中的L-Cbz-亮氨酰-L-脯氨酰-L-N-甲基苯基丙氨酸-O-L-Boc-苏氨酸-OSEM(665mg，0.74mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入Pd(OH)₂(119mg)。用H₂净化该反应体系并在氢气(1atm)环境中搅拌过夜。将该混合物通过C盐过滤。浓缩滤液至得到游离氨基四肽24(547mg，94％)，为无色油状物，不经进一步纯化将其用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.001(s，9H)，0.64-0.86(m，2H)，0.88-0.96(m，6H)，1.19-1.21(d，J＝6.3Hz)，1.33-1.34(d，J＝6.3Hz，3H)，1.44(s，9H)，1.63-1.92(m，3H)，1.92-2.01和2.08-2.24(m，4H)，2.73(s)，2.86-2.96和3.10-3.19(m，2H)，3.45-3.72(m，4H)，4.34-4.69(m，3H)，4.78-4.81(dd，J＝8.0和3.3Hz，1H)，5.01-5.10(m，1H)，5.17-5.52(m)和5.58-7.60(m，3H)6.77-6.83(m，2H)，7.00-7.10(m，2H)。

Tamandarin B被保护的直链前体(25)：向冷却至0℃的PFP酯18(285mg，0.39mmol)在CH₂Cl₂(1.5mL)中的溶液中加入DIEA(170μL，0.98mmol)并将该溶液搅拌20分钟，随后添加在CH₂Cl₂(1.5mL)和DMAP(9.5mg，0.078mmol)中的胺24(292mg，0.39mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时且然后在室温下再搅拌1小时。用NH₄Cl(3mL)使反应猝灭并用CH₂Cl₂(10mL)稀释。用10％HCl(10mL)、5％NaHCO₃(10mL)和NaCl(10mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷9∶1)而得到25(285mg，57％)，为无色油状物。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.008(s，9H)，0.73-0.83(m，2H)，0.85-0.92(m，9H)，0.92-1.08(m，21H)，1.45(s，4H)，1.13-2.19(m，11H)，2.43-2.46(m，1H)和2，54-2.58(m.1H)，2.64(s，3H)，2.88(s，3H)，3.09-3.17(m，2H)，3.44-3.73(m，4H)，3.75(s，3H)，3.79-3.89(m，1H)，4.38-4.55(m，4H)，4.69-4.81(m，1H)，4.96-5.05(m，3H)，5.18-5.43(m，3H)，5.46-5.48(d，J＝6.0Hz，1H)，6.83(m，2H)，6.95-7.11(m，2H)，7.25-7.38(m，5H)，7.55-7.77(m)和8.85-8.87(m，2H)。

Tamandarin B被保护的大环(26)：向在0℃下的完全被保护的直链前体25(350mg，0.27mmol)溶于CH₂Cl₂(5mL)中的溶液中加入MgBr₂.Et₂O(210mg，0.81mmol)。将该反应体系在0℃下搅拌2小时且然后在室温下搅拌过夜。用CH₂Cl₂稀释该反应体系并用10％HCl(10mL)和NaCl(10mL，饱和)洗涤有机层，过滤并浓缩。得到产生的酸(319mg)且将其直接用于下一步。向在氩气环境中的粗酸(319mg)在MeOH(5mL)中的溶液中加入Pd(OH)₂(28mg)。用H₂净化该反应体系并在氢气(1atm)环境中搅拌过夜。将该混合物通过C盐过滤。浓缩滤液至得到直链前体(296mg)，为白色泡沫，将其直接用于下一步。将粗的氨基酸直链前体溶于DMF(27mL)并冷却至0℃。加入HATU(123mg，0.32mmol)，随后滴加DIEA(141μL，0.81mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时且然后搅拌过夜。在真空中浓缩该反应混合物，用EtOAc(10mL)稀释并用10％HCl(10mL)、5％NaHCO₃(10mL)和NaCl(10mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷5/1)而得到被保护的大环26(50mg，三步总计19％)，为白色泡沫。该化合物表现出与参比物23中报导相同的¹H-NMR。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.78-1.07(m，39H)，1.21-1.48(m，17H)，1.56-1.92(m，4H)，1.73-1.81(m，1H)，1.95-2.12(m，2H)，2.43-2.44(m，1H)和3.11-3.17(m，1H)，2.52(s，3H)，2.89-3.00(m，1H)，3.30-3.32(m，1H)，3.49-3.52(m，1H)，3.60-3.62(m，1H)，3.66-3.70(m，1H)，3.77(s，3H)，4.14-4.19(m，1H)，4.37-4.43(m，1H)，4.46-4.48(d，J＝7.6Hz，1H)，4.55-4.86(m，1H)，4.88-4.92(m，1H)，6.82-6.83(d，J＝8.5Hz，2H)，7.06-7.07(d，J＝8.5Hz，2H)，7.41-7.48(m，2H)。

Tamandarin B(2)：向Boc被保护的大环26(10mg，0.01mmol)在HPLC EtOAc中的溶液中加入HCl在EtOAc中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐(定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向在0℃下大环胺盐(9mg，0.01mmol)和侧链(6.1mg，0.015mmol)在CH₂Cl₂(0.50mL)中的混合物中加入BOP(8.4mg，0.015mmol)和NMM(6μL，0.05mmol)。在0℃下30分钟后，将该反应体系在室温下搅拌过夜。用NaCl溶液(2mL，饱和)处理该反应体系并用EtOAc(2×10mL)提取。用10％HCl(5mL)、5％NaHCO₃(5mL)和NaCl(5mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过HPLC纯化粗油(8mg，61％)。

实施例2

Phe⁵ Tamandarin B的合成

按照方案9和10中所示的方法合成tamandarin B的苯丙氨酸类似物(Phe⁵Tamandarin B)。

方案10

方案11

L-Cbz-N-甲基苯丙氨酸(28)：向在0℃下的搅拌的L-Cbz-Phe(5.1g，17.8mmol)在THE(90mL)中的溶液中分批加入KOH细粉(6.7g，0.12mol)，随后添加硫酸氢四丁基铵(0.51g，按重量计10％)。然后在15分钟内滴加硫酸二甲酯(6.4mL，71.2mmol)。将反应体系再搅拌30分钟并加入H₂O(50mL)。在室温下搅拌5小时后，加入20％氢氧化铵水溶液(20mL)。用乙醚(100mL)稀释该反应体系，分离水层并用饱和NaHCO₃水溶液(2×40mL)提取有机层。用1M KHSO₄将合并的水层酸化至pH 1并用EtOAc(2×200mL)提取。合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。得到产生的酸28(4.5g，85％)，为黄色油状物且不经纯化将其用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：2.71和2.78(s，3H)，2.94-3.06(m，1H)，3.17-3.32(m，1H)，4.79-4.89(m，2H)，4.95和5.03(s，2H)，7.04-7.28(m，10H)。

L-Cbz-N-甲基苯丙氨酸-O-L-Boc-苏氨酸-OSEM(29)：将冷却至0℃的Cbz-N-甲基苯丙氨酸(2mg，6.56mmol)在CH₂Cl₂(40mL)中的溶液中加入Boc-Thr-OSEM(2.08g，5.96mmol)。向所得溶液中加入Et₃N(1.9ml，13mmol)、DMAP(146mg，1.19mmol)和氯甲酸异丙烯酯(0.71mL，6.56mmol)。将该反应体系在0℃下搅拌1小时，用Et₂O(150mL)稀释并用10％HCl(50mL)、5％NaHCO₃(50mL)和饱和NaCl(50mL)溶液洗涤。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷10∶1)而得到二肽29(1.79g，60％)。¹H-NMR(200MHz，CDCl₃)：0.0(s，9H)，0.96(m，2H)，1.25和1.30(d，J＝1.6Hz，3H)，1.46(s，9H)，2.75和2.83(s，3H)，2.92-3.06(m，1H)，3.20-3.40(m，1H)，3.75-3.85(m，2H)，4.44(m，2H)，4.83-4.90(m，1H)，5.01-5.15(m，3H)，5.25-5.40(m，2H)，5.46(m，1H)，7.09-7.35(m，10H)。

L-N-甲基苯丙氨酸-O-L-Boc-苏氨酸-OSEM(30)：向在氩气环境中的L-Cbz-N-甲基苯丙氨酸-O-Boc-苏氨酸-OSEM(1.7g.2.6mmol)在MeOH中的溶液中加入Pd(OH)₂(170mg)。用H₂净化该反应体系并在氢气环境中(1atm)搅拌过夜。将该混合物通过C盐过滤。浓缩滤液至得到化合物30(1.32g，98％)，为黄色油状物。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.0(s，9H)，0.93(t，J＝8.2，2H)，1.04和1，28(d，J＝5.6Hz，3H)，1.44(s，9H)，2.29(s，3H)，2.83和2.93(dd，J＝14.3和6.4Hz)，3.40(t，J＝6.1Hz，1H)，3.66-3.68(m，2H)，4.48和5.23(d，J＝9.7Hz)，5.02(d，J＝5.2Hz，2H)，7.08-7.28(m，5H)。

L-Cbz-亮氨酰-L-脯氨酰-L-N-甲基苯丙氨酸-O-L-Boc-苏氨酸-O-SEM(31)：向冷却至-15℃的L-Cbz-Leu-L-Pro-OH(1.0g，2.84mmol)在CH₂Cl₂(25mL)中的溶液中加入BOP-Cl(0.72g，2.84mmol)，随后滴加NMM(318μL，2.847mmol)。将30(1.32g，2.58mmol)在CH₂Cl₂(25mL)中的分相溶液冷却至-15℃并加入到反应体系中，随后添加N-甲基吗啉(NMM)(0.58mL，5.16mmol)。将该混合物在-15℃下搅拌15分钟，在0℃下搅拌1小时并在室温下搅拌过夜。用EtOAc稀释该反应混合物并用10％HCl(100mL)、NaHCO₃(100mL，饱和)和NaCl(100mL，饱和)洗涤。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷3/7)而得到四肽31(1.02g，55％)，为淡黄色油状物。R_f0.19(AcOEt/己烷3∶7)。[α]_D ²⁰＝-38.5(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.0(s，9H)，0.73-0.77(m，2H)，0.92-1.00(m，6H)，1.21(d，J＝6.7Hz)，1.36(d，J＝6.7Hz，3H)，1.46(s，9H)，1.54-1.99(m，7H)，2.72(s)，2.78(s，3H)，2.93-3.01(m，1H)，3.05-3.15(m)，3.50-3.55(m，1H)，3.66-3.89(m，4H)，4.29-4.35(m，1H)，4.41-4.61(m，2H)，4.63-4.65(m，1H)，4.72-4.74(dd，J＝8.1和3.1Hz，1H)，4.95-5.01(dd，J＝8.1和3.1Hz)，5.05-5.17(m，2H)，5.27-5.62(m，3H)，7.16-7.42(m，10H)，7.71(d，J＝10Hz，1H)，8.01(d，J＝9.2Hz)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：-1.46，16.2，16.6，16.9，17.9，21.4，23.4，24.5，24.7，25.1，28.2，29.2，34.5，39.5，40.7，46.8，51.1，53.3，55.1，57.6，58.8，62.1，65.8，62.7，67.9，68.2，71.2，72.5，80.1，89.8，90.2，126.6，127.3，127.9，128.4，128.8，129.4，156.0，169.1，172.7，173.8。IR(净)3278，2954，1703，1640，1521，1435，1365。HRMS m/z C₄₄H₆₆N₄O₁₁SiNa(M+Na)计算值：877.4395；测定值877.4404。

L-亮氨酰-L-脯氨酰-L-N-甲基苯基丙氨酸-O-L-Boc-苏氨酸-OSEM(32)：向在氩气环境中的31(223mg，0.26mmol)在MeOH中的溶液中加入Pd(OH)₂(50mg)。用H₂净化该反应体系并在氢气(1atm)环境中搅拌过夜。将该混合物通过C盐过滤。浓缩滤液至得到游离氨基四肽32(192mg，97％)，为黄色油状物，不经进一步纯化将其用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.0(s，9H)，0.72-0.76(m，2H)，0.90-0.99(m，6H)，1.22(d，J＝6.7Hz)，1.35(d，J＝6.7Hz，3H)，1.45(s，9H)，1.47-1.539m，2H)，1.81-2.01(m，5H)，2.71(s)，2.79(s，3H)，2.92-3.00(m，1H)，3.05-3.15(m)，3.51-3.56(m，1H)，3.67-3.90(m，4H)，4.29-4.35(m，1H)，4.42-4.63(m，2H)，4.63-4.65(m，1H)，4.72-4.74(dd，J＝8.0和3.2Hz，1H)，5.01(d，J＝6.0Hz，1H)，5.21-5.59(m，3H)，7.05-7.29(m，5H)，7.53(d，J＝10Hz)，7.68(d，J＝9.1Hz)。

[N-MePhe⁵]-Tamandarin B被保护的直链前体(33)：向冷却至0℃的PFP酯18(191mg，0.26mmol)在CH₂Cl₂(5mL)中的溶液中加入DIEA(116μL，0.65mmol)并将该溶液搅拌20分钟，随后添加在CH₂Cl₂(5mL)和DMAP(0.6mg，0.006mmol)中的胺32(192mg，0.27mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时且然后在室温下再搅拌1小时。用NH₄Cl使反应猝灭并用CH₂Cl₂稀释。用10％HCl(100mL)、5％NaHCO₃(100mL)和NaCl(100mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷9∶1)而得到33(153mg，44％)，为无色油状物。R_f0.20(AcOEt/己烷3/1)。[α]_D ²⁰＝-44.0(c＝1，CHCl₃)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.0(s，9H)，0.87-0.89(m，2H)，0.90-0.98(m，18H)，1.02-1.10(m，21H)，1.43(s，4H)，1.11-2.10(m，9H)，2.49-2.51(m，3H)，2.68(s，3H)，2.89(s，3H)，3.09-3.17(m，2H)，3.65-3.67(m，1H)，3.68-3.72(m，5H)，4.31-4.45(m，1H)，4.20-4.33(m，3H)，4.69-4.79(m，2H)，4.96-5.05(m，3H)，5.18-5.43(m，3H)，5.47(d，J＝6.0Hz，1H)，6.83(d，J＝7.9Hz，1H)，7.11-7.41(m，11H)，7.82(d，J＝6.5Hz，1H)，8.88(d，J＝8.5Hz，1H)，¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：13.1，17.3，18.1，18.5，19.3，20.9，21.6，23.9，25.4，28.6，29.6，30.5，34.8，35.0，39.9，47.3，49.4，55.3，57.3，59.3，60.7，62.6，66.7，68.6，79.1，80.6，90.6，127，1，128.2，129.3，137.4，156.8，157.1，169.5，170.4，171.0，172.1，174.2。IR(净)3446，2956，2868，1738，1703，16361455。HRMS m/zC₆₅H₁₀₇N₅O₁₅Si₂Na(M+Na)计算值：1276.7199；测定值1276.7273。

[N-MePhe⁵]-Tamandarin B被保护的大环(34)：向在0℃下的完全被保护的直链前体33(140mg，0.11mmol)溶于CH₂Cl₂(5mL)中的溶液中加入MgBr₂.Et₂O(85mg，0.33mmol)。将该反应体系在0℃下搅拌2小时且然后在室温下搅拌过夜。用CH₂Cl₂稀释该反应体系并用10％HCl(100mL)和NaCl(100mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。得到产生的酸(130mg)，为白色泡沫，且将其直接用于下一步。向在氩气环境中的粗酸(130mg，0.30mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中加入Pd(OH)₂(28mg)。用H₂净化该反应体系并在氢气(1atm)环境中搅拌过夜。将该混合物通过C盐过滤。浓缩滤液至得到直链前体(87mg，78％)，为白色泡沫，将其直接用于下一步。将粗的氨基酸直链前体(87mg，0.08mmol)溶于DMF(9mL)并冷却至0℃。加入HATU(40mg，0.10mmol)，随后滴加DIEA(46μL，0.26mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时且然后搅拌过夜。在真空中浓缩该反应混合物，用EtOAc(10mL)稀释并用10％HCl(10mL)、5％NaHCO₃(10mL)和NaCl(10mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷5/1)而得到被保护的大环34(10mg，三步总计15％)，为白色泡沫。R_f0.40(AcOEt/己烷3/7)。[α]_D ²⁰＝-36.1(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.79-1.09(m，18H)，1.09-1.10(s，21H)，1.27(d，J＝6.4Hz，3H)，1.44(s，9H)，1.56-1.70(m，3H)，1.73-1.81(m，1H)，1.99-2.23(m，4H)，2.27(dd，J＝17.0和2.9Hz，1H)，2.42(dd，J＝17.0和3.0Hz，1H)，2.50(s，3H)，2.61(dd，J＝17.1和6.5Hz，1H)，2.98-3.00(m，1H)，3.19-3.23(m，1H)，3.30-3.32(m，1H)，3.42(dd，J＝9.8和4.9Hz，1H)，3.57(dd，J＝10和4.4Hz，1H)，3.60-3.62(m，1H)，3.63-3.64(m，1H)，4.03-4.21(m，1H)，4.32-4.36(m，1H)，4.37-4.45(m，1H)，4.57-4.60(m，1H)，4.60-4.69(m，1H)，4.88-4.92(m，1H)，4.94(d，J＝6.0Hz，1H)，5.80(m，1H)，7.12-7.17(m，2H)，7.28-7.31(m，3H)，7.48-7.51(m，2H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：12.2，12.6，15.1，16.5，17.5，18.0，18.2，18.8，19.6，20.7，21.0，23.5，24.9，27.9，28.1，30.1，31.0，35.1，38.5，39.7，40.9，47.7，48.1，55.5，56.9，59.3，65.9，68.8，69，9，71.8，80.1，81.2，126.9，128.7，129.5，138.1，155.9，168.7，170.9，171.0，172.2。IR(净)3331，2926，1743，1636，1513，1456。

[N-MePhe⁵]-Tamandarin B(36)：向Boc保护的大环34(10mg，0.01mmol)在HPLC EtOAc中的溶液中加入HCl在EtOAc中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐35(9mg，定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向在0℃下大环胺盐(9mg，0.01mmol)和侧链(6.1mg，0.015mmol)在CH₂Cl₂(0.50mL)中的混合物中加入BOP(8.4mg，0.015mmol)和NMM(6μL，0.05mmol)。在0℃下30分钟后，将该反应体系在室温下搅拌过夜。用NaCl溶液(2mL，饱和)处理该反应体系并用EtOAc(2×10mL)提取。用10％HCl(5mL)、5％NaHCO₃(5mL)和NaCl(5mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过HPLC纯化粗油(8mg，61％)。

实施例3

Leu⁵Tamandarin B的尝试合成

tamandarin B的亮氨酸类似物(Leu⁵Tamandarin B)的尝试合成为如下方案中所示。

使用同样已知的合成顺序以Cbz-L-Leu(37)而非Cbz-L-Phe或Cbz-L-Tyr为原料，由L-亮氨酸制备由Leu³、Pro⁴、Leu⁵和Thr⁶组成的四肽单位(化合物41)(方案9)。

使用氢和氢氧化钯使化合物41脱保护而得到胺42。在与上述使用，例如用于制备化合物33相似的条件下使化合物42与化合物18(作为异构体混合物使用)反应。该反应产生化合物43。在上述所示，例如用于制备化合物34的条件下尝试环化化合物43。然而，在这些条件下的环化反应并不成功。

实施例4

Ser⁶Tamandarin B的合成

如方案12-16中所示合成tamandarin B的丝氨酸类似物(Ser⁶Tamandarin B)。

方案12

方案13

方案14

方案15

方案16

D-N-Boc-缬氨酸五氟苯基(PFP)酯(44)：将D-N-Boc-缬氨酸(5g，23mmol)溶于CH₂Cl₂(60mL)并冷却至0℃，随后添加吡啶(1.7mL，25.3mmol，)和PFP-三氟乙酸酯(4.08mL，27.6mmol)。将该溶液在室温下搅拌1小时并用NH₄Cl(50mL，饱和)猝灭。用5％HCl(100mL)、NaHCO₃(100mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并蒸发溶剂。得到产生的PFP酯44，为无色油状物(8.6g，98％)并直接用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1,03(d，J＝6.7Hz，3H)，1,09(d，J＝6.7Hz，3H)，1.47(s，9H)，2,30-2.38(m，1H)，4.57-4.58(m，1H)，5.01-5.02(m，1H)。

(4R)-4-叔丁氧羰基氨基-5-甲基-3-氧代己酸甲酯(45)：向冷却至-78℃的PFP酯44(7g，18.3mmol)在无水THF(30mL)中的溶液中加入乙酸甲酯的烯醇锂溶液。通过在-78℃下向LDA溶液(在50mL无水THF中65.0mmol)添加乙酸甲酯(5.4mL，65.0mmol)并将所得溶液搅拌1小时制备该烯醇盐。将该反应混合物在相同温度下搅拌45分钟以上并在-78℃下用NH₄Cl(50mL)猝灭。在温至室温后，用EtOAc(150mL)稀释该溶液。分离有机层并用10％HCl(100mL)、5％NaHCO₃(100mL)和NaCl(100mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/9)而得到甲酯45(3.0g，61％)，为无色油状物。R_f0.14(EtOAc/己烷1/9)。[α]_D ²⁰＝-13.2(c＝0.5，CHCl₃)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.81(d，J＝6.8Hz)和0.83-0.92(m，2H)，0.99(d，J＝6.8Hz，2H)，1.44(s，9H)，2.20-2.25(m，1H)，3.53(m，2H)，3.71(s，3H).4.29(m，1H)，5.09(m，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：16.6，19.7，28.2，29.5，46.8，52.3，64.3，80.08，155.9，167.1，202.0。IR(净)3442.3，2966.2，1750.0，1715.9，1515.0，1508.3，1366.9，1165.6，1014.0。HRMS m/z C₁₃H₂₄NO₅(M+H)计算值：274.1654；测定值274.1654。

(3S，4R)-4-叔丁氧羰基氨基-3-羟基-5-甲基己酸甲酯(46)：向冷却至-78℃的甲酯45(2.4g，8.70mmol)在HPLC MeOH(100mL)中的溶液中分批加入硼氢化钾(1.4g，26.1mmol)。将该反应混合物在-78℃下搅拌10分钟、温至-20℃下30分钟且然后温至0℃下10分钟。用乙酸使反应猝灭至pH＝7并用CH₂Cl₂(3×50mL)提取。用NaHCO₃(50mL，饱和)、NaCl(50mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并蒸发。得到醇46，为无色油状物(2.2g，92％)并将其直接用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.88(d，J＝6.8Hz，3H)，0.93(d，J＝6.8Hz，3H)，1.44(s，9H)，2.03-2.17(m，1H)，2.41-2.52(m，1H)，2.58-2.63(m，1H)，3.50-3.55(m，1H)，3.71(s，3H)，3.89-3.93(m，1H)，3.38-3.41(m，1H)。

(3S，4R)-4-叔丁氧羰基氨基-5-甲基-3-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)己酸甲酯(47)：向在氩气环境中冷却至0℃的粗醇46(2.2g，7.9mmol)在DMF(12mL)中的溶液中加入咪唑(1.61mL，23.7mmol)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(3.57mL，23.7mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌30分钟且然后在室温下搅拌18小时并用Et₂O(50mL)稀释。分离有机层并用10％HCl(50mL)、NaHCO₃(50mL，饱和)和NaCl(50mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，乙酸乙酯/己烷1/9)而得到47(2.59g，98％)，为无色油状物。R_f0.31(EtOAc/己烷1/9)。[α]_D ²⁰＝+5.30(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.07(s，6H)，0.84-0.91(m，15H)，1.42(s，9H)，1.98-2.01(m，1H)，2.43(dd，J＝6.0和19Hz，1H)，2.52(dd，J＝5.9和18.5Hz，1H)，3.47-3.48(m，1H)，3.65(s，3H)，4,17-4.19(m，1H)，4,41-4.44(m，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：-3.6，16.6，17.60，18.9，25.7，27.8，28.2，39.9，51.5，51.9，59.5，70.19，155.9，172.2。IR(净)3373.1，2960.7，1717.0，1504.6，1366.1，1173.0，837.0。HRMS m/z C₁₉H₃₉NO₅Si(M+Na)计算值：390.2675；测定值390.2676。

(3S，4R)-4-叔丁氧羰基氨基-5-甲基-3-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)己酸(48)：向冷却至0℃的47(500mg，1.28mmol)在25mL THF/MeOH(1∶1)中的溶液中加入1N NaOH溶液(25mL)。将该反应体系在0℃下搅拌2小时且然后在室温下搅拌过夜。浓缩该反应混合物并用H₂O(20mL)稀释，冷却至0℃，用1N KHSO₄溶液酸化至pH 2并用EtOAc(3×20mL)提取。用NaCl(50mL，饱和)洗涤合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并蒸发。得到产生的酸48，为无色油状物(1.76g，86％)并将其直接用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.06(s，6H)，0.84-0.95(m，15H)，1.43(s，9H)，2.01-2.11(m，1H)，2.53(m，1H)，2.64(m，1H)，3.53-3.58(m，1H)，4.10-4.14(m，1H)，3.65(s，3H)，4.17-4.19(m，1H)，4.51-4.54和6.29-6.31(m，1H)。

N-α-羟基戊酰基-N-亮氨酰-脯氨酸苄酯(51)：向冷却至0℃的盐酸盐49(1.56mg，4.23mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液中加入NMM(522μL，4.65mmol)。15分钟后，分批加入α-羟基戊酸(50)(500mg，4.23mmol)和DCC(959mg，4.65mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌14小时，用CH₂Cl₂(25mL)稀释并用HCl 1N(20mL)、NaHCO₃(20mL，饱和)和盐水(20mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/1-3/1梯度)而得到51(1.47g，84％)，为白色固体。R_f0.46(EtOAc/己烷1/2)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.81(d，J＝7.0Hz，3H)，0.92(m，6H)，0.97(d，J＝7.0Hz，3H)，1.42(m，1H)，1.63(m，2H)，2.00(m，3H)，2.19(m，2H)，3.60(m，1H)，3,85(m，1H)，3.88(d，J＝4.8Hz，1H)，4.66(m，1H)，4.80(m，1H)，5.06(d，J＝12.3Hz，1H)，5.14(d，J＝12.3Hz，3H)，7.32(m，5H)，7.41(d，8.4，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：15.3，19.1，21.3，23.1，24.4，24.7，28.8，31.3，40.5，46.8，48.2，58.2，66.7，75.8，127.9，128.1，128.3，135.3，117.4，117.9，173.9。

(3S，4R)-4-叔丁氧羰基氨基-5-甲基-3-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)己酸N-α-羟基戊酰基-N-亮氨酰-O-苄基-脯氨酰酯(52)：向冷却至-5℃的醇51(400mg，0.96mmol)在CH₂Cl₂(8mL)中的溶液中分批加入DMAP(35mg，0.28mmol)，酸(425mg，1.15mmol)和DCC(247mg，1.15mmol)。将该反应混合物在-5℃下搅拌7小时，过滤并蒸发。将残余物溶于CH₃CN(10mL)，再次过滤并蒸发。将粗油溶于EtOAc(20mL)并用10％KHSO₄(15mL)、NaHCO₃(15mL，饱和)和NaCl(15mL，饱和)洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/4梯度)而得到52(110mg，60％)。R_f0.47(EtOAc/己烷1∶1)。[α]_D ²⁰＝-69.0(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：旋转异构体0.07(s，6H)，0.75-1.10(m，27H)，1.49(s，9H)，1.50-1.71(m，2H)，1.75-2.20(m，3H)，2.12-2.21(m，2H)，2.41-2.63(m，2H)，3.12-3.15(m，1H)，3.41-3.49(m，2H)，3.53-3.62(m，2H)，3.68-3.72(m，1H)，3.81-3.88(m，1H)，4.05-4.10(m，1H)，4.21(d，J＝8.0Hz，1H)，4.49-4.51(m，1H)，4.60-4.69(m，2H)，4.77(d，J＝10.0Hz，1H)，4.90-5.01(m，2H)，5.11-5.22(m，2H)，6.88(d，J＝9.0Hz，1H)，7.22-7.33(m，5H)，8.33(d，J＝6.3Hz，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：-5.1，-4.8，14.7，17.8，18.0，18.9，20.4，21.2，23.2，24.6，24.7，24.9，25.4，25.7，28.4，28.8，30.2，33.9，38.9，43.0，48.4，58.8，63.2，66.8，71.5，79.3，82.6，128.1，128.3，128.5，135.5，157.4，170.0，170.9，171.2，171.8，172.2。IR(净)3265.8，2937.7，2903.6，2363.0，1740.4，1692.3，1643.4，1451.6，1386.8，1365.4，1167.2，1091.1，837.3。HRMS m/z C₄₁H₆₉N₃O₉SiNa(M+Na)计算值：796.4700；测定值798.4735。

L-N-Boc-丝氨酸苯甲酰甲基酯(55)：向冷却至0℃的搅拌的L-N-Boc-丝氨酸(2g，9.7mmol)在EtOAc(20mL)中的溶液中加入Et₃N(1.39mL，9.7mmol)和溴乙酰苯(1.9g，9.7mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌2天，用EtOAc(50mL)稀释并用10％HCl(20mL)、5％NaHCO₃(20mL)和饱和NaCl(20mL)溶液洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层并蒸发溶剂。将残余物与乙醚一起研磨并过滤而得到55(3.4g，98％)，为黄色泡沫。R_f0.50(EtOAc/己烷1∶1)。[α]_D ²⁰＝-19.1(c＝1，CHCl₃)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1.43和1.46(s，3H)，3.70-3.73(m，1H)，3.84-3.88(m，1H)，4.22-4.24(m，1H)，4.51-4.52(m，1H)，5.28-5.36(m，1H)，5.61-5.66(m，2H)，7.49(t，J＝6.5Hz，2H)，7.57(t，J＝6.3Hz，1H)，7.87(dd，J＝1.9和6.3Hz，2H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：27.2，28.1，56.0，63.7，66.3，79.8，85.0，127.6，128.8，133.3，134.3，146.6，155.5，170.1，192.8。IR(净)3439.8，2978.7，2935.6，1807.8，1756.6，1704.8，1506.6，1369.7，1162.9。

O-(L-N-Cbz-N，O-二甲基酪氨酰)-L-N-Boc-丝氨酸苯甲酰甲基酯(56)：向冷却至0℃的L-N-Boc-丝氨酸苯甲酰甲基酯55(1.42g，3.96mmol)在CH₂Cl₂(20mL)中的溶液中加入DMAP(145mg，1.18mmol)和L-N-Cbz-N，O-二甲基酪氨酸(21)(1.36g，3.96mmol)。在0℃下搅拌10分钟后，加入DCC(897mg，4.35mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌过夜。过滤该化合物并将滤液浓缩至干。将残余物溶于CH₃CN(25mL)，再次过滤并蒸发。将粗油溶于EtOAc(50mL)并用10％KHSO₄(30mL)、NaHCO₃(50mL，饱和)和NaCl(50mL，饱和)洗涤。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/4-1/2梯度)而得到二肽56(1.69g，63％)，为黄白色固体。R_f0.12(EtOAc/己烷1∶4)。Mp＝64-65℃。[α]_D ²⁰＝-12.0(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1.49(s，3H)，2.85和3.01(s，3H)，3.04-3.11(m，1H)，3.27-3.37(m，1H)，3.80(s，3H)，4.53-4.67(m，1H)，4.70(dd，J＝3.9和11.7Hz，1H)，4.81-4.82(m，1H)，4.94-5.01(m，1H)，5.08-5.14(m，2H)，5.30-5.35(m，1H)，5.48-5.52(m，1H)，6.76-6.83(m，2H)，7.05-7.24(m，2H)，7.27-7.34(m，5H)，7.51(t，J＝7.3Hz，2H)，7.64(t，J＝7.2Hz，1H)，7.89(d，J＝7.5Hz，2H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：28.3，32.2，33.8，34.2，52.9，55.1，60.9，64.9，67.2，67.3，113.9，127.4，127.7，127.8，127.9，128.3，128.9，129.1，129.8，133.9，136.6，158.3，170.4，170.6，190.8。IR(净)3404.1，2932.5，1703.2，1513.7，1453.1，1402.5，1248.0，1162.6，1033.0，754.8。

O-(L-N-Cbz-N，O-二甲基酪氨酰)-L-N-Boc-丝氨酸(57)：向冷却至0℃的丝氨酸苯甲酰甲基酯56(500mg，0.73mmol)在AcOH水溶液(6mL，90％)中的溶液中加入Zn粉(381mg，5.48mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌3小时，用Celite过滤并用EtOAc(25mL)洗涤Celite。用10％KHSO₄(20mL)、NaHCO₃(20mL，饱和)和NaCl(20mL，饱和)洗涤滤液。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，MeOH/CH₂Cl₂1/9)而得到酸57(290mg，75％)，为白色固体。R_f0.35(MeOH/CH₂Cl₂1/9)。mp＝71-72℃。[α]_D ²⁰＝-2.5(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1.43(m，9H)，2.78(s，3H)，2.81-3.01(m，1H)，3.15-3.26(m，1H)，3.79(s，3H)，4.31-4.45(m，2H)，3.65-3.70(m，1H)，4.89-5.05(m，2H)，5.55-5.67(m，1H)，6.71-6.80和6.93-7.05(m，2H)，7.26-7.33(m，5H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：28.3，33.4，33.7，53.1，55.1，60.8，67.5，68.0，80.0，113.9，127.4，127.8，128.3，128.8，129.6，129.7，136.5，137.0，158.3，170.1，174.3。IR(净)3354.1，2933.3，1706.0，1513.7，1247.5，1163.3，1032。HRMS m/zC₂₇H₃₄N₂O₉Na(M+Na)计算值：553.2162(M+Na)；测定值553.2176。

[Ser⁶]-Tamandarin B被保护的直链前体(59)：向冷却至0℃的52(117mg，0.18mmol)在二噁烷(5mL)中的溶液中加入HCl在二噁烷(5mL)中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐58(90mg，定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向冷却至-5℃的盐酸盐58(90mg，0.15mmol)、HBTU(61mg，0.16mmol)、HOBt(20mg，0.15mmol)和Tyr-ser酸57(80mg，0.15mmol)的混合物中加入CH₂Cl₂/DMF 2/1(3mL)的溶液，将该反应体系搅拌5分钟并加入DIPEA(106μL，0.60mmol)。将所得溶液在-5℃下搅拌过夜，用^tBuOMe(10mL)稀释，用10％KHSO₄(10mL)、NaHCO₃(10mL，饱和)和NaCl(10mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/1梯度)而得到59(105mg，65％)。R_f0.34(AcOEt/己烷1∶1)。[α]_D ²⁰＝-59.1(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.88-1.00(m，18H)，1.47(s，9H)，1.49-1.52(m，4H)，2.03-2.06(m，5H)，2.22-2.25(m，3H)，2.55-2.60(m，1H)，2.70-2.84(m，3H)，2.98-3.03(m，1H)，3.27(dt，J＝5.8和20.0Hz，1H)，3.80(s，3H)，4.12-4.15(m，1H)，4.50-4.53(m，3H)，4.53-4.59(m，2H)，5.00-5.23(m，6H)，5.80-5.83(m，1H)，6.78-6.80(m，3H)，7.06-7.08(m，3H)，7.29-7.38(m，11H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：14.5，17.3，18.6，20.2，21.0，23.3，24.6，24.8，27.8，28.2，28.8，30.3，32.5，33.8，38.8，46.8，48.4，55.1，58.9，60.3，60.5，61.0，64.3.66.9，67.2，68.5，78.1，78.5，79.3，113.8，127.5，127.9，128.1，128.3，128.5，128.8，129.7，135.3，136.5，156.7，157.5，158.2，167.3，168.0，169.6，170.7，171.3。IR(净)3315.5，2968.3，1744.0，1670.0，1637.7，1513.9，1447.3，1170.6。HRMS m/z C₅₇H₇₉N₅O₁₅Na计算值：1096.5470(M+Na)；测定值1096.5498。

[Ser⁶]-Tamandarin B大环(61)：向在氩气环境中的被保护的直链前体59(206mg，0.19mmol)溶于MeOH(15mL)中的溶液中加入Pd(OH)₂(81mg)。用H₂净化该反应体系并在氢气(1atm)环境中搅拌过夜。将该混合物通过Celite过滤。浓缩滤液至得到游离直链前体60(150mg，91％)，为黄色油状物，不经纯化将其用于下一步。将粗氨基酸直链前体60(150mg，0.17mmol)溶于CH₃CN(30mL)并冷却至0℃。加入HATU(160mg，0.42mmol)，随后滴加NNM(38μL，0.34mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时且然后搅拌过夜。在真空中浓缩该反应混合物，用EtOAc(15mL)稀释，用10％KHSO₄(10mL)、5％NaHCO₃(10mL)和NaCl(10mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷2/1)而得到被保护的大环61(130mg，89％)，为白色泡沫。R_f0.23(AcOEt/己烷1/2)。[α]_D ²⁰＝-56.1(c＝1，CHCl₃)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.89-1.05(m，18H)，1.45(m，9H)，1.62-1.74(m，1H)，2.00-2.20(m，4H)，2.55(m，3H)，2.81(dd，1H)，2.99(dd，1H)，3.15(dd，1H)，3.36(dd，1H)，3.53(m，1H)，3.67(m，1H)，3.73(m，1H)，3.80(s，3H)，3，91(m，1H)，4.10(m，1H)，4.19(m，1H)，4.42(td，J＝和，1H)，4.48(m，1H)，4.51(dd，J＝和，1H)，4.59(m，1H)，4，91(m，1H)，5.06(m，2H)，6.84(d，2H)，7.01(d，2H)，7.77(d，2H)，8.55(d，2H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：17.4，17.8，18.7，20.2，20.6，21.4，23.5，24.9，25.1，26.0，28.0，28.1，28.3，28.6，28.8，30.2，30.7，34.1，38.6，46.1，47.0，48.7，48.9，52.4，55.3，57.2，62.9，63.7，65.6，68.7，69.3，78.7，80.5，114.1，129.8，130.3，155.6，158.6，169.1，170.8，171.1，171.2。IR(净)3314.2，2924.3，2359.9，1742.6，1630.7。HRMS m/z C₅₇H₇₉N₅O₁₅Na计算值：1096.5470(M+Na)；测定值1096.5498。

[N-Ser⁶]-Tamandarin B(62)：向Boc保护的大环61(20mg，0.024mmol)在HPLC二噁烷(10mL)中的溶液中加入HCl在二噁烷(10mL)中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐(18mg，定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向冷却至0℃的大环胺盐(18mg，0.023mmol)和侧链(11mg，0.035mmol)在CH₂Cl₂(3mL)中的混合物中加入BOP(15mg，0.035mmol)和NMM(10μL，0.092mmol)。在0℃下30分钟后，将该混合物在室温下搅拌过夜。用饱和NaCl溶液(2mL)处理该反应体系并用EtOAc(2×10ml)提取。用10％HCl(5mL)、NaHCO₃(5mL)和NaCl(5mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过HPLC纯化粗油(24mg)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)：δ0.82-0.96(m，24H)，1.09-1.28(m，14H)，1.39-1.43(m，3H)，1.64(m，2H)，1.88-1.98(m，2H)，2.10-2.15(m，2H)，2.58(s，3H)，2.90-2.95(m，1H)，3.05(s，3H)，3.09-3.12(m，1H)，3.35-3.43(m，1H)，3.43-3.82(m，5H)，3.79(s，3H)，3.98-4.05(m，1H)，4.12-4.17(m，1H)，4.45-4.50(m，1H)，4.62-4.66(m，1H)，4.67-4.70(m，2H)，5.05(d，J＝5.3，1H)，5.29-5.32(m，2H)，6.80(d，J＝8.7Hz，2H)，7.02(d，J＝8.6Hz，2H)，7.65(d，J＝6.7Hz，1H)，8.09(d，J＝9.5Hz，1H)，8.45(d，J＝8.9Hz，1H)。HRMS m/zC₅₂H₈₁N₇O₁₄Na(M+Na)计算值：1050.5739；测定值1050.5731。

实施例5

Ser⁶Pyr Tamandarin B的合成

如方案17中所示制备tamandarin(Ser⁶Pyr Tamandarin B)的丝氨酸-丙酮酸类似物。

方案17

使用在二噁烷中的HCl(气体)除去Ser⁶tamandarin B大环中的N-Boc基团。随后使用在DMF/DCM中的HATU和NMM与D-Cbz-N-Me-Leu偶联得到缩酚酸肽63，产率50％。使用如本文所述的条件氢解CBz基团并与脯氨酰-丙酮酰片段偶联而得到所需的类似物64。

实施例6

Ala⁴Tamandarin B的合成

如方案18-20中所示合成tamandarin B(Ala⁴Tamandarin B)的丙氨酸类似物。

方案18

方案19

方案20

N-Boc-L-亮氨酰-N-L-丙氨酸苄酯(67)：向N-Boc-L-丙氨酸苄酯(66)(660mg，2.36mmol)在HPLC EtOAc(10mL)中的溶液中加入HCl在EtOAc(5mL)中的饱和溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐(定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向冷却至0℃的盐酸盐(500mg，2.78mmol)在CH₂Cl₂(6mL)中的溶液中加入NMM(423μl，4.17mmol)。15分钟后，加入N-Boc-L-亮氨酸一水合物(693mg，2.78mmol)、HOBt(425mg，2.78mmol)和DCC(630mg，3.05mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌14小时并用CH₂Cl₂稀释(25mL)且过滤。用HCl 1N(20mL)、NaHCO₃(20mL，饱和)和盐水(20mL)洗涤所得溶液，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/6梯度)而得到67(650mg，78％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.99-1.01(m，6H)，1.43(d，J＝6.8Hz，3H)，1.44(s，9H)，1.45-1.75(m，3H)，4.15-4.25(m，1H)，4.55-4.66(m，1H)，5.00-5.25(m，2H)，5.45-5.53(m，1H)，7.29-1.34(m，5H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：21.5，24.1，28.05，41.2，47.7，52.5，66.6，79.3，82.2，127.8，128.1，128.5，135.2，155.6，172.2，172.6。

N-羟基戊酰-N-亮氨酰-丙氨酸苄酯(69)：向67(625mg)在HPLCAcOEt(10mL)中的溶液中加入HCl在AcOEt(5mL)中的饱和溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐68(定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向冷却至0℃的盐酸盐68(522mg，1.59mmol)在CH₂Cl₂(6mL)中的溶液中加入NMM(197μl，1.75mmol)。15分钟后，分批加入α-羟基戊酸(187mg，1.59mmol)和DCC(360mg，1.75mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌14小时并用CH₂Cl₂稀释(25mL)且用HCl 1N(20mL)、NaHCO₃(20mL，饱和)和盐水(20mL)洗涤所得溶液，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/1)而得到69(480mg，77％)，为白色固体。R_f0.31(AcOEt/己烷1/1)。[α]_D ²⁰＝-45.3(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.82(d，J＝6.8Hz，3H)，0.86(d，J＝6.1Hz，3H)，0.90(d，J＝6.1Hz，3H)，0.99(d，J＝6.8Hz，3H)，1.36(d，J＝7.1Hz，3H)，1，57-1.63(m，3H)，1.89-1.93(m，1H)，2.02-2.16(m，1H)，3.95-3.97(m，1H)，4.49-4.96(m，2H)，5.13(c，J＝12.3，2H)，7.03(d，J＝7.0Hz，1H)，7.18(d，J＝8.5Hz，1H)，7.30-7.35(m，5H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：15.5，17.8，19.1，21.7，22.8，24.6，31.6，33.8，40.9，51.1，67.1，76.2，128.1，128.3，168.6，135.3，172.1，172.8，173.8。

(3S，4R)-4-叔丁氧羰基氨基-5-甲基-3-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)己酸N-羟基戊酰-N-亮氨酰-O-苄基丙氨酸酯(70)：向冷却至-5℃的肽69(200mg，0.51mmol)在CH₂Cl₂(4mL)中的溶液中分批加入DMAP(18.4mg，0.15mmol)、酸48(229mg，0.61mmol)和DCC(157mg，0.76mmol)。将该反应混合物在-5℃下搅拌7小时，过滤并蒸发。将残余物溶于CH₃CN(7mL)，再次过滤并蒸发。将粗油溶于EtOAc(10mL)并用10％KHSO₄(10mL)、NaHCO₃(10mL，饱和)和NaCl(10mL，饱和)洗涤。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/4梯度)而得到70(340mg，89％)，为白色泡沫。R_f0.72(AcOEt/己烷1∶1)。[α]_D ²⁰＝-50.4(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：旋转异构体混合物0.05(s，6H)，0.77-1.04(m，27H)，1.30和1.39(d，J＝6.7Hz，3H)，1.42和1.52(s，9H)，1.30-1.70(m，5H)，2.56-2,70(m，2H)，3.19-3.22(m，1H)，3.41-3.47(m，1H)，3.83-3.85(m，1H)，3.99-4.03(m，1H)，4.30-4.32(m，2H)，4.35-4.38(m，1H)，4.48-4.53(m，1H)，4.67-4.70(m，1H)，4.73-4.75(m，1H)，4.82-4.85(m，1H)，4.99-5.13(m，2H)，5.15-5.21(m，2H)，6.33(d，J＝7.2Hz，1H)，7.18-7.30(m，5H)，8.39(d，J＝8.0Hz，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：-5.1，-4.8，14.6，17.2，17.6，17.9，18.6，20.3，21.2，22.8，22.9，24.5，24.6，24.8，25.3，25.6，28.1，28.2，34.8，39.6，48.0，48.3，50.8，50.9，55.5，63.1，66.6，70.1，71.3，78.9，79.5，82.1，127.9，128.0，128.3，135.4，156.1，157.3，169.6，170.0，170.5，170.9，171.5，172.2，172.6，172.9。HRMS m/zC₃₉H₆₇N₃O₉SiNa(M+Na)计算值：772.4544；测定值772.4551。

[Ala⁴]-Tamandarin B被保护的直链前体(73)：向冷却至0℃的70(80mg，0.10mmol)在二噁烷(2mL)中的溶液中加入HCl在二噁烷(2mL)中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐71(61mg，定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向冷却至-5℃的盐酸盐(61mg，0.10mmol)、HBTU(41.7mg，0.11mmol)、HOBt(13.5mg，0.10mmol)和Tyr-Thr酸72(54mg，0.10mmol)的混合物中加入CH₂Cl₂/DMF 2/1(3mL)的溶液，将该反应体系搅拌5分钟并加入DIPEA(71μL，0.40mmol)。将所得溶液在-5℃下搅拌过夜，用^tBuOMe(10mL)稀释，用10％KHSO₄(10mL)、NaHCO₃(10mL，饱和)和NaCl(10mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/1梯度)而得到73(98mg，86％)。R_f0.38(AcOEt/己烷1∶1)。[α]_D ²⁰＝-34.4(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.88-1.02(m，18H)，1.19(d，J＝6.9Hz，3H)，1.26(d，J＝6.9Hz，3H)，1.48(s，9H)，1.55-1.62(m，4H)，1.87-1.95(m，2H)，2.22-2.45(m，2H)，2.55-2.70(m，3H)，2.84(s，3H)，2.97-3.05(m，1H)，3.11-3.19(m，1H)，3.81(s，3H)，4.12-4.35(m，2H)，4.41-4.48(m，1H)，4.55-4.58(m，1H)，4.63-4.66(m，1H)，5.00-5.20(m，6H)，5.30-5.33(m，1H)，5.62(d，J＝7.3Hz，1H)，6.77(d，J＝8.3Hz，2H)，6.98(m，1H)，7.06(d，J＝7.3Hz，1H)，7.19(m，1H)，7.29-7.42(m，10H)，7.60-7.66(m，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：16.2，16.9，17.6，18.7，20.1，23.1，24.5，24.8，25.5，26.9，28.1，28.2，30.2，32.3，33.8，34.0，37.9，39.8，48.2，51.1，55.2，57.5，60.6，61.1，66.9，67.5，69.1，70.0，78.1，80.3，113.9，127.5，128.0，128.3，128.4，128.5，129.8，1315.3，136.2，156.9，158.4，170.1，170.9，171.2，171.9，172.4。IR(净)3297.6，2962.0，1744.0，1658.8，1514.2，1166.6。HRMS m/z C₅₇H₇₉N₅O₁₅Na计算值：1096.5470(M+Na)；测定值1096.5498。

[Ala⁴]-Tamandarin B大环(74)：向在氩气环境中的被保护的直链前体73(102mg，0.09mmol)溶于MeOH(88mL)中的溶液中加入Pd(OH)₂(44mg)。用H₂净化该反应体系并在氢气(1atm)环境中搅拌过夜。将该混合物通过Celite过滤并浓缩滤液至得到游离直链前体14(77mg，96％)，为黄色油状物。将粗氨基酸直链前体(77mg，0.91mmol)溶于CH₃CN(20mL)并冷却至0℃。加入HATU(815mg，0.22mmol)，随后滴加NNM(20μL，1.82mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时且然后搅拌过夜。在真空中浓缩该反应混合物，用EtOAc(15mL)稀释，用10％KHSO₄(15mL)、5％NaHCO₃(15mL)和NaCl(15mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷2/1)而得到被保护的大环74(45mg，60％)，为白色泡沫。R_f0.24(AcOEt/己烷1/2)。[α]_D ²⁰＝-33.09(c＝1，CHCl₃)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.92-1.04(m，18H)，1.16(d，J＝6.8Hz，3H)，1.17-1.30(m，3H)，1.49(s，9H)，1.51-1.61(m，1H)，1.73-1.75(m，1H)，1.83-1.86(m，1H)，1.93-1.97(m，1H)，2.30-2.40(m，1H)，2.57-2.39(m，1H)，3.00-3.05(m，1H)，3.08(s，3H)；3.19-3.21(m，1H)，3.49-3.51(m，1H)，3.82(s，3H)，3.98-4.00(m，1H)，5.01-5.06(m，2H)，5.27-5.30(m，1H)，5.56-5.66(m，1H)，6.67-6.69(m，1H)，6.88(d，J＝7.9Hz，2H)，7.00-7.09(m，1H)，7.12(d，2H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：15.1，18.4，18.9，20.9，21.1，23.2，24.0，24.8，24.9，25.5，28.0，28.1，30.1，33.7，34.4，39.01，39.3，45.4，47.1，51.2，55.3，69.3，71.9，79.5，80.6，114.1，114.2，129.9，132.3，156.1，169.01，170.9，171.5，172.3，173.2。HRMS m/z C₄₁H₆₅N₅O₁₂Na计算值：842.4527(M+Na)；测定值842.4545。

[N-Ala⁴]-Tamandarin B(75)：向Boc保护的大环74(11mg，0.013mmol)在HPLC二噁烷(5mL)中的溶液中加入HCl在二噁烷(5mL)中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌4小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐(定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向冷却至0℃的大环胺盐(10mg，0.013mmol)和侧链(6.2mg，0.019mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的混合物中加入BOP(8.4mg，0.019mmol)和NMM(6μL，0.052mmol)。在0℃下30分钟后，将该反应体系在室温下搅拌过夜。用NaCl溶液(5mL，饱和)处理该反应体系并用EtOAc(2×10mL)提取。用10％HCl(5mL)、5％NaHCO₃(5mL，饱和)和NaCl(10mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过HPLC纯化粗油(10mg，77％)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)：δ0.82-1.46(m，32H)，1.46-2.10(m，12H)，2.16(m，4H)，2.65(m，1H)，2.82-3.01(m，1H)，3.05(s，3H)，3.20(s，3H)，3.49-3.55(m，2H)，3.63-3.92(m，5H)，3.85(s，3H)，4.09(m，1H)，4.32-4.43(m，2H)，4.60-4.65(m，1H)，4.75(t，J＝6.7，1H)，4.88(t，J＝8.0，1H)，5.01(d，J＝5.3，1H)，5.24(s，2H)，6.64-6.66(m，1H)，6.85(d，J＝8.7Hz，2H)，7.14(d，J＝8.8Hz，2H)，7.22-7.23(m，1H)。MS m/z C₅₁H₈₁N₇O₁₄计算值：1016.2；测定值1016.4(M+H)⁺。

实施例7

L-Me-Ala⁴Tamandarin B的合成

如方案21和22中所示合成tamandarin B的L-甲基丙氨酸类似物(L-Me-Ala⁴Tamandarin B)。然后使化合物85进行如下所述反应而形成L-甲基丙氨酸类似物。

方案21

方案22

Boc-L-N-甲基丙氨酸(76)：向在0℃下的搅拌的L-Boc-丙氨酸(5g，26.4mmol)在THF(80mL)中的溶液中分批加入KOH细粉(10.4g，187mol)，随后添加硫酸氢四丁基铵(0.5g，按重量计10％)。然后在15分钟内滴加硫酸二甲酯(10mL，105mmol)。将反应体系再搅拌30分钟并加入H₂O(50mL)。在室温下搅拌5小时后，加入20％氢氧化铵水溶液(20mL)。用乙醚(100mL)稀释该反应体系，分离水层并用饱和NaHCO₃水溶液(2×40mL)提取有机层。用1M KHSO₄将合并的水层酸化至pH 1并用EtOAc(2×200mL)提取。合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。得到产生的酸76(4.3g，80％)，为黄色油状物且不经纯化将其用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1.43-1.55(m，12H)，2.91(br s，3H)，4.54-4.58(m，1H)，4.89-4.93(m，1H)。

N-Boc-L-N-甲基丙氨酸苄酯(77)：向冷却至0℃的L-Boc-N-甲基丙氨酸76(2.1g，10.3mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入Et₃N(1.6mL，11.3mmol)和苄基溴(1.3mL，11.3mmol)。将该混合物在室温下搅拌18小时并在减压下蒸发溶剂。蒸发残余物，用CH₂Cl₂(20mL)稀释并用HCl 1N(15mL)、饱和NaHCO₃(15mL)和H₂O(15mL)洗涤。合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。得到产生的酯77(2.25g，95％)，为黄色油状物且不经纯化将其用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1.44-1.54(m，12H)，2.81和2.90(br s，3H)，4.49-4.53(m，1H)，4.83-4.89(m，1H)，5.18(s，2H)，7.27-7.43(m，5H)。

N-Boc-L-亮氨酰-L-N-甲基丙氨酸酸苄酯(79)：向L-N-Boc-N-甲基丙氨酸苄酯(77)(320mg，1.09mmol)在HPLC二噁烷(8mL)中的溶液中加入HCl在二噁烷(5mL)中的饱和溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐(定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向冷却至0℃的盐酸盐(250mg，1.09mmol)在CH₂Cl₂(10mL)和DMF(5mL)中的溶液中加入NMM(221μL，2.08mmol)。15分钟后，加入N-Boc-L-亮氨酸一水合物(246mg，0.99mmol)和HATU(779mg，2.08mmol)。将该混合物在室温下搅拌14小时并蒸发CH₂Cl₂。用乙醚(25mL)稀释所得残余物并用HCl 1N(20mL)、饱和NaHCO₃(20mL，)和盐水(20mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。不经纯化将粗油用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.91(d，J＝6.7Hz，3H)，0.99(d，J＝6.7Hz，3H)，1.48(m，13H)，1.69-1.78(m，2H)，3.01(s，3H)，4.60-4.71(m，1H)，5.10-5.29(m，3H)，5.35-5.48(m，1H)，7.31-7.42(m，5H)。HRMS m/z C₂₂H₃₄N₂O₅Na(M+Na)计算值：429.2365；测定值429.2385。

N-羟基戊酰-N-L-亮氨酰-N-L-甲基丙氨酸苄酯(81)：向二肽79(360mg)在HPLC二噁烷(10mL)中的溶液中加入HCl在二噁烷(6mL)中的饱和溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐80(330mg，定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向冷却至0℃的盐酸盐80(303mg，0.88mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液中加入NMM(1080μL，0.96mmol)。15分钟后，分批加入羟基戊酸(104mg，0.88mmol)和DCC(200mg，0.96mmol)。将该混合物在室温下搅拌14小时，用CH₂Cl₂(20mL)稀释，用HCl 1N(20mL)、NaHCO₃(20mL，饱和)和盐水(20mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷2/1)而得到81(258mg，72％)，为无色油状物。R_f0.30(EtOAc/己烷2/1)。[α]_D ²⁰＝-37.2(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.87(d，J＝6.8Hz，3H)，0.89(d，J＝6.1Hz，3H)，0.90(d，J＝6.1Hz，3H)，1.03(d，J＝6.8Hz，3H)，1.42(d，J＝7.3Hz，3H)，1.55-1.66(m，1H)，1.66-.1.76(m，1H)，2.14-2.20(m，1H)，3.02(s，3H)，3.98(d，J＝1Hz，1H)，4.98-5.02(m，1H)，5.17(m，2H)，5.37(c，J＝6.9Hz，2H)，7.29-7.40(m，5H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：14.07，15.5，19.12，21.5，21.6，23.1，23.3，24.6，24.7，25.4，31.0，31.7，33.4，41.3，47.2，52.3，67.0，76.1，128.2，128.4，128.6，135.3，171.3，173.3，173.5。IR(净)3378.8，2958.9，1740.3，1652.0，1635.5，1558.0，1506.2，1456.2，1196.1，1086.6。HRMS m/z C₂₂H₃₄N₂O₅Na(M+Na)计算值：429.2365；测定值429.2370。

(3S，4R)-4-叔丁氧羰基氨基-5-甲基-3-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)己酸N-羟基戊酰-N-L-亮氨酰-N-L-甲基丙氨酸苄酯(82)：向冷却至-5℃的肽81(245mg，0.61mmol)在CH₂Cl₂(4mL)中的溶液中分批加入DMAP(22.4mg，0.15mmol)、酸48(271mg，0.72mmol)和DCC(157mg，0.18mmol)。将该反应混合物在-5℃下搅拌7小时，过滤并蒸发。将残余物溶于CH₃CN(8mL)，再次过滤并蒸发。将粗油溶于EtOAc(15mL)并用10％KHSO₄(15mL)、NaHCO₃(15mL，饱和)和NaCl(15mL，饱和)洗涤。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/4)而得到70(325mg，70％)，为白色泡沫。R_f0.22(AcOEt/己烷4∶1)。[α]_D ²⁰＝-33.6(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：旋转异构体混合物0.01(s，6H)，0.85-1.00(m，27H)，1.39(d，J＝6.7Hz，3H)，1.44和1.51(s，9H)，1.29-1.40(m，1H)，1.56-1,70(m，2H)，1.89-1.92(m，1H)，2.00-2.09(m，2H)，2.43-2.46(m，1H)，2.66-2.70(m，1H)，2.69-2.70(m，1H)，2.94和3.01(s，3H)，3.43-3.46(m，1H)，3.60-3.65(m，1H)，3.98-4.02(m，4H)，4.09-4.14(m，2H)，4.31(d，J＝7.8Hz，1H)，4.81-4.82(m，1H)，4.99-5.13(m，2H)，5.15-5.21(m，1H)，6.63(d，J＝7.2Hz，1H)，6.74(d，J＝5.2Hz，1H)，7.18-7.30(m，5H)，8.39(d，J＝6.5Hz，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：-5.0，-4.5，13.9，14.1，14.7，16.5，17.6，18.1，18.5，18.8，20.4，21.3，21.5，23.2，24.6，24.7，25.7，26.9，27.7，28.4，30.1，30.4，30.7，30.9，39.3，39.9，41.8，42.8，47.0，51.9，52.3，59.4，60.2，63.0，66.7，66.9，70.1，71.4，78.9，79.2，79.4，82.4，128.08，128.2，128.3，128.5，135.4，135.5，156.2，157.3，169.1，169.7，170.8，171.0，171.2，171.6，172.5，173.6。IR(净)2959.1，1740.5，1694.0，1644.4，1521.2，1471.5，1387.0，1252.7 1166.6，1086.1。HRMS m/z C₄₀H₆₉N₃O₉SiNa(M+Na)计算值：786.4700；测定值786.4707。

[N-Me-Ala⁴]-Tamandarin B被保护的直链前体(84)：向冷却至0℃的82(285mg，0.37mmol)在二噁烷(5mL)中的溶液中加入HCl在二噁烷(5mL)中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐83(218mg，定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向冷却至-5℃的盐酸盐83(218mg，0.37mmol)、HBTU(147.3mg，0.38mmol)、HOBt(50mg，0.37mmol)和Tyr-Thr酸72(201mg，0.37mmol)的混合物中加入CH₂Cl₂/DMF 2/1(10mL)的溶液，将该反应体系搅拌5分钟并加入DIPEA(264μL，1.48mmol)。将所得溶液在-5℃下搅拌过夜，用t-BuOMe(25mL)稀释，用10％KHSO₄(20mL)、NaHCO₃(20mL，饱和)和NaCl(20mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/1梯度)而得到84(280mg，69％)。R_f0.22(AcOEt/己烷1∶1)。[α]_D ²⁰＝-45.8(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.87-1.01(m，18H)，1.00-1.16(m，4H)，1.28(d，J＝6.9Hz，3H)，1.47(s，9H)，1.68-1.69(m，2H)，1.70-1.77(m，1H)，2.07-2.09(m，1H)，2.22-2.25(m，1H)，2.75-2.77(m，1H)，2.85，2.87(m，1H)，2.88(s，3H)，2.98(s，3H)，3.23(dd，J＝7.3和14.3Hz，1H)，3.77(s，3H)，4.10-4.15(m，1H)，4.21-4.28(m，2H)，4.35-4.38(m，1H)，4.60-4.66(m，1H)，5.00-5.12(m，2H)，5.20-5.33(m，4H)，5.25-5.30(m，1H)，5.58(d，J＝7.3Hz，1H)，6.79(d，J＝8.3Hz，2H)，7.02(m，1H)，7.09(d，J＝7.3Hz，1H)，7.20(m，1H)，7.29-7.37(m，10H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：14.4，16.8，17.8，18.6，19.0，20.7，21.7，23.7，25.1，28.5，28.6，30.9，31.3，32.3，34.5，39.0，41.1，41.2，47.6，52.7，55.6，58.1，61.2，67.9，69.2，70.5，71.0，78.6，81.1，114.3，128.05，128.4，128.6，128.8，129.0，130.3，135.7，136.8，156.1，157.3，158.8，169.9，170.4，171.4，171.6，173.7。IR(净)3318.3，2961.1，2993.3，1741.8，1683.1，1636.1，1514.0，1455.7，1306.1，1247.8，1175.8。HRMS m/zC₅₇H₈₁N₅O₁₅Na计算值：1098.2756(M+Na)；测定值1098.5657。

[N-Me-Ala⁴]-Tamandarin B大环(85)：向在氩气环境中的被保护的直链前体84(280mg，0.33mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中加入Pd(OH)₂(100mg)。用H₂净化该反应体系并在氢气(1atm)环境中搅拌过夜。将该混合物通过Celite过滤，并浓缩滤液至得到游离直链前体(208mg，94％)，为黄色油状物。将粗氨基酸直链前体(208mg，0.24mmol)溶于CH₃CN(50mL)并冷却至0℃。加入HATU(219mg，0.57mmol)，随后滴加NNM(51μL，0.48mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时且然后搅拌过夜。在真空中浓缩该反应混合物，用EtOAc(30mL)稀释，用10％KHSO₄(25mL)、5％NaHCO₃(25mL)和NaCl(25mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷2/1)而得到被保护的大环85(94mg，48％)，为白色泡沫。R_f0.30(AcOEt/己烷1/2)。[α]_D ²⁰＝-28.77(c＝1，CHCl₃)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.88-1.00(m，17H)，1.22-1.33(m，3H)，1.17-1.30(m，4H)，1.49(s，9H)，1.48-1.52(m，1H)，1.97-2.05(m，2H)，2.09-2.14(m，1H)，2.30-2.40(m，1H)，2.51(dd，J＝7.0和13.2Hz，1H)，2.59-2.61(m，2H)，2.80和2.91(s，3H)，2.88-2.91(m，1H)，3.09和3.15(s，3H)，3.10-3.15(m，1H)，3.28-3.33(m，1H)，3.49-3.51(m，1H)，3.75和3.78(s，3H)，4.12-4.13(m，1H)，4.22-4.23(m，1H)，4.51-4.52(m，1H)，4.92-4.93(m，1H)，4.94(d，J＝5.8Hz，1H)，4.98-5.05(m，2H)，5.19-5.21(m，1H)，5.25-5.27(m，1H)，6.80(t，J＝6.5Hz，2H)，7.03(dd，J＝8.5和11.7Hz，2H)，7.40(d，J＝8.6Hz，1H)，7.71(d，J＝9.2Hz，1H)，7.89(d，J＝8.1Hz，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：14.1，14.8，15.5，18.3，18.8，19.0，19.4，20.6，23.8，23.9，25.0，25.3，28.4，30.1，30.2，30.8，30.9，33.9，34.8，38.9，39.3，47.7，48.2，51.3，55.6，56.5，62.0，66.6，69.3，69.5，70.3，71.5，79.3，80.9，81.0，114.4，114.7，128.4，129.7，130.2，130.4，130.8，156.2，156.4，159.0，159.2，169.1，170.0，170.2，171.4，171.8，172.0，172.9，174.1，174.3。IR(净)3334.2，2960.5，1745.1，1658.6，1961.2，1514.1，1248.5，1164.1，1082.6。HRMS m/z C₄₂H₆₇N₅O₁₂Na计算值：856.4683(M+Na)；测定值856.4617。

[N-Me-Ala⁴]-Tamandarin B(120)：向Boc保护的大环85(15mg，0.018mmol)在HPLC二噁烷(5mL)中的溶液中加入HCl在二噁烷(5mL)中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌4小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐(14mg，定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向在0℃下的大环胺盐(14mg，0.018mmol)和侧链(10mg，0.031mmol)在CH₂Cl₂(3mL)中的混合物中加入BOP(14mg，0.031mmol)和NMM(9μL，0.72mmol)。在0℃下30分钟后，将该混合物在室温下搅拌过夜。用NaCl溶液(2mL，饱和)处理该反应体系并用EtOAc(3×10mL)提取。用10％HCl(10mL)、5％NaHCO₃(10mL)和NaCl(10mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过HPLC纯化粗油(13mg)。

实施例8

L-3-(2-萘基)丙氨酸⁵Tamandarin B的合成

如方案23-26中所示和下述制备tamandarin(L-3-(2-萘基)丙氨酸⁵Tamandarin B)的萘丙氨酸类似物。

方案23

方案25

方案26

L-N-Boc-苏氨酸苯甲酰甲基酯(86)：向冷却至0℃的L-N-Boc-苏氨酸(2g，9.13mmol)在EtOAc(20mL)中的搅拌混悬液中加入Et₃N(1.31mL，9.13mmol)和溴乙酰苯(1.82g，9.13mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌2天，用EtOAc(50mL)稀释并用10％HCl(20mL)、5％NaHCO₃(20mL，饱和)和饱和NaCl(20mL)溶液洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层并蒸发溶剂。将残余物与乙醚一起研磨并过滤而得到86(2.8g，83％)，为黄色泡沫。R_f0.55(AcOEt/己烷1∶1)。[α]_D ²⁰＝-29.4(c＝2，AcOEt)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)：1.31(d，J＝6.6Hz，3H)，1,46(s，9H)，3.77(s，1H)，4,44(m，1H)，4.60(m，1H)，5.34(d，J＝16.5Hz，1H)，5.37(m，1H)，5,68(d，J＝16.7Hz，1H)，7.51(m，2H)，7.65(m，1H)，7.92(m，1H)。

L-N-Cbz-N-甲基-2-萘丙氨酸(87)：向在0℃下的搅拌的L-N-Cbz-2-萘丙氨酸(0.80g，2.29mmol)在THF(40mL)中的溶液中分批加入KOH细粉(0.89g，16.0mmol)，随后添加硫酸氢四丁基铵(80mg，按重量计10％)。然后在15分钟内滴加硫酸二甲酯(0.86mL，9.16mmol)。将反应体系再搅拌30分钟并加入H₂O(50mL)。在室温下搅拌5小时后，加入20％氢氧化铵水溶液(10mL)。用乙醚(50mL)稀释该反应体系，分离水层并用饱和NaHCO₃水溶液(2×20mL)提取有机层。用1M KHSO₄将合并的水层酸化至pH 1并用EtOAc(2×100mL)提取。合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。得到产生的酸87(832mg，90％)，为黄色油状物且不经纯化将其用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：2，89和2.94(s，3H)，2.27-3.32(m，1H)，3.46-3.55(m，1H)，4.97-5.09(m，3H)，7.12-7.52(m，12H)。

O-(L-N-Cbz-N-甲基-2-萘丙氨酸)-L-N-Boc-苏氨酸苯甲酰甲基酯(88)：向冷却至0℃的L-N-Boc-苏氨酸苯甲酰甲基酯86(852mg，2.29mmol)在CH₂Cl₂(15mL)中的溶液中加入DMAP(84mg，0.68mmol)和L-N-Cbz-N-甲基萘丙氨酸87(832mg，2.29mmol)。在0℃下搅拌10分钟后，加入DCC(519mg，2.52mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌过夜。过滤该混合物并将滤液浓缩至干。将残余物溶于CH₃CN(15mL)，再次过滤并蒸发。将粗油溶于EtOAc(50mL)并用10％KHSO₄(50mL)、NaHCO₃(50mL，饱和)和NaCl(50mL，饱和)洗涤。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷3/1梯度)而得到二肽88(1.02g，68％)，为淡黄色油状物。R_f0.25(AcOEt/己烷1∶3)。[α]_D ²⁰＝-27.6(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1.22(d，J＝6.9Hz，3H)，1.49(s，9H)，2.77和2.92(m，3H)，3.21-3.31(m，1H)，3.50-3.56(m，1H)，3.75(m，1H)，4.46-4.48(m，1H)，4.67-4.69(m，1H)，5.00-5.71(m，4H)，7.16-7.46(m，3H)，7.47-7.64(m，4H)，7.51-7.94(m，5H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：17.0，17.3，28.7，35.3，31.7，32.0，35.38，39.8，50.1，57.5，59.8，66.9，67.3，67.6，68.7，80.0，125.9，126.4，127.5，127.8，127.9，128.0，128.2，128.4，128.8，129.3，129.5，132.7，133.8，133.9，134.4，135.0，169.3，169.7，171.5，193.6。IR(净)3433.6，2977.9，1753.9，1707.6，1598.4，1510.7，1450.0，1367.5，1314.5，1161.2。

O-(L-N-Cbz-N-甲基萘丙氨酸)-L-N-Boc-苏氨酸(89)：向冷却至0℃的丝氨酸苯甲酰甲基酯88(500mg，0.75mmol)在AcOH水溶液(7mL，90％)中的溶液中加入Zn粉(383mg，5.48mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌3小时，用Celite过滤并用EtOAc(25mL)洗涤Celite。用10％KHSO₄(20mL)、NaHCO₃(20mL，饱和)和NaCl(20mL，饱和)洗涤滤液。干燥有机层(Na₂SO₄)并蒸发溶剂。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，MeOH/CH₂Cl₂1/9)而得到酸89(248mg，60％)，为白色泡沫。R_f0.35(MeOH/CH₂Cl₂1∶9)。[α]_D ²⁰＝+7.10(c＝0.7，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1.29-1.32(m，3H)，1.48(s，9H)，2.78-2.80(m，3H)，3.17-3.22(m，1H)，3.25-3.54(m，1H)，4.52-4.53(m，1H)，5.03-5.15(m，2H)，5.44-5.64(m，2H)，7.19-7.36(m，5H)，7.50-7.54(m，3H)，7.71-7.89(m，4H)。¹C-NMR(125MHz，CDCl₃)：16.4，16.7，20.7，28.1，31.7，32.0，34.6，34.9，39.8，50.1，57.3，60.6，66.4，72.2，80.0，125.4，125.9，126.7，127.5，127.9，128.2，128.8，132.2，133.4，134.2，136.1，156.1，156.9，169.3，169.7，169.8。IR(净)3435.1，2978.4，1743.4，1709.6，1499.9，1402.2，1315.6，1217.1，1162.0，1060.6，752.2。

[2-萘ala⁵]-Tamandarin B被保护的直链前体(90)：向冷却至0℃的56(110mg，0.14mmol)在二噁烷(5mL)中的溶液中加入HCl在二噁烷(5mL)中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐(85mg，定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向冷却至-5℃的盐酸盐(85mg，0.14mmol)、HBTU(53mg，0.14mmol)、HOBt(19mg，0.14mmol)和酸89(79mg，0.14mmol)的混合物中加入CH₂Cl₂/DMF 2/1(4mL)的溶液，将该反应体系搅拌5分钟并加入DIPEA(72μL，0.56mmol)。将所得溶液在-5℃下搅拌过夜，用t-BuOMe(10mL)稀释，用10％KHSO₄(10mL)、NaHCO₃(10mL，饱和)和NaCl(10mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/1梯度)而得到90(60mg，54％)。R_f0.23(AcOEt/己烷1∶1)。[α]_D ²⁰＝-34.6(c＝1，CH₂Cl₂)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.89-1.01(m，18H)，1.26-1.29(m，5H)，1.48(s，9H)，1.70-1.62(m，2H)，2.03-2.22(m，5H)，2.21-2.25(m，3H)，2.55-2.60(m，1H)，2.82-2.93(m，3H)，3.03-3.18(m，1H)，3.45-3.49(m，1H)，3.60-3.79(m，2H)，4.12-4.15(m，1H)，4.50-4.51(m，1H)，4.92-5.34(m，6H)，5.34-5.47(m，1H)，7.16-7.35(m，9H)，7.44-7.85(m，8H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：14.1，16.9，17.9，18.4，19.0，18.7，20.2，20.9，21.6，23.7，24.5，24.7，25.5，28.1，28.2，28.9，29.6，30.4，30.6，33.9，38.7，41.0，43.0，44.1，46.8，48.4，57.9，60.3，60.5，66.9，67.0，67.3，68.6，70.3，77.9，78.2，79.1，125.5，125.9，127.0，127.2，127.5，127.7，127.8，128.0，128.3，128.5，130.1，132.2，133.4，135.1，135.2，136.9，142.0，157.0，157.2，157.3，169.9，171.3，171.9，180.8。IR(净)3326.4，3062.0，2961.1，2873.6，2248.6，1743.7，1681.9，1635.0，1537.2，1453.5，1367.4，1170.2。HRMS m/z C₆₁H₈₁N₅O₁₄Na(M+Na)计算值：130.5677；测定值130.5634。

[2-萘ala⁵]-Tamandarin B大环(92)：向在氩气环境中的被保护的直链前体90(60mg，0.054mmol)在MeOH中的溶液中加入Pd(OH)₂(21mg)。用H₂净化该反应体系并在氢气(1atm)环境中搅拌过夜。将该混合物通过Celite过滤。浓缩滤液至得到游离直链前体91(45mg，96％)，为黄色油状物，不经纯化将其用于下-步。

将粗氨基酸直链前体60(45mg，0.050mmol)溶于CH₃CN(10mL)并冷却至0℃。加入HATU(46mg，0.12mmol)，随后滴加NNM(11μL，0.10mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时且然后搅拌过夜。在真空中浓缩该反应混合物，用EtOAc(10mL)稀释，用10％KHSO₄(10mL)、5％NaHCO₃(10mL)和NaCl(10mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷2/1)而得到被保护的大环92(28mg，65％)，为白色泡沫。R_f0.26(AcOEt/己烷1/2)。[α]_D ²⁰＝-55.2(c＝1，CHCl₃)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.90-1.02(m，24H)，1.29(d，6.6Hz，3H)，1.48(s，9H)，1.71-1.85(m，2H)，2.05-2.09(m，2H)，2.19-2.23(m，2H)，2.52(s，3H)，2.96(dd，J＝4.7和16.9Hz，1H)，3.46(dd，J＝10.7和14.0Hz，1H)，3.67(dd，J＝4.3和13.9Hz，1H)，3.73-3.77(m，2H)，3.78-3.83(m，1H)，3.99-4.05(m，1H)，4.39(dd，J＝3.1和10.3Hz，1H)，4.56-4-.59(m，1H)，4.92(t，J＝12.0Hz，1H)，4.97-5.00(m，2H)，5.00-5.02(m，1H)，7.36-7.37(m，1H)，7.49-7.52(m，2H)，7.56-7.58(m，2H)，7.72-7.74(m，1H)，7.76-7.79(m，2H)，7.98-8.00(m，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：15.6，18.4，189，18.9，20.6，21.2，23.9，25.3，25.4，28.0，28.4，28.5，30.8，35.6，39.0，39.3，39.5，47.2，48.8，56.3，57.5，60.7，66.0，69.3，71.9，79.6，80.7，126.3，126.9 127.5，127.8，128.2，128.5，128.9，132.8，133.9，135.9，156.2，169.0，170.1，170.9，171.7，172.0 173.2。IR(净)3339.5，2962.0，2872.0，2248.4，1742.0，1665.7，1635.5，1529.6，1451.1，1167.4，851.3。

[2-萘ala⁵]-Tamandarin B(93)：向Boc保护的大环92(28mg，0.032mmol)在HPLC二噁烷(3mL)中的溶液中加入HCl在二噁烷(3mL)中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌2小时。浓缩该溶液并用CH₂Cl₂稀释残余物且再次浓缩至得到盐酸盐(定量产率)，为白色固体，将其直接用于下一步。向冷却至0℃的大环胺盐(25mg，0.031mmol)和侧链(14.6mg，0.046mmol)在CH₂Cl₂(4mL)中的混合物中加入BOP(20.3mg，0.046mmol)和NMM(14μL，0.12mmol)。在0℃下30分钟后，将该反应体系在室温下搅拌过夜。用NaCl溶液(2mL，饱和)处理该反应体系并用EtOAc(2×10mL)提取。用10％HCl(5mL)、5％NaHCO₃(5mL，饱和)和NaCl(10mL，饱和)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过HPLC纯化粗油(8mg，61％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.82-0.96(m，24H)，1.09-1.28(m，14H)，1.31(d，J＝6.8，3H)，1.39(d，J＝6.8，3H)，1.64(m，3H)，2.10(m，4H)，2.48(s，3H)，3.10(s，3H)，3.09-3.15(m，2H)，3.35-3.41(m，2H)，3.43-3.82(m，5H)，4.29-4.33(m，1H)，4.42-4.47(m，1H)，4.65-4.70(m，1H)，4.72(t，J＝6.8，1H)，4.87(t，J＝8.3，1H)，5.02(d，J＝5.3，1H)，5.29-5.32(m，2H)，7.24-7.27(m，1H)，7.45-7.63(m，4H)，7.67-7.83(m，4H)。HRMS m/zC₅₆H₈₃N₇O₁₃Na(M+Na)计算值：1084.5946；测定值1084.5987。

实施例9

用Tamandarin大环上的酰胺键取代酯键

如方案27和28中所示制备通式XXX的化合物。

方案27

方案28

N-Boc-L-别-苏氨酸甲酯(106)：向N-Boc-L-别-苏氨酸(500mg，2.28mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入KHCO₃(637mg，4.56mmol)和MeI(227μl，3.65mmol)并将该反应体系在室温下搅拌5小时。加入水(20mL)并用乙醚(3×20mL)提取该混合物，干燥(Na₂SO₄)并蒸发至得到甲酯106(494mg，93％)，不经纯化将其用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1.19-1.25(m，3H)，1.48(s，9H)，3.78(s，3H)，4.05-4.10(m，1H)，4.32-4.40(m，1H)，4.45-4.54(m，1H)。

2-叔丁氧羰基氨基-1，3-丁二醇(107)：向冷却至0℃的甲酯106(450mg，1.93mmol)在HPLC EtOH(7mL)中的溶液中分批加入硼氢化钠(146mg，3.86mmol)。将该反应混合物在0℃下搅拌2小时并在室温下搅拌2小时。用NH₄Cl(饱和，15mL)使反应猝灭，用AcOEt(3×10mL)提取，干燥(Na₂SO₄)并蒸发。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷2/1)而得到二醇107(347mg，87％)，为无色油状物。R_f0.21(AcOEt/己烷1/2)。[α]_D ²⁰＝-10.7(c＝1，CHCl₃)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1.28(d，J＝6.9Hz，3H)，1.48(s，9H)，3.43-3.54(m，1H)，3.73(dd，J＝4.0 nd 14.1Hz，1H)，3.98(dd，J＝5.9和13.1Hz，1H)，4.00-4.05(m，1H)，5.33-5.40(m，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：20.3，28.2，28.3，56.1，62.4，69.9，79.8，153.3。IR(净)3343.8，2975.1，2931.7，1686.4，1520.0，1366.6，1248.9，1171.1，1046.3。

2-叔丁氧羰基氨基-1-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-丁二醇：向冷却至0℃的二醇107(340mg，1.65mmol)在CH₂Cl₂(4mL)中的溶液中加入Et₃N(274uL，1.98mmol)和DMAP(8mg，0.04mmol)。将该溶液搅拌5分钟并加入TBSCI(248mg，1.65mmol)。将该反应体系在室温下搅拌18小时，用NH₄Cl(饱和，15mL)猝灭并用CH₂Cl₂(3×10mL)提取，干燥(Na₂SO₄)并蒸发。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/9)而得到TBS醇(300mg，56％)，为无色油状物。R_f0.37(AcOEt/己烷1/9)。[α]_D ²⁰＝-24.7(c＝1，CHCl₃)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.05(s，6H)，0.86(s，9H)，1.30(d，J＝6.8Hz，3H)，1.47(s，9H)，3.46-3.51(m，1H)，4.75-4.80(m，1H)，4.89-4.92(m，1H)，3.98(dd，J＝1.9和11.5Hz，1H)，5.22-5.30(m，1H)。IR(净)3447.8，2954.8，2857.1，2362.1，1699.0，1498.3，1254.3，1173.8，1108.1，836.9，777.5。

2-叔丁氧羰基氨基-1-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-甲磺酰氧基丁烷(108)：向冷却至0℃的醇(100mg，0.31mmol)在CH₂Cl₂(10mL)中的溶液中加入Et₃N(64μL，0.46mmol)和MsCl(31μl，0.40mmol)。将该溶液搅拌1小时并用NH₄Cl(饱和，15mL)猝灭并用AcOEt(3×10mL)提取，干燥(Na₂SO₄)并蒸发而得到108(113mg，91％)，经进一步纯化将粗残余物用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.04(s，6H)，0.88(s，9H)，1.45-1.50(m，12H)，2.99(s，3H)，3.66-3.71(m，1H)，4.85-4.90(m，1H)，4.80-4.92(m，1H)。

3-叠氮基-2-叔丁氧羰基氨基-1-(叔丁基二甲基硅烷氧基)丁烷(109)：向甲磺酸酯108(500mg，1.26mmol)在HMPA(2mL)中的溶液中加入NaN₃(409mg，6.29mmol)和15-冠-5醚(252mg，1.26mmol)。将该溶液在55℃下搅拌3小时。将该反应混合物加入到EtOAc(30mL)中，用盐水(10mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)并蒸发。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/15)而得到叠氮化物109(160mg，34％)，为无色油状物。R_f0.33(AcOEt/己烷1/15)。[α]_D ²⁰＝-46.6(c＝0.4，CHCl₃)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.04(s，6H)，0.88(s，9H)，1.32(d，J＝6.7Hz，3H)，1.48(s，9H)，3.51-3.61(m，1H)，4.75-4.90(m，2H)，4.50-4.62(m，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：-5.5，14.1，16.5，25.8，28.3，31.6，55.2，57.2，62.4，174.3。IR(净)3326.1，2954.0，2931.1，2857.9，2359.9，2107.2，1718.2，1005.7，1471.2，1366.0，1254.5，1167.7，1098.0，838.1。

3-氨基-叔丁氧羰基氨基-1-(叔丁基二甲基硅烷氧基)丁烷(110)：向在氩气环境中的叠氮化物109(35mg，0.10mmol)在EtOH(1mL)中的溶液中加入10％Pd/C(7mg)。用H₂净化该反应体系并在氢气(1atm)环境中搅拌过夜。将该混合物通过Celite过滤。浓缩滤液至得到胺110(29mg，90％)。不经进一步纯化将粗残余物用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.05(s，6H)，0.90(s，9H)，1.12(d，J＝6.7Hz，3H)，1.47(s，9H)，3.21-3.31(m，1H)，3.42-3.48(m，1H)，3.63-3.82(m，2H)，5.01-5.10(m，1H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：-5.1，19.1，21.3，26.2，28.8，47.1，56.9，64.5，176.5。

3-(N-Cbz-N，O-二甲基酪氨酰)氨基-2-叔丁氧羰基氨基-1-(叔丁基二甲基硅烷氧基)丁烷(111)：向冷却至0℃的胺110(20mg，0.062mmol)在CH₂Cl₂(1mL)中的溶液中加入NMM(7μL，0.069mmol)和HOBt(25mg，0.18mmol)。将该溶液在0℃下搅拌15分钟并加入N-Cbz-N，O-二甲基酪氨酸(21)(21mg，0.062mmol)在CH₂Cl₂(1mL)中的溶液。最后加入于CH₂Cl₂(1mL)中的DCC(14.2mg，0.069mmol)的溶液。将该混合物在室温下搅拌16小时并过滤以除去沉淀。用CH₂Cl₂(10mL)稀释滤液并用10％KHSO₄(10mL)、5％NaHCO₃(10mL)和NaCl(10mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/3)而得到111(26mg，70％)，为白色泡沫。R_fO.36(AcOEt/己烷1/3)。[α]_D ²⁰＝-40.1(c＝0.5，CHCl₃)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：0.09(s，6H)，0.95(s，9H)，1.14-1.17(m，3H)，1.43(s，9H)，2.86(s，3H)，3.29-3.32(m，1H)，3.42-3.48(m，1H)，3.60-3.68(m，2H)，3.82(s，3H)，4.17-4.18(m，1H)，4.87-4.89(m，1H)，4.95-4.96(m，1H)，5.02-5.14(m，2H)，5.21-5.22(m，2H)，6.34-6.37(m，1H)，6.79-6.83(m，2H)，6.98-7.00(m，1H)，7.01-7.17(m，2H)，7.20-7.36(m，5H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：-5.5，17.9，18.2，25.8，28.3，33.2，44.5，55.12，62.6，67.3，57.1，66.1，113.8，127.5，127.9，128.4，129.8，158.2，171.5。IR(净)3328.5，2930.3，2856.3，2361.0，2346.6，2249.0，1708.8，1513.7，1452.5，1449.5。HRMS m/zC₃₄H₅₃N₅O₇Na(M+Na)计算值：666.3550；测定值666.3571。

3-(N-Cbz-N，O-二甲基酪氨酰)氨基-2-叔丁氧羰基氨基-1-丁醇(112)：将111(15mg，0.086mmol)在AcOH(1mL)中的溶液在室温下搅拌15小时。浓缩该反应体系至得到112(11mg，90％)，为无色油状物。经进一步纯化将粗残余物用于下一步。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：1.04(d，J＝6.9Hz，3H)，1.45(s，9H)，2.81(s，3H)，2.88-2.92(m，1H)，3.02-3.09(m，1H)，3.29-3.33(m，1H)，3.51-3.62(m，1H)，3.70-3.79(m，1H)，3.78(s，3H)，4.02-4.08(m，1H)，4.43-4.47(m，1H)，4.51-4.55(m，1H)，5.05-5.18(m，2H)，5.22(s，2H)，5.98-5.99(m，1H)，6.72((d，J＝7.9Hz，2H)，6.90-7.01(m，2H)，7.22-7.38(m，5H)。

实施例10

Lac⁹单元的修饰

如本文所述制备通式I的化合物，其中R⁵含有修饰的乳酸单元。

按照Petit和Larcheveque在《有机合成》(Org.Synth.)75：37-44(1998)中所述的步骤由(S)-丝氨酸制备(R)-缩水甘油酸(117)。

在有Et₃N存在下通过使N-Boc-脯氨酸与苄基溴反应制备L-脯氨酸苄酯(118)的三氟乙酸盐。使用三氟乙酸除去Boc基团。随后使(R)-缩水甘油酸(117)与119反应得到脯氨酸衍生物120。

在不开放环氧化物部分的情况下使用在MeOH中的LiOH除去苄酯。然后将N-缩水甘油基-L-脯氨酸用于制备合适的R⁵部分以制备通式I、IA或II的化合物，或另一方面，使N-缩水甘油基-L-脯氨酸直接与大环的游离胺，例如化合物35、脱保护的61偶联。

N-缩水甘油基-L-脯氨酸苄酯(120)：向冷却至0℃的L-脯氨酸苄酯(156mg，0.49mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入NMM(56μl，0.53mmol)和HOBt(198mg，1.47mmol)。将该溶液在0℃下搅拌15分钟并加入缩水甘油酸21(100mg，1.13mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液。最后加入DCC(253mg，1.23mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液。将该混合物在室温下搅拌16小时并过滤以除去沉淀。用CH₂Cl₂(10mL)稀释残余物并用10％KHSO₄(10mL)、5％NaHCO₃(10mL)和NaCl(10mL，饱和)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化粗油(硅胶，EtOAc/己烷1/1)而得到120(95mg，70％)，为白色泡沫。R_f0.26(AcOEt/己烷1/1)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：旋转异构体混合物1.87-1.92(m，2H)，1.91-1.98(m，2H)，1.99-2.03(m，1H)，2.19-2.20(m，2H)，2.20-2，22(m，1H)，2.66-2,68(m，1H)，2,80-2,82(m，1H)，2.94-2,95(m，2H)，3.30-3,31(m，1H)，3.56-3.57(m，2H)，357-370(m，2H)，3.72-3.85(m，1H)，4.57-4.59(m，1H)，4.70-4.72(m，1H)，5.16(s，2H)，5.22-5.29(m，2H)，7.25-7.38(m，10H)。¹³C-NMR(125MHz，CDCl₃)：22.2，24.9，28.7，30.9，31.5，45.9，46.3，46.4，47.2，48.0，48.5，58.7，59.3，66.9，67.4，128.1，128.2，128.4，128.5，128.7，170.0，182.3。HRMS m/zC₁₅H₁₇NO₄a(M+Na)计算值：298.1055；测定值298.1047。

通过使用在甲醇中的LiOH/H₂O水解苄酯由化合物120制备N-缩水甘油基-L-脯氨酸。

实施例11

Tamandarin类似物的生物活性

在本实施例中所述的实验证实tamandarin类似物具有所需的生物活性。

本文所用的“GI₅₀”指的是能够产生50％细胞生长抑制作用的化合物剂量。通过比较给药化合物的细胞生长与未给予该化合物的相同细胞的生长来评价GI₅₀。

本文所用的“LC₅₀”指的是能够在细胞中产生50％致死率的化合物剂量。通过比较给药化合物的细胞群中的细胞死亡与未给予该化合物的相同细胞群中的细胞死亡来评价LC₅₀。

“NCI-60”指的是来自国家癌症研究所(National CancerInstitute)(NCI，Frederick，Md.)的60个肿瘤细胞系组。“NCI-60平均值”为用选择的化合物处理的组的GI₅₀或LC₅₀的平均值。

下表中公开了化合物数据。

表1.tamandarin B的体外结果(单位：摩尔)

	DU145	LN-caP	IGROV	IGROV-ET	SK-BR3	SK-ME128	A549
	DU145	LN-caP	IGROV	IGROV-ET	SK-BR3	SK-ME128	A549	GI50	7.08E-09	5.84E-09	7.31E-09	1.73E-07	5.44E-09	3.03E-09	7.62E-09
TGI	2.41E-08	2.13E-08	2.91E-08	2.04E-06	2.49E-08	1.19E-08	4.01E-08	GI50	7.08E-09	5.84E-09	7.31E-09	1.73E-07	5.44E-09	3.03E-09	7.62E-09
TGI	2.41E-08	2.13E-08	2.91E-08	2.04E-06	2.49E-08	1.19E-08	4.01E-08	LC50	7.97E-08	1.42E-07	1.33E-07	9.59E-06	2.36E-07	1.19E-07	7.66E-07

	K562	PANCl	HT29	LOVO	LOVO-DOX	HELA	HELA APL
	K562	PANCl	HT29	LOVO	LOVO-DOX	HELA	HELA APL	GI50	8.47E-09	1.40E-08	6.32E-09	3.05E-08	1.25E-06	3.90E-09	5.97E-08
TGI	2.63E-08	5.69E-08	4.32E-08	1.61E-07	9.59E-06	1.76E-08	1.16E-06	GI50	8.47E-09	1.40E-08	6.32E-09	3.05E-08	1.25E-06	3.90E-09	5.97E-08
TGI	2.63E-08	5.69E-08	4.32E-08	1.61E-07	9.59E-06	1.76E-08	1.16E-06	LC50	7.82E-08	4.13E-07	9.59E-06	9.59E-06	9.59E-06	1.20E-07	9.59E-06

表2.Phe⁵tamandarin B的体外结果(单位：摩尔)

	DU145	LN-caP	IGROV	IGROV-ET	SK-BR3	SK-ME128	A549
	DU145	LN-caP	IGROV	IGROV-ET	SK-BR3	SK-ME128	A549	GI50	2.37E-09	1.52E-09	2.49E-09	2.15E-07	6.58E-10	2.74E-09	4.56E-09
TGI	1.02E-08	8.32E-09	1.28E-08	7.88E-07	4.49E-09	1.88E-08	3.90E-08	GI50	2.37E-09	1.52E-09	2.49E-09	2.15E-07	6.58E-10	2.74E-09	4.56E-09
TGI	1.02E-08	8.32E-09	1.28E-08	7.88E-07	4.49E-09	1.88E-08	3.90E-08	LC50	2.68E-07	1.01E-07	1.24E-07	6.35E-06	3.12E-07	2.05E-07	9.35E-07

	K562	PANCl	HT29	LOVO	LOVO-DOX	HELA	HELA APL
	K562	PANCl	HT29	LOVO	LOVO-DOX	HELA	HELA APL	GI50	2.32E-08	3.81E-09	4.77E-09	2.61E-08	3.58E-07	1.17E-09	4.45E-08
TGI	9.88E-07	3.28E-08	7.89E-08	8.81E-08	1.97E-06	4.61E-09	4.23E-07	GI50	2.32E-08	3.81E-09	4.77E-09	2.61E-08	3.58E-07	1.17E-09	4.45E-08
TGI	9.88E-07	3.28E-08	7.89E-08	8.81E-08	1.97E-06	4.61E-09	4.23E-07	LC50	9.88E-06	9.88E-06	9.88E-06	5.22E-06	9.88E-06	5.55E-08	9.88E-06

细胞系

名称	N°ATCC	种类	组织	特征
名称	N°ATCC	种类	组织	特征	A549SK-MEL-28HT29LoVoLoVo-DoxDU-145LN-caPSK-BR3IGROVIGVOR-ETHeLaHela-APLPANCl	CCL-185HTB-72HTB-38CCL-229HTB-81CRL-1740HTB-30CCL-2CCL-3CRL-149	人人人人人人人人人人人人人	肺黑素瘤结肠结肠结肠前列腺前列腺乳腺卵巢卵巢宫颈宫颈胰腺	肺癌“NSCL”恶性黑素瘤结肠腺癌结肠腺癌结肠腺癌(MDR)前列腺癌，无雄激素受体前列腺癌，带有雄激素受体乳腺癌，Her2/neu+，(胸膜积液)卵巢腺癌卵巢腺癌，特征在于ET-743抗性细胞宫颈上皮癌宫颈上皮癌，特征为aplidine抗性细胞胰腺上皮癌

使用比色法分析细胞生长抑制

使用sulforhodamine B(SRB)反应的比色试验类型适合于定量测定细胞生长和存活力[按照Philip Skehan等在如下文献中所述的技术：(1990)，“用于抗癌药筛选的新比色细胞毒性试验”(New colorimetriccytotoxicity assay for anticancer drug screening)-《国家癌症研究杂志》(J.Natl.Cancer Inst.)82：1107-1112]。

这种试验形式使用9mm直径的96孔细胞培养微量培养板(Faircloth，1988；Mosmann，1983)。大部分细胞系获自来源于不同人癌症类型的美国模式培养物保藏所(American Type CultureCollection)(ATCC)。

将细胞维持在补充了0.1g/l青霉素和0.1g/l硫酸链霉素的RPMI1640 10％FBS中且然后在37℃、5％CO₂和98％湿度下保温。就这些实验而言，使用胰蛋白酶从分汇合培养物中收集细胞并在平板接种前重新悬浮于新鲜培养基中。

以5×10³个细胞/孔将细胞接种在96孔微量滴定板中等分的195μl培养基中并通过在不含药物的培养基中生长18小时使它们与平板表面粘附。此后，以溶于DMSO/EtOH/PBS(0.5∶0.5∶99)的10到10-8μg/ml的5μl等分批加入样品。接触48小时后，通过SRB方法测定抗肿瘤作用：通过添加50μl冷50％(wt/vol)三氟乙酸(TCA)固定细胞并在4℃下保温60分钟。用去离子水洗涤平板并干燥。向各微量滴定孔中加入100μl SRB溶液(在1％乙酸中0.4％wt/vol)并在室温下保温10分钟。通过用1％乙酸洗涤来除去未结合的SRB。使平板风干并用Tris缓冲液溶解结合的染色剂。用自动分光光度测定平板读出器在490nm单一波长处读取光密度。

计算来自一式三份孔的数据的平均值+/-SD的值。可以计算细胞反应的某些参数：GI＝生长抑制，TGI＝总生长抑制(抑制细胞效应)和LC＝细胞杀伤(细胞毒性效应)。

表1中解释了有关本发明化合物生物活性的数据(以摩尔单位计)。

		化合物62	化合物75	化合物93
		化合物62	化合物75	化合物93	DU-145	GI50TGILC50	6.79E-092.49E-088.26E-08	1.81E-064.95E-069.84E-06	2.17E-094.39E-098.83E-09
LN-caP	GI50TGILC50	2.71E-097.24E-095.84E-08	5.48E-072.97E-069.84E-06	1.98E-094.33E-099.70E-09	DU-145	GI50TGILC50	6.79E-092.49E-088.26E-08	1.81E-064.95E-069.84E-06	2.17E-094.39E-098.83E-09
LN-caP	GI50TGILC50	2.71E-097.24E-095.84E-08	5.48E-072.97E-069.84E-06	1.98E-094.33E-099.70E-09	IGROV	GI50TGILC50	1.99E-065.29E-069.84E-06	1.99E-065.29E-069.84E-06	2.09E-091.28E-086.66E-07
IGROV-ET	GI50TGILC50	4.56E-071.90E-066.95E-06	6.86E-069.84E-069.84E-06	1.59E-076.54E-072.81E-06	IGROV	GI50TGILC50	1.99E-065.29E-069.84E-06	1.99E-065.29E-069.84E-06	2.09E-091.28E-086.66E-07
IGROV-ET	GI50TGILC50	4.56E-071.90E-066.95E-06	6.86E-069.84E-069.84E-06	1.59E-076.54E-072.81E-06	SK-BR-3	GI50TGILC50	3.74E-094.05E-089.73E-06	7.89E-073.39E-069.84E-06	1.83E-091.89E-084.65E-06
MEL-28	GI50TGI	1.66E-088.24E-08	1.50E-063.46E-06	4.14E-091.52E-08	SK-BR-3	GI50TGILC50	3.74E-094.05E-089.73E-06	7.89E-073.39E-069.84E-06	1.83E-091.89E-084.65E-06

	LC50	6.75E-07	8.00E-06	8.79E-08
	LC50	6.75E-07	8.00E-06	8.79E-08	A-549	GI50TGILC50	5.15E-083.51E-072.90E-06	5.85E-069.84E-069.84E-06	6.96E-094.86E-085.95E-07
K-562	GI50TGILC50	7.80E-083.03E-072.39E-06	5.87E-069.46E-069.84E-06	2.00E-084.73E-081.98E-07	A-549	GI50TGILC50	5.15E-083.51E-072.90E-06	5.85E-069.84E-069.84E-06	6.96E-094.86E-085.95E-07
K-562	GI50TGILC50	7.80E-083.03E-072.39E-06	5.87E-069.46E-069.84E-06	2.00E-084.73E-081.98E-07	PANC-1	GI50TGILC50	3.49E-088.82E-079.73E-06	3.75E-069.84E-069.84E-06	6.24E-099.00E-089.41E-06
HT-29	GI50TGILC50	2.37E-082.03E-079.73E-06	4.22E-069.84E-069.84E-06	4.60E-096.98E-085.58E-06	PANC-1	GI50TGILC50	3.49E-088.82E-079.73E-06	3.75E-069.84E-069.84E-06	6.24E-099.00E-089.41E-06
HT-29	GI50TGILC50	2.37E-082.03E-079.73E-06	4.22E-069.84E-069.84E-06	4.60E-096.98E-085.58E-06	LOVO	GI50TGILC50	3.89E-082.31E-073.66E-06	3.55E-069.84E-069.84E-06	6.84E-094.27E-082.49E-06
LOVO-DOX	GI50TGILC50	2.39E-068.40E-069.73E-06	9.84E-069.84E-069.84E-06	4.29E-072.33E-069.41E-06	LOVO	GI50TGILC50	3.89E-082.31E-073.66E-06	3.55E-069.84E-069.84E-06	6.84E-094.27E-082.49E-06
LOVO-DOX	GI50TGILC50	2.39E-068.40E-069.73E-06	9.84E-069.84E-069.84E-06	4.29E-072.33E-069.41E-06	HELA	GI50TGILC50	3.76E-092.61E-083.68E-07	1.18E-063.60E-069.84E-06	2.81E-099.79E-095.49E-08
HELA-APL	GI50TGILC50	4.11E-075.41E-069.73E-06	9.84E-069.84E-069.84E-06	3.64E-081.68E-072.28E-06	HELA	GI50TGILC50	3.76E-092.61E-083.68E-07	1.18E-063.60E-069.84E-06	2.81E-099.79E-095.49E-08

尽管已经完整地描述了本发明，但是本领域技术人员理解可以在不影响本发明范围或其任何实施方案的情况下在宽范围和等同范围的条件、配制和其它参数下实施本发明。将本文引述的所有专利和公开文献的全部内容引入本文作为参考。

Claims

1.通式I的化合物或其药物上可接受的盐：

其中：

R³选自氨基酸侧链和第一种荧光团；

R⁴为H或CH₃；

R⁶为异亮氨酸侧链或缬氨酸侧链；

W为O或NH；

X为O或NH；且

Y为H或羟基保护基；

Z为C(O)或C(O)-CH(CH₃)-C(O)；

条件是如果R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环，R⁴为甲基且X为O，那么R³为萘基甲基。

2.具有如下通式的权利要求1所述的化合物或其药物上可接受的盐：

其中：

R³选自氨基酸侧链和第一种荧光团；

R⁴为H或CH₃；

R⁶为异亮氨酸侧链或缬氨酸侧链；

X为O或NH；且

Y为H或羟基保护基；

3.权利要求2所述的化合物，其中R¹为H且R²为甲基。

4.权利要求2所述的化合物，其中R¹和R²为甲基。

5.权利要求2所述的化合物，其中R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环。

6.权利要求2所述的化合物，其中R³为氨基酸侧链。

7.权利要求2所述的化合物，其中R³为萘基甲基。

8.权利要求2所述的化合物，其中R³为任选被OH、OCH₃、CO(C₆H₅)、F、Cl、Br、I、CH₃或C₂H₅取代的苄基。

9.权利要求2所述的化合物，其中R³含有荧光团。

10.权利要求2所述的化合物，其中R⁴为CH₃。

11.权利要求2所述的化合物，其中R⁴为H。

12.权利要求2所述的化合物，其中R⁵为H。

13.权利要求2所述的化合物，其中R⁵为胺保护基。

14.权利要求2所述的化合物，其中R⁵为氨基酸残基或多肽。

15.权利要求2所述的化合物，其中R⁵含有荧光团。

16.权利要求2所述的化合物，其中R⁵选自下列基团：

-(N-甲基)亮氨酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸；

-(N-CBz-N-甲基)亮氨酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-丙酮酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-谷氨酰胺-焦谷氨酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-谷氨酰胺-环戊酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-亮氨酸-焦谷氨酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-乳酸-谷氨酰胺-环戊酸；

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-丙氨酸-亮氨酸-焦谷氨酸；和

-(N-甲基)亮氨酸-脯氨酸-(N-甲基)丙氨酸-亮氨酸-焦谷氨酸。

17.权利要求2所述的化合物，其中R⁶为缬氨酸侧链。

18.权利要求2所述的化合物，其中R⁶为亮氨酸侧链。

19.权利要求2所述的化合物，其中Y为H。

20.权利要求2所述的化合物，其中Y为羟基保护基。

21.权利要求2所述的化合物，其中X为O。

22.权利要求2所述的化合物，其中X为NH。

23.权利要求2所述的化合物，其中R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环；R³为任选被一个或多个选自OH、OCH₃、CO(C₆H₅)、F、Cl、Br、I、CH₃和C₂H₅的基团取代的苄基；R⁴为H；R⁶为缬氨酸侧链；X为O；且Y为H。

24.权利要求2所述的化合物，其中R¹为H；R²为CH₃；R³为任选被一个或多个选自OH、OCH₃、CO(C₆H₅)、F、Cl、Br、I、CH₃和C₂H₅的基团取代的苄基；R⁴为CH₃；R⁵如上述所定义；R⁶为缬氨酸侧链；X为O；且Y为H。

25.权利要求2所述的化合物，其中R¹为CH₃；R²为CH₃；R³为任选被一个或多个选自OH、OCH₃、CO(C₆H₅)、F、Cl、Br、I、CH₃和C₂H₅，优选OCH₃的基团取代的苄基；R⁴为CH₃；R⁶为缬氨酸侧链；X为O；且Y为H。

26.权利要求2所述的化合物，其中R¹和R²共同形成脯氨酸残基的烷基环；R³为萘基甲基；R⁴为CH₃；R⁶为缬氨酸侧链；X为O；且Y为H。

27.权利要求2所述的化合物，其中R⁵由1-5个氨基酸残基组成。

28.权利要求2所述的化合物，具有如下结构：

29.权利要求2所述的化合物，具有如下结构：

30.权利要求2所述的化合物，具有如下结构：

31.权利要求2所述的化合物，具有如下结构：

32.权利要求2所述的化合物，具有如下结构：

33.具有如下结构的化合物

34.组合物，包括权利要求1-33中任意一项的化合物和药物上可接受的赋形剂或载体。

35.抑制、治疗或预防肿瘤发生的方法，包括使细胞接触有效量的权利要求1-33中任意一项的化合物。

36.预防或抑制癌细胞生长的方法，包括使癌细胞接触有效量的权利要求1-33中任意一项的化合物。

37.抑制或预防蛋白质合成的方法，包括使细胞或细胞成分接触有效量的权利要求1-33中任意一项的化合物。

38.强化编程性细胞死亡的方法，包括使细胞或细胞成分接触有效量的权利要求1-33中任意一项的化合物。

39.提供免疫抑制治疗的方法，包括对需要的受试者给予有效量的权利要求1-33中任意一项的化合物。