RU2249598C2

RU2249598C2 - ИНГИБИТОРЫ ФЕРМЕНТА, КОНВЕРТИРУЮЩЕГО ИНТЕРЛЕЙКИН-1-β

Info

Publication number: RU2249598C2
Application number: RU98113931/04A
Authority: RU
Inventors: Дж. БЭТЧЕЛОР Марк (GB); Дж. БЭТЧЕЛОР Марк; БЕББИНГТОН Дэвид (GB); Беббингтон Дэвид; В. БЕМИЗ Гай (US); В. БЕМИЗ Гай; Герман ФРИДМАН Вольф (FR); Герман Фридман Вольф; Дж. ДЖИЛЛСПАЙ Роджер (GB); Дж. ДЖИЛЛСПАЙ Роджер; М. С. ГОЛЕК Джулиан (GB); М. С. ГОЛЕК Джулиан; ГУ Йонг (US); Гу Йонг; Дж. ЛАУФФЕР Дэвид (US); Дж. ЛАУФФЕР Дэвид; Дж. ЛИВИНГСТОН Дэвид (US); Дж. ЛИВИНГСТОН Дэвид; С. МАТХАРУ Сарооп (GB); С. МАТХАРУ Сарооп
Original assignee: Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед
Priority date: 1995-12-20
Filing date: 1996-12-20
Publication date: 2005-04-10

Abstract

Изобретение относится к новым классам соединений общей формулы

где R₁представляет собой:

или

значения радикалов указаны в формуле изобретения, которые являются ингибиторами фермента, конвертирующего интерлейкин-1β. Ингибиторы ICE настоящего изобретения характеризуются специфическими структурными и физикохимическими свойствами. Данное изобретение относится также к фармацевтическим композициям, включающим эти соединения. Соединения и фармацевтические композиции настоящего изобретения особенно хорошо подходят для ингибирования активности ICE и, следовательно, могут успешно использоваться в качестве препаратов против IL-1, апоптоз-, IGIF- и IFN-γ-опосредованных заболеваний, воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, костно-деструктивных нарушений, пролиферативных заболеваний, инфекционных заболеваний, дегенеративных заболеваний и некротических заболеваний. Настоящее изобретение также относится к способам ингибирования ICE активности для лечения интерлейкин-1-, апоптоз-, IGIF- и IFN-γ-опосредованных заболеваний и уменьшение продукции IGIF- и IFN-γ с помощью соединений и композиций настоящего изобретения. Настоящее изобретение также относится к способам получения N-ациламино соединений. 8 н. и 56 з.п. ф-лы, 30 табл., 14 ил.

Description

Настоящее изобретение относится к новым классам соединений, которые являются ингибиторами фермента, конвертирующего интерлейкин-1β ("ICE"). Данное изобретение относится также к фармацевтическим композициям, включающим эти соединения. Соединения и фармацевтические композиции данного изобретения особенно хорошо подходят для ингибирования активности ICE и, следовательно, могут успешно использоваться в качестве лекарственных средств против заболеваний, опосредованных интерлейкином-1 ("IL-1"), апоптозом, фактором, индуцирующим интерферон гамма, ("IGIF") и интерфероном-γ ("IFN-γ "), включающих воспалительные заболевания, аутоиммунные заболевания, деструкцию костей, пролиферативные нарушения, инфекционные заболевания и дегенеративные заболевания. Данное Настоящее изобретение относится к новым классам соединений, которые являются ингибиторами фермента, конвертирующего интерлейкин-1β ("ICE"). Данное изобретение относится также к фармацевтическим композициям, включающим эти соединения. Соединения и фармацевтические композиции данного изобретения особенно хорошо подходят для ингибирования активности ICE и, следовательно, могут успешно использоваться в качестве лекарственных средств против заболеваний, опосредованных интерлейкином-1 ("IL-1"), апоптозом, фактором, индуцирующим интерферон гамма, ("IGIF") и интерфероном-γ ("IFN-γ "), включающих воспалительные заболевания, аутоиммунные заболевания, деструкцию костей, пролиферативные нарушения, инфекционные заболевания и дегенеративные заболевания. Данное изобретение относится также к способам ингибирования ICE активности и уменьшения продукции IGIF и IFN-γ и к способам лечения заболеваний, опосредованных интерлейкином-1, апоптозом, фактором, индуцирующим интерферон гамма, и интерфероном-γ с использованием соединений и композиций данного изобретения. Настоящее изобретение относится также к способам получения N-ациламино соединений.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Интерлейкин-1-("IL-1") является основным проинфламматорным и иммунорегуляторным белком, который стимулирует дифференциацию и пролиферацию фибробластов, продукцию простагландинов, коллагеназы и фосфолипазы синовиальными клетками и хондроцитами, дегрануляцию базофилов и эозинофилов и активацию нейтрофилов. Oppenheim, J. H. et al, Immunology Today, 7, рр 45-56 (1986). В таком качестве он включен в патогенез хронических и острых воспалительных и аутоиммунных заболеваний. Например, при ревматоидном артрите IL-1 является медиатором как воспалительных симптомов, так и деструкции хрящевого протеогликана в пораженных суставах. Wood, D.D. et al., Arthritis Rheum. 26, 975, (1983); Pettipher, E. J. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. UNITED STATES OF AMERICA 71, 295 (1986); Arend, W. P. and Dayer, J.M., Artritis Rheum. 38, 151 (1995). IL-1 является высокоактивным агентом, вызывающим костную ресорбцию. Jandiski, J. J., J. Oral Path. 17, 145 (1988); Dewhirst, F.E. et al., J. Immunol. 8, 2562 (1985). Альтернативно он упоминается как "фактор, активирующий остеокласты" при костнодеструктивных заболеваниях, таких, как остеоартрит и множественная миелома. Bataille, R. et al., Int. J. Clin. Lab. Res. 21 (4), 283 (1992). В некоторых пролиферативных заболеваниях, таких, как острая миелогенная лейкемия и множественная миелома, IL-1 может способствовать росту и адгезии опухолевых клеток. Bani, M. R., J. Natl. Cancer Inst. 83, 123 (1991); Vidal-Vanaclocha, F., Cancer Res. 54, 2667 (1994). При этих заболеваниях IL-1 также стимулирует продукцию других цитокинов, таких, как IL-6, который модулирует развитие опухоли (Tartour et al., Cancer Res. 54, 6243 (1994). IL-1 преимущественно продуцируется моноцитами периферической крови, как часть воспалительного ответа, и существует в двух различных агонистических формах, IL-1α и IL-1β . Mosely, В. S. et аl., Proc. Natl. Acad. Sci., 84, pp.4572-4576 (1987); Lonneman, G. et al., Eur. J. Immunol., 19, pp.1531-1536 (1989).

IL-1β синтезируется как биологически неактивный предшественник, pIL-1β . В pIL-1β не хватает обычной ведущей последовательности, и он не подвергается воздействию сигнальной пептидазы. March, С. J., Nature, 315, pp.641-647 (1985). Вместо этого pIL-1β расщепляется под действием интерлейкин-1β конвертирующего фермента ("ICE") между Asp-116 и Ala-117 с получением биологически активного С-концевого фрагмента, обнаруженного в человеческой сыворотке и синовиальной жидкости. Sleath, Р. R., et al., J. Biol. Chem., 265, pp.14526-14528 (1992); A.D.Howard et al., J. Immunol., 147, pp.2964-2969 (1991). ICE является цистеин-протеазой, локализованной преимущественно в моноцитах. Она превращает предшественник IL-1β в зрелую форму. Black, R. A. et al., FEBS Lett., 247, рр.386-390 (1989); Kostura, M. J. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. UNITED STATES OF AMERICA 86. pp.5227-5231 (1989). Воздействие ICE необходимо также для транспорта зрелого IL-1β через клеточную мембрану.

Кроме того, очевидно, что ICE, или его гомологи, включены в регуляцию запрограммированной смерти клетки, или апоптоза. Yuan, J. et al., Cell. 75, pp.641-652 (1993); Miura, M. et al., Cell. 75, pp.653-660 (1993); Nett-Fiordalisi, M. A. et al., J. Cell Biochem., 17B, р.117 (1993). В частности, считается, что ICE, или его гомологи, связаны с регуляцией апоптоза при нейродегенеративных заболеваниях, таких, как болезни Альцгеймера и Паркинсона. Marx, J. and M. Baringa, Science, 259, pp.760-762 (1993); Gagliardini, V. et al., Science, 263, pp.826-828 (1994). Терапевтическое применение ингибирования апоптоза может включать лечение болезней Альцгеймера, Паркинсона, удара, инфаркта миокарда, спинной атрофии и старения.

Продемонстрировано, что ICE опосредует апоптоз (программируемую смерть клетки) в некоторых типах тканей. Steller, Н., Science, 267, р.1445 (1995); Whyte, M. and Evan, G, Nature, 376, p.17 (1995); Martin, S. J. and Green, D. R., Cell. 82, p.349,(1995); Alnemri, E. S., et al., J. Biol. Chem., 270, p.4312 (1995); Yuan, J. Curr. Opin. Cell Biol., 7, p.211 (1995). Трансгенные мыши, лишенные гена ICE, являются дефицитными в отношении Fas-опосредованного апоптоза (Kuida, К. et al., Science. 267, р.2000 (1995)). Эта активность ICE отличается от его роли как фермента, процессирующего pro-IL1β . Предполагают, что в некоторых типах тканей ингибирование ICE может не оказывать влияния на секрецию зрелого IL-1β , но может ингибировать апоптоз.

Обладающий ферментативной активностью ICE был ранее описан как гетеродимер, состоящий из двух субъединиц, р20 и р10 (с молекулярным весом соответственно 20 кДа и 10 кДа). Эти субъединицы получаются из профермента с молекулярным весом 45 кДа (р45) через форму р30, посредством автокаталитического механизма активации. Thomberry, N. A. et al., Nature, 356, pp.768-774 (1992). Профермент ICE делится на несколько функциональных доменов: продомен (р14), р22/20 субъединица, связующий полипептид и р10 субъединица. Thomberry et al., supra: Casano et al., Genomics. 20, pp.474-481 (1994).

Профермент р45 с полной длиной цепи был охарактеризован по его кДНК и аминокислотной последовательности. РСТ патентные заявки WO 91/15577 и WO 94/00154. Также известны кДНК и аминокислотные последовательности для р20 и р10. Thornberry et al., supra. Также были клонированы и секвенированы мышиный и крысиный ICE. Их аминокислотные и нуклеотидные последовательности имеют высокую степень гомологии с человеческим ICE. Miller, D. К. et al., Ann. N.Y. Acad. Sci., 696, pp.133-148 (1993); Molineaux, S. M. et. al., Proc. Nat. Acad. Sci., 90, pp.1809-1813 (1993). Трехмерная структура ICE определена на атомном уровне с помощью рентгеновской кристаллографии. Wilson, К.Р., et al., Nature, 370, pp.270-275 (1994). Активный фермент существует в виде тетрамера, состоящего из двух р20 и двух р10 субъединиц.

Кроме того, у человека обнаружены гомологи ICE, имеющие сходства в аминокислотных последовательностях регионов активных участков ферментов. Такие гомологи включают ТХ (или ICE_reI-II или ICH-2) (Faucheu, et al., EMBO J., 14, р.1914 (1995); Kamens J., et al., J. Biol. Chem., 270, p.15250 (1995); Nicolson et al., J. Biol. Chem., 270, p.15870 (1995)), TY (или ICE_reI-III) (Nicolson et al., J. Biol. Chem., 270, p.15870 (1995)); ICH-1 (или Nedd-2) (Wang, L. et al., Cell. 78, p.739 (1994)), MCH-2 (Femandes-Alnemri, Т. et al., Cancer Res., 55, p.2737 (1995)), CPP 32 (или YAMA, или апопейн) (Femandes-Alnemri, Т. et al., J. Biol. Chem. 269, p.30761 (1994); Nicolson D. W. et al., Nature. 376, p.37 (1995)), и СМН-1 (или МСН-3) (Lippke, et al., J. Biol. Chem., (1996); Femandes-Alnemri, Т. et al., Cancer Res., (1995)). Каждый из этих гомологов ICE, так же, как и сам ICE, способен индуцировать апоптоз при повышенной экспрессии в трансфицированных клеточных линиях. Ингибирование одного или нескольких таких гомологов пептидильным ингибитором ICE Tyr-Val-Ala-Asp-хлорметилкетоном приводит к ингибированию апоптоза в первичных клетках клеточных линий. Lazebnik et al., Nature, 371, р.346 (1994). Описанные здесь соединения также способны ингибировать один или несколько гомологов ICE (см. Пример 5). Следовательно, эти соединения могут использоваться для ингибирования апоптоза в тканях, содержащих гомологи ICE, но которые не содержат активный ICE и не продуцируют зрелый IL-1β .

Интерферон-гамма индуцирующий фактор (IGIF) является полипептидом с молекулярной массой приблизительно 18 кДа, стимулирующим продукцию интерферона-гамма (IFN-γ ) Т-клетками. IGIF продуцируется in vivo активированными клетками Купфера и макрофагами и экспортируется из этих клеток при стимуляции эндотоксином. Таким образом, соединение, уменьшающее продукцию IGIF, может использоваться, как ингибитор стимуляции таких Т-клеток, что, в свою очередь, приводит к уменьшению уровня продукции IFN-γ этими клетками.

IFN-γ является цитокином, обладающим иммунорегуляторным действием на ряд иммунных клеток. В частности, IFN-γ участвует в активации макрофагов и селекции Thl клеток (F. Belardelli, APMIS, 103, р.161 (1995)). IFN-γ оказывает свое действие частично путем модуляции экспрессии генов через STAT и IRF механизмы (С.Schindler and J.E.Damell, Ann. Rev. Biochem., 64, p.621 (1995); Т.Taniguchi, J. Cancer Res. Clin. Oncol., 121, p.516 (1995)).

Мыши, утратившие IFN-γ или его рецептор, обладают множественными дефектами в функциях иммунных клеток и являются устойчивыми к эндотоксическому шоку (S.Huang et al., Science. 259, р.1742 (1993); D.Dalton et al., Science, 259, p.1739 (1993); В.D.Car et al., J. Exp. Med., 179, p.1437 (1994)). Очевидно, что вместе с IL-1β , IGIF является мощным стимулятором продукции IFN-γ Т-клетками (Н.Okamura et al., Infection and Immunity. 63, р.3966 (1995); H.Okamura et al., Nature, 378, p.88 (1995); S.Ushio et al., J.Immunol., 156, p.4274 (1996)).

Продемонстрировано, что IFN-γ вносит вклад в патологические состояния, ассоциированные с рядом воспалительных, инфекционных и аутоиммунных нарушений и заболеваний. Таким образом, соединения, способные уменьшать продукцию IFN-γ , могут применяться для улучшения патологических состояний, опосредованных IFN-γ .

Механизмы биологической регуляции IGIF и, таким образом, IFN-γ , не выяснены. Известно, что IGIF синтезируется в виде белкового предшественника, называемого "про-IGIF". Однако, остается неясным, каким образом про-IGIF расщепляется и имеет ли его процессинг биологическое значение.

Соответственно, композиции и способы, регулирующие превращение про-IGIF в IGIF, могут применяться для уменьшения продукции IGIF и IFN-γ in vivo и, таким образом, для уменьшения вредного воздействия этих белков, которые вносят вклад в нарушения и заболевания человека.

Однако ICE и другие члены ICE/CED-3 семейства ранее не связывали с превращением про-IGIF в IGIF или с продукцией IFN-γ in vivo.

Ингибиторы ICE представляют собой класс соединений, применяемых для подавления воспаления или апоптоза или обоих. Описаны пептидные и пептидильдые ингибиторы ICE. PCT патентные заявки WO 91/15577; WO 93/05071; WO 93/09135; WO 93/14777 и WO 93/16710; и европейская патентная заявка 0547699. На мышиных моделях воспалительных процессов (vide infra) обнаружено, что такие пептидильные ингибиторы ICE блокируют продукцию зрелого IL-1β и подавляют рост лейкемических клеток in vitro (Estrov et al., Blood 84, 380a (1994)). Однако, из-за своей пептидной природы такие ингибиторы обычно характеризуются нежелательными фармакологическими свойствами, такими, как низкая клеточная проницаемость и клеточная активность, низкая оральная абсорбция, низкая стабильность и быстрый метаболизм. Planner, J.J. and D.W.Norbeck, in Drug Discovery Technologies, C.R.Clark and W.H.Moos, Eds. (Ellis Horwood, Chichester, England, 1990), pp.92-126. Это затрудняет разработку на их основе эффективных лекарственных препаратов.

Сообщалось также о непептидильных соединениях, ингибирующих ICE in vitro. РСТ патентная заявка WO 95/26958; патенты US 5552400; Dolle et al., J. Med. Chem., 39, pp.2438-2440 (1996). Однако, не ясно, имеют ли эти соединения соответствующий фармакологический профиль для терапевтического применения.

Кроме того, применяющиеся способы получения таких соединений не выгодны. В этих способах используется гидрид трибутилолова, токсичный, чувствительный к влаге реагент. Следовательно, эти способы не удобны для проведения, представляют риск для здоровья и создают проблемы с утилизацией токсичных отходов. Кроме того, соединения, полученные с помощью этих способов, трудно очищать.

Соответственно, существует потребность в соединениях, которые могут эффективно ингибировать действие ICE in vivo, для применения их в качестве агентов, использующихся для профилактики и лечения хронических и острых форм IL-1-опосредованных заболеваний, апоптоз-, IGIF- или IFN-γ -опосредованных заболеваний, так же, как для воспалительных, аутоиммунных, костно-деструкционных, пролиферативных, инфекционных или дегенеративных заболеваний. Существует также необходимость в разработке способов получения таких соединений.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение предоставляет новые классы соединений и их фармацевтически приемлемые производные, которые используются как ингибиторы ICE. Эти соединения могут использоваться одни, или в сочетании с другими терапевтическими или профилактическими агентами, такими, как антибиотики, иммуномодуляторы, или другие анти-воспалительные агенты, для лечения или профилактики заболеваний, опосредованных IL-1, апоптозом, IGIF или IFN-γ . Соответственно предпочтительному воплощению, соединения данного изобретения способны связываться с активным участком ICE и ингибировать активность этого фермента. Кроме того, они имеют повышенную клеточную активность, улучшенную фармакокинетику и/или улучшенную оральную биодоступность по сравнению с пептидильными ингибиторами ICE.

Главным объектом данного изобретения является предоставление новых классов соединений, которые являются ингибиторами ICE, представленных формулами;

α

различные заместители которых описаны в этом разделе.

Следующим предметом данного изобретения является предоставление способа получения N-ациламино соединений в результате сочетания карбоксильной кислоты с alloc-защищенным амином.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Фиг.1А. ICE расщепляет пpo-IGIF in vivo. Клеточные лизаты Cos клеток, трансфицированных различными плазмидами, экспрессирующими упомянутые выше ферменты, или контрольных клеток, анализировали на наличие IGIF путем разделения белков методами SDS-PAGE и иммуноблотинга с анти-IGIF антисывороткой (линия 1, имитация трансфицированных клеток; линия 2, npo-IGIF один; линии 3-12, npo-IGIF в сочетании с ICE, ICE-C285S, СРР32, CPP32-C163S, СМН-1, CMH-1-C186S, Тх, Tx-C258S, соответственно). Подвижности npo-IGIF и зрелого IGIF с молекулярной массой 18 кДа указаны справа. Маркеры молекулярного веса, который указан в кДа, показаны слева (Пример 23).

Фиг.1В. ICE расщенляет пpo-IGIF по аутентичному процессирующему участку in vitro, что продемонстрировано окрашиванием с помощью Кумасси синего продуктов протеолитической реакции, разделенных методом SDS-PAGE (Пример 23). Использовали следующие протеазы и ингибиторы: линия 1, буферный контроль; линия 2, 0,1 нМ ICE; линия 3, 1 нМ ICE; линии 4 и 5, 1 нМ ICE с 10 нМ Cbz-Val-Ala-Asp-[(2,6-дихлорбензоил)окси]метилкетоном и 100 нМ Ас-Туr-Val-Ala-Asp-альдегидом, соответственно; линии 6 и 7, 15 нМ СРР32 с 400 нМ Ac-Asp-Glu-Val-Аsр-альдегидом (D.W.Nicholson et al., Nature, 376, р.37 (1995)) соответственно; линия 8, 100 нМ СМН-1; линия 9, 10 ед./мл гранзима В; и М, маркеры молекулярной массы, указанной в кДа.

Фиг.1С. В результате расщепления под действием ICE неактивный npo-IGIF превращается в активный IGIF, который индуцирует продукцию IFN-γ в Тhl хелперных клетках. Нерасщепленный (пpo-IGIF), расщепленный под действием ICE (пpo-IGIF/ICE), расщепленный под действием СРР32 (npo-IGIF/CPP32), и рекомбинантный зрелый IGIF (rIGIF) инкубировали с А.Е7 Thl клетками в концентрации 12 нг/мл (незаштрихованная колонка) и 120 нг/мл (заштрихованная колонка) в течение восемнадцати часов и уровни высвобождающегося в культуральную среду IFN-γ анализировали с помощью ELISA-теста (Пример 23). Клетки А.Е7, инкубировавшиеся с буфером, ICE (ICE) или СРР32 (СРР32) анализировали подобным образом как негативные контроли. Полученные значения представляют собой средние величины из трех определений.

Фиг.2А. Зрелый IGIF (18 кДа) продуцируется Cos клетками, со-трансфицированными плазмидами, экспессирующими про-IGIF и ICE. Клеточные лизаты (слева) и инкубационная среда (справа) Cos клеток, трансфицированных про-IGIF экспрессирующей плазмидой, в отсутствие (-) или присутствии экспрессирующей плазмиды, кодирующей дикий тип (ICE) или неактивный мутант (ICE-C285S) ICE. Трансфицированные клетки метаболически метили ³⁵S-метионином, белки из клеточных лизатов и инкубационной среды подвергали иммунопреципитации с помощью анти-IGIF антисыворотки и разделяли методом SDS-PAGE (Пример 24). Подвижности про-IGIF и зрелого IGIF с молекулярным весом 18 кДа показаны справа. Маркеры молекулярной массы, указанной в кДа, показаны слева.

Фиг.2В. Определяли IFN-γ индуцирующую активность в Cos клетках, со-трансфицированных плазмидами, экспрессирующими про-IGIF и ICE. Клеточные лизаты (заштрихованные колонки) и инкубационную среду (незаштрихованные колонки) Cos клеток, трансфекцированных плазмидами, экспрессирующими про-IGIF, в отсутствие (про-IGIF) или присутствии (про-IGIF/ICE) экспрессирующей плазмиды, кодирующей дикий тип (ICE), анализировали на уровни IFN-γ (нг/мл) с помощью ELISA-теста. Cos клетки, трансфицированные буфером (имитация), или только ICE-экспрессирующей плазмидой (ICE), служили негативными контролями (Пример 24).

Фиг.ЗА. Клетки Купфера от мышей, утративших ICE, являются дефективными в отношении экспорта IGIF. Клетки Купфера от дикого типа мышей (ICE+/+), или ICE-дефицитных мышей, гомозиготных в отношении ICE мутации, (ICE-/-), изолировали и обрабатывали LPS в течение 3 часов. Уровни иммуноактивных полипептдов IGIF в инкубационной среде (нг/мл) клеток дикого типа определяли с помощью ELISA-теста (Пример 25). N.D. (not detectable) означает, что концентрация IGIF меньше 0,1 нг/мл.

Фиг.3В. Клетки Купфера от мышей, утративших ICE, являются дефективными в отношении экспорта зрелого IGIF. Клетки Купфера от дикого типа мышей (ICE+/+), или ICE-дефицитных мышей, гомозиготных в отношении ICE мутации, (ICE-/-), изолировали и обрабатывали LPS в течение 3 часов. Обработанные клетки метаболически метили ³⁵S-метионином, белки из клеточных лизатов и инкубационной среды подвергали иммунопреципитации с помощью анти-IGIF антисыворотки и разделяли методом SDS-PAGE (Пример 25). Подвижности про-IGIF и зрелого IGIF с молекулярным весом 18 кДа показаны справа. Маркеры молекулярной массы, указанной в кДа, показаны слева.

Фиг.3С. Сыворотка ICE-дефицитных мышей содержит пониженные уровни IGIF. Образцы сыворотки мышей дикого типа (ICE+/+), или ICE-дефицитных мышей, гомозиготных в отношении ICE мутации, (ICE-/-), анализировали на уровни IGIF (нг/мл) с помощью ELISA-теста (Пример 25).

Фиг.3D. Сыворотка ICE-дефицитных мышей содержит пониженные уровни IFN-γ . Образцы сыворотки мышей дикого типа (ICE+/+), или ICE-дефицитных мышей, гомозиготных в отношении ICE мутации, (ICE-/-), анализировали на уровни IFN-γ (нг/мл) с помощью ELISA-теста (Пример 25).

Фиг.4. Уровень IFN-γ в сыворотке после массированного введения LPS был значительно понижен у ICE-дефицитных мышей (Пример 26). Образцы сыворотки мышей дикого типа (затемненные квадраты), или ICE-дефицитных мышей (затемненные круги), анализировали на уровни IFN-γ (нг/мл) с помощью ELISA-теста как функцию от времени (в часах) после введения LPS. Температура животных на протяжении всего периода времени показана в градусах Цельсия для дикого типа мышей (незатемненные квадраты) или ICE-дефицитных мышей (незатемненные круги).

Фиг.5. Ингибитор ICE, AcYVAD-альдегид (AcYVAD-CHO), ингибирует синтез IL-1β и IFN-γ человеческими мононуклеарными клетками периферической крови (РВМС), стимулированный LPS. Процент (%) ингибирования приведен для синтеза IL-1β (незакрашенное квадраты) и IFN-γ (незакрашенные ромбы) как функция от концентрации ингибитора (мкМ).

Фиг.6. Соединение 214е ингибирует продукцию IL-1β в мышах в ответ на введение LPS. Образцы сыворотки мышей CD1 после введения LPS анализировали на уровни IL-1β (пг/мл) с помощью ELISA-теста. Соединение 214е вводили путем интраперитонеальной инъекции (IP) через один час после введения LPS. Кровь собирали через семь часов после введения LPS (Пример 7).

Фиг.7. Соединение 217е ингибирует продукцию IL-1β в мышах в ответ на введение LPS. Образцы сыворотки мышей CD1 после введения LPS анализировали на уровни IL-1β (пг/мл) с помощью ELISA-теста. Соединение 217е вводили путем интраперитонеальной инъекции (IP) через один час после введения LPS. Кровь собирали через семь часов после введения LPS (Пример 7).

Фиг.8. Соединение 214е, но не соединение 217е, при принудительном введении в ротовую полость, ингибирует продукцию IL-1β в мышах в ответ на введение LPS. В этом исследовании определяли оральную абсорбцию при условиях, описаных для фиг.6 и 7. Эти результаты показывают, что соединение 214е является потенциально активным ингибитором ICE при оральном применении (см. Пример 7).

Фиг.9. Соединение 214е и его аналоги также ингибируют продукцию IL-1β при IP введении. Эти результаты получены в условиях, описанных для фиг.6 и 7 и в Примере 7.

Фиг.10. Соединение 214е и его аналоги также ингибируют продукцию IL-1β при пероральном (РО) введении. Эти результаты получены в экспериментальных условиях, описаных для фиг.6 и 7 и в Примере 7.

Фиг.11А/В. Соединения 302 и 304а демонстрируют детектируемые клеточные уровни в крови при пероральном введении (50 мг/кг, в 0,5% карбоксиметилцеллюлозе) мышам.

Образцы крови собирали через 1 и 7 часов после приема дозы. Соединения 302 и 304а являются предшественниками 214е и метаболизируются в 214е in vivo. Определяемый в крови уровень соединения 214е не превышает 0,10 мкг/мл при пероральном введении (Пример 8).

Фиг.12. Соединение 412f блокирует прогрессию коллаген-индуцированного артрита II типа у самцов мышей DBA/1J (Wooley, Р.H., Methods in Enzymology, 162, pp.361-373 (1988) and Geiger, Т., Clinical and Experimental Reumatology, 11, pp.515-522 (1993)). Соединение 412f вводили перорально через зонд дважды в день (10, 25 и 50 мг/кг), с интервалом приблизительно в 7 часов. Воспаление определяли по Шкале Тяжести Артрита от 1 до 4 баллов (увеличение числа баллов соответствует увеличению тяжести заболевания). Добавляли число баллов по двум передним лапкам, получая конечное число баллов (см. Пример 21).

Фиг.13. Соединение 412d блокирует прогрессию коллаген-индуцированного артрита II типа у самцов мышей DBA/1J. Эти результаты получены в условиях, описаных для фиг.12 и в Примере 21.

Фиг.14. Соединение 696а блокирует прогрессию коллаген-индуцированного артрита II типа у самцов мышей DBA/1J. Эти результаты получены в условиях, описаных для фиг.12 и в Примере 21.

СОКРАЩЕНИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Сокращения

Обозначения Реагент или фрагмент

Ala аланин

Arg аргинин

Asn аспарагин

Asp аспарагиновая кислота

Cys цистеин

Gln глутамин

Glu глутаминовая кислота

Gly глицин

His гистидин

Ile изолейцин

Leu лейцин

Lys лизин

Met метионин

Phe фенилаланин

Pro пролин

Ser серин

Thr треонин

Trp триптофан

Tyr тирозин

Val валин

Ac₂O уксусный ангидрид

n-Bu нормальный бутил

DMF диметилформамид

DIEA N,N-диизопропилэтиламин

EDC гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-

этилкарбодиимида

Et₂O диэтиловый эфир

EtOAc этилацетат

Fmoc 9-флуоренилметоксикарбонил

HBTU гексафторфосфат O-бензотриазол-1-ил-

N,N,N’,N’-тетраметилурония

HOBT гидрат 1-гидроксибензотриазола

MeOH метанол

TFA трифторуксусная кислота

Alloc аллилоксикарбонил

Определения

В данном описании применяются следующие термины:

Термин "фактор, индуцирующий интерферон гамма", или "IGIF", относится к фактору, способному стимулировать эндогенную продукцию IFN-γ .

Термин "ингибитор ICE" относится к соединению, способному ингибировать этот фермент. Ингибирование ICE можно определять с помощью методов, описанных здесь, или включенных в качестве ссылки. Опытным специалистам известно, что ингибитор ICE in vivo не обязательно является ингибитором ICE in vitro. Например, в тестах in vitro соединение в форме пролекарства обычно демонстрирует отсутствие активности, или низкую активность. Такие пролекарственные формы могут изменяться под действием метаболических или других биохимических процессов в организме пациента, с образованием in vivo ингибитора ICE.

Термин "цитокин" относится к молекулам, которые опосредуют взаимодействия между клетками.

Термин "состояние" относится к любому заболеванию, нарушению, или воздействию, имеющему вредные биологические последствия для субъекта.

Термин "субъект" относится к животному, или к одной или нескольким клеткам, полученным из животного. В предпочтительном варианте животное является млекопитающим, наиболее предпочтительно, человеком. Клетки могут быть в любой форме, включая, не ограничиваясь ими, клетки, сохраняющиеся в тканях, клеточные кластеры, не погибшие клетки, трансфицированные или трансформированные клетки и клетки, полученные от животного, измененного физически или фенотипически.

Термин "активный участок" обозначает любой или все следующие участки ICE: участок, связывающий субстрат, участок, с которым связывается ингибитор, и участок, на котором происходит расщепление субстрата.

Термин "гетероцикл" или "гетероциклический" относится к стабильным моно- или полициклическим соединениям, которые могут необязательно содержать одну или две двойные связи, или одно или несколько ароматических колец. Каждый гетероцикл состоит из атомов углерода и от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей азот, кислород и серу. Используемые здесь термины "гетероатомы азота" и "гетероатомы серы" включают любую окисленную форму азота или серы и четвертичную форму любого основного азота. Определенные выше гетероциклы включают, например, пиримидинил, тетрагидрохинолил, тетрагидроизохинонлинил, пуринил, пиримидил, индолинил, бензимидазолил, имидазолил, имидазолиноил, имидазолидинил, хинолил, изохинолил, индолил, пиридил, пирролил, пирролинил, пиразолил, пиразинил, хиноксолил, пиперидинил, морфолинил, тиаморфолинил, фурил, тиенил, триазолил, тиазолил, β -карболинил, тетразолил, тиазолидинил, бензофураноил, тиаморфолинил сульфон, бензоксазолил, оксопиперидинил, оксопирролидинил, оксоазепинил, азепинил, изоксазолил, тетрагидропиранил, тетрагидрофуранил, тиадиазолил, бензодиоксолил, бензотиенил, тетрагидротиофенил и сульфоланил. Другие гетероциклы описаны в A.R. Katritzky and С.W. Rees, eds. Comprehensive Heterocyclic Chemistry: The Structure, Reactions, Synthesis and Use of Heterocyclic Compounds. Vol.1-8, Pergamon Press, NY (1984).

Термин "циклоалкил" относится к моно- или полициклическим группам, содержащим от 3 до 15 атомов углерода, и могут необязательно содержать одну или две двойные связи. Примеры включают циклогексил, адамантил и норборнил. Термин "арил" относится к моно- или полициклическим группам, содержащим 6, 10, 12 или 14 атомов углерода, в которых как минимум одно кольцо является ароматическим. Примеры включают фенил, нафтил и тетрагидронафталин.

Термин "гетероароматический" относится к моно- или полициклическим группам, содержащим от 1 до 15 атомов углерода и от одного до четырех гетероатомов, каждый из которых независимо выбран из группы, включающей серу, азот и кислород и которые дополнительно содержат от 1 до 3 пяти- или шестичленных колец, как минимум одно из которых является ароматическим.

Термин "альфа-аминокислота" (α -аминокислота) относится как к встречающимся в природе аминокислотам, так и к другим, "небелковым", α -аминокислотам, обычно использующимся в пептидной химии для получения синтетических аналогов природных пептидов, включающим D и L формы. Природными аминокислотами являются глицин, аланин, валин, лейцин, изолейцин, серин, метионин, треонин, фенилаланин, тирозин, триптофан, цистеин, пролин, гистидин, аспарагиновая кислота, аспарагин, глутаминовая кислота, глутамин, γ -карбоксиглютаминовая кислота, аргинин, орнитин и лизин. Примеры "небелковых" α -аминокислот включают гидроксилизин, гомосерин, гомотирозин, гомо-фенилаланин, цитруллин, кинуренин, 4-амино-фенилаланин, 3-(2-нафтил)-аланин, 3-(1-нафтил)-аланин, метионин сульфон, т-бутил-аланин, т-бутилглицин, 4-гидроксифенилглицин, аминоаланин, фенилглицин, винилаланин, пропаргил-глицин, 1,2,4-триазол-3-аланин, 4,4,4-трифтор-треонин, тиронин, 6-гидрокситриптофан, 5-гидрокситриптофан, 3-гидроксикинуренин, 3-аминотирозин, трифторметилаланин, 2-тиенилаланин, (2-(4-пиридил)этил)-цистеин, 3,4-диметоксифенилаланин, 3-(2-тиазолил)-аланин, иботеновую кислоту, 1-амино-1-циклопентанкарбоновую кислоту, 1-амино-1-циклогексанкарбоновую кислоту, хискваловую кислоту, 3-трифторметилфенилаланин, 4-трифторметилфенилаланин, циклогексилаланин, цикло-гексилглицин, тиогистидин, 3-метокситирозин, эластатинал, норлейцин, норвалин, аллоизолейцин, гомоаргинин, тиопролин, дегидропролин, гидроксипролин, изонипектотовую кислоту, гомопролин, циклогексилглицин, α -амино-н-масляную кислоту, циклогексилаланин, аминофенилмасляную кислоту, фенилаланин, замещенный в орто, мета или пара положении фенильного фрагмента одним или двумя из следующих заместителей: (C₁-C₄) алкил, (C₁-C₄) алкокси, галоген или нитро группами или замещен метилендиокси группой; β -2- и 3-тиенилаланин, β -2- и 3-фуранилаланин, β -2, 3- и 4-пиридилаланин, β -(бензотиенил-2- и 3-ил)аланин, β -(1- и 2-нафтил)аланин, O-алкилированные производные серина, треонина или тирозина, S-алкилированный цистеин, S-алкилированный гомоцистеин, О-сульфатный, O-фосфатный и O-карбоксильный эфиры тирозина, 3-сульфотирозин, 3-карбокситирозин, 3-фосфотирозин, эфир тирозина с 4-метансульфоновой кислотой, 4-метанфосфониевый эфир тирозина, 3,5-дииодтирозин, 3-нитротирозин, ε -алкиллизин, и дельта-алкилорнитин. Любая из этих α -аминокислот может быть замещена метильной группой в альфа-положении, атомом галогена в любом ароматическом остатке α -амино боковой цепи, или соответствующей защитной фуппой при О, N или S атомах боковой цепи аминокислотных остатков. Соответствующие защитные группы раскрыты в "Protective Groups In Organic Synthesis," T.W.Greene and P.G.M. Wuts, J. Wiley & Sons, NY, NY, 1991.

Термин "замещать" подразумевает замещение атома водорода в соединении замещающей группой. В настоящем изобретении атомы водорода, которые составляют часть фрагмента, участвующего в образовании водородной связи, способного образовать водородную связь с карбонильным кислородом Arg-341 ICE или карбонильным кислородом Ser-339 ICE, исключены из замещения. К таким исключенным атомам водорода относятся атомы, входящие в состав -NH-групп, находящихся в альфа-положении по отношению к -СО- группе, и описываются скорее как -NH-, чем как Х группа, или некоторые другие обозначения в следующих диаграммах: (а) через (t), (v) через (z).

Термин "прямая цепь" относится к прилегающей неразветвленной цепочке ковалентно связанных атомов. Прямая цепь может быть замещена, но ее заместители не являются частью прямой цепи.

Термин "К_i" относится к численному значению эффективности соединения при ингибировании активности фермента-мишени, такого, как ICE. Уменьшение значения К_i соответствует увеличению эффективности. Значение K_i получают в результате приведения экспериментально полученных значений скорости к стандартным уравнениям ферментативной кинетики (see I.H.Segel, Enzyme Kinetics, Wiley-Interscience, 1975).

Термин "пациент", используемый в данной заявке, относится к любому млекопитающему, особенно к человеку.

Термин "фармацевтически эффективное количество" относится к количеству, проявляющему эффективное действие при лечении или облегчении IL-I-, апоптоз-, IGIF- или IFN-γ -опосредованных заболеваний у пациента. Термин "профилактически эффективное количество" относится к количеству, обладающему эффективностью в предотвращении или существенном уменьшении риска IL-I-, апоптоз-, IGIF-или IFN-γ - опосредованных заболеваний у пациента.

Термин "фармацевтически приемлемый носитель, или адъювант" относится к нетоксичному носителю или адъюванту, который может быть введен пациенту вместе с соединением данного изобретения и который не нарушает его фармакологическую активность.

Термин "фармацевтически приемлемое производное" обозначает любую фармацевтически приемлемую соль, сложный эфир, или соль такого эфира соединения данного изобретения, или любое другое соединение, которое при введении реципиенту способно производить (прямым или непрямым образом) соединение данного изобретения или анти-ICE активный метаболит или их остаток.

Фармацевтически приемлемые соли соединений данного изобретения включают, например, соли, полученные из фармацевтически приемлемых неорганических и органических кислот и оснований. Примеры подходящих кислот включают хлористоводородную, бромистоводородную, серную, азотную, перхлорную, фумаровую, малеиновую, фосфорную, гликолевую, молочную, салициловую, янтарную, толуол-п-сульфоновую, винную, уксусную, лимонную, метансульфоновую, муравьиную, бензойную, малоновую, нафталин-2-сульфоновую и бензолсульфоновую кислоты. Другие кислоты, такие, как щавелевая, несмотря на то, что сами по себе не являются фармацевтически приемлемыми, могут применяться при получении солей, использующихся в качестве промежуточных веществ при получении соединений данного изобретения и их фармацевтически приемлемых солей присоединения кислот. Соли, получаемые из соответствующих оснований, включают соли щелочных металлов (напр., натрия), щелочноземельных металлов (напр., магния), аммония и N-(C_1-4 aлкил)

\binom{+}{4}

. Данное изобретение также рассматривает термин "кватернизация" любой основной азотсодержащей группы соединений, раскрытых здесь. Азот, обладающий основными свойствами, может быть переведен в четвертичную форму с помощью любого агента, известного рядовым специалистам в данной области, включая, например, низшие алкилгалогениды, такие, как метил-, этил-, пропил- и бутилхлориды, бромиды и иодиды; диалкилсульфаты, включающие диметил-, диэтил-, дибутил- и диамилсульфаты; длинноцепочечные галогениды, такие, как децил-, лаурил-, миристоил- и стеарилхлориды, бромиды и иодиды; и аралкилгалогениды, включающие бензил- и фенетилбромиды. В результате такой кватернизации могут быть получены продукты, растворимые или диспергируемые в воде или масле.

Ингибиторы ICE данного изобретения могут содержать один или несколько "асимметрических" атомов углерода и, таким образом, могут находиться в виде рацематов и рацемических смесей, индивидуальных энантиомеров, смесей диастереомеров и индивидуальных диастереомеров. Все эти изомерные формы соединений специально включены в настоящее изобретение. Каждый стереогенный атом углерода может быть R или S конфигурации. Хотя специфические соединения и строительные блоки, представленные в примерах в этой заявке, могут быть описаны в отдельной стереохимической конфигурации, также рассматриваются соединения и строительные блоки, имеющие каждый противоположную стереохимию в любом данном хиральном центре или их смеси.

Ингибиторы ICE данного изобретения могут включать циклические структуры, которые могут быть необязательно замещены при атомах углерода, азота или других атомах различными заместителями. Такие циклические структуры могут быть замещены одним или несколькими заместителями. Предпочтительно циклические структуры содержат от 0 до 3 заместителей. При множественном замещении каждый заместитель может быть выбран независимо от других, при условии того, что комбинация заместителей приводит к образованию стабильного соединения.

В данном изобретении рассматриваются только те комбинации заместителей и вариации, которые приводят к образованию стабильных соединений. Используемый здесь термин "стабильный" относится к соединениям, обладающим достаточной стабильностью для проведения промышленного производства и введения млекопитающим с помощью известных в этой области методов. Обычно такие соединения являются стабильными при температуре 40°С или ниже, в отсутствие влаги или других химически реактивных условий, в течение как минимум одной недели.

Заместители могут быть представлены в различной форме. Эти формы известны опытным специалистам и являются взаимозаменяемыми. Например, метильный заместитель на фенильном кольце может быть представлен в любой из следующих форм:

Здесь взаимозаменяемо используются различные формы таких заместителей, как метил.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Для более полного понимания описываемого изобретения далее приводится его подробное описание.

Ингибиторы ICE в одном воплощении (А) данного изобретения имеют формулу α :

в которой:

Х₁ представляет собой -СН;

g равно 0 или 1;

каждый J независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -ОН и -F, при условии, что если первый и второй J связаны с С, и упомянутый первый J представляет собой -ОН, то второй J представляет собой -Н;

m равно 0, 1, или 2;

Т представляет собой -ОН, -СО-СО₂Н, -CO₂H, или любой биоизостерический заместитель для –СО₂Н;

R₁ выбран из группы, состоящей из следующих формул, в которых любой цикл может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями при любом атоме углерода на Q₁, при любом атоме азота на R₅, или при любом атоме на =O, -ОН, -СО₂Н или галоген; любой насыщенный цикл может необязательно иметь одну или две кратные связи; и где R₁ (е) и (у) необязательно конденсирован с бензольным кольцом;

R₂₀ выбран из группы, состоящей из:

в которых каждый цикл С независимо выбран из группы, состоящей из бензо-, пиридо-, тиено-, пирроло-, фурано-, тиазоло-, изотиазоло-, оксазоло-, изоксазоло-, пиримидо-, имидазоло-циклов, циклопентила и циклогексила;

R₃ представляет собой:

-CN,

-CH=CH-R₉,

-CH=N-O-R₉,

-(CH₂)_1-3-T₁-R₉,

-CJ₂-R₉,

-CO-R₁₃, или

каждый R₄ независимо выбран из группы, состоящей из:

-Н,

-Аr₁,

-R₉,

-T₁-R₉, и

-(CH₂)_1,2,3-T₁-R₉;

каждый T₁ независимо выбран из группы, состоящей из:

СН=СН-,

-О-,

-S-,

-SO-,

-SO₂-,

-NR₁₀-,

-NR₁₀-CO-,

-CO-,

-O-СО-,

-СО-O-,

-CO-NR₁₀-,

-O-CO-NR₁₀-,

-NR₁₀-CO-O-,

-NR₁₀-CO-NR₁₀-,

-SO₂-NR₁₀-,

-NR₁₀-SO₂, и

-NR₁₀-SO₂-NR₁₀-;

каждый R₅ независимо выбран из группы, состоящей из:

-Н,

-Ar₁,

-СО-Аr₁,

-SO₂-Ar₁,

-CO-NH₂,

-SO₂-NH₂,

-R₉,

-CO-R₉,

-CO-O-R₉,

-SO₂-R₉,

R₆ и R₇ вместе образуют насыщенный 4-8-членный карбоцикл или гетероцикл, содержащий -О-, -S- или -NH-; или R₇ представляет собой -Н, a R₆ представляет собой

-Н

-Аr₁,

-R₉,

-(CH₂)_1,2,3-T₁-R₉, или

боковую цепь α -аминокислотного остатка;

каждый R₉ представляет собой C_1-6 алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенную один или несколько раз -ОН, -F, или =O и необязательно замещенную одной или двумя Ar₁ группами;

каждый R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из -Н или С_1-6 алкилыюй группы с прямой или разветвленной цепью;

каждый R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из: -Аr₂, -R₄ и

каждый Ar₁ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда арильных групп, содержащих 6, 10, 12 или 14 атомов углерода и от 1 до 3 циклов, циклоалкильную группу, содержащую от 3 до 15 атомов углерода и от 1 до 3 циклов, причем указанная циклоалкильная группа необязательно конденсирована с бензольным циклом, и гетероциклическую группу, содержащую от 5 до 15 кольцевых атомов и от 1 до 3 циклов, эта гетероциклическая группа содержит как минимум одну группу, содержащую гетероатом, выбранную из -О-, -S-, -SO-, -SO₂-, =N- и -NH-, упомянутая гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, упомянутая гетероциклическая группа необязательно включает одно или несколько ароматических колец, причем, эта циклическая группа один или несколько раз необязательно замещена –NH₂, -СО₂Н, -Cl, -F, -Br, -I, -NO₂, -CN, =O, -ОН, перфтор С_1-3

алкилом, или Q₁;

каждый Аr₂ независимо выбран из следующей группы, в которой любой цикл может быть один или несколько раз необязательно замещен Q₁ и О₂:

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из:

-Аr₁

-O-Аr₁

-R₉,

-T₁-R₉, и

-(CH₂)_1,2,3-T₁-R₉-;

каждой Q₂ независимо выбран из группы, состоящей из: -ОН, -NH₂, -СО₂Н, -Cl, -F, -Br, -I, -NO₂, -CN, -СF₃, и

;

при условии, что –Ar₁ замещен группой Q₁, которая включает одну или несколько дополнительных групп –Ar₁, упомянутая дополнительная группа –Ar₁ не замещена Q₁;

каждый Х независимо выбран из группы, состоящей из=N- и=СН-;

каждый Х₂ независимо выбран из группы, состоящей из: -О-, -СН₂-, -NH-, -S-, -SO- и –SO₂;

каждый Х₃ независимо выбран из группы, состоящей из: -СН₂-, -S-, -SO- и -SO₂-;

каждый Х₄ независимо выбран из группы, состоящей из: -СН₂- и -NH-;

каждый Х₅ независимо выбран из группы, состоящей из:

и

;

Х₆ представляет собой -СН- или -N-;

каждый Y независимо выбран из группы, состоящей из: -O-, -S- и -NH;

каждый Z независимо представляет собой СО или SO₂;

каждое а независимо равно 0 или 1;

каждое с независимо равно 1 или 2;

каждое d независимо равно 0, 1 или 2; и

каждое е независимо равно 0, 1, 2 или 3;

при условии, если

R₁ представляет собой (f),

R₆ представляет собой боковую цепь α -аминокислотного остатка, и

R₇ представляет собой -Н,

то (аа1) и (аа2) должны быть замещены Q₁;

а также при условии, если

R₁ представляет собой (о),

g равно 0,

J представляет собой -Н,

m равно 1,

R₆ представляет собой боковую цепь α -аминокислотного остатка,

R₇ представляет собой -Н,

Х₂ представляет собой -СН₂-,

Х₅ представляет собой -СН-,

Х₆ представляет собой -N-, и

R₃ представляет собой

или -CO-R₁₃, если

R₁₃ представляет собой:

-СН₂-О-СО-Аr₁,

-CH₂-S-CO-Ar₁,

-СН₂-О-Аr₁,

-CH₂-S-Ar₁ или

-R₄, если –R₄ является -Н;

то цикл группы R₁ (о) должен быть замещен Q₁ или конденсирован с бензолом; и при условии, если

R₁ является (w),

g равно 0,

J является -Н,

m равно 1,

Т представляет собой -СО₂Н,

Х₂ является О,

R₅ представляет собой бензилоксикарбонил, и

цикл С является бензоциклом,

то R₃ не может быть -CO-R₁₃, если:

R₁₃ является -CH₂-O-Ar₁ и

Ar₁ представляет собой 1-фенил-3-трифторметил-пиразол-5-ил, в котором фенил необязательно замещен атомом хлора;

или, если:

R₁₃ представляет собой -СН₂-О-СО-Аr₁ где Ar₁ представляет собой 2,6-дихлорофенил.

Предпочтительные соединения воплощения А имеют формулу α , в которой R₁ представляет собой (w):

в котором другие заместители являются такими, как описаны выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения А имеют формулу α , в которой R₁ представляет собой (у):

в котором другие заместители являются такими, как описано выше.

Более предпочтительные соединения воплощения А имеют формулу α , в которой:

X₁ представляет собой -СН;

g равно 0;

J представляет собой -Н;

m равно 0 или 1, а Т представляет собой -CO-CO₂H, или любой

биоизостерический заместитель –СО₂Н, или

m равно 1, а Т представляет собой -СО₂Н;

R₁ выбран из группы, состоящей из соединений следующих формул, в которых любой цикл может быть один или несколько раз необязательно замещен при любом атоме углерода Q₁, при любом атоме азота R₅ или при любом атоме =O, -ОН, -СО₂Н или галогеном, и где (е) необязательно конденсирован с бензолом:

и

R₂₀ представляет собой:

или

и с равно 1;

цикл С является бензоциклом, необязательно замещенным –С_1-3 алкилом, -O-C_1-3 алкилом, -Cl, -F или –СF₃;

если R₁ представляет собой (а) или (b), R₅ является предпочтительно -Н, а если R₁ представляет собой (с), (е), (f), (о), (r), (w), (x) или (у), R₅ является предпочтительно:

-CO-Ar₁

-SO₂-Ar₁,

-CO-NH₂,

-CO-NH-Ar₁,

-CO-R₉,

-CO-O-R₉,

-SO₂-R₉, или

-CO-NH-R₉,

R₇ представляет собой -Н и R₆ представляет собой: -Н,

-R₉, или

-Ar₁;

R₉ представляет собой C_1-6 алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенную =O и необязательно замещенную -Ar₁;

R₁₀ представляет собой -Н или –C_1-6 алкильную группу с прямой или разветвленной цепью;

Ar₁ представляет собой фенил, нафтил, пиридил, бензотиазолил, тиенил, бензотиенил, бензоксазолил, 2-инданил, или индолил необязательно замещенные -O-C_1-3алкилом, -NH-C_1-3 алкилом, -N-(С_1-3 алкил)₂, -Сl, -F, -СF₃, -С_1-3 алкилом, или

;

Q₁ представляет собой R₉ или -(СН₂)_0,1,2-T₁-(CH₂)_0,1,2-Ar₁, где Т₁ представляет собой -О- или -S-;

каждый Х независимо выбран из группы, состоящей из: =N- и =СН-;

каждый Х₂ независимо выбран из группы, состоящей из: -O-, -CH₂-, -NH-, -S-, -SO- и -SО₂-;

и

;

Х₆ представляет собой

и

;

при условии, если:

R₁ представляет собой (о),

Х₂ представляет собой –СН₂-,

Х₅ представляет собой

, и

Х₆ представляет собой

,

то цикл группы R₁ (о) должен быть замещен Q₁ или конденсирован с бензолом; и

Z представляет собой С=O.

Самыми предпочтительными соединениями этого более предпочтительного воплощения являются такие, в которых группа R₁ представляет собой:

или

а с равно 2; или

или

которые необязательно конденсированы с бензолом,

а с равно 1 или 2;

при условии, если R₁ представляет собой (е4),

g равно 0,

J представляет собой -H,

m равно 1,

Т представляет собой –СО₂Н,

с равно 1,

то R₃ не может быть -СО-R₁₃, если

R₁₃ представляет собой –CH₂-O-Ar₁, где

Ar₁ представляет собой 1-фенил-3-трифторметил-пиразол-5-ил, где фенил необязательно замещен атомом хлора; или если

R₁₃ представляет собой -CH₂-O-CO-Ar₁, где

Ar₁ представляет собой 2,6-дихлорфенил,

и если скелет цикла во 2 позиции замещен пара-фтор-фенилом; и

также при условии, если

R₁ представляет собой (е7),

g равно 0,

J представляет собой -Н,

m равно 1,

Т представляет собой -CO₂H или -CO-NH-OH,

R₅ является защитной группой при атоме N боковой цепи аминокислотного остатка, и

каждый с равен 1,

то R₃ не может быть -CO-R₁₃ если R₁₃ представляет собой:

-СН₂-O-CO-Ar₁,

-CH₂-S-CO-Ar₁,

-СН₂-О-Аr₁, или

-CH₂-S-Ar₁.

Самыми предпочтительными соединениями этого воплощения являются такие, в которых:

R₁ представляет собой:

или

а с равно 2;

mравно 1;

Т представляет собой -СО₂Н; и

R₃ представляет собой -CO-R₁₃.

Другими самыми предпочтительными соединениями этого воплощения являются такие, в которых:

R₁ представляет собой:

где X₂ представляет собой:

-О-,

-S-,

-SO₂-, или

-NH-;

необязательно замещенный R₅ или Q₁ при Х₂, если X₂ представляет собой -NH-; и

цикл С является бензоциклом, замещенным –С_1-3 алкилом, -O-С_1-3 алкилом, -Сl, -F или –СF₃.

Ингибиторы ICE другого воплощения (В) настоящего изобретения имеют формулу (I):

где:

R₁ выбран из группы, состоящей из соединений следующих формул:

цикл С выбран из группы, состоящей из бензо-, пиридо-, тиепо-, пирроло-, фурано-, тиазоло-, изотиазоло-, оксазоло-, изоксазоло-, пиримидо-, имидазоло-циклов, циклопентила и циклогексила;

R₂ представляет собой:

или

m равно 1 или 2;

R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉,

-S(O)₂-R₉,

-C(O)-CH₂-O-R₉,

-C(O)C(O)-R₁₀,

-R₉-

-Н, и

-C(O)C(O)-OR₁₀;

Х₅ представляет собой

и

;

Y₂ представляет собой Н₂ или О;

Х₇ представляет собой -N(R₈)- или -О-;

R₆ выбран из группы, состоящей из -Н и –СН₃;

R₈ выбран из группы, состоящей из:

-С(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉,

-C(O)-N(H)-R₁₀,

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-CH₂-OR₁₀,

-C(O)C(O)-R₁₀;

-C(O)-CH₂N(R₁₀)(R₁₀),

-C(O)-CH₂C(O)-O-R₉,

-C(O)-CH₂C(O)-R₉,

-Н, и

-C(O)-C(O)-OR₁₀;

каждый R₉ независимо выбран из группы, состоящей из –Аr₃ и –C_1-9 прямой или разветвленной алкильной группы, необязательно замещенной Аr₃, где –C_1-6 алкильная группа необязательно ненасыщена;

каждый R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Аr₃, С_3-6 циклоалкильной группы и –С_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы, необязательно замещенной Аr₃, где –C_1-6 алкильная группа необязательно ненасыщена;

R₁₃ независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Аr₃ и –C_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы, необязательно замещенной Аr₃, -CONH₂, -OR₅, -ОН, -OR₉, или –СО₂Н;

каждый R₅₁ независимо выбран из группы, состоящей из R₉, -C(O)-R₉, -C(O)-N(H)-R₉, или любые R₅₁, взятые вместе, образуют насыщенный 4-8 карбоцикл, или гетероцикл, содержащий -О-, -S-, или -NH-;

каждый R₂₁ независимо выбран из группы, состоящей из -Н или –C_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы;

каждый Аr₃ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильных групп, содержащих 6, 10, 12 или 14 атомов углерода и от 1 до 3 циклов, и ароматических гетероциклических групп, содержащих от 5 до 15 атомов кольца и от 1 до 3 циклов, упомянутая гетероциклическая группа содержит как минимум одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, -SO-, SO₂, =N- и -NH-, такая гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, упомянутая гетероциклическая группа необязательно содержит одно или несколько ароматических колец, и упомянутая циклическая группа может быть один или несколько раз необязательно замещена –Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NН₂, -СО₂Н, -Cl, -F, -Br, -I, -NO₂, -CN, =O, -ОН, -перфтор С_1-3 алкила, R₅, -OR₅, -NHR₅, OR₉, -NHR₉, R₉, -C(O)-R₁₀ и

при условии, если –Аr₃ имеет замещающую группу Q₁, которая содержит одну или несколько добавочных групп -Аr₃, упомянутые добавочные -Аr₃ группы не должны быть замещены другими -Аr₃.

Предпочтительно R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀-

-C(O)O-R₉ и

-C(O)-NH-R₁₀-

Альтернативно, R₅ выбран из группы, состоящей из:

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-C(O)-R₁₀,

-R₉ и

-C(O)-C(O)-OR₁₀,

Более предпочтительно:

m равно 1;

R₁₃ представляет собой Н или –С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, -ОН, -OR₉ или –СО₂Н, где R₉ представляет собой –С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, в которой Аr₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

R₂₁ представляет собой -Н или -СН₃;

R₅₁ представляет собой C_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную -Аr₃, где Аr₃ является фенилом, необязательно замещенным Q₁;

Аr₃ представляет собой фенил, нафтил, тиенил, хинолинил, изохинолинил, пиразолил, тиазолил, изоксазолил, бензотриазолил, бензимидазолил, тиенотиенил, имидазолил, тиадиазолил, бензо[b]тиофенил, пиридил бензофуранил, и индолил;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NH₂, -Cl, -F, -Вr, -ОН, R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -NHR₉ и

, где каждый R₉ и R₁₀ независимо представляют собой С_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, где Аr₃ является фенилом;

при условии, что –Аr₃ имеет замещающую группу Q₁, которая содержит одну или несколько добавочных групп –Ar₃, упомянутые добавочные –Аr₃ группы не должны быть замещены другими –Аr₃.

Ингибиторы ICE другого воплощения (С) настоящего изобретения имеют формулу (II):

в которой:

m равно 1 или 2;

и

цикл С выбран из группы, состоящей из бензо-, пиридо-, тиено-, пирроло-, фурано-, тиазоло-, изотиазоло-, оксазоло-, изоксазоло-, пиримидо-, имидазоло-циклов, циклопентила и циклогексила;

R₃ выбран из группы, состоящей из:

-CN,

-С(O)-Н,

-С(O)-СН₂-T₁-R₁₁,

-C(O)-CH₂-F,

-C=N-O-R₉ и

-СО-Аr₂;

R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉,

,

-S(O)₂-R₉,

-C(O)-CH₂-O-R₉,

-C(O)C(O)-R₁₀,

-R₉,

-Н и

-C(O)C(O)-OR₁₀,

X₅ представляет собой

и

;

Y₂ представляет собой H₂ или О;

Х₇ представляет собой -N(R₈)- или -О-;

каждый T₁ независимо выбран из группы, состоящей из -О-, -S-, -S(O)- и -S(O)₂-;

R₆ выбран из группы, состоящей из -Н и –СН₃;

R₈ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉,

-C(O)-NH-R₁₀,

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-CH₂-OR₁₀,

-C(O)C(O)-R₁₀,

-C(O)-CH₂-N(R₁₀)(R₁₀),

-C(O)-CH₂C(O)-O-R₉,

-С(O)-СН₂С(O)-R₉,

-Н и

-C(O)-C(O)-OR₁₀;

каждый R₉ независимо выбран из группы, состоящей из –Аr₃ и С_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы, необязательно замещенной –Аr₃, где –С_1-6 алкильная группа является необязательно замещенной;

каждый R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Аr₃, С_3-6 циклоалкильной группы и C_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы, необязательно замещенной –Аr₃, где –C_1-6 алкильная группа является необязательно замещенной;

каждый R₁₁ независимо выбран из группы, состоящей из

-Аr₄,

-(СН₂)_1-3-Аr₄,

-Н, и

-С(O)-Аr₄;

R₁₃ выбран из группы, состоящей из Н, Аr₃ и С_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы, необязательно замещенной Аr₃, -CONH₂, -OR₅, -ОН, -OR₉ или –СО₂Н; -OR₁₃ необязательно является -N(H)-OH;

каждый R₂₁ независимо выбран из группы, состоящей из -Н или С_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы;

Аr₂ независимо выбран из следующей группы, в которой любой цикл может быть один или несколько раз необязательно замещен –Q₁:

и

где каждый Y независимо выбран из группы, состоящей из О и S;

каждый Аr₃ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильных групп, содержащих 6, 10, 12 или 14 атомов углерода и от 1 до 3 циклов, и ароматических гетероциклических групп, содержащих от 5 до 15 циклических атомов и от 1 до 3 циклов, упомянутые гетероциклические группы содержат как минимум одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, -SO-, SO₂, =N- и -NH-, -N(R₅)- и -N(R₉)-, эти гетероциклические группы необязательно содержат одну или несколько двойных связей, упомянутые гетероциклические группы необязательно содержат одно или несколько ароматических колец, и упомянутые циклические группы один или несколько раз необязательно замещены –Q₁;

каждый Аr₄ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильных групп, содержащих 6, 10, 12 или 14 атомов углерода и от 1 до 3 циклов, и гетероциклических групп, содержащих от 5 до 15 атомов кольца и от 1 до 3 циклов, упомянутые гетероциклические группы содержат как минимум одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, -SO-, SO₂, =N-, -NH-, -N(R₅)- и -N(R₉)-, эти гетероциклические группы необязательно содержат одну или несколько двойных связей, упомянутые гетероциклические группы необязательно содержат одно или несколько ароматических колец, и упомянутые циклические группы один или несколько раз необязательно замещены –Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -NH₂, -СО₂Н, -Cl, -F, -Br, -I, -NO₂, -CN, =O, -ОН, -перфтор С_1-3 алкила, R₅, -OR₅, -NHR₅, OR₉, -NHR₉, R₉, -C(O)-R₁₀ и

при условии, что когда –Аr₃ имеет замещающую группу Q₁, которая содержит одну или несколько добавочных групп –Аr₃, то упомянутые добавочные –Аr₃ группы не должны быть замещены другими –Аr₃.

Предпочтительные соединения этого воплощения включают, не ограничиваясь ими, следующие соединения:

Предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е11), а другие заместители являются такими, как определено выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е12), а другие заместители являются такими, как определено выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (у1), а другие заместители являются такими, как определено выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (у2), а другие заместители являются такими, как определено выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (z), а другие заместители являются такими, как определено выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (w2), а другие заместители являются такими, как определено выше.

Более предпочтительно R₁ представляет собой (w2) и m равно 1;

цикл С является бензо-, пиридо- или тиено-циклом;

R₃ выбран из группы, состоящей из -С(O)-Н, -С(O)-Аr₂ и -C(O)CH₂-T₁-R₁₁;

R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ представляет собой –Аr₃;

-C(O)O-R₉, где R₉ представляет собой –СН₂-Аr₃;

-C(O)C(O)-R₁₀, где R₁₀ представляет собой –СН₂Аr₃;

-R₉, где R₉ представляет собой C_1-2 алкильную группу, замещенную –Аr₃;

и -C(O)C(O)-OR₁₀, где R₁₀ представляет собой –СН₂Аr₂;

T₁ является О или S;

R₆ представляет собой Н;

R₈ выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)-CH₂-OR₁₀ и -C(O)CH₂-N(R₁₀)(R₁₀), где R₁₀ является Н, СН₃ или –СН₃СН₃;

R₁₁ выбран из группы, состоящей из –Аr₄, -(СН₂)_1-3-Аr₄ и -С(O)-Аr₄;

R₁₃ представляет собой Н или С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную Аr₃, -ОН, -OR₉ или –СО₂Н, где R₉ представляет собой С_1-4 разветвленную или прямую алкильную группу, где Аr₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

Аr₂ представляет собой (hh);

Y представляет собой О;

Аr₃ представляет собой фенил, нафтил, тиенил, хинолинил, изохинолинил, тиазолил, бензимидазолил, тиенотиенил, тиадиазолил, бензотриазолил, бензо[b]тиофенил, бензофуранил и индолил;

Аr₄ представляет собой фенил, тетразолил, нафтил, пиридинил, оксазолил, пиримидинил или индолил;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из —NH₂, -Cl, -F, -Вr, -ОН, -R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -S(O)₂R₉, -OR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -NHR₉ и

, где каждый R₉ и R₁₀ независимо представляют собой –C_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную Аr₃, где Аr₃ является фенилом;

при условии, что –Аr₃ имеет замещающую группу Q₁, которая содержит одну или несколько добавочных групп –Аr₃, упомянутые добавочные –Аr₃ группы не должны быть замещены другими –Аr₃.

Предпочтительные соединения данного воплощения включают, не ограничиваясь ими, следующие соединения:

Другие предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой СН, а другие заместители являются такими, как определены выше.

Более предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой СН, R₃ представляет собой СО-Аr₂, а другие заместители являются такими, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой СН, R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, R₁₁ представляет собой -(СН₂)_1-3-Аr₄, а другие заместители являются такими, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой СН и

R₉ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁;

Т₁ является О; и

R₁₁представляет собой -С(O)-Аr₄,

а другие заместители являются такими, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е10), X₅ представляет собой СH, R₃ представляет собой

-С(O)-Н, а другие заместители являются такими, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е10), X₅ представляет собой СН, R₃ представляет собой -С(O)-СН₂-Т₁-R₁₁, R₁₁ представляет собой – Аr₄, а другие заместители являются такими, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N, а другие заместители являются такими, как определены выше.

Более предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N, R₃ представляет собой СО-Аr₄, а другие заместители являются такими, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N, R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, R₁₁ представляет собой -(СН₂)_1-3-Ar₄, а другие заместители являются такими, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N и

R₃ представляет собой -С(O)-СН₂-Т₁-R₁₁;

T₁ является О; и

R₁₁ представляет собой -(СО)-Аr₄, а другие заместители являются такими, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения С имеют формулу (II), где R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N, R₃ представляет собой

-С(O)-СН₂-Т₁-R₁₁, R₁₁ представляет собой –Аr₄, а другие заместители являются такими, как определены выше.

Более предпочтительно, если в этих более предпочтительных соединениях

R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉ и

-C(O)-NH-R₁₀.

Альтернативно в этих более предпочтительных соединениях R₅ выбран из группы, состоящей из:

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-C(O)-R₁₀,

-R₉ и

-C(O)-C(O)-OR₁₀.

Наиболее предпочтительно, если в этих более предпочтительных соединениях

m равно 1;

T₁ представляет собой О или S;

R₁₃ представляет собой Н или –C_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, -ОН, -OR₉ или –СО₂Н, где R₉ представляет собой С_1-4 разветвленную или прямую алкильную группу, Аr₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

R₂₁ представляет собой -Н или –СН₃;

R₅₁ представляет собой C_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, где Аr₃ является фенилом, необязательно замещенным Q₁;

Аr₂ представляет собой (hh);

Y представляет собой О, и

Аr₃ представляет собой фенил, нафтил, тиенил, хинолинил, изохинолинил, пиразолил, тиазолил, изоксазолил, бензотриазолил, бензимидазолил, тиенотиенил, имидазолил, тиадиазолил, бензо[b]тиофенил, пиридил,бензофуранил и индолил;

Ar₄ представляет собой фенил, тетразолил, пиридинил, оксазолил, нафтил, пиримидинил или тиенил;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NH₂, -Cl, -F, Вr, -ОН, -R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -С(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -NHR₉ и

, где каждый R₉ R₁₀ независимо представляют собой –С_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную Аr₃, где Аr₃ является фенилом;

Предпочтительные соединения воплощения (В) включают, не ограничиваясь ими, следующие соединения:

Предпочтительные соединения воплощения (С) включают, не ограничиваясь ими, следующие соединения:

Характерные соединения данного изобретения также включают, не лимитируясь ими, соединения, в структуру которых включены строительные блоки 1-22:

,

в которых:

R представляет собой

,

где R₁₃ представляет собой –СН₃, -CH₂СН₃, -СН₂CH₂СН₃, -СН(СН₃)(СН₃), -СН₂СН₂СН₂СН₃, -СН₂-СН(СН₃)СН₃, -С(СН₃)₃, -CH₂Ph, или

,

где

R₁₃ представляет собой –СH₃, -СН₂СН₃, -СН₂СH₃СН₃, -СН(СН₃)(СН₃), -СН₂CH₂СН₂СН₃, -СН₂-СН(СН₃)СН₃, -С(СН₃)₃, -CР₂Ph, или

,

и каждый R₅₁ представляет собой –СН₃, -СН₂СН₃, -СН₂СН₂СН₃, -СН(СН₃)(СН₃), -СН₂СН₂СН₂СН₃, -СН₂-СН(СН₃)СН₃, -С(СН₃)₃, -СН₂Рh, или, взятые вместе, они образуют этилендиоксиацеталь, или пропилендиоксиацеталь; или

,

где R₅₁ представляет собой –СН₃, -СН₂СН₃, -СН₂СН₂СН₃, -СН(СН₃)(СН₃), -СН₂СН₂СН₂СН₃, -СН₂-СН(СН₃)СН₃, -С(СН₃)₃, -CH₂Ph, -С(O)-СН₃ или -C(O)-Ph;

R₅ в каждом из вышеперечисленных соединений является таким же, как фрагменты R₅, описанные для соединений: 139, 214с, 214е, 404-413, 415-491, 493-501. Характерные соединения данного изобретения также включают, не лимитируясь ими, соединения, в структуру которых включены строительные блоки 1-28, в которых R, R₅₁ и R₅ являются такими, как определены выше, и в которых группа -С(O)- фрагмента R₅ соединений 214с, 214е, 404-413, 415-418, 422-426, 430-456, 458-466, 468, 470-471, 473-491, 493, 495, 497-501 замещена на –СН₂-, -С(O)С(O) или -СН₂С(O)С(O)-.

Ингибиторы ICE другого воплощения (D) настоящего изобретения имеют формулу (I):

где:

;

;

и цикл С выбран из группы, состоящей из бензо-, пиридо-, тиено-, пирроло-, фурано-, тиазоло-, изотиазоло-, оксазоло-, изоксазоло-, пиримидо, имидазоло-циклов, циклопентила и циклогексила;

R₂ представляет собой:

,

или

;

m равно 1 или 2;

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉,

-C(O)-N(R₁₀)(R₁₀)

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-CH₂-O-R₉,

-C(O)C(O)-R₁₀,

-R₉,

-H,

-C(O)C(O)-OR₁₀ и

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀);

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NH₂, -СО₂Н, -Cl, -F, -Вr, I, -NO₂, -CN, =О, -ОН, -перфтор С_1-3 алкил, R₅, -OR₅, -NHR₅, OR₉, -N(R₉)(R₁₀), R₉, -С(O)-R₁₀ и

,

при условии, что –Аr₃ имеет замещающую группу Q₁, которая содержит одну или несколько добавочных групп –Аr₃, упомянутые добавочные –Аr₃ группы не должны быть замещены другими –Аr₃;

а другие заместители являются такими, как определены в воплощении (В).

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉ и

-C(O)-NH-R₁₀.

Альтернативно R₅ выбран из группы, состоящей из:

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-C(O)-R₁₀,

-R₉ и

-C(O)-C(O)-OR₁₀.

Более предпочтительно:

m равно 1;

R₁₃ представляет собой Н или -С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, -ОН, -OR₉ или –СО₂Н, где R₉ представляет собой С_1-4 разветвленную или прямую алкильную группу, Аr₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

R₂₁ представляет собой Н или –СН₃;

R₅₁ представляет собой С_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, где Аr₃ является фенилом, необязательно замещенным Q₁;

каждая циклическая группа Аr₃ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, пиразолила, тиазолила, изоксазолила, бензотриазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, имидазолила, тиадиазолила, бензо[b]тиофенила, пиридила, бензофуранила и индолила, причем упомянутая циклическая группа может иметь один или несколько заместителей Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NH₂, -Cl, -F, -Вr, -ОН, -R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -ОR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -N(R₉)(R₁₀) и

,

где каждый R₉ и R₁₀ независимо представляют собой –С_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную Аr₃, где Аr₃ является фенилом;

Ингибиторы ICE другого воплощения (Е) настоящего изобретения имеют формулу (II):

где:

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉,

-C(O)-N(R₁₀)(R₁₀)

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-CH₂-O-R₉,

-C(O)C(O)-R₁₀,

-R₉,

-H,

-C(O)C(O)-OR₁₀ и

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀);

R₁₅ независимо выбран из группы, состоящей из -ОН, -ОАr₃, -N(H)-OH и –OC_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы, необязательно замещенной –Аr₃, -CONH₂, -OR₅, -ОН, OR₉ или –СО₂Н;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NH₂, -СО₂Н, -Cl, -F, -Br, -I, -NO₂, -CN, =O, -ОН, -перфтор C_1-3 алкил, R₅, -OR₅, -NHR₅, OR₉, -N(R₉)(R₁₀), R₉, -C(O)-R₁₀ и

,

при условии, что –Ar₃ имеет замещающую группу Q₁, которая содержит одну или несколько добавочных групп –Аr₃, упомянутые добавочные –Аr₃ группы не должны быть замещены другими –Аr₃;

а другие заместители являются такими, как определены в воплощении (С).

Предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е11), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е12), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (у1), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (у2), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (z), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (w2), а другие заместители такие, как определены выше.

Более предпочтительно R₁ представляет собой (w2) и

m равно 1;

R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃;

-C(O)O-R₉, где R₉ является –СН₂-Аr₃;

-C(O)C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃;

-R₉, где R₉ является C_1-2 алкильной группой, замещенной –Аr₃; и

-C(O)C(O)-OR₁₀, где R₁₀ является –СН₂Аr₃;

T₁ представляет собой О или S;

R₆ представляет собой Н;

R₈ выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)-CH₂-OR₁₀ и -С(O)СН₂-N(R₁₀)(R₁₀), где R₁₀ является Н, СН₃ или –СН₂СН₃;

R₁₁ выбран из группы, состоящей из -Ar₄, -(CH₂)_1-3-Ar₄ и -С(O)-Аr₄;

R₁₅ представляет собой -ОН или –OC_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Ar₃, -ОН, OR₉ или –СО₂Н, где R₉ представляет собой –С_1-4 разветвленную или прямую алкильную группу, Аr₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

Аr₂ представляет собой (hh);

Y представляет собой О;

каждая циклическая группа Аr₃ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, тиазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, тиадиазолила, бензотриазолила, бензо[b]тиофенила, бензофуранила и индолила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

каждая циклическая группа Аr₄ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, тетразолила, нафтила, пиридинила, оксазолила, пиримидинила или индолила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -NH₂, -Cl, -F, -Вr, -ОН, -R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -N(R₉)(R₁₀) и

,

где каждый R₉ и R₁₀ независимо представляют собой –C_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную Аr₃, где Аr₃ является фенилом;

Другие предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой СН, а другие заместители такие, как определены выше.

Более предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой СН, R₃ является СО-Аr₂, а другие заместители такие, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой СН, R₃ является -С(O)-СН₂-T₁-R₁₁, R₁₁ является -(CH₂)_1-3-Ar₄, а другие заместители такие, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой СН, R₃ является -С(O)-СН₂-T₁-R₁₁, T₁ представляет собой О, R₁₁ является -(СО)-Аr₄, а другие заместители такие, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой СH, R₃ является -С(O)-Н, а другие заместители такие, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой СH, R₃ является -CO-CH₂-T₁-R₁₁, R₁₁ является -Аr₄, а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N, а другие заместители такие, как определены выше.

Более предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N, R₃ является СО-Аr₂, а другие заместители такие, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N, R₃ является -С(O)-СН₂-Т₁-R₁₁, R₁₁ является -(СН₂)_1-3-Аr₄, а другие заместители такие, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N и:

R₃ является -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁;

T₁ представляет собой О; и

R₁₁ является -(СО)-Аr₄, а другие заместители такие, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N, R₃ является -С(O)-Н, а другие заместители такие, как определены выше.

Другие более предпочтительные соединения воплощения Е имеют формулу (II), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N, R₃ является -CO-CH₂-T₁-R₁₁, R₁₁ является -Аr₄, а другие заместители такие, как определены выше.

Более предпочтительно, когда в этих более предпочтительных соединениях R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉ и

-C(O)-NH-R₁₀.

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-C(O)-R₁₀,

-R₉ и

-C(O)C(O)-OR₁₀.

Предпочтительнее всего, когда в этих более предпочтительных соединениях

m равно 1;

T₁ представляет собой О или S;

R₁₅ представляет собой -ОН или -ОС_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, -ОН, OR₉ или –СО₂Н, где R₉ представляет собой –С_1-4 разветвленную или прямую алкильную группу, Ar₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

R₂₁ представляет собой -Н или СН₃;

Аr₂ представляет собой (hh);

Y представляет собой О, и

каждая циклическая группа Аr₃ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, пиразолила, тиазолила, изоксазолила, бензотриазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, имидазолила, тиадиазолила, бензо[b]тиофенила, бензофуранила и индолила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

каждая циклическая группа Аr₄ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, тетразолила, пиридинила, оксазолила, нафтила, пиримидинила или тиенила, причем упомянутая циклическая группа может иметь один или несколько заместителей –Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NН₂, -Cl, -F, -Вr, -ОН, -R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -С(O)₂-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -N(R₉)(R₁₀) и

,

Ингибиторы ICE другого воплощения (F) настоящего изобретения имеют формулу (III):

где R₁ и R₂ такие, как описаны в воплощении (D).

Предпочтительные соединения воплощения F имеют формулу (III), в которой R₁ представляет собой (w2), а другие заместители такие, как определены выше.

Предпочтительно, когда r) представляет собой (w2):

m равно 1;

цикл С является бензо-, пиридоили тиено-циклом;

R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃;

-C(O)O-R₉, где R₉ является –СН₂-Аr₃;

-С(O)С(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃;

-R₉, где R₉ является C_1-2 алкильной группой, замещенной –Аr₃; и -C(O)C(O)-OR₁₀, где R₁₀ является –CH₂Ar₃;

R₆ представляет собой Н;

R₁₃ представляет собой Н или -С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, -ОН, OR₉ или –СО₂Н, где R₉ представляет собой -С_1-4 алкильную группу с разветвленной или прямой цепью, Аr₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NH₂, -Cl, -F, -Вr, -ОН, -R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -NHR₉ и

,

Другие предпочтительные соединения воплощения F имеют формулу (III), в которой R₁ представляет собой (е11), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения F имеют формулу (III), в которой R₁ представляет собой (е12), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения F имеют формулу (III), в которой R₁ представляет собой (у1), а другие заместители такие, как определены выше;

Более предпочтительно, когда в этих более предпочтительных соединениях циклическая группа Аr₃ выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, пиразолила, тиазолила, изоксазолила, бензотриазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, имидазолила, тиадиазолила, бензо[b]тиофенила, бензофуранила и индолила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁.

К соединениям предпочтительной формы воплощения F относятся такие, в которых:

R₅ представляет собой -С(O)-R₁₀, где

R₁₀ представляет собой –Аr₃, где циклическая группа Аr₃ является фенилом, причем упомянутая циклическая группа может быть необязательно замещена один или несколько раз следующими заместителями:

-F,

Сl,

-N(H)-R₅, где R₅ является -Н или -C(O)-R₁₀, где R₁₀ представляет собой –С_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную Аr₃, где циклическая группа Аr₃ является фенилом, причем упомянутая циклическая группа может быть необязательно замещена один или несколько раз Q₁,

-N(R₉)(R₁₀), где R₉ и R₁₀ независимо представляют собой –C_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, или

-O-R₅, где R₅ представляет собой Н или -С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу.

Более предпочтительно циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил, необязательно замещенный один или несколько раз по 3 или 5 положению -Сl или по 4 положению -N(H)-R₅, -N(R₉)(R₁₀) или -O-R₅.

Другие предпочтительные соединения воплощения F включают такие, в которых R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, где R₁₀ является Аr₃, а циклическая группа Аr₃ выбрана из группы, состоящей из индолила, бензимидазолила, тиенила и бензо[b]таофенила, причем упомянутая циклическая группа может быть необязательно замещена один или несколько раз Q₁.

Другие предпочтительные соединения воплощения F включают такие, в которых R₅ представляет собой -С(O)-R₁₀, где R₁₀ является Аr₃, а циклическая группа Аr₃ выбрана из хинолила и изохинолила, причем упомянутая циклическая группа может быть необязательно замещена один или несколько раз Q₁.

Другие предпочтительные соединения воплощения F это такие, в которых R₅ представляет собой -С(O)-R₁₀, где R₁₀ является Аr₃, а циклическая группа Аr₃представляет собой фенил, замещенный

.

В другой форме воплощения F соединения являются такими, как описано выше, при дополнительном условии, что если:

m равно 1;

R₁ является (е10);

Х₅ является СH;

R₁₅ является -ОН;

R₂₁ является -Н;

Y₂ является О и R₃ является -С(O)-Н, то R₅ не может быть:

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил, замещенный Q₁, 4-(карбометокси)фенилом, 2-фторфенилом, 2-пиридилом, N-(4-метилпиперазин)метилфенилом, или

-C(O)-R₉, где R₉ является –СН₂-Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил, незамещенный Q₁; и, если

Y₂ является О, R₃ является -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, T₁ является О, а R₁₁ является Аr₄, где циклическая группа Аr₄ представляет собой 5-(1-(4-хлорфенил)-3-трифторметил)пиразолил, то R₅ не может быть:

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой 4-(диметиламинометил)фенил, фенил, 4-(карбоксиметилтио)фенил, 4-(карбоксиэтилтио)фенил, 4-(карбоксиэтил)фенил, 4-(карбоксипропил)фенил, 2-фторфенил, 2-пиридил, N-(4-метилпиперазин)метилфенил, или

-C(O)-R₉, где R₉ является –СН₂-Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил;

и, если R₁₁ является Аr₄, где циклическая группа А₄ представляет собой 5-(1-фенил-3-трифторметил)пиразолил, то R₅ не может быть:

и, если R₁₁ является Аr₄, где циклическая группа Аr₄ представляет собой 5-(1-(2-пиридил)-3-трифторметил)пиразолил, то R₅ не может быть:

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой 4-(диметиламинометил)фенил, или

Y₂ является O, R₃ является -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, T₁ является О, а R₁₁ является -С-(O)-Аr₄, где циклическая группа Аr₄ представляет собой 2,5-дихлорфенил, то R₅ не может быть:

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Ar₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой 4-(диметиламинометил)фенил, 4-(N-морфолинметил)фенил, 4-(N-(метилпиперазин)метил)фенил, 4-(N-(2-метил)имидазолметил)фенил, 5-бензимидазолил, 5-бензтриазолил, N-карбоэтокси-5-бензтриазолил, N-карбоэтокси-5-бензимидазолил, или

Y₂ является Н₂, R₃ является -С(O)-СН₂-Т₁-R₁₁, T₁ является О, а R₁₁ является -С-(O)-Аr₄, где циклическая группа Аr₄ представляет собой 2,5-дихлорфенил, то R₅ не может быть:

-C(O)-R₉, где R₉ является –СН₂-Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил.

В другой форме воплощения F соединения являются такими, в которых R₂₁ представляет собой -Н.

Альтернативно, предпочтительные соединения это такие, в которых R₂₁ представляет собой –СН₃.

Предпочтительные соединения воплощения F имеют формулу (III), в которой R1 является (w2), а другие заместители такие, как определены выше.

Более предпочтительно, когда R₁ представляет собой (w2) и

m равно 1;

R₃ выбран из группы, состоящей из -С(O)-Н, -С-(O)-Аr₂ и -C(O)CH₂-T₁-R₁₁;

R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃;

-C(O)O-R₉, где R₉ является –СН₂-Аr₃;

-C(O)C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃;

-R₉, где R₉ является С_1-2 алкильной группой, замещенной –Аr₃; и

-C(O)C(O)-OR₁₀, где R₁₀ является -СН₂Аr₃;

T₁ является О или S;

R₆ представляет собой Н;

R₈ выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)-CH₂-OR₁₀ и -С(O)СН₂-N(R₁₀)(R₁₀), где R₁₀ является Н, СН₃ или -СН₂СН₃;

R₁₁ выбран из группы, состоящей из -Аr₄, -(СН₂)_1-3-Аr₄, и -С(O)-Аr₄;

R₁₅ представляет собой Н или –ОС_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, -ОН, OR₉ или –СО₂Н, где R₉ представляет собой –С_1-4 алкильную группу с разветвленной или прямой цепью, Аr₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

Аr₂ является(hh);

Y является О;

каждая циклическая группа Аr₃ выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, тиазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, тиадиазолила, бензотриазолила, бензо[b]тиофенила, бензофуранила и индолила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

каждая циклическая группа Ar₄ выбрана из ряда, состоящего из фенила, тетразолила, нафтила, пиридинила, оксазолила, пиримидинила или индолила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NH₂, -Cl, -F, -Вr, -ОН, -R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -N(R₉)(R₁₀) и

,

Другие предпочтительные соединения воплощения F имеют формулу (III), в которой R₁ представляет собой (у1), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения F имеют формулу (III), в которой R₁ представляет собой (у2), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения F имеют формулу (III), в которой R₁ представляет собой (z), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения F имеют формулу (III), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ является СН, а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения F имеют формулу (III), в которой R₁ представляет собой (е10), Х₅ является N, а другие заместители такие, как определены выше.

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉ и

-C(O)-NH-R₁₀.

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-C(O)-R₁₀,

-R₉,

-C(O)C(O)-OR₁₀ и

-C(O)-C(O)-N(R₉)(R₁₀).

m равно 1;

R₁₃ представляет собой -Н или –С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, -ОН, OR₉ или –СО₂Н, где R₉ представляет собой –С_1-4 разветвленную или прямую алкильную группу, Аr₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

R₂₁ представляет собой -Н или СН₃;

R₅₁ представляет собой –C_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, где Аr₃ является фенилом, необязательно замещенным Q₁;

каждая циклическая группа Аr₃ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, пиразолила, тиазолила, изоксазолила, бензотриазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, имидазолила, тиадиазолила, бензо[b]тиофенила, пиридила, бензофуранила и индолила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

,

Предпочтительные соединения воплощения (F) включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

Ингибиторы ICE другого воплощения (G) настоящего изобретения имеют формулу (IV):

где

m равно 1 или 2;

;

;

;

;

;

;

; и

R₁₅ независимо выбран из группы, состоящей из -ОН, -ОАr₃, -N(H)-OH и –OC_1-6, где С_1-6 является прямой или разветвленной алкильной группой, необязательно замещенной –Аr₃, -СОNН₂, -OR₅, -ОН, OR₉ или –CO₂H;

Ar₂ независимо выбран из следующей группы, в которой любой цикл может быть один или несколько раз необязательно замещен –Q₁ или фенилом, необязательно замещенным Q₁:

и

,

а другие заместители являются такими, как определены в воплощении (Е).

Предпочтительные соединения воплощения G имеют формулу (IV), в которой R₁ представляет собой (w2), а другие заместители являются такими, как определены выше.

Предпочтительно, когда R₁ представляет собой (w2):

mравно 1;

R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃;

-C(O)O-R₉, где R₉ является –СН₂-Аr₃;

-C(O)C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃;

-C(O)C(O)-OR₁₀, где R₁₀ является –ОH₂Аr₃;

R₆ представляет собой Н;

R₈ выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)-CH₂-OR₁₀ и -С(O)СН₂- N(R₁₀)(R₁₀), где R₁₀ является Н, СН₃ или –СН₂СН₃;

R₁₃ представляет собой Н или –С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, -ОН, OR₉, -СО₂Н, где R₉ представляет собой -С_1-4 алкильную группу с разветвленной или прямой цепью, Аr₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -NH₂, -Cl, -F, -Вr, -ОН, -R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -NHR₉ и

,

Другие предпочтительные соединения воплощения G имеют формулу (IV), в которой R₁ представляет собой (е10-А), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения G имеют формулу (IV), в которой R₁ представляет собой (е11), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения G имеют формулу (IV), в которой R₁ представляет собой (е12), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения G имеют формулу (IV), в которой R₁ представляет собой (у1), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения G имеют формулу (IV), в которой R₁ представляет собой (у2), а другие заместители такие, как определены выше.

Другие предпочтительные соединения воплощения G имеют формулу (IV), в которой R₁ представляет собой (z), а другие заместители такие, как определены выше.

Более предпочтительными соединениями воплощения G являются такие, в которых R₃ представляет собой -СО-Аr₂.

Наиболее предпочтительно, когда R₃ представляет собой -СО-Аr₂, Y является О.

Другие более предпочтительные соединения это такие, в которых R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, а R₁₁ является -(CH₂)_1-3-Ar₄.

Наиболее предпочтительно, когда R₃ представляет собой -С(O)-СН₂-Т₁-R₁₁, a R₁₁ является -(CH₂)_1-3-Ar₄ и T₁ является О.

Другие более предпочтительные соединения это такие, в которых:

R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁;

Т₁ является О; и

R₁₁ является -С(O)-Аr₄.

Другие более предпочтительные соединения это такие, в которых R₃ представляет собой -С(O)-Н.

Другие более предпочтительные соединения это такие, в которых R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, а R₁₁ является -Аr₄.

Более предпочтительно, когда R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, a R₁₁ является -Ar₄, T₁ является О или S.

Более предпочтительно, когда R₁ представляет собой (e11), (e12), (у1), (у2), (z), (е10-А) и (e10-B), R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉ и

-C(O)-NH-R₁₀.

Альтернативно, когда R₁ представляет собой (e11), (е12), (у1), (у2), (z), (е10-А) и (e10-B), R₅ выбран из группы, состоящей из:

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-C(O)-R₁₀,

R₉,

-C(O)-C(O)-OR₁₀ и

-C(O)-C(O)-N(R₉)(R₁₀).

Более предпочтительно R₅ представляет собой -C(O)-C(O)-R₁₀.

Альтернативно R₅ представляет собой -C(O)-C(O)-OR₁₀.

Наиболее предпочтительно, когда R₁ представляет собой (e11), (e12), (у1), (у2), (z), (e10-A) и (e10-B):

m равно 1;

R₂₁ представляет собой -Н или СН₃;

R₅₁ представляет собой –C_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, где циклическая группа Аr₃ является фенилом, причем упомянутая циклическая группа один или несколько раз необязательно замещена –Q₁;

каждая циклическая группа Аr₃ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, пиразолила, тиазолила, изоксазолила, бензотриазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, имидазолила, тиадиазолила, бензо[b]тиофенила, пиридила, бензофуранила или индолила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

,

где каждый R₉ и R₁₀ независимо представляют собой –C_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную Аr₃, где циклическая группа Аr₃ является фенилом, и упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

Более предпочтительно, если в этих предпочтительных соединениях циклическая группа Аr₃ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, пиразолила, тиазолила, изоксазолила, бензотриазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, имидазолила, тиадиазолила, бензо[b]тиофенила, бензофуранила и индолила, и упомянутая циклическая группа один или несколько раз необязательно замещена –Q₁;

Соединениями в предпочтительной форме воплощения G являются такие, в которых R₂₁ представляет собой Н, а другие заместители такие, как определены выше.

Соединениями в другой предпочтительной форме воплощения G являются такие, в которых R₂₁ представляет собой СН₃, а другие заместители такие, как определены выше

Ингибиторы ICE другого воплощения (G) настоящего изобретения имеют формулу (V):

где R₁ представляет собой:

;

R₂₁ представляет собой СН₃;

а другие заместители такие, как определены выше в воплощении (G).

Соединения другой формы воплощения (I) (форма 1) имеют формулу (V):

где R₁ представляет собой:

;

каждый R₅ представляет собой -C(O)-C(O)-OR₁₀;

Альтернативно, соединения этой формы воплощения I (формы 2) - это такие, в которых R₂₁ представляет собой СН₃.

Соединения другой формы воплощения (J) (форма 1) имеют формулу (V):

в которой

R₁ представляет собой:

;

при условии, если:

m равно 1;

R₁ является (е10);

Х₅ является СН;

R₁₅ является -ОН;

R₂₁ является -H; и

-С(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил, незамещенный –Q₁, 4-(карбоксиметокси)фенилом, 2-фторфенилом, 2-пиридилом, N-(4-метилпиперазин)метилфенилом, или

-C(O)-OR₉, где R₉ является –СН₂-Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил, незамещенный Q₁; и, если

Y₂ является О, R₃ является -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, T₁ является О, а R₁₁ является Аr₄, где циклическая группа Аr₄ представляет собой 2,5-дихлорфенил, то R₅ не может быть:

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой 4-(диметиламинометил)фенил, фенил, 4-(карбоксиметилтио)фенил, 4-(карбоксиэтилтио)фенил, 4-(карбоксиэтил)фенил, 4-(карбоксипропил)фенил, 2-фторфенил, 2-пиридил, N-(4-мeтилпипepaзин)мeтилфeнил, или

-C(O)-OR₉, где R₁₀ является –СН₂-Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил;

и, если, R₁₁ является -Аr₄, а циклическая группа Аr₄ представляет собой 5-(1-фенил-3-трифторметил)пиразолил, то R₅ не может быть:

-C(O)-R₉, где R₉ является –СН₃-Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил;

и, если, R₁₁ является -Аr₄, а циклическая группа Аr₄ представляет собой 5-(1-(2-пиридил)-3-трифторметил)пиразолил, то R₅ не может быть:

Y₂ является О, R₃ является -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, T₁ является О, а R₁₁ является -С-(O)-Аr₄, где циклическая группа Аr₄ представляет собой 2,5-дихлорфенил, то R₅ не может быть:

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой 4-(диметиламинометил)фенил, 4-(Н-морфолинметил)фенил, 4-(N-метилпиперазин)метилфенил, 4-(N-(2-метил)имидазолилметил)фенил, 5-бензимидазолил, 5-бензтриазолил, N-карбоэтокси-5-бензтриазолил, N-карбоэтокси-5-бензимидазолил, или

Y₂ является Н₂, R₃ является -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, T₁ является О, a R₁₁ является -С-(O)-Аr₄, где циклическая группа Аr₄ представляет собой 2,5-дихлорфенил, то R₅ не может быть:

и другие заместители являются такими, как описано выше в воплощении (G).

Соединениями другой формы воплощения J (форма 2) являются такие, в которых R₂₁ представляет собой –СН₃.

Соединениями другой формы воплощения J (форма 3) являются такие, в которых R₅ представляет собой -C(O)-C(O)-OR₁₀.

Соединениями другой формы воплощения J (форма 4) являются такие, в которых R₅ представляет собой -C(O)-C(O)-OR₁₀, a R₂₁ представляет собой –СН₃.

Предпочтительные соединения воплощений Н, I и J имеют формулу (V), в которой R₃ представляет собой -СО-Аr₂.

Более предпочтительно, когда R₃ представляет собой -СО-Аr₂, Y является О.

Предпочтительные соединения воплощений Н, I и J имеют формулу (V), в которой R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁ и R₁₁ является -(СН₂)_1-3-Аr₄.

Более предпочтительно, когда R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁ и R₁₁ является -(CH₂)_1-3-Ar₄, T₁ является О.

Предпочтительные соединения воплощений Н, I и J имеют формулу (V), в которой R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, T₁ является О и R₁₁ является -С(O)-Аr₄.

Предпочтительные соединения воплощений Н, I и J имеют формулу (V), в которой R₃ представляет собой -С(O)-Н.

Предпочтительные соединения воплощений Н, I и J имеют формулу (V), в которой R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁ и R₁₁ является -Аr₄.

Более предпочтительно, когда R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁ и R₁₁является -Ar₄, T₁ является О или S.

Более предпочтительными соединениями воплощений Н и J (формы 1 и 2) являются такие, в которых R₅ выбран из группы, состоящей из:

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉ и

-C(O)-NH-R₁₀.

Альтернативно, более предпочтительными соединениями воплощений Н и J (формы 1 и 2) являются такие, в которых R₅ выбран из группы, состоящей из:

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-C(O)-R₁₀,

R₉,

-C(O)-C(O)-OR₁₀ и

-C(O)-C(O)-N(R₉)(R₁₀).

Более предпочтительными соединениями воплощений Н, I (форма 2) и J (формы 2 и 4) являются такие, в которых:

m равно 1;

Y₂ является О;

R₁₅ представляет собой ОН или -ОС_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, -ОН, OR₉, -СО₂Н, где R₉ представляет собой –C_1-4 алкильную группу с разветвленной или прямой цепью, Аr₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

Аr₂ является (hh);

Y является О; и

каждая циклическая группа Аr₃ выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, пиразолила, тиазолила, изоксазолила, бензотриазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, имидазолила, тиадиазолила, бензо[b]тиофенила, пиридила, бензофуранила и индолила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

каждая циклическая группа Аr₄ выбрана из ряда, состоящего из фенила, тетразолила, пиридила, оксазолила, нафтила, пиримидинила и тиенила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

,

Более предпочтительными соединениями воплощений I (форма 1) и J (форма 3) являются такие, в которых:

m равно 1;

R₂₁ представляет собой -H или СН₃;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NH₂, -Cl, -F, -Вr, -ОН, -R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -С(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -N(R₉)(R₁₀) и

,

где каждый R₉ и R₁₀ независимо представляют собой –С_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную Аr₃, где циклическая группа Аr₃ является фенилом, и упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

Предпочтительно, если в этих более предпочтительных соединениях циклическая группа Аr₃ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, пиразолила, тиазолила, изоксазолила, бензотриазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, имидазолила, тиадиазолила, бензо[b]тиофенила, бензофуранила и индолила, и упомянутая циклическая группа один или несколько раз необязательно замещена –Q₁.

Предпочтительными соединениями воплощений Н и J (формы 1 и 1) являются такие, в которых:

R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁;

T₁ является О; и

R₁₁ является -С(O)-Аr₄, где циклическая группа Аr₄ выбрана из ряда, состоящего из тетразолила, пиридила, оксазолила, пиримидинила и тиенила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁.

Предпочтительные соединения воплощений Н, I и J имеют формулу (V), в которой R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, R₁₁ является -Аr₄, где циклическая группа Аr₄ представляет собой пиридил, и упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁.

Предпочтительными соединениями воплощения J (форма 1) являются такие, в которых:

R₃ представляет собой -С(O)-Н и

R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, где

R₁₀ является –Аr₃, где циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил, который может быть один или несколько раз замещен следующими заместителями:

-F,

-Сl,

-N(H)-R₅, где R₅ представляет собой -Н или -C(O)-R₁₀, где R₁₀ представляет собой –С_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную Аr₃, где

Аr₃ является фенилом, -N(R₉)(R₁₀), где R₉ и R₁₀ независимо представляет собой –C_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, или

-О-R₅, где R₅ является Н или –С_1-4 прямой или разветвленной алкильной группой.

Более предпочтительно, если Аr₃ является фенилом, один или несколько раз необязательно замещенным по 3 или 5 положению -Сl или по 4 положению -NH-R₅, -N(R₉)(R₁₀) или –ОR₅.

Другими более предпочтительными соединениями воплощения J (форма 1) являются такие, в которых:

R₃ представляет собой -С(O)-Н;

R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃ выбрана из группы, состоящей из индолила, бензимидазолила, тиенила и бензо[b]тиофенила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁.

R₃ представляет собой -С(O)-Н;

R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃ выбрана из хинолила и изохинолила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁.

R₃ представляет собой -С(O)-Н;

R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃является фенилом, замещенным

.

Предпочтительные соединения воплощения (J) включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

Ингибиторы ICE другого воплощения (К) настоящего изобретения имеют формулу:

где:

R₁ представляет собой:

, или

;

С является циклом, выбранным из ряда, состоящего из бензо-, пиридо-, тиено-, пирроло-, фурано-, тиазоло-, изотиазоло-, оксазоло-, изоксазоло-, пиримидо-, имидазоло-циклов, циклопентила и циклогексила; цикл может быть один или несколько раз замещен –Q₁;

R₂ представляет собой:

,

или

;

m равно 1 или 2;

-C(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉,

-C(O)-N(R₁₀)(R₁₀)

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-CH₂-O-R₉,

-C(O)C(O)-R₁₀,

-R₉,

-H,

-C(O)C(O)-OR₁₀ и

-C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀);

X₅ представляет собой СН или N;

Y₂ представляет собой H₃ или О;

R₆ выбран из группы, состоящей из -Н и –СН₃;

R₈ выбран из группы, состоящей из:

-С(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉,

-C(O)-N(H)-R₁₀,

-S(O)₂-R₉,

-S(O)₂-NH-R₁₀,

-C(O)-CH₂-OR₁₀,

-C(O)C(O)-R₁₀,

-C(O)-CH₂-N(R₁₀)(R₁₀),

-C(O)-CH₂C(O)-O-R₉,

-C(O)-CH₂C(O)-R₉,

-Н и

-C(O)-C(O)-OR₁₀;

каждый R₉ независимо выбран из группы, состоящей из –Аr₃ и –C_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы, необязательно замещенной Аr₃, где –C_1-6 алкильная группа является необязательно замещенной;

каждый R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Аr₃, -С_3-6 циклоалкильной группы и –C_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы, необязательно замещенной Аr₃, где –C_1-6 алкильная группа может быть ненасыщенной;

R₁₃ выбран из группы, состоящей из Н, Аr₃ и C_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы, необязательно замещенной Аr₃, -CONH₂, -OR₅, -ОН, -OR₉ или –СО₂Н;

каждый R₅₁ независимо выбран из группы, состоящей из R₉, -C(O)-R₉,-C(O)-N(H)-R₉, или любые R₅₁, взятые вместе, образуют насыщенный 4-8-членный карбоцикл, или гетероциклическое кольцо, содержащее -О-, -S- или -NH-;

каждый Аr₃ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильных групп, содержащих 6, 10, 12 или 14 атомов углерода и от 1 до 3 циклов, и ароматических гетероциклических групп, содержащих от 5 до 15 циклических атомов и от 1 до 3 циклов, упомянутая гетероциклическая группа содержит как минимум одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, -SO-, SO₂, =N- и -NH-, эта гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, упомянутая гетероциклическая группа необязательно включает одно или несколько ароматических колец, и упомянутая циклическая группа один или несколько раз необязательно замещена –Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -NH₂, -CO₂H, -Cl, -F, -Br, -I, -NO₂, -CN, =O, -ОН, -перфтор C_1-3 алкила, R₅, -OR₅, -NHR₅, -OR₉, -N(R₉)(R₁₀), -R₉, -C(O)-R₁₀ и

,

Предпочтительными соединениями данного воплощения являются такие, в которых:

m равно 1;

цикл С выбран из ряда, состоящего из бензо-, пиридо- или тиено-циклов, этот цикл может быть один или несколько раз замещен галогеном, -NH₂, -NH-R₅, -NH-R₉, -OR₁₀ или –R₉, где R₉ является –С_1-4 прямой или разветвленной алкильной группой, a R₁₀ является Н или –С_1-4 прямой или разветвленной алкильной группой;

R₆ представляет собой Н;

R₁₃ представляет собой Н или -С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, -ОН, -OR₉, -CO₂H, где R₉ представляет собой –C_1-4 алкильную группу с разветвленной или прямой цепью, Аr₃ является морфолинилом или фенилом, где фенил необязательно замещен Q₁;

R₂₁ представляет собой -Н или СН₃;

R₅₁ представляет собой –C_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную –Аr₃, где Аr₃ является фенилом, необязательно замещенным –Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NН₂, -Сl, -F, -Вr, -ОН, -R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅, где R₅ представляет

собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -NHR₉ и

,

Предпочтительно, если в данном предпочтительном воплощении R₁ представляет собой (w2), а другие заместители такие, как определены выше.

Соединения данного предпочтительного воплощения включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

; и

Более предпочтительно, если R₈ выбран из группы, состоящей из:

-С(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉,

-C(O)-CH₂-OR₁₀,

-C(O)-CH₂C(O)-R₉.

Наиболее предпочтительно, если R₈ представляет собой -C(O)-CH₂-OR₁₀, а R₁₀ является -Н или –СН₃.

Альтернативно, в данном предпочтительном воплощении R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой СН, а другие заместители такие, как определены выше.

Альтернативно, в данном предпочтительном воплощении R₁ представляет собой (е10), Х₅ представляет собой N, а другие заместители такие, как определены выше.

Предпочтительно, если в любом из вышеперечисленных соединений воплощения (К) R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -C(O)-C(O)-R₁₀, а другие заместители такие, как определены выше.

Более предпочтительно, когда R₁₀ представляет собой Аr₃, а другие заместители такие, как определены выше.

Более предпочтительно, если в этих более предпочтительных соединениях:

R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ и R₁₀ представляет собой Аr₃,

где циклическая группа Аr₃ является фенилом, который может быть один или несколько раз замещен следующими группами:

-R₉, где R₉ представляет собой -С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу,

-F,

-Сl,

-N(H)-R₅, где R₅ представляет собой -Н или -С(O)-R₁₀, где R₁₀ представляет собой –С_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную Аr₃, где Аr₃ является фенилом,

-O-R₅, где R₅ является Н или -С_1-4 прямой или разветвленной алкильной группой.

Предпочтительные соединения данного более предпочтительного воплощения включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

;

;

;

Наиболее предпочтительно, когда Аr₃ является фенилом, один или несколько раз замещенным в 3 или 5 положении -Сl или в 4 положении -N(H)-R₅, -N(R₉)(R₁₀) или -О-R₅.

Предпочтительные соединения данного наиболее предпочтительного воплощения включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

;

;

;

.

Другие предпочтительные соединения данного наиболее предпочтительного воплощения включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

;

;

;

Альтернативно, Аr₃ является фенилом, один или несколько раз замещенным в 3 или 5 положении R₉, где R₉ представляет собой –C_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, и в 4 положении фенил замещен -О-R₅.

Другие предпочтительные соединения этого наиболее предпочтительного воплощения включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

; и

.

Альтернативно, в этом более предпочтительном воплощении R₅ представляет собой -С(O)-R₁₀, где R₁₀ является Аr₃ и циклическая группа Аr₃ выбрана из группы, состоящей из индолила, бензимидазолила, тиенила, хинолила, изохинолила и бензо(b)тиофенила, эта циклическая группа может быть один или несколько раз замещена –Q₁.

Наиболее предпочтительно, когда циклическая группа Аr₃ является изохинолилом.

Предпочтительные соединения этого наиболее предпочтительного воплощения включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

;

.

Альтернативно, в этом более предпочтительном воплощении R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, где R₁₀ представляет собой Аr₃, и циклическая группа. Аr₃ является фенилом, замещенным

.

Предпочтительные соединения этого более предпочтительного воплощения включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

;

Другие соединения воплощения (К) включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

Ингибиторами ICE другого воплощения (L) настоящего изобретения являются соединения формулы:

,

в которой:

;

R₅ выбран из группы, состоящей из:

-CN,

-С(O)-Н,

-C(O)-CH₂-T₁-R₁₁,

-C(O)-CH₂-F,

-C=N-O-R₉ и

-СО-Аr₂;

каждый R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Аr₃, С_3-6 циклоалкильной группы и –C_1-6 прямой или разветвленной алкильной группы, необязательно замещенной Аr₃, где –C_1-6 алкильная группа необязательно ненасыщена;

каждый R₁₁ независимо выбран из группы, состоящей из:

-Аr₄,

-(СН₂)_1-3-Аr₄,

-Н и

-С(O)-Аr₄;

R₁₅ выбран из группы, состоящей из -ОН, -ОАr₃, -N(H)-OH и –OC_1-6, где С_1-6 является прямой или разветвленной алкильной группой, необязательно замещенной –Аr₃, -CONH₂, -OR₅, -ОН, OR₉ или -СO₂Н;

Аr₂ независимо выбран из следующей группы, в которой любой цикл может быть один или несколько раз замещен –Q₁ или фенилом, необязательно замещенным Q₁:

и

,

каждый Аr₃ является циклической группой, независимо выбранной из ряда, состоящего из арильных групп, содержащих 6, 10, 12 или 14 атомов углерода и от 1 до 3 циклов, и ароматических гетероциклических групп, содержащих от 5 до 15 циклических атомов и от 1 до 3 циклов, упомянутая гетероциклическая группа содержит как минимум одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, -SO-, SO₂, =N-, -NH-, -N(R₅) и -N(R₉)-, такая гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, упомянутая гетероциклическая группа необязательно содержит одно или несколько ароматических колец, и упомянутая гетероциклическая группа может быть один или несколько раз необязательно замещена –Q₁;

каждый Аr₄ является циклической группой, независимо выбранной из ряда, состоящего из арильных групп, содержащих 6, 10, 12 или 14 атомов углерода и от 1 до 3 циклов, и ароматических гетероциклических групп, содержащих от 5 до 15 циклических атомов и от 1 до 3 циклов, упомянутая гетероциклическая группа содержит как минимум одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, -SO-, SO₂, =N-, -NH-, -N(R₅) и -N(R₉)-, такая гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, упомянутая гетероциклическая группа необязательно содержит одно или несколько ароматических колец, и упомянутая гетероциклическая группа может быть один или несколько раз необязательно замещена –Q₁;

а другие заместители являются такими, как описаны выше в воплощении (К).

Предпочтительно,

m равно 1;

С представляет собой цикл, выбранный из ряда, состоящего из бензо-, пиридо- и тиено-циклов, этот цикл может быть один или несколько раз замещен галогеном, -NH₂, -NH-R₅, -NH-R₉, -OR₁₀ или -R₉, где R₉ является -С_1-4 прямой или разветвленной алкильной группой, a R₁₀ является Н или –С_1-4 прямой или разветвленной алкильной группой;

T₁ представляет собой О или S,

R₆ представляет собой Н;

R₁₁ выбран из группы, состоящей из -Аr₄, -(СН₂)_1-3-Аr₄ и -С(O)-Аr₄;

Аr₂ представляет собой (hh);

Y представляет собой О;

каждая циклическая группа Аr₃ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, тиазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, тиадиазолила, бензотриазолила, бензо[b]тиофенила, бензофуранила и индолила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей -Q₁;

,

Предпочтительные соединения этого предпочтительного воплощения включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

;

.

Более предпочтительно, когда R₃ представляет собой -С(O)-Аr₂, а другие заместители такие, как описаны выше.

Альтернативно, R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁.

Альтернативно, R₃ представляет собой -С(O)-Н.

Предпочтительно, когда в любом из вышеперечисленных соединений воплощения (L) R₈ выбран из группы, состоящей из:

-С(O)-R₁₀,

-C(O)O-R₉,

-C(O)-CH₂OR₁₀ и

-C(O)-CH₂C(O)-R₉.

Более предпочтительно, когда R₈ представляет собой -C(O)-CH₂-OR₁₀, a R₁₀ представляет собой Н или СН₃.

Альтернативно, ингибиторами ICE воплощения (L) настоящего изобретения являются соединения формулы:

в которой:

m равно 1;

R₁ представляет собой:

;

Y₂ является Н₂ или О;

каждый T₁ независимо выбран из группы, состоящей из –О- или -S-;

R₂₁ является -Н или –СН₃;

Аr₂ представляет собой:

,

где Y является О;

каждая циклическая группа Аr₄ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, тетразолила, пиридинила, оксазолила, нафтила, пиримидинила и тиенила, причем упомянутая циклическая группа может необязательно иметь один или несколько заместителей –Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из –NH₂, -Cl, -F, -Вr, -ОН, -R₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -С(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅ где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -NHR₉ и

,

при условии, что –Аr₃ имеет замещающую группу Q₁, которая содержит одну или несколько добавочных групп –Аr₃, упомянутые добавочные -Аr₃ группы не должны быть замещены другими –Аr₃.

а другие заместители являются такими, как описано выше в воплощении (L);

при условии, если:

m равно 1;

R₁₅ является -ОН;

R₂₁ является -Н и

-С(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил, незамещенный –Q₁, 4-(карбоксиметокси)фенил, 2-фторфенил, 2-пиридил, N-(4-метилпиперазин)метилфенил, или

-Н;

-С(O)-ОR₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой 4-(диметиламинометил)фенил, фенил, 4-(карбоксиметилтио)фенил, 4-(карбоксиэтилтио)фенил, 4-(карбоксиэтил)фенил, 4-(карбоксипропил)фенил, 2-фторфенил, 2-пиридил, N-(4-метилпиперазин)метилфенил, или

-C(O)-R₉, где R₉ представляет собой изобутил или –СН₂-Аr₃, а циклическая группа Аr₃ является фенилом;

и, если, R₁₁ является -Аr₄, а циклическая группа Аr₄ представляет собой 5-(1-фенил-3-трифторметил)пиразолил или 5-(1-(4-хлор-2-пиридинил)-3-трифторметил)пиразолил, то R₅ не может быть:

-C(O)-OR₉, где R₉ является –СН₂-Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил;

-C(O)-R₁₀, где R₁₀ является –Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой 4-(диметиламинометил)фенил, 4-(N-морфолинметил)фенил, 4-(N-метилпиперазин)метилфенил,4-(N-(2-метил)имидазолилметил)фенил, 5-бензимидазолил, 5-бензтриазолил, N-карбоэтокси-5-бензтриазолил, N-карбоэтокси-5-бензимидазолил, или

Y₂ является H₂, R₃ является -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, T₁ является О, а R₁₁ является -С-(O)-Аr₄, где циклическая группа Аr₄ представляет собой 2,5-дихлорфенил, то R₅ не может быть:

-C(O)-OR₉, где R₉ является –СН₂-Аr₃, а циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил.

Предпочтительно, если в любом из вышеперечисленных воплощений (L) R₃ является -С(O)-Н и R₅ является -C(O)-R₁₀ или -C(O)-C(O)-R₁₀, а другие заместители такие, как определены выше.

Более предпочтительно, если R₁₀ является –Аr₃, а другие заместители такие, как определены выше.

R₅ является -C(O)-R₁₀ и R₁₀ является –Аr₃, где циклическая группа Аr₃ представляет собой фенил, который может быть один или несколько раз замещен следующими группами:

R₉, где R₉ представляет собой С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу;

-F,

-Сl,

-N(H)-R₅, где -R₅ представляет собой -Н или -C(O)-R₁₀,

где R₁₀ представляет собой –C_1-6 прямую или разветвленную алкильную группу, необязательно замещенную Аr₃, где Аr₃ является фенилом,

-N(R₉)(R₁₀), где R₉ и R₁₀ независимо представляют собой С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу, или

-O-R₅, где R₅ представляет собой Н или –С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу.

Наиболее предпочтительно, если Аr₃ является фенилом, который может быть один или несколько раз замещен по 3 или 5 положению -Сl или по 4 положению -N(H)-R₅, -N(R₉)(R₁₀) или -O-R₅.

Альтернативно Аr₃ является фенилом, который может быть один или несколько раз замещен по 3 или 5 положению –R₉, где –R₉ представляет собой –С_1-4 прямую или разветвленную алкильную группу; и по 4 положению -О-R₅.

Альтернативно, в этом более предпочтительном воплощении:

R₅ представляет собой -С(O)-R₁₀, где R₁₀ является Аr₃, а циклическая группа Аr₃ выбрана из группы, состоящей из индолила, бензимидазолила, тиенила, хинолила, изохинолила и бензо[b]тиофенила, причем упомянутая циклическая группа может быть один или несколько раз замещена –Q₁.

; и

.

Наиболее предпочтительно, если циклическая группа Аr₃ является изохинолином, и упомянутая циклическая группа может быть один или несколько раз замещена –Q₁.

.

Альтернативно, в этом более предпочтительном воплощении R₅ представляет собой -С(O)-R₁₀, где R₁₀ является Аr₃, а циклическая группа Аr₃представляет собой фенил, замещенный

.

Предпочтительное соединение этого более предпочтительного воплощения включает, не лимитируясь им, следующее соединение:

.

.

Другие соединения воплощения (L) включают, не лимитируясь ими, следующие соединения:

; и

.

Самыми предпочтительными соединениями воплощений (К) и (L) являются такие, в которых циклическая группа Аr₃ представляет собой изохинолин.

Соединения данного изобретения описаны в United States Application Serial Nos. 08/575,641 и 08/598,332, находящейся на рассмотрении одновременно с настоящей заявкой, и описание которой включено здесь в качестве ссылки.

Соединения данного изобретения имеют молекулярную массу, меньшую или равную 700 Дальтонам, более предпочтительно от 400 до 600 Дальтон. Эти предпочтительные соединения могут легко абсорбироваться кровопотоком пациентов при пероральном введении. Такое усвоение при оральном применении делает эти соединения замечательными лекарственными препаратами для режимов лечения и профилактики заболеваний, опосредованных IL-1, апоптозом, IGIF или IFN-γ , посредством перорального введения.

Следует понимать, что соединения настоящего изобретения могут существовать в виде различных равновесных форм, в зависимости от условий, включающих выбранный растворитель, рН, и другие, известные опытным специалистам. Все такие формы данных соединений специально включены в настоящее изобретение. В частности, многие соединения данного изобретения, особенно такие, которые содержат альдегидные или кетоновые группы в R₃ и карбоксильные группы в Т, могут принимать полу-кетальные (или полу-ацетальные) или гидратированные формы. Например, соединения воплощения (А) могут принимать формы, указанные ниже:

EQ1

В зависимости от выбора растворителя и других условий, известных опытным специалистам, соединения настоящего изобретения могут также принимать ацилоксикетальную, ацилоксиацетальную, кетальную или ацетальную формы:

Кроме того, следует понимать, что равновесные формы соединений настоящего изобретения могут включать таутомерные формы. Все такие формы данных соединений специально включены в настоящее изобретение.

Следует понимать, что соединения настоящего изобретения могут быть модифицированы подходящими функциональными группами, для улучшения избирательных биологических свойств. Такие модификации известны специалистам, в их число входят такие модификации, которые увеличивают биологическую проницаемость в данную биологическую систему (напр., в кровь, лимфатическую систему, центральную нервную систему), повышают усвоение при пероральном применении, повышают растворимость для введения посредством инъекции, снижают метаболизм и уменьшают скорость экскреции. Кроме того, эти соединения могут быть приведены к такой про-лекарственной форме, что желаемые соединения образуются в организме пациента в результате действия метаболических или других биохимических процессов на про-лекарство. Такие про-лекарственные формы обычно демонстрируют низкую активность или отсутствие активности в исследованиях in vitro. Некоторые примеры про-лекарственных форм включают кетальные, ацетальные формы, а также оксимы, имины и гидразины соединений, содержащих кетоновые или альдегидные группы, особенно такие, где они встречаются в группе R₃ соединений настоящего изобретения. Другие примеры про-лекарственных форм включают полу-кетальные, полу-ацетальные, ацилоксикетальные, ацилоксиацетальные, кетальные и ацетальные формы, которые описаны в EQ1 и EQ2.

ICE И ТХ РАСЩЕПЛЯЮТ И, ТАКИМ ОБРАЗОМ,

АКТИВИРУЮТ ПРО-IGIF

Ранее протеазу ICE идентифицировали по ее способности вызывать in vivo и in vitro превращение неактивного пpo-IL-β в активный, зрелый IL-1β , молекулу с про-воспалительным действием. В этой работе мы показали, что ICE и его близкий гомолог ТХ (Caspase-4, С.Faucheu et al., EMBO. 14, р.1914 (1995)) могут протеолитически расщеплять неактивный про-IGIF. Эта стадия процессинга необходима для превращения про-IGIF в его активную, зрелую форму, IGIF. Расщепление про-IGIF под действием ICE и, предположительно, под действием ТХ также способствует экспорту IGIF из клеток.

Вначале мы использовали скоротечную совместную экспрессию плазмид, трансфицированных в Cos-клетки, для того, чтобы определить, действительно ли любой известный член семейства ICE/CED-3 протеаз способен вызывать превращение про-IGIF в IGIF в культурах клеток (Пример 23) (фиг. 1А).

На фиг. 1А показано, что ICE расщепляет про-IGIF в Cos-клетках, трансфицированных совместно плазмидами, экспрессирующими про-IGIF в присутствии активного ICE. Cos-клетки трансфицировали плазмидами, экспрессирующими только про-IGIF (линия 2), или в комбинации с плазмидами с указанной экспрессией, кодирующими дикий тип или неактивные мутанты семейства ICE/CED-3 протеаз (линии 3-12). Получали клеточные лизаты и анализировали их на присутствие белка IGIF с помощью иммуноблотинга с анти-IGIF антисывороткой. На линии 1 представлены лизаты клеток с имитацией трансфекции.

Совместная экспрессия про-IGIF и ICE или ТХ приводит к расщеплению про-IGIF с образованием полипептида, подобного по величине природному зрелому IGIF с молекулярной массой 18 кДа. Эта стадия процессинга блокируется точечными мутациями, которые изменяют остатки каталитического цистеина, и таким образом инактивируют ICE и ТХ (Y. Gu et al., EMBO. 14, р.1923 (1995)).

Совместная экспрессия СРР32 (Caspase-3), протеазы, участвующей в программируемой клеточной смерти (Т. Fernandes-Alnemri et al., J.Biol. Chem., 269, р.30761 (1994); D.W. Nicholson et al., Nature. 376, p.37 (1995)), приводит к расщеплению про-IGIF с образованием полипептида меньшей величины, тогда как совместная экспрессия СМН-1 (Caspase-7), близкого гомолога СРР32 (J.A.Lippke et al., J.Biol. Chem., 271, р.1825 (1996)), не приводит к какому-либо заметному расщеплению про-IGIF. Таким образом, оказалось, что ICE и ТХ способны расщеплять про-IGIF с образованием полипептида, подобного по величине природному зрелому IGIF с молекулярной массой 18 кДа.

Затем мы определяли способность этих цистеиновых протеаз расщеплять про-IGIF in vitro, используя очищенный рекомбинантный (Нis)₆-меченный про-IGIF в качестве субстрата (Пример 23).

На фиг. 1В показано, что про-IGIF расщепляется in vitro под действием ICE. Очищенный рекомбинантный (His)₆-меченный про-IGIF (2 мкг) инкубировали с указанной цистеиновой протеазой в присутствии или отсутствие ингибиторов ICE или СРР32, как описано в Примере 23. Продукты расщепления анализировали с помощью SDS-PAGE фореза с окрашиванием Кумасси синим.

ICE расщепляет про-IGIF с молекулярной массой 24 кДа на два полипептида величиной 18 кДа и 6 кДа.

N-концевой аминокислотный сиквенс продуктов расщепления, полученных в результате действия ICE, показал, что полипептид с молекулярной массой 18 кДа содержит такие же N-концевые аминокислотные остатки (Asn-Phe-Gly-Arg-Leu), как и природный IGIF. Этот результат показывает, что ICE расщепляет про-IGIF по аутентичному процессирующему положению (Asp35-Asn36) (H.Okamura et al., Infection and Immunity. 63, p.3966 (1995); H.Okamura et al., Nature, 378, p.88 (1995)). N-концевой аминокислотный сиквенс продуктов расщепления, полученных в результате действия СРР32, показал, что СРР32 расщепляет про-IGIF пo Asp69-Ile70.

Расщепление npo-IGIF под действием ICE является высоко специфичной реакцией с каталитической эффективностью (k_cat/К_м) 1,4× 10⁷ М^-1с^-1 (К_м=0,6±0,1 мкМ; k_cat=8,6±0,3 с^-1) и ингибируется специфическими ингибиторами ICE (Ас-Туr-Val-Ala-Asp-aldehyde) и Сbz-Vаl-Аlа-Аsр-[2,6-дихлорбензоил)окси]метилкетон (N.A. Thomberry et al., Nature. 356, р.768 (1992); R.E. Dolle et al., J. Med. Chem., 37, p.563 (1994)).

На фиг. 1С показано, что расщепление под действием ICE in vitro активирует про-IGIF. К культуре клеток А.Е7 добавляли нерасщепленный про-IGIF, продукты его расщепления под действием ICE или СРР32, или рекомбинантный зрелый IGIF (rIGIF) до конечной концентрации 12 нг/мл или 120 нг/мл (см. Пример 23). Через восемнадцать часов проводили количественное определение содержания IFN-γ в культуральной среде с помощью ELISA-теста. В то время, как нерасщепленный npo-IGIF не обладал IFN-γ -индуцирующей активностью на детектируемом уровне, про-IGIF, расщепленный под действвием ICE, был активным в индуцировании продукции IFN-γ в Тh1-клетках.

Подобно ICE, его гомолог ТХ также расщепляет про-IGIF на полипептиды сходного размера. Однако значение его каталитической эффективности приблизительно на два порядка ниже, чем показанное для ICE.

Согласно наблюдениям, полученным в вышеописанных экспериментах с Cos-клетками, СРР32 расщепляет про-IGIF по другому положению (Аsр69-Ilе70) и получившиеся в результате полипептиды обладают низкой IFN-γ -индуцирующей активностью (фиг. 1С). СМН-1 и гранзим В не способны расщеплять про-IGIF в сколько-нибудь значительной степени.

Вместе эти результаты демонстрируют, что в экспериментах, проведенных как in vitro, так и на Cos-клетках, ICE и ТХ проявляют способность вызывать процессинг неактивного предшественника про-IGIF по аутентичному зрелому участку с образованием биологически активной молекулы IGIF.

ПРОЦЕССИНГ ПРО-IGIF ПОД ДЕЙСТВИЕМ ICE СПОСОБСТВУЕТ ЕГО ЭКСПОРТУ.

IGIF продуцируется in vivo активированными клетками Купфера и макрофагами и экспортируется из клеток при стимуляции эндотоксином (Н.Okamura et al., Infection and Immunity. 63, p.3966 (1995); H.Okamura et al., Nature. 378, p.88 (1995)). Для того чтобы определить, действительно ли внутриклеточное расщепление про-IGIF под действием ICE способствует экспорту зрелого IGIF из клетки, была использована система совместной экспрессии на Cos-клетках (Пример 23). Такой эффект наблюдали для про-IL-1β при расщеплении его под действием ICE с образованием активного IL-1β (N.А.Thomberry et al., Nature. 356, р.768 (1992)).

На фиг. 2А показаны результаты трансфекции в метаболически меченные ³⁵S-метионином Cos-клетки плазмиды, экспрессирующей только про-IGIF (линии 2 и 6), или сочетания такой плазмиды с экспрессирующей плазмидой, кодирующей дикий тип (линии 3 и 7), или неактивный мутант ICE (линии 4 и 8) (см. Пример 24). Клеточные лизаты (слева) и инкубационную среду подвергали иммунопреципитации с антисывороткой против IGIF. Белки, осажденные в результате иммунопреципитации, анализировали методом SDS-PAGE и флюорографией (фиг. 2А).

Полипептид с молекулярной массой 18 кДа, совпадающий по размеру со зрелым IGIF, был обнаружен в инкубационной среде Cos-клеток, соэкспрессирующих про-IGIF и ICE, тогда как Cos-клетки, соэкспрессирующие про-IGIF и неактивный мутант ICE (ICE-C285S) или экспрессирующие один про-IGIF (-), экспортировали только очень низкие уровни про-IGIF и недетектируемые количества зрелого IGIF. Количественная оценка показала, что около 10% зрелого IGIF экспортируется из сотрансфицированных клеток, тогда как более чем 99% про-IGIF удерживается внутри клеток.

Также определяли наличие IFN-γ -индуцирующей активности в клеточных лизатах и инкубационной среде упомянутых выше трансфицированных клеток (см. Пример 24). IFN-γ -индуцирующая активность была обнаружена как в клеточных лизатах, так и в инкубационной среде Cos-клеток, соэкспрессирующих про-IGIF и ICE, но не была обнаружена в клетках, экспрессирующих только про-IGIF, либо только ICE (фиг. 2В).

Эти результаты показывают, что расщепление про-IGIF под действием ICE способствует экспорту зрелого активного IGIF из клеток.

ПРО-IGIF КАК ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ СУБСТРАТ ICE IN VIVO.

Для изучения роли ICE в протеолитической активации и экспорте IGIF в физиологических условиях проводили оценку процессинга про-IGIF и экспорта зрелого IGIF в активированных липополисахаридом (LPS) клетках Купфера, взятых у Propiobacterium acnes - стимулированных мышей дикого типа и ICE-дефицитных (ICE -/-) (Пример 25).

Как показано на Фиг. 3А, клетки Купфера из ICE -/- мышей являются дефектными в отношении экспорта IGIF. Лизаты клеток Купфера дикого типа и ICE -/- мышей содержали сопоставимые количества IGIF, что было показано с помощью ELISA-теста. Однако, IGIF смогли обнаружить только в инкубационной среде клеток дикого типа, но не в среде клеток ICE -/-. Таким образом, мыши с ICE-недостаточностью (ICE -/-) синтезировали про-IGIF, но не могли экспортировать его в виде внеклеточного про- или зрелого IGIF.

Для того чтобы определить способны ли мыши с недостаточностью ICE (ICE -/-) процессировать внутриклеточный про-IGIF при отсутствии экспорта IGIF, клетки Купфера от мышей дикого типа и ICE -/- метаболически метили ³⁵S-метионином и проводили эксперименты с клеточными лизатами и инкубационными средами, используя иммунопреципитацию IGIF, как описано в Примере 25. Эти эксперименты показали, что непроцессированный про-IGIF присутствовал как в клетках Купфера дикого типа, так и в ICE -/-. Однако, зрелый IGIF с молекулярной массой 18 кДа присутствовал только в инкубационной среде клеток Купфера дикого типа, но не ICE -/- (фиг. 3В). Это показывает, что активный ICE необходим клеткам для экспорта процессированного IGIF из клетки.

Кроме того, инкубационная среда клеток Купфера дикого типа, но не клеток Купфера ICE -/-, содержала IFN-γ -индуцирующую активность, не относящуюся к действию IL-12, поскольку она была нечувствительной к нейтрализующим антителам к IL-12. Отсутствие IGIF в инкубационной среде ICE -/- клеток Купфера находится в соответствии с данными, полученными на Cos-клетках, показывающими, что процессинг про-IGIF под действием ICE необходим для экспорта активного IGIF.

На фиг. 3С и 3D показано, что в экспериментах in vivo ICE -/- мыши имеют пониженные сывороточные уровни IGIF и IFN-γ , соответственно. Мышам дикого типа (ICE +/+) и ICE -/- (n=3), праймированным инактивированными нагреванием Р. acnes, вводили LPS (Пример 26), и в сыворотке мышей определяли уровни IGIF (фиг. ЗС) и IFN-γ (фиг. 3D) через три часа после введения LPS с помощью ELISA-теста (Пример 25).

Сыворотка ICE -/- мышей, стимулированных Р. acnes и LPS, содержала пониженные уровни IGIF (фиг. 3С) и недетектируемый уровень IFN-γ -индуцирующей активности в присутствии анти- IL-12 антител. Вероятно, пониженные сывороточные уровни IGIF определяют значительно более низкие уровни IFN-γ в сыворотке ICE -/-мышей (фиг. 3D), поскольку мы не наблюдали значительных различий в продукции IL-12 в ICE -/- мышах в тех же условиях. В соответствии с этой интерпретацией находятся данные, что неприлипающие спленоциты мышей дикого типа и ICE -/- продуцируют сопоставимые количества IFN-γ при стимуляции рекомбинантным активным IGIF in vitro. Таким образом, нарушенная продукция IFN-γ не вызывается каким-либо очевидным дефектом Т-клеток ICE -/- мышей.

Рассматриваемые вместе, эти результаты устанавливают определяющее значение ICE в процессинге предшественника IGIF и в экспорте активного IGIF как in vitro, так и in vivo.

Для более детальной проверки взаимосвязи между уровнями IFN-γ в сыворотке и активностью ICE in vivo определяли временную зависимость после введения LPS мышам дикого типа и мышам с ICЕ-недостаточностью (Пример 26) (фиг. 4).

На фиг. 4 показано увеличение сывороточного уровня IFN-γ у мышей дикого типа, достигающего постоянного значения ≥ 17 нг/мл через 9-18 часов после введения LPS. Как и было предсказано в обсуждаемых выше экспериментах, сывороточные уровни IFN-γ значительно снижены у ICE -/- мышей, достигая 2 нг/мл через то же время, что составляет приблизительно 15% от уровня, наблюдаемого у мышей дикого типа (Фиг. 4).

Мышам дикого типа и ICE -/- вводили 30 мг/кг и 100 мг/кг (только ICE -/-) LPS и наблюдали клинические симптомы сепсиса и температуру тела каждые 4 часа. Результаты, приведенные на фиг. 4, демонстрируют значительное понижение температуры тела (от 36° С до 26° С) у мышей дикого типа в пределах 12 часов от введения LPS. Симптомы клинического сепсиса были очевидны и все животные умерли в течение 24-28 часов.

Напротив, у ICE -/- мышей, которым вводили 30 мг/кг LPS, наблюдали понижение температуры тела только на 3-4° С, минимальные симптомы нарушений и отсутствие гибели животных. У ICE -/- мышей после введения 100 мг/кг LPS наблюдали клинические симптомы, понижение температуры тела и смертность аналогично мышам дикого типа при дозе 30 мг/кг LPS.

ИНГИБИТОР ICE AC-YVAD-CHO В КАЧЕСТВЕ РАВНОЭФФЕКТИВНОГО ИНГИБИТОРА ПРОДУКЦИИ IL-1β И IFN-γ

Поскольку процессинг и секреция биологически активного IGIF опосредованы ICE, сравнивали активность обратимого ингибитора ICE (Ac-YVAD-CHO) по отношению к продукции IL-1β и IFN-γ при анализе мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) (Пример 27).

На (фиг. 5) приведены результаты, показывающие аналогичную способность ингибитора ICE Ac-YVAD-CHO к уменьшению продукции IL-1β и IFN-γ в РВМС человека с IC₅₀, равной 2,5 мкМ для каждого. Сходные результаты получали при исследованиях спленоцитов мышей дикого типа.

Эти данные дополнительно проясняют, что про-IGIF является физиологическим субстратом для ICE и позволяют предположить, что ингибиторы ICE могут использоваться для регуляции физиологических уровней IGIF и IFN-γ .

Итак, обнаружено, что ICE регулирует уровни IGIF и IFN-γ in vivo и in vitro, и ингибиторы ICE могут снижать уровни IGIF и IFN-γ в клетках человека. Эти результаты описаны в заявке United States Application Serial №08/712878, одновременно находящейся на рассмотрении с данной заявкой, причем содержание первой включено в настоящее описание в качестве ссылки.

КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ

Фармацевтические композиции и способы настоящего изобретения могут применяться для регуляции уровней IL-1, IGIF и IFN-γ in vivo. Способы и композиции настоящего изобретения таким образом могут применяться для лечения или замедления развития, снижения тяжести протекания состояний, опосредованных IL-1, IGIF и IFN-γ .

Соединения настоящего изобретения являются эффективными лигандами для ICE. Соответственно, эти соединения способны блокировать и ингибировать процессы, связанные с заболеваниями, опосредованными IL-1, апоптозом, IGIF и ifn-γ , и, таким образом, основную активность этого белка (ICE) при воспалительных, аутоиммунных, костно-деструкционных, пролиферативных, инфекционных и дегенеративных заболеваниях. Например, соединения настоящего изобретения ингибируют превращение предшественника IL-1β в зрелый IL-1β посредством ингибирования ICE. Поскольку ICE является незаменимым для продукции зрелого IL-1, ингибирование этого фермента эффективно блокирует инициацию физиологических эффектов и симптомов, опосредованных IL-1, таких, как воспаление, посредством ингибирования продукции зрелого IL-1. Таким образом, ингибируя активность предшественника IL-1β , соединения настоящего изобретения эффективно функционируют как ингибиторы IL-1.

Аналогично, соединения настоящего изобретения ингибируют превращение предшественника IGIF в зрелый IGIF. Таким образом, ингибируя продукцию IGIF, соединения настоящего изобретения эффективно функционируют как ингибиторы продукции IFN-γ .

Соответственно, одно из воплощений настоящего изобретения предоставляет способ снижения продукции IGIF у субъекта, включающий стадию введения субъекту фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество ингибитора ICE и фармацевтически приемлемый носитель.

Другое воплощение настоящего изобретения предоставляет способ снижения продукции IFN-γ у субъекта, включающий стадию введения субъекту фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество ингибитора ICE и фармацевтически приемлемый носитель.

В другом воплощении способы настоящего изобретения включают стадию введения субъекту фармацевтической композиции, содержащей ингибитор ICE-родственной протеазы, способной к расщеплению про-IGIF с образованием активного IGIF, и фармацевтически приемлемый носитель. Как описано выше, такой ICE-родственной протеазой является ТХ. Таким образом, настоящее изобретение предоставляет способы и фармацевтические композиции для регуляции уровней IGIF и IFN-γ посредством введения ингибитора ТХ.

Могут быть также обнаружены другие ICE-родственные протеазы, способные вызывать процессинг про-IGIF в форму активного IGIF. Таким образом, очевидно, что ингибиторы таких ферментов могут быть идентифицированы специалистами в данной области, и тоже попадают в сферу настоящего изобретения.

Соединения данного изобретения могут применяться традиционным способом для лечения заболеваний, которые опосредуются IL-1, апоптозом, IGIF или IFN-γ . Такие способы лечения, их дозировочные уровни и потребности могут выбираться рядовыми специалистами из имеющихся в распоряжении способов и методик. Например, соединение настоящего изобретения может быть объединено с фармацевтически приемлемым адъювантом для введения пациенту, страдающему заболеванием, опосредованным IL-1, апоптозом, IGIF или IFN-γ , фармацевтически приемлемым способом и в количествах, эффективно уменьшающих тяжесть заболевания.

Альтернативно, соединения настоящего изобретения могут использоваться в композициях и способах для лечения или профилактики субъектов против заболеваний, опосредованных IL-1, апоптозом, IGIF или IFN-γ в течение расширенного промежутка времени. Эти соединения могут использоваться в таких композициях либо по одному, либо вместе с другими соединениями данного изобретения способом, согласующимся с традиционным применением ингибиторов ICE в фармацевтических композициях. Например, соединение настоящего изобретения можно объединять с фармацевтически приемлемым адъювантом, традиционно применяющимся в вакцинах, и вводить в профилактически эффективных количествах для защиты субъектов в течение расширенного промежутка времени против заболеваний, опосредованных IL-1, апоптозом, IGIF или IFN-γ .

Соединения настоящего изобретения можно также вводить совместно с другими ингибиторами ICE для повышения терапевтического или профилактического эффекта против различных заболеваний, опосредованных IL-1, апоптозом, IGIF или IFN-γ .

Кроме того, соединения настоящего изобретения могут быть использованы как в комбинации с обычными антивоспалительными агентами, так и с ингибиторами матриксной металлопротеазы, липоксигеназы и с антагонистами других цитокинов, отличающихся от IL-1β .

Соединения настоящего изобретения можно также вводить в комбинации с иммуномодуляторами (напр., бропиримином, антителами против человеческого альфа-интерферона, IL-2, GM-CSF, метионин энкефалином, интерфероном альфа, диэтилдитиокарбаматом, фактором некроза опухоли, налтрексон и rЕРО), или с

простагландинами, для предотвращения или подавления симптомов заболеваний, опосредованных IL-1, таких, как воспаление.

При введении соединений настоящего изобретения пациенту в сочетании с другими средствами, их можно вводить последовательно или совместно. Альтернативно, фармацевтические или профилактические композиции в соответствии с настоящим изобретением включают комбинацию ингибитора ICE настоящего изобретения и другого терапевтического или профилактического агента.

Фармацевтические композиции настоящего изобретения включают любое соединение данного изобретения и их фармацевтически приемлемые соли с любым фармацевтически приемлемым носителем, адъювантом или наполнителем. Фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и наполнители, которые могут быть использованы в составе фармацевтических композиций данного изобретения, включают, не ограничиваясь ими, ионнообменники, оксид алюминия, стеарат алюминия, лицитин, само-эмульгирующиеся системы доставки лекарств (SIDS), такие, как dα -токоферол, полиэтиленгликоль 1000 сукцинат, или другие аналогичные полимерные матрицы доставки, сывороточные белки, такие, как сывороточный альбумин человека, буферные вещества, такие, как фосфаты, глицин, сорбиновая кислота, сорбат калия, частичные смеси глицеридов насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие, как сульфат протамина, гидрофосфат динатрия, гидрофосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный оксид кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидон, вещества на основе целлюлозы, полиэтиленгликоль, карбоксиметилцеллюлоза натрия, полиакрилаты, воска, блок-полимеры полиэтилена с полиоксипропиленом, полиэтиленгликоль и ланолин. Для улучшения доставки соединений данного изобретения могут быть выгодно использованы циклодекстрины, такие как α -, β - и γ -циклодекстрины или химически модифицированные производные, такие как гидроксиалкилциклодекстрины, включая 2- и 3-гидроксипропил-β -циклодекстрины или другие солюбилизированные производные.

Фармацевтические композиции данного изобретения могут вводиться перорально, парентерально, ингаляционным распылением, местно, ректально, через нос, подъязычно, вагинально или через имплантированный резервуар. Авторы изобретения предпочитают пероральное введение. Фармацевтические композиции данного изобретения могут содержать любые общепринятые нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты или наполнители. В некоторых случаях для увеличения стабильности соединений, используемых для получения лекарственных средств либо формы доставки, рН готовой лекарственной формы доводят до нужного значения с помощью фармацевтически приемлемых кислот, оснований или буферов. Термин "парентеральный", как использован в настоящем описании, включает подкожную, внутрикожную, внутривенную, внутримышечную, внутрисуставную, внутрисиновиальную, внутригрудинную, внутритекальную, внутрь поврежденного органа и внутричерепную инъекцию или инфузионные методы.

Фармацевтические композиции могут быть представлены в виде стерильных готовых форм для инъекций, например, стерильной водной или масляной суспезии для инъекций. Эту суспензию можно приготовить в соответствии с методиками, известными специалистам, с использованием диспергирующих или увлажняющих агентов (как, например, Твин 80) и суспендирующих агентов. Стерильная готовая форма для инъекций может также быть представлена в виде стерильного раствора или суспензии для инъекции в нетоксичном парентерально-приемлемом разбавителе или растворителе, например, как раствор 1,3-бутандиола. Приемлемые носители и растворители, которые могут быть использованы, включают маннит, воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Дополнительно стерильные затвердевшие масла обычно используют в качестве растворителя или суспензионной среды. Для этой цели можно использовать любое пластичное отвержденное масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Для получения форм для инъекций используют жирные кислоты, такие, как олеиновая кислота и их глицеридные производные, также, как природные фармацевтически приемлемые масла, такие, как оливковое масло или касторовое масло, особенно в виде их полиоксиэтилированных форм. Эти масляные растворы или суспензии могут также содержать длинноцепочечные спиртовой разбавитель или дисперсант, такой, как Ph. Helv или аналогичный спирт.

Фармацевтические композиции данного изобретения могут вводиться перорально в виде любой перорально приемлемой дозировочной формы, включающей, не ограничиваясь ими, капсулы, таблетки, водные суспензии и растворы. В случае таблеток для перорального применения обычно используемые носители включают лактозу и кукурузный крахмал. Также обычно добавляют смазывающие агенты, такие, как стеарат магния.

Для перорального введения в капсульнои форме используемые разбавители включают лактозу и высушенный кукурузный крахмал. При пероральном введении водных суспензий активный ингредиент сочетают с эмульгатором и суспендирующим агентом. По необходимости могут добавляться определенные подсластители и/или ароматизаторы и/или красители.

Фармацевтические композиции данного изобретения могут также вводиться в виде суппозиториев для ректального введения. Эти композиции могут быть получены путем смешения соединения данного изобретения с подходящим нераздражающим эксципиентом, который является твердым при комнатной температуре, но жидким при ректальной температуре, и, поэтому будет плавиться в прямой кишке с выделением

активных компонентов. Такие материалы включают, не ограничиваясь ими, масло какао, пчелиный воск и полиэтиленгликоли.

Местное применение фармацевтических композиций данного изобретения является наиболее подходящим для применения, когда требуемое лечение касается областей или органов, легко доступных для местного примененния. Для местного применения на коже в готовую форму с фармацевтической композицией следует включать подходящую мазь, содержащую активные компоненты, суспендированные или растворенные в носителе. Носители для местного введения соединений данного изобретения включают, не ограничиваясь ими, минеральное масло, жидкий парафин, вазелин, пропиленгликоль, полиоксиэтилен-, полиоксипропиленовое соединение, эмульгирующий воск и воду. В другом случае, готовая форма с фармацевтической композицей включает подходящий лосьон или крем, содержащий активное соединение, суспендированное или растворенное в носителе. Подходящие носители включают, не ограничиваясь ими, минеральное масло, моностеарат сорбитана, полисорбат 60, сложные цетиловые эфиры воска, цетарильный спирт, 2-октилдодеканол, бензиловый спирт и воду. Фармацевтические композиции данного изобретения могут также местно применяться в нижней части кишечного тракта как готовые формы в виде ректальных суппозиториев, или в виде подходящих составов для клизм. Трансдермальные пластыри для местного применения также включены в данное изобретение.

Фармацевтические композиции данного изобретения могут вводиться посредством назальных аэрозолей или ингаляций. Такие композиции получают в соответствии с методиками, хорошо известными в области фармацевтических готовых форм, и могут быть приготовлены в виде солевых растворов с использованием бензилового спирта или других подходящих консервантов, промоторов абсорбции для улучшения биодоступности, фторуглеродов и/или других солюбилизирующих или диспергирующих агентов, известных в данной области.

Применяемые дозировочные уровни активного ингредиента находятся примерно в интервале между 0,01 и 100 мг/кг массы тела в день, предпочтительно между примерно 1 50 мг/кг массы тела в день. Указанные уровни применяют для профилактики и лечения заболеваний, опосредованных IL-1, апоптозом, IGIF и IFN-γ , включая воспалительные, аутоиммунные, костно-деструкционные, пролиферативные, инфекционные, дегенеративные, некротические заболевания, остеоартрит, острый панкреатит, хронический панкреатит, астма, респираторный дистресс-синдром у взрослых, гломерулонефрит, ревматоидный артрит, системную красную волчанку, склеродермию, хронический тиреоидид, болезнь Грейва, аутоиммунный гастрит, инсулин-зависимый сахарный диабет (Тип 1), аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунную нейтропению, тромбоцитопению, хронический активный гепатит, миастенический отек, воспалительные заболевания кишечника, болезнь Крона, псориаз, реакции отторжения организма-хозяина против трансплантата, остеопороз, нарушения костной ткани, вызываемые множественной миеломой, хроническую и острую миелогенную лейкемию, метастатическую меланому, саркому Капоши, множественный миеломный сепсис, септический шок, шигеллез, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, церебральную недостаточность, сердечную недостаточность, атрофию мышц спины, рассеянный склероз, энцефалит, связанный со спидом, энцефалит, связанный с ВИЧ, старение, аллопецию и неврологические нарушения вследствие удара. Обычно фармацевтические композиции данного изобретения вводят от 1 до 5 раз в день, или, альтернативно, в процессе непрерывной инфузии. Такое введение может применяться как для хронической, так и для острой терапии. Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с носителем с получением единичной дозировочной формы, варьирует в зависимости от организма, подвергающегося лечению, и, особенно, от способа введения. Типовой препарат содержит примерно 5-95% активного соединения (вес/вес). Предпочтительно такие препараты содержат примерно 20-80% активного соединения,

При необходимости в процессе улучшения состояния пациента может вводиться поддерживающая доза соединения, композиции или комбинации данного изобретения. Последовательно дозировка или частота введения, или и то и другое, могут быть уменьшены, в зависимости от симптомов, до уровня, при котором улучшение состояния сохраняется и происходит облегчение симптомов до нужного уровня; тогда лечение должно прекратиться. Однако, пациенты могут нуждаться в промежуточном лечении на долговременной основе при любом повторном появлении симптомов заболевания.

Опытным профессионалам хорошо известно, что для лечения могут потребоваться более низкие или более высокие дозы, чем упомянутые выше. Специальная дозировка и режим лечения для любого конкретного пациента будут зависеть от множества факторов, включая активность специфического используемого соединения, возраст, вес тела, общее состояние здоровья, пол, диету, время введения, скорость экскреции, комбинацию лекарств, тяжесть и протекание заболевания, предрасположенность пациента к заболеванию и мнение лечащего врача.

Заболевания, опосредованные IL-1, которые могут быть вылечены или предотвращены с помощью соединений данного изобретения, включают, не ограничиваясь ими, воспалительные, аутоиммунные заболевания, костно-деструкционные нарушения, пролиферативные, инфекционные и дегенеративные заболевания. Заболевания, опосредованные апоптозом, которые могут быть вылечены или предотвращены с помощью соединений данного изобретения, включают дегенеративные заболевания.

Воспалительные заболевания, которые могут быть вылечены или предотвращены, включают, не ограничиваясь ими, остеоартрит, острый панкреатит, хронический панкреатит, астма, респираторный дистресс-синдром у взрослых. Предпочтительно, воспалительное заболевание является остеоартритом или острым панкреатитом.

Аутоиммунные заболевания, которые могут быть излечены или предотвращены, включают, не ограничиваясь ими, гломерулонефрит, ревматоидный артрит, системную красную волчанку, склеродермию, хронический тиреоидид, болезнь Грейва, аутоиммунный гастрит, инсулин-зависимый сахарный диабет (Тип 1), аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунную нейтропению, тромбоцитопению, хронический активный гепатит, миастенический отек, рассеянный склероз, воспалительные заболевания кишечника, болезнь Крона, псориаз и заболевания, связанные с реакциями отторжения организмом-хозяином трансплантата. Предпочтительно, аутоиммунные заболевания являются ревматоидным артритом, воспалительными заболеваниями кишечника, болезнью Крона или псориазом.

Костно-деструкционные нарушения, которые могут вылечиваться или предотвращаться, включают, не ограничиваясь ими, остеопороз и нарушения костной ткани, вызываемые множественной миеломой.

Пролиферативные заболевания, которые могут вылечиваться или предотвращаться, включают, не ограничиваясь ими, хроническую и острую миелогенную лейкемию, метастатическую меланому, саркому Капоши, множественную миелому.

Инфекционные заболевания, которые могут вылечиваться или предотвращаться, включают, не ограничиваясь ими, сепсис, септический шок и шигеллез.

Опосредованные IL-1 дегенеративные или некротические заболевания, которые могут вылечиваться или предотвращаться с помощью соединений данного изобретения, включают, не ограничиваясь ими, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, церебральную недостаточность и сердечную недостаточность. Предпочтительно дегенеративные заболевания являются болезнью Альцгеймера.

Опосредованные апоптозом дегенеративные заболевания, которые могут вылечиваться или предотвращаться с помощью соединений данного изобретения, включают, не ограничиваясь ими, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, церебральную недостаточность и сердечную недостаточность, атрофию мышц спины, рассеянный склероз, энцефалит, связанный со спидом, энцефалит, связанный с ВИЧ, старение, аллопецию и неврологические нарушения вследствие удара.

Способы настоящего изобретения могут применяться для лечения или замедления развития, тяжести протекания, или проявлений опосредованных IGIF или IFN-γ воспалительных, аутоиммунных, инфекционных, пролиферативных, костно-деструкционных, некротических и дегенеративных состояний, включая заболевания, нарушения или проявления, в которых состояния характеризуются повышенными уровнями продукции IGIF или IFN-γ .

Примеры таких воспалительных состояний включают, не ограничиваясь ими, остеоартрит, острый панкреатит, хронический панкреатит, астму, ревматоидный артрит, воспалительное заболевание кишечника, болезнь Крона, язвенный колит, церебральную недостаточность, сердечную недостаточность и респираторный дистресс-синдром у взрослых.

Предпочтительно воспалительное состояние является ревматоидным артритом, язвенным колитом, болезнью Крона, гепатитом и респираторным дистресс-синдромом у взрослых.

Примеры таких инфекционных состояний включают, не ограничиваясь ими, инфекционный гепатит, сепсис, септический шок и шигеллез.

Примеры таких аутоиммунных состояний включают, не ограничиваясь ими, гломерулонефрит, системную красную волчанку, склеродермию, хронический тиреоидид, болезнь Грейва, аутоиммунный гастрит, инсулин-зависимый сахарный диабет (Тип 1), юношеский диабет, аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунную нейтропению, тромбоцитопению, миастенический отек, рассеянный склероз, псориаз, плоский лишай, заболевания, связанные с реакциями отторжения организмом-хозяином трансплантата, острый дерматомиозит, экзему, первичный цирроз, гепатит, увеит, болезнь Бехчета, поверхностные заболевания кожи, врожденную недостаточность. красных клеток, непластичную анемию, амиотрофический боковой склероз и нефротический синдром.

Предпочтительно аутоиммунное состояние является гломерулонефритом, инсулин-зависимым сахарным диабетом (Тип 1), юношеским диабетом, псориазом, заболеваниями, связанными с реакциями отторжения организмом-хозяином трансплантата, включая отторжение трансплантата и гепатит.

Примеры таких костно-деструкционных нарушений включают, не ограничивясь ими, остеопороз и связанные с множественной миеломой нарушения костей.

Примеры таких пролиферативных состояний включают, не ограничивясь ими, хроническую и острую миелогенную лейкемию, метастатическую меланому, саркому Капоши, множественную миелому.

Примеры таких нейродегенеративных состояний включают, не ограничивясь ими, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и болезнь Хантингтона.

Несмотря на то, что данное изобретение направлено на использование соединений, раскрытых в данном описании, для предотвращения и лечения заболеваний, опосредованных IL-1, апоптозом, IGIF и IFN-γ , соединения данного изобретения могут также быть использованы в качестве ингибиторов для других цистеиновых протеаз.

Соединения данного изобретения также применимы в качестве коммерческих реагентов, эффективно связывающихся с ICE, или с другими цистеиновыми протеазами. В качестве коммерческих реагентов соединения данного изобретения и их производные могут использоваться для блок-протеолиза целевого пептида в биохимических или клеточных методиках анализа ICE и его гомологов, либо могут быть химически модифицированы для связывания со стабильной смолой в качестве фиксированного субстрата для применения в аффинной хроматографии. Эти и другие применения, которые характерны для коммерческих ингибиторов протеаз, будут очевидны для специалистов в данной области.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ N-АЦИЛАМИНО СОЕДИНЕНИЙ

Ингибиторы ICE данного изобретения могут быть синтезированы с использованием общепринятых методик. Является удобным, что эти соединения обычно синтезируют из легко доступных исходных материалов.

Соединения данного изобретения находятся в ряду наиболее легко синтезируемых известных ингибиторов ICE. Ранее описанные ингибиторы ICE часто содержат 4 или более хиральных центра и многочисленные пептидные связи. Относительная простота, с которой могут быть синтезированы соединения данного изобретения, составляет преимущество для крупномасштабного производства этих соединений.

Например, соединения данного изобретения могут быть получены с использованием способов, описанных в данном описании. Опытный практик может оценить, что эти способы являются не единственными путями, по которым могут быть синтезированы соединения, описанные и заявленные в данной заявке. Дальнейшие способы будут очевидны для рядовых специалистов в данной области. Кроме того, различные синтетические стадии, описанные в данной заявке, могут быть выполнены в альтернативных последовательности или порядке для получения требуемых соединений.

Это изобретение также предоставляет предпочтительный способ получения соединений данного изобретения. Соответственно, в другом воплощении (М) предоставлен способ получения N-ациламино соединений, включающий следующие стадии:

a) смешивание карбоновой кислоты с N-alloc-защищенной аминокомпонентой в присутствии инертного растворителя, трифенилфосфина, нуклеофильного удаляющего агента и тетракис-трифенилфосфин палладия (0) при температуре окружающей среды в инертной атмосфере; и

b) добавление к смеси стадии а) НОВТ и EDC; и необязательно включающий следующую стадию:

c) гидролиз смеси стадии b) в присутствии раствора, содержащего кислоту и Н₂О, причем смесь стадии b) необязательно концентрируется перед гидролизом.

Предпочтительно в качестве инертного растворителя используют СН₂Сl₂, DMF или смесь СН₂Cl₂ и DMF.

В качестве нуклеофильного удаляющего агента предпочтительно используют димедон, морфолин, триметилсилилдиметиламин или диметилбарбитуровую кислоту. Более предпочтительно нуклеофильный удаляющий агент является триметилсилилдиметиламином или диметилбарбитуровой кислотой.

Предпочтительно раствор включает трифторуксусную кислоту с весовой концентрацией примерно 1-90%. Более предпочтительно раствор включает трифторуксусную кислоту с весовой концентрацией примерно 20-50%.

Альтернативно раствор включает соляную кислоту с весовой концентрацией примерно 0,1-30%. Более предпочтительно раствор включает соляную кислоту с весовой концентрацией примерно 5-15%.

Более предпочтительно в вышеупомянутом процессе инертный растворитель является СН₂Сl₂, DMF или смесь CH₂Cl₂ и DMF, а нуклеофильный удаляющий агент представляет собой димедон, морфолин, триметилсилилдиметиламин или диметилбарбитуровую кислоту.

Наиболее предпочтительно в вышеупомянутом процессе инертный растворитель является СН₂Сl₂, DMF или смесь CH₂Cl₂ и DMF, а нуклеофильный удаляющий агент представляет собой триметилсилилдиметиламин или диметилбарбитуровую кислоту.

Предпочтительно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII):

в которой:

R₁ такой, как определен выше в воплощении (А);

R₂ представляет собой:

,

в котором R₅₁ такой, как определен выше в воплощении (В);

или

;

Предпочтительно N-alloc-защищенный амин представляет собой:

,

где R₅₁ такой, как определен выше.

В предпочтительных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (А).

Альтернативно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII), в которой R₁ такой, как определен выше в воплощении (В), и R₂ такой, как определен выше в воплощении (М).

Предпочтительно в этих альтернативных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (В).

Альтернативно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII), в которой R₁ такой, как определен выше в воплощении (С), и R₂ такой, как определен выше в воплощении (М).

Предпочтительно в этих альтернативных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (С).

Альтернативно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII), в которой R₁ такой, как определен выше в воплощении (D), и R₂ такой, как определен выше в воплощении (М).

Предпочтительно в этих альтернативных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (D).

Альтернативно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII), в которой R₁ такой, как определен выше в воплощении (Е), и R₂ такой, как определен выше в воплощении (М).

Предпочтительно в этих альтернативных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (Е).

Альтернативно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII), в которой R₁ такой, как определен выше в воплощении (F), и R₂ такой, как определен выше в воплощении (М).

Предпочтительно в этих альтернативных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (F).

Альтернативно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII), в которой R₁ такой, как определен выше в воплощении (G), и R₁ такой, как определен выше в воплощении (G).

Предпочтительно в этих альтернативных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (G).

Альтернативно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII), в которой R₁ такой, как определен выше в воплощении (Н), и R₁ такой, как определен выше в воплощении (М).

Предпочтительно в этих альтернативных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (Н).

Альтернативно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII), в которой R₁ такой, как определен выше в воплощении (I), и R₂ такой, как определен выше в воплощении (М).

Предпочтительно в этих альтернативных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (I).

Альтернативно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII), в которой R₁ такой, как определен выше в воплощении (J), и R₂ такой, как определен выше в воплощении (М).

Предпочтительно в этих альтернативных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (J).

Альтернативно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII), в которой R₁ такой, как определен выше в воплощении (К), и R₂ такой, как определен выше в воплощении (М).

Предпочтительно в этих альтернативных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (К).

Альтернативно N-ациламино соединение представлено формулой (VIII), в которой R₁ такой, как определен выше в воплощении (L), и R₂ такой, как определен выше в воплощении (М).

Предпочтительно в этих альтернативных способах заместители являются такими, как определены выше в воплощении (L).

Для более глубокого понимания настоящего изобретения представлены следующие примеры. Эти примеры приведены только с иллюстративной целью и никаким образом не должны рассматриваться как ограничивающие область данного изобретения.

ПРИМЕР 1

ИНГИБИРОВАНИЕ ICE

Константы ингибирования (K_i) и значения IС₅₀ получены для соединений данного изобретения с помощью трех способов, описанных ниже:

1. Ферментный анализ с использованием субстрата, поглощающего в УФ-видимой области

Этот анализ проводят, используя в качестве субстрата сукцинил-Tyr-Val-Ala-Asp-n-нитроанилид. Синтез аналогичных субстратов описан L.A.Reiter (Int. J. Peptide Protein Res. 43, 87-96 (1994)). Аналитическая смесь содержит:

65 мкл буфера (10 мМ Трис, 1 мМ DTT, 0,1% CHAPS pH 8,1)

10 мкл ICE (с конечной концентрацией 50 нМ для получения скорости ~ 1 мOD/мин)

5 мкл смеси DMSO/ингибитор

20 мкл 400мкМ раствора субстрата (конечная концентрация 80 мкМ)

100 мкл общий объем реакции

Определение ICE в видимой области проводят в 96-луночном планшете для микротитрования. Буфер, ICE и DMSO (если ингибитор присутствует) добавляют в лунки в порядке перечисления. Компоненты инкубируют при комнатной температуре в течение 15 минут, начиная с такого момента, когда все компоненты присутствуют во всех лунках. Считывающее устройство планшетов для микротитрования устанавливают для инкубации при 37° С. После инкубации в течение 15 минут субстрат добавляют непосредственно в лунки и реакцию регистрируют по высвобождению хромофора (pNA) при 405-603 нм при 37° С в течение 20 мин. Проводят линеаризацию данных и подсчитывают скорость в mOD/мин. DMSO присутствует только в экспериментах с ингибиторами, в других экспериментах используется буфер для доведения объема до 100 мкл.

2. Ферментный анализ с использованием флюоресцентного субстрата.

Этот анализ проводят согласно методике Thomberry et al. (Nature 356: 768-774 (1992)), используя субстрат 17, описанный в этой статье. Этим субстратом является:

ацетил-Туr-Vаl-Аlа-Аsp-амино-4-метилкумарин (АМС). Смешивают следующие компоненты:

65 мкл буфера (10 мМ Трис, 1 мМ DTT, 0,1% CHAPS pH 8,1)

10 мкл ICE (с конечной концентрацией 2-10 нМ)

5 мкл раствора ингибитора в DMSO

20 мкл 150 мкМ раствора субстрата (конечная концентрация 30 мкМ)

100 мкл общий объем реакции

Этот анализ проводят в 96-луночном планшете для микротитрования. В лунки добавляют буфер и ICE. Компоненты инкубируют при 37° С в течение 15 минут в терморегулируемом держателе планшет. После 15 минут инкубации реакцию инициируют добавлением субстрата непосредственно в лунки, и течение реакции регистрируют при 37° С в течение 30 минут по высвобождению флюорофора АМС при длине волны возбуждения 380 нм и длине волны эмиссии 460 нм. Проводят линеаризацию данных для каждой лунки и рассчитывают скорость в единицах флюоресценции в секунду.

Для определения констант ингибирования (К_i) фермента или вида ингибирования (конкурентное или неконкурентное), значения скорости реакции, определенные в ферментных анализах при различных концентрациях ингибиторов, приводят с помощью компьютерной обработки к стандартным уравнениям ферментной кинетики (см. I.H.Segel, Enzyme Kinetics, Wiley-Interscience, 1975).

Определение констант скорости второго порядка для необратимых ингибиторов проводили посредством приведения зависимости значения флюоресценции от времени к прогрессивным уравнениям Моррисона. Morrison, J.F., Mol. Cell. Biophys., 2, pp.347-368 (1985). Thomberry et al. опубликовали описание таких методов для определения констант скорости необратимых ингибиторов ICE. Thomberry, N.A., et al., Biochemistry, 33, pp.3923-3940 (1994). В случае соединений, для которых образование первичного комплекса не может быть зарегистрировано кинетически, константы скорости второго порядка (k_inact) получают непосредственно из наклона линейной части кривых зависимости k_obs от [I]. В случае соединений, для которых образование первичного комплекса с ферментом может быть зарегистрировано, для гиперболических кривых зависимости k_obs от [I] подбирают уравнения, которые описывают кинетику насыщения, из которых получают предварительные значения К_i и k’. Затем константу скорости второго порядка k_inact получают как k’/K_i.

3. Клеточный анализ РВМС

Анализ IL-1β в смешанной популяции мононуклеарных клеток периферической крови человека (РВМС), или популяции, обогащенной прилипающими мононуклеарными клетками.

Процессинг про-IL-1β под действием ICE можно детектировать в культуре клеток, используя различные клеточные источники. РВМС человека, полученные от здоровых доноров, представляют собой смешанную популяцию подтипов лимфоцитов и мононуклеарных клеток, которые продуцируют спектр интерлейкинов и цитокинов в ответ на многие классы физиологических стимуляторов. Прилипающие мононуклеарные клетки из популяции РВМС представляют собой обогащенный источник нормальных моноцитов для определенных исследований продукции цитокинов этими активированными клетками.

Экспериментальная процедура:

Готовят ряд начальных разведений тестируемых соединений в DMSO или этаноле, затем разводят средой RPMI-10% FBS (содержащей 2 мМ L-глютамин, 10 мМ HEPES, 50 ед. и 50 ед. пенициллин/стрептомицин на мл), получая соответственно препараты тестируемого соединения с 4-кратной конечной концентрацией, содержащие 0,4% DMSO или 0,4% этанола. Конечная концентрация DMSO составляет 0,1% во всех разведениях препаратов. Концентрационное титрование, которое проводят в интервале кажущихся значений К_i тестируемых соединений, определенных в тесте ингибирования ICE, обычно используют для первичного скрининга этих соединений.

Обычно тестируют 5-6 разведений соединения, а клеточную компоненту анализа повторяют дважды, с дупликатами по ELISA-тесту на каждый супернатант клеточной культуры.

Выделение РВМС и анализ IL-1:

Клетки светлого слоя кровяного сгустка, выделенные из одной пинты (0,57 л) крови человека (получают 40-45 мл конечного объема плазмы с клетками), разводят средой до 80 мл и в пробирки для разделения LeukoPREP (Becton Dickinson) помещают 10 мл суспензии клеток в каждую. После 15 мин центрифугирования при 1500-1800 g слой плазма/среда удаляют, а слой моноядерных клеток собирают пастеровской пипеткой и переносят в конические центрифужные пробирки объемом 15 мл (Coming). Добавляют среду до объема 15 мл, плавно перемешивают клетки переворачиванием и центрифугируют при 300 g в течение 15 мин. Осадок РВМС ресуспендируют в небольшом объеме среды, считают клетки и доводят их количество до 6× 10⁶ клеток/мл.

Для проведения клеточного анализа в каждую лунку 24-луночного плоскодонного планшета для культур тканей (Coming) добавляют 0,5 мл разведения тестируемого соединения и 0,5 мл раствора LPS (Sigma #L-3012; раствор, полученный в полной среде RPMI с концентрацией 20 нг/мл; конечная концентрация LPS составляет 5 нг/мл). Добавленного объема тестируемого соединения 0,5 мл и LPS обычно достаточно для перемешивания содержимого лунок. В эксперимент включают 3 контрольные смеси, как с одним LPS, контролем раствора-наполнителя, так и/или с дополнительной средой для доведения конечного объема культуры до 2,0 мл. Культуры клеток инкубируют в течение 16-18 часов при 37° С в присутствии 5% СО₂.

По окончании периода инкубации клетки собирают и переносят в конические центрифужные пробирки объемом 15 мл.

После центрифугирования в течение 10 мин при 200 g супернатанты собирают и переносят в пробирки типа Эппендорф объемом 1,5 мл. Можно отметить, что клеточный остаток может быть использован для биохимической оценки пpo-IL-1β и/или содержания зрелого IL-1β в экстрактах цитозоля методом вестерн-блоттинга или ELISA, с использованием специфической антисыворотки к пpo-IL-1β .

Выделение прилипающих мононуклеарных клеток:

РВМС выделяют и готовят, как описано выше. Сначала в лунки добавляют среду (1,0 мл), затем 0,5 мл суспензии РВМС. После одного часа инкубации планшеты плавно встряхивают и неприлипающие клетки удаляют из каждой лунки. Затем лунки аккуратно промывают три раза 1,0 мл среды и окончательно ресуспендируют в 1 мл среды. Обогащение для прилипающих клеток в общем случае составляет 2,5-3, 0× 10⁵клеток/лунку. Добавление тестируемых соединений, LPS, условия инкубации клеток и обработка супернатантов проводятся как описано выше.

ELISA:

Для измерения зрелого IL-1β применяли наборы Quantikine (R & D Systems). Анализы выполняют в соответствии с инструкцией производителя. В положительных контролях как для РВМС, так и для прилипающих мононуклеарных клеток, наблюдали уровни зрелого IL-1β приблизительно 1-3 нг/мл. Для выбора оптимального разведения супернатантов при тестировании анализы методом ELISA выполняли при разведениях супернатантов от LPS-положительных контролей, равных 1/5, 1/10 и 1/20.

Ингибирующая способность соединений может быть представлена значением IC₅₀, являющейся концентрацией ингибитора, при которой детектируют 50% зрелого IL-1β по сравнению с положительными контролями.

Опытному практику ясно, что значения величин, полученные в клеточных анализах, приведенные в данном описании, могут зависеть от множества факторов, таких, как тип клеток, источник клеток, условия роста и т.п.

ПРИМЕР 2

ФАРМАКОКИНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ НА МЫШАХ

Пептидильные ингибиторы ICE быстро выводятся со скоростью выведения выше, чем 100 μ /мин/кг. Соединения с более низкими скоростями выведения имеют улучшенные фармакокинетические свойства относительно пептидильных ингибиторов ICE.

Мы определяли скорости выведения на мышах (μ /мин/кг) для некоторых соединений настоящего изобретения, используя методы, описанные ниже:

Приготовление образцов и дозировка

Соединения растворяют в стерильном растворе TRIS (0,02 М или 0,05 М) с получением концентрации 2,5 мг/мл. При необходимости гарантии полного растворения, образец вначале растворяют в минимальном объеме диметилацетамида (который составляет максимум 5% от общего объема раствора) и затем разбавляют раствором TRIS.

Раствор препарата вводят CD-1 мышам (Charles River Laboratories - 26-31 г) через хвостовую вену в объемной дозе 10 мл/кг, дающей дозу препарата 25 мг/кг.

Мыши были разбиты на группы по 5 штук для каждой временной точки (обычно от 2 минут до 2 часов), затем в соответствующее время животных анестезировали галотаном, и кровь собирали в отдельные гепаринизированные пробирки путем отделения головы. Образцы крови охлаждали до 0° С, затем плазму отделяли и до анализа хранили при -20° С.

Биологический анализ

Концентрацию препаратов в образцах плазмы определяли с помощью ВЭЖХ-анализа с УФ или МС (ESP) детекцией. Применяли хроматографию на обращенной фазе, используя ряд связанных фаз от С1 до С18, элюировали смесями водный буфер/ацетонитрил в изократических условиях.

Количественную оценку проводили методами внешнего стандарта, используя калибровочные кривые, для получения которых использовали плазму с добавлением растворов препаратов с конечной концентрацией от 0,5 до 50 мкг/мл.

Перед анализом образцы плазмы депротеинизировали путем добавления ацетонитрила, метанола, трихлоруксусной или перхлорной кислоты с последующим центрифугированием при 10000g в течение 10 минут. Для анализов использовали объемы образцов от 20 до 50 мкл.

Соединение 214е

Дозирование и приготовление образцов

Препарат растворяли в стерильном 0,02 М Tris, получая раствор концентрации 2,5 мг/мл, который вводили 11 группам из 5 самцов CD-1 мышей через хвостовую вену в дозе 25 мг/кг. В каждой из следующих временных точек: 2, 5, 10, 15, 20, 30, 45, 60, 90 и 120 минут, группу животных анестезировали, и кровь собирали в гепаринизированные пробирки. После отделения плазму хранили до анализа при -20° С.

Анализ

К аликвотам плазмы (150 мкл) добавляли 5% перхлорную кислоту (5 мкл), энергично перемешивали и оставляли на 90 мин до центрифугирования. Получившийся супернатант отделяли и 20 мкл вводи ли для ВЭЖХ-анализа.

Условия проведения ВЭЖХ

Колонка 100× 4,6 мм Kromasil KR 100 5С4

Подвижная фаза 0,1 М Tris рН 7,5 86%

Ацетонитрил 14%

Скорость потока 1 мл/мин

Детекция УФ при 210 нм

Время удерживания 3,4 мин

Результаты анализов показывают понижение значений уровня препарата в плазме от ~70 мкг/мл при 2 минутах до <2 мкг/мл при 90 и 120 минутах.

Соединение 217е

Дозировка и приготовление образцов

Анализ

Аликвоты плазмы (100 мкл) разбавляли ацетонитрилом (100 мкл), энергично перемешивали 20 секунд и центрифугировали 10 минут. Получившийся супернатант отделяли и 20 мкл вводили для ВЭЖХ-анализа.

Результаты анализов показывают понижение значений концентрации в плазме от ~55 мкг/мл при 2 минутах до <0,2 мкг/мл при 60-120 минутах.

ПРИМЕР 3

Пептидильные ингибиторы ICE быстро выводятся со скоростью выведения выше, чем 80 мл/мин/кг. Соединения с более низкими скоростями выведения имеют улучшенные фармакокинетические свойства относительно пептидильных ингибиторов ICE.

Мы определяли скорости выведения на мышах (мл/мин/кг) для некоторых соединений настоящего изобретения, используя методы, описанные ниже:

Анализ выведения на крысах in vivo

За день до фармакокинетических исследований проводят каннюляцию шейного и каротидного сосудов крыс под анестезией. М.J.Free, R.A.Jaffee; “Cannulation techniques for the collection blood and other bodily fluids”; in: Animal Models; p.480-495; N.J.Alexander, Ed.; Academic Press; (1978). Препарат (10 мг/мл) вводили через шейную вену в среде, обычно состоящей из пропиленгликоля/физраствора, содержащих 100 мМ бикарбонат натрия в соотношении 1:1. Препарат вводили животным в дозах 10-20 мг/кг и образцы крови собирали через 0, 2, 5, 7, 10, 15, 20, 30, 60 и 90 минут через постоянно находящийся в сонной артерии катетер. Кровь центрифугировали для получения плазмы, которую хранили до анализа при -20° С. Фармакокинетический анализ данных проводят методом нелинейной регрессии, используя стандартное програмное обеспечение, такое, как Rstrip (MicroMath Softwear, UT) и/или Pcnonlin (SCI Softwear, NC), для получения значений выведения.

Аналитика:

Крысиную плазму экстрагировали равным объемом ацетонитрила (содержащим 0,1% TFA). Образцы центрифугировали приблизительно при 1000× g и супернатанты анализировали с помощью градиентной ВЭЖХ. Типичная аналитическая процедура описана ниже.

200 мкл плазмы осаждали 200 мкл 0,1% раствора трифторуксусной кислоты (TFA) в ацетонитриле и 10 мкл 50% водного раствора хлорида цинка, энергично перемешивали, затем центрифугировали при ~1000× g, супернатанты собирали и анализировали с помощью градиентной ВЭЖХ.

Стандартная кривая получена с использованием концентраций 20, 10, 5, 2 и 1 мкг/мл.

ПРИМЕР 4

АНАЛИЗ ЦЕЛОЙ КРОВИ НА ПРОДУКЦИЮ IL-1β

Мы получили значения IC₅₀ для ряда соединений настоящего изобретения, используя способы, описанные ниже:

Цель:

Анализ целой крови является простым методом определения продукции IL-1β (или других цитокинов) и активности потенциальных ингибиторов. Комплектность этой аналитической системы с ее полным комплектом лимфоидных и воспалительных типов клеток, спектром плазменных белков и красных кровяных клеток, является идеальной системой, воспроизводящей in vitro физиологические условия человека in vivo.

Материалы:

Непирогенные шприцы (~30 см³)

Непирогенные стерильные вакуумные пробирки, содержащие лиофилизованный

Na₂EDTA (4,5 мг/10 мл пробирку)

Образец целой человеческой крови (~30-50 cc)

1,5 мл пробирки Эппендорфа

Маточные растворы тестируемого соединения (~25 мМ в DMSO или другом растворителе)

Раствор хлорида натрия (0,9%), не содержащий эндотоксина и сток-раствор липополисахарида в HBSS (Sigma; Cat. # L-3012) с концентрацией 1 мг/мл.

ELISA-набор для определения IL-1β (R & D Systems; Cat # DLB50)

ELISA-набор для определения TNFα (R & D Systems; Cat # DTA50)

Водная баня или инкубатор

Экспериментальная процедура анализа целой крови:

Устанавливают инкубатор или водяную баню при 30° С. Аликвоту крови 0,25 мл вносят в 1,5 мл пробирки Эппендорфа. Замечание: обязательно переворачивать пробирки с образцом целой человеческой крови после каждых двух аликвот. Различия в повторах могут происходить в результате того, что седиментирующие клетки неравномерно суспендированы. Использование пипетки с позитивным замещением также будет минимизировать различия между параллельными аликвотами.

Растворы препарата готовят в стерильном непирогенном физрастворе путем серийных разведений. Серии разведений, устанавливающие кажущуюся К_i для тестируемого соединения, которую определяют в анализе ингибирования ICE, обычно используют для первичного скрининга соединений. В случае очень гидрофобных соединений, готовят их разведения в свежей плазме, полученной от того же донора крови, или в PBS, содержащих 5% DMSO для увеличения растворимости.

Добавляют 25 мкл разведения тестируемого соединения, или контрольной среды, и мягко премешивают образец. Затем добавляют 5,0 мкл раствора LPS (из сток-раствора с концентрацией 250 нг/мл получают свежий с конечной концентрацией LPS 5,0 нг/мл), и снова перемешивают. Пробирки инкубируют при 30° С на водяной бане в течение 16-18 часов, время от времени перемешивая. Альтернативно пробирки могут быть помещены в перемешиватель, установленный на 4 цикла в минуту, на такой же инкубационный период. В этом анализе необходимо использовать двойные или тройные повторы со следующими контролями: негативный контроль - без LPS; позитивный контроль - без тестируемого ингибитора, контрольная среда - с самой высокой концентрацией DMSO или растворителя, использующегося в эксперименте. Во все контрольные пробирки добавляют дополнительно физраствор для нормализации объемов тестируемых образцов как контрольных, так и экспериментальных с целой кровью.

После периода инкубации образцы целой крови центрифугируют 10 минут при ~2000 об/мин в микроцентрифуге, плазму переносят в новые микроцентрифужные пробирки и центрифугируют при 1000xg для осаждения оставшихся тромбоцитов, если это необходимо. Образцы плазмы можно хранить при -70° С до анализа на уровни цитокинов методом ELISA-теста.

ELISA:

Мы использовали R & D Systems (614 McKinley Place N.E.Minneapolis, MN 55413) Quantikine наборы для количественного определения IL-1β и TNFα . Анализы проводили в соответствии с инструкциями производителя. В позитивных контролях наблюдаемые уровни IL-1β составляли ~1-5 нг/мл среди индивидуалов. Разведение плазмы 1:200 во всех образцах в наших экспериментах было достаточным для попадания результатов ELISA-тестов в линейный интервал стандартных кривых ELISA. Если наблюдаются различия в анализе целой крови, может возникнуть необходимость оптимизации стандартных разведений. Nerad, J.L. et al., J.Leukocyte Biol., 52, pp.687-692 (1992).

ПРИМЕР 5

ИНГИБИРОВАНИЕ ГОМОЛОГОВ ICE

1. Выделение гомологов ICE

Экспрессия ТХ в клетках насекомых с использованием экспрессионной системы бакуловируса. Мы субклонировали кДНК ТХ (Faucheu et al., supra 1995) в модифицированный pVL1393 трансифицирующий вектор, полученную плазмиду (pVL1393/TX) со-трансфицировали в клетки насекомых с вирусной ДНК и идентифицировали рекомбинантный бакуловирус. После образования рекомбинантного вирусного маточного раствора с высоким титром, в среде определяли активность ТХ, используя видимый анализ ICE. Обычно инфекция Spodoptera frugiperda (Sf9) клеток насекомых в MOI из 5 с рекомбинантным вирусным стоком приводит к максимальной экспрессии 4,7 мкг/мл через 48 часов. В этом анализе ICE использовали в качестве стандарта.

Были также экспрессированы Т7 меченные по амино концу версии ICE или ТХ. Вначале для того, чтобы способствовать идентификации и выделению рекомбинантных белков, разные системы исследовали на различные уровни экспрессии и относительные уровни апоптозов, вызванных различными гомологами. Апоптоз в инфицированных Sf9 клетках (определяемый эксклюзивным методом с использованием трипанового синего) был выше в линиях, экспрессирующих ICE или ТХ, по сравнению с клетками, инфицированными только вирусной ДНК.

Экспрессия и выделение N-концевого (His)₆-меченого СРР32 в Е.coli.

кДНК, кодирующая полипептид СРР32 (Fernandes-Alnemri et al., supra 1994), начиная с Ser (29), была PCR амплифицирована с праймеров, которые были встроены в сайты фрейма XhoI как с 5’, так и с 3’ концов кДНК, и полученный фрагмент XhoI встраивали в экспрессионный вектор рЕТ-15b с вырезанным фрагментом XhoI для того, чтобы создать во фрейме слияние с (Нis)₆-меткой на N-конце рекомбинантного белка. Полученный рекомбинантный белок начинается с аминокислотной последовательности

где LVPRGS является местом, по которому происходит расщепление под действием тромбина, затем СРР32, начинающимся с Ser (29). Е.coli BL21(DE3), несущие плазмиды, выращивали до лог-фазы при 30° С и затем индуцировали 0,8 мМ IPTG. Клетки собирали через два часа после добавления IPTG. Получали лизаты и растворимые белки выделяли методом хроматографии на Ni-агарозе. Весь экспрессированный СРР32 белок был в активной форме. N-концевой сиквенс показал, что процессинг осуществляется по аутентичному положению между Asp (175) и Ser (176). Получили приблизительно 50 мкг белка СРР32 из 200 мл культуры. В результате титрования активного центра определили, что все белки были полностью активны. Препараты протеазы были также очень активны in vitro в отношении к расщепления PARP, а также синтетического субстрата DEVD-AMC (Nicholson et al, supra 1995).

2. Ингибирование гомологов ICE

Избирательность ряда обратимых ингибиторов гомологов ICE описана в Таблице 1. Анализ фермента ICE проводили в соответствии с методикой Wilson et al. (supra 1994) с использованием субстрата YVAD-AMC (Thornberry et al., supra 1992). Анализ активности ТХ проводили, используя субстрат ICE, в условиях, идентичных условиям, применяющимся при анализе ICE. Анализ СРР32 проводили, используя субстрат DEVD-АМС (Nicholson et al., supra 1995). В общем, существует низкая избирательность между ICE и ТХ для широкого ряда строительных блоков. Ни один из синтетических соединений, тестируемых для ICE, не являлся эффективным ингибитором СРР32. При анализе обратимых соединений в самой высокой концентрации (1 мкМ) ингибирования не обнаруживали.

Таблица 1
Соединение	К_i ICE (нМ)	К_i ТХ (нМ)	К_i СРР32 (нМ)
214е	7,5	7,0±1,1	>1000
135а	90	55±9	>1000
125b	60	57±13	>1000
137	40	40±7	>1000

Константы скорости второго порядка для инактивации ICE и его гомологов с селективными необратимыми ингибиторами представлены ниже (Таблица 2). Изучаемые необратимые соединения представляют собой широкий спектр ингибиторов ICE и его гомологов. Некоторая селективность, однако, наблюдается у необратимых соединений при сравнении ингибирования ICE и СРР32 (см. табл.2).

ПРИМЕР 6

ИНГИБИРОВАНИЕ АПОПТОЗА

Fas-индуцированный апоптоз в U937 клетках. Оценивали способность соединений блокировать анти-Fаs-индуцированный апоптоз. В предварительном эксперименте, используя RTPCR, определяли мРНК, кодирующие ICE, TX, ICH-1, CPP32 и СМН-1 в нестимулированных клетках U937. Эту клеточную линию применяли для изучения апоптоза. Клетки U937 вносили для засева культуры при концентрации 1× 10⁵ клеток/мл и выращивали до концентрации ~5× 10⁶ клеток/мл. Для экспериментов с апоптозом клетки в концентрации 2× 10⁶ помещали в 24-луночные планшеты для культур тканей в 1 мл RPMI-1640 10% FPS и стимулировали антителами к анти-Fаs-антигену в концентрации 100 нг/мл (Medical and Biological Laboratories, LTD). После 24-часовой инкубации при 37° С процентное содержание апоптозных клеток определяли FACS-анализом, используя ApoTag реагенты.

Все соединения тестировали первоначально при 20 мкМ, а для определения значений IС₅₀ проводили титрования с активными соединениями. Ингибирование апоптоза (>75% при 20 мкМ) наблюдали для 108a, 136 и 138. Значение IC₅₀, равное 0,8 мкМ, было определено для 217е по сравнению с отсутствием ингибирования анти-Fas-индуцированного апоптоза для 214е при 20 мкМ.

ПРИМЕР 7

БЫСТРЫЙ АНАЛИЗ IN VIVO ЭФФЕКТИВНОСТИ АНТИ-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ

Продукция IL-1β , индуцированная LPS

Эффективность 214е и 217е оценивали на CD1 мышах (n=6 на условие), стимулированных LPS (20 мг/кг IP (интраперитонеально)). Тестируемое соединение приготовляли в смеси: оливковое масло:DMSO:этанол (90:5:5) и вводили методом IP инъекции через один час после LPS. Сывороточные уровни IL-1β определяли с помощью ELISA. Результаты, представленные на фиг.6, демонстрируют, что 214е дозо-зависимо ингибирует секрецию IL-1β с ED₅₀ приблизительно равным 15 мг/кг. Подобные результаты получены во втором эксперименте. Значительное ингибирование секреции IL-1β наблюдали также у мышей, которым вводили 217е (фиг. 7). Однако, ясная зависимость доза-ответ не была выявлена.

Соединения 214е и 217е (50 мг/кг) вводили также через оральный зонд для избежания абсорбции. Результаты, представленные на фиг. 8, демонстрируют, что 214е, но не 217е, при пероральном введении ингибирует секрецию IL-1β , что позволяет предположить, что ингибиторы ICE обладают эффективностью, как антивоспалительные агенты, при пероральном применении.

Эффективность аналогов 214е также оценивали на мышах, стимулированных LPS, после IP (фиг. 9) и РО (перорального) (фиг. 10) введения.

Таблица 3 - % ингибирования продукции IL-1β аналогами 214е в мышах, стимулированных LPS, после IP и РО введения (50 мг/кг).

Таблица 3
Соединение	РО % ингибирования	IP % ингибирования
214е	75	78
265	27	30
416	52	39
434	80	74
438	13	40
442	10	0
2002	-	78

Следующие результаты показаны в табл.4.

Таблица 4 Cравнение эффективности пролекарства 214е в LPS-стимулированных мышах: временная зависимость ингибирования продукции IL-1β Время введения соединения (относительно времени стимуляции LPS), РО, 50 мг/кг
Соединение	-2 часа	-1 час	0 часов	+1 час
214е				55%
	39*	-*	80*	75*
	43*	44*	48*	11*
	-*	-*	-*	47*
304а	30	33	68	37
2100е	49	54	94	66
2100а	8	71	67	58
213е	0	48	41	89
302	0	27	21	26
2100с	0	0	85	40
2100d	42	35	52	26
2100b	0	0	47	26
2001	~63	~62	~57	~54
	64*	62*	58*	55*
* Значения, полученные в последующих анализах

ПРИМЕР 8

ОПРЕДЕЛЕНИЕ В КРОВИ УРОВНЕЙ ПРОЛЕКАРСТВА 214Е

Мышам вводили РО дозу соединений 302 и 304а (50 мг/кг), приготовленых в 0,5% карбоксиметилцеллюлозе. Образцы крови собирали через 1 и 7 часов после введения дозы. Сыворотку отделяли преципитацией с равным объемом ацетонитрила, содержащего 2% муравьиной кислоты, с последующим центрифугированием. Супернатант анализировали методом жидкостной хроматографии-масспектрометрии (ESI-MS) с уровнем детекции от 0,03 до 3 мкг/мл. Соединения 302 и 304а демонстрируют детектируемые уровни в крови при пероральном введении, само соединение 214е при пероральном введении не демонстрирует уровня в крови выше 0,10 мкг/мл. Соединения 302 и 304а являются пролекарствами 214е и метаболизируются в 214е in viva (см. фиг. 11).

ПРИМЕР 9

Приведенные ниже данные (см. Таблицы 5 и 6) были получены для соединений настоящего изобретения с использованием методов, описанных в Примерах 1-8. Структуры соединений Примера 9 демонстрируются в Примерах 10-17.

Таблица 6
Соедине-ние	Флюоресцентный анализ k_inact М^-1с^-1	Клетки РВМС avg. IC₅₀ (нМ)	Целая кровь человека IC₅₀ (НМ)	Выведение Мыши, в/в мл/мин/кг	Выведение Крысы, в/в мл/мин/кг
108а	1× 10⁵	17500
136	5,4× 10⁵	870	2800	93

Соедине-ние	Флюоресцентный анализ k_inact M^-1c^-1	Клетки РВМС avg. IC₅₀ (нМ)	Целая кровь человека IC₅₀ (нМ)	Выведение Мыши, в/в мл/мин/кг	Выведение Крысы, в/в мл/мин/кг
138	1,2× 10⁵	900	2900	116
217d	4,7× 10⁵	340	4000
280	4× 10⁵	650	>1000		187
283	1× 10⁵	<200	450		104
284	3,5× 10⁵	470	550	77	100
285	4,3× 10⁵	810	1000	130	50
* Значения получены при повторном анализе.

ПРИМЕР 10

Соединение 139 синтезировали способом, подобным способу, использованному для синтеза 47а.

Соединения 136 и 138 синтезировали способом, подобным способу, использованному для синтеза 57b.

Соединения 135а, 135b и 137 синтезировали способом, подобным способу, использованному для синтеза соединения 69а.

Соединения 813е, 814с, 814е, 817с, 817d, 817e, 820b, 823b, 823е, 826е, 827е, 830е, 832е, 835е, 838е, 846, 857, 865. 902, 904a, 907a, 907b,1004-1013, 1015-1045,1046-1068,1070-1091 и 1093-1099 синтезировали способом, подобным способу, использованному для синтеза соединения 264 и соответствующих соединений в Примерах 10 и 11.

Соединения 47а, 47b, 108а, 108b, 125b, 213е, 214с, 217с, 217d, 217е, 220b, 223b, 223е, 226е, 227е, 230е, 232е, 235е, 238е, 246, 257, 264, 265, 280-287, 302, 304а, 307а и 307b синтезировали, как описано ниже.

H. N-(N-ацетил-тирозинил-валинил-пипеколил)-3-амино-4-оксобутановая кислота.

Стадия А. N-(N-трет-бутоксикарбонилпипеколил)-4-амино-5-бензилокси-2-оксотетрагидрофуран.

Реакцию между N-трет-бутоксикарбонилпипеколиновой кислотой (460 мг, 2,0 ммоля) и N-аллилоксикарбонил-4-амино-5-бензилокси-2-оксотетрагидрофураном (530 мг, 1,82 ммоля) проводят по способу, аналогичному описанному Chapman (Bioorg. & Med. Chem. Lett. 2, pp. 613-618, (1992)), получая 654 мг указанного в заголовке соединения.

¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃ (в виде ротамеров)) δ 7,35 (m, 5Н), 6,88 (br. s, 1H), 4,9-4.45(m, 4H), 3,95+ (br. m, 2H), 3,06 (m, 1H), 2,9 (m, 1H), 2,7 (br. m, 1H), 2,45 (m, 1H), 2,2 (m, 1H), 1,7-l,5(m, 3Н), 1,45 (два s, 9H).

Стадия В. N-пипеколил-4-амино-5-бензилокси-2-оксотетрагидрофуран. N-(N-трет-бутоксикарбонилпипеколил)-4-амино-5-бензилокси-2-оксо-тетрагидрофуран (654 мг) растворяют в 15 мл 25% раствора трифторуксусной кислоты в дихлорометане и перемешивют при комнатной температуре. Смесь концентрируют, получая резиноподобный остаток. Остаток растворяют в дихлорметане и промывают 10% раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют с получением 422 мг соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества бежевого цвета.

¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 7,38 (m, 5H), 7,15 (d, 1H), 5,55 (d, 1H), 4,95-4,8 (m, 1H), 4,78 (m, 1H), 4,65 (d, 1H), 4,45 (m, 1H), 3,2 (m, 0,5H), 3,05 (m, 0,5H), 2,95 (m, 0,5H), 2,85 (m, 0,5H), 2,65 (m, 1H), 2,55-2,38(m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,8 (m, 1H), 1,6 (m, 2H), 1,38 (m, 2H).

Стадия С. N-(N-Ацетил-тирозинил-валинил-пипеколил)-4-амино-5-бензилокси-2 -оксо-тетрагидрофуран.

N-Ацетил-тирозинил-валин (464 мг, 1,44 ммоля) и N-пипеколил-4-амино-5-бензилокси-2-оксотетрагидрофуран (412 мг, 1,3 ммоля) растворяют каждый в 5 мл диметилформамида и дихлорометана, и охлаждают до 0° С. К охлажденному раствору добавляют 1-гидроксибензотриазол (НОВТ; 210 мг, 1,56 ммоля), затем 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид (EDC; 326 мг, 1,7 ммоля). После перемешивания в течение 18 часов смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой, 10% гидросульфатом натрия, 10% бикарбонатом натрия и водой. Органический слой концентрируют с получением неочищенного продукта, который очищают методом флэш-хроматографии (SiO₂), элюируя 94:6:1 (дихлорометан:изопропанол:пиридин), и получают 370 мг указанного в заголовке соединения.

¹Н ЯМР (500 МГц, СD₃ОD (существующий как в виде диастереомеров, так и в виде ротамеров)) δ 7,35 (m, 5H), 7,05 (m, 2H), 6,68 (m, 2H), 5,65 & 5,25 (m, 1H), 4,9-3,95 (m, 8Н), 3,4-2,6 (m, 4H), 2,5-2,1 (m, 1H), 1,98 (s, 1H), 1,9 (s, 1H), 1,85 (s, 1H), 1,8-1,6 (m, 2H), 1,55-1,3 (m, 4H), 0,95-0,85 (m, 6H).

Стадия D. N-(N-Ацетил-тирозинил-валинил-пипеколил)-3-амино-4-оксобутановая кислота.

К раствору 100 мг N-(N-ацетил-тирозинил-валинил-пипеколил)-4-амино-5-бензилокси-2-оксотетрагидрофурана в 10 мл метанола добавляют 60 мг Pd(OH)₂ на угле и смесь помещают в атмосферу водорода, создающуюся с помощью баллона. Смесь фильтруют через цилит и концентрируют, получая твердое вещество белого цвета. Это твердое вещество растворяют в 2 мл метанола и перетирают с диэтиловым эфиром, получая 26 мг указанного в заголовке соединения.

¹Н ЯМР (500 МГц, CD₃OD (существующий как в виде диастереомеров, так и в виде ротамеров)) δ 7,1 (m, 2H), 6,7 (m, 2H), 5,2 (br. m, 1H), 4,8-3,6 (m, 6H), 3,2-2,5 (m, 4H), 2,5-2,1 (m, 1H), 1,95 (три s, 3Н), 1,9-1,3 (m, 6H), 1,1-0,7 (m, 6H).

К. N-[N-Ацетил-тирозинил-валинил-(4-бензилокси)пролинил]-3-амино-4-оксобутановая кислота.

Стадия А. N-(N-Аллилоксикарбонил-4-бензилоксипролинил)-3-амино-4-оксобутановой кислоты трет-бутиловый эфир семикарбазон.

Указанное в заголовке соединение получают в результате взаимодействия N-аллилоксикарбонил-4-бензилоксипролина с третбутиловым эфиром семикарбазоном 3-амино-4-оксобутановой кислоты (T.L. Graybill et. al., Abstracts of papers, 206th National

Meeting of the American Chemical Society, Abstract MEDI-235. Chicago, IL. (1993)) при таких же условиях конденсации пептида, как описано выше (соединение

; стадия С).

¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 9,05 (br. s, 1H), 15 7,85 (br. m, 1H), 7,4-7,2 (m, 5H), 7,15 (br. s, 1H), 6,55 (br. s, 1H), 5,9 (m, 1H), 5,1-4,9 (br. m, 2H), 4,65-4,4 (m, 4H), 4,2 (br. m, 1H), 3,75-3,5 (m, 2H), 2,75-2,55 (m, 2H), 2,5 (br. m, 1H), 2,25 (br. m, 1H), 1,4 (s, 9H).

Стадия В. N-(N-Ацетил-тирозинил-валинил-(4-бензилоксипролинил))-3-амино-4-оксобутановой кислоты трет-бутиловый эфир семикарбазон.

Указанное в заголовке соединение получают в результате взаимодействия N-ацетил-тирозинил-валина и N-(N-аллилоксикарбонил-4-бензилоксипролинил)-3-амино-4-оксобутановой кислоты трет-бутилового эфира семикарбазона в реакционных условиях, описанных для соединения

, стадия А.

¹Н ЯМР (500 МГц, СD₃ОD) δ 7,35-7,2 (m, 6H), 7,0 (d, 2H), 6,65(d, 2H), 4,85 (m, 1H), 4,6-4,45 (m, 4H), 4,3 (br. m, 1H), 4,15 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 2,75-2,6 (m, 3H), 2,35 (m, 1H), 2,1 (m, 1H), 1,9 (s, 3H), 1,4 (s, 9H), 0,95 (d, 3H), 0,90 (s, 3H).

Стадия С. N-(N-Ацетил-тирозинил-валинил-(4-бензилоксипролинил))-3-амино-4-оксобутановая кислота.

N-(N-ацетил-тирозинил-валинил-(4-бензилоксипролинил))-3-амино-4-оксобутановой кислоты трет-бутиловый эфир семикарбазон (270 мг) растворяют в 10 мл 25% раствора трифторуксусной кислоты в дихлорметане и перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов. Смесь концентрируют, получая твердый остаток. Остаток растворяют в 10 мл смеси метанол: уксусная кислота: 37% формальдегид (3:1:1) и перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрируют, полученный остаток очищают методом флэш-хроматографии (SiO₂), элюируя смесью дихлорметан/метанол/муравьиная кислота (100:5:0.5), и получают 37 мг указанного в заголовке соединения.

¹H ЯМР (500 МГц, CD₃OD (существующий в виде смеси диастереомеров полуацеталей 1:1)) δ 7,4-7,25 (m, 5H), 7,0 (d, 2H), 6,65 (d, 2H), 4,65-4,05 (m, 7H), 3,75-3,4 (m, 2H), 3,05-2,3 (m, 5H), 2,2-1,95 (m, 2H), 1,90 (s, 3Н), 1,0 (d, 3H), 0,95 (d, 3Н).

(а) X=O

(в) X=H₂

(44а). К раствору (1S, 9S) т-бутил-9-амино-6,10-диоксо-октагидро-6Н-пиридазино-[1,2-а] [1,2]диазепин-1-карбоксилата (690 мг; 2,32 ммоля; GB 2128984) в диоксане (16 мл) и воде (4 мл) при 0°С добавляют твердый бикарбонат натрия (292 мг;

3,48 ммоля), затем по каплям добавляют 3-фенилпропионил хлорид (470 мг, 2,78 ммоля). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов, затем добавляют еще бикарбонат натрия (200 мг; 2,38 ммоля) и 3-фенилпропионил хлорид (100 мг; 0,6 ммоля). Смесь перемешивают еще 2 часа при комнатной температуре, разбавляют этилацетатом (50 мл), промывают насыщенным бикарбонатом натрия (2× 25 мл), высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Остаток очищают методом флэш-хроматографии (0-50% этилацетат/хлороформ), и, наконец, кристаллизуют в результате перетирания с эфиром, получая 860 мг (86%) твердого вещества белого цвета: т. пл. 137-138° С; [α ]

\binom{23}{D}

-95,1° (с 0,549, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3327, 1736, 1677, 1664, 1536, 1422, 1156;

¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,24 (5Н, m), 6,50 (1H, d, J=7.5), 5.24 (1Н, m), 4,90 (1H, m), 4,60 (1H, m), 3,44 (1H, m), 2,93 (2H, m), 2,84 (1H, m), 2,64 (1H, m), 2,54 (2H, m), 2,26 (2H, m), 1,70 (4H, m), 1,70 (9H, s). MC (FAB, m/z): 430 (M⁺+1), 374, 242, 105, 91.

(44b) получают из (IS, 9S) т-бутил-9-амино-октагидро-10-оксо-6Н-пиридазино [1,2-а] [1,2] диазепин-1-карбоксилата (Аttwood et al., J. Chem. Soc. Perkin 1. pp. 1011-19 (1986)) так же, как и 44а, получая 810 мг (81%) бесцветного масла: [α ]

\binom{23}{D}

-33,5° (с 0,545, СН₂Сl₂); IR (пленка) 3334, 2935, 1737, 1728, 1659, 1642;

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,24 (5Н, m), 6,75 (1H, d, J=6,7), 5,27 (1H, m), 4,92 (1H, m), 3,39 (1H, m), 3,03 (4H, m), 2,55 (3Н, m), 2,33 (1H, m), 2,17 (1H, m), 1,80 (5Н, m), 1,47 (9H, s), 1,39 (1H, m). MC (FAB, m/z): 416 (M⁺ + 1), 360, 211, 143, 97.

(45а). К раствору (IS, 9S) т-бутил-6,10-диоксо-октагидро-9-(3-фенилпропиониламино)-6Н-пиридазино-[1,2-а] [1,2]диазепин-1-карбоксилата (44а) (800 мг; 1,863 ммоля) в сухом дихлорметане (5 мл) при 0° С добавляют трифторуксусную кислоту (5 мл). Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов и затем концентрируют. К остатку добавляют сухой эфир (10 мл) и затем удаляют под вакуумом. Этот процесс повторяют три раза для получения кристаллического твердого вещества. Твердое вещество перетирают с эфиром, получая 590 мг (85%) твердого кристаллического вещества белого цвета: т. пл. 196-197,5° С; [α ]

\binom{23}{D}

-129,5 (с 0,2, СН₃ОН); IR (КВr) 3237, 1729, 1688,1660, 1633, 1574, 1432, 1285, 1205;

¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 8,28 (1Н, d, J=7,4), 7,22 (5Н, m), 5,32 (1Н, dd, J=5,9, 2,9), 4,75 (1Н, m), 4,51 (1Н, m), 3,50 (1Н, m), 3,01 (1Н, m), 2,91 10 (2Н, m), 2,55 (2Н, m), 2,29 (3Н, m),1,95(2H,m),1,71(2H,m).

Аналитически рассчитано для С₁₉Н₂₃N₃О₅: С, 61,12; Н, 6,21; N, 11,25. Обнаружено: С, 60,80; Н, 6,28; N, 10,97. МС (FAB, m/z) 374 (M⁺ + 1), 242, 105, 91.

(45b) получают из (IS, 9S) т-бутил-октагидро-10-оксо-9-(3-фенилпропиониламино)-6Н-пиридазино[1,2-а][1,2]диазепин-1-карбоксилата (44b) с помощью способа, описанного для соединения 45а, получая 657 мг (96%) 45b в виде кристаллического твердого вещества: т. пл. 198-202° С; [α ]

\binom{23}{D}

-86,2° (с 0,5, СН₃ОН); IR (КВr) 3294, 2939,1729, 20 1645, 1620,1574,1453,1214;

¹H ЯМР (СD₃OD) δ 7,92 (1Н, d, J=7,9), 7,20 (5Н, m), 5,29 (1H, m), 4,90 (1Н, m), 3,47 (1Н, m), 3,08 (2Н, m), 2,90 (2Н, m), 2,55 (3Н, m), 2,36 (1Н, m), 1,81 (5Н, m), 1,43 (2Н, m). MC(FAB, m/z) 360 (M⁺ +1), 211, 143, 91.

(46а). К раствору (1S, 9S) 6,10-диоксо-октагидро-9-(3-фенил-пропиониламино)-6Н-пиридазино[1,2-а] [1,2] диазепин-1-карбоксильной кислоты (45а) (662 мг; 1,773 ммоля) в сухом дихлорметане (9 мл) и сухом диметилформамиде (3 мл) при комнатной температуре добавляют хлорид бис(трифенилфосфин)палладия (30 мг) и (3S, 2R,S)-3-аллилоксикарбониламино-2-бензилокси-5-оксотетрагидрофуран (Chapman, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2, pp. 613-18 (1992)) (568 мг; 1,95 ммоля), затем по каплям добавляют гидрид три-н-бутилата олова (1,19 г; 4,09 ммоля). К смеси добавляют 1-гидрокси-бензотриазол (479 мг; 3,546 ммоля) и смесь охлаждают до 0° С перед добавлением гидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (408 мг; 2,128 ммоля). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3,25 часов и разбавляют этилацетатом (50 мл), дважды промывают разбавленной соляной кислотой (20 мл), дважды насыщенным раствором бикарбоната натрия (20 мл), один раз насыщенным солевым раствором, затем высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Получившееся масло очищают методом флэш-хроматографии (0-100% этилацетат/хлороформ), получая 810 мг (81%) 46а в виде смеси аномеров: т. пл. 92-94° С; IR (КВr) 3311, 1791, 1659, 1651, 1536; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,49, 6,56 (1Н, 2d, J=6,7, 7,8), 7,29 (10Н, m), 6,37, 6,18 (1Н, 2d, J=7,7,7,6), 5,56, 5,34 (1Н, d, s, J=5,2), 5,08-4,47 (6Н), 3,18-2,80 (5Н), 2,62-2,28 (5Н), 2,04-1,53 (5Н). MC (FAB, m/z), 563 (M⁺+1),328,149,91.

(46b) получают из 45b с помощью способа, описанного для соединения 46а, получая 790 мг (96%) стеклоподобного вещества: т.пл. 58-60° С; IR (КВr) 3316, 2940,1793,1678, 1641, 1523, 1453, 1120; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,28 (10Н, m), 6,52, 6,42 (1Н, 2d, J=7,2, 7,1), 5,53, 5,44 (1Н, d, s, J=5,2), 5,35 (1H, m), 4,6-4,9, 4,34 (4Н, m), 3,1-2,8 (6Н, m), 2,6-2,1 (7Н), 1,95-1,05 (5Н). MC (FAB, m/z), 549 (M⁺ + 1), 400, 310, 279, 91.

(47а). Смесь [3S, 2R,S, (1S,9S)] N-(2-бензилокси-5-оксотетрагидрофуран-3-ил)-6,10-диоксо-октагидро-9-(3 -фенилпропиониламино)-6Н-пиридазино[1,2-а] [1,2] диазепин-1 -карбоксамид (46а) (205 мг; 0,364 ммоля), 10% палладия на угле (200 мг) и метанола (20 мл) перемешивают под током водорода при атмосферном давлении в течение 5 часов. Смесь фильтруют и концентрируют, получая 154 мг (90%) стеклоподобного вещества: т. пл.116-118° С; [α ]

\binom{23}{D}

-140° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3323(br), 1783, 1731, 1658,1539, 1455, 1425; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,21 (5Н. m), 5,17 (1Н, m), 4,73 (1Н, m), 4,50 (2Н, m), 4,23 (1Н, m), 3,38 (1H, m), 3,06 (1H, m), 2,91 (2H, m), 2,73-2,18 (6Н, m) и 2,01-1,59 (5Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₃H₂₇N₄O₇ + Н₂О: С, 56,32; Н, 6,16; N, 11,42. Обнаружено: С, 56,29; Н, 6,11;N,11,25. MC(FAB, m/z) 473 (M⁺+1), 176, 149, 105,91.

(47b) получают из 46b no способу, описанному для 47а. Остаток очищают методом флэш-хроматографии (0-10% метанол/хлороформ), получая 65 мг (52%) стеклоподобного вещества; т.пл. 87-90° С; [α ]

\binom{23}{D}

-167,0° (с 0,1, метанол); IR (КВr) 3329,2936, 1786, 1727, 1637; ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 7,23 (5Н, m), 5,29 (1H, m), 4,83 (1H, m), 4,59 (1H, d, J=3,6), 4,29 (1H, m), 3,3-3,0 (3H, m), 2,91 (2H, m), 2,70-2,34 (5Н, m), 2,19 (2H, m), 1,75 (4Н, m), 1,36 (2H, m). Аналитически рассчитано для C₂₃H₃₀N₄O₆ + 0,5Н₂O: С, 59,09; Н, 6,68; N, 11,98. Обнаружено: С, 58,97; Н 6,68; N, 11,73. MC (FAB, m/z) 459 (M⁺ + 1), 310, 149, 105, 91.

(56а). К раствору уксусной кислоты (55а) (WO 93 21213) в ТГФ (2 мл), перемешиваемому при комнатной температуре, добавляют 1-гидроксибензотриазол (60 мг, 0,448 ммоля) и гидрохлорид диметиламинопропил-3-этилкарбодиимида (47 мг, 0,246 ммоля). Через 5 мин добавляют воду (2 капли) и продолжают перемешивание еще 20 минут. Хлорид бис(трифенилфосфин)палладия II (6 мг) добавляют после раствора т-бутил 3-(аллилоксикарбониламино)-4-оксо-5-(2,6-дихлорбензоил-окси)пентаноата (WO 93 16710) (103 мг, 0,224 ммоля) в ТГФ (1 мл). Гидрид трибутил олова (0,09 мл, 0,336 ммоля) добавляют по каплям в течение 1 часа при комнатной температуре. Смесь перемешивают еще 3 часа и выливают в этилацетат, промывают 1М HCI, водным НаНСО₃, насыщенным солевым раствором, высушивают над MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Остаток перетирают с пентаном и супернатант отбрасывают. Оставшееся твердое вещество очищают методом флэш-хроматографии (50% этилацетат/гексан), получая указанное в заголовке соединение 92 мг (63%) в виде бесцветного масла: [α ]

\binom{23}{D}

-29,6° (с 1,1, CH₂Cl₂);

IR (пленка) 3377, 3365, 3332, 3312, 1733,1691,1650,1599,1515, 1366, 1261,1153,1068, 747; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,09 (1Н, d, J=6,8), 7,84 (1Н, s), 7,58 (1Н, d, J=8,3), 7,33 (8Н, m), 7,02 (1Н, dd, J=6,9, 1,7), 6,33 (1Н, t, J=7,2), 5,20 (2Н, s), 5,12 (2Н, m), 4,89 (1H, dt), 4,65 (2Н, m), 2,80 (2Н, m), 1,38 (9Н, s).

(56b), получают по способу, описанному для (56а), который позволяет получать указанное в заголовке соединение (66%) в виде бесцветного масла: IR (пленка) 3364, 3313,1738, 1688,1648,1600,1566, 1514, 1433, 1369,1254, 1152; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,40 (1Н, d, J 7,6), 8,30 (1Н, s), 7,28 (13Н, m), 6,20 (1Н, d, J=7,6), 5,12 (2Н, q), 4,86 (1Н, m), 4,65 (2Н, q), 4,06 (2Н, s), 3,07-2,61 (6Н, m), 1,39 (9Н, s).

(57а; Q). Раствор эфира 56а (210 мг, 0,356 ммоля) в дихлорометане (0,5 мл) охлаждали до 0° С и обрабатывали трифторуксусной кислотой (0,5 мл), перемешивали и нагревали до 20° С не менее 30 минут. Раствор упаривают досуха при пониженном давлении, опять растворяют в дихлорметане и концентрируют (× 3). Остаток перетирают с этилацетатом и разбавляют эфиром, получая указанное в заголовке соединение 162 мг (85%) в виде бесцветного твердого вещества: т. пл 165-8° С (разложение); [α ]

\binom{23}{D}

-38,8° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3332, 3275, 1723, 1658, 1649,1597, 1581, 1562,1526,1432,1385, 1258,1218,1206;

¹Н ЯМР (d₆-DMSO) δ 8,96 (1Н, d, J=7,3), 8,34 (1Н, s), 7,85 (1Н, dd, J=7,3), 7,58 (3Н, m), 7,35 (5Н, m), 6,29 (1Н, t, J=7,3), 5,26 (2Н, m), 5,15 (2Н, s), 4,69 (ЗН, m), 2,75 (2Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₇H₂₃N₃O₉Cl₂: С, 53.66; Н, 3.84; N, 6.95. Обнаружено: С, 53.36; Н, 3.90; N, 6,81. М.С. (+ FAB); 604 (M⁺+ 1), 285, 241, 195, 173, 149, 91.

(57b;

), получают по способу, описанному для 57а, который позволяет получать указанное в заголовке соединение (78%) в виде бесцветных кристаллов: т. пл. 116-120° С (разложение); [α ]

\binom{23}{D}

-41,1° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3299, 1739, 1715, 1689, 1666, 1645, 1598, 1563, 1518, 1432, 1209, 1151; ¹Н ЯМР (d₆-DMSO) δ 9,24 (1Н, s), 8,88 (1Н, d, J=7,6), 8,18 (1Н, d, J=7,7), 7,60 (3Н, m), 7,26 (10Н, m), 6,06 (1Н, d, J=7,7), 5,23 (2Н, ABq), 4,69 (3Н, m), 3,93 (2Н, s), 2,78 (6Н, m). Аналитически рассчитано для C₃₅H₃₁N₃O₈Cl₂. H₂O: С, 59.16; Н, 4.68; N, 5.91. Обнаружено: С, 59.38; Н, 4.53; N, 5.84. М.С. (+ FAB); 694 (Cl=35, 37), (M⁺+ 1); 692 (С1=35, 35), (М⁺+ 1).

(65а). Смесь 2-нитро-6-метоксифенола (2,62 г, 15,5 ммоля) (ЕР 333176) и 10% палладия на угле (130 мг) в этаноле (50,0 мл) перемешивают в атмосфере Н₂ в течение 75 мин. Смесь фильтруют через Celite®, затем немедленно обрабатывают п-толуолсульфоновой кислотой (32,0 мг) и триэтилортоформатом (6,45 мл, 38,8 ммоля), затем нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в атмосфере N₂. Через 20 ч добавляют п-толуолсульфоновую кислоту (30,0 мг) и триэтилортоформат (6,45 мл, 38,8 ммоля). После суммарных 44 ч нагревания реакционной смеси дают охладиться и упаривают под вакуумом. Полученный остаток очищают методом флэш-хроматографии (25:75 этилацетат/гексан), и получают 1,97 г (85%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества желтого цвета: т. пл 28-31° С; IR (пленка) 1629, 1497, 1434, 1285,1097;

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,09 (1Н, s), 7,40 (1Н, d, J=8,0), 7,28 (1Н, t, J=8,0), 6,89 (1Н, d, J=8,0), 4,02 (3Н, s); ¹³С ЯМР (CDCl₃) δ 152,84, 145,82, 142,50, 139,99, 125,75, 113,42, 108,80, 56,97. Аналитически рассчитано для C₈H₇NO₂. 0,1Н₂О: С, 63.65; Н, 4.81; N, 9.29. Обнаружено: С, 63.43, Н, 4.88, N, 9.05. М.С. (+ FAB); 150 (М⁺ + 1).

(65b). К суспензии 4-гидроксибензоксазола (2,00 г, 14,8 ммоля) (Musser et al., J. Med. Chem., 30, pp. 62-67 (1987)) в ацетоне (80,0 мл) добавляют прокаленный К₂СО₃ (2,25 г, 16,3 ммоля), затем йодистый метан (1,38 мл, 22,2 ммоля). Реакционную смесь нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в атмосфере N₂ в течение 4,5 ч, затем фильтруют и упаривают под вакуумом, получая неочищенный продукт. Полученный остаток очищают методом флэш-хроматографии (25:75 этилацетат/гексан), и получают 2,0 г (91%) указанного в заголовке соединения в виде кристаллического твердого вещества белого цвета: т. пл 72-74° С; IR (КВr) 3089, 1619, 1610, 1503, 1496, 1322, 1275,1090, 1071, 780, 741; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 8,02 (1Н, s), 7,32 (1Н, t, J=8,0), 7,18

(1H, d, J=8,0), 6,81 (1H, d, J=8,0), 4,04 (3H, s). Аналитически рассчитано для C₈H₇NO₂: С, 64.42; Н, 4.73; N, 9.39. Обнаружено: С, 64.40; Н, 4.84; N, 9.31; m/z (EI) 149 (M⁺ + 1, 100%).

(66а). К перемешиваемому раствору 65а (548,6 мг, 3,68 ммоля) в безводном ТГФ (18,5 мл) при -78° С в атмосфере N₂ добавляют по каплям 1,56 М раствор н-бутилата лития в гексане (2,47 мл, 3,86 ммоля), получая раствор желтого цвета. После перемешивания при -78° С в течение 20 мин, добавляют сухой MgBr₂OEt₂ (1,045 г, 4,05 ммоля) в виде твердого вещества. Получившуюся смесь нагревают до -45° С и перемешивают в течение 15 мин. Получившуюся смесь затем снова охлаждают до -78° С и по каплям добавляют раствор (S)-Alloc-Asp(t-Bu)H (946,4 мг, 3,68 ммоля) в ТГФ (18,5 мл). Реакционную смесь перемешивают при -78° С в течение 30 мин, нагревают до 0° С и перемешивают 1 ч. Получившуюся гомогенную реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают 16 ч. Реакцию гасят 5% раствором бикарбоната натрия (3,5 мл), затем удаляют ТГФ под вакуумом. Получившийся водный остаток экстрагируют метиленхлоридом (× 6). Объединенные экстракты промывают насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают (MgSO₄), фильтруют и упаривают под вакуумом, получая 1,8 г неочищенного продукта. После флэш-хроматографии (40:60 этилацетат/гексан) получают 1,21 г (81%) указанного в заголовке соединения в виде масла, представляющего собой смесь диастереомеров при С-4: IR (CH₂CI₂) 3425, 2983, 1725, 1504, 1290, 1157,1101; ¹Н ЯМР(СDСl₃) δ 7,35-7,19 (2Н, m), 6,89-6,81 (1H, m), 6,00-5,57 (2Н, m), 5,32-5,05 (3H, m), 4,68-4.35 (3H, m), 4,01 (3H, s), 2,86-2,59 (2Н, m), 1,45 (9Н, s). 1,41 (9Н, s); ¹³С ЯМР (СDСl₃) δ 171,18, 171,09, 165,80, 165,30, 156,71, 156,60, 145,65, 142,76, 142,71, 140,82, 140,72, 133,23, 125,81, 125,72, 118,41, 118,21, 113,07, 112,87,108,95, 82,16, 70,28, 69,98, 66,52, 66,39, 57,03, 52,57, 52,29, 37,83, 36,86, 28,65. Аналитически рассчитано для C₂₀H₂₆N₂O₇· 0,6Н₂O: С, 57.57; Н, 6.57; N, 6.72. Обнаружено: С, 57.49, Н, 6.34, N, 6.60. М.С. (+FAB); 407 (M⁺+1); 351,307, 154.

(66b) получают по способу, описанному для 66а, который позволяет получать 1,29 г (26%, 68% от регенерированного исходного вещества) указанного в заголовке соединения в виде масла, представляющего собой смесь диастереомеров при С-4: IR (СН₂Сl₂) 3400, 1725, 1625, 1505, 1369, 1354, 1281, 1263, 1226, 1158, 1092, 1048; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,34-7,24 (1Н, m), 7,16 (1Н, d, J=8,2), 6,79 (1Н, d, J=7,9), 6,00-5,50 (2Н, m), 5,30-5,05 (ЗН, m), 4,70-4,35 (4Н, m), 4,02 (3Н, s), 2,90-2,45 (2Н, m), 1,45-1,41 (9Н, 2 x s). Аналитически рассчитано для С₂₀Н₂₆N₂O₇· 0,4Н₂O: С, 58.07; Н, 6.53; N, 6.77. Обнаружено: С, 58.09; Н, 6.41; N, 6.63. М.С. (+ FAB); 407 (М⁺ + 1,88%); 351 (100).

(67а). К перемешиваемому раствору 66а (481,9 мг, 1,19 ммоля) и Ас-Туr(^tВu)-Vаl-Аlа-ОН (586,3 мг, 1,30 ммоля) в метиленхлориде (3,5 мл) и DMF (3,5 мл) добавляют хлорид бис(трифенилфосфин) палладия (II) (18,0 мг), и по каплям добавляют гидрид трибутил олова (0,80 мл, 2,96 ммоля). Добавляют гидроксибензотриазол (320,4 мг, 2,37 ммоля) и смесь охлаждают до 0° С. Добавляют гидрохлорид 1-этил-3-[3-(диметиламино)пропил]карбодиимида (278,2 мг, 1,42 ммоля), смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16.5h. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом и промывают дважды 1М кислым сульфатом натрия, дважды насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический слой высушивают (MgSO₄), фильтруют и упаривают под вакуумом, получая 2,0 г неочищенного продукта. После флэш-хроматографии (95:5 метиленхлорид/метанол) получают 844,0 мг (94%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета: т. пл 205° С; IR (KBr) 3399, 3304, 2977, 1729, 1643, 1506, 1367, 1290, 1161;

¹Н ЯМР (d₆-DMSO) δ 8,24-7,78 (4Н, m), 7,43-7,32 (2Н, m), 7,23 (2Н, d, J=8.5), 7,16-7,07 (1Н, m), 6,93 (2Н, d, J=8,5), 6,52, 6,40 (1Н, 2 x d, J=5,5, J=5,0), 5,03, 4,78-4,49, 4,45-4,16 (5Н, brt, 2xm), 4,05, 4,04 (3Н, 2 × s), 3,08-2,35 (14Н, m), 2,11-1,89 (1Н, m), 1,83 (3Н, s), 1,49-1,32, 1,15, 1,0-0,81 (27Н, s, 2xm, J=7,0); ¹³С ЯМР (d₆-DMSO) δ 175,55, 175,18, 173,88, 173,75, 173,05, 169,23, 157,28, 148,55, 146,16, 143,21, 136,63, 133,55, 128,87, 127,17, 115,78, 111,92, 84,02, 81,50, 71,40, 61,15, 60,05, 57,79, 53,39, 51,62, 43,76, 40,52, 34,58, 32,52, 31,60, 26,35, 23,11, 22,71, 21,76. Аналитически рассчитано для С₃₉Н₅₅N₅O₁₀· 0.5Н₂O: С, 61.40; Н, 7.40; N, 9.18. Обнаружено: С, 61.43; Н, 7.31; N, 9.07. М.С. (+ FAB); 754 (M⁺ + 1); 698, 338,267.

(67b) получают в соответствии со способом, описанным для 67а, который позволяет получать 1,05 г (94%) указанного в заголовке соединения в виде мелкого порошка белого цвета: т. пл 210-213° С (разл); IR (KBr) 3284, 2977, 1736, 1691, 1632, 1536, 1505, 1452, 1392, 1367, 1258, 1236, 1161, 1091; ¹Н ЯМР (d₆-DMSO) δ 8,20-7,75 (4Н, m), 7,40-7,10 (4Н, m), 7,00-6,80 (3Н, m), 6,45, 6,34 (1Н, 2 × d, J=5,3, J=5,0), 5,00-4,10 (5Н, m), 4,00, 3,99 (3Н, 2 × s), 3,00-2,25 (4Н, m), 1,95 (1Н, m), 1,78 (3Н, s), 1,39-0,80 (27Н, m). Аналитически рассчитано для С₃₉Н₅₅N₅О₁₀· 0,5Н₂O: С, 61.40; Н, 7.40; N, 9.18. Обнаружено: С, 61.58; Н, 7.38; N, 8.91. М.С. (+ FAB); 754 (M⁺ + 1, 30%); 72 (100).

(68а). Реагент Десс-Мартина (1,082 г, 2,55 ммоля) (Ireland et al., J. Org. Chem., 58, p. 2899 (1993); Dess et al., J. Org. Chem., 48, pp. 4155-4156 (1983)) добавляют к суспензии спирта 67а (641,0 мг, 0,85 ммоля) в метиленхлориде (46,0 мл) при перемешивании. Полученную смесь перемешивают в течение 1 ч, после чего распределяют между смесью: насыщенный раствор тиосульфата натрия: насыщенный раствор бикарбоната натрия (1:1, 86,0 мл) и этилацетатом (86,0 мл). Полученную органическую фазу промывают опять смесью: насыщенный раствор тиосульфата натрия: насыщенный раствор бикарбоната

натрия (1:1), насыщенным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором хлорида натрия. Органическую фазу высушивают (MgSO₄), фильтруют и упаривают под вакуумом, получая 660,0 мг неочищенного продукта. После флэш-хроматографии (94:6 метиленхлорид/метанол) получают 636,0 мг (100%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета: т. пл 209° С; [α ]

\binom{23}{D}

-21,8° (с 0,16, метанол); IR (КВr) 3395, 3294, 2977, 1722, 1641, 1535, 1505, 1161;¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 8,43-8,16 (1Н, m), 7,97-7,62 (2Н, m), 7,49-7,14 (3Н, m), 7,08-6,95 (3Н, m), 6,89-6,73 (2Н, m), 5,81-5,68 (1Н, m), 5,16-4,86 (2Н, m), 4,53 (1Н, brt), 4,03 (3Н, s), 3,16-2,84 (4Н, m), 2,11-1,84 (4Н, m), 1,46-1,14 (21H, m), 0,92-0,78 (6Н, m); ¹³C ЯМР (CDCl₃) δ ,186,28, 173,39, 171,90, 171,19,171,03, 169,89, 156,43, 154,75, 146,32, 142,88, 140,98, 132,31, 130,54, 126,98, 124,73, 114,95, 111,42, 82,44, 78,71, 58,92, 57,20, 54,91, 53,47, 48,77, 39,43, 38,15, 32,79, 29,44,28,60, 23,55, 20,27, 19,70, 19,34. М.С. (+ FAB); 752 (M⁺ + 1); 696, 336, 265.

(68b) получают в соответствии со способом, описанным для кетона 68а, который позволяет получать 420 мг (55%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета: т. пл 211-213° С (разл); [α ]

\binom{23}{D}

-23,9° (с 0,82, метанол); IR (КВr) 3277, 3075, 1723, 1690, 1632, 1530, 1506, 1392, 1366, 1269, 1234, 1160, 1094; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 8,15 (1Н, brs), 7,7 (2Н, brs), 7,46 (1Н, t, J=8,3), 7,24 (2Н, d, J=8,3), 7,10 (1Н, brs), 7,03 (2Н, d, J=8,3), 6,83 (3Н, m), 5,74 (1Н, q, J=6,9), 5,00 (2Н, m), 4,51 (1Н, t, J=7,0), 4,07 (3Н, s), 3,20-2,95 (4Н, m), 2,00 (4Н, m), 1,42 (3Н, d, J=6,8), 1,35 (9Н, s), 1,23 (9Н, s), 0,86 (6Н, d, J=6,7). М.С. (+ FAB); 752 (M⁺ + 1, 7%); 72 (100).

(69a;

). Раствор эфира 68а (600,0 мг, 0,80 ммоля) в смеси метиленхлорида и трифторуксусной кислоты 1:1 (65,0 мл) перемешивают в течение 1 ч в сухой атмосфере N₂. Затем раствор упаривают под вакуумом, помещают в эфир и снова упаривают. Этот

процесс повторяют шесть раз, получая неочищенный продукт в виде твердого вещества не совсем белого цвета. После флэш-хроматографии (градиент от 95:5 до 80:20 метиленхлорид/метанол) получают 420,8 мг (83%) указанного в заголовке соединения в виде гидроскопичного твердого вещества белого цвета. Продукт существует в виде смеси трех изомеров в СD₃ОD, состоящей из кето-формы (с 50%), и ее ацилокси кетоформы (два изомера при С-4, с 50%): т. пл разложение выше 150° С; [α ]

\binom{23}{D}

-33,2° (с 0,17, метанол); IR (KBr) 3300, 1715, 1658, 1650, 1531, 1517, 1204; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,46-7,19 (2Н, m), 7,16-6,91 (3Н, m), 6,70-6,59 (2Н, m), 5,62-5,49 (1Н, m), 5,00-4,72 (1Н, размытый m), 4,69-4,51 (1Н, m), 4,49-4,08 (2Н, m), 4,05-3,89 (3Н, m), 3,16-2,47 (4Н, m), 2,05-1,78 (4Н, m), 1,41-1,11, 1,05-0,70 (9Н, 2 × m). Аналитически рассчитано для С₃₁Н₃₇N₅O₁₀· 3Н₂О: С, 53.67; Н, 6.25; N, 10.10. Обнаружено: С, 53.76; Н, 5.56; N, 10.28. М.С. (+ FAB); 640 (M⁺ + 1); 435, 147.

(69b;

) получают в соответствии со способом, описанным для кислоты 69а, который позволяет получать гидроскопичное соединение, указанное в заголовке 252 мг (96%). Продукт существует как смесь трех изомеров в СD₃ОD, состоящая из кето формы и ее ацилокси кетальной формы (два изомера при С-4). Продукт существует как единственный изомер в d-6 DMSO: т. пл 200-203° С (разл.); [α ]

\binom{23}{D}

-38,0° (с 0,23, метанол);

IR (КВr) 3289,2968,1718,1713, 1658, 1634, 1548,1517,1506,1461, 1453, 1393,1369, 1268,1228, 1174, 1092; ¹Н ЯМР (d₆-DMSO) δ 9,20 (1Н, brs), 8,71 (1Н, d, J=6,2), 8,10 (2Н, m), 7,83 (1Н, d, J=8,7), 7,61 (1Н, t, J=8,2), 7,46 (1Н, d, J=8,2), 7,08 (ЗН, m), 6,65 (2Н, d, J=8,3), 5,50 (1Н, q, J=6,5), 4,50 (1Н, m), 4,37 (1Н, m), 4,20 (1Н, m), 4,05 (3Н, s), 3,09-2,77 (4Н, m), 1,94 (1Н, m), 1,79 (3Н, s), 1,23 (3Н, d, J=7,0), 0,82 (6Н, m). Аналитически рассчитано для C₃₁H₃₇N₅O₁₀· 3Н₂O: С, 55.85; Н, 6.05; N, 10.51. Обнаружено: С, 55.21; Н, 5.69; N, 10.13. М.С. (+ FAB); 640 (М⁺ + 1, 22%); 107 (100).

(99). Раствор 5-(2,6-дихлорофенил)оксазола (2,71 г, 12,7 ммоля; полученный по способу, подобному описанному в Tet. Lett. 23, р. 2369 (1972)) в тетрагидрофуране (65 мл), охлаждают до -78° С в атмосфере азота. К этому раствору добавляют н-бутиллитий (1,5 М раствор в гексане, 8,5 мл, 13,3 ммоля) и перемешивают при -78° С в течение 30 мин. Добавляют эфират бромида магния (3,6 г, 13,9 ммоля) и раствор оставляют нагреваться до -45° С в течение 15 мин. Реакционную смесь охлаждают до -78°С и по каплям добавляют альдегид 58 (3,26 г, 12,7 ммоля; Graybill et al., Int. J. Protein Res., 44, pp. 173-182 (1993)) в тетрагидрофуране (65 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 25 мин, затем оставляют нагреваться до -40° С, перемешивают в течение 3 ч и затем 1 ч при комнатной температуре. Реакцию гасят 5% NаНСО₃ (12 мл) и перемешивают в течение 3 ч. Тетрагидрофуран удаляют под вакуумом и получившийся остаток экстрагируют дихлорметаном. Органический слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают над сульфатом магния, фильтруют и упаривают, получая 6,14 г указанного в заголовке соединения. После очистки получают 4,79 г (80%) соединения 99:

¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 1,45(s, 9Н), 2,7-2,5(т, 2Н), 2,8(dd, 1Н), 4,2, 4,4(2 × d, 1Н), 4,7-4,5(m, 3Н), 5,35-5,1(m, 2Н), 5,6, 5,7(2 × d, 1Н), 6,0-5,8(m, 1Н), 7,2(d, 1H), 7,3(m, 1H), 7,4(m, 2H).

a R=H

в R=COCH₂CH₂Ph

c R=CH₂Ph

(104a). Безводный хлористый водород барботировали через раствор метилового эфира (3(S)-трет-бутоксикарбониламино-2-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-бензо[b] [1,4]диазепин-1-ил) уксусной кислоты (103, 1 г, 2,86 ммоля) в 25 мл этилацетата в течение 2 минут, затем перемешивали 1 час при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривали, получая гидрохлорид метилового эфира 2-оксо-3(S)-амино-2,3,4,5-тетрагидробензо[b][1,4]диазепин-1-ил уксусной кислоты в виде твердого вещества белого цвета. Хлористоводородную соль и гидрокоричную кислоту (0,47 г, 3,15 ммоля) растворяют в 20 мл диметилформамида и охлаждают до 0° С. К раствору добавляют диизопропилэтиламин (1 мл, 5,72 ммоля) и затем добавляют N-гидроксибензотриазол и гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида. После перемешивания в течение 18 часов при комнатной температуре, смесь разбавляют 150 мл этилацетата и промывают 10% гидросульфатом натрия, 10% бикарбонатом натрия и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический слой высушивают над безводным сульфатом натрия, фильтруют и упаривают, получая твердый неочищенный продукт, который очищают методом флэш-хроматографии, элюируя смесью 7:3 этилацетат/дихлорометан, и получают 600 мг (55%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета.

¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,3-6,85 (9H,m), 6,55-6,0 (1Н, d), 4,88-4,82 (1H, m), 4,72-4,65 (1H, d), 4,28-4,22 (1H, m), 3,95-3,9 (1H, m), 3,78 (3Н, s), 3,65 (1H, br, s), 3,28-3,2 (1H, m), 2,95-2,84 (2Н, m), 2,55-2,4 (2Н, m).

(105а). Метиловый эфир (3(S)-(3-фенилпропиониламино)-2-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-бензо[b] [1, 4]диазепин-1-ил) уксусной кислоты (104а) растворяют в 90% метаноле. К реакционной смеси добавляют гидрат гидроксида лития и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь упаривают под вакуумом, получая твердое вещество белого цвета. Его растворяют в 20 мл воды, подкисляют до рН 5 и экстрагируют этилацетатом, получая 304 мг (88%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета. ¹H ЯМР (СDСl₃) δ 7,5-6,9 (11Н, m), 4,92-4,8 (1H, m), 4,7-4,58 (1H, d), 4,38-4,25 (1H, d), 3,88-3,78 (1H, m), 3,45-3,25 (1H, m), 3,05-2,85 (2Н, m), 2,55-2,45 (2Н, m).

(106a). N-[1-(2-бензилокси-5-оксотетрагидрофуран-3-илкарбамоил-метил) -2-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-бензо[b] [1,4]диазепин-3-ил]-3-фенилпропионамид получали из 105а по способу, используемому для получения соединения Н (стадия А), с получением 390 мг (93%) продукта в виде диастереомеров.

¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 7,58-7,22 (14Н, m), 5,78-5,73 (0,5 H, d), 5,64 (0,5 H, s), 5,0-4,72 (4Н, m), 4,54-4,42 (2Н, m), 3,82-3,76 (0,5 H, m), 3,68-3,62 (0,5 H, m), 3,28-3,21 (0,5H, m), 3,19-3,12 (0.5Н, m), 3,07-2,98 (2Н, m), 2,78-2,48 (4Н, m). Полученный продукт превращали в 106а по способу, описанному для получения соединения Н (Стадия D), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета (17%): ¹Н ЯМР (СD₃OD) δ 7,54-6,98 (9Н, m), 5,58-5,44 (1Н, m), 4,8-4,2 (4Н, m), 3,96-3,3 (2Н, m), 3,30-3,05 (1Н, m), 2,98-2,25 (5Н, m).

(104b). Безводный хлористый водород барботировали через раствор метилового эфира (3 (S)-трет-бутоксикарбониламино-2 -оксо-2,3,4,5 -тетрагидро-бензо [b] [1,4]диазепин-1 -ил) уксусной кислоты (103, 1 г, 2,86 ммоля) в 25 мл этилацетата в течение 2 минут, затем перемешивали 1 час при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривали, получая гидрохлорид метилового эфира 2-оксо-3(S)-амино-2,3,4,5-тетрагидробензо[b][1,4]диазепин-1-ил уксусной кислоты в виде твердого вещества белого цвета. Хлористоводородную соль суспендируют в 20 мл дихлорметана и охлаждают до 0° С. К суспензии добавляют триэтиламин (1,6 мл, 11,5 ммоля), затем по каплям добавляют дигидроциннамоил хлорид (0,9 мл, 6 ммолей). Смесь нагревают до комнатной темпратуры и перемешивают в течение 18 часов. Смесь разбавляют 25 мл дихлорметана и дважды промывают 50 мл воды и один раз 50 мл насыщенного раствора хлорида натрия. Органический слой высушивают над безводным сульфатом натрия, фильтруют и упаривают, получая вязкое желтое масло, которое очищают методом флэш-хроматографии, элюируя смесью 1:1 этилацетат/дихлорометан, и получают 1,35 г (92%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета. ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,45-7,02 (14 Н, m), 6,37-6,32 (1Н, d), 4,78-4,72 (1H, m), 4,52-4,3 (3H, m), 3,82-3,77 (1Н,m), 3,74 (3Н, s), 3,03-2,87 (4Н, m), 2,58-2,45 (2Н, m), 2,45-2,35 (1Н, m), 2,25-2,16 (1Н,m).

(105b). Метиловый эфир [2-оксо-5-(3-фенилпропионил)-3-(3-фенилпропиониламино)-2,3,4,5-тетрагидробензо[b][1,4]диазепин-1-ил]уксусной кислоты (104b; 680 мг, 1,32 ммоля) гидролизуют по способу, используемому для гидролиза 105а, и получают 645 мг (98%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета.

¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,58 (1Н, br, s), 7,5-7,42 (1H, m), 7,35-6,95 (14H, m), 4,95-4,88 (1H, m), 4,64-4,55 (1H, d), 4,54-4,45 (1H, t), 4,15-4,05 (1H, d), 3,75 (1H, m), 3,05-2,75 (4H, m), 2,58-2,45 (2H, m), 2,45-2,28 (1H, m), 2,25-2,14 (1H, m).

(106b). [2-оксо-5-(3-фенилпропионил)-3-(3-фенилпропиониламино)-2,3,4,5-

тетрагидробензо[b][1,4]диазепин-1-ил]уксусную кислоту и 3-амино-4-оксобутановой

кислоты трет-бутиловый эфир семикарбазон конденсируют по способу, используемому для получения соединения К (Стадия А), и получают 350 мг (85%) твердого вещества белого цвета. ¹H ЯМР (СDСl₃) δ 9,05 (1H, br, s), 7,58-7,55 (1H,d), 7,5-7,35 (1H, m), 7,35-6,95 (14 Н, m), 6,75-6,2 (1H, d), 6,25 (1H, br, s), 5,25 (1H, br, s), 4,95-4,88 (1H, m), 4,8-4,72 (1H, m), 4,55-4,4 (2H, m), 3,92-3,88 (1H, d), 3,73-3,68 (1H, m), 2,95-2,8 (4H, m), 2,8-2,72 (1H, m), 2,62-2,55 (1H, m), 2,55-2,45 (2H, m), 2,4-2,32 (1H, m), 2,2-2,12 (1H, m), 1,45 (9Н, s).

4-оксо-3-{2-[2-оксо-5-(3-фенилпропионил)-3-(3-фенил-пропионил-амино)-2,3,4,5-тетрагидробензо[b] [1,4]диазепин-1-ил]-ацетил-амино}бутановой кислоты трет-бутилового эфира семикарбазона удаляют защитные группы методом, описанным в получении соединения К (стадия С), и получают 118 мг (47%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета. ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 7,48-6,95 (14 Н, m), 4,65-4,15 (6Н, m), 3,5-3,4 (1Н, m), 2,85-2,72 (4Н, m), 2,65-2,5 (1Н, m), 2,5-2,34 (3Н, m), 2,34-2,15 (2H,m).

(104с). Метиловый эфир [2-оксо-3-(3-фенилпропиониламино)-2,3,4,5-тетрагидробензо-[b] [1,4] диазепин-1-ил] уксусной кислоты (104а; 500 мг, 1,31 ммоля), карбонат кальция (155 мг, 1,58 ммоля) и бензил бромид (170 мкл, 1,44 ммоля) помещают в 10 мл диметилформамида и нагревают до 80° С в течение 8 часов. Смесь разбавляют 150 мл этилацетата и промывают 4 раза 50 мл воды. Органический слой высушивают над безводным сульфатом натрия, фильтруют и упаривают, получая вязкое желтое масло, которое очищают методом флэш-хроматографии, элюируя смесью дихлорометан/этилацетат (8:2), и получают 460 мг (75%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета. ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,34-7,05 (14 Н, m), 6,32-6,28 (1Н, d), 4,84-4,76 (1H, d), 4,76-4,70 (1H, m), 4,43-4,37 (1H, d), 4,26-4,18 (1H, d), 4,06-4,00 (1H, d), 3,79 (3Н, s), 3,45-3,37 (1H, m), 3,02-2,95 (1H, m), 2,90-2,82 (2H, m), 2,5-2,34 (2H, m).

(105с) получают в результате гидролиза эфира (102с) по способу, описанному в Примере 105а, который дает 450 мг (98%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СD₃OD) δ 7,5-7,05 (14 Н, m), 6,4 (1H, br, s), 4,85-4,55 (2H,m), 4,5-4,21 (2H, m), 4,12-3,92 (1H, d), 3,45-3,3 (1H. m), 3,1-2,8 (3Н, m), 2,55-2,28 (3Н, m).

(106с). [5 -бензил-2-оксо-3(S)-(3 -фенилпропиониламино)-2,3,4,5 -тетрагидро-бензо[b][1,4]диазепин-1-ил]уксусную кислоту и 3(S)-амино-4-оксобутановой кислоты трет-бутиловый эфир семикарбазон конденсировали по способу, используемому для получения соединения К (стадия А), получая 260 мг (85%) твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 7,35-7,0 (15 H, m), 4,94-4,88 (1H, m), 4,68-4,58 (1H, d), 4,57-4,52 (1H, m), 4,41-4,34 (1H, d), 4,3-4,23 (1H, d), 4,1-4,04 (1H, d), 3,13-3,11 (1H, m), 3,09-2,98 (1H, m), 2,78-2,72 (2Н, t), 2,65-2,57 (1H, m), 2,42-2,33 (3Н, m).

С 3(S)-{2-[5-Бензил-2-оксо-3(S)-(3-фенилпропиониламино)-2,3,4,5-тетрагидробензо[b][1, 4]диазепин-1-ил]-ацетиламино}-4-оксобутановой кислоты трет-бутилового эфира семикарбазона удаляли по способу, описанному в получении соединения К (стадия С), получая 168 мг (81%) соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества белого цвета. ¹H ЯМР (СD₃OD) δ 7,37-7,0 (14Н, m), 4,75-4,62 (1H, m), 4,6-4,45 (2Н, m), 4,4-4,21 (2Н, m), 4,15-3,95 (2Н, m), 3,15-3,0 (2Н, m), 2,82-2,67 (2Н, m), 2,65-2,52 (1H, m), 2,5-2,32 (3Н, m).

(107a). Конечный семикарбазон получали конденсацией соединения 105b и т-бутил 3-(аллилоксикарбониламино)-4-оксо-5-(2,6-дихлоробензоил-окси)пентаноата (WO 93 16710) по способу, описанному для соединения 56а, с образованием 256 мг (58%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета. ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,45-7,04 (17Н, m), 6,45-6,34 (2Н, m), 5,28-5,21 (1H, m), 5,1-5,0 (1H, m), 4,95-4,90 (1H, m), 4,75-4,70 (1H, m), 4,55-4,44 (1H, m), 4,32-4,22 (1H, dd), 3,99-3,85 (1H, dd), 3,85-3,76 (1H, m), 3,06-2,83 (5H, m), 2,83-2,74 (1H, m), 2,6-2,44 (2Н, m), 2,43-2,33 (1H, m), 2,24-2,15(1H, m), 1,45 (9H,s).

(108а) получали из 107a по способу, описанному для соединения 57а, который дает 156 мг (68%) соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества белого цвета. ¹Н ЯМР (СD₃OD) δ 7,5-6,9 (17Н, m), 5,16-5,02 (1Н, dd), 4,88-4,71 (2Н, m), 4,62-4,44 (2Н, m), 4,42-4,28 (2Н, m), 4,27-4,18 (1Н, m), 3,47-3,41 (1H, m), 2,90-2,60 (5H, m), 2,46-2,4 (2Н, m), 2,39-2,18 (2H,m).

(108b) получали по способу, описанному для соединения 69а с образованием указанного в заголовке соединения (50%) в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,41-6,88 (17Н, m), 5,6-5,55 (0,5H, t), 5,48-5,43 (0,5H, t), 4,64-4,45 (2Н, m), 4,45-4,30 (1H, m), 3,93 (1,5H, s), 3,90 (1,5H, s), 3,47-3,34 (1H, m), 3,10-2,85 (2Н, m), 2,84-2,63 (5H, m), 2,6-2,4 (2H,m), 2,3-2,1 (2H,m).

(123). Фторид калия (273 мг, 4,70 ммоля), затем 2-хлорфенилметил тиол (373 мг, 2,35 ммоля) добавляют при перемешивании к раствору (3S) т-бутил N-(аллилоксикарбонил)-3-амино-5-бром-4-оксо-пентаноат (122; 749 мг, 2,14 ммоля; WO 93 16710) в диметилформамиде (20 мл). Смесь перемешивают в течение 3,5 ч, гасят водой (50 мл) и экстрагируют этилацетатом (2× 50 мл). Объединенные органические экстракты промывают водой (4× 50 мл), затем насыщенным раствором хлорида натрия (50 мл). Их высушивают (MgSO₄), концентрируют, получая масло, которое очищают методом флэш-хроматографии (10-35% этилацетат/гексан), и получают 832 мг (91%) бесцветного твердого вещества: т. пл. 45-6° С; [α ]

\binom{23}{D}

-19,0° (с 1,0, CH₂Сl₂); IR (пленка) 3340, 2980, 2935,1725,1712,1511,1503,1474, 1446,1421,1393,1368, 1281, 1244, 1157,1052, 1040, 995, 764, 739; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,36 (2Н, m), 7,21 (2Н, m), 5,91 (2Н, m), 5,27 (2Н, m), 4,76 (1Н, m), 4,59 (2Н, d), 3,78 (2Н, s), 3,36 (2Н, m), 2,91 (1Н, dd), 2,74 (1Н, dd), 1,43 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₀H₂₆ClNO₅S: С, 56,13; Н, 6,12; N, 3,27; S, 7,49. Обнаружено: С, 56,08; Н, 6,11; N, 3,26; S, 7,54. MC (C.I.) 430/28 (M⁺ + 1,3%), 374/2 (100).

(124а). Раствор 6-бензил-1,2-дигидро-2-оксо-3-(3-фенилпропиониламино)-пиридил уксусной кислоты (52b; 300 мг, 0,76 ммоля) в ТГФ (7 мл) перемешивают с 1-гидроксибензотриазолом (205 мг, 1,52 ммоля) и 1-(3-диметиламинопропил-3-этилкарбодиимид гидрохлоридом). Через 3 мин добавляют воду (12 капель) и смесь перемешивают 10 мин, затем обрабатывают т-бутил (3S) N-(аллилоксикарбонил)-3-амино-5-(2-хлорфенилметилтио)-4-оксопентаноатом (123) (325 мг, 0,76 ммоля), хлоридом бис(трифенилфосфин)палладия II (20 мг) и гидридом трибутилолова (0,6 мл, 2,28 ммоля). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов, выливают в этилацетат и промывают водным раствором 1М НСl (× 2), водным раствором бикарбоната натрия, насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Остаток перетирают с пентаном и супернатант отбрасывают. После хроматографии (силикагель, 50% этилацетат/гексан) получают бесцветную пену (439 мг, 81%): [α ]

\binom{23}{D}

-18,3° (с 0,5, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3356, 3311, 1722, 1689, 1646, 1599, 1567, 1513, 1367, 1154; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,39 (1Н, d), 3,23 (1Н, s), 7,24 (14Н, m), 6,16 (1Н, d), 4,95 (1Н, m), 4,63 (2Н, m), 4,02 (2Н, s), 3,74 (2Н, s), 3,27 (2Н, s), 2,85 (6Н, m), 1,40 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₃₉Н₄₂СlN₃О₆S: С, 65,39; Н, 5,91; N, 5,87. Обнаружено: С, 65,51;H, 5,99; N,5,77.

(124b) получают с помощью метода, подобного используемому для получения 124а из тиоэфира 123 и 3S(1S, 9S)-3-(6,10-диоксо-1,2,3,4,7,8,9,10-октагидро)-9-(3-фенилпропиониламино)-6Н-пиридазино[1,2-а] [1,2] диазепин-1-карбоновой кислоты (45а), с образованием 452 мг (50%) бесцветной пены: т. пл. 55-7° С; [α ]

\binom{23}{D}

-94,0° (с 0,12, СН₂Сl₂); 1R (KBr) 3288, 2934, 1741, 1722, 1686, 1666, 1644, 1523, 1433, 1260, 1225, 1146, 757; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,35 (3Н, m), 7,20 (7Н, m), 6,46 (1Н, d), 5,21 (1Н, m), 4,97 (2Н, m), 4,56 (1Н, m), 3,75 (2Н, s), 3,25 (3Н, m), 2,93 (5Н, m), 2,71 (1Н, dd), 2,55 (2Н, m), 2,30 (1Н, m), 1,92 (3Н, m), 20 1,66 (2Н, m), 1,42 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₃₅Н₄₃СlN₄O₇S· 0.25Н₂O: С, 59,73; Н, 6,23; Сl, 5,04; N, 7,96; S, 4,56. Обнаружено: С, 59,73; Н, 6,19; Cl, 5,10; N, 7,79; S, 4,58. MC (-FAB) 697 (М-1, 100).

(125а). Раствор т-бутил-3(2(6-бензил-1,2-дигидро-2-оксо-3-(3-фенилпропиониламино)-1 -пиридил)ацетил-амино-5 -(2-хлорфенилметилтио)-4-оксопентаноата (124а) (400 мг, 0,56 ммоля) в дихлорометане (3 мл) при 0° С обрабатывают трифторуксусной кислотой (3 мл) и перемешивают при 0° С в течение 1 ч и 0,5 ч при комнатной температуре. Раствор концентрируют и снова растворяют в дихлорметане, затем еще раз концентрируют. Эту процедуру повторяют три раза. Остаток перемешивают в эфире в течение 1 часа и фильтруют, получая бесцветное твердое вещество (364 мг, 99%): т. пл. 165-7° С; [α ]

\binom{23}{D}

-27,7° (с 0,2, СН₂Сl₂); IR (КВr) 3289,1712, 1682, 1657, 1645, 1593, 1562, 1527, 1497, 1416,1203, 1182; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 8,47 (1Н, d), 8,21 (1Н, s), 7,70 (1Н, d), 7,22 (14Н, m), 6,24 (1Н. d), 5,03 (1Н, m), 4,65 (2Н, m), 4,06 (2Н, s), 3,69 (2Н, m), 3,23 (2Н, m), 2,88 (6Н, m).

(125b) получают с помощью метода, подобного используемому для получения 125а из т-бутилового эфира 124b, с образованием 362 мг (93%) бесцветного порошка: т. пл. 76-80° С; [α ]

\binom{23}{D}

-134° (с 0,10, МеОН); IR (KBr) 3309, 2935, 1725, 1658,1528, 1445, 1417, 1277, 1219, 1175; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,80 (1Н, d), 8,19 (1Н, d), 7,31 (9Н, m), 5,09 (1Н, m), 4,74 (1Н, m), 4,63 (1Н, m), 4,35 (1Н, m), 3,76 (2Н, m), 3,28 (3Н, m), 2,80 (5Н, m), 2,52 (4Н, m), 2,16 (2Н, m), 1,90 (3Н, m). Аналитически рассчитано для С₃₁H₃₅Cl₂N₄O₇S· 0,25Н₂O: С, 57,49; Н, 5,53; N, 8,65; S, 4,95. Обнаружено: С, 57,35; Н, 5,43; N, 8,45; S, 4,88. MC (-FAB) 641 (М-1, 100).

2-Хлорфенилметилиодид. Смесь 2-хлорфенилметилбромида (4 г, 19,47 ммоля) и Nal (14 г, 97,33 ммоля) в ацетоне (40 мл) перемешивают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждают, фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток перетирают с гексаном и фильтруют. Раствор концентрируют в вакууме и получившееся масло очищают методом флэш-хроматографии (оксид кремния, гексан), получая указанное в заголовке соединение (4,67 г, 63%) в виде масла: ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,34 (4Н, m), 4,54 (2Н, s).

(201). Раствор (3S) т-бутил N-(аллилоксикарбонил)-3-амино-5-гидрокси-4-оксопентаноата (81, Chapman, et al., Bioorg. & Med. Chem. Lett., 2, pp. 613-618 (1992) 0,144 г, 0,5 ммоля) и 2-хлорфенилметилиодида (0,569 г, 1,5 ммоля) в CH₂Cl₂ (4 мл) интенсивно перемешивают с окисью серебра (0,231 г, 1 ммоль) и нагревают до 38° С в течение 40 часов. Реакционную смесь охлаждают, фильтруют и фильтрат упаривают. Остаток очищают методом флэш-хроматографии (оксид кремния, 0-20% этилацетат в гексане), получая продукт в виде бесцветного масла (0,138 г, 67%): [α ]

\binom{23}{D}

+3,9° (с 1,3, СН₂Сl₂); ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,37 (4Н, m), 5,88 (2Н, m), 5,26 (2Н, m), 4,69 (2Н, s), 4,57 (3Н, m), 4,50 (1Н, d), 4,35 (1H, d), 3,03 (1H, dd), 2,76 (1H, dd), 1,42 (9H, s).

(203). Раствор 2,4-дихлор-6-нитрофенола (202, 40 г содержащие 20% влаги) в EtOAc (500 мл) высушивают с помощью MgSO₄, фильтруют и остаток промывают небольшим количеством EtOAc. Добавляют платину на угле (5% сульфидирования - 2 г) и смесь гидрогенируют до тех пор, пока не прекратится поглощение Н₂. Добавляют триэтилортоформат (160 мл) и п-толуол сульфоновую кислоту (160 мг) и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч. После охлаждения и удаления отработанного катализатора с помощью фильтрации, раствор промывают насыщенным NаНСО₃, водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают с помощью MgSO₄ и упаривают досуха. После перетирания с гексаном получают твердое вещество, которое отделяют фильтрацией, промывают гексаном и высушивают, получая указанное в заголовке соединение (25,5 г, 88%) в виде кристаллического твердого вещества: т. пл. 98-99° С; IR (КВr) 3119, 1610,1590,1510, 1452, 1393, 1296, 1067, 850; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,16 (1H,s), 7,69 (1Н, d, J=1,9), 7,42 (1Н, d, J=1,9). Аналитически рассчитано для С₇Н₃Сl₂NО: С, 44,72; Н, 1,61; N, 7,45; Cl, 37,70. Обнаружено: С, 44,84; Н, 1,69; N, 7,31; Cl, 37,71.

(204). Магний бромид получают в результате взаимодействия Mg (7,45 г, 0,30 моля) в ТГФ (516 мл) с I₂ (50 мг) и 1,2-дибромэтаном (26,3 мл, 57,3 г, 0,30 моля) при температуре кипения с обратным холодильником в течение 2 ч и затем охлаждают до -40° С. К полученной смеси добавляют быстро через канюлю раствор 2-дитио-5,7-дихлорбензоксазола при 70° С (полученный из 5,7-дихлорбензоксазола (203, 28,9 г, 0,154 моля) и бутиллития (100 мл 1,52 М в гексане) в ТГФ (150 мл) при -70° С). Смесь перемешивали при -40° С в течение 1 ч и затем охлаждали до -70° С перед добавлением раствора (3S)т-бутил N-(аллилоксикарбонил)-3-амино-4-оксо-бутаноата (Chapman, et al., Bioorg. & Med. Chem. Lett., 2, pp. 613-618 (1992)) (20,3 г, 0,078 моля) в ТГФ (160 мл) при температуре ниже -60° С. Реакционную смесь оставляют нагреваться до температуры окружающей среды, перемешивают в течение 16 ч, затем гасят раствором хлористого аммония и экстрагируют смесью 1:1 гексан:этилацетат 600 мл. Органическую фазу промывают водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушивают над MgSO₄ и упаривают до состояния сиропа (52,9 г). После флэш-хроматографии (SiO₂ 250g -11 аликвот 1:1 гексан:СН₂Сl₂× 2, CH₂Cl₂, 5% ЕtOАс в CH₂Cl₂, 10% ЕtOАс в СН₂Сl₂, 20% EtOAc в CH₂Cl₂) получают загрязненный продукт 24,6 г, и после дополнительной хроматографии (SiO; 1:1 гексан: эфир) получают указанное в заголовке соединение в виде золотисто-коричневого стеклоподобного вещества (22,7 г, 64%); IR (пленка) 3343, 2980, 1723, 1712, 1520, 1456, 1398, 1369, 1254, 1158,993; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,60 (1H, m), 7,37 (1Н, m), 5,72 (1Н, m), 5,64 (0,5H, d), 5,10 (2,5H, m), 4,7-4,3 (4Н, m), 2,9-2,6 (2Н, m), 1,46 и 1,42 (9Н объединенный, 2× s). MC ES⁺ Da/e 445 (M + 1)⁺ Cl 35 62%, 447 (M + 1) Cl 37 40%, 389 100%.

(205а). К смеси ТГФ (200 мл) и воды (100 мл), содержащей NаНСО₃ (16,6 г, 0,2 моля), добавляют т-бутиловый эфир глютаровой кислоты (10 г, 49,2 ммоля) и затем в течение 20 минут по каплям добавляют аллил хлорформат (6,8 мл, 64 ммоля). Смесь перемешивают 2 часа, экстрагируют EtOAc, промывают насыщенным раствором гидрокарбоната, водой и насыщенным солевым раствором, высушивают и упаривают до состояния масла 205а (9,5 г, 67,2%); [α ]

\binom{23}{D}

-6° (с 1,5, МеОН)

¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 6,10 (1H, d), 5,96-5,88 (1H, m), 10 5,31-5,12 (2Н, m), 4,45 (2Н, m), 3,90-3,84 (1H, t), 2,18 (2Н, m), 1,85-1,76 (2Н, m), 1,36 (9Н, s).

(205b) получают аналогично 205, с образованием бесцветного масла (6,27 г, 88%): [α ]

\binom{23}{D}

+16° (с 0,095, МеОН); IR (КВr) 3678, 3332, 3088, 2980, 2937, 1724, 1530, 1453, 1393, 1370, 1331, 1255, 1155, 1056, 995, 935, 845, 778, 757, 636, 583; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 9,24 (1Н, broad s), 5,94-5,79 (1Н, m), 5,58 (1Н, d), 5,33-5,17 (2Н, m), 4,55 (2Н, d), 4,38-4,31 (1Н, m), 2,41-1,95 (4Н, m), 1,42 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₁₃H₂₁NO₆: С, 54,35; Н, 7,37; N, 4,88. Обнаружено: С, 54,4; Н, 7,5; N, 4,8.

(206а). К раствору соединения 205а (3,6 г, 12,5 ммоля) в ТГФ (100 мл) при 0° С добавляют N-метилморфолин (1,5 мл,13 ммолей), затем изобутилхлороформат, (1,1 мл, 13 ммолей). Через 15 мин к смеси добавляют суспензию NaBH₄ (0,95 г, 25 ммолей) в ТГФ (100 мл) и МеОН (25 мл) при -78° С. Через 2 часа при -70° С, смесь гасят уксусной кислотой, разбавляют EtOAc, промывают 3 раза насыщенным раствором гидрокарбоната, водой и насыщенным солевым раствором, высушивают и упаривают. После флэш-хроматографии (2% МеОН в CH₂Cl₂) получают соединение 206а в виде бесцветного масла (2,4 г, 70%): [α ]

\binom{23}{D}

-10° (с 3,88, CH₂Cl₂); ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 5,84 (1H, m), 5,34-5,17 (3H, m), 4,56-4,53 (2Н, m), 3,68-3,59 (2Н, m), 2,98 (1H, m), 2,40-2,30 (2Н, t), 1,84-1,78 (2Н, m), 1,43 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₁₃H₂₃NO₅: С, 57,13; Н, 8,48; N, 5,12. Обнаружено: С, 57,1; Н, 8,6; N, 6,0.

(206b) получают способом, аналогичным используемому для получения соединения 206а, который позволяет получать соединение, указанное в заголовке в виде светло-желтого масла (3,42 г, 57%): [α ]

\binom{23}{D}

+14 (с 0.166, МеОН); IR (КВr) 3341, 3083, 2976, 2936,2880, 1724, 1533, 1454, 1419. 1369, 1332, 1251, 1156, 1062,997,933, 846,777,647;

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 5,98-5,81 (1H, m), 5,35-5,10 (3H, m), 4,55 (2Н, d), 3,70-3,56 (3H, m), 2,5C-2,47 (1Н, broad s), 2,37-2,30 (2Н, m), 1,89-1,74 (2Н, m), 1,44 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₁₃Н₂₃NО₅: С, 57,13; Н, 8,48; N, 5,12. Обнаружено: С, 56,9; Н, 8,6; N, 5,6.

(207а). К раствору DMSO (1,51 г, 19,3 ммолей) в СН₂Сl₂ (25 мл) при -70° С добавляют оксалилхлорид (1,34 г, 19,3 ммолей). После 10 мин при -70° С, по каплям добавляют раствор (206а) (2,4 г, 8,8 ммолей) в СН₂Сl₂ (10 мл) и смесь перемешивают 15 минут при -70° С. Добавляют диизопропилэтиламин (3,4 г, 26,3 ммоля) и смесь перемешивают 15 минут при -25° С, затем разбвляют ЕtOАс (50 мл), промывают 2М раствором гидросульфата натрия и концентрируют, получая масло, которое немедленно используют без очистки: ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 9,5 (1H, s), 6,0-5,5 (2H, m), 5,5-5,1 (2Н, m), 4,5 (2Н, m), 4,2 (1H, m), 2,4-2,10 (2H, m), 2,05 (2H, m), 1,36 (9H, s).

(207b) получают по способу, аналогичному способу получения 207а, в виде масла (2,95 г, 96%), которое используют в следующей стадии без дополнительной очистки: [α ]

\binom{23}{D}

+21” (с 0,942, МеОН); ¹H ЯМР (СDСl₃) δ 9,58 (1H, s), 6,05-5,80 (1H, m), 5,57 (1H, broad s), 5,35-5,18 (2H, m), 4,56 (2H, d), 4,34-4,24 (1H, m), 2,38-2,16 (3Н, m), 1,96-1,73 (1H, m), 1,43 (9H, s).

(208a). Краствору 207а (2,39 г, 8,8 ммолей), в МеОН (20 мл) добавляют ацетат натрия (0,72 г, 8,8 ммолей) и семикарбазид (0,98 г, 8,8 ммолей), перемешивают в течение ночи, концентрируют и разбавляют CH₂Cl₂ (100 мл), промывают водой, высушивают и концентрируют. После флэш-хроматографии (2% МеОН в СН₂Сl₂) получают 208a (2.10 г, 73%) в виде масла: [α ]

\binom{23}{D}

-21 (с 2,55° , CH₂Cl₂); ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 9,98 (1H, s), 7,27 (1H, d), 5,8 (1H, m), 5,5 (1H, d), 5,35-5,19 (2H, m), 4,58 (2H, m), 4,14 (1H, m), 2,37 (2H, t), 2,09 (1H, m), 2,0-1,75 (2H, m). Аналитически рассчитано для C₁₄H₂₄N₄O₅: С, 51,21; Н, 7,37; N, 17,06. Обнаружено: С, 50,2; Н, 7,3; N, 16,1.

(208b) получают аналогично 208а в виде стекловидного масла (2,37 г, 66%); [α ]

\binom{23}{D}

+30 (с 0,26, СНСl₃); IR (KBr) 3476, 3360, 2979, 2923, 1700, 1586, 1527, 1427, 1394, 1369, 1338, 1253, 1156, 1060, 997, 929, 846, 775; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 9,87 (1H, s), 7,09 (1H, d), 6,05-5,75 (3Н, m). 5,58 (1H, d), 5,32-5,16 (2H, m), 4,54 (2H, d), 4,35 (1H, m), 2,32-2,26 (2H, m), 2,15-1,55 (2H, m), 1,41 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₁₄H₂₄N₄O₅: С, 51,21; Н, 7,37; N, 17,06. Обнаружено: С, 51,0; Н, 7,5; N, 16,7.

211 (b) R¹=MeSO₂	212 (b) R¹=MeSO₂
(с) R¹=МеСО	(с) R¹=МеСО
(d) R¹=PhCH₂OCO	(d) R¹=PhCH₂OCO
(е) R'=PhCO	(e) R¹=PhCO
(f) R¹=Fmoc	(f) R¹=Fmoc

(211b). Раствор т-бутил 9-амино-6,10-диоксо-1,2,3,4,7,8,9,10-октагидро-6Н-пиридазино[1,2-а] [1,2]диазепин-1-карбоксилат (GB 2,128,984; 831 мг, 2,79 ммоля) и диизопропилэтиламин (1,22 мл, 6,99 ммолей, 2,5 эквив.) в СН₂Сl₂ (10 мл) в атмосфере сухого азота обрабатывают метансульфонилхлоридом (237 мкл, 3,07 ммолей 1,1 эквив.).

Смесь перемешивают 1 ч, разбавляют EtOAc (75 мл) и промывают насыщенным NаНСО₃(50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (30 мл), высшивают (MgSO₄) и концентрируют. После флэш-хроматографии (10-35% EtOAc в CH₂Cl₂) получают 211b (806 мг, 77%) в виде бесцветного твердого вещества: т. пл. 68-70° С; [α ]

\binom{23}{D}

109 (с 1,09, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3270, 2980, 2939, 1735, 1677, 1458, 1447, 1418, 1396, 1370,1328, 1272, 1252, 1232,1222, 1156, 1131, 991; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 6,15 (1Н, d), 5,31 (1Н, m), 4,65-4,11 (2Н, m), 3,47 (1Н, m), 2,99 (3Н, s), 2,89 (1Н, m), 2,72-2,51 (2Н, m), 2,34 (1Н, m), 2,26 (1Н, m), 2,05-1,62 (4Н, m), 1,47 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₁₅H₂₃N₃O₆S: С, 47,97; Н, 6,71; N, 11,19; S, 20 8,54. Обнаружено: С, 48,28; Н, 6,68; N, 10,86; S, 8,28. МС (+ FAB) 376 (М⁺+1,66%), 320 (100).

(211с). Уксусный ангидрид (307 мг, 3,01 ммоля) добавляют при перемешивании к смеси т-бутил 9-амино-6, 10-диоксо-1,2,5,4,7,8,9,10-октагидро-6Н-пиридазино[1,2-а] [1,2]диазепин-1-карбоксилата (GB 2,128,984; 813,7 мг, 2,74 ммоля), диизопропилэтиламина (884 мг, 6,84 ммоля) и СН₂Сl₂ (20 мл). Смесь выдерживают 1 ч, затем разбавляют EtOAc, промывают раствором NаНСО₃, затем насыщенным солевым раствором, высушивают (MgSO₄) и концентрируют, получая бесцветное масло. Продукт очищают методом флэш-хроматографии (0,5-8% МеОН/СН₂Сl₂), получая 211с (804 мг, 71%) в виде бесцветного порошка: т. пл. 162-3° С; [α ]

\binom{23}{D}

-109 (с 1,03, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3358, 2974, 1733, 1693, 1668,1528,1462, 1431, 1406,1371,1278,1271,1250, 1233, 1217, 1154, 1124; ¹H ЯМР (СDСl₃) δ 6,32 (1Н, d), 5,29-5,25 (1Н, m), 4,98-4,85 (1Н, m), 4,68-4,58 (1Н, m), 3,55-3,39 (1Н, m), 2,91-2,66 (2Н, m), 2,39-2,18 (2Н, m), 2,03 (3Н, s), 1,88-1,64 (4Н, m), 1,47 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₁₆H₂₅N₃O₅: С, 56,62; Н, 7,43; N, 12,38. Обнаружено: С, 56,62; Н, 7,43; N, 12,36; МС (+ FAB) 340 (М⁺ + 1,40%), 284 (100).

(211d). Бензил хлорформат (1,07 гg) добавляют по каплям при перемешивании к охлажденной на льду смеси (1S,9S) т-бутил 9-амино-6,10-диоксо-1,2,3,4,7,8,9,10-октагидро-6Н-пиридазино[1,2-а] [1,2]диазепин-1-карбоксилата (GВ 2,128,984; 1,55 г, 5,21 ммолей), NaHCO₃ (0,66 г, 7,82 ммолей), диоксана (32 мл) и воды (8 мл). Смесь выдерживают 15 мин при 5° С, затем 2 ч при комнатной температуре. Смесь разбавляют ЕtOАс (50 мл), дважды промывают нас. раствором. NaHCO₃, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Маслянистый остаток очищают методом флэш-хроматографии, получая 211d (1,98 г, 88%) в виде бесцветного масла: [α ]

\binom{23}{D}

-56.4 (с 1,0, CH₂Cl₂); IR (тонкая пленка) 3325, 2979,2946,1728, 1677, 1528, 1456,1422,1370, 1340, 1272, 1245,1156, 1122, 1056, 916, 734, 699; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,29 (5Н, m), 5,81-5,72 (1Н, m), 5,26-5,20 (1Н, m), 5,05 (2Н, s), 4,69-4,51 (2Н, m), 3,48-3,36 (1Н, m), 2,81-2,51 (2Н, m), 2,34-2,19 (2Н, m), 1,90-1,54 (4Н, m), 1,41 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₂₂Н₂₉N₃О₆· Н₂O: С, 58,79; Н, 6,92; N, 9,35. Обнаружено: С, 59,10; Н, 6,57; N, 9,25; MC (ES +) 454 (M⁺+Na, 87%), 432 (M⁺+1, 100).

(211е). Раствор бензоилхлорида (1,61 г, 11,47 ммолей) в СН₂Сl₂ (15 мл) добавляют по каплям при перемешивании к охлаждаемой во льду смеси (1S,9S) т-бутил 9-амино-6,10-диоксо-1,2,3,4,7,8,9,10-октагидро-6Н-пиридазино [1,2-а] [1,2] диазепин-1-карбоксилата (GB 2,128,984; 3,1 г, 10,43 ммолей), сухого CH₂Cl₂ (20 мл) и диизопропилэтиламина (4,54 мл, 26,06 ммолей). Смесь держат на холоду 1 ч, затем оставляют при комнатной температуре в течение 0,5 ч. Смесь разбавляют СН₂Сl₂, промывают дважды насыщенным солевым раствором, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Остаток очищают методом флэш-хроматографии (0-5% метанола в СН₂Сl₂) и получают 211е (4,0 г, 96%) в виде бесцветного стекловидного вещества: т. пл. 74-76° С; [α ]

\binom{23}{D}

-75,0° (с 0,12, CH₂Cl₂). IR (KBr) 3350, 2979, 2938, 1736, 1677, 1662, 1536, 1422, 1276, 1250, 1155; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,72 (2Н, m), 7,53-7,40 (3Н, m), 7,07 (1Н, d, J=7,2), 5,30 (1Н, dd, J=3,0, 5,8), 5,12 (1Н, m), 4,66 (1Н, m), 3,51 (1Н, m), 2,90 (2Н, m), 2,38 (1Н, dd, J 13,2, 6,8), 2,25 (1Н, m), 1,9 (2Н, m), 1,70 (1Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₁H₂₇N₃O₅· 0,5 H₂O: С, 61,45; Н, 6,88; N, 10,24. Обнаружено С, 61,69; Н, 6,71; N, 10,18.

(211f) получают по способу, аналогичному способу получения 211е, за исключением того, что 9-фторенилметилхлорформат используют вместо бензоилхлорида, получая белое стеклоподобное твердое вещество 211f (2,14 г, 89%): т. пл. 190-192° С; [α ]

\binom{23}{D}

-81,5° (c 0,1,CH₂Cl₂). IR (KBr) 3335,2977, 1731,1678,1450,1421, 1246, 1156, 742; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,60 (2Н, m), 7,57 (2Н, m), 7,50-7,26 (4Н, m), 5,60 (1Н, d, J=7,8), 5,28 (1Н, m), 4,67 (2Н, m), 4,38 (2Н, m), 4,23 (1Н, m), 3,59-3,41 (1Н, m), 2,92-2,65 (2Н, m), 2,41-2,21 (2Н, m), 1,95-1,58 (4Н, m), 1,47 (9Н, s). MC (ES+, m/z) 520 (M⁺ + 1, 97%), 179 (100%).

(212b) синтезировали тем же способом, что и соединение 212е (635 мг, 85%), получая продукт в виде бесцветного порошка: т. пл. 209-12° С; [α ]

\binom{23}{D}

-132 (с 0,12, МеОН); IR (КВr) 3308, 2940, 1717,1707, 1699, 1619, 1469,1456,1442,1417, 1391, 1348, 1339,1330, 1310, 1271,1247, 1222,1175,1152, 1133, 993, 976; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 5,35 (1Н, m), 4,58-4,48 (1Н, m), 4,46-4,36 (1Н, m), 3,60-3,42 (1Н, m), 3,01-2,87 (1Н, m), 2,95 (3Н, s), 2,55-2,39 (1Н, m), 2,32-2,20 (2Н, m), 2,09-1,89 (2Н, m), 1,78-1,62 (2Н, m). Аналитически рассчитано для C₁₁H₁₇O₆S: С, 41,37; Н, 5,37; N, 13,16; S, 10,04. Обнаружено: С, 41,59; Н, 5,32; N, 12,75; S, 9,76; MC(ES -). Точная масса, рассчитанная для С₁₁Н₁₈N₃О₆S (МH⁺) составляет: 320,0916. Обнаружено: 320,0943.

(212с) получают из 211е тем же способом, что и соединение 212е, в виде белого стеклоподобного твердого вещества (595 мг, 77%): т. пл. >250° С; [α ]

\binom{23}{D}

-153 (с 0,10, MeOH); IR (KBr) 3280, 2942, 1742, 1697, 1675, 1650, 1616, 1548, 1470, 1443, 1281, 1249, 1202, 1187, 1171; ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 5,35-5,31 (1Н, m), 4,81-4,71 (1Н, m), 4,61-4,46 (1Н, m), 3,59-3,44 (2Н, m), 3,11-2,94 (1Н, m), 2,58-2,39 (1Н, m), 2,36-2,19 (2Н, m), 2,11-1,83 (3Н, m), 1,99 (3Н, s), 1,78-1,56 (2Н, m). Аналитически рассчитано для C₁₂H₁₇N₃O₅: С, 50,88; Н, 6,05; N, 14,83. Обнаружено: С, 50,82; Н, 10 6,02; N, 14,58; MC (ES -) 282 (М-1, 100%):

Точная масса, рассчитанная для C₁₂H₁₈N₃O₅ (MH⁺), составляет: 284,1246. Обнаружено: 284,1258.

(212d) получают из 211d тем же методом, что и соединение 212е в виде бесцветных кристаллов (170 мг, 97%): т. пл. 60-100° С; [α ]

\binom{23}{D}

-103 (с 0,10, MeOH); IR (КВr) 3341, 2947,1728,1675, 1531, 1456, 1422, 1339, 1272, 1248, 1221, 1174,1122,1056,982,699; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,35 (5Н, s), 5,65 (1Н, d), 5,48-5.40 (1Н, m), 5,10 (2Н, s), 4,76-4,57 (2Н, m), 3,49-3,30 (2Н, m), 2,92-2,59 (2Н, 20 m), 2,40-2,27 (2Н, m), 1,97-1,67 (4Н, m); MC (ES -) 374 (M -1, 100%). Точная масса, рассчитанная для С₁₈Н₂₂N₃О₆ (МН⁺), составляет: 376,1509. Обнаружено: 376,1483. Точная масса, рассчитанная для C₁₈H₂₂N₃O₆Na (MNa⁺), составляет: 398,1328. Обнаружено: 398,1315.

(212е). TFA (20 мл) добавляют при перемешивании к охлаждаемому во льду раствору т-бутилового эфира 211е (4,15 г, 10,34 ммолей) в сухом СН₂Сl₂ (20 мл). Смесь держат на холоду в течение 1,5 часов, затем оставляют на 2,5 часа при комн. темп. и концентрируют. TFA удаляют путем повторяющихся упариваний растворов остатка в СH₂Сl₂/эфире и в эфире. Финальное перетирание остатка с эфиром приводит к получению 212е 3,05 г (85%) в виде белого стеклоподобного твердого вещества: т. пл. 118-126° С; [α ]

\binom{23}{D}

-70,5° (с 0,1, СН₂Сl₂. IR (KBr) 3361, 2943, 1737, 1659, 1537, 1426, 1220, 1174; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,80 (2Н, m), 7,54-7,33 (4Н, m), 8,83 (brs), 10 5,44 (1Н, m), 5,26-5,13 (1Н, m), 4,66 (1Н, m), 3,59-3,41 (1Н, m), 2,97, 2,76 (2Н, 2m), 2,36 (2Н, m), 1,98 (2Н, m), 1,75 (2Н, m). MC (ES-, m/z) 344 (M -1, 100%).

(212f) получают из 211f c 96% выходом тем же способом, что и 212е: т. пл. 120-126° С;

[α ]

\binom{23}{D}

-72,5° (с 0,1, СН₂Сl₂. IR (KBr) 3406, 2950, 1725, 1670, 1526, 1449, 1421, 1272, 1248, 1223, 1175, 761, 741; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,76 (2Н, m), 7,62-7,26 (4Н, m), 6,07, 5,76 (2Н, brs, d, d, J=2,9), 5,46, 5,36 (1Н, 2m), 4,79-4,54 (2Н, m), 4,77 (2Н, m), 4,21 (1Н, m), 3,41 (1Н, m), 2,89 (1Н, m), 2,69 (1Н, m), 2,35 (2Н, m), 1,98, 1,73 (4Н, 2m). MC(ES -, m/z) 462 (M⁺ -1, 50%), 240 (100%).

(213с) синтезировали из 212с тем же методом, что и соединение 213е, получая смесь диастереомеров (193 мг, 36%) в виде бесцветных кристаллов: IR (КВr) 3272, 1799, 1701, 1682, 1650, 1555. 1424, 1412, 1278, 1258, 1221, 1122,937; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,41-7,28 (5Н, m), 6,52 (0,5H, d), 6,38 (0,5H, d), 6,22 (0,5H, d), 5,57 (0,5H, d), 5,36 (0,5H, s), 5,10-5,05 (1H, m), 5,00-4,45 (5,5H, m), 3,19-2,84 (3Н, m), 2,72-2,56 (1H, m), 2,51-2,25 (2Н, m), 2,02 (ЗН, s), 1,98-1,70 (3Н, m), 1,66-1,56 (ЗН, m). Аналитически рассчитано для C₂₃H₂₈N₄O₇: С, 58,47; Н, 5,97; N, 11,86. Обнаружено: С, 58,37; Н, 6,09; N, 11,47. MC (ES -) 471 (М-1, 100%). Точная масса, рассчитанная для С₂₃Н₂₉N₄О₇ (МН⁺), составляет: 473,2036. Обнаружено: 473,2012. Точная масса, рассчитанная для C₂₃H₂₈N₄O₇Na (MNa⁺), составляет: 495,1856. Обнаружено: 495,1853.

(213е). Гидрид трибутилолова (2,2 мл, 8,18 ммолей) добавляют по каплям при перемешивании в атмосфере сухого азота к раствору кислоты 212е (1,95 г, 5,6 ммолей), (3S, 2RS) 3-аллилоксикарбониламино-2-бензилокси-5-оксотетрагидрофурана (Chapman, Bioorg. & Med. Chem. Lett., 2, pp. 615-618 (1992); 1,80 г 6,16 ммолей) и (Ph₃P)₂PdCl₂ (50 мг) в сухом CH₂Cl₂ (36 мл). Через 5 мин добавляют 1-гидроксибензотриазол (1,51 г, 11,2 ммолей 6,72 ммолей), затем после охлаждения (лед/Н₂О) этилдиметиламинопропил карбодиимид гидрохлорид (1,29 г, 6,72 ммоля). Через 5 мин охлаждающую баню удаляют и смесь выдерживают при комнатной температуре 4 ч, разбавляют ЕtOАс, промывают 1М НСl, насыщенным солевым раствором, насыщенным водным раствором NaHCO₃ и насыщенным солевым раствором, высушивют (MgSO₄) и концентрируют. После флэш-хроматографии (силикагель, 0-90% ЕtOАс в СН₂Сl₂ получают продукт в виде твердого вещества белого цвета (2,34 г, 78%); IR (KBr) 3499, 1792, 1658, 1536, 1421, 1279, 1257, 1123, 977, 699; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,81 (2Н, m), 7,54-7,34 (8Н, m), 7,1, 6,97, 6,89, 6,48 (2Н, m, d, J 7,7, d, J=7,5, d, J=7,6), 5,57, 5,28 (1Н, d, J=5,2, s), 5,23-5,07 (2Н, m), 4,93-4,42, 3,22-2,70, 2,51-2,26, 2,08-1,69, 1,22 (15Н, 5m). Аналитически рассчитано для C₂₈H₃₀N₄O₇· 0,5Н₂O: С, 61,87; Н, 5,75; N, 10,32. Обнаружено С, 62,02; Н, 5,65; N, 10,25.

(214с) синтезируют из 213с с помощью метода, подобного используемому для синтеза 214е из 213е, в результате получают бесцветные кристаллы (140 мг, 99%): т. пл. 90-180° С; [α ]

\binom{23}{D}

-114 (с 0,10, МеОН); IR (KBr) 3334, 3070, 2946, 1787, 1658, 1543, 1422, 1277, 1258; ¹Н ЯМР (d₆-DMSO) δ 8,66 (1Н, m), 8,18 (1Н, d), 6,76 (1Н, s), 5,08 (1Н, m), 4,68 (1Н, m), 4,30 (1Н, m), 2,92-2,70 (2Н, m), 2,27-2,06 (3Н, m), 1,95-1,72 (4Н, m), 1,85 (3Н, s), 1,58 (2Н, m); MC(ES -) 381 (М-1, 100%). Точная масса, рассчитанная для C₁₆H₂₃N₄O₇(МH⁺), составляет: 383,1567. Обнаружено: 383,1548.

(214е). Смесь 213е (2,29 г, 4,28 ммоля), 10% палладия на угле (1,8 г) и МеОН (160 мл) перемешивали под током водорода при атмосферном давлении в течение 6,3 ч. После фильтрации и концентрирования гидрогенирование повторяют со свежим катализатором (1,8 г) в течение 5 ч. После фильтрации и концентрирования остаток перетирают с диэтиловым эфиром, хорошо промывают эфиром, получая 214е в виде твердого вещества белого цвета (1,67 г, 88%): т. пл. 143-147° С; [α ]

\binom{23}{D}

-125° (с 0,2, СН₃ОН). IR (КВr) 3391, 1657,1651,1538, 1421, 1280,1258;

¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,90 (2Н, m), 7,63-7,46 (3Н, m), 5,25 (1Н, m), 5,08-4,85 (1Н, m), 4,68-4,53 (2Н, m), 4,33-4,24 (1Н, m), 3,62-3,44, 3,22-3,11, 2,75-2,21, 2,15-1,92, 1,73-1,66 (11Н, 5m). Аналитически рассчитано для C₂₁H₂₄N₄O₇· Н₂О: С, 54.54; Н, 5.67; N, 12.11. Обнаружено С, 54.48; Н, 5.63; N, 11.92.

(215с) синтезируют из 214с тем же способом, что и соединение 215е, получая смесь диастереомеров в виде белого стеклоподобного твердого вещества (398 мг, 84%): IR (КВr) 3338, 2977, 1738, 1658, 1562, 1541, 1433, 1368, 1277, 1150; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,36-7,32 (3Н, m), 6,91 (1Н, d), 6,30 (1Н, d), 5,15-5,09 (1Н, m), 5,01-4,88 (1Н, m), 4,61-4,44 (2Н, m), 4.37-4,08 (3Н, m), 3,32-3,18 (1Н, m), 3,04-2,89 (1Н, m), 2,82-2,51 (4Н, m), 2,39-2,29 (1Н, m), 2,08-1,64 (4Н, m) 2,02 (3Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₈H₃₄N₄Cl₂O₉: С, 52,26; Н, 5,64; N, 8,71. Обнаружено: С, 52,44; Н, 5,87; N, 8,16. MC (ES -) 645/3/1 (М-1, 26%), 189 (81), 134 (100). Точная масса, вычисленная для C₂₈H₃₇N₄Cl₂O₉ (MH⁺), составляет: 643,1938. Обнаружено: 643,1924. Точная масса, вычисленная для C₂₈H₃₆N₄Cl₂O₉Na (MNa⁺), составляет: 665,1757. Обнаружено: 665,1756.

(215d)) синтезируют из 214d тем же способом, что и соединение 215е, получая смесь диастереомеров в виде белого стеклоподобного твердого вещества (657 мг, 70%): IR (КВr) 3420,3361,2975,2931, 1716, 1658,1529,1434,1367,1348, 1250,1157,1083,1055; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,32 (8Н, m), 7,14 (1Н, d), 5,81 (1Н, d), 5,15 (1Н, m), 5,07 (2Н, s), 4,74-4,65 (1Н, m), 4,58-4,22 (4Н, m), 4,15-4,06 (1Н, m), 3,72 (1Н, m), 3,32-3,21 (1Н, m), 3,04-2,94 (1Н, m), 2,69-2,52 (3Н, m), 2,33-2,27 (1Н, m), 1,95-1,59 (4Н, m), 1,28 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₃₄Н₄₀N₄Сl₂O₁₀· 0,5 H₂O: С, 54,70; Н, 5,54; N, 7,50. Обнаружено: С, 54,98; Н, 5,59; N, 7,24. МС (ES -) 737/5/3 (М-1, 22%), 193/1/89 (100). Точная масса, вычисленная для C₃₄H₄₁N₄Cl₂O₁₀ (МН⁺), составляет: 735,2120. Обнаружено: 735,2181.

(215е) Гидрид трибутилолова (4,6 мл; 11,4 ммолей) добавляют по каплям при перемешивании к смеси (3S,4RS) т-бутил (N-аллилоксикарбонил)-3-амино-5-(2,6-дихлорбензоилокси)-4-гидроксипентаноата (полученного по способу, подобному описанному в Revesz et al., Tetrahedron. Lett., 35, pp. 9693-9696 (1994)) (2,64 г; 5,7 ммолей), (Ph₃P)₂PdCl₂ (50 мг), CH₂Cl₂ (100 мл) и DMF (20 мл) при комнатной температуре. Смесь перемешивают в течение еще 10 мин, затем добавляют 1-гидроксибензотриазол (1,54 г, 11,4 ммолей). Смесь охлаждают до 0° С, затем добавляют гидрохлорид этилдиметиламинопропил карбодиимида (1,31 г; 6,84 ммолей). Смесь выдерживают при этой температуре 15 мин, затем при комнатной температуре 17 ч. Смесь разбавляют ЕtOАс (300 мл), промывают 1М НСl (2× 100 мл), нас.водн. NaHCO₃(3× 100 мл) и насыщенным солевым раствором (2× 100 мл), высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Остаток очищают методом флэш-хроматографии (2-5% (МеОН/СH₂Сl₂)), получая 3,24 г (81%) 215е в виде стеклоподобного твердого вещества: т. пл. 106-110° С;

IR (КВr) 3354, 1737, 1659, 1531,1433, 1276, 1150; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,80 (2Н, dd, J=7,9 и 1,5), 7,75-7,26 (6Н, m), 7,14-6,76 (2Н, m), 5,30-5,02 (2Н, m), 4,63-20 4,11 (5Н, m), 3,44-3,26 (2Н, m), 3,10-2,30 (5Н, m), 2,10-1,60 (5Н, m), 1,44 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₃₃H₃₈N₄Cl₂O₉· 0.75 Н₂О: С, 55,12; Н, 5,54; N, 7,79; Cl, 9,86. Обнаружено: С, 55,04; Н, 5,34; N, 7,80; Cl, 10,24. MC (ES +) 709/7/5 (М+1), 378 (59), 324 (64), 322 (100).

(216с) синтезируют из 215е тем же методом, что и соединение 216е, получая стеклоподобное белое твердое вещество (300 мг, 83%): т. пл. 80-125° С; [α ]

\binom{23}{D}

-89,1 (с 1,08, СH₂СI₂); IR (КВr) 3356, 2979, 2935, 1740, 1659, 1532, 1434, 1369, 1276, 1260, 1151;

¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,39-7,32 (3Н, m), 7,13 (1Н, d), 6,34 (1Н, d), 5,22-5,17 (1Н, m), 5,11 (1Н, d), 5,04 (1Н, d), 4,99-4,88 (2Н, m), 4,64-4,52 (1Н, m), 3,29-3,11 (1Н, m), 3,05-2,67 (4Н, m), 2,39-2,29 (1Н, m), 2,02 (3Н, s), 1,98-1,75 (4Н, m), 1,46 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₂₈Н₃₄N₄Сl₂O₉: С, 52,42; Н, 5,34; N, 8,73. Обнаружено: С, 52,53; Н, 5,70; N, 7,85. MC (ES -) 643/41/39 (M-1, 100%). Точная масса, рассчитанная для С₂₈Н₃₅N₄Сl₂O₉ (МН⁺), составляет: 641,1781. Обнаружено: 641,1735. Точная масса, рассчитанная для С₂₈Н₃₄N₄Сl₂O₉Nа (MNa⁺), составляет: 663,1601. Обнаружено: 663,1542.

(216d) синтезировали из 215d тем же методом, что и соединение 216е, получая 216d в виде белого стеклоподобного твердого вещества (688 мг, 68%): т. пл. 90-170° С; [α ]

\binom{23}{D}

-83.4 (с 1,01, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3338, 2933, 1736, 1670, 1525, 1433,1417, 1368,1258, 1151, 1056, 1031; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,33 (8Н, m), 7,18 (1Н, d), 5,65 (1Н, d), 5,19 (1Н, m), 5,09 (2Н, s), 4,98-4,86 (1Н, m), 4,82-4,49 (2Н, d), 3,30-3,07 (1Н, m), 3,05-2,59 (4Н, m), 2,42-2,27 (1Н, m), 2,18-1,59 (5Н, m), 1,42 (9Н, s); MC (ES-) 737/5/3 (M, 13%), 185 (100).

(216е). Реагент Десс-Мартина (3,82 г; 9,0 ммолей) добавляют при перемешивании к раствору спирта 215е (3,17 г; 4,5 ммолей) в СН₂Сl₂ (100 мл). Смесь перемешивают в течение 1 часа, разбавляют EtOAc (300 мл), затем промывают смесью 1:1 нас. раствора Na₂S₂O₃ и нас. раствора NaHCO₃ (100 мл), затем нас. солевым раствором (100 мл). Смесь высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Остаток очищают методом флэш-хроматографии, получая 2,2 г (70%) 216е в виде бесцветного твердого вещества: т. пл. 102-107° С; [α ]

\binom{23}{D}

-82.5 (с 0,1, CH₂Сl₂); IR (KBr) 3374, 2937, 1739, 1661, 1525, 1433, 1275, 1260, 1152; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,85-7,78 (2Н, m), 7,57-7,32 (6Н, m), 7,09 (1Н, d, J=7,9), 7,01 (1Н, d, J 7,3), 5,25-5,16 (1Н, m), 5,16-5,05 (1Н, m), 5,15 (1Н, d), 5,03 (1Н, d), 4,99-4,90 (1Н, m), 4,68-4,54 (1Н, m), 3,31-3,17 (1Н, m), 3,17-2,72 (4Н, m), 2,45-2,35 (1Н, m), 2,30-1,66 (5Н, m), 1,44 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₃₃Н₃₆N₄Сl₂O₉· 0,5Н₂O: С, 55,62; Н, 5,23; N, 7,86; Cl, 9,95. Обнаружено: С, 55,79; Н, 5,15; N, 7,80; Cl 9,81. MC (ES +) 729/7/5 (M + Na), 707/5/3 (М+1), 163 (100%).

(217с) синтезировали из 216с тем же методом, что и соединение 217е, получая продукт в виде белого стеклоподобного твердого вещества (166 мг, 66%): т. пл. 85-175° С; [α ]

\binom{23}{D}

-156 (с 0,13, МеОН); IR (КВr) 3373, 2929, 1742, 1659, 1562, 1533, 1433, 1412, 1274, 1266, 1223,1197,1145, 1138; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,38 (3Н, s), 5,14-5,03 (1Н, m), 4,49-4,32 (2Н, m), 3,50-3,27 (1Н, m), 3,11-2,92 (1Н, m), 2,84-2,62 (2Н, m), 2,46-2,11 (2Н, m), 2,05-1,46 (5Н, m), 1,92 (3Н, s). Аналитически рассчитано для С₂₄Н₂₆N₄Сl₂O₉· Н₂O: С, 47,77; Н, 4,68; N, 9,29. Обнаружено: С, 47,75; N, 4,59; N, 9,07. MC (ES +) 627/5/3 (М+К, 21%), 611/9/7 (M+Na, 87), 589/7/5 (M⁺ +1, 71), 266 (100). Точная масса, рассчитанная для С₂₄H₂₇N₄Сl₂O₉(МН⁺), составляет: 585,1155. Обнаружено: 585,1134.

(217d) синтезировали из 216d тем же методом, что и соединение 217е, получая 217d в виде белого стеклоподобного твердого вещества (310 мг, 9б%): т. пл. 85-110° С; [α ]

\binom{23}{D}

-85.9 (с 0,13, MeOH); IR (KBr) 3351, 2945, 1738, 1669, 1524, 1433, 1258, 1147, 1057;¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 7,56 (4Н, m), 7,45 (5Н, m), 5,32 (2Н, m), 5,20 (2Н, s), 4,76-4,48 (3Н, m), 3,65-3,38 (3Н, m), 3,27-3,09 (2Н, m), 3,03-2,89 (2Н, m), 2,65-2,24 (3Н, m), 2,19-1,62 (5Н, m); MC (ES -) 679/7/5 (М-1, 100%); Точная масса, рассчитанная для C₃₀H₃₁N₄Cl₂O₁₀ (МН⁺). составляет: 677,1417. Обнаружено: 677,1430.

(217е) TFA (25 мл) добавляют по каплям к охлаждаемому во льду раствору эфира 216е (2,11 г, 3,0 ммоля). Смесь перемешивают 20 мин при 0° С, затем при комнатной температуре 1 час. Смесь упаривают досуха, затем три раза упаривают с эфиром. Добавляют сухой эфир (50 мл) и фильтруют, получая 1,9 г (98%) 217е в виде бесцветного твердого вещества: т. пл. 126-130° С; [α ]

\binom{23}{D}

-122,0 (с 0,1, МеОН); IR (КВr) 3322,1740, 1658, 1651, 1532, 1433, 1277, 1150; ¹H ЯМР (d₆-DMSO) δ 8,87 (1Н, d, J=7,4), 8,61 (1Н, d, J=7,8), 7,92-7,86 (2Н, m), 7,65-7,43 (6Н, m), 5,25-5,12 (3Н, m), 4,94-4,60 (2Н, m), 4,44-4,22 (1Н, m), 3,45-3,10 (1Н, m), 3,00-2,52 (3Н, m), 2,45-2,10 (3Н, m), 2,10-1,75 (2Н, m), 1,75-1,50 (2Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₉H₂₈N₄O₉· 1H₂O: С, 52.34; Н, 4.54; N, 8.42; Cl, 10.66. Обнаружено: С, 52.02; Н, 4.36; N, 8.12; Cl, 10.36. MC (ES -) 649/7/5 (M -1), 411 (100%).

(218b) получают из кислоты 212b и 99 по способу, аналогичному способу получения 215е с образованием диастереомеров (865 мг, 80%) в виде бесцветного твердого вещества: IR (KBr) 3298, 2974, 1723, 1659, 1544, 1518, 1430, 1394, 1370, 1328, 1273, 1256, 1156, 1134; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,45-7,28 (4Н, m), 7,26-7,15 (2Н, m), 5,26-5,10 (2Н, m), 4,80-4,67 (1Н, m), 4,59-4,42 (2Н, m), 3,32-3,17 (1Н, m), 2,96 (3Н, 2xs), 2,93-2,79 (1Н, m), 2,71-2,53 (4Н, m), 2,38-2,28 (1Н, m), 2,07-1,81 (4Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₈H₃₅N₅Cl₂O₉S· 0,5 Н₂О: С, 48,21; Н, 5,20; N, 10,03. Обнаружено: С,48,35; Н, 5,26; N, 9,48. MC (ES+) 714/2/0 (M + Na, 25%), 692/90/88 (M⁺ + 1, 51), 636/4/2 (38), 246 (100). Точная масса, рассчитанная для C₂₈H₃₆N₅Cl₂O₉S (MH⁺), составляет: 688,1611. Обнаружено: 688,1615.

(219b) получали из 218b по способу, аналогичному способу получения 216е, в виде не совсем белого порошка (675 мг, 81%): т. пл. 100-200° С; [α ]

\binom{23}{D}

-84,9 (с 1,01, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3336,2978, 2936,1719,1674,1510, 1433,1421, 1369,1329,1274, 1257,1155, 991, 789; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,47-7,38 (4Н, m), 7,24 (1Н, d), 5,61-5,53 (1Н, m), 5,48 (1Н, d), 5,38-5,30 (1Н, m), 4,67-4,45 (2Н, m), 3,48-3,18 (2Н, m), 3,04-2,90 (2Н, m), 2,97 (3Н, s), 2,69-2,54 (1Н, m), 2,42-2,32 (1Н, m), 2,22-2,15 (1Н, m), 2,07-1,93 (3Н, m), 1,71-1,65 (2Н, m), 1,38 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₈H₃₃N₃Cl₂O₉S: С, 48,98; Н, 4,84; N, 10,20; S, 4,67. Обнаружено: С, 48,73; Н, 4,95; N, 9,65; S, 4,54. MC (ES +) 692/90/88 (M⁺ + 1, 100%), 636/4/220 (71). Точная масса, рассчитанная для C₂₈H₃₄N₅Cl₂O₉S (МН⁺), составляет: 686,1454. Обнаружено: 686,1474.

(220b) получают из 219b по способу, аналогичному способу получения 217е в виде бледно-кремового порошка (396 мг, 87%): т. пл. 100-200° С; [α ]

\binom{27}{D}

-129 (с 0,12, МеОН); IR (KBr) 3310, 3153, 1713, 1667,1557,1510,1432,1421,1329, 1273,1258,1221,1193, 1153, 1134, 992, 789; ¹H ЯМР (d₆-DMSO) δ 7,88 (1Н, s), 7,81-7,60 (4Н, П1), 5,49-5,28 (1Н, m), 5,24-5,14 (1Н, 5 m), 4,46-4,22 (2Н, m), 3,30-3,03 (2Н, m), 2,97-2,76 (3Н, m), 2,96 (3Н, s), 2,46-2,24 (1Н, m), 2,16-2,05 (1Н, m), 2,03-1,78 (3Н, m), 1,68-1,46 (2Н, m); MC (ES-) 632/30/28 (M -1, 68%), 149/7/5 (100). Точная масса, рассчитанная для С₂₄Н₂₆N₅Сl₂O₉S (МH⁺), составляет: 630,0828. Обнаружено: 630,0852.

(221b) получают из кислоты 212b и (3S,4RS) т-бутил N-(аллилоксикарбонил)-3-амино-4-гидрокси-4-(5,7-дихлоробензоксазол-2-ил)бутаноата (204) по способу, аналогичному способу получения соединения 215е, с образованием смеси диастереомеров (460 мг, 70%) в виде стеклоподобного вещества: IR (пленка) 3325, 1725, 1664, 1453, 1399, 1373, 1327, 1274, 1256, 1155; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,57 (1Н, m), 7,36 (2Н, m), 6,06 (1Н, t), 5,29 (2Н, m), 4,79 (1Н, m), 4,47 (1Н, m), 3,23 (1Н, m). 2,97 и 2,94 (3Н объединенный, 2xs), 2,9-2,4 (4Н. m), 2,30 (1Н, m), 1,96 (4Н, m), 1,41 и 1,37 (9Н объединенный, 2xs). МС ES Da/e 660 (M -1)^-Cl³⁵ 100%,662(М-1)^-Сl³⁷.

(221е) получают из кислоты (212е) и (3S, 4RS) т-бутил N-(аллилоксикарбонил)-3-амино-4-гидрокси-4-(5,7-дихлорбензоксазол-2-ил)бутаноата (204) по способу, аналогичному способу получения соединения 215е с образованием смеси диастереомеров (613 мг, 87%) в виде стеклоподобного вещества: IR (пленка) 3328, 1729, 1660, 1534, 1454, 1422, 1399, 1276, 1254, 1155; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,80 (2Н, d), 7,60-7,35 (5Н, m), 7,05 (2Н, m), 5,13 (3Н, m), 4,74 (1Н, m), 4,51 (1Н, m), 3,25 (1Н, m), 3,1-2,6 (5Н, m), 2,33 (1Н, m), 2,1-1,5 (5Н, m), 1,43 и 1,41 (9Н объединенный, 2xs). MC ES Da/e 688 (M+1)⁺ Cl³⁵ 55%, 690 (M+1)⁺ Сl³⁷35%, 328 100%.

(222b) получают из 221b no способу, аналогичному способу получения 216е в виде бесцветного стеклоподобного вещества (371 мг, 86%): [α ]

\binom{26}{D}

-81,0 (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3324, 2979, 2936, 1726, 1664, 1394, 1370, 1328, 5 1155, 991; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,78 (1Н, d), 7,57 (2Н, m), 5,87 (1Н, d), 5,69 (1Н, m), 5,47 (1Н, m), 4,55 (2Н, m), 3,24 (2Н, m), 3,0 (5Н, m + s), 2,59 (1Н, m), 2,39 (1Н, m), 2,2 -1,7 (4Н, m), 1,65 (1Н, m), 1,40 (9Н, s).

(222е) получают из 221е по способу, аналогичному способу получения 216е в виде бесцветного стеклоподобного вещества (480 мг, 84%): [α ]

\binom{25}{D}

-86,4° (с 0,1 СН₂Сl₂); IR (KBr) 3337,2978,2938, 1728, 1657, 1534, 1456,1422, 1395, 1370, 1277,1250,1154; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,80 (3Н, m), 7,50 (4Н, m), 7,20 (1Н, d), 7,02 (1Н, d), 5,60 (1Н, m), 5,28 (1Н, m), 5,15 (1Н, m), 4,11 (1Н, m), 3,34 (2Н, m), 2,96 (3Н, m), 2,40 (1Н, m), 2,20 (1Н, m), 1,92 (2Н, m), 1,67 (2Н, m), 1,38 (9Н, s). MC ES^-Da/e 684 (M -1)^-Cl³⁵ 47%, 686 (M -1)^-Cl³⁷ 32%.

(223b) получают из 222b no способу, аналогичному способу получения 217е в виде не совсем белого твердого вещества (257 мг, 78%): [α ]

\binom{25}{D}

-105.7° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3321, 1723, 1663, 1407, 1325, 1151, 992; ¹Н ЯМР (d₆-DMSO) δ 8,96 (1Н, d), 8,18 (1Н, d), 7,96 (1Н, d), 5,50 (1Н, m), 5,15 (1Н, m), 4,30 (2Н, m), 3,06 (2Н, m), 2,87 (5Н, m +s), 2,29 (1Н, m), 1,99 (4Н, m), 1,56 (2Н, m).

(223е) получают из 222е по способу, аналогичному способу получения 217е в виде бледно-кремового твердого вещества (311 mg, 78%): т. пл. 167-180° С; [α ]

\binom{23}{D}

-88,6° (с 0,1 CH₂Cl₂); IR (KBr) 3331, 1724, 1658, 1534, 1458, 1421, 1279, 1256,991; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,77 (4Н, m), 7,4 (5Н, m), 5,57 (1Н, bs), 5,33 (1Н, bs), 5.47 (1Н, q), 4,56 (1Н, bd), 3,60 (2Н, ro), 3,20 (3Н, m), 2,76 (1Н, m), 2,36 (1Н, dd), 2,0 (3Н, m), 1,66 (1Н, m). MC ES Da/e 628 (M -1)^-Сl³⁵ 7%, 630 (M -1)^-Сl³⁷ 2,3%, 584 100%.

(224e). 1-Гидроксибензотриазол (0,23 г, 1,71 ммоля) и гидрохлорид этил диметиламинопропилкарбодииимида добавляют при перемешивании к раствору кислоты 212е (0,295 г, 0,853 ммолей) в THF (5 мл). Через 5 мин добавляют воду (0,5 мл), затем через 7 мин добавляют раствор (3S) т-бутил-3-аллилоксикарбониламино-5-(2-хлор-фенил)метилтио-4-оксопентаноата (123, 0,478 г, 1,02 ммоля) и (РРh₃) PdCl₂ (20 мг) в THF (2 мл). Гидрид трибутилолова (0,65 мл, 2,33 ммолей) добавляют по каплям в течение 20 мин. Смесь выдерживают в течение 4,5 ч, затем разбавляют ЕtOАс, промывают 1М НСl, нас. солевым раствором, нас.водным раствором NaHCO₃ и затем опять нас. солевым раствором. Смесь высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Остаток перетирают несколько раз с гексаном, который декантируют и выбрасывают, затем очищают методом флэш-хроматографии (10-100% ЕtOАс в CH₂Cl₂) и получают 0,2 г (35%) белого стеклоподобного твердого вещества: т. пл. 70-72° С; [α ]

\binom{26}{D}

-82,5° (с 0,02, СН₂Сl₂), IR (КBr) 3404, 1726, 1660, 1534, 1524, 1422, 1277, 1254, 1154; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,83-7,78 (2Н, m), 7,7, 7,75-7,32, 7,26-7,20 (7Н, 3m), 7,12 (1Н, d, J=8,2), 7,01 (1Н, d, J=7,3), 5,23-5,08 (2Н, m), 5,03-4,94 (1Н, m), 4,62 (1Н, dt, J=14,5), 3,78 (2Н, m), 3,38-3,29 (1Н, m), 3,26 (2Н, s), 3,06-2,82 (4Н, m), 2,71 (1Н, dd, J=17,2, 4,5), 2,39 (1Н, dd, J=13,2, 6,5), 2,15-1,83, 1,73-1,63 (5Н, m), 1,45 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₃₃Н₃₉N₄СlO₇S: С, 59,05; Н, 5,86; N, 8,35. Обнаружено: С, 59,00; Н, 5,80; N, 7,92.

(225е) получают из кислоты 212е и (3S) т-бутил N-(аллилоксикарбонил)-3-амино-5-(2-хлорфенилметилокси)-4-оксопентаноата (201), используя способ, подобный способу получения 224е, с образованием 40 мг (23%) стеклоподобного твердого вещества: ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,83-7,73 (2Н, m), 7,67-7,10 (9Н, m), 5,23-5,09 (2Н, m), 4,59 (1Н, m), 4,45-4,22 (2Н, m), 3,7-3,19, 3,08-2,72, 2,71-2,47, 2,05-1,85, 1,72-1,61, 1,45-1,26 (2pH, 6m).

(226е) получают из 224е по способу, аналогичному способу получения соединения 217е, с образованием 0,22 г (81%) не совсем белого твердого вещества: т. пл. 95-100° С; [α ]

\binom{23}{D}

-95,6° (с 0,2, СН₂Сl₂), IR (КВr) 3393, 1720, 1658, 1529, 1422, 1279; ¹Н ЯМР (d₆-DMSO) δ 8,80 (1Н, d. J=7,5), 7,89 (2Н, m), 7,7 (1Н, d, J=7,7), 7,56-7,28 (7Н, m), 5,10 (1Н, m), 4,87-4,73 (2Н, m), 4,39 (1Н, m), 3,77 (2Н, m), 3,44, 3,35 (2Н, +0,2m), 2,97-2,56, 2,2, 1,92, 1,61 (11Н, 4m). Аналитически рассчитано для C₂₉H₃₁N₄ClO₇S· 0,5 Н₂О: С, 55,02; Н, 5,10; N, 8,85. Обнаружено: С, 55,00; Н, 5,09; N, 8,71.

(227е) получают из 225е по способу, аналогичному способу получения соединения 217е. Продукт дополнительно очищают методом флэш-хроматографии (0-5% МеОН/СН₂Сl₂), получая 19 мг (81%) стеклоподобного твердого вещества: ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,79 (2Н, m), 7,66-7,18 (9Н, m), 5,30-5,10 (2Н, m), 4,85 (1Н, m), 4,65 (2Н, m), 4,53 (1Н, m), 4,28 (2Н, m), 3,28, 3,01, 2,72, 2,33, 1,94, 1,60 (11Н, 6m). MC (ES, m/z) 597 (М⁺ -1, 100%).

(228е). 1-Гидроксибензотриазол (0,23 г, 1,68 ммоля) и, затем гидрохлорид этилдиметиламинопропил карбодиимида (0,21 г, 1,09 ммоля) добавляют при перемешивании к раствору кислоты 212е (0,29 г, 0,84 ммоля) в СН₂Cl₂ (3 мл) при комн. темп. Смесь выдерживают 10 мин, затем добавляют раствор (3RS, 4RS) т-бутил 3-амино-5-фтор-4-гидроксипентаноата (Revesz, L. et al. Tetrahedron Lett., 52, pp. 9693-9696 (1994); 0,29 г, 1,40 ммоля) в СН₂Сl₂ (3 мл), затем 4-диметиламинопиридин (10 мг). Раствор перемешивают 17 ч, разбавляют ЕtOАс, промывают 1М НСl, нас. солевым раствором, нас.водным раствором NаНСО₃ и затем опять нас. солевым раствором, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Остаток очищают методом флэш-хроматографии (50-100% ЕtOАс/ СН₂Сl₂ и 5% MeOH/EtOAc), получая 0,25 г (56%) белого стеклоподобного твердого вещества: IR (KBr) 3343, 1726, 1658, 1536, 1426, 1279, 1257, 1157; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,84-7,79 (2Н, m), 7,57-7,40 (3Н, m), 7,05-6,92, 6,73 (2Н, 2m), 5,17-5,04 (2Н, m), 4,56, 4,35-4,21, 4,04 (5Н, 3m), 3,36, 3,09-2,34, 2,00 (11Н, 3m), 1,46 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₆H₃₅FN₄O₇· 0,5 Н₂О: С, 57,45; Н, 6,65; N, 10,31. Обнаружено: С, 57,64; Н, 6,56; N, 10,15.

(229е) получают из 228с по способу, аналогичному способу получения соединения 216е. После очистки методом флэш-хроматографии (30-50% ЕtOАс/СН₂Сl₂) продукт получают в виде белого стеклоподобного твердого вещества (0,194 г, 89%): IR (KBr) 3376, 1728, 1659, 1529,1424,1279,1256, 1156.

(230е) получают из 229е по способу, аналогичному способу получения соединения 217е, с образованием 230е в виде белого стеклоподобного твердого вещества (100%): т. пл. 105-125° С; [α ]

\binom{23}{D}

-91,4° (с 0,72, СН₃ОН), IR (KBr) 3336, 1789, 1737, 1659, 1535, 1426, 1279, 1258, 1186; ¹H ЯМР (СD₃ОD) δ 7,71-7,68 (2Н, m), 7,37-7,23 (3Н, m), 5,02, 4,88-4,63, 4,37-4,0 (6Н, 3m), 3,30, 2,97, 2,68-2,60, 2,37-1,54 (11Н, 4m). MC (ES -, m/z) 475 (М⁺ -1, 100%).

(231е). Метиловый эфир N-флюоренилметилокси-карбонил-3-амино-3-цианопропионовой кислоты (EP 0547699 A1, 385 мг, 1,1 ммоля) обрабатывают 17 мл диэтиламина. После 1,5 часов перемешивания при комнатной температуре раствор концентрируют. Остаток хроматографируют на силикагеле (3% метанол в CH₂Cl₂) и получают свободный амин в виде бледно-желтого масла. К раствору этого масла и гидроксибензотриазола (297 мг, 2,19 ммоля) в DMF (5 мл) добавляют при 0° С этилдиметиламинопропил карбодиимид (232 мг, 1,21 ммоля, 1,1 эквив.), затем (IS, 9S) 9-(бензоиламино)-[6, 10-диоксо-1,2,3,4,7,8,9,10-октагидро-6Н-пиридазино[1,2-а] [1,2]диазепин-1-карбоновую кислоту (212е). После перемешивания в течение 5 мин при 0° С и затем в течение ночи при комнатной температуре, смесь разбавляют СН₂Сl₂ (50 мл) и получившийся раствор промывают последовательно 1М НСl (2× 30 мл), H₂O (30 мл), 10% NаНСО₃ (2× 30 мл) и нас. водн. NaCl, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. После очистки методом флэш-хроматографии (3% метанол в СН₂Сl₂) получают соединение 231е (404 мг, 83%) в виде твердого вещества: [α ]

\binom{20}{D}

-121° (с 0,14, СН₂Сl₂) ¹H ЯМР (СDСl₃) δ 7,40-7,83 (5Н, m), 7,38 (1Н, d), 6,96 (1H, d), 5,27-5,07 (2H, m), 4,66-4,50 (1H, m), 3,79 (3H, s), 3,23-2,73 (6Н, m), 2,47-2,33 (1H, m), 2,15-1,82 (4Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₂H₂₅N₅O₆: С, 58,0; Н, 5,53; N, 15,38. Обнаружено: С, 57,6; Н, 5,6; N, 15,0.

(232е). Раствор метилового эфира 231е (400 мг, 0,88 ммоля) в метаноле (30 мл) и воде (30 мл) охлаждают до 0° С и обрабатывают диизопропилэтиламином. Раствор перемешивают при 0° С в течение 10 мин и затем в течение ночи при комнатной температуре. Гетерогенную смесь концентрируют и полученное твердое вещество подвергают хроматографии на силикагеле (5% метанол/1% муравьиная кислота в СН₂Сl₂), получая свободную кислоту 232е (170 мг, 44%) в виде белого твердого вещества: т. пл. 155° С (разл.); [α ]

\binom{20}{D}

-117° (с 0,1, МеОН); IR (KBr) 3343, 3061, 2955, 1733, 1656, 1577, 1533, 1490, 1421, 1342, 1279, 1256, 1222, 1185,708; ¹Н ЯМР (D⁴-MeOH) δ 7,88-7,28 (5Н, m), 5,20-5,03 (1H, m), 4,98-4,84 (2H, m), 4,75-4,53 (1H, m), 4,51-4,34 (1H, m), 3,45-3.22 (1H, m), 3,14-2,94 (1H, m), 3,14-2,94 (1H, m), 2,88-2,61 (2H, m), 2,53-1,50 (8Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₁H₂₃N₅O₆· 1,5 Н₂O: С, 53,84; Н, 5,59; N, 14,95; О, 25,61. Обнаружено: С, 54,3; Н, 5,4; N, 14,3.

(233е). К раствору (1S,9S) 6, 10-диоксо-1,2,3,4,7,8,9,10-октагидро-9-(бензоиламино)-6Н-пиридазино[1,2-а] [1,2]диазепин-1-карбоновой кислоты (212е) (345 мг, 10 ммолей), (208а) (361 мг, 1,1 ммоля, 1,1 экв.) и (Рh₃Р)₂РdСl₂ (20 мг) в СН₂Сl₂ (5 мл), добавляют по каплям н-Вu₃SnН (0,621 мл, 2,3 ммоля, 2,1 экв.). Полученный оранжево-коричневый раствор перемешивают при 25° С в течение 10 мин и затем добавляют 1-гидроксибензотриазол (297 мг, 2,2 ммоля, 2 экв.). Смесь охлаждают до 0° С и добавляют этилдиметиламинопропил карбодиимид (253 мг, 1,3 ммоля, 1,2 экв.). После перемешивания при 0° С в течение 10 мин и затем в течение ночи при комнатной температуре, смесь разбавляют ЕtOАс (50 мл) и полученный раствор промывают последовательно 1М НСl (3× 25 мл), 10% NaHCO₃ (3× 25 мл) и нас.водн. NaCl, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. После флэш-хроматографии на силикагеле (2-10% метанол в СН₂Сl₂) получают соединение 233е (280 мг, 49%) в виде рыжевато-коричневого твердого вещества: [α ]

\binom{20}{D}

-95 (с 0,09, МеОН); IR (КВr) 3477, 3333,2968, 2932, 1633,1580, 1535, 1423, 1378, 1335, 1259, 1156, 1085, 709; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 9,32 (1Н, s), 7,83-7,39 (6Н, m), 7,11-7,09 (1Н, m), 6,30-5,30 (2Н, brs), 5,17-5,05 (2Н, m). 4,62-4,38 (2Н, m), 3,30-3,15 (1Н, m), 3,13-2,65 (2Н, m), 2,46-2,19 (3Н, m), 2,15-1,54 (8Н, m), 1,42 (9Н, s).

(236е) получают по способу, аналогичному способу получения 233е, используя (4R) т-бутил N-аллилоксикарбонил-4-амино-5-оксо-пентаноат семикарбазон (208b, 435 мг, 1,33 ммоля). Продукт получают в виде пены (542 мг, 71%): [α ]

\binom{20}{D}

-99° (с 0,19, СНСl₃); IR (КВr) 3473,3331, 3065, 2932,2872,1660,1580,1533,1488,1423,1370,1337,1278, 1254, 1223, 1155, 1080, 1024, 983, 925, 877, 846, 801, 770, 705; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 9,42 (1Н, s), 7,81 (2Н, d), 7,51-7,40 (4Н, m), 7,06 (1Н, d), 6,50-5,50 (2Н, broad s), 5,25-5,00 (2Н, m), 4,60-4,45 (2Н, m), 3,15-2,85 (2Н, m), 2,75-2,35 (1H, m), 2,30-1,23 (11H, m), 1,42 (9H, s).

(234е). Раствор семикарбазона 233е (390 мг, 0,68 ммоля) в метаноле (10 мл) охлаждают до 0° С и затем обрабатывают 38% водн. раствором формальдегида (2 мл) и 1М НСl (2 мл). Затем реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Раствор концентрируют до удаления метанола. Водн. раствор экстрагируют ЕtOАс (30 мл). Органический раствор промывают последовательно 10% NaHCO₃ (30 мл) и нас.водн. NaCl (30 мл), высушивают (MgSO₄) и концентрируют. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (2-5% метанол в СН₂Сl₂) получают 234е (179 мг, 51%) в виде белой пены: [α ]

\binom{20}{D}

-101° (с 0,064, МеОН); IR (КВr) 3346, 2976, 2934, 1730, 1657, 1535, 1456, 1425, 1278, 1255, 1156, 708; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 9,56 (1Н, s), 7,88-7,38 (5Н, m), 7,01 и 6,92 (2Н, 2d), 5,27-5,08 (2Н, m), 4,69-4,46 (1Н, m), 3,50-3,27 (2Н, m), 3,15-2,73 (2Н, m), 2,46-1,83 (10Н, m), 1,45 (9H, s).

(237е) получают из 236е по способу, аналогичному способу получения 234е, с образованием белой пены (390 мг, 85%): [α ]

\binom{20}{D}

-113° (с 0,242, СНСl₃); IR (КВr) 3352, 3065,2974, 1729, 1657,1536,1489,1454, 1423, 1369,1338,1278,1255, 1223, 1156,1078, 1026,981,846,709.

(235е). Раствор т-бутилового эфира 234е (179 мг, 0,35 ммолей) в сухом СН₂Сl₂ (3 мл) охлаждают до 0° С и обрабатывают трифторуксусной кислотой (2 мл). Полученный раствор перемешивают при 0° С в течение 30 мин и затем 2 ч при комнатной температуре. Раствор концентрируют, остаток помещают в сухой СН₂Сl₂ (5 мл) и смесь снова концентрируют. Процесс повторяют еще раз с новой порцией СН₂Сl₂ (5 мл).

Полученный остаток кристаллизуют из диэтилового эфира. Осадок собирают и очищают на колонке с силикагелем (5% метанол в СН₂Сl₂), получая соединение 235е в виде твердого вещества белого цвета (111 мг, 70%): т. пл. 142° С (разл.); [α ]

\binom{20}{D}

-85,5 (с 0,062, MeOH); IR (KBr) 3409, 3075, 2952, 1651, 1541, 1424, 1280, 1198, 1136,717; ¹Н ЯМР (d₆-DMSO) δ 9,40 (1Н, s), 8,62 (2Н, m), 7,96-7,38 (5Н, m), 5,19-5,02 (1Н, m), 4,98-4,79 (1Н, m), 4,48-4,19 (1Н, m), 3,51-3,11 (2Н, m), 3,04-2,90 (2Н, m), 2,38-1,46 (10Н, m).

(238е) получают из 237е тем же способом, что и 235е, в виде бежевой пены (190 мг, 60%): [α ]

\binom{20}{D}

-78 (с 0,145, МеОН); IR (КВr) 3400, 3070,2955, 2925, 2855, 1653, 1576, 1541, 1490, 1445,1427,1342,1280, 1258, 1205, 1189,1137,1075, 1023, 983, 930,878,843, 801, 777, 722; ¹Н ЯМР (d₆-DMSO) δ 9,40 (1Н, s), 8,72-8,60 (2Н, m), 7,89 (2Н, d), 7,56-7,44 (3Н, m), 5,17 (1Н, m), 4,90-4,83 (1Н, m), 4,46-4,36 (1Н, m), 4,20-4,15 (1Н, m), 3,40-3,30 (1Н, m), 2,98-2,90 (2Н, m), 2,50-1,60 (10Н, m).

(243) получают из (IS, 9S) т-бутил 9-амино-октагидро-10-оксо-6Н-пиридазино [1,2-а] [1,2] диазепин-1-карбоксилата (Attwood, et al., J. Chem. Soc. Perkin 1. pp. 1011-19 (1986)), по способу, описанному для 211е, с образованием 2,03 г (86%) бесцветной пены: [α ]

\binom{25}{D}

-15,9° (с 0,5, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3400, 2976, 2937, 1740, 1644, 1537, 1448, 1425, 1367, 1154; ¹H ЯМР (СDСl₃) δ 7,88-7,82 (2Н, m), 7,60-7,38 (4Н, m), 5,48 (1Н, m), 4,98 (1Н, m), 3,45 (1Н, m), 3,22-2,96 (2Н, m), 2,64 (1Н, m), 2,43-2,27 (2Н, m), 1,95 (2Н, m), 1,82-1,36 (4Н, m), 1,50 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₂₁H₂₉N₃O₄· 0,25 Н₂О: С, 64,35; Н, 7,59; N, 10,72. Обнаружено: С, 64,57; Н, 7,43; N, 10,62. МС (ES⁺, m/z) 388 (100%, M⁺ + 1).

(244) получают из (IS, 9S) т-бутил 9-бензоиламино-октагидро-10-оксо-6Н-пиридазино-[1,2-а][1,2]диазепин-1-карбоксилата (243), по способу, описанному для 212е, с образованием 1,52 г (89%) белого порошка: т. пл. 166-169° С (разл.); [α ]

\binom{25}{D}

-56,4° (с 0,5, СН₃ОН); IR (KBr) 3361, 2963, 2851, 1737, 1663, 1620, 1534, 1195, 1179; ¹H ЯMP (d₆-DMSO) δ 12,93 (1Н, brs), 8,44 (1Н, d, J=8,4), 7,93 (2Н, m), 7,54 (3Н, m), 5,46 (1Н, m), 4,87 (1Н, m), 3,12 (2Н, m), 2,64 (1Н, m), 2,64 (1Н, m), 2,27 (1Н, m), 1,98-1,68 (7Н, m), 1,40 (1Н, m). Аналитически рассчитано для С₁₇Н₂₁N₃O₄· 0,25 Н₂О: С, 60,79; Н, 6,45; N, 12,51. Обнаружено: С, 61,07; Н, 6,35; N, 12,55. MC (ES+, m/z) 332 (58%, М⁺ + 1), 211 (100).

(245) получают из (IS, 9S) 9-бензоиламино-октагидро-10-оксо-6Н-пиридазино [1, 2-а] [1, 2] -диазепин-1-карбоновой кислоты (244), по способу, описанному для 213е, с образованием 601 мг (76%) бесцветной пены: IR (KBr) 3401, 2945, 1794, 1685, 1638, 1521, 1451, 1120; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,87-7,77 (2Н, m), 7,57-7,14 (10Н, m), 5,59-5,47 (2Н, m), 4,97-4,32 (4Н, m), 3,27-1,35 (14Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₈H₃₂N₄O₆· 0,5 H₂O: С, 63,50; Н, 6,28; N, 10,58. Обнаружено: С, 63,48; Н, 6,14; N, 10,52. MC (ES +, m/z) 521 (100%,M⁺+1).

(246) получают из [3S, 2RS (1S,9S)]N-(2-бензилокси-5-оксотетрагидрофуран-3-ил)-9-бензоиламино-октагидро-10-оксо-6Н-пиридазино [1,2-а] [1,2] диазепин-1-карбоксамида (245), по способу, описанному для 214е, с образованием 396 мг (84%) белого порошка: т. пл. 110-115° С; [α ]

\binom{26}{D}

-126,3° (с 0,2, СН₃ОН); IR (КВr) 3345, 2943, 1787, 1730, 1635, 1578, 1528, 1488, 1450, 1429; ¹Н ЯМР (СD₃OD) δ 7,88 (2Н, m), 7,48 (3Н, m), 5,55 (1Н, m), 4,91 (1Н, m), 4,56 (1Н, m), 4,29 (1Н, m), 3,41-3,05 (3Н, m), 2,76-2,41 (3Н, m), 2,28-2,01 (3Н, m), 1,86-1,65 (4Н, m), 1,36 (1Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₁H₂₆N₄O₆· 1,25 Н₂О: С, 55,68; Н, 6,34; N, 12,37. Обнаружено: С, 55,68; Н, 6,14; N, 12,16. MC (ES -, m/z) 429 (100%, M⁺-1).

(247). н-бутиллития (1,6 М в гексане) (22,3 мл, 35,7 ммолей) добавляют по каплям в течение 20 мин к раствору (2R)-(-)-2,5-дигидро-3,6-диметокси-2-(1-метилэтил)пиразина (5,8 мл, 6,0 г, 32,4 ммолей) в THF (250 мл), охлажденному до -75° С, с такой скоростью, чтобы поддерживать температуру ниже -72° С. Реакционную смесь перемешивают 1 час при -75° С и добавляют раствор 2,6-ди-т-бутил-4-метоксифенил-2-бутеноата (Suzuck et al. Liebias Ann. Chem. pp. 51-61 (1992)) (9,9 г, 32,5 ммолей) в THF (60 мл) в течение 30 минут, поддерживая при этом температуру ниже -72° С. Реакционную смесь выдерживают 1,5 часа при -75° С, затем добавляют раствор ледяной уксусной кислоты (6 мл) в THF (25 мл) при -75° С, и раствор нагревают до комнатной температуры. Этот раствор выливают в 10% NH₄Cl (300 мл) и экстрагируют диэтиловым эфиром (3× 250 мл). Объединенные органические фазы промывают нас. солев. раствором (2× 200 мл), высушивают над Na₂SO₄ и упаривают досуха при пониженном давлении. Полученное масло очищают методом флэш-хроматографии на силикагеле (20% гептан в СН₂Сl₂), с образованием указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого масла (13,5 г, 85%): [α ]

\binom{20}{D}

-64° (с 0,22, МеОН); IR (КВr) 2962, 2873, 2840, 1757, 1697, 1593, 1460, 1433, 1366,1306,1269,1236, 1187, 1157, 1126, 1063,1038, 1011, 970, 924,892,867,846, 831, 797, 773, 754; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 6,85 (2Н, s), 4,21 (1Н, 1, J=3,5), 3,98 (1Н, t, J=3,5), 3,79 (3Н, s), 3,71 (3Н, s), 3,69 (3Н, s), 3,15 (1Н, dd, J 17,8, 7,9), 2,86-2,81 (1Н, m), 2,58 (1Н, dd, J=17,8, 5,9), 2,28-2,19 (1Н, m), 1,33 (18Н, s), 1,02 (3Н, d, J=6,8), 0,70 (6Н, dd, J=13, 6,8).

(248). Раствор (247) (22,4 г, 45,8 ммолей) в ацетонитриле (300 мл) и 0.25N НСl (366 мл, 2 экв.) перемешивают в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 4 дней. Ацетонитрил упаривают при пониженном давлении и к водной фазе добавляют диэтиловый эфир (250 мл). рН водной фазы доводят до рН 8-9 концентрированным раствором аммиака (32%), и фазы разделяют. Водную фазу экстрагируют диэтиловым эфиром (2× 250 мл). Объединенные органические фазы высушивают над Na₂SO₄ и упаривают досуха при пониженном давлении. Полученное масло очищают методом флэш-хроматографии на силикагеле (2% метанол в СН₂Сl₂), с образованием целевого продукта в виде светло-желтого масла (8,2 г, 45%): [α ]

\binom{20}{D}

+20° (с 0,26, МеОН); IR (KBr) 3394, 3332, 3000, 2962, 2915, 2877, 2838, 1738, 1697, 1593, 1453, 1430, 1419, 1398,1367, 1304, 1273, 1251, 1221, 1203, 1183, 1126, 1063, 1025, 996, 932, 891, 866, 847, 800, 772, 745;

¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 6,85 (2Н, s), 3,79 (3Н, S), 3,74 (3Н, s), 3,72-3,69 (1Н, m), 3,05-2,85 (1Н, m), 2,67-2,50 (2Н, m), 1,32 (18H, s), 0,93 (3Н, d, J=7). Аналитически рассчитано для C₂₂H₃₅NO₅: С, 67,15; Н, 8,96; N, 3,5. Обнаружено: С, 67,20; Н, 9,20; N, 3,70.

(249). Раствор (2S, 3S)-5-[2,6-ди-т-бутил-4-метоксифенил]3-метилглутамата (248) (8,0 г, 20,3 ммолей) в 5N НСl (200 мл) нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь упаривают досуха при пониженном давлении. Остаток растворяют в циклогексане (× 4) и упаривают досуха (х4), получая твердое вещество белого цвета (7,9 г, 93%): т. пл. 230°С; [α ]

\binom{23}{D}

+22° (с 0,27, МеОН); IR (КВr) 3423,2964, 1755, 1593, 1514,1456, 1421, 1371, 1303,1259,1201,1179,1138, 1106, 1060, 966, 926, 861, 790, 710; ¹H ЯМР (MeOD) δ 6,76 (2Н, s), 4,02 (1Н, d, J=3,7), 3,67 (3Н, s), 3,05-2,85 (1Н, m), 2,80-2,55 (2Н, m), 1,22 (18H, s), 1,09 (3Н, d, J=6,3); ¹³С ЯМР (MeOD) δ 174,5, 171,4, 158,6, 145,2, 143,1, 113,2, 58,3, 56,3, 39,8, 36,9, 32,5, 16,6. Аналитически рассчитано для C₂₁H₃₄ClNO₅: С, 60,64; Н, 8,24; N, 3,37. Обнаружено: С, 60,80; Н, 8,40; N, 3,40.

(250). Диизопропилэтиламин (4,1 мл, 3,04 г, 23,5 ммолей, 1,25 экв) и фталевый ангидрид (3,5 г, 23,6 ммолей, 1,25 экв) добавляют к раствору (2S,3S)-5-[2,6-ди-т-бутил-4-метоксифенил]3-метилглутамата (249) (7,8 г, 18,6 ммолей) в толуоле (300 мл), и полученную смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь упаривают досуха и полученное масло очищают методом флэш-хроматографии на силикагеле (2% метанол в СН₂Сl₂), получая целевой продукт в виде белой пены (8,35g, 87%): [α ]

\binom{20}{D}

-20° (с 1,04, МеОН); IR (KBr) 3480, 2968, 2880, 1753, 1721,1594, 1462, 1422, 1388, 1303, 1263,1216,1183, 1148, 1062, 1003, 933, 899, 755, 723; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,92-7,87 (2Н, m), 7,78-7,73 (2Н, m), 6,84 (2Н, s), 4,95 (1Н, d), 3,78 (3Н, s), 3,30-3,05 (2Н, m), 2,85-2,65 (1Н, m), 1,30 (18Н, s), 1,13 (3Н, d).

(251). Раствор аминокислоты (250) (1,2 г, 2,35 ммоля) в сухом диэтиловом эфире (10 мл) обрабатывают пентахлоридом фосфора (0,52 г, 2,5 ммоля) при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрируют, обрабатывают несколько раз толуолом и снова упаривают досуха. Полученный хлорид кислоты растворяют в сухом THF (5 мл) и СН₂Сl₂

(5 мл) и охлаждают до 0° С. К раствору добавляют т-бутил-1-(бензилоксикарбонил)-гексагидро-3-пиридазин-карбоксилат (0,753 г, 2,35 ммоля, 1 экв.) и N-этилморфолин (3 мл). Реакционную смесь перемешивают 30 мин при 0° С и затем в течение ночи при комнатной температуре. Смесь упаривают и к полученному остатку добавляют CH₂Cl₂(30 мл). Раствор промывают 1М НСl, водой, 10% NaHCO₃, высушивают (MgSO₄) и упаривают. Полученную белую пену очищают на силикагеле (0-2% метанол в СН₂Сl₂), получая целевое соединение 251 в виде бледно-желтого стеклоподобного твердого вещества (740 мг, 39%): [α ]

\binom{20}{D}

-22 (с 0,42, МеОН); IR (KBr) 3441, 2966, 1725, 1693,1386, 1255, 1221,1186,1154,1123, 1063, 724; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,94-7,89 (4Н, m), 7,56-7,28 (5Н, m), 6,84 (2Н, 2s), 5,29-5,20 (2Н, АВ), 4,91-4,81 (1Н, m), 4,05-3,88 (1Н, m), 3,78 (3Н, s), 3,75-3,80 (1Н, m), 3,28-2,95 (2Н, m), 2,23-1,51 (6Н, m), 1,45 (9Н, s), 1,31 (9Н, s), 1,28 (9Н, s),1,27(3H,d).

(254). Раствор защищенной кислоты (251) (715 мг, 0,893 ммоля) обрабатывали церия (IV) нитратом аммония (1,8 г, 3,3 ммоля, 3,7 экв.) в воде (3 мл) в течение 4 ч при комнатной температуре. Добавляют маннит (600 мг, 3,3 ммоля, 3,7 экв.) и смесь перемешивают 1 ч. К смеси добавляют диэтиловый эфир (50 мл) и воду (30 мл). После декантации водную фазу экстрагируют диэтиловым эфиром (4× 50 мл). Объединенную органическую фазу промывают водой, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. После хроматографии на силикагеле (10% метанол в CH₂Cl₂) получают 5-(1-бензилоксикарбонил-3-т-бутоксикарбонил-гексагидропиридазин-2-ил)карбонил-3-метил-4-фталимидопентановую кислоту (252) (360 мг, 64%): [α ]

\binom{20}{D}

-49,2 (с 0,118, МеОН). Этот продукт используют без дополнительной очистки (360 мг, 0,609 ммоля), его подвергают гидрированию в метаноле (30 мл) в течение 3 часов, используя 10% Pd/уголь (36 мг). Реакционную смесь фильтруют и полученный раствор концентрируют, получая амин (253) в виде пены (270 мг, 96%) [α ]

\binom{20}{D}

-56,1 (с 0,18 МеОН). Этот амин (253) растворяют в сухом THF (10 мл) и добавляют пентахлорид фосфора (305 мг, 1,47 ммоля, 2,5 экв.). Смесь охлаждают до -5° С и под током азота добавляют N-этилморфолин. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Смесь концентрируют и к осадку добавляют CH₂Cl₂ (20 мл), охлажденную Н₂О (20 мл), 1М НСl (20 мл). После декантации водн. фазу реэкстрагируют CH₂Cl₂ (2× 20 мл). Объединенную органическую фазу промывают 10% NaHCO₃ и водой, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Полученное масло очищают на силикагеле (1% метанол в CH₂Cl₂), получая бициклическое соединение (254) в виде твердого вещества (65 мг, 25%): [α ]

\binom{20}{D}

-77 (с 0,208, МеОН); IR (КВr) 3471, 3434, 2975, 2928, 1767, 1723, 1443, 1389, 1284, 1243, 1151, 1112, 720; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,94-7,69 (4Н, m), 5,34-5,27 (1Н, m), 4,89-4,66 (2Н, m), 3,94-3,64 (2Н, m), 3,02-2,84 (1Н, m), 2,34-2,19 (2Н, m), 1,94-1,61 (3Н, m), 1,47 (9Н, s), 1,14 (3Н, d). Аналитически рассчитано для С₂₃Н₂₇N₃O₆: С 62,57; Н, 6,17; N, 9,52. Обнаружено: С, 62,60; Н, 6,40; N, 9,10.

(255). Раствор бициклического соединения (254) (70 мг, 0,16 ммолей) в метаноле обрабатывали гидратом гидразина (0,02 мл, 4 ммолей, 2,5 экв.). После 5 ч перемешивания при комнатной температуре смесь концентрируют, к полученному остатку добавляют толуол и снова упаривают. Остаток обрабатывают 2М уксусной кислотой (2 мл) в течение 16 ч. Получившийся осадок отфильтровывают и промывают 2М уксусной кислотой (10 мл). Фильтрат подщелачивают твердым NаНСО₃ и экстрагируют ЕtOАс.Органический раствор промывают водой, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (2% метанол в СН₂Сl₂) получают свободный амин в виде пены (50 мг, 100%). Этот амин (50 мг, 0,16 ммолей) растворяют в диоксане (1 мл) и воде (0,25 мл), обрабатывают NаНСО₃(0,034 г, 0,04 ммолей) и затем бензоилхлоридом (0,047 мл, 0,40 ммолей, 2,8 экв.). Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, после чего разбавляют ЕtOАс (15 мл). Органический раствор промывают 10% NaHCO₃ и нас.водным раствором NaCl, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. После очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (2% метанол в CH₂Cl₂) получают бензамид 255 в виде пены (67 мг, 100%): ¹H ЯМР (СDСl₃) δ 7,89-7,39 (5Н, m), 6,79 (1H, d), 5,32-5,20 (1H, m), 4,98-4,82 (1H, m), 4,75-4,64 (1H, m), 3,84-3,65 (1H, m), 3,09-2,89 (1H, m), 2,45-2,18 (2H, m), 2,00-1,61 (4H, m), 1,48(9H,s), 1,28(3H,d),

(257). Раствор т-бутилового эфира 255 (67 мг, 0,16 ммоля) в CH₂Cl₂ (1 мл) обрабатывают при 0° С трифторуксусной кислотой (1 мл). Полученный раствор перемешивают при 0° С в течение 15 мин, и затем 1 ч при комнатной температуре. Раствор концентрируют, к остатку добавляют сухой СН₂Сl₂ (2× 2 мл) и смесь снова концентрируют (× 2). Остаток кристаллизуют из диэтилового эфира. Отфильтровывают осадок, получая свободную кислоту 255 в виде твердого вещества серого цвета (40 мг, 70%). Раствор кислоты (40 мг, 0,11 ммоля), N-аллилоксикарбонил-4-амино-5-бензилокси-2-оксотетрагидрофурана (Chapman, Bioorg. & Med. Chem. Lett., 2, pp. 615-18 (1992); 39 мг, 0,13 ммоля, 1,2 экв.) и по каплям n-Вu₃SnН (0,089 мл, 0,33 ммоля, 3 экв.). Полученный раствор перемешивают 10 мин при 25° С, после чего добавляют 1-гидроксибензотриазол (36 мг, 0,266 ммоля, 2,4 экв.). Смесь охлаждают до 0° С и добавляют этилдиметиламинопропил карбодиимид (31 мг, 0,16 ммоля, 1,5 экв.). После перемешивания при 0° С в течение 10 мин и затем в течение ночи при комнатной температуре, смесь разбавляют ЕtOАс (20 мл) и полученный раствор промывают последовательно 1М НСl (2× 5 мл), 10% NаНСО₃ (2× 5 мл) и нас. водным. NaCl (5 мл), высушивают (MgSO₄) и концентрируют. После флэш-хроматографии на силикагеле (2% метанол в СН₂Сl₂) получают смесь диастереомеров (256) в виде твердого вещества серого цвета (50 мг, 82%). Этот продукт (256) используют без дальнейшей очистки (50 мг, 0,091 ммоля) и гидрируют в метаноле (5 мл), используя 10% Pd/уголь (30 мг) в течение 24 часов. Реакционную смесь фильтруют и полученный раствор концентрируют. После флэш-хроматографии на силикагеле (2-20% метанола в СН₂Сl₂) получают соединение 257 (9 мг, 21%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹H ЯМР (D₄-MeOH) δ 7,88-7,29 (5Н, m), 5,18-4,99 (1H, m), 4,59-4,35 (3H, m), 4,26-4,11 (1Н, m), 3,65-3,41 (2Н, m), 3,18-2,91 (1H, m), 2,62-1,47 (8Н, m), 1,29-1,00 3H, 2d) (смесь ацеталя и полуацеталя). МС (ES -) 457.

(259). Бензилакрилат (1,13 мл, 7,34 ммоля) добавляют при перемешивании к суспензии бензоилгидразина (285) (1,0 г, 7,34 ммоля) в изопропаноле (28 мл). Смесь кипятят 20 ч с обратным холодильником, охлаждают до комнатной температуры и концентрируют. Остаток очищают методом флэш-хроматографии (20% ЕtOАс в СH₂Сl₂), получая 259 (1,098 г, 50%) в виде масла, которое кристаллизуется при стоянии: т, пл. 65° С; IR (КВr) 3283, 1723, 1644, 1316, 1201, 1156; ¹Н ЯМР(CDСl₃) δ 8,32-8,18 (1Н, m), 7,81-7,70 (2Н, m), 7,57-7,23 (8Н, m), 5,36-4,92 (1Н, brm), 5,11 (2Н, s), 3,26 (2Н, t, J=6,5), 2,59 (2Н, t, J=6,5);

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ 172,12, 167,27, 135,65, 132,54, 131,66, 128,45, 128,10, 128,06, 126,84, 66,31, 47,33, 33,31. Аналитически рассчитано для C₁₇H₁₈N₂O₃: С, 68,44; Н, 6,08; N, 9,39. Обнаружено: С, 68,42; Н, 6,10; N, 9,38. MC (ES +) 321 (M + Na, 38%), 299 (M⁺ + 1, 100).

(260). Раствор (3S)-1-бензил 3-т-бутил гексагидропиридазин-1,3-дикарбоксилата (Наssаll et al. J. Chem. Soc. Perkin 1, pp. 1451-1454 (1979)) (925,3 мг, 2,89 ммоля) и диизопропилэтиламина (0,70 мл, 4,0 ммоля) в 1,93М растворе фосгена в толуоле (17,96 мл, 34,7 ммоля) перемешивают 45 мин при комнатной температуре, затем концентрируют, получая твердое вещество желтого цвета. К этому твердому веществу добавляют толуол (18 мл), гидразид (259) (861,6 мг, 2,89 ммоля) и диизопропилэтиламин (0,70 мл, 4,0 ммоля). Смесь перемешивают 2,75 ч при комнатной температуре, затем концентрируют. Полученный остаток помещают в ЕtOАс, дважды промывают 1М НСl, нас. солевым раствором, затем высушивают (MgSO₄), фильтруют и концентрируют, получая 2,15 г неочищенного вещества. После флэш-хроматографии (40% ЕtOАс в гексане) получают 1,65 г (89%) соединения, указанного в заголовке, в виде белой пены: т. пл. 40° С; [α ]

\binom{24}{D}

-55,78° (с 0,40, СН₂Сl₂); IR (КВr) 3436, 2930, 1733, 1689, 1455, 1412 1367,1258, 1156, 697; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,54-8,23 (0.5Н, m), 7,97-7,09 (15.5Н), 5,16-4,80 (4Н, m), 4,66-4,32 (1Н, m), 4,24-3,55 (3,3H, m), 3,50-3,26 (0.4Н, m), 3,19-2,49 (2.3Н, m), 2,11-1,43 (6Н, m), 1,32-1,05 (7Н, т). Аналитически рассчитано для C₃₅H₄₀N₄O₈· 0,5 Н₂О: С, 64,31; Н, 6,32; N, 8,57. Обнаружено: С, 64,18; Н, 6,27; N, 8,56. MC (ES +) 662 (M + Na, 84%), 645 (М⁺ +1, 100), 384 (77).

(261). Раствор 260 (1,59 г, 2,47 ммоля) в МеОН (142 мл) обрабатывают 10% палладием на угле (230,0 мг) и перемешивают 1,5 ч в атмосфере Н₂. Смесь отфильтровывают и растворитель упаривают, получая 1,04 г (100%) белой пены. Это вещество используют в следующей стадии без дополнительной очистки: т. пл. <40° С; [α ]

\binom{26}{D}

+1-6° (с 0,26, СН₂Сl₂); IR (КВr) 3422, 2977, 2986, 1728, 1677, 1486, 1445, 1396, 1369, 1309, 1228, 1155, 916, 716; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 10,0-9,7 (1Н, brm), 7,86 (2Н, d, J=7,5), 7,62-7,38 (3Н, m), 7,3-5,6 (2Н, brm), 4,57 (1Н, brd, J=4,0), 4,05-3,77 (2Н, m), 3,00-2,82 (1Н, m), 2,80-2,43 (3Н, m), 2,20-2,03 (1Н, m), 2,00-1,47 (1Н, m), 1,62-1,14 (11Н, m); ¹³С ЯМР (CDCl₃) δ 175,00, 171,17, 167,62, 160,68, 132,39, 131,77, 128,67, 127,38, 82,27, 54,38, 48,04, 46,35, 33,62, 28,02, 25,68, 21,61. MC (ES +) 443 (M + Na, 68%), 421 (М⁺ + 1), 100), 365 (50), 131 (61).

(262). К раствору аминокислоты 261 (1,012 г, 2,41 ммоля) в сухом THF (26 мл) при 0° С добавляют N-этилморфолин (597 мкл, 4,69 ммоля), затем PCl₅ (651,3 мг, 3,12 ммоля). Реакционную смесь перемешивают 2 часа при 0° С, затем оставляют нагреваться до комнатн. темп. и перемешивают еще 15,5 ч. Смесь концентрируют, к полученному остатку добавляют ЕtOАс, промывают дважды 1М НСl, нас. раствором NaHCO₃, нас. солевым раствором, затем высушивают (MgSO₄), фильтруют и концентрируют. После флэш-хроматографии (20% EtOAc в CH₂Cl₂) получают 727,3 мг (75%) указанного в заголовке соединения в виде белой пены: [α ]

\binom{26}{D}

+51,0° (с 0,20, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3436, 2979, 1733, 1670, 1483, 1437, 1420, 1299, 1243, 1156; ¹H ЯМР (СDСl₃) δ 8,70 (1Н, s), 7,78 (2Н, d, J=7,0), 7,57-7,32 (3Н, m), 5,08 (1Н, dd, J=2,5, 5,5), 4,59-

4,43 (1Н, m), 4,08-3,69 (3Н, m), 3,07-2,84 (1Н, m), 2,57-2,35 (1H, m), 2,34-2,14 (1H, m), 2,07-1,43 (3Н, m), 1,48 (9H, s);

¹³C ЯМР (СDСl₃) δ 172,41, 169,04, 166,35, 158,35, 132,24, 132,03, 128,61, 127,31, 82,77, 55,41, 54,07, 41,57, 32,21, 28,04, 24,97, 20,37. Аналитически рассчитано для C₂₀H₂₆N₄O₅: С, 59,69; Н, 6,51; N, 13,92. Обнаружено: С, 59,53; Н, 6,53; N, 13,84. MC (ES +) 425 (M + Na, 71%), 403 (M⁺ + 1, 100), 145 (41).

(263). Раствор эфира 262 (720,0 мг, 1,80 ммолей) в смеси 1:1 СН₂Сl₂ и TFA (150 мл) перемешивают 1,3 ч в безводной атмосфере. Затем раствор упаривают под вакуумом, добавляют Et₂O и снова упаривают. Этот процесс повторяют шесть раз до получения неочищенного продукта в виде не совсем белого твердого вещества. Продукт очищают методом флэш-хроматографии (5% МеОН в СН₂Сl₂), получая 520,0 мг (83%) указанного в заголовке соединения в виде белой пены: [α ]

\binom{25}{D}

+59,5° (с 1,82, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3435, 3266, 2956, 1732, 1664, 1524, 1486, 1440, 1302; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 9,13 (1H, s), 7,77 (2Н, d, J=7,5), 7,57-7,32 (3Н, m), 5,27-5,16 (1H, m), 4,62-4,43 (1H, m), 5 4,09-2,70 (3Н, m), 3,14-2,89 (1H, m), 2,59-2,43 (1H, m), 2,38-2,20 (1H, m), 2,14-1,89 (1H, m), 1,82-1,59 (2Н, m); ¹³С ЯМР (CDCl₃) δ 173,65, 172,28, 166,44, 158,42, 132,44, 131,31, 128,61, 127,39, 54,83, 54,01, 42,11, 31,79, 24,42, 20,29; MC (ES -) 345 (М-Н⁺, 10 100%), 161 (45).

(264). К раствору кислоты 263 (300,0 мг, 0,87 ммоля) и (2RS,3S)-3-аллилоксикарбониламино-2-бензилокси-5-оксотетрагидрофурана (Chapman, Bioorg. & Med. Chem. Lett 2, pp. 615-18 (1992)) (277,6 мг, 0,95 ммоля) в сухом CH₂Cl₂ (2,5 мл) и в сухом DMF (2,5 мл) при комн. темп. добавляют хлорид бис(трифенилфосфин)палладия (13,0 мг), затем гидрид три-н-бутилолова (466,0 мкл, 1,73 ммоля). Реакционную смесь перемешивают 5 мин, после чего добавляют 1-гидроксибензотриазол (234,1 мг, 1,73 ммоля) и смесь охлаждают до 0° С перед добавлением гидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (204,5 мг, 1,04 ммоля). Смесь оставляют нагреваться до комн. темп. и перемешивают 16,5 ч. Смесь разбавляют ЕtOАс, промывают 1М NaHSO₄, дважды промывают нас. раствором NaHCO₃, затем Н₂O и нас. солевым раствором. Органический слой высушивают (MgSO₄), фильтруют и концентрируют. Остаток очищают методом флэш-хроматографии (5% МеОН в СН₂Сl₂), получая 358,3 мг (77%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета: IR (КВr) 3435, 1791, 1665, 1526, 1421, 1285; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,76 и 8,49 (1H, 2 xs), 7,92-7,73 (2Н, m), 7,62-7,24 (8,5H, m), 6,86 (0,5H, d, J=8,0), 5,53 и 5,33 (1Н, d, J=5,5, s), 4,95-4,34 (5Н, m), 4,04-3,54 (3Н, m), 3,03-2,64 (2Н, m), 2,49-2,14 (2Н, m), 2,11-1,46 (4Н, m); MC (ES +) 558 (M + Na, 100%), 536 (М⁺ + 1, 78), 404 (58).

(265). Смесь 264 (350,0 мг, 0,65 ммоля), 10% палладия на угле (350 мг) и метанола (36 мл) перемешивают 6,5 ч в атмосфере Н₂. Смесь фильтруют и растворитель упаривают. Добавляют Et₂O и растворитель снова упаривают. Этот процесс повторяют четыре раза до получения 283 мг (97%) указанного в заголовке соединения в виде белого кристаллического твердого вещества: т. пл. декарбоксилатов выше 140° С; [α ]

\binom{26}{D}

+33,5° (c 0,18, MeOH), IR (KBr) 3428, 1663, 1528, 1487, 1437, 1288; ¹H ЯМР (d₆-DMSO) δ 10,56 (1Н, s), 8,71-8,57 (1Н, m), 7,88-7,81 (2Н, m), 7,65-7,46 (3Н, m), 4,97-4,85 (1H, m), 4,38-4,0 (3Н, m), 3,88-3,52 (3Н, m), 2,91-2,71 (2Н, m), 2,50-2,38 (1H, m), 2,35-2,21 (1H, m), 2,10-1,94 (1H, m), 1,93-1,49 (3Н, m); ¹³С ЯМР (d₆-DMSO) δ 173,66, 172,49, 169,97, 169,89, 164,96, 157,62, 132,35, 131,85, 128,39, 127,32, 53,81, 52,69, 40,90, 33,17, 31,60, 24,40, 24,13, 19,24; MC (ES -).

(266). Раствор (2S) дициклогексиламиновой соли 3-бензилоксикарбониламино-2-трет-бутоксикарбониламинопропионовой кислоты (3 г, 5,8 ммолей) в дихлорометане (200 мл) промывали четыре раза раствором 1М НСl, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Получившееся масло растворяют в сухом дихлорметане (35 мл), охлаждают до 0° С и обрабатывают трифторуксусной кислотой (35 мл). Этот раствор перемешивают 1,5 ч при 0° С, после чего упаривают досуха. К остатку добавляют дихлорметан (50 мл) и затем упаривают под вакуумом. Этот процесс повторяют шесть раз, получая в результате твердое вещество белого цвета. Белое твердое вещество суспендируют в толуоле (50 мл), обрабатывают порошкообразным фталевым ангидридом (940 мг, 6,35 ммоля) и кипятят с обратным холодильником 18 ч. Полученный раствор концентрируют, получая масло, которое очищают методом флэш-хроматографии (2-10% метанол/дихлорометан) с образованием 266, 2,01 г (94%), в виде белого порошка: IR (KBr) 3600-2500br, 1776, 1714, 1530, 1469, 1455, 1392, 1263, 1131, 722; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,83 (2Н, m), 7,72 (2Н, m), 7,29 (5Н, m), 5,41 (1Н, m), 5,03 (2Н, s), 3,90 (2Н, m); MC (ES-), 367 (M -1).

(267). Суспензию кислоты 266 (1,32 г, 3,58 ммоля) в сухом эфире (37 мг) обрабатывали пентахлоридом фосфора (1,04 г, 5 ммолей) и перемешивали 2 часа при комнатной темпратуре. Раствор отфильтровывают для удаления непрореагировавшего пентахлорида фосфора, после чего упаривают досуха. К остатку добавляют сухой толуол (25 мг), затем упаривают досуха. Этот процесс повторяют несколько раз. Получившееся масло растворяют в сухом дихлорметане (25 мг), охлаждают до 0° С и обрабатывают раствором (3S) т-бутил 1-бензилоксикарбонилпиридазин-3-карбоксилата (1,15 г, 3,58 ммоля) в сухом дихлорметане (2 мг), затем 5% водным раствором бикарбоната натрия (25 мг). Смесь интенсивно перемешивают 20 ч при комнатной температуре, затем разбавляют этилацетатом (100 мл) и подкисляют до рН2 с помощью 1М НСl. Органическую фазу дважды промывают разбавленным раствором НСl, затем нас. солевым раствором, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Полученное масло очищают методом флэш-хроматографии (2-20% этилацетат/дихлорометан 10-20% метанол/дихлорометан), получая (267), 1,25 г (52%) в виде белого порошка: IR (КВr) 3367, 2955, 1722, 1517, 1455, 1387, 1369, 1251, 1153, 721; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,81 (2Н, m), 7,74 (2Н, m), 7,63 (1Н, brs), 7,31 (10Н, m), 5,46-4,76 (5Н, m), 4,07-3,54 (4Н, m), 2,4 (1Н, m), 2,0-1,6 (3Н, m), 1,40 (9Н, s); MC (ES+), 671 (M + 1), 693 (M + Na).

(268). Раствор эфира 267 (50 мг, 0,074 ммоля) в метаноле (15 мл) обрабатывают 10% палладием на угле (50 мг) и гидрируют при комнатной температуре и атмосферном давлении в течение 24 ч. Смесь тщательно вакуумируют для удаления водорода, после чего обрабатывают 37% водным раствором формальдегида (18 мг, 0,22 ммоля) и перемешивают 2 часа под током азота. Смесь фильтруют, упаривают досуха, и продукт очищают методом флэш-хроматографии (4-100% этилацетат/дихлорометан), получая 268 14,5 мг (48%) в виде масла: ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,85 (2Н, m), 7,71 (2Н, m), 5,78 (1H, dd, J=10, 5), 4,99 (1H, dd, J=6,1, 1,5), 4,07 (1H, d, J=10,6), 3,49 (1H, dd, J=14, 5), 3,39 (1H, d, J=10,3), 3,24 (1H, dd, J=14, 10,2), 3.17 (2Н, m), 2,39 (1H, m), 1,84-1,46 (3Н), 1,51 (9Н, s); MC (ES+), 415 (M + 1), 437 (M + Na).

Соединения 280-283 получают из 212b по способу, подобному используемому для получения 226е. Соединения 284-287 получают по способу, подобному используемому для получения 217е.


Соединение	R₅	R
280
281
282
283
284
285
286
287

(306а) получают тем же способом, что и 208а, за исключением того, что 2,6-дихлорфенилметоксиамин (полученный тем же способом, что и 306b) используют вместо семикарбазида, получая 870 мг (колич.) в виде прозрачного масла.

(306b) получают тем же способом, что и 208а, за исключением того, что 2-(фенил)этоксиамин (US 5 346 911) используют вместо семикарбазида, получая 395 мг (колич.) в виде прозрачного масла.

(307а) получают тем же способом, что и 233е, за исключением того, что 306а используют вместо 207а, с образованием 23 мг (23%) 307а в виде твердого вещества белого цвета.

(307b) получают тем же способом, что и 233е, за исключением того, что 306b используют вместо 207а, с образованием 43 мг (48%) 307Ь в виде твердого вещества белого цвета.

(308а) получают из 307а способом, подобным способу получения 235е из 234е, с образованием 15,2 мг (74%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 0,9(m), 1,3(s), 1,7(m), 1,8(m), 2,0(m), 2,1-2,2(m), 2,3(dd), 2,4-2,5(m), 2,6(m), 2,7-2,8(m), 3,l(m), 3,3(m), 3,4-3,5(m), 4,5(m), 4,9(m), 5,l(m), 5,3(d), 5,4(s), 6,8(d), 7,2-7,5(m), 7,8(dd), 8,4(dd).

(308b) получают из 307b способом, подобным способу получения 235е из 234е, с образованием 25,2 мг (68%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹H ЯМР (СD₃ОD) δ 1,2(m), 1,6-1,7(m), 2,0-2,1(m), 2,2(m), 2,3(m), 2,5(m), 2,6-2,7(dd), 2,9(t), 3,0(t), 3,1(m), 3,3-3,5(m), 4,2(t), 4,25(m), 4,5(m), 5,2(t), 5,3(t), 6,7(d), 7,l-7,2(m), 7,35(dd), 7,4(m), 7,5(m). 7,8(dd), 8,3(dd).

(302).

Стадия А: 301 получают тем же способом, что и соединение 605а (Стадия А), за исключением того, что 212е используют вместо 603а с образованием 540 мг (34%) твердого вещества белого цвета.

Стадия В: 302. Раствор 301 (50,7 мг; 0,091 ммоля) в 2,8 мл МеОН/НОАс/37% водн. раств. формальдегида (5:1:1) перемешивают 5,5 ч при комн. темп. и реакционную смесь концентрируют до 0,7 мл под вакуумом. Остаток растворяют в 3 мл CH₃CN и концентрируют до 0,7 мл (3× ), растворяют в толуоле, концентрируют до 0,7 мл под вакуумом (2× ) и концентрируют досуха. После хроматографии (флэш, SiO₂ 5% изопропанол/СН₂Сl₂) получают 302 (45,5 мг, 78%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (d₆-DMSO) δ 1,0-1,15(m, 2H), 1,4(s, 9H), 1,65(m, 2H), 1,9-2,1(m, 2H), 2,15-2,4(m, 3Н), 2,55(m, 1H), 2,7-3,0(m, 2H), 4,3-4,6(m, 2H), 4,9(m, 1H), 5,2(m, 1H), 7,4-7,6(m, 2H), 7,8-8,0(m, 2H), 8,6(m, 1H), 8,8(m,1H), 9,4(s, 1H).

(304a).

Стадия А: Раствор 302 (90 мг; 0,18 ммоля) в 10 мл МеОН обрабатывают триметилортоформатом (1 мл) и гидратом п-толуолсульфоновой кислоты (5 мг; 0,026 ммоля), и реакционную смесь перемешивают 20 ч. Затем обрабатывают 3 мл нас.водного раствора NaHCO₃ и концентрируют под вакуумом. К остатку добавляют ЕtOАс и промывают разбавленным водным раствором NaHCO₃, высушивают над MgSO₄ и концентрируют в вакууме, получая 80 мг 303а.

Стадия В: 303а растворяют в 2 мл TFA и перемешивают 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь растворяют в СН₂Сl₂ и концентрируют в вакууме (3× ). После хроматографии (флэш, SiО₂, от 1% до 3% МеОН/ СН₂Сl₂) получают 43 мг (64%) 304a в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 1,55-1,8(m, 2H), 1,9-2,15(m, 4Н), 2,25-2,5(m, 2Н), 2,7-3,3(m, 4Н), 3,45, 3,6(s, s, 3H), 4,4, 4,75(2m, 1H), 4,6(m, 1H), 4,95, 5,4(t,d, 1H), 5,l-5,2(m, 1H), 6,45, 7,05(2d, 1H), 6,95(m, 1H), 7,45(m, 2H), 7,5(m, lH),7,85(m,2H).

Пример 11

Соединения 214е, 404-413,415-445,446-468,470-491 и 493-499 синтезируют так, как описано в Примере 11 и Таблице 7.

Стадия А. Синтез 401. Смолу TentaGel S® NH; (0,16 ммоля/г, 10,0 г) помещают в стеклянную воронку с пористым фильтром и промывают DMF (3× 50 мл), 10% (об./об.) DIEA в DMF (2× 50 мл) и в конце DMF (4× 50 мл). К смоле добавляют DMF в количестве, достаточном для образования взвеси, затем соединение 400 (1,42 г, 2,4 ммоля, полученное из т-бутилового эфира (3S)-3-(флуоренилметилоксикарбонил)-4-оксобутановой кислоты по методике A.M. Murphy et. al. J. Am. Chem. Soc., 114, 3156-3157 (1992)), гидрат 1-гидроксибензотриазола (HOBT· H₂O; 0,367 г, 2,4 ммоля), O-бензотриазол-1-ил-N, N, N, N' -тетраметилуроний гексафторфосфат (HBTU; 0,91 г, 2,4 ммоля) и DIEA (0,55 мл, 3,2 ммоля). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи, используя кистевой встряхиватель. Смолу отделяют на стеклянной воронке с пористым фильтром путем вакуумной фильтрации и промывают DMF (3× 50 мл). Непрореагировавшие аминогруппы закрывают в результате взаимодействия смолы с 20% (об./об.) Ас₂О/DMF (2× 25 мл) непосредственно в воронке (10 мин/промыв). Смолу промывают DMF (3× 50 мл) и CH₂Cl₂ (3× 50 мл) и затем сушат в течение ночи, получая 401 (11,0 г, количественный выход).

Стадия В. Синтез 402. Смолу 401 (6,0 г, 0,16 ммоля/г, 0,96 ммоля) подвергают набуханию на стеклянной воронке с пористым фильтром с помощью DMF (3× 25 мл). Fmoc-защитную группу снимают в 25% (об./об.) пиперидин/DMF (25 мл) в течение 10 мин (время от времени перемешивая) и затем в течение 20 мин в свежем пиперидиновом реагенте (25 мл). Затем смолу промывают DMF (3× 25 мл) и N-метипирролидоном (2× 25 мл). После перенесения смолы в 100-мл колбу добавляют N-метипирролидон до получения взвеси и затем 212f (0,725 г, 1,57 ммоля), НОВТ· Н₂О (0,25 г, 1,6 ммоля), HBTU (0,61 г, 1,6 ммоля) и DIEA (0,84 мл, 4,8 ммоля). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, используя кистевой встряхиватель. Обработка смолы и закрытие непрореагировавших защитных групп с помощью 20% (об./об.) Ас₂О в DMF проводят, как описано для 401, получая 402 (6,21 г, количественный выход).

Стадия С. Синтез 403. Это соединение получают из смолы 402 (0,24 г, 0,038 ммоля), используя Advanced ChemTech 396 Multiple Peptide synthesizer. Автоматические циклы состоят из автоматических промывок DMF (3× 1 мл), удаления защитных групп с помощью 25% (v/v) пиперидина в DMF (1 мл) в течение 3 мин, затем со свежим реагентом (1 мл) в течение 10 мин, получая смолу 403. Смолу промывают DMF (3× 1 мл) и N-метипирролидоном (3× 1 мл).

Стадия D. Способ 1. (409). Смолу 403 ацилируют раствором 0,4М тиофен-3-карбоновой кислоты и 0,4М НОВТ в N-метилпирролидоне (1 мл), раствором 0,4М HBTU в N-метилпирролидоне (0,5 мл) и раствором 1,6М DIEA в N-метилпирролидоне (0,35 мл), реакционную смесь перемешивают 2 часа при комн. темп. Стадию ацилирования повторяют. Наконец, смолу промывают DMF (3× 1 мл), СН₂Сl₂ (3× 1 мл) и высушивают под вакуумом. Альдегид удаляют со смолы и проводят общее депротектирование путем обработки 95% TFA/5% Н₂О (об./об., 1,5 мл) в течение 30 мин при комн. темп. После промывания смолы удаляющим реагентом (1 мл), объединенные фильтраты добавляют к холодной смеси 1:1 Еt₂O:пентан (12 мл) и получившийся осадок отделяют центрифугированием и декантацией. Осадок растворяют в смеси 10% СН₃Со/90% Н₂O/0,1% TFA (15 мл) и лиофилизируют, получая 409 в виде белого порошка. Это соединение очищают полу-препаративной RP-ВЭЖХ с колонкой Rainin Microsorb™ С 18 (5 μ , 21,4× 250 mm), элюируя линейным градиентом CH₃CN (5% -45%), содержащим 0,1% TFA (об./об.) в течение 45 мин при 12 мл/мин. Фракции, содржащие целевой продукт, собирают и лиофилизируют, получая 409 (10,8 мг, 63%).

Стадия D. Способ 1А. Синтез 418. По способу, подобному способу 1, смолу 403 ацилируют с помощью 4-(1-флуоренилметоксикарбониламино)бензойной кислотой и повторяют. Fmoc-группу удаляют, как описано в Стадии С, и свободный амин ацилируют 20% (об./об.) Ас₂О в DMF (1 мл) и 1,6М DIEA в N-метилпирролидоне (0,35 мл) в течение 2 ч при комн. темп. Стадию ацилирования повторяют. После удаления альдегида получают 418 (3,2 мг).

Стадия D. Способ 1В. Синтез 447. По способу, подобному способу 1А, смолу 403 ацилируют с помощью 0,4М 4-(1-флуоренилметоксикарбониламино)бензойной кислотой. Стадию ацилирования повторяют один раз. Fmoc-группу удаляют, как раньше, и свободный амин взаимодействует с 1М метансульфонилхлоридом в CH₂Cl₂ (0,5 мл) и 1М пиридином в CH₂Cl₂ (0,60 мл) в течение 4 ч при комн. темп. После удаления альдегида получают 447 (10,0 мг).

Стадия D. Способ 2. Синтез 214е. По способу, подобному способу 1, смолу 403 ацилируют с помощью 0,5М бензоил хлорида в N-метилпирролидоне (1 мл) и 1,6М DIEA в N-метилпирролидоне (0,35 мл) в течение 2 ч при комн. темп. Стадию ацилирования повторяют. После удаления альдегида со смолы получают 214е (5,1 мг, 30%).

Стадия D. Способ 3. Синтез 427. По способу, подобному способу 1, смола 403 взаимодействует с 1,0 М бензолсульфонил хлоридом в СН₂Сl₂ (0,5 мл) и 1М пиридином в CH₂Cl₂ (0,60 мл) в течение 4 ч при комн. темп. Реакцию повторяют. После удаления альдегида со смолы получают 427 (7,2 мг, 40%).

Стадия D. Способ 4. Синтез 420. По способу, подобному способу 1, смола 403 взаимодействует с 0,5М метилизоцианатом в N-метилпирролидоне (1 мл) и 1,6М DIEA в N-метилпирролидоне (0,35 мл) в течение 2 ч при комн. темп. Реакцию повторяют. После удаления альдегида со смолы получают 420 (8,3 мг, 55%).

Стадия D. Способ 5. Синтез 445. По способу, подобному способу 1, смолу 403 ацилируют с помощью 0,27М имидазол-2-карбоновой кислоты (1 мл) в 2:1 DMF:H₂O (с 1 экв. DIEA) и 1М гидрохлоридом 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидом (EDC) в смеси 2:1 N-метилпирролидон/Н₂О (0,35 мл) в течение 3 ч при комн. темп. После удаления альдегида со смолы получают 445 (9,5 мг).

Аналитические анализы ВЭЖХ:

(1) Waters DeltaPak С 18, ЗООА (5μ , 3.9× 150 мм). Линейный градиент СН₃СN (5% - 45%), содержащий 0,1% TFA (об./об.) в течение 14 мин при 1 мл/мин.

(2) Waters DeltaPak С 18, ЗООА (5μ , 3.9× 150 мм).

Линейный градиент CH₃CN (0% - 25%), содержащий 0,1% TFA (об./об.) в течение 14 мин при 1 мл/мин.

(3) Waters DeltaPak C18, ЗООА (5μ , 3.9× 150 мм). Изократическое элюирование 0.1% TF А/вода (об./об.) при 1 мл/мин.

(4) Waters DeltaPak C18, ЗООА (5μ , 3.9× 150 мм). Линейный градиент CH₃CN (0%-30%), содержащий 0,1% TFA (об./об.) в течение 14 мин при 1 мл/мин.

(5) Waters DeltaPak C18, ЗООА (5μ , 3.9× 150 мм). Линейный градиент CH₃CN (0%-35%), содержащий 0,1% TFA (об./об.) в течение 14 мин при 1 мл/мин.

Пример 12

Соединения 605a-j, 605m-q, 605s, 605t и 605v синтезируют с помощью способов,

описанных ниже.

Соединение №	R₂	R₅
600а/103	Н	СН₃
600b	Н	CH₂Ph
600с	СН₃	СН₂Рh

Стадия А. (25)-2-трет-Бутоксикарбониламино-3-(2-нитрофенил-амино)пропионовая кислота. (2S)-2-трет-Бутоксикарбониламино-3-аминопропионовую кислоту (10 г, 49 ммолей), 2-фторнитробензол (5,7 мл, 54 ммолей) и NaHCO₃ (8,25 г, 98 ммолей) помещают в 130 мл DMF и нагревают 18 ч, при 80° С. Реакционную смесь упаривают под вакуумом, получая вязкий остаток оранжевого цвета, который растворяют в 300 мл Н₂О и экстрагируют Et₂O (3× 150 мл). Водный раствор подкисляют до рН 5 с помощью 10% NaHSO₄ и экстрагируют ЕtOАс (3× 250 мл). Объединенные экстракты высушивают над безводным Na₂SO₄, фильтруют и упаривают, получая 12,64 г (83%) указанного в заголовке соединения в виде аморфного твердого вещества оранжевого цвета: ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 8,15-8,10 (1H,d), 7,54-7,48 (1H,t), 7,13-7,08 (1H, d), 6,73-6,65 (1H, t), 4,45-4,35 (1H, m), 3,9-3,8 (1H, dd), 3,65-3,55 (1H, dd), 1,45 (9H, s).

Стадия В. (2S)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(2-аминофенил-амино)-пропионовая кислота. Смесь (2S)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(2-нитрофениламино)пропионовой кислоты (12,65 г, 40,5 ммоля) и 0,5 г 10% Pd/C в 100 мл МеОН перемешивают 4 ч, в водороде под давлением 1 атм. Раствор фильтруют через целит 545 и фильтрат упаривают под вакуумом, получая 11,95 г указанного в заголовке соединения с количественным выходом в виде темно-коричневого твердого вещества, которое используют без очистки: ¹H ЯМР (CD₃OD) δ 6,75-6,70 (3H,m), 6,65-6,58 (1H, m), 4,35-4,3 (1H, m), 3,6-3,38 (2Н, m), 1,45 (9H, s).

Стадия С. (3S)-2-Оксо-3-трет-бутоксикарбониламино-1,3,4,5-тетрагидро-1Н-1,5-бензодиазепин. Гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (8,54 г, 44,5 ммоля) добавляют к охлажденному (0° С) раствору (2S)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(2-аминофениламино)пропионовой кислоты (11,95 г, 40,5 ммоля) в 100 мл DMF и перемешивают 18 часов. Реакционную смесь выливают в 700 мл ЕtOАс и промывают четыре раза 100 мл H₂O. Органический слой высушивают над безводным Na₂SO₄, фильтруют, упаривают и получают коричневое твердое вещество, которое очищают методом флэш-хроматографии, элюируя смесью 3:7 ЕtOАс/гексан. В результате получают 8 г (71%) указанного в заголовке соединения: ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,78 (1Н, s), 7,02-6,95 (1H, m), 6,88-6,82 (1H, m), 6,82-6,78 (1H, m), 6,75-6,70 (1H, m), 5,8-5,7 (1H, d), 4,55-4,45 (1H, m), 3,95 (1H, s), 3,9-3,82 (1H, m), 3,48-3,40 (1H,m), 1,45 (9H,s).

Стадия D. (600а/103). 1,0 M раствор амида бис(триметилсилил)лития (3,4 мл, 3,4 ммоля) в THF добавляют по каплям к охлажденному до -78° С раствору (3S)-2-оксо-3-трет-бутоксикарбониламино-2,3,4,-тетрагидро-1Н-1,5-бензодиазепина (0,94 г, 3,38 ммоля) в 20 мл безводного THF и перемешивают 30 мин. К реакционной смеси добавляют по каплям метилбромацетат (0,44 мл, 4 ммоля) и нагревают до комн. темп. Реакционную смесь разбавляют 100 мл ЕtOАс и промывают 0,3N KHSO₄ (50 мл), Н₂О (2× 50 мл), нас. солевым раствором. Объединенную органическую фазу высушивают над безводным Na₂SO₄, фильтруют, упаривают и получают смолу, которую очищают методом флэш-хроматографии, элюируя смесью 3:7 ЕtOАс/гексан. В результате получают 0,98 г (83%) указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета. ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,15-7,07 (2Н, m), 6,98-6,94 (1H, m), 6,88-6,84 (1H, d), 5,62-5,55 (1H, d), 4,71-4,65 (1H, d), 4,65-4,6 (1H, m), 4,33-4,27 (1H, d), 3,96-3,90 (1H, m), 3,78 (3Н, s), 3,44-3,37 (1H,m), 1,4 (9H,s).

(600b). Получают по способу, аналогичному способу получения 600а/103 (Стадия D), за исключением того, что вместо метилбромацетата используют бензилбромацетат, с образованием 600b с количественным выходом.

(600с), Стадия А, (2S)-2-трет-Бутоксикарбониламино-3-(2-нитро-3,5-диметилфениламино)-пропионовая кислота. Получают по способу, описанному для 600а/103 (Стадия А), за исключением того, что вместо 2-фторнитробензола используют 2-фтор-4,6-диметил-нитробензол с образованием целевого продукта с выходом 93%.

Стадия В. (2S) -2-трет-бутоксикарбониламино-3-(2-амино-3,5-диметилфенил-амино)-пропионовая кислота. (2S)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(2-нитро-3,5-диметилфенил-амино)пропионовую кислоту превращают в соединение, указанное в заголовке, по способу, описанному для получения 600а/103 (Стадия В).

Стадия С. 2-Oксо-(3S)-3-трет-бутоксикарбониламино-2,3,4,5-тетрагидро-7,9-диметил-1Н-1,5-бензодиазепин. Охлажденный до 0° С раствор (2S)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(2-амино-3,5-диметилфенил-амино)-пропионовой кислоты (763 мг, 2,36 ммоля) и N-метилморфолина (483 мг, 4,78 ммоля) в 60 мл безводного THF обрабатывают по каплям изобутилхлорформатом (352 мг, 2,5 ммоля). Реакционную смесь перемешивают 2 ч, при 0° С, 1 ч при комн. темп. и выливают в EtOAc. Смесь промывают 5% водн. раствором NaHSO₄, нас.водным раствором NaHCO₃ и нас.водным раствором NaCl, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. После хроматографии (флэш, SiO₂, от 10% до 25% и до 50% EtOAc/CH₂Cl₂) получают 490 мг (68%) целевого продукта.

Стадия D (600с). (2S)-2-трет-Бутоксикарбониламино-3-(2-амино-3,5-диметилфенил-амино)-пропионовую кислоту превращают в 600с с выходом 75% по способу, аналогичному способу получения 600b.

(602а) Стадия А. Безводный НСl барботируют через раствор метилового эфира (3S)-2-оксо-3-трет-бутоксикарбониламино-2,3,4,5-тетрагидро-1 Н-1,5-бензодиазепин-1 -уксусной кислоты (600а/103, 4,0 г, 11,4 ммоля) в 20 мл СН₂Сl₂ в течение 20 мин, после чего перемешивают 1 ч при комн. темп. Реакционную смесь упаривают, получая гидрохлорид метилового эфира (3S)-2-оксо-3-амино-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-1,5-бензодиазепин-1-уксусной кислоты в виде твердого вещества белого цвета.

Стадия В. Твердое вещество белого цвета растворяют в 70 мл DMF и добавляют бензойную кислоту (1,5 г, 12,3 ммоля). Реакционную смесь охлаждают в бане со смесью лед/Н₂O и обрабатывают гидрохлоридом 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (2,4 г, 12,5 ммоля), 1-гидроксибензотриазолом (1,7 г, 12,6 ммоля) и диизопропилэтиламином (3,0 г, 23,2 ммоля). Реакционную смесь перемешивают 18 ч при комн. темп. в атмосфере азота и выливают в Н₂О. Водную смесь экстрагируют ЕtOАс (2× ). Объединенные органические слои промывают 0,5 N водн. раствором NaHSO₄, Н₂О, нас.водным раствором NaHCO₃, Н₂О и нас.водным раствором NaCl, высушивают над MgSO₄ и концентрируют в вакууме. После хроматографии (флэш, SiO₂, от 10% до 30% EtOAc/CH₂Cl₂) получают 3,4 г (85%) метилового эфира (3S)-2-оксо-3-(бензоиламино)-2,3,4,5-тетрагадро-1Н-1,5-бензодиазепин-1-уксусной кислоты в виде твердого вещества белого цвета.

Стадия С. Способ А. (602а). Раствор метилового эфира (3S)-2-оксо-3-(бензоиламино)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-1,5-бензодиазепин-1-уксусной кислоты (200 мг, 0,57 ммоля) в СН₂Сl₂ (10 мл) обрабатывают триэтиламином (119 мг, 1,13 ммоля) и 3-фенилпропионилхлоридом (114 мг, 0,68 ммоля). Реакционную смесь перемешивают 30 мин при комн. темп. и разбавляют СН₂Сl₂. Раствор промывают 10% водн. НСl, нас.водным раствором NаНСО₃ и нас.водным раствором NaCl, высушивют над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме, получая 240 мг (87%) 602а в виде белой пены.

Стадия С. Способ В. (602g). Охлажденный до 0° С раствор бензилового эфира (3S)-2-оксо-3-(бензоиламино)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-1,5-бензодиазепин-1 -уксусной кислоты (600b) (465 мг, 1,10 ммоля) в СН₂Сl₂ (5 мл) обрабатывают раствором ацетоуксусной кислоты в 1 мл СН₂Сl₂ с последующим медленным добавлением гидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (431 мг, 2,2 ммоля) в 2 мл СН₂Сl₂ в атмосфере Na. Через 15 мин реакционную смесь выливают в ЕtOАс, промывают 5% водным раствором NaHSO₄, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. После хроматографии (флэш, SiO₂, от 0% до 10% до 25% МеОН/СН₂Сl₂) получают 580 мг бензилового эфира (3S)-2-оксо-3-(бензоиламино)-5-ацетоацетил-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-1,5-бензодиазепин-1 -уксусной кислоты в виде твердого вещества белого цвета.

Стадия С. Способ С. (602j). Смесь охлажденного до 0° С раствора бензилового эфира (3S)-2-оксо-3-(бензоиламино)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-1,5-бензодиазепин-1-уксусной кислоты (600b) (461 мг, 1,07 ммоля) в THF (5 мл) и нас.водного раствора NаНСО₃ (2,5 мл) при интенсивном перемешивании обрабатывают раствором метилхлорформата (151 мг, 1,6 ммоля) в THF (0,35 мл) и реакционную смесь перемешивают 45 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают в CH₂Cl₂ и промывают Н₂О, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. После хроматографии (флэш, SiO₂, от 0% до 10% МеОН/СН₂Сl₂) получают 525 мг 602j в виде твердого вещества белого цвета.

Стадия С. Способ D. (602р). Раствор 600а/103 (400 мг, 1,1 ммоля) и бензилизоцианата (166 мг, 1,2 ммоля) в 10 мл CH₂Cl₂ и 10 мл DMF нагревают при 80° С в течение 3 дней. Реакционную смесь охлаждают до комн. темп., выливают в Н₂О и экстрагируют EtOAc (2× ). Объединенные органические слои промывают Н₂О (4× ) и нас.водным раствором NaCl, высушивают над MgSO₄ и концентрируют в вакууме. После хроматографии (флэш, SiO₂, от 50% до 80% EtOAc/гексан) получают 602р в виде твердого вещества белого цвета.

Стадия С. Способ Е. (602v). Раствор гидрохлорида метилового эфира (3S) 2-оксо-3-амино-5-(3-фенилпропионил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-1,5-бензодиазепин-1-уксусной кислоты (560 мг, 1,34 ммоля), бензальдегида (146 мг, 1,34 ммоля) и ацетата натрия (220 мг, 2,68 ммоля) в метаноле (20 мл) обрабатывают 4

Å-ситами (2 г) и NaCNBH₃ (168 мг, 2,68 ммоля). После перемешивания в течение 2,5 ч реакционную смесь подкисляют 10% водным раствором НСl до рН2 и промывают Et₂O (2× 75 мл). Органические слои концентрируют в вакууме, получая масло. После хроматографии (флэш, SiO₂, от 0 до 35% EtOAc/CH₂Cl₂) получают 250 мг (40%) 602v в виде прозрачного масла.

Стадия D. Способ А.

(603а). Метиловый эфир (3S)-2-оксо-3-бензоиламино-5-(3-фенилпропионил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-1,5-бензодиазепин-1 -уксусной кислоты (602а; 1,25 г, 2,57 ммоля) растворяют в 11 мл THF, МеОН и Н₂О (5:5:1), обрабатывают LiОН· Н₂О (42 мг, 0,62 ммоля) и перемешивают 64 ч при комн. темп. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, разбавляют водой и подкисляют 1N водн. раствором НСl, получая 230 мг 603а в виде твердого вещества белого цвета.

Стадия D. Способ В.

(603d). Смесь бензилового эфира (3S)-2-оксо-3-(бензоиламино)-5-ацетил-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-1,5-бензодиазепин-1-уксусной кислоты (602d; 510 мг, 1, 08 ммоля) и 5% Pd/C (250 мг) в МеОН (10 мл) перемешивали 0,5 ч в атмосфере Н₂ (1 атм). Реакционную смесь фильтруют и концентрируют в вакууме, получая 410 мг 603d в виде твердого вещества белого цвета.

Соединения Таблицы 8 получают так, как описано в Таблице 9, используя способы Примера 12.

Таблица 8
Соединение №	R₂	R₃	R₄	R₅
602b	H	PhCH₂C(O)	PhC(O)	CH₂Ph
602с	H	PhC(O)	PhC(O)	CH₂Ph
602d	H	СН₃С(О)	PhC(O)	CH₂Ph
602е	H	СН₃ОСН₂С(О)	PhC(O)	CH₂Ph
602f	H	(СН₃)₂СНСН₂С(O)	PhC(O)	CH₂Ph
602g	H	СН₃С(O)СН₂С(O)	PhC(O)	CH₂Ph
602h	H	СН₃ОС(O)С(O)	PhC(O)	CH₂Ph
602i	H	СН₃С(O)С(O)	PhC(O)	CH₂Ph
602j	H	СН₃ОС(О)	PhC(O)	CH₂Ph
602k	H	СН₃С(О)	Boc	CH₂Ph
6021	СН₃	СН₃С(О)	Boc	CH₂Ph
602m	H	СН₃SO₂	PhC(O)	СН₃
602p	H	PhCH₂NHC(O)	PhC(O)	СН₃
602q	H		PhC(O)	CH₂Ph
602r	H	PhCH₂CH₂C(O)	PhCH₂CH₂C(O)	CH₂Ph
602s	H	4-пиридил-СН₂С(O)	PhC(O)	CH₂Ph

Соединения Таблицы 10 получают так, как описано в Таблице 11, используя способы Примера 12.

Таблица 10
Соединение №	R2	R₃	R₄	R₅
602n	H	СН₃С(О)	Naphthylene-2-C(O)	CH₂Ph
602о	СН₃	СН₃С(О)	PhC(O)	СН₂Рh
602t	H	3-СН₃РhСН₂С(O)	PhC(O)	CH₂Ph
602u	H	СН₃С(О)	Fmос	CH₂Ph
602v	H	PhCH₂CH₂CO	PhCH₂	СН₃

Таблица 11
№	Исходное соединение	1) Стадия С, R₃Х способ (выход, %)	3) Стадия С R₄X способ (выход, %)	Стадия D способ (выход, %)
603n	602k	СН₃С(O)Сl А (quant.)	naphthylenе- 2-С(O)Сl А (70)	В (quant.)
603о	602l	СН₃С(O)Сl A (quant.)	PhC(O)Cl А (73)	В (quant.)
603t	602k	3-СН₃РhСН₂С(O)Сl A (quant.)	PhC(O)Cl А (93)	В (95)
603u	602k	СН₃С(O)Сl A (quant.)	Fmoc-Cl С (82)	С (98)
603v	600а/103	PhCH₂CH₂C(O)Cl А	PhCHO Е(40)	А (95)

Соединения Таблицы 12 получают с помощью методов, описанных ниже.

Таблица 12
Соединение №	R₂	R₃	R₄
605а	Н	PhCH₂CH₂C(O)	PhC(O)
605b	H	PhCH₂C(O)	PhC(O)
605с	Н	PhC(O)	PhC(O)
605d	H	СН₃С(О)	PhC(O)
605е	H	СН₃ОСН₂С(O)	PhC(O)
605f	H	(СН₃)₂СНСН₂С(O)	PhC(O)
605g	H	СН₃С(O)СН₂С(O)	PhC(O)
605h	H	СН₃ОС(O)С(O)	PhC(O)
605i	H	СН₃С(O)С(O)	PhC(O)
605j	H	СН₃ОС(О)	PhC(O)

Соединение №	R₂	R₃	R₄
605m	H	CH₃SO₃	PhC(O)
605n	H	СН₃С(О)	Нафтил-2-С(O)
605o	СН₃	СН₃С(О)	PhC(O)
605p	H	PhCH₂NHC(O)	PhC(O)
605q	H		PhC(O)
605s	H	4-пиридил-СН₂С(O)	PhC(O)
605t	H	3-СН₃РhСН₂С(O)	PhC(O)
605v	H	PhCH₂CH₂C(O)	PhCH₂

(605a). Стадия А. 3(S)-3-(1-Флюоринилметилоксикарбониламино)-4-оксомасляной кислоты трет-бутиловый эфир семикарбазон (210 мг, 0,45 ммоля), полученный по методике, аналогичной получению бензилоксикарбонильного аналога по Grayblll et al., Int. J. Protein Res., 44, pp. 173-82 (1994), растворяют в 10 мл DMF и 2 мл диэтиламина и перемешивают в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрируют под вакуумом с получением семикарбазона трет-бутилового эфира 3(S)-3-амино-4-оксомасляной кислоты. Раствор вышеупомянутого остатка и соединения 603а (200 мг, 0,42 ммоля) в 5 мл DMF и 5 мл СН₂Cl₂ при 0° С обрабатывают 1-гидроксибензотриазолом (57 мг, 0,42 ммоля) и гидрохлоридом 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (98 мг, 0,51 ммоля). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов, выливают в ЕtOАс (75 мл) и промывают 0,3N водным раствором KHSO₄, нас. водным раствором NaHCO₃ и нас.водным раствором NaCl, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. После хроматографии (флэш, SiO₂, от 0% до 4% МеОН/0,1% NH₄OН/СН₂Сl₂) получают 240 мг (83%) 604а.

Стадия В. 604а перемешивают с 10 мл 33% TFA/H₂O в течение 4 ч и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в 7 мл смеси МеОН/уксусная кислота/37% водн. раствор формальдегида (5:1:1) и перемешивают 18 ч. После хроматографии (Reverse Phase С 18, 4,4 mm lDx25 cm, от 15% до 70% СН₃СN/0,1% TFA/H₂O) получают 32 мг (16%) 605а в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СD₃ОD, существует в виде диастереомеров полуацеталя) δ 7,85-7,78 (2Н, d), 7,5-7,32 (6Н, m), 7,32-7,28 (1Н, m), 7,18-6,98 (5Н, m), 4,92-4,85 (2Н, m), 4,5-4,32 (2Н, m), 4,31-4,20 (2Н, m), 3,7-3,6 (1Н, m), 2,90-2,75 (2Н, m), 2,65-2,5 (1H, m), 2,48-2,25 (3H, m).

Следующие соединения получают аналогичным способом:

(605b). 148 мг (33%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 7,9-6,9 (m, 16H), 4,9 (s, 2H), 4,5 (m, 1H), 4,4 (m, 2H), 3,75 (s, 1H), 3,6 (dd, 1H), 3,45 (dd, 1H), 2,7 (m, 1H), 2,5 (m, 1H).

(605с). 319 мг (56%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,9-6,9 (m, 16H), 5,1 (m, 1H), 4,9 (dd, 1H), 4,7 (m, 1H), 4,6 (dd, 1H), 4,4 (m, 2H), 4,05 (m, 1H), 2,7 (m,1H), 2,5(m, 1H).

(605d). 190 мг (38%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 1,9(d, Н), 2,4(m, 1Н), 2,65(m, 1H), 3,7(m, 1H), 4,25(m, 1H), 4,45(m, 2H), 4,8-5,05(m, 3H), 7,3-7,7(m, 7H), 7,9(d, 2H).

(605e). 250 мг (78%) ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 1,87 (bs), 1,95 (s, 2H), 2,1 (bs), 2,4 (m, 2H), 2,65 (m, 2H), 3,59 (bs), 3,75 (bs), 3,87 (bs), 4,19 (m), 4,37 (m), 4,50-4,78 (bm), 4,92 (m), 5,27 (bs), 7,41-7,58 (m, 7H) и 7,87 ppm (d, 2H).

(605f). 210,5 мг (46%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,9-7,4 (m, 9Н), 5,1 (m. 1H), 4,9 (m, 1H), 4,6 (dd, 1H), 4,4 (m, 2H), 4,1 (d, 1H), 3,8 (m, 1H), 3,5 (q, 1H), 2,7 (m, 1H), 2,5 (m, 1H), 2,0 (m, 3H), 1,2 (t, 1H), 0,9 (d, 3H), 0,8 (d, 3H).

(605g). 81 мг (19%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 7,9-7,3 (m, ПН), 4,9-4,8 (m, 2H), 4,6-4,4 (m, 3H), 4,3 (m, 1H), 3,75 (q, 1H), 3,55 (d, 1H), 2,7 (m, 1H), 2,5 (m,1H),2,05(s,3H).

(605h). 227 мг (54%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,5(m, 1H), 2,7(m, 1H), 3,55(s, 3H), 3,8-4,0(m, 2H), 4,4(m, 1H), 4,6-4,8(m, 2H), 4,95(d, 1H), 5,1(m, 1H), 7,3-7,7(m, 7H), 7,9(d, 2H), 8,6(d, 1H).

(605l). 150 мг (37%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 7,9-7,3 (m, 12Н), 5,1 (m, 1H), 4,65 (t, 1H), 4,55 (dd, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,1 (d, 1H), 3,9 (q, 1H), 3,45 (q, 1H), 2,7 (m, 1H), 2,5 (m, 1H), 2,25 (s, 3H).

(605j). 234 мг (44%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,9-7,4 (m, 12Н), 5,0 (m, 1H), 4,8-4,5 (m, 3H), 4,4 (m, 1H), 4,3 (t, 1H), 3,9-3,75 (m, 2H), 3,6 (s, 3H), 2,7(m,1H),2,5(m,1H).

(605m). 64,5 мг (34%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, существует в виде диастереомеров полуацеталя и открытой формы альдегида) δ 9,48 (0,2Н, s), 8,85-8,72 (1H, m), 8,65-8,60 (0,8 H, d), 8,30-8,26 (0,2 H, d), 7,95-7,88 (2H,d), 7,6-7,45 (6Н, m), 7,44-7,38 (1H, m), 5,78-5,75 (0,2H, d), 5,48 (0,6H, s), 4,85-4,70 (2H, m), 4,62-4,54 (1H, d), 4,50-4,40 (2H, m), 4,25-4,14 (1H, m), 3,9-3,85 (1H, m), 3,16 (3H, s), 3,05-2,3 (2, m).

(605n). 103 мг (17%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 1,9(s, 3H), 2,5(m, 1H), 2,65(m, 1H), 3,75(m, 1H), 4,3(m,1H), 4,5-4,7(m, 3H), 4,85-5,l (m, 2H), 7,3-7,65(m, 6H), 7,85-8,05(m, 4H), 8,45(s, 1H).

(605o). 42 мг (12%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CD₃OD, существует в виде диастереомеров полуацеталя) δ 7,85-7,74 (2H, m), 7,5-7,44 (1H, m), 7,43-7,35 (4H, m), 5,6-5,05 (2H, m), 4,82-4,42 (2H, m), 4,40-3,95 (2H, m), 3,6-3,5 (1H, m), 2,7-2,38 (2H, m), 2,32 (3H, s), 2,27 (3H, s), 1,92 (3H,s).

(605р). 165 мг (37%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 2,45(m, 1H), 2,7(m, 1H), 3,8(m, 1H), 4,15-4,5(m, 4H), 4,5-4,75(m, 2H), 4,8-5,0(m, 2H), 7,1-7,7(m, 12H),7,9(d,2H).

(605q). 210 мг (66%) ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 1,95 (s, 2H), 2,4 (m, 2Н), 2,65 (m, 2H), 3,29 (s, 3Н), 3,78 (m), 3,87 (bs), 4,0 (d, 1H), 4,32 (m), 4,50-4,15 (m), 4,95 (m), 5,27 (bs), 7,45-7,65 (m, 7H) и 7,89 ppm (d, 2H).

(605s). 128 мг (19%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 8,5-7,4 (m, 13H), 5,0 (m, 1H), 4,7 (m, 1H), 4,5 (m, 2H), 4,45-4,4 (m, 3Н), 3,8-3,7 (m, 2H), 2,7 (m, 1Н),2,5(m,1Н).

(605t). 132 мг (24%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹H ЯМР (CD₃OD) δ 7,8-6,7 (m, 13H), 4,9 (t, 1H), 4,75 (dd, 1H), 4,2 (dd, 1H), 4,1 (m, 2H), 3,8 (dd, 1H), 3,6 (q, 1H), 3,45 (dd, 1H), 3,3 (dd, 1H), 2,6 (m, 1H), 2,3 (m, 1H), 2,15 (s, 3Н).

(605v). 88 мг (28%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СD₃OD) δ 7,63-7,51 (2H. m), 7,5-7,35 (7H, m), 7,25-7,10 (3H,m), 7,1-7,02 (2H, m), 5,04-4,96 (1H, m), 4,75-4,57 (2H, m), 4,38-4,26 (2H,m), 4,24-4,12 (2H, m), 4,10-4,02 (1H, d), 4,88-4,80 (1H, m), 2,90-2,80 (2H, m), 2,78-2,63 (1H,m), 2,55-2,35 (2H, m), 2,34-2,22 (1H, m).

Соединения Таблицы 13 описаны ниже.

Таблица 13
#	R₂	R₃	R₄	R₆	R₇
609а	H	РhСН₂СН₂С(О)	PhCH₂CH₂C(O)	Сl	Сl
609b	H	СН₃С(О)	PhC(O)	Сl	Сl

(609а). Стадия А. Раствор соединения 204 (223 мг, 0,5 ммоля) и соединения 603 г (300 мг, 0,36 ммоля) в 4 мл DMF и 4 мл СН₂Сl₂ обрабатывают (Рh₃Р)₂РdСl₂ (10 мг), 1-гидроксибензотриазолом (135 мг, 1,0 ммоля) и гидрохлоридом 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (115 мг, 0,6 ммоля). Гидрид 3-н-бутилолова (219 мг, 0,75 ммоля) добавляют по каплям к реакционной смеси, которую перемешивают в течение 18 ч. Реакционную смесь выливают в ЕtOАс и промывают 10% водн. раствором NaHSO₄, нас.водным раствором NaHCO₃ и нас.водным раствором NaCl, высушивают над Nа₂SO₄ и концентрируют под вакуумом. После очистки методом флэш-хроматографии (SiO₂, градиент от 0 до 50% ЕtOАс/гексан) получают 360 мг соединения 607а в виде пены (86%).

Стадия В. Раствор соединения 607а (360 мг) в 5 мл СН₂Сl₂ добавляют по каплям к суспензии 1,1,1-триацетокси-1,1-дигидрокси-1,2-бензиодиоксол-3(1Н)-она (362 мг, 0,85 ммоля) в 20 мл CH₂Cl₂. Реакционную смесь перемешивают в течение 4,5 часа, разводят СН₂Сl₂ и промывают смесью нас. водный раствор NаНСО₃/ нас. водный раствор Nа₂S₂О₃1:1, нас. водным раствором NаНСО₃ (2× ) и нас. водным раствором NaCl, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. После очистки методом флэш-хроматографии (SiO₂, 20% EtOAc/CH₂Cl₂) получают 340 мг кетона 608а (95%).

Стадия С. Соединение 608а (300 мг, 0,36 ммоля) растворяют в 25 мл 25% TFA/ CH₂Cl₂и перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов и концентрируют под вакуумом. После очистки методом флэш-хроматографии (SiO₂, градиент 0-5% МеОН/СН₂Сl₂) получают 118 мг соединения 609а в виде твердого вещества белого цвета (42%): ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,62-6,65 (16Н, m), 4,85-4,7 (1Н, m), 4,68-4,42 (2Н, m), 4,40-4,15 (2Н, m), 3,48-3,28 (1Н, m), 3,0-2,9 (1Н, m), 2,9-2,6 (4Н, m), 2,55-2.18 (3Н, m), 2,16-1,96 (2Н, m).

(609b) получают из 603d тем же способом, что и 609а, с образованием 287 мг (43% общий выход) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) δ 1,6(s, 3Н), 2,7-3,1 (m, 2Н), 3,45(m, 1Н), 4,4(t, 1H), 4,7(m, 2H), 4,95(m, 1H), 5,2, 5,4(2s, 1H), 7,2-7,65(m, 8H), 7,9(d, 2H), 8,8(t, 1H), 8,9-9,1(2s, 1H), 12,6(br, 1H).

(612) получают по способу, подобному способу получения соединения 607а (только стадии А и С), используя 603m (150 мг, 0,36 ммоля) вместо 603r и т-бутиловый эфир (3S)-3-(аллиоксикарбониламино)-4-оксо-5-(2,6-дихлорбензоил-окси)пентановой кислоты (110; 160 мг, 0,36 ммоля, WO 93/16710) вместо 606а, с образованием 612 (56%) в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,85-7,10 (12Н, m), 5,4-4,65 (4Н, m), 4,6-4,15 (4Н, m), 3,10-2,72 (5Н, s & m).

Пример 13

Соединения 619-635 синтезируют так, как описано в Примере 13 и Таблице 14.

Синтезы соединений 619-635.

Стадия А. Синтез соединения 614. Смолу TentaGel S® NH₂ (0,16 ммоля/г, 10,0 г) помещают в стеклянную воронку с пористым фильтром и промывают диметилформамидом (3× 50 мл), 10% (об./об.) диизопропилэтиламином (DIEA) в диметилформамиде (2× 50 мл) и в конце диметилформамидом (4× 50 мл). К смоле добавляют диметилформамид в количестве, достаточном для получения взвеси, затем соединение 400 (1,42 г, 2,4 ммоля, полученное из т-бутилового эфира (3S)3-(флуоренилметилоксикарбонил)-4-оксомасляной кислоты по методике, описанной А.М. Murphy et. al. J. Am. Chem. Soc., 114, 3156-3157 (1992)), гидрат 1-гидроксибензотриазола (HOBT· H₂O; 0,367 г, 2,4 ммоля), гексафторфосфат O-бeнзотриазол-N,N,N,N'-тетраметилурония (HBTU; 0,91 г, 2,4 ммоля) и DIEA (0,55 мл, 3,2 ммоля). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, используя кистевой встряхиватель. Смолу отделяют на стеклянной воронке с пористым фильтром путем вакуумной фильтрации и промывают диметилформамидом (3× 50 мл). Непрореагировавшие аминогруппы закрывают в результате взаимодействия смолы со смесью 20% (об./об.) уксусный ангидрид/диметилформамид (2× 25 мл) непосредственно на воронке (10 мин/промыв). Смолу промывают диметилформамидом (3× 50 мл) и дихлорметаном (3× 50 мл), затем сушат в течение ночи под вакуумом, получая 614 (11,0 г, количественный выход).

Стадия В. Синтез 616. Смолу 614 (3,0 г, 0,16 ммоля/г, 0,48 ммоля) подвергают набуханию в стеклянной воронке с пористым фильтром путем промывания диметилформамидом (3× 15 мл). Затем удаляют защитную группу Fmoc, обрабатывая смолу смесью 25% (об./об.) пиперидин/диметилформамид (15 мл) в течение 10 мин (время от времени перемешивая) и затем свежим пиперидиновым реагентом (15 мл) в течение 20 мин. После чего смолу промывают диметилформамидом (3× 15 мл), затем N-метилпирролидоном (2× 15 мл). Смолу переносят в колбу объемом 100 мл, добавляют N-метилпирролидон, получая взвесь, затем соединение 603u (0,736 г, 0,72 ммоля), НОВТ· Н₂О (0,112 г, 0,73 ммоля), HBTU (0,27 г, 0,73 ммоля) и DIEA (0,26 мл, 1,5 ммоля). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, используя кистевой встряхиватель. Смолу обрабатывают и закрывают непрореагировавшие группы с помощью 20% (об./об.) раствора уксусного ангидрида в диметилформамиде так, как описано для соединения 614, получая 616 (3,13 г, количественный выход).

Стадия С. Синтез 617. Это соединение получают из смолы 616 (0,24 г, 0,038 ммоля), используя множественный пептидный синтезатор Advanced ChemTech 396. Автоматические циклы включают промывание смолы диметилформамидом (3× 1 мл), удаление защитных групп обработкой 25% (об./об.) раствором пиперидина в диметилформамиде (1 мл) в течение 3 мин, затем свежим реагентом (1 мл) в течение 10 мин, получая смолу 617. Смолу промывают диметилформамидом (3× 1 мл) и N-метилпирролидоном (3× 1 мл).

Стадия D. Способ 1. (624). Смолу 617 ацилируют 0,4М раствором тиофен-3-карбоновой кислоты и 0,4М НОВТ в N-метилпирролидоне (1 мл), 0,4М раствором HBTU в N-метилпирролидоне (0,5 мл) и 1,6М раствором DIEA в N-метилпирролидоне (0,35 мл) и реакционную смесь перемешивают 2 ч при комнатной температуре. Стадию ацилирования повторяют. В конце смолу промывают диметилформамидом (3× 1 мл), дихлорметаном (3× 1 мл) и сушат в вакууме. Удаление альдегида и всех защитных групп проводят путем обрабатывания смесью 95% TFA/ 5% Н₂О (об./об., 1,5 мл) в течение 30 мин при комнатной температуре. После промывания смолы удаляющим реагентом (1 мл), объединенные фильтраты добавляют к холодной смеси 1:1 эфир:пентан (12 мл) и получившийся осадок отделяют центрифугированием и декантацией. Полученный осадок растворяют в смеси 10% ацетонитрил/90% Н₂O/0,1% TFA (15 мл) и лиофилизируют, получая неочищенный продукт 624 в виде белого порошка. Это соединение очищают методом полу-препаративной обращенно-фазовой ВЭЖХ с колонкой Rainin Microsorb™ C18 (5 u, 21,4× 250 mm), элюируя линейным градиентом ацетонитрила (5% -45%), содержащим 0,1% TFA (об./об.), в течение 45 мин при 12 мл/мин. Фракции, содержащие целевой продукт, собирают и лиофилизируют, получая 624 (10,0 мг, 54%).

Стадия D. Способ 1А. Синтез 627. Следуя способу, подобному способу 1, смолу 617 ацилируют 4-(1-флуоренилметоксикарбониламино)бензойной кислотой и повторяют. Защитные группы Fmoc удаляют, как описано в Стадии С, и свободные амино-группы ацилируют 20% (об./об.) раствором уксусного антидрида в диметилформамиде (1 мл) и 1,6М DIEA в N-метилпирролидоне (0,35 мл) в течение 2 ч при комн. темп. Стадию ацилирования повторяют. После удаления альдегида получают 627 (4,2 мг, 20%).

Стадия D. Способ 2. Синтез соединения 632. Следуя способу, подобному способу 1, смолу 617 ацилируют 0,5М раствором хлорангидрида коричной кислоты в N-метилпирролидоне (1 мл) и 1,6М DIEA в N-метилпирролидоне (0,35 мл) в течение двух часов при комнатной температуре. Стадию ацилирования повторяют. После удаления альдегида получают 632 (11,1 мг, 58%).

Стадия D. Способ 3. Синтез соединения 629. По способу, аналогичному способу 1, смола 617 взаимодействует с 1,0М раствором бензолсульфонилхлорида в дихлорметане (0.5 мл) и 1М растворе пиридина в дихлорметане (0,60 мл) в течение 4 часов при комнатной температуре. Реакцию повторяют. После отщепления альдегида со смолы получают 629 (4,7 мг, 24%).

Аналитическая ВЭЖХ:

(1) Waters DeltaPak С 18, 300А (5 μ , 3,9× 150 мм). Линейный градиент ацетонитрила (5% -45%), содержащий 0.1% TFA (об./об.) в течение 14 мин при 1 мл/мин (см. табл.14).

Пример 14

Соединения 1605a-j, 1605m, 1605n, 1605p, 1605t и 1605v синтезируют так, как описано ниже.

(3S) N-(2-Оксо-3-трет-бутоксикарбониламино-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо [3,4-b][1,4]-диазепин (1600).

Стадия A. (3S) 2-трет-Бутоксикарбониламино-3-(3-нитропиридин-2-иламино)пропионовую кислоту получают по способу, подобному способу получения (2S) 2-трет-бутоксикарбониламино-3-(2-нитрофениламино)пропионовой кислоты на Стадии А синтеза 600а/103, за исключением того, что вместо 2-фторнитробензола используют 3-хлор-3-нитропиридин, получая 4,05 г (64%) твердого вещества желтого цвета.

Стадия В. (2S) 2-Трет-бутоксикарбониламино-3-(3-аминопиридин-2-иламино)пропионовую кислоту получают по способу, подобному способу получения (2S) 2-трет-бутоксикарбониламино-3-(2-аминофениламино)пропионовой кислоты на Стадии В синтеза 600а/103, получая 3,68 г (колич.) темного твердого вещества.

Стадия С. Метиловый эфир (2S) 2-трет-бутоксикарбониламино-3-(3-аминопиридин-2-иламино)пропионовой кислоты. Раствор (2S) 2-трет-бутоксикарбониламино-3-(3-аминопиридин-2-иламино)пропионовой кислоты (360 мг, 1,21 ммоля) и МеОН (59 мг, 1,82 ммоля) в безводном СН₂Сl₂ (20 мл) обрабатывают 4-диметиламинопиридином (DMAP, 163 мг, 1,33 ммоля) и гидрохлоридом 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (280 мг, 1,45 ммоля). Реакционную смесь перемешивают в течение 18 ч, разбавляют EtOAc (150 мл), промывают водой (2× ), нас.водным раствором NaHCO₃ и нас.водным раствором NaCl, высушивают над Nа₂SO₄ и концентрируют в вакууме. После хроматографии (флэш, SiO₂, от 0 до 5% МеОН/СН₂Сl₂) получают 250 мг (67%) указанного в заголовке соединения в виде светло-коричневого твердого вещества

Стадия D. (1600). Раствор метилового эфира (2S) 2-трет-бутоксикарбониламино-3-(3-аминопиридин-2-иламино)пропионовой кислоты (70 мг, 0,225 моля) и 25% метоксид натрия/МеОН (130 мкл, 0,56 ммоля) в безводном МеОН (4 мл) нагревают при 60° С в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, остаток растворяют в 2 мл Н₂О и экстрагируют EtOAc (3× ). Объединенные экстракты высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. После хроматографии (флэш, SiO₂, от 0% до 3% МеОН/ CH₂Cl₂) получают 7,5 мг (3%) соединения 1600 в виде светло-коричневого твердого вещества: ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,96-7,92 (1Н, d), 7,75-7,65 (1Н, br. s), 7,14-7,08 (1H, d), 6,73-6,65 (1H, m), 5,83-5,75 (1H, br. s), 5,4-5,25 (1H, br. s), 4,6-4,5 (1H,m), 3,95-3,84 (1H, m), 3,55-3,48 (1H, m), 1,4 (9H, s).

Стадия Е. 1601 получают из 1600 по способу стадии D, использующемуся для получения 600а/103.

Синтез 1603.1603 получают из 1601, используя способ получения 603 из 600.

Синтез 1605.

1605 получают из 1603 по способу, описанному для синтеза 605 из 603 (см. табл.15).

Таблица 15
1605	R₃	R₄
а	РhСН₂СН₂СО	PhCO
b	РhСН₂СО	PhCO
с	PhCO	PhCO
d	СН₃СО	PhCO
е	СН₃ОСН₂СО	PhCO
f	(СН₃)₂СНСН₂СО	PhCO
g	СН₃СОСН₂СО	PhCO
h	СН₃ОСОСО	PhCO
i	СН₃СОСО	PhCO
j	СН₃ОСО	PhCO
m	СН₃SO₃	PhCO
n	СН₃СО	Naphthyl-2-CO
p	PhCH₂NHCO	PhCO

t	3-СН₃РhСН₂СО	PhCO
V	PhCH₂CH₂CO	PhCH₂

Пример 15

Соединения 1610-1621 получают из 1600 по способам, подобным использующимся для получения соединений 619-635 из 600а/103 и 600b.

где для соединений 1610-1621

а R₃=СН₃С(О)-

b R₃=СН₃ОСН₂С(O)-:

	R₄
1610
1611
1612
1613
1614
1615
1616
1617
1618
1619
1620
1621

Пример 16

Соединения, включающие строительные блоки (e11), (y1), (y2), (z) и (e12), могут быть синтезированы так, как описаны ниже.

Синтез строительного блока R₁, где R₁ представляет собой (e11), a Y₂ представляет собой =O.

Синтез строительного блока R₁, где R₁ представляет собой (y1), а Y₂ представляет собой =O.

Синтез строительного блока R₁, где R₁ представляет собой (у2), а Y₂ представляет собой Н₂ и Х₇ представляет собой О.

Синтез строительного блока R₁, где R₁ представляет собой (у2), a Y₂ представляет собой =O и X₇ представляет собой NH.

Синтез строительного блока R₁, где R₁ представляет собой (у2), a Y₂ представляет собой Н₂ и X₇ представляет собой NH.

Синтез строительного блока R₁, где R₁ представляет собой (z), a Y₂ представляет собой О.

Синтез строительного блока R₁, где R₁ представляет собой (е12), a Y₂ представляет собой =O.

Пример 17

Получение соединений 2001, 2002, 2100а-е и 2201 описано ниже.

(2000). К раствору т-бутил 9-амино-6,10-диоксо-1,2,3,4,7,8,9,10-октагидро-6Н-пиридазино [1,2-а][1,2]диазепин-1-карбоксилата (GB 2,128,984; 340 мг, 5 ммоля) в CH₂Cl₂добавляют бензоилмуравьиную кислоту (260 мг, 1,7 ммоля), НОВТ (230 мг, 1,7 ммоля) и EDC (340 мг, 1,7 ммоля). Полученную смесь перемешивают 16 часов при температуре окружающей среды, выливают в IN HCl и экстрагируют CH₂Cl₂. Затем органические экстракты промывают нас. раствором NаНСО₃, высушивают над MgSO₄и концентрируют, получая 1999 в виде бледно-желтого твердого вещества. Это твердое вещество растворяют в CH₂Cl₂ (25 мл) и TFA (25 мл) перемешивают в течение ночи и концентрируют в вакууме, получая 560 мг 2000 в виде масла.

(2001) синтезируют из 2000 тем же способом, что и соединение 213е, получая 410 мг (63%) соединения 2001 в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CDCl₃, смесь диастереомеров) δ 8,25 (1Н, d), 8,23 (1H, d), 7,78 (1H, dd), 7,65 (1H, bm), 7,50 (2H, m), 7,40-7,25 (4H, m), 6,55 (1H, d), 5,57 (1H, d), 5,10 (1H, t), 5,05-4,95 (2H, m), 4,90, (1H, d), 4,80 (1H, d), 4,72 (1H, bm), 4,65 (1H, m), 4,55 (1H, m), 4,45 (1H, t), 3,25 (1H, m), 3,15 (1H, m), 3,00 (2H, bm), 2,90 (1H, dd), 2,70 (1H, m), 2,47 (1H, dd), 2,45 (1H, m), 2,35 (1H, m), 2,00-1,75 (4H, m), 1,60 (1H, bm).

(2002). Соединение 2001 (58,6 мг, 0,10 ммоля) обрабатывают 15 мл TFA/MeCN/вода (1:2:3) и перемешивают 6,5 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагируют эфиром. Водный слой концентрируют с азеотропным удалением воды, используя MeCN. Продукт суспендируют в СН₂Сl₂, концентрируют в вакууме и осаждают в эфире, получая 46,8 мг (99%) 2002 в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 9,05 (0.25Н, d), 8,15 (1H, d), 7,68 (1H, t), 7,64 (0,25H, d), 7,55 (3Н, t), 7,35 (0,5H, m), 5,22 (1H, t), 4,90 (1H, m), 4,58 (1H, dd), 4,50 (1H, m), 4,28 (1H, bm), 3,45 (1H, m), 3,10 (1H, bt), 2,68 (1H, ddd), 2,60-2,45 (2H, m), 2,30 (1H, dd), 2,15-2,05 (2H, m), 1,90 (2H, bm), 1,68 (1H,bm).

(2100a). Раствор 214е (101 мг, 0,23 ммоля) в изопропаноле (10 мл) перемешивают при комнатной температуре с каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты (10 мг). Через 75 минут реакционную смесь выливают в насыщенный раствор NaHCO₃ и экстрагируют СН₂Сl₂. Объединенные экстракты высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют. После флэш-хроматографии (SiO₂, от СН₂Сl₂ до ЕtOАс) получают 56 мг (51%) 2100a в виде твердого вещества белого цвета: ¹H ЯМР (СDСl₃, смесь диастереомеров) δ 7,9-7,8 (2H,m), 7,6-7,5 (1Н, m), 7,5-7,4 (2Н, m), 7,1 (0,5H, d), 6,9 (0,5Н, d), 6,4 (0,5H,d), 5,6 (0,5H, d), 5,3 (0,5H, s), 5,2-5,1 (1H, m), 4,95 (0,5H, m), 4,75-4,5 (1,5Н, m), 4,35 (0,5H, t), 4,1 (0,5H, m), 3,98 (0,5H, m), 3,3-2,75 (4Н, m), 2,5-2,4 (2H,m), 2,25 (1H, m), 2,1-1,9 (3H,m) 1,75-1,55 (2H,m).

(2100b). Раствор 214е (16 мг, 0,036 ммоля) в этаноле (2 мл) перемешивают при комнатной температуре с каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты (2 мг). Через 5 дней реакционную смесь выливают в насыщенный раствор NaHCO₃ и экстрагируют СН₂Сl₂. Объединенные экстракты высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют. После флэш-хроматографии (SiO₂, СН₂Сl₂:ЕtOАс 95:5 об./об.) получают 16 мг (81%) 2100b в виде твердого вещества белого цвета: ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,85-7,74 (2H,m),7,55-7,38 (3H,m), 7,04-6,95 (1H,d), 6,61-6,48 (1H,d), 5,15-5,08 (1H,m), 4,63-4,53 (1H,m), 4,52-4,45 (1H,m), 4,42-4,35 (1H,m), 4,15-4,05 (2H,m), 3,74-3,60 (2H,m), 3,57-3,42 (2H,m), 3,39-3,28 (1H,m), 3,03-2,93 (1H,m), 2,92-2,82 (1H,m), 2,65-2,52 (2H,m), 2,42-2,25 (1H,m), 2,20-1,88 (4H,m), 1,76-1,50 (2H,m), 1,35-1,10 (9H,m).

(2100с). Раствор 214е (165 мг, 0,37 ммоля) в метаноле (5 мл) перемешивают при комнатной температуре с каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты (17,5 мг). Через 4 дня реакционную смесь разбавляют ЕtOАс и промывают 10% раствором NaHCO₃ (3× ) и нас.водным раствором NaCl. Объединенные экстракты высушивают над Nа₂SO₄ и концентрируют. После флэш-хроматографии (SiO₂, EtOAc) получают 127 мг (68%) 2100с в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,82 (2Н, d), 7,55-7,50 (1H, m), 7,47-7,43 (2H, m), 7,02 (1H, d), 6,53 (1H, d), 5,20-5,10 (1H, m), 4,56-4,50 (1H, m), 4,45-4,50 (1H каждый, два m), 3,69 (3Н, s), 3,41 (3Н, s), 3,43 (3Н, s), 3,35-3,25 (1H, m), 3,06-2,98 (1H, m), 2,94-2,83 (1H, m), 2,65-2,53 (2H, m), 2,35-2,32 (1H, m), 2,15-2,07 (1Н,т), 2,00-1,89 (3Н, m), 1,75-1,56 (2H, m).

(2100d). Раствор 214е (53 мг, 0,12 ммоля) в изопропаноле (5 мл) перемешивают при 50° С с каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты (5 мг). Через 3 дня реакционную смесь выливают в насыщенный раствор NаНСО₃ и экстрагируют СН₂Сl₂.

Объединенные экстракты высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют. После флэш-хроматографии (SiO₂, CH₂Cl₂:EtOAc (от 4:1 до 1:1 об./об.)) получают 49 мг (68%) 2100d в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,85 (2Н, d), 7,50-7,43 (1H, m), 7,41-7,35 (2H, m), 7,02 (1H, d), 6,47 (1Н, d), 5,13-5,07 (1Н, m) 5,00-4,9 (1H, m), 4,61-4,55 (2Н, m), 4,37-4,30(1H, m), 3,80-3,70 (1H, m), 3,90-3,80 (1H, m), 3,42-3,35 (1H, m), 3,03-2,93 (1H, m), 2,91-2,81 (1H, m), 2,62-2,50 (2H, m), 2,38-2,33 (1H, m), 2,12-2,06 (1H,m), 1,97-1,81 (3H, m), 1,70-1,60 (2H, m), 1,28-1,05 (18H,m).

(2100e) синтезируют из 302 по способу, использующемуся для синтеза 304а, получая 2100е, за исключением того, что этанол и триэтилортоформат используют вместо метанола и триметилортоформата. После хроматографии (SiO₂, 5% этанол/СН₂Сl₂) получают 92 мг (68%) твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (СDСl₃, смесь диастереомеров) δ 7,90-7,80 (2H, m), 7,60-7,50 (1H, m), 7,50-7,40 (2H, m), 7,30 (0,5H, d), 7,00 (0,5H, d), 6,50 (0,5H, d), 5,50 (0,5H, d), 5,20-5,10 (1,5H, m), 4,95 (0,5H, m), 4,75-4,65 (0,5H, m), 4,65-4,50 (1H, m), 4,38 (0,05H, t), 4,00-3,90 (0,5H, m), 3,85-3,75 (0,5H, m), 3,75-3,65 (0,5H, m), 3,65-3,55 (0,5H, m), 3,30-2,70 (4Н, m), 2,50-2,35 (2H, m), 2,30 (1H, d), 2,15-1,90 (3H, m), 1,80-1,60 (2H, m), 1,25-1,20 (3H, два t).

(2201) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для синтеза 605b, получая 2201: ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,30-8,22 (1H,m), 8,05-7,98 (1H, d), 7,96-7,83 (1H,m), 7,77-7,68 (1H,m), 7,67-7,40 (7H,m), 5,12-5,02 (1H,m), 4,98-4,41 (5H,m), 4,38-4,24 (1H,m), 4,07-4,00 (1H,d), 3,92-3,80 (2H,m), 3,32 (3H,s), 2,75-2,60 (1H,m), 2,58-2,35 (1H,m).

Пример 18

Мы получили следующие данные для выбранных соединений настоящего изобретения с помощью способов, описанных в данной заявке (Таблица 16, см. Пример 7; Таблицы 17 и 18, см. Примеры 1-4). Структуры и способы получения соединений настоящего изобретения описаны в Примерах 28-31.

Таблица 16. Сравнение эффективности пролекарств на мышах после введения LPS: Ингибирование продукции IL-1β . Процент ингибирования продукции IL-1β после обработки соединением данного изобретения представлен как функция от времени, прошедшего после введения LPS ("-" означает, что значения ингибирования в этот относительный промежуток времени не были получены).

Соединение	-2 ч	-1 ч	0 ч	+1 ч
213f	(-4)	-	8	-
213h	9	-	53	-
213i	(-11)	-	62	-
213k	0	-	68	-
213l	(-18)	-	80	-
213m	26	-	42	-
213o	4	-	8	-
213р	21	-	29	-
213q	17	-	91	-
213r	59	-	37	-
213x	0	-	78	-
213y	29	-	50	-
214е	39	-	70	75
	43	44	48	11
	-	-	-	47
214k	12	-	31	-
214l	0	-	54	-
214m	0	-	17	-
214w	11	-	91	-
2641	0	-	23	1
404	-	-	-	56
	55	-	6	-

Соединение	-2 ч	-1 ч	0 ч	+1 ч
412	0	-	0	-
412	11	-	37	-
418	-	-	-	64
418	25	-	52	^-
434	-	-	-	80
434	0	-	63	-
450	0	-	35	-
452	-	-	-	70
452	28	-	89	-
456	-	-	-	56
456	41	-	69
470	0		36	-
471	0	-	34
475	0	-	15	-
481	27	-	0	-
486	19	-	15	-
487	17	-	20	-
528	25	-	67	-
550f	0	-	50	-
550h	55	-	73	-
550i	(-10)	-	23	-
550k	36	-	34	-
550l	9	-	38	-
550m	45	-	52	-
550n	19	-	65	-
550o	19	-	64	-
550p	30	-	60	-
655	0	-	68	-
656	31	-	16	-
662	41	-	75	-
668	-	-	-	53
695а	49	-	78	-
1015	15	-	28	-
2001	64	62	58	55
2001а	10	-	16	-
2002	5	-	87	-
2100h	34	-	32	-
2100i	19	-	74	-
2100j	48	41	0	33
2100k	30	50	32	72
2100l	52	-	28	-
2100m	40	-	42	-
2100n	21	9	64	73
2100o	31	44	68	64

Таблица 17. Данные для выбранных соединений настоящего изобретения, полученные с помощью способов, описанных в примерах 1-4.
Соединение	УФ-видимый К_i (нМ)	Клетки РВМС средн. IC₅₀ (нМ)	Целая кровь человека IC₅₀ (нМ)	Выведение Мыши, в/в мл/мин/кг	Выведение Крысы, в/в мл/мин/кг
213f		-	3000
213g			2200
213h			1500
213i			1100
213j
213k			2000
213l			2000
213m			2500
213o		5000	3300
213р			<300
213q			<300
213r			<300
213v	0.5	1,100	1100	41	23
213x		4500	2500
213y			930
214j	4.2	2500	6000
214k	0.2	500	580		22
214l	6	1900	1100		12
214m	1.5	530	2200		33.4
214w	0.6	620	370		15
246b	30000	>30000		87
264l			3000
265a	2600	25000
265c	1100	4500			32
265d	500	1500			35
265f	1200				24
280b		13000
280c		10000			86
280d		25000
283b		1750			41
283c		4000			50

Соединение	УФ-видимый К_i (нМ)	Клетки РВМС средн. IC₅₀ (нМ)	Целая кровь человека IC₅₀ (нМ)	Выведение Мыши, в/в мл/мин/кг	Выведение Крысы, в/в мл/мин/кг
283d		>8000	10000
308с	3000
308d	3000
500	25	1800	1800
501	2.5	1800	1600
505с		1500
505d		>20000
505f		550		-
510a	65	200		267
510d	2300	>20000
511с	730	>20000		78	40
528			2200
550f			1100
550h			1800
550i			1400
550k			3000
5501			750
550m			2000
550n			<300
550o		450	3000
550p			2900
550q			700
640	155	2250	3900
642	35	8000	2900
645	150
650	550	4000
653	30	2300	6000
655
656	0.6	2100	1600		2.9
662	0.5	1800	800		2.75
668	9	5200	3700		29
669	14		10000
670			4500
671	5	2000	2500		33.2
677			610
678	5	2700	2200
680

Соединение	УФ-видимый К_i (нМ)	Клетки РВМС средн. IC₅₀ (нМ)	Целая кровь человека IC₅₀ (нМ)	Выведение Крысы, в/в мл/мин/кг	Выведение Мыши, в/в мл/мин/кг
681	9	3000	5000
682			1300
683	400	>20000	>20000
684	15	5000	2800
686	4	4000	9000
688а			3000
688b			1300
689а	0.8	910	2500
689b	2.2	600	2000
690а			1600
690b
691а	2.1	2900	1200		9.9
691b	11.5	1,900	1400
692а
692b			1800
693
694	3	2600	2100
695а
695b
695с			2500
696	4.5	2000	2900		13
700	275
701	90
702	45	>5000	20000
703	5	1400	20000
704	30	2600	9800
705	5	2300	3200
706	5	2400	5800
707	180
708	140
709	10	2100	14000
710	110
711	175
910	10	3400	3800
911	9	3500	1900
912	10	4200	3800
913	4.5	2400	7000

Соединение	УФ-видимый К_i (нМ)	Клетки РВМС средн. IC₅₀ (нМ)	Целая кровь человека IC₅₀ (нМ)	Выведение Мыши, в/в мл/мин/кг	Выведение Крысы, в/в мл/мин/кг
914	5.2	2600	2800
915	11.5	>8000	1900
918	7		1150
919	4	2000	4300
920	16	2100	3000
921	8.5	1800	3000
1018	170	4000	5500	-	9,1
1052	100	2500		-	16
1053	27	2000	>20000		34
1056	170				17
1075	120	5000	5500		14.5
1095	360	6000			28
1105	250	3500	3000
1106	75	4000	1700
1107	65
1108	22	1400	2600
1109	80
1110	45
1111	18	6050	4400
1112	3.5	1800	2300
1113	290
1114	125
1115	250
1116	215
1117	35	1700	1300
1118	380
1119	515
1120	95
1121	170
1122	400
1123	30	2,400	4500
1124	270
1125	55	2300	9000
2001а			3000
2100f
2100g
2100h			2000

Продолжение Таблицы 17
Соединение №	УФ-видимый, K_i(нМ)	Клетки РВМС сред. IC₅₀ (нМ)	Целая кровь человека IC₅₀ (нМ)	Введение Мыши, в/в мл/мин/кг	Введение Крысы, в/в мл/мин/кг
2100i
2100j	30000		12000
2100k	520	4000	600
2100l		750	2200
2100m
2100n	670	770	4000
2100o	670	1150	1500

Мы получили следующие данные для выбранных соединений настоящего изобретения с помощью способов, описанных в данной заявке (см. Примеры 1-4). Структуры и способы получения соединений настоящего изобретения описаны в Примерах 28-31.

Таблица 18
Соединение	Флюоресцентный анализ k_inact m^-1c^-1	Клетки РВМС avg. IC₅₀ (нМ)	Целая кровь человека IC₅₀ (нМ)	Введение Мыши, в/в мл/мин/кг	Введение Крысы, в/в мл/мин/кг
286	370000	300	1600		119
505b	190000	1500	2100	161	196
505е	420000	9000	1000

Пример 19

Точный (быстрый) in vivo анализ эффективности препаратов, как анти-воспалительных агентов

Результаты, приведенные в Таблице 19, показывают, что соединения 412f, 412d и 696а ингибируют продукцию IL-1β в LPS-стимулированных мышах при пероральном введении. Использовали следующие среды для лекарств: этанол/РЕG/вода, β -циклодекстрин, лаброзол/вода или кремофор/вода. Соединения вводили через определенные промежутки времени после LPS-стимуляции. Схема описана в Примере 7.

Таблица 19. Ингибирование (%) продукции IL-1β в LPS-стимулированных мышах.
Соединение	Доза 10 мг/кг	Доза 25 мг/кг	Доза 50 мг/кг
412f	17%	25%	32%
412е	5%	17%	61%
696а	0	45%	52%

Пример 20

Стимуляция мышей интраперитонеальным введением каррагенана

Воспалительное состояние у мышей индуцируют интраперитонеальной (IP) инъекцией 10 мг каррагенана в 0,5 мл физ. раствора (Griswold et al., Inflammation, 13, pp. 727-739 (1989)). Препараты вводили перорально через зонд, используя следующие среды для лекарств: этанол/РЕG/вода, β -циклодекстрин, лаброзол/вода или кремофор/вода. Мышей умершвляют через 4 часа после введения каррагенана, затем проводят IP инъекцию 2 мл физ. раствора, содержащего 5 ед./мл гепарина. После легкого массажа перитонеальной области делают небольшой надрез, содержимое собирают и записывают объем. До центрифугирования образцы держат во льду. Центрифугируют для удаления клеток (130× g, 8 мин при 4° С), полученный супернатант хранят при -20° С. Уровни IL-1β в перитонеальной жидкости определяют с помощью ELISA-теста.

Результаты, приведенные в таблице 20, демонстрируют, что пролекарство 412f ингибирует продукцию IL-1β в каррагенан-стимулированных мышах после перорального введения препарата. Соединение 214е не ингибировало продукцию IL-1β при пероральном введении в дозе 50 мг/кг.

Таблица 20. Ингибирование (%) продукции IL-1β соединениями 412f и 412d в каррагенан-стимулированных мышах.
Доза (мг/кг)	Соединение 412f	Соединение 412d
1	30%	0
10	54%	32%
25	49%	31%
50	73%	36%
100	75%	53%

Пример 21

Коллаген-индуцированный артрит типа II

Коллаген-индуцированный артрит типа II вызывали у самцов мышей DBA/I J по методике, описанной Wooley and Geiger (Wooley, P.H., Methods in Enzvmology. 162, pp. 361-373 (1988) and Geiger, Т. Clinical and Experimental Rheumatology. 11,pp. 515-522 (1993)). Коллаген типа II из грудины цыпленка (4 мг/кг в 10 мМ уксусной кислоте) эмульгировали в равном объеме полного адъюванта Фрейнда (FCA) повторяющимися пассажами (400) между двумя стеклянными шприцами объемом 10 мл с иглой с двойным центром 16 калибра. Мышей иммунизировали путем внутридермальной инъекции (50 мкл; 100 мкл СII на мышь) эмульсии коллагена спустя 21 день в противоположно-боковом положении основания хвоста. Препараты вводили дважды в день (10, 25 и 50 мг/кг) перорально через зонд с интервалом приблизительно в 7 часов. Используемые среды для лекарств включают этанол/РЕG/вода, β -циклодекстрин, лаброзол/вода или кремофор/вода. Обработку препаратом начинали в пределах 2 часов после введения усилителя иммунизации СII. Воспалительное состояние оценивали по шкале увеличения тяжести от 1 до 4 по двум передним лапкам, эти значения складывали и получали конечное значение.

Результаты, представленные на фиг.12,13 и 14, демонстрируют, что пролекарства 412f, 412d и 696а ингибируют воспалительное состояние у мышей с коллаген-индуцированным артритом при пероральном введении. Соединение 214е не ингибировало воспаления в дозе 50 мг/кг при пероральном введении через зонд один раз в день.

Пример 22

Определение биодоступности препаратов in vivo

Препараты (10-100 мг/кг) вводят крысам перорально (10 мл/кг), используя следующие среды для лекарств: этанол/РЕG/вода, β -циклодекстрин, лаброзол/вода или кремофор/вода. Образцы крови берут из сонной артерии через 0,25, 0,50, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6 и 8 часов после введения препарата, центрифугируют, получая плазму, и хранят при -70° С до анализа. Концентрации альдегида определяют, используя ферментный анализ. Фармакокинетический анализ данных проводят с помощью метода нелинейной регрессии, используя RStrip (MicroMath Software, UT). Значения доступности препаратов определяли следующим образом: (AUC препарата после перорального введения пролекарства/AUC препарата после в/в введения препарата)х(в/в дозировка/пероральн. дозировка)× 100%.

Результаты, приведенные в Таблице 21, демонстрируют, что пролекарства 412f, 412d и 696а дают значительный уровень лекарства в крови и обладают хорошей доступностью при пероральном применении. При пероральном применении препарата 214е его присутствие в крови не было обнаружено.

Таблица 21. Биодоступность соединений 412f, 412d, 696a и 214е при пероральном применении у крыс.
Соединение	Доза (мг/кг)	C_макс (мкг/мл)	Доступность препарата (%)
412f	25	2,4	32
412d	25	2,6	35
696a	50	1,2	10
214е	45	0,2	0,9

Пример 23

ICE расщепляет и активирует про-IGIF

Плазмиды с экспрессией ICE и гомолога ICE

0,6 kb кДНК, кодирующая мышиный про-IGIF полной длины цепи (Н. Okamura et al,. Nature. 378, р.88 (1995)), была встроена в экспрессионный вектор млекопитающих pCDLSRa (Y. Takebe et al., Mol. Cell Biol., 8, p. 466 (1988)).

Обычно плазмиды (3 мкг), кодирующие активный ICE (выше) или три фермента, родственных ICE, TX, CPP32 и СМН-1, встроенные в pCDLSRα экспрессионный вектор (С. Faucheu et al., ЕМВО. 14, р. 1914 (1995); Y. Gu et al., EMBO. 14, p. 1923 (1995); J.A.Lippke et al., J.Biol. Chem. 271, p. 1825 (1996)), трансфицировали в сливающиеся монослои Cos-клеток в плашках диаметром 35 мм, используя DEAE-декстрановый метод (Y. Gu et al., ЕМВО J., 14, р. 1923 (1995)). Через двадцать четыре часа клетки лизировали и лизаты подвергали электрофорезу SDS-PAGE и иммуноблотингу, используя антисыворотку, специфичную для IGIF (Н. Okamura et al., Nature, 378, р.88 (1995)).

С помощью полимеразной цепной реакции сайты Nde I встраивали по 5' и 3' концам мышиной про-IGIF кДНК, используя следующие праймеры:

GGAATTCCATATGGCTGCCATGTCAGAAGAC (начальный) и GGTTAACCATATGCTAACTTTGATGTAAGTTAGTGAG (противоположный). Полученный фрагмент Nde I лигировали в Е. coli экспрессионный вектор рЕТ-15В (Novagen) в сайт Nde I для создания плазмиды, управляющей синтезом полипептида, состоящего из 213 аминокислот и включающего пептид из 21 остатка (

где LVPRGS является сайтом, расщепляющим тромбин), присоединенного во фрейме к N-концу про-IGIF по Аlа2, что подтверждается ДНК-сиквенсом этой плазмиды и N-концевым сиквенсом экспрессируемых белков. Штамм Е. coli BL21(DE3), несущий плазмиду, индуцировали 0,8 мМ изопропил-1-тио-β -D-галактопиранозидом в течение 1,5 часа при 37° С, собирали, подвергали лизису посредством микрофлюидизации (Microfluidic, Watertown, MA) в буфере А (20 мМ фосфат натрия, рН 7,0, 300 мМ NaCl, 2 мМ дитиотреитол, 10% глицерин, 1 мМ фенилметилсульфонил фторид и 2,5 мкг/мл лейпептин). Лизаты осветляли с помощью центрифугирования при 100000× g в течение 30 мин. Затем (His)6-меченный белок про-IGIF выделяли из супернатанта с помощью хроматографии на Ni-NTA-агарозе (Qiagen) в условиях, рекомендуемых производителем.

Реакция расщепления npo-IGIF in vitro

Реакционную смесь реакции расщепления in vitro (30 мкл), содержащую 2 мкг очищенного npo-IGIF и очищенные протеазы различных концентраций в буфере, содержащем 20 мМ Hepes, рН 7,2, 0,1% Triton Х-100, 2 мМ DTT, 1 мМ PMSF и 2,5 мкг/мл лейпептина, инкубировали 1 час при 37° С. Условия расщепления под действием гранзима В использовались такие, как описано выше (Y.Gu et al., J. Biol. Chem., 271, p. 10816 (1996)). Продукты расщепления анализировали с помощью электрофореза SDS-PAGE на 16% гелях и окрашивания Кумасси синим, подвергали N-концевому аминокислотному сиквенсу на ABI автоматическом пептидном секвенаторе в условиях, рекомендуемых производителем.

Кинетические параметры расщепления IGIF под действием ICE

Кинетические параметры (k_cat/К_м, К_м и k_cat) расщепления IGIF под действием ICE определяли следующим образом. Про-IGIF, меченный ³⁵S-метионином (3000 cpm, полученный in vitro транскрипцией и трансляцией с использованием TNT Т7-связанной системой лизатов ретикулоцитов (Promega) и кДНК про-IGIF в векторе рSР73 в качестве шаблона) инкубировали в реакционной смеси объемом 60 мкл, содержащей от 0,1 до 1 нМ рекомбинантного ICE и от 190 нМ до 12 мкМ немеченного про-IGIF в течение 8-10 мин при 37° С. Концентрации продукта расщепления определяли с помощью анализов SDS-PAGE и Phospholmager. Кинетические параметры рассчитывали путем приведения методом нелинейной регрессии зависимости значений скорости от концентрации к уравнению Михаэлиса-Ментен, используя программу Enzfitter (Biosoft).

Определение индукции синтеза IFN-γ

Клетки А.Е7 Th1 (H. Quill and R. H. Schwartz, J. Immunol., 138, p. 3704 (1987)) (0,3× 10³ клеток в 0,15 мл среды Click, дополненной 10% FBS, 50 мкМ 2-меркаптоэтанола 50 ед./мл IL-2) в 96-луночных планшетах обрабатывали IGIF в течение 18-20 часов и супернатант культуры анализировали на содержание IFN-γ методом ELISA (Endogen, Cambridge, MA).

Пример 24

Процессинг про-IGIF под действием ICE в Cos-клетках

Cos клетки трансфицировали различными комбинациями экспрессирующих плазмид, как описано в Примере 23. Трансфицированные Cos клетки (3,5× 10⁵ клеток в 35-мм плашках) подвергали мечению в течение 7 часов, используя 1 мл свободной от метионина DMEM, содержащей 2,5% нормальной DMEM, 1% диализированной фетальной бычьей сыворотки и 300 мкСi/мл ³⁵S-метионина (³⁵S-Express Protein Labeling-Mix, New England Nuclear). Клеточные лизаты (приготовленные в 20 мМ Hepes, pH 7.2 150 мМ NaCl, 0,1% Triton Х-100, 5 мМ этилмалеимид, 1 мМ PMSF, 2,5 мкг/мл лейпептин), или культуральную среду, выдерживающуюся в тех же условиях, подвергали иммунопреципитации с анти-IGIF антителами, которые распознают как предшественник, так и зрелую форму IGIF (H. Okamura et al., Nature, 378, р. 88 (1995)). Иммунопреципитированные белки анализировали методами SDS-PAGE (электрофорез на полиакриламидном геле) и флюорографии (фиг.2А).

Мы также определяли наличие IFN-γ индуцирующей активности в клеточных лизатах и культуральной среде трансфицированных клеток (фиг.2В). Трансфицированные Cos клетки (3,5× 10⁵ клеток в 35-мм плашках) выращивали в 1 мл среды в течение 18 часов. Среду собирали и использовали в анализе индукции IFN-γ при конечном разбавлении 1:10 (Пример 23). Осадки Cos клеток от той же трансфекции подвергали лизису в 100 мкл 20 мМ Hepes, pH 7,0, путем трехкратного замораживания-оттаивания. Лизаты осветляли центрифугированием, как описано выше, и использовали в анализе при разбавлении 1:10.

Пример 25

IGIF является физиологическим субстратом для ICE

Дикий тип (ICE+/+) и ICE-/- мышей праймировали инактивированными под действием тепла Р. acnes, клетки Купфера выделяли из этих мышей через 7 дней после праймирования и затем стимулировали 1 мкг/мл LPS в течение 3 часов. Количество IGIF в культуральной среде измеряли с помощью ELISA-теста.

Мышам дикого типа или с дефицитом по ICE вводили интраперитонеально убитые тепловой обработкой р. acnes по описаной методике (Н.Okamura et al., Infection and Immunity. 63, p. 3966 (1995)). Клетки Купфера получали через семь дней в соответствии с методикой Tsutsui et al. (Н. Tsutsui et al., Hepato-Gastroenterol., 39, р. 553 (1992)), за исключением того, что вместо nycodenz градиента использовали метризамид. В каждом эксперименте клетки Купфера от 2-3 животных объединяли и культивировали в среде RPMI 1640, дополненной 10% фетальной сывороткой ягнят и 1 мкг/мл. Клеточные лизаты и культуральную среду получали спустя 3 часа.

Клетки Купфера от мышей дикого типа и ICE-/- мышей метаболически метили ³⁵S-метионином так же, как и Cos клетки (описано выше в Примере 24) за исключением того, что вместо DMEM использовали не содержащую метионина RPMI 1640. Эксперименты по иммунопреципитации проводили на клеточных лизатах и культуральной среде, и иммунопреципитаты анализировали методами SDS-PAGE и флюорографии, как описано в Примере 23. См. фиг.3.

Пример 26

Индукция продукции INF-γ in vivo

LPS в смеси с 0,5% карбоксиметилцеллюлозой в PBS, рН 7,4, вводили мышам путем внутриперитонеальной инъекции (LPS 30 мг/кг) в дозировочном объеме 10 мл/кг. Кровь собирали каждые 3 часа в течение 24 часов от групп из трех мышей дикого типа или с дефицитом по ICE. Уровни INF-γ в сыворотке определяли методом ELISA (Endogen).

Пример 27

Анализ ингибирования IGIF и IFN-γ

Ингибирование процессинга IGIF под действием ингибиторов ICE определяли в анализе ингибирования ICE, как описано в данной заявке (см. Пример 1 и Таблицу 22).

Анализ человеческих РВМС

Клетки светлого слоя кровяного сгустка человека получали от доноров крови и выделяли мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) центрифугированием в LeukoPrep пробирках (Becton-Dickinson, Lincoln Park, NJ). РВМС добавляли (3× 10⁶/лунка) к 24-луночным Corning планшетам для культивирования тканей и после одного часа инкубации при 37° С не прилипшие клетки удаляли осторожным промыванием. Прилипшие мононуклеарные клетки стимулировали LPS (1 мкг/мл) в присутствии или отсутствие ингибитора ICE в 2 мл RPMI-1640-10% FBS. После 16-18 часов инкубации при 37° С количественно определяли содержание IGIF и IFN-γ в супернатантах культуры с помощью ELISA - теста.

Например, мы получили следующие данные для соединения 412 настоящего изобретения, используя описанные здесь методы. Структура соединения 412 показана в таблице 22.

Таблица 22
соединение	УФ-видимый К_i (нМ)	Клетки РВМС средн. IС₅₀ (нМ)
412	1,3	580

Пример 28

Соединения данного изобретения могут быть получены различными способами. Далее иллюстрируется предпочтительный способ:

К раствору соединения А (1,1 эквивалент) в CH₂Cl₂ (или DMF или CH₂Cl₂/DMF (1:1)) добавляют трифенилфосфин (0-0,5 эквивалентов), нуклеофильный агент (2-50 эквивалентов) и тетракис-трифенилфосфин палладий (0) (0,05-0,1 эквивалента) при температуре окружающей среды в инертной атмосфере (азота или аргона). Через 10 мин эту реакционную смесь необязательно концентрируют, затем добавляют раствор кислоты A-I или A-II в CH₂Cl₂ (или DMF или СН₂Сl₂/DMF (1:1)), после чего добавляют НОВТ (1,1 эквивалент) и EDC (1,1 эквивалент). Полученную реакционную смесь оставляют перемешиваться при температуре окружающей среды в течение 1-48 часов, получая продукты конденсации C-I или C-II.

Различные нуклеофильные агенты могут быть использованы в вышеупомянутом процессе. Merzouk and Guibe, Tetrahedron Letters, 33, pp. 477-480 (1992); Guibe and Balavoine, Journal of Organic Chemistry, 52, pp. 4984-4993 (1987). Предпочтительные нуклеофильные агенты, которые могут быть использованы, включают следующие соединения: димедон, морфолин, триметилсилил диметиламин и диметил барбитуровую кислоту. Более предпочтительными нуклеофильными агентами являются триметилсилил диметиламин (2-5 эквивалентов) и диметил барбитуровая кислота (5-50 эквивалентов). Если нуклеофильным агентом является триметилсилил диметиламин, вышеупомянутую реакционную смесь надо концентрировать перед добавлением A-I или А-II.

Другие соединения данного изобретения могут быть получены гидролизом соединений, представленных формулами C-I и C-II, с получением соединений, представленных формулами H-I и H-II, как продемонстрировано на следующей схеме:

Гидролиз можно проводить в различных условиях в присутствии кислоты и воды. Кислоты, которые могут быть использованы, включают п-толуолсульфоновую, метансульфоновую, серную, перхлорную, трифторуксусную и хлористоводородную. Например, могут быть использованы растворы трифторуксусной кислоты (1-90% по весу) или хлористоводородной кислоты (0,1-30% по весу) в СН₃СN/Н₂О (1-90% Н₂О по весу) в интервале температур 0-50° С.

Пример 29

Соединения 213f, 213g, 213h, 213i, 213j, 213k, 2131, 213m, 214f, 214g, 214h, 214i, 214j, 214k, 2141, 214m, 550f, 550g, 550h, 550i, 550j, 550k, 5501 и 550m получают следующим образом.

Соединение (213f) синтезируют из 212f по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 504 мг соединения 213f в виде твердого вещества желтого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 1,10(br. m, 0.25Н), 1,30(br. m, 2H), 1,50(br. m, 1H), 1,65(br. m, 1,5H), 1,80(br. m, 0,25H), 1,90(br. m, 0,25H), 1,95(br. m, 0,5H,), 2,05(br. m, 0.25H), 2,15(m, 1H). 2,3(m, 1H), 2,5(br. m, 1H), 2.6(dd, 1H), 2,8(m, 1H), 3,l(br. s, 3H), 3,15(br. m, 1H), 3,32(br. s, 3H), 3,5(m, 1H), 4,5(br. m, 1H), 4,62(d, 0,25H), 4,72(m, 3H), 4,95(m, 1H), 5,1(br. t, 0.25H), 5,15(br. t, 0,75H), 5,7(d, 1H), 6,75(d, 2H), 7,35(br. s, 5H), 7,75(d, 2H).

Соединение (213g) синтезируют из 212g по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 400 мг соединения 213g, ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 1,5(br. m, 1H), 1,65(br. m, 2H), 1,70(br. m, 0,25H), 1,90(br. m, 1H), 1,95(br. m, 1H), 2,05(br. m, 0,25H), 2,10(m, 1H), 2,3(m, 1H), 2,5(m, 2H), 2,59(d, 1H), 2,6(d, 1H), 2,78(d, 1H), 2,8(d, 1H), 2,93(br. s, 4H), 3,05(br. m, 1H), 3,15(br. m, 0.25H), 3,3(br. s, 3H), 3,5(m, 2H), 4,5(br. m, 2H), 4,65(d, 1H), 4,7(br. m, 2H), 4,95(br. m, 1H), 5,15(br. t, 0,25H), 5,2(br. t, 0.75H), 5.2(d, 1H), 6,95(d, 1H), 7,15(d, 1H), 7,25(br. s, 1H), 7,3(br. t, 2H), 7,45(br. s, 6H).

Соединение (213h) синтезируют из 212h по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 296 мг соединения 213h, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,55-1,68(m, 1H), 1,7-2,05(m, 3H), 2,3-2,5(m, 2H), 2,65-2,8(m, 1H), 2,85-2,93(m, 1H), 2,95-3,25(m, 3H), 4,44-4,65(m, 2H), 4,68-4,82(m, 1H), 4,9-4,95(d, 1H), 5,05-5,18(m, 2H), 5.28(s, 0,5H), 5,55-5,58(d, 0.5H), 6.52-6.58(d, 0,5H), 6,7-6,76(m, 2H), 6,82-6.85(d, 0.5H), 7,3-7,4(m. 5H), 7,52-7,58(m, 1H),7.75(s,0.5H), 7,8(s, 0.5H).

Соединение (213i) синтезируют из 212i по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 1,1 г соединения 213i, ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 1,55-2,05(m, 6H), 2,26-2,5(m, 2H), 2,68-2,82(m, 1H), 2,85-2,92(m, 1H), 2,95-3,25(m, 2H), 3,82(s, 1,5H), 3,85(s, 1,5H), 4,4-4,65(m, 2H), 4,7-4,78(m, 1H), 4,88-4,95(m, 1H), 5,05-5,23(m, 1H), 5,28(s, 0,5H), 5,55-5,58(d, 0,5H), 6,6-6,65(m, 1H), 6,8-6,84(m, 1H), 6,9-6,95(m, 3H), 7,3-7,45(m, 4H), 7,78-7,85(m, 2H).

Соединение (213j) синтезируют из 212j по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 367 мг соединения 213j, ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 1,55-2,05(m, 12Н), 2,25(d, 1H), 2,35(m, 1H), 2,48(m, 2H), 2,75(m, 2H), 2,9(m, 1H), 2,95-3,25(m, 5H), 4,45(t, 1H), 4,5-4,6(m, 4H), 4,7(m, 1H), 4,75(d. 1H), 4,88(m, 1H), 5,05(m, 2H), 5,15(q, 1H), 5,3(s, 1H), 5,58(d, 1H), 6.5(d, 1H), 6,9(d, 1H), 7,05(d, 1H), 7,25-7,35(m, 5H), 7,6(s, 2H), 7.7(s, 2H).

Соединение (213k) синтезируют из 212k по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 593 мг соединения 213k, ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 1,5(m, 1H), 1,6-1,7(m, 2H), 1,75-1,95(m,4H), 2,15(m, 2H), 2,3(m, 1H), 2,6(m, 1H), 2,7(m, 1H), 3,05(m, 2H), 3,15(m, 1H), 3,5(m, 2H), 4,45(m, 2H), 4,65(d, 1H), 4,7(m, 1H), 4,95(m, 1H), 5,15(m, 1H), 5,4(3, 1H). 5,7(d, 1H), 7,3(m, 5H), 7,85(s, 2H).

Соединение (213l) синтезируют из 2121 по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 133 мг соединения 2131, ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 1,55-l,7(m, 1H), 1,75-2,05(m, 3H), 2,25(s, 1,5H), 2,27(s, 1,5H), 2,3-2,48(m, 2H), 2,7-2,83(m, 1H), 2,85-2,94(dd,1H), 2,95-3,25 (m, 2H), 4,42-4,65 (m, 2H), 4,68-4,85 (m, 1H), 4,88-4,95 (m, 1H), 5,05-5,18 (m, 2H), 5,32 (s, 0,5H), 5,55-5,6 (d, 0,5H), 6,48-6.55 (d, 1H), 6,88-6,92 (d, 1H), 7,0-7,04 (d, 0,5H), 7,15-7,2 (d, 0,5H), 7,3-7,4 (m, 4H), 7,64-7,78 (m, 2H), 7,88-7,94 (m, 1H), 8,45-8,56 (m, 1H).

Соединение (213m) синтезируют из 212m по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 991 мг соединения 213m, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,5-2,15 (m, 5Н), 2,2-2,55 (m, 3Н), 2,6-3,3 (m, 4H), 3,95 (2s, 3Н), 4,45-4,7 (m, 2H), 4,7-4,85 (m, 1H), 4,85-4,95 (m, 1H), 5,05-5,25 (m, 1H), 5,3 (s, 0,5Н), 5,6 (d, 0,5Н), 6,55 (d, 0,5H), 6,85 (d, 0,5Н), 7,0 (d, 0,5H), 7,25-7,6 (m, 5,5H), 7,75 (s, 1H), 7,85 (s, 1H).

Соединение (550f) синтезируют из 212f по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 420 мг соединения 550f в виде не совсем белого твердого вещества, ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 1,2-l,25 (br. t, 3Н), 1,35 (m, 1H), 1,55 (br. m, 1H), 1,88-2,02 (br. m, 4H), 2,3 (d, 1H), 2,35 (m, 1H), 2,45 (m, 1H), 2,55-2,75 (m, 3H), 3,0 (s, 6H), 3,25 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,65 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,9 (m, 1H), 4,3 (1, 1H), 4,55 (m, 2H), 4,68 (br. m, 1H), 3,9 (m, 1H), 4,3 (t, 1H), 4,55 (m, 2H), 4,68 (br. m, 1H), 4,95 (br. m, 1H), 5,1 (br. m, 2H), 5,45 (d, 1H), 6,5 (m, 2H), 7,7 (m, 2H).

Соединение (550h) синтезируют из 212h по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 195 мг соединения 550h в виде твердого вещества белого цвета. ¹H ЯMP (DMSO-d₆) δ 1,1-1,18 (2t, 3H), 1,6-1,7 (m, 2H), 1,88-2,05 (m, 2H), 2,1-2,35 (m, 3H), 2,48-2,56 (m, 1H), 2,75-2,8 (m, 0,75H), 2,88-3,08 (m, 1,25H), 3,25-3,4 (m, 1H), 3,55-3,8 (m, 2H), 4,35-4,45 (m, 1H), 4,55-4,62 (m, 1H), 4,8-4,88 (m, 1H), 4,98-5,03 (m, 0,25H), 5,1-5,13 (m, 0,75H), 5,33 (s, 0,25H), 5,58-5,6 (d, 0,75H), 5,9-6,0 (br. s, 2H), 6,8-6,85 (d, 1H), 7,58-7,62 (d, 1H), 7,82 (s, 1H), 8,22-8,28 (d, 1H), 8,48-8,52 (d, 0,75H), 8,72-8,76 (d, 0,25H).

Соединение (550i) синтезируют из 212i по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 135 мг соединения 550i, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,18-1,28 (2t, 3Н), 1,6-1,75 (m, 1,5Н), 1,9-2,1 (ml, 3,5H), 2,22-2,3 (d, 0,5H), 2,38-2,47 (m, 1,5H), 2,7-2,8 (m, 0,5H), 2,8-2,93 (m, 1H), 2,94-3,15 (m, 1,5H), 3,15-3,28 (m, 1H), 3,55-3,62 (q, 0,5H), 3,62-3,73 (q, 0,5H), 3,78-3,88 (q, 0,5H), 3,88 (s, 3H), 3,9-3,95 (q, 0,5H), 4,33-4,4 (m, 0,5H), 4,5-4,55 (m, 1H), 4,68-4,76 (m, 0,5H), 4,9-4,95 (m, 0,5H), 5,1-5,2 (m, 1,5H), 5,18 (s, 0,5H), 5,48-5,52 (d, 0,5H), 6,48-6,55 (d, 0,5H), 6,85-6,9 (m, 1H), 6,9-6,95 (П1, 2H), 7,34-7,38 (d, 0,5H), 7,78-7,85 (m, 2H).

Соединение (550k) синтезируют из 212k по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 174 мг соединения 550k в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) δ 1,15 (2t, 3Н), 1,6-1,75 (m, 2H), 1,9-2,05 (m, 2H), 2,1-2,4 (m, 5H), 2,5-2,55 (m, 1H), 2,7-2,8 (m, 0,5H), 2,85-3,0 (m, 1H), 3,0-3,1 (m, 0,5H), 3,55-3,7 (m, 1H), 3,7-3,8 (m, 1H), 4,2 (t, 0,5H), 4,35-4,45 (m, 0,5H), 4,55-4,65 (m, 0,5H), 4,8-4,9 (m, 0,5H), 5,05 (t, 0,5H), 5,15 (t, 0,5H), 5,35 (s, 0,5H), 5,6 (d, 0,5H), 7,95 (s, 2H), 8,5 (d, 0,5H), 8,65 (d, 1H), 8,75 (d, 0,5H), 10,9 (br. s, 1H).

Соединение (550l) синтезируют из 212l по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 151 мг соединения 550l, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,2-1,28 (2t, 3Н), 1,6-1,72 (m, 1,5Н), 1,88-2,15 (m, 3,5Н), 2,22-2,28 (m, 0,5Н), 2,28 (s, 3H), 2,38-2,48 (m, 1.5Н), 2,66-2,92 (m, 1,5Н), 2,95-3,14 (m, 1,5Н), 3,2-3,34 (m, 1H), 3,56-3,63 (q, 0,5H), 3,63-3,72 (q, 0,5Н), 3,8-3,85 (q, 0,5H), 3,9-3,95 (q, 0,5H), 4,32-4,38 (m, 0,5Н), 4,5-4,62 (m, 1H), 4,68-4,75 (m, 0,5Н), 4,88-4,92 (m, 0,5Н), 5,08-5,2 (m, 1,5Н), 5,18 (s, 0,5H), 5,46-5,5 (d, 0,5H), 6,5-6,55 (d, 0,5Н), 6,98-7,05 (m, 1H), 7,42-7,48 (d, 0,5H), 7,63-7,78 (m, 2,5H), 7,9-7,94 (d, 0,5H), 8,44-8,52 (m, 1H).

Соединение (550m) синтезируют из 212m по способу, использующемуся для получения 213е из 212е с образованием 301 мг соединения 550m в виде твердого вещества белого цвета: ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,2-l,35 (2t, 3H), 1,5-1,8 (m, 2H), 1,9-2,15 (5Н), 2,25 (d, 0,5Н), 2,4-2,5 (m, 2H), 2,65-2,8 (m, 0,5H), 2,8-3,0 (m, 0,5H), 3,0-3,2 (m, 1H), 3,2-3,35 (m, 0,5H), 3,55-3,65 (m, 0,5H), 3,65-3,75 (m, 0,5H), 3,8-3,9 (m, 0,5H), 3,9-4,0 (m, 0,5H), 4,4-4,45 (m, 0,5H), 4,55-4,65 (m, 0,5H), 4,7-4,8 (m, 0,5H), 4,85-4,95 (m, 0,5H), 5,05-5,2 (m, 0,5H), 5,2 (s, 0,5H), 5,5 (d, 0,5H), 6,5 (d, 0,5H), 6,9 (d, 0,5H), 6,95 (d, 0,5H), 7,35 (d, 0,5H), 7,75 (s, 1H), 7,85 (s, 1H).

Соединение (214j) синтезируют из 213j по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 62 мг соединения 214j в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 0,9 (t, 1H), 1,3 (br. s, 1H), 1,7 (br. m, 1H), 1,9 (br. m, 1H), 2,1 (br. s, 1H), 2,25 (q, 1H), 2,35 (ln, 1H), 2,48 (m, 2H), 2,65 (t, 1H), 3,15 (br. t, 1H), 3,5 (br. m, 1H), 4,3 (br. s, 1H), 4,55 (m, 2H), 4,95 (t, 1H), 5,25 (br. s, 1H), 7,6 (br. s, 1H), 7,85 (br. s, 1H).

Соединение (214k) синтезируют из 213k по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 80 мг соединения 214k в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 1,6-1,7 (m, 1H), 1,8-2,0 (m, 2H), 2,0-2,1 (m, 2H), 2,15-2,25 (m, 1H), 2,3-2,4 (m, 1H), 2,4-2,55 (m, 2H), 2,6-2,75 (m, 1H), 3,05-3,2 (m, 1H), 3,4-3,6 (m, 2H), 4,2-4,3 (m, 1H), 4,45-4,6 (m, 1H), 4,8-5,0 (m, 1H), 5,1-5,2 (m, 1H), 7,85 (s, 2H).

Соединение (2141) синтезируют из 2131 по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 91 мг соединения 214l в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) δ 1,65 (br, m, 6H), 1,9 (br, m, 6H), 2,15 (s, 3H), 2,3 (m, 3H), 2,6-2,85 (m, 3H), 5,29 (m, 2Н), 3,0 (m, 1H), 4,15 (br, q, 1H), 4,4 (m, 3H), 5,0 (m, 1H), 5,15 (m, 1H), 5,45 (s, 1H), 7,8 (d, 2H), 7,95 (d, 1H), 8,05 (s, 1H), 8,65 (m, 2H), 9,65 (s, 1H).

Соединение (214m) синтезируют из 213m по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 105 мг соединения 214m в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 1,6-1,75 (m, 1H), 1,85-1,95 (m, 1H), 2,0-2,1 (m, 2H), 2,15-2,25 (m, 1H), 2,3-2,4 (m, 1H), 2,45-2,55 (m, 2H), 2,65-2,75 (m, 1H), 3,4-3,55 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 4,2-4,3 (m, 1H), 4,45-4,6 (m, 1H), 4,9-5,0 (m, 1H), 5,15-5,2 (m, 1H), 7,9 (s, 2H).

Соединения 308с и 308d получают следующим образом.

Соединение (308с) синтезируют из 212е по способу, использующемуся для получения 308b из 212е с образованием 266 мг соединения 308с, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,6-1,7 (m, 1H), 1,88-1,98 (m, 3H), 2,02-2,15 (m, 1H), 2,3-2,4 (m, 1H), 2,65-2,95 (m, 3H), 3,04-3,09 (m, 1H), 3,12-3,25 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 4,5-4,58 (m, 1H), 4,88-4,95 (m, 1H), 5,1-5,25 (m, 2H), 6,86-6,9 (d, 2H), 7,15-7,25 (m, 2H), 7,36-7,4 (m, 1H), 7,75-7,8 (d, 2H).

Соединение (308d) синтезируют из 212е по способу, использующемуся для получения 308b из 212е с образованием 270 мг соединения 308d. ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,55-1,65 (m, 1H), 1,8-2,1 (m, 4H), 2,3-2,4 (m, 1H), 2,65-2,88 (m, 3H), 2,9-3,3 (m, 3H), 4,5-4,58 (m, 1H), 4,88- 4,95 (m, 1H), 5,05 (s, 2H), 5,1-5,2 (m, 1H), 6,82-6,95 (m, 2H), 7,02-7,15 (m, 2H), 7,28 (m, 5H), 7,45 (m, 1H), 7,72 (d, 2H).

Соединения 2100f, 2100g, 2100h, 2100i и 2100j получают по описанной ниже схеме.

(2101а) синтезируют из аллилоксикарбониламино-β -трет-бутил аспартата по способу, используемому Chapman (Bioorg. & Med. Chem. Lett., 2, pp.615-618 (1992)) для получения (3S,2RS) 3-аллилоксикарбониламино-2-бензилокси-5-оксотетрагидрофурана, используя 4-хлорбензиловый спирт вместо бензилового спирта, получая 1,84 г соединения 2101а в виде кристаллического твердого вещества.

Соединение (2100f) синтезируют из 212е по способу, использующемуся для получения 213е из 212е, используя 2101а, с образованием 380 мг соединения 2100f, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,8-2,0 (m, 10Н), 2,30 (d, 1H), 2,31-2,5 (m, 3H), 2,7-2,9 (m, 3H), 3,05 (m, 2H), 3,1-3,2 (m, 4H), 4,45 (q, 1H), 4,5-4,6 (m, 3H), 4,7 (d, 2H), 4,85 (d, 1H), 4,9 (l, 1H), 5,2 (l, 1H), 5,15 (m, 2H), 5,25 (s, 1H), 5,55 (d, 1H), 6,5 (d, 1H), 6,9 (d, 1H), 6,95 (d, 1H), 7,25 (m, 3H), 7,35 (t, 2H), 7,45 (m, 2H), 7,55 (1H), 7,8 (m, 3H).

Соединение (2101b) синтезируют из (3S,2RS) 3-аллилоксикарбониламино-2-бензилокси-5-оксотетрагидрофуран по способу, использующемуся для получения 2100d из 214е, используя Н₂SО₄ вместо pTSA, с образованием 2101b.

(2100g) синтезируют из 212е по способу, использующемуся для получения 213е из 212е, используя 2101b, получая 31 мг 2100g, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,19 (d), 1,94 (br s), 2,00-2,12 (т), 2,24 (d), 2,42 (dd), 2,71-2,83 (m), 3,02 (dd), 3,12-3,27 (шир. m), 3,93 (m), 4,32-4,37 (m), 4,52-4,63 (m), 4,90-4,95 (m), 5,12-5,20 (m), 5,28 (s), 6,93 (d), 7,10 (d), 7,41-7,50 (m), 7,51-7,58 (m), 7,84 (d).

(2100h). Раствор 214е (287 мг, 0,65 ммоля) в пиридине (5 мл) обрабатывают Ас₂О (0,4 мл, 3,62 ммолей). Через 6 часов реакционную смесь выливают в 5% NaHSO₄ и экстрагируют 3 раза EtOAc. Объединенные органические слои промывают нас. солевым раствором, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. После хроматографии (SiO₂, EtOAc) получают 119 мг соединения 2100h, ¹H ЯМР (CDCl₃), смесь четырех диастереомеров) δ 1,80-2,05 (m), 2,12 (s), 2,13 (s), 2,19 (s), 2,212 (d), 2,67-2,75 (m), 2,80-2,95 (m), 3,00-3,20 (m), 3,21-3,33 (m), 3,50-3,95 (четыре дискретных мультиплета), 4,19 (m), 4,55 (m), 4,57-4,65 (m), 4,69 (m), 4,85-4,95 (m), 5,04 (m), 5,10 (s), 5,10-5,22 (m), 6,46 (d), 6,03 (s), 6,50 (d), 6,58 (d), 6,75 (d), 6,95-7,05 (m), 7,22 (m), 7,30 (m), 7,71 (d), 7,75-7,83 (m).

(2100i). К раствору соединения 2100b (1,5 г, 2,7 ммолей) в СН₃СN (10 мл) добавляют IN НСl при температуре окружающей среды. Через 6 часов добавляют твердый NаНСО₃ и продукт экстрагируют EtOAc, высушивают над MgSO₄ и концентрируют в вакууме. После хроматографии (SiO₂, 30-100% CH₂Cl₂ в EtOAc) получают 123 мг соединения 2100i, ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 1,25 (1, 3H), 1,6-1,8 (m, 1Н), 1,9-2,2 (m, 5H), 2,4-2,5 (m, 1H), 2,75-2,9 (m, 2H), 3,0-3,1 (m, 2H), 3,2-3,25 (m, 1H), 4,05-4,2 (m, 1IH), 4,5-4,7 (m, 1H), 5,1-5,25 (m, 1H), 7,0-7,2 (m, 2H), 7,4-7,45 (m, 2H), 7,5 (t, 1H), 7,8 (t, 2H), 9,5 (s, 1H).

Соединение (2100j) синтезируют из 213j по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 62 мг соединения 2100j, ¹H ЯМР (СDСl₃) δ 1,3 (t, 3H), 1,6-1,8 (m, 2Н), 1,9-2,25 (m, 4Н), 2,25 (s, 3H), 2,3-2,45 (m, 1H), 2,8-3,0 (m, 1H), 3,0-3,25 (m, 2H), 3,4-3,45 (m, 2H), 4,1-4,2 (m, 2H), 4,55-5,47 (m, 1H), 5,1-5,25 (m, 1H), 6,8 (s, IH), 7,0-7,1 (m, 2H), 7,5 (t, 1H), 7,8 (t, 2H), 9,5 (s, 1H).

Соединения 500 и 501 описаны в Таблице 23. Эти соединения получают с помощью способов, сходных со способами получения соединений 404-449 (см. Пример 11).

Соединения, описанные ниже (213m, 213n, 213o, 213p, 213q, 213r, 213s, 213t, 213u, 213v, 213w, 213x и 214w), получают с помощью способов, использующихся для получения соединений 213b-f.

Соединения 419, 415, 450, 456, 475, 404, 486, 487, 417, 408 и 418 тоже могут быть получены по описанной ниже схеме.

соединение	R¹
213m, 419	МеОС (О)-
213n, 415

213о, 450
213р, 456
213q, 475
213r, 404
213s, 486
213t, 487
213u, 417

213v, 408
213w, 214w
213х, 418

Соединение (213n) выделяют из смеси диастереомеров (соотношение изомеров син.:анти 6:4) (1,43 г, 82%) в виде твердого вещества белого цвета: т.пл. 206-10° С; IR (КВr) 3288, 1787, 1680, 1657, 1651, 1619, 1548, 1440, 1256, 1135; ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) δ 8,75 (0,4Н, d), 8,55 (0,6H, d), 8,45 и 8,43 (1Н, 2xd), 7,50 (1Н, d), 7,42 (1Н, s), 7,40-7,27 (5Н, m), 7,01 (1Н, d), 6,11 (2Н, s), 5,67 (0,6Н, d), 5,43 (0,4H, s), 5,10-5,00 (1Н, m), 4,90-4,59 (3,5H, m), 4,45-4,25 (1,5Н, m), 3,47-3,20 (1Н, m), 3,20-2,70 (2Н, m), 2,65-2,35 (1Н, m), 2,35-2,00 (3Н, m), 2,00-1,75 (2Н, m), 1,65-1,40 (2Н, m). Аналитически рассчитано для С₂₉Н₃₀N₄O₉: С, 60,20; Н, 5,23; N, 9,68. Обнаружено: С, 60,08; Н, 5,32; N, 9,50. MC (ES⁺) 580 (M⁺ + 2, 35%), 579 (М⁺ + 1, 100), 404 (5), 367 (5), 236 (7), 107 (5).

(213о) анти-изомер в виде пенистого твердого вещества белого цвета (0,73 г, 69%): т.пл. 135-40° С; [α ]

\binom{21}{D}

-37,3° (с 0,1, СН₂Cl₂); IR (КВr) 3452, 3310, 1790, 1664, 1659, 1650, 1549, 1425, 1258, 1121; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 10,11 (1Н, s), 8,77 (1Н, d), 8,57 (1Н, d), 8,01 (1Н, S), 7,76 (1H, d), 7,55 (1Н, d), 7,45-7,25 (6Н, m), 5,43 (1Н, s), 5,08-5,00 (1Н, m), 4,95-4,73 (1Н, m), 4,76 и 4,68 (2Н, dd), 3,40-3,20 (1Н, m), 3,09 (1Н, dd), 3,02-2,75 (1Н, m), 2,45-2,06 (4Н, m), 2,06 (3Н, s), 2,00-1,75 (2Н, m), 1,70-1,40 (2Н, m). Аналитически рассчитано для С₃₀Н₃₃N₅O₈· 0,75 Н₂О: С, 59,54; Н, 5,75; N, 11,57. Обнаружено: С, 59,40; Н, 5,62; N, 11,50. MC (ES⁺) 593 (M⁺ 2, 33%), 592 (М⁺ + 1, 100), 574 (7), 487 (7), 475 (6), 385 (9), 373 (26), 318 (14), 296 (11), 266 (10), 221 (22).

(213р) выделяют в виде белой пены (1,2 г, 77%): [α ]

\binom{20}{D}

115° (с 0,20, СН₂Сl₂); IR (КВr) 3368, 2946, 1794, 1654, 1609, 1540, 1505, 1421, 1277, 1175, 1119, 980; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 10,1 (1H, s), 8,80 (0,5H, d, J=6,6), 8,60 (0,5H, d, J=7,2), 8,40-8,36 (1H, 2d), 7,82 (2Н, d, J=8,0), 7,41 (5Н, bs), 6,86 (2Н, d, J=8,6), 5,72 (0,5H, d, J=5,0), 5,49 (0,5H, bs), 5,13-5,07 (1H, m), 4,95-4,65 (2,5H, m), 4,49-4,38 (2,5H, m), 3,49-3,30 (2Н, m), 3,21, 2,79 (2Н, m), 2,40-1,41 (7H, m), MS (ES⁺) 551.

(213q) выделяют в виде белого стеклоподобного твердого вещества (80%): т.пл. 145-149° С; [α ]

\binom{23}{D}

-56,0° (с 0,05, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3399-3319, 1791, 1657, 1543, 1420, 1253, 1119; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 9,54 (1H, S), 7,65 (1H, d, J=7,9), 7,51 (1H, d, J=6,9), 7,44-7,25 (7Н, m), 7,18-7,06 (3Н, m), 5,30-5,20 (1H, m), 5,27 (1H, S), 4,84 (1H, m), 4,79 10 (1H, d, J=11,4), 4,56 (1H, d, J=11,3), 4,47 (2Н, m), 3,28 (1H, m), 3,10-2,97 (2Н, m), 2,71 (1H, m), 2.47-2,37 (1H, m), 2,26 (1H, d, J=17,9), 2,09 (1H, m), 1,83, 1,70, 1,51 (4Н, 3m),

(213r) выделяют как смесь диастереомеров (соотношение изомеров син.:анти 55:45) в виде пенистого твердого вещества белого цвета (1,46 г, 89%): т.пл. 106-10° С; IR (KBr) 3306,2947, 1791, 1659, 1650, 1535, 1421, 1256, 1122; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,76 (0,45H, d), 8,56 (0,55Н, d), 8,49 и 8,47 (1Н, 2 х d), 7,41-7,19 (9Н, m), 5,67 (0,55Н, d), 5,43 (0,45Н, 20 s), 5,11-5,02 (1Н, m), 4,86-4,55 (3,5Н, m), 4,45-4,25 (1,5Н, m), 3,40-3,20 (1Н, m), 3,20-2,70 (2Н, m), 2,65-2,40 (1Н, m), 2,34 (3Н, s), 2,30-1,70 (5Н, m), 1,65-1,40 (2Н, m). Аналитически рассчитано для С₂₉H₃₂N₄O₇: С, 62,66; Н, 5,95; N, 10,08. Обнаружено: С, 62,91; Н, 6,00; N, 9,70. MC (ES⁺) 550 (М⁺ + 2, 43%), 549 (M⁺ + 1, 100), 374 (3), 280 (4), 279 (20), 118 (5).

(213s) выделяют как анти-изомер в виде пенистого твердого вещества белого цвета (0,64 г, 77%): т.пл. 137-41° С; [α ]

\binom{21}{D}

-48,2° (с 0,05, СН₃ОН); IR (KBr) 3477, 3314, 1791, 1659, 1599, 1529, 1499, 1406, 1256, 1122; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 10,45 (1Н, s), 8,76 (1Н, d), 8,50 (1Н, d), 7,86 (2Н, d), 7,69 (2Н, d), 7,41-7,20 (10Н, m), 5,43 (1Н, s), 5,08-4,98 (1Н, m), 4,90-4,73 (1Н, m), 4,76 и 4,68 (2Н, dd), 10 3,67 (2Н, s), 3,40-3,20 (1Н, m), 3,09 (1Н, dd), 3,02-2,75 (1Н, m), 2,39 (1Н, dd), 2,30-2,00 (3Н, m), 2,00-1,75 (2Н, m), 1,70-1,40 (2Н, m). Аналитически рассчитано для С₃₆Н₃₇N₅О₈· 0,5 Н₂О: С, 63,90; Н, 5,66; N, 10,35. Обнаружено: С, 63,68; Н, 5,67; N, 10,24. MC (ES⁺) 669 (M⁺ + 2, 40%), 668 (M⁺ + 1, 100), 640 (12), 435 (18), 425 (23), 403 (33), 328 (17), 302, (32), 274 (22), 197 (16), 138 (17).

(213t) выделяют в виде пенистого твердого вещества белого цвета (0,63 г, 80%): т.пл. 159-64° С; [α ]

\binom{21}{D}

-37,0° (с 0,05, СН₃ОН); IR (KBr) 3463, 3321, 1790, 1680, 1658, 1650, 1644, 1595, 1525, 1501, 1408, 1251, 1113, 933; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 10,13 (1Н, s), 8,76 (1Н. d), 8,48 (1H, d), 7,85 (2Н, d), 7,68 (2Н, d), 7,40-7,25 (5Н, m), 5,43 (1Н, s), 5,08-4,95 (1H, m), 4,92-4,73 (1H, m), 4,76 и 4,68 (2Н, dd), 3,40-3,20 (1H, m), 3,09 (1H, dd), 3,02-2,75 (1H, m), 2,39 (1H, dd), 2,35-2,00 (6Н, m), 2,00-1,75 (2Н, m), 1,70-1,40 5 (2Н, m), 0,93 (6Н, d). Аналитически рассчитано для С₃₃Н₃₉N₅O₈· 0,5Н₂О: С, 61,67; Н, 6,27; N, 10,90. Обнаружено: С, 61,49; Н, 6,24; N, 10,86. МС (ES⁺) 635 (M⁺ + 2, 39%), 634 (M⁺ + 1, 100), 484 (10), 427 (9), 274 (18), 268 (37), 204 (19), 117 (13).

(213u) выделяют в виде твердого вещества белого цвета (81%): т.пл. 120-132° С; IR (KBr) 3361-3334, 1792, 1659, 1585, 1536, 1499, 1457, 1416, 1340, 1236, 1126, 989; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,39-7,29 (6Н, m), 7,12 (1H, s), 7,03 (1H, s), 6,92, 6,83, 6,48 (приблиз./3Н, 3d, J=8,1, 7,5, 8,1), 5,57 (d, 15 J=5,3), 5,27 (1H, s), 5,23-5,06, 4,91-4,71, 4,64-4,43 (6Н, 3m), 3,92, 3,91, 3,89, 3,88 (9Н, 4s), 3,32-2,70, 2,52-2,08, 1,91, 1,63 (1H, 4m),

(213v) выделяют в виде твердого вещества белого цвета (78%): т.пл. 121-7° С; IR (KBr) 3534-3331, 1791, 1659, 1528, 1420, 1256, 1122; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 8,34-8,29 (1H, m), 7,98-7,87 (2Н, m), 7,68-7,45 (4Н, m), 7,34-7,24 (5Н, m), 7,04 (d, J=6,8), 6,78 (d, J=7,8), 6,66 (d, J=7,7), 6,48 (2Н, d, J=7,5). 5,56 (d, J=5,4), 5,15 (1H, s), 5,30-5,14, 5,0, 4,89 (d, J=11,2), 4,71-4,41 (6Н), 3,18-2,80, 2,50-2,27, 2,08-1,60 (11H, 3m).

(213w) выделяют как смесь диастереомеров (65/35) в виде твердого вещества белого цвета (0,9 г, 65%): т.пл. 110-115° С (разлож.); IR (KBr) 3409, 2945, 1792, 1658, 1606, 1534, 1486, 1420, 1330, 1276, 1209, 1122, 980, 960; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,66 (0,35H, d, J=6,9), 7,46-7,20 (7Н, m), 6,93 (0,35H, d, J=7,7), 6,85 (0,65H, d, J=7,6), 6,73 (0,65H, d, J=7,6), 5,96 (0,35Н, bs), 5,85 (0,65H, bs), 5,56 (0,65H, d, J=5,2), 5,28 (0,35Н, bs), 5,20-4,98 (2Н, m), 4,96-4,40 (4Н, m), 3,28-2,55 (3Н, m), 2,53-2,32 (1H, m), 2,23 (6Н, 2s), 2,03-1,40 (7Н, m), MC (ES⁺) 577, (ES⁺) 579.

(213х) выделяют в виде бесцветного порошка (691 мг, 86%): т.пл. 150-70° С; [α ]

\binom{22}{D}

-10,1° (c 0,10, Me₂CO); IR (KBr) 3313, 1791, 1679, 1654, 1597, 1528, 1501, 1457, 1407, 1371, 1315, 1255, 1184, 1122, 933; ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) δ 8,75 (1H, d), 8,47 (1H, d), 7,84 (2Н, d), 7,66 (2Н, d), 7,35 (5Н, m), 5,43 (1H, s), 5,06-5,00 (1H, m), 20 4,90-4,64 (3Н, m), 4,46-4,26 (2Н, m), 3,16-2,86 (2Н, m), 2,45-2,05 (5Н, m), 2,07 (3Н, s), 2,00-1,84 (2Н, m), 1,68-1,56 (2Н, m)/ Аналитически рассчитано для С₃₀Н₃₃N₅O₈· Н₂О: С, 59,11; Н, 5,79; N, 11,49. Обнаружено: С, 59,38; Н, 5,66; N, 11,31; MC (ES⁺) 614 (100%), 592 (M⁺ + 1, 66).

(415) получают тем же способом, что и соединение 214е, с образованием белого твердого вещества (297 мг, 84%): т.пл. 158-62° С; [α ]

\binom{24}{D}

-109,5° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2500 (шир.), 1783, 1659, 1650, 1538, 1486, 1439, 1257, 1037; ¹Н ЯМР (СО₃ОD) δ 7,48 (1H, dd), 7,35 (1H, d), 6,88 (1H, d), 6,03 (2Н, s), 5,25-5,15 (1H, m), 5,02-4,90 (1H, m), 4,63-4,45 (2Н, m), 4,30-4,20 (1H, m), 3,57-3,30 (1H, 10 m), 3,20-3,05 (1H, m), 2,75-2,10 (5Н, m), 2,10-1,60 (4Н, m), MC (ES⁺) 488 (М⁺, 25%), 487 (M⁺ - 1, 100), 443 (8), 387 (3), 315 (5), 150 (6), 127 (5), 113 (8). Точная масса, рассчитанная для С₂₂Н₂₅N₄О₉ (МН⁺). составляет 489,1621. Обнаружено: 489,1648.

(450) получают тем же способом, что и соединение 214е с образованием белого пенистого твердого вещества (378 мг, 94%): т.пл. 175-9° С; [α ]

\binom{22}{D}

-91,7° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2500 (br), 3319, 1659, 1590, 1553, 1427, 1260; ¹H ЯМР (СD₃ОD) δ 8,01 (1H, d), 7,74 (1H, dd), 7,58 (1H, d), 7,45-7,35 (1H, m), 5,25-5,15 (1H, m), 5,05-4,90 (1H, m), 4,60- 4,45 (2Н, m), 4,30-4,20 (1H, m), 3,55-3,30 (1H, m), 3,20-3,00 (1H, m), 2,75-2,20 (5H, m), 2,14 (3H, s), 2,20-1,60 (4H). Аналитически рассчитано для C₂₃H₂₇N₅O₈· 1,5 Н₂О: С, 52,27; Н, 5,72; N, 13,25. Обнаружено: С, 52,31; Н, 5,86; N, 12,85. MC (ES⁺) 501 (М⁺, 26%), 500 (М⁺ - 1, 100), 328 (2), 149 (3), 113 (3).

(456) получают тем же способом, что и соединение 214е с образованием белого твердого вещества (0,73 г, 72%): т.пл. >260° С; [α ]

\binom{20}{D}

-66° (с 0,34, МеОН); IR (KBr) 3401, 2946, 1651, 1609, 1584, 1506, 1426, 1277, 1257, 1177; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 10,2 (1H, очень шир. с), 9,17 (1H, bs), 8,65 (1H, s), 8,37 (1H, d, J=5,4), 7,81 (2Н, d, J=8,2), 6,87 (2Н, d, J=8,4), 5,24 (1H, m), 4,92-4,86 (1H, m), 4,41-4,32 10 (2Н, m), 3,68-3,21 (3H, m), 3,12-2,79 (1H, m), 2,50-1,42 (7Н, m), MC (ES⁺) 459.

(475) получают тем же способом, что и описанный для соединения 214е с образованием белого твердого вещества (79%): т.пл. 150° С (размягч.) 190-210° С; [α ]

\binom{23}{D}

-97,5° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3319, 1658, 1650, 1549, 1421, 1256; ¹Н ЯМР (СH₃ОD) δ 7,61 (1H, d, J=8,0), 7,43 (1H, d, J=8,1), 7,21 (2Н, m), 7,05 (1H, m), 5,21 (1H, m), 5,07-4,77 (1H, m), 4,54 (2Н, m), 4,23 (1H, m), 3,46 (1H, m), 3,14 (1H, m), 2,66-1,71 (9Н, m). MC (ES⁺, m/z), 482 (M⁺ - 1, 100%).

(404) получают тем же способом, что и соединение 214е с образованием белого твердого вещества (0,79 г, 86%): т.пл. 156-9° С; [α ]

\binom{25}{D}

-119,7° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2500 (br), 3387, 3309, 2956, 1785, 1659, 1650, 1535, 1422, 1278; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,46-7,15 (4H, m), 5,25-5,15 (1H, m), 5,02-4,90 (1H, m), 4,58-4,45 (2Н, m), 4,30-4,20 (1H, m), 3,55-3,30 (1H, m), 3,20-3,05 (1H, m), 2,80-2,20 (4H, m), 2,41 (3H, s), 2,20-1,60 (5H, m), MC (ES⁺) 458 (М⁺, 27%), 457 (M⁺ - 1, 100), 413 (13), 339 (8), 285 (5), 134 (6), 127 (11). Точная масса, рассчитанная для C₂₂H₂₇N₄O₇ (MH⁺). составляет 459,1880. Обнаружено: 459,1854.

(486) получают тем же способом, что и соединение 214е с образованием белого твердого вещества (325 мг, 89%): т.пл. 165-9° С; [α ]

\binom{22}{D}

-69,1° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2500 (шир.), 3318, 1658, 1599, 1530, 1505, 1407, 1258; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,85 (2H, d), 7,69 (2H, d), 7,38-7,20 (5H, m), 5,25-5,15 (1H, m), 5,05-4,90 (1H, m), 4,57-4,45 (2H, m), 4,30-4,20 (1H, m), 3,70 (2H, s), 3,55-3,30 (1H, m), 3,20-3,00 (1H, m), 2,75-1,60 (9H, m). Аналитически рассчитано для C₂₉H₃₁N₅O₈· 1,5Н₂О: С, 57,61; Н, 5,67; N, 11,58. Обнаружено: С, 57,81; Н, 5,74; N, 11,47. MC (ES⁺) 577 (М⁺ 33%), 576 (М⁺ - 1, 100), 502 (2).

(487) получают тем же способом, что и соединение 214е с образованием белого пенистого твердого вещества (335 мг, 93%): т.пл. 176-80° С; [α ]

\binom{22}{D}

-88,0° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2500 (шир.), 3321, 2960, 1781, 1660, 1597, 1529, 1407, 1258, 1187; ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 7,86 (2H, d), 7,69 (2H, d), 5,25-5,15 (1H, m), 5,05-4,90 (1H, m), 4,60-4,45 (2H, m), 4,30-4,20 (1H, m), 3,57-3,30 (1H, m), 3,20-3,00 (1H, m), 2,75-1,60 (12Н, m), 1,00 (6Н, d). Аналитически рассчитано для C₂₆H₃₃N₅O₈· H₂O: С, 55,61; Н, 6,28; N, 12,45. Обнаружено: С, 56,00; Н, 6,37; N, 12,15. MC (ES⁺) 543 (M⁺ 31%), 542 (M⁺ - 1, 100), 498 (2), 468 (3).

(417) получают по способу, подобному способу, описанному для получения соединения 214е с образованием твердого вещества белого цвета (0,63 г, 92%): т.пл. 145-155° С (приблиз./ не резко); [α ]

\binom{27}{D}

-114,6° (с 0,11, СН₃ОН); IR (KBr) 3327, 1658, 1586, 1548, 1501, 1416, 1341, 1238, 1126; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,22 (2H, s), 5,21 (1H, m), 5,00 (1H, m), 4,56, 4,49 (2H, 2m), 4,25 (1H, m), 3,88 (6Н, s), 3,80 (3Н, s), 3,55-3,43 (1H, m), 3,12 (1H, m), 2,71- 1,70 (9Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₄H₃₀N₄O₁₀· 2H₂O: С, 50,52; Н, 6,01; N, 9,82. Обнаружено: С, 50,49; Н, 6,05; N, 9,68. МС (ES⁺) m/z) 533 (М⁺ - 1, 100%).

(408) получают по способу, подобному способу, описанному для получения соединения 214е с образованием твердого вещества белого цвета (73%): т.пл. 157-165° С (не резко); [α ]

\binom{27}{D}

-140,5° (c 0,1, CH₃OH); IR (KBr) 3325, 1658, 1531, 1420, 1278, 1257; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 8,33-8,28 (1Н, m), 8,01-7,78 (2Н, m), 7,71 (1Н, d, J=6,0), 7,59-7,52 (3Н, m), 5,27 (1Н, m), 5,12-5,03 (1Н, m), 4,55 (2Н, m), 4,25 (1Н, m), 3,64-3,43 (1Н, m), 3,24-3,12 (1Н, m), 2,80-1,67 (9Н, m). Аналитически рассчитано для С₂₅H₂₆N₄O₇· 2Н₂O: С, 56,60; Н, 5,70; N, 10.56. Обнаружено: С, 56,70; Н, 5,80; N, 10,33. MC (ES⁺, m/z), 493 (М⁺ - 1, 100%).

(214w) получают тем же способом, что и соединение 214е с образованием 210 мг (62%) белого твердого вещества: т.пл. >260° С; [α ]

\binom{20}{D}

-93° (с 0,20, МеОН); IR (KBr) 3401, 2948, 1651, 1604, 1559, 1486, 1421, 1325, 1276, 1210; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 9,39 (1H, bs), 8,29 (1Н, d, J=5,9), 7,55 (2Н, s), 6,64 (1Н, d, J=6,1), 5,79 (1Н, s), 5,25-5,21 (1Н, m), 1,90-1,82 (1Н, m), 4,41-3,69 (2Н, m), 3,47-3,20 (3Н, m), 2,97-2,91 (1Н, m), 2,23 (6Н, s), 2,25-1,60 (7Н, m).

(550q) синтезировали по способу, использующемуся для получения соединения 213е, с образованием 550q.

(213y) синтезировали по способу, использующемуся для получения соединения 213е, с образованием 213y.

(412а) синтезировали по способу, применяющемуся для получения соединения 550q, ииспользуя 513а-1, с образованием 412а.

(412b) синтезировали по способу, применяющемуся для получения соединения 550q, ииспользуя 513а-2, с образованием 412b.

(412с) синтезировали по способу, применяющемуся для получения соединения 550q, ииспользуя 513b-1, с образованием 412с.

(412d) синтезировали по способу, применяющемуся для получения соединения 550q, ииспользуя 513b-2, с образованием 412d: ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 9,5 (1H, d), 8,9 (1H, d), 8,5 (1H, d), 7,9-7,8 (2H, m), 7,8-7,65 (2H, m), 6,55 (1H, d), 5,55 (1H, d), 5,25-5,1 (2H, m), 4,75-4,65 (1H, m), 4,65-4,6 (1H, m), 4,4-4,3 (1H, m), 3,25-3,15 (1H, m), 3,15-3,05 (1H, m), 2,95-2,8 (2H, m), 2,55-2,4 (2H, m), 2,15-1,5 (14H, m).

(412e) синтезировали по способу, применяющемуся для получения соединения 550q, ииспользуя 513f-1, с образованием 412e.

(412f) синтезировали по способу, применяющемуся для получения соединения 550q, используя 513f-2, с образованием 412f.

Соединения 410 и 412 получают по способам, использующимся для получения соединения 605 из 604.

соединение	R¹
502y, 410
502z, 412

(410) выделяют методом флэш-хроматографии (5-25% метанола в дихлорметане), получая 296 мг (94%) бесцветного твердого вещества: т.пл. 90-200° С; IR (КВr) 3338, 3096, 2950, 1787, 1726, 1657, 1546, 1420, 1279, 1258, 1125, 1092, 984, 933; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 8,41 (1Н, d), 8,13 (1Н, d), 7,54-7,41 (3Н, m), 7,20 (1Н, d), 5,19-5,11 (1H, m), 4,54-4,30 (1Н, П1), 3,27 (1Н, m), 3,18-3,03 (1Н, m), 2,81-2,64 (2Н, m), 2,56-1,59 (7Н, m). Аналитически рассчитано для C₁₉H₂₂N₄O₇S· 2,5 Н₂О: С, 46,05; Н, 5,49; N, 11,31. Обнаружено: С, 46,36; Н, 5,25; N, 11,10. МС (ES⁺) 449 (M - 1, 80%), 113 (100). Точная масса, рассчитанная для C₁₉H₂₃N₄O₇S (MH⁺) составляет: 451,1287. Обнаружено: 451,1295.

(412) получают по способу, подобному описанному для получения соединения 605, с образованием стеклоподобного твердого вещества белого цвета (69%): т.пл. 138-141° С; [α ]

\binom{23}{D}

-105,5° (с 0,5, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3375, 1787, 1659, 1515, 1421, 1278, 1256; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 9,32 (1Н, m), 8,79 (1Н, m), 8,47 (1Н, m), 7,86-7,64 (4Н, m), 5,31, 5,18, 4,59, 4,37 (4 или 5Н, m), 3,55-2,76, 2,49-2,39, 2,05, 1,65 (11Н, 4m). Аналитически рассчитано для С₂₄Н₂₅N₅O₇· 1,5Н₂O: С, 55,17; Н, 5,40; N, 13,40. Обнаружено: С, 54,87; Н, 5,22; N, 13,15. MS (ES⁺, m/z) 494 (М⁺ - 1, 100%).

(502y) синтезируют по способу, использующемуся для получения соединения 604 из 603, с образованием бледно-кремового порошка: т.пл. 120-180° С; [α ]

\binom{23}{D}

-109° (с 0,18, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3478, 3327, 1670, 1582, 1543, 1421,1279, 1257, 1155; ¹Н ЯМР (СDСl₃, СD₃OD) δ 8,04 (1Н, m), 7,49 (1Н, m), 7,38 (1Н, m), 7,17 (1H, m), 5,17-5,01 (2Н, m), 4,86 (1Н, m), 4,61-4,50 (1Н, m), 3,45-3,29 (2Н, m), 3,21-3,03 (1Н, m), 2,79-2,54 (3Н, m), 2,43-2,33 (1Н, m), 2,11-1,66 (5Н, m), 1,44 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₂₄Н₃₄N₇O₇S· Н₂O: С, 49,56; Н, 6,07; N, 16,86; S, 5,51. Обнаружено: С, 49,51; Н, 5,93; N, 16,31; S, 5,17. MC (ES⁺) 586 (100%), 564 (M⁺ + 1, 1,59). Точная масса, рассчитанная для С₂₄Н₃₄N₇O₇S (МH⁺). составляет 564,2240. Обнаружено: 564, 2267.

(502z) получают по способу, подобному описанному для получения соединения 604, с образованием бледно-желтого твердого вещества (90%): т.пл. 142-145° С; [α ]

\binom{24}{D}

-136,5° (с 0,06, CH₂Cl₂); ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 9,51-9,46 (1H, m), 9,11 (1H, s), 8,83 (1H, d, J=7,8), 8,53 (1H, d, J=5,5), 7,89-7,83 (2Н, m), 7,77-7,65 (2Н, m), 7,55 (1H, d, J=7,2), 7,18 (1H, d, J=2,7), 5,26-5,12 (2Н, m), 4,87 (1H, m), 4,59 (1H, m), 3,25-3,12 (2Н, m), 2,95-2,76 (2Н, m), 2,59-2,38, 2,18-1,94, 1,70 (5Н, 3m), 1,44 (9Н, s).

соединение	R⁴	R¹
415а
415b
415с
214w-1
214w-2
214w-3
214w-4
214w-5
214w-6
214w-7
412g
412h

Соединения (415а), (415b), (415с), (214w-1), (214w-2), (214w-3), (214w-4), (214w-5), (214w-6), (214w-7), (412g) и (412h) синтезировали с помощью способов, использующихся для получения 550q.

(415) синтезировали по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001, с образованием 415.

(214w) синтезировали по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001, с образованием 214w.


соединение	R
2100k
2100l
2100m
2100n
2100о

(2100k) получают с помощью способа, подобного способу получения соединения 213е, с образованием смеси диастереомеров (75/25) в виде твердого вещества белого цвета (258 мг, 83%): т.пл. 101° С; [α ]

\binom{25}{D}

-96° (с 0,2, СН₂Cl₂); IR (KBr) 3328, 2935, 2978, 1732, 1669, 1603, 1483, 1450, 1414, 1237, 1155, 1082, 989, 755; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,84-7,80 (2Н, m), 7,54-7,17 (8Н, m), 7,06-6,99 (1Н, m), 6,25 (1Н, d, J=7,9H), 5,41 (0,75H, d, J=5,4H), 5,31 (0,25H, bs), 5,23-5,09 (1H, m), 4,93-4,87 (1H, m), 4,68-4,51 (2H, m), 4,40-4,33 (0,25H, m), 4,24-4,14 (0,75H, m), 3,95-3,70 (1H, m), 3,30-3,13 (1H, m), 3,14-2,78 (5H, m), 2,47-2,21 (2H, m), 2,05-1,50 (5H, m). Аналитически рассчитано для C₂₉H₃₂N₄O₇· 0,5 H₂O: С, 62,47; Н, 5,97; N, 10,05. Обнаружено: С, 62,17; Н, 5,83; N, 9,97. MC (ES⁺) 549.

(2100l) получают тем же способом, что и соединение 213е (74%) в виде бесцветного твердого вещества: т.пл. 172-80° С; [α ]

\binom{23}{D}

-91,5° (с 0,1, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3290, 1792, 1677, 1657, 1642, 1544, 1425, 1280, 1259, 1124, 977; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,80 (2H, m), 7,46 (3,5Н, m), 7,00 (1H, d, J=6,7), 20 6,48 (0,5Н, d, J=7,9), 5,55 (0,5Н, d, J=5,3), 5,19 (2H, s + m), 4,93 (0,5Н, m), 4,62 (1,5H, m), 4,34 (1H, m), 4,18 (0,5H, m), 3,28-2,70 (4Н, m), 2,49-2,29 (2H, m), 205-1,48 (15Н, m).

(2100m) получают тем же способом, что и соединение 213е (76%) в виде бесцветного твердого вещества: т.пл. ~140° С, повторная плавка 187-9° С; [α ]

\binom{23}{D}

-96,9° (с 0,11, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3507, 3308, 3251, 1772, 1660, 1641, 1566, 1545, 1457, 1424, 1346, 1326, 1302, 1275, 1258, 1136, 1085, 1018, 981; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,78 (2Н, m), 7,53 (3Н, m), 7,19 (4Н, m), 6,91 (1Н, d, J=7,4), 6,27 (1Н, d, J=7,6), 5,66 (1Н, d, J=5,3), 5,10 (1Н, m), 4,96 (1Н, m), 4,75 (2Н, m), 4,52 (1Н, m), 3,08 (3Н, m), 3,03-2,71 (5Н, m), 2,48-2,31 (2Н, m), 1,90-1,40 (4H, m), 1,22 (1Н, m),

(2100n) получают с помощью способа, описанного для получения соединения 213е, с образованием белого стекловидного твердого вещества (76%): т.пл. 112-5° С; [α ]

\binom{23}{D}

-62,0° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3305, 1789, 1677, 1665, 1535, 1422, 1279, 1256, 1119, 942, 700; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 7,84 (2Н, m), 7,58-7,27 (9Н, m), 6,99 (1Н, d, J=7,8), 5,23 (1, s), 5,23-5,11 (1Н, m), 4,89 (1Н, m), 4,76 (1Н, d, J=11,3), 4,55 (1Н, d, J=11,4), 4,58-4,43 (2Н, m), 3,30-2,96, 2,81-2,69, 2,46-2,37, 2,16-1,66 (10Н, 4m), 2,27 (1Н, d, J=17.8). Аналитически рассчитано для С₂₈Н₃₀N₄O₇· 0,5Н₂O: С, 61,87; Н, 5,75; N, 10,32. Обнаружено: С, 61,88; Н, 5,70; N, 10.33. MC (ES⁺, m/z) 535 (M⁺ + 1, 100%).

Соединение (2100о) (содержащее около 7% (2S)) получают по способу, подобному описанному для получения 213е, с образованием белого стекловидного твердого вещества (81%): т.пл. 115-7° С; [α ]

\binom{23}{D}

-121,8° (с 0,11, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3326, 1792, 1659, 1535, 1421, 1278, 1257, 1124, 978; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,82 (2Н, m), 7,58-7,24 (8Н, m), 6,90 (1Н, d, J=7,3), 6,49 (1Н, d, J=7,7), 5,57 (1Н, d, J=5,5), 5,11 (2Н, m), 4,91 (1Н, d, J=11,4), 4,57 (1Н, d, J=11,1), 4,81-4,68 (1Н, m), 4,65-4,54 (1Н, m), 3,18-2,71, 2,52-2,30, 2,05-1,62 (11Н, 3m). Аналитически рассчитано для C₂₈H₃₀N₄O₇· 0,5H₂O: С, 61,87; Н, 5,75; N, 10,32. Обнаружено: С, 61,70; Н, 5,71; N, 10,15. MC (ES⁺) m/z) 535 (М⁺ + 1, 94,3%), 557 (100%).

(550n) получают по способу, подобному способу получения 213е, с образованием смеси диастереомеров (65/35) в виде рыжевато-коричневого порошка (390 мг, 28%): т.пл. 139-145° С; [α ]

\binom{23}{D}

-104° (с 0,2, МеОН); IR (KBr) 3318, 2405, 2369, 1792, 1660, 1591, 1549, 1484, 1422, 1257, 1117; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 10,1 (1Н, s), 8,80 (0,65H, d, J=6,6), 8,58 (0,35H, d, J=6,6), 8,59 (1Н, d, J=7,0), 8,06 (1H, bs), 7,83-7,79 (1H, m), 7,61-7,57 (1H, m), 7,47-7,39 (1H, m), 5,61 (0,35H, d, J=5,0), 5,37 (0,65H, bs), 5,17-5,14 (0,35H, m), 5,08-5,06 (0,65Н, m), 4,92-4,86 (1H, m), 4,67-4,61 (0,35H, m), 4,47-4,41 (0,65H, m), 4,28-4,11 (1H, 2m), 3,80-3,59 (2Н, m), 3,23-2,75 (3Н, m), 2,61-1,48 (7Н, m), 2,10 (3Н, s), 1,25 и 1,17 (3Н, 2t, J=5,8), MC (ES⁺) 528.

(550о) получают по способу, подобному способу получения 213е, с образованием бесцветного твердого вещества (1,071 г, 80%): т.пл. 155-70° С; [α ]

\binom{22}{D}

-75,8° (с 0,26, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3314, 2941, 1791, 1658, 1545, 1420, 1341, 1312, 1252, 1181, 1118, 939, 749; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 9,45 (0,5H, s), 9,34 (0,5H, s), 7,68-7,62 (1Н, m), 7,49-7,39 (2Н, m), 7,33-7,26 (1Н, m), 7,18-7,03 (3Н, m), 5,49 (0,5H, d), 5,30 (0,5 Н, s), 5,26-5,13 (1Н, m), 4,90-4,83 (0,5Н, m), 4,76-4,49 (1Н, m), 4,42-4,35 (0,5Н, m), 3,97-3,74 (1Н, m), 3,72-3,53 (1Н, m), 3,35-2,64 (4H,m), 2,50-2,37 (1H, m), 2,20-1,82 (5Н, m), 1,69-1,50 (2Н, m), 1,30-1,19 (3Н, m).

(550р) получают по способу, подобному способу получения 213е, с образованием смеси диастереомеров в виде белой пены (820 мг, 47%): [α ]

\binom{24}{D}

-75° (с 0,16, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3401, 2937, 1791, 1657, 1609, 1539, 1505, 1423, 1277, 1177, 1118; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,07-8,05 (1Н, m), 7,67 (2Н, d, J=7,9), 7,38-7,29 (2Н, m), 6,80 (2Н, d, J=8,5), 5,49 (0,5H, d, J=4,6), 5,23 (0,5H, bs), 5,24-5,20 (1Н, m), 5,12-5,08 (1Н, m), 4,68-4,29 (2Н, m), 3,92-3,45 (3Н, m), 3,32-2,30 (2Н, m), 2,80-1,56 (11Н, m), 1,21 (3Н, t, J=7,0Н).

соединение	R
503а 504а 286
503b 504b 505b
503с 504с 505с
503d 504d 505d
503е 504е 505е

(503а) получают из 212b и (3S,4R) т-бутил(N-аллилоксикарбонил)-3-амино-4-гидрокси-5-(1-нафтоилокси)пентаноата по способу, описанному для получения соединения (213е), с образованием 533 мг (81%) не совсем белой пены: [α ]

\binom{22}{D}

-81,4° (с 0,5, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3342, 2976, 1719, 1664, 1328, 1278, 1246, 1153, 1137. ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,86 (1H, d, J=8,4), 8,21 (1Н, dd, J=1,3, 7,3), 8,03 (1Н, d, J=8,1), 7,88 (1H, d, J=8,6), 7,66-7,45 (3H, m), 7,23 (1H, d, J=8,6), 5,96 (1H, d, J=9,2), 5,30 (1H, m), 4,59-4,33 (5Н, m), 4,24 (1H, m), 3,96 (1H, brd), 3,29 (1H, m), 2,95 (1H, m), 2,93 (3H, s), 2,69-2,50 (3H, m), 2,36 (1H, m), 1,96 (4Н, m), 1,62 (1H, m), 1,41 (9H, s). Аналитически рассчитано для C₃₁H₄₀N₄O₁₀S· 0,25 H₂O, 55,97; Н, 6,14; N, 8,42. Обнаружено: С, 55,90; Н, 6,11; N, 8,23. МС (ES⁺) 683 (M+Na, 100%), 661 (М+1,39), 605 (78).

(504а) синтезируют из 503а по способу, использующемуся для получения 216е из 215е, с образованием 446 мг (91%) бесцветной пены: [α ]

\binom{21}{D}

-111,6° (с 0,5, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3319, 2978, 2936, 1723, 1670, 1413, 1370, 1329, 1278, 1246, 1153. ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,87 (1H, d, J=8,9), 8,29 (1H, d, J=7,2), 8,06 (1H, d, J=8,3), 7,90 (1H, d, J=8,2), 7,66-7,48 (3H, m), 7,37 (1H, d, J=8,1), 5,61 (1H, d, J=9,0), 5,31 (1H, m), 5,22 (1H, АВ, J=16,9), 5,09 (1H, АВ, J=16,92), 4,99 (1H, m), 4,65-4,43 (2Н, m), 3,28 (1H, m), 2,96 (3H, s), 2,86 (2Н, m), 2,59 (1H, m), 2,38 (1H, dd, J=6,8, 13,2), 2,21-1,70 (6Н, m), 1,45 (9H, s). Аналитически рассчитано для C₃₁H₃₈N₄O₁₀S· 0,25 H₂O: С, 56,14; Н, 5,85; N, 8,45. Обнаружено: С, 56,11; Н, 5,83; N, 8,29. MC (ES⁺) 657 (М-1, 100%).

(286) получают из 504а по способу, описанному для получения 217, с образованием 356 мг (93%) белого порошка: т.пл. 120-123° С; [α ]

\binom{23}{D}

-121° (с 0,194, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3314, 2937, 1722, 1663, 1412, 1328, 1278, 1245, 1195, 1132. ¹H ЯМР (DMSO-d₆) δ 12,63 (1Н, brs), 8,94 (1Н, d, J=7,4), 8,78 (1Н, d, J=8,6), 8,26 (2Н, m), 8,11 (1Н, d, J=8,0), 7,77-7,62 (4Н, m), 5,28 (2Н, s), 5,21 (1Н, m), 4,82 (1Н, m), 4,44-4,29 (2Н, m), 3,31 (1Н, m), 2,98 (3Н, s), 2,98-2,86 (2Н, m), 2,72 (1Н, dd, J=7,3, 16,9), 2,40 (1Н, m), 2,24-1,84 (4Н, m), 1,69 (2Н, m). Аналитически рассчитано для С₂₇Н₃₀N₄O₁₀S· Н₂O: С, 52,25; Н, 5,20; N, 9,03. Обнаружено: С, 52,11; Н, 4,97; N, 8,89. MC (ES⁺) 601 (М-1, 100%).

(503b) синтезируют тем же способом, что и соединение 213е, получая не совсем белый порошок (671 мг, 88%): т.пл. 90-120° С; IR (KBr) 3345, 2977, 1727, 1664, 1532, 1450, 1423, 1369, 1323, 1310, 1276, 1257, 1154, 1101, 990, 766; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,61-7,55 (2Н, m), 7,51-7,42 (3Н, m), 6,86 (1Н, d), 5,69 (1Н, d), 5,21 (1Н, m), 4,64-4,38 (2Н, m), 4,15-4,05 (3Н, m), 3,84 (1Н, s), 3,31-3,14 (2Н, m), 2,97-2,87 (1Н, m), 2,94 (3Н, s), 2,76 (3Н, s), 2,64-2,48 (3Н, m), 2,39-2,29 (1Н, m), 2,04-1,61 (5Н, 10 m). Аналитически рассчитано для C₃₁H₄₁N₅O₁₁S· H₂O: С, 52,46; Н, 6,11; N, 9,87; S, 4,52. Обнаружено: С, 52,34; Н, 5,92; N, 9,56; S, 4,44. MC (ES⁺) 714 (47%), 692 (M⁺ + 1, 84), 636 (100).

(504b) синтезируют тем же способом, что и соединение 216b, получая бесцветный порошок (601 мг, 93%): т.пл. 75-115° С; [α ]

\binom{23}{D}

-104° (с 0,26, CН₂Сl₂); IR (KBr) 3324, 2977, 2935, 1730, 1670, 1525, 1452, 1422, 1369, 1317, 1276, 1256, 1222, 1155, 1107, 990, 766; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,68-7,61 (2Н, m), 7,47-7,38 (3Н, m), 7,32-7,24 (1Н, m), 5,56 (1Н, d), 5,36-5,24 (1Н, m), 5,04 (1Н, d), 4,88 (1Н, d), 4,86-4,77 (1Н, m), 4,64-4,39 (2Н, m), 3,32-3,17 (1Н, m), 2,97-2,85 (1Н, m), 2,93 (3Н, s), 2,76 (3Н, s), 2,80-2,71 (1Н, m), 2,65-2,49 (1Н, m), 2,41-2,30 (1Н, m), 2,12-1,61 (6Н, m), 1,42 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₃₁N₃₉N₅O₁₁S· H₂O: С, 52,61; Н, 5,84; N, 9,90; S, 4,53. Обнаружено: С, 52,94; Н, 5,69; N, 9,72; S, 4,51. MC (ES⁺) 712 (31%), 707 (100). 690 (М⁺ + 1, 41), 634 (55).

(505b) синтезируют тем же способом, что и соединение 217, получая бесцветный порошок (499 мг. 96%): т.пл. 95-145° С; [α ]

\binom{23}{D}

-137° (с 0,12, МеОН); IR (KBr) 3323, 2936, 1732, 1665, 1529, 1452, 1421, 1312, 1275, 1256, 1221, 1183, 1153, 1135, 1101, 990; ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 7,67-7,56 (2Н, m), 7,49-7,38 (4Н, m), 5,23-5,12 (1Н, m), 5,02 (1Н, d), 4,79-4,73 (1Н, m), 4,52-4,34 (3Н, m), 3,48-3,25 (2Н, m), 3,03-2,85 (2Н, m), 2,94 (3Н, s), 2,74 (3Н, s), 2,79-2,66 (1Н, m), 2,52-2,38 (1Н, m), 2,29-2,14 (1Н, m), 2,04-1,70 (4Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₇H₃₁N₅O₁₁S· H₂O: С, 49,77; Н, 5,18; N, 10,75; S, 4,92. Обнаружено: С, 49,83; Н, 5,01; N, 10,27; S, 4,84. MC (ES⁺) 746 (42%), 632 (M - 1, 100), 386 (60). Точная масса, рассчитанная для C₂₇H₃₁N₅O₁₁S (MH⁺), составляет 634,1819. Обнаружено: 634,1807.

(503с) синтезируют тем же способом, что и соединение 213е, получая бесцветный порошок (446 мг, 84%): IR (KBr) 3345, 2976, 2935, 1727, 1664, 1603, 1535, 1483, 1451, 1416, 1395, 1369, 1328, 1297, 1277, 1237, 1155, 1135, 1076, 990, 755; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,98-7,89 (1Н, m), 7,55-7,45 (1Н, m), 7,39-7,18 (3Н, m), 7,14-7,07 (1Н, m), 7,00-6,90 (3Н, m), 6,75 (1Н, d), 5,57-5,50 (1Н, m), 5,21-5,09 (1Н, m), 4,64-4,42 (2Н, m), 4,36-4,12 (3Н, m), 3,95-3,87 (1Н, m), 3,39-3,18 (1Н, m), 3,00-2,82 (1Н, 5 m), 2,95 (3Н, s), 2,69-2,48 (3Н, m), 2,42-2,28 (1Н, m), 2,07-1,62 (6Н, m), 1,42 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₃₃Н₄₂N₄O₁₁S· Н₂O: С, 54,99; Н, 6,15; N, 7,77; S, 4,45. Обнаружено: С, 54,95; Н, 5,95; N, 7,34; S, 4,20. MC (ES⁺) 725 (26%), 720 (47), 703 (M⁺ + 1, 34), 433 (100), 403 (89).

(504с) синтезируют тем же способом, что и соединение 216е, получая бесцветный порошок: т.пл. 85-100° С; [α ]

\binom{22}{D}

-91,3° (с 0,52, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3328, 2978, 2935, 1732, 1669, 1603, 1524, 1483, 1450, 1396, 1369, 1296, 1276, 1237, 1155, 1132, 1082, 989, 755; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,03-7,98 (1Н, m), 7,52-7,44 (1Н, m), 7,37-7,07 (5Н, m), 7,01-6,92 (3Н, m), 5,52 (1Н, d), 5,28-5,20 (1Н, m), 5,06-4,84 (3Н, m), 4,64-4,39 (2Н, m), 3,32-3,14 (1Н, m), 2,99-2,88 (1Н, m), 2,94 (3Н, s), 2,65-2,45 (2Н, m), 2,39-2,29 (1Н, m), 2,12-1,58 (6Н, m), 1,40 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₃₃Н₄₀N₄O₁₁S· 2,5 Н₂О; С, 56,56; Н, 5,75; N, 8,00; S, 4,58. Обнаружено: С, 56,37; Н, 5,84; N, 7,69; S, 4,37. MC (ES⁺) 723 (30%), 718 (100), 701 (M⁺ + 1, 23), 645 (59).

(505с) синтезируют тем же способом, что и соединение 217, получая бесцветную пену (252 мг, 72%): т.пл. 90-125° С; [α ]

\binom{23}{D}

-133° (с 0,11, МеОН); IR (KBr) 3314, 2938, 1792, 1734, 1663, 1604, 1535, 1483, 1448, 1415, 1250, 1132, 756; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,81-8,76 (1Н, m), 7,92 (1Н, d), 7,68-7,54 (2Н, m), 7,41-7,25 (3H, m), 7,16-6,91 (4Н, m), 5,13-4,98 (2Н, m), 4,72-4,63 (1Н, m), 4,37-4,21 (2Н, m), 2,92 (3H, s), 2,90-2,60 (3H, m), 2,35-2,26 (1Н, m), 2,17-2,05 (2Н, m), 1,99-1,80 (2Н, m), 1,61-1,50 (1Н, m). Аналитически рассчитано для С₂₉Н₃₂N₄O₁₁S· 0,5 H₂O: С, 53,29; Н, 5,09; N, 8,57; S, 4,90. Обнаружено: С, 53,57; Н, 5,18; N, 8,32; S, 4,75. MC (ES⁺) 643 (M-1, 100%).

(503d) синтезируют тем же способом, что и соединение 213е, получая бесцветное твердое вещество (563 мг, 90%): IR (KBr) 3349, 2978, 2935, 1724, 1664, 1583, 1536, 1489, 1443, 1370, 1327, 1271, 1226, 1189, 1155, 1073, 990, 755; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,77 (1Н, d), 7,67 (1Н, m), 7,45-7,10 (6Н, m), 7,00 (2Н, d), 5,93-5,80 (1Н, m), 5,36-5,30 (1Н, m), 4,63-4,24 (5Н, m), 4,15-4,09 (1Н, m), 3,37-3,22 (1Н, m), 2,98-2,74 (1Н, m), 2,94 (3H, s), 2,70-2,47 (3H, m), 2,40-2,30 (1Н, m), 2,15-1,60 (5Н, m), 1,42 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₃₃Н₄₂N₄O₁₁S· Н₂O: С, 54,99; Н, 6,15; N, 7,77; S, 4,45. Обнаружено: С, 54,60; Н, 5,88; N, 7,49; S, 4,50. MC (ES⁺) 725 (19%), 720 (91), 703 (M⁺ + 1, 74), 647 (76), 629 (100), 433 (78).

(504d) синтезируют тем же способом, что и соединение 216е, получая бесцветный порошок (466 мг, 85%): т.пл. 75-100° С; [α ]

\binom{22}{D}

-99,3° (с 0,60, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3335, 2978, 2937, 1728, 1669, 1584, 1525, 1487, 1444, 1416, 1369, 1328, 1272, 1227, 1188, 1155, 989, 754; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,82-7,77 (1Н, m), 7,66-7,65 (1H, m), 7,46-7,32 (4Н, m), 7,26-7,10 (2Н, m), 7,04-6,98 (2Н, m), 5,68 (1Н, d), 5,37-5,31 (1Н, m), 5,11 (1Н, d), 5,02-4,88 (2Н, m), 4,66-4,42 (2Н, m), 3,35-3,17 (1Н, m), 2,98-2,89 (1Н, m), 2,96 (3H, s), 2,84-2,78 (1Н, m), 2,72-2,47 (1Н, m), 2,42-2,32 (1Н, m), 2,14-1,58 (6Н, m), 1,43 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₃₃H₄₀N₄O₁₁S: С, 56,56; Н, 5,75; N, 8,00. Обнаружено: С, 56,36; Н, 5,82; N, 7,71. МС (ES⁺) 723 (56%), 718 (90), 701 (M⁺ + 1, 36), 645 (100).

(505d) синтезируют тем же способом, что и соединение 217, получая бесцветную пену (353 мг, 73%): т.пл. 80-115° С; [α ]

\binom{23}{D}

- 138° (с 0,11, МеОН); IR (KBr) 3327, 2937, 1728, 1666, 1584, 1529, 1487, 1443, 1413, 1328, 1273, 1227, 1189, 1155, 1134, 989, 754; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,82 (1Н, d), 7,76-7,72 (1Н, m), 7,61-7,53 (2Н, m), 7,48-7,32 (4Н, m), 7,24-7,17 (1H, m), 7,11-7,06 (2Н, m), 5,14-5,06 (3H, m), 4,73-4,64 (1H, m), 4,38-4,24 (2Н, m), 2,92 (3Н, s), 2,89-2,61 (3H, m), 2,38-2,27 (1Н, m), 2,19-2,06 (2Н, m), 2,02-1,79 (3H, m), 1,63-1,52 (1Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₉H₃₂N₄O₁₁S· 0,5 Н₂О: С, 53,29; Н, 5,09; N, 8,57; S, 4,90. Обнаружено: С, 53,24; Н, 5,14; N, 8,34; S, 4,86. MC (ES⁺) 643 (M - 1, 100%), 385 (62).

(503е) получают по способу, описанному для получения 213е, с образованием не совсем белого твердого вещества (70%): т.пл. 100-103° С; [α ]

\binom{25}{D}

-84,0° (с 0,05, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3459-3359, 1722, 1664, 1514, 1368, 1328, 1278, 1247, 1155; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,52 (1Н, m), 7,06-6,99 (2Н, m), 5,69 (1Н, d, J=9,0), 5,23 (1Н, m), 4,61-4,16 (6Н, m), 3,36-3,19 (1Н, m), 2,96 (3H, s), 2,67-2,49, 2,42-2,32, 2,06-1,89, 1,69 (10Н, 4m), 1,43 (9Н, s).

(504е) получают по способу, описанному для получения 216е, с образованием твердого вещества белого цвета (98%): т.пл. 91-98° С; [α ]

\binom{25}{D}

-112,5° С (с 0,06, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3453-3364, 1727, 1668, 1513, 1420, 1368, 1245, 1155; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,54 (1H, d, J=5,3), 7,18 (1H, d, J=7,18), 7,05 (1H, d, J=5,4), 5,42 (1H, d, J=8,9), 5,25 (1H, m), 5,02 (2Н, m), 4,96-4,87 (1H, m), 4,65-4,42 (2Н, m), 3,34-3,17 (1H, m), 2,97-2,93 (1H, m), 2,97 (3H, s), 2,87-2,78, 2,73-2,50, 2,38-2,32, 2,13-1,88, 1,69-1,60 (9Н, 5m), 1,44 (9Н, s).

(505е). Раствор соединения 217 (0,33 г, 0,51 ммоля) в сухом дихлорметане (3 мл) охлаждают (лед/вода), защищая от попадания влаги. При перемешивании добавляют трифторуксусную кислоту (2 мл). После удаления охлаждающей бани раствор выдерживают 2 часа при комнатной температуре и концентрируют в вакууме. Остаток упаривают три раза из дихлорметана, перетирают с диэтиловым эфиром и фильтруют. Твердое вещество очищают методом флэш-хроматографии (силикагель, 0-6% метанол в дихлорметане), получая продукт в виде белого стекловидного твердого вещества (0,296 г, 98%): т.пл. 110-122° С; [α ]

\binom{22}{D}

–163,5° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3514-3337, 1726, 1664, 1513, 1420, 1245, 1152, 1134, 990; ¹Н ЯМР (СD₃OD) δ 7,79 (1H, d, J=5,2), 7,12 (1H, d, J=5,2), 5,20 (1H, m), 5,02-4,72 (2Н, m, экранированный Н₂О), 4,59-4,32 (3H, m), 3,48-3,29, 3,08-2,75, 2,50-2,41, 2,31-2,22, 2,08-1,89, 1,72-1,63 (11Н, 6m), 2,95 (3H, s).

соединение	R¹
506а	PhC (O)-
507а
506b	MeS (O)₂-
507b
506с	МеОС (О)-
507с
506g	СН₃С (О)-
507g

(506а). Раствор соединения 212е (321 мг, 0,929 ммоля) и (3S) т-бутил 3-амино-5-диазо-4-оксопентаноата (198 мг, 0,929 ммоля) в дихлорметане (3 мл) охлаждают до 0° С и добавляют N,N-диизопропилэтиламин (0,16 мл, 1,86 ммоля) и [2- (1Н-бензотриазол-1-ил)]-1,1,3,3-тетраметил-уроний тетрафторборат (328 мг, 1,02 ммоля). Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, разбавляют этилацетатом и промывают 1М NaHSO₄ (x2), водным раствором NаНСО₃ (х2), нас. солевым раствором, высушивают над сульфатом магния и упаривают. После хроматографии на силикагеле, элюируя этилацетатом, получают 506а (425 мг, 85%) в виде бесцветной пены: [α ]

\binom{23}{D}

-124,9° (с 0,2, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3332, 2111, 1728, 1658, 1532, 1421, 1392, 1367, 1279, 1256, 1155; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,82 (2Н, m), 7,49 (3H, m), 7,28 (1Н, d, J=9,3), 7,05 (1Н, d, J=7,3), 5,06 (1Н, s), 5,18 (2Н, m), 4,78 (1Н, m), 4,62 (1Н, m), 3,29 (1Н, m), 3,08-2,79 (3H, m), 2,58 (1Н, dd, J=16,8, 5,6), 2,20-1,85 (4Н, m), 1,70 (1H, m), 1,45 (9Н, s), MC (ES⁺) 539,58 (M - 1, 97,9%) 529,59 (100).

(506b) получают тем же способом, что и соединение 506а. 74% в виде желто-оранжевого твердого вещества: т.пл. 75° С (разлож.); [α ]

\binom{20}{D}

-92,0° (с 0,036, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3438, 2904, 2113, 1728, 1669, 1523, 1368, 1328, 1155; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,48 (1Н, d, J=8,1), 5,83-5,68 (1Н, m,), 5,55-5,50 (1Н, m), 5,43-5,14 (1Н, m), 4,83-4,45 (3H, m), 3,40-3,19 (1Н, m), 2,98 (3H, s), 2,92-2,30 (4Н, m), 2,24-1,70 (6Н, m), 1,43 (9Н, s).

(506с) получают тем же способом, что и соединение 506а, с образованием бледно-желтой пены (405 мг, 82%): [α ]

\binom{20}{D}

-144° (с 0,2, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3339, 2978, 2958, 2112, 1728, 1674, 1530, 1459, 1415, 1367, 1274, 1252, 1154, 1063; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,23 (1H, d, J=8,2), 5,51-5,31 (2Н, m), 5,21-5,16 (1Н, m), 4,77-4,55 (3H, m), 3,68 (3H, s), 3,35-3,18 (1Н, m), 3,04-2,51 (4Н, m), 2,40-2,30 (1Н, m), 2,09-1,66 (5Н, m), 1,45 (9H, s), MS (ES⁺) 493.

(506g) получают тем же способом, что и соединение 506а. 81%: [α ]

\binom{28}{D}

-146,7° (с 0,4, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3438, 2904, 2113, 1728, 1669, 1523, 1368, 1328, 1155; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,32 (1Н, d), 6,43 (1Н, d), 5,50 (1Н, s), 5,22 (1Н, m), 4,94 (1Н, m), 4,775 (1Н, m), 4,60 (1Н, m), 3,24 (1Н, m), 3,03-2,52 (4Н, m), 2,36 (1Н, m), 2,10-1,64 (5Н, m), 2,02 (3H, s), 1,45 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₁H₂₀N₆O₇: С, 52,69; Н, 6,32; N, 17,05. Обнаружено: С, 52,51; Н, 6,27; N, 17,36, MC (ES⁺) 477 (M⁺ - 1, 100%).

(507а). Раствор соединения 506а (3,0 г, 5,55 ммоля) в сухом дихлорметане (40 мл) охлаждают до 0° С и в течение 4 мин по каплям добавляют 30% раствор бромистоводородной кислоты в уксусной кислоте (1,1 мл, 5,55 ммолей). Смесь перемешивают 9 мин при 0° С и гасят водным раствором бикарбоната натрия. Продукт экстрагируют этилацетатом, промывают водным раствором бикарбоната натрия, нас. солевым раствором, высушивают (MgSO₄) и упаривают, получая 2,97 г (92%) в виде бесцветной пены: [α ]

\binom{23}{D}

-82,3° (с 0,23, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3333, 1726, 1659, 1530, 1458, 1447, 1422, 1395, 1368, 1279, 1256, 1222, 1155, 728; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,81 (2Н, m), 7,50 (3H, m), 7,11 (1Н, d, J=8,0), 7,01 (1Н, d, J=7,4), 5,20 (2Н, m), 5,00 (1Н, m), 4,06 (2Н, s), 3,28 (1Н, m), 3,20-2,70 (4Н, m), 2,42 (1Н, m), 2,10-1,85 (4Н, m), 1,72 (1Н, m), 1,44 (9Н, s), Аналитически рассчитано для С₂₆Н₃₃N₄O₇Вr· 0,7 Н₂О: С, 51,53; Н, 5,72, N, 9,24. Обнаружено: С, 51,55; Н, 5,52; N, 9,09, МС (ES⁺) 595, 593 (М⁺ + 1).

(507b) получают тем же способом, что и соединение 507а. (68%) в виде оранжевой пены: [α ]

\binom{20}{D}

-135° (с 0,053, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3429, 2944, 2935, 1723, 1670, 1458, 1408, 1327, 1225, 1154, 991; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,38 (1Н, 5d, J=8,2), 5,69 (1Н, d, J=9,3), 5,43-5,34 (1Н, m), 5,07-4,97 (1Н, m), 4,70-4,42 (2Н, m), 4,12 (2Н, s), 3,35-3,17 (1Н, m), 3,10-2,69 (4Н, m), 2,98 (3H, s), 2,43-2,33 (1Н, m), 2,15-1,65 (5Н, m), 1,43 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₀H₃₁BrN₄O₈S: С, 42,33; Н, 5,51; N, 9,87. Обнаружено: С, 42,69; Н, 5,52; N, 9,97.

(507с) получают тем же способом, что и соединение 507а, с образованием бледно-желтой пены (320 мг, 78%): [α ]

\binom{20}{D}

-107° (с 0,2, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3401, 2956, 1726, 1670, 1528, 1452, 1415, 1395, 1368, 1276, 1251, 1155, 1064; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,07 (1Н, d, J=7,6), 5,47 (1Н, d, J=8,1), 5,21-5,16 (1Н, m), 5,03-4,94 (1Н, m), 4,75-4,56 (2Н, m), 4,06 (2Н, s), 3,69 (3H, s), 3,31-3,13 (1Н, m), 3,03-2,92 (2Н, m), 2,81-2,58 (2Н, m), 2,41-2,31 (1Н, m), 2,10-1,66 (5H,m), 1,44 (9H,s).

(507g) получают тем же способом, что и соединение 507а, с образованием бледно-желтой пены (84%): [α ]

\binom{22}{D}

-109,6° (с 0,1, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3324, 1727, 1659, 1535, 1458, 1444, 1423, 1369, 1279, 1256, 1223, 1155; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,12 (1H, d, J=7,8), 6,33 (1Н, d, J=7,5), 5,19 (1H, m), 4,97 (2Н, m), 4,58 (1H, m), 4,06 (2Н, s), 3,20 (1H, m), 3,05-2,69 (4Н, m), 2,35 (1H, m), 2,14-1,68 (5Н, m), 2,03 (3H, s), 1,44 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₁H₃₁BrN₄O₇· 0,3H₂O: С, 46,99; Н, 5,93; N, 10,44. Обнаружено: С, 46,97; Н, 5,90; N, 10,35.

соединение	R
508а 284
508b 285

(508а). К раствору соединения 506с (547 мг, 1 ммоль) в DMF (4 мл) добавляют фторид калия (145 мг, 2,5 ммолей, 2,5 экв.). После 10 мин перемешивания при комнатной температуре добавляют 2,6-дихлорбензойную кислоту (229 мг, 1,2 ммоля, 1.2 экв.). Реакционную смесь выдерживают 3 часа при комнатной температуре, затем добавляют этилацетат (30 мл). Раствор промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (30 мл), нас. солевым раствором, высушивают над MgSO₄ и концентрируют в вакууме, получая 590 мг (90%) бледно-желтой пены: [α ]

\binom{22}{D}

-85° (с 0,20, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3400, 2956, 1737, 1675, 1528, 1434, 1414, 1368, 1344, 1272, 1197, 1152, 1061; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,36-7,33 (3H, m), 7,04 (1H, d, J=8,0), 5,46 (1H, d, J=7,8), 5,19-5,16 (1H, m), 5,08 (2H, AB), 4,97 4,55 (1H, m), 4,69-4,55 (2H, m), 3,68 (3H, s), 15 3,30-3,10 (1H, m), 3,01-2,50 (4Н, m), 2,40-2,33 (1H, m), 2,15-1,60 (5Н, m), 1,44 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₂₈Н₃₄Cl₂N₄O₁₀: С, 51,15; Н, 5,21; N, 8,52. Обнаружено: С, 51,35; Н, 5,32; N, 8,56.

(284) синтезируют из 508а по способу, использующемуся для получения 505 из 504, с образованием 330 мг (65%) твердого вещества белого цвета: т.пл. 115° С (разлож.); [α ]

\binom{20}{D}

-107° (с 0,2, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3340, 2954, 1738, 1664, 1530, 1434, 1272, 1198, 1148, 1060; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,91 (1H, d, J=7,2Н), 7,67-7,63 (3H, m), 7,54 (1H, d, J=8,0), 5,24 (2H, s), 5,20-5,15 (1H, m), 4,79-4,70 (1H, m), 4,46-4,37 (2H, m), 3,58 (3H, s), 3,33-3,20 (1H, m), 2,94-2,55 (4Н, m), 2,30-1,60 (6Н, m). Аналитически рассчитано для С₂₄Н₂₆Сl₂Н₄O₁₀· Н₂O: С, 46,54; Н, 4,56; N, 9,05. Обнаружено: С, 46,36; Н, 4,14; N, 8,88.

(508b) синтезируют тем же способом, что и соединение 508а, получая бледно-желтую пену (460 мг, 82%): [α ]

\binom{22}{D}

-115° (с 0,20, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3413, 2960, 1729, 1675, 1528, 1514, 1461, 1421, 1368, 1265, 1116, 1096; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,27-7,03 (4Н, m), 5,48 (1H, d, J=8,2), 5,20-5,14 (1H, m), 5,04 (2H, AB), 4,93-4,86 (1H, m), 4,80-4,56 (2H, m), 3,77 (3H, s), 3,32-3,15 (1Н, m), 3,00-2,56 (4Н, m), 2,37 (6Н, s), 2,19-1,77 (5Н, m), 1,45 (9Н, s), 2,41-2,25 (1H, m), МС (ЕS⁺) 617.

(285) синтезируют тем же способом, что и соединение 284, получая твердое вещество белого цвета (303 мг, 78%): т.пл. 110° С (разлож.); [α ]

\binom{20}{D}

-128° (с 0,10, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3339, 2958, 1731, 1666, 1529, 1420, 1266, 1248, 1115, 1070; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,90 (1H, d, J=7,4), 7,54 (1H, d, J=7,9), 7,36-7,28 (1H, m), 7,17-7,14 (2H, m), 5,19-5,15 (3H, m), 4,84-4,74 (1Н, m), 4,45-4,37 (2Н, m), 3,59 (3Н, s), 3,45-3,25 (1H, m), 2,95-2,64 (4H, m), 2,35 20 (6Н, s), 2,30-1,60 (6Н, m). Аналитически рассчитано для С₂₆Н₃₂N₄O₁₀· Н₂O: С, 53,98; Н, 5,92; N, 9,68. Обнаружено: С, 53,50; Н, 5,52; N, 9,49. MS (ES⁺) 559.

соединение	R
509а 510а
509b 280
509с 283
509d 510d

(510а). Раствор соединения 506а (2,27 г, 4,2 ммолей) в сухом дихлорметане (50 мл) обрабатывают 30% раствором бромистоводородной кислоты в уксусной кислоте (1,84 мл, 9,2 ммолей, 2,2 экв.) при 0° С в атмосфере азота. После 10 мин перемешивания при 0° С реакция завершается и в среде выкристаллизовывается твердое вещество белого цвета. Твердое вещество отфильтровывают и промывают этилацетатом и диэтиловым эфиром, получая 2,20 г (100%) [3S(1S,9S)]5-бром-3-(9-бензоиламино-6,10-диоксо-1,2,3,4,7,8,9,10-октагидро-6Н-пиридазино[1,2-а][1,2]диазепин-1-карбоксамидо)-4-оксопентановой кислоты, которую используют без дополнительной очистки: ¹H-ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,87 (1H, d, J=7,3), 8,63 (1H, d, J=7,6), 7,91-7,87 (2H, m), 7,60-7,44 (3H, m), 6,92 (1Н, bs), 5,14-5,09 (1H, m), 4,92-4,65 (2H, m), 4,43 (2H, АВ), 4,41-4,35 (1H, m), 3,33-3,22 (1H, m), 2,98-2,90 (1H, m), 2,89-2,57 (2H, m), 2,35-15 2,15 (3H, m), 1,99-1,91 (2H, m), 1,75-1,60 (2H, m). Раствор бромкетона (535 мг, 1 ммоль) в сухом DMF (10 мл) обрабатывают фторидом калия (150 мг, 2,5 ммолей, 2,5 экв.) в атмосфере азота. После 5 мин перемешивания при комнатной температуре добавляют 2-меркаптотиазол (140 мг, 1,2 ммоля, 1,2 экв.). Реакционную смесь выдерживают в течение ночи и добавляют этилацетат (150 мл) затем органическую фракцию промывают нас. солевым раствором, высушивают над сульфатом магния и упаривают под вакуумом. Остаток кристаллизуют из диэтилового эфира, фильтруют и очищают на силикагеле, используя градиент МеОН (от 0% до 5%) в дихлорметане. После упаривания получают 344 мг (60%) твердого вещества белого цвета: т.пл. 90-95° С (разлож.); [α ]

\binom{20}{D}

-82° (с 0,2, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3328, 2941, 1745, 1659, 1535, 1422, 1276, 1255, 1223, 1072; ¹H ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,92 (1H, d, J=7,6), 8,68 (1H, d, J=7,6), 7,98-7,90 (2H, m), 7,75-7,67 (1H, m), 7,64-7,50 (4Н, m), 5,22-5,18 (1H, m), 4,95-4,74 (2H, m), 4,58-4,38 (3H, m), 3,52-3,19 (1H, m), 3,05-2,65 (4Н, m), 2,40-1,50 (6Н, m).

Аналитически рассчитано для C₂₅H₂₇N₅O₄S₂· H₂O: С, 50,75; Н, 4,94 N, 11,84. Обнаружено: С, 51,34; Н, 4,70; N, 11,58. МС (ES⁺) 572.

(509b). Раствор соединения 507а (100 мг, 0,17 ммоля) в сухом диметилформамиде (1,5 мл) обрабатывают 1-фенил-1Н-тетразол-5-тиолом (33 мг, 0,187 ммоля) и фторидом калия (15 мг, 0,34 ммоля). Смесь перемешивают 2 ч при комнатной температуре, разбавляют этилацетатом, промывают водным раствором бикарбоната натрия (х2), нас. солевым раствором, высушивают (MgSO₄) и упаривают. Продукт очищают методом флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя этилацетатом, с образованием 103 мг (88%) бесцветной пены: [α ]

\binom{23}{D}

-92,2° (с 0,1, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3334, 1726, 1660, 1528, 1501, 1417, 1394, 1368, 1279, 1253, 1155; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,82 (2Н, m), 7,60-7,40 (8Н, m), 7,39 15 (1Н, d, J=8,1), 7,05 (1Н, d, J=7,3), 5,26 (1Н, m), 5,15 (1Н, m), 4,99 (1Н, m), 4,60 (2Н, m), 4,30 (1Н, d, J=17, 2H), 3,32 (1Н, m), 3,10-2,75 (4Н, m), 2,40 (1Н, m), 2,24 (1Н, m), 1,90 (3H, m), 1,75 (1Н, m), 1,44 (9Н, s), MC (ES⁺) 691,47 (M⁺ + 1).

(280) синтезируют по способу, использующемуся для получения 505 из 504. Раствор соединения 509b (98 мг, 0,142 ммоля) в дихлорметане (1 мл) охлаждают до 0° С и добавляют трифторуксусную кислоту (1 мл). Смесь перемешивают 15 мин при 0° С и 30 мин при комнатной температуре, затем упаривают при пониженном давлении. Остаток перетирают с сухим толуолом и упаривают. Хроматографируют на силикагеле, элюируя 10% метанолом в дихлорметане, и получают бесцветное стеклоподобное вещество, которое кристаллизуют из смеси дихлорметан/диэтиловый эфир, с образованием 62 мг (69%) бесцветного твердого вещества: т.пл. 145° С (разлож.); [α ]

\binom{22}{D}

-80,9° (с 0,1, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3400, 1727, 1658, 1530, 1501, 1460, 1445, 1416, 1280, 1254; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,00 (1Н, m), 7,79 (2Н, d, J=6,7), 7,58-7,30 (9Н, m), 5,25 (2Н, m), 4,94 (1Н, m), 4,53 (2Н, m), 4,35 (1Н, m), 3,35 (1H, m), 3,01 (3H, m), 2,73 (1H, m), 2,38 (1H, m), 1,98 (4H, m), 1,64 (1H, m). Аналитически рассчитано для C₂₉H₃₀N₈O₇S· 0,2TFA: С, 53,71; Н, 4,63; N, 17,04. Обнаружено: С, 53,97; Н, 4,92; N, 16,77. MC (ES⁺) 633,55 (M⁺ -1).

(509с) получают тем же способом, что и соединение 509b, с образованием бесцветного стеклоподобного вещества (34%): [α ]

\binom{22}{D}

-77,1° (с 0,25, СН₂Сl₂); IR (пленка) 3311, 1724, 1658, 1603, 1578, 1536, 1488, 1458, 1426, 1368, 1340, 1279, 1256, 1231, 1155, 707; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,29 (2Н, m), 7,84 (2Н, m), 7,48 (4H, m), 7,22 (3H, m), 5,20 (2Н, m), 4,90 (2Н, m), 4,58 (1H, m), 3,29 (1H, m), 3,20-2,70 (4H, m), 2,38 (2Н, m), 1,96 (4H, m), 1,68 (1H, m), 1,42 (9Н, s). MC (ES⁺) 608,54 (M + 1).

(283) получают тем же способом, что и соединение 280, с образованием бесцветной пены (100%): т.пл. ~125° С; [α ]

\binom{19}{D}

-84,1° (с 0,1, 20% МеОН/СН₂Сl₂); IR (KBr) 3401, 1736, 1663, 1538, 1489, 1459, 1425, 1281, 1258, 1200, 1134; ¹H ЯМР (CD₃OD/CDCl₃) δ 8,38 (2Н, m), 7,84-7,40 (8Н, m), 5,16 (4H, m), 4,80 (1H, m), 4,56 (1H, m), 3,50 (1H, m), 3,12 (2Н, m), 2,82 (2Н, m), 2,37 (1H, m), 2,10-1,65 (5Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₇H₂₉N₅O₈· 0,4H₂O: С, 51,77; Н, 4,61; N, 10,41. Обнаружено: С, 52,19; Н, 4,93; N, 9,99.

(509d) синтезируют тем же способом, что и соединение 509b, получая бесцветное твердое вещество (49,6 мг, 82%): ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,02 (1H, s), 7,95-7,86 (1H, m), 7,84-7,76 (2Н, m), 7,62-7,35 (4H, m), 7,22-7,07 (1H, m), 6,43 (1H, d), 5,26-5,08 (2Н, m), 5,03-4,72 (3H, m), 4,66-4,50 (1H, m), 3,43-3,19 (1H, m), 3,15-2,97 (1H, m), 2,86-2,72 (3H, m), 2,48-2,31 (1H, m), 2,18-1,60 (6Н, m), 1,43 (9Н, s).

(510d) синтезируют тем же способом, что и соединение 280, получая бесцветное твердое вещество (25,7 мг, 57%): т.пл. 140-80° С; IR (KBr) 3391, 2945, 1733, 1664, 1530, 1422, 1363, 1277, 1259, 1204; ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 8,23 (1Н, s), 7,94 (1Н, d), 7,87 (2Н, d), 7,54-7,42 (3H, m), 6,48 (1Н, d), 5,22-5,15 (1Н, m), 4,57-4,46 (1Н, m), 3,62-3,41 (1Н, m), 3,22-3,13 (1Н, m), 3,02-2,81 (2Н, m), 2,70-1,80 (6Н, m). Аналитически рассчитано для С₂₆Н₂₈N₆O₈· 1,5Н₂O: С, 54,30; Н, 5,35; N, 14,61. Обнаружено: С, 54,14; Н, 5,35; N, 13,04. MC (ES⁺) 551 (M - 1, 100%). Точная масса, рассчитанная для C₂₆H₂₉N₆O₈S (MH⁺), составляет 553,2047. Обнаружено: 553,2080.

соединение	R
504f 505f
504g 280b
504h 283b

(505f) получают тем же способом, что и соединение 508а, используя 507b и 3-хлор-2-гидрокси-4Н-пиридо[1,2-а]пиримидин-4-он, затем сразу гидролизуют 504f трифторуксусной кислотой, получая рыжевато-коричневый порошок (65 мг, 30%): [α ]

\binom{20}{D}

128° (с 0,10, МеОН); IR (KBr) 3414, 2928, 1667, 1527, 2459, 1407, 1328, 1274, 1153, 1134; ¹Н ЯМР (MeOH) δ 9,35 (1Н, d, J=6,6Н), 8,34 (1Н, t, J=7,2Н), 7,99-7,95 (1H, m), 7,76-7,69 (1H, m), 5,85-5,45 (3H, m), 5,30-5,21 (1H, m), 4,93-4,66 10 (2Н, m), 3,81-3,65 (1H, m), 3,66 (3H, m), 3,45-2,52 (4Н, m), 2,52-1,71 (6Н, m). D.J.Hlasta et al., J. Med. Chem. 1995, 38, 4687-4692.

(504g) получают тем же способом, что и соединение 509b, (83%) в виде бесцветной пены: [α ]

\binom{23}{D}

-112,7° (с 0,2, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3312, 1726, 1668, 1501, 1413, 1395, 1369, 1328, 1276, 1254, 1155; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,59 (5Н, m), 7,48 (1H, d, J=8,0), 5,68 (1H, d, J=9,0), 5,37 (1H, m), 4,95 (1H, m), 4,62-4,31 (4Н, m), 3,36 (1H, m), 2,98 (3H, s), 2,88 (4Н, m), 2,66 (1H, m), 2,42 20 (2Н, m), 1,98 (1H, m), 1,75 (1H, m), 1,43 (9H,s).

(280b) получают тем же способом, что и соединение 280, (100%) в виде бесцветной пены: т.пл. 120-5° С; [α ]

\binom{25}{D}

-112,4° (с 0,1, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3328, 1730, 1664, 1529, 1501, 1410, 1328, 1277, 1219, 1153, 1134, 991; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,07 (1H, d, J=7,8), 7,58 (5Н, s), 6,41 (1H, d, J=9,5), 5,32 (1H, m), 5,04 (1H, m), 4,70 (1H, d, J=17,5), 4,60 (3H, m), 3,50-2,9 (3H, m), 2,98 (3H, s), 2,45 (2Н, m), 2,06 (4Н, m), 1,68 (1H, m).

(504h) получают тем же способом, что и соединение 509b (24%) в виде бесцветной пены: [α ]

\binom{23}{D}

-101,0° (с 0,2, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3330, 1727, 1669, 1425, 1396, 1369, 1328, 1276, 1256, 1231, 1155, 1137, 991; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,28 (2Н, br d, J=9,4), 7,71 (1H, d, J=7,9), 7,22 (2H, s), 6,03 (1H, d, J=9,4), 5,36 (1H, 15 m), 4,95 (2H, m), 4,52 (2Н, m), 3,29 (1Н, m), 3,07 (3H, s), 3,23-2,75 (3H, m), 2,66-2,35 (2H, m), 2,30-1,60 (5Н, m), 1,42 (9Н, s).

(283b) получают тем же способом, что и соединение 280, (100%) в виде бесцветной пены: т.пл. 120-5° С; [α ]

\binom{25}{D}

-85,2° (с 0,1, 10% СН₃ОН/СН₂Сl₂); IR (KBr) 3337, 1738, 1667, 1560, 1457, 1424, 1326, 1317, 1278, 1258, 1200, 1189, 1150, 1133,991; ¹Н ЯМР (СDСl₃/СD₃ОD) δ 8,35 (2H,m), 7,54 (2H, m), 5,32 (2H, m), 4,83 (2H, m), 4,45 (2H, m), 3,43-2,77 (4Н, m), 2,97 (3H, s), 2,42 (2H, m), 2,05-1,72 (5Н, m).

соединение	R
508с 511с
508d 280с
508е 283с

(508с) получают тем же способом, что и соединение 509b, с образованием 544 мг (97%) бледно-желтой пены: [α ]

\binom{20}{D}

-86° (с 0,19, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3426, 2947, 1725, 1669, 1551, 1418, 1383, 1253, 1155, 1064; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,49 (2Н, d, J=4,8), 7,13 (1Н, d, J=7,9), 7,03-6,98 (1Н, m), 5,47 (1Н, d, J=7,9), 5,23-5,19 (1Н, m), 5,09-5,01 (1Н, m), 4,84-4,51 (2Н, m), 4,04 (2Н, АВ), 3,69 (3H, S), 3,38-5 3,19 (1Н, m), 3,06-2,64 (4Н, m), 2,40-1,76 (6Н, m), 1,43 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₂₅H₃₄N₆О₈S: С, 51,89; Н, 5,92; N, 14,52. Обнаружено: С, 51,49; Н, 6,04; N, 13,87. МС (ES⁺) 579.

(511с) получают тем же способом, что и соединение 280 с образованием 370 мг (79%) белого порошка: т.пл. 105° С (разл.); [α ]

\binom{22}{D}

-94° (с 0,20, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3316, 3057, 2957, 1724, 1664, 1252, 1416, 1384, 1254, 1189, 1063; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,85 (1Н, d, J=7,8), 8,62 (2Н, d, J=4,7), 7,53 (1Н, d, J=8,0), 7,28-7,23 (1Н, 15 m), 5,21-5,17 (1Н, m), 4,87-4,79 (1Н, m), 4,47-4,35 (2Н, m), 4,23 (2Н, АВ), 3,58 (3H, s), 3,30-3,21 (1Н, m), 2,95-2,50 (4Н, m), 2,35-1,60 (6Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₁H₂₆N₆O₈S· H₂O: С, 46,66; Н, 5,22; N, 15,55. Обнаружено: С, 46,66; Н, 5,13; N, 15,07. MC (ES⁺) 523, (ES⁺) 521.

(508d) синтезируют тем же способом, что и соединение 509b, получая бесцветное твердое вещество (269 мг, 87%): т.пл. 80-110° С; [α ]

\binom{23}{D}

-108° (с 0,60 СН₂Сl₂); IR (KBr) 3315, 2977, 1727, 1688, 1527, 1501, 1458, 1418, 1368, 1279, 1250, 1155, 1064; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,70 (1Н, d), 7,63-7,53 (5Н, m), 5,84 (1Н, d), 5,34-5,27 (1Н, m), 5,05-4,92 (1Н, m), 4,78-4,54 (3H, m), 4,38 (1Н, d), 3,66 (3H, s), 3,37-5 3,19 (1Н, m), 3,07-2,94 (1Н, m), 2,91-2,82 (2Н, m), 2,71-2,56 (1Н, m), 2,40-2,30 (1Н, m), 2,19-2,13 (1Н, m), 2,08-1,68 (4Н, m), 1,42 (9Н, s). MC (ES⁺) 667 (31%), 645 (M⁺ + 1, 100), 589 (62).

(280с) синтезируют тем же способом, что и соединение 280, получая бледно-кремовое вещество (203 мг, 88%): т.пл. 105-130° С; [α ]

\binom{22}{D}

-235° (с 0,11 МеОН); IR (KBr) 3342, 2951, 1727, 1667, 1529, 1501, 1459, 1416, 1276, 1252, 1225, 1192, 1062; ¹H ЯMP (D₆-DMSO) δ 8,89 (1Н, d), 7,69 (5Н, s), 7,50 (1Н, d), 5,18-5,11 (1Н, m), 4,79-4,69 (1Н, m), 15 4,57 (2Н, s), 4,42-4,32 (1Н, m), 3,54 (3H, s), 2,92-2,63 (3H, m), 2,21-1,82 (5Н, m), 1,65-1,57 (1Н, m). MC (ES⁺) 587 (M - 1, 100%).

(508е) синтезируют тем же способом, что и соединение 509b, получая бледно-оранжевое твердое вещество (199 мг, 25%): т.пл. 80-120° С; [α ]

\binom{23}{D}

-89° (с 0,51 СН₂Сl₂); IR (KBr) 3333, 2978, 1726, 1669, 1578, 1536, 1478, 1426, 1368, 1277, 1253, 1232, 1155, 1064; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,41-8,18 (2Н, m), 7,81 (1Н, d), 7,26-7,20 (2Н, s), 5,91 (1Н, d), 5,24-5,16 (1Н, m), 5,07-4,86 (3H, m), 4,81-4,51 (2Н, m), 3,67 (3H, s), 3,34-3,16 (1Н, m), 3,10-2,81 (3H, m), 2,72-2,54 (1Н, m), 2,41-2,31 (1Н, m), 2,07-1,62 (5Н, m), 1,47 (9Н s). MC (ES⁺) 562 (M⁺ + 1, 100%), 506 (38).

(283с) синтезируют тем же способом, что и соединение 280, получая не совсем белый порошок (167 мг, 98%): т.пл. 90-105° С; [α ]

\binom{22}{D}

-106° (с 0,11 МеОН); IR (KBr) 3325, 3070, 2956, 1669, 1544, 1423, 1256, 1199, 1133, 1062; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,95 (1H, d), 8,45-8,20 (2Н, m), 7,53-7,45 (3H, m), 5,19-5,08 (3H, m), 4,70-4,62 (1H, m), 4,41-4,30 (2H, m), 3,53 (3H, s), 2,92-2,68 (3H, m), 2,22-2,06 (2H, m), 1,95-1,82 (2H, m), 1,63-1,53 (1H, m). MC (ES⁺) 506 (M⁺ + 1, 100%).

соединение	R
512а 280d
512b 283d

(512a) получают тем же способом, что и соединение 509b, в виде бесцветной пены (83%): [α ]

\binom{23}{D}

-129,6° (с 0,1, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3323, 1726, 1664, 1531, 1501, 1444, 1415, 1394, 1369, 1279, 1254, 1156; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,59 (5Н, s), 7,37 (1Н, d, J=7,9), 6,38 (1Н, d, J=7,4), 5,27 (1Н, m), 4,98 (2Н, m), 4,58 (2Н, d + m), 4,28 (1Н, d, J=17,2), 3,28 (1Н, m), 3,10-2,65 (4Н, m), 2,31 (2Н, m), 2,03 (3H, s), 2,10-1,72 (4Н, m), 1,48 (9Н, s).

(280d) получают тем же способом, что и соединение 280, в виде бесцветной пены (77%): [α ]

\binom{22}{D}

– 93,3° (c 0,1, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3316, 1728, 1659, 1531, 1501, 1415, 1341, 1278, 1253, 1222, 1185; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,05 (1Н, d, J=7,9), 7,57 (5Н, br s), 5,30 (1Н, m), 5,01 (2Н, m), 4,70-4,10 (4Н, m), 3,40-2,85 (4Н, m), 2,62 (1Н, m), 2,33 (1Н, m), 2,27-5 1,65 (5Н, m), 2,01 (3H, s).

(512b) получают тем же способом, что и соединение 509b, в виде бесцветной пены: IR (KBr) 3333, 1727, 1661, 1542, 1427, 1369, 1279, 1257, 1232, 1156; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,30 (2Н, m), 7,20 (3H, m), 6,45 (1H, d, J=7,4), 5,17 (1H, m), 4,91 (3H, m), 4,55 (1H, m), 3,27 (1H, m), 3,14-2,70 (4H, m), 2,41 (1H, m), 2,04 (3H, s), 2,10-1,65 (6H, m), 1,44 (9H, s).

(283d) получают тем же способом, что и соединение 280, в виде бесцветной пены (100%): [α ]

\binom{22}{D}

-106,0° (с 0,2, 10% СН₃ОН/СН₂Сl₂); IR (KBr) 3312, 1735, 1664, 1549, 1426, 1279, 1258, 1200, 1135; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,27 (2Н, m), 7,46 (2Н, m), 5,09 (11Н, m), 4,79 (3H, m), 4,47 (1H, m), 3,40 (1H, m), 3,30-2,70 (3H, m), 2,54 (1H, m), 2,30 (1H, m), 1,98 (3H, s), 2,05-1,65 (4H, m).

(245b) получают из (1S,9R) 9-бензоиламино-1,2,3,4,7,8,9,10-октагидро-10-оксо-6Н-пиридазино[1,2-а][1,2]диазепин-1-карбоновой кислоты по способу, описанному для получения соединения 245, с образованием 416 мг (85%) бесцветной пены (смесь диастереомеров ~ 1:1): IR (KBr) 3392, 3302, 2942, 1792, 1642, 1529, 1520, 1454, 1119; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,79 (2Н, m), 7,51-7,09 (10Н, m), 5,52 (0,5H, d, J=5,3), 5,51 (0,5H, s), 5,36 (1H, m), 4,84 (1H, m), 4,74-4,59 (1,5Н, m), 4,51 (1H, m), 4,38 (0,5H, m), 3,22-2,83 (5Н, m), 2,51 (1H, m), 2,25 (2Н, m), 2,01-1,46 (6H, m). Аналитически рассчитано для C₂₈H₃₂N₄O₆· 0,75H₂O: С, 62,97; Н, 6,32; N, 10,49. Обнаружено: С, 63,10; Н, 6,16; N, 10,21. MC (ES⁺) 521 (M + 1, 100%).

(246b) получают из 245b по способу, описанному для получения соединения 246, с образованием 104 мг (33%) белого порошка: т.пл. 115-119° С; [α ]

\binom{24}{D}

19,8° (с 0,2 МеОН) IR (KBr) 3293, 2944, 1786, 1639, 1578, 1537, 1489, 1450, 1329, 1162, 1124; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,85 (2Н, d, J=7,0), 7,49 (3H, m), 5,49 (1H, m), 4,55 (1H, m), 4,30 (2Н, m), 3,40 (1H, m), 3,19-2,89 (3H, m), 2,63 (2Н, m), 2,16-1,81 (5Н, m), 1,60 (3H, m). Аналитически рассчитано для C₂₁H₂₆N₄O₆· H₂O: С, 56,24; Н, 6,29; N, 12,49. Обнаружено: С, 56,54; Н, 6,05; N, 12,29. MC (ES⁺) 429 (M - 1, 100%).

Соединения 513a-j получают по описанной ниже схеме.

соединение	R
513а
513а-1
513а-2
513b
513b-1

513b-2
513с
513d
513e
513f
513f-l
513f-2

(513а) получают тем же способом, что и соединение 513d/e, с образованием смеси диастереомеров (670 мг, 50%) в виде масла: IR (KBr) 3331, 2946, 1790, 1723, 1713, 1531, 1329, 1257, 1164, 1120, 1060, 977, 937, 701; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,36-7,18 (5H, m), 5,99-5,83 (1Н, m), 5,41-5,34 (2Н, m), 5,28-5,18 (2Н, m), 4,59-4,56 (2Н, m), 4,32-3,96 (2Н, m), 3,85-3,73 (1Н, m), 3,02-2,76 (3H, m), 2,49-2,34 (1H, m).

(513b) получают как и соединение 513d/e, с образованием 8 г (51%) смеси диастереомеров в виде прозрачного масла: [α ]

\binom{20}{D}

-13° (с 0,25, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3325, 2959, 2875, 1790, 1723, 1535, 1420, 1328, 1257, 1120, 1049, 973, 937; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 6,02-5,80 (1H, m), 5,53-5,46 (2Н, m), 5,37-5,21 (2Н, m), 4,58 (2Н, d, J=5,5), 4,50-4,46 (0,5Н, m), 4,34-4,25 (1H, m), 4,19-4,12 (0,5Н, m), 3,06-2,77 (1H, m), 2,53-2,35 (1H, m), 1,85-1,50 (8Н, m). Аналитически рассчитано для C₁₃H₁₉NO₅: С, 57,98; Н, 7,11; N, 5,20. Обнаружено: С, 56,62; Н, 7,22; N, 4,95. MC (ES⁺) 270.

(513с) синтезируют тем же способом, что и соединение 513d/e, получая единственный изомер (20%) в виде бледно-желтого масла: [α ]

\binom{24}{D}

-63,1° (с 0,2, СН₂Сl₂); IR (пленка) 3338, 2948, 1791, 1723, 1529, 1421, 1330, 1253, 1122, 984, 929, 746; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,20 (4Н, m), 5,87 (1H, m), 5,61 (1H, d, J=5,4), 5,33-5,10 (2Н, m), 4,70 (1H, m), 4,56 (3H, m), 3,33-3,19 (2Н, m), 3,10-2,94 (2Н, m), 2,81 (1H, dd, J=8,3, 17,3), 2,43 (1H, dd, J=10,5, 17,3).

(513d) и (513d/e) получают по способу, описанному Chapman Biorg. & Med. Chem. Lett., 2, pp. 615-618 (1992)]. После экстракции этилацетатом и промывания NаНСО₃, продукт высушивают (MgSO₄), фильтруют и упаривают, получая масло, которое содержит продукт и бензиловый спирт. Добавляют гексан (200 мл) (используют 200 мл гексана на каждые 56 г AllocAsp (CO₂tBu)CH₂OH), смесь перемешивают и охлаждают в течение ночи. Получают маслянистое твердое вещество. Жидкость декантируют и оставляют для хроматографии. Маслянистый остаток растворяют в этилацетате и упаривают, получая масло, которое кристаллизуют из 10% раствора этилацетата в гексане (~ 500 мл). Твердое вещество фильтруют, получая 513d (12,2 г, 19%): т.пл. 108-110° С; [α ]

\binom{24}{D}

+75,72° (с 0,25, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3361, 1778, 1720, 1517, 1262, 1236, 1222, 1135, 15 1121, 944, 930, 760; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,38 (5Н, m), 5,90 (1Н, m), 5,50 (1Н, s), 5,37 (0,5Н, m), 5,26 (2,5Н, m), 4,87 (1H, ABq), 4,63 (3H, m), 4,31 (1Н, m), 3,07 (1Н, dd), 2,46 (1Н, dd). Аналитически рассчитано для C₁₅H₁₇NO₅: С, 61,85; Н, 5,88; N, 4,81. Обнаружено: С, 61,85; Н, 5.89; N, 4,80.

Жидкие фракции объединяют и упаривают, получая масло (~ 200 г), содержащее бензиловый спирт. Добавляют смесь гексан/этилацетат (9:1, 100 мл) и продукт очищают методом хроматографии, элюируя 10% раствором этилацетата в гексане для удаления избытка бензилового спирта, и затем смесью дихлорметан/гексан (1:1, содержащей 10% этилацетата). В результате получают соединение 513е, содержащее некоторое количество 513d (20,5 г, 32%): т.пл. 45-48° С; [α ]

\binom{24}{D}

-71,26° (с 0,25, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3332, 1804, 1691, 1536, 1279, 1252, 1125, 976. ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,38 (5Н, m), 5,91 (1Н, m), 5,54 (1H, d, J=5,2), 5,38 (3H, m); 4,90 (1H, ABq); 4,60 (4Н, m), 2,86 (1H, dd); 2,52 (1H, dd). Аналитически рассчитано для С₁₅Н₁₇NО₅· 0,1Н₂О: С, 61,47; Н, 5,91; N, 4,78. Обнаружено: С, 61,42; Н, 5,88; N, 4,81.

(513f) синтезируют тем же способом, что и соединение 513d/e, получая бесцветное масло (152 мг, 79%): IR (пленка) 3334, 2983, 2941, 1783, 1727, 1713, 1547, 1529, 1422, 1378, 1331, 1313, 1164, 1122, 1060, 938; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 6,09-5,82 (2Н, m), 5,50-5,18 (3H, m), 4,64-4,54 (2Н, m), 4,27-4,16 (1Н, m), 3,95-3,78 (1Н, m), 3,73-3,56 (1Н, m), 3,05-2,77 (1Н, m), 2,56-2,37 (1Н, m), 1,35-10 1,17 (4Н, m). Аналитически рассчитано для С₁₀Н₁₅NO₅: С, 52,40; Н, 6,60; N, 6,11. Обнаружено: С, 52,16; Н, 6,62; N, 5,99. MC (ES⁺) 229 (М⁺ + 1, 100%).

(513g). 4-Диметиламино-пиридин (76,0 мг, 622 ммолей) добавляют к раствору 2-феноксибензоил хлорида (579 мг, 2,49 ммолей) и соединения 517 (600 мг, 2,07 ммоля) в пиридине (10 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов, затем добавляют нас. солевой раствор (25 мл) и экстрагируют этилацетатом (30 мл, 20 мл). Объединенные органические экстракты промывают 1М хлористоводородной кислотой (3× 25 мл), насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия (2× 25 мл) и нас. солевым раствором (25 мл), высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Бледно-оранжевое масло очищают методом колоночной хроматографии (1-10% ацетона в дихлорметане), получая 447 мг (44%) бесцветного масла: IR (пленка) 3375, 2980, 1721, 1712, 1602, 1579, 1514, 1484, 1451, 1368, 1294, 1250, 1234, 1161, 1137, 1081, 754; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,98-7,93 (1Н, m), 7,50-7,41 (1Н, m), 7,35-7,25 (2Н, m), 7,22-7,03 (3H, m), 6,95 (3H, d), 5.95-5,76 (1H, m), 5,57 (1Н, d), 5,30-5,13 (2Н, m), 4,51 (2Н, d), 4,25 (2Н, d), 4,18-4,04 (1Н, m), 3,88 (1Н, m), 3,50 (1Н, m), 2,51 (2Н, m), 1,41 (9Н, s), MS (ES⁺) 508 (57%), 503 (76), 486 (M⁺ + 1, 45), 468 (27), 412 (100). Точная масса, рассчитанная для С₂₆Н₃₂NО₈ (МH⁺), составляет: 486,2128. Обнаружено: 486,2158.

(513h) получают из (3S,4R) т-бутил(N-аллилоксикарбонил)-3-амино-4,5-дигидроксипентаноата по способу, описанному для 513g, получая 562 мг (85%) бесцветного масла: IR (пленка) 3418, 2980, 1722, 1711, 1512, 1368, 1278, 1245, 1198, 1157, 1139; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,90 (1Н, d, J=8,6), 8,21 (1Н, dd, J 1,2, 7,3), 8,04 (1Н, d, J=8,2), 7,89 (1H, dd, J=1,5, 7,9), 7,67-7,46 (3H, m), 5,88 (1H, m), 5,49 (1H, d, J=15 9,0), 5,35-5,18 (2H, m), 4,57-4,46 (4Н, m), 4,19 (2H, m), 2,67 (2Н, m), 1,40 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₄H₂₉NO₇: С, 65,00; Н, 6,59; N, 3,16. Обнаружено: С, 64,74; Н, 6,56; N, 3,09. MC (ES⁺) 466 (M+Na, 100%), 444 (М + 1, 39), 388 (44).

(513i) получают тем же способом, что и соединение 513g, с образованием бесцветного масла (569 мг, 85%): IR (пленка) 3400, 1723, 1712, 1584, 1528, 1489, 1443, 1367, 1276, 1232, 1190, 1161, 1098, 1074, 995, 755; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,65-8,59 (1H, d), 7,84-7,66 (2H, m), 7,45-7,11 (5Н, m), 7,05-6,97 (2H, m), 6,00-5,78 (1H, m), 5,54-5,14 (2H, m), 4,62-4,52 (2H, m), 4,42-4,32 (2H, m), 4,08-4,22 (2H, m), 2,78-2,47 (2H, m), 1,44 (9Н, s), MS (ES⁺) 508 (100%), 486 (M⁺ + 1, 33). Точная масса, рассчитанная для C₂₆H₃₂NO₈ (MH⁺), составляет: 486,2128. Обнаружено: 486,2121.

(513j) синтезируют тем же способом, что и соединение 513g, получая бледно-оранжевое масло (905 мг, 91%): IR (пленка) 3418, 3383, 2980, 1722, 1711, 1601, 1517, 1450, 1424, 1368, 1308, 1252, 1154, 1100, 994, 767, 698; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,62-7,55 (2H, m), 7,51-7,42 (3H, m), 5,98-5,76 (1H, m), 5,33-5,18 (2H, m), 4,53 (2H, d), 4,18 (2H, d), 3,91 (1H, m), 3,80 (1H, m), 2,76 (3H, s), 2,5010 (2H, m), 1,43 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₂₄Н₃₀N₂O₈· 0,5Н₂O: С, 59,62; Н, 6,46; N, 5,79. Обнаружено: C, 59,46; Н, 6,24; N, 5,72. MC (ES⁺) 497 (100%), 475 (M⁺ + 1, 15), 419 (48).

(514) получают по способу, описанному в Н.Matsunaga, et al., Tetrahedron Letters 24, pp. 3009-3012 (1983), как чистый диастереомер (60%), в виде масла: [α ]

\binom{23}{D}

-36,9° (с 0,5, дихлорметан); IR (пленка) 2982, 2934, 1726, 1455, 1369, 1257, 1214, 1157, 1068; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,31 (5Н, m), 4,10 (1Н, q, J=6,0), 4,05-3,75 (4Н, m), 3,10 (1Н, q, J=6,0), 2,40 (2Н, m), 1,42 (9Н, s), 1,40 (3H, s), 1,34 (3H, s).

(516). Соединение 514 (3,02 г, 9,00 ммолей) и 10% палладий на угле (300 мг) в этаноле (30 мл) перемешивают 2 часа под током водорода. Суспензию фильтруют через целлит и 0,45 мм мембранный фильтр, фильтрат концентрируют, получая соединение 515 в виде бесцветного масла (2,106 г, 95%), которое используют без дальнейшей очистки. Это масло (1,93 г, 7,88 ммолей) растворяют в воде (10 мл) и добавляют 1,4-диоксан и гидрокарбонат натрия (695 мг, 8,27 ммолей). Смесь охлаждают до 0° С и по каплям добавляют аллил хлорформат (1,04 г, 919 мл, 8,66 ммолей). Через 3 часа смесь экстрагируют эфиром (2× 50 мл). Объединенные эфирные экстракты промывают водой (2× 25 мл) и нас. солевым раствором (25 мл), высушивают (MgSO₄) и концентрируют, получая бесцветное масло. После колоночной флэш-хроматографии (10-35% этилацетата в гексане) получают бесцветное твердое вещество (2,69 г, 95%): т.пл. 64-5° С; [α ]

\binom{23}{D}

-21° (с 1,00, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3329, 1735, 1702; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 6,00-5,82 (1H, m), 5,36-5,14 (2Н, m), 5,42 (1H, s), 4,56 (1H, d), 4,40-4,08 (2H, m), 4,03 (1H, m) 3,70 (1H, m), 2,52 (2H, m), 1,44 (12H, 2 х s), 1,33 (3H, s). Аналитически рассчитано для С₁₆Н₂₇NО₆: С, 58,34; Н, 8,26; N, 4,25. Обнаружено: С, 58,12; Н, 8,16; N, 4,19; МС (+FAB) 320 (M⁺ + 1, 41%), 274 (70), 216 (100).

(517). Раствор соединения 516 (2,44 г, 7,41 ммолей) в 80% водном растворе уксусной кислоты (25 мл) перемешивают 24 часа при комнатной температуре, затем концентрируют и подвергают азеотропной перегонке с толуолом (2× 25 мл). Остаток обрабатывают нас. солевым раствором (25 мл) и экстрагируют этилацетатом (2× 25 мл). Органические фракции высушивают (MgSO₄) и концентрируют, получая бесцветное масло. После флэш-хроматографии (20-80% этилацетата в дихлорметане) получают бесцветное твердое вещество (1,99 г, 90%): т.пл. 74-5° С; [α ]

\binom{25}{D}

-1,3° (с 1,0, CH₂Cl₂); IR (KBr) 1723, 1691; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 6,02-5,78 (2H, m), 5,35-5,16 (2H, m), 4,55 (2H, d), 4,16-4,04 (2H, m), 2,76 (2H, s), 3,56 (2H, m), 2,56 (2H, m), 1,43 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₁₃Н₂₃NО₆: С, 53,97; Н, 8,01; N, 4,84. Обнаружено: С, 53,79; Н, 7,88; N, 4,81; МС (+FAB) 290 (M⁺ + 1, 44%), 234 (100).

Пример 30

Соединения 1105-1125 получают по способам, описанным ниже. Физические характеристики перечислены в Таблице 24.

Стадия А. Синтез соединения 401. Смолу TentaGel S^® NH₂ помещают в металлокерамический сосуд для встряхивания и промывают диметилацетамидом (3× 15 мл). Соединение 400 (1,36 г, 2,3 ммолей) растворяют в DMA (10 мл) и добавляют O-бензотриазол-N,N,N,N’-тетраметилуроний гексафторфосфат (HBTU; 0,88 г, 2,3 ммолей) и DIEA (0,8 мл, 4,6 ммолей). Раствор переносят на смолу и затем добавляют 5 мл DMA. Реакционную смесь перемешивают 1,5 часа при комнатной температуре, используя кистевой встряхиватель. Смолу фильтруют и промывают диметилацетамидом (4× 15 мл).

Стадия В. Синтез 1102. Со смолы 401 удаляют защитные группы с помощью 20% (об./об.) пиперидин/диметилацетамида (15 мл) в течение 10 мин (встряхивание) и затем еще 10 мин со свежим пиперидиновым реагентом (15 мл). После чего смолу промывают диметилацетамидом (6× 15 мл) и затем N-метилпирролидоном (2× 25 мл).

Соединение 1101 (0,979 г, 2,11 ммолей) растворяют в диметилацетамиде (8 мл). Добавляют HBTU (0,81 г, 2,1 ммолей) и DIEA (0,75 мл, 4,3 ммолей), раствор добавляют к смоле, после него добавляют диметилацетамид (4 мл). Реакционую смесь перемешивают 2 часа при комнатной температуре с помощью кистевого встряхивателя. Обработку смолы проводят так, как описано для 401, с образованием 1102.

Стадия С. Синтез 1103. Это соединение получают из смолы 1102 (0,040 ммолей), используя множественный пептидный синтезатор Advanced ChemTech 396. Автоматические циклы состоят из промыва смолы диметилформамидом (2× 1 мл), снятия защитных групп в 25% (об./об.) растворе пиперидина в диметилформамиде (1 мл) в течение 3 мин и затем в течение еще 10 мин в свежем реагенте (1 мл), с образованием

смолы 1103. Смолу промывают диметилформамидом (3× 1 мл) и N-метилпирролидоном (3× 1 мл).

Смолу ацилируют раствором 0,4М карбоновой кислоты и 0,4М НОВТ в N-метилпирролидоне (0,5 мл), раствором 0,4М HBTU в N-метилпирролидоне (0,5 мл) и раствором 1,6М DIEA в N-метилпирролидоне (0,25 мл) и реакционную смесь перемешивают 2 часа при комнатной температуре. Стадию ацилирования повторяют. Наконец, смолу промывают N-метилпирролидоном (1× 1 мл), диметилформамидом (4× 1 мл), дихлорметаном (5× 1 мл) и высушивают под вакуумом. Альдегид отщепляют от смолы и проводят общее снятие защитных групп путем обработки 95% TFA/5% H₂O (об./об., 1,5 мл) в течение 30 мин при комн. температуре. После промывания смолы расщепляющим реагентом (1 мл) объединенные фильтраты добавляют к холодной смеси 1:1 эфир:гексан (10 мл) и получившийся осадок выделяют центрифугированием и декантацией. Получившийся осадок растворяют в смеси 10% ацетонитрил/90% Н₂O/0,1% TFA (5 мл) и лиофилизируют, получая неочищенный продукт 1105-1125 в виде белого порошка. Это соединение очищают методом полу-препаративной RP-HPLC на колонке Rainin Microsorb™ С 18 (5 μ , 21,4× 250 мм), элюируя линейным градиентом ацетонитрила (8% 48%), содержащим 0,1% TFA (об./об.), в течение 30 мин при скорости потока 12 мл/мин. Фракции, содержащие целевой продукт, объединяют и лиофилизируют, получая 1105-1125 (10,8 мг, 63%).

Аналитические методы ВЭЖХ:

(1) Waters DeltaPak С 18, 300

(5μ , 3,9× 150 мм). Линейный градиент ацетонитрила (0% 25%), содержащий 0,1% TFA (об./об.) в течение 14 мин при скорости потока 1 мл/мин.

(2) Waters DeltaPak C18, 300

(5μ , 3,9× 150 мм). Линейный градиент ацетонитрила (5% 45%), содержащий 0,1% TFA (об./об.) в течение 14 мин при скорости потока 1 мл/мин.

(259b) синтезируют по способу, использующемуся для получения 259 из 258, с образованием воскоподобного твердого вещества (87 г, 51%): т.пл. 54-55° С; IR (пленка)

3324, 2978, 1732, 1713, 1455, 1367, 1277, 1254, 1171; ¹Н ЯМР (СDCl₃) δ 7,35 (5H, m), 6,15 (1Н, bs), 5,13 (2Н, s), 3,15 (2Н, t, J=6,5), 2,54 (2Н, t, J=6,5), 1,45 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₁₅H₂₂N₂O₃: С, 61,21; Н, 7,53; N, 9,52. Обнаружено: С, 61,29; Н, 7,51; N, 9,51. MC (ES⁺) 295 (M⁺ + 1).

(260b) синтезируют по способу, использующемуся для получения 260 из 259 с образованием смолы (81 г), которую используют в следующей стадии без очистки. Аналитические данные для чистого образца: IR (пленка) 3318, 2976, 1733, 1451, 1412, 1393, 1366, 1256, 1161; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,34 (10Н, m), 6,68 (0,5H, bs), 5,11 (4Н, m), 4,63 (0,5Н, bs), 4,14 (1Н, m), 3,53 (2Н, m), 3,08 (1Н, m), 2,63 (2Н, m), 2,10-1,60 (4Н, m), 1,60-1,35 (19H, m+2xs).

(261b), синтезируют по способу, использующемуся для получения 261 из 260, получая смолу, которую очищают методом флэш-хроматографии (1:1 этилацетат/дихлорметан), получая указанное в заголовке соединение 261b (36,0 г, 79,4% после 2 стадий): IR (пленка) 3267, 2979, 2937, 1728, 1668, 1394, 1369, 1245, 1159; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 7,6 (1Н, bs), 6,8 (1Н, 20 vbs), 4,47 (1Н, bs), 3,73 (2Н, bs), 2,98 (1Н, bs), 2,66 (3H, n), 2,04 (1Н, bs), 1,84 (1H, m), 1,6-1,2 (21Н, m+ s).

(262b) синтезируют по способу, использующемуся для получения 262 из 261, с образованием указанного в заголовке соединения 262b (18,6 г, 54%) в виде масла: [α ]

\binom{20}{D}

+47,7° (с 0,236, CH₂Cl₂); IR (пленка) 3291,2978, 1738, 1727, 1690, 1678, 1439, 1243, 1164; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 6,59 (1Н, s), 5, 06 (1Н, m), 4,47 (1Н, m), 3,85 (3H, m), 2,82 (1Н, m), 2,37 (1H, m), 2,22 (1H, m), 1,92 (1H, m), 1,63 (2H, m), 1,48 и 1,46 (18H, 2xs). MC (ES⁺) 399 (M⁺+ 1).

(518). Соединение 262b (2,43 г, 6,1 ммолей) растворяют в 1М растворе хлористого водорода в этилацетате (30 мл) и перемешивают 20 часов при комнатной температуре. Добавляют твердый бикарбонат натрия (4 г, 46,5 ммолей) и 20 мл воды, смесь перемешивают 5 мин до разделения, и водную фракцию экстрагируют этилацетатом. Объединенный органический раствор промывают водой, нас. солевым раствором, высушивают (MgSO₄) и концентрируют. После очистки методом флэш-хроматографии (50% этилацетат в дихлорметане - 100% этилацетат) получают чистый продукт 518 (1,08 г, 59%) в виде нестабильного масла: [α ]

\binom{20}{D}

+82° (с 0,55, CH₂Cl₂); IR (пленка) 3331, 2977, 1731, 1680, 1664, 1439, 1420, 1315, 1158; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 5,08 (1H, m), 4,48 (1Н, m), 1,80 (2H, Abq), 3,70 (2H, bs, замещено D₂O), 3,53 (1H, m), 2,75 (1H, m), 2,30 (2H, m), 1,88 (1H, m), 1,71 (2H, m), 1,47 (9Н, s).

(520). Соединение 519 (9,4 г, 35,6 ммолей) суспендируют в метаноле (230 мл) и охлаждают до 0° С в ледяной бане. Добавляют по каплям тионил хлорид (3 мл, 4,89 г, 41,1 ммолей) в течение 30 мин и смесь перемешивают 48 часов при температуре окружающей среды. Растворитель удаляют под вакуумом при 30° С и маслянистый остаток растворяют в этилацетате (500 мл). Органический раствор промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой и нас. солевым раствором, высушивают (MgSO₄) и концентрируют, получая соединение 520 (7,84 г, 79%) в виде масла: [α ]

\binom{22}{D}

-25,9° (с 0,615, CH₂Cl₂); IR (пленка) 2953, 1739, 1703, 1694, 1440, 1403, 1357, 1261, 1241, 1174; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,36 (5Н, s), 5,18 (2Н, s), 4,00 (1Н, bd), 3,73 (3H, s), 3,55 (1Н, dd), 3,12 (1Н, t), 2,06 (1Н, m), 1,73 (3H, m). Аналитически рассчитано для С₁₄Н₁₇N₂О₄· 0,25Н₂О: С, 59,46; Н, 6,59; N, 9,91. Обнаружено: С. 59,44; Н, 6,46; N, 10,09.

(521). Используя метод, подобный описанному выше для соединения 260, получают соединение 521, 96% в виде неочищенного масла: [α ]

\binom{22}{D}

-22,16° (с 0,25, CH₂Cl₂); IR (пленка) 3316, 2976, 2953, 1738, 1726, 1714, 1690, 1367, 1260, 1167; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,25 (10Н, m), 6,82 (1Н, bs), 5,10 (4Н, m), 4,80 (1Н, bs), 4,3-3,4 (6Н, m), 3,10 (1Н, m), 2,59 (2Н, m), 1,95 (2Н, m), 1,44 (10Н, m+s).

(522). Используя метод, подобный описанному выше для соединения 261, получают соединение 522, 92% в виде твердого вещества белого цвета: т.пл. 146-148° С (разлож.); [α ]

\binom{22}{D}

+27,8° (с 0,25, CH₂Cl₂); IR (КВг) 3346, 1740, 1710,1626, 1497, 1290, 1250, 1206, 1179, 1159; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,60 (1Н, bs), 7,5-5,5 (1Н, vbs), 4,46 (1Н, bs), 3,76 (5Н, m+s), 3,00 (1Н, m), 2,70 (3H, m), 2,16 (1Н, m), 1,92 (1Н, m), 1,56 (1Н, m), 1,46 (11Н, m+s). Аналитически рассчитано для C₁₅H₂₆N₄O₇: С, 48,12; Н, 7,00; N, 14,96. Обнаружено: С, 48,21; Н, 6,96; N, 14,86. MC (ES⁺) 373 (М^- - 1).

(523). Соединение 522 (7,15 г, 19,1 ммолей) растворяют в дихлорметане (100 мл), содержащем диметилформамид (0,5 мл), и охлаждают до 0° С. Добавляют тионил хлорид (1,6 мл, 2,61 г, 22 ммоля) и N-этилморфолин (4,86 мл, 440 мг, 38,2 ммолей) и смесь перемешивают 2 часа. Органическую смесь промывают 2М раствором бисульфата натрия (50 мл), насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и нас. солевым раствором (50 мл), высушивают (MgSO₄) и концентрируют. Остаток перетирают с эфиром, получая соединение 523 в виде твердого вещества белого цвета (5,73 г, 84%): т.пл. 186-188° С (разлож.); [α ]

\binom{22}{D}

+65,3° (с 0,25, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3298, 2978, 1750,1720, 1682, 1658, 1455, 1423, 1369, 1316, 1241, 1212, 1160; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 6,56 (1Н, s), 5,17 (1H, dd), 4,48 (1H, bd), 3,81 (3H, m), 3,75 (3H, s), 2,83 (1H, 15 dt), 2,40 (1H, m), 2,28 (1H, m), 1,95 (1H, m), 1,67 (1H, m), 1,47 (9H, s). Аналитически рассчитано для C₁₅H₂₄N₄O₆· 1,6 H₂O: С, 50,13; Н, 6,82; N, 15,59. Обнаружено: С, 50,12; Н, 6,71; N, 15,58. МС (ES⁺) 357 (M⁺ - 1, 46%), 301 (100%).

(524) синтезируют из 523 по способу, использующемуся для получения 518.

Соединения 262a-k по способам, использующимся для получения 211b-f.


262a-k	263a-k
соединение	R
262a 263а
262b 263b
262с 263с
262d 263d
262e 263е
262f 263f
262g 263g
262h 263h
262i 263i
262j 263j
262k 263k

(262а). Получают 443 мг (91%) указанного в заголовке соединения: т.пл. 56-7° С; [α ]

\binom{25}{D}

+76° (с 0,15, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3429, 2979, 1734, 1675, 1418, 1369, 1339, 1323, 1244, 1164, 665; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 8,45 (1H, s), 8,00-7,59 (7Н, m), 4,69-4,65 (1Н, m), 4,25-4,12 (1Н, m), 4,10-30 3,99 (1Н, m), 3,73-3,55 (2Н, m), 2,40-2,30 (1Н, m), 1,99-1,91 (1Н, m), 1,82-1,62 (2Н, m), 1,48-1,46 (2Н, m), 1,37 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₃H₂₈N₄O₆S· H₂O: С, 54,53; Н, 5,97; N, 11,06. Обнаружено: С, 54,60; Н, 5,73; N, 10,95. MC (ES⁺) 489.

(262с) Получают 120 мг (80%) бесцветной пены: [α ]

\binom{22}{D}

+22,6° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3316, 1732, 1671, 1609, 1551, 1495, 1455, 1432, 1316, 1288, 1245, 1218, 1158, 1122, 1023; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,16 (4Н, m), 6,79 (1Н, m) 6,60 (1Н, m), 5,11 (1Н, m), 4,59 (1Н, m), 5 3,89 (2Н, m), 3,77 (3H, s), 3,72 (2Н, m), 2,85 (1Н, m).

(262d) (81%) получают в виде бесцветной пены: [α ]

\binom{22}{D}

+3,7° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3468, 3446, 3269, 1734, 1698, 1667, 1609, 1555, 1490, 1461, 1433, 1423, 1296, 1246, 1215, 1173, 1157, 1028, 756; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 8,23 (1Н, m), 7,95 (1Н, s), 6,95 (4Н, m), 5,15 (1Н, m), 4,60 (1Н, m), 3,98-3,65 (4Н, m), 3,89 (3H, s), 2,90 (1Н, m), 2,48 (1Н, m), 2,25 (1Н, m), 2,05-1,65 (2Н, m), 1,48 (9Н, s).

(262е) получают в виде белого пенистого твердого вещества (155 мг, 53%): т.пл. 53-7° С; [α ]

\binom{22}{D}

+57,4° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3271, 2978, 1733, 1680, 1437, 1314, 1245, 1156; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,46 (1Н, s), 7,42-7,20 (5Н, m), 5,03 (1Н, dd), 4,52-4,40 (1H, m), 3,96-3,70 (2H, m), 3,70-3,49 (1H, m), 3,63 (2Н, s), 2,92-2,75 (1H, m), 2,43-2,33 (1H, m), 2,33-2,15 (1H, m), 2,00-1,50 (3H, m), 1,45 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₁H₂₈N₄O₅· 0,25H₂O: С, 59,91; Н, 6,82; N, 13,31. Обнаружено: С, 60,19; Н, 6,80; N, 13,30. МС (ES⁺) 418 (М⁺ + 2, 25%), 417 (M⁺ + 1, 100), 362 (9), 361 (45).

(262f) получают в виде твердого вещества белого цвета (273 мг, 93%): т.пл. 102-6° С; [α ]

\binom{22}{D}

+7,5° (с 0,07, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3320, 2979, 1731, 1676, 1669, 1601, 1549, 1444, 1314, 1240, 1156; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,37-7,20 (6Н, m), 7,08-6,98 (1H, 5 m), 12 (1H, dd), 4,64-4,55 (1H, m), 4,02-3,78 (2H, m), 3,75-3,65 (1H, m), 2,94-2,75 (1H, m), 2,57-2,35 (1H, m), 2,35-2,20 (1H, m), 2,00-1,50 (3H, m), 1,48 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₀H₂₇N₅O₅· 0,4H₂O: С, 56,56; Н, 6,60; N, 16,49. Обнаружено: С, 56,89; Н, 6,58; N, 16,07. MC (ES⁺) 419 (М⁺+ 2, 24%), 418 (М⁺ + 1, 100), 363 (15), 362 (81), 242 (10).

(262g) (13 г) получают в виде твердого вещества белого цвета (298 мг, 70%): т.пл. 138-43° С; [α ]

\binom{23}{D}

+69,8° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3282, 2978, 1733, 1664, 1536, 1421, 1310, 1156, 15 748; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 9,67 (1H, s), 9,53 (1H, s), 7,50 (1H, d), 7,30-7,15 (2H, m), 7,10-7,00 (1H, m), 6,93 (1H, 3), 5,16-5,12 (1H, m), 4,60-4,50 (1H, m), 4,05-3,85 (2H, m), 3,85-3,70 (1H, m), 3,05-2,90 (1H, m), 2,55-2,35 (1H, m), 2,35-2,20 (1H, m), 2,00-1,85 (1H, 20 m), 1,85-1,50 (2H, m), 1,47 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₂₂Н₂₇N₅O₅· 0,45Н₂O: С, 58,77; Н, 6,26; N, 15,58. Обнаружено: С, 59,14; Н, 6,24; N, 15,18. МС (ES⁺) 433 (М⁺ + 2, 26%), 442 (M⁺ + 1, 100), 387 (17), 386 (79), 285 (20), 229 (85), 211 (26), 185 (15), 183 (57), 139 (9).

(262h) получают в виде твердого вещества белого цвета (325 мг, 73%): т.пл. 209-12° С; [α ]

\binom{24}{D}

+62,4° (c 0,2, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3513, 3269, 2980, 1731, 1680, 1653, 1599, 1531, 1314, 1158; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 9,40 (1H, s), 8,75 (1H, s), 7,72 (2H, d), 7,47 (2H, d), 5,15-5,05 (1H, m), 4,55-4,45 (1H, m), 4,05-3,70 (3H, m), 3,00-2,80 (1H, m), 2,45-2,35 (1H, m), 2,30-2,15 (1H, m), 2,10 (3H, s), 2,00-1,80 (1H, m), 1,80-1,50 (2H, m), 1,48 (9Н, s). Аналитически рассчитано для С₂₂Н₂₉N₅O₆: С, 57,51; Н, 6,36; N, 15,24. Обнаружено: С, 57,4; Н, 6,38; N, 15,12. MC (ES⁺) 461 (М⁺ + 2, 26%), 460 (M⁺ + 1, 100), 405 (12), 404 (55), 354 (7), 285 (23), 229(52), 183(22).

(262i) получают в виде белого стеклоподобного твердого вещества (76%): т.пл. 85-9° С; [α ]

\binom{25}{D}

+66,4° (с 0,11, СН₂Сl₂); IR (KBr) 1732, 1668, 1607, 1502, 1440, 1312, 1295, 1258, 1176, 1157, 1025; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 8,25 (1H, s), 7,77 (2H, m), 6,90 (2H, m), 5,11-5,07 (1H, m), 4,55-4,48 (1H, m), 4,01-3,91 (2H, m), 3,86-3,78 (1H, m), 3,85 (3H, s), 2,98 (1H, m), 2,46-2,40 (1H, m), 2,26-2,20 (1H, m), 2,05-20 1,80 (1H, m), 1,70-1,64 (2H, m), 1,48 (9Н, s).

(262j) получают в виде белого кристаллического твердого вещества (79%): т.пл. 182-3° С (разлож.); [α ]

\binom{22}{D}

+92,1° (с 0,4, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3283, 1732, 1684, 1448, 1430, 1404, 1369, 1338, 1306, 1285, 1242, 1169, 1091, 692; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,89 (2H, d, J=7,4), 7,76 (1H, s), 7,64-7,49 (3H, m), 4,83 (1H, m), 4,35 (1H, brd, J=13,0), 4,00 (1H, 5 m), 3,74-3,63 (2H, m), 2,39-2,26 (2H, m), 2,06 (1H, m), 1,50-1,41 (10Н, m). Аналитически рассчитано для C₁₉H₂₆SN₄O₆: С, 52,04; Н, 5,98; N, 12,78. Обнаружено: С, 52,11; Н, 5,95; N, 12,71. МС (ES⁺) 437 (М⁺ - 1, 100%).

(262k) (83%) получают: [α ]

\binom{22}{D}

+42,3° (с 0,11, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3287, 2997, 2935, 1735, 1681, 1606, 1501, 1296, 1248, 1173, 1155. ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 9,23 (1Н, s), 7,73 (2Н, d), 7,38 (5Н, m), 6,85 (2Н, d), 5,08 (1Н, m), 5,02 (2Н, s), 4,48 (1Н, bd), 4,15-3,65 (3H, m), 2,96 (1Н, m), 2,45-2,10 (2Н, m), 1,88 (1Н, m), 1,63 (2Н, mn), 1,48 (9Н, s), MC (ES⁺) 509 (M⁺ + 1).

Соединения 263a-k синтезируют с помощью способов, использующихся для получения 212b-f.

(263а) 348 мг (94%) получают в виде белого пенистого твердого вещества: т.пл. [α ]

\binom{21}{D}

+171° (с 0,056, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3426, 3233, 2953, 1734, 1663, 1481, 1415, 1340, 1214, 1167, 1132, 1075, 668; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 8,44 (1Н, s), 8,00-7,60 (7Н, m), 4,85-4,83 (1Н, m), 4,25-4,00 (1Н, m), 4,07-3,90 (1Н, m), 3,70-3,46 (2Н, m), 2,38-2,30 (1Н, m), 2,12-2,01 (1Н, m), 1,91-1,83 (1Н, m), 1,46-1,26 (1Н. m), 1,13-1,06 (1Н, m), 0,90-0,77 (1Н, m), MC (ES⁺) 431.

(263b). 200 мг (100%) получают в виде твердого вещества белого цвета: т.пл. 155° С; [α ]

\binom{20}{D}

+13° (с 0,07, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3431, 2935, 1734, 1663, 1531, 1435, 1292, 1177; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 9,73 (1Н, bs), 7,73-7,27 (5Н, m), 5,35-5,25 (1Н, m), 4,56-4,48 (1Н, m), 4,05-3,65 (3H, m), 3,12-3,00 (1Н, m), 2,50-2,45 (1Н, m), 2,30-2,20 (1Н, m), 2,10-2,00 (1Н, m), 1,75-1,61 (2Н, m), MS (ES⁺) 401.

(263с) 216 мг, (100+%) получают в виде бесцветной пены: [α ]

\binom{23}{D}

32,5° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3326, 1730, 1661, 1610, 1555, 1495, 1431, 1314, 1288, 1217, 1175, 1161. ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,87 (1Н, s), 7,58 (1Н, s), 7,19 (2Н, m), 6,82 (1Н, m), 6,62 (1Н, m), 5,21 (1Н, m), 4,55 (1Н, m), 3,76 (3H, s), 4,0-3,65 (4Н, m), 2,85 (1Н, m), 2,35 (2Н, m), 1,75 (1Н, m), 1,71 (2Н, m).

(263d) (100+%) получают в виде бесцветной пены: [α ]

\binom{24}{D}

+11,7° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3394, 3325, 1666, 1603, 1543, 1490, 1463, 1438, 1329, 1311, 1292, 1249, 1214, 1176, 1119, 1024, 752; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 8,15 (1Н, m), 7,97 (2Н, m), 7,15-6,84 (3H, m), 5,29 (1Н, m), 4,62 (1Н, m), 4,04-3,65 (4Н, m), 3,89 (3H, s), 2,92 (1Н, m), 2,50 (1Н, m), 2,30 (1Н, m), 2,10-l,75 (2H, m).

(263е) получают в виде белого пенистого твердого вещества (117 мг, 98%): т.пл. 109-14° С; [α ]

\binom{24}{D}

+82,6° (с 0,06, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3700-2250 (br), 3437, 3274, 2959, 1733. 1664, 1481, 1437, 1310, 1177; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,99 (1Н, s), 7,40-7,15 (5Н, m), 5,15-5,10 (1Н, m) , 5,25-4,70 (1Н, bs), 4,50-4,35 (1Н, m), 3,95-3,50 (3H, m), 3,61 (2Н, s), 10 2,93-2,78 (1Н, m), 2,40-2,20 (2Н, m), 2,10-1,80 (1Н, m), 1,80-1,60 (2Н, m). Аналитически рассчитано для C₁₇H₂₀N₄O₅· 2H₂O: С, 53,96; Н, 5,86; N, 14,81. Обнаружено: С, 54,12; Н, 5,50; N. 14,68. МС (ES⁺) 360 (М⁺, 21%), 359 (М⁺- 1, 100), 196 (14), 182 (14), 111 (7).

(263f) получают в виде белого пенистого твердого вещества (199 мг, 92%): т.пл. 149-52° С; [α ]

\binom{24}{D}

+92,0° (с 0,01, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2300 (br), 3319, 2956, 1726, 1664, 1600, 1548, 1500, 1444, 1313, 1238, 755; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,90 (1Н, s), 8,24 (1Н, s), 7,42 (2Н, d), 7,30-7,20 (2Н, m), 7,00-5,90 (1Н, m), 4,98-4,92 (1Н, m), 4,32-4,22 (1Н, m), 3,80-3,55 (3H, m), 2,85-2,70 (1Н, m), 2,30-2,20 (1Н, m), 2,20-2,00 (1Н, m), 1,90-1,35 (3H, m).

Аналитически рассчитано для С₁₆Н₁₉N₅O₅· 0,75Н₂O: С, 51,26; Н, 5,51; N, 18,68. Обнаружено: С, 51,11; Н, 5,23; N, 18,42. МС (ES⁺); 361 (М⁺, 20%), 360 (M⁺ - 1, 100), 241 (11), 240 (89), 196 (15), 175 (29), 111(12).

(263g) получают в виде твердого вещества белого цвета (259 мг, 92%): т.пл. 248-51° С; [α ]

\binom{24}{D}

+94,0° (с 0,01, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2300 (br) 3341, 2956, 1738, 1668, 1651, 1529, 1425, 1311, 1259, 751; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 13,29 (1H, bs), 11,72 (1Н, s), 10,64 (1Н, s), 7,65 (1Н, d), 7,45 (1Н, d), 7,26-7,15 (1Н, m), 7,17 (1Н, s), 7,10-7,00 (1Н, m), 5,05-4,95 (1Н, m), 4,40-4,25 (1Н, m), 3,90-3,50 (3H, m), 2,88-2,75 (1Н, m), 2,38-2,20 (1Н, m), 2,20-2,00 (1Н, m), 1,90-1,35 (3Н). Аналитически рассчитано для C₁₈H₁₉N₅O₅· 0,5H₂O: С, 53,59; Н, 5,25; N, 17,35. Обнаружено: С, 53,66; Н, 4,88; N, 17,11. MC (ES⁺) 385 (М⁺, 23%). 384 (М⁺ - 1, 100), 298 (6), 253 (8), 227 (10), 199 (23), 196 (10), 173 (9), 126 (21).

(263h) получают в виде твердого вещества белого цвета (282 мг, 99%): т.пл. 210-5° С; [α ]

\binom{24}{D}

+74,5° (с 0,01, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2300 (br) 3444, 3316, 2960, 1664, 1599, 1531, 1439, 1301, 1184; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 13,30 (1Н, bs), 10,50 (1Н, 3), 10,25 (1Н, s), 7,80 (2Н, d), 7,68 (2Н, d), 5,00-4,90 (1Н, m), 4,35-4,25 (1Н, m), 3,90-3,40 (3H, m), 2,88-2,70 (1Н, m), 2,35-2,25 (1Н, m), 2,25-1,95 (1Н, m), 2,08 (3H, s), 1,95-1,35 (3H, m), MC (ES⁺) 403 (М⁺, 10%), 402 (M⁺- 1, 100), 358 (10), 247 (10), 227 (16), 219 (51), 198 (12), 184 (17).

(263i) получают в виде белого стеклоподобного твердого вещества (приблиз. 100%), используя без очистки: ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 9,23 (1Н, s), 7,72 (2Н, d, J=8,8), 6,81 (2Н, d, J=8,9), 5,22 (1H, m), 4,51 (1H, m), 3,97-3,72 (2H, m), 3,81 (3H, s), 3,03 (1H, m), 2,51-2,46 (1H, m), 2,31-2,25 (1H, m), 2,03 (1H, m), 1,72 (2H, m).

(263j) получают в виде твердого вещества белого цвета (100%): т.пл. 73-83° С (разлож.); [α ]

\binom{22}{D}

+104,7° (с 0,3, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3600-2500 (br), 3208, 1734, 1666, 1481, 1448, 1416, 1338, 1311, 1214, 1171, 1091, 729, 689; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7,87 (3H, m), 7,70-7,50 (3H, m), 7,16 (1Н, brs), 4,99 (1Н, m), 4,37 (1Н, brd, J=12,8), 3,92 (1Н, m), 3,67 (2Н, m), 2,36 (2Н, m), 2,13 (1Н, brd, J=12,2), 1,56 (3H, m). Аналитически рассчитано для C₁₅H₁₈SN₄O₆· 0,25CF₃CO₂H: С, 45,31; Н, 4,48, N, 13,64. Обнаружено: С, 45,48; Н, 4,71; N, 13,43. MC (ES⁺) 383 (MH⁺, 100%). Точная масса, рассчитанная для C₁₅H₁₉SN₄O₆ (MH⁺), составляет: 383,1025. Обнаружено: 383,1007.

(263k) (100%) получают: т.пл. 130-142° С; IR (KBr) 3272, 2945, 1738, 1650, 1611, 1501, 1445, 1309, 1255, 1171; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 9,35 (1Н, s), 7,74 (2Н, d), 7,38 (5Н, m), 6,85 (2Н, d), 5,40 (1Н, bs), 5,19 (1Н, s), 5,02 (2Н, s), 4,49 (1Н, d), 3,92 (2Н, m), 3,68 (1Н, m), 2,99 b (1Н, bs), 2,43 (1Н, bs), 2,22 (1Н, bs), 1,99 (1Н, bs), 1,68 (2Н, bs).

(525l) синтезируют по способу, использующемуся для получения 211, с образованием белого кристаллического твердого вещества (3,35 г, 83%): т.пл. 214-5° С; [α ]

\binom{20}{D}

+75,2° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3272, 2955, 1747, 1664, 1610, 1485, 1443, 1265, 1040; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 8,66 (1Н, s), 7,32 (1H, dd), 7,23 (1Н, d), 6,76 (1Н, d), 6,02 (2Н, s), 5,20 (1Н, dd), 4,55-4,45 (1Н, m), 4,03-3,70 (3H, m), 3,78 (3H, s), 3,05-2,88 (1Н, m), 2,47-2,35 (1Н, m), 2,35-2,20 (1Н, m), 2,10-1,90 (1H, m), 1,85-1,50 (2H, m). Аналитически рассчитано для C₁₈H₂₀N₄O₇· 0,5H₂O: С, 52,87; Н, 5,06; N, 13,70. Обнаружено: С, 52,84; Н, 5,00; N, 13,66. MC (ES⁺) 406 (M⁺ + 2, 20%), 405 (M⁺ + 1, 100), 391 (10), 162 (6), 148 (3), 105 (2).

(263l). Суспензию 5251 (3,32 г, 8,2 ммолей) в тетрагидрофуране (60 мл) обрабатывают раствором LiOH× H₂O (0,69 г, 16,4 ммолей, 2,0 экв.) в воде (20 мл). Полученную смесь перемешивают 1 час, концентрируют и остаток растворяют в воде (50 мл). Раствор подкисляют с помощью 2М NaHSO₄ и продукт экстрагируют ЕtOАс (порциями по 100 мл и 50 мл). Объединенные растворы промывают нас. солевым раствором (2× 50 мл), высушивают (MgSO₄) и концентрируют с образованием 263l в виде белого кристаллического твердого вещества (2,87 г, 90%): т.пл. 154-8° С; [α ]

\binom{20}{D}

+85,6° (с 0,01, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2300 (br) 3248, 2942, 1733, 1681, 1658, 1648, 1536, 1486, 1440, 1297, 1255, 1037; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 13,23 (1H, bs). 10,45 (1H, s), 7,45 (1H, d), 7,35 (1H, s), 7,03 (1H, d), 6,12 (2H, s), 5,00-4,93 (1H, m), 4,35-4,25 (1H, m), 3,90-3,40 (3H, m), 2,95-2,70 (1H, m), 2,40-2,25 (1H, m), 2,15-2,00 (1H, m), 1,91-1,40 (3H, m). Аналитически рассчитано для C₁₇H₁₉N₄O₇· 0,8 H₂O: С, 50,45; Н, 4,88; N, 13,84. Обнаружено: С, 50,80; Н, 4,95; N, 13,36. MC (ES⁺) 390 (М⁺, 19%), 389 (M⁺ - 1, 100), 345 (9), 204 (31), 182 (27), 111 (12).

соединение	R¹
264а 265а
264с 265с
264d 265d
264е 1095
264f 265f
264g 1075
264h 1018
264i 1052
264j 1027

264k 1056
264l 1015

(264а) синтезируют тем же способом, что и соединение 213е с образованием твердого вещества белого цвета (240 мг, 82%): IR (KBr) 3380, 3066, 2947, 1789, 1750,1691, 1454, 1417, 1368, 1298, 1262, 1235, 1193, 1118, 756, 696; ¹H ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,59 (1Н, d, J=6,8), 8,48 (1H, s), 8,25-8,09 (3H, m), 7,85-7,75 (3H, m), 7,36 (5Н, m), 5,39 (1Н, m), 4,21 (2Н, АВ, J=14,2), 4,53-4,49 (1Н, m), 4,25-4,10 (2Н, m), 3,65-3,44 (3H, m), 3,13-2,99 (1Н, m), 2,43-2,16 (1Н, m), 1,72-0,72 (7Н, m). Аналитически рассчитано для С₃₀Н₃₁N₅О₈S: 57,96; Н, 5,03; N, 11,27. Обнаружено: С, 57,28; Н, 5,14; N, 10,48. MC (ES⁺) 622.

(264с) получают тем же способом, что и соединение 213е, (55%) в виде бесцветной пены: т.пл. 135-40° С; [α ]

\binom{22}{D}

+51,6° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3314, 1790, 1664, 1608, 1543, 1496, 1455, 1428, 1325, 1287, 1250, 1218, 1160, 1118; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 8,00 (1H, d, J=7,l), 7,66 (1Н, s), 7,55 (1Н, s), 7,28 (5Н, m), 7,14 (2Н, m), 6,87 (1Н, d, J=7,4), 6,59 (1Н, m), 5,42 (1Н, s), 4,66 (5Н, 5 m), 3,90-3,65 (4Н, m), 3,73 (3H, s), 2,98 (2Н, m), 2,38 (2Н, m), 2,01-1,65 (3H, m).

(264d) получают тем же способом, что и соединение 213е, (72%) в виде бесцветной пены: [α ]

\binom{22}{D}

+21,4° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3302, 1791, 1689, 1678, 1664, 1602, 1536, 1489, 1461, 1437, 1420, 1249, 1119, 1023, 942, 751; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 8,07 (1Н, d, J=7,7), 7,82 (1Н, s), 7,68 (1Н, d, J=6,7), 7,49 (1Н, s), 7,34 (5Н, m), 6,96 (3H, m), 5,47 (1Н, s), 4,82 (2Н, d + m, J=11,5), 4,63 (1Н, d, J=1,5), 4,49 (2Н, m), 3,85 (4Н, s + m), 3,68 (2Н, 15 m), 3,01 (2Н, m), 2,46 (2Н, m), 1,95 (3H, m), 1,57 (1Н, m).

(264е) синтезируют по способу, использующемуся для получения 213е, с образованием смеси диастереомеров (соотношение изомеров син:анти 9:1) в виде белого стеклоподобного твердого вещества (128 мг, 78%): т.пл. 103-8° С; IR (KBr) 3419, 3302, 1793, 1664, 1535, 1421, 1327, 1256, 1123, 973; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 10,20 (0,9H, s), 9,35 (0.1Н, s), 8,74 (0,1H, d) , 8,49 (0,9H, d), 7,36-7,15 (10Н, m), 5,67 (0.9Н, d), 5,44 (0,1H, s), 4,85-4,75 (1Н, m), 4,74-4,60 (1H, m), 4,77 и 4,63 (2Н, dd), 4,30-4,10 (1H, m), 3,80-3,40 (3H, m), 3,43 (2Н, s), 3,10-2,40 (3H, m), 2,25-2,15 (1H, m), 2,00-1,35 (4Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₈H₃₁N₅O₇· 0,5H₂O: С, 60,2; Н, 5,77; N, 12,53. Обнаружено: С, 60,38; Н, 5,83; N, 12,13. МС (ES⁺) 551 (M⁺ + 2, 33%), 550 (M⁺ + 1, 100), 480 (7), 343 (8), 279 (4).

(264f) получают тем же способом, что и соединение 213е с образованием чистого син-изомера в виде белого пенистого твердого вещества (225 мг, 82%): т.пл. 130-5° С; [α ]

\binom{24}{D}

+10,8° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3316, 1791, 1688, 1676, 1664, 1601, 1536, 1445, 1314, 1242, 973; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 8,84 (1H, s), 8,49 (1H, d), 8,19 (1H, s), 7,45-7,18 (9Н, m), 7,00-6,90 (1H, m), 5,68 (1H, d), 4,90-4,81 (1H, m), 4,75-4,60 (1H, m), 4,78 и 4,63 (2Н, dd), 4,30-4,20 (1H, m), 3,75-3,55 (3H, m), 2,85-2,55 (3H, m), 2,25-2,15 (1H, m), 2,00-1,35 (4Н, m). Аналитически рассчитано для С₂₇Н₃₀N₆O₇· 0,5Н₂O: С, 57,95; Н, 5,58; N, 15,02. Обнаружено: С, 58,12; Н, 5,64; N, 14,81. MC (ES⁺) 552 (М⁺ 2, 30%), 551 (М⁺ + 1, 100), 362 (19), 299 (10), 279 (4).

(264g) получают тем же способом, что и соединение 213е, с образованием чистого анти-изомера в виде твердого вещества белого цвета (284 мг, 80%): т.пл. 148-53° С; [α ]

\binom{24}{D}

+72,0° (с 0,1, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3404, 3295, 1789, 1660, 1536, 1421, 1310, 1260, 1122, 749; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 11,72 (1H, s), 10,58 (1H, s), 8,73 (1H, d), 7,65 (1H, d), 7,58-7,27 (6Н, m), 7,27-7,10 (1H, m), 7,17 (1H, s), 7,10-7,00 5 (1H, m), 5,46 (1H, s), 4,90-4,85 (1H, m), 4,77 и 4,68 (2Н, dd), 4,35-4,25 (2Н, m), 3,95-3,55 (3H, m), 3,09 (1H, dd), 2,95-2,80 (1H, m), 2,47-2,25 (2Н, m), 2,10-1,35 (4Н, m), MC (ES⁺) 574 (М⁺ 35%), 573 (М⁺ 1, 100), 384 (16), 383 (69), 341 (23), 327 (12), 267 (13), 200 (22).

(264h) получают тем же способом, что и соединение 213е с образованием смеси диастереомеров (соотношение изомеров син:анти 9:1) в виде твердого вещества белого цвета (276 мг, 70%): т.пл. 147-52° С; IR (KBr) 3444, 3304, 1793, 1665, 1602, 1531, 15 1505, 1423, 1294, 1264, 1181, 1123, 966; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 10,41 (1Н, s), 10,22 (1Н, s), 8,71 (0,1H, d), 8,48 (0,9H, d), 7,78 (2Н, d); 7,67 (2H, d), 7,35-7,30 (5Н, m), 5,68 (0,9H, d), 5,45 (0,1H, s), 4,88-4,80 (1Н, m), 3,75-4,60 (1H, m), 4,77 и 4,63 (2H, dd), 4,30-20 4,20 (1H, m), 3,90-3,50 (3H, m), 3,10-2,50 (3H, m), 2,35-2,20 (1H, m), 2,07 (3H, s), 2,05-1,35 (4Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₉H₃₂N₆O₈· 1H₂O: С, 57,04; Н, 5,61; N, 13,76. Обнаружено: С, 56,79; Н, 5,50; N, 13,53. MC (ES⁺) 594 (M⁺ + 2, 34%), 593 (M⁺ + 1, 100), 387 (8), 386 (38), 358 (8), 162 (19).

(264i) получают по способу, описанному для получения соединения 213е с образованием твердого вещества белого цвета (70%): т.пл. 116-118° С; IR (KBr) 3315, 2951, 1793, 1664, 1607, 1502, 1258, 1177; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8,07 (1H, s), 7,77 (2H, d, J=8,6), 7,35 (5Н, m), 6,94 (2H, d, J=8,5), 6,74 (1H), 4,89 (1H, d, J=11,1), 4,74 (1H, m), 4,60 (1H, d, J=11,0), 4,48, 4,41 (1H, 2m), 3,86 (3H, s), 3,79, 3,71-3,53 (3H, 2m), 2,87 (2H, m), 2,44 (1H, m), 2,18, 1,91, 1,68 (5Н, 3m).

(264j) синтезируют тем же способом, что и соединение 213е с образованием пены (88%): [α ]

\binom{24}{D}

+74,2° (с 0,36, CH₂Cl₂); IR (KBr) 3332, 3235, 1793, 1664, 1537, 1448, 1416, 1337, 1169, 118, 1092, 940, 690; ¹H ЯРМ (CDCl₃) δ 7,99 (1H, s), 7,88 (2H, d, J=6,8), 7,64-7,48 (3H, m), 7,34 (5Н, s), 7,13 (1H, d, J=6,9), 5,39 (1H, s), 4,81 (2H, m), 4,62 (1H, d, J=11,5), 4,48 (1H, m), 4,33 (1H, m), 3,85 (1H, m), 3,59 (2H, m), 3,03 (1H, dd, J=7,6, 18,2), 2,49-2,28 (3H, m), 1,94-1,40 (4Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₆H₂₉SN₅O₈: С, 54,63; Н, 5,11; N, 12,25. Обнаружено: С, 54,42; Н, 5,28; N, 11,62. MC (ES⁺) 572 (МН⁺, 100%). Точная масса, рассчитанная для С₂₆Н₃₀SN₅O₈ (MH⁺): 572,1315. Обнаружено: 572,1802.

(264k) получают по способу, использующемуся для получения соединения 213е (96%): IR (PBr) 3294, 2946, 1793, 1658, 1606, 1535, 1501, 1248, 1174, 1119. ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 8,91 (1H, s), 7,85 (3H, m), 7,4 (10Н, m), 7,02 (2Н, d), 5,35 (1H, s), 5,10 5 (2Н, s), 4,8-4,3 (5Н, m), 4,00 (1H, bs), 3,78 (2Н, m), 2,90 (2Н, m), 2,5-1,5 (6Н, m).

(264l) получают тем же способом, что и соединение 213е, с образованием смеси диастереомеров (соотношение изомеров син:анти 1:1) в виде твердого вещества белого цвета (1,72 г, 71%): т.пл. 148-60° С; IR (KBr) 3314, 1780, 1677, 1658, 1651, 1550, 1485, 1439, 1258, 1132, 1038, 943; ¹H ЯМР (D₆-DMSO) δ 10,39 (1H, s), 8,71 (0,5Н, d), 8,49 (0,5Н, d), 7,44 (1H, d), 7,42-7,30 (6Н, m), 7,03 (1H, d), 6,12 (2Н, s), 5,68 (0,5H, d), 5,45 (0,5H, s), 4,90-4,82 (1H, m), 15 4,82-4,58 (2,5H, m), 4,40-4,10 (1,5Н, m), 3,90-3,65 (2Н, m), 3,65-3,43 (1H, m), 3,09 (0,5Н, dd), 2,90-2,55 (1,5H, m), 2,45-2,10 (2Н, m), 2,10-1,35 (4Н, m). Аналитически рассчитано для С₂₈Н₃₉Н₅O₉· 0,2Н₂O: С, 57,67; Н, 5,08; N, 12,01. Обнаружено: С, 58,01; Н, 5,33; N, 11,51. MC (ES⁺) 581 (M⁺ + 2, 33%), 580 (М⁺, 100), 374 (9), 373 (48), 345 (12), 261 (4), 239 (7), 149 (9).

(265а) получают тем же способом, что и соединение 265 с образованием твердого вещества белого цвета (37 мг, 17%): т.пл. 126-30° С (разлож.); [α ]

\binom{20}{D}

+30° (с 0,05, МеОН); IR (KBr) 3371, 2935, 1785, 1663, 1538, 1418, 1339, 1164, 669; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 8,44 (1Н, s), 8,06-7,50 (7Н, m), 7,22 (1Н, d, J=8,4), 4,58-4,57 (1H, m), 4,46-4,42 5 (1H, m), 4,16-4,09 (2Н, m), 3,85-3,50 (3H, m), 2,84-2,78 (1H, m), 2,64-2,51 (1H, m), 2,44-2,15 (2Н, m), 1,81-0,89 (4Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₃H₂₅N₅O₈S· H₂O: С, 50,27; Н, 4,95; N, 12,74. Обнаружено: С, 50,33; Н, 5,04; N, 12,60. МС (ES⁺) 530.

(265с) получают тем же способом, что и соединение 265, (90%), в виде бесцветного твердого вещества: т.пл. ~150° С (разлож.); [α ]

\binom{23}{D}

+94,8° (с 0,1, 20% МеОН/СН₂Cl₂); IR (KBr) 3330, 1780, 1660, 1610, 1550, 1495, 1428, 1326, 1287, 1251, 1223, 1160; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,16 (2Н, m), 6,89 (1H, d, J=15 7,8), 4,58 (1H, m), 4,37 (2Н, m), 3,76 (6Н, s + m), 2,95 (1H, m), 2,67 (1H, m), 2,33 (1H, m), 2,20-1,85 (3H, m), 1,66 (1H, m).

(265d) получают тем же способом, что и соединение 265, (85%) в виде бесцветного твердого вещества: т.пл. ~176-85° С; [α ]

\binom{23}{D}

+11,0° (с 0,1, МеОН); IR (KBr) 3392, 3328, 1784w, 1665, 1603, 1537, 1490, 1462, 1437, 1337, 1290, 1290, 1217, 1177, 1119, 1023; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 8,02 (2H,m), 6,95 (4H,m), 5,05 (1H, m), 4,60 (2Н, m), 3,92 (4Н, s + m), 3,00 (2Н, m), 2,68 (1H, m), 2,39 (1H, m), 2,00 (4Н, m), 1,69 (1H, m).

(1095) получают тем же способом, что и соединение 265, с образованием твердого вещества белого цвета (84 мг, 90%): т.пл. 180-6° С; [α ]

\binom{22}{D}

+22,3° (с 0,065, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2300 (br), 3287, 1664, 1536, 1425,1261, 1181; ¹Н ЯМР (СD₃OD) δ 7,35-7,20 (5Н, m), 5,00-4,90 (1H, m), 4,60-4,50 (1H, m), 4,50-4,10 (2Н, m), 3,90-3,50 (3H, m), 3,54 (2Н, s), 3,00-2,80 (1H, m), 2,80-2,40 (2Н, m), 2,35-2,20 (1H, m), 2,20-1,50 (4H, m), MC (ES⁺) 459 (М+ 24%), 458 (М⁺ - 1, 100), 358 (27), 175 (9), 149 (7), 137 (12). Точная масса, рассчитанная для С₂₁H₂₆N₅O₇ (MH⁺), составляет: 460,1832. Обнаружено: 460,1840.

(265f) получают тем же способом, что и соединение 265 с образованием белого пенистого твердого вещества (130 мг, 88%): т.пл. 157-62° С; [α ]

\binom{24}{D}

+41,7° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2300 (br), 3325, 1782, 1663, 1547, 1443, 1315, 1242, 1181; ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 7,40 (2Н, dd), 7,35-7,20 (2Н, m), 7,06-6,95 (1H, m), 5,05-4,95 (1H, m), 4,64-4,54 (1H, m), 4,50-4,35 (1H, m), 4,35-4,15 (1H, m), 3,90-3,69 (3H, m), 3,00-2,85 (1H, m), 2,80-2,45 (3H, m), 3,40-1,50 (4H, m), MC (ES⁺) 460 (М⁺, 24%), 459 (M⁺ - 1, 100), 341 (9), 340 (54), 296 (6), 239 (9).

(1075) получают тем же способом, что и соединение 265, с образованием твердого вещества белого цвета (184 мг, 83%): т.пл. 210-5° С; [α ]

\binom{24}{D}

+43,9° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2300 (br), 3309, 1660, 1537, 1423, 1311, 1262, 1184; ¹Н ЯМР (СD₃OD) δ 7,61 (1H, d), 7,45 (1H, d), 7,28-7,15 (1H, m), 7,15-7,00 (1H, m), 7,13 (1H, s), 5,12-4,96 (1H, m), 4,62-4,55 (1H, m), 4,50-4,25 (2Н, m), 4,00-3,69 (3H, m), 3,05-2,90 (1H, m), 2,80-2,30 (3H, m), 2,25-1,50 (4H, m), MC (ES⁺) 484 (М+, 26%), 483 (М⁺ - 1, 100), 383 (25), 245 (12), 208 (11), 200 (21), 174 (31), 137 (18).

(1018) получают тем же способом, что и соединение 265 с образованием твердого вещества белого цвета (177 мг, 82%): т.пл. 235-40° С; [α ]

\binom{23}{D}

+27,3° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2300 (br), 3311, 2957, 1662, 1599, 1531, 1318, 1266, 1182; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,83 (2Н, d), 7,69 (2Н, d), 5,10-4,95 (1H, m), 4,64-4,55 (1H, m), 4,50-4,35 (1H, m), 4,32-4,22 (1H, m), 4,00-3,65 (3H, m), 3,05-2,90 (1H, m), 2,80-2,30 (3H, m), 2,15 (3H, s), 2,15-1,50 (4Н, m). Аналитически рассчитано для C₂₄H₃₀N₄O₁₀· 2H₂O: 49,90; Н, 5,52; N, 15,87. Обнаружено: С, 50,21; Н, 5,41; N, 15,49. MC (ES⁺) 502 (М+, 28%), 501 (M⁺ - 1, 100), 401 (8), 218 (4), 119 (2), 118 (5), 113 (16).

(1052) синтезируют по способу, использующемуся для получения 265, с образованием твердого вещества белого цвета (0,194 г, 100%): т.пл. 138-142° С; [α ]

\binom{20}{D}

+36,3° (с 0,19, СН₃ОН); IR (KBr) 3434-2962, 1782, 1660, 1607, 1537, 1504, 1441, 1424, 1313, 1293, 1258, 1177; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,11 (2Н, d, J=8,8), 6,90 (2Н, d, J=8,9), 4,48 (1Н, m), 4,34, 4,28 (1Н, 2m), 4,15 (1Н, m), 3,75 (3H, s), 3,75, 3,70 (3H, m), 2,88, 2,49, 2,28, 2,23, 2,00, 1,86, 1,79, 1,58 (8Н, m).

(1027) синтезируют по способу, подобному способу получения соединения 265, с образованием белой пены (88%): [α ]

\binom{24}{D}

+22,6° (с 0,17, МеОН); IR (KBr) 3349, 1789, 1663, 1537, 1448, 1337, 1169, 1092, 690; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,82 (2Н, d, J=7,8), 7,57 (3H, m), 4,74 (1Н, m), 4,47 (1Н, m), 4,24-4,10 (2Н, m), 3,72-3,47 (4Н, m), 2,62-2,48 (3H, m), 2,20 (1Н, m), 1,94-1,35 (3H, m), MC (ES⁺) 480 (М⁺ - 1, 100%). Точная масса, рассчитанная для C₁₉H₂₄SN₅O₈ (MН⁺), составляет: 482,1346. Обнаружено: 482,1325.

(1056) получают по способу, использующемуся для получения соединения 265 (95%): т.пл. >300° С; IR (KBr) 3392, 1660, 1610, 1507, 1442, 1280, 1171, 1149, 1133. ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,74 (2Н, d J=8,7), 6,84 (2Н, d J=8,7), 4,58 (1Н, m), 4,41 (1Н, bd, J=12,6), 4,28 (1Н, m), 3,85 (3H, m), 2,98 (1Н, m), 2,8-2,3 (3H, m), 2,3-1,6 (4H,m).

(1015) получают тем же способом, что и соединение 265, с образованием твердого вещества белого цвета (142 мг, 58%): т.пл. 170-5° С; [α ]

\binom{23}{D}

+32,7° (с 0,1, СН₃ОН); IR (KBr) 3700-2500 (br), 3325, 2969, 1784, 1662, 1485, 1440, 1292, 1258, 1037; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,45 (1Н, dd), 7,32 (1Н, d), 6,90 (1Н, d), 6,05 (2Н, s), 5,10-4,90 (1Н, m), 4,62-4,54 (1Н, m), 4,45-4,35 (1Н, m), 4,33-4,22 (1Н, m), 3,95-3,65 (3H, m), 3,05-2,90 (1Н, m), 2,80-2,30 (3H, m), 2,20-1,50 (4Н, m).

(526) получают тем же способом, что и соединение 502, с образованием стекловидного твердого вещества: [α ]

\binom{20}{D}

+34° (с 0,13, СН₂Сl₂); IR (KBr) 3437, 2929, 1670, 1530, 1428, 1288, 1156; ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 10,0 (1Н, bs), 9,74 (1Н, bs), 7,93 (1Н, s), 7,80-7,60 (2Н, m), 7,40-7,18 (3H, m), 6,15-5,30 (2Н, bs), 5,00-4,85 (2Н, m), 4,50-4,25 (1Н, m), 3,95-3,75 (3H, m), 3,12-2,78 (2Н, m), 2,73-1,60 (7Н, m), 1,36 (9Н, s). Аналитически рассчитано для C₂₇H₃₄N₈O₇S: С, 52,76; Н, 5,58; N, 18,23. Обнаружено: С, 52,25; Н, 5,74; N, 16,30. MC (ES⁺) 615.

(1053) получают тем же способом, что и соединение 214, с образованием твердого вещества белого цвета (106 мг, 73[α ]

\binom{20}{D}

+22° (с 0,10, МеОН); IR (KBr) 3428, 2944, 1733, 1652, 1532, 1433, 1337, 1288, 1186; ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 7,95 (1H, s), 7,90-7,85 (2Н, m), 7,43-7,35 (2Н, m), 4,98 (1Н, m), 4,65-4,52 (1Н, m), 4,40-4,20 (2Н, m), 3,85-3,70 (3H, m), 3,30-3,25 (3H, m), 3,03-2,85 (1Н, m), 2,70-2,31 (3H, m), 2,10-1,55 (4Н, m). MC (ES⁺) 500 (в виде метилацеталя альдегида).

(528) получают тем же способом, что и соединение 213е с образованием смеси диастереомеров (соотношение изомеров син-.анти 1:1) в виде кремоподобного белого пенистого твердого вещества (1,05 г, 58%): т.пл. 124-32° С; IR (KBr) 3312, 2979, 1790, 1664, 1610, 1532, 1485, 1285, 1120, 1037,932; ¹Н ЯМР (D₆-DMSO) δ 10,39 (1Н, s), 8,71 (0,5H, d), 8,43 (0,5H, d), 7,15 (1Н, d), 7,36 (1Н, s), 7,04 (1Н, d), 6,12 (2H, s), 5 5,58 (0,5H, d), 5,34 (0,5H, s), 4,95-4,85 (1Н, m), 4,70-4,52 (0,5H, m), 4,35-4,10 (1,5H, m), 3,95-3,50 (5Н, m), 3,03 (0,5H, dd), 2,90-2,55 (1,5H, m), 2,46-2,20 (2Н, m), 2,10-2,40 (4Н, m), 1,16-1,13 (3H, 2xt). Аналитически рассчитано для С₂₃Н₂₇N₅O₉· 0,6Н₂O: С, 52,29; Н, 5,38; N, 13,26. Обнаружено: С, 52,53; Н, 5,35; N, 12,78. МС (ES⁺ 519) (M⁺ + 2, 27%), 518 (М⁺ + 1, 100), 472 (7), 374 (12), 373 (53), 345 (14), 149 (12).

Пример 31

Получение соединений 640, 642, 645, 650, 653, 655, 656, 662, 668, 669, 670, 671, 677, 678, 681, 682, 683, 684, 686, 688a, 688b, 6891, 689b, 690a, 690b, 691a, 691b, 695a, 695b, 695с, 692а, 692b, 693 и 694 описано ниже.

(638) синтезируют из 600а по споособам, использующимся для получения 602m из 600а с образованием 2,4 г соединения 638 в виде твердого вещества белого цвета.

(639). К раствору 638 (630 мг, 1,76 ммолей) и 2-нафтилметилбромида (428 мг, 1,94 ммолей) в CH₃CN добавляют К₂СО₃ (608 мг, 4,4 ммолей). Полученную смесь перемешивают при температуре окружающей среды. Через 18 часов реакционную смесь разбавляют CH₂Cl₂, промывают водой, затем нас. солевым раствором, высушивают над Nа₂SO₄ и концентрируют в вакууме. После флэш-хроматографии (SiO₂, от 0 до 20%, EtOAc/CH₂Cl₂) получают 450 мг соединения 639.

(640) синтезируют по способу, использующемуся для получения 605v из 602v, с образованием 205 мг соединения 640 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (СDСl₃) δ 2,4-2,55(m, 1Н), 2,65-2,8(m, 1H), 3,2(s, 3H), 3,72-3,78(m, 1H), 3,85-4,0(m, 2H), 4,22-4,28(d, 1H), 4,26-4,5 (m, 4H), 4,58-4,75 (m, 1H), 4,78-4,85 (m, 1H), 5,0-5,08 (t, 1H), 7,35-7,65 (m, 7H), 7,85-8,02 (m, 4H).

(642) синтезируют из 638 по способу, использующемуся для получения 605m с образованием 213 мг соединения 642, ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 2,5(n, 1H), 2,68 (ddd, 1H), 3,25(s, 2H) , 3,3(s, 3H), 3,78(m, 2H), 4,0(d, 1H), 4,3(m, 1H), 4,6(m, 2H), δ 4,85 (br, s, 2H), 7,08-7,22(m, 2H), 7,35(m, 1H), 7,4-7,65(m, 4H), 7,7(dd, 1H), 8,1 (dd, 1H).

(643). К суспензии N-ацетилглицина (200 мг, 1,7 ммолей) в CH₂Cl₂ (2,5 мл), содержащей DMF (0,005 мл), добавляют оксалилхлорид (0,450 мл, 5,1 ммолей). После перемешивания в течение 30 минут при температуре окружающей среды смесь концентрируют, получая 643 в виде неочищенного продукта.

(644) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 602d из 600b, используя 643, с образованием 112 мг соединения 644.

(645) синтезируют из 644 по способу, использующемуся для получения 605d из 602d, с образованием 43 мг соединения 645 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (СD₃ОD) δ 1,95(s, 3Н), 2,4(m, 1Н), 2,65 (m, 1H), 3,4 (s, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,05 (d, 1H), 4,3 (m, 1H), 4,4-4,6 (m, 2H), 5,0 (m, 1H), 7,4-7,7 (m, 6H), 7,85-8,0 (m, 2H).

(646) получают из N-Fmoc-саркозина по способу, использующемуся для получения 643, с образованием соединения 646 в виде неочищенного продукта.

(647) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для синтеза 602d из 600b, используя 646, с образованием 481 мг соединения 647.

(648) синтезируют из 647 по способу, использующемуся для получения 604d из 602d, с образованием 409 мг 648.

(649). Раствор 648 (409 мг, 0,465 ммолей) в смеси MeCN:Et₂NH (4:1, об./об.) перемешивают при температуре окружающей среды. Через 45 мин, реакционную смесь концентрируют в вакууме. После флэш-хроматографии (SiO₂, от 5% до 20% МеОН в СН₂Сl₂) получают 241 мг соединения 649.

(650) синтезируют из 649 по способу, использующемуся для получения 605d из 604 с образованием 179 мг соединения 650 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,4-2,6 (m, 2H), 2,7 (s, 3Н), 3,5 (q, 1H), 3,8 (m, 2H), 4,2-4,4 (m, 2H), 4,3-4,45 (m, 1H), 5,0-5,1 (m, 2H), 7,4-7,7 (m, 6H), 7,85-7,9 (m, 2H), 8,2 (m, 1H).

(652) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 602n из 600b, используя реагент, полученный в результате взаимодействия DMF с 3 эквивалентами оксалилхлорида в CH₂Cl₂ растворе, такой как R³X, с образованием 404 мг соединения 652.

(653) синтезируют из 652 по способу, использующемуся для получения 605d из 602d, с образованием 84 мг соединения 653 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (СD₃OD) δ 2,3(m, 1H), 2,55(dd, 1H), 3,75(br, s, 1H), 4,25-4,6(m 5H), 5,15(m, 1H), 7,2-7,45(m, 6H), 7,8-7,9(dd, 3H), 8,l(s, 1H), 8,2(m, 2H).

(654) синтезируют из 600b, используя способы, подобные используемым для получения 603d из 600b, с образованием 775 мг соединения 654.

(655) синтезируют из 654 по способу, использующемуся для получения 213е, с образованием 304 мг 655, ¹H ЯМР (СD₃ОD) δ 2,4 (d, 1H), 2,6-2,75 (m, 2H), 3,0 (m, 1H), 3,45 (m, 1H), 3,8 (с, 1H), 4,0 (t, 2H), 4,4(m, 2H), 4,5-4,55(m, 2H), 7,2-7,45 (m, 4H), 7,85 (s, 2H).

(656) синтезируют из 655 по способу, подобному используемому для получения 2002 из 2001, с образованием 136 мг соединения 656 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 1,85 (s, 3Н), 2,5 (m, 1H), 2,65 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 4,3 (m, 1H), 4,55 (m, 2H), 7,4-7,6 (m, 4H), 7,85 (s, 2H).

(657). К раствору бензилгликолята (6,0 г, 36,1 ммолей) в СН₂Сl₂ охлаждают в водяной бане со льдом, добавляют флуоренилметокси хлорформиат (14 г, 1,5 экв.), затем диизопропилэтиламин (9 мл, 1,5 экв.). Через 1 час реакционную смесь выливают в насыщенный водный раствор хлорида аммония и экстрагируют СН₂Сl₂, высушивают над Na₂SO₄, затем концентрируют в вакууме. Продукт перетирают с МеОН, получая 2,2 г соединения 657 как первый сбор твердого вещества белого цвета.

(658). К раствору соединения 657 (2,2 г, 5,93 ммолей) в тетрагидрофуране добавляют 5% Pd/C (220 мг). Полученную суспензию энергично перемешивают в атмосфере водорода. Через 90 мин реакционную смесь фильтруют через целит. Фильтрат выливают в насыщенный водный раствор NaHCO₃ и промывают дважды EtOAc. Затем водный слой подкисляют и продукт экстрагируют дважды СН₂Сl₂, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме с образованием 1,46 г (88%) соединения 658 в виде твердого вещества белого цвета.

(659) получают из 658 по способу, использующемуся для получения 643, с образованием соединения 659 в виде неочищенного продукта.

(660) синтезируют из 600b, используя 659, по способу, использующемуся для получения 604d из 600b с образованием 453 мг соединения 660.

(661). Раствор соединения 660 (423 мг) в смеси MeOH:Et₂NH (1:1, об./об.) перемешивают при температуре окружающей среды. Через 10 минут реакционную смесь концентрируют в вакууме до небольшого объема. Вызывают выпадение осадка путем добавления эфира, в результате получают 230 мг соединения 661.

(662) синтезируют из 661 по способу, использующемуся для получения 605d из 604, с образованием 37 мг соединения 662 в виде белого твердого вещества, ¹H ЯМР (СD₃ОD) δ 2,45(m, 1H), 2,7(m, 1H), 3,75(m, 1Н), 3,9(d, 1H), 4,15(d, 1H), 4,35(m, 1H), 4,5(t, 2Н), 4,7(dd, 1H), 7,4-7,6(m, 4Н), 7,85(s, 2H).

(663). К раствору бензилгликолята (46,91 г, 0,282 моля) и диизопропилэтиламина (74 мл, 0,423 моля) в СH₂Сl₂, охлажденному на водяной бане, добавляют раствор TIPSOTf (95 г, 0,31 моля) в СН₂Сl₂. Полученную смеь оставляют нагреваться до температуры окружающей среды, затем выливают в воду, промывают дважды 10% водным раствором NaHSO₄, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. После флэш-хроматографии (SiO₂, от 0 до 5% ЕtOАс в гексане) получают 71,6 г соединения 663.

(664). К раствору соединения 663 (0,4 г, 1,2 ммолей) в ЕtOАс добавляют 10% Pd/C (33 мг). Полученную суспензию перемешивают в атмосфере водорода. Через 15 часов реакционную смесь фильтруют через целит и фильтрат концентрируют в вакууме с образованием 0,29 г масла. К раствору этого масла в 1,4-диоксане добавляют NаНСО₃ (0,5 М, 2,4 мл). Полученный раствор концентрируют в вакууме из толуола, получая соединение 664 в виде воскообразного твердого вещества.

(665) синтезируют из 664 по способу, подобному использующемуся для получения 643, с образованием 665 в виде неочищенного продукта.

(666) синтезируют из 600b, используя 665, по способу, использующемуся для получения 604d из 600b, с образованием 131 мг соединения 666.

(667). К раствору соединения 666 (131 мг, 0,17 ммолей) в тетрагидрофуране, охлажденном в водяной бане со льдом, добавляют тетрабутиламмоний фторид (1 М, 0,190 мл). Через 2 часа реакционную смесь выливают в воду, экстрагируют дважды EtOAc, высушивают над MgSO₄ и концентрируют в вакууме, получая 63 мг соединения 667 в виде твердого вещества белого цвета.

(668) синтезируют из 667 по способу, использующемуся для получения 605d из 604d с образованием 48 мг соединения 668 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,45 (m, 1H), 2,67 (d, 1H), 3,78 (d, 1H), 3,85 (br, m, 1H), 4,05 (d, 1H), 4,28 (m, 1H), 4,5 (m, 2H), 4,65 (m, 1H), 4,95 (br, s, 2H), 7,4-7,5 (m, 4H), 7,52-7,65 (m, 3H), 7,88 (d, 2H).

(669) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 605d из 600b с образованием 63 мг соединения 669 в виде белого твердого вещества, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 1,9 (s, 3H), 2,4-2,7 (m, 2H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,9 (s, 3H), 4,2-4,4 (m, 2H), 4,4-4,6 (m, 3H), 7,4-7,8 (m, 4H), 7,9 (s, 2H).

(670) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 655 из 600b, с образованием 218 мг соединения 670 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 1,7, 1,75 (2s, 3H), 2,15, 2,2 (2s, 6H), 2,4-2,5 (m, 1H), 2,6-2,75 (m, 1H), 3,65-3,75 (m, 2H), 4,2-4,3 (m, 2H), 4,45-4,6 (m, 3H), 7,35-7,6 (m, 4H), 7,5 (s, 2H).

(671) синтезируют из 670 по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 253 мг соединения 671 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 1,9 (s, 3H), 2,25 (s, 6H), 2,4-2,5 (m, 1H), 2,6-2,75 (m, 1H), 3,65-3,75 (m, 2H), 4,2-4,3 (m, 2H), 4,45-4,6 (m, 3H), 7,35-7,6 (m, 4H), 7,5 (s, 2H).

(672) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения соединения 602n из 600b, используя 665, с образованием 1,08 г соединения 672.

(673). К раствору соединения 672 (1,08 г, 1,69 ммолей) в CH₂Cl₂ добавляют 2,6-лютадин (0,8 мл), затем TMSOTf (l мл, 5,1 ммолей). Через 1 час реакционную смесь выливают в NaHCO₃ и экстрагируют СН₂Cl₂, высушивают над MgSO₄ и концентрируют в вакууме до небольшого объема, который непосредственно используют в следующей реакции.

(674) синтезируют из 673 по способу, использующемуся для получения 602b с образованием 0,91 г соединения 674.

(675). Раствор соединения 674 (0,365 г, 0,5 ммолей) в МеОН перемешивают с IN раствором NaOH (1,2 мл, 1,2 ммолей). Через 16 часов реакционную смесь концентрируют в вакууме, затем растворяют в воде и промывают дважды эфиром. Водный слой подкисляют с помощью IN HCl и продукт экстрагируют в EtOAc, высушивают над MgSO₄ и концентрируют в вакууме с образованием 337 мг соединения 675 в виде твердого вещества.

(676) синтезируют из 675 по способу, использующемуся для получения 213е, с образованием 166 мг соединения 676 в виде твердого вещества белого цвета.

(677). Раствор TBAF (6 мл, 3 ммоля) в НОАс (0,46 мл, 8 ммолей) добавляют к соединению 676 (0,213 г, 0,256 ммолей). Через 16 часов реакционную смесь выливают в EtOAc и промывают дважды NaHCO₃, один раз нас. солевым раствором, высушивают над MgSO₄ и и концентрируют в вакууме с образованием 139 мг соединения 677 в виде твердого вещества, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,4(d, 1H), 2,5 (dd, 1H), 2,8 (dd, 1H), 2,92 (dd, 1H), 3,15 (m, 10 2Н), 3,55-3,65 (m, 2Н), 3,72 (s, 6H), 3,92 (m, 1H), 4,05 (m, 1H), 4,3 (m, 1H), 4,42 (d, 1H), 4,6 (dd, 1H), 4,65-4,8 (m, 2Н), 4,88 (d, 1H), 5,55 (d, 1H), 6,55 (m, 2H), 6,75 (d, 1H), 7,25-7,55 (m, 8H), 7,75 (m, 2Н).

(678) синтезируют по способу, использующемуся для получения 667 из 666 с образованием 54 мг соединения 678 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,45 (m, 1H), 2,7 (m, 1H), 3,5 (m, 2H), 3.75 (or, s, 6H), 4,05 (d, 1H), 4,3 (m, 1H), 4,51-4,6 (m, 2H), 4,8 (br, m, 2H), 6,7 (d, 2H), 7,4-7,5 (br, m, 3H), 7,6-7,65 (br, m, 2H).

(680) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 677 из 600b с образованием 140 мг соединения 680 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 2,31 (d, 1H), 2,4 (dd, 2H), 2,75 (dd, 2H), 2,85 (dd, 1H), 3,36 (br, s, 1H), 3,45 (br, 5 s, 1H), 3,6 (br, t, 2H), 3,82 (br, m, 2H), 3,95 (br, d, 2H), 4,35 (m, 2H), 4,42 (d, 1H), 4,55 (m, 1H), 4,70 (d, 1H), 4,82 (br, s, 2H), 5,5 (d, 1H), 6,91 (d, 1H), 7,25 (br, m, 5H), 7,35-7,46 (br, m, 3H), 7,5-7,6 (m, 2H), 8,15 (br, d, 2H).

(681) синтезируют из 680 по способу, использующемуся для получения 678 из 677 с образованием 45 мг соединения 681 в виде серого твердого вещества, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,5 (m, 1H), 2,7 (dt, 1H), 3,65-3,85 (br, m, 3H), 4,05 (m, 1H), 4,3 (m, 1H), 4,5-4,7 (br, m, 3H), 4,85 (br, s, 2H), 7,3 (br, m, 2H), 7,4-7,7 (m, 5H), 8,15 (d, 2H).

(682) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 655 из 600b с образованием 495 мг соединения 682 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 2,00 (s, 3H), 2,05 (s, 3H), 2,47 (d, 1H), 2,58 (dd, 1H), 2,85 (dd, 1H), 2,89 (dd, 1H), 3,9 (m, 2H), 4,05-4,15 (m, 2H), 4,19 (dd, 1H), 4,45 (m, 2H), 4,55-5,05 (m, 8H), 5,55 (d, 1H), 6,85 (d, 1H), 7,15 (d, 1H), 7,25-7,55 (m, 10Н), 7,75 (d, 2H).

(683) синтезируют из 682 по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 82 мг соединения 683 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,1 (s, 3Н), 2,5 (m, 1H), 2,68 (m, 1H), 3,8 (m, 1H), 4,29 (dd, 1H), 4,31 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,55 (d, 1H), 4,6 (d, 1H), 4,72 (d, 1H). 4,95 (br, s, 2H), 7,45 (br, m, 2H), 7,52-7,65 (br, m, 5H), 7,88 (d, 2H).

(684) синтезируют из 600b, по способу, использующемуся для получения 605d из 600b с образованием 72 мг соединения 684 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 1,9 (s, 3Н), 2,25 (s, 6H), 2,45 (m, 1H), 2,6 (m, 1H), 3,3 (s, 1H), 3,7 (s, 3Н), 4,25 (m, 1H), 4,45-4,6 (m, 3Н), 7,4 (br, s, 2H), 7,55 (br, d, 4H).

(685) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 676 из 600b с образованием 165 мг соединения 685.

(686). К раствору соединения 685 (165 мг, 0,21 ммолей) в THF добавляют раствор соединения TBAF (1M, 0,21 мл). Продукт отделяют фильтрацией после осаждения из реакционной смеси. После хроматографии на обращенной фазе (от 10% до 80% MeCN в воде/0,1% TFA) получают 25 мг соединения 686 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,37-2,42 (m), 2,59-2,70 (m), 3,60-3,89 (m), 4,01 (d), 4,20-4,31 (m), 4,42-4,70 (m), 4,80-5,05 (m), 6,79 (d), 7,32-7,65 (m),7,81(s).

(687а) синтезируют из 600b, по способам, подобным использующимся для получения 654 из 600b, с образованием 1,6 г соединения 687а.

(687b) синтезируют из 600b, по способам, подобным использующимся для получения 654 из 600b, с образованием 1,1 г соединения 687b.

(688а). К раствору соединения (3S,2R,S)-3-аллилоксикарбониламино-2-бензилокси-5-оксотетрагидрофуран (Chapman, Biorg. Med. Chem. Lett., 2, pp. 613-618 (1992)) (1,13 г, 1,2 экв.) в CH₂Cl₂ добавляют трифенилфосфин (423 мг, 0,5 экв.), диметилбарбитуровую кислоту (1,26 г, 2,5 экв.) и тетракистрифенилфосфин палладий (0) (373 мг, 0,1 экв.). Через 5 минут реакционную смесь охлаждают на водяной бане со льдом, после чего добавляют раствор соединения 687а в DMF (1,6 г, 1 экв.), НОВТ (480 мг, 1,1 экв.) и EDC (681 мг, 1,1 экв.). Полученную смесь перемешивают при температуре окружающей среды. Через 16 часов реакционную смесь выливают в NaHSO₄ и экстрагируют дважды EtOAc. Органический слой промывают NaHCO₃, нас. солевым раствором, высушивают над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. После хроматографии (SiO₂, от 20% до 100% EtOAc в CH₂Cl₂) получают 880 мг соединения 688а в виде твердого вещества не совсем белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,55 (dd, 1H), 2,7 (dd, 1H), 3,0 (m, 1H), 3,6 (m, 1H), 3,75 (d, 1H), 3,9-4,0 (m, 2H), 4,3-4,45 (m, 3H), 4,5-4,6 (m, 3H), 4,7 (m, 2H), 5,35 (s, 1H), 5,55 (d, 1H), 7,1-7,5 (m, 4H), 7,85 (s, 2H).

(688b) синтезируют из 687b по способу, использующемуся для получения 688а из 687а с образованием 960 мг соединения 688b в виде твердого вещества не совсем белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,6 (dd, 1H), 2,7 (dd, 1H), 3,0 (dd, 1H), 3,2 (s, 3H), 3,7 (m, 3Н), 3,9 (m, 2H), 4,4-4,5 (m, 2Н), 4,6 (m, 3Н), 5,35 (s, 1H), 5,55 (d, 1H), 7,25 (m, 2H), 7,4-7,5 (m, 4H).

(689a) синтезируют из 688а по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 184 мг соединения 689a в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,45 (m, 1H), 2,6 (m, 1H), 3,3 (s, 3Н), 3,7-3,85 (m, 2H), 4,0 (d, 1H), 4,3 (m, 1H), 4,5-4,6 (m, 3Н), 7,3-7,6 (m, 4H), 7,85 (s, 2H).

(689b) синтезируют из 688b по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 412 мг соединения 689b в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,5 (m, 1H), 2,7 (m, 1H), 3,3 (s, 3Н), 3,7-3,85 (m, 2H), 4,05 (dd, 1H), 4,3 (m, 1H), 4,6 (m, 2H), 7,45-7,4 (m, 2H), 7,5 (s, 2H), 7,55 (m, 2H).

(690а) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения соединения 676 из 600b, 688а из 687а, затем 677 из 676 с образованием 863 мг соединения 690а в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 62,2 (s, 6H), 2,45 (d, 0,5H), 2,6-2,9 (m, 1H), 3,05 (dd, 0,5H), 3,65-3,85 (m, 2H), 3,95-4,1 (m, 1H), 4,35-5,0 (m, 7H), 5,35 (s, 0,5H), 5,65 (d, 0,5H), 7,2-7,4(m, 4H), 7,4-7,7 (m, 7Н).

(690b) синтезируют из 600b по способам, использующимся для получения 677 из 600b с образованием 200 мг соединения 690b, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,49 (d, 1H), 2,65 (d, 1H), 2,66 (d, 1H), 2,85 (d, 1H), 2,87 (d, 1H), 3,05 (dd, 1H), 3,35 (br, s, 1H), 3,72 (br, s, 2H), 4,01 (m, 2H), 4,45 (br, m, 1H), 4,6 (m, 1H), 4,7 (m, 1H), 4,8 (m, 1H), 4,95 (br, s, 2H), 5,65 (d, 1H), 6,8 (d, 2H), 7,2-7,35 (br, m, 3H), 7,45 (m, 2H), 7,75 (d, 2H).

(691a) синтезируют из 690а по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 560 мг соединения 691a в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,15 (s, 6H), 2,45 (m, 1H), 2,65 (m, 1H), 3,55(m, 1H), 3,7 (d, 1H), 4,0 (d, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,5-4,6 (m, 3H), 7,3-7,5 (m, 6H).

(691b) синтезируют из 690b по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 410 мг соединения 691b в виде белого твердого вещества, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,5 (m, 1H), 2,65 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,8 (d, 1H), 4,05 (d, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,5 (m, 1H), 4,6 (m, 1H), 4,95 (br, s, 2H), 6,8 (d, 2H), 7,45 (m, 2H), 7,6 (m, 2H), 7,75 (d, 2H).

(695а) синтезируют из 600b по способам, использующимся для получения 677 из 600b с образованием 75 мг соединения 695а, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,2 (s, 6H), 2,45 (m, 1H), 2,6 (m, 1H), 3,65 (m, 1H), 3,75 (d, 1H), 4,0 (d, 1H), 4,28 (m, 1H), 4,5 (m, 3H), 7,4-7,6 (m, 6H).

(695b) синтезируют из 600b по способам, использующимся для получения 677 из 600b с образованием 880 мг соединения 695b, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 2,1 (s, 3H), 2,25-2,5 (m, 2H), 2,8-2,92 (m, 0,5H), 3,15-3,2 (m, 0,5H), 3,45-3,6 (m, 2H), 3,75-3,95 (m, 2Н), 4,15-4,25 (m, 1H), 4,35-4,6 (m, 2H), 4,6-4,88 (m, 3H), 5,22 (s, 0,25H), 5,33 (s, 0.25Н), 5,52-5,58 (d, 0,5H), 7,15-7,45 (m, 9,5H), 7,5-7,75 (m, 5H), 8,3-8,35 (m, 0,5H), 9,08-9,18 (m, 1Н).

(695с) синтезируют из 600b по способам, использующимся для получения 677 из 600b с образованием 840 мг соединения 695с, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 2,23 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,45-2,62 (m, 1H), 2,8-2,9 (dd, 0,5H), 2,9-3,05 (dd, 0,5H), 3,45-3.63 (m, 5 1H), 3,64 (s, 1,5Н), 3,68 (s, 1,5H), 3,78-4,05 (m, 2Н), 4,2-4,33 (m, 1H), 4,4-4,63 (m, 2H), 4,65-4,94 (m, 2H), 4,95-5,1 (m, 1H), 5,45 (s, 0,5H), 5,5-5,6 (d, 0,5H), 6,9-6,95 (d, 1H), 7,25-7,7 (m, 12H).

(692a) синтезируют из 600b по способам, использующимся для получения 661 из 600b, исключая стадии получения 604d из 603d, используя вместо них способ получения 688а из 687а с образованием 854 мг соединения 692a, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,45 (d, 1H), 2,6 (m, 1H), 2,7 (m, 1H), 3,0 (m, 1H), 3,5-3,7 (m, 4H), 4,0 (q, 2H), 4,45 (m, ЗН), 4,55 (m, 4H), 5,35 (s, 1H), 5,6 (d, 1H), 7,2-7,5 (m, 9H), 7,85 (s, 2H).

(692b) синтезируют из 600b по способам, использующимся для получения 661 из 600b, исключая стадии получения 604d из 603d, используя вместо них способ получения 688а из 687а, с образованием 207 мг соединения 692b, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 1,05 (t, 3Н), 1,15 (t, 3Н), 2,45 (d, 1H), 2,55 (m, 1H), 2,7 (m, 1H), 3,55 (m, 2H), 3,6-3,75 (m, 5H), 4,0 (dd, 2H), 4,3 (d, 1H), 4,4-4,7 (m, 5H), 5,25 (s, 1H), 5,5 (d, 1H), 7,25-7,6 (m, 4H), 7,85 (s, 2H).

(693) синтезируют из 600b по способам, использующимся для получения 688а из 600b с образованием 30 мг соединения 693, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 1,7 (s, 3H), 1,8 (s, 3Н), 2,51 (d, 1H), 2,6 (m, 1H), 2,85 (m, 1H), 3,0 (m, 1H), 3,75 (br, d, 2H), 4,0-4,1 (cd, 2H), 4,5-5,0 (m, 6H), 5,45 (s, 1H), 5,55 (s, 1H), 7,15-7,85 (m, 14H).

(694) синтезируют из 691с по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001 с образованием 380 мг соединения 694 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,25 (s, 6H), 2,45 (m, 1H), 2,65 (m, 1H), 3,65 (m, 5H), 4,0 (d, 1H), 4,28 (m, 1H), 4,55 (d, 2H), 4,95 (m, 1H), 7,4-7,6 (m, 6H).

Соединения 700-711 получают по способам, подобным использующимся для получения соединений 619-635 (см. Пример 13). Физические характеристики для соединений 700-711 перечислены в Таблице 25.

Соединения 910-915 и 918-921 получают так, как описано ниже. Физические характеристики для этих соединений перечислены в Таблице 26.

Стадия А. Синтез соединения 401. Смолу TentaGel S® NH (0,25 ммолей/г, 6,8 г) помещают в стеклянный встряхиватель и промывают диметилацетамидом (3× 20 мл). К раствору соединения 400 (1,70 г, 2,9 ммолей, полученного из т-бутилового эфира (3S) 3-(флуоренилметилоксикарбонил)-4-оксомасляной кислоты по методике A.M. Murphy et al. J. Am. Chem. Soc., 114, 3156-3157 (1992)) в диметилацетамиде (15 мл) добавляют O-бензотриазол-N,N,N,N’-тетраметилуроний гексафторфосфат (HBTU; 1,09 г, 2,9 ммолей) и DIEA (1,0 мл, 5,7 ммолей). Этот раствор добавляют к смоле, затем добавляют диметилацетамид (5 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре, используя кистевой встряхиватель. Смолу отделяют путем фильтрации с отсасыванием и промывают диметилацетамидом (6× 20 мл). Образец смолы (7,4 мг) тщательно промывают 50% метанолом в дихлорметане, высушивают путем отсасывания. Удаление защитных групп Fmoc с помощью 20% пиперидина в диметилацетамиде (10,0 мл) и УФ-анализ раствора показывает замещение 0,19 ммоля/г.

Стадия В. Синтез соединения 903. Со смолы 401 удаляют защитные группы с помощью 20% (об./об.) пиперидин/диметилацетамида (20 мл) в течение 10 мин (при встряхивании) и затем в течение еще 10 мин со свежим пиперидиновым реагентом (20 мл). Затем смолу промывают диметилацетамидом (6× 20 мл). Раствор соединения 902 (1,52 г, 2,81 ммолей) обрабатывают HBTU (1,07 г, 2,83 ммолей) и DIEA (1,0 мл, 5,7 ммолей) и переносят на смолу, затем добавляют диметилацетамид (5 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 2,5 ч при комнатной температуре, используя кистевой встряхиватель. Смолу отделяют путем фильтрации с отсасыванием и промывают диметилацетамидом (4× 20 мл) и дихлорметаном (4× 20 мл), и высушивают под током азота. Замещение смолы, проведенное, как описано для 401, составляло 0,169 ммолей/г.

Стадия С. Синтез соединения 905. Смолу 903 (7,54 г, 1,27 ммолей) и димедон (2,19 г, 15,6 ммолей) помещают в 100 мл круглодонную колбу и добавляют свежеперегнанный безводный тетрагидрофуран (60 мл). Добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (0,32 г, 0,28 ммоляl) и создают атмосферу азота, реакционную смесь в запечатанном сосуде перемешивают в течение 15 часов на кистевом встряхивателе. Смолу фильтруют, промывают диметилацетамидом (4× 20 мл), дихлорметаном (4× 20 мл) и диметилацетамидом (1× 20 мл). К смоле добавляют дополнительное количество диметилацетамида для получения взвеси, затем пиридин (1,5 мл, 18,5 ммолей) и раствор соединения 904 (5,5 ммолей) в дихлорметане (10 мл). Реакционную смесь встряхивают в атмосфере азота в течение 8 ч, затем фильтруют. Смолу промывают диметилацетамидом (5× 20 мл) и дихлорметаном (5× 20 мл).

Стадия D. Синтез соединения 906. Это соединение получают из Смолы 905 (0,24 г, 0,038 ммолей), используя множественный пептидный синтезатор Advanced ChemTech 396. Автоматические циклы состоят из промывания смолы диметилформамидом (3× 1 мл), удаления защитных групп с помощью обработки 25% (об./об.) раствором пиперидина в диметилформамиде (1 мл) в течение 10 мин и затем свежим реагентом (1 мл) в течение 20 мин, в результате получают смолу 906. Смолу промывают диметилформамидом (3× 1 мл) и N-метилпирролидоном (3× 1 мл).

Стадия Е. (910-922) Смолу 906 ацилируют раствором 0,4М карбоновой кислоты и 0,4М НОВТ в N-метипирролидоне (0,5 мл), раствором 0,4М HBTU в N-метилпирролидоне (0,5 мл) и раствором 1,6М DIEA в N-метипирролидоне (0,25 мл) и реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре. Смолу промывают N-метилпирролидоном (1× 1 мл), диметилформамидом, (4× 1 мл), 50% метанолом в дихлорметане (5× 1 мл) и высушивают на воздухе. Альдегид удаляют со смолы и проводят общее удаление защитных групп путем обработки 95% TFA/5% Н₂О (об./об., 1,5 мл) в течение 30 мин при комнатной температуре. После промывания смолы удаляющим реагентом (2× 1 мл), объединенные фильтраты добавляют к охлажденной смеси 1:1 эфир:гексан (35 мл) и полученный осадок выделяют путем центрифугирования и декантации. Полученный осадок растворяют в ацетонитриле (0,5 мл) и Н₂О (0,5 мл) и фильтруют через 0,45 - микронные микроцентрифужные фильтры. Это соединение очищают методом полупрепаративной обращенно-фазовой ВЭЖХ с колонкой Rainin Microsorb™ CIS (5μ , 21,4× 250 мм), элюируя линейным градиентом ацетонитрила (10%-50%), содержащим 0,1% TFA (об./об.) в течение 30 мин при скорости потока 12 мл/мин. Фракции, содержащие целевой продукт, объединяют и лиофилизируют, получая соединения 910-922.

Аналитические процедуры ВЭЖХ:

(1) Waters DeltaPak CIS, 300

(5μ , 3,9× 150 мм). Линейный градиент ацетонитрила (0% - 25%), содержащий 0,1% TFA (об./об.) в течение 14 мин при скорости потока 1 мл/мин.

(2) Waters DeltaPak C18, 300

(5μ , 3,9× 150 мм). Линейный градиент ацетонитрила (5% - 45%), содержащий 0,1% TFA (об./об.), в течение 14 мин, при скорости потока 1 мл/мин.

(696) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 691а из 600b, с образованием 696. ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,45(m, 1Н), 2,7(m, 1H), 3,75(d, 1H), 3,95(q, 1H), 4,05(d, 1H), 4,3(m, 1H), 4,45-4,65(m, 2H), 5,05(m, 1H), 7,5-7,6(m, 3H), 7,7(t, 1H), 7,8(t, 1H), 7,98(t, 1H), 8,55(d, 1H), 9,l(d, 1H).

(728)

(696а) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 690а из 600b, с образованием 696а. ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 0,95(t, 2H), 1,25(t, 1H), 1,4 (m, 2H), 1,55(m, 1H), 2,55 (m, 1H), 2,85(m, 1H), 2,95(dd, 1H), 3,15(m, 1H), 3,55(m, 1H), 3,9(m, 2H), 4,35(t, 1H), 4,4-4,55(m, 2H), 4,75(m, 1H), 4,8-5,05(m, 2H), 5,45(s, 1H), 5,55(d, 1H), 6,85 (d, 1H), 7,15(d, 1H), 7,2-7,5(m, 5H), 7,6-7,8(m, 3H), 8,45(d, 1H), 9,05(d, 1H), 9,35(d, 1H).

(696b) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 690а из 600b, с образованием 696b. ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 0,9(m, 3H), 1,15(q, 3H), 1,15(m, 1H), 1,65(m, 1H), 2,5(m, 1H), 2,8(m, 1H), 2,95-3,0(m, 2H), 3,6(m, 2H), 3,7-3,85(m, 4H), 4,0(m, 2H), 4,3(m, 1H), 4,55(m, 1H), 4,65(m, 1H), 4,85-4,95(m, 1H), 5,05(m, 1H), 5,35(s, 1H), 5,45(d, 1H), 6,85(d, 1H), 7,25(d, 1H), 7,35-7,85(6H), 8,85(dd, 2H), 9,05(m, 1H),9,35(dd,2H).

(696с) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 690а из 600b, с образованием 696с. ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 1,25(t, 1H), 1,65(q, 1H), 1,9(m, 1H), 2,9(m, 1H), 3,05(m, 1H), 3,9(d, 1H), 4,2(m, 1H), 4,3(d, 1H), 4,7-5,0(m, 3H), 5,25(m, 1H), 5,7(s, 1H) , 5,9(d, 1H), 7,5(d, 2H), 7,7-7,9(m, 3H), 8,0(t, 1H), 8,2(m, 2H), 8,75(d, 1H), 9,35(d, 1H).

(696d) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 690а из 600b, с образованием 696d. ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 0,9 (t, 1H), 1,2(t, 1H), 1,3-1,45(m, 2H), 1,6-1,8(m, 4H), 2,45(m, 1H), 2,8(m, 1H), 3,0(m, 1H), 3,4(q, 1H), 3,5(d, 1H), 4,0(m, 2H), 4,2-4,3(m, 2H), 4,55(d, 1H), 4,65 (m, 1H) , 4,9 (m, 1H), 5,05(m, 1H), 5,4(s, 1H), 5,5(d, 1H), 6,8(d, 1H), 7,3-7,9(m, 6H), 8,5(d, 1H), 9,05(d, 1H), 9,4(d, 1H).

(696e) синтезируют из 600b по способу, использующемуся для получения 690а из 600b, с образованием 696e. ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,2(t, 1H), 2,4(m, 1H), 2,8 (m, 2H), 3,6(d, 1H), 3,7(q, 1H), 4,0(m, 2H), 4,3(d, 2H), 4’’, 65 (m, 1H), 4,85(t, 1H), 5,0(m, 1H), 5,35(d, 1H) , 6,5(d, 1H), 7,15-7,85(m, 8H), 8,45(d, 1H), 9,05(d, 1H), 9,4(d, 1H).

Пример 32

Результаты даны в табл.27.

Таблица 27
Соединение	УФ- видимый К_i (нМ)	Клетки РВМС средн. IC₅₀ (нМ)	Целая кровь человека IC₅₀ (нМ)	Выведение Мыши, в/в мл/мин/кг	Выведение Крысы, в/в мл/мин/кг
688с	200
689b-1	3.5		2700	-
696-1	0.5
696-2	0.5
697	1.8		5000
698	18		13500
699	1.1
699а-2
720	2.7
721	1.3		5000
722	5		5000
723	2.3		2000
724	2		1800
725	3.7		3000
726	300
727	50		2300
728	300
729	28		2800
730	90		8000
731	150
732	5		1800
733	5		1500
734	9		6000
735	6		10000

Пример 33

Соединения 684а, 688b-l, 688с, 689b-l, 690a-l, 696-1, 696-2, 696а-2, 696а-1, 697, 697а, 698, 698а, 699, 699а, 699а-1, 699а-2, 800 и 801 получают так, как описано в таблице 28.

Таблица 28
CIP#	R⁴	R³	R⁵	R¹
684а			H
688b-l			F
688с			Н
689b-l			F
690a-l			Н

CIP#	R⁴	R³	R⁵	R¹
696-1			F
696-2			Сl
696а-2			Сl
696а-1			F
697			Н
697а			H
698			Н
698а			H
699			H
699а			H

CIP#	R⁴	R³	R⁵	R¹
699a-l			F
699a-2			F
800			Н
801			Н

(690а-1) синтезировали по способу, использующемуся для получения 690а и 2100b, с образованием 690а-1, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,15(t, 6Н), 1,3(t, 3H), 2,25(s, 6H), 2,60(d, 2Н), 3,50(m, 2Н), 3,70(m,4Н), 4,05(m, 2Н), 4,15(m, 2Н), 4,30(d, 1H), 4,45(m, 1H), 4,50(d, 1H), 4,55(d, 1H), 0 4,70(t, 1H), 5,05(m, 1H), 5,30(s, 1H), 6,70(d, 1H), 7,10(d, 2H), 7,30-7,50(m, 7Н).

(697а) синтезировали по способу, использующемуся для получения 677, с образованием 840 мг соединения 697а, ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,78 (br, s, 2H), 2,48-2,58 (d, 0,5H), 2,6-2,7 (m, 0,5H), 2,8-2,9 (m, 0,5H), 2,92-3,03 (m, 0,5H), 3,55-3,8 (m, 2H), 3,92-4,02 (d, 1H), 4,25-4,3 (d, D,5H), 4,37-4,42 (d, 0,5H), 4,43-4,48 (m,0,5H), 4,55-4,65 (m, 1,5H), 4,7-5,12 (m, 5H), 5,44 (s, 0,5H), 5,58-5,63 (d, 0,5H), 6,95-8,1 (m, 13Н).

(697) синтезируют по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001, с образованием 140 мг соединения 697, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,38-2,5 (m, 1H), 2,55-2,75 (m, 1H), 3,68-3,9 (m, 3H), 3,95-4,03 (m, 1H), 4,2-4,3 (m, 1H), 4,4-4,7 (m, 4H), 7,35-7,8 (m, 6H).

(684а) синтезируют по способу, использующемуся для получения соединения 2100j, с образованием 684а, ¹Н ЯМР (500 МГц, СDСl₃, смесь диастереомеров) δ 1,3 (s, 9H), 1,8(s, 3H), 2,1 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,3(s, 6H), 3,3-3,5(m, 3H), 3,65(s, 3H), 3,9(n, 1H), 4,1(d, 1H), 4,3(d, 1H), 4,6-4,8(m, 3H), 5,0(m, 1H), 6,7(s, 1H), 7,0(d, 1H), 7,1 (d, 1H), 7,2-7,5 (m,6H).

(698a) синтезируют по способу, использующемуся для получения соединения 652, с образованием 795 мг 698a, ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃, смесь диастереомеров) δ 2,8(m, 2H), 4,0(m, 1H), 4,5-4,8(m, 4H), 5,2(m, 1H), 5,5(s, 1H), 5,75(d, 1H), 7,3-7,85(m, 11H), 7,9(t, 1H), 8,2(d, 1H), 8,6(m, 1H), 9,3(m, 1H).

(698) синтезируют по способу, использующемуся для получения соединения 653, с образованием 225 мг 698, ¹Н ЯМР (500 МГц, СD₃ОD) δ 2,4(m, 1H), 2,6(m, 1H), 3,9(m, 1H), 4,2(m, 1H), 4,3-4,7(m, 4H), 5,l(m, 1H), 7,3-7,5(m, 4H), 7,6-7,8(m, 2H), 7,8(m, 2H), 8,2(d, 1H), 8,5(d, 1H), 9,0(d, 1H).

(699a) синтезируют по способу, использующемуся для получения соединения 655, с образованием 820 мг 699a, в виде рыжевато-коричневого твердого вещества, ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 2,60(ddd, 1H), 2,90(ddd, 1H), 3,20(s, 3Н), 3,25(s, 3Н), 3,70(t, 1H), 3,90(m, 2H), 4,20(dd, 1H), 4,60(m, 2H), 4,70-5,00(m, 5H), 5,55(d, 1H), 7,00(d, 1H), 7,20-7,50(m, 7H), 8,45(dd, 1H), 9,0(dd, 1H) и 9,35 ppm (dd, 1H).

(688b-l) синтезируют по способу, использующемуся для получения соединения 655, с образованием 600 мг 688b-l, ¹Н ЯМР (CDCl₃, смесь диастереомеров) δ 2,21(s, 3Н), 2,28(s, 3Н), 2,42-2,50(m, 0,5Н), 2,58-2,65(m, 0,5Н), 2,83-2,91(m, 0,5Н), 2,98-3,1(m, 0,5Н), 3,18(s, 1,5H), 3,22(s, 1,5H), 3,72-3,78(d, 1H), 3,78-3,9(m, 2H), 4,08-4,15(d, 1H), 4,5-4,69(m, 3Н), 4,7-4,85(m, 1H), 4,88-5,1(m, 2H), 5,45(s, 0,5H), 5,55-5,65(d, 0,5Н), 6,85-6,92(m, 1H), 7,02-7,13(m, 2H), 7,24-7,55(m, 9Н).

(689b-l) синтезируют по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001, с образованием 689b-l, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,18 (s, 6H), 2,36-2,47 (m, 1H), 2,6-2,72 (m, 1H), 3,34 (s, 3Н), 3,66-3,88 (m, 2H), 3,95-4,05 (m, 1H), 4,2-4,78 (m, 5H), 4,9 (m, 1H), 7,3-7,41 (m, 2H), 7,48 (s, 2H), 7,5-7,63 (m, 1H).

(699) синтезируют по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001, с образованием 699 в виде твердого вещества белого цвета, ¹H ЯМР (500 МГц, СD₃ОD) δ 2,50 (m, 1H), 2,70 (m, 1H), 3,25 (s, 3Н), 3,80 (bd, 1H), 3,90 (bd, 1H), 4,00 (bd, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,50-4,70 (m, 3Н), 4,80-4,85 (bt, 1H), 5,00 (bm, 1H), 7,40-7,55 (m, 5H), 7,70 (bm, 1H), 7,85 (bm, 1H), 8,00 (bm, 1H), 8,55 (bd, 1H) и 9,05 ppm (bd, 1H).

(696a-l) синтезируют по способу, использующемуся для получения 656, с образованием 800 в виде твердого вещества желтого цвета, ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 2,55 (ddd, 1H), 2,85 (ddd, 1H), 3,70-3,80 (m, 2H), 3,95 (bm, 1H), 4,05 (d, 1H), 4,30 (d, 1H), 4,40-4,60 (m, 4H), 4,70-5,05 (m, 4H), 5,55(d, 1H), 7,10 (d, 1H), 7,20-7,35 (m, 3H), 7,40-7,50 (m, 1H), 7,60-7,85 (m, 3H), 8,40 (dd, 1H), 9,10 (m, 1Н), и 9,30 рр(m, 1Н).

(696а-2) синтезируют по способу, использующемуся для получения 677, с образованием 204 мг 696а-2 в виде белого твердого вещества, за исключением того, что восстановление нитро-группы проводят следующим образом: к раствору нитро-соединения (7,2 г, 20 ммолей) в МеОН добавляют NH₄Cl (2,1 г, 39 ммолей) и Zn (17 г, 260 ммолей). Полученную смесь нагревают в течение 1 часа при температуре флегмы, затем охлаждают и фильтруют через целлит. Фильтрат концентрируют в вакууме, затем обрабатывают холодной IN HCl, получая 3,6 г бледно-красного твердого вещества. ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 1,85(s, 1H), 2,45(d, 0,5H), 2,50-2,65(m, 0,5H), 2,80-2,90(m, 0,5H), 2,90-3,00(m, 0,5H), 3,45(s, 0,5H), 3,55-3,75(m, 1H), 3,85-4,15(m, 2H), 4,25(d, 1H), 4,40-4,65(m, 2H), 4,70-4,80(m, 0,5H), 4,85-5,15(m, 3H), 5,40 (s, 0,5H), 5,60(d, 0,5H), 7,00(d, 0,5H), 7,15-7,90 (m, 12,5H), 8,35-8,45(m, 1H), 9,00-9,10(m, 1H), 9,25-9,40(m, 1H).

(696-1) синтезируют по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001, с образованием 140 мг 696-1 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (500 МГц, СD₃ОD) δ 2,50 (m, 1H), 2,70 (m, 1H), 3,85 (d, 1H), 3,95 (m, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,50-4,60 (m, 2H), 4,80 (bm, 1H), 5,00 (m, 1H), 7,40-7,48 (m, 3H), 7,65 (m, 1H), 7,75 (t, 1H), 7,85 (t, 1H), 8,00(d, 1H), 8,55(d, 1H) и 9,05 ppm (d, 1H).

(696-2) синтезируют по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001, с образованием 250 мг 696-2 в виде твердого вещества белого цвета, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,40-2,55(m, 1H), 2,60-2,75(m, 1H), 3,80-4,00(m, 2H), 4,05(d, 1H), 4,20-4,35(m, 1H), 4,45-4,65 (m, 3H), 4,80-5,10(m, 2H).

(699a-l) синтезируют по способу, использующемуся для получения 655, с образованием 699a-l, ¹H ЯМР (500 МГц; CDСl₃) δ 2,55 (ddd, 1H), 2,90 (ddd, 1H), 3,25 (s, 3H), 3,28 (s, 3H), 3,80 (bt, 2H), 3,95 (bm, 2H), 4,25 (dd, 1H), 4,45-4,90 (m, 3H), 5,60 (d, 1H), 7,05-7,40 (m, 8H), 7,50 (bm, 1H), 7,65-7,85 (m, 2H), 8,45 (d, 1H), 9,1 (m, 1H) и 9,35 ppm (m, 1H).

(699а-2) синтезируют по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001, с образованием 699а-2, ¹Н ЯМР (500 МГц, СD₃ОD) δ 2,51 (m, 1H), 2,70 (dt, 1H), 3,31 (bs, 3H), 3,90 (bdt, 1H), 3,95 (bm, 1H), 4,05 (d, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,50 (d, 1H), 4,60 (dd, 1H), 4,65 (dt, 1H), 4,80 (m, 1H), 5,05 (m, 1H), 7,35-7,48 (m, 3H), 7,65 (bm, 1H), 7,75 (t, 1H), 7,82 (t, 1H), 8,05 (d, 1H), 8,55 (d, 1H) и 9,05 ppm (d, 1H).

(688с) синтезируют по способу, использующемуся для получения 308d, с образованием 800, ¹Н ЯМР (CD₃OD) δ 2,2 (s, 6H), 2,58-2,83 (m, 2H), 3,28 (s, 3H), 3,29-3,34 (m, 1H), 3,68-3,80 (m, 2H), 3,95-4,05 (dd, 1H), 4,38-4,48 (dd, 1H), 4,82-5,00 (m, 2H), 5,26-5,36 (m, 2H), 7,22-7,65 (m, 10H).

(800) синтезируют по способу, использующемуся для получения 696а-l, с образованием 204 мг 800 в виде твердого вещества желтого цвета, ¹Н ЯМР (CDCl₃) (смесь диастереомеров) δ 1,70(s, 1H), 2,40-2,80(m, 7H), 2,80-2,90(m, (СDСl₃) (смесь диастереомеров) δ 1,70(s, 1H), 2,40-2,80(m, 7H), 2,80-2,90(m, 0,5Н), 2,95-3,05(m, 0,5Н), 3,30-3,35(m, 0,5Н), 3,45-3,55(m, 0,5Н), 3,55-3,65(m, 1H), 3,80-4,05(m, 2Н), 4,30-4,50(m, 2Н), 4,55-4,65(m, 1H), 4,75-4,95(m, 3Н), 5,45(s, 0,5Н), 5,55(d, 0,5H), 6,70(d, 0,5H), 6,90(d, 0,5H), 7,15-7,80(m, 10H).

(801) синтезируют по способу, использующемуся для получения 2002 из 2001, с образованием 801.

Пример 34

Соединения 720-73 получают по способам, подобным способам, использующимся для получения соединений 619-635 (см. Пример 13). Физические характеристики соединений 720-73 перечислены в таблице 29.

Пример 35

Соединения 736-767 получают по способам, подобным способам, использующимся для получения соединений 619-635 (см. Пример 13). Физические характеристики соединений 736-767 перечислены в таблице 30.

Таблица 30
Соединение	R⁴	R³
736
737
738
739
740
741

Соединение	R⁴	R³
742
743
744
745
746
747
748
749
750
751
752

Соединение	R⁴	R³
753
754
755
756
757
758
759
760
761
762
763

Соединение	R⁴	R³
764
765
766
767

Данные приведенных выше примеров демонстрируют, что соединения настоящего изобретения проявляют ингибиторную активность в отношении фермента, конвертирующего IL-1β .

Постольку, поскольку соединения настоящего изобретения способны ингибировать ICE in vitro и, более того, могут применяться перорально к млекопитающим, они обладают очевидным клиническим применением при лечении IL-1-, апоптоз-, IGIF- и IFN-γ -опосредованных заболеваний. На основании этих тестов можно предсказать способность соединений к ингибированию ICE in vivo.

Так как заявителем описано множество воплощений данного изобретения, является очевидным, что основные структуры могут быть изменены для обеспечения других воплощений, в которых используются продукты и способы данного изобретения. Таким образом, следует понимать, что объем данного изобретения, определяемый в прилагаемой формуле изобретения, не ограничен отдельными воплощениями, представленными в примерах.

Claims

1. Соединение, представленное формулой (VI)

где R₁представляет собой

или

С представляет собой цикл, выбранный из ряда, состоящего из бензо-, необязательно один или несколько раз замещенного -Q₁, и пиридо-;

R₂ представляет собой:

(а)

или

(b)

m равно 1 или 2;

каждый R₅ независимо выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)O-R₉, -C(O)-N(R₉)(R₁₀), -S(O)₂-R₉, -S(O)₂-NH-R₁₀, -C(O)C(O)-R₁₀, -R₉;

X₅ представляет собой CH или N;

Y₂ представляет собой H₂ или О;

R₆ представляет собой -H;

R₈ выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)O-R₉, -S(O)₂-R₉, -C(O)-CH₂-OR₁₀, -C(O)C(O)-R₁₀, -C(O)-CH₂-O-C(O)R₉, -H и -C(O)-C(O)-OR₁₀;

каждый R₉ независимо выбран из группы, состоящей из -Ar₃ и прямой или разветвленной -C_1-6 алкильной группы, необязательно замещенной -Ar₃, где -С_1-6 алкильная группа необязательно является ненасыщенной;

каждый R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из -H, -Ar₃и прямой или разветвленной -C_1-6алкильной группы, необязательно замещенной -Ar₃, где -С_1-6 алкильная группа необязательно является ненасыщенной;

R₁₃ выбран из группы, состоящей из -H и прямой или разветвленной -C_1-6 алкильной группы;

каждый R₅₁ независимо выбран из группы, состоящей из R₉, -C(O)-R₉, -C(O)-N(H)-R₉и -С_3-6-циклоалкильной группы;

каждый R₂₁ представляет -H;

каждый Ar₃ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильной группы, содержащей 6 или 10 атомов углерода и 1 или 2 кольца, и ароматической гетероциклической группы, содержащей от 5 до 10 атомов в кольце и 1 или 2 кольца, причем указанная гетероциклическая группа содержит, по крайней мере, одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, =N- и -NH-, и такая гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей и указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одно или несколько ароматических колец, а также указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -NH₂, -CO₂H, -Cl, -F, -Br, -I, -NO₂, -CN, =О, -ОН, -перфтор С_1-3 алкила, -R₅, -OR₅, -NHR₅, -OR₉, -N(R₉)(R₁₀), -R₉, -C(O)-R₁₀и

,

при условии, что когда -Ar₃ замещен группой Q₁, которая содержит одну или несколько дополнительных групп -Ar₃, указанные дополнительные -Ar₃ группы не замещены другим -Ar₃;

и при условии, когда R₂ представляет

R₂₁ представляет Н и

Y представляет О, тогда R₅ не может представлять -С(О)R₁₀, где R₁₀представляет –СН₂СН₂Ar₃ и Ar₃ означает незамещенный фенил; или -S(O)₂R₉, где R₉ представляет метил; и когда Y представляет Н₂, тогда R₅ не может представлять -С(О)R₁₀, где R₁₀представляет –СН₂СН₂Ar₃ и Ar₃ означает незамещенный фенил.

2. Соединение по п. 1, выбранное из группы, состоящей из

213е

304a

813e

904a

2001

2100a

2100b

2100c

2100d

2100e

677

680

213C

213f

213g

213h

213i

213j

213l

213mm

213o

213p

213q

213r

213s

213t

213u

213v

213w

213x

245

245b

256

303a

550f

550g

550h

550i

550j

550l

500n

550o

550p

2100f

2100g

2100h

2100k

2100l

2100m

2100n

2100o

3. Соединение по п. 1, где m равно 1; С представляет собой цикл, выбранный из ряда, состоящего из бензо-, необязательно один или несколько раз замещенного -Cl, -F, -Br, -I, -NH₂, -OH, NH-R₅, -OR₅, где R₅является прямой или разветвленной С_1-4 алкильной группой, или -R₅, где R₅ является прямой или разветвленной С_1-4 алкильной группой, и пиридо; R₆ представляет собой H; R₁₃ представляет собой H или прямую или разветвленную С_1-4 алкильную группу; R₂₁ представляет собой -H; R₅₁ представляет собой прямую или разветвленную С_1-6 алкильную группу, необязательно замещенную -Ar₃, где Ar₃ является фенилом, необязательно замещенным Q₁; каждую циклическую группу Ar₃ независимо выбирают из ряда, включающего фенил, нафтил, тиенил, хинолинил, изохинолинил, пиразолил, тиазолил, изоксазолил, бензотриазолил, бензимидазолил, тиенотиенил, имидазолил, тиадиазолил, бензо[b]тиофенил, пиридил, бензофуранил и индолил, и указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁; каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -NH₂, -Cl, -F, -Br, -ОН, -R₅, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅, и

где каждый R₉ и R₁₀ независимо представляет собой прямую или разветвленную -С_1-6 алкильную группу, необязательно замещенную -Ar₃, где Ar₃является фенилом; при условии, что когда -Ar₃ замещен группой Q₁, которая содержит одну или несколько дополнительных групп -Ar₃, указанные дополнительные -Ar₃ группы не замещены другим -Ar₃.

4. Соединение по п. 3, где R₁ представляет собой группу (w2).

5. Соединение по п. 4, где R₈ выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)O-R₉ и -C(O)-CH₂-ОR₁₀.

6. Соединение по п. 5, где R₈представляет собой -C(O)-CH₂-OR₁₀, a R₁₀ является -H или -CH₃.

7. Соединение по п. 3, где R₁представляет группу (e10), a X₅ является CH.

8. Соединение по п. 3, где R₁представляет группу (e10), a X₅ является N.

9. Соединение по любому из пп. 1, 3-4 или 5-8, где R₅представляет собой -C(O)-R₁₀ или -C(O)-C(O)-R₁₀.

10. Соединение по п. 9, где R₁₀представляет собой Ar₃.

11. Соединение по п. 10, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, a R₁₀ является Ar₃, где циклическая группа Ar₃ представляет собой фенил, необязательно один или несколько раз замещенный следующими группами: -R₅, где R₅ представляет собой прямую или разветвленную С_1-4 алкильную группу; -F; -Cl; -NH₂; -N(H)-R₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, где R₁₀представляет собой прямую или разветвленную -C_1-6 алкильную группу, необязательно замещенную -Ar₃, где Ar₃ является фенилом; -N(R₉)(R₁₀), где R₉ и R₁₀ независимо представляют собой прямую или разветвленную -C_1-4 алкильную группу, или

-О-R₅, где R₅ представляет собой H или прямую или разветвленную -С_1-4 алкильную группу.

12. Соединение по п. 11, выбранное из группы, состоящей из

682

690b

693

695a

695b

13. Соединение по п. 11, где Ar₃ является фенилом, замещенным один или несколько раз по 3-му или 5-му положению -Cl или по 4-му положению -NH-R₅, -N(R₉)(R₁₀) или -О-R₅; или Ar₃ является фенилом, замещенным один или несколько раз по 3-му или 5-му положению группой -R₅, где R₅представляет собой прямую или разветвленную С_1-4 алкильную группу; и по положению 4 группой -О-R₅.

14. Соединение по п. 13, выбранное из группы, состоящей из

655

688а

692а

692b

213k

213m

550k

550m

670

688b

690a

695с

214w-1

214w-2

214w-3

214w-4

214w-5

214w-6

214w-7

15. Соединение по п. 10, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, где R₁₀ является Ar₃, а циклическая группа Ar₃ выбрана из группы, состоящей из индолила, бензимидазолила, тиснила, хинолила, изохинолила и бензо[b]тиофенила, и указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁.

16. Соединение по п. 15, где циклическая группа Ar₃ является изохинолилом и указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁.

17. Соединение по п. 16, выбранное из группы, состоящей из

696а

696а-1

696b

696с

696d

696е

699а

699a-1

213y

412a

412b

412с

412d

412e

412g

412h

550q

18. Соединение по п. 16, представляющее собой

412f

19. Соединение по п. 11, где R₅представляет собой -C(O)-R₁₀, где R₁₀ является Ar₃, а циклическая группа Ar₃является фенилом, замещенным группой

.

20. Соединение по п. 19, выбранное из группы, состоящей из

213n

415a

415b

415c

21. Соединение, представленное формулой

(VII)

в которой m равно 1 или 2; R₁ выбран из группы, состоящей из соединений следующей формулы:

С представляет собой цикл, выбранный из ряда, состоящего из бензо-, необязательно один или несколько раз замещенного -Q₁, и пиридо; R₃ выбран из группы, состоящей из -CN; -C(O)-H; -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁; -C=N-O-R₉ и -CO-Ar₂; каждый R₅ независимо выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀; -C(O)O-R₉; -C(O)-N(R₁₀)(R₁₀); -S(O)₂-R₉; -C(O)-CH₂-O-R₉; -C(O)C(O)-R₁₀; -C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀) и -R₉;

каждый T₁ представляет -О-; R₆ представляет -H; R₈ выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)O-R₉, -C(O)-NH-R₁₀, -S(O)₂-R₉, -C(O)-CH₂-OR₁₀, -C(O)C(O)-R₁₀, -C(O)-CH₂-N(R₁₀)(R₁₀), -H и -C(O)-C(O)-OR₁₀; каждый R₉ независимо выбран из группы, состоящей из -Ar₃ и прямой или разветвленной -C_1-6 алкильной группы, необязательно замещенной -Ar₃; каждый R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из -H, -Ar₃, -С_3-6циклоалкильной группы и прямой или разветвленной -C_1-6 алкильной группы, необязательно замещенной -Ar₃, где -C_1-6 алкильная группа необязательно является ненасыщенной; каждый R₁₁представляет -C(O)-Ar₄; R₁₅представляет -ОН или -O(C_1-6 прямой или разветвленный алкил); Ar₂ представляет

каждый Ar₃ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильной группы, которая содержит 6 или 10 атомов углерода и 1 или 2 кольца, и ароматической гетероциклической группы, содержащей от 5 до 10 кольцевых атомов и 1 или 2 кольца, причем указанная гетероциклическая группа содержит, по крайней мере, одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, SO₂, =N-и -NH-, причем указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одно или несколько ароматических колец и указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁; каждый Ar₄ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильной группы, содержащей 6 атомов углерода, причем указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁; каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -NH₂, -CO₂H, -Cl, -F, -Br, -I, -NO₂, -ОН, -NHR₅, -OR₉, -R₉, перфтор С_1-3 алкила, -N(R₉)(R₁₀), и

при условии, что когда -Ar₃ замещен группой Q₁, которая содержит одну или несколько дополнительных групп -Ar₃, указанные дополнительные -Ar₃ группы не замещены другим -Ar₃; и при условии, что, когда R₆представляет Н, кольцо С является бензокольцом, которое не замещено группой -Q₁, а R₅представляет -С(О)-R₁₀, где R₁₀представляет -СН₂СН₂Ar₃, где Ar₃ является незамещенным фенилом, тогда R₈ не является Н или -С(О)-R₁₀, где R₁₀представляет -СН₂СН₂Ar₃, где Ar₃ является незамещенным фенилом.

22. Соединение по п. 21, выбранное из группы, состоящей из

605а

605b

605с

605d

605e

605f

605g

605h

605i

605j

605m

605n

605o

605p

605q

605s

605t

605v

609a

609b

619

620

621

622

623

624

625

626

627

628

629

630

631

632

633

634

635

653

678

681

701

702

703

704

705

706

709

710

711

921

23. Соединение по п. 21, где m равно 1; С представляет собой цикл, выбранный из ряда, состоящего из бензо, необязательно замещенного один или несколько раз -Q₁, и пиридо; Т₁ представляет собой О; R₆ представляет собой H; R₁₁ представляет -C(O)-Ar₄; Ar₂ представляет

Y представляет собой О; каждая циклическая группа Ar₃ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, тиазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, тиадиазолила, бензотриазолила, бензо[b]тиофенила, бензофуранила и индолила, причем указанная циклическая группа необязательно замещена один или несколько раз -Q₁; каждая циклическая группа Ar₄ представляет фенил, причем указанная фенильная группа необязательно замещена один или несколько раз -Q₁; каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -NH₂, -Cl, -F, -Br, -ОН, -R₉, -OR₉, -NHR₉, -NH-R₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или

-S(O)₂-R₉, и

,

где каждый R₉ и R₁₀ независимо представляют собой прямую или разветвленную -C_1-6 алкильную группу, необязательно замещенную -Ar₃, где Ar₃является фенилом; при условии, что когда -Ar₃ замещен группой Q₁, которая содержит одну или несколько дополнительных групп -Ar₃, указанные дополнительные -Ar₃ группы не должны быть замещены другим -Ar₃.

24. Соединение по п. 23, где R₈ выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)O-R₉, и -C(O)-CH₂-OR₁₀.

25. Соединение по п. 24, где R₈представляет собой -C(O)-CH₂-OR₁₀ и R₁₀является -H или -CH₃.

26. Соединение по п. 23, где R₃представляет собой -C(O)-Ar₂, -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁ или -C(O)-H.

27. Соединение по п. 26, где R₈ выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)O-R₉ и-C(O)-CH₂-OR₁₀.

28. Соединение по п. 27, где R₈представляет собой -C(O)-CH₂-OR₁₀, a R₁₀ является -H или -CH₃.

29. Соединение, представленное формулой (IV)

где m равно 1 или 2; R₁ выбран из группы, состоящей из соединений следующей формулы:

R₃ выбран из группы, состоящей из -CN, -C(O)-H, -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁ и -C(O)-CH₂-F; каждый R₅ независимо выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)O-R₉, -C(O)-N(R₁₀)(R₁₀), -S(O)₂-R₉, -C(O)C(O)-R₁₀ и -C(O)C(O)-N(R₁₀)(R₁₀); Y₂ представляет собой О; каждый T₁ независимо выбран из группы, состоящей из -О- и -S-; каждый R₉ независимо выбран из группы, состоящей из -Ar₃ и прямой или разветвленной -C_1-6 алкильной группы, необязательно замещенной -Ar₃, где -С_1-6 алкильная группа необязательно является ненасыщенной; каждый R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из -H, -Ar₃, -С_3-6 циклоалкильной группы и прямой или разветвленной -С_1-6 алкильной группы, необязательно замещенной -Ar₃, где -C_1-6 алкильная группа необязательно является ненасыщенной; каждый R₁₁ представляет -(СН₂)_1-3-Аr₄; R₁₅ представляет -ОН или -O(C_1-6прямой или разветвленный алкил); каждый R₂₁ представляет -H; каждый Ar₃ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильной группы, которая содержит 6 или 10 атомов углерода и 1 или 2 кольца, и ароматической гетероциклической группы, содержащей от 5 до 10 кольцевых атомов и 1 или 2 кольца, причем указанная гетероциклическая группа содержит, по крайней мере, одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, =N- и -NH-, причем указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одно или несколько ароматических колец и указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁; каждый Ar₄ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильной группы, содержащей 6 или 10 атомов углерода и 1 или 2 кольца, и гетероциклической группы, содержащей от 5 до 10 кольцевых атомов и 1 или 2 кольца, где указанная гетероциклическая группа содержит, по крайней мере, одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, =N-, -NH-, где эта гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, и указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одно или несколько ароматических колец, и где указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁; каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -Cl, -F, -Br, -I, -ОН, -OR₉, -N(R₉)(R₁₀), -NHR₅, -R₉ и

при условии, что когда -Ar₃ замещен группой Q₁, которая содержит одну или несколько дополнительных групп -Ar₃, указанные дополнительные -Ar₃ группы не замещены другим -Ar₃.

30. Соединение, представленное формулой (V)

где m равно 1 или 2; R₁ представляет собой

(е10-В)

R₃ выбран из группы, состоящей из -CN, -C(O)-H, -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, -C(O)-CH₂-F, -C=N-O-R₉ и -CO-Ar₂; каждый R₅ независимо выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)O-R₉, -C(O)-N(R₁₀)(R₁₀), -S(O)₂-R₉, -C(O)C(O)-R₁₀, -H, -C(O)C(O)-OR₁₀ и -C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀); Y₂ представляет собой H₂ или О; каждый T₁ независимо выбран из группы, состоящей из -О- и -S-; каждый R₉ независимо выбран из группы, состоящей из -Ar₃ и прямой или разветвленной -C_1-6 алкильной группы, необязательно замещенной -Ar₃, где -C_1-6 алкильная группа необязательно является ненасыщенной; каждый R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из -H, -Ar₃, -С_3-6циклоалкильной группы и прямой или разветвленной -C_1-6 алкильной группы, необязательно замещенной -Ar₃, где -C_1-6 алкильная группа необязательно является ненасыщенной; каждый R₁₁ независимо выбран из группы, состоящей из -Ar₄, -(CH₂)_1-3-Ar₄ и -C(O)-Ar₄; R₁₅ независимо выбран из группы, состоящей из -ОН и -О(С_1-6прямой или разветвленный алкил); каждый R₂₁ независимо выбран из группы, состоящей из -H или прямой или разветвленной -С_1-6алкильной группы; Ar₂ независимо выбран из следующих групп, в которых любой цикл может быть необязательно один или несколько раз замещен -Q₁ или фенилом, необязательно замещенным -Q₁:

(hh)

и

(ii)

где каждый Y независимо выбран из группы, состоящей из О и S; каждый Ar₃ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильной группы, содержащей 6 или 10 атомов углерода и 1 или 2 кольца и из ароматической гетероциклической группы, содержащей от 5 до 10 кольцевых атомов, и 1 или 2 кольца, и где указанная гетероциклическая группа содержит, по крайней мере, одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, =N- и -NH-, причем эта гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одно или несколько ароматических колец и указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁; каждый Ar₄ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильной группы, содержащей 6 или 10 атомов углерода и 1 или 2 кольца, и из гетероциклической группы, содержащих от 5 до 10 кольцевых атомов и 1 или 2 кольца, где указанная гетероциклическая группа содержит, по крайней мере, одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, =N- и -NH-, и эта гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, где указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одно или несколько ароматических колец и указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁; каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -NH₂, -Cl, -F, -Br, -I, -ОН, -перфтор C_1-3 алкила, R₅, -OR₅, -NHR₅, -OR₉, -N(R₉)(R₁₀), -R₉, -C(O)-R₁₀ и

при условии, что когда -Ar₃ замещен группой Q₁, которая содержит одну или несколько дополнительных групп -Ar₃, то указанные дополнительные -Ar₃ группы не замещены другим -Ar₃; и при условии, что, когда m равно 1; R₁₅ является -ОН; R₂₁ является -H и R₃ является -C(O)-H, то R₅ не может быть -S(O)₂-R₉, где R₉ представляет метил; или -C(O)-R₁₀, где R₁₀ является -СН₂СН₂Ar₃, где Ar₃представляет собой фенил; и при условии, когда m равно 1; R₁₅ является -ОН или -ОС(СН₃)₃; R₂₁ является -H и R₃ представляет собой -CO-Ar₂, где Ar₂ представляет

или

то R₅ не может быть -S(O)₂-R₉, где R₉ является метилом; или -C(O)-R₁₀, где R₁₀ является -СН₂СН₂Ar₃, где Ar₃является незамещенным фенилом; и, при условии, когда m равно 1; R₁₅ является -ОН или -ОС(СН₃)₃; R₂₁ является -H и R₃ представляет собой -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, где T₁ является S и R₁₁ представляет собой -(CH₂)-Ar₄, где Ar₄ представляет собой 2-дихлорфенил, или -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, где T₁ является О и R₁₁ представляет собой -(СО)-Ar₄, где Ar₄ представляет собой 2,6-дихлорфенил, то R₅ не может быть -S(O)₂-R₉, где R₉ является метилом; или -C(O)-R₁₀, где R₁₀ является -СН₂СН₂Ar₃, где Ar₃является незамещенным фенилом.

31. Соединение по пп. 21, 29 или 30, выбранное из группы, состоящей из

2002

2201

220b

223b

223e

226e

227e

307a

307b

429

820b

823b

826е

827е

214с

217с

217e

246

257

265

280

281

282

283

284

285

286

287

404

405

406

407

408

409

410

411

413

416

417

418

419

420

422

423

424

425

426

430

431

432

433

434

435

436

437

438

439

440

441

442

443

444

445

446

447

448

449

450

451

452

453

454

455

456

457

458

459

460

462

463

464

465

466

467

468

469

470

471

472

473

474

475

476

477

478

479

480

481

481s

482

482s

483

484

485

486

487

488

489

490

491

493

494

495

497

498

499

814с

880

881

882

883

1004

1005

1006

1007

1008

1009

1010

1011

1012

1013

1015

1016

1017

1018

1019

1020

1022

1023

1024

1025

1026

1030

1031

1032

1033

1034

1035

1036

1037

1038

1039

1040

1041

1042

1043

1044

1045

1046

1047

1048

1049

1050

1051

1052

1053

1054

1055

1056

1057

1058

1059

1060

1061

1062

1063

1064

1065

1066

1067

1068

1069

1070

1071

1072

1073

1074

1075

1076

1077

1078

1079

1080

1081

1081s

1082

1083

1082s

1084

1085

1086

1087

1088

1089

1090

1091

1093

1094

1095

1096

1097

1098

1099

421

427

428

1021

1027

1028

32. Соединение по пункту 30, где

m равно 1;

Т₁ является О или S;

R₂₁ является -H или -CH₃;

Ar₂ представляет собой группу (hh);

Y является О; каждая циклическая группа Ar₃ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, нафтила, тиенила, хинолинила, изохинолинила, пиразолила, тиазолила, изоксазолила, бензотриазолила, бензимидазолила, тиенотиенила, имидазолила, тиадиазолила, бензо[b]тиофенила, пиридила, бензофуранила и индолила, причем указанная циклическая группа один или несколько раз замещена -Q₁; каждая циклическая группа Ar₄ независимо выбрана из ряда, состоящего из фенила, тетразолила, пиридинила, оксазолила, нафтила, пиримидинила и тиенила, причем упомянутая циклическая группа один или несколько раз замещена -Q₁; каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -NH₂, -Cl, -F, -Br, -ОН, -R₉, -NHR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -S(O)₂-R₉, -OR₅, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, -OR₉, -NH(R₉), и

где каждый R₉ и R₁₀ независимо представляют собой прямую или разветвленную -C_1-6 алкильную группу, необязательно замещенную Ar₃, где Ar₃является фенилом; при условии, что когда -Ar₃ замещен группой Q₁, которая содержит одну или несколько дополнительных групп -Ar₃, указанные дополнительные -Ar₃ группы не замещены другими -Ar₃;

33. Соединение по п. 32, где R₃представляет собой -C(O)-Ar₂, -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁ или -C(O)-H.

34. Соединение по любому из пп. 21, 23-30 или 32-33, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀ или -C(O)C(O)-R₁₀.

35. Соединение по п. 34, где R₁₀представляет собой Ar₃.

36. Соединение по п. 35, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, a R₁₀ является Ar₃, где циклическая группа Ar₃ является фенилом, необязательно замещенным один или несколько раз следующими группами: -R₉, где R₉ представляет собой прямую или разветвленную -С_1-4 алкильную группу; -F, -Cl, -N(H)-R₅, где -R₅ представляет собой -H или -C(O)-R₁₀, где R₁₀ является прямой или разветвленной -C_1-6алкильной группой, необязательно замещенной -Ar₃, где Ar₃ является фенилом, -N(R₉)(R₁₀), где R₉ и R₁₀ независимо представляют собой прямую или разветвленную -C_1-4 алкильную группу, или -О-R₅, где -R₅ представляет собой -H или прямую или разветвленную -С_1-4 алкильную группу.

37. Соединение по п. 36, выбранное из группы, состоящей из

668

691b

911

912

913

и

916

38. Соединение по п. 36, где Ar₃ является фенилом, замещенным один или несколько раз по 3-му или 5-му положению -Cl или по 4-му положению группами -N(H)-R₅, -N(R₉)(R₁₀) или -Q-R₅, или где Ar₃ является фенилом, замещенным один или несколько раз по 3-му или 5-му положению -R₉, где R₉ представляет собой прямую или разветвленную C_1-4 алкильную группу, а в 4-ом положении замещенным группой -О-R₅.

39. Соединение по п. 38, выбранное из группы, состоящей из

656

662

669

686

689а

914

915

918

214k

214m

671

684

689b

691a

694

917

922

214w

40. Соединение по п. 35, где R₅ представляет собой -C(O)-R₁₀, где R₁₀является -Аr₃, а циклическая группа Ar₃ выбрана из группы, состоящей из индолила, бензимидазолила, тиенила, хинолила, изохинолила и бензо[b]тиофенила, и причем указанная циклическая группа необязательно один или несколько замещена -Q₁.

41. Соединение по п. 40, выбранное из группы, состоящей из

919

и

920

42. Соединение по п. 40, где циклическая группа Ar₃ является изохинолилом, причем указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁.

43. Соединение по п. 42, представляющее собой соединение

696

696-1

и

699

44. Соединение по п. 42, представляющее собой

412

45. Соединение по п. 35, где R₅представляет собой -C(O)-R₁₀, где R₁₀ является Ar₃, а циклическая группа Ar₃является фенилом, замещенным

46. Соединение по п. 45, где указанным соединением является

910

или

415

47. Фармацевтическая композиция, обладающая способностью ингибировать продуцирование IL-1β, содержащая соединение по любому из пп. 1-46 и фармацевтически приемлемый носитель.

48. Способ лечения или профилактики заболевания, выбранного из следующего ряда: остеоартрит, острый панкреатит, хронический панкреатит, астма, респираторный дистресс-синдром у взрослых, инфекционный гепатит, гломерулонефрит, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, склеродермия, хронический тиреоидид, болезнь Грейва, аутоиммунный гастрит, инсулин-зависимый сахарный диабет (тип I), аутоиммунная гемолитическая анемия, аутоиммунная нейтропения, тромбоцитопения, хронический активный гепатит, миастенический отек, воспалительное заболевание кишечника, болезнь Крона, язвенный колит, множественный склероз, псориаз, реакция “трансплантат против хозяина”, острый дерматоз, экзема, первичный церроз, увеит, болезнь Бехчета, острая аплазия, апластическая анемия, боковой амиотрофический склероз, нефротический синдром, остеопороз, нарушения костной ткани, вызываемые множественной миеломой, хроническая и острая миелогенная лейкемия, метастатическая меланома, саркома Капоши, множественная миелома, сепсис, септический шок, шигеллез, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, церебральная ишемия или ишемия миокарда, у субъекта, включающий введение указанному субъекту соединения по любому из пп. 1-46.

49. Способ по п. 48, где заболевание выбрано из следующего ряда: остеоартрит, острый панкреатит, ревматоидный артрит, воспалительное заболевание кишечника, язвенный колит, болезнь Крона, гепатит, респираторный дистресс-синдром у взрослых, гломерулонефрит, инсулин-зависимый сахарный диабет (Тип I), ювенильный диабет, псориаз, реакция “трансплантат против хозяина”, гепатит или болезнь Альцгеймера.

50. Способ лечения или профилактики заболевания, выбранного из следующего ряда: болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, церебральная ишемия, ишемия миокарда, атрофия мышц спины, множественный склероз, СПИД-ассоциированный энцефалит, ВИЧ-ассоциированный энцефалит, старение, алопеция или неврологические нарушения в результате удара, у субъекта, включающий введение указанному субъекту соединения по любому из пп. 1-46.

51. Способ по п. 50, где заболеванием является болезнь Альцгеймера.

52. Способ получения N-ациламиносоединения, представленного формулой (VII):

(VII)

где R₁ выбран из группы, состоящей из следующих формул:

(е10)

(e11)

(е12)

(y1)

(y2)

(z)

С представляет собой цикл, выбранный из ряда, состоящего из бензо, пиридо, тиено, пирроло, фурано, тиазоло, изотиазоло, оксазоло, изоксазоло, пиримидо, имидазоло, циклопентила и циклогексила; этот цикл необязательно один или несколько раз замещен Q₁;

R₂ представляет собой

(а)

(b)

(с)

d)

m равно 1 или 2;

R₃ выбран из группы, состоящей из -CN, -C(O)-H, -C(O)-CH₂-T₁-R₁₁, -C(O)-CH₂-F, -C=N-OR₉ и -СОAr₂;

каждый R₅ независимо выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)O-R₉, -C(O)-N(R₁₀)(R₁₀), -S(O)₂-R₉, -S(O)₂-NH-R₁₀, -C(O)-CH₂-O-R₉, -C(O)C(O)-R₁₀, -R₉, -H, -C(O)C(O)-OR₁₀ и -C(O)C(O)-N(R₉)(R₁₀);

X₅ представляет собой CH или N;

Y₂ представляет собой H₂ или О;

X₇ представляет собой -N(R₈)- или -О-;

каждый Т₁ независимо выбран из группы, состоящей из: -О-, -S-, -S(O)- и -S(O)₂-;

R₆ выбран из группы, состоящей из -H и -СН₃;

R₈ выбран из группы, состоящей из -C(O)-R₁₀, -C(O)O-R₉, -C(O)-N(H)-R₁₀, -S(O)₂-R₉, -S(O)₂-NH-R₁₀, -C(O)-CH₂-OR₁₀, -C(O)C(O)-R₁₀, -C(O)-CH₂N(R₁₀)(R₁₀), -C(O)-CH₂C(O)-O-R₉, -C(O)-CH₂C(O)-R₉, -H и -C(O)-C(O)-OR₁₀; каждый R₉ независимо выбран из группы, состоящей из -Ar₃ и прямой или разветвленной -C_1-6 алкильной группы, необязательно замещенных -Ar₃, где -C_1-6 алкильная группа необязательно является ненасыщенной;

каждый R₁₀ независимо выбран из группы, состоящей из -H, -Ar₃, -С_3-6циклоалкильной группы и прямой или разветвленной -C_1-6алкильной группы, необязательно замещенных -Ar₃, где -C_1-6 алкильная группа необязательно является ненасыщенной;

каждый R₁₁ независимо выбран из группы, состоящей из -Ar₄, -(CH₂)_1-3-Ar₄, -H и -С(О)-Ar₄;

R₁₃ выбран из группы, состоящей из -H, -Ar₃ и прямой или разветвленной -C_1-6алкильной группы, необязательно замещенных -Ar₃, -CONH₂, -OR₅, -ОН, -OR₉ или -CO₂H;

-ОR₁₃необязательно является -N(H)-OH;

каждый R₅₁ независимо выбран из группы, состоящей из R₉, -C(O)-R₉и -C(O)-N(H)-R₉, или любые R₅₁, взятые вместе, образуют насыщенный 4-8-членный карбоцикл, или гетероцикл, содержащий -О-, -S- или -NH-;

каждый R₂₁ независимо выбран из группы, состоящей из -H или прямой или разветвленной -С_1-6 алкильной группы;

Ar₂ независимо выбран из следующих групп, в которых любое кольцо может быть необязательно один или несколько раз замещено группой -Q₁:

(hh)

(ii)

каждый Ar₃ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильных групп, содержащих 6, 10, 12 или 14 атомов углерода и от 1 до 3 колец, и ароматических гетероциклических групп, содержащих от 5 до 15 атомов в кольце и от 1 до 3 колец, где указанная гетероциклическая группа содержит по крайней мере одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, -SO-, SO₂, =N-, и -NH-, -N(R₅)- и -N(R₉)-, причем указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одно или несколько ароматических колец и указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁;

каждый Ar₄ представляет собой циклическую группу, независимо выбранную из ряда, состоящего из арильных групп, содержащих 6, 10, 12 или 14 атомов углерода и от 1 до 3 колец, и гетероциклических групп, содержащих от 5 до 15 атомов в кольце и от 1 до 3 колец, где указанная гетероциклическая группа содержит по крайней мере одну гетероатомную группу, выбранную из -О-, -S-, -SO-, SO₂, =N-, и -NH-, -N(R₅)- и -N(R₉)-, причем указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одну или несколько двойных связей, указанная гетероциклическая группа необязательно содержит одно или несколько ароматических колец и указанная циклическая группа необязательно один или несколько раз замещена -Q₁;

каждый Q₁ независимо выбран из группы, состоящей из -NH₂, -CO₂H, -Cl, -F, -Br, -I, -NO₂, -CN, =О, -ОН, -перфтор C_1-3 алкила, R₅, -OR₅, -NHR₅, -OR₉, -N(R₉)(R₁₀), -R₉, -C(O)-R₁₀, и

при условии, что когда -Ar₃ замещен группой Q₁, которая содержит одну или несколько дополнительных групп -Ar₃, указанные дополнительные -Ar₃ группы не замещены другими -Ar₃,

включающий стадии a) смешивание карбоновой кислоты с N-alloc-защищенным амином в присутствии инертного растворителя, трифенилфосфина, нуклеофильного акцептора и тетракистрифенилфосфинпалладия (0) при температуре окружающей среды в инертной атмосфере и b) добавление к смеси стадии a) гидрата 1-гидроксибензотриазола и гидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида для образования N-ациламино связи; и необязательно включающий следующую стадию c) гидролиз смеси стадии b) в присутствии раствора, содержащего кислоту и H₂O, причем смесь стадии b) необязательно концентрируется.

53. Способ по п. 52, где N-ациламиносоединение представляет собой следующее:

где R представляет

где R₁₃ представляет –СН₃, -СН₂СН₃, -СН₂СН₂СН₃, -СН(СН₃)(СН₃), -СН₂СН₂ СН₂СН₃, -СН₂-СН(СН₃)СН₃, -С(СН₃)₃, -СН₂Ph или

где R₁₃ представляет -СН₃, -СН₂СН₃, -СН₂СН₂СН₃, -СН(СН₃)(СН₃), -СН₂СН₂СН₂СН₃, -СН₂-СН(СН₃)СН₃, -С(СН₃)₃, -СН₂Ph или

и каждый R₅₁ представляет -СН₃, -СН₂СН₃, -СН₂СН₂СН₃, -СН(СН₃)(СН₃), -СН₂СН₂СН₂СН₃, -СН₂-СН(СН₃)СН₃, -С(СН₃)₃, -СН₂Ph или, взятые вместе, образуют этилендиоксиацеталь или пропилендиоксиацеталь; или

где R₅₁ представляет -СН₃, -СН₂СН₃, -СН₂СН₂СН₃, -СН(СН₃)(СН₃), -СН₂СН₂СН₂СН₃, -СН₂-СН(СН₃)СН₃, -С(СН₃)₃, -СН₂Ph, -С(О)-СН₃ или -С(О)-Ph.

54. Способ по п. 52 или 53, где нуклеофильным акцептором является димедон, морфолин, триметилсилилдиметиламин или диметилбарбитуровая кислота.

55. Способ по п. 54, где нуклеофильным акцептором является триметилсилилдиметиламин или диметилбарбитуровая кислота.

56. Способ по п. 55, где нуклеофильным акцептором является диметилбарбитуровая кислота.

57. Способ по любому из пп. 52-56, где инертным растворителем являются CH₂Cl₂, диметилформамид или смесь CH₂Cl₂ и диметилформамида.

58. Способ по п. 57, где раствор содержит трифторуксусную кислоту в количестве приблизительно от 1 до 90% по весу.

59. Способ по п. 58, где раствор включает трифторуксусную кислоту в количестве приблизительно 20-50% по весу.

60. Способ по п. 57, где раствор содержит хлористоводородную кислоту в количестве приблизительно 0,1-30% по весу.

61. Способ по п. 60, где раствор содержит хлористоводородную кислоту в количестве приблизительно 5-15% по весу.

62. Способ по п. 52 или 53, где N-ациламиносоединение выбирают из группы, состоящей из

213y

412a

412b

412c

412d

412e

412g

412h

и

550q

63. Способ по п. 52 или 53, где N-ациламиносоединение представляет

412f

64. Способ по п. 52 или 53, где N-ациламиносоединение представляет

412

Разноска приоритетов:

от 20.12.1995, заявка №08/575641, пп.1-51;

от 26.11.1996, заявка №60/031495, пп. 52-64.