CN1709258A - 治疗高血脂症的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种新的治疗高脂血症的药物组合物，其特征是含有有效量的烟酸(Nicotinic Acid)和罗苏伐他汀(Rosuvastatin)钙，重量比(以游离酸计)为(15～160)∶1，优选重量比为(30～160)∶1，进一步优选重量比为100∶1。烟酸和罗苏伐他汀钙两药合用，其降脂作用明显优于相同剂量的单方，表明两药合用有协同作用，同时又无明显的毒性作用。上述组合物对预防治疗高血脂伴不稳定型心绞痛取得了意外的显著效果，明显优于相同剂量的单方，协同作用明显。是冠心病患者的理想选择。

Description

治疗高血脂症的组合物

所属技术领域

本发明涉及治疗高血脂症的新的组合物，特别是含有烟酸与罗苏伐他汀钙及药用辅料的组合物。

背景技术：

罗苏伐他汀(Rosuvastatin)是国内外进行了广泛研究并已在多国上市的HMG-CoA还原酶抑制剂，它通过在体内选择性地抑制胆固醇合成过程中的限速酶HMG-CoA还原酶，使胆固醇的合成减少，也使低密度脂蛋白受体合成增加，主要作用部位在肝脏，结果使血胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平降低，由此对动脉粥样硬化和冠心病的防治产生作用。本品还降低血清甘油三酯水平和增高血高密度脂蛋白水平。罗苏伐他汀有5、10、20和40mg的片剂。在临床试验中，多数病人服用5或10mg的开始剂量就达到了国家胆固醇教育计划(National Cholesterol Education Program)推荐的目标LDL-C水平。20mg剂量可以作为胆固醇水平非常高的病人的初始剂量，而40mg的剂量仅应在20mg剂量治疗疗效不足时使用。Shepherd教授最近完成了一项他汀类药物降脂作用比较的临床试验，用药8周的结果显示：罗苏伐他汀10mg(n＝539)LDL-C达标率为80％，而阿托伐他汀10mg(n＝529)达标率为63％(P＜0.001)，阿托伐他汀20mg(n＝925)LDL-C达标率为74％(P＜0.01)。Jones PH的研究显示：罗苏伐他汀10mg降低LDL-C46％，而阿托伐他汀从10mg递增到20mg、40mg，LDL-C分别降低37％(P＜0.001)、43％和48％；辛伐他汀从10mg递增到20mg、40mg，LDL-C分别降低28％、35％和39％(P值均＜0.001)；普伐他汀从10mg递增到20mg、40mg，降低LDL-C分别为20％、24％和30％(P值均＜0.001)。Brown WV等将罗苏伐他汀的降脂活性和安全性与普伐他汀和辛伐他汀进行了52周的临床随机双盲对照研究，结果表明，在用药12周后，罗苏伐他汀5mg和10mg剂量组的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)分别下降了39.1％和47.4％，与普伐他汀20mg组(下降26.5％)和辛伐他汀20mg组(下降34.6％)有显著差异(P＜0.05)。用药52周后，罗苏伐他汀5mg和10mg组达到美国国家胆固醇教育计划推荐LDL-C目标的比率分别为88％和87.5％，而普伐他汀组仅为60％，辛伐他汀组为72.5％，(在后40周，未达目标的患者剂量加倍)所有实验组患者均耐受良好^[1]。纵然罗苏伐他汀有着如此强效的优势，但其不良反应和其它他汀类药物相比较要严重一些，在上市之前的临床试验中，大剂量(80mg)组有7例患者发生了危及生命的横纹肌溶解症，因此当时其安全性就受到过质疑。上市前临床试验中还发现，罗苏伐他汀还可损害一些患者的肾功能(未观察到其他他汀类有类似不良反应)。最终，FDA因考虑到罗苏伐他汀的优势(药效稍强于其他他汀类)而批准其上市，但建议服用剂量从5mg～10mg开始，最大剂量不超过40mg。

烟酸及其衍生物在脂肪组织中可通过降低环磷酸腺苷(cAMP)水平而抑制激素敏感性脂肪酶，直接抑制脂肪的分解代谢，使TG不易分解为游离脂肪酸(FFA)，导致血液中FFA浓度降低，肝脏合成TG的原料缺乏，以致于VLDL合成减少，继发性地引起LDL产生减少。此外，本药直接抑制肝脏合成VLDL也可能是降低LDL的原因。烟酸及其衍生物能通过减少VLDL产生而降低LDL、TG水平，进而减少TC水平，即降低具有致动脉粥状硬化(AS)作用的血浆脂蛋白水平，升高具有抗AS作用的HDL水平。

目前，该领域的研究趋势是将两种不同作用机制的血脂调节药制成复方制剂，可以发挥协同作用，同时减少毒副作用。

欧洲专利申请EP0373507公开了HMG-CoA还原酶抑制剂普伐他汀、洛伐他汀、velostatin分别为5mg、10mg、20mg、40mg和烟酸500mg的组合物的制备，但没有公开其有益效果及最佳配比的实验数据，但没有涉及烟酸或烟酸的衍生物与罗苏伐他汀组合物及最佳配比。

《洛伐他汀和烟酸肌醇单用和合用治疗高血脂症的比较》，发表于《心血管病学进展》1996年第17卷第六期，公开洛伐他汀和烟酸肌醇合用治疗高血脂症；《普伐他汀和烟酸肌醇单用和合用治疗高血脂症的疗效观察》，发表于《中国动脉硬化杂志》1997年，第5卷第3期，公开普伐他汀和烟酸肌醇合用治疗高血脂症。二者均未涉及烟酸或烟酸的衍生物和罗苏伐他汀组合物及最佳配比。

美国专利US5260305A公开了HMG-CoA还原酶抑制剂普伐他汀和烟酸及其衍生物的组合物，具体公开了规格为普伐他汀5mg、10mg、20mg、40mg和阿昔莫司750mg的组合物的制备，但没有公开其有益效果及最佳配比的实验数据，更没有涉及烟酸或烟酸的衍生物和罗苏伐他汀组合物及最佳配比。

发明目的：

本发明的目的是通过一系列科学的筛选实验，提供一种新的治疗高脂血症的药物组合物，其优点是作用强、毒副作用低和使用方便。本药物含有特定比例的烟酸和罗苏伐他汀钙，由于两种药物作用机制不同，组成组合物后降脂作用将更加全面，并且两类药物合用有协同作用，其降脂作用明显优于相同剂量的单方；虽然罗苏伐他汀钙有着较强大的降脂效果，但大剂量的罗苏伐他汀存在发生可危机生命的横纹肌溶解症的风险，通过和烟酸或烟酸的衍生物伍用，显著降低了组合物中罗苏伐他汀的用量，使组合物在有效降低血脂水平的同时，大大降低了罗苏伐他汀钙的用药风险性，同时本组合物一日只需用药一次，用药方便，这将大大提高患者的顺应性。

技术方案：

本发明的组合物由烟酸或烟酸可药用的酯和罗苏伐他汀钙以及药用辅料组成，其中烟酸和罗苏伐他汀钙的重量比为15～160∶1(罗苏伐他汀钙的重量以游离酸计，下同)，优选的比例是30～160∶1，进一步优选的比例是100∶1，其中烟酸优选做成缓释部分。该组合物的药物制剂的剂型，包括片剂、胶囊、颗粒剂、丸剂、滴丸等固体制剂，可以按照本领域公知的一般制剂方法制备，烟酸含量相当于150～1000mg的日剂量，罗苏伐他汀钙含量相当于2～40mg的日剂量，其中优选罗苏伐他汀钙含量相当于5～20mg的日剂量。

本发明的组合物在制成固体制剂，如片剂或胶囊时，为达到持久的治疗效果，优选地将有效量的烟酸制成缓释部分，再与有效量的罗苏伐他汀钙共同制成缓释制剂，如缓释片、缓释胶囊等。相应地，可药用的辅料包括稀释剂，如淀粉、乳糖、甘露醇、预胶化淀粉、糊精、微晶纤维素；崩解剂，如羧甲基淀粉钠、羟丙基淀粉、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠；缓释剂，如乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素-4M、羟丙基甲基纤维素-15M；优特奇RS-100、RL100、RS30D、RL30D、NE30D，以及苏丽丝(乙基纤维素的水分散体)粘合剂，如聚乙烯吡咯烷酮，交联聚乙烯吡咯烷酮，润滑剂，如硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶等。

本发明的组合物通过药理方面的研究工作，表明当用本发明的组合物时，尤其是采用优选的配比时，与单独应用有效量的烟酸和罗苏伐他汀钙时相比，本发明的组合物给出令人吃惊的更好效果，同时毒性没有增加，在达到相同降脂效果的情况下，两类药物伍用大大降低了每种药物的使用剂量，这就显著降低了烟酸类药物的不良反应和罗苏伐他汀钙的用药风险。本发明的组合物可以每日1～2次给药，优选为每日一次。

本发明中罗苏伐他汀可以为任何一种可以药用的盐，即合适的罗苏伐他汀生理可接受的盐，包括衍生自无机的和有机的碱所形成的盐，为钠盐、钙盐、钾盐、镁盐、锌盐、铁盐。罗苏伐他汀可以药用的酯为合适的罗苏伐他汀生理可接受的酯，包括衍生自脂肪醇、芳香醇、杂环醇所形成的酯，为甲酯、乙酯、烯丙酯、苯酯。

本发明中烟酸的衍生物包括阿昔莫司(Acipimox)、烟酸肌醇酯、维生素E烟酸酯。

具体实施方式：

现通过如下实例进一步说明本发明的内容，但本发明的应用范围不仅限于下列实例。

实例1

a、烟酸                        500g

   乳糖                        30g

   羧甲基淀粉钠                30g

   微晶纤维素                  18g

   6％PVP的无水乙醇溶液        100g

   硬脂酸镁                    2g

制备工艺：烟酸过100目筛，乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素过80目筛，称取处方量的烟酸和乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素混合均匀，加入6％PVP无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

b、罗苏伐他汀钙(其重量以游离酸计，下同)      5g

   羟丙基纤维素                            15g

   预胶化淀粉                              10g

   6％PVP的无水乙醇溶液                    30g

   山榆酸甘油酯                            1g

制备工艺：罗苏伐他汀钙过100目筛，羟丙基纤维素、预胶化淀粉过80目筛，称取处方量的罗苏伐他汀钙和羟丙基纤维素、预胶化淀粉混合均匀，加入6％PVP的无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的山榆酸甘油酯。

c、将上述a，b两种组分采用双层压片机冲压片即得双层片。

实例2

a、烟酸                     500g

   乳糖                     30g

   羧甲基淀粉钠             30g

   微晶纤维素               18g

   6％PVP的无水乙醇溶液     100g

   硬脂酸镁                 2g

制备工艺：烟酸过100目筛，乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素过80目筛，称取处方量的烟酸和乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素混合均匀，加入6％PVP无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

b、罗苏伐他汀钙            10g

   羟丙基纤维素            30g

   预胶化淀粉              20g

   6％PVP的无水乙醇溶液    50g

   山榆酸甘油酯            2g

制备工艺：罗苏伐他汀钙过100目筛，羟丙基纤维素、预胶化淀粉过80目筛，称取处方量的罗苏伐他汀钙和羟丙基纤维素、预胶化淀粉混合均匀，加入6％PVP的无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的山榆酸甘油酯。

c、将上述a，b两种组分采用双层压片机冲压片即得双层片。

实例3

a、烟酸                        300g

   羟丙基甲基纤维素-4M          40g

   微晶纤维素                  30g

   8％PVP的无水乙醇溶液        150g

   硬酯酸镁                    2g

制备工艺：烟酸过100目筛，羟丙基纤维素-4M、微晶纤维素过80目筛，称取处方量的烟酸和羟丙基纤维素-4M、微晶纤维素混合均匀，加入8％PVP无水乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

b、罗苏伐他汀钙                20g

羧甲基纤维素钠                30g

乳糖                          20g

6％PVP的95％乙醇溶液          50g

硬酯酸镁                      2g

制备工艺：罗苏伐他汀钙过100目筛，羧甲基纤维素钠、乳糖过80目筛，称取处方量的罗苏伐他汀钙和羧甲基纤维素钠、乳糖混合均匀，加入6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

c、将上述a，b两种组分采用双层压片机冲压即得双层片。

实例4

a、烟酸                        1200g

   甘露醇                      10g

   乳糖                        40g

   微晶纤维素                  20g

   6％PVP的95％乙醇溶液        120g

   硬酯酸镁                    2g

制备工艺：烟酸过100目筛，甘露醇、乳糖、微晶纤维素过80目筛，称取处方量的烟酸和甘露醇、乳糖、微晶纤维素混合均匀，加入6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

b、罗苏伐他汀钙                30g

   预胶化淀粉                  50g

   甘露醇                      50g

   6％PVP的95％乙醇溶液        100g

   微粉硅胶                    5g

制备工艺：罗苏伐他汀钙过100目筛，预胶化淀粉、甘露醇过80目筛，称取处方量的罗苏伐他汀钙和预胶化淀粉、甘露醇混合均匀，加入6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

c、将上述a，b两种组分采用双层压片机冲压即得双层片。

实例5

a、烟酸                        1200g

   乳糖                        30g

   羟丙基甲基纤维素-15M        20g

   8％PVP的95％乙醇溶液        150g

   山榆酸甘油酯                2g

制备工艺：烟酸过100目筛，乳糖、羟丙基甲基纤维素-15M过80目筛，称取处方量的烟酸和乳糖、羟丙基甲基纤维素-15M混合均匀，加入8％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的山榆酸甘油酯。

b、罗苏伐他汀钙                10g

   羟丙基纤维素                15g

   糊精                        20g

   6％PVP的95％乙醇溶液        50g

   滑石粉                      2g

制备工艺：罗苏伐他汀钙过100目筛，羟丙基纤维素、糊精过80目筛，称取处方量的罗苏伐他汀钙和羟丙基纤维素、糊精混合均匀，加入6％PVP的95％乙醇溶液适量制粒，60℃干燥，16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的滑石粉。

c、将上述a，b两种组分采用双层压片机冲压即得双层片。

实例6

a、烟酸                          500g

   空白丸芯                      250g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)     200g

制备工艺：将烟酸过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机(台湾元成机械厂)，入风压力0.5bar，入风温度30℃，喷枪压力(CYL)3bar，雾化压力(CAP1)0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，转盘转速145rpm，喷7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)。造粒结束，50℃烘干，出料。

b、罗苏伐他汀钙                    15g

   空白丸芯                        90g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)      50g

制备工艺：将罗苏伐他汀钙过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL3bar，CAP1 0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵6％，转盘转速160rpm，喷7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)。造粒结束，45℃烘干，出料。

c、将a和b制得的小丸采用硬胶囊药物填充机按照每两粒胶囊中含烟酸与罗苏伐他汀钙的重量分别为200mg和30mg进行填充，即可。

实例7

a、烟酸                                750g

   空白丸芯                            250g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)           200g

制备工艺：将烟酸过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL3bar，CAP1 0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，转盘转速145rpm，喷7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)。造粒结束，50℃烘干，出料。

b、a中制得的含烟酸小丸

   Surelease                            90g

   滑石粉                               1g

   纯水                                 50g

制备工艺：将a中制得的含烟酸小丸倒入转盘，开造粒包衣机，入风压力1.0bar，入风温度30℃，CYL3bar，CAP1 1.5bar，蠕泵5％，转盘转速180rpm，喷入Surelease的纯水溶液。包衣结束，50℃烘干，出料。

c、按照实例5中b的要求制得罗苏伐他汀钙小丸，与本例b中制得的烟酸小丸采用硬胶囊药物填充机按照每两粒胶囊中含烟酸与罗苏伐他汀钙的重量分别为300mg，和30mg进行填充，即可。

实例8

a、烟酸                                500g

   空白丸芯                            200g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)           200g

制备工艺：将烟酸过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL3bar，CAP1 0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，转盘转速165rpm，喷入7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)。造粒结束，50℃烘干，出料。

b、罗苏伐他汀钙                        20g

   空白丸芯                            150g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)          150g

制备工艺：将罗苏伐他汀钙过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL3bar，CAP10.8bar，倒入空白丸芯，下料速度4rpm，蠕泵12％，转盘转速120rpm，喷入7％PVP溶液(溶剂为90％醇)。造粒结束，45℃烘干，出料。

c、将a与b制得的小丸采用硬胶囊药物填充机按照每两粒胶囊中含烟酸与罗苏伐他汀钙的重量分别为200mg和40mg进行填充，即可。

实例9

a、烟酸                                750g

   空白丸芯                            300g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)           200g

制备工艺：将烟酸过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL3bar，CAP1 0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，转盘转速145rpm，喷入7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)。造粒结束，50℃烘干，出料。

b、a中制得的含烟酸小丸

   乙基纤维素                        40g

   硬脂酸                            70g

   聚乙二醇-6000                     6g

   滑石粉                            12g

   95％乙醇                          1000g

制备工艺：将a中制得的含烟酸小丸倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风温度30℃，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL3bar，CAP1 1.0bar，蠕泵6％，转盘转速175rpm，喷入乙基纤维素、硬脂酸和聚乙二醇-6000的95％乙醇溶液。包衣结束，50℃烘干，出料。

c、罗苏他汀                            20g

   空白丸芯                            150g

   7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)          150g

制备工艺：将罗苏伐他汀钙过120目筛，处方量称取，倒入下料斗中，开造粒包衣机，入风压力0.5bar，入风温度30℃，CYL3bar，CAP1 0.8bar，倒入空白丸芯，造粒。下料速度4rpm，蠕泵12％，转盘转速120rpm，喷入7％PVP溶液(溶剂为90％乙醇)。造粒结束，45℃烘干，出料。

d、将b与c制得的小丸采用硬胶囊药物填充机按照每两粒胶囊中含烟酸与罗苏伐他汀钙的重量分别为800mg和5mg进行填充，即可。

实例10  烟酸和罗苏伐他汀钙复方治疗大鼠高血脂症的配比筛选

[摘要]本试验目的在于通过筛选确定毒性低、作用强和使用方便的烟酸和罗苏伐他汀钙复方制剂配伍组成。采用正常Wistar大鼠或高脂饲料致大鼠高脂血症模型。受试品烟酸为鲁南制药股份有限公司生产，罗苏伐他汀钙由AstraZeneca公司生产。结果发现，饲以高脂饲料14天后，大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇均明显升高，形成高脂血症模型。给模型大鼠灌服烟酸(150～800mg/kg)和(或)罗苏伐他汀钙(5～40mg/kg，以游离酸计，下同)14天后，血清中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均明显下降，高密度脂蛋白胆固醇升高。单用其中一种药或两药伍用，其效果随剂量递增加强。

结果表明，烟酸和罗苏伐他汀钙伍用对高脂饲料所致的大鼠高脂血症有明显治疗作用，效果与两种药物的剂量相关。从药效和毒性两方面分析，罗苏伐他汀钙5mg/kg和烟酸500mg/kg伍用效果较好。

1  试验目的

通过筛选确定烟酸或烟酸和罗苏伐他汀钙复方制剂组成，以达到复方制剂毒副作用低、作用全面和增强、使用方便(如每日1次用药)之目的。在上述实验基础上按有关要求，进行复方制剂的量效关系和多组份相互影响的试验，为申报开发复方制剂提供实验依据。

2  受试药物

2.1  烟酸

批号：0306004

纯度：大于99.7％

生产单位：鲁南制药股份有限公司

保存条件：阴凉干燥处保存，有效期1年半。

配制方法：临用前用1％CMC混匀，配成试验所需浓度。

2.2  罗苏伐他汀钙(Rosuvastatin Calcium)

批    号：030206

纯    度：大于99.0％

生产单位：阿斯利康公司

保存条件：阴凉干燥处保存，有效期2年。

配制方法：临用前用1％CMC混匀，配成试验所需浓度。

3  实验动物

3.1  品系和来源

Wistar大鼠，军事医学科学院医学实验动物中心繁殖，实验动物质量许可证号为医动字D01-3039。

3.2  体重和性别

年龄为9周～10周。体重180-220g。雄性。

3.3  饲养条件

动物实验室空气定时排风、光照良好，常温。每笼饲养5只动物，饲以本院实验动物中心专门为大鼠配制的膨化饲料，自由饮水。动物实验条件合格证号为医动字D01-2051。试验开始前，观察动物进食、活动及粪便等1周，选择健康动物进入试验。

4  大鼠高脂血症模型制备^[2]

大鼠高脂血症模型采用高脂饲料致高脂血症法。高脂饲料配方如下：基础饲料87.3％、胆固醇2％、猪油10％、甲基硫氧嘧啶0.2％、猪胆盐0.5％，各成分保证混合均匀。连续2周。给药期间隔天给予高脂饲料，其余时间给予正常饲料。

5  烟酸和罗苏伐他汀钙对正常大鼠血脂的影响^[2]

5.1  剂量选择

临床上烟酸用于降血脂的剂量为1000～2000mg/次(按人体重60kg计算，上述剂量为16.8～33.6mg/kg)，3次/日，按体表面积为单位的剂量等效原则推算，上述人常用剂量换算成大鼠剂量约为300mg/kg/day。本试验采用1次/日给药方法，故在本试验中烟酸剂量设为150、300、500、800mg/kg。

临床上罗苏伐他汀的剂量为5～20mg/次(按人体重60kg计算，上述剂量为0.1-0.3mg/kg)，1次/日，每日量最大不超过40mg^[4]。按体表面积为单位的剂量等效原则推算，上述人常用剂量换算成大鼠剂量约为0.5-1.5mg/kg。结合文献报道，将本试验中罗苏伐他汀钙剂量设为5、10、20、40mg/kg。

5.2 组别设置

依据上述剂量设置，按血清总胆固醇水平均衡原则，把正常动物按照随机原则分为：(1)正常对照组；(2)烟酸150mg/kg组；(3)烟酸300mg/kg组；(4)烟酸500mg/kg组；(5)烟酸800mg/kg组；(10)罗苏伐他汀钙5mg/kg组；(11)罗苏伐他汀钙10mg/kg组；(12)罗苏伐他汀钙20mg/kg组；(13)罗苏伐他汀钙40mg/kg组；(14)烟酸300mg/kg和罗苏伐他汀钙10mg/kg组；(15)烟酸300mg/kg和罗苏伐他汀钙20mg/kg组；(16)烟酸500mg/kg和罗苏伐他汀钙5mg/kg组；(17)烟酸500mg/kg和罗苏伐他汀钙10mg/kg组；(18)烟酸500mg/kg和罗苏伐他汀钙20mg/kg组；(19)烟酸500mg/kg和罗苏伐他汀钙40mg/kg组；(20)烟酸800mg/kg和罗苏伐他汀钙5mg/kg组；(21)烟酸800mg/kg和罗苏伐他汀钙10mg/kg组；每组6只，雄性。

5.4 给药

临床给药途径为口服，故本试验采用灌胃法给药，连续灌胃4天。灌胃均在动物进食后进行。每天1次。给药体积为0.3ml/100g体重。14:00～16:00给药。

5.5  检测指标

血清化学指标包括总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-L)。其中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)检测试剂采用北京中生生物工程高技术公司产品，用SABA/18全自动生化分析仪测定；其余试剂采用日本罗氏试剂公司产品，用日立7020自动生化分析仪测定。测定方法参照试剂说明书取血样前禁食16小时。

6  烟酸和罗苏伐他汀钙对模型大鼠血脂的影响

6.1  剂量依据

同正常大鼠实验。

6.2  组别设置

依据上述剂量设置，按血清总胆固醇水平均衡原则，把正常动物按照随机原则分为：(1)正常对照组；(2)模型对照组；(3)烟酸150mg/kg组；(4)烟酸300mg/kg组；(5)烟酸500mg/kg组；(6)烟酸800mg/kg组；(11)罗苏伐他汀钙5mg/kg组；(12)罗苏伐他汀钙10mg/kg组；(13)罗苏伐他汀钙20mg/kg组；(14)罗苏伐他汀钙40mg/kg组；(15)烟酸300mg/kg和罗苏伐他汀钙10mg/kg组；(16)烟酸300mg/kg和罗苏伐他汀钙20mg/kg组；(17)烟酸500mg/kg和罗苏伐他汀钙5mg/kg组；(18)烟酸500mg/kg和罗苏伐他汀钙10mg/kg组；(19)烟酸500mg/kg和罗苏伐他汀钙20mg/kg组；(20)烟酸500mg/kg和罗苏伐他汀钙40mg/kg组；(21)烟酸800mg/kg和罗苏伐他汀钙5mg/kg组；(22)烟酸800mg/kg和罗苏伐他汀钙10mg/kg组；每组10只，雄性。

6.3  给药

临床给药途径为口服，故本试验采用灌胃法给药，连续灌胃14天。灌胃均在动物进食后进行。每天1次。给药体积为0.3ml/100g体重。

6.4  检测指标

同正常大鼠实验。

7  试验结果

7.1  烟酸和罗苏伐他汀钙对正常大鼠血脂的影响

正常大鼠给药4天后，烟酸、罗苏伐他汀钙和联合用药组的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇均有所降低，高密度脂蛋白胆固醇升高(表1)。给药后血清甘油三酯略有下降，但无统计学差异。联合用药组的效果优于单药。

        1  烟酸和罗苏伐他汀钙及配伍对正常大鼠血脂的影响

组别	总胆固醇(mmol/L)	甘油三酯(mmol/L)	低密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)	高密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)
					正常对照组烟酸150mg/kg烟睃300mg/kg烟酸500mg/kg烟酸500mg/kg罗翔伐他汀钙5mg/kg罗苏伐他汀钙10mg/kg罗苏伐他汀钙20mg/kg罗苏伐他汀钙40mg/kg烟300罗苏10mg/kg烟300罗苏20mg/kg烟500罗苏5mg/kg烟500罗苏10mg/kg烟500罗苏20mg/kg烟500罗苏40mg/kg烟800罗苏5mg/kg烟800罗苏10mg/kg	2.07±0.281.90±0.251.87±0.281.75±0.311.67±0.292.00±0.111.92±0.371.83±0.261.73±0.331.63±0.351.54±0.291.50±0.341.51±0.181.46±0.40*1.70±0.251.41±0.33*1.58±0.27	0.88±0.560.81±0.430.79±0.390.72±0.440.69±0.360.73±0.320.68±0.080.67±0.200.60±0.210.61±0.130.67±0.190.63±0.220.66±0.340.62±0.260.59±0.330.61±0.290.58±0.16	0.44±0.100.40±0.120.39±0.150.34±0.130.33±0.250.39±0.090.36±0.100.32±0.100.35±0.220.33±0.110.35±0.140.36±0.230.32±0.190.35±0.300.32±0.090.37±0.170.31±0.20	0.83±0.090.85±0.110.87±0.130.90±0.120.92±0.221.11±0.301.10±0.14*1.06±0.191.05±0.471.01±0.461.10±0.151.12±0.191.09±0.251.05±0.221.11±0.311.13±0.191.08±0.41

注：*与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

7.2烟酸和罗苏伐他汀钙对模型大鼠血脂的影响

大鼠饲以高脂饲料14天后分组给药。烟酸的剂量从300～800mg/kg，罗苏伐他汀钙的剂量从5～40mg/kg，组成联合用药组。给药14天后，与模型对照组比较，烟酸和罗苏伐他汀钙各剂量组血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均下降。(表2)。综合分析，烟酸500mg/kg和罗苏伐他汀钙5mg/kg、烟酸800mg/kg和罗苏伐他汀钙10mg/kg联合用药效果显著，对血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均表现出协同作用。

部分烟酸剂量组及与罗苏伐他汀钙联合用药组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶升高，高剂量组升高幅度大(表3)。各组大鼠血清中肌酸激酶活性变化趋势与血清丙氨酸氨基转移酶相似。因此在复方中应尽可能降低罗苏伐他汀钙的剂量，以烟酸500mg/kg和罗苏伐他汀钙5mg/kg剂量，配伍较好，对血清中肌酸激酶与血清丙氨酸氨基转移酶活性的影响较小。

                      表2  烟酸和罗苏伐他汀钙及复方对模型大鼠血脂的影响

组别	血清总胆固醇(mmol/L)	血清甘油三酯(mmol/L)	低密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)	高蜜度脂蛋白胆固醇(mmol/L)
					正常对照组	1.93±0.30	0.63±0.13	0.41±0.10	1.07±0.20

模型对照组烟酸150mg/kg烟酸300mg/kg烟酸500mg/kg烟酸800mg/kg罗苏伐他汀钙5mg/kg罗苏伐他汀钙10mg/kg罗苏伐他汀钙20mg/kg罗苏伐他汀钙40mg/kg烟300罗苏10mg/kg烟300罗苏20mg/kg烟500罗苏5mg/kg烟500罗苏10mg/kg烟500罗苏20mg/kg烟500罗苏40mg/kg烟800罗苏5m/kg烟800罗苏10mg/kg

5.75±0.33=5.56±0.355.17±0.40**4.77±0.36***4.49±0.50***4.77±0.47***4.36±0.44***4.22±0.38***3.77±0.37***4.06±0.34***3.88±0.27***3.46±0.56***3.57±0.29***3.46±0.35***3.61±0.37***3.59±0.26***3.25±0.41***

2.27±0.26＝2.24±0.152.20±0.232.03±0.341.59±0.17***2.20±0.152.10±0.201.41±0.41***1.21±0.10***1.78±0.13**1.65±0.25***1.19±0.16***1.32±0.47***1.28±0.35**1.33±0.22***1.27±0.34***1.08±0.18***

3.26±0.09=3.20±0.253.01±0.29*2.65±0.38***2.11±0.23***2.96±0.612.77±0.59*2.20±0.26***1.99±0.45***2.45±0.32***2.37±0.37***1.56±0.25***1.69±0.29***1.72±0.39***1.58±0.41***1.56±0.34***1.40±0.17***

0.99±0.111.08±0.140.99±0.181.15±0.261.21±0.33*0.94±0.140.98±0.151.17±0.311.27±0.25**1.13±0.151.27±0.18***1.51±0.20***1.43±0.31**1.46±0.22***1.44±0.35**1.50±0.27***1.55±0.34***

注：与正常对照组比较，###P＜0.001；与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

表3  烟酸和罗苏伐他汀钙及复方对模型大鼠血清丙氨酸氨基转移酶

                   和肌酸激酶的影响

组别	丙氨酸氨基转移酶(nmol.s-1/L)	肌酸激酶(U/L)
			正常对照组模型对照组烟酸150mg/kg烟酸300mg/kg烟酸500mg/kg烟酸800mg/kg罗苏5mg/kg罗苏10mg/kg罗苏20mg/kg罗苏40mg/kg烟300罗苏10mg/kg烟300罗苏20mg/kg烟500罗苏5mg/kg烟500罗苏10mg/kg烟500罗苏20mg/kg烟500罗苏40mg/kg烟800罗苏5mg/kg烟800罗苏10mg/kg	527.9±144.8683.5±245.6650.4±234.5679.5±325.4643.7±267.7688.2±198.1826.1±328.8859.4±309.9*868.7±620.61504.0±864.9**589.3±156.4867.2±187.5736.9±209.6802.7±179.3833.5±236.71407.8±809.1**765.1±207.5695.8±193.9	507.2±194.6**287.2±68.5256.3±55.7280.6±46.9265.8±33.4271±125345.6±219.5363.4±126.0589.2±335.8*1450.2±1385.2*325.6±103.5469.3±121.8300.4±201.6335.6±179.5509.2±302.41523.7±1092.7*320.9±220.4473.1±187.9

注：与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

8结论

烟酸和罗苏伐他汀钙伍用对高脂饲料所致的大鼠高脂血症有明显治疗作用，降脂效果与两种药物的剂量相关，其中以烟酸500mg/kg和罗苏伐他汀钙5mg/kg剂量，伍用效果显著，同时又无明显的毒性作用。此外，本试验结果发现，较高剂量的烟酸每日给药1次也有显著的降血脂作用，且毒性小，这为烟酸和罗苏伐他汀钙组成复方，实现每日给药1次提供了实验依据。

实例11.不同释放时间的烟酸和罗苏伐他汀钙复方对临床高血脂患者不稳定型心绞痛的预防治疗效果

1  试验目的

将动物试验筛选所确定的烟酸与罗苏伐他汀钙复方制剂(重量比为100∶1)，用于高血脂伴不稳定型心绞痛患者，以观察其预防治疗效果。

2  受试药物

2.1  药品名称：烟酸

批    号：0304001

纯    度：大于99.6％

生产单位：鲁南制药股份有限公司

保存条件：阴凉干燥处保存，有效期1年半。

2.2  药品名称：罗苏伐他汀(Rosuvastatin)

批    号：030205

纯    度：大于99.0％

生产单位：阿斯利康公司

2.3  药品名称：烟酸罗苏伐他汀(Rosuvastatin)普通片，每片含烟酸500mg，罗苏伐他汀钙5mg。

批    号：0305003

生产单位：鲁南制药股份有限公司

保存条件：阴凉干燥处保存，有效期1年半。

2.4  药品名称：烟酸罗苏伐他汀(Rosuvastatin)缓释片，每片含烟酸500mg，罗苏伐他汀钙5mg。

批    号：0304002

生产单位：鲁南制药股份有限公司

保存条件：阴凉干燥处保存，有效期1年半。

3  受试患者选择

临床确诊的各型高血脂伴不稳定型心绞痛的患者。

4.给药方案

将所有受试患者按照心肌缺血事件发生频率和心肌梗死面积均衡的原则，随机分为安慰剂对照组、烟酸组、罗苏伐他汀钙组、烟酸罗苏他汀普通片组和烟酸罗苏他汀缓释片组。剂量设置依据，根据动物实验所得到的罗苏伐他汀钙和烟酸组合物的最佳比例以及两种药物临床的常用剂量，将给药剂量设定为，罗苏伐他汀钙5mg，烟酸500mg，每晚顿服。

5.检测指标

心绞痛发作频率，血清乳酸脱氢酶(LDH)活性。

6.试验结果

高血脂伴不稳定型心绞痛的患者在用药前的一周内测定心绞痛的发作频率和血清乳酸脱氢酶的活性，随机分组后，给予相应的药物治疗，在给药后的第16周再次测定心绞痛的发作频率和血清乳酸脱氢酶活性。结果如下：

组别             心绞痛发作频率      血清LDH

                 次/周               U·L^-1

安慰剂对照组     5.9±2.9            251.4±45.2

烟酸组           4.5±2.4            205.6±50.6^*

罗苏伐他汀钙组   3.0±1.8^*          205.2±43.4

烟+罗普通片组    2.1±1.0^**#        148.9±53.1^**&

烟+罗缓释片组    0.8±1.2^***###&&     105.7±43.9^***###&&

注：*与安慰剂组相比较，P＜0.05，***与安慰剂组相比较，P＜0.001

    #与烟酸组相比较，P＜0.05，###与烟酸组相比较，P＜0.001

    &与罗苏伐他汀钙组相比较，P＜0.05，&&与罗苏伐他汀钙组相比较，P＜0.01

7.结论

烟酸500mg和罗苏伐他汀钙5mg伍用对临床高血脂伴不稳定型心绞痛患者具有协同性的预防治疗效果。而其中缓释片的效果最为理想。

参考文献

[1]Brown WV，Bays HE et al，Efficacy and safety of rosuvastatin compared with pravastatin andsimvaststin in patients with hypercholesterolemia：a randomized，double-blined，52-week trial.

[2]徐叔云，卞如濂，陈修主编.药理学实验方法学(第三版)，人民卫生出版社出版，2002年1月，1201-1202

[3]Al-Shurba4i A，et al.The effect of Acipimox on triacylglycerolmetabolism in rat.Scand J Clin Lab Invest，1990，50(2)：203-208

[4]Crestor(Rosuvastatin)说明书

Claims (13)

1.一种治疗高血脂症的组合物，其特征在于所述的组合物包括：

a)第一个活性成分，它是烟酸(Nicotinic Acid)；

b)第二个活性成分，它选自罗苏伐他汀(Rosuvastatin)、或其可药用的盐、酯或溶剂化物；

c)一种或多种其它可药用的活性成分或者非活性成分。

2.按照权利要求1所述的组合物，其特征在于所述的罗苏伐他汀可以药用的盐为合适的罗苏伐他汀生理可接受的盐，包括衍生自无机的和有机的碱所形成的盐，为钠盐、钙盐、钾盐、镁盐、锌盐、铁盐。

3.按照权利要求1所述的组合物，其特征在于所述的罗苏伐他汀可以药用的酯为合适的罗苏伐他汀生理可接受的酯，包括衍生自脂肪醇、芳香醇、杂环醇所形成的酯，为甲酯、乙酯、烯丙酯、苯酯。

4.按照权利要求1和2所述的组合物，其特征是第二个活性成分为罗苏伐他汀钙。

5.按照权利要求1所述的组合物，其特征是烟酸和罗苏伐他汀钙的重量比(以游离酸计，下同)是：(15～160)∶1。

6.按照权利要求1所述的组合物，其特征是优选烟酸和罗苏伐他汀钙的重量比是：(30～160)∶1。

7.按照权利要求1所述的组合物，其特征是进一步优选烟酸和罗苏伐他汀钙的重量比是：100∶1。

8.按照权利要求1～7所述的组合物制成的医疗用制剂。

9.按照权利要求8所述的医疗用制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸。

10、按照权利要求1～7所述的组合物，用于制备治疗冠心病的药物。

11、按照权利要求1～7所述的组合物，添加其它活性成分用于制备治疗冠心病的药物。

12、按照权利要求1～7所述的组合物，用于制备治疗高血脂伴不稳定型心绞痛的药物。

13、按照权利要求1～7所述的组合物，添加其它活性成分后用于制备治疗高血脂伴不稳定型心绞痛的药物。