CN1588080A - 乌蛇止痒丸的质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种乌蛇止痒丸的质量控制方法，改进修订了乌蛇止痒丸原质量标准的基础上，增加了苦参，蛇床子，牡丹皮，黄柏四种药材的薄层色谱鉴别步骤，修订建立了采用照高效液相色谱法测定黄柏的盐酸小檗碱的含量的方法。本发明的质量控制方法，具有较强的专属性与良好的重现性，有利于实现对乌蛇止痒丸成品质量的有效控制。
Description
技术领域
本发明涉及一种乌蛇止痒丸的质量控制方法。
背景技术
乌蛇止痒丸是一种用于治疗皮肤瘙痒，荨麻疹等属血虚郁热，风湿相搏证者的中药，该产品标准收载于部标准中药成方制剂第十八册中，由乌梢蛇，苦参，蛇床子，牡丹皮，黄柏等11味动植物药材加工制成的浓缩水丸，黄柏具有清热解毒，泻火燥湿的功效，为乌蛇止痒丸的主药之一，其主要有效成份为小檗碱，原标准较简单，鉴别步骤少，而且专属性不强，不足以控制药品的质量。
发明内容
本发明的目的是为了提供一种在改进修订了乌蛇止痒丸原质量标准的基础上，增加苦参，蛇床子，牡丹皮，黄柏四种药材的薄层色谱鉴别步骤，修订建立采用照高效液相色谱法测定黄柏的盐酸小檗碱的含量的方法，具有较强的专属性与良好的重现性，有利于实现对乌蛇止痒丸成品质量的有效控制的乌蛇止痒丸的质量控制方法。
本发明的主要技术方案是，该乌蛇止痒丸的质量控制方法，包含如下步骤：
(1)取乌蛇止痒丸成品，置显微镜下观察：横纹肌纤维黄色或黄棕色，多碎断，边缘较平整，有细密平直或微波状明暗相间的横纹。草酸钙簇晶数个排列成行或成片存在于薄壁细胞中，直径9～45um。草酸钙针晶细小，不规则地充塞于薄壁细胞中；内果皮细胞棕黄色，细胞壁连珠状增厚；纤维鲜黄色，壁厚，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。纤维淡黄色，壁厚，初生壁多少分离，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。含晶细胞的壁不均匀木化增厚。
(2)取乌蛇止痒丸成品40丸(约5g)，磨碎，加乙醇15ml，浸泡过夜；过滤，滤液作为供试品溶液。另取蛇床子素对照品加乙醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液与对照品溶液各2μl点样于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯(30∶1)为展开剂，展开，取去，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3)取(2)项下的供试品溶液，低温浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取黄柏对照药材0.5g，加乙醇10ml，超声处理5分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成0.05mg/ml的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取去，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；
(4)取丹皮酚对照品，加乙醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取(3)项下的供试品溶液与丹皮酚对照品溶液各10μl，以条带状分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(10∶1)为展开剂，展开，取去，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇液，于80℃加热5分钟；供试品色谱中，在与丹皮酚对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5)取乌蛇止痒丸成品40丸(约5g)，磨碎，加氯仿30ml，氨水0.5ml，浸泡过夜，过滤，滤液蒸干；滤渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参碱对照品加氯仿制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液与对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨(9∶1∶0.1)为展开剂，展开，取去，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙红色荧光斑点。
本发明的乌蛇止痒丸的质量控制方法，照高效液相色谱法对乌蛇止痒丸成品中黄柏的有效成分盐酸小檗碱进行含量测定。
本发明的乌蛇止痒丸的质量控制方法，在乌蛇止痒丸成品中黄柏的有效成分盐酸小檗碱进行的含量测定中，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。0.2M磷酸溶液-乙腈(72∶28)为流动相。检测波长为266nm。理论板数按盐酸小檗碱计算应不低于7000。取置五氧化二磷真空干燥器干燥过夜的盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含4μg盐酸小檗碱的溶液，即得对照品溶液。取乌蛇止痒丸成品约0.15g，研碎，精密称定，加10％盐酸甲醇回流提取二次，每次40ml，30min，过滤，合并滤液，蒸干，残渣加水3～4滴润湿，再加无水乙醇使溶解，转移置中性氧化铝柱(100～200目，105℃活化1小时，内径2.0cm，长1.0cm)上，加无水乙醇200ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。按照乌蛇止痒丸成品干燥品计算，每1g含黄柏以盐酸小檗碱计，不少于设定值为合格。
上述步骤并不需要按照先后顺序进行，而且同时还可以进行常规检测，如性状观察。该乌蛇止痒丸成品为黑色的浓缩水丸，除去包衣后显棕褐色，气香，味苦辛。该乌蛇止痒丸成品还应符合(中国药典2000年版一部附录IA)丸剂项下有关的各项规定。
符合以上条件的乌蛇止痒丸成品为合格。
本发明的质量控制方法，改进修订了乌蛇止痒丸原质量标准，增加了苦参，蛇床子，牡丹皮，黄柏四种药材的薄层鉴别，并采用照高效液相色谱法测定黄柏的盐酸小檗碱的含量，提高了质量控制的专属性与良好的重现性，有利于实现对乌蛇止痒丸成品质量的有效控制。
具体实施方式
本实施例的一种乌蛇止痒丸的质量控制方法，包含如下步骤：
(1)取乌蛇止痒丸成品，置显微镜下观察：横纹肌纤维黄色或黄棕色，多碎断，边缘较平整，有细密平直或微波状明暗相间的横纹。草酸钙簇晶数个排列成行或成片存在于薄壁细胞中，直径9～45um。草酸钙针晶细小，不规则地充塞于薄壁细胞中；内果皮细胞棕黄色，细胞壁连珠状增厚；纤维鲜黄色，壁厚，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。纤维淡黄色，壁厚，初生壁多少分离，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。含晶细胞的壁不均匀木化增厚。
(2)取乌蛇止痒丸成品40丸(约5g)，磨碎，加乙醇15ml，浸泡过夜；过滤，滤液作为供试品溶液。另取蛇床子素对照品加乙醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液与对照品溶液各2μl点样于同一硅胶G薄层板上，以苯—乙酸乙酯(30∶1)为展开剂，展开，取去，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3)取(2)项下的供试品溶液，低温浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取黄柏对照药材0.5g，加乙醇10ml，超声处理5分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成0.05mg/ml的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取去，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；
(4)取丹皮酚对照品加乙醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液与对照品溶液各10ml，以条带状分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(10∶1)为展开剂，展开，取去，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇液，于80℃加热5分钟。供试品色谱中，在与丹皮酚对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(5)取乌蛇止痒丸成品40丸(约5g)，磨碎，加氯仿30ml，氨水0.5ml，浸泡过夜，过滤，滤液蒸干；滤渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参碱对照品加氯仿制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液与对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨(9∶1∶0.1)为展开剂，展开，取去，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙红色荧光斑点。
本实施例的乌蛇止痒丸的质量控制方法，照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)对乌蛇止痒丸成品中黄柏的有效成分盐酸小檗碱进行含量测定。
本实施例的乌蛇止痒丸的质量控制方法，在乌蛇止痒丸成品中黄柏的有效成分盐酸小檗碱进行的含量测定中，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。乙腈-0.02M磷酸溶液(28∶72)为流动相。检测波长为266nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于7000。取置五氧化二磷真空干燥器干燥过夜的盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含4μg盐酸小檗碱的溶液，即得对照品溶液。取乌蛇止痒丸成品粉末0.15g，精密称定，加10％盐酸甲醇回流提取二次，每次40ml，30min，过滤，合并滤液，蒸干，残渣加水3～4滴润湿，再加无水乙醇使溶解，转移置中性氧化铝柱(100～200目，105℃活化1小时，内径2.0cm，长1.0cm)上，加无水乙醇200ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。按照乌蛇止痒丸成品干燥品计算每1g含黄柏以盐酸小檗碱计，不少于设定值为合格。本实施例中每1g乌蛇止痒丸成品中含黄柏以盐酸小檗碱计，设定值为0.2mg。
上述步骤并不需要按照先后顺序进行，而且同时还可以进行常规检测，如性状观察。该乌蛇止痒丸成品为黑色的浓缩水丸，除去包衣后显棕褐色，气香，味苦辛。该乌蛇止痒丸成品还应符合(中国药典2000年版一部附录I A)丸剂项下有关的各项规定。
符合以上条件的乌蛇止痒丸成品为合格。
Claims (4)
1.一种乌蛇止痒丸的质量控制方法，其特征在于，包含如下步骤：
(1)取乌蛇止痒丸成品，置显微镜下观察：横纹肌纤维黄色或黄棕色，多碎断，边缘较平整，有细密平直或微波状明暗相间的横纹；草酸钙簇晶数个排列成行或成片存在于薄壁细胞中，直径9～45um。草酸钙针晶细小，不规则地充塞于薄壁细胞中；内果皮细胞棕黄色，细胞壁连珠状增厚；纤维鲜黄色，壁厚，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维；纤维淡黄色，壁厚，初生壁多少分离，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维；含晶细胞的壁不均匀木化增厚；
(2)取乌蛇止痒丸成品40丸(约5g)，磨碎，加乙醇15ml，浸泡过夜；过滤，滤液作为供试品溶液；另取蛇床子素对照品加乙醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液与对照品溶液各2μl点样于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯(30∶1)为展开剂，展开，取去，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(3)取(2)项下的供试品溶液，低温浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取黄柏对照药材0.5g，加乙醇10ml，超声处理5分钟，过滤，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成0.05mg/ml的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取去，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；
(4)取丹皮酚对照品，加乙醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取(3)项下的供试品溶液与丹皮酚对照品溶液各10μl，以条带状分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(10∶1)为展开剂，展开，取去，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇液，于80℃加热5分钟；供试品色谱中，在与丹皮酚对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5)取乌蛇止痒丸成品40丸(约5g)，磨碎，加氯仿30ml，浓氨溶液0.5ml，放置过夜，过滤，滤液蒸干；滤渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加氯仿制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液与对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨(9∶1∶0.1)为展开剂，展开，取去，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙红色荧光斑点。
2.一种乌蛇止痒丸的质量控制方法，其特征是：照高效液相色谱法对乌蛇止痒丸成品中黄柏的有效成分盐酸小檗碱进行含量测定。
3.根据权利要求2所述的乌蛇止痒丸的质量控制方法，其特征是：在乌蛇止痒丸成品中黄柏的有效成分盐酸小檗碱进行的含量测定中，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.2M磷酸溶液(28∶72)为流动相；检测波长为266um；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于7000；取置五氧化二磷真空干燥器干燥过夜的盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含4μg盐酸小檗碱的溶液，即得对照品溶液；取乌蛇止痒丸成品粉末0.15g，精密称定，加10％盐酸甲醇溶液加热回流提取二次，每次40ml，30min，过滤，合并滤液，蒸干，残渣加水3～4滴润湿，再加无水乙醇适量使溶解，转移置中性氧化铝柱(100～200目，105℃活化1小时，内径2.0cm，长1.0cm)上，加无水乙醇200ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；按照乌蛇止痒丸成品干燥品计算每片含黄柏以盐酸小檗碱计，不少于设定值为合格。
4.根据权利要求3所述的乌蛇止痒丸的质量控制方法，其特征是：按照乌蛇止痒丸成品干燥品计算，每1g乌蛇止痒丸成品中含黄柏以盐酸小檗碱计，设定值为0.2mg。
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| PB01 | Publication | ||
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Owner name: GUANGZHOU BAIYUNSHAN ZHONGYI PHARMACEUTICAL CO., L Free format text: FORMER NAME: GUANGZHOU ZHONGYI PHARMACEUTICAL CO., LTD. |
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