CN101596269B - 婴儿素的检测方法 - Google Patents
婴儿素的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101596269B CN101596269B CN2008101144067A CN200810114406A CN101596269B CN 101596269 B CN101596269 B CN 101596269B CN 2008101144067 A CN2008101144067 A CN 2008101144067A CN 200810114406 A CN200810114406 A CN 200810114406A CN 101596269 B CN101596269 B CN 101596269B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- spot
- need testing
- reference substance
- chromatogram
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Abstract
本发明公开了一种婴儿健脾散的质量控制方法，通过对木香、白术、人工牛黄的薄层定性鉴定，能全面地粗略反映药品的质量，通过对木香烃内酯的定量测定，能更加精确的反映药品的质量，从而保证了药品的安全性和有效性，提高了产品质量，便于药品的标准化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种婴儿健脾散的质量控制方法，属于中药技术领域。
背景技术
婴儿健脾散(原名婴儿素)具有健脾、消食、止泻的功效，用于消化不良，乳食不进，腹胀，大便次数增多等症，是儿科临床常用药品。国家标准《中药成方制剂》第6册165页，标准号为WS3-B-1230-92，收载了该制剂的处方、制法及质量控制方法。
该制剂的处方：
白扁豆(炒)400g 山药 125g 鸡内金(炒)120g
白术(炒) 120g 川贝母 8g 木香(炒) 120g
碳酸氢钠 120g 人工牛黄0.25g
该制剂的制备方法为：以上八味，除人工牛黄、碳酸氢钠外，白扁豆等六味粉碎成细粉，将人工牛黄研细，与碳酸氢钠及上述粉未配研，过筛，混匀，即得。
该制剂的质量控制方法为：
(1)取本品置显微镜下观察：种皮栅状细胞成片，无色，，外壁极厚有较多纵沟纹，内壁薄，光辉带位于细胞近外缘。不规则的内壁组织碎片淡黄人色。草酸钙针晶束甚长大。
(2)取本品粉末1g，加水5ml，搅拌，滤过，滤液调至中性，加醋酸氧铀锌试液2滴，发生黄色沉淀。
(3)取本品1g，加水5ml，搅拌，滤过，滤液加硫酸镁试液5滴，不发生沉淀，煮沸数分钟即生成白色沉淀。
(4)取本品5g，加石油醚20ml，加热回流提取10分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml作为供试品溶液。另取白术、木香对照药材各2g，分别加石油醚10ml，振摇提取10分钟滤过，滤液浓缩至约1ml，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(附录57页)试验吸取供试品溶液10μl，作为对药材溶液1μl，分别点于同一硅胶G薄板上，以石油醚-醋酸乙酯-苯(7∶15∶15)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以以5％香草醛硫酸溶液。供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(5)取鉴别(4)项下提取后的样品，加无水乙醇20ml，置60℃水浴中振摇提取30分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取胆酸、猪去氧胆酸对照品，加无水乙醇制成每1ml各含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录57页)试验，吸取上述供试品溶液10μl，对照品溶液1μl，分别点于同上硅胶G薄层板上以氯仿-乙醚-冰醋酸(2∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液105～110℃烘约 10分钟，在紫外光灯(365nm)下检视。供式品色谱中，在于对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
该质量控制方法只对该制剂的成份进行了定性控制，没有对其成分进行定量控制，不能准确反映该制剂的内在质量的变化，不能保证临床应用的安全有效，不利于药品的标准化生产，也不符合现代中药发展的趋势。
发明内容
本发明的目的是提供一种对所述的婴儿健脾散进行质量控制的方法，以保证药品的安全性和有效性，提高产品质量，便于药品的标准化、现代化生产。
为了达到上述目的，本发明提供了一种婴儿健脾散的质量控制方法，该方法包括下列a、b、c、d四种检测：
a.木香的定性检测
取婴儿健脾散，加石油醚，振摇提取，静置，取上清液作为供试品溶液；另取木香对照药材，加石油醚，振摇提取，静置，上清液作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄板上，以石油醚-乙酸乙酯混合液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
b.白术的定性检测
取婴儿健脾散，加石油醚，振摇提取，静置，取上清液作为供试品溶液；另取白术对照药材，加石油醚，振摇提取，静置，取上清液作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄板上，以石油醚-乙酸乙酯混合液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液；105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
c.人工牛黄的定性检测
取婴儿健脾散，加乙醇，超声提取，取上清液作为供试品溶液；另取胆酸对照品适量，加无水乙醇制成对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸混合液的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
d.木香烃内酯的定量检测
照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定；
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水为流动相；检测波长为225nm；理论板数按木香烃内酯峰计应不低于2000；
对照品溶液的制备取木香烃内酯对照品，精密称定，加甲醇溶解，即得；
供试品溶液的制备取婴儿健脾散，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，称定重量，浸泡过夜，超声处理，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜过滤，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每克含木香以木香烃内酯(C15H20O2)计，不得少于0.4mg。
该制剂的质量控制方法还可以包含下述四种检测：
a.木香的定性检测
取婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚5ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液；另取木香对照药材0.1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚1ml，振摇提取10分钟，静置，上清液作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄板上，以10∶1比例的沸点在30～60℃范围的石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
b.白术的定性检测
取婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚5ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液；另取白术对照药材0.1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚1ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄板上，以50∶1比例的沸点在60～90℃范围的石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液；105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
c.人工牛黄的定性检测
取婴儿健脾散5g，加乙醇35ml，超声提取30分钟，取上清液作为供试品溶液；另取胆酸对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20∶25∶3∶2比例的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸上层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
d.木香烃内酯的定量检测
照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定；
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以60∶40比例的甲醇-水为流动相；检测波长为225nm；柱温为30℃；理论板数按木香烃内酯峰计应不低于2000；
对照品溶液的制备取木香烃内酯对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并制成每1ml中约含木香烃内酯70μg的溶液，即得；
供试品溶液的制备取婴儿健脾散约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，浸泡过夜，在功率250W，频率33kHz的条件下超声处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜过滤，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl与供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每克含木香以木香烃内酯(C15H20O2)计，不得少于0.4mg。
由于婴儿健脾散处方中的木香含有的木香烃内酯，具有松弛平滑肌、解痉、抗菌等作用，是婴儿健脾散的有效成分。但该有效成分在加工或存储过程中处理不当易发生挥发、分解等物理化学变化，影响药品的疗效，单纯的定性检测往往不能反映这些变化，而定量检测，特别是将木香烃内酯这样易挥发易分解成分作为指标成份进行定量检测，能更加精确的反映药品质量的优略，便于生产工艺的改进和药品质量的监测。本发明对木香、白术、胆酸的定性检测，简便易行，能全面地粗略反映药品的质量。该质量控制方法将定性检测与定量检测结合应用，可以从广度和精度上更好的控制药品质量。
本发明木香和白术的定性检测中，用展开剂“石油醚-乙酸乙酯”代替了“石油醚-醋酸乙酯-苯”避开了对环境污染较大的化学试剂苯的使用；胆酸的定性检测中，用展开剂“正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸”代替了“氯仿-乙醚-冰醋酸”避开了对环境污染较大的化学试剂氯仿的应用。以上措施，减少了对周围环境的化学污染，有利于环境的保护。
具体实施方式
下述实验例和实施例进一步说明但不限于本发明。
实验例1木香定性检测实验
1.供试品溶液制备方法的确定
方法a.取婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚5ml，振摇提取5分钟，静置，取上清液作为供试品溶液。
方法b.取婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚5ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液。
方法c.取婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚10ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液。
方法d.取婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚10ml，振摇提取5分钟， 静置，取上清液作为供试品溶液。
另取木香对照药材0.1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚1ml，振摇提取10分钟，静置，上清液作为对照药材溶液。
吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄板上，以10∶1比例的石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热，结果见下表。
表1.供试品溶液制备方法的确定
| 组别 | a | b | c | d |
| 展开效果 | 斑点分离不好，有 干扰 | 斑点较清晰，分离 较好 | 斑点较清晰，分离 较好 | 斑点不清晰，分离 不好 |
由上述结果可以看出，可以选择方法b、c作为该供试品溶液的制备方法，为了节省溶剂，优选方法b即可。
2.本检测方法中展开剂用量配比的优选：
取上述供试品溶液、对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别以下述比例的展开剂展开：石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(6∶1)、石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(8∶1)、石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(10∶1)、石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(12∶1)、石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(14∶1)，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热，观察供试品色谱中，在与木香对照药材色谱相应的位置上斑点显色情况。结果见表2
表2展开剂优选实验结果
| 展开剂配比 | 6∶1 | 8∶1 | 10∶1 | 12∶1 | 14∶1 |
| 展开效果 | 分离不好， 有托尾现象 | 分离不好， 有托尾现象 | 斑点清晰， 分离较好 | 主斑点分离 不好 | 主斑点分离 不好 |
从表2可以看出展开剂为石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(10∶1)时，供试品溶液展开效果最好，没有出现拖尾、主斑点分离不好等现象。
3.本检测方法中样品溶液点样量的优选：
分别取供试品溶液各0.5μl、1.0μl、1.5μl、2.0μl、2.5μl，点于同一硅胶G薄层板上，以10∶1比例的石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热，观察供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表3：
表3样品溶液点样量优选实验结果
| 点样量 | 0.5μl | 1.0μl | 1.5μl | 2.0μl | 2.5μl |
| 效果 | 供试品在 相应对照 品位置无 斑点 | 供试品在相 应对照品位 置斑点显色 很浅 | 供试品在相 应对照品位 置斑点显色 较浅 | 供试品在相 应对照品位 置斑点显色 清晰 | 供试品在相 应对照品位 置斑点分离 不好 |
从表3可以看出供试品点样量在2.0μl时，在薄层板上显色效果较好，适合试验要求。
综上所述，本制剂中木香的定性检测方法为：
取婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚5ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液。另取木香对照药材0.1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚1ml，振摇提取10分钟，静置，上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄板上，以10∶1比例的石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实验例2.白术的定性检测实验
1.供试品溶液制备方法的确定
方法a.取婴儿健脾散1g，用乙醚10ml，加热回流20分钟，放冷，滤过，滤液挥干溶剂，残渣加乙酸乙醇0.5ml，作为供试品溶液。
方法b.取婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚5ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液。
方法c.取婴儿健脾散1g，加水10ml使溶解，加石油醚(30～60℃)10ml，振摇提取，弃去石油醚液，水层加乙醚提取二次，每次10ml，合并乙醚液，挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。
方法d.取婴儿健脾散1g，加正己烷10ml。超声处理15分钟，滤过，滤液低温蒸干，残渣加正己烷1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取白术对照药材0.1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚1ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液。
吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄板上，以50∶1比例的石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液。105℃加热，结果见下表。
表4.供试品溶液制备方法的确定
| 组别 | a | b | c | d |
| 展开效果 | 供试品色谱 中，与对照药材色 谱相应的位置上， 未显示斑点。 | 供试品色谱中，与 对照药材色谱相 应的位置上，显示 相同颜色的斑点。 斑点较清晰，分离 较好 | 供试品色谱中，与 对照药材色谱相 应的位置上，斑点 不清晰，分离不好 | 供试品色谱中，与 对照药材色谱相 应的位置上，斑点 不清晰，分离不好 |
由上述结果可以看出，选择方法b作为该供试品溶液的制备方法。
4.本检测方法中展开剂用量配比的优选：
取上述供试品溶液、对照药材溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别以下述比例的展开剂展开：石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(30∶1)、石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(40∶1)、石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(50∶1)、石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(60∶1)、石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(70∶1)，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热，观察供试品色谱中，在与白术对照药材色谱相应的位置上斑点显色情况。结果见表5
表5展开剂优选实验结果
| 展开剂配比 | 30∶1 | 40∶1 | 50∶1 | 60∶1 | 70∶1 |
| 展开效果 | 供试品色谱 中，与对照药 材色谱相应的 位置上，斑点 分离不好，有 托尾现象 | 供试品色谱 中，与对照药 材色谱相应的 位置上，斑点 分离不好，有 托尾现象 | 供试品色谱 中，与对照药 材色谱相应的 位置上，斑点 清晰，分离较 好 | 供试品色谱 中，与对照药 材色谱相应的 位置上，未显 示斑点 | 供试品色谱 中，与对照药 材色谱相应的 位置上，未显 示斑点 |
从表2可以看出展开剂为石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(50∶1)时，供试品溶液展开效果最好，没有出现拖尾、主斑点分离不好等现象。
5.本检测方法中样品溶液点样量的优选：
分别取供试品溶液各0.5μl、1.0μl、1.5μl、2.0μl、2.5μl，点于同一硅胶G薄层板上，以10∶1比例的石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热，观察供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表6：
表6样品溶液点样量优选实验结果
| 点样量 | 0.5μl | 1.0μl | 1.5μl | 2.0μl | 2.5μl |
| 效果 | 供试品在 相应对照 品位置无 斑点 | 供试品在相 应对照品位 置斑点显色 清晰 | 供试品在相 应对照品位 置斑点显色 较浅 | 供试品在相 应对照品位 置斑点分离 不好 | 供试品在相 应对照品位 置斑点分离 不好 |
从表3可以看出供试品点样量在2.0μl时，在薄层板上显色效果较好，适合试验要求。
综上所述，本制剂中白术的定性检测方法为：取婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚5ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液。另取白术对照药材0.1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚1ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄板上，以50∶1比例的石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液。105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实验例3.人工牛黄的定性检测试验
1.供试品溶液制备方法的确定
方法a.取婴儿健脾散5g，加乙醇35ml，超声提取10分钟，取上清液作为供试品溶液。
方法b.取婴儿健脾散5g，加乙醇35ml，超声提取20分钟，取上清液作为供试品溶液。
方法c.取婴儿健脾散5g，加乙醇35ml，超声提取30分钟，取上清液作为供试品溶液。
方法d.取婴儿健脾散5g，加乙醇35ml，超声提取40分钟，取上清液作为供试品溶液。
另取胆酸对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。
吸取上述供试品溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20∶25∶3∶2比例的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸上层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，105℃加热，结果见下表。
表7.供试品溶液制备方法的确定
| 组别 | a | b | c | d |
| 展开效果 | 供试品色谱中，与 对照药材色谱相 应的位置上，未显 示斑点。 | 供试品色谱中，与 对照药材色谱相 应的位置上，斑点 颜色很浅，不清晰 | 供试品色谱中，与 对照药材色谱相 应的位置上，显示 相同颜色的斑点。 斑点较清晰，分离 较好 | 供试品色谱中，与 对照药材色谱相 应的位置上，斑点 分离不好，有托尾 现象。 |
由上述结果可以看出，选择方法c作为该供试品溶液的制备方法。
2.本检测方法中展开剂用量配比的优选：
吸取上述供试品溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别以下述比例的展开剂展开：正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸(10∶35∶3∶2)d的上层液，正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸(15∶30∶3∶2)d的上层液，正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸(20∶25∶3∶2)d的上层液，正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸(25∶20∶3∶2)d的上层液，正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸(30∶15∶3∶2)d的上层液，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，105℃加热，观察供试品色谱中，在与胆酸对照品色谱相应的位置上斑点显色情况。结果见表8
表8展开剂优选实验结果
| 展开剂配比 (正己烷-乙 酸乙酯-甲醇 -醋酸) | 10∶35∶3∶2 | 15∶30∶3∶2 | 20∶25∶3∶2 | 25∶20∶3∶2 | 30∶15∶3∶2 |
| 展开效果 | 供试品色谱 中，与对照品 色谱相应的位 置上，斑点分 离不好，有托 尾现象 | 供试品色谱 中，与对照品 色谱相应的位 置上，斑点分 离不好，有托 尾现象 | 供试品色谱 中，与对照品 色谱相应的位 置上，斑点清 晰，分离较好 | 供试品色谱 中，与对照品 色谱相应的位 置上，斑点颜 色很浅 | 供试品色谱 中，与对照品 色谱相应的位 置上，未显示 斑点 |
从表2可以看出展开剂为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸(20∶25∶3∶2)时，供试品溶液展开效果最好，没有出现拖尾、主斑点分离不好等现象。
3.本检测方法中样品溶液点样量的优选：
分别取供试品溶液各6μl、8μl、10μl、12μl、14μl，对照品溶液2μl点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸(20∶25∶3∶2)的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，105℃加热，观察供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，斑点显色情况。结果见表9：
表9样品溶液点样量优选实验结果
| 点样量 | 6μl | 8μl | 10μl | 12μl | 14μl |
| 效果 | 供试品在 相应对照 品位置斑 | 供试品在相 应对照品位 置斑点显色 | 供试品在相 应对照品位 置斑点显色 | 供试品在相 应对照品位 置斑点分离 | 供试品在相应 对照品位置斑 点分离不好， |
| 点不清晰 | 较浅 | 清晰，分离较 好 | 不好，有托 尾现象 | 有托尾现象 |
从表3可以看出供试品点样量在10μl时，在薄层板上显色效果较好，适合试验要求。
综上所述，本制剂中胆酸的定性检测方法为：取婴儿健脾散5g，加乙醇35ml，超声提取30分钟，取上清液作为供试品溶液。另取胆酸对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20∶25∶3∶2比例的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸上层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实验例4.木香烃内酯的定量检测试验
1.仪器与药品
检测仪器：岛津公司SPD-10Avp型高效液相色谱仪
色谱柱：迪玛(C184.6×150mm，5μm)
流动相：甲醇-水(60∶40)
检测波长：225nm 流速：1.0ml/min 柱温：30℃
对照品：木香烃内酯购于中国药品生物制品检定所批号：111524-200503
色谱与系统条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(60∶40)为流动相；检测波长225nm。理论板数按木香烃内酯峰计应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取木香烃内酯对照品适量，加甲醇溶解并制成每1ml中约含木香烃内酯70μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取婴儿健脾散约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，放置过夜，超声处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜过滤，即得。
2.含量测定方法考察：
(1)稳定性试验
取供试品溶液，分别于配制后0、2、4、6、12、24小时，依法测定，结果表明，其在24小时内基本稳定，结果见表10：
表10稳定性试验结果
(2)线性关系考察
取对照品溶液木香烃内酯0.067mg/ml，分别精密吸取1、2、4、6、8和10μl注入高效液相色谱仪，并绘制标准曲线，结果见附图5和表12，木香烃内酯在0.067～0.670μg间呈线性关系，其回归方程为：Y＝2E+06X-1500.7(r＝0.9999)。
表11线性范围数据结果
| 进样量(μg) | 0.067 | 0.134 | 0.268 | 0.402 | 0.536 | 0.670 |
| 峰面积 | 128537 | 249822 | 500829.5 | 767137 | 1016484 | 1266030 |
(3)精密度试验
精密吸取供试品溶液10μl，重复进样5次，求得相对标准偏差＜2％，符合要求，结果见表12：
表12精密度试验结果
(4)重现性试验
按供试品的制备方法，制备同一批号样品5份，对每份进行测定，求得相对标准偏差＜2％，结果见表13：
表13重现性试验结果
(5)回收率试验
精密称取已知含量的同一批号的样品1g，再分别精密加入对照品溶液5ml(浓度为0.168mg/mL)，再精密加入甲醇45ml，按正文供试品溶液的制备方法操作，依法测定，计算其回收率，结果见表14：
表14回收率试验结果
结论：由试验结果可以看出，本品的回收率符合规定。
根据以上数据，将含量限度定为：本品每克含木香以木香烃内酯(C15H20O2)计，不得少于0.4mg。
从以上试验结果可以看出，本发明所采用的含量测定方法其线性关系、稳定性、精密度、重现性、回收率均良好，能够有效控制婴儿健脾散中木香烃内酯的含量。
下述实施例均能够实现上述实验例所述的效果
实施例1
称取下列重量份(kg)的原料药：
白扁豆(炒)40 山药 12.5 鸡内金(炒)12
白术(炒) 12 川贝母 0.8 木香(炒) 12
碳酸氢钠 12 人工牛黄 0.025
该制剂的制备方法为：以上八味，除人工牛黄、碳酸氢钠外，白扁豆等六味粉碎成细粉，将人工牛黄研细，与碳酸氢钠及上述粉未配研，过筛，混匀，即得。
实施例2-3
照实施例1相同的处方量及制法制备2批中试样品。
质量控制方法：
a.木香的定性检测
分别取实施例1-3的婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚5ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液。另取木香对照药材0.1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚1ml，振摇提取10分钟，静置，上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄板上，以10∶1比例的石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
b.白术的定性检测
分别取实施例1-3的婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚5ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液。另取白术对照药材0.1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚1ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄板 上，以50∶1比例的石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液。105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
c.人工牛黄的定性检测
分别取实施例1-3的婴儿健脾散5g，加乙醇35ml，超声提取30分钟，取上清液作为供试品溶液。另取胆酸对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20∶25∶3∶2比例的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸上层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
d.木香烃内酯的定量检测
照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以60∶40比例的甲醇-水为流动相；检测波长为225nm；柱温为30℃。理论板数按木香烃内酯峰计应不低于2000。
对照品溶液的制备取木香烃内酯对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并制成每1ml中约含木香烃内酯70μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备分别取实施例1-3的婴儿健脾散约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，浸泡过夜，在功率250W，频率33kHz的条件下超声处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜过滤，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl与供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。测定结果如下：
表15实施例1-3的木香烃内酯含量测定结果
另外，也以处方原料药的比例和制备工艺制成了不含木香、白术和人工牛黄的阴性样品，按照质量控制方法中供试样品的制备方法制备了阴性对照溶液，在硅胶G薄层板上，所述的3种阴性样品在相应位置上未出现斑点。
经反复试验，该质量控制方法专属性、重复性好，因此做为婴儿健脾散的质量控制方法，对婴儿健脾散进行质量控制。
Claims (1)
1.婴儿素的检测方法，所述的婴儿素收载于卫生部药品标准中药成方制剂第6册165页，标准号为WS3-B-1230-92，其特征在于该检测方法包含下列a、b、c、d四种检测：
a.木香的定性检测
取婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚5ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液；另取木香对照药材0.1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚1ml，振摇提取10分钟，静置，上清液作为对照药材溶液；照薄层色谱法中国药典2005年版一部附录VIB试验吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄板上，以10∶1比例的沸点在30～60℃范围的石油醚—乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
b.白术的定性检测
取婴儿健脾散1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚5ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液；另取白术对照药材0.1g，加入沸点在30～60℃范围的石油醚1ml，振摇提取10分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄板上，以50∶1比例的沸点在60～90℃范围的石油醚—乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液；105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
c.人工牛黄的定性检测
取婴儿健脾散5g，加乙醇35ml，超声提取30分钟，取上清液作为供试品溶液；另取胆酸对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20∶25∶3∶2比例的正己烷—乙酸乙酯—甲醇—醋酸上层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
d.木香烃内酯的定量检测
照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定；
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以60∶40比例的甲醇—水为流动相；检测波长为225nm；柱温为30℃；理论板数按木香烃内酯峰计应不低于2000；
对照品溶液的制备 取木香烃内酯对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并制成每1ml中约含木香烃内酯70μg的溶液，即得；
供试品溶液的制备 取婴儿健脾散约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，浸泡过夜，在功率250W，频率33kHz的条件下超声处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜过滤，即得；
测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl与供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每克含木香以木香烃内酯计，不得少于0.4mg。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008101144067A CN101596269B (zh) | 2008-06-02 | 2008-06-02 | 婴儿素的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008101144067A CN101596269B (zh) | 2008-06-02 | 2008-06-02 | 婴儿素的检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101596269A CN101596269A (zh) | 2009-12-09 |
| CN101596269B true CN101596269B (zh) | 2011-08-17 |
Family
ID=41417987
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2008101144067A Active CN101596269B (zh) | 2008-06-02 | 2008-06-02 | 婴儿素的检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101596269B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104407092A (zh) * | 2014-08-29 | 2015-03-11 | 湖南九典制药有限公司 | 一种具有开胃健脾功效的中药组合物的质量检测方法 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101816682A (zh) * | 2010-05-10 | 2010-09-01 | 贵州神奇药业股份有限公司 | 氨酚咖黄烷胺片的质量检测方法 |
| CN102716457A (zh) * | 2012-06-28 | 2012-10-10 | 陈慧婷 | 治疗鼓胀的白术中药制剂及制备方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1084194C (zh) * | 1998-03-03 | 2002-05-08 | 四川三九梓橦宫制药有限公司 | 一种制备超微婴儿素的方法 |
-
2008
- 2008-06-02 CN CN2008101144067A patent/CN101596269B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1084194C (zh) * | 1998-03-03 | 2002-05-08 | 四川三九梓橦宫制药有限公司 | 一种制备超微婴儿素的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 李竞.婴儿素质量控制初探.《中成药》.1987,(第09期),12. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104407092A (zh) * | 2014-08-29 | 2015-03-11 | 湖南九典制药有限公司 | 一种具有开胃健脾功效的中药组合物的质量检测方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101596269A (zh) | 2009-12-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101167788B (zh) | 一种用于久病虚损,气阴不足的贞芪扶正中药制剂质控方法 | |
| CN102854281B (zh) | 一种无糖型强力枇杷露的检测方法 | |
| CN101444606A (zh) | 一种六味安消中药制剂的质量控制方法 | |
| CN103808842B (zh) | 一种中药制剂护肝滴丸的质量检测方法 | |
| CN102335402A (zh) | 一种中药制剂补中益气合剂的检测方法 | |
| CN107315061B (zh) | 一种治疗妇女子宫出血的茜芷中药制剂的检测方法 | |
| CN101408531A (zh) | 一种四季三黄丸的质量检测方法 | |
| CN101982189A (zh) | 丹参舒心胶囊的检测方法 | |
| CN101596269B (zh) | 婴儿素的检测方法 | |
| CN106198810B (zh) | 一种具有治疗肿瘤放化疗骨髓抑制的中药组合物的质量检测方法 | |
| CN104407092A (zh) | 一种具有开胃健脾功效的中药组合物的质量检测方法 | |
| CN102068549B (zh) | 中药制剂清热凉血丸的检测方法 | |
| CN103822888B (zh) | 赶黄草的质量检测方法 | |
| CN101632741A (zh) | 健儿清解液的质量控制方法 | |
| CN101543545B (zh) | 治疗鼻炎的中药制剂及其质量检测方法 | |
| CN100369614C (zh) | 复方胆通固体制剂的质量控制方法 | |
| CN102707006B (zh) | 穿破石配方颗粒的质量检测方法 | |
| CN101703610A (zh) | 清脑降压片质量检测方法 | |
| CN102068656A (zh) | 一种中药制剂羊痫疯癫丸的质量控制方法 | |
| CN108037234B (zh) | 一种鸡骨草肝炎颗粒的质量检测方法 | |
| CN106896180A (zh) | 一种补肾填精口服液的检测方法 | |
| CN101690756B (zh) | 胆炎康胶囊的检测方法 | |
| CN101700306A (zh) | 一种乳癖消制剂的质量控制方法 | |
| CN100432670C (zh) | 一种中药制剂金嗓开音丸的质量检测方法 | |
| CN108037200B (zh) | 一种滋肾宁神丸的质量检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |