CN1541108A - 含有至少两种效价的疫苗组合物,其中一种效价是添加了助剂的,另一种效价是未添加助剂的 - Google Patents

含有至少两种效价的疫苗组合物,其中一种效价是添加了助剂的,另一种效价是未添加助剂的 Download PDF

Info

Publication number
CN1541108A
CN1541108A CNA028156455A CN02815645A CN1541108A CN 1541108 A CN1541108 A CN 1541108A CN A028156455 A CNA028156455 A CN A028156455A CN 02815645 A CN02815645 A CN 02815645A CN 1541108 A CN1541108 A CN 1541108A
Authority
CN
China
Prior art keywords
polysaccharide
vaccine
vaccine combination
tire
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CNA028156455A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1282486C (zh
Inventor
A
A·弗朗松
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sanofi Pasteur SA
Original Assignee
Aventis Pasteur SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=8866367&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CN1541108(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Aventis Pasteur SA filed Critical Aventis Pasteur SA
Publication of CN1541108A publication Critical patent/CN1541108A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1282486C publication Critical patent/CN1282486C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
    • A61K39/0275—Salmonella
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32411—Hepatovirus, i.e. hepatitis A virus
    • C12N2770/32434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及一种疫苗组合物，该组合物含有两种效价：(i)第一效价，它与氢氧化铝一起添加，(ii)含有细菌荚膜多糖的第二效价，其多糖含有一个或多个O－乙酰基基团，并且由于保护化合物的存在它不吸附在氢氧化铝上，该保护化合物可以是磷酸盐、柠檬酸盐或碳酸盐，并且它阻止这种吸附。第一效价可以是任何疫苗效价。根据一种特别方式，疫苗组合物含有(i)氢氧化铝吸附的甲型肝炎效价和(ii)由伤寒沙门氏菌荚膜的Vi多糖构成的伤寒效价。

Description

含有至少两种效价的疫苗组合物，其中一种效价 是添加了助剂的，另一种效价是未添加助剂的
本发明的主题具体地是一种稳定化的甲型肝炎/伤寒(HA-Vi)双效价疫苗组合物，其中Vi效价在至少约24小时期间保持其免疫能力。
甲型肝炎和伤寒是两种已经有疫苗的疾病。世界上卫生条件还远未达到最理想的地区，都会发现有这两种疾病。由于各自传染物共同地具有同样的传播途径(口-粪便途径)，还由于这些疾病的流行地区覆盖面非常宽阔，所以将这两种效价合并在同一产品中似乎是很有意义的。特别地，很容易理解在旅行者用的疫苗范围内，HA-Vi结合要比分开服用两种单效价疫苗HA和Vi更具吸引力。
为了证明HA和Vi效价是相容的，特别在无毒、免疫能力和稳定性方面是相容的，已经进行了许多研究工作。这些研究使用了由市场上已经有的单效价疫苗制备的HA-Vi组合，它们主要在于两个方面：一方面，将SmithKline Beecham Biological(Rixensart，比利时)生产的HavrixTM(HA)和(Vi)单效价疫苗组合进行了这些研究，另一方面，将Aventis Pasteur(里昂，法国)生产的AvaximTM(HA)和TyphimViTM(Vi)单效价疫苗组合进行了这些研究。
在这两组研究中，HA单效价疫苗由失活的甲型肝炎病毒构成，并且吸附在氢氧化铝上。同样地，伤寒单效价疫苗由仍是未添加助剂的伤寒沙门氏菌荚膜的多糖构成。最后，以同样方式，将这些相应的单效价疫苗(这些单效价疫苗是以液体形式销售的)简单混合生产出双效价组合。因此，一定剂量的AvaximTM和一定剂量的Typhim ViTM混合在一起得到一定剂量的HA-Vi双效价组合。
在没有实施临床试验范围内的注射之前，使用构建的组合曾进行了不到二十个月的两组研究工作。这些研究工作表明，这些双效价组合与相应的单效价是等效的，特别在免疫能力方面。于是，SmithKlineBeecham Biological的双效价组合满足了英国当局的要求，因此已经准许进入这个国家的市场。但是，这种准入有一个有效期确定为在生产后12个月的限制。
在疫苗领域内，特别考虑到在分配前控制分批所需要的时间时，有效期为12个月是不够的。确定有效期为24个月或更好地为36个月大大有利于这些批疫苗推向市场。
然而，在HA-Vi组合的情况下，本申请人发现在生产日期过16-18个月后，Vi疫苗逐渐失去其免疫能力，并且提出一种有关这种不稳定性根源的假设。事实上，具有Vi免疫原性特征的Vi多糖O-乙酰基团随着时间推移会水解，特别在碱性条件下更是如此。这种水解被认为是造成Vi多糖免疫能力下降的原因，这种水解是由于组分Vi吸附在氢氧化铝上所致，而氢氧化铝是作为HA效价添加剂存在于双效价组合中。单效价疫苗彼此一混合，Vi效价就立刻吸附在铝凝胶上。这种吸附导致Vi多糖保持在碱性环境中。事实上，氢氧化铝带正电荷的吸引介质的OH-离子，这样造成在铝凝胶微环境中pH升高，在吸附后Vi就定位在铝凝胶上。至于O-乙酰基团的水解，这种水解是一种非常缓慢的现象时，其作用是在约16-18个月后才真正觉察出来。
本申请人不仅证明了Vi效价随着时间推移的不稳定性问题，而且本申请人提出一种解决方法，该方法在于在双效价组合中再添加一种化合物，它阻止铝凝胶吸附Vi，同时保持以添加形式的HA效价。有利地，这种化合物可以是一种阴离子，例如磷酸根或柠檬酸根。
在其更一般的教导中，本发明因此涉及一种疫苗组合物，该组合物含有至少两个效价：(i)与氢氧化铝一起添加的第一效价和(ii)含有细菌荚膜多糖的第个二效价，该多糖含有一个或多个O-乙酰基团，并且由于添加了第一效价，氢氧化铝不吸附第二效价，这是由于附加化合物的存在将阻止氢氧化铝吸附第二效价，不干扰第一效价的吸附。
根据一种有利的实施方式，因保护阴离子化合物的存在，可阻止吸附第二效价，其条件是它提供为最终疫苗使用所需要的所有安全保证。这种保护化合物可以是磷酸盐、柠檬酸盐或碳酸盐。还可能使用不同阴离子的组合，例如磷酸根与柠檬酸根的组合。作为典型提示，明确指出特别地可以用含有磷酸一钾、磷酸二钠和氯化钠的溶液提供磷酸根。
使用保护化合物尤其能够长时间地(24个月或24个月以上)，优选地在正常储存温度或更高(例如37℃)温度下在保存过程中稳定第二效价的抗原活性。采用不同的技术，在生产该组合物时测量这种活性，然后随着时间推移或在生产日期过去至少24个月再进行同样的测量，比较所得到的这些结果就可以估算出免疫活性的稳定性。当不能确定数字化数据彼此间在统计上有不同时，则应该认为免疫活性是稳定的。采用ELISA技术，使用在疫苗领域中通常使用的技术，可以实施抗原免疫活性的测定。
第一效价可以是任何疫苗效价，没有类型或结构的限制，其条件当然是需要其添加。特别可以列举甲型肝炎效价(HepA或HA)、乙型肝炎效价(HepB)和肺炎球菌效价。这种第一效价可以由失活病毒构成，失活病毒例如为失活的HA病毒或失活的脊髓灰质炎病毒；减弱的病毒；病毒或细菌亚单位抗原，例如乙型肝炎病毒的表面抗原，白喉或破伤风类毒素。
第二效价按照定义是由共轭或未共轭多糖构成，它们在其重复单元中含有一个或多个O-乙酰基团。伤寒沙门氏菌的荚膜多糖(还称之Vi多糖)和脑膜炎奈瑟球菌群A的荚膜多糖满足这个定义。在这些情况下，因此可以谈到Vi效价，或伤寒效价和甲型脑膜炎(meningo A)效价。
关于“细菌荚膜多糖”，应该理解是由具有荚膜多糖特征的重复单元链构成的多糖，无论其大小，也与其辅助修饰无关。在本发明组合物中的多糖重复单元必须包括至少一个O-乙酰基团。
为了本发明的目的，根据完全常规的技术由源细菌出发可以得到纯化形式的多糖。按照需要，该多糖可以是(i)片段的或非片段的和(ii)与载体多肽共轭或未共轭的，例如白喉或破伤风类毒素。
在更特定的范围内，本发明的目的是一种疫苗组合物，它含有(i)与氢氧化铝一起添加的HA效价和(ii)由Vi多糖构成的伤寒效价；其中Vi效价未被氢氧化铝吸附的组合物。
为了本发明的目的，可以通过用氢氧化铝进行沉淀，或者通过用氢氧化铝吸附的方法来添加第一效价。
用于添加第一效价的氢氧化铝可以是纯氢氧化铝(即只含有Al3+离子和氢氧根的铝化合物)，或以这个名称为人们所知的任何氢氧化铝，即使从化学观点来看，它们不是只由氢氧化铝构成。因此还可能涉及混合的铝化合物，例如以碱式磷酸铝或碱式硫酸铝名称表示的铝化合物。一般地，可能涉及特别地含有羟基基团的铝化合物。作为典型说明，可列举Superfos Biosector公司销售的AlhydrogelTM氢氧化铝。
为阻止吸附第二效价，同时保持呈添加形式的第一效价，应该添加足够数量的磷酸根、柠檬酸根或碳酸根离子(保护化合物)。这个数量取决于各种因素，其中包括第一效价的数量与性质，其添加方式，氢氧化铝的数量与性质，以及第二效价的数量。为了一旦确定了其它因素就可决定用于阻止第二效价吸附的化合物的适当量，疫苗领域里的技术人员可完全直接考虑这些制约因素，以便氢氧化铝被磷酸根离子饱和，同时保持呈添加形式的第一效价。
但是，明确指出市售的疫苗通常含有0.6-1.5mg铝/ml。在市售的Hep A疫苗中，只要氧化铝凝胶的吸附位点远未饱和，就会发现与HepA抗原相比，通常剂量(以铝量表示)的氧化铝凝胶大大过量。因此，实际上，只是铝量似乎是确定应该存在的保护化合物数量的决定因素。
对于含有0.3mg呈氢氧化铝形式和0.5ml体积的铝的本发明组合物，再添加约20mM磷酸根是合适的。如果铝为这同样体积，而量加倍，再添加两倍磷酸根，即40mM是合适的。但是对于1ml体积含有0.6mg铝的本发明组合物，20mM磷酸根就足够了。
作为说明，指出本发明的双效价疫苗体积为0.5ml时可以含有(i)160抗原单位或1440 ELISA单位的失活的甲型肝炎病毒，该病毒吸附在(ii)含有0.3mg铝的氢氧化铝上；(iii)0.025mg Vi多糖；以及(iv)20mM磷酸根。
上述抗原单位和ELISA单位分别是Aventis Pasteur公司和SmithKline Beecham Biological公司(van Hoecke等人，J.Travel.Med.(1998)5：116和André等人，inProg.Med.Virol.，Melnick JLEd，Basel，Karger(1990)37：72)，借助专有标准的ELISA试验所确定的单位。不可能是另外的，因为没有Hep A疫苗的国际标准化标准。
本发明的组合物有利地呈液体形式，疫苗剂量有利地配制成0.5-1ml的体积，其中包括边界。
本发明的组合物可以这样制备：
(i)往含有除伤寒效价之外的通过氢氧化铝添加的效价的制剂中添加磷酸根、柠檬酸根或碳酸根离子；
(ii)把在步骤(i)得到的制剂与含有伤寒效价的制剂混合。
实施例：制备本发明的HA-Vi组合物
A-制备吸附的HA组分
一批失活HA病毒的抗原效价是885U ELISA/ml，把99ml这种HA病毒与5.94ml 25％2-苯氧基-乙醇混合。然后均化15分钟，然后用Millipak 40MPGL 04SH2过滤器过滤制剂。过滤后，得到95ml效价为835U ELISA/ml的制剂。
往这种制剂中添加47.5ml含有3.14mg铝/ml的氧化铝凝胶。用48m l40mM PBS(磷酸盐缓冲液)补足。在5℃下搅拌一夜(18小时)，以便HA组分吸附在氧化铝凝胶上。pH是7.28。
B-制备浓缩10倍的Vi多糖溶液
根据Gotschlich等人，Prog.Immunobiol.Standard(1972)5：485描述的方法制备Vi多糖粉末。在装有16.64mg Vi(9.5g％残留湿度，即15.06mg干重)的30ml瓶中，在连续搅拌下，逐步倒入25.1ml为注射制备的蒸馏水(ppi)。继续在5℃下搅拌24小时，以便使多糖完全溶解。用0.22微米Millex GV SLGV 025过滤器过滤这种制剂。用5ml ppi蒸馏水洗涤该过滤器。最后体积因此是30.1ml。
C-制备HAVi双效价疫苗
往62ml在步骤A得到的制剂(HA)中添加10.6ml 94mM磷酸盐溶液，然后添加8.1ml在步骤B中得到的制剂(Vi)。这样得到疫苗的特征如下：
最后磷酸盐的浓度：20mM
pH：7.3
摩尔渗透压浓度：578mosm/kg。
然后把这种称之为P2制剂的制剂再分成剂量0.5ml的份。
同时还制备了两种其它双效价组合物P2′和P2″，它们不再含有20mM磷酸盐，而分别含有10mM和40mM磷酸盐。为此，根据种类添加了10.6ml 17.6mM或246mM的磷酸盐溶液。
立刻研究P2、P2′和P2″组合物中的HA和Vi组分的性质或在离心后研究这些组合物中的HA和Vi组分性质，给出这些组分在这些组合物中的性质(采用ELISA方法检测这些组分)。观察到，在10mM磷酸盐时，HA仍被吸附，但Vi吸附在氧化铝凝胶上，而在40mM磷酸盐时，Vi不再被吸附，但HA部分被解吸。在20mM磷酸盐时，这些所寻求的条件都满足：HA仍被吸附同时Vi不被吸附。
接着，研究了在5℃±3℃下P2剂量在30个月期间的稳定性。具体地采用ELISA方法评价了从其整体与离心后的上清液(吸附在与凝胶一起沉淀的氧化铝凝胶上的组分)所取疫苗剂量中Vi多糖的抗原本领；这样还能够确定未吸附Vi的百分数。
ELISA是以间接方法方式实施的。待定剂量的Vi抗原是处在覆盖板底部的抗-Vi抗体与小鼠的抗-Vi抗体之间的夹层中。添加生物素基化的抗鼠IgG的抗体，然后添加与辣根过氧化物酶偶合的生物素基化的链霉胍配合物。添加邻亚苯基二胺二盐酸盐(OPD)使该反应显色。OPD的降解表现出着橙褐色，这种着色与Vi抗原量成比例。其强度可用分光光度计测量。
在96-孔板中，分配100μl抗伤寒沙门氏菌血清。在37℃下培育5小时，然后排空该板，再用含有0.05％吐温的PBS(磷酸盐缓冲液)洗涤三次。添加200μl稀释在PBS中的奶粉溶液，使空位点饱和。在37℃下培育1小时30分钟，然后排空该板，再洗涤三次。制备以倍率2稀释的标准疫苗的系列稀释液，以便达到一定的标准范围。以适当方式对待测定疫苗剂量以及参比剂量(能够证实标准范围)进行稀释；将100μl每种稀释液分配到孔中，再在37℃下培育一夜。排空该板，再进行洗涤。然后向孔中添加100μl适当稀释抗Vi鼠血清。再在37℃下培育1小时，然后排空该板，再进行洗涤。这时固定生物素基化的鼠抗免疫球蛋白(向每个孔中加入100μl适当稀释液)。再在37℃下培育1小时，然后排空该板，再进行洗涤。这时固定与过氧化物酶偶合的生物素基化链霉胍(向每个孔中加入100μl适当稀释液)。再在37℃下培育1小时，然后排空该板，再进行洗涤。向每个孔中添加100μl 1mg/ml OPD在pH5柠檬酸盐磷酸盐缓冲液中的溶液，使该板显色。在100μl 2N硫酸添加到孔中之前，在黑暗中在室温下培育30分钟。使用分光光度计在492nm处读其板。确定了随浓度变化的吸收标准曲线。与标准曲线相比，计算出每种试验稀释液的效价，以ng/ml表示。为了得到每个试验疫苗剂量的平均效价，求出用全部稀释液所得效价的平均值。该效价以μg/剂量给出。
还测量了离心后上清液中存在的Vi多糖的O-乙酰基的数量。使用羟胺，采用比色方法测定了O-乙酰基(Hestrin S.J.Biol.Chim.(1949) 180：249)。在碱性介质中羟胺与这些酯生成异羟肟酸，该酸在铁盐存在下给出栗色，可采用分光光度计在540nm处测定其强度。
同时，使用以与P2同样方式制备的称之为制剂P1的制剂进行同样的研究，其唯一不同之处在于在制备双效价疫苗时不添加磷酸盐。在这种情况下，Vi组分没有立刻吸附在氧化铝凝胶上，为了在离心后进行测定，如P2一样，合适的是预先解吸它。通过调节pH和介质的离子强度，可达到这种解吸。在离心后，让氧化铝凝胶与150mM柠檬酸三钠溶液在37℃下接触6小时。然后离心回收上清液，其中有Vi组分。
下表I中列出这些结果。
表I
5℃   T0   3个月   6个月   9个月   12个月   18个月   24个月   30个月
整个疫苗中Vi  Vi ELISA(μg/剂量)   P2   23.6   25.5   21.7   21.3   18.5   23.7   24.3   26.5
  P1   24.4   23.3   22.2   19.8   17.9   20.5   18.6   19.3
离心后上清液中Vi  Vi ELISA(μg/dose)   P2   24.3   26   23.1   21.8   17.9   25   21.9   25.8
  P1   21   16.9   16.5   15.4   12   14.7   21.8   15.7
 O-乙酰基(μ摩尔/剂量)   P2   0.127   0.148   0.116   0.117   0.130   0.134   0.095   0.143
  P1   0.081   0.056   0.055   0.055   0.061   0.057   0.090   0.054
 多糖(μg/dose)   P2   32.5   30.5   27.6   31   30.4   29.1   31.7   29.3
  P1   20.8   22   15.6   16.2   18.5   16.5   17   18.4
P1中Vi解吸％   86％   72％   74％   78％   67％   72％   63％   81.6％
还研究了在25℃±2℃6个月内与在37℃±3℃3个月内P2配方的稳定性。这些结果列于下面表II和III。
表II
25℃     T0   1个月   3个月   6个月
整个疫苗中Vi Vi ELISA(μg/剂量)   P2     23.6   23.6   21.7   20.6
  P1     24.4   19.6   11.3   7.4
离心后上清液中Vi Vi ELISA(μg/剂量)   P2     24.3   25.5   22.6   20.1
  P1     21   15   10.3   6.3
O-乙酰基(μ摩尔/剂量)   P2     0.127   0.130   0.103   0.137
  P1     0.081   0.053   0.041   0.029
多糖(μg/剂量)   P2     32.5   31.6   25.5   27.2
  P1     20.8   17.3   10.3   6.3
 P1中Vi解吸％     86％   77％   91％   85％
表III
37℃   TO   1个月   3个月
整个疫苗中Vi  Vi ELISA(μg/剂量)   P2   23.6   24.1   21
  P1   24.4   12.7   5.6
离心后上清液中Vi  Vi ELISA(μg/剂量)   P2   24.3   25.5   21.1
  P1   21   9.9   4.7
 O-乙酰基(μ摩尔/剂量)   P2   0.127   0.143   0.104
  P1   0.081   0.050   0.026
多糖(μg/剂量)   P2   32.5   36   22.5
  P1   20.8   15.4   9.9
P1中Vi解吸％   86％   78％   84％

Claims (8)

1.一种疫苗组合物，该组合物含有(i)与含有羟基基团的铝化合物一起添加的第一效价，(ii)含有细菌荚膜多糖的第二效价，其多糖含有一个或多个O-乙酰基基团和(iii)磷酸根离子、柠檬酸根离子或碳酸根离子。
2.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中第一效价是甲型肝炎效价。
3.根据权利要求2所述的疫苗组合物，其中甲型肝炎效价由失活的甲型肝炎病毒构成。
4.根据权利要求1-3中任一权利要求所述的疫苗组合物，其中第二效价是伤寒效价，它由伤寒沙门氏菌荚膜的Vi多糖构成。
5.根据权利要求4所述的疫苗组合物，其中伤寒效价在至少24个月期间具有稳定的抗原效价。
6.根据权利要求1-5中任一权利要求所述的疫苗组合物，其中通过氢氧化铝或碱式磷酸铝的铝化合物添加第一效价。
7.根据权利要求1-6中任一权利要求所述的疫苗组合物，其中通过铝化合物吸附来添加第一效价。
8.根据权利要求1-7中任一权利要求所述疫苗组合物的生产方法，其中：
(i)往一种制剂中添加磷酸根、柠檬酸根或碳酸根离子，该制剂含有通过含有羟基基团的铝化合物添加的第一效价；和
(ii)把在步骤(i)得到的制剂与含有第二效价的制剂混合，其中第二效价由含有一个或多个O-乙酰基基团的细菌荚膜的多糖构成。
CNB028156455A 2001-08-08 2002-07-31 含至少两种效价的疫苗组合物,其一添有助剂,另一未添 Expired - Lifetime CN1282486C (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR01/10573 2001-08-08
FR0110573A FR2828406B1 (fr) 2001-08-08 2001-08-08 Composition vaccinale bivalente havi

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1541108A true CN1541108A (zh) 2004-10-27
CN1282486C CN1282486C (zh) 2006-11-01

Family

ID=8866367

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB028156455A Expired - Lifetime CN1282486C (zh) 2001-08-08 2002-07-31 含至少两种效价的疫苗组合物,其一添有助剂,另一未添

Country Status (22)

Country Link
US (1) US7404960B2 (zh)
EP (1) EP1416958B2 (zh)
JP (1) JP4221291B2 (zh)
KR (1) KR100881703B1 (zh)
CN (1) CN1282486C (zh)
AT (1) ATE357929T1 (zh)
AU (1) AU2002342949B2 (zh)
BR (1) BRPI0211151B8 (zh)
CA (1) CA2455406C (zh)
CY (1) CY1107619T1 (zh)
DE (1) DE60219177T3 (zh)
DK (1) DK1416958T4 (zh)
ES (1) ES2284940T5 (zh)
FR (1) FR2828406B1 (zh)
HU (1) HU228216B1 (zh)
IL (2) IL159519A0 (zh)
MX (1) MXPA04001125A (zh)
NZ (1) NZ530727A (zh)
PL (1) PL215134B1 (zh)
PT (1) PT1416958E (zh)
WO (1) WO2003013600A1 (zh)
ZA (1) ZA200400022B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102526724A (zh) * 2011-01-14 2012-07-04 四川大学 氢氧化铝凝胶-多糖复合免疫佐剂及其制备方法和用途

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2738682A1 (en) 2004-04-15 2005-10-15 Eng-Hong Lee Soft gel delivery system for treating poultry
MX2009002560A (es) * 2006-09-07 2009-03-20 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacuna.
KR101101901B1 (ko) * 2009-01-30 2012-01-02 주식회사 리노 주방용 선반
WO2010109323A1 (en) 2009-03-24 2010-09-30 Novartis Ag Adjuvanting meningococcal factor h binding protein
FR2985663B1 (fr) 2012-01-17 2015-03-27 Sanofi Pasteur Procede de formulation d'un vaccin contenant au moins deux antigenes susceptibles de s'adsorber sur de l'oxy hydroxyde d'aluminium

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2734484B1 (fr) * 1995-05-24 1997-06-27 Pasteur Merieux Serums Vacc Composition vaccinale liquide et procede de fabrication
GB9806456D0 (en) * 1998-03-25 1998-05-27 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
EP1107787B1 (en) * 1998-08-28 2003-05-14 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Salmonella typhi vaccine compositions
US6585973B1 (en) * 1998-10-29 2003-07-01 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Method for preparing solid phase conjugated vaccine
GB9909077D0 (en) * 1999-04-20 1999-06-16 Smithkline Beecham Biolog Novel compositions

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102526724A (zh) * 2011-01-14 2012-07-04 四川大学 氢氧化铝凝胶-多糖复合免疫佐剂及其制备方法和用途

Also Published As

Publication number Publication date
HUP0401182A2 (hu) 2004-09-28
DE60219177T2 (de) 2008-01-24
WO2003013600A1 (fr) 2003-02-20
ATE357929T1 (de) 2007-04-15
BRPI0211151B1 (pt) 2019-07-09
JP2005501081A (ja) 2005-01-13
DK1416958T4 (da) 2012-07-09
FR2828406B1 (fr) 2005-06-24
IL159519A (en) 2010-11-30
ES2284940T5 (es) 2012-07-02
JP4221291B2 (ja) 2009-02-12
PL215134B1 (pl) 2013-10-31
DK1416958T3 (da) 2007-07-30
US20040170648A1 (en) 2004-09-02
FR2828406A1 (fr) 2003-02-14
EP1416958B2 (fr) 2012-03-14
KR20040043182A (ko) 2004-05-22
HUP0401182A3 (en) 2004-10-28
EP1416958B1 (fr) 2007-03-28
HU228216B1 (en) 2013-02-28
BRPI0211151B8 (pt) 2021-05-25
CA2455406A1 (en) 2003-02-20
AU2002342949B2 (en) 2007-07-05
PL367904A1 (en) 2005-03-07
NZ530727A (en) 2004-06-25
MXPA04001125A (es) 2004-05-20
CY1107619T1 (el) 2013-04-18
KR100881703B1 (ko) 2009-02-06
CA2455406C (en) 2012-03-13
BR0211151A (pt) 2004-08-10
DE60219177T3 (de) 2012-08-30
ES2284940T3 (es) 2007-11-16
ZA200400022B (en) 2006-05-31
IL159519A0 (en) 2004-06-01
US7404960B2 (en) 2008-07-29
EP1416958A1 (fr) 2004-05-12
CN1282486C (zh) 2006-11-01
DE60219177D1 (de) 2007-05-10
PT1416958E (pt) 2007-05-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2788023B1 (en) Aluminium compounds for use in therapeutics and vaccines
EP2073841B1 (en) Manufacture of booster vaccines having reduced antigen doses
KR101089400B1 (ko) 나노구조의 메소다공성 실리카에 의해 캡슐화된 백신항원에 의해 형성된 면역원 복합체
CN1282486C (zh) 含至少两种效价的疫苗组合物,其一添有助剂,另一未添
US4740589A (en) Capsular polysaccharide metal complex vaccines
JP2014525429A (ja) Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ抗原のアジュバント添加処方物
KR102219638B1 (ko) 엔테로바이러스 불활화 및 보강제 흡착 방법과 이로부터 수득되는 저용량 백신 조성물
Yang et al. Dendritic mesoporous silica nanoparticle adjuvants modified with binuclear aluminum complex: coordination chemistry dictates adjuvanticity
SA519401232B1 (ar) تركيب اقتراني من السكر المتعدد لكبسولة بكتيريا المكورات الرئوية وبروتين حامل واستخداماته
JPH0545570B2 (zh)
CN110809477A (zh) 新型多价多糖-蛋白轭合物疫苗组合物及其制剂
JPH02149530A (ja) 水酸化亜鉛または水酸化鉄をアジュバントとして含有する抗原溶液
KR100385711B1 (ko) 디프테리아, 파상풍 톡소이드와 백일해균 및ｂ형간염표면항원을 포함한 4가 혼합백신 및 그 제조방법
US20220031736A1 (en) Use of anionic clay in preparing lead-removing medicine
ES2625011T3 (es) Procedimiento de formulación de una vacuna que contiene al menos dos antígenos susceptibles de adsorberse sobre el oxihidróxido de aluminio
EP4327820A1 (en) Liquid sextuple vaccine composition
US6927235B2 (en) Vaccine composition comprising iron phosphate as vaccine adjuvant
CA2525615C (en) Vaccine composition comprising iron phosphate as a pharmaceutical aid to said vaccine
CA1259917A (en) Capsular polysaccharide metal complex vaccines
Christodoulou et al. Al-fumarate, a Metal-Organic Framework encapsulating antigen as a potent, versatile and resorbable vaccine adjuvant
KR100741359B1 (ko) 항원을 비활성돼지보체로 처리한 돈단독균 불활화백신의제조방법
EP3473268A1 (en) Combined preparation for parenteral use
JPH10245232A (ja) 非晶質酸化鉄の製造及び用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CX01 Expiry of patent term

Granted publication date: 20061101

CX01 Expiry of patent term