CN1456336A

CN1456336A - 一种大株红景天粉针剂及其制备方法

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Publication number: CN1456336A
Application number: CN 03126742
Authority: CN
Inventors: 吴梅春
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2003-06-02
Filing date: 2003-06-02
Publication date: 2003-11-19
Anticipated expiration: 2023-06-02
Also published as: CN1244333C

Abstract

本发明公开了一种大株红景天粉针剂，它是以中草药大株红景天为原料经提取、纯化、加入适量药用辅料调配后，用冷冻干燥方法制备而成，其主要活性成分的组成和重量含量为：红景天甙1.2～30％、酪醇0.08～6％、总黄酮7.5～64％。本发明稳定性好、有效期长，经药效学试验表明有显著的抗心肌缺血和抗脑缺血作用，对冠心病、缺血性中风等心脑血管疾病有良好的治疗效果。

Description

一种大株红景天粉针剂及其制备方法

所属技术领域

本发明涉及一种大株红景天粉针剂，同时本发明还涉及该大株红景天粉针剂的制备方法。

背景技术

大株红景天又名狭叶红景天，为景天科红景天属植物Rhodiola kirilowii(Regel.)Maxim.的干燥根及根茎，是药用红景天的一个主要种，被收载于《中华人民共和国药典》1977年版一部和《藏药标准》，具有活血止血、化瘀消肿的功效。民间用于治疗跌打损伤、吐血、咳血、月经过多等症。近年来的药理研究表明，大株红景天具有抗血栓素形成、抗心肌缺血、抗病毒、抗辐射、抗疲劳、抗衰老、改善缺氧动物的有氧代谢、增强对低氧环境的耐受能力等多方面的药理作用。植物化学研究结果表明，大株红景天的主要活性化学成分有红景天甙、酪醇、黄酮类化合物等。目前临床上使用的大株红景天制剂多为口服制剂，起效缓慢，用药周期长，尚无稳定性好、起效快、生物利用度高、可供静脉注射使用的粉针剂，限制了大株红景天在临床上的进一步应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种疗效确切、起效迅速，质量稳定、有效期长的大株红景天粉针剂，该粉针剂可用于静脉注射，疗效高。

本发明的另一目的在于提供该大株红景天粉针剂的制备方法。

本发明提供的一种大株红景天粉针剂，是由中草药大株红景天为原料制备获得的药剂，其主要活性成分的组成和重量含量为：

红景天甙1.2～30％、酪醇0.08～6％、总黄酮7.5～64％。

本发明所使用的原料—大株红景天，除符合《中国药典》1977年版一部红景天项下有关的各项规定外，按干燥品计算，还要求其红景天甙(C₁₄H₂₀O₇)含量不得少于0.3％，并且酪醇(C₈H₁₄O₂)含量不得少于0.02％。

本发明提供的一种大株红景天粉针剂的制备方法，包括以下三个步骤：

(1)提取：取大株红景天药材，切片，每次用4～12倍量10～95％的乙醇回流提取2～5次，每次0.5～3小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05～1.08的浓缩液，加入2～5倍量的水，搅拌均匀，冷藏12～72小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.05～1.18，加乙醇使含醇量达80～85％，搅匀，调pH值至8.0，冷藏12～48小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05～1.18的浓缩液，得提取液；

(2)纯化：取上述提取液，采用有机溶剂萃取法、大孔树脂柱层析法、硅胶或氧化铝柱层析法三种方法中的任一种方法制得纯化物；

(3)配制：取上述纯化物，加注射用水，冷藏，滤过，滤液调pH值至7.0～7.5，静置、滤过，滤液加入药用辅料并加注射用水，搅拌溶解，过滤，将滤液灌装于已灭菌的西林瓶中，冷冻干燥，冻干结束后压塞、压盖，质检，包装，即制得本发明粉针剂。

本发明所述的有机溶剂萃取法是：取提取液，每次用等体积的正丁醇或醋酸乙脂萃取，共萃取3～6次，合并萃取液，减压回收、干燥，即得纯化物；所述的大孔树脂柱层析法是：取提取液，流经大孔吸附树脂层析柱，先用浓缩液重量10～50倍的水洗脱，弃去洗脱液，再用浓缩液重量10～50倍的20～95％乙醇洗脱，收集此洗脱液，减压回收、干燥，即得纯化物；所述的硅胶或氧化铝柱层析法是：取提取液，干燥，用乙醇溶解，加入适量硅胶或氧化铝拌匀，干燥，上氧化铝或硅胶层析柱，用90～100％的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收、干燥，即得纯化物；所述的药用辅料为甘露醇、聚维酮K30、葡萄糖、乳糖中的一种或几种。

本发明的活性成分红景天甙和酪醇的含量检测采用了高效液相法，总黄酮的检测采用分光光度法，但总黄酮的含量是以芦丁为标准计算的。

本发明制备的大株红景天粉针剂有很好的稳定性，经稳定性试验研究表明有效期长达2.9年，澄明度、溶解性、色泽、pH值、热源、刺激性等指标均符合《中国药典》有关注射剂的规定。在临用前配制成溶液，可用于肌肉注射或加入注射用生理盐水或注射用葡萄糖溶液中，以静脉滴注方式给药。本发明药物具有起效迅速、生物利用度高、效果确切等优点，经药效学试验表明有显著的抗心肌缺血和抗脑缺血作用，对冠心病、缺血性中风等心脑血管疾病有良好的治疗效果。

下面结合实施例及主要药效学试验对本发明作进一步的说明。

实施例1

(1)取大株红景天药材1000g，切片，每次用12倍量45％的乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05(60℃)的浓缩液，加入3倍量的水，搅拌均匀，冷藏72小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的浓缩液，加乙醇使含醇量达80％，搅匀，用20％的氢氧化钠溶液调pH值至8.0，冷藏48小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.12(60℃)的浓缩液，得提取液，备用；

(2)取上述提取液，流经大孔吸附树脂层析柱，先用浓缩液重量40倍的水洗脱，弃去洗脱液，再用浓缩液重量40倍的50％乙醇洗脱，收集此洗脱液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10(60℃)的浓缩液，加注射用水300ml，冷藏，滤过，滤液用10％的氢氧化钠溶液调pH值至7.0～7.5，静置、滤过，滤液备用；

(3)取上述滤液加入甘露醇80g和葡萄糖20g并加注射用水至1000ml，分别用0.65μm和0.22μm微孔滤膜过滤，将滤液灌装于已灭菌的西林瓶中，冷冻干燥，冻干结束后压塞、压盖，质检，包装，即制得本发明大株红景天粉针剂。

实施例2

(1)取大株红景天药材1000g，切片，每次用10倍量65％的乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.08(60℃)的浓缩液，加入4倍量的水，搅拌均匀，冷藏66小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.06(60℃)的浓缩液，加乙醇使含醇量达85％，搅匀，用30％的氢氧化钠溶液调pH值至8.5，冷藏38小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.13(60℃)的浓缩液，得提取液，备用；

(2)取上述提取液，每次用等体积的正丁醇萃取，共萃取5次，合并萃取液，减压回收、干燥，加注射用水600ml，搅拌溶解，冷藏，滤过，滤液用10％的氢氧化钠溶液调pH值至7.5，静置、滤过，滤液备用；

(3)取上述滤液加入甘露醇100g并加注射用水至1000ml，分别用0.65μm和0.22μm微孔滤膜过滤，将滤液灌装于已灭菌的西林瓶中，冷冻干燥，冻干结束后压塞、压盖，质检，包装，即制得本发明粉针剂。

实施例3

(1)取大株红景天药材1000g，切片，每次用12倍量60％的乙醇回流提取2次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.06(60℃)的浓缩液，加入5倍量的水，搅拌均匀，冷藏56小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.07(60℃)的浓缩液，加乙醇使含醇量达85％，搅匀，用30％的氢氧化钠溶液调pH值至8.5，冷藏48小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.18(60℃)的浓缩液，得提取液，备用；

(2)取上述提取液，真空干燥后，研成细粉，用250ml乙醇溶解，加入150g硅胶拌匀，真空干燥，研成粉末，上硅胶层析柱，用5000ml95％的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收、干燥，加注射用水700ml，搅拌溶解，冷藏，滤过，滤液用10％的氢氧化钠溶液调pH值至7.5，静置、滤过，滤液备用；

(3)取上述滤液加入甘露醇85g、聚维酮K₃₀5g、葡萄糖5g、乳糖5g并加注射用水至1000ml，分别用0.65μm和0.22μm微孔滤膜过滤，将滤液灌装于已灭菌的西林瓶中，冷冻干燥，冻干结束后压塞、压盖，质检，包装，即制得本发明粉针剂。主要药效学试验

通过脑缺血再灌与心脏冠脉结扎所致心肌缺血两种实验动物模型，观察本发明大株红景天粉针抗心肌缺血与脑缺血的作用；同时观察了大株红景天粉针对麻醉犬心脏血流动力学与脑血流量方面的影响。为临床用药提供药理学依据。试验结果如下：一、对大脑中动脉血栓模型大鼠的影响

试验采用了三氯化铁致大脑中动脉血栓形成大鼠模型，造模后MCAT大鼠神经症状评定的结果显示：大株红景天粉针40、20、10mg/kg组治疗给药三次，对造模后6h，24h的大鼠的神经症状均有不同程度的改善(P＜0.01，P＜0.05)。MCAT大鼠脑梗塞范围测量结果显示，术后24h，大株红景天粉针三个剂量组的大鼠梗塞程度明显减轻，与模型组相比具有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)。MCAT大鼠脑组织含水量测定结果显示，造模后24h，大株红景天粉针20、10mg/kg组的大鼠手术侧脑含水量明显低于模型组，与模型组相比具有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)。对MCAT大鼠脑组织病理形态学观察显示，MCAT模型组大鼠损伤侧皮质可见大量变性神经元，且失去层次分布。大株红景天粉针40mg/kg组大鼠损伤侧皮质可见散在正常神经细胞，大株红景天粉针20mg/kg、10mg/kg组脑皮质缺血灶内可见大量变性萎缩神经元，神经元数目减少。图像分析表明给药组阳细胞面密度增大(P＜0.01)，结合病理照片说明给药组可使神经细胞损失减少，存活细胞数量相对于模型组为多，提示本药具有减轻脑缺血所致的神经损伤作用。二、对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

本实验观察了大株红景天粉针注射给药对SD大鼠缺血再灌注所致心肌损伤的影响，并与丹参注射液进行了比较。用3％戊巴比妥钠腹腔麻醉SD大鼠后，左侧第4-5肋间开胸，结扎冠状动脉左前降支，制成急性缺血再灌注模型。缺血同时注射给予大株红景天粉针，缺血30min再灌注30min后测定血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和心肌梗塞范围。大株红景天粉针低、中、高剂量组(10、20、40mg/kg)和丹参注射液组血清CK、LDH活性、心肌梗塞区重量明显低于模型组(P＜0.05)；结果表明大株红景天粉针注射给药对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用，可明显抑制缺血再灌注所致大鼠心肌损伤时LDH、CK溢出，降低血清LDH、CK活性，可明显缩小心肌梗塞范围。三、对麻醉犬血流动力学、心肌耗氧量及脑血流量的影响

1.本实验采用心脏导管法直接观察注射大株红景天粉针(5、10、20mg/kg)对麻醉犬心率(HR)、收缩压(BPs)、舒张压(BPd)、平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张压LVDP、左心室收缩压最大变化速率(±dp/dt_max)、左心室舒张末期压(LVEDP)等血流动力学的影响。结果表明：生理盐水组、大株红景天粉针各剂量组和丹参注射液组在5min至180min，麻醉犬心率、血压、左心室收缩压、左心室舒张压、左心室收缩压最大变化速率、左心室舒张末期压等血流动力学指标均有波动，但与给药前比较差异均不显著。

2.观察大株红景天粉针注射给药对麻醉犬心肌耗氧量、冠脉流量与脑血流量的影响。结果显示：大株红景天粉针5、10、20mg/kg注射后心肌耗氧量变化与同时间点生理盐水组相比显著下降；还可明显降低心肌氧摄取率，增加冠脉流量，降低冠脉阻力，增加颈内动脉流量，作用强度与剂量有一定的关系。大株红景天粉针各剂量组对犬心输出量、总外周阻力均无明显影响。实验结果表明大株红景天粉针可明显增加麻醉犬冠脉流量与脑血流量，明显降低心肌氧摄取率，显著降低心肌耗氧量；对心输出量、总外周阻力均无明显影响。

Claims

1、一种大株红景天粉针剂，其特征在于是由中草药大株红景天为原料制备获得的药剂，其主要活性成分的组成和重量含量为：

红景天甙1.2～30％、酪醇0.08～6％、总黄酮7.5～64％。

2、权利要求1所述的大株红景天粉针剂的制备方法，包括以下三个步骤：

3、根据权利要求2所述的大株红景天粉针剂的制备方法，其特征在于所述的有机溶剂萃取法是：取提取液，每次用等体积的正丁醇或醋酸乙脂萃取，共萃取3～6次，合并萃取液，减压回收、干燥，即得纯化物。

4、根据权利要求2所述的大株红景天粉针剂的制备方法，其特征在于所述的大孔树脂柱层析法是：取提取液，流经大孔吸附树脂层析柱，先用浓缩液重量10～50倍的水洗脱，弃去洗脱液，再用浓缩液重量10～50倍的20～95％乙醇洗脱，收集此洗脱液，减压回收、干燥，即得纯化物。

5、根据权利要求2所述的大株红景天粉针剂的制备方法，其特征在于所述的硅胶或氧化铝柱层析法是：取提取液，干燥，用乙醇溶解，加入适量硅胶或氧化铝拌匀，干燥，上氧化铝或硅胶层析柱，用90～100％的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收、干燥，即得纯化物。

6、根据权利要求2所述的大株红景天粉针剂的制备方法，其特征在于所述的药用辅料为甘露醇、聚维酮K30、葡萄糖、乳糖中的一种或几种。