CN104987952B - 从红景天全草中提取挥发油及红景天甙的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从红景天全草中提取挥发油及红景天甙的提取方法，先是将红景天全草粉末置于蒸馏罐中进行水蒸气蒸馏，提取出红景天挥发油，然后通过下述步骤提取红景天甙：①对罐中的物料继续搅拌并通入95％的乙醇溶液，使物料体系中的乙醇浓度达到50％‑55％，抽滤得提取液并浓缩之，②浓缩液用HPD‑100大孔树脂层析，收集浓度为50％的乙醇洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥至粉末，③将干燥粉末制成成硅胶拌合物并通过硅胶和中性氧化铝混合层析柱进行柱层析，收集无水乙醇洗脱液，浓缩后再用无水乙醇重结晶，得到红景天甙结晶。本发明实现了红景天全草中两种有效成分的综合提取，工序简单，成本低，提取率稳定，能够实现工厂化生产。

Description

从红景天全草中提取挥发油及红景天甙的方法

技术领域

本发明涉及植物有效成分的提取方法，具体涉及的是一种从红景天中提取挥发油及红景天甙的方法。

背景技术

红景天(Rhodiola rosea L)是景天科(Crassulaceae)红景天属(Rhodiola)植物，为多年生草本植物，有二百多个品种，是多生长在高寒无污染山区地带的珍稀野生中药材，常见的主要有小丛红景天、帕里红景天、狭叶红景天、小花红景天、长鞭红景天、大花红景天、高山红景天、蔷薇红景天、圣地红景天等二十多个品种。《神农本草经》记载红景天“主养命以应天，无毒，多服久服不伤人，轻身益气、不老延年”，《本草纲目》记载“红景天，本经上品，祛邪恶气，补诸不足”是“已知补益药中所罕见”。

红景天中生物活性成分较多，含有红景天甙、挥发油、多糖、萜类、黄酮类、多种维生素、多种微量元素等，其中红景天甙独特的结构和显著的生物活性，受到人们的关注，红景天甙的结构式

是β-葡萄糖酪醇甙，也叫红景天苷，是一种亲水性化合物，易溶于水、乙醇、甲醇、乙酸等介质中，难溶于石油醚、庚烷、乙酸乙酯等溶剂，红景天甙具有抗疲劳、抗缺氧、抗衰老、提高脑力和体力机能、保肝等药理作用。

目前，有关红景天挥发油提取和成分分析的文献较多，而生物活性方面研究较少，作为透皮促进剂、抗菌剂等方面有部分研究，红景天挥发油开发利用的空间很大；红景天中红景天甙的含量较低，从红景天中提取红景天甙的方法较多，用不同浓度的乙醇溶液、不同浓度的甲醇溶液、水等提取介质在不同条件下提取，还可借助超声波、微波、超临界二氧化碳萃取等辅助提取方法进行提取。红景天产地不同、品种不同、生长环境不同以及部位的不同，红景天甙的含量和提取率均不相同，且存在着较大差异。在红景天甙纯化精制过程中主要通过柱色谱法，使用不同的固定相，如大孔苯乙烯型或丙乙烯型树脂、硅胶、聚酰胺、氧化铝等，以不同的洗脱剂，如丙酮、不同浓度的乙醇溶液、不同浓度的甲醇溶液、乙酸酯类、不同比例的氯仿甲醇溶液等进行洗脱分离纯化，可得到较高纯度的红景天甙。

中国专利公开号CN101974045A公开了一种制备红景天苷的方法，是用水借助微波提取，经过大孔树脂洗脱处理后，可得到纯度高达92％的红景天甙。

中国专利公开号CN103833802A公开了一种红景天苷的制备方法，是用有机溶剂提取，借助微波辅助提取，经过大孔树脂粗分离，在硅胶柱中以甲醇和三氯甲烷混合液洗脱，能够高效的提取纯度较高的红景天甙，纯度具体是多少，未见说明。

《应用与环境生物学报》上2013年19卷4期的文献《冰乙酸水解法提高女贞子提取物中红景天苷含量》一文中：用水进行回流提取，浓缩后加入冰乙酸水解来提高红景天苷的收率。

《广东农业科学》上2011年18期的文献《超声波法提取红景天苷工艺条件的优化》一文中：对红景天提取工艺条件进行优化，确定了超声提取的最佳工艺。

《中国食物与营养》上2012年18卷9期的文献《中药材中红景天甙和粗多糖的超声波辅助提取工艺研究》一文中：研究超声波辅助法从中药材中同时提取红景天甙和粗多糖的最佳工艺，提高了收率。

综上所述，现有红景天的提取技术要么只得到红景天挥发油，要么只得到红景天甙。以水或醇溶液作为介质，借助超声波或微波进行提取，或用超临界二氧化碳进行萃取，再用柱色谱法分离纯化，虽然能够获取高纯度的红景天甙，但是这些方法提取成本较高，步骤繁琐，工序复杂，纯度和提取率均不稳定，直接影响红景天甙的品质，而且难以实现工厂化生产，更不适合于低含量原料的提取。

发明内容

本发明的目的在于提出一种从红景天全草中将挥发油和红景天甙进行综合提取的方法，该方法工序简单，成本低，红景天甙的纯度高，提取率稳定，能够实现工厂化生产。

实现上述目的的技术方案是：一种从红景天全草中提取挥发油及红景天甙的提取方法，其特征是按下述步骤完成：

1)将红景天全草粉末置于蒸馏罐中，在搅拌下通入水蒸气蒸馏，蒸馏时间为2h-2.2h，从冷凝管中接收全程溜出液，

2)溜出液用30℃-60℃型号石油醚萃取三次，每次萃取时石油醚的用量为溜出液体积量的0.7-1倍，合并萃取液，

3)用无水硫酸钠干燥萃取液，然后蒸馏回收石油醚，得到红景天挥发油；

4)完成了步骤1)后，继续搅拌蒸馏罐中的水和固体渣，当其温度降至70℃时，通入浓度为95％的乙醇溶液，当蒸馏罐中物料体系中的乙醇浓度达到50％-55％时，停止乙醇通入，继续搅拌，自然降温至50℃，放出物料，抽滤得提取液；固体渣再用浓度为50％-55％的乙醇溶液在60℃下浸提两次，合并提取液，

5)浓缩提取液，并控制提取液的密度在1.02-1.04千克/立方分米，

6)将浓缩后的提取液用HPD-100大孔树脂拌合吸附，提取液与HPD-100大孔树脂的拌合重量比为3.5-4.5∶1，装入直径/柱高为60cm/300cm的层析柱中，然后按下述步骤依次洗脱，

6.1)用4-5倍层析柱体积量的水洗脱，

6.2)用层析柱体积的3-4倍量、浓度为10％的乙醇溶液洗脱，

6.3)用层析柱体积的4-5倍量、浓度为50％的乙醇溶液洗脱，

6.4)用层析柱体积3-4倍量的无水乙醇洗脱，

7)将步骤6.3)的洗脱液浓缩至密度为1.08-1.11千克/立方分米，再经喷雾干燥塔成干燥粉末，

8)在干燥粉末中加入4倍量的无水乙醇和2倍量的硅胶，拌匀，减压回收乙醇，形成均匀的硅胶拌合物，

9)准备一个硅胶和中性氧化铝混合层析柱，所述硅胶和中性氧化铝的细度均为300目，两者的混合重量比1∶1，层析柱的直径/柱高为10cm/90-100cm，干法装柱，

10)将硅胶拌合物干法上样装在步骤9)所述层析柱的上部，用无水乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至有大量固形物析出时，再用无水乙醇重结晶，得到红景天甙结晶。

上述步骤10)中，硅胶拌合物的上样量与层析柱内填充物的重量比为1∶9-10。

本发明的优点在于：1、实现了两种有效成分的综合提取，既得到了红景天挥发油，又得到了红景天甙，使红景天资源得以综合利用。2、红景天粉末经过水蒸气蒸馏处理后再提取红景天甙，大幅度减少了以往提取过程中的油状胶黏物，易纯化处理，且红景天甙的提取率明显提高。3、工序简单，在红景天甙的提取过程中只经过两次柱层析分离就能得到产品，再经过重结晶，便得到了较高纯度的红景天甙，整个提取过程易操作并可稳定控制，能够实现工厂化生产。4、成本低，提取过程主要使用乙醇溶液，避免了大量使用其他价格较高的有机溶剂，乙醇溶液能循环套用，HPD-100大孔树脂、硅胶和中性氧化铝可循环利用。5、提取率稳定，红景天甙的纯度高，按照本发明方法，工厂化的生产规模能够使红景天挥发油的提取率达到0.38％-0.43％；红景天甙的提取率达到85.2％-87.3％，纯度高于92％，最高可达93.2％。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

将红景天全草阴干，粉碎，过100目筛，然后按下述步骤完成红景天挥发油及红景天甙的提取：

1)称取红景天全草粉末20kg放入蒸馏罐中，在搅拌下通入水蒸气蒸馏2.1h，从冷凝管中接收全程溜出液，

2)溜出液用30℃-60℃型号石油醚萃取三次，每次萃取时石油醚的用量为溜出液体积量的1倍，合并萃取液，

3)用无水硫酸钠干燥萃取液，然后蒸馏回收石油醚，得到红景天挥发油0.085kg，

4)完成了步骤1)后，继续搅拌蒸馏罐中的水和固体渣，当其温度降至70℃时，通入浓度为95％的乙醇溶液，当蒸馏罐中物料体系中的乙醇浓度达到52％时，停止乙醇通入，继续搅拌，自然降温至50℃，放出物料，抽滤得提取液；固体渣再用浓度为52％的乙醇溶液在60℃下浸提两次，合并提取液，

5)常压蒸馏回收乙醇，待蒸馏温度超过80℃时，减压蒸馏浓缩提取液，控制提取液的密度在1.02千克/立方分米，

6)将浓缩后的提取液用HPD-100大孔树脂拌合吸附，提取液与HPD-100大孔树脂的拌合重量比为4.5∶1，装入直径/柱高为60cm/300cm的层析柱中，然后按下述步骤依次洗脱，

6.1)用4倍层析柱体积量的水洗脱，

6.2)用层析柱体积的3倍量、浓度为10％的乙醇溶液洗脱，

6.3)用层析柱体积的4倍量、浓度为50％的乙醇溶液洗脱，

6.4)用层析柱体积3倍量的无水乙醇洗脱，

7)将步骤6.3)的洗脱液浓缩至密度为1.08千克/立方分米，再经喷雾干燥塔成干燥粉末，对步骤6.1)、6.2)、6.4)的洗脱液分别浓缩，回收乙醇，

8)在干燥粉末中加入4倍量的无水乙醇和2倍量的硅胶，拌匀，减压回收乙醇，形成均匀的硅胶拌合物，

9)准备一个硅胶和中性氧化铝混合层析柱，所述硅胶和中性氧化铝的细度均为300目，两者的混合重量比1∶1，层析柱的直径/柱高为4cm/36cm，干法装柱，

10)将硅胶拌合物干法上样装在步骤9)所述层析柱的上部，硅胶拌合物和层析柱内填充物重量比为1∶9，用无水乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至有大量固形物析出时，再用无水乙醇重结晶，得到红景天甙结晶0.616kg，提取率为86.1％，按照《中国药典》2010年版第144页“红景天甙的具体测定方法”测得其含量为92.1％。

实施例2

称取红景天全草100目粉末30kg，放入蒸馏罐中，然后按下述步骤完成红景天挥发油及红景天甙的提取：

1)在搅拌下通入水蒸气蒸馏2.2h，从冷凝管中接收全程溜出液，

2)溜出液用30℃-60℃型号石油醚萃取三次，每次萃取时石油醚的用量为溜出液体积量的0.7倍，合并萃取液，

3)用无水硫酸钠干燥萃取液，然后蒸馏回收石油醚，得到红景天挥发油0.127kg；

4)完成了步骤1)后，继续搅拌蒸馏罐中的水和固体渣，当其温度降至70℃时，通入浓度为95％的乙醇溶液，当蒸馏罐中物料体系中的乙醇浓度达到55％时，停止乙醇通入，继续搅拌，自然降温至50℃，放出物料，抽滤得提取液；固体渣再用浓度为55％的乙醇溶液在60℃下浸提两次，合并提取液，

5)常压蒸馏回收乙醇，待蒸馏温度超过80℃时，减压蒸馏浓缩提取液，控制提取液的密度在1.04千克/立方分米，

6)将浓缩后的提取液用HPD-100大孔树脂拌合吸附，提取液与HPD-100大孔树脂的拌合重量比为3.5∶1，装入直径/柱高为60cm/300cm的层析柱中，然后按下述步骤依次洗脱，

6.1)用5倍层析柱体积量的水洗脱，

6.2)用层析柱体积的4倍量、浓度为10％的乙醇溶液洗脱，

6.3)用层析柱体积的5倍量、浓度为50％的乙醇溶液洗脱，

6.4)用层析柱体积4倍量的无水乙醇洗脱，

7)将步骤6.3)的洗脱液浓缩至密度为1.11千克/立方分米，再经喷雾干燥塔成干燥粉末，对步骤6.1)、6.2)、6.4)的洗脱液分别浓缩，回收乙醇，

8)在干燥粉末中加入4倍量的无水乙醇和2倍量的硅胶，拌匀，减压回收乙醇，形成均匀的硅胶拌合物，

9)准备一个硅胶和中性氧化铝混合层析柱，所述硅胶和中性氧化铝的细度均为300目，两者的混合重量比1∶1，层析柱的直径/柱高为6cm/60cm，干法装柱，

10)将硅胶拌合物干法上样装在步骤9)所述层析柱的上部，硅胶拌合物和层析柱内填充物重量比为1∶9，用无水乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至有大量固形物析出时，再用无水乙醇重结晶，得到红景天甙结晶0.842kg，含量为93.2％，提取率为85.2％。

实施例3

称取红景天全草100目粉末50kg，放入蒸馏罐中，然后按下述步骤完成红景天挥发油及红景天甙的提取：

1)在搅拌下通入水蒸气蒸馏2h，从冷凝管中接收全程溜出液，

2)溜出液用30℃-60℃型号石油醚萃取三次，每次萃取时石油醚的用量为溜出液体积量的0.8倍，合并萃取液，

3)用无水硫酸钠干燥萃取液，然后蒸馏回收石油醚，得到红景天挥发油0.191kg；

4)完成了步骤1)后，继续搅拌蒸馏罐中的水和固体渣，当其温度降至70℃时，通入浓度为95％的乙醇溶液，当蒸馏罐中物料体系中的乙醇浓度达到50％时，停止乙醇通入，继续搅拌，自然降温至50℃，放出物料，抽滤得提取液；固体渣再用浓度为50％的乙醇溶液在60℃下浸提两次，合并提取液，

5)常压蒸馏回收乙醇，待蒸馏温度超过80℃时，减压蒸馏浓缩提取液，控制提取液的密度在1.03千克/立方分米，

6)将浓缩后的提取液用HPD-100大孔树脂拌合吸附，提取液与HPD-100大孔树脂的拌合重量比为4∶1，装入直径/柱高为60cm/300cm的层析柱中，然后按下述步骤依次洗脱，

6.1)用4倍层析柱体积量的水洗脱，

6.2)用层析柱体积的3倍量、浓度为10％的乙醇溶液洗脱，

6.3)用层析柱体积的5倍量、浓度为50％的乙醇溶液洗脱，

6.4)用层析柱体积4倍量的无水乙醇洗脱，

7)将步骤6.3)的洗脱液浓缩至密度为1.10千克/立方分米，再经喷雾干燥塔成干燥粉末，对步骤6.1)、6.2)、6.4)的洗脱液分别浓缩，回收乙醇，

8)在干燥粉末中加入4倍量的无水乙醇和2倍量的硅胶，拌匀，减压回收乙醇，形成均匀的硅胶拌合物，

9)准备一个硅胶和中性氧化铝混合层析柱，所述硅胶和中性氧化铝的细度均为300目，两者的混合重量比1∶1，层析柱的直径/柱高为10cm/100cm，干法装柱，

10)将硅胶拌合物干法上样装在步骤9)所述层析柱的上部，硅胶拌合物和层析柱内填充物重量比为1∶10，用无水乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至有大量固形物析出时，再用无水乙醇重结晶，得到红景天甙结晶1.55kg，含量为92.6％，提取率为87.3％。

Claims (2)

1.一种从红景天全草中提取挥发油及红景天甙的提取方法，其特征是按下述步骤完成：1)将红景天全草粉末置于蒸馏罐中，搅拌下通入水蒸气蒸馏，蒸馏时间为2h-2.2h，从冷凝管中接收全程溜出液，

2)溜出液用30℃-60℃型号石油醚萃取三次，每次萃取时石油醚的用量为溜出液体积量的0.7-1倍，合并萃取液，

3)用无水硫酸钠干燥萃取液，然后蒸馏回收石油醚，得到红景天挥发油，

4)完成了步骤1)后，继续搅拌蒸馏罐中的水和固体渣，当其温度降至70℃时，通入浓度为95％的乙醇溶液，当蒸馏罐中物料体系中的乙醇浓度达到50％-55％时，停止乙醇通入，继续搅拌，自然降温至50℃，放出物料，抽滤；固体渣再用浓度为50％-55％的乙醇溶液在60℃下浸提两次，合并提取液，

5)浓缩提取液，并控制提取液的密度在1.02-1.04千克/立方分米，

6)将浓缩后的提取液用HPD-100大孔树脂拌合吸附，提取液与HPD-100大孔树脂的拌合重量比为3.5-4.5∶1，装入直径/柱高为60cm/300cm的层析柱中，然后按下述步骤依次洗脱，

6.1)用4-5倍层析柱体积量的水洗脱，

6.2)用层析柱体积的3-4倍量、浓度为10％的乙醇溶液洗脱，

6.3)用层析柱体积的4-5倍量、浓度为50％的乙醇溶液洗脱，

6.4)用层析柱体积3-4倍量的无水乙醇洗脱，

7)将步骤6.3)的洗脱液浓缩至密度为1.08-1.11千克/立方分米，再经喷雾干燥塔成干燥粉末，

8)在干燥粉末中加入4倍量的无水乙醇和2倍量的硅胶，拌匀，减压回收乙醇，形成均匀的硅胶拌合物，

9)准备一个硅胶和中性氧化铝混合层析柱，所述硅胶和中性氧化铝的细度 均为300目，两者的混合重量比1∶1，层析柱的直径/柱高为10cm/90-100cm，干法装柱，

10)将硅胶拌合物干法上样装在步骤9)所述层析柱的上部，用无水乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至有大量固形物析出时，再用无水乙醇重结晶，得到红景天甙结晶。

2.按照权利要求1所述的从红景天全草中提取挥发油及红景天甙的提取方法，其特征在于：所述步骤10)中，硅胶拌合物的上样量与层析柱内填充物的重量比为1∶9-10。