CN1689593A - 一种注射用参附粉针剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种注射用参附粉针剂的制备方法，属中药领域。本发明的特征在于其制备工艺为如下步骤：(1)红参的提取：乙醇回流提取法。(2)附子的提取：酸水提取法。(3)红参提取物的精制：大孔树脂柱法，经此工艺人参总皂苷含量达到75％以上。(4)附子提取物的精制：醇处理结合弱酸性阳离子交换树脂柱、大孔吸附树脂柱，经此工艺附子总生物碱含量达到50％以上。(5)红参、附子精制物按原药材比1∶2均匀混合配剂，灭菌，冷藏，过滤，超滤，冷冻干燥，包装，制成成品粉针，经此制备工艺使总成分的含量达到80％以上。

Description

一种注射用参附粉针剂的制备方法

技术领域

本发明涉及中药技术领域注射用参附粉针剂的制备方法。

背景技术

注射用参附来源于古方“参附汤”，运用现代科学制剂技术制的得冻干粉针剂，可用于治疗临床上的心悸、心衰、休克等症。现临床应用的有参附水针剂，但此制剂属80年代研制，工艺相对落后，药理药效研究不完善，质量控制指标不完备，并且水针剂不稳定。而注射用参附制备采用先进的树脂纯化技术，超滤技术，冷冻干燥技术，使总成分的含量应达到80％以上，达到了国家对中药注射剂研究的技术要求，药理药效学研究细致明确，且本制剂为粉针剂利于储存运输，更利于临床应用。

发明内容

本发明的目的是提供注射用参附粉针剂的制备方法，为临床急症用药提供一种疗效确切、起效迅速的中药新制剂。

本发明的目的是这样实现的：

一、注射用参附的处方组成

红参5000g    附子加工品黑顺片10000g

                   制成粉针剂1000支

二、注射用参附的制备工艺

取红参饮片，加3-4倍或4-5倍量85％乙醇，连续提取5次，次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度60～70℃测得1.14～1.16，冷却至40℃以下，加入2-3倍或3-4倍或4-5倍或5-6倍量纯水溶解，过滤，滤液用树脂柱精制，使人参总皂苷的含量达到75％。另取附子加工品黑顺片加6或7或8或9或10倍量的酸水提取2次或3次或4次或5次，每次2小时，合并提取液，浓缩成膏，至相对密度80～90℃测得为1.16～1.20，二级醇沉，每次24小时，醇沉上清液过滤，浓缩至相对密度60～70℃测得为1.12～1.16，再加3或4或5或6或7或8倍量纯水进行水洗，静置12-16小时或16-20小时或20-24小时，水洗液过滤，用离子交换树脂柱及大孔吸附树脂柱精制，使附子总碱含量达到50％以上。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值，灭菌，冷藏，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

工艺中红参提取物的精制采用AB-8大孔树脂柱或X-5型或H₁₀₃型树脂柱，按药材树脂比1∶1.5或1∶1的量上样，用纯水洗脱6-7或7-8或8-9或9-10或10-12个树脂体积，弃去去离子水洗脱液，用20％-30％或30％-40％乙醇洗脱2-3或3-4或4-5或5-6个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用50％-60％或60％-70％乙醇解离人参皂苷，洗脱4-6或6-8个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度70～80℃测得为1.02～1.04，备用。

工艺中附子的提取，溶剂采用盐酸或磷酸调得的pH为2.0-3.0或3.0-3.5或3.5-4.0或4.0-4.5的去离子或蒸馏水，醇沉浓度第一次为65％-75％，第二次为80％-85％。

工艺中附子提取物的精制采用D₁₅₂型或D-113型弱酸性阳离子交换树脂柱，按药材树脂比1∶1或1∶1.5的量上样，用去离子水洗脱6-8或8-10倍树脂体积，弃去洗脱液，用0.05M或0.1M或0.15M或0.2M的盐酸溶液洗脱4或5或6个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值3.0或3.5或4.0或4.5，浓缩至相对密度80～90℃测得为1.02，冷却至40℃以下，调pH值5.5或6.0或6.5或7.0，过滤，滤液过AB-8型或X-5型大孔吸附树脂柱，用去离子或蒸馏水洗脱1-3个或3-4个树脂体积，弃去水洗脱液。树脂柱用40％-50％或50％-60％乙醇洗脱4个-6个或6-8个树脂体积，收集醇洗脱液，浓缩相对密度在60～70℃测定为1.01～1.06。

工艺中红参与附子精制物配剂后pH值应调至6.5-7.0，灭菌30分钟，冷藏72小时。将冷藏药液过滤，再超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冷冻干燥，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针，经此制备工艺使总成分的含量达到80％以上。

该发明为中药现代化研究做出了应有的贡献，为临床急症的治疗提供了一种可靠的中药。

试验例

[试验例1]：注射用参附对心源性休克犬的作用

1.试验目的：

研究注射用参附对心源性休克犬血流动力学影响，为临床用于抗心源性休克提供理论依据。

2.试验材料：

2.1.试验动物：

健康成年杂种犬，体重11--17kg，雌雄兼用，由白求恩医科大学实验动物部提供。

2.2.受试药物：

注射用参附，由哈药集团中药二厂提供，规格：40mg/支。

参附注射液，由四川雅安三九药业有限公司生产，规格：20ml/支。

3.试验方法：

杂种犬25只，分为5组，每组5只。对照组给予等容量生理盐水，阳性对照组给予参附注射液0.6ml/kg，实验组分为注射用参附3mg/kg、6mg/kg、12mg/kg三个剂量组，均采用缓慢静脉注射。

以戊巴比妥钠30mg/kg iv麻醉后，背位固定，切开颈部皮肤，分离气管、插管，行人工呼吸，分离右侧颈总动脉插管，连接AP-601放大器，测定血压。分离股动脉，连接AP-601放大器，做心室内插管，测定左室内压，左室舒张期末压，并经微分处理器EQ-601G测定左室内压最大上升、下降速率(±dp/dtmax)。分离股静脉插管，并连接三通，以备输液和给药。于左侧第四肋间施开胸术，暴露心脏，剪开心包，做心包术。于冠状动脉前降支末梢、中部、根部下方，分别用小圆针穿入细丝线，以备结扎。连接肢体导联，测定标准II导心电图，计算心率。稳定15~30min，每隔10min顺次结扎冠状动脉前降支末梢、中部、根部，待平均动脉压MAP(13.3kPa以上)下降至9.3kPa或原血压(10~13kPa)的70％以下者视为休克，持续观察10min，如血压不明显回升者即给药观察。上述各指标同步记录于多导记录仪(RM-6000型，日本光电公司生产)。记录给药前及药后1、3、5、15、30、45、60、90、120、180分钟各项指标。实验数据实测值和变化百分率值与对照组比较，进行组间t检验分析。

4.试验结果：

4.1.注射用参附对心率的影响：

与盐水组相比，其他各给药组对心率均无明显影响。

4.2.对血压的影响：

注射用参附12mg/kg组在给药后5~60min对收缩压有升高作用，变化百分率增加明显(P＜0.01)；注射用参附6mg/kg组，在5~45min有升高收缩压作用(P＜0.05)；注射用参附3mg/kg组在10~30min有升高收缩压作用(P＜0.05)；阳性对照组在5~30min对收缩压有升高作用(P＜0.05)。

注射用参附12mg/kg组在5~60min对舒张压有升高作用(P＜0.05)，其中15min时作用明显(P＜0.01)，注射用参附6mg/kg 5~60min组对舒张压有升高作用(P＜0.05)，注射用参附3mg/kg组在10~45min对舒张压有升高作用(P＜0.05)，阳性对照组在5~30min有升高舒张压的作用(P＜0.05)。

注射用参附12mg/kg组在5~60min对平均血压有升高作用，其中5~30min作用明显(P＜0.01)；注射用参附6mg/kg组5~60min对平均血压有升高作用(P＜0.05)，其中30min作用明显(P＜0.01)；注射用参附3mg/kg组在10~30min对平均血压有升高作用(P＜0.05)，其中30min作用明显(P＜0.01)；阳性对照组在5~30min有升高平均血压的作用(P＜0.05)。

4.3.对左室内压和左室舒末压的影响：

注射用参附12mg/kg组在5~30min对左室内压有升高作用(P＜0.05)，其中15~30min作用明显(P＜0.01)；注射用参附6mg/kg组在5~30min对左室内压有升高作用(P＜0.05)；注射用参附3mg/kg组在10min对左室内压有升高作用(P＜0.05)；阳性对照组在5~30min有升高左室内压的趋势，但无明显统计学意义。与生理盐水组相比，给药后各组对左室舒末压均无明显影响。

4.4.对±dp/dt max的影响：

注射用参附12mg/kg组在5~60min对+dp/dt max有升高作用(P＜0.05)，其中30min作用明显(P＜0.01)；注射用参附6mg/kg在5~30min对+dp/dt max有增加作用(P＜0.05)；注射用参附3mg/kg组在15~30min对+dp/dt max有增强作用(P＜0.05)；阳性对照组在10~45min也有增大+dp/dt max的作用(P＜0.05)。

注射用参附12mg/kg组在5~60min对-dp/dt max有升高作用(P＜0.05)，其中30~45min作用明显(P＜0.01)；注射用参附6mg/Kg组5~45min对-dp/dt max有升高作用(P＜0.05)，其中30min作用明显(P＜0.01)；注射用参附3mg/kg组在10~30min对-dp/dt max有升高作用(P＜0.05)；阳性对照组在10~45min有升高-dp/dt max作用(P＜0.05)，其中30min时作用明显(P＜0.01)。

5.试验结论：

注射用参附(3mg/kg、6mg/kg、12mg/kg)静脉给药，对结扎冠脉所致的心源性休克，具有升高血压等改善血流动力学作用，结果表明，本品可有效用于心源性休克。

[试验例2]：注射用参附对实验性心肌梗塞犬的影响

1.试验目的：

通过结扎犬LAD，观察注射用参附对∑-ST、N-ST、MIS和心肌三酶的影响。为证明注射用参附的抗心肌缺血作用，提供实验依据。

2.试验材料：

2.1.试验动物：

健康成年杂种犬，体重12-21kg，雌雄兼用，由白求恩医科大学实验动物部提供。

2.2.受试药物：

注射用参附，由哈药集团中药二厂提供，规格：40mg/支

参附注射液，由四川雅安三九药业有限公司生产，规格：20ml/支

3.试验方法：

杂种犬30只，随机分为5组，每组6只，以戊巴比妥30mg/kg iv麻醉。背位固定，颈部皮肤切开，气管插管，连接WM-2型人工呼吸机，分离冠状动脉左前降支下1/3处，穿线以备结扎，造成心肌梗塞，用多点湿布式吸附法标测EECG，标测点24个，分正常区(对照点)，梗塞边缘区和梗塞中心区，股静脉插管以备给药。

术毕，稳定15分钟。记录各点EECG，同时自股静脉取血，测AST，CPK和LDH值，做为给药前值，结扎冠状动脉15分钟后，经股静脉给药，对照组给予等容量生理盐水，阳性药物对照组给予参附注射液12.52ml/kg，注射用参附6.26mg/kg，12.52mg/kg，25mg/kg三个剂量组，记录：给药前、结扎成功后、给药后1、3、5、10、20、30、45、60、90、120、150、180、210、240、300、360分钟EECG，以ST段升高总mV数表示∑-ST，以ST段升高＞2mV的导联数为N-ST。记录360分后，第二次取血测心肌三酶。最后，取下心脏，称全心重，沿冠状沟剪去大血管根部和心房，称左心室重。将左心室均匀地横断切成5片，置于硝基四氮唑兰(N-BT)染液中，在37℃恒温水浴箱中染色15分钟。用落点求积法(36点/cm2)测量每片心肌双侧梗塞区(N-BT非染色区)与非梗塞区(N-BT染色区)，每片心肌称重，计算每片心肌面积，心室总面积和梗塞区的总面积，计算梗塞区与心室及心脏重量百分比。

4.实验结果：

4.1.对EECG的影响：

4.1.1.对缺血程度的影响(∑-ST)：

参附注射液对照组对缺血程度(∑-ST)，在20-180分钟作用明显(P＜0.05)，变化百分率在20-210分钟作用明显(P＜0.01)；注射用参附6.25mg/kg组在45-180分钟作用明显(P＜0.05)，变化百分率在45分钟作用明显(P＜0.05)；注射用参附12.52mg/kg组实测值在30-180分钟作用明显(P＜0.05)；注射用参附25mg/kg组在20-210分钟作用明显(P＜0.01)，变化百分率在20-210分钟作用明显(P＜0.05)。

4.1.2.对N-ST的影响：

参附注射液对照组对缺血范围(N-ST)，变化百分率在20-180分钟作用明显(P＜0.05)；注射用参附6.25mg/kg组变化百分率在30-180分钟作用明显(P＜0.05)；注射用参附12.52mg/kg组实测值在30-180分钟作用明显(P＜0.05)；注射用参附25mg/kg组实测值在30-60分钟作用明显(P＜0.05)，变化百分率在20-180分钟作用明显(P＜0.05)。

4.2.对MIS的影响：

阳性药组，低剂量组，中剂量组，高剂量组均可明显减少梗塞/全心肌梗塞/左心面积(P＜0.05)。

4.3.对心肌三酶(AST，CPK，LDH)的影响：

参附注射液对照组，注射用参附12.52mg/kg，25mg/kg可明显降低血清AST的含量(P＜0.01)，变化百分率降低明显(P＜0.05)。

参附注射液对照组，注射用参附25mg/kg变化百分率可明显降低血清CK的含量(P＜0.05)。

各个剂量组对血清中的LDH的含量，与盐水对照组比较无显著性差异。

5.讨论与结语：

本实验采用结扎冠状动脉前降支(LAD)造成急性心肌梗塞模型。用心肌外膜电图标测心肌缺血程度和范围，定量组织学测定心肌梗塞范围及心肌梗塞后血清酶的变化。实验结果证明，注射用参附经静脉给药，能明显降低心肌缺血程度(∑-ST)，减少心肌缺血范围(N-ST)，缩小心肌梗塞范围(MIS)，提示注射用参附具有抗心肌缺血作用。

通过注射用参附对开胸犬血流动力学研究，证明其能明显降低冠脉阻力，增加冠脉血流量和心肌血流量；通过心率减慢，降低左室作功，使心肌耗氧量降低，从而改善梗塞区供血供氧功能，减轻心肌细胞损伤。说明心肌梗塞范围缩小，破坏程度降低，对缺血心肌有保护作用。

具体实施方式  实施例

[实施例1]：取红参片，加4倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度65℃测得1.16，冷却至36℃，加入2倍量去离子水溶解，过滤，滤液用X-5型树脂柱精制，按药材树脂1∶1的量上样，用去离子水洗脱6个树脂体积，弃去去离子水洗液，用20％醇洗脱2个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用50％乙醇解离人参皂苷，洗脱4个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度70℃测得为1.04，检测人参总皂苷的含量为78％备用。取附子加工品黑顺片加6倍量的盐酸调得pH为2.0的去离子提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度80℃测得为1.16，二级醇沉，醇沉浓度第一次为65％，第二次为80％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度60℃测得为1.12，再加3倍量去离子水洗12小时，水洗液过滤，用D-113型弱酸性阳离子交换树脂柱精制，按药材树脂比1∶1的量上样，用去离子水洗脱7倍树脂体积，弃去水洗液，用0.05M的盐酸溶液洗脱4个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值3.0，浓缩至相对密度78℃测得为1.02，冷却至30℃，调pH值5.5，过滤，滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，用去离子水洗脱1个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用40％乙醇洗脱4个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在60℃测定为1.06，测定附子总碱含量为55％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.5，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

[实施例2]：取红参片，加3倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度60℃测得1.16，冷却至35℃，加入3倍量去离子水溶解，过滤，滤液用X-5型树脂柱精制，按药材树脂1∶1.5的量上样，用去离子水洗脱7个树脂体积，弃去去离子水洗液，用20％醇洗脱2个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用50％乙醇解离人参皂苷，洗脱4个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度75℃测得为1.03，检测人参总皂苷的含量为77％，备用。取附子加工品黑顺片加7倍量的盐酸调得pH为2.0的去离子提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度80℃测得为1.16，二级醇沉，醇沉浓度第一次为65％，第二次为80％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度60℃测得为1.12，再加3倍量去离子水洗12小时，水洗液过滤，用D-113型弱酸性阳离子交换树脂柱，按药材树脂比1∶1的量上样，用去离子水洗脱6倍树脂体积，弃去水洗液，用0.05M的盐酸溶液洗脱4个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值3.0，浓缩至相对密度80℃测得为1.02，冷却至30℃，调pH值5.5，过滤，滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，用去离子水洗脱1个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用40％乙醇洗脱4个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在60℃测定为1.01，测定附子总碱含量为55％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.5，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

[实施例3]：取红参片，加4倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度66℃测得1.15，冷却至31℃，加入2倍量蒸馏水溶解，过滤，滤液用X-5型树脂柱精制，按药材树脂1∶1的量上样，用蒸馏水洗脱8个树脂体积，弃去蒸馏水洗液，用30％醇洗脱2个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用50％乙醇解离人参皂苷，洗脱4个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度70℃测得为1.04，检测人参总皂苷的含量为75％备用。取附子加工品黑顺片加8倍量的盐酸调得pH为2.5的蒸馏水提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度85℃测得为1.18，二级醇沉，醇沉浓度第一次为70％，第二次为80％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度60℃测得为1.15，再加5倍量蒸馏水洗12小时，水洗液过滤，用D-113型弱酸性阳离子交换树脂柱精制，按药材树脂比1∶1的量上样，用蒸馏水洗脱9倍树脂体积，弃去水洗液，用0.1M的盐酸溶液洗脱4个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值4.0，浓缩至相对密度78℃测得为1.02，冷却至30℃，调pH值5.5，过滤，滤液过X-5大孔吸附树脂柱，用蒸馏水洗脱2个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用40％乙醇洗脱4个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在62℃测定为1.05，测定附子总碱含量为56％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.8，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

[实施例4]：取红参片，加5倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度68℃测得1.14，冷却至26℃，加入6倍量去离子水溶解，过滤，滤液用AB-8型树脂柱精制，按药材树脂1∶1的量上样，用去离子水洗脱8个树脂体积，弃去去离子水洗液，用20％醇洗脱2个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用60％乙醇解离人参皂苷，洗脱4个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度75℃测得为1.03，检测人参总皂苷的含量为77％备用。取附子加工品黑顺片加8倍量的盐酸调得pH为3.0的去离子提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度85℃测得为1.18，二级醇沉，醇沉浓度第一次为75％，第二次为80％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度62℃测得为1.13，再加5倍量去离子水洗12小时，水洗液过滤，用D-152型弱酸性阳离子交换树脂柱精制，按药材树脂比1∶1的量上样，用去离子水洗脱10倍树脂体积，弃去水洗液，用0.15M的盐酸溶液洗脱5个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值4.0，浓缩至相对密度78℃测得为1.02，冷却至30℃，调pH值6.5，过滤，滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，用去离子水洗脱1个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用40％乙醇洗脱3个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在66℃测定为1.02，测定附子总碱含量为55％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.5，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

[实施例5]：取红参片，加4倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度67℃测得1.16，冷却至23℃，加入6倍量去离子水溶解，过滤，滤液用X-5型树脂柱精制，按药材树脂1∶1的量上样，用去离子水洗脱11个树脂体积，弃去去离子水洗液，用40％醇洗脱2个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用60％乙醇解离人参皂苷，洗脱5个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度74℃测得为1.04，检测人参总皂苷的含量为76％备用。取附子加工品黑顺片加10倍量的磷酸调得pH为4.0的去离子提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度88℃测得为1.17，二级醇沉，醇沉浓度第一次为70％，第二次为90％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度68℃测得为1.12，再加7倍量去离子水洗16小时，水洗液过滤，用D-113型弱酸性阳离子交换树脂柱精制，按药材树脂比1∶1.5的量上样，用去离子水洗脱7倍树脂体积，弃去水洗液，用0.2M的盐酸溶液洗脱4个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值4.5，浓缩至相对密度76℃测得为1.02，冷却至22℃，调pH值5.0，过滤，滤液过X-5大孔吸附树脂柱，用去离子水洗脱2个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用40％乙醇洗脱4个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在60℃测定为1.02，测定附子总碱含量为54％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.5，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

[实施例6]：取红参片，加5倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度67℃测得1.15，冷却至26℃，加入3倍量去离子水溶解，过滤，滤液用X-5型树脂柱精制，按药材树脂1∶1的量上样，用蒸馏水洗脱9个树脂体积，弃去去离子水洗液，用30％醇洗脱4个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用70％乙醇解离人参皂苷，洗脱4个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度75℃测得为1.03，检测人参总皂苷的含量为76％备用。取附子加工品黑顺片加8倍量的磷酸调得pH为3.0的蒸馏水提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度80℃测得为1.18，二级醇沉，醇沉浓度第一次为70％，第二次为85％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度60℃测得为1.14，再加8倍量去离子水洗12小时，水洗液过滤，用D-113型弱酸性阳离子交换树脂柱精制，按药材树脂比1∶1的量上样，用去离子水洗脱10倍树脂体积，弃去水洗液，用0.05M的盐酸溶液洗脱4个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值3.5，浓缩至相对密度75℃测得为1.02，冷却至26℃，调pH值5.5，过滤，滤液过X-5大孔吸附树脂柱，用去离子水洗脱4个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用50％乙醇洗脱4个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在63℃测定为1.04，测定附子总碱含量为53％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.9，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

[实施例7]：取红参片，加3倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度66℃测得1.16，冷却至28℃，加入6倍量去离子水溶解，过滤，滤液用X-5型树脂柱精制，按药材树脂1∶1的量上样，用去离子水洗脱8个树脂体积，弃去去离子水洗液，用20％醇洗脱3个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用70％乙醇解离人参皂苷，洗脱4个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度72℃测得为1.04，检测人参总皂苷的含量为75％备用。取附子加工品黑顺片加7倍量的盐酸调得pH为4.0的去离子提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度84℃测得为1.17，二级醇沉，醇沉浓度第一次为60％，第二次为80％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度66℃测得为1.14，再加8倍量去离子水洗16小时，水洗液过滤，用D-113型弱酸性阳离子交换树脂柱精制，按药材树脂比1∶1的量上样，用去离子水洗脱8倍树脂体积，弃去水洗液，用0.15M的盐酸溶液洗脱4个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值3.5，浓缩至相对密度77℃测得为1.02，冷却至25℃，调pH值5.5，过滤，滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，用去离子水洗脱1个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用40％乙醇洗脱4个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在60℃测定为1.02，测定附子总碱含量为51％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.6，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

[实施例8]：取红参片，加4倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度65℃测得1.16，冷却至26℃，加入3倍量去离子水溶解，过滤，滤液用AB-8型树脂柱精制，按药材树脂1∶1.5的量上样，用去离子水洗脱10个树脂体积，弃去去离子水洗液，用20％醇洗脱6个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用60％乙醇解离人参皂苷，洗脱5个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度75℃测得为1.04，检测人参总皂苷的含量为76％备用。取附子加工品黑顺片加6倍量的盐酸调得pH为3.5的去离子提取3次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度85℃测得为1.17，二级醇沉，醇沉浓度第一次为75％，第二次为85％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度62℃测得为1.15，再加4倍量去离子水洗12小时，水洗液过滤，用D-152型弱酸性阳离子交换树脂柱精制，按药材树脂比1∶1的量上样，用去离子水洗脱8倍树脂体积，弃去水洗液，用0.1M的盐酸溶液洗脱4个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值3.5，浓缩至相对密度88℃测得为1.02，冷却至20℃，调pH值6.5，过滤，滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，用去离子水洗脱1.5个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用50％乙醇洗脱6个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在61℃测定为1.06，测定附子总碱含量为54％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.5，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

[实施例9]：取红参片，加4倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度64℃测得1.13，冷却至25℃，加入4倍量去离子水溶解，过滤，滤液用H₁₀₃型树脂柱精制，按药材树脂1∶1的量上样，用去离子水洗脱8个树脂体积，弃去去离子水洗液，用30％醇洗脱3个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用50％乙醇解离人参皂苷，洗脱4个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度72℃测得为1.04，检测人参总皂苷的含量为77％备用。取附子加工品黑顺片加8倍量的盐酸调得pH为3.0的去离子提取3次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度80℃测得为1.20，二级醇沉，醇沉浓度第一次为65％，第二次为85％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度62℃测得为1.12，再加4倍量去离子水洗12小时，水洗液过滤，用D-113型弱酸性阳离子交换树脂柱精制，按药材树脂比1∶1的量上样，用去离子水洗脱6倍树脂体积，弃去水洗液，用0.05M的盐酸溶液洗脱4个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值3.0，浓缩至相对密度75℃测得为1.02，冷却至26℃，调pH值5.5，过滤，滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，用去离子水洗脱1个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用50％乙醇洗脱4个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在63℃测定为1.06，测定附子总碱含量为54％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.7，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

[实施例10]：取红参片，加3倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度65℃测得1.15，冷却至30℃，加入2倍量去离子水溶解，过滤，滤液用H₁₀₃型树脂柱精制，按药材树脂1∶1.5的量上样，用去离子水洗脱12个树脂体积，弃去去离子水洗液，用20％醇洗脱2个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用60％乙醇解离人参皂苷，洗脱6个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度74℃测得为1.03，检测人参总皂苷的含量为71％备用。取附子加工品黑顺片加9倍量的盐酸调得pH为2.5的去离子提取2次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度84℃测得为1.16，二级醇沉，醇沉浓度第一次为70％，第二次为80％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度64℃测得为1.13，再加8倍量去离子水洗12小时，水洗液过滤，用D-113型弱酸性阳离子交换树脂柱精制，按药材树脂比1∶1的量上样，用去离子水洗脱8倍树脂体积，弃去水洗液，用0.15M的盐酸溶液洗脱4个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值3.0，浓缩至相对密度78℃测得为1.02，冷却至30℃，调pH值5.5，过滤，滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，用去离子水洗脱2个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用40％乙醇洗脱4个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在65℃测定为1.02，测定附子总碱含量为52％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.6，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

[实施例11]：取红参片，加4倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度66℃测得1.15，冷却至21℃，加入4倍量去离子水溶解，过滤，滤液用H₁₀₃型树脂柱精制，按药材树脂1∶1的量上样，用去离子水洗脱10个树脂体积，弃去去离子水洗液，用40％醇洗脱2个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用60％乙醇解离人参皂苷，洗脱4个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度72℃测得为1.03，检测人参总皂苷的含量为72％备用。取附子加工品黑顺片加10倍量的盐酸调得pH为4.0的去离子提取3次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度80℃测得为1.19，二级醇沉，醇沉浓度第一次为65％，第二次为80％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度65℃测得为1.13，再加8倍量去离子水洗12小时，水洗液过滤，用D₁₅₂型弱酸性阳离子交换树脂柱精制，按药材树脂比1∶1的量上样，用去离子水洗脱8倍树脂体积，弃去水洗液，用0.10M的盐酸溶液洗脱4个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值3.0，浓缩至相对密度80℃测得为1.02，冷却至38℃，调pH值5.5，过滤，滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，用去离子水洗脱2个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用60％乙醇洗脱6个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在66℃测定为1.01，测定附子总碱含量为53％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.8，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

[实施例12]：取红参片，加3倍量85％乙醇，连续提取5次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度70℃测得1.14，冷却至31℃，加入6倍量去离子水溶解，过滤，滤液用X-5型树脂柱精制，按药材树脂1∶1的量上样，用去离子水洗脱11个树脂体积，弃去去离子水洗液，用30％醇洗脱4个树脂体积，弃去乙醇洗脱液，再用70％乙醇解离人参皂苷，洗脱5个树脂体积，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成清膏，相对密度75℃测得为1.03，检测人参总皂苷的含量为77％备用。取附子加工品黑顺片加6倍量的盐酸调得pH为4.5的去离子提取3次，每次2小时，合并提取液，浓缩至相对密度90℃测得为1.16，二级醇沉，醇沉浓度第一次为65％，第二次为75％。每次24小时，醇沉液过滤，浓缩至相对密度65℃测得为1.14，再加3倍量去离子水洗12小时，水洗液过滤，用D₁₅₂型弱酸性阳离子交换树脂柱精制，按药材树脂比1∶1的量上样，用去离子水洗脱9倍树脂体积，弃去水洗液，用0.20M的盐酸溶液洗脱6个树脂体积，用去离子水继续洗脱一个树脂体积，合并洗脱液，调pH值4.0，浓缩至相对密度80℃测得为1.02，冷却至38℃，调pH值7.0，过滤，滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，用去离子水洗脱2个树脂体积，弃去水洗液。树脂柱用40％乙醇洗脱6个树脂体积，收集醇洗液，浓缩至相对密度在63℃测定为1.05，测定附子总碱含量为58％。将红参与附子的精制物均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值为6.9，灭菌30分钟，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，进冻干机箱冻干，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针。

Claims (3)

1、注射用参附是由红参与附子两味中药组成的一种冻干粉针剂。其特征在于它制备工艺的提取包括以下步骤：

(1)、红参的提取：取红参片，加3-6倍量85％乙醇，回流提取2小时，收集提取液，连续提取5次，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度在温度60-70℃时为1.14～1.16，冷却至70℃备用；

(2)、附子的提取：取附子，加6-10倍量用酸调得pH为2.0-4.5的纯水，煎煮2-5遍，每次2小时，合并提取液，浓缩成膏，至相对密度在80～90℃测定为1.16～1.20，提取膏备用；

(3)、红参提取物的精制：将红参提取物，加入2-6倍量纯水溶解，过滤，滤液上大孔树脂柱，按药材与大孔树脂比1∶1或1∶1.5的量上样，用纯水和乙醇分别洗脱、解离人参皂苷，收集该洗脱液，回收乙醇，浓缩成70～80℃测其相对密度为1.02～1.04的红参精制物，备用；经此工艺人参总皂苷含量达到75％以上；

(4)、附子提取物的精制：将附子提取物边搅拌边加入95％的乙醇，使醇浓度达到65％-75％，静置24小时，取上清液过滤，浓缩至相对密度60～70℃测定为1.12～1.16，冷却至40℃以下，边搅拌边加入95％的乙醇，使醇浓度达到80-90％，静置24小时，取上清液过滤，浓缩至相对密度60～70℃时为1.12～1.16；将上述附子浓缩膏，加3-8倍量去离子水，搅匀，静置12-24小时，水溶液过滤，滤液过弱酸性阳离子交换树脂柱，用纯水及酸水溶液洗脱，合并洗脱液，调pH值3.0～5.0，浓缩至相对密度80～90℃测定为1.02-1.05，冷却至40℃以下，调pH值5.5～7.0，过滤，滤液上大孔吸附树脂柱，用纯水及乙醇洗脱，收集醇洗液，浓缩成相对密度在60～70℃测定为1.01～1.06的附子精制物，备用；经此工艺附子总生物碱含量达到50％以上；

(5)红参、附子精制物按原药材比1∶2均匀混合，加注射用水稀释一定量，调pH值5.0～7.0，灭菌30min，冷藏72小时，过滤，超滤，将超滤药液分装，盖塞，冷冻干燥，出箱压铝盖，包装，制成成品粉针，经此制备工艺使总成分的含量达到80％以上。

2、根据权利要求1的冻干粉针剂，其制备工艺中所用纯水为去离子水或蒸馏水。

3、根据权利要求1的冻干粉针剂，其制备工艺中所用酸为盐酸或磷酸。