CN101628022A - 一种红花滴丸及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种红花滴丸，是以中药红花为原料制成药物提取物，与作为基质的可药用载体一起制成羟基红花黄色素A含量不低于25mg/g的滴丸。其制备方法是将红花水提液浓缩、醇沉，回收乙醇后上大孔吸附树脂柱纯化，收集洗脱液浓缩干燥得到红花药物提取物，与基质聚乙二醇4000混合，滴入冷却剂中制成滴丸。本发明的红花滴丸为口服剂型，服药方便，增加了患者服药的安全性，可应用于心血管病患者出院后恢复期的治疗，满足了不同时期患者对药品的不同需求。本发明药物溶解和吸收加快，提高了药物的生物利用度，稳定性高，保证了药品的质量，较之注射剂不易出现过敏反应，副作用小，使用安全方便。

Description

一种红花滴丸及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种具有活血化瘀、益气止痛作用，用于治疗心血管疾病的药物，特别是一种利用中药红花制备的滴丸制剂。本发明还涉及该红花滴丸的制备方法。

技术背景

红花为菊科植物Carthamus tinctorius L.的干燥花，是一种常用的活血化瘀中药，作为药用已有上千年得历史，可用于冠心病、心绞痛、脉管炎等诸多心血管疾病的治疗。

我国自20世纪70年代以来，对红花的化学成分进行了广泛研究。多数研究证明，红花的主要有效成分存在于其水溶性部位，其中红花黄色素是其主要生理活性物质。近年来，国内外学者对红花黄色素的药理作用进行了深入研究，发现其在扩冠、降压、抗血栓、抗凝血、活血化瘀、耐缺氧、免疫抑制等方面都有明显的药理功效，大量的药理实验证明红花黄色素是红花治疗作用的重要物质基础之一。

红花大多于复方制剂中应用，关于其单方制剂的临床报道很少。近年来，红花单方制剂红花注射液广泛应用于临床各科治疗多种瘀血阻滞为患或血行不畅之证，如冠心病、心绞痛、脑梗塞等，取得了满意的临床疗效。例如，朱勇用红花注射液治疗冠心病心绞痛136例，并以复方丹参注射液164例作为对照，结果表明治疗组总有效率为95.59％，优于对照组。李利明等对比了红花注射液与复方丹参注射液治疗冠心病心绞痛的疗效，结果显示：红花注射液可明显减少心绞痛发作次数，持续时间，减少硝酸甘油用量，并可使心肌缺血心电图有较好的恢复作用，疗效明显优于对照组。张丽娟等采用红花注射液加入糖或盐水中静滴治疗脑梗塞45例，与对照组低分子右旋糖酐加维脑路通静滴相比愈显率有显著性差异，并且红花组在降低红细胞压积及血小板粘附率方面明显优于对照组。张春燕分别采用红花注射液与复方丹参注射液静滴治疗68例急性脑梗死病人，结果表明红花与丹参皆能提高疗效，降低血脂与血流变学指标，与治疗前相比有显著性差异，而红花组降低血液流变学作用较丹参组明显，差异非常显著。刘俊瑛等用50％红花注射液5ml加250ml生理盐水静脉点滴，每日1次，逐日增加5ml直至20ml(含红花10g)，20天为1疗程，均应用2个疗程。作为控制血糖等全身外辅助治疗糖尿病视网膜病变60例118只眼。结果：眼底荧光血管造影复查表明，普遍表现毛细血管扩张明显，荧光素漏出增多，微血管进行性病变未得到控制。薛腊梅等将红花注射液治疗的23例糖尿病周围神经病变与23例常规应用B族维生素治疗的患者进行了对照，结果治疗组2周显效率91％，对照组2周显效率34.7％，腓总神经运动传导速度及感觉传导速度均显著提高，提示，红花注射液可有效缓解糖尿病周围神经病变，改善神经传导速度，可有效防治糖尿病周围神经病变。

红花注射液已在临床使用多年，其临床效果已经得到了充分的肯定。然而，由于其采用注射剂型，受现有注射剂制备技术的限制，往往容易产生急性过敏反应或不良反应，而且制造和医疗成本高，运输储存不方便。特别是注射剂的操作难度大，恢复期患者用药不便，不适宜在家庭使用。为此，急需在原红花注射液临床适应症及制剂制备工艺的基础上，研制一种能满足恢复期患者在家庭中使用的口服剂型。

另外，由于制备技术等原因，大多数药物的口服剂型在服用后存在溶散时间长、溶出率低、吸收较差、肝肠首过效应和生物利用率较低等问题，从而影响药效的发挥，也直接影响治疗效果。因此，有必要寻求更好的红花药物的口服剂型，以满足临床治疗和恢复期患者家庭使用的需求。

发明内容

本发明的目的就是提供一种红花的单方制剂——红花滴丸，以满足恢复期患者的使用需求。

提供一种生物利用度高，药效发挥迅速的红花滴丸的制备方法，是本发明的另一发明目的。

本发明的红花滴丸是以中药红花为原料，制成药物提取物，与作为基质的可药用载体一起制备成滴丸，其中：

药物提取物的制备是以红花为原料，于60～90℃提取3次，每次40～80分钟，第一次加入红花质量15～25倍的水，第二次和第三次各加入红花质量12～18倍的水，合并三次提取液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.0～1.1，放置至室温，加入乙醇溶液使含醇量达到70～90wt％，于4℃静置24～36小时，过滤去除沉淀，滤液于60℃减压回收乙醇至无醇味，加入8～10倍体积的水，上大孔吸附树脂柱，以水洗脱1个柱体积，弃去洗脱液，再用20～40wt％乙醇溶液洗脱4个柱体积，收集洗脱液，50～80℃减压浓缩，喷雾干燥，得到红花药物提取物；

所述的作为基质的可药用载体为聚乙二醇4000，且药物提取物与基质的质量配比满足羟基红花黄色素A含量不低于25mg/g。

在所述的上大孔吸附树脂柱吸附步骤中，上样量与树脂用量的质量比为1∶1。

本发明红花滴丸的具体制备方法包括以下步骤：

以红花为原料，于60～90℃提取3次，每次40～80分钟，第一次加入红花质量15～25倍的水，第二次和第三次各加入红花质量12～18倍的水，合并三次提取液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.0～1.1，放置至室温，加入乙醇溶液使含醇量达到70～90wt％，于4℃静置24～36小时，过滤去除沉淀，滤液于60℃减压回收乙醇至无醇味，加入8～10倍体积的水，上大孔吸附树脂柱，以水洗脱1个柱体积，弃去洗脱液，再用20～40wt％乙醇溶液洗脱4个柱体积，收集洗脱液，50～80℃减压浓缩，喷雾干燥，得到红花药物提取物；

将聚乙二醇4000加热熔融后，加入红花药物提取物，使满足物料中的羟基红花黄色素A含量不低于25mg/g，搅拌均匀，转移至滴丸机的贮液罐，调整滴丸机的温度控制系统，使贮液罐和滴头温度控制在70～90℃，将物料滴入冷却剂中收缩成型制成滴丸。

上述制备方法中，所使用的冷却剂是甲基硅油或植物油。

按照本发明方法制备的红花滴丸符合滴丸剂产品的质量标准，其中羟基红花黄色素A的含量可以达到25mg/g以上。

本发明红花滴丸及其制备方法所具有的有益效果是：

1)本发明的红花滴丸由传统的注射剂型改为口服剂型，服药方便，增加了患者服药的安全性，可应用于心血管病患者出院后恢复期的治疗，满足了不同时期患者对药品的不同需求。

2)本发明的红花滴丸采用大孔树脂吸附纯化技术提取红花中的活性有效成分，与可药用载体一起制成固体分散剂，使药物呈分子、胶体或微晶状态分散于基质中，药物的总表面积增大，且基质为亲水性，对药物具有润湿作用，能使药物迅速溶散成微粒或溶液，因而使药物的溶解和吸收加快，提高了药物的生物利用度，充分发挥出药物的高效、速效作用。

3)本发明的红花滴丸是将药物提取物与熔融的基质混合后，滴入不相混溶的冷却剂中制成，药物稳定性高，不易水解、氧化，且操作在液态下进行，无粉尘污染，不易受晶型的影响，保证了药品的质量，增加了药品的稳定性。

4)本发明制备得到的红花滴丸质量稳定，较之注射剂不易出现过敏反应，副作用小，使用安全方便。

5)本发明的红花滴丸较之注射剂制备工艺简单，储存、运输、携带方便，且滴丸计量准确，患者服用剂量容易控制。

具体实施方式

实施例1

取红花药材186g，加入20倍重量的水，于80℃提取60分钟，提取液过滤，滤渣再加入15倍重量的水，于80℃提取60分钟，提取液过滤，滤渣再加入15倍重量的水，于80℃提取60分钟，过滤。合并三次滤液，减压浓缩至相对密度为1.05(80℃)，放置至室温。加入90％乙醇，使含醇量达到80％，在4℃静置24小时，过滤去除沉淀，滤液于60℃减压回收乙醇至无醇味。加入浓缩液10倍体积的水稀释后，上已处理好的DM-130大孔吸附树脂柱，上样量与树脂用量的质量比为1∶1，用水洗脱1个柱体积，弃去洗脱液，再用30％乙醇洗脱4个柱体积，收集洗脱液，60℃减压浓缩，喷雾干燥，得到红花药物提取物14.3g。

将35.7g聚乙二醇4000置水浴中加热熔融后，加入红花药物提取物，搅拌均匀，转移至滴丸机的贮液罐中，调整滴丸机温度控制系统，使贮液罐和滴头温度保持在80℃，调节滴头使丸重为50mg，滴入甲基硅油冷却剂中，收缩成型制成1000丸滴丸。

实施例2

红花滴丸对心肌缺血大鼠生理指标的影响

取雄性健康大鼠50只，随机分为5组(模型组，红花滴丸低、中、高组，红花注射液组)，模型组按1ml/100g给予生理盐水，红花滴丸低、中、高剂量组分别按30mg/kg、60mg/kg、120mg/kg(按红花滴丸中红花提取物量计，分别相当于生药390、780、1560mg/kg)剂量灌胃给药，各组连续给药7天，末次给药45min后腹腔注射20％乌拉坦1.2g/kg麻醉，背位固定，记录正常心电图。胸部去毛、消毒、沿左锁骨中线纵行切开皮肤约2cm，在第四或第五肋间钝性分离肌层，打开胸腔，剪开心包，轻压右侧胸廓，挤出心脏，在动脉圆锥与左心耳之间冠状静脉处结扎左冠状动脉后，把心脏放回胸腔，迅速缝合胸壁，手术需在30秒内完成，记录缺血后心电图变化。红花注射液组按生药计780mg/kg剂量尾静脉注射给药，给药15min后按上述方法进行心肌缺血手术。

数据用X±SD表示，以t检验进行统计学处理。

表1红花滴丸对心肌缺血大鼠心电图J点的影响

△表示生药剂量

*表示与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

#表示与红花注射液组比较，#P＞0.05

结果显示，与模型组比较，红花注射液组与红花滴丸中、高剂量组在60min均能显著降低J点抬高的幅度(P＜0.01)，在30min红花注射液组、红花滴丸高剂量组也能明显降低缺血大鼠J点抬高的幅度(P＜0.05)。在生药量相等的条件下，红花滴丸与红花注射液作用强度相当，二者之间无显著性差异(P＞0.05)。证明红花滴丸能显著降低冠状动脉结扎大鼠心电J点抬高的幅度，具有较好的心肌保护作用。

实施例3

红花滴丸对心肌缺血大鼠生化指标的影响

取雄性健康大鼠60只，随机分为6组(假手术组，模型组，红花滴丸低、中、高组，红花注射液组)，假手术组、模型组按1ml/100g给予生理盐水，红花滴丸组分别按30mg/kg、60mg/kg、120mg/kg(按红花滴丸中红花提取物量计，分别相当于生药390、780、1560mg/kg)剂量灌胃给药，各组连续给药7天，末次给药45min后腹腔注射20％乌拉坦1.2g/kg麻醉，背位固定。胸部去毛、消毒、沿左锁骨中线纵行切开皮肤约2cm，在第四或第五肋间钝性分离肌层，打开胸腔，剪开心包，轻压右侧胸廓，挤出心脏。在动脉圆锥与左心耳之间冠状静脉处结扎左冠状动脉后，把心脏放回胸腔，迅速缝合胸壁，手术需在30秒内完成。红花注射液组按780mg生药/kg剂量尾静脉注射给药，给药后15min按上述方法进行心肌缺血手术。6h后将大鼠固定于解剖板上，分离颈总动脉，抽取血液，静置10min后，4500rpm离心15min，吸取血清，利用试剂盒检测CK、LDH、AST酶活。

数据用X±SD表示，以t检验进行统计学处理。

表2红花滴丸对心肌缺血大鼠血液中酶活的影响

△表示生药剂量

#表示与假手术组比较，^###P＜0.001

*表示与模型组比较，*P＜0.05，***P＜0.001；

▲表示与红花注射液组比较，▲P＞0.05

结果显示，心肌缺血模型大鼠血清CK、AST、LDH酶活的活性明显升高(P＜0.001)，与模型组比较，红花滴丸中、高剂量组、红花注射液均能显著降低上述三种酶的活性(P＜0.05)。在生药量相等的条件下，红花滴丸与红花注射液具有等效的作用强度，二者间无显著性差异(P＞0.05)。红花滴丸能有效地改善因心肌缺血引起的组织损伤，使血清CK、AST、LDH活性显著降低。

实施例4

红花滴丸对心肌缺血大鼠形态学指标的影响

取雄性健康大鼠50只，随机分为5组(模型组，红花滴丸低、中、高组，红花注射液组)，模型组按1ml/100g给予生理盐水，红花滴丸低、中、高剂量组分别按30mg/kg、60mg/kg、120mg/kg(按红花滴丸中红花提取物量计，分别相当于生药390、780、1560mg/kg)剂量灌胃给药，各组连续给药7天，末次给药45min后腹腔注射20％乌拉坦1.2g/kg麻醉，背位固定，记录正常心电图。胸部去毛、消毒、沿左锁骨中线纵行切开皮肤约2cm，在第四或第五肋间钝性分离肌层，打开胸腔，剪开心包，轻压右侧胸廓，挤出心脏。在动脉圆锥与左心耳之间冠状静脉处结扎左冠状动脉后，把心脏放回胸腔，迅速缝合胸壁，手术需在30s内完成。红花注射液组按780mg生药/kg剂量尾静脉注射给药，给药后15min按上述方法进行心肌缺血手术。6h后将大鼠固定于解剖板上，打开胸腔，剥离心脏，用生理盐水冲洗，除去血污，剔除血管脂肪等非心肌组织，沿冠状沟切除心房，留下心室，称重。顺房室沟从心尖到心基部平行将心室切成0.1cm厚的心肌片，将心肌片放在0.3％的NBT，在37℃孵育4min，染色后立即用水冲洗去多余的染料，剪去各心肌片被染色的非梗死区心肌，称量未染色的梗死区心肌，按照下列公式算出心肌梗死重量百分率(％)

数据用X±SD表示，以t检验进行统计学处理。

表3红花滴丸对心肌缺血大鼠心肌缺血面积的影响

△表示生药剂量

*表示与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

#表示与红花注射液组比较，#P＞0.05

结果显示红花滴丸中、高剂量组、红花注射液组与模型组相比，能显著降低心肌梗死重量百分率(P＜0.05或P＜0.01)。在生药量相等的条件下，红花注射液与红花滴丸作用强度相当，二者间无显著性差异(P＞0.05)。红花滴丸可缓解缺血对心肌细胞的损伤，具有保护心肌组织的作用。

实施例5

红花滴丸对大鼠体内血栓形成的影响

取雄性健康大鼠50只，随机分为5组(空白对照组，红花滴丸低、中、高组，红花注射液组)。空白对照组按1ml/100g给予生理盐水，红花滴丸低、中、高剂量组分别按30mg/kg、60mg/kg、120mg/kg(按红花滴丸中红花提取物量计，分别相当于生药390、780、1560mg/kg)剂量灌胃给药，各组连续给药7天，实验前各组禁食16小时，末次给药45分钟后，水合氯醛麻醉(360mg/kg，i.p.)，分离右侧颈总动脉及左颈外静脉，在聚乙烯管中放入一根长5cm已称重的七号丝线。以含肝素钠(50U/ml)的生理盐水溶液充满聚乙烯管，聚乙烯管的一端插入左颈外静脉，另一端插入右颈总动脉。打开夹闭血管的动脉夹，使血流从右总颈动脉流经聚乙烯管后，返回左颈外静脉。开放血流15min后立即取出丝线称重，减去丝线重量即得血栓湿重。红花注射液组按780mg生药/kg剂量尾静脉注射给药，给药15min后按上述方法进行动-静脉旁路血栓试验。

数据用X±SD表示，以t检验进行统计学处理。

表4红花滴丸对大鼠动-静脉旁路血栓形成的影响(x±SD，n＝10)

*与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01。

#表示与红花注射液组比较，#P＞0.05

结果所示，开放血流15min后丝线上有明显的血栓粘附，红花滴丸中、高剂量，红花注射液组均可明显抑制血栓的形成，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。在生药量相等的条件下，红花滴丸与红花注射液作用强度相当，二者比较无显著性差异(P＞0.05)。红花滴丸能显著抑制血栓的形成，达到活血化淤的作用。

实施例6

红花滴丸对大鼠血液流变性的影响

取健康大鼠50只，雌雄各半，随机分为5组(空白对照组，红花滴丸低、中、高组，红花注射液组)。空白对照组按1ml/100g给予生理盐水，红花滴丸小剂量组(HHDW30mg/kg，按生药计相当于原制剂390mg/kg)，红花滴丸中剂量组(HHDW60mg/kg，按生药计相当于原制剂780mg/kg)，红花滴丸大剂量组(HHDW120mg/kg，按生药计相当于原制剂1560mg/kg)，各组连续灌胃给药7天，每组10只，实验前各组禁食16小时，然后分别给予相应的药物，45min后水合氯醛麻醉(360mg/kg，i.p.)，于腹主动脉取血5ml，以0.5％肝素抗凝，用血液流变学测试仪测定全血粘度、血浆粘度、红细胞压积等指标。红花注射液组按780mg生药/kg剂量尾静脉注射给药，给药15min后，按上述方法进行血液流变学测定。

数据用X±SD表示，以t检验进行统计学处理。

表5红花滴丸对大鼠血液流变性的影响(X±SD)

*与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01

#表示与红花注射液组比较，#P＞0.05

结果所示，与空白对照组比较，红花注射液组、红花滴丸中、高剂量组全血粘度、血浆粘度明显降低(P＜0.05)；红花注射液组、红花滴丸高剂量组红细胞压积明显低于空白对照组(P＜0.05)。红花滴丸中剂量与红花注射液比较，二者作用强度相当，无显著差异(P＞0.05)。红花滴丸可降低大鼠全血粘度、血浆粘度和红细胞压积。

实施例7

红花滴丸的毒理学实验

小鼠以5.0g/kg的剂量、0.5ml/20g(25ml/kg)的体积，一日一次给药；大鼠以5.0g/kg的剂量、2ml/100g(20ml/kg)的体积，一日一次给药。未发现动物死亡和其他异常变化。结果表明：红花滴丸提取物小鼠和大鼠口服的最大给药量均为5.0g/kg。

观察了红花滴丸提取物三个剂量组(1800mg/kg，600mg/kg及200mg/kg)连续灌胃给药3个月对大鼠产生得毒性作用。结果显示：(1)给药组及对照组动物一般状况良好，自第3周开始，高剂量组大鼠的体重比对照组明显升高，其中雄性大鼠分别在第7、8、9、10、11、12、13周与对照组比较具有统计学差异；雌雄大鼠分别在第8、9、10、11、12、13周与对照组比较具有统计学差异。(2)血清T-BIL水平在3个剂量组都明显升高，高剂量组5/10高于0.3mg/dl，中剂量组4/10高于0.3mg/dl，低剂量组3/10高于0.3mg/dl。对照组T-BIL水平均在0.1-0.3mg/dl之间。(3)高剂量组血清GPT水平与对照组比较明显升高(P＜0.01)，对照组GPT水平在32-53IU/L之间，高剂量组在36-62IU/L之间，其中5/10大于53IU/L。综合3个月得阶段性实验结果：红花提取物可能具有促进大鼠生长得作用；虽其高剂量升高血GPT，但病理组织学检查未见肝细胞得异常变化。

实施例8

红花滴丸稳定性检测试验

根据中药新药质量稳定性研究的技术要求以及中药新药稳定性试验要求，红花滴丸药品标准草案和中国药典2000年版一部有关滴丸剂项下的方法和要求，对红花滴丸进行了为期6个月的性状、鉴别、含量测定、溶散时限和微生物限度(细菌、霉菌、大肠杆菌)检查等四项进行稳定性考察。结果如表6

表6红花滴丸稳定性试验报告

Claims (5)

1、一种红花滴丸，是以中药红花为原料，制成药物提取物，与作为基质的可药用载体一起制备成滴丸，其中：

药物提取物的制备是以红花为原料，于60～90℃提取3次，每次40～80分钟，第一次加入红花质量15～25倍的水，第二次和第三次各加入红花质量12～18倍的水，合并三次提取液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.0～1.1，放置至室温，加入乙醇溶液使含醇量达到70～90wt％，于4℃静置24～36小时，过滤去除沉淀，滤液于60℃减压回收乙醇至无醇味，加入8～10倍体积的水，上大孔吸附树脂柱，以水洗脱1个柱体积，弃去洗脱液，再用20～40wt％乙醇溶液洗脱4个柱体积，收集洗脱液，50～80℃减压浓缩，喷雾干燥，得到红花药物提取物；

所述的作为基质的可药用载体为聚乙二醇4000，且药物提取物与基质的质量配比满足羟基红花黄色素A含量不低于25mg/g。

2、根据权利要求1所述的红花滴丸，其特征是所述的大孔吸附树脂柱吸附中，上样量与树脂用量的质量比为1∶1。

3、权利要求1所述红花滴丸的制备方法，包括以下步骤：

以红花为原料，于60～90℃提取3次，每次40～80分钟，第一次加入红花质量15～25倍的水，第二次和第三次各加入红花质量12～18倍的水，合并三次提取液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.0～1.1，放置至室温，加入乙醇溶液使含醇量达到70～90wt％，于4℃静置24～36小时，过滤去除沉淀，滤液于60℃减压回收乙醇至无醇味，加入8～10倍体积的水，上大孔吸附树脂柱，以水洗脱1个柱体积，弃去洗脱液，再用20～40wt％乙醇溶液洗脱4个柱体积，收集洗脱液，50～80℃减压浓缩，喷雾干燥，得到红花药物提取物；

将聚乙二醇4000加热熔融后，加入红花药物提取物，使满足物料中的羟基红花黄色素A含量不低于25mg/g，搅拌均匀，转移至滴丸机的贮液罐，调整滴丸机的温度控制系统，使贮液罐和滴头温度控制在70～90℃，将物料滴入冷却剂中收缩成型制成滴丸。

4、根据权利要求3所述的红花滴丸的制备方法，其特征是在所述的大孔吸附树脂柱吸附中，上样量与树脂用量的质量比为1∶1。

5、根据权利要求3所述的红花滴丸的制备方法，其特征是所述的冷却剂是甲基硅油或植