CN1371746A

CN1371746A - 一种具有调节血脂和治疗化学性肝损伤作用的中药组合物

Info

Publication number: CN1371746A
Application number: CN02116334A
Authority: CN
Inventors: 张建军; 王林元
Original assignee: 北京采瑞医药有限公司
Current assignee: Jinshili Good Friend (tianjin) Co Ltd
Priority date: 2002-03-26
Filing date: 2002-03-26
Publication date: 2002-10-02
Anticipated expiration: 2022-03-26
Also published as: CN1150937C

Abstract

本发明公开了一种具有调节血脂和预防、治疗化学性肝损伤作用的中药组合物及其制备方法。该中药组合物是由葛根、枳椇子、山楂、茯苓、白术、五味子、甘草为原料药制成的,经科学实验证明本发明药物对化学性肝损伤及高血脂症均有预防和治疗作用。

Description

一种具有调节血脂和治疗化学性肝损伤作用的中药组合物

技术领域

本发明涉及一种中药，特别是涉及一种具有调节血脂和预防、治疗化学性肝损伤作用的中药组合物。

背景技术

现代研究证明，配方中葛根及其主要成份的药理作用有：(1)降低血清胆固醇；(2)清除氧自由基和抗脂质过氧化作用；一般来说，乙醇促进体内氧自由基的生成和脂质过氧化，导致血液粘稠度增高，葛根能通过清除氧自由基和抗脂质过氧化而使酒精所致的血粘度异常变化恢复至正常状态；(3)扩张血管，降低血压，改善血循环，促进血液中乙醇代谢；(4)提高组织耐缺氧能力。从枳棋子中分离出4个黄酮类化合物，即双氢山奈酚(dihydrokaempferolI)等，经实验研究其对改善组织缺氧有明显作用。葛根，枳棋子提取液对抵抗自由基作用明显，可促进血液循环，延缓乙醇吸收，防止乙醇中毒。

山楂对不同动物造成的高脂模型有较肯定的降脂作用；山楂还能增加胃中酶类，促进消化；并有利尿作用。

茯苓具有利尿作用，还可对四氯化碳所致大鼠肝损伤有明显的保护作用，使谷丙转氨酶活性明显降低，防止肝细胞坏死。

白术可减少肝细胞变性坏死，促进肝的增长，使升高的谷-丙转氨酶降低，防止肝糖原的减少，促进脱氧核糖核酸的恢复，并能明显抑制四氯化碳引起的小鼠血清GOT、GPT和LDH的上升。肝脏病理切片可见苍术酮(白术中所含成分)治疗组肝组织脂肪侵润减轻。坏死的肝脏区域较阳性对照小。苍术酮能显著抑制四氯化碳所致过氧化脂质的生成。白术对大鼠、兔、狗均有显著而持久的利尿作用。白术还有血管扩张作用。

五味子对四氯化碳所致兔、大鼠、小鼠肝损害引起的谷—丙转氨酶升高有显著降低作用。能明显诱导小鼠和大鼠肝微粒体细胞色素P-450活性，增强肝脏的解毒功能。对氧自由基引起的损伤有保护作用。有血管舒张作用。

甘草有保肝作用，可使肝脏的变性显著减轻，肝细胞内的糖原及核糖核酸恢复，血清谷丙转氨酶活力显著下降，甘草中甘草甜素对家兔实验性高脂血症有明显的降脂作用，甘草类黄酮可明显抑制小鼠肝匀桨在震荡温育条件下引起的丙二醛升高。甘草还有解毒作用。

技术内容

本发明目的在于提供一种具有调节血脂和治疗化学性肝损伤作用的中药组合物及其制备方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现的：选取原料药

葛根300～900重量份枳椇子100～600重量份

山楂100～600重量份茯苓100～600重量份

白术30～300重量份五味子100～600重量份

甘草30～300重量份；将葛根加乙醇含量为70％的食用酒精回流提取两次，酒精量为5倍、4倍，提取时间为1.5h、1.5h，合并酒精液，回收乙醇至无醇味，浓缩成稠膏，减压干燥得干膏，出膏率为10％，迅速置入洁净容器，密封，进入控制区，备用A；枳椇子、山楂、茯苓、五味子、白术、甘草加水煎煮两次，加水量为5倍，4倍，提取时间为1.5h、1.5h，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏，减压干燥得干膏，出膏率为23％，迅速置入洁净容器，密封，进入控制区，备用B；以上干膏A和B于控制区内合并粉碎，制成任何临床上可接受的剂型，使每100g含总黄酮1.20g、粗多糖1.60g，每日服用量为2～4g。

本发明组合物的用量范围可以是：

葛根387～600重量份枳椇子133～400重量份

山楂133～400重量份茯苓133～400重量份

白术20～200重量份五味子133～400重量份

甘草20～200重量份。

本发明组合物的优选用量范围是：

葛根580重量份枳椇子380重量份

山楂380重量份茯苓380重量份

白术190重量份五味子380重量份

甘草190重量份。实验例1：本发明胶囊(本发明胶囊)保肝功能实验

一、试验目的：检测受试物是否具有对肝脏损伤的保护功能

二、试验材料和方法：

1、受试物：本发明胶囊样品性状：棕褐色粉末推荐用量：4.0克/日·人样品来源：北京采瑞医药有限公司

2、肝损伤阳性对照物：无水乙醇(分析纯)，北京化工厂生产。试验时用水配成50％乙醇溶液。

3、动物：昆明种小鼠，50只，雄性，体重27-32g，由军事医学科学院实验动物中心提供。动物合格证号：医动字第01-3023号。

4、试验方法：选择健康小鼠50只，随机分为五组，每组10只。剂量设计按每人每日食用量的1倍、10倍、30倍设低、中、高三个剂量，即66.7、666.7、2000mg/kgBW。同时设阴性对照组及50％乙醇肝阳性对照组。将受试物以蒸馏水配制，每日一次经口灌胃给予各剂量组动物，灌胃量0.1ml/10gBW，阴性对照组及肝损伤阳性对照组给予等量蒸馏水。连续灌胃28天，每周称体重，调整给药量。于实验第28天将受试物各组及肝阳性对照组小鼠给予50％乙醇0.12ml/10gBW，禁食12小时后，取肝脏制成10％肝匀浆，分别测甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)及还原型谷胱甘肽(GSH)含量；同时取肝脏进行脂肪染色，镜检。结果用“SPSS 8.0软件进行方差分析统计。

三、试验结果：

1、体重：试验期间动物体重增长情况见表1。

表1 本发明胶囊试验动物体重( X±S) 单位：克

初始第一周第二周第三周第四周阴性对照组 29.3±1.8 34.7±2.0 38.0±2.4 40.5±3.1 42.2±3.1阴性对照组 29.3±1.3 34.0±1.5 38.7±1.5 40.7±2.1 44.4±2.7低剂量组 29.4±1.3 34.9±1.5 38.8+2.0 41.7±2.1 43.6±1.8中剂量组 29.8±1.9 36.2±2.2 38.2±2.2 40.1±1.5 42.7±2.6高剂量组 29.4±1.8 34.2±2.3 38.3±2.3 41.4±2.1 42.6±2.8

由表1可见，各组动物试验期内体重持续增长，各组之间无显著性差异。

2、小鼠肝脏MDA测定：用TBA比色法测定肝组织中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)含量，结果见表2。

表2 本发明胶囊对小鼠肝脏中MDA含量的影响组别 MDA P值

动物数 F值(mg/kg) (nmol/100g肝) 组间比与阳性比阴性(0) 10 3.85±0.49 0.000阳性(0) 10 11.07±2.55 ----低剂量(66.7) 10 5.90±1.71 12.437 0.000 0.000中剂量(666.7) 10 6.83±3.47 0.000高剂量(2000) 10 7.78±2.58 0.004

由表2可见，阳性对照组与阴性组相比，肝组织中MDA含量明显升高，差异有极显著性(P＜0.01)，受试物各剂量组MDA含量比阳性对照组降低，且有极显著性差异(P＜0.01)。说明受试物可降低肝组织中MDA含量。

3、小鼠肝脏GSH测定：

用DTNB比色法测定肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)的含量，结果见表3。

表3 本发明胶囊对小鼠肝脏中GSH含量的影响组别 GSH P值

动物数 F值(mg/kg) (μmol/100g肝) 组间比与阳性比阴性(0) 10 7.10±0.65 0.000阳性(0) 10 2.79±0.71 ----低剂量(66.7) 10 4.25±0.78 42.506 0.000 0.000中剂量(666.7) 10 5.33±0.86 0.000高剂量(2000) 10 4.74±0.80 0.000

由表3可见，阳性对照组与阴性组相比GSH含量明显降低，差异有极显著性(P＜0.01)。受试物各剂量组GSH含量比阳性对照组升高，且有极显著性差异(P＜0.01)。说明受试物能有效地阻止GSH的耗竭。4.小鼠肝脏甘油三酯(TG)的测定：用甘油磷酸氧化酶过氧化物酶法(试剂盒)测定，结果见表4。

表4 本发明胶囊对肝脏甘油三酯的影响组别 GSH P值

动物数 F值(mg/kg) (μmol/100g肝) 组间比与阳性比阴性(0) 10 14.77±1.34 0.000阳性(0) 10 43.65±11.33 ----低剂量(66.7) 10 30.21±5.75 12.965 0.000 0.002中剂量(666.7) 10 33.15±11.52 0.016高剂量(2000) 10 36.05±11.84 0.075

由表4可见，阳性对照组与阴性对照比较，肝脏代：含量明显升高，差异有极显著性(P＜0.01)。受试物低、中剂量组TG含量明，垦终于阳性鹕纳差异有显著性(P＜0.01，P＜0.05)。说明受试物可降低肝脏中TG的含量。

5、肝脏病理组织学检查：取肝脏(左大叶)10％福尔马林固定，冰冻切片苏丹III脂肪染色。苏木精复染，封片，镜检，结果见表5。

1)阴性对照组动物：1例肝脏可见少数肝细胞脂肪浸润，90％动物肝脏

偶见个别脂滴或大致正常。

2)阳性对照组100％动物肝脏脂滴分级在++～++++，其中70％肝脏可见弥漫性肝细胞以小滴为主的脂肪变性。

3)低剂量组80％动物肝细胞脂肪浸润在0～++级，20％肝细胞脂肪浸润为+++；中剂量组30％肝细胞脂肪浸润为+～++，70％动物肝细胞脂肪浸润在+++～++++级之间：高剂量组100％肝细胞脂肪浸润在+++～++++级之间，其中50％肝脏可见弥漫性肝细以小滴为主的脂肪变性。

表5 本发明胶囊对肝脏脂滴分布的影响组别动物数 - + ++ +++ ++++

总积分(mg/kg) (只) 例数积分例数积分例数积分例数积分例数积分阴性对照(0) 10 9 0 1 1 0 0 0 0 0 0 1阳性对照(0) 10 0 0 0 0 1 2 2 6 7 28 36##低剂量(66.7) 10 1 0 3 3 4 8 2 6 0 0 17**中剂量(666.7) 10 0 0 2 2 1 2 5 15 2 8 27高剂量(2000) 10 0 0 0 0 0 0 5 15 5 20 35与阳性对照组比较：** P＜0.01与阴性对照组比较：## P＜0.01肝细胞脂肪变性评分标准：- 肝细胞内脂滴散在，稀少。 0分+ 含脂滴的肝细胞不超过1/4。 1分++ 含脂滴的肝细胞不超过1/2。 2分+++ 含脂滴的肝细胞不超过3/4。 3分++++ 肝组织几乎被脂滴代替。 4分四、结论：

本试验以4800mg/kgBW乙醇复制小鼠乙醇肝损伤模型，并在此基础上对本发明胶囊进行保肝功能检测。试验结果表明，该受试物可有效地阻止乙醇导致肝脏GSH耗竭和MDA升高，减轻肝细胞脂肪变性，具有保护乙醇性肝损伤的功能。

实验例2：本发明胶囊(本发明胶囊)调节血脂作用实验报告

1.材料和方法：

1.1.受试物：名称：本发明胶囊，推荐量：4克/日/人性状：棕褐色

粉末前处理方法：用蒸馏水将受试物配制成不同浓度样品来源：

北京采瑞医药有限公司

1.2.试验动物：Wistar种大鼠，50只，雄性，体重260～285g 由中国医学科学院实验动物中心提供动物合格证号：SCXK11-00-0006号

1.3.饲料浓度：

高脂饲料：79％基础饲料，1％胆固醇，10％蛋黄粉，10％猪油

灌胃量：1ml/100gBW

给受试物方式：经口灌胃

各剂量组剂量：66.7mg/kgBW、333.3mg/kgBW、2000mg/kgBW

(分别相当于人推荐量的1、5、30倍)

1.4.主要仪器与试剂：7020全自动生化分析仪(HITACHI)

1.5.试验方法：

选用健康成年雄性大鼠50只，取尾血测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及高密度脂蛋白(HDL-C)，根据TC水平随机分为五个组，即阴性对照组、高脂对照组和受试物的低、中、高三个剂量组，每组10只动物。除阴性对照组外，各组均给予高脂饲料喂养。受试物的剂量设计分别为66.7、333.3、2000mg/kgBW。均按1ml/100gBW灌胃给予受试物。两个对照组则给予相同体积的蒸馏水(1ml/100gBW)。28天后，断头取血，测定TC、TG和HDL-C三项指标。

1.6.实验数据统计：采用“SSPS8.0”软件进行统计分析

2.结果

2.1.本发明胶囊对大鼠体重的影响：见表6

表6 本发明胶囊对大鼠体重的影响单位：克剂量动物数体重增重(mg/kgBW) (只) 试验前试验末 (g)阴性对照 10 271.1±6.7 355.7±7.8 84.6±8.6高脂对照 10 272.1±8.8 366.6±8.2 94.5±6.4##66.7 10 270.7±7.2 365.0±10.7 94.3±10.0333.3 10 266.0±4.2 355.9±7.5 89.9±8.92000 10 266.6±7.9 355.3±14.0 88.7±10.0注：与阴性对照组相比：# P＜0.05； ##P＜0.01

与高脂对照组相比：* P＜0.05； **P＜0.01

经统计学检验，试验末高脂对照组动物体重增长高于阴性对照组，且差异具有高度显著性(P＜0.01)。而同时喂饲料的各剂量组动物体重增长与高脂对照组相比无显著性差异(P＞0.05)。

2.2.本发明胶囊对大鼠血脂的影响：见表7、表8

表7 本发明胶囊对大鼠血脂的影响量动物数 TC(mmol/L) TG(mmol/L) HDL-C(mmol/L)(mg/kgBW) (只) 试验前试验后试验前试验后试验前试验后阴性对照 10 1.52±0.18 1.30±0.13 1.23±0.23 1.54±0.29 0.86±0.10 0.65±0.07高脂对照 10 1.46±0.18 2.75±0.36## 1.27±0.30 1.92±0.39# 0.84±0.09 0.63±0.0566.7 10 1.45±0.18 2.53±0.21 1.21±0.51 1.86±0.56 0.82±0.11 0.55±0.02333.3 10 1.46±0.17 2.30±0.33^** 1.40±0.36 1.29±0.42** 0.82±0.10 0.63±0.092000 10 1.45±0.14 2.34±0.33** 1.15±0.32 1.31±0.42** 0.83±0.08 0.68±0.14注：与阴性对照组相比：#P＜0.05； ##P＜0.01

与高脂对照组相比：^*P＜0.05； ^**P＜0.01

由表7可见，试验末，高脂对照组动物的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)均高于阴性对照组，经方差分析检验，差异具有显著性或高度显著性，说明高脂动物模型制造成功；而中、高剂量组动物的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TC)均低于高脂对照组，且差异具有高度显著性。各剂量组动物的血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)与高脂对照组比较，无显著性差异。

表8 本发明胶囊对降低大鼠血脂水平的影响(％)剂量 TC TG(mg/kgBW) (％) (％)高脂对照66.7 8.0 3.1333.3 16.4 32.82000 1.49 31.8

由表8可见，试验末，各剂量组动物的血清总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)与高脂对照组相比，均有所下降。

3.小结：

根据《保健食品功能学评价程序和检验方法》中调节血脂作用检验方法的判断标准判定，由北京采瑞医药有限公司提供的本发明胶囊具有调节血脂的作用。

实施例1：

葛根580g 枳椇子380g

山楂380g 茯苓380g

白术190g 五味子380g

甘草190g

将葛根加乙醇含量为70％的食用酒精回流提取两次，酒精量为5倍、4倍，提取时间为1.5h、1.5h，合并酒精液，回收乙醇至无醇味，浓缩成稠膏，减压干燥得干膏，出膏率为10％，迅速置入洁净容器，密封，进入控制区，备用A；枳椇子、山楂、茯苓、五味子、白术、甘草加水煎煮两次，加水量为5倍，4倍，提取时间为1.5h、1.5h，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏，减压干燥得干膏，出膏率为23％，迅速置入洁净容器，密封，进入控制区，备用B；以上干膏A和B于控制区内合并粉碎，过80目筛，装0号胶囊，每粒装量为0.5g，共制成1000粒胶囊。

Claims

1、一种具有调节血脂和治疗化学性肝损伤作用的中药组合物，其特征在于该组合物是由下述重量份的原料药制成的：

葛根300～900重量份枳椇子100～600重量份

山楂100～600重量份茯苓100～600重量份

白术30～300重量份五味子100～600重量份

甘草30～300重量份

2、如权利要求1所述的具有调节血脂和治疗化学性肝损伤作用的中药组合物，其特征在于该组合物是由下述重量份的原料药制成的：

葛根387～600重量份枳椇子133～400重量份

山楂133～400重量份茯苓133～400重量份

白术20～200重量份五味子133～400重量份

甘草20～200重量份

3、如权利要求1所述的具有调节血脂和治疗化学性肝损伤作用的中药组合物，其特征在于该组合物是由下述重量份的原料药制成的：

葛根580重量份枳椇子380重量份

山楂380重量份茯苓380重量份

白术190重量份五味子380重量份

甘草190重量份

4、如权利要求1、2或3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法为：选取不同重量份的原料药后，将葛根加乙醇含量为70％的食用酒精回流提取两次，酒精量为5倍、4倍，提取时间为1.5h、1.5h，合并酒精液，回收乙醇至无醇味，浓缩成稠膏，减压干燥得干膏，出膏率为10％，迅速置入洁净容器，密封，进入控制区，备用A；枳椇子、山楂、茯苓、五味子、白术、甘草加水煎煮两次，加水量为5倍，4倍，提取时间为1.5h、1.5h，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏，减压干燥得干膏，出膏率为23％，迅速置入洁净容器，密封，进入控制区，备用B；以上干膏A和B于控制区内合并粉碎，制成任何临床上可接受的剂型。

5、如权利要求1、2或3所述的组合物在制备预防和治疗化学性肝损伤的药物或保健食品中的应用。

6、如权利要求1、2或3所述的组合物在制备预防和治疗高脂血症的药物或保健食品中的应用。