CN1323655C - 含有山参不定根提取物的化妆品组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及含有山参不定根提取物的化妆品组合物。通过用乙醇抽提天然山参制备山参不定根的提取物。含有该提取物的化妆品组合物具有良好的美白效果。
Description
技术领域
本发明一般涉及一种化妆品组合物,特别是含有通过组织培养生长的山参(也称为野山参)不定根提取物的化妆品组合物。
背景技术
有许多原因导致人皮肤变黑。其中,接触紫外线是众所周知的。一旦皮肤接触紫外光,在皮肤黑色素细胞中活跃合成黑色素,并释放到表皮。黑色素细胞中的黑色素合成是由酪氨酸酶介导的。具体说,细胞酪氨酸被酪氨酸酶转化成多巴醌,从其通过自发酶反应产生黑色素。因此,黑色素的产生可通过阻断黑色素合成途径的一些反应来抑制,该概念已被抑制皮肤变黑的典型方法接受。
就此,常规使用抗坏血酸、曲酸、熊果苷、氢醌、脂溶性甘草提取物和各种植物提取物。通过螯合酪氨酸酶活性位点中的铜离子,曲酸起到抑制酶活性的作用。尽管它具有高酪氨酸酶抑制活性,曲酸未被用于化妆材料,因为它与化妆材料中的其它成分相容性差。氢醌也不用于化妆材料,因为它有刺激皮肤的安全问题。
进行了许多研究寻找天然材料,尤其是能使皮肤变白的草药。结果,发现各种药草,包括桑树(Morus alba LINNE)、甘草(Glycyrrhiza uralensis FISCH)、胀果甘草(Glycyrrhiza inflata BAT)、芍药(Paeonia lactiflora PALL)、川赤芍(P.veitchii LYNCH)、越南肉桂(Cinnamomum loureirii NEES)、苦参(SophoraFlavescens Arr.)、野葛(Pueraria thunbergiana(SIEB.et ZUCC)BENTH)、当归(Angelica sinensis(OLIV.)DIELS)、紫斑牡丹(Paeonia suffruticosa ANDR.)、半夏(Pinella ternata(THUNB.)BREIT)、芦荟等的提取物具有抑制酪氨酸酶的活性。然而,这些草药不显示显著的美白作用。另外,各种实验证明草药提取物不能以化妆品或药物有效量使用因为最终产品稳定性低和脱色。特别是,仅在以高浓度使用时,草药提取物才在极大程度上抑制酪氨酸酶活性。即大部分草药提取物在低浓度时很少显示针对酪氨酸酶的抑制活性。
因此,需要一种改良的化妆材料,它在皮肤美白效果上是卓越的,并且与其它化妆材料相容,对皮肤没有刺激。
发明公开
在本发明之前,本发明人为了解决现有技术中存在的问题,进行了广泛和深入的对于天然存在的美白材料的研究,最终发现山参提取物强烈抑制黑素细胞中黑色素的形成,因此显示卓越的皮肤美白效果。
因此,本发明的一个目的是提供一种山参提取物,它对于皮肤变白是有效的,可用作化妆材料。
本发明的另一个目的是提供一种皮肤美白化妆制剂,它含有作为有效成分的山参不定根提取物。
本发明的另一个目的是提供一种制备含有山参不定根提取物作为化妆有效成分的皮肤美白化妆制剂的方法。
根据本发明的一个方面,提供了一种化妆品组合物,它含有组织培养的山参不定根提取物,其量为组合物总重量的0.1-10.0%重量。
根据本发明的另一个方面,提供了一种方法,制备组织培养的山参不定根提取物,包括步骤:干燥组织培养的山参不定根;将根浸在含有乙醇的溶液中;过滤溶液;和任选的从滤液中除去乙醇。
附图简述
图1是显微照片,显示用山参不定根提取物和其它对照材料处理的B-16黑素瘤细胞中黑色素的合成的抑制。
实施本发明的最佳模式
在植物分类学中,山参或野生人参(Panax ginseng C.A.MEYER)的起源可推到约100,000,000年前。它被分类为属于五加科的显花植物和被子植物。在韩国,第一株山参被报道为在Jeollanam-do的Mohoo山发现的。山参需要非常精密的环境条件以供生长。例如,当置于不适合其发芽的环境中时,山参种子埋在地下很长时间。即,它们等到适合的环境条件。
根据其生长条件,山参被分类成18种。例如山参被称为天种(天然存在的山参)如果种子自发播种并发芽;土种,如果种子被野生动物摄取并排泄;人种,如果它是从种在山里的种子长出的;栽培山参,如果幼人参被移植到山里;和类山参,如果幼山参是人工栽培的。其中,野山参具有最强的药效。由于含有其它植物没有的丰富生物活性的独特物质,例如皂苷,野山参被实验证明具有各种作用,包括增强免疫系统,对癌症的抑制作用,抗糖尿病活性,心血管刺激,降低血压和低血压,刺激肝脏、胃和大脑功能,抗衰老作用,恢复活力等。事实上,山参被称为神秘的东方药草。
未报道过山参对于皮肤美白作用。
在本发明中,山参不定根的提取物用于美白皮肤的化妆品。通过组织培养获得山参不定根。
根据本发明,美白皮肤的化妆品制剂含有来自山参不定根的提取物,它以制剂总重量的0.1-10.0%重量,优选0.5-2.0%重量作为化妆有效成分存在。。制剂可含有其它成分,它们通常掺入化妆品组合物。成分的种类和量可以由本领域普通技术人员选择。
为了获得从山参不定根得到的,有效用于美白化妆品的提取物,首先干燥组织培养的山参不定根。然后,将干燥的山参不定根浸入含有乙醇的溶液一段预定的时间。过滤获得含有来自山参根的皮肤美白成分的提取物的溶液。可任选的,可从滤液中除去乙醇。
可用常规组织培养方法获得组织培养的山参不定根。例如,从天然存在的山参根组织形成愈伤组织,然后培养愈伤组织,诱导不定根。如此形成的不定根可以用于大量生产,包括但不限于液相培养。
用于提取山参不定根的溶剂可仅是乙醇或联合其它醇,例如1,3-丁二醇或丙二醇。当单独使用乙醇时,溶剂优选是70%水溶液,以比所用的山参不定根重量大20-40倍的量使用。在另一方面,当乙醇与1,3-丁二醇联用或使用丙二醇时,以比山参不定根重量大20-40倍的量加入70%乙醇溶液,而1,3-丁二醇或丙二醇的用量比山参不定根重量大2-10倍。通过使用不同溶剂获得的各提取物可单独或作为混合物掺入化妆品制剂。
本发明的化妆品组合物可配制成常规化妆品制剂,包括但不限于爽肤水、润肤奶液、乳霜、按摩霜、精华素、凝胶样霜、面膜片、营养乳液等。
在一般描述本发明后,根据一些实施例可提供进一步的理解,在本文中提供这些例子仅为说明,不是限制性的,除非另外说明。
1.山参不定根的组织培养
用Pyungchang,Gangwon-do,韩国收集的山参(11年)作为组织培养的来源。在含有1.0mg/L 2,4-D(2,4-二氯苯氧基乙酸)、0.1mg/L激动素和3%蔗糖的MS(Murashige and Skoog)固态培养基上,对接种的山参根片表面(3-6毫米)22±1℃避光诱导,8周后产生愈伤组织。
然后,在补充有3.0mg/L IBA(3-吲哚丁酸)和3%蔗糖的MS固体培养基上,在22±1℃避光培养愈伤组织,4周后诱导不定根。不定根在补充有5.0mg/L IBA和5%蔗糖的改进的MS液相培养基上(不含NH4 +-N),在22±1℃避光增殖。初始pH是5.8-6.0,通气体积是0.1vvm。液相培养进行约40天。
2.山参提取物的制备
实施例1
在干燥后,将1kg组织培养的山参不定根浸入30kg 70%的乙醇水溶液,陈化5-6周。然后,溶液滤过滤纸(5C,185mm,Toyoroshi Kaisha,Ltd.)以获得提取物。
实施例2
在干燥后,将1kg组织培养的山参不定根浸入30kg 70%乙醇水溶液,陈化5-6周。然后,溶液滤过滤纸(5C,185mm,Toyoroshi Kaisha,Ltd.)。从如此获得的滤液通过在100℃水浴中加热除去乙醇获得糖浆状的提取物。
实施例3
在干燥后,将1kg组织培养的山参不定根浸入30kg 70%乙醇水溶液和3kg 1,3-丁二醇或丙二醇,陈化5-6周。然后,溶液滤过滤纸(5C,185mm,Toyoroshi Kaisha,Ltd.),然后在50-60℃从滤液中除去乙醇,获得提取物。
2.对针对黑色素生成的抑制活性和细胞毒性的测试
实验性实施例1:针对黑色素生成的抑制活性
用B-16黑素瘤细胞(从Wonju,Korea的Yonsei大学医学院获得)检测了实施例1-3中从组织培养的山参不定根制备的提取物的皮肤美白作用。就此,在6孔组织培养板中以2×104细胞/孔加入从黑鼠衍生的B-16黑素瘤细胞,各孔含有2ml补充有10%FBS(Gibco,USA)的DMEM培养基(Gibco,USA),然后在5%CO2气体中37℃培养24小时。然后,用补充有10%FBS,含有2μMα-MSH(促黑素细胞激素,购自Sigma,USA)和2mM茶碱(Sigma,USA)的DMEM培养基替换培养基。然后,在同一培养基中稀释(0.25%或0.5%)提取物,并加到细胞中,然后在5%CO2气体中37℃培养,直到细胞覆盖80%孔底部面积。除去培养基后,用PBS(磷酸缓冲盐,Gibco,USA)洗涤细胞,并用胰蛋白酶处理,获得细胞沉淀。在5,000rpm离心收集的细胞沉淀10分钟,除去上清液。在60℃温箱内干燥如此获得的细胞沉淀24小时,然后在细胞中加入1N NaOH,溶解细胞黑色素。为了肉眼检测,用电视显微镜拍下溶解的黑色素,结果如图1所示。另外,用ELISA分析黑色素的稀释物,以检测山参不定根提取物对黑色素合成的抑制活性。结果如下文表1所示。
表1
针对黑色素合成的抑制活性
样品 | 浓度(μM/ml) | 490nm的OD | 抑制活性率(%) | |
山参不定根提取物 | 2500 | 样品(×3) | 对照(×3) | 84 |
0.154 | 0.976 | |||
5000 | 0.052 | 0.982 | 95 | |
红参提取物 | 2500 | 0.665 | 0.972 | 32 |
5000 | 0.399 | 0.988 | 60 | |
熊果苷 | 2500 | 0.218 | 0.980 | 78 |
5000 | 0.102 | 0.986 | 90 |
如图1和表1所示,山参不定根的提取物对皮肤显示卓越的美白作用。
实验性实施例2:细胞毒性
检测了实施例1-3中组织培养的山参不定根提取物的细胞毒性,与常规作为皮肤美白材料的红参提取物和熊果苷比较。
在胰蛋白酶消化回收后,将转化的小鼠成纤维细胞L929细胞悬浮在补充有2%BCS(胎牛血清)的DMEM中,悬液分成2,500-3,000细胞/孔浓度的等份,加入96孔培养板的各孔中,然后在5%C02气体中37℃培养48小时。用新鲜的无血清培养液更换培养液后,用下文表2所示的测试材料处理细胞,培养48小时。在各孔中,加入中性红(50微克/ml),并与细胞反应3小时。中性红在活细胞中完成聚集后,用1.0%甲醛/1.0%CaCl2固定染料。从细胞中用1.0%乙酸/50%乙醇溶液提取中性红。用ELISA分析提取的中性红,以测定测试材料根据浓度的细胞毒性。结果如下文表2所示。在表2中,“NR50”值表示将细胞存活率减少到与对照相比的50%的测试样品浓度。
表2
细胞毒性
样品 | 浓度(w/w%) | NR50 | |||||
4 | 2 | 1 | 0.1 | 0.01 | 0.001 | ||
山参不定根提取物 | 2 | 71 | 83 | 100 | 100 | 100 | 2.47 |
红参提取物 | - | 2 | 51 | 87 | 100 | 100 | 1.01 |
熊果苷 | - | - | 2 | 63 | 82 | 98 | 0.29 |
从其比已知美白材料高得多的NR50可明显的看出,山参不定根提取物对身体非常安全。
3.皮肤美白化妆品的配制
如下制备了各种含有组织培养的山参不定根提取物的化妆品:
制剂实施例1
根据下文表3所示制备了爽肤水。
表3
成分 | 含量(Wt%) |
山参不定根提取物 | 2.00 |
1,3-丁二醇 | 2.00 |
甘油 | 3.00 |
油醇 | 2.00 |
聚山梨醇酯20 | 1.00 |
乙醇 | 6.00 |
防腐剂 | 痕量 |
调味剂 | 痕量 |
纯水 | 余量 |
总计 | 100.00 |
制剂实施例2
根据下文表4所示的制剂制备了润肤奶液。
表4
成分 | 含量(Wt%) |
山参不定根提取物 | 2.00 |
1,3-丁二醇 | 4.00 |
甘油 | 3.00 |
油醇 | 0.50 |
聚山梨醇酯20 | 1.00 |
防腐剂 | 痕量 |
调味剂 | 痕量 |
纯水 | 余量 |
总计 | 100.00 |
制剂实施例3
根据下文表5所示的制剂制备了营养霜。
表5
成分 | 含量(Wt%) |
山参不定根提取物 | 2.00 |
丙二醇 | 5.00 |
甘油 | 5.00 |
三乙醇胺 | 0.50 |
乙酸生育酚 | 1.00 |
液态石蜡 | 5.00 |
低凝点高级润滑油 | 5.00 |
昆士兰果油 | 15.00 |
聚山梨醇酯60 | 1.00 |
去水山梨糖醇赛喹醇酸酯(Cesquiolate) | 1.00 |
羧乙烯聚合物 | 0.20 |
防腐剂 | 痕量 |
调味剂 | 痕量 |
纯水 | 余量 |
总计 | 100.00 |
制剂实施例4
用下文表6所示的配方制备了按摩霜。
表6
成分 | 含量(Wt%) |
山参不定根提取物 | 2.00 |
凡舍林(Vacerin) | 5.00 |
液态石蜡 | 30.00 |
蜂蜡 | 3.00 |
聚山梨醇酯60聚山梨醇酯 | 1.00 |
去水山梨糖醇赛喹醇酸酯(Cesquiolate) | 1.00 |
丙二醇 | 5.00 |
甘油 | 5.00 |
防腐剂 | 痕量 |
调味剂 | 痕量 |
纯水 | 余量 |
总计 | 100.00 |
制剂实施例5
根据下文表7所示的配方制备精华素。
表7
成分 | 含量(Wt%) |
山参不定根提取物 | 2.00 |
1,3-丁二醇 | 2.00 |
甘油 | 5.00 |
三乙醇胺 | 0.27 |
羧乙烯聚合物 | 0.20 |
黄原胶 | 0.10 |
防腐剂 | 痕量 |
调味剂 | 痕量 |
纯水 | 余量 |
总计 | 100.00 |
制剂实施例6
根据下文表8所示的制剂制备凝胶样的霜。
表8
成分 | 含量(Wt%) |
山参不定根提取物 | 2.00 |
丙二醇 | 20.00 |
卡波姆 | 20.00 |
聚山梨醇酯60 | 0.50 |
防腐剂 | 痕量 |
调味剂 | 痕量 |
纯水 | 余量 |
总计 | 100.00 |
制剂实施例7
用下文表9所示的成分制备面膜片。
表9
成分 | 含量(Wt%) |
山参不定根提取物 | 2.00 |
1,3-丁二醇 | 5.00 |
聚乙烯醇 | 12.00 |
聚乙烯吡咯烷酮 | 2.00 |
乙醇 | 8.00 |
聚乙烯乙酸酯 | 1.00 |
防腐剂 | 痕量 |
调味剂 | 痕量 |
纯水 | 余量 |
总计 | 100.00 |
制剂实施例8
根据下文表10所示的制剂制备了营养乳液。
表10
成分 | 含量(Wt%) |
山参不定根提取物 | 2.00 |
丙二醇 | 5.00 |
甘油 | 4.00 |
低凝点高级润滑油 | 5.00 |
昆士兰果油 | 10.00 |
聚山梨醇酯60聚山梨醇酯 | 0.50 |
十六烷芳基(Cetearyl)醇 | 1.00 |
卡波姆 | 0.20 |
防腐剂 | 痕量 |
调味剂 | 痕量 |
纯水 | 余量 |
总计 | 100.00 |
工业应用性
如上所述,根据本发明提供了一种含有组织培养的山参不定根提取物的化妆品组合物,用于美白皮肤。含有作为主要成分的山参不定根提取物的化妆品组合物在美白效果和对皮肤没有刺激性上是卓越的。
已用说明性方式描述了本发明,应理解所用的术语是用于描述而不是为了限制。根据上文的教导,本发明的许多修改和变化是可能的。因此,应理解在权利要求范围内,本发明可用除了特别描述的以外的方式实施。
Claims (6)
1.一种从组织培养的山参不定根制备提取物的方法,其特征在于,该方法包括步骤:
干燥组织培养的山参不定根;
在含有乙醇的溶液中陈化干燥的组织培养的山参不定根;
过滤溶液;和
可任选的从提取物中除去乙醇。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述含乙醇的溶液选自乙醇水溶液,乙醇和1,3-丁二醇的混合物,和乙醇和丙二醇的混合物。
3.一种用于皮肤美白的化妆品组合物,其特征在于,该组合物含有占组合物总重量的0.1-10.0%重量的山参不定根提取物,所述不定根是从天然存在的山参组织培养物获得的,所述提取物是用权利要求2所述的方法获得的。
4.如权利要求3所述的化妆品组合物,其特征在于,所述提取物的含量是组合物总重量的0.5-2.0%重量。
5.如权利要求3所述的化妆品组合物,其特征在于,所述组合物含有用乙醇水溶液获得的所述提取物,或用乙醇和1,3-丁二醇的混合物获得的所述提取物,或用乙醇和丙二醇的混合物获得的所述提取物。
6.如权利要求3所述的化妆品组合物,其特征在于,所述化妆品组合物的制剂形式选自爽肤水、润肤奶液、乳霜、按摩霜、精华素、凝胶样霜、面膜片和营养乳液。
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