CN103167865B - 胶原产生促进剂、透明质酸产生促进剂、成纤维细胞增殖促进剂及抗皱剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供胶原产生促进效果、透明质酸产生促进效果、成纤维细胞增殖促进效果和皱纹改善效果优异的植物种子的有机溶剂提取物的处理物。本发明的胶原产生促进剂的特征在于，用有机溶剂提取柏科(<i>Cupressaceae</i>)侧柏属(<i>Platycladus</i>)植物的种子，得到含有油性成分的提取物，将该提取物的溶剂的一部分或全部蒸馏除去后，添加浓度0.5～15N的碱水溶液并混合，接着进行酸处理后，进行水洗而得到。

Description

胶原产生促进剂、透明质酸产生促进剂、成纤维细胞增殖促进剂及抗皱剂

相关申请

本申请要求2010年10月27日提出申请的日本国专利申请2010-240674号的优先权，在此援引其内容。

技术领域

本发明涉及胶原产生促进剂、透明质酸产生促进剂、成纤维细胞增殖促进剂及抗皱剂，特别是涉及胶原产生促进效果等优异的植物种子的有机溶剂提取物的处理物。

背景技术

皮肤自外侧起由角质层、表皮、基底膜和真皮构成。

真皮是其中范围最广的部分，细胞并不像表皮那样紧密堆叠。而且细胞外空间大都被称作“细胞外基质”的巨大分子的网格结构所填充。该细胞外基质在真皮内的成纤维细胞等中产生，由透明质酸、硫酸皮肤素等被称为酸性粘多糖的多糖类以及胶原、弹性蛋白等纤维性蛋白质构成。细胞外基质与皮肤的弹性、张力、水嫩感、新陈代谢等直接相关。成纤维细胞等中的细胞外基质的产生减弱，则会失去皮肤的弹性和水嫩感，容易发生肌肤干燥，成为导致皮肤老化的一大原因。

上述纤维性蛋白质主要由胶原构成，其中，I型胶原占全部的80％。除I型胶原外，还已知III、V、XII和XIV型胶原的存在。老化皮肤上可见的松弛的成因之一在于皮肤组织随着年龄的增加而变薄。老化的皮肤中，作为真皮的主要基质成分的胶原纤维的减少显著，这很可能成为皮肤厚度减小的主要原因。因此，认为促进胶原的产生、维持胶原量对于松弛的预防和改善是有效的。

另外，除上述以外，胶原的产生促进对于皮肤的创伤治疗的改善、以及骨质疏松症、关节炎、腱鞘炎等的治疗、高血压的防止等也是有效的。

迄今为止，作为胶原产生促进剂，已知包含仅以水作为提取溶剂从柏子仁(侧柏种子干燥得到的产品)中提取的生药提取物的胶原产生促进剂(例如参照专利文献1)。但是，该生药提取物的胶原产生促进效果具有改善的余地。

另一方面，上述多糖类中的透明质酸具有细胞间隙中的水分的保持、以在组织内形成果冻状的基质为基础的细胞的保持、组织的润滑性和柔软性的保持、对机械损伤等外力的抵抗、以及细菌感染的防止等多种功能。最近，关于与癌症转移的关系，也正在进行大量研究。

另外，除皮肤外，透明质酸还分布在关节液、玻璃体、韧带等中，在机体内广泛分布。因此，除了提高保湿效果外，透明质酸的产生促进对于关节疼痛(变形性膝关节病)的治疗、皮肤松弛的改善、以干眼症为主的角结膜上皮损伤的治疗、白内障和角膜移植手术时的前房保持等也是有效的。

迄今为止，作为透明质酸产生促进剂，已知含有属于公牛藻科公牛藻属的海藻的提取物作为有效成分的透明质酸产生促进剂(例如参照专利文献2)。

如上所述，除了肌肤的松弛、肌肤干燥等的改善和防止、皮肤老化的防止外，胶原、透明质酸还可应用于膝关节病的改善剂和眼科手术用制剂等。因此，如果能找到具有胶原、透明质酸这两者的产生促进效果的物质，则具有能广泛应用于上述症状的改善、预防和治疗等的优点。

另一方面，专利文献3中，已知对选自崖柏(Thuja)属植物、悬钩子(Rubus)属植物、越橘(Vaccinium)属植物、猕猴桃(Actinidia)属植物和紫苏(Perilla)属植物中的植物的种子进行提取，制成植物提取物，然后对该植物提取物实施碱处理而得的植物性美白剂的制造方法。

但是，并不知道侧柏有机溶剂提取物的处理物具有优异的胶原产生促进效果和透明质酸产生促进效果。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2010-235482号公报

专利文献2：日本特开平9-176036号公报

专利文献3：日本特开2007-223944号公报。

发明内容

发明所要解决的课题

本发明是鉴于上述现有技术而完成的发明，其目的在于提供胶原产生促进效果和透明质酸产生促进效果等优异的植物种子的有机溶剂提取物的处理物。

用于解决课题的手段

为了解决上述课题，本发明人进行了认真研究，结果发现，用有机溶剂提取属于柏科(Cupressaceae)侧柏属(Platycladus)的植物的种子，得到含有油性成分的提取物，对该提取物进行碱处理和酸处理后，进行水洗，得到的处理物具有优异的胶原产生促进效果等，从而完成了本发明。

即，本发明所述的胶原产生促进剂的特征在于，用有机溶剂提取属于柏科(Cupressaceae)侧柏属(Platycladus)的植物的种子，得到含有油性成分的提取物，将该提取物的溶剂的一部分或全部蒸馏除去后，添加浓度0.5～15N的碱水溶液并混合，接着进行酸处理后，进行水洗而得到。

本发明所述的透明质酸产生促进剂的特征在于，用有机溶剂提取属于柏科(Cupressaceae)侧柏属(Platycladus)的植物的种子，得到含有油性成分的提取物，将该提取物的溶剂的一部分或全部蒸馏除去后，添加浓度0.5～15N的碱水溶液并混合，接着进行酸处理后，进行水洗而得到。

本发明所述的成纤维细胞增殖促进剂的特征在于，用有机溶剂提取属于柏科(Cupressaceae)侧柏属(Platycladus)的植物的种子，得到含有油性成分的提取物，将该提取物的溶剂的一部分或全部蒸馏除去后，添加浓度0.5～15N的碱水溶液并混合，接着进行酸处理后，进行水洗而得到。

本发明的抗皱剂的特征在于，用有机溶剂提取属于柏科(Cupressaceae)侧柏属(Platycladus)的植物的种子，得到含有油性成分的提取物，将该提取物的溶剂的一部分或全部蒸馏除去后，添加浓度0.5～15N的碱水溶液并混合，接着进行酸处理后，进行水洗而得到。

所述促进剂或抗皱剂中，优选添加的纯碱量为100～300g/L提取物。

所述促进剂或所述抗皱剂中，优选属于柏科侧柏属的植物是侧柏(Platycladusorientalis)。

本发明所述的胶原产生促进方法的特征在于，涂敷所述胶原产生促进剂。

本发明所述的透明质酸产生促进方法的特征在于，涂敷所述透明质酸产生促进剂。

本发明所述的成纤维细胞增殖促进方法的特征在于，涂敷所述成纤维细胞增殖促进剂。

本发明所述的皱纹改善方法的特征在于，涂敷所述抗皱剂。

本发明所述的胶原产生促进方法的特征在于，口服摄取所述胶原产生促进剂。

本发明所述的透明质酸产生促进方法的特征在于，口服摄取所述透明质酸产生促进剂。

本发明所述的成纤维细胞增殖促进方法的特征在于，口服摄取所述成纤维细胞增殖促进剂。

本发明所述的皱纹改善方法的特征在于，口服摄取所述抗皱剂。

发明的效果

根据本发明，可提供作为胶原产生促进剂、透明质酸产生促进剂、成纤维细胞增殖促进剂、抗皱剂有用的植物种子的有机溶剂提取物的处理物。

附图说明

图1是表示侧柏种子的水提取物和该种子的有机溶剂提取物的处理物之间的胶原产生促进效果的比较的图。

图2是表示侧柏种子的有机溶剂提取物的处理物的皱纹改善效果的图。

具体实施方式

本发明所述的胶原产生促进剂的特征在于，用有机溶剂提取属于柏科(Cupressaceae)侧柏属(Platycladus)的植物的种子，得到含有油性成分的提取物，将该提取物的溶剂的一部分或全部蒸馏除去后，添加浓度0.5～15N的碱水溶液并混合，接着进行酸处理后，进行水洗而得到。

本发明中使用的植物的种子是属于柏科侧柏属的植物的种子。其中优选使用侧柏(Platycladusorientalis)的种子。

侧柏原产于中国、朝鲜半岛，约250年前传到日本，现在在日本各地种植，是树高5～15m的常绿灌木或小乔木。

侧柏的种子呈黑褐色的长椭球形，也称“柏子仁”。其在中医学上广泛使用，用于滋养强壮和消炎等。

提取物的具体提取方法、碱处理方法、酸处理方法可采用例如以下方法。

相对于柏科植物的种子的质量，用1～100倍、优选1～30倍左右的质量的有机溶剂进行一定时间的提取。所用的种子也可以根据需要适度地粉碎，过滤时网眼堵塞成为问题时等的情况下，可以在未粉碎状态下直接使用。

此外，也可以用少量的有机溶剂反复提取，可以使用索格利特提取器之类的回流装置。

提取中使用的有机溶剂只要是通常在提取中使用的有机溶剂即可，无特别限定，优选挥发性有机溶剂。

作为有机溶剂，可以单独或两种以上组合使用例如甲醇、乙醇等醇类，含水醇类、丙酮、乙酸乙酯、己烷、乙醚等极性或非极性有机溶剂。其中，从价格低、容易减压浓缩的角度考虑，特别优选丙酮、乙酸乙酯、己烷。除此之外，也可以用超临界二氧化碳气体进行提取，或者压榨种子而使用榨汁。

与之相对，含水的提取溶剂会抑制活性成分的提取，因此不优选。

从如上所述得到的提取物中除去有机溶剂后，进行碱处理。

碱处理的方法无特别限定，可以通过例如下述方法得到：将有机溶剂提取物的溶剂的一部分或全部蒸馏除去后，添加浓度0.5～15N、优选1～10N的碱水溶液并混合。

更具体而言，例如相对于溶剂蒸馏除去后的提取物，添加0.2～2倍容量的浓碱水溶液后，充分搅拌混合，进行30分钟～数天左右的熟化。作为浓碱水溶液，可例举包含0.5～15N、优选1～10N的浓度的NaOH、KOH等的水溶液。应予说明，优选添加浓碱水溶液，使纯碱量达到100～300g/L提取物。

作为混合时的温度，优选室温～70℃的范围，更优选30～60℃的范围。熟化时，优选进行适当搅拌，以使亲水性成分和亲油性成分不分离。

对如上所述经过碱处理的处理物实施酸处理。

酸处理的方法无特别限定，可例举例如添加浓度0.5～15N的酸溶液，使pH降至0.5～2左右的方法。

如果实施酸处理，则液状(油状)物质分离出来。该液状物质在具有极高的胶原产生促进效果的同时，也对肌肤显示出高安全性。

为了促进液状物质的回收而进行水洗。然后，可以根据需要进行脱色、脱臭、脱盐、蒸馏等操作。

从属于柏科侧柏属的植物的种子中如上所述提取、处理而得的成分除了具有胶原产生促进效果外，还具有促进表皮细胞的透明质酸合成的效果、成纤维细胞增殖促进效果、皱纹改善效果。

因此，本发明所述的胶原产生促进剂也可以用作透明质酸产生促进剂、成纤维细胞增殖促进剂、抗皱剂。

本发明所述的胶原产生促进方法、透明质酸产生促进方法、成纤维细胞增殖促进方法、皱纹改善方法的特征在于，涂敷本发明的胶原产生促进剂、透明质酸产生促进剂、成纤维细胞增殖促进剂、抗皱剂。

上述促进方法或皱纹改善方法也可以涂敷包含本发明的促进剂或抗皱剂的皮肤外用组合物。

皮肤外用组合物的应用范围极广，可应用于各种领域(例如包括准药品在内的化妆品、医药品、利用微针的注入剂等)。其制品形态是任意的，可例举例如软膏、霜、乳液、化妆水、精华素、冻胶、凝胶、面膜(pack)、面膜(mask)、粉底、微针等。

制备皮肤外用组合物时，配合以液状成分计优选为0.0001～20质量％、更优选为0.001～2质量％的作为有效成分的促进剂或抗皱剂。

配合有本发明所述的促进剂或抗皱剂的皮肤外用组合物可以通过常规方法制造。皮肤外用组合物中除了作为必需成分的促进剂或抗皱剂以外，可以在不损害本发明的效果的范围内适当配合皮肤外用组合物中常用的任意成分。

作为皮肤外用组合物中可以配合的任意成分，可例举例如氨基酸、脂质、糖、激素、酶、核酸等生理活性物质等。

此外，也可以适当配合水(纯水、温泉水、深层水等)、油剂、表面活性剂、金属皂、凝胶化剂、粉体、醇类、水溶性高分子、皮膜形成剂、树脂、包合化合物、香料、除臭剂、盐类、pH调整剂、清凉剂、来源于动物或微生物的提取物、血液循环促进剂、收敛剂、抗皮脂溢剂、螯合剂、角质溶解剂、酶、激素类、维生素类、其它植物提取物等。

此外，也可以适当配合依地酸二钠、依地酸三钠、柠檬酸钠、聚磷酸钠、偏磷酸钠、葡糖酸等金属封闭剂，咖啡因、丹宁、维拉帕米、氨甲环酸及其衍生物、甘草提取物、光甘草定、火棘的果实的热水提取物、各种生药、乙酸生育酚、甘草酸及其衍生物或其盐等药剂，葡萄糖、果糖、阿洛酮糖、阿洛糖、塔格糖、甘露糖、蔗糖、海藻糖、木糖醇等糖类，β丙氨酸、甘氨酸、GABA、肌氨酸等离子通道控制物质，肌肽、类视黄醇等。

此外，通过将本发明所述的促进剂或抗皱剂与一种或两种以上的其它药效剂组合配合，也能配制成各效果更好或者在起到各效果的同时也起到其它药效的皮肤外用组合物。

作为上述药效剂，可例举例如美白剂、紫外线防御剂、抗菌剂、抗炎症剂、血液循环促进剂、各种药效成分、活性氧除去剂、保湿剂、其它促进剂、其它抗皱剂等，但不限定于此。

配合有本发明所述的促进剂或抗皱剂的皮肤外用组合物的剂型只要能发挥本发明的效果即可，无特别限定。皮肤外用组合物的剂型是任意的，可例举例如溶液体系、可溶化体系、乳化体系、粉末分散体系、水-油双层体系、水-油-粉末三层体系、软膏、凝胶、气溶胶等。

此外，本发明所述的胶原产生促进方法、透明质酸产生促进方法、成纤维细胞增殖促进方法、皱纹改善方法也优选口服摄取本发明的胶原产生促进剂、透明质酸产生促进剂、成纤维细胞增殖促进剂、抗皱剂。

上述促进方法或皱纹改善方法也可以口服摄取包含本发明的促进剂或抗皱剂的饮食品。

将本发明的胶原产生促进剂、透明质酸产生促进剂、成纤维细胞增殖促进剂及抗皱剂配合于饮食品时，促进剂或抗皱剂的配合量(干燥质量)可以根据它们的种类、目的、形态、使用方法等来适当决定。例如，配合量在饮食品总量中优选为0.0001～50质量％左右。特别是配合于特定保健用食品时，优选以能充分发挥出效果的量配合本发明的促进剂或抗皱剂。

作为饮食品的形态，可以任意地成形为例如颗粒状、糊状、凝胶状、固体状、液体状等。

饮食品中可以适当含有已确认能配合于饮食品等中的公知的各种物质，例如粘合剂、崩解剂、增稠剂、分散剂、重吸收促进剂、矫味剂、缓冲剂、表面活性剂、增溶剂、保存剂、乳化剂、等渗剂、稳定剂和pH调整剂等赋形剂。

实施例

下面例举实施例对本发明进行更详细的描述，但本发明不受这些实施例的任何限定。如无特别记载，配合量以质量％表示。

首先，本发明人通过下述制备方法制备了柏科侧柏属植物(侧柏)种子的有机溶剂提取物及其处理物(A)。接着，针对提取物及其处理物的成纤维细胞增殖促进效果以及成纤维细胞的I型胶原产生促进效果，进行了如下所示的试验。

将不添加提取物及其处理物的情况设为100，结果示于表1。

侧柏种子的有机溶剂提取物的制备方法

将侧柏的种子(未粉碎)分别浸渍于5倍量(v/w)的有机溶剂(丙酮)，在室温下进行10天的提取。预先用尼龙网(100目)除去残渣，再用滤纸过滤。用旋转蒸发器从滤液中除去溶剂。由此得到提取物。

侧柏种子的有机溶剂提取物的处理物的制备方法A

一边用搅拌叶片搅拌如上所述得到的提取物，一边向提取物中添加0.5～15N的NaOH溶液，以纯NaOH计在100～300g/L的范围内(温度50℃)。一边以200rpm搅拌，一边进行5小时的处理。然后，缓慢添加5N的H₂SO₄，一边搅拌一边使pH降至1附近，回收分离出的液状(油状)物质。在回收的液状(油状)物质中添加等容量的水进行水洗，除去杂质、盐和过量的酸。将液状(油状)物质减压干燥，得到液状的处理物(A)。

<细胞活化试验>

将来源于人新生儿的成纤维细胞HF0K接种于含10％胎牛血清(FBS)的达尔伯克改良伊格尔MEM培养基(DMEM、日水公司(ニッスイ社)制)中，接着接种于24孔板，在37℃、二氧化碳浓度5体积％的气氛中静置。细胞贴壁后，将培养基换成含低浓度血清(0.5％)的培养基，继续培养一昼夜。然后，添加样本配制液并混合，使得提取物及其处理物相对于培养基达到0、0.5×10^-4、1×10^-4、2×10^-4、3×10^-4体积％。在培养第3天，用Hoechst33342(同仁化学株式会社制)测定并求出在各样本配制液中生长发育的成纤维细胞的细胞数，以不添加提取物或其处理物的情况作为对照，评价细胞活化程度。

收集细胞培养上清，评价I型胶原产生量。

<I型胶原产生的测定>

关于收集的细胞培养上清中的I型胶原，使用I型前胶原C末端肽(ProcollagenTypeIC-peptide(PIP))EIA试剂盒(宝公司(TAKARA社)制)，按照试剂盒附带的操作手册来测定培养基上清中的I型胶原C末端肽，作为I型胶原产生量的指标。以DNA量计，用Hoechst33342求出每1个孔的细胞量，以每单位细胞的形式来评价在提取物或其处理物的作用下促进合成的I型胶原量。

[表1]

由表1可知，通过对侧柏种子的有机溶剂提取物实施处理，对于来源于人新生儿的成纤维细胞HF0K具有高的细胞活化能力。

此外还确认，虽然在侧柏种子的有机溶剂提取物中未见I型胶原产生促进效果，但通过实施处理，在极低的浓度下就能提高I型胶原的产生。

因此，本发明所述的胶原产生促进剂和成纤维细胞增殖促进剂需要对侧柏种子的有机溶剂提取物进行碱处理和酸处理。

接着，使用与上述试验不同的侧柏的种子，对于I型胶原产生促进效果进行进一步探讨。

本发明人将侧柏种子约3等分，通过下述方法制备了该种子的水(10℃和20℃)提取物和有机溶剂提取物的处理物(B)。接着，通过上述试验测定水提取物和处理物(B)的每单位细胞的I型胶原产生量。将不添加水提取物和处理物(B)的情况(对照)设为100，结果示于图1。

应予说明，图1示出平均值±SD。此外，通过Studentt检验(显著水平*p＜0.1、**p＜0.05)进行统计处理，示出确认相对于对照有显著性差异或倾向性差异的值。

侧柏种子的水提取物的制备方法

将侧柏的种子浸渍于5倍量(v/w)的水，在10℃或20℃下进行24小时的提取。预先用尼龙网(100目)除去残渣，再用滤纸过滤。由此得到水提取物。

侧柏种子的有机溶剂提取物的处理物的制备方法B

将侧柏的种子浸渍于5倍量(v/w)的有机溶剂(丙酮)，在20℃下进行24小时的提取。预先用尼龙网(100目)除去残渣，再用滤纸过滤。用旋转蒸发器从滤液中除去溶剂。

一边用搅拌叶片搅拌所得的提取物，一边向提取物中添加0.5～15N的NaOH溶液，以纯NaOH计在100～300g/L的范围内(温度50℃)。一边以200rpm搅拌，一边进行5小时的处理。然后，缓慢添加5N的H₂SO₄，一边搅拌一边使pH降至1附近，回收分离出的液状(油状)物质。在回收的液状(油状)物质中添加等容量的水进行水洗，除去杂质、盐和过量的酸。将液状(油状)物质减压干燥，得到液状的处理物(B)。

由图1可以确认，有机溶剂提取物的处理物具有浓度依赖性的显著的胶原产生促进效果。

但是，水提取物在任何条件下都几乎没有效果，未确认到显著的胶原产生促进效果。

因此，本发明所述的胶原产生促进剂必须在侧柏种子的提取中使用不含水的有机溶剂。

接着，使用与上述试验不同的侧柏的种子，对于该种子的处理物的透明质酸合成促进效果进行探讨，确认I型胶原产生促进效果和成纤维细胞增殖促进效果。

即，对于通过上述制备方法A制备的侧柏种子的处理物，通过如下所示的试验测定表皮细胞的透明质酸合成促进效果，并且通过上述试验测定成纤维细胞增殖促进效果、成纤维细胞的I型胶原产生促进效果。将不添加处理物的情况设为100，结果示于表2。

<表皮细胞的透明质酸合成促进试验>

将来源于人表皮的角质形成细胞HaCaT接种于96孔板(6000个/孔)，在含15％Humedia-KG2(仓纺株式会社(クラボー株式会社)制)和85％Humedia-KB2的培养基中培养24小时。然后，换成含有制备的侧柏种子处理物(相对于培养基为0、0.005、0.01体积％)的100％Humedia-KB2培养基。继续培养2天，收集细胞的培养上清。

用透明质酸测定试剂盒(三菱化学培养基株式会社(三菱化学メディエンス株式会社))测定上清中所含的透明质酸的量。以DNA量计，用Hoechst33342(同仁化学株式会社制)求出每1个孔的细胞量。以每单位细胞的形式来评价在侧柏种子的处理物的作用下促进合成的透明质酸量。

[表2]

由表2也可以确认，本发明的侧柏种子、即柏子仁的处理物也具有表皮细胞的透明质酸合成促进效果。

此外，也再次确认柏子仁的处理物具有成纤维细胞增殖促进效果、I型胶原产生促进效果。

<皱纹改善效果试验>

接着，使用与上述试验不同的侧柏的种子，确认通过上述制备方法A制备的该种子的处理物的皱纹改善效果。

即，对于配合有0.35％的侧柏种子的有机溶剂提取物的处理物的(活性物)和未配合有0.35％的侧柏种子的有机溶剂提取物的处理物的(安慰剂)，制备了下述表3所示配合组成的皮肤外用剂(霜)。接着，让28名专业试验人员将各皮肤外用剂分别涂敷于左右眼角，1天2次，涂敷2个月，让他们评价哪一边的细小皱纹变得不明显。结果示于图2。

(表3)

霜活性物安慰剂

达纳炸药用甘油1.01.0质量％

一缩二丙二醇5.05.0

1,3-丁二醇7.07.0

羧基乙烯基聚合物0.30.3

丙烯酸甲基丙烯酸烷基酯聚合物0.050.05

烯烃低聚物8.08.0

二甲基聚硅氧烷1.01.0

甲基苯基聚硅氧烷1.01.0

侧柏种子(柏子仁丙酮提取物)的处理物0.35－

苛性钾0.090.09

EDTA0.010.01

防腐剂适量适量

香料适量适量

离子交换水剩余剩余

(制法)

将羧基乙烯基聚合物和丙烯酸甲基丙烯酸烷基酯聚合物均匀地溶解于离子交换水，另一方面，将侧柏种子的处理物、甲基聚硅氧烷、甲基苯基聚硅氧烷溶解于烯烃低聚物，添加至水相中。接着，添加其它成分后，用苛性钾中和，增稠，从而制得。

由图2可知，半数以上的试验人员确认，侧柏种子的处理物配合品具有皱纹改善效果。

因此可以确认，本发明所述的侧柏种子、即柏子仁的处理物也具有皱纹改善效果。

下面，作为本发明所述的胶原产生促进剂、透明质酸产生促进剂、成纤维细胞增殖促进剂、抗皱剂的配合例，示出皮肤外用组合物及食品。本发明不受该配合例的限定。应予说明，柏子仁的有机溶剂提取物的处理物在与上述实施例同样的试验中，都具有优异的胶原产生促进效果、透明质酸产生促进效果、成纤维细胞增殖促进效果、皱纹改善效果。

配合例1：霜

硬脂酸5.0质量％

硬脂醇4.0

肉豆蔻酸异丙酯18.0

甘油单硬脂酸酯3.0

丙二醇10.0

本胶原产生促进剂(柏子仁丙酮提取物的处理物)1.0

苛性钾0.2

亚硫酸氢钠0.01

防腐剂适量

香料适量

离子交换水剩余

(制法)

将丙二醇和苛性钾添加并溶解在离子交换水中，加热，保持于70℃(水相)。混合其它成分，加热熔化，保持于70℃(油相)。将油相缓慢添加至水相中，全部添加完毕后，暂时保持该温度，使反应进行。然后用均相混合机均匀地乳化，一边充分搅拌混合，一边冷却至30℃，从而制得。

配合例2：霜

硬脂酸6.0质量％

失水山梨糖醇单硬脂酸酯2.0

聚氧乙烯(20摩尔)失水山梨糖醇单硬脂酸酯1.5

丙二醇10.0

本透明质酸产生促进剂(柏子仁乙酸乙酯提取物的处理物)0.1

甘油三辛酸酯10.0

角鲨烯5.0

亚硫酸氢钠0.01

对羟基苯甲酸乙酯0.3

香料适量

离子交换水剩余

(制法)

将丙二醇添加并溶解在离子交换水中，加热，保持于70℃(水相)。混合其它成分，加热熔化，保持于70℃(油相)。将油相添加至水相中，进行预乳化，用均相混合机均匀地乳化后，一边充分搅拌混合，一边冷却至30℃，从而制得。

配合例3：霜

硬脂醇7.0质量％

硬脂酸2.0

氢化羊毛脂2.0

角鲨烷5.0

2-辛基十二醇6.0

聚氧乙烯(25摩尔)鲸蜡醇醚3.0

甘油单硬脂酸酯2.0

丙二醇5.0

本成纤维细胞增殖促进剂(柏子仁己烷提取物的处理物)1.0

香料适量

亚硫酸氢钠0.03

对羟基苯甲酸乙酯0.3

离子交换水剩余

(制法)

将丙二醇添加并溶解在离子交换水中，加热，保持于70℃(水相)。混合其它成分，加热熔化，保持于70℃(油相)。将油相添加至水相中，进行预乳化，用均相混合机均匀地乳化后，一边充分搅拌混合，一边冷却至30℃，从而制得。

配合例4：乳液

硬脂酸2.5质量％

鲸蜡醇1.5

凡士林5.0

液体石蜡10.0

聚氧乙烯(10摩尔)单油酸酯2.0

聚乙二醇15003.0

三乙醇胺1.0

本胶原产生促进剂(柏子仁丙酮提取物的处理物)0.04

肌肽3.5

烟酰胺1.0

亚硫酸氢钠0.01

对羟基苯甲酸乙酯0.3

羧基乙烯基聚合物0.05

香料适量

离子交换水剩余

(制法)

将羧基乙烯基聚合物溶解于少量离子交换水(A相)。将聚乙二醇1500和三乙醇胺、肌肽、烟酰胺添加至剩余的离子交换水中，加热溶解，保持于70℃(水相)。混合其它成分，加热熔化，保持于70℃(油相)。将油相添加至水相中，进行预乳化，添加A相，用均相混合机均匀地乳化，乳化后一边充分搅拌混合，一边冷却至30℃，从而制得。

配合例5：乳液

(油相部)

硬脂醇1.5质量％

角鲨烯2.0

凡士林2.5

脱臭液状羊毛脂1.5

月见草油2.0

肉豆蔻酸异丙酯5.0

甘油单油酸酯2.0

聚氧乙烯(60摩尔)氢化蓖麻油2.0

乙酸生育酚0.05

本透明质酸产生促进剂(柏子仁己烷提取物的处理物)0.01

对羟基苯甲酸乙酯0.2

对羟基苯甲酸丁酯0.1

甘氨酸乙酯1.0

香料适量

(水相部)

亚硫酸氢钠0.01

烟酰胺0.05

甘油5.0

透明质酸钠0.01

羧基乙烯基聚合物0.2

氢氧化钾0.2

纯水剩余

(制法)

将油相部在70℃下溶解。将水相部在70℃下溶解，将油相部与水相部混合，用乳化机乳化后，用热交换机冷却至30℃，从而制得。

配合例6：凝胶状美容液

95％乙醇10.0质量％

一缩二丙二醇15.0

聚氧乙烯(50摩尔)油醇醚2.0

羧基乙烯基聚合物1.0

苛性钠0.15

本成纤维细胞增殖促进剂(柏子仁乙酸乙酯提取物的处理物)2.0

视黄醇0.04

L-精氨酸0.1

肌氨酸1.0

对羟基苯甲酸甲酯0.2

香料适量

离子交换水剩余

(制法)

将羧基乙烯基聚合物均匀地溶解于离子交换水，另一方面，将柏子仁乙酸乙酯提取物的处理物、聚氧乙烯(50摩尔)油醇醚溶解于95％乙醇，添加至水相中。接着，添加其它成分后，用苛性钠、L-精氨酸中和，增稠，从而制得。

配合例7：美容液

(A相)

乙醇(95％)10.0质量％

聚氧乙烯(20摩尔)辛基十二醇1.0

本胶原产生促进剂(柏子仁己烷提取物的处理物)0.3

对羟基苯甲酸甲酯0.15

泛醇乙醚0.1

(B相)

氢氧化钾0.1

(C相)

甘油5.0

肌肽3.0

烟酰胺3.0

一缩二丙二醇10.0

亚硫酸氢钠0.03

羧基乙烯基聚合物0.2

纯水剩余

(制法)

将A相、C相分别均匀地溶解，将A相添加至C相，使其可溶化。接着，添加B相后，进行填充，从而制得。

配合例8：面膜(pack)

(A相)

一缩二丙二醇5.0质量％

聚氧乙烯(60摩尔)氢化蓖麻油5.0

(B相)

橄榄油5.0

本透明质酸产生促进剂(柏子仁丙酮提取物的处理物)1.0

乙酸生育酚0.2

对羟基苯甲酸乙酯0.2

香料0.2

(C相)

亚硫酸氢钠0.03

肌肽0.1

聚乙烯醇(皂化度90、聚合度2000)13.0

乙醇7.0

纯水剩余

(制法)

将A相、B相、C相分别均匀地溶解，将B相添加至A相，使其可溶化。接着，向其中添加C相后，进行填充，从而制得。

配合例9：软膏

聚氧乙烯(30摩尔)鲸蜡基醚2.0质量％

甘油单硬脂酸酯10.0

液体石蜡10.0

凡士林40.0

鲸蜡醇6.0

对羟基苯甲酸甲酯0.1

对羟基苯甲酸丁酯0.1

甘油单硬脂酸酯2.0

本成纤维细胞增殖促进剂(柏子仁丙酮提取物的处理物)5.0

丙二醇10.0

离子交换水剩余

香料适量

(制法)

将丙二醇添加并溶解在离子交换水中，加热，保持于70℃(水相)。将其它成分在70℃下混合溶解(油相)。将油相添加至上述水相中，用均相混合机均匀地乳化，冷却后进行填充，从而制得。

下面，同样地制造配合例10～13的霜。

配合例10：霜

液体石蜡8.0质量％

凡士林3.0

二甲基聚硅氧烷2.0

硬脂醇3.0

山萮醇2.0

甘油5.0

一缩二丙二醇4.0

海藻糖1.0

季戊四醇四(2-乙基己酸)酯4.0

聚氧乙烯甘油单异硬脂酸酯2.0

聚氧乙烯甘油单硬脂酸酯1.0

亲油性甘油单硬脂酸酯2.0

柠檬酸0.05

柠檬酸钠0.05

氢氧化钾0.015

油溶性甘草提取物0.1

棕榈酸视黄酯(100万单位)0.25

本胶原产生促进剂(柏子仁乙酸乙酯提取物的处理物)0.3

肌肽3.5

烟酰胺2.0

乙酸生育酚0.1

对羟基苯甲酸酯适量

苯氧基乙醇适量

二丁基羟基甲苯适量

依地酸三钠0.05

4-叔丁基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷0.01

对甲氧基肉桂酸-2-乙基己酯0.1

β-胡萝卜素0.01

聚乙烯醇0.5

羟乙基纤维素0.5

羧基乙烯基聚合物0.05

纯水剩余

香料适量。

配合例11：霜

凡士林2.0质量％

二甲基聚硅氧烷2.0

乙醇5.0

山萮醇0.5

鲨肝醇0.2

甘油7.0

1,3-丁二醇5.0

聚乙二醇200000.5

霍霍巴油3.0

角鲨烷2.0

羟基硬脂酸植物甾醇酯0.5

季戊四醇四(2-乙基己酸)酯1.0

聚氧乙烯氢化蓖麻油1.0

氢氧化钾0.1

焦亚硫酸钠0.01

六偏磷酸钠0.05

甘草亭酸硬脂酯0.1

泛醇乙醚0.1

熊果苷7.0

氨甲环甲酰胺盐酸盐11.0

本透明质酸产生促进剂(柏子仁己烷提取物的处理物)0.001

肌肽3.5

乙酸生育酚0.1

透明质酸钠0.05

对羟基苯甲酸酯适量

依地酸三钠0.05

4-叔丁基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷0.1

甘油二对甲氧基肉桂酸单-2-乙基己酸酯0.1

氧化铁黄适量

黄原胶0.1

羧基乙烯基聚合物0.2

纯水剩余。

配合例12：霜

凡士林2.0质量％

二甲基聚硅氧烷2.0

乙醇5.0

山萮醇0.5

鲨肝醇0.2

甘油7.0

1,3-丁二醇5.0

聚乙二醇200000.5

霍霍巴油3.0

角鲨烷2.0

羟基硬脂酸植物甾醇酯0.5

季戊四醇四(2-乙基己酸)酯1.0

聚氧乙烯氢化蓖麻油1.0

氢氧化钾0.1

焦亚硫酸钠0.01

六偏磷酸钠0.05

甘草亭酸硬脂酯0.1

泛醇乙醚0.1

熊果苷7.0

氨甲环甲酰胺盐酸盐11.0

本抗皱剂(柏子仁丙酮提取物的处理物)1.0

乙酸生育酚0.1

透明质酸钠0.05

对羟基苯甲酸酯适量

依地酸三钠0.05

4-叔丁基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷0.1

甘油二对甲氧基肉桂酸单-2-乙基己酸酯0.1

氧化铁黄适量

黄原胶0.1

羧基乙烯基聚合物0.2

纯水剩余。

配合例13：霜

凡士林2.0质量％

二甲基聚硅氧烷2.0

乙醇5.0

山萮醇0.5

鲨肝醇0.2

甘油7.0

1,3-丁二醇5.0

聚乙二醇200000.5

霍霍巴油3.0

角鲨烷2.0

羟基硬脂酸植物甾醇酯0.5

季戊四醇四(2-乙基己酸)酯1.0

聚氧乙烯氢化蓖麻油1.0

氢氧化钾0.1

焦亚硫酸钠0.01

六偏磷酸钠0.05

甘草亭酸硬脂酯0.1

泛醇乙醚0.1

4-甲氧基苯甲酸3.0

氨甲环甲酰胺盐酸盐11.0

本胶原产生促进剂(柏子仁己烷提取物的处理物)0.1

肌肽3.5

乙酸生育酚0.1

透明质酸钠0.05

对羟基苯甲酸酯适量

依地酸三钠0.05

4-叔丁基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷0.1

甘油二对甲氧基肉桂酸单-2-乙基己酸酯0.1

氧化铁黄适量

黄原胶0.1

羧基乙烯基聚合物0.2

纯水剩余。

配合例14：微针

是利用日本特开2005-152180中记载的方法的制造方法，采用以下组成

麦芽糖94.5质量％

葡聚糖5.0

氯沙坦0.1

本透明质酸产生促进剂(柏子仁乙酸乙酯提取物的处理物)0.4。

配合例15：软胶囊(1500mg/天)

食用大豆油530mg

杜仲提取物50

胡萝卜提取物50

本胶原产生促进剂(柏子仁含水乙醇提取物的处理物)100

蜂王胶50

吗咖30

γ-氨基丁酸(GABA)30

蜂蜡60

明胶375

甘油120

甘油脂肪酸酯105。

Claims (3)

1.组合物在制备抗皱剂中的用途，其特征在于，所述组合物是用有机溶剂提取属于柏科(Cupressaceae)侧柏属(Platycladus)的植物的种子，得到含有油性成分的提取物，将该提取物的溶剂的一部分或全部蒸馏除去后，添加浓度0.5～15N的碱水溶液并混合，接着进行酸处理后，进行水洗而得到。

2.权利要求1所述的用途，其特征在于，添加的纯碱量为100～300g/L提取物。

3.权利要求1或2所述的用途，其特征在于，属于柏科侧柏属的植物是侧柏(Platycladusorientalis)。