CN1254345A - 丝氨酸蛋白酶抑制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及具有式(Ⅰ)的化合物:R1SO2－B－X－Z－C(O)－Y, B为一个键,式－NH－CH[(CH2)pC(O)OH]－C(O)－的氨基酸或其酯衍生物,其中p为1,2或3,Gly、D－1－Piq、D－3－Piq、D－1－Tiq、D－3－Tiq、D－Ate、Aic或具有疏水性、碱性或个性侧链的L－或D－氨基酸;X为具有疏水性侧链的氨基酸、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、任选包含选自N、O或S的其它杂原子的环状氨基酸,并任选被(1－6C)烷基、(1－6C)烷氧基、苄氧基或氧代取代,或X为2－氨基异丁酸、－NR2－CH2－C(O)－或片段(Ⅰ)或(Ⅱ),其中n为2,3或4,W为CH或N,R3为H、(1－6C)烷基或苯基,这些基团可任选被羟基、(1－6C)烷氧基、COOH、COO(1－6C)烷基、CONH2或卤素取代;Z为赖氨酸或4－氨基环己基甘氨酸。本发明化合物具有抗凝血活性并可用于治疗或预防凝血酶相关疾病。可变的R1和Y定义见权利要求1中。

Description

丝氨酸蛋白酶抑制剂
本发明涉及新的丝氨酸蛋白酶抑制剂，含有它们的药物组合物以及所述抑制剂在制备用于治疗和预防凝血酶相关疾病的药物中的用途。
丝氨酸蛋白酶为在血液凝固级联作用中起重要作用的酶。这组蛋白酶的成员为例如凝血酶、胰蛋白酶、因子VIIa、IXa、Xa、XIa、XIIa和蛋白C。
凝血酶为调节血液凝固级联作用最后一步的丝氨酸蛋白酶。凝血酶的主要作用是将纤维蛋白原裂解产生通过交联作用形成不溶性凝胶的纤维蛋白单体。此外，在级联作用早期凝血酶通过活化因子V和VIII调节其自身的产生。它还在细胞水平上具有重要的作用，其中它对特定的受体起作用以导致血小板聚集、内皮细胞活化和成纤维细胞增殖。因此，凝血酶在瘀血和血栓形成中具有重要的调节作用。由于凝血酶的抑制剂可具有广泛的治疗用途，因此，在该领域中已进行了广泛的研究。
在丝氨酸蛋白酶，更具体地为凝血酶的合成抑制剂的开发中，对以类似于天然底物的方式被蛋白水解酶识别的小合成肽的兴趣增加。结果，已制备了新的肽样抑制剂，如凝血酶的过渡态抑制剂。
为了获得可以较低剂量给药并具有较少和很小副作用的凝血酶抑制剂，对更有效和更具选择性的凝血酶抑制剂的研究一直未减弱。而且，对口服生物利用率给予了特别的关注。在需要治疗凝血酶相关疾病的急性治疗中静脉内凝血酶强抑制剂在临床上是有效的。然而，尤其是预防凝血酶相关疾病，如心肌梗死、血栓形成和中风需要长期的治疗，优选通过口服给予抗凝剂。
以前出版物公开的许多肽样丝氨酸蛋白酶抑制剂，尤其是凝血酶抑制剂是基于序列-D-Phe-Pro-Arg-，参见例如由Brady等[生物有机和药物化学，3(1995)，1063-78]和在美国专利5,597,804公开的化合物。凝血酶抑制剂还包含赖氨酸侧链替代精氨酸，如由Brady等和Lewis等[血栓形成和瘀血，74(4)(1995)，1107-121]和其它由Jones等[酶抑制剂杂志，9(1995)，43-60]公开的其它抑制剂。在后来的出版物中，报道包含α-酮甲酯官能团的三肽化合物是不稳定的化合物，因此，对于进一步开发作为凝血酶抑制剂是不利的。还已知具有氨基环己基部分替代赖氨酸或精氨酸侧链的凝血酶抑制剂[WO94/25051]。从这些和还有其它的参考文献[例如美国专利5,523,308]已知在这些肽样凝血酶抑制剂C末端的许多变化。该领域的发展已经促进了对如何调节这类凝血酶抑制剂的生物特性的认识。然而，虽然在寻找具有良好口服生物利用率的选择性凝血酶抑制剂中花费了很大的努力，仍只存在很少的现有技术已知的满足这些要求的过渡态凝血酶抑制剂。
令人惊奇的是，现已发现下式化合物：
R1SO2-B-X-ZC(O)-Y      (I)其中R1为R2OOC-(CHR2)m-或R2NH-CO-(CHR2)m-或选自(1-12C)烷基、(2-12C)链烯基，这些基团可任选被(3-12C)环烷基、(1-6C)烷氧基、OH、COOR2、CF3或卤素取代，和选自(6-14C)芳基、(7-15C)芳烷基和(8-16)芳烯基，其中芳基基团可任选被(1-6C)烷基、(3-8C)环烷基、(1-6C)烷氧基、OH、COOH、CF3或卤素取代。m为1，2或3；各R2基团独立地为H、(1-12C)烷基、(3-8C)环烷基、(6-14C)芳基或(7-15C)芳烷基，其中芳基基团可任选被(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基或卤素取代；B为一个键，式-NH-CH[(CH2)pC(O)OH]-C(O)-的氨基酸或其酯衍生物，其中p为1，2或3，Gly、D-1-Piq、D-3-Piq、D-1-Tiq、D-3-Tiq、D-Atc、Aic或具有疏水性、碱性或中性侧链的L-或D-氨基酸；X为具有疏水性侧链的氨基酸、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、任选包含选自N、O或S的其它杂原子的环状氨基酸，并任选被(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基、苄氧基或氧代基取代，或X为2-氨基异丁酸、-NR2-CH2-C(O)-或片段
Figure A9880474100071
其中n为2，3或4，W为CH或N，R3为H、(1-6C)烷基或苯基，这些基团可任选被羟基、(1-6C)烷氧基、COOH、COO(1-6C)烷基、CONH2或卤素取代；Z为赖氨酸或4-氨基环己基甘氨酸；Y为-NH-(1-6C)亚烷基-C6H5，其中苯基可被(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基或卤素取代，或Y为-OR4或-NR5R6，其中R4为H、(2-6C)烷基或苄基，R5和R6独立地为H、(1-6C)烷氧基或任选被卤素取代的(1-6C)烷基，或R5与R6一起为(3-6C)亚烷基或R5与R6和与它们相连的N原子一起形成
Figure A9880474100072
其中V为O、S或SO2；或其前药或其药物可接受的盐，为强的和选择性的丝氨酸蛋白酶抑制剂。更具体地说，本发明的化合物为凝血酶、因子VII/组织因子和因子Xa的抑制剂。本发明的化合物在口服给药后显示提高的药物动力学，尤其是良好的生物利用率。为本发明一部分的α-(2-6C)酮酯化合物不显示以前报道的不稳定的α-酮甲基酯化合物的缺点。
本发明的化合物可用于治疗和预防凝血酶介导的和凝血酶相关疾病。这包括许多其中凝固级联作用被活化的血栓形成和促血栓形成疾病，它包括，但不局限于深静脉血栓形成、肺栓塞、血栓性静脉炎、血栓形成或栓塞引起的动脉闭塞、血管形成术或血栓溶解期间或之后的动脉再闭塞、动脉损伤或侵害性心脏病过程之后的再狭窄、术后静脉血栓形成或栓塞、急性或慢性动脉粥样硬化、中风、心肌梗死、癌症和转移瘤和神经变性疾病。本发明的化合物还可在体外血液循环中被用作如透析和手术中所必需的抗凝剂。本发明的化合物还可在体外用作抗凝剂。
根据本发明优选的丝氨酸蛋白酶抑制剂为其中Z为赖氨酸的化合物。更优选的为其中X为环状氨基酸、具有疏水性侧链的氨基酸、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、-NR2-CH2-C(O)-或片段
Figure A9880474100081
其中R3为H、(1-6C)烷基或苯基的化合物。
尤其优选的为其中X为脯氨酸、亮氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、苯丙氨酸、-NR2-CH2-C(O)-，其中R2为甲基、环戊基或环己基，或片段
Figure A9880474100082
其中R3为H或甲基的化合物。
其它优选的化合物为其中B为一个键或具有疏水性或中性侧链的D-氨基酸的那些。本发明最优选的化合物为其中R1为(1-6C)烷基或苄基的那些。Y定义中的R4优选为(2-6C)烷基或苄基。尤其优选的是其中Y为-OCH(CH3)2的化合物。还优选Y为NH2的化合物。
术语(1-12C)烷基指具有1-12个碳原子的支链或直链烷基基团，如甲基、乙基、叔丁基、异戊基、庚基、十二烷基等。优选的烷基基团为具有1-6个碳原子的(1-6C)烷基基团。
(2-12)链烯基基团为具有2-12个碳原子的支链或直链不饱和烃基。优选的为(2-6C)链烯基基团。实例为乙烯基、丙烯基、烯丙基等。
术语(1-6C)亚烷基指具有1-6个碳原子的支链或直链亚烷基基团，如-(CH2)s-，s为1-6，-CH(CH3)-、-CH(CH3)-(CH2)-等。Y定义中的优选的亚烷基基团为亚乙基和亚甲基。
术语(1-6C)烷氧基指具有1-6个碳原子的烷氧基，其中烷基部分具有如前所述的定义。
术语(3-12C)环烷基指具有3-12个碳原子的单或双环基团，其中环烷基基团可任选被氧代基取代。优选的为(3-8C)环烷基，如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。环戊基和环己基为更优选的环烷基基团。R1定义中优选的环烷基取代的烷基基团为樟脑基团。
(6-14C)芳基基团为6至14个碳原子的芳香部分。芳基基团可进一步包含一个或多个杂原子，如N、S或O。芳基基团的实例为苯基、萘基、(异)喹啉基、2，3-二氢化茚基等。
(7-15C)芳烷基和(8-16C)芳烯基基团为分别被一个或多个芳基基团取代的烷基和链烯基，总的碳原子数分别为7-15和8-16。
术语卤素指氟、氯、溴或碘。
术语酯衍生物指任何适宜的酯衍生物，优选(1-4C)烷基酯，如甲酯、乙酯或叔丁酯。
术语Atc指2-氨基-1，2，3，4-四氢化萘-2-羧酸，Aic指氨基-1，2-二氢化茚羧酸。术语1-和3-Tiq分别指1，2，3，4-四氢异喹啉-1-和-3-羧酸；1-和3-Piq分别为全氢化异喹啉-1-和-3-羧酸。术语具有疏水性侧链的氨基酸指具有为(3-8C)环烷基、(6-14C)芳基或(1-6C)烷基的侧链的氨基酸，其中烷基基团可任选被一个或多个(3-8C)环烷基基团或(6-14C)芳基基团取代。疏水性侧链可任选被一个或多个取代基取代，如羟基、卤素、三氟甲基、-OSO2CF3、(1-4C)烷基(例如甲基或乙基)、(1-4C)烷氧基(例如甲氧基)、苯氧基、苄氧基等。优选的具有疏水性侧链的氨基酸为亮氨酸、缬氨酸、环己基丙氨酸、4-甲氧基-环己基丙氨酸、环辛基丙氨酸、苯基丙氨酸、D-萘基丙氨酸、酪氨酸、O-甲基酪氨酸(或对甲氧基苯基丙氨酸)、3，3-二苯基丙氨酸、正亮氨酸和亮氨酸。
具有碱性侧链的氨基酸为例如，但不限于精氨酸和赖氨酸，优选精氨酸。
术语具有中性侧链的氨基酸指氨基酸，如谷氨酰胺(Gln)、甲硫氨酸砜、天冬酰胺(Asn)等。优选的为Gln和Asn。
环状氨基酸为例如2-氮杂环丁烷羧酸、脯氨酸、2-哌啶酸、1-氨基-1-羧酸-(3-8C)环烷烃(优选4C，5C或6C)、4-哌啶羧酸、4-噻唑烷羧酸、3，4-脱氢脯氨酸、氮杂脯氨酸、2-八氢引哚羧酸等。优选的为2-氮杂环丁烷羧酸、脯氨酸、哌啶羧酸、4-噻唑烷羧酸、3，4-脱氢脯氨酸和2-八氢引哚羧酸。定义中，术语取代指：被一个或多个取代基取代。本发明还包括在给药后代谢成活性化合物的式I化合物的前药。适宜的前药为例如式I化合物的N-烷氧基羰基保护(优选N-乙氧基羰基)衍生物。
本发明进一步包括一种制备式I化合物的方法，包括偶联被适当保护的氨基酸或氨基酸类似物，接着除去保护基。
根据式I的化合物可以用这类化合物的常规方式制备。为此目的，活化适宜的Nα保护(和如果存在活性侧链，则侧链被保护)氨基酸衍生物或肽，并在溶液或固体载体上偶联至适宜的羧基被保护的氨基酸或肽衍生物中。α-氨基官能团的保护通常由氨基甲酸酯官能团，如酸不稳定的叔丁基氧羰基基团(Boc)、苄基氧羰基(Cbz)基团和取代的类似物或碱不稳定的9-芴基-甲基氧羰基(Fmoc)基团来完成。还可通过催化氢化作用除去Cbz基团。其它适宜的氨基保护基团包括Nps、Bpoc、Msc等。有关保护基团的好的综述提供在“肽、分析、合成、生物学，第3卷，E.Gross和J.Meienhofer编(Academic Press，New York，1981)”。羧基的保护可通过酯的形成来完成，例如碱不稳定的酯，如甲酯或乙酯，酸不稳定酯，如叔丁酯或氢解不稳定酯，如苄基酯。赖氨酸或4-氨基环己基甘氨酸的侧链官能团的保护可通过使用前述的基团来完成。适宜保护的氨基酸或肽的羧酸基团的活化可通过叠氮化合物、混合酐、活性酯或碳化二亚胺方法进行，尤其是加入催化和外消旋抑制化合物，如1-羟基苯并三唑、N-羟基琥珀酰亚胺、3-羟基-4-氧代-3，4-二氢-1，2，3-苯并三唑、N-羟基-5-降冰片烯-2，3-二羧基亚胺。参见例如“肽、分析、合成、生物学(见上文)”和“纯化学和应用化学”，59(3)，331-344(1987)。
可为游离碱形式的本发明的化合物可从反应混合物中以药物可接受盐的形式分离。还可通过将式I的游离碱用有机或无机酸处理来获得药物可接受的盐，其中有机或无机酸为如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、马来酸、丙二酸、甲磺酸、富马酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸和抗坏血酸。
本发明的化合物包含一个或多个手性碳原子，并可因此以纯的对映体的形式，或对映体混合物的形式，或以包含非对映体的混合物的形式获得。获得纯对映体的方法为本领域所熟知，例如将从光学活性酸和外消旋混合物获得的盐进行结晶或使用手性柱进行层析。对于非对映体，可使用正相或反向柱。
可经肠或胃肠外给药本发明的化合物，对于人，优选为0.001-100mg/kg体重的每日剂量，优选0.01-10mg/kg体重。与药物适宜的佐剂混合，例如在标准参考文献，Gennaro等“Remington’s PharmaceuticalSciences”(18版，Mack Publishing公司，1990，尤其参见第8部分：药物制剂和它们的制造)中描述的，可将化合物压制成固体剂量单位，如丸剂、片剂，或加工成胶囊剂或栓剂。通过药物适宜的液体，化合物也可以溶液、悬浮液、乳液的形式使用，例如用作注射制剂，或为喷雾剂，例如用作鼻喷雾剂。
为了制备剂量单位，例如片剂，设想使用常规的添加剂，如填料、着色剂、聚合物粘合剂等。通常，可使用不干扰活性化合物作用的任何药物可接受的添加剂。用于组合物给药的适宜载体包括以适当的量使用的乳糖、淀粉、纤维素衍生物等，或其混合物。
本发明进一步通过参考下面说明性的实施例来说明。缩写：Et＝乙基                    Bzl＝苄基Boc＝叔丁基氧羰基           Cbz＝苄氧羰基Cha＝环己基丙氨酰           Pro＝脯氨酰Lys＝赖氨酰                 Acg＝4-氨基环己基甘氨酰TFA＝三氟乙酸               Pac＝苯基乙酰基Nps＝硝基苯磺酰基           Bpoc＝2-对-联苯基异丙氧基羰基Asp＝天冬氨酰               Glu＝谷氨酰Dpa＝联苯基丙氨酰           H-Aad-OH＝氨基己二酸Tyr(Me)＝(O-甲基)-酪氨酰    Phe＝苯丙氨酰Nal＝萘-2-基-丙氨酰H-3-Tiq-OH＝1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸Msc＝甲磺酰基乙氧羰基Teoc＝2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基norLeu(环)-Gly-OH＝(S)-3-氨基-2-氧代-六氢-1-吖庚因乙酸norVal(环)-Gly-OH＝(S)-3-氨基-2-氧代-1-哌啶乙酸实验：
用于HPLC中的溶剂体系为：A：0.5M磷酸缓冲液pH＝2.1；B：水；C：乙腈/水3/2 v/v。
除非另有说明，在分析型HPLC Supelcosil LC-18-DB柱(5um颗粒；250×2.1mm)测定保留时间(Rt(LC))，其中35℃下，使用溶剂体系A，B和C的梯度(如说明的)，以0.25ml/分钟的流速洗脱该柱。实施例1BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-NHBzl(a)Cbz-Lys(Boc)-OMe
向Cbz-Lys(Boc)-OH(28g)的二氯甲烷/甲醇(9/1v/v；500mL)溶液中加入2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3四甲基尿鎓四氟硼酸盐(23.6g)，通过加入三乙胺将溶液调至pH8。室温下，将反应混合物搅拌2小时。将混合物顺序用冷1N盐酸、水、5％碳酸氢钠和水洗涤，用硫酸钠干燥。蒸发滤液，使用乙酸乙酯/庚烷(1/4v/v)作为洗脱液将剩余物进行硅胶层析。收集含有Cbz-Lys(Boc)-OMe的级分并蒸发。产率：29.1g。TLC：Rf＝0.85，硅胶上乙酸乙酯/庚烷＝3/1v/v。(b)Cbz-Lys(Boc)Ψ[氰基乙酸]
将反应温度保持在-70℃以下，向冷(-78℃)Cbz-Lys(Boc)-OMe(29.1g)的无水二氯甲烷溶液(800ml)中滴加氢化二异丁基铝(222mL 1M的己烷溶液)。-78℃下，将产生的溶液搅拌1小时，向反应混合物中加入5％柠檬酸水溶液(600mL)。室温下，将两层混合物搅拌10分钟，将各层分开，含水层用二氯甲烷萃取两次。将混合的二氯甲烷层用水洗涤，用硫酸钠干燥并过滤。氮气氛下，搅拌滤液，在冰水浴中冷却。加入氰化钠(36.3g)和苄基三乙基氯化铵(4.2g)的水溶液(600mL)。剧烈搅拌下，在30分钟期间分批加入(2×9mL)乙酸酐。分离有机相，含水相用二氯甲烷萃取两次。将混合的二氯甲烷层用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空蒸发。通过硅胶层析(洗脱液：庚烷/乙酸乙酯＝1/1v/v)纯化剩余物产生Cbz-Lys(Boc)Ψ[氰基乙酸](26.3g)。TLC：Rf＝0.60，硅胶上，二氯甲烷/乙酸乙酯7/3v/v。(c)Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe
氮气氛下，将Cbz-Lys(Boc)Ψ[氰基乙酸](26.3g)的乙醚/甲醇＝3/1v/v溶液(600mL)冷却至-20℃，在将温度保持在低于-5℃下，加入66g气态氯化氢。4℃下，将反应混合物保持过夜。在将温度保持在低于5℃下，将水(100ml)滴加至反应混合物中。室温下搅拌16小时后，分离有机层并用水洗涤。将水层用氯化钠饱和，并用仲丁醇/二氯甲烷＝3/2v/v萃取。有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空蒸发产生25.4g粗胺。将剩余物溶解在N，N-二甲基甲酰胺(400mL)中，加入二碳酸二叔丁酯(16g)，使用三乙胺将PH调至8。室温下，将反应混合物搅拌过夜。减压蒸发除去溶剂。将剩余物溶解在乙酸乙酯中，连续用水、盐水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并真空蒸发。通过硅胶层析(洗脱液：乙酸乙酯/庚烷＝4/6v/v)纯化剩余物产生Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]OMe(15.8g)。TLC：Rf＝0.75，硅胶上乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水＝63/20/6/11v/v/v/v。(d)Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH
室温下，将搅拌的Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]OMe(2.0g)的二噁烷/水＝7/3v/v溶液(50mL)分批用2M氢氧化钠溶液(2.36mL)处理。1小时后，将反应混合物用水(100mL)稀释，加入2M盐酸直至pH2.0，并用二氯甲烷萃取。将混合的有机相用水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并真空干燥产生Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH(1.85g)。TLC：Rf＝0.65，硅胶上乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水＝63/20/6/11v/v/v/v。(e)Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NHBzl
向搅拌的Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH(0.90g)的N，N-二甲基甲酰胺溶液(10mL)中加入1-羟基苯并三唑(HOBt，444mg)，N-甲基吗啉(0.5mL)，苄基胺(282mg)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI，462mg)。室温下搅拌16小时后，将反应混合物倒至水中，将该含水混合物用乙酸乙酯萃取。将乙酸乙酯萃取物用1N盐酸、水、5％碳酸氢钠水溶液和水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩产生Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NHBzl(1.0g)。TLC：Rf＝0.81，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水＝163/20/6/11v/v/v/v。(f)H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NHBzlHCl
向Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NHBzl(1.0g)的甲醇溶液(25mL)中加入10％位于活性炭(100mg)中的钯和2M盐酸(1mL)，室温常压下将该悬液氢化1小时。过滤除去钯催化剂，真空浓缩滤液产生H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NHBzlHCl(0.87g)。TLC：Rf＝0.15，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水＝163/20/6/11v/v/v/v。(g)N-Boc-L-α-氨基-ε-己内酯
向搅拌的L-α-氨基-ε-己内酯(10g)的二噁烷/水(2/1v/v)的溶液(30mL)中加入1N氢氧化钠溶液(7.8mL)，接着加入二碳酸二叔丁酯(18.8g)。室温下将混合物搅拌16小时并真空浓缩。将剩余物溶解在乙酸乙酯中，用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空蒸发。将粗提物用己烷研制，过滤并真空干燥产生N-Boc-L-α-氨基-ε-己内酯(16g)。TLC：Rf＝0.85，硅胶上，乙酸乙酯/庚烷1/1v/v。(h)Boc-norLeu(环)-Gly-OMe
将N-Boc-L-α-氨基-ε-己内酯(10g)溶解在二氯甲烷(100ml)中。-20℃下，缓慢加入1M双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的四氢呋喃/环己烷1/1v/v的溶液(1当量)，将混合物搅拌30分钟。随后加入溴乙酸甲酯(4mL)，室温下将混合物搅拌2小时。加入另外的双(三甲基甲硅烷基)氨基化锂的四氢呋喃/环己烷1/1v/v以促使反应完成。用二氯甲烷稀释混合物，并用0.1N盐酸，水，5％碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空蒸发。通过硅胶层析(洗脱液：庚烷/乙酸乙酯6/4v/v)纯化剩余物产生12g Boc-norLeu(环)-Gly-OMe。TLC：Rf＝0.55，硅胶上，乙酸乙酯/庚烷6/4v/v。(i)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-OMe
将Boc-norLeu(环)-Gly-OMe(3g)溶解在TFA/二氯甲烷1/1v/v(30ml)中，室温下搅拌1小时。真空浓缩反应混合物。将剩余物溶解在二氯甲烷(25mL)中，0℃下，缓慢加入苄基磺酰氯(2.25g)的二氯甲烷溶液(10mL)。反应中加入三乙胺以使pH保持为8。室温下将混合物搅拌1小时，此后，将混合物真空干燥。将剩余物溶解在乙酸乙酯中，用5％碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空干燥。通过硅胶层析(洗脱液：二氯甲烷/乙酸乙酯95/5v/v)纯化剩余物产生BzlSO2-norLeu(环)-Gly-OMe(3.9g)。孔C：Rf＝0.40，硅胶上，二氯甲烷/乙酸乙酯9/1v/v。(j)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-OH
室温下，将BzlSO2-norLeu(环)-Gly-OM(3.9g)的二噁烷/水9/1的溶液(100mL)用足够量的1N氢氧化钠处理以将pH保持在13达2小时。酸化后，将混合物倒至水中并用二氯甲烷萃取。有机层用水洗涤，用硫酸钠干燥。浓缩滤液产生3.6g的标题化合物。孔C：Rf＝0.60，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水63/20/6/11v/v/v/v。(k)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[CHOHCO]-NHBzl
向冷(0℃)的BzlSO2-norLeu(环)-Gly-OH(340mg)的N，N-二甲基甲酰胺溶液(10mL)中顺序加入1-羟基苯并三唑(HOBt，203mg)和二环己基碳二亚胺(DCC，217mg)。0℃下，搅拌30分钟后，加入如(f)描述制备的H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NHBzl.HC(402g)和三乙胺(0.15mL)。0℃下，将混合物搅拌1小时，室温下保持过夜。将混合物冷却至-20℃，通过过滤除去二环己基脲。将滤液蒸发至干燥。将剩余物溶解在乙酸乙酯中并顺序用1M盐酸、水、5％碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，真空浓缩产生BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NHBzl(690mg)。TLC：Rf＝0.75，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水163/20/6/11v/v/v/v。(1)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[COCO]-NHBzl
向BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NHBzl(680mg)的无水二氯甲烷溶液(20mL)加入424mg高碘酸(Dess-Martin试剂)。室温下搅拌1小时后，加入2％硫代硫酸钠溶液(20ml)和5％碳酸氢钠溶液(20mL)，室温下将混合物搅拌30分钟。分离有机层，用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空蒸发产生粗BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[COCO]-NHBzl(561mg)。TLC：Rf＝0.85，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水163/20/6/11v/v/v/v。(m)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-NHBzl
将BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[COCO]-NHBzl(560mg，粗)用三氟乙酸(10ml)处理，室温下搅拌1小时。真空浓缩反应混合物，将剩余物溶解在水中，并直接加至制备性HPLC DeltaPak RP-C18柱上，随后以80mL/分钟的流速，使用20％A/80％B至20％A/45％B/35％C的洗脱体系洗脱45分钟。产量：287mg BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-OH。Rt(LC)：23.8分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟。实施例2乙基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-OH(a)Boc-D-Cha-Pro-OPac
0℃下，向Boc-D-Cha-OH.H2O(21.5g)的N，N-二甲基甲酰胺溶液(143mL)中加入羟基苯并三唑(HOBt)(13.7g)和二氯环己基碳二亚胺(DCC)(15.7g)，0℃下搅拌30分钟。将H-Pro-OPac.TFA(20g)溶解在50mLN，N-二甲基甲酰胺中，用三乙胺将pH调至8，将该溶液加入至反应混合物中。让其继续16小时，在此期间温度升至室温。过滤混合物，真空浓缩，溶解在乙酸乙酯中，用1N盐酸、水、5％碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空蒸发。产量28g。TLC：Rf＝0.5，硅胶上，二氯甲烷/甲醇95/5v/v。(b)乙基SO2-D-Cha-Pro-Opac
将Boc-D-Cha-Pro-OPac(3.8g)溶解在TFA/二氯甲烷1/1v/v(25mL)中，室温下搅拌30分钟。真空蒸发反应混合物。将粗胺溶解在二氯甲烷(50mL)中，-78℃下，加入乙基磺酰氯(0.8mL)。反应期间加入三乙胺以使pH保持在8.0℃下，将混合物搅拌3小时，此后加入水(25mL)。室温下再搅拌30分钟后，真空浓缩反应混合物。将剩余物溶解在乙醚中，并用1N盐酸、水、5％碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空干燥。用甲醇研制粗物质，产生乙基SO2-D-Cha-Pro-OPac(3.0g)。TLC：Rf＝0.6，硅胶上，二氯甲烷/甲醇95/5v/v。(c)乙基SO2-D-Cha-Pro-OH
向乙基SO2-D-Cha-Pro-OPac(10g)的四氢呋喃溶液(250mL)中加入1M四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液(84mL)。室温下将反应混合物搅拌30分钟，倒至水(1L)中。水溶液用乙酸乙酯萃取。将混合的有机层顺序用1N盐酸和水洗涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过从乙酸乙酯/二异丙基醚中结晶而纯化以产生乙基SO2-D-Cha-Pro-OH(6.0g)。TLC：Rf＝0.2，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水163/20/6/11v/v/v/v。(d)乙基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-OH
根据实施例1描述的方法进行乙基SO2-D-Cha-Pro-OH和H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe.HCl的DCC/HOBt偶联，皂化、Dess-Martin氧化，去保护和纯化。产量：163mg标题化合物。Rt(LC)：36.35分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例3BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-OEt(a)Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OEt
将Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe(751mg)溶解在25mL 3N HCl/乙醇溶液中，室温下搅拌4.5小时。将反应溶液蒸发至干，与乙醇共蒸发三次产生691mg Cbz-LysΨ[CHOHCO]-OEt。将该产物溶解在10mL无水二氯甲烷中，加入二碳酸二叔丁酯(425mg)。用三乙胺调节并保持溶液的pH至8，室温下将反应搅拌16小时。加入水，洗涤有机层，干燥产生782mg所需产物。在硅胶上使用庚烷/乙酸乙酯2/3纯化后，最终产量为696mg。TLC：Rf＝0.95，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水232/31/18/7v/v/v/v。(b)H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OEt.HCl
向Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OEt(696mg)的乙醇溶液(25ml)中加入10％位于活性炭中的钯(100mg)和2N盐酸(0.8ml)，室温常压下将该悬浮液氢化50分钟。过滤除去钯催化剂，真空浓缩滤液产生H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OEt.HCl(525mg)。TLC：Rf＝0.17，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水233/31/18/7v/v/v/v。(c)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-OEt
根据实施例1描述的方法进行与BzlSO2-norLeu(环)-Gly-OH的偶联、氧化、去保护和纯化。产量：186mg标题化合物。Rt(LC)：32.46分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例4BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-NH2
根据实施例1描述的方法进行BzlSO2-norLeu(环)-Gly-OH和H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NH2.HCl的偶联、随后的氧化、去保护和纯化产生103mg的标题化合物。Rt(LC)：27.50分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例5乙基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-OEt
根据实施例1描述的方法进行乙基SO2-D-Cha-Pro-OH(270mg)和H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OEt.HCl(268mg)的DCC/HOBt偶联、Dess-Martin氧化和使用三氟乙酸去保护以及纯化。产率：41mg标题化合物。Rt(LC)：40.7分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟，并将此洗脱液混合物再保持10分钟。实施例6乙基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-NHBzl
根据实施例1描述的方法进行乙基SO2-D-Cha-Pro-OH(250mg)和H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NHBzl.HCl(611mg)的DCC/HOBt偶联、Dess-Martin氧化和使用三氟乙酸去保护以及纯化。产率：208mg标题化合物。Rt(LC)：28.7分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟。实施例7乙基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-NH2
用实施例1中所描述的方法制备标题化合物。如对H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NHBzl.HCl所描述的，从Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH(0.95g)制备H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NH2.HCl(0.84g)。接着进行乙基SO2-D-Cha-Pro-OH(189mg)与H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NH2.HCl(179mg)之间的DCC/HOBt偶联、Dess-Martin氧化和使用三氟乙酸去保护以及纯化，产生126mg标题化合物。Rt(LC)：36.3分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例8BzlSO2-norVal(环)-Gly-LysΨ[COCO]-OH(a)(S)-3-((苄氧基羰基)氨基)-2-氧代-哌啶
将Cbz-鸟氨酸-OH.HCl(25g)溶解在2L N，N-二甲基甲酰胺中，并加入12mL三乙胺至pH8.5。剧烈搅拌下，滴加2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基尿鎓四氢硼酸盐(TBTU，26.5g)的250mL N，N-二甲基甲酰胺溶液。在继续用三乙胺将pH调至8.5的同时，室温下让混合物反应16小时。将反应混合物浓缩至干，溶解在乙酸乙酯中，用1N盐酸、水、5％碳酸氢钠、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干产生11.7g标题化合物。TLC：Rf＝0.80，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水63/20/6/11v/v/v/v。(b)Cbz-norVal(环)-Gly-OMe
将(S)-3-((苄氧基羰基)氨基)-2-氧代-哌啶(5g)溶解在二氯甲烷(50mL)中。-20℃下，缓慢加入1M双(三甲基甲硅烷基)氨基锂的四氢呋喃/环己烷1/1v/v溶液(20mL，1当量)，将混合物搅拌30分钟。随后加入溴乙酸甲酯(1.9mL)，室温下将混合物搅拌30分钟。将混合物用乙酸乙酯稀释，并用饱和氯化氨水溶液猝灭。将有机层用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空干燥。通过硅胶层析(洗脱液：二氯甲烷/甲醇95/5v/v)纯化剩余物产生4.7g Cbz-norVal(环)-Gly-OMe。TLC：Rf＝0.38，硅胶上，乙酸乙酯/庚烷3/1v/v。(c)BzlSO2-norVal(环)-Gly-OMe
将Cbz-norVal(环)-Gly-OMe(4.7g)溶解在40mL甲醇中，加入500mg 10％位于活性炭中的钯，加入7.4mL 2N盐酸，室温常压下氢化1小时。过滤反应混合物，真空干燥，立即作为H-norVal(环)-Gly-OMe.Hcl用于下一步中。
将粗胺溶解于二氯甲烷(50mL)中，0℃下，缓慢加入苄基磺酰氯(2.82g)。反应中加入三乙胺以保持pH8。室温下将混合物搅拌1小时，此后，将混合物用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空干燥。通过硅胶层析(洗脱液：二氯甲烷/甲醇95/5v/v)纯化剩余物产生BzlSO2-norVal(环)-Gly-OMe(2g)。TLC：Rf＝0.87，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水＝63/20/6/11v/v/v/v。(d)BzlSO2-norVal(环)-Gly-OH
根据实施例1描述的方法进行BzlSO2-norVal(环)-Gly-OMe(2g)的皂化。产率：1.8g。TLC：Rf＝0.40，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水＝63/20/6/11v/v/v/v。(e)BzlSO2-norVal(环)-Gly-LysΨ[COCO]-OH
根据实施例1描述的方法进行BzlSO2-norVal(环)-Gly-OH和H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe·HCl之间的偶联、氧化、去保护以及纯化。产率：107mg标题化合物。Rt(LC)：24.45分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例9乙基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基
使用实施例3对H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OEt·HCl描述的方法从Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-O-Me(0.49g)和2-丙醇制备H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基·盐酸(0.32g)。根据实施例1描述的方法进行乙基SO2-D-Cha-Pro-OH(239mg)和H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-O异丙基·盐酸(316mg)之间的DCC/HOBt偶联、Dess-Martin氧化和去保护以及纯化。产率：123mg标题化合物。Rt(LC)：43.0分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟，并再将此洗脱液混合物保留10分钟。实施例10BzlSO2-norVal(环)-Gly-LysΨ[COCO]-氮杂环丁烷
用实施例1描述的方法制备标题化合物。如对Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-NHBzl所描述的，从Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH(2.7g)制备CbzLys(Boc)Ψ[CHOHCO]-氮杂环丁烷(2.26g)。氢化CbzLys(Boc)Ψ[CHOHCO]-氮杂环丁烷(269mg)产生H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-氮杂环丁烷·盐酸(214mg)。接着进行BzlSO2-norVal(环)-Gly-OH(175mg)与H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-氮杂环丁烷·盐酸(214mg)之间的DCC/HOBt偶联、Dess-Martin氧化和使用三氟乙酸去保护以及纯化产生84mg标题化合物。Rt(LC)：27.8分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例11BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-氮杂环丁烷
根据实施例10描述的方法制备Cbz-Ly(Boc)Ψ[CHOHCO]-氮杂环丁烷。根据实施例1描述的方法进行氢化、与BzlSO2-norLeu(环)-Gly-OH的偶联、氧化、去保护和纯化。Rt(LC)：33.61分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例12BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(乙氧基羰基)Ψ[COCO]-氮杂环丁烷(a)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[CHOHCO]-氮杂环丁烷.TFA
将BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-氮杂环丁烷(根据实施例10描述的方法制备)(220mg)溶解在10mL二氯甲烷/三氟乙酸1/1v/v中，室温下搅拌2小时。蒸发除去溶剂，剩余物用乙醚研制。产率：267mg。TLC：Rf＝0.57，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水＝63/20/6/11v/v/v/v。(b)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(乙氧基羰基)Ψ[CHOHCO]-氮杂环丁烷
将BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[CHOHCO]-氮杂环丁烷·TFA(267mg)溶解在10mL N，N-二甲基甲酰胺中，加入46ul氯甲酸乙基酯，此后用三乙基胺将pH调至8.5。室温下搅拌16小时后，反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水、5％碳酸氢钠、2％柠檬酸和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干产生150mg标题化合物。TLC：Rf＝0.53，硅胶上，二氯甲烷/甲醇9/1v/v。(c)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(乙氧基羰基)Ψ[COCO]-氧杂环丁烷
根据实施例1描述的方法进行BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(乙氧基羰基)Ψ[CHOHCO]-氮杂环丁烷(150mg)的氧化和纯化。产率为25mg。Rt(LC)：26.42分钟；20％A/60％B/20％C至100％C，40分钟。实施例13BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-O-异丙基
根据实施例1描述的方法进行BzlSO2-norLeu(环)-Glyo-OH(实施例1中描述)和H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-异丙基-HCl之间的偶联、氧化和去保护以及纯化。产率：400mg标题化合物。Rt(LC)：40分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例14BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-NH-异丙基(a)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH
根据实施例1描述的方法进行1.96g BzlSO2-norLeu(环)-Gly-OH和2.20g H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe.HCl之间的DCC/HOBt偶联和产物皂化。产率：3.1g粗标题化合物。TLC：Rf＝0.4，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水＝66/20/6/11v/v/v/v。(b)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-阳异丙基
根据实施例1描述的方法进行0.4mmol BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH与0.105mL异丙胺之间的EDCI/HOBt偶联、DessMartin氧化(反应时间：19小时)和去保护。产率：150mg标题化合物。Rt(LC)：34.01分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例15BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-NH-正丙基
根据实施例1描述的方法进行0.4mmol BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH与0.101mL丙胺之间的EDCI/HOBt偶联、DessMartin氧化(反应时间24小时)和去保护。产率：144mg标题化合物。Rt(LC)：34.22分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例16BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-NH-甲基
根据实施例1描述的方法进行0.4mmol BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH与甲胺(0.4mL的3M N，N-二甲基甲酰胺溶液)之间的EDCI/HOBt偶联、Dess Martin氧化(反应时间20小时)和去保护。产率：127mg标题化合物。Rt(LC)：28.36分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例17BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-吡咯烷基
根据实施例1描述的方法进行0.4mmol BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH与0.102mL吡咯烷之间的EDCI/HOBt偶联、DessMartin氧化(反应时间14天)和去保护。产率：125mg标题化合物。Rt(LC)：36.87分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例18BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-N-乙基
根据实施例1描述的方法进行0.4mmol BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH与乙基胺(1.78mL 0.7M N，N-二甲基甲酰胺溶液)之间的EDCI/HOBt偶联、Dess Martin氧化(反应时间：20小时)和去保护。产率：115mg标题化合物。Rt(LC)：31.30分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例19BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-吗啉-4-基
根据实施例1描述的方法进行0.4mmol BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH与0.107mL吗啉之间的EDCI/HOBt偶联、DessMartin氧化(反应时间：6.5天)和去保护。产率：148mg标题化合物。Rt(LC)：33.73和34.17分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例20RzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-(1，1-三氧代)硫代吗啉-4-基
向2.47g的硫代吗啉的25mL甲醇溶液中加入5.75g二碳酸二叔丁酯和4mL三乙基胺。室温搅拌3小时后，加入50mL乙酸乙酯。将该溶液用被盐酸将pH调至3的水，水，5％碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，并浓缩产生4.73g N-叔丁基氧羰基硫代吗啉。将该剩余物(4.73g)溶解在50mL二氯甲烷中，加入50mL水。向该搅拌混合物中分小批加入11g3-氯过苯甲酸(80-90％纯度)，保持反应混合物为pH7。室温下搅拌16小时后，分离水层，有机层用5％硫代硫酸钠溶液，5％碳酸氢钠溶液(三次)和盐水洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩。剩余物通过硅胶层析(洗脱液：乙酸乙酯/庚烷2/3v/v)纯化产生5.7g N-叔丁基氧羰基硫代吗啉1，1-二氧化物。将该砜(0.625g)溶解在50mL 3M氯化氢的二噁烷溶液中，室温下搅拌4小时后，浓缩反应混合物产生0.579g硫代吗啉1，1-二氧化物盐酸盐。
根据实施例1描述的方法进行0.4mmol BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH与0.21g硫代吗啉1，1-二氧化物盐酸盐之间的EDCI/HOBt偶联、Dess Martin氧化(反应时间：3天)和去保护。产率：180mg标题化合物。Rt(LC)：33.64；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例21BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-N(甲基)(甲氧基)
根据实施例1描述的方法进行0.4mmol BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH与0.12g N，O-二甲基羟基胺之间的EDCI/HOBt偶联、Dess Martin氧化(反应时间：3.5天)和去保护。产率：136mg标题化合物。Rt(LC)：33.80和34.53分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例22BzlSO2-norLeu(环)-Gly-LysΨ[COCO]-(2-甲酰胺)氮杂环丁-1-基)
根据实施例1描述的方法进行1.13g N-叔丁基氧羰基-L-氮杂环丁烷-2-羧酸与1.38g氯化铵之间的DCC/HOBt偶联产生0.468g N-叔丁基氧羰基-L-氮杂环丁烷-2-甲酰胺。将该酰胺(0.224g)溶解在5mL 3M氯化氢的二噁烷溶液中。室温下搅拌3小时后，浓缩反应混合物产生0.17g氮杂环丁烷-2-甲酰胺盐酸盐。
根据实施例1描述的方法进行0.4mmol BzlSO2-norLeu(环)-Gly-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OH与0.17g氮杂环丁烷-2-甲酰胺盐酸盐之间的EDCI/HOBt偶联、Dess Martin氧化(反应时间：20小时)和去保护。产率：58mg标题化合物。Rt(LC)：26.43分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例23正丙基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-O异丙基(a)Boc-D-Cha-Pro-OBzl
0℃下，向搅拌的11.64g Boc-D-Cha-OH的100mL二氯甲烷溶液中加入6.36g HOBt和9.72g DCC。20分钟后，加入用N，N-二异丙基乙基胺调至pH8的10.35g H-Pro-OBzl.HCl的40mL二氯甲烷溶液。16小时后，过滤反应混合物，滤液顺序用水，0.1N盐酸，水，5％碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。将所有含水洗涤物用乙酸乙酯洗涤两次，混合所有有机提取物，用硫酸钠干燥并浓缩。向剩余物中加入乙酸乙酯和庚烷(1/1(v/v))的混合物，过滤产生的悬浮液，滤液通过硅胶层析(洗脱液：乙酸乙酯/庚烷＝1/1v/v)纯化以产生19.34g Boc-D-Cha-Pro-OBzl。TLC：Rf＝0.8，硅胶上，二氯甲烷/甲醇＝9/1v/v。(b)正丙基SO2-D-Cha-Pro-OBzl
将Boc-D-Cha-Pro-OBzl(1.01g)溶解在42mL 3M氯化氢的二噁烷溶液中。室温下搅拌2小时后，浓缩反应混合物。将剩余物溶解在35ml二氯甲烷中并冷却至0℃。向该搅拌溶液中加入0.22mL1-丙烷磺酰氯，将pH调至8.5。室温下搅拌24小时后，浓缩反应混合物。将剩余物溶解在乙酸乙酯中，顺序用5％碳酸氢钠水溶液，水，5％柠檬酸溶液和盐水洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩。粗产物通过凝胶层析(洗脱液：乙酸乙酯/庚烷＝1/1v/v)纯化产生0.85g正丙基SO2-D-Cha-Pro-OBzl。TLC：Rf＝0.6，硅胶上，乙酸乙酯/庚烷＝1/1v/v。(c)正丙基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基
使用实施例1描述的方法将正丙基SO2-D-Cha-Pro-OBzl(0.85g)氢化产生0.54g正丙基SO2-D-Cha-Pro-OH。根据实施例9描述的方法进行225mg正丙基SO2-D-Cha-Pro-OH与H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基·HCl的DCC/HOBt偶联和Dess Martin氧化。如上所述使用3M氯化氢的二噁烷溶液除去Boc基团，使用实施例1描述的制备性HPLC方法纯化粗产物。产率：47g标题化合物。Rt(LC)：27.6分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟，然后至100％C，10分钟。实施例24(10-樟脑)SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基
使用实施例23中描述的方法从Boc-D-Cha-Pro-OBzl和(-)-10-樟脑磺酰氯制备标题化合物。产率：从Boc-D-Cha-pro-OBzl计为12％。Rt(LC)：33.6分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟，然后至100％C，10分钟。实施例25苯基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基
使用实施例23中描述的方法从Boc-D-Cha-Pro-OBzl和苯磺酰氯制备标题化合物。产率：从Boc-D-Cha-Pro-OBzl计为9％。Rt(LC)：29.3分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟，然后至100％C，10分钟。实施例26甲基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基
使用实施例23中描述的方法从Boc-D-Cha-Pro-OBzl和甲磺酰氯制备标题化合物。产率：从Boc-D-Cha-Pro-OBzl计为18％。Rt(LC)：24.3分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟，然后至100％C，10分钟。实施例27异丙基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基
使用实施例23中描述的方法从Boc-D-Cha-Pro-OBzl和异丙基磺酰氯制备标题化合物。产率：从Boc-D-Cha-Pro-OBzl计为2％。Rt(LC)：26.8分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟，然后至100％C，10分钟。实施例28苄基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基
使用实施例23中描述的方法从Boc-D-Cha-Pro-OBzl和α-甲苯磺酰氯制备标题化合物。产率：从Boc-D-Cha-Pro-OBzl计为11％。Rt(LC)：30.4分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟，然后至100％C，10分钟。实施例29正丁基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基
使用实施例23中描述的方法从Boc-D-Cha-Pro-OBzl和1-丁基磺酰氯制备标题化合物。产率：从Boc-D-Cha-Pro-OBzl计为29％。Rt(LC)：29.3分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟，然后至100％C，10分钟。实施例30[3-(苄基磺酰基氨基)-6-甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶基]乙酰基-LysΨ[COCO]-O-异丙基
根据实施例9描述的方法进行151mg[3-(苄基磺酰基氨基)-6-甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶基]乙酸(WO97/01338)与205mg H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]O-异丙基·盐酸之间的DCC/HOBt偶联、Dess Martin氧化和去保护和纯化，产生91mg标题化合物。Rt(LC)：34.7分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例31[3-(苄基磺酰基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶基]乙酰基-LysΨ[COCO]-O-异丙基
根据实施例9描述的方法进行178mg[3-(苄基磺酰基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶基]乙酸(WO97/46207)与H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基·盐酸之间的DCC/HOBt偶联、Dess Martin氧化。根据实施例23描述的方法使用氯化氢的二噁烷溶液进行去保护以及纯化产生116mg标题化合物。Rt(LC)：32.4分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例32[3-(苄基磺酰基氨基)-6-甲基-2-氧代-1，2-三氢吡啶基]乙酰基-LysΨ[COCO]-NH2
根据实施例1描述的方法进行的286mg[3-(苄基磺酰基氨基)-6-甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶基]乙酸(WO97/01338)与H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe，盐酸之间的DCC/HOBt偶联，产生0.51g[3-(苄基磺酰基氨基)-6-甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶基]乙酰基-LysΨ[CHOHCO]-OMe。根据实施例4描述的方法进行该甲酯的皂化、与氯化铵的EDCI/HOBt偶联、Dess Martin氧化，去保护以及纯化，产生76mg标题化合物。Rt(LC)：26.9分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例33BzlSO2-Aad-Pro-LysΨ[COCO]-OH(a)BzlSO2-Aad(OtBu)-OH
向搅拌的0.5g H-Aad(OtBu)-OH在4.4mL 1N氢氧化钠水溶液中的溶液中加入0.42g苄基磺酰氯的2mL二噁烷溶液。室温下16小时后，加入另外1.4mL 2N氢氧化钠溶液、0.5mL二噁烷和0.09g苄基磺酰氯，将反应混合物再搅拌1天。除去二噁烷，加入水，使用盐酸让混合物成为酸性(pH3)，用乙醚萃取两次。将混合醚层用硫酸钠干燥，浓缩产生235mgBzlSO2-Aad(OtBu)-OH。TLC：Rf＝0.7，硅胶上，二氯甲烷/甲醇/水＝14/6/1v/v/v。(b)BzlSO2-Aad(OtBu)-Pro-OH
如实施例23描述的，进行235mg BzlSO2-Aad(OtBu)-OH与168mg H-Pro-OBzl.HCl的DCC/HOBt偶联、接着氢化产生193mg标题化合物。TLC：Rf＝0.6，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水＝163/20/6/11v/v/v/v。(c)BzlSO2-Aad-Pro-LysΨ[COCO]-OH
根据实施例32中描述的方法进行193mg BzlSO2-Aad(OtBu)-Pro-OH与H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe.HCl的DCC/HOBt偶联、皂化、Dess Martin氧化、去保护和纯化，产生85mg标题化合物。Rt(LC)：26.1分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例34BzlSO2-Glu-Pro-LysΨ[COCO]-OH
根据实施例33描述的途径从H-Glu-(OtBu)-OH开始产生标题化合物。产率：从H-Glu-(OtBu)-OH开始为3％。Rt(LC)：22.6分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例35BzlSO2-Asp-Pro-LysΨ[COCO]-OH
根据实施例33描述的途径从H-Asp-(OtBu)-OH开始产生标题化合物。产率：从H-Asp-(OtBu)-OH开始为18％。Rt(LC)：21.9分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例36BzlSO2-D-Tyr(Me)-Pro-LysΨ[COCO]-NH2(a)EtSO2-D-Tyr(Me)-Pro-OH
使用实施例23描述的方法进行2.22g Boc-D-Tyr(Me)-OH与2.0g H-Pro-OBzl.HCl的DCC/HOBt偶联，除去Boc保护基团，使用磺酰氯磺化并氢化苄基酯，产生1.0g标题化合物。TLC：Rf＝0.23，硅胶上，二氯甲烷/甲醇＝95/5v/v。(b)EtSO2-D-Tyr(Me)-Pro-LysΨ[COCO]-NH2
使用实施例32描述的方法进行254mg EtSO2-D-Ty(Me)-Pro-OH与H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe.HCl的DCC/HOBt偶联、皂化、与氯化铵的EDCI/HOBt偶联、Dess Martin氧化、去保护和纯化，产生83mg标题化合物。Rt(LC)：28.0分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例37EtSO2-D-Tyr(Me)-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基
根据实施例9描述的方法进行0.51g EtSO2-D-Ty(Me)-Pro-OH与H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-O异丙基.HCl的DCC/HOBt偶联、Dess Martin氧化、去保护和纯化，产生223mg标题化合物。Rt(LC)：36.5分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例38EtSO2-D-Tyr(Me)-Pro-LysΨ[COCO]-氮杂环丁烷
根据实施例10描述的方法进行307mg EtSO2-D-Ty(Me)-Pro-OH与H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-氮杂环丁烷盐酸盐的DCC/HoBt偶联、Dess Martin氧化、去保护和纯化，产生83mg标题化合物。Rt(LC)：36.4分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例39EtSO2-D-Tyr(Me)-Pro-LysΨ[COCO]-N-(4-氯丙基)
作为实施例38纯化中的第二产物获得标题化合物(43mg)。Rt(LC)：38.1分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例40BzlSO2-D-Dpa-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基(a)BzlSO2-D-Dpa-Pro-OH
根据实施例23中描述的方法除去1.5g Boc-D-Dpa-Pro-OBzl(WO97/31937)的Boc基团、与苄基磺酰氯反应、除去苄基酯，产生1.0g标题化合物。TLC：Rf＝0.63，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸//水＝163/20/6/1v/v/v/v。(b)BzlSO2-D-Dpa-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基
根据实施例9描述的方法进行0.31g BzlSO2-D-Dpa-Pro-OH与H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基盐酸盐的DCC/HOBt偶联、Dess Martin氧化、去保护和纯化，产生50mg标题化合物。Rt(LC)：32.2分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟，然后至100％C，10分钟。实施例41EtSO2-Leu-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基(a)EtSO2-Leu-OMe
使用三乙胺将搅拌的3.0g H-Leu-OMe.HCl的30mL二氯甲烷溶液调至pH8并冷却到0℃。接着加入3.2mL乙磺酰氯和2.3mL三乙基胺。室温下搅拌16小时后，反应混合物顺序用0.5N盐酸、水和5％碳酸氢钠水溶液洗涤并浓缩。将粗产物用硅胶层析纯化(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝9/1v/v)，产生3.3g EtSO2-Leu-OMe。TLC：Rf＝0.69，硅胶上，二氯甲烷/乙酸乙酯＝9/1v/v。(b)EtSO2-Leu-Pro-OH
皂化EtSO2-Leu-OMe(3.3g)(实施例1的方法)，与H-Pro-OBzl偶联(实施例23的方法)，并使用所述方法氢化产生的二肽(实施例23的方法)，产生3.4g标题化合物。TLC：Rf＝0.11，硅胶上，二氯甲烷/乙酸乙酯＝9/1v/v。(c)EtSO2-Leu-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基
根据实施例23描述的方法进行145mg EtSO2-Leu-Pro-OH与H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基.HCl的DCC/HOBt偶联、Dess Martin氧化、去保护和纯化产生120mg标题化合物。Rt(LC)：16.6分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟。实施例42BzlSO2-norLeu(环)-Gly-AcgΨ[COCO]-氮杂环丁烷(a)H-Acg(Boc)[CHOHCO]-OMe.HCl
向3-[4-(1，1-二甲基乙氧基羰基氨基)环己基]-2-羟基-3-硝基丙酸甲酯(Lyle等，生物有机药物化学通讯，7，67-72(1997))(294m的甲醇(100mL)溶液中加入2N盐酸(0.425mL)和10％位于活性炭粉末中的钯(0.45g)，室温常压下将该悬浮液氢化16小时。过滤除去钯催化剂，减压蒸发除去溶剂，产生非对映异构体混合物形式的H-Acg(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe.HCl(289mg)。TLC：Rf＝0.26，硅胶上，乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水＝232/31/18/7v/v/v/v。(b)BzlSO2-norLeu(环)-Gly-AcgΨ[COCO]-氢杂环丁烷
根据实施例1描述的方法进行0.27g BzlSO2-norLeu(环)-Gly-OH与0.25g H-Acg(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe.HCl的DCC/HOBt偶联、皂化、与氮杂环丁烷盐酸盐的EDCI/HOBt偶联、Dess Martin氧化、去保护。产率：82mg标题化合物。Rt(LC)：34.8分钟和35.4分钟；20％A/80％B至20％A/20％B/60％C，40分钟。实施例43乙基SO2-D-Cha-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基(a)Cbz-Acg(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe
使用N，N-二异丙基乙基胺将搅拌的0.34g H-Acg(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe.HCl在10mL乙腈和10mL N，N-二甲基甲酰胺中的溶液调至pH8。向该溶液中加入0.24g N-苄基氧羰基氧琥珀酰亚胺。室温下搅拌1小时后，浓缩反应混合物。将剩余物溶解在乙酸乙酯中，用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。将剩余物通过硅胶层析纯化(洗脱液：乙酸乙酯/庚烷2/3v/v)，产生0.287mg Cbz-Acg(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe。TLC：Rf＝0.25，硅胶上，乙酸乙酯/庚烷＝1/1v/v。(b)Cbz-Acg(Boc)Ψ[CHOHCO]-O异丙基
氮气氛下，向搅拌的5mL四氢呋喃和1mL 2-丙醇的混合物中缓慢加入2.5mL 1.6N正丁基锂的己烷溶液。20分钟后，加入0.28g Cbz-Acg(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe的5mL 2-丙醇溶液并在室温下搅拌2小时。接着加入0.5mL乙酸并浓缩反应混合物。将剩余物溶解在乙酸乙酯中，用水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。将剩余物通过硅胶层析纯化(洗脱液：乙酸乙酯/庚烷2/3v/v)，产生0.223mg Cbz-Acg(Boc)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基。TLC：Rf＝0.25，硅胶上，乙酸乙酯/庚烷＝1/2v/v。(b)乙基SO2-D-Cha-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基
向0.22g Cbz-Acg(Boc)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基的N，N-二甲基甲酰胺溶液中加入10％位于活性炭中的钯(80mg)和2M盐酸(0.23mL)，室温常压下将该悬浮液氢化1小时。过滤除去钯催化剂。使用实施例1中描述的方法，该滤液用于与0.166g乙基SO2-D-Cha-Pro-OH的DCC/HOBt偶联。利用实施例1中描述的方法，使用Dess Martin试剂氧化产物，除去Boc基团并纯化。Rt(LC)：30分钟；20％A/60％B/20％C至20％A/80％C，30分钟。实施例44EtSO2-B-X-LysΨ[COCO]-O(a)Teoc-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基
在实施例1f描述的条件下氢化Cbz-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe(10g)产生定量产率的H-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe。室温下，在存在N，N-二异丙基乙基胺(pH＝8)时，将粗产物用2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基羰基羟基琥珀酰亚胺(6.7g)的N，N-二甲基甲酰胺(100mL)溶液处理2小时。将反应混合物蒸发至干，剩余物溶解在乙酸乙酯中，并用2％柠檬酸溶液、水、5％碳酸氢钠溶液和盐水洗涤。用硫酸钠干燥，蒸发溶剂，硅胶层析(洗脱液：乙酸乙酯/庚烷＝1/1v/v)后，产生Teoc-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe(9.1g)。室温下，通过向搅拌的异丙基醇(5.4mL)、THF(27.1mL)和1.6M正丁基锂的己烷混合物(13.6mL)的混合物中滴加Teoc-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-OMe(2.8g)完成随后的酯基转移。1小时后，将反应混合物冷却至0℃，加入冰醋酸(2.5mL)。将反应混合物浓缩成小体积，用乙酸乙酯稀释，用水(2×)洗涤，用硫酸钠干燥。过滤并真空除去溶剂产生粗产物。硅胶层析(洗脱液：乙酸乙酯/庚烷＝1/1v/v)产生标题化合物(2.9g)。TLC：Rf＝0.53，硅胶上，庚烷/乙酸乙酯1/1v/v。(h)Teoc-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基
将Teoc-Lys(Boc)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基(2.8g)溶解在乙醚(36mL)中，并加入对甲苯磺酸(1.8g)。30℃2小时后，蒸发反应混合物，将剩余物真空干燥产生Teoc-LysΨ[CHOHCO]-O-异丙基。向4.2g羟甲基树脂(Bachem，1.02mmol/g)在50mL乙腈/二氯甲烷(1/1v/v)和三乙胺(1.81mL)中的悬浮液中加入碳酸N，N-二琥珀酰亚胺酯(3.36g)。室温下，在定轨摇床中将悬浮液摇荡2小时。过滤树脂并用二氯甲烷、乙腈和二氯甲烷洗涤(各三次)并干燥。将Teoc-LysΨ[CHOHCO]-O-异丙基(见上文)溶解在50mL乙腈/二氯甲烷(1/1v/v)中。用三乙胺将溶液的pH调节至8。将该溶液加入树脂中，室温下将悬浮液摇荡16小时。根据前面描述的方法过滤除去溶剂并洗涤树脂。真空干燥后，获得5.43g Teoc-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]O-异丙基。(c)H-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基
室温下，将2.5g Teoc-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基的三氟乙酸/二氯甲烷(50mL，1/9v/v)悬浮液摇荡45分钟。用二氯甲烷充分洗涤树脂，高真空下干燥，产生H-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基(2.5g)。(d)Boc-X-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基
将H-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基以500mg一份分至4个反应器中。将树脂用1％N，N-二异丙基乙基胺的二氯甲烷/N，N-二甲基甲酰胺(3/2v/v)溶液和二氯甲烷洗涤(各三次)。接着，将10mL二氯甲烷/N，N-二甲基甲酰胺(3/2v/v)加入至树脂中，然后加入结构单元Boc-X-OH(139mg Boc-D-Leu-OH，139mg Boc-Leu-OH，148mg Boc-Gln-OH或159mg Boc-Phe-OH)、2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基尿鎓四氟硼酸盐(TBTU，193mg)和N，N-二异丙基乙基胺(105ul)。室温下将悬浮液摇荡90分钟，此后通过过滤除去溶剂。将树脂用二氯甲烷/N，N-二甲基甲酰胺(3/2v/v)、N，N-二甲基甲酰胺和二氯甲烷(各三次)洗涤并干燥。(e)H-X-Lvs(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基
在脱除Teoc基团(参见实施例44c)的相同条件下除去四种不同X-结构单元的Boc基团，产生四个500mg H-X-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]O-异丙基。将树脂(500mg)分配于5个反应器中。(f)EtSO2-B-X-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基
基于100g树脂，在如方法(d)描述的相同条件下进行第二结构单元EtSO2-B-OH(根据实施例41中描述的方法制备的27.0mg EtSO2-Asn-OH，26.8mg EtSO2-D-Leu-OH，30.8mg EtSO2-D-Phe-OH，36.8mg EtSO2-Nal-OH和32.4mg EtSO2-D-3-Tiq-OH)的偶联。后处理后，真空干燥20个反应容器(从4种不同X单元和5种不同B单元产生)。(g)EtSO2-B-X-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[COCO]-O-异丙基
将EtSO2-B-X-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基(100mg)溶胀在1-羟基-1，2-苯并二氧碘茂-3(1H)-酮1-氧化物(0.18M)在二甲基亚砜(2mL)和二氯甲烷(0.2mL)中的溶液中。室温下，将反应混合物摇荡过夜，此后过滤除去溶剂。随后用二甲基亚砜和二氯甲烷洗涤(各三次)，干燥后产生EtSO2-B-X-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[CHOHCO]-O-异丙基。(h)EtSO2-B-X-LysΨ[COCO]-O-异丙基
将三氟乙酸/硫代茴香醚(2mL，10/1v/v)溶液加入至EtSO2-B-X-Lys(CO-O-甲基树脂)Ψ[COCO]-O-异丙基(100mg)中。室温下将反应混合物摇荡4小时。过滤树脂，用三氟乙酸洗涤(3次)，此后，真空蒸发滤液至干。将树脂用庚烷(2mL)漂洗，在滗析庚烷层后剧烈搅拌。将该过程重复两次。将粗产物干燥并直接上样在使用下面条件的制备性SupelcosilC18DB柱(21×250mm)用于纯化：流速：20mL/分钟；缓冲液A：三氟乙酸水溶液，0.1M，B：水，C：乙腈/水6/4v/v；梯度(取决于产物的极性)3％A-67％B-30％C至3％A-52％B-45％C，40分钟。210nm处UV检测。分离对应于所需化合物的主要峰并冷冻干燥，产生如表44所示的纯化的终产物。表44：在羟甲基树脂中制备的EtSO2-B-X-LysΨ[COCO]-O-异丙基的表征(在反向HPLC中的保留时间和电喷雾质谱中的M+H峰)。HPLC条件：流速：10mL/分钟；缓冲液A：水，B：乙腈/水(6/4v/v)，C：0.5M磷酸缓冲液pH＝2.1；梯度0→45分钟65％A/15％B/20％c→0％A/80％B/20％C。210nm处UV检测。
                                       B
    Asn     D-Leu   D-Phe     Nal   D-3-Tiq
 EtSO2-B-D-Leu-D/L-LysΨ[COCO]-O-异丙基  Rt＝17.07minM+H＝536.4   Rt＝27.20minM+H＝535.6   Rt＝30.89minM+H＝569.4  Rt＝38.17minM+H＝619.6   Rt＝33.54minM+H＝581.4
 EtSO2-B-Leu-D/L-LysΨ[COCO]-O-异丙基  Rt＝17.17minM+H＝536.4   Rt＝30.78minM+H＝535.6   Rt＝32.89minM+H＝569.4  Rt＝37.79minM+H＝619.6   Rt＝33.60minM+H＝581.4
 EtSO2-B-Gln-D/L-LysΨ[COCO]-O-异丙基  Rt＝5.40minM+H＝551.2   Rt＝15.74minM+H＝550.4   Rt＝18.05minM+H＝584.4  Rt＝28.44minM+H＝634.4   Rt＝21.27minM+H＝596.4
 EtSO2-B-Phe-D/L-LysΨ[COCO]-O-异丙基  Rt＝20.75minM+H＝570.4   Rt＝33.33minM+H＝569.4   Rt＝35.18minM+H＝603.4  Rt＝39.47minM+H＝653.6   Rt＝35.92minM+H＝615.6
实施例45
可使用本发明的方法制备下面的化合物：CF3SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基MeSO2-D-Tyr(Me)-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基正丁基SO2-D-Tyr(Me)-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基CF3SO2-D-Tyr(Me)-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基BzlSO2-D-Tyr(Me)-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-(p-OEt-Phe)-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Nle-Pro-LysΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Cha-Azt-LysΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Cha-(N-环庚基-Gly)-LysΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Cha-Val-LysΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Cha-Pec-LysΨ[COCO]O-异丙基EtSO2-D-Cha-(3，4-脱氢-Pro)-LysΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-氮杂环丁烷MeSO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-氮杂环丁烷正丁基SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-氮杂环丁烷CF3SO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-氮杂环丁烷BzlSO2-D-Cha-Pro-LysΨ[COCO]-氮杂环丁烷[3-(BzlSO2氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶]乙酰基-LysΨ[COCO]-氮杂环丁烷[3-(BzlSO2氨基)-6-甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶]乙酰基-LysΨ[COCO]-氮杂环丁烷MeSO2-D-Cha-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基正丁基SO2-D-Cha-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基CF3SO2-D-Cha-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基BzlSO2-D-Cha-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Tyr(Me)-Pro-AcgΨ[COCO]O-异丙基MeSO2-D-Tyr(Me)-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基正丁基SO2-D-Tyr(Me)-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基CF3SO2-D-Tyr(Me)-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基BzlSO2-D-Tyr(Me)-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Tyr(Et)-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Nle-Pro-AcgΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Cha-Azt-AcgΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Cha-(N-环戊基-Gly)-AcgΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Cha-Val-AcgΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Cha-Pec-AcgΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Cha-(3，4-脱氢-Pro)-AcgΨ[COCO]-O-异丙基EtSO2-D-Cha-Pro-AcgΨ[COCO]-氮杂环丁烷ErSO2-D-Tyr(Me)-Pro-AcgΨ[COCO]-氮杂环丁烷EtSO2-D-Tyr(Me)-Pro-AcgΨ[COCO]-NH2EtSO2-D-Cha-Pro-AcgΨ[COCO]-氮杂环丁烷正丁基SO2-D-Cha-Pro-AcgΨ[COCO]-氮杂环丁烷CF3SO2-D-Cha-Pro-AcgΨ[COCO]-氮杂环丁烷BzlSO2-D-Cha-Pro-AcgΨ[COCO]-氮杂环丁烷3-(BzlSO2-氨基)-1-羧甲基-吡啶-2-酮-AcgΨ[COCO]-O-异丙基3-(BzlSO2-氨基)-1-羧甲基-吡啶-2-酮-AcgΨ[COCO]-氮杂环丁烷3-(BzlSO2-氨基)-1-羧甲基-6-甲基-吡啶-2-酮-AcgΨ[COCO]-O-异丙基3-(BzlSO2-氨基)-1-羧甲基-6-甲基-吡啶-2-酮-AcgΨ[COCO]-氮杂环丁烷
本发明化合物的生物活性通过下列试验方法确定。I.抗凝血酶分析
凝血酶(因子IIa)为凝固级联作用中的一种因子。
本发明化合物的抗凝血酶活性通过分光光度法测定由凝血酶导致的发色底物水解的速率来分析。用于缓冲体系中抗凝血酶活性的此分析法被用来评价试验化合物的IC50值。试验介质：三羟甲基氨基甲烷-NaCl-聚乙二醇6000(TNP)缓冲液参考化合物：I12581(Kabi)赋形剂：TNP缓冲液
可用在最终反应混合物中在浓度高达2.5％而不具有副作用的二甲亚砜、甲醇、乙醇、乙腈或叔丁基醇帮助溶解。方法     试剂*
1.三羟甲基氨基甲烷-NaCl(TN)缓冲液
缓冲液的组成：
三羟甲基氨基甲烷(Tris)6.057g(50mmol)
NaCl                 5.844g(100mmol)
加水至                11
37℃下，用HCl(10mmol.l-1)将溶液的pH调至7.4。
2.TNP缓冲液
将聚乙二醇6000溶解在TN缓冲液中以产生3g.l-1的浓度。
3.S-2238溶液
将一小瓶S-2238(25mg；Kabi Diagnostica，瑞典)溶解在20mLTN缓冲液中以产生1.25mg/ml(2mmol.l-1)的浓度。
4.凝血酶溶液
将人凝血酶(16000nKat/瓶；Centraal Laboratorium VoorBloedtransfusie，阿姆斯特丹，荷兰)溶解在TNP中以产生835nKat/mL的贮液。
在使用前立即将该溶液用TNP稀释以产生3.34nKat/mL的浓度。
*-使用的所有成分为分析级
-对于水溶液，使用超纯水(Milli-Q级)。试验和参考化合物溶液的制备
将试验化合物和参考化合物溶解在Milli-Q水中以产生10-2mol.l-1的贮液浓度。将各种浓度逐步用赋形剂稀释以产生10-3、10-4m和10-5mol/l的浓度。稀释液，包括贮液被用于分析中(反应混合物的最终浓度：分别为3×10-3；10-3；3×10-4；10-4；3×10-5；10-5；3×10-6和10-6mol/l)。方法
室温下，将0.075ml和0.025ml试验化合物或参考化合物溶液或赋形剂轮流地移至微量滴定平板的各孔中，将这些溶液分别用0.115ml和0.0165ml TNP缓冲液稀释。将0.030ml S-2238溶液的等分试样加入至各孔中，将平板预加热并在37℃培养箱(Amersham)中摇荡预保温10分钟。预保温后，通过向各孔加入0.030ml凝血酶溶液启动S-2238的水解。37℃下，将平板保温(摇荡30秒)。保温开始1分钟后，在90分钟期间，在405nm处每2分钟使用动态微量平板计数器(Twinreader plus，FlowLaboratories)测定各种样品的吸光率。
使用LOTUS-MEASURE将所有数据收集在IBM个人计算机中。对于各化合物的浓度(以mol/l反应混合物表示)和对于空白，将吸光率对以分计的反应时间作图。反应的评价：对于各种最终浓度，从分析图中计算最大吸光率。根据Hafner等(Arzneim-Forsch/药物研究1997；27(II)：1871-3)使用对数转换分析计算IG50值(导致空白的最大吸光率的50％抑制的最终浓度，以μmol/l表示)。
本发明化合物的IC50值示于下表中。抗凝血酶活性：
实施例                          IC50(μmol/l)
  4                                 0.09
  24                                0.01
  38                                0.11
  40                                0.02II.抗因子Xa分析
活化的因子X(Xa)为凝固级联作用中的一种因子。本发明化合物的抗凝血酶活性通过分光光度法测定由Xa产生的发色底物s-2222水解的速率来分析。用于缓冲体系中抗凝血酶活性的此分析法被用来评价试验化合物的IC50值。
一般，下面的方法和试验条件类似于如上面描述的抗凝血酶分析。不同之处示于下面。参考化合物：苄脒
TNP缓冲液
可用在最终反应混合物中在浓度高达1％(对于DMSO)和2.5％(对于其它溶剂)而不具有副作用的二甲亚砜、甲醇、乙醇、乙睛或叔丁基醇帮助溶解。方法试剂*
3.S-2222溶液
将一小瓶S-2238(15mg；Kabi Diagnostica，瑞典)溶解在10mL水中以产生1.5mg/ml(2mmol.l-1)的浓度。
4.Xa溶液
将牛Xa因子(71nKat/瓶；Kabi Diagnostica)溶解在10mL TNP缓冲液中，接着进一步用30mlTNP缓冲液稀释以产生1.77nKat/mL的贮液。稀释液必须新制备。方法
替代S-2238溶液(在抗凝血酶分析中)，将上面S-2222加入至该分析的各孔中。抗因子Xa活性
实施例                    IC50(μmol/l)
  1                           0.64
  5                           0.28
  28                          0.02III.抗因子VIIa/组织因子分析
血管损伤启动一系列最终导致损伤部位纤维蛋白胶形成的产酶反应。主要的产酶反应是由酶原因子VII产生活化的因子VII(VIIa)。该活化反应通过目前仍不清楚的机理进行。一种假设是存在于血浆中的少量因子Xa与正常情况下不与血液接触，但由于损伤则暴露于它的膜结合蛋白组织因子(TF)结合，和该膜结合TF与因子Xa的复合物活化因子VII(参考文献1)。接着活化的因子VII也与膜结合TF结合，该内在的tenase复合物接着将因子X转化为因子Xa。
当对凝固反应的控制不足时发生血栓形成。恢复这种控制的一种方法是通过抑制必需的凝固酶，如膜结合TF与因子VIIa的复合物。由于VIIa或VIIa/TF复合物的抑制很可能也抑制tenase复合物，后一复合物的抑制剂也可通过确定试验化合物对VIIa或VIIa/TF的抑制来发现。描述了借以确定化合物对VIIa/TF复合物的抑制能力的方法。以各种浓度将试验化合物与因子VIIa和TF和发色底物混合，其中该底物被已知通过TF结合VIIa断裂远远比通过游离VIIa容易。在微量平板计数器中连续监测进行的酰胺水解反应。通过IC50表示所研究化合物的抑制能力，其中IC50定义为在反应开始后90分钟产生酰胺水解反应50％抑制的化合物的浓度。试剂：Hepes缓冲液
通过将29.40g CaCl2.2H2O，47.66g Hepes，87.66g NaCl和30.00g聚乙二醇(PEG)MW＝6000溶解在1000ml bidest水中来制备10倍浓度的Hepes缓冲液。在将溶液加热至37℃后，在10M NaOH的帮助下将缓冲液的pH调至7.40。4℃下贮存浓缓冲液，在此条件下可稳定至少2个月。使用前以1-8将缓冲液稀释在bidest水中以在各孔中获得20mM CaCl2，20mM Hepes，150mM NaCl和0.3％PEG6000的最终浓度(见试验方法)。由于溶解性不好，如果化合物溶解并稀释在bidest水或其它赋形剂中，可将Hepes缓冲液稀释成1-6以在试验中保持相同的离子强度。重组人因子VIIa
从American Diagnostica，Greenwich，CT.获得重组人因子VIIa。各瓶包含1.2mg重组人因子VIIa，它是从2ml由10mM甘氨酰甘氨酸，50mMNaCl，10mM CaCl2，30mg/ml甘露醇，0.1％Tween组成的缓冲液，pH5.5冷冻干燥而来。如制造商所说明的，将这些瓶中的内含物用2ml bidest水重新配制。将由此获得的2ml 1.2*10-5贮液分成较小的部分，贮存于-30℃。在此条件下，这些VIIa样品稳定至少6个月。重组人组织因子
从American Diagnostica Inc，Greenwich，CT.获得重组人组织因子。各瓶包含25μg重组人组织因子(未脂化；MW35000道尔顿)，它是从1ml由150mM NaCl，200mM甘露醇和10mM CHAPS(用来溶解膜蛋白的类固醇衍生物；参见Merck Index)组成的Tris/HCl缓冲液(pH8.0)冷冻干燥而来。如制造商所说明的，将这些瓶中的内含物用1ml bidest水重新配制。将由此获得的1ml 7.14×10-7贮液分成较小的部分，贮存于-30℃。在此条件下，这些VIIa样品稳定至少67个月。PefachromeVIIa
PefachromeVIIa-CH3SO2-D-Cha-but-Arg-pNa.AcOH(MW670.8)-从Pentapharm Ltd，Basle，瑞典获得。在各瓶中包含10μmol该产色底物。在实验时，将瓶中的内容物溶解在8.33ml bidest水中，产生1.2mMPefachromeVIIa溶液。将溶液的剩余部分贮存于-30℃，在此条件下其稳定至少6个月。重组TF/重组VIIa溶液
实验时，将深度冷冻的1.2*10-5M重组VIIa样品和深度冷冻的7.14*10-7的重组人组织因子样品解冻。将解冻的7.14*10-7重组人TF溶液稀释至4*10-7M，将30μl该溶液与1μl 1.2*10-5解冻的重组VIIa溶液和449μl Hepes缓冲液混合，产生包含25nM重组VIIa和25nM重组TF的Hepes缓冲液溶液。480μl TF/VIIa溶液的量足以检测一种试验化合物的八种溶液的抑制。需要N倍的该量来确定N个试验化合物的IC50。试验化合物的准备
将试验化合物溶解于Hepes缓冲液中以产生5*10-3贮液(A)。通过用含因子III的Hepes缓冲液稀释各种上述溶液从该溶液制备七种具有1.67*10-3M(B)，5.56*10-4M(C)，1.85*10-4(D)，6.17*10-5M(E)，2.06*10-5M(F)，6.86*10-6M(G)和2.29*10-6M(H)浓度的另外的溶液。对于参考化合物Org34593和对各N-1试验化合物制备这样一系列的溶液。如果认为更方便，可制备其它不同化合物浓度的溶液系列。方法
在微量滴定平板中逐列分配化合物，为未抑制的反应留出8个孔的一个列。使用8道移液管将100μl Hepes缓冲液加至所有(N+1)*8个孔中。这里N为不同试验化合物的数目，包括参考化合物Org34593。此后，使用8道移液管将50μl 1.2mM pefachromeVIIa溶液加至试验化合物和空白反应的所有(N+1)*8孔中的100μl Hepes缓冲液中。
接着，将50μl第一、二、三至第N化合物的八种溶液的每一种以递减的浓度顺序分别与1，2，3至N列的第一(A)至第八孔(H)的内容物混合，以获得每列一个化合物具有从高至低的递减顺序的化合物浓度的分布。最后将50μl Hepes缓冲液加至为空白系列留出的第N+1列的8个孔中。
在准备好整个平板后，在微量滴定平板摇床/保温箱(Amersham)中将其摇荡1分钟，通过在相同设备中保温平板将溶液升至37℃。
通过使用八道移液管将50μl在37℃下预热的25nM VIIa/25nM TF溶液加入至各(N+1)*8孔中启动反应。将平板摇荡30秒后，将其放置在恒温微量滴定平板计数器中，在90分钟期间以1分钟的间隔读取各孔的405nm吸光率。在与动态计数器相连的PC上的LOTUS1.2.3中收集吸光率。评价：
通过减去反应启动后1分钟测定的相应的第一吸光率值，将在90分钟测定的最终吸光率对试验开始时的空白吸光率进行校正。通过计算各种浓度[I]的试验化合物的+log((Abs[I]/Abs[O])-1)将存在(Abs[I])和不存在(Abs[O])试验化合物下校正的最终吸光率转换成对数值。将这些对数值对试验化合物浓度的-log作图。该对数图通常显示最终吸光率的20％到80％抑制之间的线性关系。
pIC50被定义为其对数值等于0的试验化合物(浓度，M)的-log。该值通过分对数与-log[I]优选在分对数0值附近的相互关系的线性回归来计算。当试验化合物对VIIa/TF具有活性致使pIC50必须通过外推替代内推来计算时，最好制备另外系列的该试验化合物并再进行分析。Hafner等(参考文献2)描述了这种计算pIC50的方法。相应的IC50以10-pIC50计算并以M表示。需要的量：
需要约1mg以评价试验化合物的IC50。参考化合物：
作为参考化合物，可使用Org 34593(PPACK)。对于该化合物已确定IC50为3*10-7M。参考文献：
(1)组织因子的表达和功能的结构生物学：Edgington，T.S.等于“血栓形成和瘀血”66(1)，67-79(1991)。
(2)浓度反应关系的数学分析：Hafner，D.等于“Arzneim.Forsch./药物研究”27，1871-1873(1977)。
作为对本发明化合物的抗因子VIIa/组织因子活性的单点测定，在1×10-5M浓度时的抑制百分数示于下表中。对于百分率的确定，遵循上面描述的方法。抗因子VIIa/组织因子活性(在1×10-5M浓度时的抑制百分数)：
   实施例                   抑制百分数(％)44)EtSO2-D-Phe-Leu-                  98LysΨ[COCO]-O-异丙基44)EtSO2-Asn-Leu-LysΨ[COCO]-        56O-异丙基44)EtSO2-D-3-Tiq-Phe-                91LysΨ[COCO]-O-异丙基44)EtSO2-D-Leu-Gln-                  94LysΨ[COCO]-O-异丙基

Claims (10)

1.式I的化合物
R1SO2-B-X-Z-C(O)-Y       (I)其中R1为R2OOC-(CHR2)m-或R2NH-CO-(CHR2)m-或选自(1-12C)烷基、(2-12C)链烯基，这些基团可任选被(3-12C)环烷基、(1-6C)烷氧基、OH、COOR2、CF3或卤素取代，和选自(6-14C)芳基、(7-15C)芳烷基和(8-16)芳烯基，其中芳基基团可任选被(1-6C)烷基、(3-8C)环烷基、(1-6C)烷氧基、OH、COOH、CF3或卤素取代，m为1，2或3；各R2基团独立地为H、(1-12C)烷基、(3-8C)芳烷基、(6-14C)芳基或(7-15C)环烷基，其中芳基基团可任选被(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基或卤素取代；B为一个键，式-NH-CH[(CH2)pC(O)OH]-C(O)-的氨基酸或其酯衍生物，其中p为1，2或3，Gly、D-1-Piq、D-3-Piq、D-1-Tiq、D-3-Tiq、D-Atc、Aic或具有疏水性、碱性或中性侧链的L-或D-氨基酸；X为具有疏水性侧链的氨基酸、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、任选包含选自N、O或S的其它杂原子的环状氨基酸，并任选被(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基、苄氧基或氧代取代，或X为2-氨基异丁酸、-NR2-CH2-C(O)-或片段
Figure A9880474100021
其中n为2，3或4，W为CH或N，R3为H、(1-6C)烷基或苯基，这些基团任选被羟基、(1-6C)烷氧基、COOH、COO(1-6C)烷基、CONH2或卤素取代；Z为赖氨酸或4-氨基环己基甘氨酸；Y为-NH-(1-6C)亚烷基-C6H5，其中苯基可被(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基或卤素取代，或Y为-OR4或-NR5R6，其中R4为H、(2-6C)烷基或苯基，R5和R6独立地为H、(1-6C)烷氧基或任选被卤素取代的(1-6C)烷基，或R5与R6一起为(3-6C)亚烷基或R5与R6与和它们相连的N原子一起形成其中V为O、S或SO2；或其前药或其药物可接受的盐。
2.权利要求1的化合物，其中Z为赖氨酸。
3.权利要求1或2的化合物，其中X为环状氨基酸、具有疏水性侧链的氨基酸、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、-NR2-CH2-C(O)-或片段其中R3为H、(1-6C)烷基或苯基。
4.权利要求1-3任一项的化合物，其中X为脯氨酸、亮氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、苯丙氨酸、-NR2-CH2-C(O)-，其中R2为甲基、环戊基或环己基，或X为片段其中R3为H或甲基。
5.权利要求1-4任一项的化合物，其中B为一个键或具有疏水性或中性侧链的D-氨基酸。
6.权利要求1-5任一项的化合物，其中R1为(1-6C)烷基或苄基。
7.权利要求1-6任一项的化合物，其中Y为-OCH(CH3)2。
8.包含权利要求1-7任一项的化合物和药物适宜辅助剂的药物组合物。
9.权利要求1-7任一项的化合物用于治疗。
10.权利要求1-7任一项的化合物在制备用于治疗或预防凝血酶相关疾病的药物中的用途。
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