CN1245398C - 黄芩素的提取工艺、药用组合物及制剂制备工艺 - Google Patents

Abstract

本发明涉及高纯度的黄芩素、其药物组合物、制备方法和医药用途，该高纯度的黄芩素按重量百分比计算含黄芩素为90%以上，另有汉黄芩素、千层纸素和白杨素等化合物；本发明的黄芩素及其药物组合物临床上用于治疗各种病毒感染的疾病，如肝炎、病毒性感冒、病毒感染引起的急性呼吸道综合症等。

Description

黄芩素的提取工艺、药用组合物及制剂制备工艺

                             技术领域

本发明涉及中药有效部位、药物组合物以及制备方法和用途，具体地说，本发明涉及高纯度的黄芩素、药物组合物以及提取工艺和医药用途。

                             背景技术

黄芩是一种相当古老的中药，在我国已使用了上千年，安全无害，早在《神农本草经》中就被列为中品。其中以根入药的黄芩有滇黄芩、粘毛黄芩、甘肃黄芩、丽江黄芩、川黄芩、大黄芩等。临床上黄芩具有清热、泻火、解毒、止血、安胎等功效，其主要作用是抗氧化、清除自由基、抗炎、抗肿瘤、阻止钙离子通道、抑制醛糖还原酶、抗病毒、抗过敏等并对免疫、心脑血管、消化、神经等系统均有保护作用。

黄芩化学成分的研究由来已久，国内外学者对其化学成分和药理作用进行了系统的研究，从中分离得到的黄酮类化合物有黄芩苷(baicalin)、汉黄芩苷(wogonside)、黄芩素(baicalein)、汉黄芩素(wogonin)、千层纸素A(oroxylinA)、黄芩黄酮I(skullcapflavone I)、以及黄芩黄酮II(skullcapflavone II)等，其根中主要含黄芩苷、黄芩苷元、汉黄芩苷元等多种黄酮类成分(宋万志 药用黄芩的资源学研究。药学学报1981，16(2)：139～145)。

黄芩中的黄酮类成分具有较强的药理活性。黄芩素(也称黄芩苷元，baicalein)被确证具有抑菌、利尿、抗炎抗变态活性，黄芩素除具有抑菌、利尿、解痉作用外，并证明具有较强的抗癌作用等(曾广方 天然黄酮类最近研究进展 上海中国科学院药物所，1963)。

黄芩素(baicalein)亦称为黄芩苷元，为黄芩苷经水解失去一分子葡萄糖醛酸的产物。该化合物与某些文献上习称的黄芩素不同，后者往往指未经水解的黄酮苷类化合物，现称黄芩苷(baicalin)。

                             发明内容

本发明的目的之一是提供一种高纯度的黄芩素。本发明的高纯度的黄芩素，具有5，6，7-三羟基黄酮结构的黄酮类化合物，其中黄芩素的含量按重量百分比计算为90％以上，还含有含量按重量百分比计算低于10％的汉黄芩素、干层纸素和白杨素化合物。

本发明的目的之二是提供一种制备上述的高纯度的黄芩素的方法。

本发明的目的之三是提供上述的高纯度的黄芩素和药学上可以接受的药物载体混合形成药物组合物，可用于临床治疗各种病毒感染的疾病。

本发明的目的之四是提供上述的高纯度的黄芩素以及其药物组合物的医药用途。

为实现上述的发明目的，本发明通过采用下述的技术方案。

一种高纯度的黄芩素，具有5，6，7-三羟基黄酮结构的黄酮类化合物，其中黄芩素的含量按重量百分比计算为90％以上，还含有含量按重量百分比计算低于10％的汉黄芩素、千层纸素和白杨素化合物。

一种药物组合物，由上述所述的黄芩素与药学上可以接受的药物载体混合形成组合物；优选该药物组合物为片剂、胶囊剂、软胶囊、喷雾剂、凝胶剂、凝胶吸入剂、口服剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、脂质体注射剂、靶向给药注射剂、栓剂、缓释制剂或控释制剂；所述的片剂或胶囊剂优选为所述黄芩素与填充剂或崩解剂组配的常规片剂或胶囊剂；所述的缓释制剂优选为所述的黄芩素与填充剂和羟丙甲纤维素K4M组配的缓释片剂或缓释胶囊剂；所述的软胶囊优选为所述的黄芩素分散于油相中得到的软胶囊；所述的软膏优选是以所述黄芩素的微粉制备得到的。所述的注射剂优选为所述黄芩素与增溶剂或助溶剂形成的注射剂或混悬型注射液；所述冻干注射剂优选为所述黄芩素与亚硫酸钠形成的冻干注射用粉针。

上述的填充剂优选为乳糖、微晶纤维素、糊精、淀粉或磷酸钙；崩解剂优选为羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮或交联羧甲基纤维素钠；可选加粘合剂、润湿剂及润滑剂。

其中，所述的片剂或胶囊剂按下述配方组成：所述的黄芩素∶乳糖或微晶纤维素∶羟丙纤维素或羧甲基淀粉钠，按重量比计算为1∶0.5～2.5∶0.1～1.0，优选为1∶1.0～2.0∶0.4～0.6；或者为所述的黄芩素∶乳糖或微晶纤维素∶羟丙甲纤维素K4M，按重量比计算为1∶0.1～0.7∶0.15～0.8，优选为1∶0.2～0.5∶0.4～0.8。

其中，所述的软胶囊，所用油相优选为大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油或橄榄油；亦可加增溶剂或潜溶剂或抗氧剂。

其中，所述注射剂，所用增溶剂优选为聚氧乙烯醚蓖麻油、吐温或普流罗尼F-68；所用助溶剂优选为亚硫酸钠、尿素、烟酰胺、脯氨酸、葡萄糖、枸橼酸或其钠盐。

其中，所述混悬型注射液，优选实施方案是将所述黄芩素的微粉和聚山梨酯80混研后，溶解到含磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、尼泊金酯和羧甲基纤维素钠的水溶液，经研磨而制得。

上述所述的高纯度的黄芩素，是通过下述的方法制备得到：黄芩药材用水润湿后于20～30℃保温12～24小时，用溶剂1回流提取，提取液浓缩后用70～100％的乙醇回流，使大部分提取物溶解，滤取不溶的黄色固体物，所得到的黄色固体物经溶剂2重结晶即得到黄芩素，其中的溶剂1为乙醇、乙酸乙酯、丙酮或其组合，溶剂2为丙酮、氯仿、丙酮与乙醇的混合液、氯仿与乙醇的混合液或氯仿与丙酮的混合液。

本发明的药用组合物制剂可以制成各种制剂形式，包括片剂、胶囊剂、软胶囊、喷雾剂、凝胶剂、凝胶吸入剂、口服剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、脂质体注射剂，靶向给药注射剂、栓剂、缓释制剂、控释制剂。优选的是片剂、胶囊剂、缓释片剂和胶囊剂、软胶囊、注射剂、冻干注射剂、混悬注射剂、软膏。

本发明的药物组合物特征在于：可以是黄芩素与填充剂、崩解剂组配的常规片剂或胶囊剂；或者是黄芩素与填充剂和羟丙甲纤维素K4M组配的缓释片剂或胶囊剂；其中填充剂可选用乳糖、微晶纤维素、糊精、淀粉、磷酸钙等；崩解剂可选用羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠等；亦可选加粘合剂、润湿剂及润滑剂。

本发明的药物组合物制备片剂或胶囊剂配方组成为：按重量比，黄芩素1∶乳糖或微晶纤维素0.5～2.5∶羟丙纤维素或羧甲基淀粉钠0.1～1.0；或者，黄芩素1∶乳糖或微晶纤维素0.1～0.7∶羟丙甲纤维素K4M 0.15～0.8。

优选的配方为：按重量比，黄芩素1∶乳糖或微晶纤维素1.0～2.0∶羟丙纤维素或羧甲基淀粉钠0.4～0.6；或者，黄芩素1∶乳糖或微晶纤维素0.2～0.5∶羟丙甲纤维素K4M 0.4～0.8。

上述辅料还可选用，崩解剂如：羟丙基淀粉、羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、羧甲基纤维素钙、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠等；填充剂如：乳糖、蔗糖、甘露醇、微晶纤维素、糊精、淀粉、磷酸钙、磷酸氢钙、硫酸钙、碳酸钙、环糊精、微粉纤维素等；润湿剂和粘合剂如：预胶化淀粉、聚维酮、羧甲基纤维素钠、羟丙甲纤维素；润滑剂如：滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、微粉硅胶、氢化植物油、聚乙二醇4000和6000；润湿剂如：十二烷基硫酸钠、吐温80；骨架材料如：羟丙甲纤维素、乙基纤维素等。

本发明所述的药物组合物软胶囊，其特征在于：将黄芩素分散与油相中制得。其中油相可以是大豆油、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄榄油等；亦可加增溶剂或潜溶剂及抗氧剂等。

本发明的软胶囊还可选用如下辅料：溶剂如：聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄榄油等；增溶剂或潜溶剂如：吐温80、聚氧乙烯醚蓖麻油、苯甲酸苄酯、乳酸乙酯等；抗氧剂如：没食子酸丙酯、特丁基苯酚(BHT)、维生素E等。胶壳中明胶、甘油与水的比例可适当调节，如明胶/甘油/水三者的比例在1∶0.3～0.4∶0.7～1.4为宜，胶壳中还可添加其他成分，如防腐剂：对羟基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯等；增塑剂如山梨醇等；稳定剂如阿拉伯胶等；遮光剂如：二氧化钛、硫酸钡、沉降碳酸钙等。

本发明所述的药物组合物注射剂特征在于：将黄芩素与增溶剂或助溶剂形成的可注射溶液。增溶剂可选用聚氧乙烯醚蓖麻油、吐温、普流罗尼F-68、聚维酮、聚乙二醇等；助溶剂可选用亚硫酸钠、磷酸二氢钾、尿素、烟酰胺、脯氨酸，葡萄糖、枸橼酸及其钠盐等。

本发明还可以将黄芩素与亚硫酸钠形成注射用冻干粉针。

本发明所述的药物组合物混悬型注射液，其特征在于：将黄芩素微粉和聚山梨酯80混研后，溶解到含磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、尼泊金酯和羧甲基纤维素钠的水溶液，经研磨制得。

本发明的注射剂还可选用如下辅料：增溶剂如：吐温类、普流罗尼F-68、聚乙二醇、聚氧乙烯醚蓖麻油、聚维酮等；助溶剂如：亚硫酸氢钠、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸二氢钾、磷酸二氢铵等；酰胺类化合物如尿素、乙酰胺、硫脲、苯甲酰胺等，氨基酸类如精氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸、蛋氨酸、组氨酸、谷氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸，含羟基或羧基的化合物如蔗糖、葡萄糖、果糖、木糖、甘露糖、枸橼酸及其钠盐、乳酸、水杨酸钠等；助悬剂如：羧甲基纤维素钠、聚维酮、羟丙甲基纤维素等；防腐剂如：尼泊金甲、乙、丙和丁酯；pH调节剂如：枸橼酸及枸橼酸盐、磷酸盐等；抗氧剂如：维生素C、半胱氨酸盐酸盐等；溶剂如：注射用水、注射用乙醇、丙二醇等。

本发明所述的药物组合物软膏，其特征在于：以黄芩素微粉制备软膏。

本发明的药用组合物优选口服剂型每片或每粒含有黄芩素40-120mg，注射剂每支含有20mg。

本发明式(I)药用组合物的施用量可根据用药途径、患者年龄、体重、体表面积、所治疗的疾病的类型和严重程度等变化，其日剂量可以是40-720mg，优选40-240mg。可以一次或多次施用。

本发明的上述所述的高纯度黄芩素和所述的药物组合物，可以用于各种病毒感染疾病，优选在制备治疗肝炎、病毒性感冒、病毒感染引起的急性呼吸道综合征等的药物中应用。

                           具体实施方式

为更好的理解本发明，下面通过具体的实施例进一步阐述本发明，但不应被理解为对本发明有任何的限制。

实施例1

取黄芩药材20kg粉碎成粗粉，加水润湿，并于20～30℃保温过夜，用乙醇回流提取三次。减压回收乙醇至无乙醇蒸出，残余物加入85％的乙醇，加热使大部分溶解，过滤，取不溶物(为黄色固体)，用丙酮重结晶，过滤，得黄芩素约200g，经纯度检查，主要为黄芩素(含量大于90％)，还含有少量汉黄芩素、千层纸素和白杨素化合物(含量小于10％)。

实施例2

取黄芩药材20kg粉碎成粗粉，加水润湿，并于20～30℃保温过夜，用乙酸乙酯回流提取三次。减压回收至无乙酸乙酯蒸出，残余物加入75％的乙醇，加热使大部分溶解，过滤，取不溶物(为黄色固体)，用氯仿重结晶，过滤，得黄芩素约200g，经纯度检查，主要为黄芩素(含量大于90％)，还含有少量汉黄芩素、千层纸素和白杨素化合物(含量小于10％)。

实施例3

黄芩素胶囊剂的制备

处方：黄芩素            40mg

      乳糖              80mg

      羟丙纤维素        20mg

      聚山梨酯80        16mg

      3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量

      滑石粉            2.5mg

将黄芩素、乳糖，羟丙纤维素过60目筛混均，加入适量的聚山梨酯80，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀。按处方量灌装1号胶囊，每粒含黄芩素40mg。用法：每天三次，每次二粒。

实施例4

黄芩素片剂的制备

处方：黄芩素                       40mg

      乳糖                         80mg

      羟丙纤维素                   20mg

      聚山梨酯80                   16mg

      3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液  适量

      滑石粉                       2.5mg

将黄芩素、乳糖、羟丙纤维素过60目筛混均，加入适量的聚山梨酯80，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀，压片，每片含黄芩素40mg。用法：每天三次，每次二片。

实施例5

黄芩素缓释胶囊剂的制备

处方：黄芩素                         120mg

      聚维酮                         60mg

      微晶纤维素                     40mg

      羟丙甲纤维素E15                20mg

      羟丙甲纤维素K4M                80mg

      3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液    适量

      滑石粉                         4mg

将黄芩素和聚维酮溶于乙醇中，减压蒸发除去乙醇，所得固体放置在真空干燥器中过夜以除尽乙醇。将上述固体与微晶纤维素、羟丙甲纤维素E15、羟丙甲纤维素K4M过60目筛混均，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀。按处方量灌装胶囊，每粒含黄芩素120mg。用法：每天二次，每次一粒。

实施例6

黄芩素缓释片剂的制备

处方：黄芩素                           120mg

      聚维酮                           60mg

      乳糖                             40mg

      羟丙甲纤维素E15                  20mg

      羟丙甲纤维素K4M                  80mg

      3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液      适量

      滑石粉                           4mg

将将黄芩素和聚维酮溶于乙醇中，减压蒸发除去乙醇，所得固体放置在真空干燥器中过夜以除尽乙醇。将上述固体与乳糖、羟丙甲纤维素E15、羟丙甲纤维素K4M过60目筛混均，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀，压片，每粒含黄芩素120mg。用法：每天二次，每次一片。

实施例7

黄芩素软胶囊

处方：内容物    每粒含      胶壳

      黄芩素    40mg        明胶    46.00％

      PEG400    0.5ml       甘油    17.82％

                            水      36.18％

取黄芩素溶于PEG400中，将此溶液制成软胶囊。每粒含黄芩素40mg。

实施例8

黄芩素注射剂

处方：黄芩素              20mg

      聚氧乙烯醚蓖麻油    1.0mg

      注射用水加至        5.0mL

将黄芩素溶于无水乙醇，加入聚氧乙烯醚蓖麻油(CremophorELP)，混匀，减压蒸发除去乙醇，加入适量注射用水混匀成澄清透明溶液，经0.22μm微孔滤膜过滤，分装封口，于100℃流通蒸汽灭菌30分钟即得，每支含黄芩素20mg。

实施例9

黄芩素注射剂

处方：黄芩素            2.0g

      亚硫酸钠          4.0g

      聚维酮            10.0g

      乙醇              50mL

      注射用水加至      1000mL

将黄芩素分散在乙醇中，亚硫酸钠溶于水中，在超声或搅拌条件下将亚硫酸钠溶液逐渐加入黄芩素中，使成澄清透明溶液；加聚维酮，搅拌使溶解，补加注射用水至足量；经0.22μm微孔滤膜过滤，分装封口，于100℃流通蒸汽灭菌30分钟即得，每支含黄芩素20mg。

实施例10

注射用黄芩素(粉针剂)

处方：黄芩素            20mg

      亚硫酸钠          40mg

      聚维酮            50mg

      甘露醇            100mg

将黄芩素分散在15％乙醇中，将亚硫酸钠加入，超声使溶解，加入聚维酮和甘露醇，搅拌使溶解；按0.1％加入针用活性炭，搅拌15分钟，经钛砂芯脱炭抽滤到洁净的容器中，补加注射用水至足量，将溶液搅拌5分钟使均匀，再经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液灌装在7ml西林瓶中，每瓶2ml，然后部分地塞上丁基橡胶塞，送至冻干箱内的板层上，插入温度探头，关闭箱门。按冻干曲线冷冻干燥，最后干燥温度为35℃以上并保持2小时。密塞，放气，出箱，轧盖。每支含黄芩素20mg。

实施例11

黄芩素混悬型注射剂

处方：黄芩素              20mg

      羧甲基纤维素钠      10mg

      聚山梨酯80          0.1mg

      尼泊金乙酯          0.5mg

      尼泊金丙酯          0.5mg

      磷酸二氢钾          16.7mg

      磷酸氢二钾          1.7mg

      注射用水加至        2ml

将黄芩素进行气流粉碎，得粒径10μm以下的微粉。将磷酸二氢钾和磷酸氢二钾溶于注射用水中，加入尼泊金乙酯和丙酯，再加入羧甲基纤维素钠，60℃条件下使全部溶解。将微粉化后的黄芩素置于容器中，加聚山梨酯80研成细糊状，将上述溶液逐渐加入，搅拌均匀后，经胶体磨研磨5至10次。按常规测定方法测定含量合格后，分装在安瓿中，于100℃流通蒸汽灭菌30分钟即得，每支含黄芩素20mg。

实施例12

黄芩素软膏

处方：黄芩素                50g

      单硬脂酸甘油酯        120g

      石蜡                  50g

      蜂蜡                  50g

      白凡士林              50g

      液体石蜡              250g

      司盘80                20g

      吐温80                10g

      对羟基苯甲酸乙酯      1g

      蒸馏水加至            1000g

将黄芩素研为极细粉，按乳化法制备O/W型乳膏。

Claims (12)

1、一种高纯度的黄芩素，具有5，6，7-三羟基黄酮结构的黄酮类化合物，其中黄芩素的含量按重量百分比计算为90％以上，还含有含量按重量百分比计算低于10％的汉黄芩素、千层纸素和白杨素化合物。

2、一种药物组合物，其特征在于权利要求1所述的黄芩素与药学上可以接受的药物载体混合形成组合物。

3、权利要求2的药物组合物是片剂、胶囊剂、软胶囊、喷雾剂、凝胶剂、凝胶吸入剂、口服剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、脂质体注射剂、靶向给药注射剂、栓剂、缓释制剂或控释制剂。

4、权利要求3所述的片剂或胶囊剂为所述黄芩素与填充剂或崩解剂组配的常规片剂或胶囊剂；所述的缓释制剂为所述的黄芩素与填充剂和羟丙甲纤维素K4M组配的缓释片剂或缓释胶囊剂；所述的软胶囊为所述的黄芩素分散于油相中得到的软胶囊；所述的软膏是以所述黄芩素的微粉制备得到的；所述的注射剂为所述黄芩素与增溶剂或助溶剂形成的注射剂或混悬型注射液；所述冻干注射剂为所述黄芩素与亚硫酸钠形成的冻干注射用粉针。

5、权利要求4所述的填充剂选自乳糖、微晶纤维素、糊精、淀粉和磷酸钙；所述的崩解剂选自羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮和交联羧甲基纤维素钠。

6、权利要求5所述药物组合物，其中所述的黄芩素∶乳糖或微晶纤维素∶羟丙纤维素或羧甲基淀粉钠，按重量比计算为1∶0.5～2.5∶0.1～1.0。

7、根据权利要求6所述的药物组合物，其中所述的黄芩素∶乳糖或微晶纤维素∶羟丙纤维素或羧甲基淀粉钠，按重量比计算为1∶1.0～2.0∶0.4～0.6。

8、权利要求5所述药物组合物，其中所述的黄芩素∶乳糖或微晶纤维素∶羟丙甲纤维素K4M，按重量比计算为1∶0.1～0.7∶0.15～0.8。

9、根据权利要求8所述药物组合物，其中所述的黄芩素∶乳糖或微晶纤维素∶羟丙甲纤维素K4M，按重量比计算为1∶0.2～0.5∶0.4～0.8。

10、权利要求4所述的软胶囊所用油相选自大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油和橄榄油，亦可加增溶剂或潜溶剂或抗氧剂；所述的注射剂所用增溶剂选自聚氧乙烯醚蓖麻油、吐温和普流罗尼F-68，所用助溶剂选自亚硫酸钠、尿素、烟酰胺、脯氨酸、葡萄糖、枸橼酸及其钠盐；所述的混悬型注射液是将所述黄芩素的微粉和聚山梨酯80混研后，溶解到含磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、尼泊金酯和羧甲基纤维素钠的水溶液，经研磨而制得。

11、一种权利要求1所述黄芩素的提取工艺，黄芩药材用水润湿后于20～30℃保温12～24小时，用溶剂1回流提取，提取液浓缩后用70～100％的乙醇回流，使大部分提取物溶解，滤取不溶的黄色固体物，所得到的黄色固体物经溶剂2重结晶即得到黄芩素，其中的溶剂1为乙醇、乙酸乙酯、丙酮或其组合，溶剂2为丙酮、氯仿、丙酮与乙醇的混合液、氯仿与乙醇的混合液或氯仿与丙酮的混合液。

12、权利要求1-10中任意一项在制备治疗肝炎、病毒性感冒、病毒感染引起的急性呼吸道综合征的药物中应用。