CN1242963C - 一种从杜仲叶中连续提取活性物质的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种以杜仲叶为原料连续提取生物活性物质的方法，包括(一)以水、甲醇或乙醇为提取剂，通过超声振荡提取或加热提取、大孔树脂吸附和乙醇洗脱等工序提取杜仲总甙和杜仲总黄酮的方法；(二)以水、甲醇或乙醇为提取剂，通过大孔树脂分离、乙酸乙酯萃取和混合溶剂重结晶等工序提取绿原酸和杜仲总黄酮的方法以及(三)以酸性水溶液为提取剂，通过大孔树脂分离、活性碳脱色和乙醇沉淀等工序从提取过其它活性成份后的杜仲叶渣中提取杜仲酸性多糖的方法。本发明的工艺过程简单、成本低、产品收率高、提高了杜仲叶中具有保健和医疗活性成份的综合利用率，增加了杜仲叶的经济价值。
Description
技术领域
本发明内容属于生化物品制备技术领域，涉及一种从杜仲叶中连续提取生物活性物质的方法。
背景技术
杜仲(Eucommia ulmoides)是分布于我国西部至中部的一种名贵的药材，中医学上历来以其树皮入药。在杜仲中含有较丰富的杜仲总甙、杜仲总黄酮、绿原酸、杜仲酸性多糖等活性物质成份，其中的杜仲总甙是具有综合生物活性的高度浓缩物，可做为医药、保健品、饮料及疗效性功能化妆品、饲料抗生素的添加剂，杜仲总黄酮、绿原酸及杜仲酸性多糖均是保健品、食品和药品的重要原料，临床上具有抗菌、消炎、抗感冒、降血压、抗肿瘤及抗艾滋病毒等功效。目前本领域还没有杜仲总甙、杜仲总黄酮及杜仲酸性多糖提取的先例，对杜仲所含绿原酸成份的提取方法也并非是连续提取生物活性物质的方法，且还存在着工艺复杂、生产周期长、原料利用率低、加工成本高及产品得率低等问题。
发明内容
本发明的目的在于针对本领域已有技术所存在的问题而提供一种从杜仲叶中连续提取活性物质的方法。
本发明所述的提取方法是一种以杜仲叶为原料、通过一次投料而连续提取杜仲总甙、杜仲总黄酮、绿原酸及杜仲酸性多糖的方法，其提取路线包括杜仲总甙——杜仲总黄酮——杜仲酸性多糖的提取路线和绿原酸——杜仲总黄酮——杜仲酸性多糖的提取路线。
所述的杜仲总甙——杜仲总黄酮——杜仲酸性多糖的提取路线为：将杜仲叶浸泡在提取液中，用提取法提取2～3次；将提取液减压浓缩至提取液体积的1/5～1/10后，调提取液的pH值为1～4，用大孔树脂柱吸附浓缩液；然后用水洗去吸附浓缩液中的糖分和色素后，用5％～50％的低浓度乙醇洗脱杜仲总甙，洗脱液脱除溶剂，得杜仲总甙固体；再将洗脱完杜仲总甙的溶液用55％～95％高浓度乙醇洗脱杜仲总黄酮，洗脱液脱除溶剂，得杜仲总黄酮固体；将提取了杜仲总甙、杜仲总黄酮后的杜仲叶渣用碱性溶液调成pH值为8～12的溶液，于60～90℃提取，用大孔树脂柱吸附浓缩液；水洗浓缩液至洗脱液中加入95％乙醇无沉淀止，洗脱液经活性炭脱色，浓缩脱色后的溶液至其略带乳白色后，在溶液中加入95％乙醇，使溶液含醇量达到80％～90％，分离出沉淀，干燥沉淀物，得杜仲酸性多糖固化物颗粒。
所述的绿原酸——杜仲总黄酮——杜仲酸性多糖的提取路线为：将杜仲叶浸泡在提取液中，用提取法提取2～3次；将提取液减压浓缩至提取液体积的1/5～1/10后，调提取液的pH值为1～4，用大孔树脂柱吸附浓缩液；然后用洗脱剂洗脱吸附浓缩液中绿原酸，洗脱液用乙酸乙酯反复萃取，萃取液脱除溶剂，得绿原酸粗品，使用混合溶剂重结晶，得绿原酸纯品；再将洗脱完绿原酸的大孔树脂继续用55％～95％高浓度乙醇洗脱杜仲总黄酮，洗脱液脱除溶剂，得杜仲总黄酮固体；将提取了绿原酸和杜仲总黄酮后的杜仲叶渣用碱性溶液调成pH值为8～12的溶液，于60～90℃提取，用大孔树脂柱吸附浓缩液；水洗浓缩液至洗脱液中加入95％乙醇无沉淀止，洗脱液经活性炭脱色，浓缩脱色后的溶液至其略带乳白色后，在溶液中加入95％乙醇，使溶液含醇量达到80～90％，分离出沉淀，干燥沉淀物，得杜仲酸性多糖固化物颗粒。
与现有的同类技术相比，本发明以杜仲叶为原料连续提取生物活性物质，提高了原料中具有保健和医疗活性成份的综合利用率，增加了杜仲叶的经济价值。就活性物质的提取工艺而言：本发明所述提取绿原酸方法的工艺简单、成本低，所获绿原酸的纯度高，并且能与杜仲总黄酮连续提取；本发明所述提取杜仲酸性多糖的方法可以用提取过杜仲总甙或绿原酸的杜仲叶渣作原料，既扩大了提取酸性多糖的原料来源，也降低了杜仲酸性多糖的成本，所得酸性多糖产品的颜色淡、纯度高；另外，由于此前本领域还没有杜仲总甙、杜仲总黄酮和杜仲酸性多糖提取的先例，本发明首次实现了工业化规模提取杜仲总甙、杜仲总黄酮和杜仲酸性多糖的工艺方法，该方法能从同一根大孔树脂上更换洗脱剂后依次洗脱出杜仲总甙和杜仲总黄酮，方法简单、投资少、运行的成本低、收率高。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明内容做进一步描述。
一、杜仲总甙与杜仲总黄酮的提取
用水、甲醇(浓度为20％～90％)或乙醇溶液做提取剂，将50kg杜仲叶浸泡其中，在超声振荡器中振荡提取2小时或在60～90℃温度条件下加热回流提取2小时，以同样方法提取3次，将提取液减压浓缩至提取液体积的1/5后，将浓缩液用大孔树脂(如X-5、D101等)吸附，先用水洗去吸附浓缩液中的糖分和色素，再用低浓度(5％～50％)乙醇洗脱完杜仲总甙，之后再用高浓度(55％～90％)乙醇洗脱杜仲总黄酮，洗脱液分别脱除溶剂，得杜仲总甙固体3.5～3.8kg和杜仲总黄酮1.3～1.5kg。杜仲总甙的纯度为30％～80％，杜仲总黄酮的纯度为20％～80％。
二、绿原酸与杜仲总黄酮的提取
以50kg杜仲叶为原料，用水、乙醇或60％甲醇在40～95℃温度范围内提取3次，将提取液减压浓缩至提取液体积的1/5后，调pH值为3，上大孔树脂(如XDA-1、LSA-20等)柱，用35％甲醇或乙醇洗脱绿原酸，洗脱液用乙酸乙酯反复萃取，脱除乙酸乙酯后，得纯度为35～60％的绿原酸粗品0.9～1.1kg，得率为1.5～2.0％；混合溶剂(乙酸乙酯+氯仿)重结晶，获得纯度为96％～99％的绿原酸纯品0.23～0.27kg，得率为0.3％～0.6％；大孔树脂柱继续用高浓度(55％～90％)乙醇洗脱杜仲总黄酮，洗脱液脱除溶剂，得纯度为20％～80％的杜仲总黄酮固体0.9～1.8kg，杜仲总黄酮得率为2.0％～3.0％。
三、杜仲酸性多糖的提取
将提取过杜仲总甙、杜仲总黄酮和绿原酸后的杜仲叶渣以氨、氢氧化钠、碳酸钠等碱性水溶液调pH值为11，于60～95℃温度范围内提取，提取液上大孔树脂(如D4020、D101等)柱，用水洗浓缩液至洗脱液中加入95％乙醇无沉淀止，洗脱液再经活性炭脱色，浓缩脱色后的溶液至其略带乳白色后，加入95％乙醇，使溶液含醇量达到80％～90％，分离出沉淀，干燥沉淀物，得纯度为40％～51％的灰白色杜仲酸性多糖固化物颗粒0.5～0.8kg。
Claims (6)
1、一种从杜仲叶中连续提取活性物质的方法，包括以杜仲叶为原料连续提取杜仲总甙、杜仲总黄酮、绿原酸以及酸性多糖的方法，其特征在于：将杜仲叶浸泡在提取液中，用提取法提取2～3次，所述的提取液为水液或用20％～90％甲醇或乙醇为提取剂的液体；将提取液减压浓缩至提取液体积的1/5～1/10后，调提取液的pH值为1～4，用大孔树脂柱吸附浓缩液；然后
1.1、用水洗去吸附浓缩液中的糖分和色素后，用5％～50％的低浓度乙醇洗脱杜仲总甙，洗脱液脱除溶剂，得杜仲总甙固体；再将洗脱完杜仲总甙的溶液用55％～95％高浓度乙醇洗脱杜仲总黄酮，洗脱液脱除溶剂，得杜仲总黄酮固体；将提取了杜仲总甙、杜仲总黄酮后的杜仲叶渣用碱性溶液调成pH值为8～12的溶液，于60～90℃提取，用大孔树脂柱吸附浓缩液；水洗浓缩液至洗脱液中加入95％乙醇无沉淀止，洗脱液经活性炭脱色，浓缩脱色后的溶液至其略带乳白色后，在溶液中加入95％乙醇，使溶液含醇量达到80％～90％，分离出沉淀，干燥沉淀物，得杜仲酸性多糖固化物颗粒；或
1.2、用洗脱剂洗脱吸附浓缩液中绿原酸，洗脱液用乙酸乙酯反复萃取，萃取液脱除溶剂，得绿原酸粗品，使用混合溶剂重结晶，得绿原酸纯品；再将洗脱完绿原酸的大孔树脂用55％～95％高浓度乙醇洗脱杜仲总黄酮，洗脱液脱除溶剂，得杜仲总黄酮固体；将提取了绿原酸和杜仲总黄酮后的杜仲叶渣用碱性溶液调成pH值为8～12的溶液，于60～90℃提取，用大孔树脂柱吸附浓缩液；水洗浓缩液至洗脱液中加入95％乙醇无沉淀止，洗脱液经活性炭脱色，浓缩脱色后的溶液至其略带乳白色后，在溶液中加入95％乙醇，使溶液之含醇量达到80％～90％，分离出沉淀，干燥沉淀物，得杜仲酸性多糖固化物颗粒。
2、如权利要求1所述的从杜仲叶中连续提取活性物质的方法，其特征在于所说的提取液为用乙醇为提取剂的液体。
3、如权利要求1所述的从杜仲叶中连续提取活性物质的方法，其特征在于所说的提取液为用20％～90％甲醇为提取剂的液体。
4、如权利要求1所述的从杜仲叶中连续提取活性物质的方法，其特征在于所说的提取液为水液。
5、如权利要求1所述的从杜仲叶中连续提取活性物质的方法，其特征在于所说的用于洗脱绿原酸的洗脱剂为乙醇。
6、如权利要求1所述的从杜仲叶中连续提取活性物质的方法，其特征在于所说的用于洗脱绿原酸的洗脱剂为浓度值是35％的甲醇。
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