CN1232259C - 一种口腔局部给药的具有双向免疫调节功能的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及卡介菌多糖核酸在制备口腔局部给药的药物中的新用途，通过口腔局部给药可以达到双向免疫调节，以治疗慢性支气管炎、感冒、哮喘。本发明还提供了有效量的卡介菌多糖核酸加上药学上可接受的辅料制备成口腔局部给药的具有双向免疫调节功能的药物组合物，该组合物具有治疗慢性支气管炎、感冒、哮喘等功能。采用卡介菌多糖核酸的口腔局部用药具有疗效佳，毒性小，副作用少，安全性高，服药方便等优点。

Description

一种口腔局部给药的具有双向免疫调节功能的药物组合物

                       技术领域

本发明涉及一种口腔局部给药的具有双向免疫调节功能的药物组合物，具体地说，是卡介菌多糖核酸为活性成分的口腔局部给药的药物组合物。

                       背景技术

慢性支气管炎、哮喘、变态反应性鼻炎、变态反应性皮肤病均为春季常见多发疾病。临床上抗菌、抗组织胺、激素类药物较多，对这些疾病发作时症状控制已不是难题，但无法控制其反复发作。卡介菌多糖核酸的应用推广，又多了一种可控制这些疾病复发的有效方法。但是，临床上传统应用卡介菌多糖核酸的施药手段是肌肉注射方式，虽然其注射途径疗效是肯定的，但存在以下几个缺点：一是临床上注射途径用药不方便，二是卡介菌多糖核酸临床用药疗程较长，如患者中途放弃治疗，将贻误病情。卡介菌多糖核酸注射液治疗慢性支气管炎、感冒、哮喘，采用肌肉注射给药难以达到直接作用于病灶部位的目的，不能满足局部给药。

                         发明内容

本发明的目的是提供卡介菌多糖核酸的新的给药途径，具体的说，是提供其在制备口腔局部给药的药物中的用途。

本发明的另一目的是提供这种新的药物制剂的制备方法。

本发明的技术方案：

本发明提供卡介菌多糖核酸在制备口腔局部给药的具有双向免疫调节功能的药物的用途。

具体的是卡介菌多糖核酸在制备口腔局部给药的治疗慢性支气管炎、感冒、哮喘的药物中的用途。

同时，本发明还提供有效量的卡介菌多糖核酸加上药学上可接受的辅料制备成口腔局部给药的具有双向免疫调节功能的药物组合物。

进一步的是，有效量的卡介菌多糖核酸加上药学上可接受的辅料制备成口腔局部给药的治疗慢性支气管炎、感冒、哮喘的药物组合物。

所述药物组合物为口腔局部用药的固体制剂或液体制剂，具体的说所述固体制剂是口含片、口腔粘附片或膜剂，更具体地说这种口含片、口腔粘附片或膜剂，含有卡介菌多糖核酸0.5mg～6mg/片，所述的液体制剂是喷雾剂，其中，含卡介菌多糖核酸0.5mg～6mg/揿。

本发明还提供了所述药物组合物的制备方法，包括：a、液体浮膜培养或固体培养制备卡介菌菌体；b、热酚乙醇提取卡介菌多糖核酸；c、在b步骤中制备的有效量卡介菌多糖核酸与药学上可接受的辅料混合，制成口腔局部给药的药物制剂。

卡介菌多糖核酸可通过口腔粘膜吸收而发挥其双向免疫调节功能，一方面通过增强单核——巨噬细胞功能，增强人体血液中T细胞总数，提高NK细胞的活性，提高IgG及C₃含量等机制，增强免疫功能低下患者的免疫功能，故对免疫功能低下所致的疾病如呼吸道反复感染；流感有很好的疗效；另一方面，通过提高TH₁/TH₂的比值稳定肥大细胞膜，产生抗体封闭作用等，对免疫功能过强所致的疾病如哮喘，过敏性鼻炎，过敏性皮炎等也有很好的疗效。除此机理之外，本发明中卡介菌多糖核酸是采用口腔粘膜用药而引发的粘膜免疫反应，产生强的TH₁型细胞免疫应答，从而产生r-干扰素等免疫刺激细胞因子以及激活免疫效应机制，因此，本发明的卡介菌多糖核酸口腔局部给药的制剂主要用于预防和治疗慢性支气管炎、感冒、哮喘等疾病。

卡介菌多糖核酸采用口腔局部用药具有疗效佳，毒性小，副作用少，安全性高，服药方便等优点。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

                       具体实施方式

本发明提供了卡介菌多糖核酸的新的给药途径，同时提供了这种新的药物制剂的制备方法，具体实施方式为：

实施例1  卡介菌多糖核酸口含片制备

a.液体浮膜培养技术及固体培养技术制备卡介菌菌体涉及特定的苏通氏培养基配制处方(1000ml)

MgSO₄                            0.5g

K₂HPO₄                          0.5g

柠檬酸                            2g

味精                              8g

甘油                              60ml

柠檬酸铁铵                        0.05g

1‰硫酸锌                         1ml

方法：加热水溶，氨水调节PH为7.5，0.1Mpa30分钟灭菌。卡介菌菌体培养技术

将保存于苏通马铃薯培养基的卡介菌菌种接种于上述特定的苏通氏培养基，在38±0.5℃条件下培养7天后为S₁菌膜，将S₁菌膜接种于苏通氏培养基内连续培养10-12天即为S_II菌膜，用S_II菌膜再继续接种上述含味精苏通氏培养基21天制备沙膜，收取沙膜用于卡介菌多糖核酸的制备。

b.卡介菌菌体经热酚法提取制备卡介菌多糖核酸粉末

取破碎菌悬液与等量热酚混匀，以静止法或离心沉淀菌体，吸取上清液以透析法或其它适宜方法除酚，加入适量乙醇沉淀多糖核酸，搜集沉淀物。分别以乙醇、乙醚混匀洗涤，离心后干燥即得精制多糖核酸。

c.辅料(乳糖)混合制备湿软材，将湿软材过筛，干燥，制备成空白颗粒。

d.将卡介菌多糖核酸粉末与空白颗粒充分混合，在常温条件下直接压片，每片含卡介菌多糖核酸0.5mg。

通过上述的方法，可制得每片含卡介菌多糖核酸6mg、2mg。

实施例2  卡介菌多糖核酸粘附片制备

步骤a和b同实施例1，c、将辅料、卡介菌多糖核酸分三层：下层用HPC/CP作基质，中层为卡介菌多糖核酸，上层为乳糖，直接压片，每片含卡介菌多糖核酸2mg。

实施例3  卡介菌多糖核酸膜剂制备

步骤a和b同实施例1，c、用聚乙烯作基质，用膜压机直接压片成膜剂，每片含卡介菌多糖核酸6mg。

实施例4  卡介菌多糖核酸喷雾剂

步骤a和b同实施例1，c、用常规的喷雾剂辅料与卡介菌多糖核酸混合，制备成卡介菌多糖核酸喷雾剂，规格：3mg/揿。

以下通过试验来进一步阐述本发明所述药物的有益效果，包括药效试验和毒理试验。

试验例一 本发明药物抗喘作用试验

1、实验材料：

1.1引喘装置：由空气压缩机、气雾喷头(喷出的粒直径约5u)、水银检压计、底座和4L的玻璃钟罩构成喷雾室。

1.2试剂：本发明药物：实施例1制得的卡介菌多糖核酸口含片；卡介菌多糖核酸肌肉注射液(卡舒宁注射液)，由成都生物制品研究所提供，批号20020206；氨茶碱，天津津跃氨基酸有限公司，批号0208191。2％氯化乙酰胆碱和0.1％磷酸组织胺等容积混合液。

1.3豚鼠(体重＜200g)由四川大学实验动物中心提供。豚鼠、小鼠试验中的高、中、低三种试验剂量(卡介菌多糖核酸粉剂含量)均为：2mg/只、1mg/只、0.5mg/只，而人用剂量为：2mg/50Kg(人)，因此，以高剂量组(2mg卡介菌多糖核酸粉剂含量/只)豚鼠(平均体重为200g)试验剂量计算：豚鼠的试验剂量为人用剂量的250倍。而高剂量组(2mg卡介菌多糖核酸粉剂含量/只)小鼠(平均体重为20g)试验剂量计算：小鼠的试验剂量为人用剂量的2500倍。

2、实验方法：

豚鼠(体重180-220g)，分别放入玻璃钟罩中，以400mmHg压力喷入2％氯化乙酰胆碱和0.1％磷酸组织胺等容积混合液15秒钟。喷雾停止后，观察豚鼠的引喘潜伏期(即从喷雾开始到哮喘发作、呼吸极度困难，直至抽搐跌倒的时间)。引喘潜伏期＞120秒者，不予选用。取经测定引喘潜伏期合格的豚鼠，雌雄各半，随机分成对照组和试验组，每组10只。试验组连续口含给药10天，于第10天给药后1小时，按上述方法测豚鼠的引喘潜伏期，并作方差分析。

3、实验结果

实验分组            给药剂量   动物数量       体重             引喘时间(秒)

                    (mg/kg)      (只)         (g)

卡介菌多糖核酸口含片

高剂量组              10         10        204.13±6.95        99.29±30.61^***

中剂量组              5          10        205.45±8.15        76.88±27.12^***

低剂量组              2.5        10        207.04±7.17        62.86±28.70

卡介菌多糖核酸肌注组   2.5        10        204.3±9.22         107.50±17.53

氨茶碱对照组          25         10        207.89±11.23       115.00±14.14

阴性对照组            NS         10        206.34±8.13        43.33±5.0

*p＜0.05，***p＜0.001 NS：生理盐水

结果提示卡介菌多糖核酸口含片给予高、中剂量均可明显延长引喘潜伏期(p＜0.001)，且卡介菌多糖核酸口含片高剂量组与卡介菌多糖核酸肌注组无显著性差异，卡介菌多糖核酸口含片低剂量组无明显效果，与阴性对照组之间比较无显著差异。(p＞0.05)

4、实验结论：

在本实验条件下，本发明药物高、中剂量组有明显延长引喘潜伏期的作用，说明本发明药物具有与肌注有相同的疗效。

试验例二 本发明药物对小鼠迟发性变态反应作用试验

1、实验材料：

药品：本发明药物：实施例1制得的卡介菌多糖核酸口含片；卡介菌多糖核酸肌肉注射液(卡舒宁注射液)，由成都生物制品研究所提供，批号20020206。二硝基氟苯(DNFB)配制成1％的溶液备用。地塞米松，  西南药业公司出品，批号020406。

实验动物：Balb/c小鼠60只(体重20g左右)，雌雄各半，由四川大学实验动物中心提供。一级动物(合格证：川实动质管第97号)

2、实验方法

2.1随机分为阴性对照组，给药组和阳性药物组，卡介菌多糖核酸口含片连续给药15天，卡介菌多糖核酸注射剂隔天一次，给药7天，地塞米松致敏前30分钟给药。

2.2致敏：除抗原攻击的对照组外，每组腹部去毛，范围2×3平方cm大小，并将1％DNFB溶液均匀涂抹上。

2.3攻击并测定结果：

致敏后第5天，将1％DNTB溶液10ul均匀涂抹于小鼠右耳(两面)进行攻击，对照组同样涂耳但未致敏。攻击后24h，颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下直径8mm的耳片，称重。同时取小鼠胸腺及脾脏称重，以左右耳片重量之差为肿胀度，分别以每10g小鼠的脾重(mg)和胸腺重(mg)作为脾指数和胸腺指数，观察各组的差别。

3、实验结果：1)记录每只动物的耳重，(肿胀度)

             2)脾指数，10g小鼠的脾重(mg)

             3)胸腺指数，10g小鼠的胸腺重(mg)

实验分组         给药剂量  动物数量   体重             耳肿胀度              脾指数

                 (mg/kg)    (只)       (g)         (左右耳重量之差值)

卡介菌多糖核酸口含片

高剂量组            100     10      20.10±1.1       Δ0.80±0.42*       0.055±0.005

中剂量组            50      10      20.55±1.17      Δ1.0±0.66*        0.058±0.002

低剂量组            25      10      20.83±0.75      Δ1.78±1.48        0.056±0.003

卡介菌多糖核酸肌注组 25      10      20.23±1.44      Δ0.70±0.82        0.059±0.006

地塞米松对照组      0.1     10      20.50±1.43      Δ0.10±0.74        0.024±0.001

阴性对照组          N.S     10      21.10±1.20      Δ2.10±0.62        0.046±0.007

p＜0.05，***p＜0.001

结果提示卡介菌多糖核酸口含片给予高、中、低剂量均可明显增加脾指数(p＜0.001)。耳肿胀度经统计学处理，显示卡介菌多糖核酸口含片高、中剂量组与阴性对照组有显著差异(p＜0.05)，说明卡介菌多糖核酸口含片高、中剂量有显著降低耳肿胀作用，减轻迟发性变态反应水肿，且口含片高剂量组与肌注组无明显差异(p＞0.05)。有关胸腺指数的测定，在实验中发现，卡介菌多糖核酸口含片各剂量组及卡介菌多糖核酸肌注组的动物胸腺大多数已消失，无法测定其重量，该现象与使用卡介菌多糖核酸口含片后促进小鼠胸腺迅速成熟有关。

4、实验结论：

在本实验条件下，本发明药物高、中剂量组均有明显降低耳肿胀的作用，减轻迟发性变态反应的水肿，促进胸腺成熟的作用，且与肌注组有相同的疗效。

实验例三 本发明药物对小鼠溶血素影响试验

1、实验材料：

(1)药品：本发明药物：实施例1制得的卡介菌多糖核酸口含片；卡介菌多糖核酸肌肉注射液(卡舒宁注射液)，由成都生物制品研究所提供，批号20020206。

(2)绵羊红细胞(SRBC)保存液(Alsever)：葡萄糖2.05g，氯化钠0.428g，柠檬酸钠0.8g，蒸馏水100ml，无菌过滤后备用。

(3)都氏液(测血红蛋白用)：碳酸氢钠1.09，高铁氰化钾0.2g，氰化钾0.05g，蒸馏水1000ml。

(4)补体：新鲜豚鼠3只，混合血清经SRBC(10∶1)于4℃吸收30分钟后置于-20℃以下备用。

(5)羊红细胞(SRBC)的分离：在无菌条件下，自健康成年绵羊颈外静脉取血，置血液于有玻璃珠的三角烧瓶中轻摇10分钟以除去纤维蛋白，加入2倍量的保存液，置4℃冰箱备用。临用时用生理盐水洗涤3次，再稀释为20％SRBC悬液。

(6)实验动物：昆明种小鼠70只(体重18~20g)，雌雄各半，由四川大学动物中心提供，一级动物(合格证：川实动质管第67号)。

2、实验方法：

(1)实验动物分组，按以下方法给药：卡介菌多糖核酸口含片高、中、低三个剂量组，连续10天口含给药，卡介菌多糖核酸注射剂组，隔天一次给药，连续5天，PHA组(植物血凝素组)免疫前半小时给药。

(2)免疫：小鼠腹腔注射20％SRBC 0.2ml/天，免疫后第一天去眼球取血，分离血清，将血清稀释后供测定。

(3)样品的吸光度值测定：反应管内依次加入经稀释的血清1ml，5％SRBC0.5ml，10％补体1ml，置37℃恒温水浴中保温30分钟，然后移至冰浴中终止反应，1500rpm离心5分钟，取上清液1ml加都氏试剂3ml，摇匀放置10分钟，用7230分光光度计(上海分析仪器总厂制造)于540nm波长比色读取吸光度。

(4)SRBC半数溶血时的吸光度值：取5％SRBC 0.25ml加都氏液至4ml，读取吸光度值，即为实验中所用SRBC半数溶血时的吸光度值。

(5)计算：样品管半数溶血值HC₅₀按下式计算：

3、实验结果：

实验分组        给药剂量(mg/kg)  动物数量(只)    体重(g)              小鼠HC50

卡介菌多糖核酸口含片

高剂量组            100           10          20.72±1.82          290.91±101.50^***

中剂量组            50            10          20.50±1.76          287.3±53.67^***

低剂量组            25            10          20.30±1.32          223.10±78.53^***

卡介菌多糖核酸肌注组 25            10          19.80±1.18          320.5±66.99

PHA对照组                         10          19.70±1.30          317.8±71.48

阴性对照组          N.S           10          19.74±0.94          52±25.27

***p＜0.001

4、实验结论：

经方差分析，结果提示本发明药物高、中、低剂量均可明显增加小鼠半数溶血值HC₅₀(p＜0.001)，且高、中剂量组的结果与阳性对照组(卡介菌多糖核酸肌注组与PHA对照组)无明显差异，说明与肌注卡介菌多糖核酸有相同的疗效。

实验例四 本发明药物脱敏作用实验

1、实验材料：

试剂：本发明药物：实施例1制得的卡介菌多糖核酸口含片；卡介菌多糖核酸肌肉注射液(卡舒宁注射液)，由成都生物制品研究所提供，批号20020206。

动物：豚鼠60只，雌雄各半，体重250～300g，由四川大学实验动物中心提供。

2、实验方法：

(1)选合格豚鼠60只随机分成6组，每组10只，分别每只肌注小牛血清0.5mg/ml/只，隔日1次，共3次进行致敏。

(2)各组动物分别按以下方法给药20天(口含片组每天给药，卡舒宁注射隔日1次)：

(3)BSA攻击：卡介菌多糖核酸口含片各剂量组、卡介菌多糖核酸肌注组及阴性对照组1均通过后肢静脉注射小牛血清10mg/ml/只进行攻击，阴性对照组2则通过后肢静脉注射生理盐水1ml/只。

(4)观察并记录各组动物的反应情况，按照以下标准打分：

反应级数                         反应症状

0                                无明显反应

1                                有抓鼻、颤抖或竖毛

2                                有几次咳嗽、抓鼻、颤抖或竖毛

3                                多次或连续咳嗽，伴有呼吸困难、痉挛

4                                痉挛、抽搐、休克死亡

3、实验结果：

实验分组     给药剂量(mg/kg)	动物数量(只)	动物反应级别(只)
			0    1    2    3    4
		卡介菌多糖核酸口含片高剂量组            10中剂量组            5低剂量组            2.5卡介菌多糖核酸肌注组 2.5阴性对照组1(致敏组)阴性对照组2(非致敏组)		101010101010	2    2    3    2    10    2    3    3    20    0    2    4    43    1    3    1    20    0    0    4    610   0    0    0    0

经方差分析，结果提示卡介菌多糖核酸口含片高剂量组，其动物的反应级别与阴性对照组1之间有明显差异(p＜0.01)，且卡介菌多糖核酸口含片高剂量组与卡舒宁肌注组之间比较无明显差异(p＞0.05)；但卡介菌多糖核酸口含片中、低剂量组与阴性对照组1之间比较无明显差异(p＞0.05)。

4、实验结论：

在本实验条件下，卡介菌多糖核酸口含片在高剂量时对豚鼠有脱敏作用，且与肌注无明显差异。

通过上述试验表明：口腔喷含卡介菌多糖核酸，其药效与肌注方式近似，且服用比肌注方便。

实验例五 卡介菌多糖核酸的几种服药方案的药效状况的比较

1、材料：

1.1试验动物：豚鼠300-450g雌雄各半，共计80只

1.2试剂：小牛血清、卡介菌多糖核酸(半成品粉剂)、蔗糖、淀粉、生理盐水、卡舒宁(卡介菌多糖核酸针剂)。

1.3试验器材：烧杯、三角瓶、注射器及针头、量筒、电子天平、医用剪刀、医用镊子等。

2、步骤：

2.1配置小牛血清(10mg/ml，1mg/ml)，辅形剂(比例为蔗糖1∶1淀粉)

2.2将80只豚鼠分别称重并按随机分组法分成五组，每组12只且雌雄各半，每只豚鼠分别肌肉注射小牛血清(0.5mg/ml/只)进行致敏，隔日一次，共计3次，末次注射后，各组分别做以下处理：第一组分别肌肉注射卡舒宁，隔日一次，共计10次；第二组分别灌胃卡舒宁(1支/只)，隔日一次，共计10次；第三组分别口腔喷含卡介菌多糖核酸(0.5mg/只)+辅形剂，隔日一次，共计10次；第四、五组分别口腔喷含等量的辅形剂，隔日一次，共计10次；各组做完以上处理后，末次次日，第一、二、三、四各组选10只健康豚鼠分别后肢静脉注射小牛血清(10mg/ml/只)进行攻击，第五组用生理盐水(1ml/只)后肢静脉攻击。每只动物在攻击后观察其30分钟内的反应情况，各组按以下标准进行打分，并通过计算各组间的P值来判断差异。

3、反应打分标准

反应级数             反应症状

0                    无明显反应

1                    有抓鼻、颤抖或竖毛

2                    有几次咳嗽有抓鼻、颤抖或竖毛

3                    多次或连续咳嗽，伴有呼吸困难，

                     痉挛

4                    痉挛、抽搐、休克死亡

4、结果见下表：

表1卡介菌多糖核酸的几种服药方案的药效状况

5、分析与讨论

以上结果中第一组作为试验的脱敏阳性对照，二、三组为不同给药途径及方案的试验组，第四组为脱敏阴性对照，第五组为整个试验的致敏系统的阴性对照。

计算各试验组分别与脱敏阴性和阳性组间的P值，以及阴阳组间的P值。

得到以下结果：

1组、3组分别与4组间的P值均为＜0.05

1组分别与3组间的P值均为     ＞0.05

2组与4组间的P值为           ＞0.05

根据以上P值结果可以说明本次脱敏试验设立的阴阳性对照(4组与1组)是成立的，即二者间存在显著差异，同样试验组中第3组与阴性对照组存在显著差异，并与阳性对照组间无显著差异。2组与4组的P值＞0.05第2组是口服胃、肠壁吸收途径，第4组是指口腔局部用辅形剂，而二者的P值＞0.5说明第2组口服胃、肠壁吸收途径无脱敏作用。

第二组卡介菌多糖核酸(灌服卡舒宁)与第三组喷含卡介菌多糖核酸两组试验结果为

反应级别                    零     一     二     三     四

灌服组各级别动物数    (C1)   1      1      1      3      3

口腔喷含组各级别动物数(C2)   2      4      3      -      1

经计算两种结果之间统计学P值为0.034，且小于0.05，从而说明二者间存在显著性差异。

上述试验表明：口腔喷含卡介菌多糖核酸的脱敏效果与肌注方式近似，而优于口服卡介菌多糖核酸。

试验例六 卡介菌多糖核酸口腔局部给药的急毒性试验

1、试验材料

1.1试剂和器材：卡舒宁、辅形剂

(蔗糖与淀粉1∶1配制)、电子分析天平、微量进样器、乳钵、烧杯等。

1.2选用25±2g健康昆明种小鼠，每一实验组16只，雌雄各半。

2、试验方法

2.1剂量：试验组卡介菌多糖核酸口含采用3个剂量，分别为：介菌多糖核酸1mg+辅形剂9mg/只、卡介菌多糖核酸2mg+辅形剂8mg/只、卡介菌多糖核酸4mg+辅形剂6mg/只；对照组口含辅形剂10mg/只。

2.2分组与观察：小鼠按性别随机分成8组，其中雌性4组，雄性4组；三个实验组分别按上述剂量一次给予小鼠，对照组只给予等量辅形剂，小鼠给药后连续10天观察动物死亡情况，10天后各组进行称重。

3、实验结果

3.1小鼠给药后观察和称重结果如表2所示：

               表2卡介菌多糖核酸口含片急毒性试验

剂量卡介菌多糖核酸+辅形剂	途径口腔喷含	动物性别	观察日/情1 2 3 4 5	动物健康况6 7 8 9 10	存活数及(死亡率)
						1mg+9mg/只	口含	雄8只雌8只	- - - - -- - - - -	- - - - -- - - - -	8(0.0％)8(0.0％)
2mg+8mg/只	口含	雄8只雌8只	- - - - -- - - - -	- - - - -- - - - -	8(0.0％)8(0.0％)
						4mg+6mg/只	口含	雄8只雌8只	- - - - -- - - - -	- - - - -- - - - -	8(0.0％)8(0.0％)
0mg+10mg/只	口含	雄8只雌8只	- - - - -- - - - -	- - - - -- - - - -	8(0.0％)8(0.0％)

注：口含日期                             “-”表示动物健康

3.2 10日后动物称重情况：

第一组(口含卡介菌多糖核酸1mg+9mg辅形剂)

雄性平均体重32.6g        雌性平均体重31.4g

第二组(口含卡介菌多糖核酸2mg+8mg辅形剂)

雄性平均体重33.3g        雌性平均体重31.5g

第三组(口含卡介菌多糖核酸4mg+6mg辅形剂)

雄性平均体重31.9g        雌性平均体重31.2g

第四组(口含辅形剂10mg即对照组)

雄性平均体重32.4g        雌性平均体重32.1g

4、结论：

以上三组中不同剂量的卡介菌多糖核酸口含给小鼠后均未引起动物死亡。根据人用剂量以2mg/50kg来计算，试验的三组剂量分别为人用剂量的1000倍，2000倍，4000倍，且各组动物体重均未出现明显减轻，反而是表现为正常生长的增重现象，这些均表明口含卡介菌多糖核酸人用剂量是安全的、低毒的。

改变给药途径是否能够保持原有的药效并具备自身特点，对本领域技术人员并非现而易见，但通过以上实验可以表明：本发明提供的卡介菌多糖核酸口腔局部给药的药物制剂在抗喘作用，降低耳肿胀，减轻迟发性变态反应，促进胸腺成熟，双向免疫调节，对小鼠溶血素等方面药效与肌注方式基本相同，但是使用时较注射制剂更方便、安全；另一方面，卡介菌多糖核酸口腔局部给药的药物制剂的脱敏效果与口服卡介菌多糖核酸比较，有显著的优越性，充分说明本发明提供的卡介菌多糖核酸口腔局部给药途径是一种安全、有效的用药途径，为卡介菌多糖核酸提供了一种新的用药方式。

Claims (4)

1、一种口腔局部给药的具有双向免疫调节功能的药物组合物，其特征在于：它是由有效量的卡介菌多糖核酸为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备成的口腔局部给药制剂，所述的口腔局部给药制剂是固体制剂或喷雾剂。

2、根据权利要求1所述的口腔局部给药的具有双向免疫调节功能的药物组合物，其特征在于：所述的固体制剂是：口含片、口腔粘附片或膜剂。

3、根据权利要求2所述的口腔局部给药的具有双向免疫调节功能的药物组合物，其特征在于：所述口含片、口腔粘附片或膜剂，含有卡介菌多糖核酸0.5mg～6mg/片。

4、根据权利要求1所述的口腔局部给药的具有双向免疫调节功能的药物组合物，其特征在于：所述的喷雾剂含卡介菌多糖核酸0.5mg～6mg/揿。