CN86103736A

CN86103736A - 用于治疗动物胃肠疾病的细菌组合物的制备方法

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Publication number: CN86103736A
Application number: CN198686103736A
Authority: CN
Inventors: 约翰·E·黑尔; 威廉姆·L·马沙尔
Original assignee: HEIBREDER NATIONAL PIONEER CO
Current assignee: HEIBREDER NATIONAL PIONEER CO
Priority date: 1985-05-29
Filing date: 1986-05-29
Publication date: 1987-05-20
Also published as: DK252786D0; EP0203586A2; DK252786A; GR861387B; EP0203586A3

Abstract

一种生产用于治疗动物胃肠疾病的细菌组合体的方法，它包括给动物服用有效量的发酵乳杆菌ATCC53113号菌株或它的突变体。

Description

本发明与生产用于治疗动物如猪、牛、绵羊、山羊或马的胃肠疾病的细菌组合体的方法有关。

胃肠病是引起家畜经济损失的主要原因。通常，这种病在动物新生儿发育期最易感染。这时，动物的自身免疫系统还不完全能保护自由免受环境中可能存在的病源微生物的侵袭。胃肠疾病常常导致家畜死亡或者是减缓其生长速度，以致需要更长时间才能出售，从而使农民增加经济负担。即使动物从胃肠病中恢复过来，也耽误了其生长时间，相应地推迟上市时间农民为此要付出代价。据估计，动物损失一天生长时间，就需要两到叁天的时间才能达到上市重量。尽管胃肠病可能是病毒或细菌的病因，但是由大肠杆菌（Escherichiacoli）引起的则是其中常见及最能引起动物衰弱。

那些引起胃肠疾病的大肠杆菌肠毒素的菌株，显然通过质粒编码的细菌粘附素能够结合在敏感动物肠上皮细胞上。大肠杆菌的致病作用也是由它所携带的质粒编码的肠毒素引起的。

过去在动物中已采用过多种措施防止或减轻胃肠疾病，例如，（Fiarr）在美国专利3，953，609号公开一种使动物口服乳酸杆菌NRRL-B5628的方法，以限制消化系统其它细菌生长。专利权获得者声称，这种生物对治疗猪婴和其它动物新生儿的痢疾，腹泻和肠道细菌病特别有用，它能减小肠道中大肠杆菌的菌数。专利权所有人还说这个菌株能用于减少产仔期母猪的肠道细菌，反过来，也就减少了新生猪仔的肠道细菌的菌数。

Henry等在美国专利3，320，130号上公开了一种药物的制备过程，这种药物是含有嗜酸乳杆菌（Tactobacillus Acidophilus）和非病原性大肠杆菌的混合体。Henry等指出发明的这种药物对于治疗婴儿和成人的结肠炎、胃肠炎、大小肠炎都是有效的。

Hata等在美国专利4，314，995号上公开了一种治疗传染病的方法，它涉及乳酸菌（Tactobacillus FRI）菌株，1946，2779，2780，2781或是2782号，在添加或不添加抗菌素时服用。据称这个方法可用于治疗病人的胃炎和肠炎，但建议配合使用抗菌素治疗这些疾病。

Nouvel在美国专利3，369，969号上公开了一种制备药物的方法，这种药物是由非致病性对抗菌素有抗性的肠道细菌，以及存在的或不存在有二分裂微生物或梭状细菌组成。据称这种药物能用于治疗与肠内微生物区系缺乏平衡相关的疾病。专利权所有人进一步公开这种药物对治疗病人腹泻的用法。

在Barrou等的研究报告中（应用细菌学杂誌48：147（1980）），作者检查了，发酵乳杆菌（Tactobacillus fermentum）和唾液链球菌（streptococcuo salivariuo）对猪胃上皮细胞的附着作用。作者报道通过喂食发酵乳杆菌菌株14号和唾液链球菌菌株312号的混合物四天后，胃和十二指肠中的大肠杆菌数在统计上显著下降。然而，当发酵乳杆菌14号菌株单独服用四天时，大肠杆菌数仅在这些动物胃中显著下降。作者进一步指出，这种治疗方法不大可能有效地治疗由大肠杆菌引起的腹泻，因为十二指肠中的大肠杆菌菌数仍然超过每克组织10⁶个菌。作者推测，通过给动物喂食大量14号菌株，或是服用14号菌株所产生的浓缩的抑制因子，如能增强14号菌株的抗菌效果，则对大肠杆菌引起的痢疾应该有些效果。

Muralidhara等人在（食品保护杂誌，40：288，1977）描述了喂食乳酸菌对小猪肠组织的菌区系和粪便的影响。这些作者发现在用产肠毒素的大肠杆菌感染前，只服用乳酸乳杆菌（Tactobacillus lactis）的浓缩物并不能防止动物不得痢疾。这些动物在接触传染病源前，只有在服用乳酸乳杆菌以外，还服用母猪初乳才能完全防止痢疾。

总之，技术背景表明，尽管以前研究者已经试图用细菌的预防法去防止或消除胃肠疾病，但这种方法中所用的微生物只是部分有效的;这样，在动物中就继续需要有一个简单的，无毒性的，非抗菌素性的治疗胃肠疾病的方法。

此发明是给患有或可能患有胃肠病的动物服用治疗剂量的含有发酵乳杆菌，ATCC 53113号菌株的组合体。据推测，这些微生物好象能结合在被治疗动物肠上皮细胞表面的特异受体上，因而抑制了结合在同样受体上的有肠毒素微生物的致病作用。也可能是这种微生物产生的物质抑制了肠毒素病原有的生长或附着。

另一方面，我们也认为发酵乳杆菌，ATCC 53113号，通过刺激动物的免疫系统以保护动物免受产肠毒素微生物的侵染，或者是帮助动物保持一个健康的肠道，使其不易发展成胃肠病。

这样，本发明提供了一种治疗动物胃肠疾病的方法，它包括使动物服用有效剂量的发酵乳杆菌ATCC 53113号及其突变体。

本发明也提供菌株及其突变体，以及包含上述菌株的组合体。

胃肠疾病是指同胃肠有关或是影响胃肠的一类疾病。按照发明的方法，给患有胃肠病或有患肠胃病可能的动物服用治疗量的发酵乳杆菌ATCC 53113号菌或其有效的突变体。在发明的最佳实施方案中是用治疗量的发酵乳杆菌ATCC 53113号，给刚断奶的幼畜服用。

本发明的方法是极有吸引力的，因为发明的微生物是非致病性的，所以不可能由于这个微生物引起而发生任何有害影响。同样，有意义的是，按照本发明治疗胃肠病的方法，不需要抗菌素的补充使用，而防止传染性微生物与肠膜组织的结合，宁愿依靠控制传染性微生物的“自然”机制。在针对公众日益增长的对肉中存在抗菌素的担心和这些抗菌素也许会对大众健康有影响方面上是有意义的。

发明的微生物是从健康的新生猪肠道中分离到的。这种抑制胃肠病的有效微生物是发酵乳杆菌ATCC 53113号，或其有效的突变体。这些突变体被认为是与亲株相等。

在工艺中有一般技术的人都知道，自发突变在微生物中是常常出现的。并且，突变可通过多种已知的方法人为产生。例如，突变可用化学的，辐射的和重组的等技术诱发。如表Ⅰ所示，根据突变剂的活性可把化学诱变剂分为4个主要组，其中任何一种都能在本发明中应用。

可用象紫外线和X-射线这样因素产生辐射引发突变，切补，或通过重组的复制后修复是引起突变的初步机制。

此外，突变也可通过用限制性内切确的重组技术产生。使用这种技术对于大片段DAN的缺失和插入特别有价值。

不论诱发突变的方式如何，关键之点是突变体的治疗功能要和亲株一样。换句话说，本发明的突变包括例如分类特征的微小改变象某些糖的发酵，一些微小变化的突变。另外，本发明包括

表Ⅰ

活性实例

碱基类似物 5-溴尿嘧啶

2-氨基嘌呤

脱氨试剂亚硝酸

羟胺

烷基化试剂硫酸二乙酯

亚硝亚胍

吖啶衍生物吖啶橙

溴化乙啶

的突变其中遗传物质转移使突变体在表型上表现出能与不同肠上皮细胞受体结合的多点决定族，而肠上皮细胞受体是各种胃肠疾病原的附着点。

本发明对一些胃肠病，只要其基本病原是微生物，如细菌和病毒都是有效的。另一方面，当动物肠内正常菌区系被清除或不平衡时，如得严重的病毒性胃肠炎或用高剂量的抗生素治疗后，为了帮助恢复正常的肠内菌落区系和防止乘虚而入的病原（菌）繁殖，本发明同样是有用的。

用本发明能治疗的胃肠病有，腹泻，肠道细菌病和痢疾。腹泻包括许多不同致病因素，其中有实质上是细菌和病毒的。这种疾病的特征为不正常的排便次数和液体状的粪便。肠道细菌病，这里所指的是由于感染大肠杆菌而引起的肠胃病。痢疾是一种严重的肠胃病。这种病是常在猪、牛、绵羊，山羊和马等家畜中发现的一种腹泻。在这种病的进程中，常在晚期便血，症状为发烧，脱水和精神萎糜。通常发现，痢疾对新生动物是致死的，并且是农民经济损失的主要来源。新生动物对引起痢疾的病原物特别敏感，因为这些动物还没有足够的时间发展自己对病原物的免疫反应。然而，新生幼畜依靠母畜的初乳的被动免疫防止疾病。

不幸的是，初乳提供的保护程度在动物之间是相当不同的，可能是或者部分是取决于母畜的年龄和免疫经历。另一方面，新生动物还没有建立正常的肠道微生物区系，也使它们对伺机侵入的病原菌特别敏感。

幼畜断奶和改用固体饲料时，也对肠胃病特别敏感。在这种情况下，动物已离开了其母亲的安抚和保护，而置身于陌生的动物之间。消化道也被迫从运送易消化的奶汁变成运送不太易消化的植物性物质（如玉米和大豆），另外，断奶动物不得不学会如何吃新食物。当动物断奶时，农民的主要两点忧虑是使动物吃新食物保持健康。后来，当动物调整到新食物定量，农民又为获得体重和饲料效率操心。紧张情绪和规定食物的改变也显示出引起消化道微生物区系的改变。由于肠道的保护性微生物区系被破坏，这些动物就更可能发生痢疾。痢疾的病因可能是病毒，也可能是细菌，或是两者都是。

在动物断奶后的生活时期，痢疾最可能由病毒感染引起。在动物生活的这个时期，对肠胃病的敏感性升高，可能是由于失去了通过哺育获得的母体被动抗体的保护，在动物自己发展起对各种胃肠病病原物的活跃的保护性免疫之前，这些被动性抗体消失了。可以设想，在微生物区系的改变和免疫过渡期，肠道对于伺机侵入的病原物感染是更加敏感的。

然而，不论动物特种胃肠病的发展机制如何，它都能使用发酵乳酸杆菌ATCC 53113号菌株而得到缓解。

通过给需要保护的动物服用发酵乳杆菌ATCC 53113号菌株或含有这种微生物的组合体，就可以非常容易地防止胃肠疾病发生。

组合体可以是液体的，冷冻干燥的，或是胶状的并且可以包含其它能治疗胃肠病的菌株。在固体药剂形式中，组合体可以包含本发明的生物和药物载体。药物载体可以是水的、非水液体的或是固体的。在固体剂量形式中，组份中可包含蔗糖、乳糖、淀粉或者硅石这类无活性填充剂及润滑剂，这些润滑剂帮助组合体通过肠道。在胶囊、片剂、丸剂形式的单位剂量中也含有缓冲物质，其它形式的口服剂也可用肠衣制备，以防止组合体在达到肠之前被溶解。

根据本发明的组合体，每克将含有10³-10¹²个活菌体，较优者为每克10⁴-10¹⁰个活菌体，最佳者为每克10⁵-10⁸活菌体。

口服液剂形式，一般为一个装有液体药剂的肠衣胶囊。合适的形式包括乳状液、悬液、溶液、糖浆和配剂，它们含有在技术上常用的填充剂如纯水、糖、多糖、硅胶、明胶和乙醇。这些无活性填充剂无发明物的治疗活性。除填充剂外，这种组合体还包含佐剂，如湿润剂、悬浮剂、乳化剂和甜味剂，调味品和香料。

某种动物的剂量范围，随着其体重和伴随使用的抗菌素而不同。能够作成单一用药或联合用药的剂量，每一单位剂量含有10³-10¹²个活菌，较好的为10⁴-10¹⁰个活菌，最好的为10⁵-10⁸个活菌。

用发酵乳杆菌，ATCC 53113号的全细胞和/或细胞提取物组成的疫苗通过免疫动物也能完成防治胃肠病。熟悉此领域工艺技术的人都能用各种技术制备这些细胞提取物。这些提取物的重要性在于它们保护性地刺激动物的免疫系统，使动物以后接触胃肠病病原因子时，可改善其影响。这些疫苗能以“免疫效应量”通过肠道或不经肠道使用。用于本发明术语“免疫效应量”是指使动物免疫系统敏感化以改善胃肠病影响的必需疫苗量。

通过肠道使用的疫苗能用上述活生物体口服的方法实现。

动物不经肠道使用的疫苗，能通过皮下，肌肉或是静脉注射去免疫动物或通过鼻咽，粘膜，或上皮吸收。非肠道使用的疫苗制品包括无菌的水溶液或非水溶液、悬浊液、乳状液。非水溶剂有丙二醇，聚乙二醇，植物油如橄榄油和可注射的有机酯如乙基油酸盐。咬合敷料的载体能用于增加皮肤的渗透性和增强疾苗的吸收。除惰性填充剂外，这类组合体还包括佐剂，湿润剂和乳浊剂。

疫苗制品含有佐剂是可能的。佐剂是用于非特异地放大特异免疫效应的一类物质。正常情况下，先将佐剂和抗原混合，然后，再加到免疫系统中，或是分别加入，但都作用于被免疫动物的同一位点。佐剂根据它们的成分大致分为几个组。这些组包括：油性佐剂（例如：Freund完全及不完全佐剂），矿物质盐（例如，AlK（SO₄）₂AlNa（SO₄）₂，AlNH₄（SO₄），二氧化硅，高岭土和碳），多核苷酸（如，多聚次黄嘌呤-胞嘧啶核苷酸和多聚腺嘌呤-尿嘧啶核苷酸）和某些天然物质（例如，来自结核分枝杆菌的腊口，以及在小棒杆杆菌和百日咳博德特氏菌中发现的物质和布鲁氏菌属成员中发现的物质）。在这些物质中，最有用的佐剂是皂苷。例如皂皮酸（Superfos A/S，Denark）。

用本发明疫苗进行定时免疫，在应用多次免疫时，可用许多不同的技术进行。不只一次地使用本发明的疫苗，以增加在动物中表达的，动物免疫反应的表达水平和多样性是可能的。典型的情况是如果要进行多次免疫，则每次通常间隔1-2个月。

给予某一动物的剂量范围取决于其体重和伴随使用的抗菌素情况。被用作单一用药或联合用药的剂量，它含有10³-10¹²个菌单位剂量，比较好的是每剂量10⁴-10¹⁰个菌，最佳的是10⁵-10⁸个菌单位剂量。

另一方面，动物可服用等于这些有机体浓度的等量物，它们的量用其它的测定方法表示，如总蛋白浓度或细胞碎片浓度。

发明的组合体除了发酵乳杆菌ATCC 53113号菌株外，还包括这种生物的突变体或它们普通肠内生物，如二分裂细菌或梭状细菌。

本发明也与制备药物方法或药用性组合体的方法有关，所说这种药物含有本发明的成份，它可用于治疗或防止胃肠疾病。

在此工艺中那些有普通技能的人，会知道其它合用的填充剂和剂型，或会用普通实验确定填充剂和剂型。另外，不同组合体的使用可用工艺内行们所熟知的普通标准技术进行。

以上公开了本发明的一般描述。通过参见下面的特例，可获得更全面的了解;这里提供的特例目的只是为了说明，而不是作为限制，除非作特别说明。

例1

发酵乳杆菌，ATCC 53113号菌株是革兰氏阳性杆菌，它是从健康的新生猪仔的肠子中分离到的。这种微生物的发酵特性见表二。这个特性是用商用的测试系统完成的（CHL Kit，DMS Laboratories，Darts Mill，Flemington，New Jersey）。

表二

底物反应

甘油 -

赤藓糖醇 -

D-阿拉伯糖 -

L-阿拉伯糖 -

核糖 +

D-木糖 -

L-木糖 -

核糖醇 -

β-甲基-木糖苷 -

半乳糖 +

D-葡萄糖 +

D-果糖 -

D-甘露糖 -

L-山梨糖 -

鼠李糖 -

半乳糖醇 -

肌糖 -

甘露糖 -

山梨醇 -

续表二

底物反应

α-甲基-D-甘露糖苷 -

α-甲基-D-糖苷 -

N-乙基-葡萄糖胺 -

苦杏仁苷 -

熊果苷 -

七叶苷 -

水扬苷 -

纤维二糖 -

麦芽糖 +

乳糖 +

蜜二糖 +

蔗糖 +

海藻糖 -

菊粉 -

松三糖 -

D-棉子糖 +

淀粉 -

糖原 -

木糖醇 -

续表二

底物反应

β-龙胆二糖 -

D-松二糖 -

D-来苏糖 -

D-塔格糖 -

D-岩藻糖 -

L-岩藻糖 -

D-阿拉伯糖醇 -

L-阿拉伯糖醇 -

葡萄糖酸 +

2-酮基-葡萄糖酸 -

5-酮基-葡萄糖酸 -

ATCC 53113号菌株可在添加DL-苏氨酸的MRS汁^a培养基中进行培养（Chassy etal，细菌学杂誌，127：1576-1578，1976）。质粒的特性是按照Anderson et al等，“应用和环境微生物学”，46：549-552（1983）的方法测定的。质粒的大小是用水平电泳确定的，琼脂糖浓度是0.6%，缓冲液是三羟甲基氨基甲烷-硼酸（Meyers et al细菌学杂志，127：1529-1537，1976）。ATCC 53113号菌株已发现有6种不同大小的质粒。见表三。

表三

在发酵乳杆菌，（Lactobacillus fermentum）

ATCC 53113号菌株中存在的质粒的大小^a

27.7

8.7

4.3

3.5

2.6

2.1

a-单位是10⁶道尔顿。

例2

这个发明的方法的效果和发明的组合体已在新生小猪中进行了调查。五头新生猪出生后立即与它们的母猪分开。不让它们的母猪来抚养这些小猪，以便使它们不能通过母猪的初乳而获得被动免疫性。把这些猪仔分组隔离喂养。第一组猪仔服用在无菌脱脂牛奶中含有10¹⁰-10¹¹浓度发酵乳杆菌，ATCC 53113号菌。在服用这个剂量后八小时，这些猪仔便服用在无菌脱脂牛奶中的10⁸大肠杆菌K-99（NADC（澳）1472）来进行接触感染。这种微生物是一种已知引起猪痢疾的肠病原菌。第二组猪仔不用发酵乳杆菌ATCC 53113号菌株进行预处理，但用10⁸的大肠杆菌K-99（NADC 1472）进行口服感染。第三组猪仔作为对照，不用任何生物进行口服接种。以因痢疾而死亡的时间监测所有动物。所得结果见表四

表四

组数 ATCC 53113号 K-99接触由痢疾引起的死亡

别量菌株治疗剂量感染的剂量时间（小时）

1组 2 10¹⁰-10¹¹10⁸没有死亡

2组 2 - 10⁸32

3组 1 - - 没有死亡

实验中用发明的微生物进行预处理的猪仔，当用已知肠病原菌大肠杆菌进行接触感染时，并没有因痢疾而死亡。这与第二组猪仔形成明显的对照。第二组的猪仔在感染大肠杆菌，K-99 NADC 1472后很快就出现痢疾特有症状，32小时内就死亡。对照猪仔的存活表明，第二组猪仔的死亡是由于接触感染所致，而不是由于实验中可能存在的其他环境因素。

例3

取三周同期的猪仔（饲养和性别是混合的）与它们的母猪分开，同时继续护理并提前喂固体饲料。这些猪仔随机地编排到对照组和实验组，在耳朵上打标记，用2毫升安慰剂凝胶口服接种（对照组）或口服接种在凝胶中含有发酵乳杆菌，ATCC 53113号菌株（6×10⁵个生物）的凝胶。所有猪仔都单独喂养在一个离开地表的金属笼子中，随意供给饲料和水。每天观察体重和腹泻情况，并做记录，历时21天，同时每周度量饲料耗费。实验中每天发生痢疾的猪仔数见表五。

表五

服用发酵乳杆菌ATCC 53113号

菌株对地方性痢疾感染动力学的影响

每天发生痢疾猪仔的数量

组别 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21

对照组 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 1 2 2 2 4 4 4 3 4 3 4

实验组 0 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0

一般来说，服用了发酵乳杆菌，ATCC 53113号菌株的猪仔表现出很低的发病率，发生痢疾的猪仔病情也很轻。在对照组9只发生痢疾的猪仔中，有4只症状持续了7天或更长。

这个实验的结果总结在表六中

表六

发酵乳杆菌，ATCC

53113号菌株对痢疾的影响

组数平均增加平均饲料全部痢痢疾的平均痢疾

别量磅/猪消耗（磅）疾天数病例持续时间b

对照组 15 7.25 14.77 37 9 5

（.73）^a（1.82）

实验组 15 7.01 15.24 9 4 2

（.69）（1.21）

a-平均标准误差

b-天数

将到了第21天仍然腹泻的四头猪仔杀掉，用酶连免疫吸附测定法（ELISA）确定其病原是轮状病毒的诊断。

用含有ATCC 53113号菌株的凝胶处理过的实验组猪仔比没有用该菌株处理的对照猪仔，对由轮状病毒引起的地方性感染有更强的抵抗力（4只动物比9只动物）。另外，在实验组中不发展轮状病毒感染的猪仔，得痢疾的时间远比对照组中那些发展轮状病毒感染的猪仔为短（2天比5天）。最后，对照组中猪仔痢疾的总天数比实验组大得多（37天比9天）。

例4

还做了另一个实验，除了在试验第14天晚上又给动物服用了第二次安慰剂凝胶剂量（对照组）或是含有发酵乳杆菌，ATCC 53113号菌株的凝胶（实验组）外，其余都与上面叙述过的例3形式相同。实验中每天得痢疾的动物数见表七。

表七

多次服用发酵乳杆菌，ATCC

53113号菌株对地方性痢疾感染动力学的影响

每天得痢疾动物的数量

组别 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21

对照组 0 0 1 1 3 4 2 0 0 0 0 0 1 4 6 6 0 0 0 0 0

实验组 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0

在对照组动物的痢疾发病在两个时期发生。在实验早期，试验第三天至第七天，在对照组中有五个痢疾病例发生。第二次突然蔓延的七个病例是在试验第3天到第16天。在实验组动物中，大多数发生痢疾的病例是在实验的第14天时见到。第十四天夜里，两个组都服用第二次，安慰剂凝胶剂量（对照组）和含有发酵杆菌的凝胶剂量（实验组）。这时每个组里有4只动物得较重的痢疾。那些服用了含发酵乳杆菌凝胶的动物，到第十五天就没有痢疾症状了。相反，在对照组，第14天腹泻的4只动物中有3只到第15天仍然感染痢疾，此外，只有3只对照组动物在第15天又得痢疾感染。这个实验的全部结果总结于表八。

表八

用发酵乳杆菌，ATCC 53113号

菌株多次处理对发生痢疾的影响

组数平均增加量平均饲料消得痢疾痢疾的平均痢疾^e

别量磅/猪耗（磅）总天数病例持续时间

对照组 19^a6.59 14.43 27 14^d2

（0.66）^b（1.03）

实验组 20 7.00 17.07 5 5 1

（0.51）（0.88）^c

a-1只动物在试验中死亡

b-平均标准误差

c-有效差异在0.06水平上

d-对照组有两只动物发生两次痢疾

e-天数

实验组的动物没有发生象对照组动物在实验的第3至第7天发生早期痢疾感染。那些在实验组中发生痢疾的病例是在实验的晚期（第14天），刚好与对照组的第二次痢疾突然蔓延同时发生。一般说来，实验组的动物健康状况比对照组的动物要好的多。实验组动物发生痢疾的病例要少一些（5比14），同时，当实验组动物得痢疾时，发病的持续时间也只有对照组得痢疾动物的一半时间。另外，实验组猪得痢疾总天数比对照组的要少得多（5天比27天）。实验组动物固体饲料量消耗明显多于对照组动物这个事实表明，实验组动物对食用固体饲料（17磅比1.4磅）能更快地适应。

这项研究表明，服用发酵乳杆菌，ATCC 53113号菌株不仅能够推迟或防止动物发展痢疾的可能性，而且，这里还表明，由于在试验第十四天第二次服药，能够使那些得较重痢疾感染的动物加速减轻病情。

本发明现已得到全面地阐述，显然，只要不背离本发明在这里所陈述的精神或范围，有专业知识的人可对它作很多更改。

Claims

1、生产一种用于治疗动物胃肠疾病的细菌组合体的方法，这种组合体包括有效数量的发酵乳杆菌，ATCC53113号菌株或它的突变体与一种非药用性载性。

2、按照权利要求1所述的方法，其中所说胃肠疾病是指痢疾、腹泻或肠道细菌病。

3、按照权利要求1所述的方法，其中所说动物是指猪、牛、绵羊、山羊或马。

4、按照权利要求3所述的方法，其中所说动物是新出生动物。

5、按照权利要求1所述的方法，其中所说，组合体是在肠道中应用的。

6、按照权利要求5所述的方法，其中所说药用载体是液体或固体。

7、按照权利要求6所述的方法，其中所说液体载体是水溶液或非水溶液。

8、按照权利要求6所述的方法，其中所说固体载体是非活性填充剂。

9、按照权利要求8所述的方法，其中所说非活性填充剂是蔗糖、乳糖或淀粉。

10、按照权利要求8所述的方法，其中所说非活性填充剂中含有润滑剂。

11、按照权利要求7或8所述的方法，其中所说组合体是包含在肠衣内的。

12、按照权利要求5所述的方法，其中所说组合体是以液体、冷冻干燥、或丸剂形式。

13、按照权利要求1所述的方法，其中所说组合体是非肠道使用的。

14、按照权利要求13所述的方法，其中所说非肠道使用是指皮下注射，肌肉注射或静脉注射，或鼻咽吸收，粘膜吸收或皮肤吸收。

15、按照权利要求13所述的方法，其中所说组合体含有一种佐剂。

16、按照权利要求15所述的方法，其中所说佐剂是一种皂苷衍生物。

17、按照权利要求16所述的方法，其中所说皂苷衍生物是皂皮酸。