CN116990529A - 一种生化酶质控品的制备方法 - Google Patents
一种生化酶质控品的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116990529A CN116990529A CN202310962584.XA CN202310962584A CN116990529A CN 116990529 A CN116990529 A CN 116990529A CN 202310962584 A CN202310962584 A CN 202310962584A CN 116990529 A CN116990529 A CN 116990529A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- quality control
- concentration
- enzyme
- composition
- negative
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 title claims abstract description 81
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 42
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 42
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 51
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 31
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims abstract description 28
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims abstract description 25
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims abstract description 22
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims abstract description 20
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 20
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims abstract description 16
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims abstract description 9
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims abstract description 7
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 13
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 claims description 12
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 claims description 12
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 12
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 claims description 12
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims description 12
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 claims description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 5
- 102000014898 transaminase activity proteins Human genes 0.000 claims description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 abstract description 9
- 238000007710 freezing Methods 0.000 abstract description 7
- 230000008014 freezing Effects 0.000 abstract description 7
- 230000007774 longterm Effects 0.000 abstract description 7
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 abstract description 5
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 abstract description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 26
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 14
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 108010050201 2-hydroxybutyrate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-IMJSIDKUSA-N L-1,4-dithiothreitol Chemical compound SC[C@H](O)[C@@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- -1 etc. Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000002951 small molecule assay Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/96—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood or serum control standard
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/91—Transferases (2.)
- G01N2333/91188—Transferases (2.) transferring nitrogenous groups (2.6)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本申请涉及一种生化酶质控品的制备方法。具体而言，提供了一种质控品组合物，其包含以下或由以下组成：血清基质；至少一种酶；甘露醇；半乳糖；以及谷氨酸，其中不含有海藻糖、不含有外源性甘氨酸、不含有外源性白蛋白。本公开中所提供的冻干质控品具有更好的加速稳定性、长期稳定性、复溶冷藏/复溶冷冻稳定性。
Description
本申请是2017年12月01日提交的专利申请201711247002.0《一种稳定的冻干质控品》的分案申请。
技术领域
本申请涉及临床检验领域。更具体地，涉及组合物在制备酶质控品中的用途。
背景技术
在现代医学体系中，临床检验的地位显得越来越重要，特别是生化检验。如何进一步提高生化检验质量，保证生化检验结果的准确性、标准化、科学化，已成为检验工作者急需解决的主要课题之一。
质量管理是检验学科建设的核心。为了保证生化检验结果的质量，必须对生化检验全过程进行控制(刘凤春等人，生化检验质量控制，中国卫生检验杂质，2010，卷20：906-907)。
在生化检验质量控制中，质控品发挥着关键作用。根据IFCC的定义，质控品(也作，质控物，控制物质)是指专门用于质量控制目的的标本或溶液，不能用于校准。质控品分为定值和不定值两种。
在临床生化分析质量控制过程中，生化分析仪的定期校准及其质量控制是必不可少的，新仪器安装、更换不同批次的试剂、室间或室内质控出现异常、每次维修后都应进行仪器的校准。
质控品是用于体外诊断的质量控制物质，是一种旨在用于医学用途的检测系统中使用的物质、材料、物品或设备，其目的是评价或验证测量精密度、测量准确度、由于试剂或分析仪器的变化检测系统可能产生的分析偏差等性能特征。
生化分析仪与生化试剂组合的检测结果的可靠性依赖于质控品的监测，才能保证报告结果的准确性和不同实验室检测结果的可比性。在临床检验项目中，常常需要检测样本中的酶含量/活性。然而，和小分子待测物相比，酶非常容易变性。由此可见，对质控品的稳定性、瓶间差要求非常高。
质控品中通常包含不止一种酶。不同的酶，有着不同的化学性质、不同的活性。因此，不同的酶对环境的要求也不同。然而，在质控品中，不同种类的酶却处于同一环境中，技术人员很难兼顾不同酶对稳定性的不同要求。因而，在质控品的生产过程中，倾向于加入很多种类的保护成分以满足不同酶的需求。
CN102128917A公开了一种临床生化质控品及其制备工艺，其利用海藻糖、多种稳定剂和复合蛋白保护剂、复合酶保护剂的组合效应，制备成多项临床生化质控品。在该申请中，质控品中包含保护剂(4.0至6.0g/L氯化钠、0.1至0.5g/L枸橼酸、1.0至2.5g/L枸橼酸钠、0.5至1.5g/L磷酸二氢钠、0.1至0.8g/L腺嘌呤、0.5至2.0g/L复合蛋白保护剂HPD、1.0至5.0g/L二硫苏糖醇、生物抑菌剂)；稳定剂(6.0至16.0g/L甘露醇、5.0至10g/L海藻糖、2.0至5.0g/L丙三醇、1.0至5.0g/L复合酶保护剂HP、2.5至6.0g/L复合酶稳定剂AES、1.0至2.5g/LBSA、0.2至0.6g/g迭氮钠)。该方法分别对ALT、AST、TBIL等酶或蛋白质进行保护；-20℃时有效期为12个月；2至8℃保存有限期为6个月。然而，在质控品中添加多达十五种不同类型的保护成分，这至少存在以下几方面的不便：
1)生产周期长，每一个成分的添加都会需要增加相应的操作步骤，
2)增加质量控制环节，每个生产步骤都需要记录、监控环节；
3)带来了溯源链的不确定性；
4)增加污染可能；
5)生产成分大大增加。
CN101893639A中公开了一种稳定质控血清α-羟丁酸脱氢酶和乳酸脱氢酶活性的方法，包括对海藻糖、甘露醇、甘氨酸、质控血清和缓冲液混合、冷冻干燥的步骤。CN101893639A公开的方法使冻干后的α-HBDH和LDH质控品长期保存，并且在水化复溶后两种酶α-HBDH和LDH的活性无明显变化。在该申请中，质控品包含3％牛血清蛋白、12％海藻糖、5％甘露醇、200mM甘氨酸、400U/Lα-HBDH和550U/L的LDH、磷酸盐缓冲液。
对于临检试剂的稳定性研究，本领域常采用加速稳定性实验来预测产品的失效期(用于评价货架稳定性，有时也被称作长期稳定性或者有效期)。这样的方法优点在于研究周期短(通常数周即可)，不用真正地将试剂存放1年、2年、甚至更长的时间。但是，加速稳定性的理论基础是阿伦尼乌斯公式(Arrhenius equation)。为了确保预测的准确性，要想适用该公式，则对试剂有着较多的要求。这是一种理想状态下的预测。然而，生化试剂的成分复杂、种类繁多，并不是任何试剂都能完美地适用加速稳定性实验来预测其真正效期。
除此外，试剂的稳定性，不应当狭义地理解为货架稳定性(长期稳定性)。这是因为，试剂在实际操作使用中，并不是单纯地静置在环境条件恒定的库房当中(恒定的温湿度、避免光照直射、无震动)，而是可能暴露在变化的环境中。例如，在运输过程中(搬运、颠簸)，会接触到机械力的作用，也会遇到温度上的变化(尽管可以采用冷链运输，也无法避免温湿度时刻恒定)。
再比如，在临床机构中，样本的检测都是在大型设备(生化分析仪)上进行。这种操作方式允许多个样本(从数十个至上百个样本)依次或同时检测。那么，试剂将会被从其稳定的储存环境中脱离出来，并且打开包装上机待用。这个过程同样无法避免温湿度的变化，并且样本开盖后接触空气，面临着氧化的因素。因此，这种情况下，加速稳定性实验根本无法评价其它方面的稳定性(ISO标准23640-2011，In vitro diagnostic medical devices-Evaluation of stability of in vitro diagnostic reagents)。
对于干粉形式的质控品，在临床机构待用前，都需要操作人员对其进行重新溶解。然而，重新溶解的操作同样引入了不稳定因素。
因此，技术人员需要找到一种新的方法，使得不添加那么多成分，却仍然能发挥同样的、甚至更好的稳定作用。
发明内容
鉴于本领域的上述需求，根据本公开的一些实施方案，提供了一种质控品组合物，其包含以下或由以下组成：
-血清基质；
-至少一种酶，所述的酶选自：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、或其组合；
-甘露醇；
-半乳糖；以及
-谷氨酸。
在一些实施方案中，质控品组合物不含有外源性海藻糖。
在一些实施方案中，质控品组合物不含有外源性甘氨酸。
在一些实施方案中，质控品组合物不含有外源性白蛋白。
在本公开上下文中，“外源性”是指，除了血清基质、甘露醇、酶等原料中可能以微量的形式而存在的、或者原料本身自带的以外，没有人工额外向质控品中引入海藻糖、甘氨酸或白蛋白。
在一些实施方案中，本公开的组合物是干粉或冻干粉。
在一些实施方案中，本公开的组合物中，甘露醇：半乳糖：谷氨酸的质量比为5：3：3。
在一些实施方案中，如将所述质控品组合物复溶，甘露醇的浓度按质量/体积计相当于5％。这可反推甘露醇在干粉质控品中存在的量。
在一些实施方案中，如果将所述质控品组合物复溶，半乳糖的浓度按质量/体积计为3％。
在一些实施方案中，如果将所述质控品组合物复溶，谷氨酸的浓度按质量/体积计为3％。
在一些实施方案中，所述血清基质源自人血清。
在一些实施方案中，处于生物安全考虑，所述人血清为HBsAg阴性、HCV阴性、HIV阴性、且TP阴性。
根据一些实施方案，还提供了一种质控品组合物，其由以下组成：
-人血清基质，所述人血清为HBsAg阴性、HCV阴性、HIV阴性、TP阴性；
-至少一种酶，所述的酶选自：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、或其组合；
-甘露醇；
-半乳糖；以及
-谷氨酸。
在一些实施方案中，所述组合物是干粉或冻干粉。在一些实施方案中，甘露醇：半乳糖：谷氨酸的质量比为5：3：3。
在一些实施方案中，所述质控品组合物复溶后，甘露醇的浓度按质量/体积计相当于5％、半乳糖的浓度按质量/体积计相当于3％、谷氨酸的浓度按质量/体积计相当于3％；丙氨酸氨基转移酶的浓度相当于400U/L、天门冬氨酸氨基转移酶的浓度相当于400U/L。
根据一些实施方案，还提供了组合物在制备酶质控品中的用途，其中所述组合物包含：血清基质、甘露醇、半乳糖以及谷氨酸。
在一些实施方案中，所述组合物不含有外源性海藻糖，所述组合物不含有外源性甘氨酸，所述组合物不含有外源性白蛋白。
在一些实施方案中，甘露醇：半乳糖：谷氨酸的质量比为5：3：3。
在一些实施方案中，血清基质源自人血清；所述人血清为HBsAg阴性、HCV阴性、HIV阴性、TP阴性。
在一些实施方案中，所述酶质控品包含至少一种酶，所述的酶选自：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、或其组合。
在一些实施方案中，所述酶质控品是干粉或冻干粉。
根据一些实施方案，还提供了一种提高酶质控品稳定性的方法，其包括步骤：
1)提供至少一种酶，所述的酶选自：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、或其组合；
2)提供组合物，所述组合物包含血清基质、甘露醇、半乳糖以及谷氨酸，其中甘露醇：半乳糖：谷氨酸的质量比为5：3：3；
3)将步骤1)中所述的至少一种酶和步骤2)中所述组合物进行混合；
所述血清基质源自人血清；所述人血清为HBsAg阴性、HCV阴性、HIV阴性、TP阴性；
步骤1)和步骤2)的顺序可互换。
在一些实施方案中，上述方法还包括对混合物进行干燥的步骤。
在一些实施方案中，干燥是冷冻干燥。
根据一些实施方案，还提供了一种制备酶质控品的方法，其包括步骤：
1)提供至少一种酶，所述的酶选自：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、或其组合；
2)提供组合物，所述组合物包含血清基质、甘露醇、半乳糖以及谷氨酸，其中甘露醇：半乳糖：谷氨酸的质量比为5：3：3；
3)将步骤1)中所述的至少一种酶和步骤2)中所述组合物进行混合，
4)对步骤3)所得的混合物进行干燥操作；优选地，所述干燥是冷冻干燥；
所述血清基质源自人血清；所述人血清为HBsAg阴性、HCV阴性、HIV阴性、TP阴性；
步骤1)和步骤2)的顺序可互换。
在一些实施方案中，按照如下参数进行冷冻干燥：
捕水温度设置为-80℃；真空报警上限设置为100Pa；真空范围中上限设置为30Pa；真空范围中下限设置为20Pa；隔板温度设置为-45℃。
具体实施方式
实施例
实施例1：ALT质控品的组成
对比质控品和测试质控品的组成参见表1。
表1.ALT质控品的不同组成
实施例2：AST质控品的组成
对比质控品和测试质控品的组成参见表2。
表2.AST质控品的不同组成
实施例3.质控品的制备方法
1)按照表1和表2的成分进行称量；
2)将称量的成分分别加入至血清基质(或缓冲液)中，搅拌溶解；
3)将所得液体质控品移入深色玻璃容器(如棕色安瓿)中；
4)将分装后的液体质控品，放至冻干机样品箱中进行冻干。
设置参数如下：
-捕水温度-80℃；-真空报警上限100Pa；
-真空范围中上限30Pa；-中下限20Pa；
-隔板温度-45℃，
依次打开压缩机、循环机和箱冷阀开始预冻；
隔板温度降至-40℃(约预冻3小时)后，关闭箱冷阀，开冷阱阀；
冷阱阀温度降到-50℃后，打开中隔阀开真空泵开始抽真空；
待真空度下降到30Pa以下，进入手动/曲线控温，设置隔板温度为-10℃，设置真空调节，维持16至20小时；
之后，设置隔板温度到25℃，设置真空不调，6小时后结束冻干。
冻干结束，关闭中隔阀，依次关闭真空泵、冷阱电磁阀、压缩机、循环泵，打开(前箱)放气阀，取出样品压塞。
测试例
测试例1.生化分析仪设置参数
AST和ALT测试试剂盒采用市售成熟产品即可，对制造商来源没有限制。使试剂盒分别测试实施例1和2中配制的各质控品。所用全自动生化分析仪为东芝40。
测试例2.加速稳定性(也作热稳定性)
将放入37℃保持7天的冻干质控品与2-8℃保存的冻干质控品同时溶解，同时检测，计算(37℃浓度-2-8℃浓度)/2-8℃浓度。
表3.ALT加速实验结果
| 1天 | 3天 | 5天 | 7天 | |
| 对照 | 379.0 | 372.7 | 368.9 | 360.7 |
| 实例1 | 379.2 | 371.3 | 368.1 | 359.8 |
| 实例2 | 381.2 | 373.8 | 372.2 | 366.7 |
| 实例3 | 382.5 | 378.0 | 373.5 | 371.0 |
| 实例4 | 384.9 | 380.9 | 376.3 | 375.0 |
| 实例5 | 384.0 | 379.8 | 374.1 | 373.6 |
| 实例6 | 392.5 | 391.5 | 389.7 | 387.4 |
| 实例7 | 395.4 | 394.7 | 393.0 | 393.8 |
| 实例8 | 394.7 | 394.5 | 391.9 | 390.9 |
表4.AST加速实验实验结果
测试例3.长期稳定性
将质控品在2-8℃保存18个月。与初检浓度(刚制得时)相比，计算(18个月浓度-初检浓度)/初检浓度。
表5.ALT长期稳定性实验结果
| 6个月 | 12个月 | 18个月 | |
| 对照 | 381.6 | 379.8 | 375.3 |
| 实例1 | 381.9 | 378.1 | 374.5 |
| 实例2 | 385.0 | 383.3 | 382.6 |
| 实例3 | 385.1 | 383.8 | 382.7 |
| 实例4 | 385.5 | 384.2 | 381.0 |
| 实例5 | 386.8 | 386.7 | 385.6 |
| 实例6 | 394.3 | 391.8 | 389.7 |
| 实例7 | 397.5 | 395.6 | 395.2 |
| 实例8 | 395.4 | 393.8 | 391.8 |
表6.AST长期稳定性实验结果
| 6个月 | 12个月 | 18个月 | |
| 对照 | 378.9 | 377.2 | 374.0 |
| 实例1 | 379.2 | 378.0 | 374.4 |
| 实例2 | 380.2 | 380.0 | 379.3 |
| 实例3 | 382.3 | 379.5 | 378.3 |
| 实例4 | 384.3 | 383.3 | 382.0 |
| 实例5 | 383.2 | 381.7 | 381.3 |
| 实例6 | 390.7 | 388.6 | 386.7 |
| 实例7 | 398.4 | 397.8 | 397.1 |
| 实例8 | 397.5 | 396.6 | 395.8 |
测试例4.复溶稳定性
1.复溶冷藏：
质控品溶解后，在2-8℃冷藏3天后检测。检测结果与初检结果进行比较，计算(冷藏3天浓度-初检浓度)/初检浓度。
表7.ALT复溶冷藏实验结果
表8.AST复溶冷藏实验结果
| 1周 | 2周 | 3周 | |
| 对照 | 389.1 | 386.3 | 382.5 |
| 实例1 | 389.4 | 385.3 | 381.4 |
| 实例2 | 390.8 | 389.7 | 385.8 |
| 实例3 | 392.2 | 390.4 | 388.7 |
| 实例4 | 394.6 | 393.7 | 390.0 |
| 实例5 | 392.9 | 389.2 | 388.1 |
| 实例6 | 396.0 | 394.6 | 392.6 |
| 实例7 | 398.9 | 398.6 | 396.7 |
| 实例8 | 397.6 | 397.6 | 395.5 |
2.复溶冷冻：
质控品溶解后，-20℃冷藏15天后检测，检测结果与初检结果进行比较，计算(冷冻15天浓度-初检浓度)/初检浓度。
表9.ALT复溶冷冻实验结果
| 15天 | 30天 | 45天 | |
| 对照 | 389.2 | 387.6 | 384.2 |
| 实例1 | 389.2 | 385.7 | 380.8 |
| 实例2 | 391.7 | 388.0 | 385.0 |
| 实例3 | 392.9 | 391.5 | 387.7 |
| 实例4 | 395.3 | 392.8 | 389.7 |
| 实例5 | 395.4 | 391.6 | 388.5 |
| 实例6 | 399.4 | 396.9 | 394.9 |
| 实例7 | 400.7 | 400.4 | 398.4 |
| 实例8 | 400.5 | 399.0 | 396.9 |
表10.AST复溶冷冻实验结果
测试例5.外观及溶解性检测
加入蒸馏水后观察完全溶解所用时间和溶解过程的变化。
结果：冻干后各组均为白色或浅黄色冻干粉。各组复溶后均为浅黄色澄清溶液，无不溶物。
但是，ALT和AST对照组完全溶解需要11至12分钟。然而，本申请的测试组在7至10分钟之内都完全溶解，尤其是ALT和AST的实例7在7分钟至8分钟之内完全溶解。这表示本申请的测试组合物可以提供更好的溶解性能，组成上更加接近待测样本。
测试例6.含水量
随机抽取冻干品3瓶，测定冻干品的含水量。
冻干后各组含水量均可控制在5％以内，符合冻干质控品的含水量要求。在相同的冻干操作条件下，对于ALT和AST的实例6-8，含水量甚至可以控制在3％以内。
根据压力减小沸点下降的原理，物料中的水分可从水不经过液相而直接升华为水汽。根据这个原理，可以先将湿原料冻结至冰点之下，使原料中的水分变为固态冰，然后在适当的真空环境下，将冰直接转化为蒸汽而除去，再用真空系统中的水汽凝结器将水蒸汽冷凝，从而使物料得到干燥。
不限于具体理论，对于ALT和AST的实例6-8，其组成提供了更理想的冰点，有利于在冻干的物理过程中水分的升华。换言之，当降低到5％含水量时，本公开的质控品仅需要更短的冻干时间即可达到。
测试例7.均一性和瓶间差
1.均一性：重复测定1瓶10次，按计算测定均值、标准差和CV。
2.批内瓶间差：测定10瓶质控品各1次，计算测定均值、标准差和瓶间差。
结果：冻干后各组均一性和瓶间差均可控制在5％以内。然而，对于ALT和AST的实例1-8，均一性和瓶间差甚至均可控制在3％以内。不限于具体理论，对照组所添加的组分种类更多，这实际上引入了更多操作上的误差，因而影响了制造过程的可控性。然而，临床上对于质控品瓶-瓶之间、批-批之间，要求越一致越好。因此，在确保稳定性的前提下，引入越少的组分(和操作步骤)越好。
测试例8.ALT和AST的组合质控品
此外，本申请人还将400U/L ALT和400U/L AST组合在一起按照上述实验。参照表1的组成进行质控品制备，区别仅在于除了400U/LALT外，还含有400U/L AST。
测试结果显示各项性能指标均和测试例1-7中的结果相当(数据未显示)。这证实ALT和AST可以制备成组合质控品，两种酶互部影响各自的稳定性和生物学性能，能够同处于同一组合物中。
综上，在加速稳定性、长期稳定性、复溶冷藏/复溶冷冻稳定性方面，本公开中所提供的冻干质控品均显著优于对照质控品。并且，当甘露醇、半乳糖、谷氨酸组合使用时，能够提供更好的效果。
Claims (6)
1.组合物在制备生化酶质控品中的用途，其中所述组合物由以下组成：
-人血清基质；
-甘露醇；
-半乳糖；以及
-谷氨酸，
其中，
所述组合物不含有外源性海藻糖，
所述组合物不含有外源性甘氨酸，
所述组合物不含有外源性白蛋白；
甘露醇：半乳糖：谷氨酸的质量比为5：3：3；
所述酶质控品包含至少一种酶，所述的酶选自：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、或其组合；且
所述酶质控品是冻干粉；
优选地，所述酶质控品组合物复溶后，甘露醇的浓度按质量/体积计相当于5％、半乳糖的浓度按质量/体积计相当于3％、谷氨酸的浓度按质量/体积计相当于3％；
优选地，丙氨酸氨基转移酶的浓度相当于400U/L、天门冬氨酸氨基转移酶的浓度相当于400U/L。
2.根据权利要求1所述的用途，所述人血清基质源自人血清；所述人血清为HBsAg阴性、HCV阴性、HIV阴性、TP阴性。
3.一种制备酶质控品的方法，其包括步骤：
1)提供至少一种酶，所述酶选自：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、或其组合；
2)提供组合物，所述组合物由以下组成：人血清基质、甘露醇、半乳糖以及谷氨酸，其中甘露醇：半乳糖：谷氨酸的质量比为5：3：3；
所述酶质控品组合物复溶后，甘露醇的浓度按质量/体积计相当于5％、半乳糖的浓度按质量/体积计相当于3％、谷氨酸的浓度按质量/体积计相当于3％；丙氨酸氨基转移酶的浓度相当于400U/L、天门冬氨酸氨基转移酶的浓度相当于400U/L；
3)将步骤1)中所述的至少一种酶和步骤2)中所述组合物进行混合，
4)对步骤3)所得的混合物进行冷冻干燥；
优选地，所述人血清为HBsAg阴性、HCV阴性、HIV阴性、TP阴性；
步骤1)和步骤2)的顺序可互换。
4.根据权利要求3所述的方法，其中所述冷冻干燥按照如下进行：
优选地，捕水温度设置为-80℃；
优选地，真空报警上限设置为100Pa；
优选地，真空范围中上限设置为30Pa；
优选地，真空范围中下限设置为20Pa；
优选地，隔板温度设置为-45℃。
5.一种提高酶质控品稳定性的方法，其包括步骤：
1)提供至少一种酶，所述酶选自：丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、或其组合；
2)提供组合物，所述组合物由以下组成：人血清基质、甘露醇、半乳糖以及谷氨酸，其中甘露醇：半乳糖：谷氨酸的质量比为5：3：3；
优选地，所述酶质控品组合物复溶后，甘露醇的浓度按质量/体积计相当于5％、半乳糖的浓度按质量/体积计相当于3％、谷氨酸的浓度按质量/体积计相当于3％；丙氨酸氨基转移酶的浓度相当于400U/L、天门冬氨酸氨基转移酶的浓度相当于400U/L；
3)将步骤1)中所述的至少一种酶和步骤2)中所述组合物进行混合；
优选地，所述人血清为HBsAg阴性、HCV阴性、HIV阴性、TP阴性；
步骤1)和步骤2)的顺序可互换。
6.根据权利要求5所述的方法，还包括步骤：
对步骤3)所得的混合物进行干燥操作；优选地，所述干燥是冷冻干燥。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310962584.XA CN116990529A (zh) | 2017-12-01 | 2017-12-01 | 一种生化酶质控品的制备方法 |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201711247002.0A CN108089016B (zh) | 2017-12-01 | 2017-12-01 | 一种稳定的冻干质控品 |
| CN202310962584.XA CN116990529A (zh) | 2017-12-01 | 2017-12-01 | 一种生化酶质控品的制备方法 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201711247002.0A Division CN108089016B (zh) | 2017-12-01 | 2017-12-01 | 一种稳定的冻干质控品 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116990529A true CN116990529A (zh) | 2023-11-03 |
Family
ID=62172470
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201711247002.0A Active CN108089016B (zh) | 2017-12-01 | 2017-12-01 | 一种稳定的冻干质控品 |
| CN202310962584.XA Pending CN116990529A (zh) | 2017-12-01 | 2017-12-01 | 一种生化酶质控品的制备方法 |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201711247002.0A Active CN108089016B (zh) | 2017-12-01 | 2017-12-01 | 一种稳定的冻干质控品 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (2) | CN108089016B (zh) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109100499A (zh) * | 2018-06-21 | 2018-12-28 | 上海彧成生物科技有限公司 | 一种质控品冻干液的配方 |
| CN109781991B (zh) * | 2018-12-26 | 2022-06-24 | 深圳开立生物医疗科技股份有限公司 | 一种c反应蛋白保存液、校准品、质控品和检测试剂盒 |
| CN109708946A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-05-03 | 宁波美康保生生物医学工程有限公司 | 用于离心式微流控芯片的混合线性高值的制备方法 |
| CN110964783B (zh) * | 2019-12-10 | 2023-08-29 | 郑州标源生物科技有限公司 | 一种线粒体天门冬氨酸氨基转移酶质控品及其制备方法 |
| CN113092746B (zh) * | 2020-04-30 | 2022-11-18 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 生化校准物质 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2333217A1 (en) * | 2001-01-31 | 2002-07-31 | Hisahide Hiura | Quality control material |
| CN101105495B (zh) * | 2007-07-31 | 2011-06-15 | 浙江省肿瘤医院 | 肿瘤标志物质控品的制备方法 |
| CN101893639B (zh) * | 2010-02-11 | 2013-10-30 | 上海蓝怡科技有限公司 | 稳定质控血清α-羟丁酸脱氢酶和乳酸脱氢酶活性的方法 |
| CN103076213B (zh) * | 2012-12-26 | 2015-01-21 | 宁波美康生物科技股份有限公司 | 糖化白蛋白质控品的制备方法 |
| CN103399160A (zh) * | 2013-08-07 | 2013-11-20 | 上海睿康生物科技有限公司 | 一种免疫比浊法载脂蛋白e检测试剂盒 |
-
2017
- 2017-12-01 CN CN201711247002.0A patent/CN108089016B/zh active Active
- 2017-12-01 CN CN202310962584.XA patent/CN116990529A/zh active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN108089016B (zh) | 2023-11-07 |
| CN108089016A (zh) | 2018-05-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108089016B (zh) | 一种稳定的冻干质控品 | |
| CN103900884B (zh) | 精浆复合质控品及其制备方法、试剂盒 | |
| CN101893639B (zh) | 稳定质控血清α-羟丁酸脱氢酶和乳酸脱氢酶活性的方法 | |
| AU2017235973B2 (en) | Customized quality controls for analytical assays | |
| Xu et al. | Room-temperature-storable PCR mixes for SARS-CoV-2 detection | |
| US8790932B2 (en) | Method for providing a dried reagent in a microfluidic system and microfluidic system | |
| CN109593834A (zh) | 一种核酸扩增试剂所需的冻干保护体系及其制备方法 | |
| CN111707625A (zh) | 一种总胆汁酸测定试剂球的制备方法、试剂球及检测芯片 | |
| CN104630325B (zh) | 一种液体型纤维蛋白原检测试剂及其制备方法 | |
| CN107677528A (zh) | 一种肝素抗凝检测试剂的校准品及质控品及其制备方法 | |
| CN113088508B (zh) | 一种神经元特异性烯醇化酶的冻干方法 | |
| CN113234792A (zh) | 一种用于凝血检测的质控组合物 | |
| CN113092746B (zh) | 生化校准物质 | |
| CN111351318A (zh) | 抗体偶联乳胶的冻干方法 | |
| CN116410258A (zh) | 因子xi缺乏血浆保护剂及其应用 | |
| CN113834942B (zh) | 一种胎盘生长因子质控品及其制备方法 | |
| CN104166004A (zh) | 凝血因子ⅷ质控品制备方法 | |
| CN115704749A (zh) | 用于制备糖化血红蛋白质控品的试剂盒及制备方法 | |
| Duanginta et al. | Challenges of In Vitro Glycation when Producing Blood Materials for Hemoglobin A1C Immunoassays. | |
| Prasad et al. | Effect of Storage on the Stability of Enzyme Activities in Pooled Serum | |
| CN114371239B (zh) | 用于测定氧化三甲胺的试剂盒及其制备方法和应用 | |
| WO2010101206A1 (ja) | 管理試料の安定化剤、当該安定化剤を含有する管理試料、及び、当該管理試料を含む測定用キット | |
| CN110596227B (zh) | 飞行时间质谱即用型斯坦利沙门氏菌定性标准样品的制备方法 | |
| CN114594274A (zh) | 一种抗缪勒管激素质控品、制备方法及其应用 | |
| CN117356558A (zh) | 一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |