CN1169839C - 一种枸杞多糖及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种枸杞多糖,其所含活性多糖成分的组成及比例为:分子量在10万~18万∶1万~8万∶0.3万~0.8万=(4~20%)∶(8~40%)∶(4~20%)。本发明还公开了上述枸杞多糖的制备方法:以中药枸杞为原料,加入8~20倍50~100℃的热水,用高速剪切机剪切10~40分钟,压榨,取压榨出的汁高速离心,离心液用截留分子量为5~10万的超滤膜过滤,超滤液再用截留分子量为3000~10000的超滤膜浓缩,冷冻干燥,即得。本发明枸杞多糖活性成分明确,质量可控,用于治疗因免疫能力低下而引起的疾病疗效可靠,并且几乎无不良反应。
Description
所属技术领域
本发明涉及一种枸杞多糖,同时,本发明还涉及一种所述枸杞多糖的制备方法及其在制备用于治疗因免疫低下引起疾病的药物方面的应用。
背景技术
枸杞子中的主要活性成份为多糖类,其主要功效能提高机体的免疫能力,从而可以用于治疗因免疫能力低下而引起的疾病,如长期感冒,哮喘,癌症等。枸杞子中糖类以单糖和寡糖居多,多糖含量相对较少。在以往的多糖提取工艺中,多具有长时间高热的提取过程,如煎煮和浓缩,这样不仅会使最终产品颜色加深,同时也使许多多糖断裂成寡糖和单糖。根据研究报道,有明显药理作用的枸杞多糖,其分子量多在1万以上,而枸杞单糖和寡糖目前研究认为是没什么药理作用,若将多糖分离得过纯,则药理作用有明显降低的现象。
发明内容
本发明的目的在于提供一种枸杞多糖,其活性成分明确,质量可控,用于治疗因免疫能力低下而引起的疾病疗效可靠,并且几乎无不良反应。
本发明的另一目的在于提供该枸杞多糖制备方法,该方法工艺简单,产品收率高。
本发明的目的还在于提供该枸杞多糖在制备用于治疗因免疫低下引起疾病的药物方面的应用。
本发明提供的枸杞多糖,其所含活性多糖成分的组成和比例为:分子量在10万~18万∶1万~8万∶0.3万~0.8万=(4~20%)∶(8~40%)∶(4~20%)。
本发明提供的枸杞多糖的制备方法,以中药枸杞为原料,包括以下步骤:取枸杞子置容器中,加入8~20倍50~100℃的热水,用高速剪切机剪切10~40分钟,压榨,取压榨出的汁高速离心,离心液用截留分子量为5~10万的超滤膜过滤,超滤液再用截留分子量为3000~10000的超滤膜浓缩,冷冻干燥,即得。
本发明方法用热水进行剪切,既可以使多糖迅速溶于热水中,又避免枸杞中色素因高温下变化,使颜色加深;再用不同分子量的超滤膜,进行分离和浓缩,冷冻干燥,可以避免长时间的高热提取过程,使最终产品多糖收率高达80%以上,外观好,且整个生产过程操作简单,容易进行规模化生产,成本低。
本发明枸杞多糖应用在治疗因免疫能力低下而引起的疾病方面,可与一种或多种药学上可接受的载体(辅料)配制成药剂。
上述药用辅料是指药学领域常规的药用辅料,例如:稀释剂、赋形剂和水等,填充剂如淀粉、甘露醇、糊精、蔗糖、乳糖,微晶纤维素等;粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮;润湿剂如甘油;崩解剂如甲基淀粉钠,羟丙纤维素,交联羧甲基纤维素,琼脂和碳酸氢钠;表面活性剂如十六烷醇,十二烷基硫酸钠,吐温80等;吸附载体如高岭土和皂粘土;润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙和镁、微粉硅胶和聚乙二醇等。另外还可以在组合物中加入其它辅剂如香味剂、甜味剂等。
本发明的药剂可通过口服、直肠或肠胃外给药的方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时,可将其制成常规的固体制剂如片剂、胶囊、粉剂、颗粒剂等,制成液体制剂如水或油悬浮剂其它液体制剂如糖浆、合剂、酏剂等;用于肠胃外给药时,可将其制成注射用的溶液、粉针、水或油性悬浮剂等。本发明优选的形式是粉针、注射液和片剂、包衣片剂、胶囊、颗粒剂、合剂。
本发明的枸杞多糖药剂的施用量可根据用药途径、患者年龄、体重、所治疗的疾病的类型和严重程度等变化,其日剂量可以是1~500mg/kg体重,优选5~450mg/kg体重。可以一次或多次施用。
本发明枸杞多糖活性成分明确,质量可控,用于治疗因免疫能力低下而引起的疾病疗效可靠,并且几乎无不良反应。
下面通过实施例及主要药效学试验对本发明作进一步的说明。
实施例1 枸杞多糖的制备
取枸杞子1000g,经挑拣后,用常水冲洗干净,置容器中,加入15倍80℃的热水,用高速剪切机剪切30分钟,压榨,取压榨出的汁高速离心,离心液用截留分子量为5~10万的超滤膜过滤,超滤液再用截留分子量为3000~10000的超滤膜浓缩,冷冻干燥,即得。
实施例2 枸杞多糖口服液的制备
实施例1枸杞多糖 50g
苯甲酸钠 2g
取实施例1枸杞多糖,加苯甲酸钠,加注射用水至适量,加热溶解,放冷,再加注射用水至1000ml,搅拌,用0.45μl微孔滤膜过滤,灌装,封口,100℃,30分钟灭菌,即得。
实施例3 枸杞多糖粉针的制备
实施例1枸杞多糖 100g
甘露醇 50g
取枸杞多糖,加水至甘露醇,加注射用水至适量,加热溶解,放冷,再加注射用水至1000ml,搅拌,用0.22μl微孔滤膜过滤,分装于西林瓶中,冷冻干燥,压盖,封口,即得。
实施例4 枸杞多糖注射液的制备
实施例1枸杞多糖 100g
吐温-80 1ml
注射用水 加至1000ml
取实施例1枸杞多糖,用900ml注射用水溶解,再用1%的氢氧化钠溶液调pH至6~7,加1ml吐温-80,补加注射用水至1000ml,静置,用0.22μm的微孔滤膜过滤,灌封,流通蒸汽灭菌,即得。
实施例5 枸杞多糖胶囊的制备
实施例1枸杞多糖 500g
糊精 425g
羧甲基纤维素钠 60g
硬脂酸镁 15g
取实施例1枸杞多糖、糊精、羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁混合均匀,过80目筛,用干式制粒机制粒,用60目筛整粒,灌于胶囊中,即得。
以上实施例仅为了对本发明作进一步的说明,而本发明的范围不受所举实施例的局限。
本发明提供的是一种新型的治疗因免疫能力低下而引起的疾病的天然药物---枸杞多糖及其药剂,为证明其效果及安全性,发明者使用按上述实施例1中提供的方法制备得到的枸杞多糖,进行了的毒理和药效学实验,研究结果如下:
一、主要药效学试验
为观察实施例1枸杞多糖(以下简称为LBP)作为提高机体免疫功能和抗肿瘤辅助治疗药物的效果,本试验进行了扶正祛邪、增效减毒试验。小鼠均于接种后第2天静脉注射给药,连续10天,观察小鼠的各种表现、肿瘤生长及死亡情况,停药后1天处死荷实体瘤小鼠,观察药物的抑瘤率、脏器系数及对免疫系统的影响,同时研究LBP对Cy是否具有增效作用、对Cy免疫低下小鼠是否具有解毒作用,并进行iv注射或ig给药的药效比较,结果表明:
①25、50、100mg/kg对HepS的肿瘤的生长有抑制作用,分别是36.6、48.7、61.6%,口服100mg/kg的抑制率为40.2%;对S180也有较强的抑制作用,100mg/kg可明显延长ACE腹水癌小鼠的生命。提示LBP具有较强的抗肿瘤作用,且iv给药效果强于ig给药。
②可明显提高荷瘤小鼠的WBC数,升高率可大于200%,对不同瘤株同剂量相关性比较复杂;LBP可提高HepS小鼠巨噬细胞吞噬功能、提高淋巴细胞转化率及NK细胞的活性;明显提高血清中IL-2与TNF-α水平。表明LBP且提高免疫功能的作用,可增强机体对肿瘤的杀伤作用。
③与Cy合用能明显提高抑瘤率,减少动物死亡率,对因化疗所致免疫低下的动物,有明显的升高WBC提高免疫功能的作用,增加脾脏与胸腺指数。表明本品与化疗药物合用有明显的增效减毒作用。
综上所述LBP具较强的抗肿瘤作用,显著提高免疫功能,同化疗药物合用有明显的增效减毒作用,提示LBP作用为抗肿瘤辅助治疗药物应有很好的前景。
二、急性毒性试验
家犬麻醉(戊巴比妥钠i.v30mg/kg)状态下,静脉注射LBP大、小两个剂量(20、100mg/kg生药),总体积5ml/kg,对药前与给药后测定的血压(SBP、DBP、BP)、呼吸频率、振幅、体温、心率、心电图(P、QRS、ST、T波间期、振幅)参数,均无明显变化。LBP大、中、小三个剂量组(500、250、50mg/kg生药三剂量),按0.1ml/10g体重小鼠iv注射,药后30分钟,对小鼠10分钟内自发活动次数,对小鼠腹腔注射45mg/kg戊巴比妥钠,动物的睡眠时间与生理盐水对照组比较均无统计学差异。表明LBP在相应剂量下对神经、呼吸与心血管系统均没有明显不良影响。
三、长期毒性试验
1、大鼠长期毒性试验:Sprague-Dawley大鼠160只,分高剂量组(500mg/kg)、中剂量组(160mg提取物/kg)、低剂量组(50mg提取物/kg)及5%葡萄糖注射液对照组,每组动物40只,雌雄各半。给药途径为腹腔注射,每天一次,每周给药6天,用药周期为26周。
结果表明,LBP腹腔注射给药26周,大鼠的行为活动、皮毛色泽及粪便均属正常。摄食量未发现明显的与药物作用有关的异常变化。高、中、低剂量组动物的体重增长与对照组相比无显著差异。主要的脏器重量及其系数与对照组比较未见显著性差异。血液学和血液生化学实验表明,高、中、低剂量组大鼠血液所检测的各项指标与对照组比较,除高中剂量组WBC升高外未见明显由于药物所致的异常变化。病理切片结果显示,各时期各组动物肺脏均有少数动物出现炎症反应,少数动物肝脏出现炎细胞浸润与轻度脂肪变,但与空白对照组比较没有差异。在本试验条件下,LBPi.v.给药26周对SD大鼠的无毒剂量为500mg/kg。
2、Beagle犬长期毒性试验:Beagle犬32只,试验分LBP高剂量组(250mg提取物/kg)、中剂量组(80mg提取物/kg)、低剂量组(25mg提取物/kg)及空白对照组(5%葡萄糖注射液)。高、中、低剂量组和对照组,给药途径为静脉注射,每日一次,每周6次,用药周期为26周。
结果表明,静脉注射LBP13周、26周后对犬的血常规中高中剂量组WBC明显高于空白对照组,但在正常范围之内;血清生化、尿常规和摄食量等均未发现明显的与药物作用有关的异常变化。动物的活动状况在给药后一切正常。与对照组相比,各给药组的犬体重及体重增长正常且在同周内无显著差异。犬心电图各项指标正常。组织切片检查表明,在所有受检脏器中均未见明显的病理改变。在本试验条件下,LBPi.v.给药26周对犬的无毒剂量为250mg/kg。
Claims (3)
1、一种枸杞多糖,其特征在于所含活性多糖成分的组成及比例为:分子量在10万~18万∶1万~8万∶0.3万~0.8万=(4~20%)∶(8~40%)∶(4~20%)。
2、权利要求1所述的枸杞多糖的制备方法,其特征在于以中药枸杞为原料,包括以下步骤:取枸杞子置容器中,加入8~20倍50~100℃的热水,用高速剪切机剪切10~40分钟,压榨,取压榨出的汁高速离心,离心液用截留分子量为5~10万的超滤膜过滤,超滤液再用截留分子量为3000~10000的超滤膜浓缩,冷冻干燥,即得。
3、权利要求1所述的枸杞多糖在制备用于治疗因免疫低下引起疾病的药物方面的应用。
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