CN116973566A - 一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂 - Google Patents
一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116973566A CN116973566A CN202310659344.2A CN202310659344A CN116973566A CN 116973566 A CN116973566 A CN 116973566A CN 202310659344 A CN202310659344 A CN 202310659344A CN 116973566 A CN116973566 A CN 116973566A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- antigen
- cov
- sars
- protein
- fragment
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 181
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 181
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 181
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 85
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 claims description 43
- 101710198474 Spike protein Proteins 0.000 claims description 43
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 39
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 claims description 36
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 33
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 28
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 28
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 28
- 102000053723 Angiotensin-converting enzyme 2 Human genes 0.000 claims description 26
- 108090000975 Angiotensin-converting enzyme 2 Proteins 0.000 claims description 26
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 23
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 18
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 claims description 17
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 15
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 13
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 12
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 101000629318 Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 Spike glycoprotein Proteins 0.000 claims description 11
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 8
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 7
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 7
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 3
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 claims description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 claims description 2
- 241000008910 Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus Species 0.000 claims 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 36
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 26
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 12
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 10
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 9
- 101000929928 Homo sapiens Angiotensin-converting enzyme 2 Proteins 0.000 description 9
- 102000048657 human ACE2 Human genes 0.000 description 9
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 8
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 8
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 5
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 5
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 3
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 glycooxidase Proteins 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 description 1
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031673 Corneodesmosin Human genes 0.000 description 1
- 101710139375 Corneodesmosin Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 108010015133 Galactose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 101001028244 Onchocerca volvulus Fatty-acid and retinol-binding protein 1 Proteins 0.000 description 1
- KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N Ruthenium Chemical group [Ru] KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000003176 Severe Acute Respiratory Syndrome Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101710137302 Surface antigen S Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical class C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000012502 diagnostic product Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002923 metal particle Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052707 ruthenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/08—RNA viruses
- G01N2333/165—Coronaviridae, e.g. avian infectious bronchitis virus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Virology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明提供了一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂。利用本发明方法即能够快速、准确地鉴别结合突变型抗原的抗体,保证了检测时效性,且检测效率高、成本低。
Description
本申请是针对发明名称为《一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂》、申请日为2021年10月18日、申请号为202111208160.1的原申请的分案申请。
技术领域
本发明属于免疫检测领域。更具体地,涉及一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂。
背景技术
2020年12月14日,英国首次向WHO通报新冠病毒变异株,并命名为新冠病毒B.1.1.7突变株。虽然初步评估显示新冠病毒B.1.1.7突变株不会增加疾病严重性,但其会导致更高的发病率,产生更多住院及死亡病例。2020年10月中旬首次在南非发现新冠病毒B1.351突变株,该变异株除了与新冠病毒B.1.1.7突变株在S抗原上有相同的N501Y突变外,不同之处在于还包含了对病毒感染能力有潜在重要影响的S蛋白E484K和K417N两个关键位点的突变。不同位点突变带来的差异对于指导疾病预防有着重要意义,因此能快速鉴别不同突变型抗原的诊断产品在目前尤为重要。
发明内容
本发明目的是提供一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂。利用本发明方法即能够快速、准确地鉴别结合突变型抗原的抗体,保证了检测时效性。
在一些实施方案中,本发明可以包括下述一项或多项:
1、一种方法,其中,利用包括ACE2或其片段的蛋白、第一抗原和第二抗原对样品进行免疫检测,所述方法用于鉴别结合突变型抗原的抗体;其中,所述第一抗原和所述第二抗原均包括RBD或其片段;所述第一抗原与所述第二抗原之间存在至少一个位点不同。
2、根据项目1所述的方法,其中,包括ACE2或其片段的蛋白用可检测标记物进行直接或间接标记,第一抗原和第二抗原分别直接或间接结合至固相;或;
包括ACE2或其片段的蛋白直接或间接结合至固相,第一抗原和第二抗原分别用可检测标记物进行直接或间接标记。
3、根据项目1所述的方法,其中,所述抗原为病原体抗原;
可选地,所述病原体为SARSr-CoV;
可选地,所述SARSr-CoV为SARS-CoV-2或其变体;
可选地,所述抗原包括SARS-CoV-2或其变体的RBD或其片段。
4、根据项目1-3任一项所述的方法,其中,所述位点包括SARS-CoV-2刺突蛋白第455位、第456位、第484位、第485位、第486位、第490位或第494位氨基酸。
5、根据项目1-3任一项所述的方法,其中,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位突变为非谷氨酸的其它氨基酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位为谷氨酸;
可选地,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位突变为赖氨酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位为谷氨酸。
6、根据项目1-3任一项所述的方法,其中,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位突变为非苯丙氨酸的其它氨基酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位为苯丙氨酸;
可选地,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位突变为丙氨酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位为苯丙氨酸。
7、根据项目1所述的方法,其中,所述免疫检测为免疫层析检测、ELISA检测、免疫比浊法或化学发光法检测。
8、一种鉴别结合突变型抗原的抗体的试剂,其中,包括项目1-7任一项所述的包括ACE2或其片段的蛋白、第一抗原和第二抗原。
9、一种鉴别结合突变型抗原的抗体的层析试剂,其中,包括项目1-7任一项所述的包括ACE2或其片段的蛋白、第一抗原和第二抗原、结合垫、第一检测线和第二检测线;其中,包括ACE2或其片段的蛋白用可检测标记物进行直接或间接标记,并设于结合垫上;第一检测线上设有第一抗原,所述第二检测线上设有第二抗原;或;第一检测线上设有第二抗原,所述第二检测线上设有第一抗原;其中,所述第一检测线较所述第二检测线靠近结合垫。
10、项目1-7任一项所述的方法、项目8所述的试剂或项目9所述的层析试剂在鉴别结合突变型抗原的抗体中的应用。
具体实施方式
本发明提供了一种方法,利用包括ACE2或其片段的蛋白、第一抗原和第二抗原对样品进行免疫检测,所述方法用于鉴别结合突变型抗原的抗体;其中,所述第一抗原和所述第二抗原均包括RBD或其片段;所述第一抗原与所述第二抗原之间存在至少一个位点不同。
突变型抗原是指与参考抗原相比某一位点或多个位点发生突变。
所述结合突变型抗原的抗体包括中和抗体。
本领域技术人员应该理解,本发明以待检抗体与包括ACE2或其片段的蛋白竞争结合所述抗原的免疫反应进行,通过检测结果鉴别待检样品中是否存在结合突变型抗原的抗体。
所述“包括ACE2或其片段的蛋白”可以是例如能与RBD或其片段结合的ACE2片段,例如是ACE2全长。在一些实施方案中,ACE2或其片段可以包含胞外结构域,或由胞外结构域构成。
所述第一抗原、所述第二抗原包括RBD或其片段。在一些实施方案中,其可以是例如能与ACE2或其片段结合的RBD片段,例如是受体结合基序(RBM),例如是RBD全长,例如包括RBD的S1蛋白,例如包括RBD的刺突蛋白全长。
“所述第一抗原与所述第二抗原之间存在至少一个位点不同”是指所述第一抗原与所述第二抗原在至少一个位点上氨基酸不同。本领域技术人员应该理解,第一抗原、第二抗原可以长度不同。在一些实施方案中,其可以是例如第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第501位为酪氨酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第501位为天冬酰胺。
在一些实施方案中,包括ACE2或其片段的蛋白用可检测标记物进行直接或间接标记,第一抗原和第二抗原分别直接或间接结合至固相;在一些实施方案中,包括ACE2或其片段的蛋白直接或间接结合至固相,第一抗原和第二抗原分别用可检测标记物进行直接或间接标记。
在一些实施方案中,所述标记蛋白用可检测标记物进行直接或间接标记。在一些实施方案中,可检测标记物例如金属粒子,荧光标记,发色团标记,电子致密标记,化学发光标记,电化学标记,放射性标记,核酸标记,或酶标记;在一些实施方案中,可检测标记物例如可以是罗丹明,荧光素,荧光微球,胶体金,吖啶酯,乳胶微球,彩色微球,三联钌,鲁米诺类,Eu螯合物,荧光素酶,辣根过氧化物酶,碱性磷酸酶,β-半乳糖苷酶,葡糖淀粉酶,溶菌酶,糖氧化酶,葡萄糖氧化酶,半乳糖氧化酶或葡萄糖-6-磷酸脱氢酶标记。
在一些实施方案中,所述包被蛋白直接或间接结合至固相。在一些实施方案中,固相没有特别限制,其可以是例如磁性颗粒,胶乳粒子,微量滴定板,硝酸纤维素膜,玻璃纤维素膜,尼龙膜或微流控芯片。
在一些实施方案中,所述抗原为病原体抗原;在一些实施方案中,所述病原体为SARSr-CoV(严重急性呼吸综合征相关冠状病毒);在一些实施方案中,所述SARSr-CoV为SARS-CoV-2或其变体;在一些实施方案中,所述抗原包括SARS-CoV-2或其变体的RBD或其片段。
在一些实施方案中,“所述第一抗原与所述第二抗原之间存在至少一个位点不同”,所述位点包括SARS-CoV-2刺突蛋白第455位、第456位、第484位、第485位、第486位、第490位或第494位氨基酸。
在一些实施方案中,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位突变为非谷氨酸的其它氨基酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位为谷氨酸。在一些实施方案中,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位突变为赖氨酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位为谷氨酸;在一些实施方案中,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位突变为谷氨酰胺,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位为谷氨酸;在一些实施方案中,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位突变为脯氨酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位为谷氨酸。
在一些实施方案中,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位突变为非苯丙氨酸的其它氨基酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位为苯丙氨酸;在一些实施方案中,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位突变为丙氨酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位为苯丙氨酸。
在一些实施方案中,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第485位突变为精氨酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第485位为甘氨酸。在一些实施方案中,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第494位突变为脯氨酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第494位为丝氨酸。
在一些实施方案中,“所述第一抗原与所述第二抗原之间存在至少一个位点不同”,所述位点还可以包括例如SARS-CoV刺突蛋白第442位、第472位、第479位、第480位或第487位氨基酸。
本发明所述免疫检测应做广义理解,其指通过抗原抗体特异性结合而进行的检测方法,包括例如免疫层析检测、例如ELISA检测、例如免疫比浊法检测、例如化学发光法检测,但不限于此。
本发明还提供了一种鉴别结合突变型抗原的抗体的试剂,包括所述的包括ACE2或其片段的蛋白、第一抗原和第二抗原。本发明所述试剂应做广义理解,其主要指承载免疫检测相关试剂的工具。在一些实施方案中,还可以进一步包括一些配套试剂,其可以是例如工作液,但不限于此。
在一些实施方案中,所述试剂为免疫层析试剂,包括以上任一实施方案所述的包括ACE2或其片段的蛋白、第一抗原和第二抗原、结合垫、第一检测线和第二检测线;其中,包括ACE2或其片段的蛋白用可检测标记物进行直接或间接标记,并设于结合垫上;第一检测线上设有第一抗原,所述第二检测线上设有第二抗原;或;第一检测线上设有第二抗原,所述第二检测线上设有第一抗原;其中,所述第一检测线较所述第二检测线靠近结合垫。
在一些实施方案中,所述第一检测线为T1线,所述第二检测线为T2线。
在一些实施方案中,包括ACE2或其片段的蛋白例如为人ACE2,第一抗原例如包括SARS-CoV-2变体(例如其刺突蛋白第484位为谷氨酸突变的其它氨基酸)的RBD或其片段的蛋白(例如氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示),第二抗原例如包括SARS-CoV-2(例如其刺突蛋白第484位为谷氨酸)的RBD或其片段的蛋白(例如氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示)。在一些实施方案中,所述T1线上设有第一抗原、所述T2线上设有第二抗原。在一些实施方案中,当待检样品中无待检抗体时人ACE2会与第一抗原和第二抗原均发生结合,则T1线显色、T2线显色,二者显色相当。在一些实施方案中,当待检样品中存在不结合某位点突变型抗原(例如刺突蛋白第484位为谷氨酸突变的其它氨基酸)的抗体时,该抗体基本不与人ACE2竞争结合第一抗原,但会与人ACE2竞争结合第二抗原;则T1线显色不受影响、T2线显色减弱,T1线显色强于T2线显色。在一些实施方案中,当待检样品中存在结合某位点突变型抗原(例如刺突蛋白第484位为谷氨酸突变的其它氨基酸)的抗体时,该抗体会与人ACE2竞争结合第一抗原,但基本不与人ACE2竞争结合第二抗原;则T1线显色减弱、T2线显色不受影响,T1线显色弱于T2线显色。利用本发明两种抗原,设定双重检测线,可以快速简便地鉴定出突变型抗原,在一些实施方案中,可以更加优越地检测灵敏度。
在一些实施方案中,包括ACE2或其片段的蛋白例如为人ACE2,第一抗原例如包括SARS-CoV-2变体(例如其刺突蛋白第456位为苯丙氨酸突变的其它氨基酸)的RBD或其片段的蛋白(例如氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示),第二抗原例如包括SARS-CoV-2(例如其刺突蛋白第456位为苯丙氨酸)的RBD或其片段的蛋白(例如氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示)。在一些实施方案中,所述T1线上设有第一抗原、所述T2线上设有第二抗原。
本发明还提供了以上任一实施方案所述方法、试剂及层析试剂在鉴别结合突变型抗原的抗体中的应用。
利用本发明方法同样也能鉴别SARSr-CoV其它冠状病毒的突变型抗原。该类病毒通过受体结合结构域RBD与ACE2的结合入侵细胞。
本发明中,待测样品包括健康或病理状态的血液(包括血清、血浆或全血)样本、淋巴样本、唾液样本或关节滑液。
本发明方案不限于SARSr-CoV突变型的鉴别,根据本发明原理,其它抗原突变型的鉴别也可以采用本发明方案,本发明方案在目前新冠病毒变异迅速的现状下,能发挥更大的优势,本发明方案也为未来一些新型病原体突变型的鉴定提供新的思路。
实施例1胶体金平台鉴别突变型
H83抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,H84抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,Ab13抗体为结合参考抗原(例如H83抗原)的抗体;Ab13抗体、人ACE2可购自菲鹏生物;其它试剂和材料均为市购。
1.标记
(1)胶体金制备:采用传统柠檬酸钠还原法,首先将氯金酸溶液加热至沸腾,迅速加入一定比例的柠檬酸三钠溶液,搅拌均匀,待溶液颜色变为酒红色且不再变化时停止加热,冷却至室温,得到浓度为万分之四的胶体金溶液;
(2)标记:向胶体金溶液中加入0.2M K2CO3溶液调节pH至6.0-7.5;
(3)离心:向调节pH后的胶体金溶液中加入人ACE2并混匀,后加入BSA封闭,终止标记,离心10000rpm/7min/4℃,去上清;
(4)复溶:重悬至100uL,超声2-3次;
(5)铺金:将重悬得到的浓缩金稀释并铺于玻璃纤维素膜,然后放入冻干机冻干(1-2h)或者放入37℃干燥房干燥过夜,制得结合垫。
2.包被
(1)将硝酸纤维素膜与底板组装好备用;
(2)将H84抗原和H83抗原稀释至0.1-1.0mg/mL,用喷金画膜仪,在硝酸纤维素膜上均匀的画T1和T2线(间距6mm),然后放入37℃恒温箱中进行干燥,至少干燥45min以上。
T1线较T2线靠近结合垫,将样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫依次搭接组装于底板上,组装切条,加样检测。
3.检测
(1)待检样品:阴性血清、Ab13、抗体阳性血清等。
(2)检测方法:使用试纸条进行检测。
4.实验结果
表1、H83和H84对阴性血清和Ab13抗体的检测结果
表2、H83和H84对阴性血清和23#、25#血清的检测结果
包被抗原 | 阴性血清 | 23# | 25# |
T1:H83 | C4+ | C6 | C6 |
T2:H84 | C4 | C4 | C4 |
表1、2中,字母B代表不显色,字母C后的数字代表显色强度,数字越大,显色越弱。
表1结果显示,检测阴性血清时,T1和T2的显色基本相当,而加入Ab13抗体后,H83对应的检测线的显色明显降低,而H84对应的检测线显色无明显降低,可见Ab13抗体结合包括刺突蛋白第484位谷氨酸的非突变型抗原;阳性血清23#、25#的检测结果见表2,结果显示,加入该样本时,H83对应的检测线T1的显色明显降低,而T2线显色无明显降低,可见阳性血清中存在结合刺突蛋白第484位谷氨酸的非突变型抗原的抗体。
实施例2彩色微球鉴别突变型
1.标记
取彩色微球,300W超声后,取0.1ml乳胶颗粒加入0.9ml 100mM MES中,涡旋混匀;15000rmp 15min离心,后去上清;加入1.0ml 100mM MES超声,加入适量MES和NHS活化微球10min;15000rmp 15min离心,后去上清;加入1.0ml 100mM MES超声,加入适量ACE2,37℃涡旋反应过夜;15000rmp 15min离心,后去上清,加入BSA封闭,超声,37℃反应4h;15000rmp15min离心,后去上清并清洗,超声;15000rmp 15min离心,后去上清重悬;将重悬得到的浓缩液稀释并铺于玻璃纤维素膜,然后放入冻干机冻干(1-2h)或者放入37℃干燥房干燥过夜,制得结合垫。
2.包被
(1)将硝酸纤维素膜与底板组装好备用;
(2)将H84抗原和H83抗原稀释至0.1-1.0mg/mL,用喷金画膜仪,在NC膜上均匀的画T1和T2线(间距6mm),然后放入37℃恒温箱中进行干燥,至少干燥45min以上。
T1线较T2线靠近结合垫,将样品垫、结合垫、NC膜、吸水垫依次搭接组装于底板上,组装切条,加样检测。
3.检测
(1)待检样品:生理盐水、阴性血清、Ab13、抗体阳性血清等。
(2)检测方法:使用试纸条进行检测。
4.实验结果
表3、H84和H83对生理盐水、阴性血清和Ab13抗体的检测结果
包被抗原 | 生理盐水 | 阴性血清 | Ab13(20ug/ml) | Ab13(5ug/ml) |
T2:H83 | C4 | C4 | C9 | C7+ |
T1:H84 | C4 | C4+ | C3 | C3 |
表4、H83和H84对阴性血清和Ab13抗体的检测结果
包被抗原 | 阴性血清 | Ab13(20ug/ml) |
T2:H84 | C4- | C5+ |
T1:H83 | C3 | B+ |
表3、表4结果显示,检测生理盐水、阴性血清时,T1和T2的显色基本相当,而加入Ab13抗体后,H83对应的检测线的显色明显降低,而H84对应的检测线显色无明显降低,可见Ab13抗体结合包括刺突蛋白第484位谷氨酸的非突变型抗原;阳性血清1#等16份样本的检测结果见表5,结果显示,加入此16份样本时,检测线T2的显色明显降低,而T1线显色无明显降低,可见阳性血清中存在结合包括刺突蛋白第484位谷氨酸的非突变型抗原的抗体。阳性血清36#、47#检测结果见表6,结果显示,检测线T1显色降低,且降低相比表5更为明显(血清样本均经过稀释),T1线显色无明显降低,可见,阳性血清中存在结合包括刺突蛋白第484位赖氨酸的突变型抗原的抗体;并且相比检测结合非突变型抗原的抗体,检测结合突变型抗原的抗体具有更高的灵敏度,在新冠病毒变异多的现阶段具有提高指示结合突变株抗原的抗体的作用。
表5、H84和H83对抗体阳性血清的检测结果
表6、H84和H83对36#、47#阳性血清的检测结果
a:稀释比例
表3、4、5、6中,字母B代表不显色,字母C后的数字代表显色强度,数字越大,显色越弱。
实施例3彩色微球鉴别突变型
H85抗原氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。H85抗原包被于T1检测线,H83抗原包被于T2检测线,其它标记、包被、检测过程同实施例2。当检测样品为阴性血清时,T1、T2检测线显色相当;当检测样品中含有结合包括刺突蛋白第456位苯丙氨酸的非突变型抗原的抗体时,T2检测线显色减弱,T1检测线显色强于T2至少2个色卡;当检测样品中含有包括结合刺突蛋白第456位丙氨酸的抗体时,T1检测线显色减弱、几乎消线,T2检测线显色强于T1至少2个色卡。
H86抗原氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。H86抗原包被于T1检测线,H83抗原包被于T2检测线,其它标记、包被、检测过程同实施例2。当检测样品为阴性血清时,T1、T2检测线显色相当;当检测样品中含有结合包括刺突蛋白第484位谷氨酸的非突变型抗原的抗体时,T2检测线显色减弱,T1检测线显色强于T2至少2个色卡;当检测样品中含有包括结合刺突蛋白第484位谷氨酰胺的抗体时,T1检测线显色减弱、几乎消线,T2检测线显色强于T1至少2个色卡;通过双重检测线,可以更准确、灵敏地识别突变型抗原。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
序列表
SEQ ID NO:1:
RVQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSA
SFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKL
PDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGST
PCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKST
NLVKNKCVNF
SEQ ID NO:2:
MFVFLVLLPLVSSQCVNLTTRTQLPPAYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDL
FLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGT
TLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLGVYYHKNNKSWMESEFRVY
SSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLV
RDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYV
GYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQ
PTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFST
FKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDF
TGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSTPCNG
VKGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLV
KNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDIT
PCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQDVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSN
VFQTRAGCLIGAEHVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTNSPRRAR
SEQ ID NO:3:
RVQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSA
SFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKL
PDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLARKSNLKPFERDISTEIYQAGST
PCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKST
NLVKNKCVNF
SEQ ID NO:4:
MFVFLVLLPLVSSQCVNLTTRTQLPPAYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDL
FLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGT
TLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLGVYYHKNNKSWMESEFRVY
SSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLV
RDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYV
GYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQ
PTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFST
FKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDF
TGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSTPCNG
VQGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLV
KNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDIT
PCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQDVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSN
VFQTRAGCLIGAEHVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTNSPRRAR。
Claims (10)
1.一种方法,其特征在于,利用包括ACE2或其片段的蛋白、第一抗原和第二抗原对样品进行免疫检测,所述方法用于鉴别结合突变型抗原的抗体;其中,所述第一抗原和所述第二抗原均包括RBD或其片段;所述第一抗原与所述第二抗原之间存在至少一个位点不同。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,包括ACE2或其片段的蛋白用可检测标记物进行直接或间接标记,第一抗原和第二抗原分别直接或间接结合至固相;或;
包括ACE2或其片段的蛋白直接或间接结合至固相,第一抗原和第二抗原分别用可检测标记物进行直接或间接标记。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述抗原为病原体抗原;
可选地,所述病原体为SARSr-CoV;
可选地,所述SARSr-CoV为SARS-CoV-2或其变体;
可选地,所述抗原包括SARS-CoV-2或其变体的RBD或其片段。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法,其特征在于,所述位点包括SARS-CoV-2刺突蛋白第455位、第456位、第484位、第485位、第486位、第490位或第494位氨基酸。
5.根据权利要求1-3任一项所述的方法,其特征在于,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位突变为非谷氨酸的其它氨基酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位为谷氨酸;
可选地,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位突变为赖氨酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第484位为谷氨酸。
6.根据权利要求1-3任一项所述的方法,其特征在于,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位突变为非苯丙氨酸的其它氨基酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位为苯丙氨酸;
可选地,第一抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位突变为丙氨酸,第二抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白第456位为苯丙氨酸。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述免疫检测为免疫层析检测、ELISA检测、免疫比浊法或化学发光法检测。
8.一种鉴别结合突变型抗原的抗体的试剂,其特征在于,包括权利要求1-7任一项所述的包括ACE2或其片段的蛋白、第一抗原和第二抗原。
9.一种鉴别结合突变型抗原的抗体的层析试剂,其特征在于,包括权利要求1-7任一项所述的包括ACE2或其片段的蛋白、第一抗原和第二抗原、结合垫、第一检测线和第二检测线;其中,包括ACE2或其片段的蛋白用可检测标记物进行直接或间接标记,并设于结合垫上;第一检测线上设有第一抗原,所述第二检测线上设有第二抗原;或;第一检测线上设有第二抗原,所述第二检测线上设有第一抗原;其中,所述第一检测线较所述第二检测线靠近结合垫。
10.权利要求1-7任一项所述的方法、权利要求8所述的试剂或权利要求9所述的层析试剂在鉴别结合突变型抗原的抗体中的应用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110147628 | 2021-02-03 | ||
CN2021101476284 | 2021-02-03 | ||
CN202111208160.1A CN114859042B (zh) | 2021-02-03 | 2021-10-18 | 一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202111208160.1A Division CN114859042B (zh) | 2021-02-03 | 2021-10-18 | 一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN116973566A true CN116973566A (zh) | 2023-10-31 |
Family
ID=82628052
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202111208160.1A Active CN114859042B (zh) | 2021-02-03 | 2021-10-18 | 一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂 |
CN202310659344.2A Pending CN116973566A (zh) | 2021-02-03 | 2021-10-18 | 一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202111208160.1A Active CN114859042B (zh) | 2021-02-03 | 2021-10-18 | 一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (2) | CN114859042B (zh) |
Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20030219752A1 (en) * | 1995-12-07 | 2003-11-27 | Diversa Corporation | Novel antigen binding molecules for therapeutic, diagnostic, prophylactic, enzymatic, industrial, and agricultural applications, and methods for generating and screening thereof |
EP0919568A1 (en) * | 1997-12-01 | 1999-06-02 | Sorin Diagnostics S.r.l. | Escape mutant of the surface antigen of hepatitis B virus |
ES2384497T3 (es) * | 2005-02-08 | 2012-07-05 | The New York Blood Center, Inc. | Anticuerpos monoclonales neutralizantes contra el coronavirus asociado al síndrome respiratorio agudo severo |
SI3556396T1 (sl) * | 2010-08-31 | 2022-09-30 | Theraclone Sciences, Inc. | Nevtralizacijska protitelesa proti virusu človeške imunske pomanjkljivosti (HIV) |
EP2731626B1 (en) * | 2011-07-11 | 2018-12-19 | THE UNITED STATES OF AMERICA, represented by the S | Photosensitizing antibody-fluorophore conjugates |
CA2896282C (en) * | 2013-01-04 | 2021-07-20 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for detecting protease activity in biological systems |
CN108445223A (zh) * | 2018-02-11 | 2018-08-24 | 北京科美生物技术有限公司 | 检测目标抗-Carp抗体的均相免疫检测试剂盒及其应用 |
CN110818800B (zh) * | 2018-08-14 | 2023-09-15 | 上海透景诊断科技有限公司 | 一种通过构建桥连复合物间接检测目的分析物的检测方法 |
CN111303254A (zh) * | 2020-02-20 | 2020-06-19 | 北京新创生物工程有限公司 | 新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗原检测试剂盒 |
CN111366728A (zh) * | 2020-03-27 | 2020-07-03 | 重庆探生科技有限公司 | 一种用于检测新型冠状病毒SARS-CoV-2的免疫层析试剂盒 |
CN111849994B (zh) * | 2020-03-31 | 2021-11-16 | 厦门大学 | SARS-CoV-2 S蛋白或RBD蛋白的核酸适配体及其应用 |
CN111825750A (zh) * | 2020-05-21 | 2020-10-27 | 谭骏 | Ace2受体保护性合成短肽在新型冠状病毒感染的应用 |
CN111825762A (zh) * | 2020-06-17 | 2020-10-27 | 武汉华美生物工程有限公司 | 抗sars-cov-2病毒s蛋白rbd结构域的纳米抗体及其用途 |
CN112079906B (zh) * | 2020-07-15 | 2022-11-04 | 张影 | 一种新型冠状病毒刺突蛋白、相关生物材料及其应用、检测试纸和检测试剂盒 |
CN112028977A (zh) * | 2020-08-18 | 2020-12-04 | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 | 一种新型冠状病毒n蛋白抗原变体及其在新型冠状病毒抗体检测中的应用 |
CN112111005B (zh) * | 2020-09-09 | 2021-04-23 | 中国检验检疫科学研究院 | 一种能与阳性血清竞争结合非洲猪瘟病毒b646l抗原的单克隆抗体及其应用 |
CN112255420B (zh) * | 2020-12-23 | 2021-03-05 | 北京百普赛斯生物科技股份有限公司 | 利用bli技术检测新型冠状病毒中和性抗体的方法 |
CN112285348B (zh) * | 2020-12-29 | 2021-03-16 | 北京百普赛斯生物科技股份有限公司 | 新冠病毒疫苗表达抗原蛋白的电化学发光免疫检测试剂盒 |
-
2021
- 2021-10-18 CN CN202111208160.1A patent/CN114859042B/zh active Active
- 2021-10-18 CN CN202310659344.2A patent/CN116973566A/zh active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN114859042B (zh) | 2023-11-03 |
CN114859042A (zh) | 2022-08-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN111983217B (zh) | 一种样本处理液及其应用 | |
US8426125B2 (en) | Method of pretreating specimen and immunoassay using the same | |
JP5557450B2 (ja) | 測定対象成分の免疫測定法 | |
Granade et al. | Rapid detection and differentiation of antibodies to HIV-1 and HIV-2 using multivalent antigens and magnetic immunochromatography testing | |
WO2011105537A1 (ja) | 偽陽性反応を抑制する検体抽出液 | |
CN111999507A (zh) | 一种检测新型冠状病毒抗体的荧光免疫层析试纸 | |
CN111796093A (zh) | 一种新型冠状病毒、mers与甲/乙型流感病毒四合一快速检测试剂盒 | |
US20220074938A1 (en) | Method of detecting pathogens and/or antigens in samples | |
US11768209B2 (en) | Method and reagent for measuring thyroglobulin | |
CN114859042B (zh) | 一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂 | |
CN113203856A (zh) | 检测冠状病毒抗体的试剂盒、冠状病毒抗体的检测方法 | |
CN114814216B (zh) | 用于鉴别新冠核衣壳蛋白的核酸适体-抗体混合夹心法 | |
CN111273033A (zh) | 一种高尔基体蛋白73的测定试剂盒及其化学发光测定方法 | |
JP2004239885A (ja) | イオン性界面活性剤存在下における免疫測定法 | |
CN114910643B (zh) | 一种鉴别结合突变型抗原的抗体的方法及试剂 | |
CN114910650A (zh) | 检测抗膜突蛋白-IgG抗体的试剂在制备检测血管内皮损伤的试剂盒中的应用 | |
CN113252911B (zh) | SARS-CoV-2中和抗体的检测试剂盒及其应用 | |
CN114910647A (zh) | 细丝蛋白-A-IgG抗体在制备检测血管内皮损伤试剂盒中的应用 | |
CN114910649A (zh) | 检测抗α-烯醇化酶-IgG抗体的试剂在制备检测血管内皮损伤的试剂盒中的应用 | |
CN114460287A (zh) | 一种中和抗体的检测方法和试剂盒 | |
Xu et al. | Determination of human COVID‐19 total antibodies in serum using a time‐resolved fluorescence immunoassay | |
JP5640271B2 (ja) | 新規ペプチド及びその使用 | |
CN113447657B (zh) | 一种检测抗乌头酸水合酶-IgG抗体的检测试剂盒 | |
WO2022054822A1 (ja) | 偽陽性の抑制により特異性を改善した検査キット | |
WO2024005055A1 (ja) | 検査方法、検査試薬、及び検査キット |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |