CN116847856A - 酒精性肝损伤抑制用氢水 - Google Patents

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Abstract

一种与乙醇混合的酒精性肝损伤抑制用氢水，氢溶解浓度为550～5600ppb，与乙醇混合时，乙醇在氢水中的浓度为1～4％。

Description

酒精性肝损伤抑制用氢水
技术领域
本发明涉及一种酒精性肝损伤抑制用氢水。
背景技术
迄今为止，已经有酒精性肝损伤的各种病症的报道(例如，宿醉等轻度病症、昏迷和干细胞坏死等严重病症)，从抑制这些肝损伤的观点来看，已经使用了含有各种活性成分的酒精性肝损伤抑制剂。
作为该酒精性肝损伤抑制剂，出现了例如含有赖氨酸和柠檬酸作为活性成分的抑制剂(例如参照专利文献1)、含有脯氨酸或赖氨酸的预防用组合物(例如参照专利文献2)、以及以明胶或可溶性胶原蛋白作为活性成分的抑制剂(例如参照专利文献3)等提案。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本公开专利公报特开2007-161642号公报
专利文献2：日本公开专利公报特开平6-116144号公报
专利文献3：日本公开专利公报特开平6-247876号公报
发明内容
发明要解决的技术问题
此处，就上述现有技术中的酒精性肝损伤抑制剂而言，需要提取或合成活性成分，因此存在抑制剂的制造复杂且成本增加的问题。
本发明正是为解决上述问题而完成的，其目的在于：提供一种能够有效地抑制酒精性肝损伤、同时安全性高、制备容易且廉价的酒精性肝损伤抑制用氢水。
用以解决技术问题的技术方案
为了达成上述目的，本发明的酒精性肝损伤抑制用氢水是与乙醇混合的酒精性肝损伤抑制用氢水，其中氢溶解浓度为550～5600ppb，乙醇在与乙醇混合后的氢水中的浓度为1～4％。
发明效果
根据本发明，能够提供一种安全性高、制备容易且廉价、进而能够有效地抑制酒精性肝损伤的酒精性肝损伤抑制用氢水。
附图说明
图1为示意性地表示生成本发明的实施方式所涉及的电解氢水的电解水生成装置的构成的构成图。
具体实施方式
本发明的氢水是一种与乙醇混合的酒精性肝损伤抑制用氢水，氢溶解浓度为550～5600ppb，乙醇在与乙醇混合后的氢水中的浓度为1～4％。
更具体而言，使用本发明的氢水处理来源于人肝癌的模型细胞(HepG2)时，与使用不含氢的净化水进行处理的情况(细胞存活率50％)相比，确认到了在550～5600ppb范围的氢溶解浓度的整个范围内，细胞存活率提升，能够抑制肝细胞死亡。
一般认为这是因为，本发明的氢水中的溶解氢使由乙醇产生醛的酶即ADH(醇脱氢酶)的活性降低，因此抑制了乙醇在肝脏中分解而引起的醛的生成，降低了起因于醛的细胞毒性的细胞损伤(线粒体损伤或DNA损伤)，故酒精性肝损伤得到抑制。
还这样认为：本发明的氢水中的溶解氢使ALDH(醛脱氢酶)的活性提升，因此醛的代谢(醛氧化而分解成醋酸)得到促进，起因于醛的细胞毒性的细胞损伤(线粒体损伤或DNA损伤)降低，故酒精性肝损伤得到抑制。
需要说明的是，乙醇在氢水中的浓度小于1％的情况下，由于乙醇的浓度过低，因此有时无法充分地得到对上述酒精性肝损伤的抑制效果。
氢在氢水中的溶解浓度小于550ppb的情况下，有时抑制上述酒精性肝损伤的效果会降低。
需要说明的是，从提升抑制上述酒精性肝损伤的效果的观点来看，氢在氢水中的溶解浓度优选为1100～1300ppb。
作为本发明的电解氢水，例如能够使用对水进行电解处理而生成的电解氢水。
图1为示意性地表示生成本实施方式所涉及的电解氢水的电解水生成装置的构成的构成图。
电解水生成装置1包括多个电解槽3、4，在图1中示出了包括一对电解槽3、4的电解水生成装置1。需要说明的是，电解水生成装置1也可以包括三个以上的电解槽3、4。
电解槽3、4串联连接，电解槽3相对于电解槽4设置在上游侧。
电解槽3包括用于将水电解的电解室30、在电解室30内彼此相对着布置的第一供电体31和第二供电体32、将电解室30划分为第一供电体31侧的第一极室30A和第二供电体32侧的第二极室30B的隔膜33。
将第一供电体31和第二供电体32中的一者用作阳极供电体，另一者用作阴极供电体。将水供向电解室30的第一极室30A和第二极室30B，将直流电压施加给第一供电体31和第二供电体32，由此而在电解室30内产生水的电解。
上游侧电解室30的隔膜33例如使用由具有磺酸基的氟类树脂形成的固体高分子膜。在隔膜33的两个面上形成有由铂形成的镀层。另一方面，第一供电体31和第二供电体32例如使用在由钛等形成的膨胀金属(expanded metal)等网状金属的表面上形成有铂的镀层的供电体。这种网状的第一供电体31和第二供电体32能够一边夹持隔膜33一边使水遍布隔膜33的表面，促进电解室30内的电解。
隔膜33的镀层与第一供电体31和第二供电体32抵接并电气连接。隔膜33使电解产生的离子通过，第一供电体31和第二供电体32经由隔膜33电气连接。在使用由固体高分子材料形成的隔膜33的电解室30中进行电解，电解氢水的pH值不上升(也就是说，电解室30内的水维持为中性)。
水在电解室30内电解而产生氢气及氧气。例如，在将第一供电体31用作阳极供电体的情况下，在第一极室30A中产生氧气，生成溶入有氧气的电解氧水。另一方面，在第二极室30B中产生氢气，生成溶入有氢气的电解氢水。在将第一供电体31用作阴极供电体的情况下，在第一极室30A中产生氢气，生成溶入有氢气的电解氢水。另一方面，在第二极室30B中产生氧气，生成溶入有氧气的电解氧水。
电解槽4包括在将水电解的电解室40内彼此相对着布置的第一供电体41和第二供电体42、将电解室40划分为第一供电体41侧的第一极室40A和第二供电体42侧的第二极室40B的隔膜43。
将第一供电体41和第二供电体42中的一者用作阳极供电体，另一者用作阴极供电体。将水供向电解室40的第一极室40A和第二极室40B，将直流电压施加给第一供电体41和第二供电体42，由此而在电解室40内产生水的电解。
隔膜43例如由聚四氟乙烯(PTFE)亲水膜构成。夹着隔膜43相对着布置的第一供电体41和第二供电体42例如使用钛等的金属板。第一供电体41和第二供电体42布置在远离隔膜43的位置。
在上述构成的电解槽4中，电解氢水的pH值一边上升，也就是说阴极室内的水的碱强度一边提升，电解一边进行下去。
在将第一供电体41用作阳极供电体的情况下，在第一极室40A中产生氧气，生成溶入有氧气的电解氧水。另一方面，在第二极室40B中产生氢气，生成溶入有氢气的电解氢水。将第一供电体41用作阴极供电体的情况下，在第一极室40A中产生氢气，生成溶入有氢气的电解氢水。另一方面，在第二极室40B中产生氧气，生成溶入有氧气的电解氧水。
电解水生成装置1具有用于向电解室30和40供给电解水的供水路20、及用于从电解室30及40排出电解水的排水路61和62。
从供水路20向电解水生成装置1供给原水。原水通常使用自来水，但除此之外，例如也能够使用井水、地下水等。在电解水生成装置1被用来生成饮用电解氢水等情况下，能够在供水路20上适当地设置对原水进行净化的净化滤芯等。
供水路20分支为供水路21和供水路22。供水路21连接在第一极室30A的下端部。供水路22连接在第二极室30B的下端部。流入供水路20的水通过供水路21和22流入第一极室30A、第二极室30B。
在供水路21、22的路径上设置有流量调节阀23，该流量调节阀23调节在供水路21、22中流动的水的量。利用流量调节阀23调节流入第一极室30A和第二极室30B的水量。
排水路61连接在第一极室40A的上端部，这样从第一极室40A流出的水就会流入排水路61。排水路62连接在第二极室40B的上端部，这样从第二极室40B流出的水就会流入排水路62。
在第一极室40A和第二极室40B与排水路61、62之间设置有流路切换阀63，该流路切换阀63选择性地切换第一极室40A和第二极室40B与排水路61、62的连接状态。
供向供电体31、32与供电体41、42的电解电流由控制部(未图示)控制。控制部掌管对供电体31、32以及供电体41、42等各部分的控制工作。控制部例如具有执行各种运算处理、信息处理等的CPU(Central Processing Unit)以及存储掌管CPU工作情况的程序和各种信息的存储器等。控制部例如控制第一供电体31、41和第二供电体32、42的极性。
通过相互改变第一供电体31、41和第二供电体32、42的极性，能够从排水路61排出电解氢水或电解氧水中所需要的电解水，将不需要的电解水从排水路62排出。使第一供电体31、41和第二供电体32、42作为阳极供电体或阴极供电体发挥作用的时间均匀化，还能够抑制水锈在电解室30及电解室40中的附着。
需要说明的是，电解室30的第一极室30A和电解室40的第一极室40A通过第一水路51串联连通。电解室30的第二极室30A和电解室40的第二极室40A通过第二水路52串联连通。
需要说明的是，在上述实施方式中，使其为使用与乙醇混合的酒精性肝损伤抑制用氢水的构成，但例如也可以使用通过使氢气直接与乙醇溶液接触而使氢溶解于乙醇溶液的构成。
更具体而言，例如能够采用以下方法：使用包括获得氢气的套筒和布置在套筒的内部且形成有多个孔的中空纤维的膜模组，经由形成于中空纤维的孔，通过鼓泡使氢气直接与乙醇溶液接触，生成溶解有氢的乙醇溶液。
在该情况下，也是通过将乙醇的浓度设定为1～4％，并且将氢溶解浓度设定为550～5600ppb，而能够得到与上述氢水相同的效果。
(实施例)
以下，根据实施例对本发明进行说明。需要说明的是，本发明不受这些实施例的限定，能够基于本发明的主旨对这些实施例进行变形或变更，而不应把这些变形或变更排除在本发明范围之外。
＜电解氢水的制备＞
使用电解水生成装置(日本Trim公司制造，商品名称：TRIMION GRACE)，在温度为22℃、流速为1.5L/min的条件下得到了氢溶解浓度不同的等级1～4的电解氢水，并且得到了经微碳过滤的净化水。
接着，进行了上述各等级的电解氢水的pH值和氢溶解浓度的测量。需要说明的是，使用pH值测试仪(HORIBA公司制造，商品名称：LAQUA act D-71)进行了pH值的测量，使用溶解氢计DH-35A(东亚DKK公司制造)进行了氢溶解浓度的测量。
等级1：800ppb、pH值7
等级2：860ppb、pH值8
等级3：1120ppb、pH值9
等级4：1320ppb、pH值10
＜电解氢水的处理用培养基(电解氢水培养基)的制作＞
用上述净化水或各等级的电解氢水将由粉体调整得到的5×杜氏改良伊戈尔培养基(DMEM；Dulbecco's Modified Eagle Medium)稀释五倍，作为电解氢水的处理用培养基(也就是说，20％的5×DMEM和80％的电解氢水或混合有净化水的氢水混合物即处理用培养基)使用。
因此，各等级的电解氢水培养基中的氢溶解浓度如下。
等级1：800ppb×4/5＝640ppb
等级2：860ppb×4/5＝688ppb
等级3：1120ppb×4/5＝896ppb
等级4：1320ppb×4/5＝1056ppb
＜细胞的培养＞
从理研生物资源研究中心(RIKEN BRC)获得来自人体的细胞即HepG2细胞株，在含有10％的胎牛血清(Fetal Bovine Serum；FBS)(Sigma-Aldrich、F7524)和1％的青霉素－链霉素(富士胶片和光纯药公司制造、商品名称：168-23191)的DMEM中在37℃、5％CO2的条件下进行了培养。
＜乙醇对肝细胞的毒性的评价＞
以5.0×104细胞/24孔板(5.0×104细胞/24孔板)对HepG2细胞进行接种，预培养24小时后，用0～8％的乙醇处理了24小时。然后，使用胰蛋白酶将细胞剥离并使其悬浮，用台盼蓝(富士胶片和光纯药公司制造、商品名称：207-17081)的染色法(台盼蓝法)测量活细胞数，使用下式(1)计算出了HepG2细胞在乙醇处理中的细胞存活率。以上结果示于表1。
[式1]
细胞存活率＝(各乙醇浓度的活细胞数/乙醇浓度为0％的情况下的活细胞数)×100(1)
【表1】
如表1所示，随着乙醇浓度的增加，细胞存活率减少，可知乙醇对肝细胞具有毒性。
＜电解氢水对乙醇毒性的作用的评价＞
以5.0×104细胞/24孔板对HepG2细胞进行接种，预培养24小时后，用净化水、等级1～4的电解氢水培养基、含有4％乙醇的净化水以及含有4％乙醇的等级1～4的电解氢水培养基处理了24小时。然后，使用胰蛋白酶将细胞剥离并使其悬浮，用台盼蓝(富士胶片和光纯药公司制造、商品名称：207-17081)的染色法(台盼蓝法)测量活细胞数，使用下式(2)计算出了HepG2细胞在乙醇处理中的细胞存活率。以上结果示于表2、表3。
[式2]
细胞存活率＝(乙醇处理组的活细胞数/乙醇未处理组的活细胞数)×100 (2)
【表2】
【表3】
如表3所示，与用含有4％乙醇的净化水(不含电解氢水)进行了处理的情况相比，在用含有4％乙醇的等级1～4的电解氢水培养基进行了处理的情况下，细胞存活率提升，可知等级1～4的电解氢水具有减轻乙醇对肝细胞的毒性的效果。
＜电解氢水对乙醇浓度的作用的评价＞
以5.0×104细胞/24孔板对HepG2细胞进行接种，预培养24小时后，用含有0～8％乙醇的净化水以及含有0～8％乙醇的等级4的电解氢水培养基处理了24小时。然后，使用胰蛋白酶将细胞剥离并使其悬浮，用台盼蓝(富士胶片和光纯药公司制造、商品名称：207-17081)的染色法(台盼蓝法)测量活细胞数，使用下式(3)计算出了HepG2细胞在乙醇处理中的细胞存活率。以上结果示于表4、表5。
[式3]
细胞存活率＝(各乙醇浓度的活细胞数/乙醇浓度为0％的情况下的活细胞数)×100(3)
【表4】
【表5】
如表5所示，与用含有1～4％乙醇的净化水(不含电解氢水)进行了处理的情况相比，在用含有1～4％乙醇的等级4的电解氢水培养基进行了处理的情况下，细胞存活率提升，可知在等级4的电解氢水含有1～4％乙醇的情况下，具有减轻乙醇对肝细胞的毒性的效果，特别是在含有2～4％乙醇的情况下，具有大幅度地减轻乙醇对肝细胞的毒性的效果。
＜溶解氢对乙醇毒性的作用的评价＞
以5.0×104细胞/24孔板对HepG2细胞进行接种，预培养24小时后，用净化水、等级4的电解氢水培养基、进行过两次高压蒸汽灭菌锅(AC)处理的等级4的电解氢水培养基(AC)、用缓冲液(HEPES)进行了pH值调节(中和)的等级4的电解氢水培养基(pH)、氢溶解浓度为1040ppb的氢水培养基(用氢溶解浓度为1300ppb的氢水将上述5×杜氏改良伊戈尔培养基(DMEM)稀释5倍后的培养基)、以及使在上述水或培养基中分别含有4％乙醇而得到的水或培养基处理了24小时。然后，使用胰蛋白酶将细胞剥离并使其悬浮，用台盼蓝(富士胶片和光纯药公司制造、商品名称：207-17081)的染色法(台盼蓝法)测量活细胞数，使用上式(2)计算出了HepG2细胞在乙醇处理中的细胞存活率。以上结果示于表6、表7。
【表6】
【表7】
如表7所示，在用含有4％乙醇且已进行过两次高压蒸汽灭菌锅处理的等级4的电解氢水培养基(AC)进行了处理的情况下，细胞存活率与用含有4％乙醇的净化水(不含电解氢水)进行了处理的情况大致相同，可知通过高压蒸汽灭菌锅处理去除了溶解氢的电解氢水不具有减轻乙醇对肝细胞的毒性的效果。即可知电解氢水中的氢具有减轻乙醇对肝细胞的毒性的效果。
在用含有4％乙醇且已用缓冲液(HEPES)进行了pH值调节(中和)的等级4的电解氢水培养基(pH)进行了处理的情况下，细胞存活率与用含有4％乙醇的等级4的电解氢水培养基进行了处理的情况大致相同，可知对电解氢水的pH值调节没有影响。
在用氢溶解浓度为1040ppb的氢水培养基进行了处理的情况下，细胞存活率与用含有4％乙醇的等级4的电解氢水培养基进行了处理的情况差不多，即使在不是通过电解处理生成的氢水的情况下，也与电解氢水一样，具有减轻乙醇对肝细胞的毒性的效果。
＜氢水对细胞培养液中的乙醇浓度的作用的评价＞
以2.0×105细胞/6孔板对HepG2细胞进行接种，预培养24小时后，用含有4％乙醇的净化水、含有4％乙醇的等级4的电解氢水培养基、含有4％乙醇并进行过两次高压蒸汽灭菌锅(AC)处理的等级4的电解氢水培养基(AC)、以及含有4％乙醇且氢溶解浓度为1040ppb的氢水培养基(用氢溶解浓度为1300ppb的氢水将上述5×杜氏改良伊戈尔培养基(DMEM)稀释5倍后的培养基)处理了24小时。
然后，在培养上清液中，使用QuantiChromTM乙醇检测试剂盒(QuantiChromTMEthanol Assay Kit)测量了乙醇浓度[％]。以上结果示于表8。
【表8】
由表8可知：与用净化水和已进行过两次高压蒸汽灭菌锅处理的等级4的电解氢水培养基(AC)处理了的情况相比，在用等级4的电解氢水培养基及氢水培养基进行了处理的情况下，乙醇在细胞培养液中的浓度高。
可以认为：这是因为等级4的电解氢水培养基和氢水培养基中的溶解氢使ADH(醇脱氢酶)的活性降低，乙醇的代谢(乙醇的氧化引起的醛的生成)得到了抑制之故。
＜氢水对细胞中的醛浓度的作用的评价＞
以1.0×106细胞/10-cm培养皿对HepG2细胞进行接种，预培养24小时后，用含有4％乙醇的净化水、含有4％乙醇的等级4的电解氢水培养基、含有4％乙醇并进行过两次高压蒸汽灭菌锅(AC)处理的等级4的电解氢水培养基(AC)、以及含有4％乙醇且氢溶解浓度为1040ppb的氢水培养基(用氢溶解浓度为1300ppb的氢水将上述5×杜氏改良伊戈尔培养基(DMEM)稀释5倍后的培养基)处理了24小时。
然后，在培养细胞的裂解液(Lysis bf)的溶解上清液中，使用EnzyChromTM乙醛检测试剂盒(EnzyChromTM Acetaldehyde Assay Kit)，测量了乙醛在1.0×106细胞中的浓度[nmol]。以上结果示于表9。
【表9】
如表9所示，可知：与用净化水和已进行过两次高压蒸汽灭菌锅处理的等级4的电解氢水培养基(AC)进行了处理的情况相比，在用等级4的电解氢水培养基及氢水培养基进行了处理的情况下，醛在细胞中的浓度降低。
认为这是由于等级4的电解氢水培养基和氢水培养基中的溶解氢使ALDH(醛脱氢酶)的活性提升，促进了醛的代谢(醛氧化而分解为乙酸)之故。
＜溶解氢对ADH(醇脱氢酶)的作用的评价＞
以2.0×105细胞/6孔板对HepG2细胞进行接种，预培养24小时后，用净化水、等级4的电解氢水培养基、进行过次高压蒸汽灭菌锅(AC)处理的等级4的电解氢水培养基(AC)、氢溶解浓度为1040ppb的氢水培养基(用氢溶解浓度为1300ppb的氢水将上述5×杜氏改良伊戈尔培养基(DMEM)稀释5倍后的培养基)、以及使在这些水或培养基中分别含有了4％乙醇而得到的水或培养基处理了24小时。
然后，使用乙醇脱氢酶活性比色检测试剂盒(Alcohol Dehydrogenase ActivityColorimetric Assay Kit)，测量了1.0×106细胞中的ADH活性[μU]。以上结果示于表10。
【表10】
如表10所示，可知：与用不含乙醇的等级4的电解氢水培养基进行了处理的情况相比，在用含有4％乙醇的等级4的电解氢水培养基进行了处理的情况下，ADH的活性降低。同样，可知：与用不含乙醇的电解氢水培养基进行了处理的情况相比，在用含有4％乙醇的电解氢水培养基处理的情况下，ADH的活性降低。
＜溶解氢对ALDH(醛脱氢酶)的作用的评价＞
以2.0×105细胞/6孔板对HepG2细胞进行接种，预培养24小时后，用净化水、等级4的电解氢水培养基、进行过两次高压蒸汽灭菌锅(AC)处理的等级4的电解氢水培养基(AC)、氢溶解浓度为1040ppb的氢水培养基(用氢溶解浓度为1300ppb的氢水将上述5×杜氏改良伊戈尔培养基(DMEM)稀释5倍后的培养基)、以及使在这些水或培养基中分别含有了4％乙醇而得到的水或培养基处理了24小时。
然后，使用醛脱氢酶活性比色检测试剂盒(Aldehyde Dehydrogenase ActivityColorimetric Assay Kit)，测量了1.0×106细胞中的ALDH活性[μU]。以上结果示于表11。
【表11】
如表11所示，可知：与用净化水进行了处理的情况相比，在用等级4的电解氢水培养基进行了处理的情况下，ALDH的活性提升，与是否含有乙醇无关。同样，可知：在用氢水培养基进行了处理的情况下，与用净化水进行了处理的情况相比，ALDH的活性提升，与是否含有乙醇无关。
＜溶解氢对醛毒性作用的评价＞
以5.0×104细胞/24孔板对HepG2细胞进行接种，预培养24小时后，用净化水、等级4的电解氢水培养基、进行过两次高压蒸汽灭菌锅(AC)处理的等级4的电解氢水培养基(AC)、氢溶解浓度为1040ppb的氢水培养基(用氢溶解浓度为1300ppb的氢水将上述5×杜氏改良伊戈尔培养基(DMEM)稀释5倍后的培养基)、以及使这些水或培养基中分别含有1mM的乙醛而得到的水或培养基处理了24小时。然后，使用胰蛋白酶将细胞剥离并使其悬浮，用台盼蓝(富士胶片和光纯药公司制造、商品名称：207-17081)的染色法(台盼蓝法)测量活细胞数，用下式(4)计算出了HepG2细胞在醛处理中的细胞存活率。以上结果示于表12、表13。
[式4]
细胞存活率＝(醛处理组的活细胞数/醛未处理组的活细胞数)×100(4)
【表12】
【表13】
如表13所示，与用含有1mM醛的净化水处理的情况相比，在用含有1mM的醛、等级4的电解氢水培养基进行了处理的情况下，细胞存活率提升，可知等级4的电解氢水具有减轻醛对肝细胞的毒性的效果。
同样，与用含有1mM醛的净化水进行了处理的情况相比，在用含有1mM的醛的氢水培养基进行了处理的情况下，细胞存活率提升，可知氢水具有减轻醛对肝细胞的毒性的效果。
＜氢水对乙醇毒性的作用的评价＞
使用氢水生成设备(日本Trim公司制造，商品名称：TRIM SEVEN WATER)生成了7000ppb的氢水。接着，将在净化水中浸渍了5秒钟的生成设置附带的氢产生剂加入到生成设备附带的专用胶囊中后，倒入装满净化水的生成设备附带的宝特瓶中并密封，静置了5分钟。然后，将该宝特瓶振荡30秒后，在4℃下静置了24小时。然后，将该宝特瓶振荡30秒后，得到了7000ppb的氢水。需要说明的是，1300ppb的氢水是用净化水稀释7000ppb的氢水而得到的。
接着，以5.0×104细胞/24孔板对HepG2细胞进行接种，预培养24小时后，用净化水、氢溶解浓度为1040ppb的氢水培养基、氢溶解浓度为5600ppb的氢水培养基(用上述氢溶解浓度为1300ppb或7000ppb的氢水将上述5×杜氏改良伊戈尔培养基(DMEM)稀释5倍后的培养基)、以及使在这些水或培养基中分别含有4％乙醇而得到的水或培养基处理了24小时。然后，使用胰蛋白酶将细胞剥离并使其悬浮，用台盼蓝(富士胶片和光纯药公司制造、商品名称：207-17081)的染色法(台盼蓝法)测量活细胞数，使用上式(2)计算出了HepG2细胞在乙醇处理中的细胞存活率。以上结果示于表14、表15。
【表14】
【表15】
如表15所示，与用含有4％乙醇的净化水(不含氢水)进行了处理的情况相比，在用含有4％乙醇的1040ppb的电解氢水培养基和含有4％乙醇的5600ppb的电解氢水培养基进行了处理的情况下，细胞存活率提升，可知具有减轻乙醇对肝细胞的毒性的效果。
符号说明
1 电解水生成装置
3 电解槽
4 电解槽
20～22 供水路
30 电解室
30A 第一极室
30B 第二极室
31 第一供电体
32 第二供电体
33 隔膜
40 电解室
40A 第一极室
40B 第二极室
41 第一供电体
42 第二供电体
43 隔膜
61 排水路
62 排水路

Claims (4)

1.一种酒精性肝损伤抑制用氢水，其与乙醇混和，其特征在于：
氢溶解浓度为550～5600ppb，
与所述乙醇混合时，乙醇在所述氢水中的浓度为1～4％。
2.根据权利要求1所述的酒精性肝损伤抑制用氢水，其特征在于：
所述氢溶解浓度为1100～1300ppb。
3.根据权利要求1或2所述的酒精性肝损伤抑制用氢水，其特征在于：
该酒精性肝损伤抑制用氢水为电解氢水。
4.一种乙醇的处理方法，其特征在于：将氢溶解浓度为550～5600ppb的酒精性肝损伤抑制用氢水与乙醇混合，以使乙醇在该氢水中的浓度达到1～4％。
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WO2008062814A1 (fr) * 2006-11-24 2008-05-29 Spring Co., Ltd. Solution aqueuse dissoute dans l'hydrogène et procédé de prolongement de la durée de vie de l'hydrogène dissous dans la solution aqueuse
JP6320715B2 (ja) * 2013-10-15 2018-05-09 静岡県公立大学法人 アルコール性脂肪肝予防・治療剤
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