KR20070057873A

KR20070057873A - 면역부활제, 그 생성 방법 및 생성 장치

Info

Publication number: KR20070057873A
Application number: KR1020077006980A
Authority: KR
Inventors: 소이치로 이나모리; 마사히코 하야시
Original assignee: 호시자키 덴키 가부시키가이샤
Priority date: 2004-09-27
Filing date: 2005-03-24
Publication date: 2007-06-07
Also published as: WO2006035523A1; AU2005288469A1; CN101031311A; EP1810683A4; EP1810683A1

Abstract

동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위하여 사용되는 면역부활제로서, 은 성분을 함유하는 물의 전해에 의해 생성된 약 알칼리성 전해수를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 면역부활제.

종양 세포, 암, 면역부활제, 은, 전기분해, 전해수

Description

면역부활제, 그 생성 방법 및 생성 장치{IMMUNOPOTENTIATOR AND METHOD AND APPARATUS FOR PRODUCING THE SAME}

본 발명은 동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위한 면역부활제, 동 면역부활제의 생성 방법, 및 동 면역부활제의 생성 장치에 관한 것이다. 조제

암 등 악성 종양을 치료하기 위하여 많은 종류의 종양 치료제가 개발되고 있다. 이들 종양 치료제는 그 대부분이 화학물질을 유효성분으로 하는 약제로서, 정도의 차이는 있지만 많은 부작용을 수반하는 어려움이 있다.

일본 특허공개 제2001-137852호 공보에서는, 특이한 종류의 종양 치료제로서 Na0H를 포함하는 물을 전기분해하여 얻어지는 전해 환원수를 유효성분으로 하는 것이 "암 억제제"라는 명칭으로 제안된 바 있다. 이 암 억제제는 유격막 전해에 의해 생성되는 알칼리성 물인 전해 환원수(전해 생성 알칼리성수)에 포함되는 고 농도의 용존수소가 활성산소로 인한 DNA의 손상을 방지 또는 복구하는 능력을 갖는다는 것에 착안하여 개발된 것이다. 일반적으로 고 농도의 용존수소를 함유하는 전해 환원수는 NaCl의 희박 수용액을 유격막 전해조의 음극측 전해실에서 전해함으로써 생성된다.

그러나, NaCl의 희박 수용액이 유격막 전해조의 음극측 전해실에서 전해되는 때, 동 유격막 전해조의 양극측 전해실에서 염소 성분을 함유하는 산화성 물(전해 생성 산성수)이 생성되고, 그때 대량의 차아염소산이나 염소 가스가 발생하여 전해 환원수로 녹아 들어가게 된다. 염소 성분이 다량으로 용존하는 전해 환원수는 복용에 적합하지 않음은 물론이고, 용존하는 염소 성분이 암 세포에 대해서 발암성의 방향으로 작용한다는 이유에서, 다량의 염소 성분이 용존되지 않은 전해 환원수를 얻기 위하여 NaCl 수용액 대신 NaOH 수용액을 전해할 것이 제안된 바 있다.

또한, WO95/14484호 재공표 특허공보에는, 은 이온을 유기 또는 무기 이온교환체로 이루어지는 담체에 담지시킨 것이 "생체내 프리 라디칼 생성제"라는 명칭으로 제안된 바 있다. 이 생체내 프리 라디칼 생성제는 프리 라디칼인 ·OH가 암 세포를 파괴하는 작용을 갖는다는 것에 착안하여 개발된 것이다. 이 점에 착안하면, ·OH가 계속해서 발생하는 제제가 매우 유리하고, 해당 생체내 프리 라디칼 생성제는 은 이온이 물을 라디칼 분해하여 ·OH를 생성하는 것을 전제로 하는데, 은 이온을 담지한 이온교환체가 ·OH를 장시간 계속 발생시킨다는 것을 이유로, 은 이온을 담지한 이온교환체를 생체내 프리 라디칼 생성제로서 특정하고 있는 것이다.

발명의 개요

최근, 본 발명자들은 특수한 기능을 갖는 것으로서 주목받고 있는 전해 생성수에 대하여 예의 연구한 결과, 은 성분을 함유하는 전해 생성 알칼리성수 및 전해 생성 산성수는 암 세포를 직접 공격하는 기능을 갖지는 않지만, 특정 종양에 대한 면역기능을 높이는 작용을 갖는다는 깨달음을 얻었다. 본 발명은 이러한 깨달음에 기초하여 이루어진 것으로서, 그 목적으로 하는 바는, 특정 성분을 함유하는 전해 생성수를 유효성분으로 하는 면역부활제, 동 면역부활제의 생성 방법 및 동 면역부활제의 생성 장치를 제공하는 데 있다.

본 발명에 따르면, 상기 목적은 동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위하여 사용되는 면역부활제로서, 은 성분을 함유하는 물의 전해에 의해 생성된 약 알칼리성 전해수를 유효성분으로 함유하는 면역부활제를 제공함으로써 달성된다. 이 면역부활제에 있어서는, 상기 약 알칼리성 전해수의 수소 이온 농도가 pH 9를 기준으로 pH 8.0∼10.0의 범위에 있고, 은 성분이 은 이온 환산 농도로 100ppb를 기준으로 30ppb∼200ppb의 범위에서 이온의 형태로 포함되어 있는 것이 바람직하다. 또한, 상기 약 알칼리성 전해수의 산화환원 전위가 +200mV를 기준으로 +400mV∼-800mV의 범위로 규정되어 있는 것이 바람직하다.

또한, 상기 목적은 은 성분을 함유하는 물의 전해에 의해 생성된 약 산성 전해수를 유효성분으로 함유하는 면역부활제를 제공함으로써 달성된다. 이 면역부활제에 있어서는, 상기 약 산성 전해수의 수소 이온 농도가 pH 6을 기준으로 pH 5.0∼7.0의 범위이고, 은 성분이 은 이온 환산 농도로 100ppb를 기준으로 30ppb∼200 ppb의 범위에서 이온의 형태로 포함되어 있는 것이 바람직하다. 또한, 상기 약 산성 전해수의 산화환원 전위가 400mV를 기준으로 +200mV∼+800mV의 범위로 규정되어 있는 것이 바람직하다.

전술한 본 발명의 면역부활제는, 암 세포 등의 종양을 직접 공격하는 작용이 없어 항암제로서의 기능을 갖는 것은 아니지만, 마우스 종양인 Sarcoma 180(S-180) 에 대한 종양 증식 억제 작용을 갖는 것과, 마찬가지로 마우스 종양인 Meth-A에 대한 종양 증식 억제 작용을 갖지 않는 것이 확인되었다. 이 효과(항종양 작용)는, S-180이 항원성이 높은 동종 이계 종양이고, Meth-A가 동계 종양이므로, 면역계를 통하고 있음이 예측된다. 더욱이, 이 결과에 기초하여 비장 림프구의 활성화 반응을 검토한 결과, 자연 세포독성 활성을 보이는 세포 표면 마커 CD233의 발현 비율이나, 세포장해성, T 세포 활성을 보이는 CD3e 발현의 비율이 종양 억제군에서 현저하게 증가하였음이 확인되었다. 이들 결과는 본 발명에서 특정하고 있는 은 성분을 함유하는 전해 생성 알칼리성수 또는 전해 생성 산성수의 투여에 의해서 종양 억제군에서는 세포성 면역기능이 항진되어 항종양 작용을 발휘하고 있음을 시사하고 있다.

상기 사항으로부터, 본 발명에서 특정하고 있는 은 성분을 함유하는 전해 생성 알칼리성수 또는 전해 생성 산성수는, 그 작용기전에 대해서는 아직 특정할 수 없지만, 동종 이계 종양 세포에 대하여 항종양 면역력을 높이는 제제, 바꿔 말하면 면역기능을 증강시키기 위한 면역부활제인 것으로 보인다.

본 발명에 따른 면역부활제는, 은 성분을 함유하는 물을 유격막 전해조의 음극측 전해실에서 전해함으로써, 은 성분 함유 약 알칼리성 전해수를 유효성분으로 하는 면역부활제로서 생성된다. 혹은, 은 성분을 함유하는 물을 무격막 전해조 내의 음극측에서 전해함으로써, 은 성분 함유 약 알칼리성 전해수를 유효성분으로 하는 면역부활제로서 생성된다. 또한, 본 발명에 따른 면역부활제는, 은 성분을 함유하는 물을 유격막 전해조의 양극측 전해실 또는 무격막 전해조 내의 양극측에서 전해함으로써, 은 성분 함유 약 산성 전해수를 유효성분으로 하는 면역부활제로서 생성되어도 좋다.

더욱이, 본 발명에 따른 면역부활제는, 은 분말을 물에 용해시켜 조정한 은 성분을 함유하는 수용액을 유격막 전해조 또는 무격막 전해조의 음극측 전해실에서 전해함으로써, 은 성분 함유 약 알칼리성 전해수를 유효성분으로 함유하는 면역부활제로서 생성된다.

또한, 본 발명에 따르면, 수돗물, 천연수 등의 맑은 물을 처리하는 연수기와 정수기를 구비한 수처리 기구와, 은 전극을 양극측 전극으로서 그 내부에 구비하여 상기 수처리 기구에서 처리된 처리수를 전해하는 무격막 전해조와, 이 무격막 전해조에서 전해하여 생성된 전해수를 전해하는 유격막 전해조를 구비하여, 상기 유격막 전해조의 양극측 전해실로부터 은 성분 함유 약 산성 전해수를 도출하고, 동 유격막 전해조의 음극측 전해실로부터 은 성분 함유 약 알칼리성 전해수를 도출하여, 상기 약 산성 전해수 또는 약 알칼리성 전해수를 동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위한 면역부활제로서 사용할 수 있도록 한 면역부활제의 제조 장치가 제공된다.

더욱, 본 발명에 따르면, 수돗물, 천연수 등의 맑은 물을 처리하는 연수기와 정수기를 구비한 수처리 기구와, 은 전극을 양극측 전극으로서 그 내부에 구비하여 상기 수처리 기구에서 처리된 처리수를 전해하는 제1 무격막 전해조와, 이 무격막 전해조에서 전해하여 생성된 전해수를 전해하는 제2 무격막 전해조를 구비하여, 상기 제2 무격막 전해조의 양극측 전해실로부터 은 성분 함유 약 산성 전해수를 도출 하고, 동 제2 무격막 전해조의 음극측 전해실로부터 은 성분 함유 약 알칼리성 전해수를 도출하여, 상기 약 산성 전해수 또는 약 알칼리성 전해수를 동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위한 면역부활제로서 사용할 수 있도록 한 면역부활제의 제조 장치가 제공된다.

도 1은 본 발명에 따른 면역부활제 생성 장치의 전체 구조를 개략적으로 도시한 개략 구성도이다.

도 2는 이식 S-180 종양 증식의 경시적 변화(추정중량)를 보인 그래프이다.

도 3은 이식 S-180 종양의 증식(실중량)을 보인 그래프이다.

도 4는 이식 Meth-A 종양 증식의 경시적 변화(추정중량)를 보인 그래프이다.

도 5는 이식 Meth-A 종양의 증식(실중량)을 보인 그래프이다.

도 6은 이식 S-180 종양에 대한 각 시약(증류수, PSK, Ag0 시약)의 증식 억제 효과를 경시적으로 보인 그래프이다.

도 7은 이식 S-180 종양에 대한 각 시약(증류수, Ag40 시약)의 증식 억제 효과를 경시적으로 보인 그래프이다.

도 8은 이식 S-180 종양에 대한 각 시약(증류수, Ag70 시약)의 증식 억제 효과를 경시적으로 보인 그래프이다.

도 9는 이식 S-180 종양에 대한 각 시약(증류수, Ag150 시약)의 증식 억제 효과를 경시적으로 보인 그래프이다.

도 10은 이식 Meth-A 종양에 대한 각 시약(증류수, PSK, Ag0 시약)의 증식 억제 효과를 경시적으로 보인 그래프이다.

도 11은 이식 Meth-A 종양에 대한 각 시약(증류수, Ag40 시약)의 증식 억제 효과를 경시적으로 보인 그래프이다.

도 12는 이식 Meth-A 종양에 대한 각 시약(증류수, Ag70 시약)의 증식 억제 효과를 경시적으로 보인 그래프이다.

도 13은 이식 Meth-A 종양에 대한 각 시약(증류수, Ag150 시약)의 증식 억제 효과를 경시적으로 보인 그래프이다.

도 14는 각 시약을 투여한 각 군의 FACS(유세포분석기)에 의한 해석 결과를 보인 해석도이다.

도 15는 이식 S-180 종양에 대한 각 시약(7일째)의 증식 억제 효과를 보인 그래프이다.

도 16은 이식 S-180 종양에 대한 각 시약(10일째)의 증식 억제 효과를 보인 그래프이다.

도 17은 이식 S-180 종양에 대한 각 시약(14일째)의 증식 억제 효과를 보인 그래프이다.

도 18은 이식 S-180 종양에 대한 생성 방법을 달리 하는 각 시약의 증식 억제 효과를 보인 그래프이다.

도 19는 이식 S-180 종양에 대한 투여 시기를 달리 하는 각 시약의 증식 억제 효과를 보인 그래프이다.

도 20은 이식 S-180 종양에 대한 은 성분 농도를 달리 하는 각 시약의 증식 억제 효과를 보인 그래프이다.

본 발명에 따른 면역부활제는 동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위한 면역부활제이며, 그 제 1 면역부활제는 은 성분을 함유하는 전해 생성 알칼리성수를 유효성분으로 하는 것이다. 이 면역부활제는 구체적으로는, 전해 생성 알칼리성수의 pH가 pH 8.0∼10.0의 범위에 있고, 산화환원 전위가 +400 mV∼-800mV의 범위에 있으며, 은 성분이 은 이온 환산으로 30ppb∼200ppb의 범위에 있는 것이다.

또한, 본 발명에 따른 제 2 면역부활제는, 은 성분을 함유하는 전해 생성 산성수를 유효성분으로 하는 것이다. 이 면역부활제는 구체적으로는, 전해 생성 산성수의 pH가 pH 5.0∼7.0의 범위에 있고, 산화환원 전위가 +200mV∼+800mV의 범위에 있으며, 은 성분이 은 이온 환산으로 30ppb∼200ppb의 범위에 있는 것이다.

이들 면역부활제는 암 등 종양 세포를 직접 공격하는 작용이 없어 항암제로서의 기능을 갖는 것은 아니다. 그러나, 마우스 종양인 Sarcoma 180(S-180)에 대한 종양 증식 억제 작용을 갖는 것과, 마찬가지로 마우스 종양인 Meth-A에 대한 종양 증식 억제 작용을 갖지 않는 것을 확인하였다. 이 결과(항종양 작용)는, 마우스 종양인 Sarcoma 180(S-180)이 항원성이 높은 동종 이계 종양이고, 마우스 종양인 Meth-A가 동계 종양이므로, 면역계를 통하고 있음을 시사하고 있다.

또한, 이 결과에 기초하여 비장 림프구의 활성화 반응을 검토한 결과, 자연 세포독성 활성을 보이는 세포 표면 마커 CD233의 발현 비율이나, 세포장해성, T 세포 활성을 보이는 CD3e 발현 T 림프구의 비율은 종양 억제군에서 현저하게 증가하였음을 확인하였다. 이들 결과는 본 발명에서 특정하고 있는 은 성분을 함유하는 전해 생성 알칼리성 물이나 전해 생성 산성수의 투여에 의해서 종양 억제군에서는 세포성 면역기능이 항진되어 항종양 작용을 발휘하고 있음을 시사하고 있다.

이상의 결과로부터, 본 발명에서 특정하고 있는 은 성분을 함유하는 전해 생성 알칼리성수나 전해 생성 산성수는, 그 작용기전에 대해서는 아직 특정할 수 없지만, 항원성이 높고, 획득 면역능이 높은 동종 이계 종양에 대하여 항종양 면역력을 높이는 제제, 바꿔 말하면 면역기능을 증강시키는 면역부활제인 것으로 보인다. 해당 면역기능을 증강시키는 면역부활 작용은 함유한 은 성분의 양이 많을수록 크다는 것이 확인되었다. 한 실험 범위(은 성분의 함유량 0∼150ppb의 범위)에서 은 성분의 함유량이 150ppb인 경우가 가장 많은 면역부활 작용을 보이는 것을 확인하였다.

상기한 면역부활제는 수돗물이나 천연수 등의 일반 물을 연수처리 및 정수처리한 처리수를 피전해수로 하는 무격막 전해와, 동 무격막 전해로 생성된 전해 생성수를 피전해수로 하는 유격막 전해 또는 무격막 전해의 전해처리에 의해 용이하게 생성할 수 있다. 또한, 상기 면역부활제의 유격막 전해조를 사용하는 생성 방법은 도 1에 도시한 면역부활제의 생성 장치에 의해 실시할 수 있다. 도 1은 해당 면역부활제 생성 장치의 일 실시 형태의 전체 구성을 개략적으로 도시한 것으로서, 수처리 기구(10), 무격막 전해조(20) 및 유격막 전해조(30)를 구비하고 있다.

해당 면역부활제 생성 장치를 구성하는 수처리 기구(10)는 연수기(11), 정수기(12) 및 저류조(13)를 구비하고 있다. 연수기(11)는 양이온 교환 수지를 내장하고, 정수기(12)는 높은 정밀도의 여과기능을 갖는 필터를 내장하고 있다. 연수기 (11)는 급수관로(11a)를 통해 수원인 수돗물의 공급원에 연결되고, 급수관로(11b)를 통해 정수기(12)에 연결되어 있다. 또한, 정수기(12)는 급수관로(12a)를 통해 저류조(13)에 연결되어 있다. 저류조(13)는 급수관로(13a)를 통하여 무격막 전해조(20)의 전해실(R)에 연결되어 있다. 또한, 저류조(13)는 환류관로(13b), 오버플로관로(13c), 및 도시하지 않은 수위 검지 센서를 구비한다. 오버플로관로(13c)는 배수관로(13d)에 연결되고, 급수관로(13a)의 도중은 배수 밸브(13e)를 통하여 배수관로(13d)에 연결되어 있다. 또한, 급수관로(13a)의 도중에는 급수 펌프(14)가 개재되어 있다.

해당 수처리 기구(10)는 수돗물을 연수기(11) 및 정수기(12)로 처리한 처리수를 저류조(13) 내에 설정된 소정량 저류시키는 기능, 바꿔 말하면 피전해수를 생성하는 기능, 및 저류조(13)에 저류되어 있는 처리수를 피전해수로서 무격막 전해조(20)의 전해실(R)로 공급하는 기능의 두 기능을 구비하고 있다. 해당 수처리 기구(10)에서는, 저류조(13)에 저류되어 있는 처리수를 급수 펌프(14)를 구동시킴으로써 피전해수로서 무격막 전해조(20)의 전해실(R)로 공급한다.

무격막 전해조(20)는 원통형의 조 본체(21) 내에 양극 전극(22)과 음극 전극 (23)을 배치하여 구성되어 있다. 양극 전극(22)은 은제의 막대체로서 조 본체(21)의 중앙부에 위치하고, 음극 전극(23)은 SUS304로 이루어지는 원통체로서 양극 전극(22)을 중심으로 그 외주측에 위치해 있다. 이에 따라, 조 본체(21) 안은 전해실(R)로 형성된다. 조 본체(21)의 하방측에는 저류조(13)가 갖는 급수관로(13a)가 연결되어 있다. 또한, 조 본체(21)는 전해실(R)로 연통되는 유출관로(21a)를 구비하고 있다. 유출관로(21a)는 분기관로에서 후술하는 유격막 전해조(30)의 각 전해실(R1, R2)에 연결되어 있다.

해당 무격막 전해조(20)에서는 제어기구(40)가 갖는 전원으로부터 양극 전극 (22)과 음극 전극(23) 사이에 인가 전압이 부여되어 전해 운전이 개시된다. 전해 운전에서는 급수 펌프(14)의 구동에 의해 저류조(13)에 저류되어 있는 처리수를 피전해수로서 전해실(R) 내로 공급받는다. 피전해수는 전해실(R) 내에서 설정된 소정의 전해 전류에 의해 전해를 받아 전해 생성수가 된다. 해당 전해 생성수는 유출관로(21a)를 거쳐서 후술하는 유격막 전해조(30)의 각 전해실로 공급된다. 전해 전류값은 도시하지 않은 전류계로 검출되어 제어기구(40)가 갖는 마이크로 컴퓨터에 입력되고, 설정된 전해 전류값으로 제어된다. 이에 따라, 전해 운전시에 양극 전극(22)과 음극 전극(23) 사이의 전해 전류값은 설정된 소정의 범위로 유지된다. 해당 무격막 전해조(20)에서 전해 전류값은 0∼30mA의 범위에서 제어가능하다.

유격막 전해조(30)는 사각형의 상자 형태를 이루는 조 본체(31) 안을 이온투과 가능한 격막(32)으로 구획하여 된 것으로서, 각 구획실에 전극(33a, 33b)이 각각 배치되어 한 쌍의 전해실(R1, R2)로 형성된다. 각 전극(33a, 33b)은 Ti 판 표면을 Pt 도금하여 된 동일한 것으로서, 격막(32)을 사이에 두고 서로 대향하여 위치해 있다. 조 본체(31)의 하방측에는 무격막 전해조(20)가 갖는 유출관로(21a)의 분기관로가 연결되어 있어, 무격막 전해조(20)에서 생성된 전해 생성수를 피전해수로서 각 전해실(R1, R2)로 공급할 수 있게 되어 있다. 또한, 조 본체(31)는 각 전해실(R1, R2)로 연통되는 한 쌍의 유출관로(31a, 31b)를 구비하고 있으며, 양 유출관로(31a, 31b)의 도중에는 전환 밸브(34)가 개재되어 있다.

해당 유격막 전해조(30)에서는 제어기구(40)가 갖는 전원에서 각 전극(33a, 33b)으로 전압이 인가되어 전해 운전이 개시되며, 전해 운전은 무격막 전해조(20)의 전해 운전에 연동하여 이루어진다. 해당 유격막 전해조(30)의 전해 운전 도중에는 각 전극(33a, 33b)에 인가하는 전압의 극성이 소정 시간마다 양음 반전하도록 제어되고, 이 극성의 반전에 따라 전환 밸브(34)가 전환동작하여 양 유출관로(31a, 31b)의 양 전해실(R1, R2)에 대한 연결 상태를 전환하도록 구성되어 있다. 각 전극(33a, 33b)에서 극성의 반전 및 전환 밸브(34)의 전환동작은 제어기구(40)가 갖는 마이크로 컴퓨터에 의해 제어됨과 동시에, 양 전극(33a, 33b) 사이의 전해 전류값이 도시하지 않은 전류계로 검출되어 마이크로 컴퓨터에서 설정된 전해 전류값으로 제어된다. 이에 따라, 전해 운전시에 양 전극(33a, 33b) 사이의 전해 전류값은 설정된 소정의 범위로 유지된다. 해당 유격막 전해조(30)에서 전해 전류값은 0∼3A의 범위에서 제어 가능하다.

이와 같이, 해당 유격막 전해조(30)에 있어서는, 각 전극(33a, 33b)에 대한 극성을 정기적으로 반전시켜 각 전해실(R1, R2)의 양극측 및 음극측을 정기적으로 반전시키는 구성을 채택하고 있다. 이 의도는 전해 운전시 양극측 전해실에서 생성되는 전해 생성 산성수 분위기에서 발생하기 쉬운 스케일의 부착에 대처하기 위한 것으로서, 만일 양극측 전해실에서 스케일이 발생하여 부착되는 경우에도, 해당 양극측 전해실을 음극측 전해실로 반전시켜 전해 생성 알칼리성수 분위기로 만듦으로써 해당 스케일을 유출 제거시키는 것이다.

따라서, 해당 유격막 전해조(30)에서는 전해 운전시 각 전해실(R1, R2)을 정기적으로 양극측 및 음극측으로 반전하여, 어느 한 전해실(R1)에 대해, 양극측 전해실인 경우에는 전해 생성 산성수가 생성됨과 동시에, 음극측 전해실인 경우에는 전해 생성 알칼리성수가 생성되고, 다른 전해실(R2)에 대해, 음극측 전해실인 경우에는 전해 생성 알칼리성수가 생성됨과 동시에 양극측 전해실인 경우에는 전해 생성 산성수가 생성된다. 이들의 경우, 각 전해실(R1, R2)의 양극측 및 음극측의 반전에 따라 전환 밸브(34)가 전환동작하여 유출관로(31a, 31b)가 각 전해실(R1, R2)의 반전측에 연결되며, 유출관로(31a, 31b)의 어느 하나는 전해 생성 산성수 전용의 유출관로로서 확보되고, 유출관로(31a, 31b)의 다른 하나는 전해 생성 알칼리성수 전용의 유출관로로서 확보된다. 해당 유격막 전해조(30)의 음극측 전해실에서 생성되는 전해 생성 알칼리성수(은 성분 함유)가 본 발명에 따른 제 1 면역부활제에 해당하고, 양극측 전해실에서 생성되는 전해 생성 산성수가 본 발명에 따른 제 2 면역부활제에 해당한다.

해당 면역부활제 생성 장치에 있어서는, 수처리 장치(10)는 임의로 운전되어 저류조(13)에는 항상 소정량의 처리수가 저류되어 있어, 무격막 전해조(20) 및 유격막 전해조(30)에 의한 동기적인 전해 운전시에 공급 펌프(14)의 구동에 의해 저류조(13) 내의 처리수가 피전해수로서 무격막 전해조(20)의 전해실(R)로 공급된다. 한편, 저류조(13) 내의 처리수가 설정되어 있는 양까지 줄어든 경우에는, 도시하지 않은 수위 검지 센서가 이것을 검지하여 제어기구(40)의 마이크로 컴퓨터로 검출신호를 출력한다. 마이크로 컴퓨터는 해당 검출신호에 기초, 급수 밸브(11c)를 개방하여 처리수를 저류조(13) 내의 저류량이 소정량이 될 때까지 보급을 계속한다.

무격막 전해조(20) 및 유격막 전해조(30)에 의한 동기적인 전해 운전에 있어서는, 무격막 전해조(20)의 양극 전극(22)과 음극 전극(23) 사이에 30mA 이하의 소정값의 전해 전류가 인가되고, 유격막 전해조(30)의 양 전극(33a, 33b) 사이에 3A 이하의 소정값의 전해 전류가 인가된다. 무격막 전해조(20)에 의한 무격막 전해에 있어서는, 전해실(R)로 공급된 피전해수인 처리수의 전해에서는 양극 전극(22)측으로부터 은 이온이 용출되고, 은 이온 또는 그 밖의 형태의 은 성분을 함유하는 전해 생성수, 즉 은 성분을 함유하는 대략 중성의 전해 생성수가 생성된다. 생성된 해당 전해 생성수는 피전해수로서 유격막 전해조(30)의 양 전해실(R1, R2)로 공급된다.

유격막 전해조(30)에 의한 유격막 전해에 있어서는, 어느 한쪽 전해실(R1)이 양극측 전해실인 경우에는 전해 생성 산성수가 생성됨과 동시에, 음극측 전해실인 경우에는 전해 생성 알칼리성수가 생성되고, 다른 쪽 전해실(R2)이 음극측 전해실인 경우에는 전해 생성 알칼리성수가 생성됨과 동시에, 양극측 전해실인 경우에는 전해 생성 산성수가 생성된다. 해당 유격막 전해에 의해 생성된 전해 생성 산성수는, 예를 들어 전용의 유출관로인 유출관로(31a)를 통해 소정의 장소로 유출되고, 전해 생성 알칼리성수는, 예를 들어 전용의 유출관로인 유출관로(31b)를 통해 소정의 장소로 유출된다.

해당 전해 생성 알칼리성수는 소정량의 은 성분을 함유하는 전해 생성 알칼리성 물로, 본 발명에 따른 제 1 면역부활제에 해당한다. 해당 전해 생성 산성수는 소정량의 은 성분을 함유하는 전해 생성 산성 물로, 본 발명에 따른 제 2 면역부활제에 해당한다.

해당 생성 장치에서는 면역부활제가 함유하는 은 성분의 양을 무격막 전해의 전해 운전 조건에 따라 제어할 수 있다. 예를 들어, 전해 전류값이나 전해 시간을 제어함으로써 은 이온의 농도를 0∼200ppb의 범위에서 임의의 농도로 설정할 수 있다. 또한, 면역부활제의 pH 등의 특성에 대해서도 유격막 전해의 전해 운전 조건에 따라 제어할 수 있다. 예를 들어, 전해 전류값이나 전해 시간을 제어함으로써 전해 생성 알칼리성수의 pH를 7.0∼11.0의 범위에서 임의의 값으로, 또한 전해 생성 산성수의 pH를 3.0∼7.0의 범위에서 임의의 값으로 각각 설정할 수 있다.

한편, 해당 생성 장치에서, 무격막 전해조(20)로부터의 유출관로(21a)를 유격막 전해조(30)의 전해실(R1, R2)로 선택적으로 연통하도록 구성하여, 무격막 전해조(20)에서 생성되는 전해 생성수를 전해실(R1, R2)의 선택된 어느 한 전해실로 공급함과 동시에, 선택되지 않은 다른 전해실에는 단순한 물을 공급하도록 전해 운전할 수도 있다. 해당 전해 운전에 따르면, 선택된 어느 한 전해실에서 면역부활제를 생성할 수 있다. 예를 들어, 선택된 전해실이 음극측 전해실인 경우에는 전해 생성 알칼리성수인 제 1 면역부활제가 생성되고, 또한 선택된 전해실이 양극측 전해실인 경우에는 전해 생성 산성수인 제 2 면역부활제가 생성된다.

실시예 1

본 실시예에서는 해당 면역부활제의 생성 장치에서 생성된 전해 생성 알칼리성 물로서 은 성분의 농도를 달리하는 전해 생성 알칼리성수(공시약)에 대하여, 그 종양 세포의 증식 저해 작용, 이식 종양에 대한 항종양 작용을 확인하기 위하여 하기에 나타낸 2개의 실험(시험관내)을 행하였다.

(1) 실험 1 : 각종 종양 세포에 대한 작용

본 실험에서는 공시료로서 사단법인 기타자토 연구소의 연구실에서 계대 유지·보존해 온 각종 마우스 및 사람 암 세포를 채용하였다. 또한, 공시약으로서는 해당 면역부활제의 생성 장치에서 매회 생성한 4종의 전해 생성 알칼리성수(공시약 1∼4)를 채용하였다. 공시약 1은 pH 9.3이고 은 성분 농도 50ppb인 전해 생성 알칼리성수, 공시약 2는 pH 9.3이고 은 성분 농도 25ppb인 전해 생성 알칼리성수, 공시약 3은 pH 9.3이고 은 성분 농도 12.5ppb인 전해 생성 알칼리성수, 그리고 공시약 4는 pH 9.3이고 은 성분 농도 6.25ppb인 전해 생성 알칼리성수이다.

공시료 중, 마우스 흑색종 세포주(B16/BL6), 육종 세포주(S-180), 마우스 림프종 세포주(P388), 섬유육종 세포주(L929), 사람 신경아종 세포주(NB-1), 사람 자궁경부암주(HeLa), 사람 섬유아세포주(WI-38 세포)에 대해서, 10% 태아소혈청(FBS)을 포함하는 최소 이글 배지(MEM)에서 계대 유지하였다. 이들 세포를 3∼5×10⁴세포/mL로 조제하고, 그 0.1mL를 96-구멍 배양 플레이트에 뿌렸다. 이들에 목적량의 공시약을 첨가하고, 다시 총 0.2mL가 되도록 MEM 배지를 가하고, 5% CO₂ 존재 하 37 ℃에서 72시간 배양하였다. 세포 생존율은 MTT 법(Carmichaei, J. 등 Cancer Res. vol. 47, p 936∼942, 1987)에 의한 비색정량에 의해 측정하였다.

공시료 중, 마우스 육종 세포주(Meth-A), 마우스 폐암주(LCC), 사람 위암주 (KATO-Ⅲ), 사람 골수성 백혈병 세포주(HL-60), 사람 조직구성 림프종 세포주(U-937), 사람 전립선암주(LNCaP), 마우스 림프종 세포주(L5178Y-ML), 사람 림프아구성 백혈병 세포주(Jurkat)에 대해서, 10% FBS 함유 RPMI-1640 배지에서 계대 유지하였다. 이들 세포를 5×10⁴세포/mL로 조제하고, 그 0.1mL를 96-구멍 배양 플레이트에 뿌렸다. 이들에 목적량의 공시약을 첨가하고, 다시 총 0.2mL가 되도록 RPMI-1640 배지를 가하고, 5% C0₂ 존재 하 37℃에서 72시간 배양하였다. 세포 생존율은 MTT 법에 의한 비색정량에 의해 측정하였다.

공시료 중, 마우스 골수아구양 백혈병 세포주(M1), 사람 간암주(Hep G2), 사람 구강류 상피암주(KB 세포)에 대해서, 10% FBS 함유 DMEM(Dulbeccs Modijed EM) 배지에서 계대 유지하였다. 이들 세포를 5×10⁴세포/mL로 조제하고, 그 0.1mL를 96 구멍 배양 플레이트에 뿌렸다. 이들에 목적량의 공시약을 첨가한 후, 총 0.2mL가 되도록 DMEM 배지를 가하고, 5% CO₂ 존재 하 37℃에서 72시간 배양하였다. 세포 생존율은 MTT 법에 의한 비색정량에 의해 측정하였다. 해당 실험 결과를 표 1(마우스 수립 암세포의 세포 생존율) 및 표 2(사람 수립 암세포의 세포 생존율)에 나타내었다.

(2) 실험 2 : 마우스에 대한 항종양 작용

본 실험에서는 공시 동물로서 5주령 수컷 ddY계 마우스(일본 SLC에서 구입), 5주령 암컷 BALB/c계 마우스(일본 SLC에서 구입)를 채용하였다. ddY계 마우스에는 그 배쪽 피내에 1×10⁶개의 S-180 세포를 이식하고, BALB/c계 마우스에는 그 배쪽 피내에 Meth-A 세포를 이식하여, 이식일을 0일로 하여 0일부터 15일(이식일로부터 15일)까지의 기간 동안 공시약을 마우스에게 자유 경구 섭취에 의해 투여하였다. 이 기간 동안 정기적으로 종양의 크기(장경 및 단경)를 외부에서 측정함과 동시에 체중을 측정하였다. 또한, 15일에 마우스를 방혈 치사시키고 종양을 적출하여 그 중량을 측정하였다.

해당 실험에서는 공시약으로서 은 성분이 70ppb 농도이고 pH 9.2인 전해 생성 알칼리성수를 채용하였다. 또한, 해당 실험에서는 컨트롤군으로서 공시약 대신 증류수를 채용하고, 비교군으로서 공시약 대신 크레스틴(PSK, 양성대조: 산쿄 가부시키가이샤 제조)을 채용하였다. 또한, 동물군에 대해서는 마우스를 구입 후 1주일간의 예비 사육 후 실험에 사용하였다. 사육은 마우스를 폴리카보네이트제의 케이지(32×231×13cm)에 5마리 넣고, 실온 23±0.5℃, 습도 55±5%의 환경에서 행하였고, 조명은 오전 8시∼오후 8시의 12시간 조사하였으며, 물, 모이는 자유로이 섭취할 수 있는 상태로 하였다.

정기적으로 행하는 종양의 크기(장경 및 단경) 및 체중의 측정은 암의 증식 정도를 확인하는 것으로서, 종양 크기(장경 및 단경)의 측정에는 버니어 캘리퍼스를 사용하고, 종양의 크기(종양 추정중량)를 장경(mm)×단경(mm)²/2의 식으로 산출하였다. 한편, 통계처리는 언페어드 t 검정으로 행하였다. 또한, 공시약의 투여 종료 후의 종양의 크기에 대해서는 적출한 종양의 중량을 직접 측정함으로써 행하였다. 이들 결과에 대해서는, S-180 세포에 대한 결과를 표 3(이식 S-180의 증식 억제 효과: 추정중량 및 실중량), 도 2의 그래프(이식 S-180 증식의 경시적 변화: 추정중량), 도 3의 그래프(이식 S-180 증식의 실중량)에 나타내었다. 또한, Meth-A에 대한 결과를 표 4(이식의 증식 억제 효과: 추정중량 및 실중량), 도 4의 그래프(이식 Meth-A 증식의 경시적 변화: 추정중량), 도 5의 그래프(이식 Meth-A 증식의 실중량)에 나타내었다.

(3)고찰

마우스 및 사람의 각종 수립 암 세포주의 세포 증식에 대한 은 성분 함유 전해 생성 알칼리성수의 작용에 대하여 검토한 결과에서는, 증식 억제에 대하여 감수성이 높은 P388 마우스 림프종 주에 있어서 배지 pH가 변화되는 한계농도의 50%(공시약 첨가)에 있어서도 10% 정도의 증식 억제밖에 보이지 않았다. 다른 세포주에 대해서도 증식 억제 효과는 보이지 않았다. 따라서, 해당 결과는 세포에 대한 은 성분 함유 전해 생성 알칼리성수에는 직접적인 세포막 장해 DNA/RNA의 절단, 전사 저해, 선택적 정보 전달 저해 작용 등은 없다는 것이 시사된다.

마우스에 이식한 종양 세포의 항종양에 대한 은 성분 함유 전해 생성 알칼리성수의 작용에 대하여 검토한 결과에서는, 피내 이식한 S-180 세포의 증식은 양성대조인 크레스틴(PSK) 투여의 경우와 동일 정도의 유의(P>0.05)로 억제되는 결과를 얻었으며, 피내 이식한 Meth-A 세포의 증식은 억제되지 않는 결과를 얻었다. S-180은 항원성이 높은 동종 이계의 암인 것에 대하여, Meth-A는 항원성이 낮은 동계 암이다. PSK는 면역 부활 작용을 갖는 제암제로서, Meth-A에는 증식 억제 작용이 낮다고 한다. 또한, 은 성분 함유 전해 생성 알칼리성수의 증식 억제 작용이 PSK의 패턴과 유사하므로, 은 성분 함유 전해 생성 알칼리성수의 증식 억제 작용은 면역계를 통한 작용인 것이 시사된다.

실시예 2

본 실시예에서는 해당 면역부활제의 생성 장치에서 생성된 전해 생성 알칼리성수로서 은 성분의 농도를 달리하는 전해 생성 알칼리성수(공시약)에 대하여, 마우스 이식 종양(S-180, Meth-A)에 대한 항종양 작용을 확인하기 위하여 하기에 나타낸 2가지 실험(생체내)을 행하였다. 본 실시예에서는 종양으로서 사단법인 기타자토 연구소의 연구실에서 계대 유지·보존해 온 S-180 종양, Meth-A 종양을 채용하였다. 또한, 공시약으로는 해당 면역부활제의 생성 장치에서 생성한 은 성분의 농도를 달리하는 전해 생성 알칼리성수(공시약 1∼4)을 채용하고, 컨트롤로서 증류수를, 양성대조로서 크레스틴 PSK(양성대조: 산쿄 가부시키가이샤 제조)를 채용하였다. 공시약 1은 은 이온 농도 0ppb, pH 9.5인 전해 생성 알칼리성수(Ag0 시약), 공시약 2는 은 이온 농도 40ppb, pH 9.5인 전해 생성 알칼리성수(Ag40 시약), 공시약 3은 은 이온 농도 70ppb, pH 9.5인 전해 생성 알칼리성수(Ag70 시약), 공시약 4는 은 이온 농도 150ppb, pH 9.5인 전해 생성 알칼리성수(Ag150 시약)이다. 각 공시약은 연일 생성한 것이다. 한편, 공시험용 마우스는 각 투여 시약마다 6마리를 한 군으로 하였다.

(1) 실험 1 : S-180에 대한 작용

마우스로는 5주령의 암컷 ddY 마우스(일본 SLC에서 구입)를 채용하고, ddY계 마우스의 배쪽 피내에 0.5×10⁶개의 S-180 세포를 이식하고, 이식일을 0일로 하여 0일부터 24일(이식일로부터 24일)까지의 기간을 기준으로, 공시약, 증류수 및 PSK에 대해서는 마우스에게 자유로운 경구 섭취에 의한 자유 경구 투여를 행하고, PSK에 대해서는 경구 존데에 의한 강제 경구 투여를 행하였다. 경구 투여에서는 0일부터 24일까지의 기간(동일자 투여군) 이외에, 이식일 1주일 전부터 24일까지의 기간(사전 투여군), 및 이식일 1주일 후부터 24일까지의 기간(사후 투여군)의 투여를 행하였다.

이들 투여 기간 동안 정기적으로 종양의 크기(장경 및 단경)를 외부에서 측정함과 동시에 체중을 측정하였다. 또한, 24일에 마우스를 방혈 치사시키고 종양을 적출하여 그 중량을 측정하였다. 한편, 실험에 사용한 마우스는 구입 후 1주일간 예비 사육한 것으로서, 사육은 마우스를 폴리카보네이트제의 케이지(32×231×13cm)에 6마리 넣고, 실온 23±0.5℃, 습도 55±5%의 환경에서 행하였고, 조명은 오전 8시∼오후 8시의 12시간 조사하였으며, 물, 모이는 자유로이 섭취할 수 있는 상태로 하였다.

정기적으로 행하는 종양의 크기(장경 및 단경) 및 체중의 측정은 종양의 증식 정도를 확인하는 것으로서, 종양 크기(장경 및 단경)의 측정에는 버니어 캘리퍼스를 사용하고, 종양의 크기(종양 추정중량)를 장경(mm)×단경(mm)²/2의 식으로 산출하였다. 한편, 통계처리는 언페어드 t 검정으로 행하였다. 또한, 공시약 등의 투여 종료 후의 종양의 크기에 대해서는 적출한 종양의 중량을 직접 측정함으로써 행하였다. 이들 결과에 대해서, 표 5(이식 S-180의 증식 효과: 추정중량, 실중량), 도 6∼도 9의 그래프(이식 S-180 종양 증식의 경시적 변화: 추정중량)에 나타내었다.

(2) 실험 2 : Meth-A에 대한 작용

마우스로는 5주령의 암컷 MALB/c계 마우스(일본 SLC에서 구입)를 채용하고, BALB/c 마우스의 배쪽 피내에 Meth-A 종양을 이식하고, 이식일을 0일로 하여 0일부터 24일(이식일로부터 24일)까지의 기간 동안을 기준으로 하여, 공시약, 증류수 및 PSK에 대해서는 마우스에게 자유로운 경구 섭취에 의한 자유 경구 투여를 행하고, PSK에 대해서는 경구 존데에 의한 강제 경구 투여를 행하였다. 경구 투여에서는 0일부터 24일까지의 기간(동일자 투여군) 이외에, 이식일 1주일 전부터 24일까지의 기간(사전 투여군), 및 이식일 1주일 후부터 24일까지의 기간(사후 투여군)의 투여를 행하였다.

이들 투여 기간 동안 정기적으로 종양의 크기(장경 및 단경)를 외부에서 측정함과 동시에 체중을 측정하였다. 또한, 24일에 마우스를 방혈 치사시키고 종양을 적출하여 그 중량을 측정하였다. 한편, 실험에 사용한 마우스는 구입 후 1주일간 예비 사육한 것으로서, ddY계 마우스와 동일 조건으로 사육한 것이다.

정기적으로 행하는 종양의 크기(장경 및 단경) 및 체중의 측정은 종양의 증식 정도를 확인하는 것으로서, 종양 크기(장경 및 단경)의 측정에는 버니어 캘리퍼스를 사용하고, 종양의 크기(종양 추정중량)를 장경(mm)×단경(mm)²/2의 식으로 산출하였다. 또한, 통계처리는 언페어드 t 검정으로 행하였다. 또한, 공시약의 투여 종료 후의 종양의 크기에 대해서는 적출한 종양의 중량을 직접 측정함으로써 행하였다. 이들 결과에 대해서 도 10∼도 13의 그래프(이식 Meth-A 종양 증식의 경시적 변화: 추정중량)에 나타내었다.

(3) 고찰

S-180 종양의 증식 억제 효과에 대하여: 증류수군(컨트롤군)에서는 S-180 종양은 경시적으로 증가하였으며, PSK 사전 투여군과 Ag0 시약 동일자 투여군에서는 S-180 종양의 경시적 증가가 약간 억제되는 경향이 있다(도 6 참조). Ag40 시약 사전 투여군과 Ag40 시약 동일자 투여군에서는 이식 10일 후부터 유의한 종양 증식 억제가 보인다(도 7 참조). Ag70 시약 투여군에서는 Ag70 시약 사전 투여군과 Ag 70 시약 사후 투여군 모두 이식 17일 후부터 유의한 종양 증식 억제가 보였다(도 8 참조). 단, Ag70 시약 동일자 투여군에서는 종양 증식이 억제된 것과 억제되지 않은 것이 있었기 때문에 평균값이 상승하여, 언페어드 t 검정에 있어서 유의차는 보이지 않았다. Ag150 시약 투여군에서는 Ag150 시약 사전 투여군, Ag150 시약 동일자 투여군 및 Ag150 시약 사후 투여군 모두 이식 10일 후부터 유의한 종양 증식 억제가 보였다(도 9 참조).

표 5에 이상의 시약 투여의 종료 후 S-180 종양의 추정중량 및 실중량을 나타내었다. 이 결과는 상기한 S-180 종양 증식 억제에 대한 각 시약의 억제 효과를 뒷받침하고 있다.

한편, S-180 종양을 이식한 마우스의 음수량과 체중 변화에 대하여 관찰하였더니, Ag0 시약, Ag40 시약, Ag70 시약, Ag150 시약 사이에 유의차는 없지만, 증류수에 비하여 다량으로 음수하였음을 확인하였다. 또, Ag0 시약, Ag40 시약, Ag70 시약, Ag150 시약, 증류수를 투여한 어느 마우스에서도 체중은 증가하였고, 체독성에 의한 마우스의 체중감소는 보이지 않았다.

Meth-A 종양의 증식 억제 효과에 대하여: 증류수군(컨트롤군)과 PSK의 각 투여군에서 Meth-A 종양은 경시적으로 증가하였고, 이들 사이에 유의차는 보이지 않는다. 또, Ag0 시약, Ag40 시약, Ag70 시약, Ag150 시약의 각 투여군에서도 Meth-A 종양은 마찬가지로 경시적으로 증가하였고, 이들 사이에 유의차는 보이지 않는다 (도 10∼도 13 참조).

실시예 3

본 실시예에서는 해당 면역부활제의 생성 장치에서 생성된 은 성분의 농도를 달리하는 전해 생성 알칼리성수, 증류수(컨트롤) 및 PSK(양성 대조)의 T 림프구에 대한 작용을 확인하는 실험을 행하였다.

본 실험에서는 각 시약을 투여한(24일) 마우스로부터 적출한 비장을 슬라이드 글래스로 찌그러뜨려 세포현탁액을 조제하고, 이것을 Lympholite-M에 중층하고, 20℃에서 2000rpm으로 20분간 원심분리하여 T 세포군을 얻었다. 얻어진 T 세포를 MEM 배지에 현탁하고, 1×10⁶세포/mL/웰로 조제하고, 항원으로서 S-180 막획분을 50㎕ 부가하고, 5% CO₂ 존재 하 37℃에서 24시간 배양하였다. 배양 종료 후 FITC 표식 CD3e 항체, PE 표식 CD233 항체를 반응시키고, 세정한 후 FACS(유세포분석기)로 림프구의 활성화를 측정하였다. 또한, 세포장해성을 나타내는 CD3e 항원의 발현과 NK(자연 세포독성) 활성을 보이는 CD233 항원의 발현에 대하여, 실시예 2의 결과로부터 각 시약 투여군 중의 종양 증식 및 억제의 전형적인 예를 보이는 개체를 추출하여 비장 T 림프구의 CD 발현을 FACS로 해석하였다. 얻어진 결과를 표 6(림프구에 대한 활성화 작용)에, 그리고 얻어진 FACS의 해석 결과를 도 14에 나타내었다.

도 14에서, UR 구역은 활성화 자연 세포독성 세포와 활성화 장해성 T 세포 (CD233(+), CD3e(+))를 나타내고, UL 구역은 활성화 자연 세포독성 세포(CD233(+))를 나타내고, LR 구역은 활성화 장해성 T 세포(CD3e(+))를 나타내고, LL 구역은 불활성화 림프구를 나타내고 있다. 얻어진 FACS의 해석 결과로부터는, 종양 증식 억제가 보이지 않은 컨트롤군과 Ag0 시약 투여군에서는 모두 CD3e(-) 및 CD233(-)의 불활성화 T 림프구가 65∼75%를 차지하고 있다. 또한, 종양 증식 억제를 보인 크레스틴(PSK: 양성대조) 투여군과 Ag150 시약 투여군에서는 CD233(+)와 CD3e(+)의 활성화 T 림프구의 비율은 13∼23%로서, 비억제군에 비교하여 약 3배 상승하였다.

이 결과는 Ag150 시약 투여에 의해 세포성 면역이 부활되었음을 나타내고 있다. 또한, 이 결과는 자연 세포독성 활성을 보이는 CD233(+), 세포장해성 T 세포 활성을 보이는 CD3e(+)의 T 림프구 비율도 증가하였음을 나타내고 있으므로, Ag40∼Ag150 시약(은 성분 함유 전해 생성 알칼리성수)에 의해 세포성 면역기능이 항진하여 항종양 작용을 발휘하고 있음을 시사하고 있다.

실시예 4

본 실시예에서는 무격막 전해(은 전극)-유격막 전해…본 발명에 따른 생성 장치…로 생성한 은 성분의 농도를 달리하는 전해 생성 알칼리성수(A군 공시약) 및 전해 생성 산성수(B군 공시약), 유격막 전해-무격막 전해(은 전극)로 생성한 은 성분의 농도를 달리하는 전해 생성 알칼리성수(C군 공시약), 무격막 전해(은 전극)로 생성한 전해 생성수(D군 공시약), 은 분말을 물에 첨가하여 충분히 교반하여 조제한 은 수용액(E군 공시약)에 대하여 마우스 이식 종양(S-180)에 대한 항종양 작용을 확인하기 위한 실험(생체내)을 행하였다.

(1) 실험

본 실험에서는 공시 동물로서 5주령 암컷 ddY계 마우스(일본 SLC에서 구입)를 채용하였다. ddY계 마우스에는 그 배쪽 피내에 1×10⁶개의 S-180 세포를 이식하고, 이식일을 0일로 하여 0일부터 14일(이식일로부터 14일)까지의 기간 동안 공시약을 마우스에게 자유 경구 섭취에 의해 투여하였다. 이 기간 동안 정기적으로 종양의 크기(장경 및 단경)를 외부에서 측정함과 동시에 체중을 측정하였다. 또한, 14일에 마우스를 방혈 치사시키고 종양을 적출하여 그 중량을 측정하였다.

본 실험에 있어서는, 공시약으로서 하기의 표 7에 나타낸 각 공시약 A군(A1, A2), 공시약 B군(B1, B2, B3), 공시약 C군(C1, C2), 공시약 D군(D1, D2) 및 공시약 E군(E1, E2)을 채용하였다. 또한, 본 실험에서는 컨트롤군으로서 공시약 대신 증류수를 채용하였다. 동물군에 대해서는 마우스를 구입 후 1주일 예비 사육 후 실험에 사용하였다. 사육은 마우스를 폴리카보네이트제의 케이지(32×231×13cm)에 5마리 넣고, 실온 23±0.5℃, 습도 55±5%의 환경에서 행하였고, 조명은 오전 8시∼오후 8시의 12시간 조사하였으며, 물, 모이는 자유 섭취할 수 있는 상태로 하였다.

(2) 결과

본 실험에 있어서, 정기적으로 행하는 종양의 크기(장경 및 단경) 및 체중의측정은 암의 증식 정도를 확인하는 것으로서, 종양 크기(장경 및 단경)의 측정에는 버니어 캘리퍼스를 사용하여, 종양의 크기(종양 추정중량)를 장경(mm)×단경(mm)²/2의 식으로 산출하였다. 한편, 통계처리는 언페어드 t 검정으로 행하였다. 또한, 공시약의 투여 종료 후의 종양의 크기에 대해서는 적출한 종양의 중량을 직접 측정함으로써 행하였다. 이들 결과를 공시약 A군에 대해서는 표 8에, 공시약 B군에 대해서는 표 9에, 공시약 C군에 대해서는 표 10에, 공시약 D군에 대해서는 표 11에, 공시약 E군에 대해서는 표 12에 각각 나타내었다.

또한, 이들 각 표에 나타낸 결과를 기초로 하여 각 측정일마다 정리한 결과(그래프)를 도 15(7일째), 도 16(10일째), 도 17(14일째)에 각각 나타내었다. 그리고 또한 이들 각 표에 나타낸 결과를 기초로 공시약의 생성 방법의 차이에 따른 결과(그래프)를 도 18에, 공시약의 투여 시기의 차이에 따른 결과(그래프)를 도 19에, 공시약의 은 이온 농도의 차이에 따른 결과(그래프)를 도 20에 각각 나타내었다.

(3) 고찰

본 실험의 결과를 참조하면, 공시약의 생성 방법의 차이에 관해서는 무격막 전해(은 전극)-유격막 전해법으로 생성한 은 성분 함유 전해 생성 산성수(공시약 A군)와 전해 생성 알칼리성수(공시약 B군)에는 높은 증식 억제 작용이 보인다. 단, 은 성분 함유 전해 생성 알칼리성수라도 유격막 전해-무격막 전해(은 전극)로 생성한 전해 생성 알칼리성수(공시약 C군)는 증식 억제 작용이 보이지 않는다. 또한, 무격막 전해(은 전극)로 생성한 은 함유 전해 생성수(공시약 D군)와 은 분말을 물에 첨가하여 조제한 은 수용액(공시약 E군)은 증식 억제 작용은 보이지 않는다.

공시약의 투여 시기의 차이에 관해서는 사전 투여와 동시 투여 모두 증식 억제 작용을 가지나, 동시 투여의 경우 쪽이 증식 억제 작용이 보다 높은 경향이 있음을 알 수 있다. 또한, 공시약의 은 이온 농도의 차이에 관해서는 은 성분이 은 이온 농도로 100ppb이면 높은 증식 억제 작용이 보이고, 은 성분이 은 이온 농도로 500ppb여도 증식 억제 작용에 차이가 보이지 않는다.

Claims

동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위하여 사용되는 면역부활제로서, 은 성분을 함유하는 물의 전해에 의해 생성된 약 알칼리성 전해수를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 면역부활제.
제 1 항에 있어서, 상기 약 알칼리성 전해수의 수소 이온 농도가 pH 9를 기준으로 pH 8.0∼10.0의 범위에 있고, 은 성분이 은 이온 환산 농도로 100ppb를 기준으로 30ppb∼20ppb의 범위에서 이온의 형태로 함유되어 있는 것을 특징으로 하는 면역부활제.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 약 알칼리성 전해수의 산화환원 전위가 +200mV를 기준으로 +400mV∼+800mV의 범위로 규정되어 있는 것을 특징으로 하는 면역부활제.
동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위하여 사용되는 면역부활제로서, 은 성분을 함유하는 물의 전해에 의해 생성된 약 산성 전해수를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 면역부활제.
제 4 항에 있어서, 상기 약 산성 전해수의 수소 이온 농도가 pH 6을 기준으 로 pH 5.0∼7.0의 범위이고, 은 성분이 은 이온 환산 농도로 100ppb를 기준으로 30 ppb∼200ppb의 범위에서 이온의 형태로 함유되어 있는 것을 특징으로 하는 면역부활제.
제 4 항 또는 제 5 항에 있어서, 상기 약 산성 전해수의 산화환원 전위가 400mV를 기준으로 +200mV∼+800mV의 범위로 규정되어 있는 것을 특징으로 하는 면역부활제.
동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위하여 사용되는 면역부활제의 생성 방법으로서, 은 성분을 함유하는 물을 유격막 전해조의 음극측 전해실에서 전해하여 은 성분 함유 약 알칼리성의 전해수를 유효성분으로 함유하는 면역부활제를 생성하는 것을 특징으로 하는 방법.
동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위하여 사용되는 면역부활제의 생성 방법으로서, 은 성분을 함유하는 물을 무격막 전해조 내의 음극측에서 전해하여 은 성분 함유 약 알칼리성의 전해수를 유효성분으로 함유하는 면역부활제를 생성하는 것을 특징으로 하는 방법.
동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위하여 사용되는 면역부활제의 생성 방법으로서, 은 성분을 함유하는 물을 유격막 전해조의 양극측 전해실에서 전해하여 은 성분 함유 약 산성의 전해수를 유효성분으로 함유하는 면역부활제를 생성하는 것을 특징으로 하는 방법.
동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위하여 사용되는 면역부활제의 생성 방법으로서, 은 성분을 함유하는 물을 무격막 전해조 내의 양극측에서 전해하여 은 성분 함유 약 산성의 전해수를 유효성분으로 함유하는 면역부활제를 생성하는 것을 특징으로 하는 방법.
동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위하여 사용되는 면역부활제의 생성 방법으로서, 은 분말을 물에 용해시켜 조정한 은 성분을 함유하는 수용액을 유격막 전해조의 음극측 전해실에서 전해하여 은 성분 함유 약 알칼리성의 전해수를 유효성분으로 함유하는 면역부활제를 생성하는 것을 특징으로 하는 방법.
동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위하여 사용되는 면역부활제의 생성 방법으로서, 은 분말을 물에 용해시켜 조정한 은 성분을 함유하는 수용액을 무격막 전해조의 음극측에서 전해하여 은 성분 함유 약 알칼리성의 전해수를 유효성분으로 함유하는 면역부활제를 생성하는 것을 특징으로 하는 방법.
수돗물, 천연수 등의 맑은 물을 처리하는 연수기와 정수기를 구비한 수처리 기구와, 은 전극을 양극측 전극으로서 그 내부에 구비하여 상기 수처리 기구에서 처리된 처리수를 전해하는 무격막 전해조와, 이 무격막 전해조에서 전해하여 생성된 전해수를 전해하는 유격막 전해조를 구비하여, 상기 유격막 전해조의 양극측 전해실로부터 은 성분 함유 약 산성 전해수를 도출하고, 동 유격막 전해조의 음극측 전해실로부터 은 성분 함유 약 알칼리성 전해수를 도출하여, 상기 약 산성 전해수 또는 약 알칼리성 전해수를 동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위한 면역부활제로 사용할 수 있도록 한 것을 특징으로 하는 면역부활제의 제조 장치.
수돗물, 천연수 등의 맑은 물을 처리하는 연수기와 정수기를 구비한 수처리 기구와, 은 전극을 양극측 전극으로서 그 내부에 구비하여 상기 수처리 기구에서 처리된 처리수를 전해하는 제 1 무격막 전해조와, 이 무격막 전해조에서 전해하여 생성된 전해수를 전해하는 제 2 무격막 전해조를 구비하여, 상기 제 2 무격막 전해조의 양극측 전해실로부터 은 성분 함유 약 산성 전해수를 도출하고, 동 제 2 무격막 전해조의 음극측 전해실로부터 은 성분 함유 약 알칼리성 전해수를 도출하여, 상기 약 산성 전해수 또는 약 알칼리성 전해수를 동종 이계 종양 세포의 증식을 억제하는 면역기능을 높이기 위한 면역부활제로 사용할 수 있도록 한 것을 특징으로 하는 면역부활제의 제조 장치.