CN116420831B - 一种鼠李糖乳杆菌sf-l30在制备改善机体血清素水平发酵饮品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一种鼠李糖乳杆菌SF‑L30在制备改善机体血清素水平发酵饮品中的应用。该鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)SF‑L30保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.23780,保藏日期为2021年11月11日,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明用于发酵的鼠李糖乳杆菌SF‑L30具有较强的肠胃适应能力,可有效调节肠胃菌群健康,具有提高机体免疫力的功效;本发明提供的鼠李糖乳杆菌SF‑L30发酵饮品能起到调节机体血清素含量水平的作用,对于轻度和中度抑郁症患者具有良好的预防和治疗效果。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一种鼠李糖乳杆菌SF-L30在制备改善机体血清素水平发酵饮品中的应用。
背景技术
血清素即5-羟色胺,是一种吲哚衍生物,简称5-HT,化学式为C10H12N2O,广泛存在于哺乳动物组织中,特别在大脑皮层质及神经突触内含量很高,它也是一种抑制性神经递质。5-HT能系统与调节记忆和学习的脑区之间存在着直接的解剖与神经化学联系,几乎影响到大脑活动的每一个方面:从调节情绪、精力、记忆力到塑造人生观。5-HT水平较低的人群更容易发生抑郁、冲动行为。科学家们甚至通过改变实验动物脑内5-HT的水平使他们更具有攻击性。5-HT假说是Coppen于1965年首先提出,认为抑郁症的发生是中枢神经系统中5-HT释放减少,突触间含量下降所致。由于5-HT的效力下降,随年龄增长患抑郁症的可能性增加。抗抑郁药如盐酸氟西汀就是通过提高脑内5-HT水平而起作用。目前,纯西药治疗抗抑郁具有较强的副作用,中药治疗虽然具有一定效果,副作用小,但是见效慢,口感差。
发明内容
针对现有技术产品副作用高、见效慢、口感差的问题,本发明提供一种鼠李糖乳杆菌SF-L30在制备改善机体血清素水平发酵饮品中的应用。
本发明提供一种鼠李糖乳杆菌SF-L30在制备改善机体血清素水平发酵饮品中的应用,该鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)SF-L30保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No. 23780,保藏日期为2021年11月11日,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
进一步的,鼠李糖乳杆菌SF-L30的培养方法为,将鼠李糖乳杆菌SF-L30接种于液体培养基,接种量为1%,在37℃恒温下发酵培养20h所得。
进一步的,液体培养基包括如下重量的组分:蛋白胨 10g、牛肉粉 5g、酵母粉 4g、K2HPO4·7H2O 2g、柠檬酸三铵 2g、葡萄糖 20g、CH3COONa·3H2O 5g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO4·4H2O 0.05g、吐温80 1mL、蒸馏水 1000mL。
进一步的,发酵饮品为被发酵底物经鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵后与调味料混合所得;发酵饮品中含有鼠李糖乳杆菌SF-L30的数量优选为10-30亿CFU/mL;
被发酵底物包括如下重量份数的组分:净化水 65~75份,蒲公英提取物 2~4份,姜黄提取物 3~5份,薄荷提取物 1~2份,栀子提取物 2~3份,甘草提取物 1~2份,荞麦提取物2~4份,红枣粉1~3份,决明子提取物 0.5~1份,百合提取物 2~3份,山药粉2~3份,沙棘提取物 1~2份。
进一步的,发酵饮品的制备方法具体包括如下步骤:
(1)将被发酵底物各组分混合,得到混合浆料;
(2)将混合浆料输送至灭菌容器中,120℃高压灭菌30min,然后冷却至30℃,得到灭菌液;
(3)将鼠李糖乳杆菌SF-L30接种到MRS液体培养基中,接种量为1%,37℃下培养20h得到接种剂;
(4)将接种剂接种于灭菌液中,接种量为1%,37℃下培养48h,得到发酵液;
(5)将发酵液输送至高压喷雾破壁机中,压力设置50MPa,进行破壁处理,得到破壁发酵液;
(6)破壁发酵液与调味料混合调味后,进行巴氏灭菌,得发酵饮品。
进一步的,被发酵底物包括如下重量份数的组分:净化水 68份,蒲公英提取物 2份,姜黄提取物 3份,薄荷提取物 1份,栀子提取物 2份,甘草提取物 1份,荞麦提取物 3份,红枣粉 2份,决明子提取物 1份,百合提取物 2份,山药粉 3份,沙棘提取物 2份。
进一步的,调味料包括如下重量份数的组分:蜂蜜1~3份,胡萝卜浓缩汁 2~4份,水蜜桃浓缩汁 2~4份。
进一步的,调味料包括如下重量份数的组分:蜂蜜 2份,胡萝卜浓缩汁 4份,水蜜桃浓缩汁 4份。
本发明发酵饮品的被发酵底物具备如下功效:
蒲公英:清热解毒,利尿散结;姜黄:破血行气,通经止痛;薄荷:疏散风热,清利头目,利咽透疹,疏肝行气;栀子:泻火除烦,清热利湿,凉血解毒,外用消肿止痛;甘草:具有补脾益气,清热解毒,祛痰止咳,缓急止痛;荞麦:开胃宽肠,下气消积;红枣:味甘性温、归脾胃经;决明子:清肝明目,利水通便,降血压降血脂;百合:养阴润肺,清心安神;山药:健脾,补肺,固肾,益精;沙棘:健脾消食。
本发明的有益效果在于:
(1)本发明用于发酵的鼠李糖乳杆菌SF-L30具有较强的肠胃适应能力,可有效调节肠胃菌群健康,具有提高机体免疫力的功效;
(2)本发明提供的鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品能起到调节机体血清素含量水平的作用,对于轻度和中度抑郁症患者具有良好的预防和治疗效果。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都应当属于本发明保护的范围。
本发明使用的MRS固体平板培养基包括以下组分:
蛋白胨 10g、牛肉粉 5g、酵母粉 4g、K2HPO4·7H2O 2g、柠檬酸三铵 2g、葡萄糖20g、CH3COONa·3H2O 5g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO4·4H2O 0.05g、吐温80 1mL、琼脂 15.0g、蒸馏水 1000mL。
本发明使用的MRS液体培养基包括以下组分:
蛋白胨 10g、牛肉粉 5g、酵母粉 4g、K2HPO4·7H2O 2g、柠檬酸三铵 2g、葡萄糖20g、CH3COONa·3H2O 5g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO4·4H2O 0.05g、吐温80 1mL、蒸馏水1000mL。
本发明使用的各物质提取物的制备方法为,分别将蒲公英、姜黄、薄荷、栀子、甘草、荞麦、决明子、百合、沙棘洗净后破碎成粗粒,分别用10倍量水煎煮2次,两次煎煮时间为3h、1h,合并两次滤液,静置2h后过滤得提取液,将提取液在真空度-0.06Mpa条件下浓缩至1.10倍(70℃),然后进行喷雾干燥,最后粉碎成80目细粉,即得各提取物;
红枣粉的制备方法为红枣去核加水预煮后得到红枣汁,将红枣汁打碎后加入0.01wt%果胶酶进行酶解(30℃,80min),真空加热浓缩酶解产物至原重量的20%,得到浓缩红枣浆,然后经两级高压均质处理、喷雾干燥,即得红枣粉;
山药粉的制备方法为选择光滑、无病斑、条形直顺的新铁棍鲜山药,洗净去皮,切成0.2~0.3cm厚薄片,并立即浸泡于0.5%亚硫酸氢钠水溶液中,3h后捞出,用清水洗净后放入沸水中烫漂8min,捞出山药薄片并用清水漂去粘液,之后将山药薄片烘干、电磨加工成粉,即得山药粉;
胡萝卜浓缩汁、水蜜桃浓缩汁的制备方法为分别将去皮的胡萝卜丁、水蜜桃丁预煮5min后打浆,用卧螺机提取浆液中的汁液,同时用两效真空蒸发器将物料浓缩至40%,高温杀菌,待物料冷却,即得胡萝卜浓缩汁、水蜜桃浓缩汁;
上述蒲公英提提取物、姜黄提取物、薄荷提取物、栀子提取物、甘草提取物、荞麦提取物、决明子提取物、百合提取物、沙棘提取物、胡萝卜浓缩汁、蜂蜜、水蜜桃浓缩汁也可使用其他方法制备或购买相应市售产品。
实施例1 鼠李糖乳杆菌SF-L30的分离和鉴定
1、菌源
酸奶,2021年1月采集于青海省西宁市。
2、菌株的分离
对酸奶样品做十倍梯度稀释,每个梯度取100μL均匀涂布于MRS固体平板培养基上,随后取出置于厌氧罐中,37℃厌氧培养过夜;
次日可见平板上长有形态大小各异的菌落,挑取若干乳酸菌的特征菌落作二代划线纯化处理,平板厌氧活化1天,得培养物,随后做菌株鉴定。
3、鼠李糖乳杆菌SF-L30的鉴定
(1)鉴定单位
生工生物工程(上海)股份有限公司。
(2)引物序列
27F:5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3';
1492R:5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'。
(3)鉴定的序列
TTGATTTAATTTTGAACGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCTTAAGTGGGGGATAACATTTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAAATCCAAGAACCGCATGGTTCTTGGCTGAAAGATGGCGTAAGCTATCGCTTTTGGATGGACCCGCGGCGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCAATGATACGTAGCCGAACTGAGAGGTTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGCAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTTGGAGAAGAATGGTCGGCAGAGTAACTGTTGTCGGCGTGACGGTATCCAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCTCGGCTTAACCGAGGAAGTGCATCGGAAACTGGGAAACTTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCATGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAATGCTAGGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCTTTTGATCACCTGAGAGATCAGGTTTCCCCTTCGGGGGCAAAATGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATGACTAGTTGCCAGCATTTAGTTGGGCACTCTAGTAAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAACGAGTTGCGAGACCGCGAGGTCAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTTCGGACTGTAGGCTGCAACTCGCCTACACGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCACGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTTTGTAACACCCGAAGCCGGTGGCGTAACCCTTTTA。
(4)鉴定结果
该菌株被鉴定为Lactobacillus(乳杆菌属),推测为Lactobacillus rhamnosus(鼠李糖乳杆菌)。
实施例2 一种鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品
准备原料,包括被发酵底物和调味料,其中被发酵底物包括如下重量份的组分:净化水68份,蒲公英提取物2份,姜黄提取物3份,薄荷提取物1份,栀子提取物2份,甘草提取物1份,荞麦提取物3份,红枣粉2份,决明子提取物1份,百合提取物2份,山药粉3份,沙棘提取物2份。 调味料包括如下重量份的组分:蜂蜜2份,胡萝卜浓缩汁4份,水蜜桃浓缩汁4份。
按照如下工艺步骤制备发酵饮品:(1)首先将被发酵底物的各组分混合,得到混合浆料;(2)将混合浆料输送至灭菌容器中,120℃高压灭菌30min,然后冷却至30℃,得到灭菌液;(3)将鼠李糖乳杆菌SF-L30接种到MRS液体培养基中,接种量为1%,37℃下培养20h得到接种剂;(4)将接种剂接种于灭菌液中,接种量为1%,37℃下培养48h,得到发酵液;(5)将发酵液输送至高压喷雾破壁机中,压力设置50MPa,进行破壁处理,得到破壁发酵液;(6)破壁发酵液与调味料混合调味后,进行巴氏灭菌,得发酵饮品。
实施例3 一种鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品
准备原料,包括被发酵底物和调味料,其中被发酵底物包括如下重量份的组分:净化水65份,蒲公英提取物4份,姜黄提取物4份,薄荷提取物2份,栀子提取物3份,甘草提取物2份,荞麦提取物4份,红枣粉3份,决明子提取物0.5份,百合提取物3份,山药粉2份,沙棘提取物1份。 调味料包括如下重量份的组分:蜂蜜3份,胡萝卜浓缩汁2份,水蜜桃浓缩汁2份。按照实施例2工艺步骤制备发酵饮品。
实施例4 一种鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品
准备原料,包括被发酵底物和调味料,其中被发酵底物包括如下重量份的组分:净化水75份,蒲公英提取物3份,姜黄提取物5份,薄荷提取物1.5份,栀子提取物2.5份,甘草提取物1.5份,荞麦提取物2份,红枣粉1份,决明子提取物0.75份,百合提取物2.5份,山药粉2.5份,沙棘提取物1.5份。 调味料包括如下重量份的组分:蜂蜜1份,胡萝卜浓缩汁3份,水蜜桃浓缩汁3份。按照实施例2工艺步骤制备发酵饮品。
实施例5 一种鼠李糖乳杆菌ACCC 10534发酵饮品
按照实施例2准备原料,并按照如下工艺步骤制备发酵饮品:
(1)首先将被发酵底物的各组分混合,得到混合浆料;(2)将混合浆料输送至灭菌容器中,120℃高压灭菌30min,然后冷却至30-40℃,得到灭菌液;(3)将鼠李糖乳杆菌ACCC10534接种到MRS液体培养基中,接种量为1%,37℃下培养20h得到接种剂;(4)将接种剂接种于灭菌液中,接种量为1%,37℃下培养48h,得到发酵液;(5)将发酵液输送至高压喷雾破壁机中,压力设置50MPa,进行破壁处理,得到破壁发酵液;(6)破壁发酵液与调味料混合调味后,进行巴氏灭菌,得发酵饮品。
实施例6 一种鼠李糖乳杆菌ACCC 05450发酵饮品
按照实施例2准备原料,并按照如下工艺步骤制备发酵制品:(1)首先将被发酵底物的各组分混合,得到混合浆料;(2)将混合浆料输送至灭菌容器中,120℃高压灭菌30min,然后冷却至30-40℃,得到灭菌液;(3)将鼠李糖乳杆菌ACCC 05450接种到MRS液体培养基中,接种量为1%,37℃下培养20h得到接种剂;(4)将接种剂接种于灭菌液中,接种量为1%,37℃下培养48h,得到发酵液;(5)将发酵液输送至高压喷雾破壁机中,压力设置50MPa,进行破壁处理,得到破壁发酵液;(6)破壁发酵液与调味料混合调味后,进行巴氏灭菌,得发酵饮品。
测试例1 鼠李糖乳杆菌SF-L30的胃肠道适应性测试
(1)模拟胃液的配置:将胃蛋白酶溶于灭菌的生理盐水(0.9%w/v,pH值为3.0),使胃蛋白酶终浓度为3g/L,以0.22μm无菌滤膜过滤,现配现用;
(2)模拟肠液的配置:将胰蛋白酶溶于灭菌的生理盐水(0.9%w/v,pH值为8.0),使胰蛋白酶终浓度为1g/L,并加入胆盐使胆盐终浓度为0.3%,以0.22μm无菌滤膜过滤,现配现用;
(3)分别将鼠李糖乳杆菌SF-L30、鼠李糖乳杆菌ACCC 10534和鼠李糖乳杆菌ACCC05450连续活化三代(每代18h),测定连续活化三代的菌株在A600下的OD值,通过计算求出OD5所需的菌液量;
(4)将OD5的菌液以8000G离心10min,弃上清,重悬于1mL模拟胃液中,37℃培养3h后进行平板活菌计数;取模拟胃液处理后的菌液8000G离心10min,弃上清,重悬于等体积的模拟肠液中,37℃培养4h后进行平板活菌计数。按照如下公式计算各菌株的耐受胃肠液后的存活率,分析各菌株的胃肠道适应能力。耐受胃肠液后的存活率(%)=(耐受模拟肠液后菌液中的活菌数/菌液中的原始活菌数)×100%。
结果如下表2所示,可以看出,本发明鼠李糖乳杆菌SF-L30较其他鼠李糖乳杆菌胃肠适应能力强。
表1 鼠李糖乳杆菌SF-L30胃肠道适应性测试
测试例2鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品对慢性束缚应激小鼠行为及血清素水平的影响
将60只SPF级Balb-c健康雄性小鼠随机分为5组,每组12只,分为对照组、实施例2组、实施例3组、实施例5组、实施例6组。小鼠分组后第1~3天正常饲喂。第4~14天通过构建慢性不可预见应激模型,每天给予小鼠不同刺激,每天随机选取2种:拥挤(4h)、气味刺激(12h)、冰水浴(3min)、禁食(12h)、禁水(12h)、倾笼(12h)、昼夜颠倒(12h)、夹尾(2min)、摇晃鼠笼(10min)、孤独(3h)、潮湿垫料(12h)。然后按照如下方法进行分组灌服实验:(1)对照组:连续饲喂基础日料3周,灌服生理盐水10mL/只。(2)实施例2组:连续饲喂基础日料3周,每天灌服实施例2制备的鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品10mL/只。(3)实施例3组:连续饲喂基础日料3周,每天灌服实施例3制备的鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品10mL/只。(4)实施例5组:连续饲喂基础日料3周,每天灌服实施例5制备的鼠李糖乳杆菌ACCC10534发酵饮品10mL/只。(5)实施例6组:连续饲喂基础日料3周,每天灌服实施例6制备的鼠李糖乳杆菌ACCC05450发酵饮品10mL/只。
试验方法:(1)自主活动试验:各组小鼠在灌服实验第3周最后2d,应用小鼠自主活动程序仪测定小鼠5min内的活动次数。(2)糖水摄入量实验:各组小鼠在灌服实验第3周最后2d,每只小鼠加1%蔗糖溶液100ml,同时进行禁食,计算小鼠24h饮用1%蔗糖溶液量。(3)悬尾实验:各组小鼠在灌服实验第3周最后1d的上午对各组小鼠进行悬尾测试。将小鼠尾尖端1/3处固定在悬尾箱内,使动物呈悬空倒挂状,悬挂两侧用隔板挡住小鼠视线。动物为克服不正常体位而挣扎活动,但当感觉无望后,停止挣扎。实验共进行6min,记录后4min内的不动时间。(4)强迫游泳实验:各组小鼠在灌服实验第3周最后1d的下午对各组小鼠进行强迫游泳测试。将小鼠放入水深10cm的塑料杯中强迫游泳,观察6min,记录后4min保持不动的时间。(5)血清素水平检测:实验完成后处死动物。取出小鼠脑组织称重,将脑组织放入玻璃匀浆器中,加入2倍脑组织体积的生理盐水充分匀浆。将脑组织匀浆液以4000 r/min,离心10min。取200μL上清液,加入1.2ml乙酸乙酯,混匀后于4℃,15000 r/min,离心15 min。取1ml上清液,氮气吹干,加入100μL流动相混匀、离心后,取样测定。
表2 试验小鼠自主活动次数、糖水摄入量比较
表3 鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品对慢性束缚应激小鼠行为的影响
表4 试验小鼠血清素平均水平(5-HT)比较
注:“*”表示与对照组相比p<0.05
由表2与表3可以看出,与对照组相比,本发明提供的鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品能提高小鼠自由活动次数,提高糖水摄入,并且够降低小鼠的悬尾累计不动时间和强迫游泳不动时间,其中实施例2组、实施例3组有统计学意义(p<0.05)。由表4可以看出,实施例试验组明显高于对照组,其中实施例2组、实施例3组小鼠5-HT含量水平现状提高(p<0.05),通过以上数据可以说明本发明提供的鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品可通过提高小鼠体内的血清素水平降低小鼠抑郁症发生概率。
测试例3 本发明鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品的临床实验
采用完全随机方法,选取轻中度抑郁症患者60人,随机分成4组,分别为实施例2组、实施例3组、实施例5组、实施例6组,每组15人,在正常治疗基础上,加用本发明实施例2-5制得的鼠李糖乳杆菌发酵饮品,每次10ml,每日2次。连续治疗8周。以HAMD量表评定对疾病的疗效。HAMD减分率=(治疗前评分-治疗后评分)/治疗前评分×100%。表5示出了临床试验结果。
表5 鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品临床试验结果
通过表5统计数据发现,在正常治疗的基础上服用本发明鼠李糖乳杆菌SF-L30发酵饮品可在一定程度上改善治疗效果,尤其是实施例2的治疗效果更为显著。
尽管通过优选实施例的方式对本发明进行了详细描述,但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下,本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的修改或替换,而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (1)
1.一种鼠李糖乳杆菌SF-L30在制备改善机体血清素水平发酵饮品中的应用,其特征在于,该鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)SF-L30保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No. 23780,保藏日期为2021年11月11日,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号;
发酵饮品的制备方法包括如下步骤:
(1)首先将被发酵底物的各组分混合,得到混合浆料;
(2)将混合浆料输送至灭菌容器中,120℃高压灭菌30min,然后冷却至30℃,得到灭菌液;
(3)将鼠李糖乳杆菌SF-L30接种到MRS液体培养基中,接种量为1%,37℃下培养20h得到接种剂;
(4)将接种剂接种于灭菌液中,接种量为1%,37℃下培养48h,得到发酵液;(5)将发酵液输送至高压喷雾破壁机中,压力设置50MPa,进行破壁处理,得到破壁发酵液;
(6)破壁发酵液与调味料混合调味后,进行巴氏灭菌,得发酵饮品;
步骤(1)中被发酵底物包括如下重量份的组分:净化水68份,蒲公英提取物2份,姜黄提取物3份,薄荷提取物1份,栀子提取物2份,甘草提取物1份,荞麦提取物3份,红枣粉2份,决明子提取物1份,百合提取物2份,山药粉3份,沙棘提取物2份;
步骤(6)中调味料包括如下重量份的组分:蜂蜜2份,胡萝卜浓缩汁4份,水蜜桃浓缩汁4份。
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