CN116271012A

CN116271012A - 高浓度抗c5抗体制剂

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Publication number: CN116271012A
Application number: CN202310099760.1A
Authority: CN
Inventors: S·奥尔蒂斯; J·真蒂莱; L·菲罗米纳坦; E·劳希尔; B·梅森
Original assignee: Alexion Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Alexion Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2017-07-27
Filing date: 2018-07-27
Publication date: 2023-06-23
Also published as: KR20200034739A; WO2019023564A8; JP7079844B2; CN111315411A; DK3658184T3; CA3069756A1; EP3658184B1; JP2023090876A; CN111315411B; SI3658184T1; RU2020108198A; KR102576012B1; RU2020108198A3; MX2022005990A; AU2022279414A1; AU2018306612A1; HUE064436T2; EP3658184A1; JP2020528894A; KR20230066126A

Abstract

本公开涉及包含高浓度的抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)的稳定水溶液及制备所述溶液的方法。本公开还提供了使用所述溶液治疗或预防补体相关病症，诸如阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)和非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)的方法。还涉及治疗试剂盒，其含有以下一者或多者：所述溶液，以及用于向需要这种治疗的患者施用所述溶液的工具。

Description

高浓度抗C5抗体制剂

本申请是申请日为2018年7月27日、申请号为201880048000.5、发明名称为“高浓度抗C5抗体制剂”的发明专利申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

本申请要求2017年7月27日提交的美国临时申请序列号62/537,741的权益。上述临时专利申请的全部内容通过引用并入本文。

序列表

本申请包含序列表，该序列表已经以ASCII格式以电子方式提交并通过引用整体并入本文。创建于2018年7月26日的所述ASCII副本命名为AXJ-226PC_SL.txt，且大小为32,987字节。

背景技术

补体系统连同机体的其他免疫系统一起发挥作用，以防御细胞和病毒病原体的侵入。至少存在25种补体蛋白，这些蛋白是作为血浆蛋白和膜辅因子的复杂集合而发现的。血浆蛋白占脊椎动物血清球蛋白的约10％。补体组分通过在一系列复杂但精确的酶促裂解和膜结合事件中相互作用来实现其免疫防御功能。产生的补体级联反应导致产生具有调理、免疫调节和裂解功能的产物。例如，在The Merck Manual第16版中提供了与补体激活相关的生物活性的简明摘要。

虽然功能正常的补体系统提供了针对感染性微生物的稳固防御，但补体途径的不适当调节或激活已牵涉到多种病症的发病机制中，包括阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)和非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)(参见，例如，Socié G等人，French Society ofHaematology.Lancet.1996；348(9027)：573-577；Brodsky，R.，Blood.2014；124(18)：2804-2811)；Hillmen，P.等人，Am.J.Hematol.2010；85(8)：553-559；Caprioli等人(2006)Blood108：1267-1279；和Kavanagh等人(2006)British Medical Bulletin 77 and 78：5-22)。

患有补体相关病症(诸如PNH或aHUS)的患者有大量发病和死亡的风险。因此，本发明的目的是提供用于治疗患有补体相关病症的患者的改良组合物和方法。

发明内容

本文提供了稳定的高浓缩抗C5抗体水溶液，以及制备和使用所述制剂的方法。除其他方面外，本公开提供了适于在高浓度溶液中在相当长的时间内维持抗C5抗体(例如，雷武珠单抗(ravulizumab)，也称为“抗体BNJ441”和“ALXN1210”)的物理和功能稳定性的配制条件。例如，本公开提供了能够在2℃至8℃下维持抗C5抗体主要呈单体形式长达2年的配制条件，即使该抗体以大约100mg/mL或更高的浓度维持在溶液中时也是如此。另外，如本文所述和在工作实施例中举例说明的那样，此类制剂还使高浓缩溶液中抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)的聚集、片段化或降解减到最少。例如，本公开提供了能够维持抗C5抗体呈高浓缩形式两年且没有可检测到的抗体片段化或降解产物(如使用尺寸排阻色谱-高效液相色谱技术(SEC-HPLC)，诸如HPLC-凝胶渗透所测定的)且聚集物不超过2％的配制条件。本文还提供了适于配制高于200mg/mL的抗C5抗体(诸如雷武珠单抗)溶液的条件。

稳定的高浓缩抗C5抗体水溶液的益处很多。首先，对于需要以小体积向患者施用抗体的治疗应用，治疗功效常常取决于该小体积中可以施用的抗体的量。在不能将抗C5抗体配制成高浓度的情况下，常常将避免使用例如皮下、玻璃体内和/或关节内递送途径。相关地，高浓缩抗体制剂关于施用途径方面允许更多的患者选择。对于需要频繁、长期施用和/或自我递送的治疗应用，通过高浓度制剂使得施用成为可能，并且比静脉输注对患者更具吸引力。例如，抗C5抗体的高浓度制剂可以允许患者通过例如皮下或静脉注射来自我施用抗体。因此，配制高浓度抗体的能力通过为患有补体相关病症的患者提供简便的家庭施用替代方案，可以提高施用依从性。

此外，用于产生本文所述的水溶液的方法不需要冻干步骤，特别报导的高浓度水溶液也不需要由冻干材料重构。当前特别报导的高浓度抗体溶液提供了几个优于重构的冻干抗体制剂的优势。首先，执业医师必须在无菌条件下在本地重构冻干的抗体溶液，这增加了施用前溶液中微生物污染的机会。另外，重构需要相当小心，以确保重构容器中所含的所有固体均已适当溶解在溶液中。因此，本文提供的高浓度水溶液为执业医师、护理人员和/或患者提供了快速、容易、安全且有效的方式，用于将治疗性抗体递送给有需要的患者。

高浓度制剂的其他益处包括例如，由于减少了大量储存空间和/或产品填装数而节省了制造成本。另外，生产具有更长保质期的产品的能力最终将需要更少的生产运行，这最终降低了高浓缩治疗性抗体的制造商和消费者的成本。

示例性的抗C5抗体是雷武珠单抗(也称为抗体BNJ441和ALXN1210)，包含分别具有SEQ ID NO：14和11所示的序列的重链和轻链，或其抗原结合片段和变体。在其他实施方案中，该抗体包含雷武珠单抗的重链和轻链互补决定区(CDR)或可变区(VR)。因此，在一个实施方案中，该抗体包含具有SEQ ID NO：12所示序列的雷武珠单抗重链可变(VH)区的CDR1、CDR2和CDR3结构域，以及具有SEQ ID NO：8所示序列的雷武珠单抗轻链可变(VL)区的CDR1、CDR2和CDR3结构域。在另一个实施方案中，该抗体包含分别如SEQ ID NO：19、18和3所示的CDR1、CDR2和CDR3重链序列，以及分别如SEQ ID NO：4、5和6所示的CDR1、CDR2和CDR3轻链序列。

在另一个实施方案中，该抗体包含分别具有SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：8所示氨基酸序列的VH和VL区。

在另一个实施方案中，该抗体包含如SEQ ID NO：13所示的重链恒定区。

在另一个实施方案中，该抗体包含与人新生儿Fc受体(FcRn)结合的变体人Fc恒定区，其中所述变体人Fc CH3恒定区在对应于天然人IgG Fc恒定区的甲硫氨酸428和天冬酰胺434的残基处包含Met-429-Leu和Asn-435-Ser取代，各自按照EU编号。

在另一个实施方案中，该抗体包含分别如SEQ ID NO：19、18和3所示的CDR1、CDR2和CDR3重链序列，和分别如SEQ ID NO：4、5和6所示的CDR1、CDR2和CDR3轻链序列，以及与人新生儿Fc受体(FcRn)结合的变体人Fc恒定区，其中所述变体人Fc CH3恒定区在对应于天然人IgGFc恒定区的甲硫氨酸428和天冬酰胺434的残基处包含Met-429-Leu和Asn-435-Ser取代，各自按照EU编号。

在另一个实施方案中，该抗体与以上提到的抗体竞争结合和/或结合C5上的相同表位。在另一个实施方案中，该抗体与以上提到的抗体具有至少约90％的可变区氨基酸序列同一性(例如，与SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：8具有至少约90％、95％或99％的可变区同一性)。

在另一个实施方案中，该抗体在pH 7.4和25℃下与人C5结合，亲和力解离常数(K_D)在0.1nM≤K_D≤1nM范围内。在另一个实施方案中，该抗体在pH 6.0和25℃下与人C5结合，K_D≥10nM。在另一个实施方案中，该抗体的[(抗体或其抗原结合片段在pH 6.0和25℃下对人C5的K_D)/(该抗体或其抗原结合片段在pH 7.4和25℃下对人C5的K_D)]大于25。

一方面，提供了一种稳定水溶液(例如，无菌溶液)，其中该溶液包含浓度为约100mg/mL的抗C5抗体，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3。在另一个实施方案中，该溶液包含浓度为或约为105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200、205、210、215、220、225、230、235、240、245、250、255、260、265、270、275、280、285、290、295或300mg/mL的抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)。

在另一个实施方案中，稳定水溶液包含一种或多种附加药剂(例如，稳定剂、缓冲剂、表面活性剂和/或防腐剂)。例如，在一个实施方案中，稳定水溶液包含稳定剂。示例性的稳定剂包括但不限于多元醇、糖(例如，蔗糖或海藻糖)、氨基酸(例如精氨酸)、胺和盐析盐。在一个实施方案中，该溶液包含至少一种浓度为2-10％(包括端值)的稳定剂。在一个实施方案中，该溶液包含5％蔗糖。在另一个实施方案中，该溶液包含至少一种或多种浓度为10mM至50mM(包括端值)的稳定剂。在另一个实施方案中，稳定剂以至少或等于20mM的浓度存在于溶液中。在另一个实施方案中，稳定剂以至少或等于25mM的浓度存在于溶液中。在另一个实施方案中，稳定剂以至少或等于50mM的浓度存在于溶液中。在另一个实施方案中，该溶液包含25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，该溶液包含至少一种或多种缓冲剂。可以包含在洗涤液中的典型缓冲液的非限制性实例包括Tris(三(羟甲基)甲胺)、双-Tris、双-Tris丙烷、组氨酸、三乙醇胺、二乙醇胺、甲酸盐、乙酸盐、MES(2-(N-吗啉)乙磺酸、磷酸盐、HEPES(4-2-羟乙基-1-哌嗪乙烷磺酸)、柠檬酸盐、MOPS(3-(N-吗啉)丙磺酸)、TAPS(3{[三(羟甲基)甲基]氨基}丙磺酸)、Bicine(N，N-双(2-羟乙基)甘氨酸)、Tricine(N-三(羟甲基)甲基甘氨酸)、TES(2-{[三(羟甲基)甲基]氨基}乙磺酸)、PIPES(哌嗪-N，N’-双(2-乙磺酸)、二甲基胂酸盐(二甲胂酸)SSC(柠檬酸钠盐水)和磷酸钠。在另一个实施方案中，缓冲剂是氨基酸。氨基酸可以是例如，选自组氨酸(例如，L-组氨酸)、丝氨酸(例如，L-丝氨酸)和甘氨酸(例如，L-甘氨酸)中的一种。在另一个实施方案中，该溶液包含两种或更多种缓冲剂。在一个特定实施方案中，缓冲剂是磷酸钠。

在另一个实施方案中，该溶液包含至少一种或多种浓度为10mM至300mM(包括端值)的缓冲剂。在另一个实施方案中，该溶液包含至少一种浓度为10mM至200mM(包括端值)的缓冲剂。在另一个实施方案中，该溶液包含至少一种浓度为10mM至100mM(包括端值)的缓冲剂。在另一个实施方案中，该溶液包含至少一种浓度为10mM至50mM(包括端值)的缓冲剂。在另一个实施方案中，该溶液包含至少一种浓度为20mM至50mM(包括端值)的缓冲剂。在另一个实施方案中，缓冲剂以至少或等于20mM的浓度存在于溶液中。在另一个实施方案中，缓冲剂以至少或等于25mM的浓度存在于溶液中。在另一个实施方案中，缓冲剂以至少或等于50mM的浓度存在于溶液中。

在另一个实施方案中，该溶液包含浓度为0.1％至5％的碳水化合物赋形剂。在一个实施方案中，碳水化合物赋形剂以至少或等于1.5％的浓度存在于溶液中。在另一个实施方案中，碳水化合物赋形剂以至少或等于3％的浓度存在于溶液中。碳水化合物赋形剂可以是例如，选自山梨醇和甘露醇的碳水化合物赋形剂。在另一个实施方案中，该溶液包含两种或更多种碳水化合物赋形剂。

在另一个实施方案中，该溶液包含表面活性剂。适合用于本发明制剂的表面活性剂包括但不限于脂肪酸酯(例如，山梨糖醇酐单辛酸酯、山梨糖醇酐单月桂酸酯、山梨糖醇酐单棕榈酸酯)、山梨糖醇酐三油酸酯、脂肪酸甘油酯(例如，单辛酸甘油酯、单肉豆蔻酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯)、脂肪酸聚甘油酯(例如，单硬脂酸十甘油酯、二硬脂酸十甘油酯、单亚油酸十甘油酯)、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯(例如，聚氧乙烯山梨糖醇酐单月桂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单棕榈酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐三油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐三硬脂酸酯)、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯(例如，聚氧乙烯山梨醇四硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨醇四油酸酯)、聚氧乙烯脂肪酸甘油酯(例如，聚氧乙烯单硬脂酸甘油酯)、聚乙二醇脂肪酸酯(例如，聚乙二醇二硬脂酸酯)、聚氧乙烯烷基醚(例如，聚氧乙烯月桂醚)、聚氧乙烯聚氧丙烯烷基醚(例如，聚氧乙烯聚氧丙烯二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯丙醚、聚氧乙烯聚氧丙烯鲸蜡醚)、聚氧乙烯烷基苯基醚(例如，聚氧乙烯壬基苯基醚)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(例如，聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油)、聚氧乙烯蜂蜡衍生物(例如，聚氧乙烯山梨醇蜂蜡)、聚氧乙烯羊毛脂衍生物(例如，聚氧乙烯羊毛脂)和聚氧乙烯脂肪酸酰胺(例如，聚氧乙烯硬脂酸酰胺)；C12-C18烷基硫酸盐(例如，鲸蜡醇硫酸酯钠、月桂基硫酸钠、油基硫酸钠)、聚氧乙烯C10-C18烷基醚硫酸盐(平均添加2至4摩尔环氧乙烷单元)(例如，聚氧乙烯月桂基硫酸钠)和C10-C18烷基磺酸琥珀酸酯盐(例如，月桂基磺酸琥珀酸酯钠)；和天然表面活性剂，诸如卵磷脂、甘油磷脂、鞘磷脂(例如，鞘髓磷脂)，和C12-C18脂肪酸的蔗糖酯。

在一个实施方案中，制剂中的表面活性剂是非离子型表面活性剂。在某些实施方案中，制剂中的表面活性剂是聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯，例如聚山梨醇酯20、40、60、80或其一种或多种的组合。在一个实施方案中，制剂中的表面活性剂是聚山梨醇酯80(Tween80)。在另一个实施方案中，制剂中的表面活性剂是聚山梨醇酯60。在另一个实施方案中，制剂中的表面活性剂是聚山梨醇酯40。在另一个实施方案中，制剂中的表面活性剂是聚山梨醇酯20(Tween 20)。溶液中表面活性剂的浓度可以例如，在0.001％至0.02％之间(包括端值)。例如，表面活性剂可以以约0.001％至约1％，或约0.001％至约0.5％，或约0.01％至约0.2％的量存在于制剂中。在一个实施方案中，水溶液含有浓度为至少或大约0.001％(例如，至少或大约0.002％、0.003％、0.004％、0.005％、0.006％、0.007％、0.008％、0.009％、0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.11％、0.12％、0.13％、0.14％、0.15％、0.16％、0.17％、0.18％、0.19％、0.2％、0.21％、0.22％、0.23％、0.24％、0.25％、0.26％、0.27％、0.28％、0.29％、0.3％、0.31％、0.32％、0.33％、0.34％、0.35％、0.36％、0.37％、0.38％、0.39％、0.4％、0.41％、0.42％、0.43％、0.44％、0.45％、0.46％、0.47％、0.48％、0.49％或0.5％或更高)的表面活性剂。在另一个实施方案中，水溶液含有不超过0.2％(例如，不超过0.19％、0.18％、0.17％、0.16％、0.15％、0.14％、0.13％、0.12％、0.11％、0.10％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、0.009％、0.008％、0.007％、0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％或0.001％)的药学上可接受的表面活性剂。在一个特定实施方案中，表面活性剂是0.05％的聚山梨醇酯80。

在另一个实施方案中，溶液包含防腐剂。示例性的防腐剂包括但不限于苯甲醇、间甲酚和苯酚。

在一个实施方案中，稳定水溶液除抗C5抗体外还包含不超过五种药剂。在另一个实施方案中，稳定水溶液除抗C5抗体外还包含不超过四种药剂。在另一个实施方案中，稳定水溶液除抗C5抗体外还包含不超过三种药剂。在另一个实施方案中，稳定水溶液除抗C5抗体外还包含不超过两种药剂。在另一个实施方案中，稳定水溶液除抗C5抗体外还包含不超过一种药剂。

在另一个实施方案中，稳定水溶液包含：浓度为100±20mg/mL(例如，80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119或120mg/mL)的抗C5抗体，所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；50±15mM(例如，35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64或65mM)磷酸盐缓冲液；5±3％(例如，2％、3％、4％、5％、6％、7％或8％)蔗糖；和25±10mM(例如15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35mM)精氨酸；其中溶液的pH为7.4±0.5(例如，6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8或7.9)。

在另一个实施方案中，稳定水溶液由以下组成：浓度为100±20mg/mL(例如，80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119或120mg/mL)的抗C5抗体，所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ IDNO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；50±15mM(例如，35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64或65mM)磷酸盐缓冲液；5±3％(例如，2％、3％、4％、5％、6％、7％或8％)蔗糖；和25±10mM(例如15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35mM)精氨酸；其中溶液的pH为7.4±0.5(例如，6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8或7.9)。

在另一个实施方案中，稳定水溶液包含：浓度为100±20mg/mL(例如，80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119或120mg/mL)的抗C5抗体，所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；50±15mM(例如，35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64或65mM)磷酸盐缓冲液；5±3％(例如，2％、3％、4％、5％、6％、7％或8％)蔗糖；25±10mM(例如，15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35mM)精氨酸；和0.05±0.03％(例如，0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％和0.08％)聚山梨醇酯80，其中溶液的pH为7.4±0.5(例如，6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8或7.9)。

在另一个实施方案中，稳定水溶液由以下组成：浓度为100±20mg/mL(例如，80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119或120mg/mL)的抗C5抗体，所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ IDNO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；50±15mM(例如，35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64或65mM)磷酸盐缓冲液；5±3％(例如，2％、3％、4％、5％、6％、7％或8％)蔗糖；25±10mM(例如，15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35mM)精氨酸；和0.05±0.03％(例如，0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％和0.08％)聚山梨醇酯80，其中溶液的pH为7.4±0.5(例如，6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8或7.9)。

在另一个实施方案中，提供了一种稳定水溶液(例如，无菌溶液)，其中该溶液包含(a)抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)，(b)约50mM磷酸盐缓冲液；(c)约5％蔗糖；(d)约25mM精氨酸。在另一个实施方案中，提供了一种稳定水溶液(例如，无菌溶液)，其中该溶液包含(a)浓度为约100mg/mL的抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)，(b)约50mM磷酸盐缓冲液；(c)约5％蔗糖；(d)约25mM精氨酸。在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含：a)抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)，(b)50mM磷酸盐缓冲液；(c)5％蔗糖；和(d)25mM精氨酸。在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含：a)浓度为100mg/mL的抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)，(b)50mM磷酸盐缓冲液；(c)5％蔗糖；和(d)25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含(a)抗C5抗体，(b)约50mM磷酸盐缓冲液，(c)约5％蔗糖，(d)约0.05％聚山梨醇酯80，和(e)约25mM精氨酸。在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含(a)浓度为约100mg/mL的抗C5抗体，(b)约50mM磷酸盐缓冲液，(c)约5％蔗糖，(d)约0.05％聚山梨醇酯80，和(e)约25mM精氨酸。在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含(a)抗C5抗体，(b)50mM磷酸盐缓冲液，(c)5％蔗糖，(d)0.05％聚山梨醇酯80，和(e)25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含(a)抗C5抗体，(b)50mM磷酸盐缓冲液，(c)5％蔗糖，(d)0.05％聚山梨醇酯80，和(e)25mM精氨酸。在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含(a)浓度为100mg/mL的抗C5抗体，(b)50mM磷酸盐缓冲液，(c)5％蔗糖，(d)0.05％聚山梨醇酯80，和(e)25mM精氨酸。在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含a)浓度为100mg/mL的抗C5抗体，(b)50mM磷酸盐缓冲液，(c)5％蔗糖，(d)0.05％聚山梨醇酯80，和(e)25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，稳定水溶液除抗C5抗体外还包含不超过四种药剂。在另一个实施方案中，稳定水溶液除抗C5抗体外还包含不超过三种药剂。在另一个实施方案中，稳定水溶液除抗C5抗体外还包含不超过两种药剂。在另一个实施方案中，稳定水溶液除抗C5抗体外还包含不超过一种药剂。

在另一个实施方案中，该稳定水溶液由以下组成：(a)浓度为约100mg/mL的抗C5抗体，(b)约50mM磷酸盐缓冲液，(c)约5％蔗糖，和(d)约25mM精氨酸。在另一个实施方案中，该稳定水溶液由以下组成：(a)浓度为100mg/mL的抗C5抗体，(b)50mM磷酸盐缓冲液；(c)5％蔗糖，和(d)25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，该稳定水溶液由以下组成：(a)浓度为约100mg/mL的抗C5抗体，(b)约50mM磷酸盐缓冲液，(c)约5％蔗糖，(d)约0.05％聚山梨醇酯80，和(e)约25mM精氨酸。在另一个实施方案中，该稳定水溶液由以下组成：(a)浓度为100mg/mL的抗C5抗体，(b)50mM磷酸盐缓冲液，(c)5％蔗糖，(d)0.05％聚山梨醇酯80，和(e)25mM精氨酸。

在一个实施方案中，该稳定水溶液包含：(a)浓度为约100mg/mL的抗C5抗体，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；(b)约50mM磷酸盐缓冲液；(c)约5％蔗糖，和(d)约25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含：(a)浓度为100mg/mL的抗C5抗体，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；(b)50mM磷酸盐缓冲液；(c)5％蔗糖，和(d)25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含：(a)浓度为约100mg/mL的抗C5抗体，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；(b)约50mM磷酸盐缓冲液；(c)约5％蔗糖，(d)约0.05％聚山梨醇酯80，和(e)约25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含：(a)浓度为100mg/mL的抗C5抗体，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；(b)50mM磷酸盐缓冲液；(c)5％蔗糖，(d)0.05％聚山梨醇酯80，和(e)约25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，该稳定水溶液由以下组成：(a)浓度为约100mg/mL的抗C5抗体，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；(b)约50mM磷酸盐缓冲液；(c)约5％蔗糖，(d)约0.05％聚山梨醇酯80，和(e)约25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，该稳定水溶液由以下组成：(a)浓度为100mg/mL的抗C5抗体，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；(b)50mM磷酸盐缓冲液；(c)5％蔗糖，(d)0.05％聚山梨醇酯80，和(e)25mM精氨酸。

在一个实施方案中，pH为7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8或7.9。在另一个实施方案中，溶液的pH在7.0至7.4之间。在另一个实施方案中，溶液的pH在7.2至7.8之间。在另一个实施方案中，溶液的pH在7.2至7.6之间。在一个特定实施方案中，溶液的pH为7.4。

可以将本文所述的溶液配制为用于任何合适的施用模式。在一个实施方案中，将溶液配制为通过肠胃外模式(例如，静脉内、皮下、腹膜内或肌内注射)进行施用。在一个特定实施方案中，将溶液配制为用于皮下施用。例如，在一个实施方案中，稳定水溶液包含浓度为100mg/mL的抗C5抗体，并且配制为用于皮下施用。在另一个特定实施方案中，将溶液配制为用于静脉施用。例如，在一个实施方案中，稳定水溶液包含浓度为100mg/mL的抗C5抗体，并且配制为用于静脉施用。

在本文所述的任何溶液的一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC(例如，凝胶渗透HPLC)所测定的，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下储存至少六个月期间，保持至少95％(例如，至少96％、97％、98％或99％)为单体。在另一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC所测定的，抗C5抗体在2℃至8℃下储存至少九个月期间，保持至少95％(例如，至少96％、97％、98％或99％)为单体。在另一个实施方案中，通过SEC-HPLC测定，抗C5抗体在2℃至8℃下储存至少一年期间，保持至少95％(例如，至少96％、97％、98％或99％)为单体。在另一个实施方案中，通过SEC-HPLC测定，抗C5抗体在2℃至8℃下储存至少18个月期间，保持至少95％(例如，至少96％、97％、98％或99％)为单体。在另一个实施方案中，通过SEC-HPLC测定，抗C5抗体在2℃至8℃下储存至少两年期间，保持至少95％(例如，至少96％、97％、98％或99％)为单体。

在本文所述的任何溶液的另一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC(例如，凝胶渗透HPLC)所测定的，溶液中少于5％的抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)聚集。在另一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC所测定的，溶液中少于4％的抗C5抗体聚集。在另一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC所测定的，溶液中少于3％的抗C5抗体聚集。在另一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC所测定的，溶液中少于2％的抗C5抗体聚集。在另一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC所测定的，溶液中少于1％的抗C5抗体聚集。

在本文所述的任何溶液的另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少六个月期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其C5结合活性的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。在另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少九个月期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其C5结合活性的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。在另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少一年期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其C5结合活性的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。在另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少十八个月期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其C5结合活性的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。在另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少两年期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其C5结合活性的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。在另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少三年期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其C5结合活性的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。

在本文所述的任何溶液的另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少九个月期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其抑制溶血的能力的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。在本文所述的任何溶液的另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少六个月期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其抑制溶血的能力的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。在本文所述的任何溶液的另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少一年期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其抑制溶血的能力的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。在本文所述的任何溶液的另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少18个月期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其抑制溶血的能力的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。在本文所述的任何溶液的另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少两年期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其抑制溶血的能力的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。在本文所述的任何溶液的另一个实施方案中，抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下存储至少三年期间，与对应于储存之前的抗C5抗体的参考抗C5抗体相比，保持其抑制溶血的能力的至少80％(例如，至少81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)。

另一方面，提供了用于产生稳定的浓缩抗体溶液的方法，所述溶液包含浓度为100mg/mL的抗C5抗体，50mM磷酸盐缓冲液，5％蔗糖；和25mM精氨酸，所述方法包括：

i)提供包含所述抗C5抗体的第一水溶液，所述第一水溶液具有第一配方并且包含不超过10mg/mL的所述抗C5抗体；

ii)使所述第一水溶液渗滤到pH为7.4的包含50mM磷酸盐缓冲液、5％蔗糖和25mM精氨酸的配方中，从而产生第二水溶液，其中所述第二水溶液由于渗滤而具有第二配方；并且

iii)浓缩所述第二水溶液以产生包含100mg/mL的所述抗C5抗体、50mM磷酸盐缓冲液、5％蔗糖和25mM精氨酸的稳定浓缩抗体溶液。

在另一个实施方案中，提供了用于产生稳定的浓缩抗体溶液的方法，所述溶液包含浓度为100mg/mL的抗C5抗体，50mM磷酸盐缓冲液，5％蔗糖；25mM精氨酸，和0.05％聚山梨醇酯80，所述方法包括：

ii)使所述第一水溶液渗滤到pH为7.4的包含50mM磷酸盐缓冲液、5％蔗糖、25mM精氨酸和0.05％聚山梨醇酯80的配方中，从而产生第二水溶液，其中所述第二水溶液由于渗滤而具有第二配方；并且

iii)浓缩所述第二水溶液以产生包含100mg/mL的所述抗C5抗体、50mM磷酸盐缓冲液、5％蔗糖、25mM精氨酸和0.05％聚山梨醇酯80的稳定浓缩抗体溶液。

还提供了治疗患有补体相关病状的人类患者的方法，其包括以有效治疗补体相关病状的量向患者施用(例如，皮下或静脉施用)如本文所述的稳定水溶液。示例性的补体相关病状包括但不限于类风湿性关节炎、抗磷脂抗体综合征、狼疮性肾炎、缺血再灌注损伤、非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)、典型溶血性尿毒症综合征、阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)、致密物沉积病、视神经脊髓炎、多灶性运动神经病、多发性硬化、黄斑变性、HELLP综合征、自发性流产、血栓性血小板减少性紫癜、寡免疫性血管炎、大疱性表皮松解症、复发性流产、创伤性脑损伤、心肌炎、脑血管病症、周围血管病症、肾血管病症、肠系膜/肠血管病症、血管炎、过敏性紫癜性肾炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis)、全身性红斑狼疮相关血管炎、类风湿性关节炎相关血管炎、免疫复合血管炎、高安氏病(Takayasu’sdisease)、扩张型心肌病、糖尿病血管病变、川崎病(Kawasaki’s disease)、静脉空气栓塞、支架置入、冠状动脉旋磨术、经皮腔内冠状动脉成形术后再狭窄、重症肌无力、冷凝集素病、皮肌炎、阵发性寒冷性血红蛋白尿、抗磷脂综合征、格雷夫斯病(Graves’disease)、动脉粥样硬化、阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease)、全身性炎性反应败血症、败血性休克、脊髓损伤、肾小球肾炎、移植排斥、桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis)、I型糖尿病、银屑病、天疱疮、自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜、古德帕斯彻综合征(Goodpasture’ssyndrome)、迪戈斯病(Degos disease)和灾难性抗磷脂综合征。在一个特定实施方案中，所述补体相关病状是非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)。在另一个实施方案中，所述补体相关病状是阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)。

还提供了试剂盒，其包括适合用于本文所述的方法中的治疗有效量的如本文所述的稳定水溶液。在一个实施方案中，试剂盒包含：(i)本文所述的任何溶液；(ii)用于将溶液递送给有需要的患者的工具(例如，注射器)。在一个实施方案中，所述工具适于将溶液皮下递送给患者。在一个实施方案中，所述工具适于将溶液静脉递送给患者。在另一个实施方案中，试剂盒还包含至少一种用于治疗受试者的补体相关病症的附加活性剂。

附图说明

图1描绘了对50mg/mL的经组氨酸缓冲液交换的雷武珠单抗(ALXN1210)进行盐滴定的动态光散射结果。

图2描绘了对50mg/mL的经缓冲液交换的雷武珠单抗(ALXN1210)进行L-精氨酸滴定的动态光散射结果。

图3描绘了对50mg/mL的经磷酸盐缓冲液交换的雷武珠单抗(ALXN1210)进行盐滴定的动态光散射结果。

图4描绘了50mg/mL的经缓冲液交换的雷武珠单抗(ALXN1210)的差示扫描荧光结果。

图5描绘了10mg/mL和114mg/mL(不含L-精氨酸)以及114mg/mL(添加了L-精氨酸)的雷武珠单抗(ALXN1210)的动态光散射结果。

图6显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的稳定性数据(T＝0至T＝2周处于2-8℃下)。

图7显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的稳定性数据(T＝3周至T＝2个月处于2-8℃下)。

图8显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的稳定性数据(T＝0至T＝3周处于23-27℃下)。

图9显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的稳定性数据(T＝1个月至T＝2个月处于23-27℃下)。

图10显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的稳定性数据(T＝1周至T＝3周处于37℃下)。

图11显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的稳定性数据(T＝1个月至T＝2个月处于37℃下)。

图12显示了稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％(T＝0至T＝2个月处于2-8℃下)。

图13显示了稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％(T＝0至T＝2个月处于23-27℃下)。

图14显示了稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％(T＝0至T＝2个月处于37℃下)。

图15显示了雷武珠单抗(ALXN1210)和组氨酸样品的稳定性动态光散射数据(T＝0)。

图16显示了雷武珠单抗(ALXN1210)组氨酸AS样品的稳定性动态光散射数据(T＝0)。

图17显示了雷武珠单抗(ALXN1210)磷酸盐样品的稳定性动态光散射数据(T＝0)。

图18显示了雷武珠单抗(ALXN1210)磷酸盐样品的稳定性动态光散射数据(T＝2个月处于2-8℃下)。

图19显示了雷武珠单抗(ALXN1210)冻融的稳定性数据(T＝0至处于-20℃下T＝1个月时的循环2)。

图20显示了雷武珠单抗(ALXN1210)处于-20℃下T＝1个月时的冻融循环3至循环5的稳定性数据。

图21显示了稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％(处于-20℃下T＝1个月时冻融)。

图22显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的原型稳定性数据(T＝0至T＝2个月处于2-8℃下)。

图23显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的原型稳定性数据(T＝3个月至T＝6个月处于2-8℃下)。

图24显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的原型稳定性数据(T＝9个月至T＝12个月处于2-8℃下)。

图25显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的原型稳定性数据(T＝1个月至T＝2个月处于23-27℃下)。

图26显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的原型稳定性数据(T＝3个月至T＝6个月处于23-27℃下)。

图27显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的原型稳定性数据(T＝9个月至T＝12个月处于23-27℃下)。

图28显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的原型稳定性数据(T＝2周至T＝2个月处于37℃下)。

图29显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的原型稳定性数据(T＝1个月至T＝3个月处于-20℃下)。

图30显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的原型稳定性数据(T＝6个月至T＝12个月处于-20℃下)。

图31显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的原型稳定性研究结果(T＝3个月至T＝6个月处于-80℃下)。

图32显示了雷武珠单抗(ALXN1210)的原型稳定性研究结果(T＝12个月处于-80℃下)。

图33显示了原型稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％(T＝0至T＝12个月处于2-8℃下)。

图34显示了原型稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％(T＝0至T＝12个月处于23-27℃下)。

图35显示了原型稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％(T＝0至T＝12个月处于37℃下)。

图36显示了原型稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％(T＝0至T＝12个月处于-20℃下)。

图37显示了原型稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％(T＝0至T＝12个月处于-80℃下)。

图38显示了75mg/mL的雷武珠单抗ALXN1210磷酸盐样品的原型稳定性动态光散射数据(T＝0)。

图39显示了75mg/mL的雷武珠单抗ALXN1210磷酸盐样品的原型稳定性动态光散射数据(T＝1个月处于2-8℃下)。

图40显示了100mg/mL的雷武珠单抗ALXN1210磷酸盐样品的原型稳定性动态光散射数据(T＝1个月处于2-8℃下)。

图41显示了原型稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％-处于-20℃下T＝1个月时的冻融循环1-3。

图42显示了原型稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％-处于-20℃下T＝1个月时的冻融循环4-5。

图43显示了原型稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％-处于-80℃下T＝3个月时的冻融循环1-3。

图44显示了原型稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％-处于-80℃下T＝3个月时的冻融循环4-5。

图45显示了原型稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％-处于-20℃下T＝1个月时的冻融循环1-5。

图46显示了原型稳定性尺寸排阻色谱(SEC)数据，即雷武珠单抗(ALXN1210)的单体％-处于-80℃下T＝3个月时的冻融循环1-5。

图47描绘了1期研究的总体设计，1期研究设计为评价在42名健康受试者中皮下施用的400mg单剂量的雷武珠单抗(ALXN1210)与静脉施用的400mg单剂量的雷武珠单抗(ALXN1210)或皮下施用的安慰剂相比的安全性、耐受性、PK、PD和免疫原性。

图48提供了对所有受试者的处理的概述。

图49是使用线性标度描绘各个ALXN1210血清浓度与标称时间的关系的图表

图50是使用对数线性标度描绘各个ALXN1210血清浓度与标称时间的关系的图表

图51是描绘施用安慰剂SC、ALXN1210 SC和ALXN1210 IV的受试者的游离C5血清浓度随时间推移相对于基线的平均(±SD)百分比变化的图表。

图52是描绘施用安慰剂SC、ALXN1210 SC和ALXN1210 IV的受试者的总C5血清浓度随时间推移相对于基线的平均(±SD)百分比变化的图表。

图53是描绘施用安慰剂SC、ALXN1210 SC和ALXN1210 IV的受试者的鸡红细胞(cRBC)溶血随时间推移相对于基线的平均(±SD)百分比变化的图表。

具体实施方式

本公开特别报导了含高浓度的抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)的稳定水溶液。该溶液可用于多种治疗应用中，诸如用于治疗或预防补体相关病症的方法。虽然绝非旨在为限制性，但是下文详细阐述了示例性溶液、制剂、治疗试剂盒以及用于制备和使用任何前述物质的方法，并在工作实施例中进行了举例说明。

I.定义

除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与技术人员通常所理解的相同含义。尽管与本文描述的那些类似或等同的方法和组合物可以用于本发明的实践或试验中，但本文描述的是优选方法和组合物。

除非上下文另外明确指出，否则单数形式“一”、“一种(个)”和“所述(该)”包括复数指示物。

术语“约”，尤其是关于给定的数量或数目，意在涵盖正负百分之十(±10％)(例如，±5％)以内的偏差。

术语“药物制剂”是指这样的制剂，其形式使得活性成分的生物活性明确有效，并且不含对要施用该制剂的受试者有明显毒性的其他组分。

如本文所用，“水性”药物组合物是适于药用的组合物，其中水性载体是水。适于药用的组合物可以是无菌的、均质的和/或等渗的。水性药物组合物可以直接制备成水性形式和/或可以由冻干物重构。

“等渗”制剂是具有与人血基本上相同的渗透压的制剂。等渗制剂通常将具有约275至350mOsm/kg的渗透压。术语“低渗”描述了渗透压低于人血渗透压的制剂。相应地，术语“高渗”用于描述渗透压高于人血渗透压的制剂。等渗性可以例如使用蒸气压或冰冻型渗压计来测量。“张力剂”是使制剂等渗的化合物。

如本文所用，溶液的“摩尔渗透压浓度”是每千克溶剂中溶质的渗透压摩尔数。摩尔渗透压浓度是溶液中存在的颗粒数目的量度，并且与颗粒的大小或重量无关。只能通过使用仅取决于颗粒浓度的溶液特性对其进行测量。这些特性是蒸气压降低、冰点降低、沸点升高和渗透压，并且统称为依数性。

“无菌”制剂是无菌性的或不含或基本上不含任何活的微生物及其孢子。

如本文所用，“稳定”制剂是其中的抗体在储存后基本上保持其物理稳定性和/或化学稳定性和/或生物活性的制剂。用于测量蛋白质稳定性的各种分析技术在本领域中是可用的，并且在Peptide and Protein Drug Delivery，247-301，Vincent Lee编辑，MarcelDekker，Inc.，New York，N.Y.，Pubs.(1991)和Jones，A.Adv.Drug Delivery Rev.10：29-90(1993)中进行了综述。可以在选定时间段之后在选定温度下测量抗C5抗体制剂的稳定性。例如，储存后聚集物形成的增加是水性抗C5抗体制剂的不稳定性指标。除了聚集物形成以外，在整个保质期内原始透明度、颜色和气味的保持也是用于监测本文所述的抗C5抗体水溶液的稳定性的指标。

如果在目视检查颜色和/或透明度时，或正如通过紫外光散射或通过体积排阻色谱法测量的那样，抗体基本上没有显示出聚集、沉淀和/或变性的迹象，则该抗体在药物制剂中“保持其物理稳定性”。

术语“聚集”是指将天然的折叠蛋白组装形成含有非天然结构的聚集物。即使在生理、非变性条件下也可以发生聚集，并且常常是不可逆的，从而产生无活性，有时具有免疫原性和毒性的非天然聚集物。

如本文所用的短语“低至不可检测的聚集水平”是指正如通过凝胶渗透高效液相色谱(GP-HPLC)、高效尺寸排阻色谱(HPSEC)或静态光散射(SLS)技术所测量的，样品含有按蛋白质重量计不超过约5％，不超过约4％，不超过约3％，不超过约2％，不超过约1％和不超过约0.5％的聚集。

如下所述，如果在给定时间的化学稳定性使得认为抗体仍保持其生物活性，则该抗体在药物制剂中“保持其化学稳定性”。可以通过检测和量化抗体的化学改变形式来评估化学稳定性。化学改变可涉及大小更改(例如，剪切)、脱酰胺、消旋、水解、氧化、β消除和二硫键交换，这些可以使用已知技术进行评价，例如尺寸排阻色谱法、SDS-PAGE、基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱法(MALDI/TOF MS)和/或离子交换色谱法。

如果药物制剂中的抗体对其预期目的而言具有生物活性，则该抗体在药物制剂中“保持其生物活性”。例如，如果药物制剂中抗体的生物活性是在制备药物制剂时所表现出的生物活性(例如，正如在抗原结合测定中所测定的)的约30％、约20％或约10％以内(在测定误差范围内)，则生物活性得以保持。在本文中，单克隆抗体的“生物活性”是指抗体与抗原结合的能力。还可以包括与抗原结合，并产生可测量的生物学反应的抗体，所述生物学反应可以在体外或体内测量。

药物产品(例如，包含抗C5抗体的水溶液)的保质期是产品在发生分解之前储存的时间长度。例如，保质期可以定义为0.1％、0.5％、1％、5％或10％的产品分解的时间。

如本文所用，术语“抗体”描述了包含至少一个抗体来源的抗原结合位点(例如，VH/VL区或Fv或CDR)的多肽。抗体包括已知形式的抗体。例如，抗体可以是人抗体、人源化抗体、双特异性抗体或嵌合抗体。抗体也可以是Fab、Fab’2、ScFv、SMIP、Affibody、纳米抗体或结构域抗体。抗体也可以是以下任何同种型：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA1、IgA2、IgAsec、IgD和IgE。抗体可以是天然存在的抗体，或者可以是已经通过蛋白质工程技术(例如，通过突变、缺失、取代、与非抗体部分的缀合)改变的抗体。例如，抗体可以包括一个或多个改变抗体特性(例如，功能特性)的变体氨基酸(与天然存在的抗体相比)。例如，本领域已知许多此类改变，这些改变会影响例如半衰期、效应子功能和/或对患者体内的抗体的免疫反应。术语抗体还包括包含至少一个抗体来源的抗原结合位点的人工或工程改造的多肽构建体。

如本文所用，术语“特异性结合”、“选择性结合”、“选择性地结合”和“特异性地结合”是指抗体结合预定抗原上的表位而不结合其他抗原。通常，抗体(i)在通过例如表面等离子体共振(SPR)技术在

2000表面等离子体共振仪器中使用预定抗原(例如C5)作为分析物并使用该抗体作为配体进行测定，或通过对抗体与抗原阳性细胞结合的Scatchard分析进行测定时，结合的平衡解离常数(K_D)大约小于10^-7M，诸如大约小于10^-8M、10^-9M或10^-10M或甚至更低，并且(ii)与预定抗原结合的亲和力是其与除预定抗原或密切相关的抗原以外的非特异性抗原(例如，BSA、酪蛋白)结合的亲和力的至少两倍。因此，除非另有说明，否则“特异性结合人C5”的抗体是指以10^-7M或更小，诸如大约小于约10^-8M、10^-9M或10^-10M或甚至更低的K_D与可溶性或细胞结合的人C5结合的抗体。

如本文所用，术语“表面等离子体共振”是指一种光学现象，其允许通过检测生物传感器基质中蛋白质浓度的改变，例如通过使用BIAcore系统(Pharmacia Biosensor AB，Uppsala，Sweden and Piscataway，N.J.)来检测，分析实时生物特异性相互作用。有关更多说明，参见Jonsson，U.等人(1993)Ann.Biol.Clin.51：19-26；Jonsson，U.等人(1991)Biotechniques 11：620-627；Johnsson，B.等人(1995)J.Mol.Recognit.8：125-131；以及Johnnson，B.等人(1991)Anal.Biochem.198：268-277。

如本文所用，术语“K_off”意在指抗体从抗体/抗原复合物中解离的解离速率常数。

如本文所用，术语“K_d”意在指特定抗体-抗原相互作用的解离常数。

如本文所用，术语“受试者”或“患者”在本文可互换使用，并且是指哺乳动物，诸如人、小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠、兔、猫、狗、猴、牛、马、猪等。在一个实施方案中，患者是人类患者(例如，患有补体相关病状的人类患者)。

如本文所用，术语“治疗”是指本文所述的治疗措施。“治疗”方法采用向受试者施用本文公开的组合，以便治愈、延迟疾病或病症或复发性疾病或病症，降低其严重程度，或改善其一种或多种症状，或以便延长受试者的生存期超过在没有这种治疗的情况下预计的生存期。

如本文所用，“有效治疗”是指产生有益效果，例如改善疾病或病症的至少一种症状的治疗。有益效果可以表现为相对于基线改善的形式，即，相对于在根据所述方法开始治疗之前进行的测量或观察结果有所改善。有效治疗可以指减轻疾病或病状的至少一种症状。

术语“有效量”是指提供所需的生物学、治疗和/或预防结果的药剂的量。该结果可以是疾病或病状的一种或多种体征、症状或病因的减少、改善、缓和、缩减、延迟和/或减轻，或生物系统的任何其他所需改变。在一个实例中，“有效量”是减轻疾病或病状的至少一种症状的稳定水溶液的量。有效量可以按一次或多次施用的方式来施用。

如本文所用，术语“诱导”和“诱导阶段”可互换使用并且是指治疗的第一阶段。

如本文所用，术语“维持”和“维持阶段”可互换使用并且是指治疗的第二阶段。在某些实施方案中，只要观察到临床益处或在发生无法处理的毒性或疾病进展之前，继续治疗。

II.抗C5抗体

本文所述的抗C5抗体与补体组分C5(例如，人C5)结合并抑制C5裂解成片段C5a和C5b。如上所述，相对于用于治疗目的的其他抗C5抗体(例如，依库珠单抗(eculizumab))，此类抗体还具有例如改善的药代动力学特性。

适合用于本发明的抗C5抗体(或源自其中的VH/VL结构域)可以使用本领域众所周知的方法产生。可替代地，可以使用本领域公认的抗C5抗体。也可以使用与本领域公认的这些抗体中的任一种竞争结合C5的抗体。

示例性的抗C5抗体是雷武珠单抗，其包含分别具有SEQ ID NO：14和11所示的序列的重链和轻链，或其抗原结合片段和变体。雷武珠单抗(也称为BNJ441和ALXN1210)在PCT/US2015/019225和美国专利号：9,079,949中进行了描述，教导或这些专利特此通过引用并入。在本文件全篇，术语雷武珠单抗、BNJ441和ALXN1210可互换使用。雷武珠单抗选择性结合人补体蛋白C5，在补体激活期间抑制其裂解为C5a和C5b。这种抑制作用防止促炎介质C5a的释放和细胞溶解性成孔膜攻击复合物(MAC)C5b-9的形成，同时保存了微生物调理和免疫复合物清除所必需的补体激活近端或早期组分(例如，C3和C3b)。

在其他实施方案中，抗体包含雷武珠单抗的重链和轻链CDR或可变区。因此，在一个实施方案中，抗体包含具有SEQ ID NO：12所示序列的雷武珠单抗的VH区的CDR1、CDR2和CDR3结构域，以及具有SEQ ID NO：8所示序列的雷武珠单抗的VL区的CDR1、CDR2和CDR3结构域。在另一个实施方案中，抗体包含分别具有SEQ ID NO：19、18和3所示序列的重链CDR1、CDR2和CDR3结构域，以及分别具有SEQ ID NO：4、5和6所示序列的轻链CDR1、CDR2和CDR3结构域。在另一个实施方案中，该抗体包含分别具有SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：8所示氨基酸序列的VH和VL区。

另一示例性的抗C5抗体是抗体BNJ421，其包含分别具有SEQ ID NO：20和11所示序列的重链和轻链，或其抗原结合片段和变体。BNJ421(也称为ALXN1211)在PCT/US2015/019225和美国专利号9,079,949进行了描述，教导或这些专利特此通过引用并入。

在其他实施方案中，抗体包含BNJ421的重链和轻链CDR或可变区。因此，在一个实施方案中，抗体包含具有SEQ ID NO：12所示序列的BNJ421的VH区的CDR1、CDR2和CDR3结构域，以及具有SEQ ID NO：8所示序列的BNJ421的VL区的CDR1、CDR2和CDR3结构域。在另一个实施方案中，抗体包含分别具有SEQ ID NO：19、18和3所示序列的重链CDR1、CDR2和CDR3结构域，以及分别具有SEQ ID NO：4、5和6所示序列的轻链CDR1、CDR2和CDR3结构域。在另一个实施方案中，该抗体包含分别具有SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：8所示氨基酸序列的VH和VL区。

CDR的确切边界已根据不同方法进行了不同定义。在一些实施方案中，轻链或重链可变结构域内CDR或框架区的位置可以如Kabat等人[(1991)“Sequences of Proteins ofImmunological Interest.”NIH公开号91-3242，U.S.Department of Health and HumanServices，Bethesda，MD]所定义的那样。在此类情况下，可以将CDR称为“Kabat CDR”(例如，“Kabat LCDR2”或“KabatHCDR1”)。在一些实施方案中，轻链或重链可变区的CDR位置可以如Chothia等人(1989)Nature 342：877-883所定义的那样。因此，可以将这些区域称为“Chothia CDR”(例如，“Chothia LCDR2”或“Chothia HCDR3”)。在一些实施方案中，轻链和重链可变区的CDR位置可以如Kabat-Chothia组合定义所定义的那样。在此类实施方案中，可以将这些区域称为“组合Kabat-Chothia CDR”。Thomas等人[(1996)MolImmunol33(17/ 18)：1389-1401]举例说明了根据Kabat和Chothia定义对CDR边界的鉴定。

在一些实施方案中，本文所述的抗C5抗体包含重链CDR1，其包含以下氨基酸序列或由以下氨基酸序列组成：GHIFSNYWIQ(SEQ ID NO：19)。在一些实施方案中，本文所述的抗C5抗体包含重链CDR2，其包含以下氨基酸序列或由以下氨基酸序列组成：EILPGSGHTEYTENFKD(SEQ ID NO：18)。在一些实施方案中，本文所述的抗C5抗体包含含有以下氨基酸序列的重链可变区：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGHIFSNYWIQWVRQAPGQGLEWMGEILPGSGHTEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARYFFGSSPNWYFDVWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO：12)。

在一些实施方案中，本文所述的抗C5抗体包含含有以下氨基酸序列的轻链可变区：

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCGASENIYGALNWYQQKPGKAPKLLIYGATNLADGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQNVLNTPLTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO：8)。

在一些实施方案中，本文所述的抗C5抗体可以包含与人新生儿Fc受体(FcRn)结合的变体人Fc恒定区，其亲和力大于变体人Fc恒定区所来源的天然人Fc恒定区的亲和力。例如，Fc恒定区相对于变体人Fc恒定区所来源的天然人Fc恒定区，可包含一个或多个(例如，两个、三个、四个、五个、六个、七个或八个或更多个)氨基酸取代。所述取代可以增加含有变体Fc恒定区的IgG抗体在pH 6.0下与FcRn的结合亲和力，同时维持相互作用的pH依赖性。用于测试抗体Fc恒定区中的一个或多个取代是否会增加Fc恒定区在pH 6.0下对FcRn的亲和力(同时维持相互作用的pH依赖性)的方法是本领域已知的，并且在工作实施例中进行了举例说明。参见例如，PCT/US2015/019225和美国专利号9,079949，其各自的公开内容通过引用整体并入本文。

增强抗体Fc恒定区对FcRn的结合亲和力的取代是本领域已知的，包括例如(1)Dall’Acqua等人(2006)J Biol Chem 281：23514-23524描述的M252Y/S254T/T256E三重取代；(2)在Hinton等人(2004)J Biol Chem 279：6213-6216和Hinton等人(2006)J Immunol176：346-356中描述的M428L或T250Q/M428L取代；(3)在Petkova等人(2006)Iht Immunol18(12)：1759-69中描述的N434A或T307/E380A/N434A取代。其他取代配对：P257I/Q311I、P257I/N434H和D376V/N434H在例如Datta-Mannan等人(2007)J Biol Chem 282(3)：1709-1717中进行了描述，其公开内容通过引用整体并入本文。

在一些实施方案中，变体恒定区在EU氨基酸残基255处具有缬氨酸取代。在一些实施方案中，变体恒定区在EU氨基酸残基309处具有天冬酰胺取代。在一些实施方案中，变体恒定区在EU氨基酸残基312处具有异亮氨酸取代。在一些实施方案中，变体恒定区在EU氨基酸残基386处具有取代。

在一些实施方案中，变体Fc恒定区相对于其所来源的天然恒定区包含不超过30个(例如，不超过29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3或2个)氨基酸取代、插入或缺失。在一些实施方案中，变体Fc恒定区包含一个或多个选自下组的氨基酸取代：M252Y、S254T、T256E、N434S、M428L、V259I、T250I和V308F。在一些实施方案中，变体人Fc恒定区在位置428处包含甲硫氨酸且在位置434处包含天冬酰胺，各自按照EU编号。在一些实施方案中，变体Fc恒定区包含428L/434S双重取代，如例如美国专利号8.088,376中所述。

在一些实施方案中，由于抗体工程改造，这些突变的精确位置可以从天然人Fc恒定区位置偏移。例如，当用于IgG2/4嵌合Fc中时，428L/434S双重取代可对应于429L和435S，如同在雷武珠单抗(BNJ441)中发现的并在美国专利号9,079,949中描述的M429L和N435S变体中一样，所述专利的公开内容通过引用整体并入本文。

在一些实施方案中，变体恒定区相对于天然人Fc恒定区在氨基酸位置237、238、239、248、250、252、254、255、256、257、258、265、270、286、289、297、298、303、305、307、308、309、311、312、314、315、317、325、332、334、360、376、380、382、384、385、386、387、389、424、428、433、434或436(EU编号)包含取代。在一些实施方案中，所述取代选自下组：在位置237处甲硫氨酸取代甘氨酸；在位置238处丙氨酸取代脯氨酸；在位置239处赖氨酸取代丝氨酸；在位置248处异亮氨酸取代赖氨酸；在位置250处丙氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、缬氨酸、色氨酸或酪氨酸取代苏氨酸；在位置252处苯丙氨酸、色氨酸或酪氨酸取代甲硫氨酸；在位置254处苏氨酸取代丝氨酸；在位置255处谷氨酸取代精氨酸；在位置256处天冬氨酸、谷氨酸或谷氨酰胺取代苏氨酸；在位置257处丙氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、丝氨酸、苏氨酸或缬氨酸取代脯氨酸；在位置258处组氨酸取代谷氨酸；在位置265处丙氨酸取代天冬氨酸；在位置270处苯丙氨酸取代天冬氨酸；在位置286处丙氨酸或谷氨酸取代天冬酰胺；在位置289处组氨酸取代苏氨酸；在位置297处丙氨酸取代天冬酰胺；在位置298处甘氨酸取代丝氨酸；在位置303处丙氨酸取代缬氨酸；在位置305处丙氨酸取代缬氨酸；在位置307处丙氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、丝氨酸、缬氨酸、色氨酸或酪氨酸取代苏氨酸；在位置308处丙氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、谷氨酰胺或苏氨酸取代缬氨酸；在位置309处丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸或精氨酸取代亮氨酸或缬氨酸；在位置311处丙氨酸、组氨酸或异亮氨酸取代谷氨酰胺；在位置312处丙氨酸或组氨酸取代天冬氨酸；在位置314处赖氨酸或精氨酸取代亮氨酸；在位置315处丙氨酸或组氨酸取代天冬酰胺；在位置317处丙氨酸取代赖氨酸；在位置325处甘氨酸取代天冬酰胺；在位置332处缬氨酸取代异亮氨酸；在位置334处亮氨酸取代赖氨酸；在位置360处组氨酸取代赖氨酸；在位置376处丙氨酸取代天冬氨酸；在位置380处丙氨酸取代谷氨酸；在位置382处丙氨酸取代谷氨酸；在位置384处丙氨酸取代天冬酰胺或丝氨酸；在位置385处天冬氨酸或组氨酸取代甘氨酸；在位置386处脯氨酸取代谷氨酰胺；在位置387处谷氨酸取代脯氨酸；在位置389处丙氨酸或丝氨酸取代天冬酰胺；在位置424处丙氨酸取代丝氨酸；在位置428处丙氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸或酪氨酸取代甲硫氨酸；在位置433处赖氨酸取代组氨酸；位置434处丙氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、丝氨酸、色氨酸或酪氨酸取代天冬酰胺；以及在位置436处组氨酸取代酪氨酸或苯丙氨酸，其全部按照EU编号。

在一些实施方案中，用于本文所述方法中的合适的抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：14中描绘的氨基酸序列的重链多肽和/或含有SEQ ID NO：11中描绘的氨基酸序列的轻链多肽。可替代地，在一些实施方案中，用于本文所述方法中的抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：20中描绘的氨基酸序列的重链多肽和/或含有SEQ ID NO：11中描绘的氨基酸序列的轻链多肽。

在一个实施方案中，抗体在7.4和25℃(以及另外在生理条件下)与C5结合，其亲和解离常数(K_D)为至少0.1(例如，至少0.15、0.175、0.2、0.25、0.275、0.3、0.325、0.35、0.375、0.4、0.425、0.45、0.475、0.5、0.525、0.55、0.575、0.6、0.625、0.65、0.675、0.7、0.725、0.75、0.775、0.8、0.825、0.85、0.875、0.9、0.925、0.95或0.975)nM。在一些实施方案中，抗C5抗体或其抗原结合片段的K_D不大于1(例如，不大于0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3或0.2)nM。

在其他实施方案中，[(抗体在pH 6.0和25℃下对C5的K_D)/(抗体在pH 7.4和25℃下对C5的K_D)]大于21(例如，大于22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、350、400、450、500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500或8000)。

确定抗体是否与蛋白质抗原结合和/或测定抗体对蛋白质抗原的亲和力的方法是本领域已知的。例如，可以使用多种技术来检测和/或量化抗体与蛋白质抗原的结合，例如但不限于蛋白质印迹(Western blot)、斑点印迹(dot blot)、表面等离振子共振(SPR)方法(例如，BIAcore系统；Pharmacia Biosensor AB，Uppsala，Sweden and Piscataway，N.J.)，或酶联免疫吸附测定(ELISA)。参见例如，Benny K.C.Lo(2004)“Antibody Engineering：Methods and Protocols，”Humana Press(ISBN：1588290921)；Johne等人(1993)JImmunolMeth 160：191-198；Jonsson等人(1993)Ann Biol Clin 51：19-26；以及Jonsson等人(1991)Biotechniques 11：620-627。另外，在工作实施例中提出了用于测量亲和力(例如，解离常数和缔合常数)的方法。

如本文所用，术语“k_a”是指抗体与抗原缔合的速率常数。术语“k_d”是指抗体从抗体/抗原复合物中解离的速率常数。并且术语“K_D”是指抗体-抗原相互作用的平衡解离常数。平衡解离常数由动力学速率常数的比率K_D＝k_a/k_d推导得出。此类测定值优选在25℃或37℃下测量(参见工作实施例)。例如，可以在BIAcore 3000仪器上使用抗Fc捕获方法固定抗体，在pH 8.0、7.4、7.0、6.5和6.0下通过表面等离振子共振(SPR)测定与人C5结合的抗体的动力学。

在一个实施方案中，抗C5抗体或其抗原结合片段阻滞C5蛋白(例如，人C5蛋白)的C5a和/或C5b活性片段的产生或活性。通过这种阻滞作用，抗体抑制例如C5a的促炎作用以及细胞表面C5b-9膜攻击复合物(MAC)的产生。

确定本文所述的特定抗体是否抑制C5裂解的方法是本领域已知的。抑制人类补体组分C5会降低受试者体液中补体的细胞溶解能力。体液中存在的补体的细胞溶解能力的此类降低可以通过本领域众所周知的方法来测量，例如通过常规溶血测定，诸如Kabat和Mayer(编辑)，“Experimental Immunochemistry，第2版”135-240，Springfield，IL，CCThomas(1961)，第135-139页描述的溶血测定，或该测定法的常规变型，诸如在例如Hillmen等人(2004)NEngl J Med 350(6)：552中描述的鸡红细胞溶血方法。确定候选化合物是否抑制人C5裂解成C5a和C5b形式的方法是本领域已知的，并且在Evans等人(1995)Mol Immunol32(16)：1183-95中进行了描述。例如，可以通过本领域众所周知的方法测量体液中C5a和C5b的浓度和/或生理活性。对于C5b，可以使用溶血测定法或针对如本文所讨论的可溶性C5b-9的测定法。也可以使用本领域已知的其他测定法。使用这些或其他合适类型的测定法，可以筛选出能够抑制人补体组分C5的候选药剂。

可以使用免疫学技术(诸如但不限于ELISA)测量C5和/或其分裂产物的蛋白质浓度，以测定抗C5抗体或其抗原结合片段抑制C5转化为生物活性产物的能力。在一些实施方案中，测量C5a的产生。在一些实施方案中，使用C5b-9新表位特异性抗体来检测末端补体的形成。

可以使用溶血测定法来测定抗C5抗体或其抗原结合片段对补体激活的抑制活性。为了测定抗C5抗体或其抗原结合片段对体外血清试验溶液中经典补体途径介导的溶血的影响，例如，使用溶血素包被的绵羊红细胞或用抗鸡红细胞抗体敏化的鸡红细胞作为靶细胞。通过将100％裂解视为等于在不存在抑制剂的情况下发生的裂解来归一化裂解百分比。在一些实施方案中，经典补体途径受人IgM抗体激活，例如，如同在

经典途径补体试剂盒(/>

COMPL CP310，Euro-Diagnostica，Sweden)中所用的。简言之，在人IgM抗体的存在下，将试验血清与抗C5抗体或其抗原结合片段一起孵育。通过使混合物与酶缀合的抗C5b-9抗体和荧光底物接触并在适当波长下测量吸光度来测量产生的C5b-9的量。作为对照，将试验血清在不存在抗C5抗体或其抗原结合片段的情况下孵育。在一些实施方案中，试验血清是用C5多肽重构的C5缺陷血清。

为了测定抗C5抗体或其抗原结合片段对替代途径介导的溶血的影响，可以将未敏化的兔或豚鼠红细胞用作靶细胞。在一些实施方案中，血清试验溶液是用C5多肽重构的C5缺陷血清。通过将100％裂解视为等于在不存在抑制剂的情况下发生的裂解来归一化裂解百分比。在一些实施方案中，替代补体途径受脂多糖分子激活，例如，如同在

替代途径补体试剂盒(/>

COMPL AP330，Euro-Diagnostica，Sweden)中所用的。简言之，在脂多糖的存在下，将试验血清与抗C5抗体或其抗原结合片段一起孵育。通过使混合物与酶缀合的抗C5b-9抗体和荧光底物接触并在适当波长下测量荧光性来测量产生的C5b-9的量。作为对照，将试验血清在不存在抗C5抗体或其抗原结合片段的情况下孵育。

在一些实施方案中，使用CH50eq测定法量化C5活性或其抑制。CH50eq测定法是一种用于测量血清中的总经典补体活性的方法。该试验是一种裂解测定，其使用抗体敏化的红细胞作为经典补体途径的激活剂，并用各种试验血清稀释液测定产生50％裂解所需的量(CH50)。溶血百分比可以例如使用分光光度计测定。CH50eq测定法可提供末端补体复合物(TCC)形成的剪接度量，因为TCC本身是造成所测量的溶血的直接原因。

该测定法是本领域技术人员众所周知和通常实践的。简言之，为了激活经典补体途径，将未稀释的血清样品(例如，重构的人血清样品)添加到含有抗体敏化的红细胞的微量测定孔中，从而产生TCC。接下来，在微量测定孔中将活化的血清稀释，微量测定孔涂有捕获试剂(例如，与TCC的一种或多种组分结合的抗体)。活化样品中存在的TCC与涂覆微量测定孔表面的单克隆抗体结合。洗涤孔，并向每个孔中添加检测试剂，该检测试剂经可检测地标记并识别结合的TCC。可检测的标记可以是例如荧光标记或酶标记。测定结果以每毫升CH50单位当量(CH50 U Eq/mL)表示。

抑制，例如因为它与末端补体活性有关，所以包括在例如溶血测定或CH50eq测定中末端补体的活性与对照抗体(或其抗原结合片段)在相似条件和等摩尔浓度下的作用相比，降低至少5％(例如，至少6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％或60％)。如本文所用，实质性抑制是指对指定活性(例如，末端补体活性)至少40％(例如至少45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％或更高)的抑制。在一些实施方案中，本文所述的抗C5抗体相对于依库珠单抗的CDR(即SEQ IDNO：1-6)含有一个或多个氨基酸取代，在溶血测定或CH50eq测定中仍然保持依库珠单抗的补体抑制活性的至少30％(例如，至少31％、32％、33％、34％、35％、36％、37％、38％、39％、40％、41％、42％、43％、44％、45％、46％、47％、48％、49％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％)。

本文所述的抗C5抗体在人体中的血清半衰期为至少20(例如，至少21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54或55)天。在另一个实施方案中，本文所述的抗C5抗体在人体中的血清半衰期为至少40天。在另一个实施方案中，本文所述的抗C5抗体在人体中的血清半衰期为大约43天。在另一个实施方案中，本文所述的抗C5抗体在人体中的血清半衰期在39-48天之间。用于测量抗体的血清半衰期的方法是本领域已知的。在一些实施方案中，例如，如同在工作实施例中描述的一种小鼠模型系统(例如，C5缺陷型/NOD/scid小鼠或hFcRn转基因小鼠模型系统)中所测量的，本文所述的抗C5抗体或其抗原结合片段的血清半衰期比依库珠单抗的血清半衰期长至少20％(例如，至少30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、100％、125％、150％、175％、200％、250％、300％、400％、500％)。

在一个实施方案中，该抗体与本文所述的抗体竞争结合和/或结合C5上相同的表位。关于两种或更多种抗体的术语“结合相同表位”意指正如通过给定方法所确定的，抗体结合氨基酸残基的相同区段。用确定抗体是否与本文所述的抗体结合“C5上的相同表位”的技术包括，例如表位作图法，诸如对抗原：抗体复合物晶体的x射线分析(提供表位的原子分辨)和氢/氘交换质谱法(HDX-MS)。其他方法监测抗体与肽抗原片段或抗原的突变变体的结合，其中通常认为由于抗原序列内氨基酸残基的修饰而导致的结合丧失是表位组分的指示。另外，也可以使用用于表位作图的计算组合方法。这些方法依赖于目标抗体从组合噬菌体展示肽库中亲和分离出特定短肽的能力。预计具有相同的VH和VL或相同的CDR1、2和3序列的抗体会与相同的表位结合。

“与另一种抗体竞争结合靶标”的抗体是指抑制(部分或完全)另一种抗体与靶标结合的抗体。可以使用已知的竞争实验来确定两种抗体是否彼此竞争结合靶标，即一种抗体是否以及在何种程度上抑制另一种抗体与靶标的结合。在某些实施方案中，一种抗体与另一种抗体竞争并抑制另一种抗体与靶标的结合至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％。抑制或竞争的水平可根据哪种抗体是“封闭抗体”(即首先与靶标一起孵育的冷抗体)而有所不同。竞争抗体与相同表位、重叠表位或相邻表位结合(例如，通过空间位阻证明)。

可以使用多种本领域公认的技术来产生用于本文所述方法中的本文所述的抗C5抗体或其抗原结合片段。单克隆抗体可以通过本领域技术人员熟悉的各种技术获得。简言之，来自于经所需抗原免疫的动物的脾细胞通常通过与骨髓瘤细胞融合而永生化(参见，Kohler和Milstein，Eur.J.Immunol.6：511-519(1976))。永生化的替代方法包括用爱泼斯坦巴尔病毒(Epstein Barr Virus)、致癌基因或逆转录病毒转化，或本领域众所周知的其他方法。筛选由单个永生化细胞产生的菌落，以产生对抗原具有所需特异性和亲和力的抗体，并且可以通过各种技术(包括注入脊椎动物宿主的腹膜腔内)来提高由此类细胞产生的单克隆抗体的产率。可替代地，可以根据Huse等人，Science246：1275-1281(1989)概述的一般方案从人B细胞中筛选出DNA文库，从而分离出编码单克隆抗体或其结合片段的DNA序列。

III.高浓缩抗C5抗体溶液

本文提供了包含抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)的稳定水溶液。本文所述的水溶液可以是无菌的、药用级组合物，例如，用于施用给受试者以治疗或预防补体相关病症，诸如PNH或aHUS。本文所述的溶液可以根据标准方法配制。药物制剂是得到确认的技术，并且在例如，Gennaro(2000)“Remington：The Science and Practice of Pharmacy”，第20版，Lippincott，Williams&Wilkins(ISBN：0683306472)；Ansel等人(1999)“PharmaceuticalDosage Forms and Drug Delivery Systems”，第7版，Lippincott Williams&WilkinsPublishers(ISBN：0683305727)；以及Kibbe(2000)“Handbook of PharmaceuticalExcipients American Pharmaceutical Association”，第3版(ISBN：091733096X)中有进一步描述。在工作实施例中举例说明了本文所述的高浓度抗体溶液的合适配制方法。

本文所述的水溶液包含高浓度的与人补体组分C5结合的抗体(诸如雷武珠单抗)。此类溶液在本文中有时称为“高浓度抗体溶液”。如本文所用，水溶液中抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)的“高浓度”是至少、等于或高于40(例如，至少、等于或高于45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200、205、210、215、220、225、230、235、240、245、250、255、260、265、270、275、280、285、290、295或300)mg/mL的抗体浓度。在一个实施方案中，抗C5抗体存在于溶液中的浓度大于100(例如，大于105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190或195)mg/mL。在另一个实施方案中，抗C5抗体存在于溶液中的浓度大于200(例如，大于200、205、210、215、220、225、230、235、240、245、250、255、260、265、270、275、280、285、290或295)mg/mL。在另一个实施方案中，抗C5抗体存在于溶液中的浓度大于300mg/mL。在另一个实施方案中，抗体存在于溶液中的浓度为例如40mg/mL至200mg/mL，50mg/mL至200mg/mL，60mg/mL至200mg/mL，70mg/mL至200mg/mL，80mg/mL至200mg/mL，90mg/mL至200mg/mL，100mg/mL至200mg/mL，110mg/mL至200mg/mL，120mg/mL至200mg/mL，130mg/mL至200mg/mL，140mg/mL至200mg/mL，150mg/mL至200mg/mL，40mg/mL至100mg/mL，50mg/mL至100mg/mL，60mg/mL至100mg/mL，70mg/mL至100mg/mL，80mg/mL至100mg/mL，90mg/mL至100mg/mL，40mg/mL至150mg/mL，50mg/mL至150mg/mL，60mg/mL至150mg/mL，70mg/mL至150mg/mL，80mg/mL至150mg/mL，90mg/mL至150mg/mL，100mg/mL至150mg/mL，110mg/mL至150mg/mL，120mg/mL至150mg/mL，40mg/mL至50mg/mL，40mg/mL至250mg/mL，50mg/mL至250mg/mL，60mg/mL至250mg/mL，70mg/mL至250mg/mL，80mg/mL至250mg/mL，90mg/mL至250mg/mL，100mg/mL至250mg/mL，110mg/mL至250mg/mL，120mg/mL至250mg/mL，130mg/mL至250mg/mL，140mg/mL至250mg/mL，150mg/mL至250mg/mL，160mg/mL至250mg/mL，170mg/mL至250mg/mL，180mg/mL至250mg/mL，190mg/mL至250mg/mL，200mg/mL至250mg/mL，高于200mg/mL(例如，至少201mg/mL)至250mg/mL，或高于200mg/mL(例如，201mg/mL或更高)至300mg/mL。

如本文所述且如工作实施例中举例说明的，特别报导的水溶液为配制在其中的抗C5抗体提供了明显的物理和化学稳定性以及功能稳定性。例如，本文所述的制剂能够维持以高浓度存在于溶液中的抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)的结构完整性。在一个实施方案中，该溶液适于在2-8℃(例如，4℃)下储存。在另一个实施方案中，将溶液配制为在低于0℃的温度(例如，-20℃或-80℃)下储存。在另一个实施方案中，将溶液配制为在2-8℃(例如，4℃)下储存长达三年(例如，1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、1年、11/2年、2年、21/2年或3年)。在另一个实施方案中，该溶液适于在2-8℃(例如，4℃)下储存至少1、2或3年。

如本文所述的工作实施例中所举例说明的，本文所述的溶液适于在大约2℃至8℃下维持大约100mg/mL的抗C5抗体主要呈单体形式长达两年。如本文所用，如果例如，正如使用尺寸排阻色谱法-高效液相色谱法(SEC-HPLC，诸如凝胶渗透HPLC)测定的，溶液中存在的抗体至少95％(例如，至少95.1％、95.2％、95.3％、95.4％、95.5％、95.6％、95.7％、95.8％、95.9％、96％、96.1％、96.2％、96.3％、96.4％、96.5％、96.6％、96.7％、96.8％、96.9％、97％、97.1％、97.2％、97.3％、97.4％、97.5％、97.6％、97.7％、97.8％、97.9％、98％、98.1％、98.2％、98.3％、98.4％、98.5％、98.6％、98.7％、98.8％、98.9％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％或99.9％或更多)为单体，则在特别报导的水溶液中以高浓度配制的抗C5抗体“主要为单体”或“主要呈单体形式”。在一个实施方案中，此处描述的溶液中的抗C5抗体可以在大约2℃至8℃下储存(例如，在例如1℃、2℃、3℃、4℃、5℃、6℃、7℃、8℃、9℃或10℃下储存)至少一个月(例如，至少两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、七个月、八个月、九个月、10个月、11个月、12个月、13个月、14个月、15个月、16个月、17个月、18个月、19个月、20个月、21个月、22个月、23个月、24个月或更长时间)后保持主要为单体。

在另一个实施方案中，溶液中少于5％(例如，少于4.9％、4.8％、4.7％、4.6％、4.5％、4.4％、4.3％、4.2％、4.1％、4.0％、3.9％、3.8％、3.7％、3.6％、3.5％、3.4％、3.3％、3.2％、3.1％、3.0％、2.9％、2.8％、2.7％、2.6％、2.5％、2.4％、2.3％、2.2％、2.1％、2％、1.9％、1.8％、1.7％、1.6％、1.5％、1.4％、1.3％、1.2％、1.1％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％或0.1％)的抗体是寡聚的、聚集的和/或片段化的。如本文所用，抗体片段化是指完整抗体的分子量小于完整抗体的组装不当的成分或降解产物。此类片段化形式包括但不限于游离单体重链多肽，二聚体重链多肽(例如，二硫键连接的重链多肽)，与一条轻链多肽结合的二聚体重链多肽，与一条轻链多肽结合的单体重链多肽，或轻链或重链多肽的进一步降解产物或片段。在一些实施方案中，在2℃至8℃下储存至少一个月(例如，至少两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、七个月、八个月、九个月、10个月、11个月、12个月、13个月、14个月、15个月、16个月、17个月、18个月、19个月、20个月、21个月、22个月、23个月、24个月或更长时间)后，少于2％(例如，少于1.9％、1.8％、1.7％、1.6％、1.5％、1.4％、1.3％、1.2％、1.1％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％或0.1％)的抗体聚集。在一些实施方案中，在2℃至8℃下储存至少一个月(例如，至少两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、七个月、八个月、九个月、10个月、11个月、12个月、13个月、14个月、15个月、16个月、17个月、18个月、19个月、20个月、21个月、22个月、23个月、24个月或更长时间)后，少于1％(例如，少于0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％或0.1％)的抗体片段化。用于测定溶液中存在的单体抗体的量以及抗C5抗体的寡聚、聚集或片段化形式的量的方法在本文中进行了描述，并在工作实施例中进行了举例说明。例如，技术人员可以使用例如尺寸排阻色谱法-高效液相色谱法(SEC-HPLC，例如凝胶渗透HPLC)，静态光散射(SLS)，傅立叶变换红外光谱法(FTIR)，圆二色性(CD)，尿素诱导蛋白质去折叠技术，固有色氨酸荧光，非还原十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和差示扫描量热法(DSC)来测定给定溶液中存在的完整、片段化、未折叠的中间体和/或聚集的抗体物质的百分比。

在本文所述的任何溶液的一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC(例如，凝胶渗透HPLC)所测定的，溶液中少于5％的抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)聚集。在另一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC所测定的，溶液中少于4％的抗C5抗体聚集。在另一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC所测定的，溶液中少于3％的抗C5抗体聚集。在另一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC所测定的，溶液中少于2％的抗C5抗体聚集。在另一个实施方案中，正如通过SEC-HPLC所测定的，溶液中少于1％的抗C5抗体聚集。

如本文所述且如工作实施例中所举例说明的，本文特别报导的含抗C5抗体的溶液在2℃至8℃下储存至少一个月(例如，至少两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、七个月、八个月、九个月、10个月、11个月、12个月、13个月、14个月、15个月、16个月、17个月、18个月、19个月、20个月、21个月、22个月、23个月、24个月、25个月、26个月、27个月、28个月、29个月、30个月、31个月、32个月、33个月、34个月、35个月、36个月或更长时间)后可保持其生物/功能活性(例如，与人C5结合的能力)的至少90％(例如，91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或甚至100％)。

在另一个实施方案中，本文所述的溶液中存在的抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)在2℃至8℃下储存至少一个月(例如，至少两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、七个月、八个月、九个月、10个月、11个月、12个月、13个月、14个月、15个月、16个月、17个月、18个月、19个月、20个月、21个月、22个月、23个月、24个月、25个月、26个月、27个月、28个月、29个月、30个月、31个月、32个月、33个月、34个月、35个月、36个月或更长时间)后可以保持其抑制溶血的活性的至少90％(例如，91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)。用于测定特别报导的溶液中的抗体是否保持其活性的合适的溶血测定法在本文中进行了描述并且是本领域已知的，例如使用禽或猪红细胞进行的体外溶血测定。用于评价抗体制剂与人补体组分C5结合的能力的合适方法是本领域已知的并且在本文中进行了描述。

本文所述的水溶液可以含有一种或多种常见药剂(例如，一种或多种赋形剂和/或添加剂，诸如缓冲剂、糖(sugar)或糖化物(saccharide)、盐、表面活性剂、增溶剂、稀释剂、粘合剂、稳定剂、盐、亲脂性溶剂、氨基酸、螯合剂和/或防腐剂)。

在一个实施方案中，水溶液含有一种或多种缓冲剂。如本文所用，术语“缓冲剂”是指当添加到水溶液中时能够在添加酸或碱时或在用溶剂稀释时保护溶液免受pH变化的一种或多种组分。在一个实施方案中，该溶液包含至少一种或多种缓冲剂。可以包含在洗涤液中的典型缓冲液的非限制性实例包括Tris(三(羟甲基)甲胺)、双-Tris、双-Tris丙烷、组氨酸、三乙醇胺、二乙醇胺、甲酸盐、乙酸盐、MES(2-(N-吗啉)乙磺酸、磷酸盐、HEPES(4-2-羟乙基-1-哌嗪乙烷磺酸)、柠檬酸盐、MOPS(3-(N-吗啉)丙磺酸)、TAPS(3{[三(羟甲基)甲基]氨基}丙磺酸)、Bicine(N，N-双(2-羟乙基)甘氨酸)、Tricine(N-三(羟甲基)甲基甘氨酸)、TES(2-{[三(羟甲基)甲基]氨基}乙磺酸)、PIPES(哌嗪-N，N’-双(2-乙磺酸)、二甲基胂酸盐(二甲胂酸)SSC(柠檬酸钠盐水)和磷酸钠。

在另一个实施方案中，缓冲剂是氨基酸。氨基酸可以是例如，选自组氨酸(例如，L-组氨酸)、丝氨酸(例如，L-丝氨酸)和甘氨酸(例如，L-甘氨酸)中的一种。在另一个实施方案中，该溶液包含两种或更多种缓冲剂。在一个特定实施方案中，缓冲剂是磷酸钠。在一个实施方案中，特别报导的溶液不包含作为缓冲剂的游离氨基酸。在另一个实施方案中，特别报导的溶液仅包含一种作为缓冲剂的游离氨基酸(例如，组氨酸)。在另一个实施方案中，特别报导的溶液可以包含两种或更多种(例如，两种、三种、四种、五种、六种或七种或更多种)作为缓冲剂的不同氨基酸，例如丝氨酸和组氨酸。

缓冲液的浓度足以维持所需的pH，并且也可以改变，例如以维持制剂的等渗性。肠胃外制剂中采用的常规缓冲剂的典型浓度可在以下文献中找到：Pharmaceutical DosageForm：Parenteral Medications，第1卷，第2版，第5章，第194页，De Luca and Boylan，″Formulation of Small Volume Parenterals″，Table 5：Commonly used additives inParenteral Product。在一个实施方案中，制剂中所述一种或多种缓冲剂的浓度为约10mM至300mM(包括端值)。在另一个实施方案中，该溶液包含至少一种浓度为10mM至200mM(包括端值)的缓冲剂。在另一个实施方案中，本文所述的水溶液含有浓度为至少10mM(例如，至少15、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290或300mM或更高)的缓冲剂。在另一个实施方案中，水溶液包含的缓冲剂浓度为约10mM至50mM，15mM至50mM，20mM至50mM，25mM至50mM，30mM至50mM，40mM至50mM，10mM至100mM，15mM至100mM，20mM至100mM，25mM至100mM，30mM至100mM，40mM至100mM，10mM至150mM，15mM至150mM，20mM至150mM，25mM至150mM，30mM至150mM，40mM至150mM，50mM至100mM，60mM至100mM，70mM至100mM，80mM至100mM，50mM至150mM，60mM至150mM，70mM至150mM，80mM至150mM，90mM至150mM，100mM至150mM，10mM至200mM，15mM至200mM，20mM至200mM，25mM至200mM，30mM至200mM，40mM至200mM，50mM至200mM，60mM至200mM，70mM至200mM，80mM至200mM，90mM至200mM，100mM至200mM，150mM至200mM，10mM至250mM，15mM至250mM，20mM至250mM，25mM至250mM，30mM至250mM，40mM至250mM，50mM至250mM，60mM至250mM，70mM至250mM，80mM至250mM，90mM至250mM，100mM至250mM，150mM至250mM，或200mM至250mM。在另一个实施方案中，制剂中缓冲液的浓度为约20mM、25mM、30mM、35mM、40mM、45mM、50mM、55mM、60mM、65mM、70mM、75mM、80mM、90mM、95mM或约100mM。在另一个实施方案中，缓冲剂以至少或等于20mM的浓度存在于溶液中。在另一个实施方案中，缓冲剂以至少或等于25mM的浓度存在于溶液中。在另一个实施方案中，缓冲剂以至少或等于50mM的浓度存在于溶液中。在特别报导的溶液含有两种或更多种(例如，至少两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或10种或更多种)不同缓冲剂的实施方案中，所述两种或更多种缓冲剂中的每一种可以独立地以例如上述浓度之一存在。

在一个实施方案中，水溶液具有中性pH或可以调节为具有中性pH。如本文所用，“中性pH”是介于7和8之间(且包括端值)的pH。因此，如本文所用，中性pH包括特定pH值，诸如7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9和8.0。在一些实施方案中，中性pH为至少pH7(例如，至少pH 7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.7或7.9)，但小于pH 8(例如，小于pH7.9、7.8、7.7、7.6、7.5、7.4、7.3、7.2或7.1)。也就是说，在一些实施方案中，中性pH可以是例如，至少pH 7，但小于pH 7.5。在一些实施方案中，中性pH可以在pH 7和pH 7.5之间。在一些实施方案中，中性pH可以在pH 7和pH 7.2之间。在另一个实施方案中，溶液的pH在7.0至7.4之间。在另一个实施方案中，溶液的pH在7.2至7.8之间。在另一个实施方案中，溶液的pH在7.2至7.6之间。在一些实施方案中，中性pH可以是例如pH 7。本领域的技术人员还将认识到，人血(诸如来自健康患者的人血)具有如本文所定义的中性pH，例如，人血的pH大约为pH7.35至pH 7.45。参见，例如，Boron and Boulpaep(2003)“Medical physiology：acellular and molecular approach，”W.B.Saunders，New York(ISBN：0721632564)。在一些实施方案中，本文所述的高浓缩抗体溶液的pH在大约6.4至7.5之间(包括端值)(例如，大约6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6或7.7)。在一个实施方案中，溶液的pH在7.2至7.6之间。在一个特定实施方案中，溶液的pH为7.4。

在一个实施方案中，溶液含有一种或多种表面活性剂，诸如阴离子型、阳离子型或非离子型表面活性剂。如本文所用，术语“表面活性剂”是指既含疏水性部分(例如，烷基链)又含亲水性部分(例如，羧基和羧酸根基团)的表面活性分子。适合用于本发明制剂的表面活性剂包括但不限于脂肪酸酯(例如，山梨糖醇酐单辛酸酯、山梨糖醇酐单月桂酸酯、山梨糖醇酐单棕榈酸酯)、山梨糖醇酐三油酸酯、脂肪酸甘油酯(例如，单辛酸甘油酯、单肉豆蔻酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯)、脂肪酸聚甘油酯(例如，单硬脂酸十甘油酯、二硬脂酸十甘油酯、单亚油酸十甘油酯)、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯(例如，聚氧乙烯山梨糖醇酐单月桂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单棕榈酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐三油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐三硬脂酸酯)、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯(例如，聚氧乙烯山梨醇四硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨醇四油酸酯)、聚氧乙烯脂肪酸甘油酯(例如，聚氧乙烯单硬脂酸甘油酯)、聚乙二醇脂肪酸酯(例如，聚乙二醇二硬脂酸酯)、聚氧乙烯烷基醚(例如，聚氧乙烯月桂醚)、聚氧乙烯聚氧丙烯烷基醚(例如，聚氧乙烯聚氧丙烯二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯丙醚、聚氧乙烯聚氧丙烯鲸蜡醚)、聚氧乙烯烷基苯基醚(例如，聚氧乙烯壬基苯基醚)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(例如，聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油)、聚氧乙烯蜂蜡衍生物(例如，聚氧乙烯山梨醇蜂蜡)、聚氧乙烯羊毛脂衍生物(例如，聚氧乙烯羊毛脂)和聚氧乙烯脂肪酸酰胺(例如，聚氧乙烯硬脂酸酰胺)；C12-C18烷基硫酸盐(例如，鲸蜡醇硫酸酯钠、月桂基硫酸钠、油基硫酸钠)、聚氧乙烯C10-C18烷基醚硫酸盐(平均添加2至4摩尔环氧乙烷单元)(例如，聚氧乙烯月桂基硫酸钠)和C10-C18烷基磺酸琥珀酸酯盐(例如，月桂基磺酸琥珀酸酯钠)；和天然表面活性剂，诸如卵磷脂、甘油磷脂、鞘磷脂(例如，鞘髓磷脂)，和C12-C18脂肪酸的蔗糖酯。

在一个实施方案中，制剂中的表面活性剂是非离子型表面活性剂。在某些实施方案中，制剂中的表面活性剂是聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯，例如聚山梨醇酯20、40、60、80或其一种或多种的组合。在一个实施方案中，制剂中的表面活性剂是聚山梨醇酯80(Tween80)。在另一个实施方案中，制剂中的表面活性剂是聚山梨醇酯60。在另一个实施方案中，制剂中的表面活性剂是聚山梨醇酯40。在另一个实施方案中，制剂中的表面活性剂是聚山梨醇酯20(Tween 20)。

添加到制剂中的表面活性剂的量足以减少配制的抗体的聚集和/或将制剂中颗粒的形成减到最少。例如，表面活性剂可以以约0.001％至约1％，或约0.001％至约0.5％，或约0.01％至约0.2％的量存在于制剂中。在一个实施方案中，水溶液含有浓度为至少或大约0.001％(例如，至少或大约0.002％、0.003％、0.004％、0.005％、0.006％、0.007％、0.008％、0.009％、0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.11％、0.12％、0.13％、0.14％、0.15％、0.16％、0.17％、0.18％、0.19％、0.2％、0.21％、0.22％、0.23％、0.24％、0.25％、0.26％、0.27％、0.28％、0.29％、0.3％、0.31％、0.32％、0.33％、0.34％、0.35％、0.36％、0.37％、0.38％、0.39％、0.4％、0.41％、0.42％、0.43％、0.44％、0.45％、0.46％、0.47％、0.48％、0.49％或0.5％或更高)的表面活性剂。在另一个实施方案中，水溶液含有不超过0.2％(例如，不超过0.19％、0.18％、0.17％、0.16％、0.15％、0.14％、0.13％、0.12％、0.11％、0.10％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、0.009％、0.008％、0.007％、0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％或0.001％)的药学上可接受的表面活性剂。

在另一个实施方案中，所述制剂包含浓度为约0.001％至约0.5％，约0.005％至约0.2％，约0.01％至约0.1％，或约0.02％至约0.06％或约0.03％至约0.05％(w/v)的聚山梨醇酯。在某些实施方案中，所述制剂包含浓度为0.0 1％或0.02％或0.03％或0.04％或0.05％或0.06％或0.07％或0.08％或0.09％或0.1％或0.15％或0.2％(w/v)的聚山梨醇酯。在某些实施方案中，表面活性剂以0.02％或约0.04％(w/v)的量存在于制剂中。在一个实施方案中，表面活性剂以0.05％(w/v)的量存在于制剂中。

在一个实施方案中，所述制剂包含至少约0.01％，至少约0.02％，至少约0.05％，至少约0.1％，至少约0.2％，至少约0.3％，至少约0.4％或至少约0.5％的聚山梨醇酯80。在某些实施方案中，所述制剂包含约0.01％至约0.5％，约0.01％至约0.3％，约0.001％至约0.2％，约0.02％至约0.5％，约0.02％至约0.3％，约0.02％至约0.2％，约0.05％至约0.5％，约0.05％至约0.3％，约0.05％至约0.2％，约0.075％至约0.5％，约0.075％至约0.3％，或约0.075％至约0.2％的聚山梨醇酯80。在另一个实施方案中，所述制剂包含约0.01％，约0.02％，约0.05％，约0.1％，约0.2％，约0.3％，约0.4％或约0.5％的聚山梨醇酯80。在一个实施方案中，所述制剂包含约0.05％的聚山梨醇酯80。在一个实施方案中，所述制剂包含约0.04％的聚山梨醇酯80。在一个实施方案中，所述制剂包含约0.03％的聚山梨醇酯80。在一个实施方案中，所述制剂包含约0.02％的聚山梨醇酯80。在一个实施方案中，所述制剂包含约0.01％的聚山梨醇酯80。

在一个实施方案中，水溶液含有一种或多种盐，例如，氯化钠、氯化钾或氯化镁。在一些实施方案中，本文所述的水溶液含有浓度为至少10mM(例如，至少15、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290或300mM或更高)的盐。在一些实施方案中，本文所述的水溶液可包含浓度小于或大约为200mM(例如，小于或大约为190、180、170、160、150、140、130、120、110、100、90、80、70、60、50、40、30、25、20、15或10mM)。在一些实施方案中，本文所述的水溶液可包含的盐浓度为约10mM至50mM，15mM至50mM，20mM至50mM，25mM至50mM，30mM至50mM，40mM至50mM，10mM至100mM，15mM至100mM，20mM至100mM，25mM至100mM，30mM至100mM，40mM至100mM，10mM至150mM，15mM至150mM，20mM至150mM，25mM至150mM，30mM至150mM，40mM至150mM，50mM至100mM，60mM至100mM，70mM至100mM，80mM至100mM，50mM至150mM，60mM至150mM，70mM至150mM，80mM至150mM，90mM至150mM，100mM至150mM，10mM至200mM，15mM至200mM，20mM至200mM，25mM至200mM，30mM至200mM，40mM至200mM，50mM至200mM，60mM至200mM，70mM至200mM，80mM至200mM，90mM至200mM，100mM至200mM，150mM至200mM，10mM至250mM，15mM至250mM，20mM至250mM，25mM至250mM，30mM至250mM，40mM至250mM，50mM至250mM，60mM至250mM，70mM至250mM，80mM至250mM，90mM至250mM，100mM至250mM，150mM至250mM，或200mM至250mM。在特别报导的溶液含有两种或更多种(例如，至少两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或10种或更多种)不同盐的实施方案中，所述两种或更多种盐中的每一种可以独立地以例如上述浓度之一存在。

在一个实施方案中，水溶液含有一种或多种碳水化合物赋形剂。合适的碳水化合物赋形剂在例如Katakam和Banga(1995)J Pharm Pharmacol 47(2).：103-107；Andya等人(2003)AAPS PharmSci 5(2)：Article 10；以及Shire(2009)“Current Trends inMonoclonal Antibody Development and Manufacturing”，第11卷，Springer，第354页中进行了描述。适合用于本文所述的溶液中的碳水化合物赋形剂包括但不限于单糖，诸如果糖、麦芽糖、半乳糖、葡萄糖、D-甘露糖和山梨糖；二糖，诸如乳糖、蔗糖、海藻糖和纤维二糖；多糖，诸如麦芽糖糊精、葡聚糖和淀粉；以及糖醇，诸如甘露糖醇、木糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇和山梨糖醇。在一个实施方案中，碳水化合物赋形剂以至少或大约0.5％(例如，至少或大约0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3％、3.25％、3.5％、3.75％、4％、4.25％、4.5％、4.75％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％、9.5％、10％或更高)的浓度存在于本文特别报导的溶液中。在特别报导的溶液含有两种或多种(例如，至少两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或10种或更多种)不同的碳水化合物赋形剂的实施方案中，每种赋形剂可以独立地以上述任何浓度存在。。

在另一个实施方案中，稳定水溶液包含一种或多种稳定剂。示例性的稳定剂包括但不限于多元醇、糖(例如，蔗糖或海藻糖)、氨基酸(例如，精氨酸)、胺和盐析盐。在一个实施方案中，该溶液包含至少一种浓度为2-10％(包括端值)的稳定剂。在一个实施方案中，该溶液包含5％蔗糖。在另一个实施方案中，该溶液包含至少一种或多种浓度为10mM至50mM(包括端值)的稳定剂。在另一个实施方案中，稳定剂以至少或等于20mM的浓度存在于溶液中。在另一个实施方案中，稳定剂以至少或等于25mM的浓度存在于溶液中。在另一个实施方案中，稳定剂以至少或等于50mM的浓度存在于溶液中。在另一个实施方案中，该溶液包含25mM精氨酸。

在一个实施方案中，本文所述的溶液含有一种或多种防腐剂。

如本文所用，术语“防腐剂”是指降低细菌作用并且可以任选地添加至本文制剂中的药剂。防腐剂的添加可以例如利于生产多用途(多剂量)制剂。潜在的防腐剂的实例包括十八烷基二甲基苄基氯化铵、氯化六甲双铵、苯扎氯铵(烷基苄基二甲基氯化铵的混合物，其中烷基为长链化合物)和苄索氯铵。其他类型的防腐剂包括芳族醇，诸如苯酚、丁醇和苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯、邻苯二酚、间苯二酚、环己醇、3-戊醇和间甲酚。

在一个实施方案中，稳定水溶液包含：浓度为100±20mg/mL(例如，80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119或120mg/mL)的抗C5抗体，所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；50±15mM(例如，35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64或65mM)磷酸盐缓冲液；5±3％(例如，2％、3％、4％、5％、6％、7％或8％)蔗糖；和25±10mM(例如15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35mM)精氨酸；其中溶液的pH为7.4±0.5(例如，6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8或7.9)。

在另一个实施方案中，提供了一种稳定水溶液(例如，无菌溶液)，其中该溶液包含(a)浓度为约100mg/mL的抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)，(b)约50mM磷酸盐缓冲液；(c)约5％蔗糖；(d)约25mM精氨酸。在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含：a)浓度为100mg/mL的抗C5抗体(例如，雷武珠单抗)，(b)50mM磷酸盐缓冲液；(c)5％蔗糖；和(d)25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含(a)浓度为约100mg/mL的抗C5抗体，(b)约50mM磷酸盐缓冲液，(c)约5％蔗糖，(d)约0.05％聚山梨醇酯80，和(e)约25mM精氨酸。在另一个实施方案中，该稳定水溶液包含a)浓度为100mg/mL的抗C5抗体，(b)50mM磷酸盐缓冲液，(c)5％蔗糖，(d)0.05％聚山梨醇酯80，和(e)25mM精氨酸。

在另一个实施方案中，稳定水溶液包含不超过三种附加药剂。在另一个实施方案中，稳定水溶液包含不超过两种附加药剂。在另一个实施方案中，稳定水溶液包含不超过一种附加药剂。

IV.用于制备高浓缩抗体溶液的方法

本文还提供了用于制备高浓缩抗C5抗体溶液的方法。在一个实施方案中，提供了用于产生稳定的浓缩抗体溶液的方法，所述溶液包含浓度为100mg/mL的抗C5抗体，50mM磷酸盐缓冲液，5％蔗糖；和25mM精氨酸，所述方法包括：

V.施用途径

本文所述的溶液可以使用多种方法施用给患者，所述方法部分取决于施用途径。所述途径可以是肠胃外模式，例如静脉注射或输注(IV)、皮下注射(SC)、腹膜内(IP)注射、眼内注射、关节内注射或肌内注射(IM)。如本文所用，“肠胃外施用”、“经肠胃外施用”和其他语法上等同的短语，是指除肠内施用和局部外用以外，通常通过注射进行的施用模式，包括但不限于静脉内、鼻内、眼内、肺、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、皮内、肺内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外、脑内、颅内、颈动脉内和胸骨内注射和输注。

在一个特定实施方案中，该溶液通过皮下注射施用。皮下施用可以借助于装置来完成。该装置工具可以是注射器、预装注射器、一次性或可重复使用的自动注射器、笔式注射器、贴片注射器、可穿戴式注射器、具有皮下输注套件的可移动式注射器输注泵或其他装置。

在一个实施方案中，本文所述的溶液通过局部施用递送给受试者。如本文所用，“局部施用”或“局部递送”是指不依赖于经由血管系统将组合物或活性剂(例如，抗C5抗体)运输至其预期的靶组织或部位的递送。在靶组织或部位附近局部施用后，溶液或其一种或多种组分可扩散至预期的靶组织或部位。

例如，溶液可以通过注射或通过植入含该溶液的装置来递送。植入物可以是多孔的、无孔的或凝胶状的材料，包括膜，诸如硅橡胶膜或纤维。植入物可构造成用于将溶液持续或周期性释放至受试者体内。参见，例如，美国专利申请公开号20080241223；美国专利号5,501,856；4,863,457；和3,710,795；EP488401；和EP 430539，其中每一个的公开内容都通过引用整体并入本文。本文所述的溶液可以通过基于例如扩散性、易蚀性或对流系统的可植入装置递送给受试者，所述系统例如渗透泵、生物可降解的植入物、电扩散系统、电渗系统、蒸气压力泵、电解泵、泡腾泵、压电泵、基于侵蚀的系统或机电系统。

在一个实施方案中，本文所述的溶液可局部施用至关节(例如，活动关节)。例如，在所述病症是关节炎的实施方案中，可以将治疗上适当的溶液直接施用至关节(例如，施用至关节间隙)或关节附近。可以局部施用本文所述的组合物的关节内关节的实例包括，例如经受关节炎病状的髋关节、膝关节、肘关节、腕关节、胸骨锁骨关节、颞下颌关节、腕骨关节、跗骨关节、踝关节以及任何其他关节。本文所述的组合物也可施用于囊，例如，肩峰囊、肱二头肌桡骨囊、肘桡骨囊、三角肌囊、髌下囊、坐骨囊以及医学领域已知的任何其他囊。

在另一个实施方案中，本文所述的溶液可局部施用于眼。如本文所用，术语“眼”是指与眼相关的任何和所有解剖组织和结构。在一个实施方案中，将本文所述的溶液施用于眼后房。在另一个实施方案中，在玻璃体内施用本文所述的溶液。在另一个实施方案中，经巩膜施用本文所述的溶液。

在一些实施方案中，例如，在用于治疗或预防诸如COPD或哮喘的病症的实施方案中，可以通过肺向受试者施用本文所述的溶液。肺部药物递送可以通过吸入实现，并且本文中的吸入施用可以是口服和/或经鼻。在一个实施方案中，如本文所述的溶液可通过雾化器施用于受试者的肺。雾化器使用压缩空气以液化气溶胶或雾剂形式递送化合物。雾化器可以是例如射流雾化器(例如，空气或液体射流雾化器)或超声雾化器。其他装置和肺内施用方法在例如美国专利申请公开号20050271660和20090110679中进行了阐述，其中每一个的公开内容通过引用整体并入本文。

在另一个实施方案中，本文所述的溶液以单位剂型存在，该单位剂型可以特别适于自我施用。本公开配制的产品可以包括在容器内，该容器通常例如是小瓶、药筒、预装注射器或一次性笔。也可以使用定量器，诸如美国专利号6,302,855中描述的定量器。注射系统可以包括如美国专利号5,308,341中描述的递送笔。最常用于向糖尿病患者自我递送胰岛素的笔式装置在本领域中是众所周知的。此类装置可以包括至少一个注射针(例如，长度为约5至8mm的31号针)，通常预装一个或多个治疗单位剂量的溶液，并且可用于以尽可能少的疼痛将溶液快速递送给受试者。

VI.治疗方法

所述溶液可用于治疗人类患者的各种疾病和病状。在一个实施方案中，该溶液可用于治疗补体相关病症，包括但不限于：类风湿性关节炎(RA)；抗磷脂抗体综合征；狼疮性肾炎；缺血再灌注损伤；非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)；典型或感染性溶血性尿毒症综合征(tHUS)；致密物沉积病(DDD)；阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)；视神经脊髓炎(NMO)；多灶性运动神经病(MMN)；多发性硬化(MS)；黄斑变性(例如，年龄相关性黄斑变性(AMD))；溶血、肝酶升高和低血小板(HELLP)综合征；血栓性血小板减少性紫癜(TTP)；自发性流产；寡免疫性血管炎；大疱性表皮松解症；复发性流产；和创伤性脑损伤(参见，例如，Holers(2008)Immunological Reviews 223：300-316以及Holers和Thurman(2004)MolecularImmunology 41：147-152)。

在另一个实施方案中，补体相关病症是补体相关血管病症，诸如但不限于糖尿病相关血管病症(例如，眼的糖尿病相关性血管病症)、视网膜中央静脉阻塞、心血管病症、心肌炎、脑血管病症、周围(例如，肌肉骨骼)血管病症、肾血管病症、肠系膜/肠血管病症、移植物和/或再植物的血管再生、血管炎、过敏性紫癜性肾炎、全身性红斑狼疮相关血管炎、类风湿性关节炎相关血管炎、免疫复合血管炎、高安氏病、扩张型心肌病、糖尿病血管病变、川崎病(动脉炎)、静脉空气栓塞(VGE)以及支架置入、冠状动脉旋磨术和经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)后再狭窄(参见，例如，美国专利申请公开号20070172483)。

其他补体相关病症包括但不限于重症肌无力、冷凝集素病、皮肌炎、格雷夫斯病、动脉粥样硬化、阿尔茨海默氏病、格林-巴利综合征、迪戈斯病、移植物排斥(例如，移植排斥)、败血症、烧伤(例如，严重烧伤)、全身性炎性反应败血症、败血性休克、脊髓损伤、肾小球肾炎、桥本甲状腺炎、I型糖尿病、银屑病、天疱疮、自身免疫性溶血性贫血(AIHA)、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、古德帕斯彻综合征、抗磷脂综合征(APS)、灾难性APS(CAPS)、肌萎缩性侧索硬化(ALS)、阿尔茨海默氏病和慢性炎性脱髓鞘神经病。

在另一个实施方案中，本文所述的溶液可用于治疗血栓性微血管病(TMA)，例如与补体相关病症诸如本文所述的任何补体相关病症相关的TMA。

补体相关病症还包括补体相关肺病，诸如但不限于哮喘、支气管炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、间质性肺病、α-1抗胰蛋白酶缺乏症、肺气肿、支气管扩张、闭塞性细支气管炎、肺泡炎、结节病、肺纤维化和胶原血管病。

在另一个实施方案中，将本文所述的溶液施用于受试者以治疗、预防或改善受试者中补体相关炎性反应(例如，补体相关病症的补体相关炎性反应方面)的至少一种症状。例如，组合物可用于治疗、预防和/或改善与补体相关炎性反应相关的一种或多种症状，所述补体相关炎性反应诸如移植物排斥/移植物抗宿主病(GVHD)、再灌注损伤(例如，在心肺分流术或组织移植后)，以及在其他形式的创伤性损伤(诸如烧伤(例如，严重烧伤)、钝伤、脊髓损伤或冻伤)后的组织损害。参见，例如，Park等人(1999)Anesth Analg 99(1)：42-48；Tofukuji等人(1998)J Thorac Cardiovasc Surg 116(6)：1060-1068；Schmid等人(1997)Shock 8(2)：119-124；以及Bless等人(1999)Am J Physiol 276(1)：L57-L63。

在另一个实施方案中，补体介导的病症是补体介导的血管病症，诸如但不限于心血管病症、心肌炎、脑血管病症、周围(例如，肌肉骨骼)血管病症、肾血管病症、肠系膜/肠血管病症、移植物和/或再植物的血管再生、血管炎、过敏性紫癜性肾炎、全身性红斑狼疮相关血管炎、类风湿性关节炎相关血管炎、免疫复合血管炎、器官或组织移植、高安氏病、毛细血管渗漏综合征、扩张型心肌病、糖尿病血管病变、胸腹主动脉瘤、川崎病(动脉炎)、静脉空气栓塞(VGE)以及支架置入、冠状动脉旋磨术和经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)后再狭窄(参见，例如，美国专利申请公开号20070172483)。

VII.组合治疗

在一个实施方案中，将本文所述的溶液作为单一疗法向患者施用。在另一个实施方案中，将所述溶液连同一种或多种附加药剂和/或其他疗法(例如，其适于治疗补体相关病症)一起施用。例如，组合疗法可以包括向人类患者施用为患者提供治疗益处的一种或多种附加药剂(例如，抗凝剂、抗高血压药或抗炎药(例如，类固醇))。在一个实施方案中，本文所述的溶液连同抗炎剂(例如，NSAID、皮质类固醇、甲氨蝶呤、羟化氯喹、抗TNF剂(诸如依那西普(etanercept)和英夫利昔单抗(infliximab))、B细胞消耗剂(诸如利妥昔单抗(rituximab))、白细胞介素-1拮抗剂或T细胞共刺激阻滞剂(诸如阿巴西普(abatacept)))一起施用。

用于治疗受试者中的补体相关病症的附加药剂将根据所治疗的特定病症而变化，但可以包括但不限于一种或多种抗高血压药(例如，血管紧张素转化酶抑制剂、拉贝洛尔(1abetalol)、肼苯哒嗪(hydralazine)、硝苯地平(nifedipine)、钙通道拮抗剂、硝酸甘油或硝普酸钠(sodium nitroprussiate))、抗凝剂、皮质类固醇(例如，泼尼松(prednisone))、免疫抑制剂(例如，长春新碱(vincristine)或环孢霉素A(cyclosporineA))、抗凝剂(例如，华法林(Coumadin)、阿司匹林(aspirin)、肝素、苯茚二酮、磺达肝素(fondaparinux)、依达肝素(idraparinux))、凝血酶抑制剂(例如，阿加曲班(argatroban)、来匹卢定(lepirudin)、比伐卢定(bivalirudin)或达比加群(dabigatran))、纤溶剂(例如，安克洛酶(ancrod)、α-氨基己酸、抗纤维蛋白溶酶-a₁、前列环素(prostacyclin)和去纤苷(defibrotide))、抗高血压剂(例如，拉贝洛尔、肼苯哒嗪、硝苯地平、钙通道拮抗剂、硝酸甘油或硝普酸钠)、降脂剂(例如，羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂)、抗癫痫剂(例如硫酸镁)、抗血栓形成剂(例如，肝素、抗凝血酶、前列环素或低剂量阿司匹林)、交感神经能拟似药(例如，沙丁胺醇(albuterol))、抗生素、脱氧核糖核酸酶(例如，

)、抗胆碱能药、抗IgE抑制剂(例如，抗IgE抗体)、皮质类固醇或非类固醇性抗炎药(NSAID)。有许多不同的NSAIDS可用，一些非处方的包括布洛芬(ibuprofen)/>

/>

和萘普生(naproxen)/>

还有许多其他药物可通过处方获得，包括美洛昔尿(meloxicam)/>

依托度酸(etodolac)/>

萘丁美酮(nabumetone)/>

舒林酸(sulindac)/>

托来美汀(tolementin)

胆碱水杨酸镁/>

双氯芬酸(diclofenac)

地夫西纳(Diflusinal)/>

吲哚美辛(indomethicin)/>

酪洛芬(ketoprofen)/>

奥沙普嗪(oxaprozin)/>

和吡罗昔康(piroxicam)/>

(参见例如，Mihu等人(2007)J Gastrointestin Liver Dis 16(4)：419-424)。在另一个实施方案中，本文所述的溶液可以配制成与静脉γ球蛋白疗法(IVIG)、血浆除去法、血浆置换法或血浆交换法一起施用于患者。

在一个实施方案中，该溶液和一种或多种附加药剂和/或疗法同时施用。在另一个实施方案中，该溶液在施用一种或多种附加药剂和/或疗法之前施用。在另一个实施方案中，该溶液在施用一种或多种附加药剂和/或疗法之后施用。

当本文所述的抗体溶液与第二活性剂组合使用时，所述药剂(例如，抗C5抗体和第二药剂)可以分开或一起配制。例如，所述溶液和药剂可以例如就在施用之前混合，并且一起施用或例如在相同或不同时间分开施用。

VIII.试剂盒和单位剂型

本文还提供了包括稳定水溶液的试剂盒，所述稳定水溶液含有适于向人类患者(例如，患有补体相关病症的患者)施用的治疗有效量的抗C5抗体或其抗原结合片段，诸如雷武珠单抗或BNJ421。试剂盒还可以任选地包括说明书，例如，说明书包括施用时间表，以允许实践者(例如，医师、护士或患者)施用其中所含的组合物，以将所述溶液施用给患者。

试剂盒还可含有用于将一种或多种溶液递送给有需要的患者(例如，患有、怀疑患有补体相关病症或有发展补体相关病症风险的患者)的合适工具。在一个实施方案中，所述工具适于将溶液侵入性地(例如，血管内(例如，静脉内)、皮下、关节内、眼内、玻璃体内或肌内)递送给患者。在另一个实施方案中，所述工具适于将溶液皮下递送给患者。在另一个实施方案中，所述工具适于将溶液侵入性地递送给患者。例如，所述工具可以是注射器或渗透泵。在另一个实施方案中，所述溶液可以配制成滴眼剂，所述工具是滴管。

任选地，试剂盒包括多包单剂量溶液，每一包含有供单次施用的有效量的溶液。试剂盒中还可包括施用溶液所必需的仪器或装置。例如，试剂盒可以提供一个或多个含有溶液的预装注射器。

以下实施例仅是说明性的，不应以任何方式解释为限制本公开的范围，因为在阅读本公开之后，许多变型和等同形式对于本领域技术人员将变得显而易见。

本申请全篇引用的所有参考文献、Genbank条目、专利和公开的专利申请的内容均通过引用明确地并入本文。

实施例

实施例1：用于皮下施用的雷武珠单抗(AXLN1210)高浓度制剂的开发

该实施例总结了用于皮下施用的ALXN1210高浓度制剂的开发(例如，在100mg/mL下为50mM磷酸盐缓冲液、5％蔗糖、25mM精氨酸，pH 7.4)。在早期制剂开发中进行了初步实验，以获得配制前的筛选数据，并评价ALXN1210在较高浓度下乳浊性外观的减少。ALXN1210的初始制剂(在10mg/mL下为10mM磷酸盐、150mM氯化钠(pH 7.0)、0.02％Tween 80)为无色且略微呈乳浊性。随着ALXN1210浓度的增加，乳浊性外观也增加。根据配制前筛选的结果，执行了稳定性研究以获得先导稳定性数据。在初始稳定性研究后，执行了原型稳定性研究以获得散装原料药和药物产品的最佳配方。下面详细讨论初步研究和稳定性研究。

1.方法

A.外观

通过使用正常实验室光在白色和黑色背景上进行目视观察来确定外观。

B.C5结合

C5结合ELISA是对ALXN1210的效能测定。该试验程序是一种带比色检测的直接结合免疫测定法，用于测试ALXN1210与其靶标即人C5补体蛋白结合的能力。Polysorp微量滴定板用人C5蛋白涂覆，并用牛血清白蛋白(BSA)封闭。由ALXN1210参考材料制备标准曲线。参考材料和试验样品以三种稀释度制备，这三种稀释度旨在落入测定的工作范围内。与标准品和样品一起孵育后，将板进行洗涤并且和与辣根过氧化物酶(HRP)缀合的小鼠抗人IgG4一起孵育。再次洗涤该板，然后使用底物2，2′-连氮基-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)显影。用分光光度法在酶标仪上在405nm下读取反应的底物的量。吸光度读数与板上与C5结合的ALXN1210的浓度成正比。对标准曲线应用四参数曲线拟合，并从曲线上以内插值法获得参考材料和试验样品结果。将样品试验结果与参考材料结果进行比较，并报告相对活性(％)。

C.密度

使用DMA 4500密度计进行的密度测量是通过U型管原理确定的。将空心U形玻璃管装满样品，然后以尽可能最低的幅度进行电子激发。通过以下关系确定密度：

ρ＝A(τ²)-B

p＝密度

τ＝振荡周期

A和B是用两种已知密度的物质通过仪器校准确定的仪器常数。

D.差示扫描荧光法

差示扫描荧光法通过在荧光染料(诸如Sypro Orange)的存在下完成热变性曲线来测量热稳定性变化。当蛋白质去折叠时，暴露的疏水表面与染料结合，从而增加了荧光并在疏水暴露T_h的温度下产生具有特征中点值的稳定性曲线。

E.动态光散射法

动态光散射法通过使用允许使用3百万像素机载相机对微孔板中的孔进行成像的照明系统来测量微孔板中原位蛋白质、纳米颗粒和其他大分子的大小和相互作用。由于布朗运动引起的光散射的波动给出了与溶液中存在的颗粒的流体力学半径有关的扩散系数。

F.HPLC凝胶渗透法

凝胶渗透(尺寸排阻)HPLC用于区分单体IgG与可能由于单体聚集而产生的较大的多聚体抗体物质。将试验样品注入用磷酸盐缓冲盐水(pH 7.0)平衡的TSK凝胶G3000 SWXL柱上，然后进行等度洗脱。在214nm下监测蛋白质峰，并将单体IgG的纯度百分比表示为总积分峰面积的百分比。通过观察在单体峰之前洗脱的峰来检测较大质量的多聚体。

G.成像毛细管电泳(iCE)

该方法使用Protein Simple iCE280或iCE3系统，该系统在毛细管柱中执行游离溶液IEF，并使用全柱UV检测器检测聚焦的蛋白质区域。通过预先混合ALXN1210、载体两性电解质和pI标志物来制备样品。将样品上样到毛细管盒中，并在毛细管两端的电解槽中装入酸和碱。施加电压，使分析物在其pI下聚焦。CCD相机每30秒拍摄整个毛细管柱的一张UV光吸收图像，从而可以实时监测聚焦步骤。捕获并分析所产生的分离模式。从掺入样品中的pI标志物的位置以内插值法获得样品中存在的蛋白质的pI。

H.芯片实验室(LoC)

该方法测试产品的均质性和纯度。通过用十二烷基硫酸锂(LDS)处理使非还原的样品变性。通过用十二烷基硫酸锂(LDS)处理使还原的样品变性，并用二硫苏糖醇(DTT)破坏二硫键。将多肽链和与LDS结合的荧光染料混合，并通过微毛细管电泳根据分子大小进行分离。检测蛋白质并通过激光诱导的荧光量化。

I.摩尔渗透压浓度

使用冰点降低渗透压仪测定样品的摩尔渗透压浓度。渗透压仪在使用前用涵盖样品范围的50mOsm/kg和850mOsm/kg的市售、经检定的摩尔渗透压浓度标准品进行校准。在测试样品之前，使用290mOsm/kg参考溶液确认校准成功。测试样品，一式三份，并报告样品测定的平均值。

J.pH

使用蛋白质抗性饱和无银KCl组合电极以及相关的仪表和温度监测器进行pH测量。在使用之前，使用在适当pH范围(即，pH 4.0-pH 7.0)内的市售溶液对仪表进行校准。

K.使用SoloVPE进行蛋白质浓缩

使用理论上测定的消光系数1.479，在试验样品中使用可变光程技术，使用280nm下的吸光度测定蛋白质浓度。对于每个样品，按照该方法进行三次重复的吸光度读数。

L.粘度

使用AMVn粘度计得到的粘度测量值是通过滚球原理测定的。在空心管中装入样品和已知密度的实心球，然后以已知角度倾斜。测定球从管的一侧移到另一侧所需的时间，并用于通过以下关系式计算粘度：

η＝K*(ρb-ρs)*tr

η＝动力粘度(mPa*s)

K＝比例常数

ρb＝球的密度(g/mL)

ps＝样品密度(g/mL)

tr＝球滚动时间

为了计算粘度，将使用DMA 4500M密度计测定的样品密度用作ps。

M.通过微流成像(MGI)测定不可见颗粒

目的是通过微流成像(MFI)评估制剂中所有不可见的颗粒。从2-8℃储存条件中取出样品，并使用BOT1自动取样器直接在MFI中进行测试。在将样品上样到BOT1中之前，需要进行六次样品倒置，以确保颗粒完全混合。将样品上样到三个连续的孔中，每个孔进行一次测量，总共重复3次。在BOT1内建立三个混合周期，以进一步确保均匀混合

2.制剂开发

图1-5和表1-5显示了高浓度ALXN1210早期制剂开发的实验结果。

在第一个实验中，观测到向磷酸钠缓冲液中的ALXN1210添加氨基酸对乳浊度的影响。经确定乳浊度的原因是在高浓度下溶液中抗体分子之间缺乏电荷排斥作用。如下所述进行一系列实验，以优化产生稳定透明溶液所需的特定氨基酸和浓度。根据这些实验，确定添加带正电荷的氨基酸(L-精氨酸)降低了在磷酸钠缓冲液中的50mg/mL ALXN1210样品的乳浊度。通过目视检查小瓶得出相同的结论(数据未示出)。

另外，以下实验通过以下方式进行：使用10mg/ml的ALXN1210 IV制剂并浓缩抗体，并进行缓冲液交换以评估用于发现高浓度ALXN1210制剂的各种初始缓冲液体系。如下表1所示，所有合并样品的最终缓冲液交换率为1：1000才能获得所需pH。合并样品的浓度范围为35.3至54.0mg/mL。缓冲液交换后的回收率％为70.6％至108％。外观结果显示，经pH 7的25mM组氨酸和pH 7的25mM磷酸盐缓冲液交换的小瓶透明且无色，与依库珠单抗相当，而所有经其他缓冲液交换的小瓶中的溶液均为乳浊性。成像毛细管电泳(iCE)结果显示pI范围为5.98至6.54，主要pI范围为6.19至6.24，且面积％范围为63.1％至65.9％。尺寸排阻色谱法(SEC)结果显示，单体％(纯度)为98.48％至98.98％。

表1：10mg/mL至50mg/mL的缓冲液交换ALXN1210(合并组1-3)

*与依库珠单抗相当

如图1所示，使用DLS在pH 7下对经组氨酸缓冲液交换的样品的盐滴定结果显示，随着盐浓度的增加，ALXN1210中的自我缔合也增加。

如图2所示，使用动态光散射(DLS)进行L-精氨酸滴定的结果显示，25mM L-精氨酸是降低50mg/mL的ALMN1210中的乳浊度所需的最小量。

如图3所示，使用DLS在pH 7下对经磷酸盐缓冲液交换的样品的盐滴定结果显示，在ALXN1210中，无盐和添加150mM盐也有最少量的自我缔合。比较标记为2和5的峰。

如图4所示，使用DSF获得的缓冲液交换样品的结果显示，疏水口袋未在ALXN1210中暴露。pH 5和6的柠檬酸盐和乙酸盐缓冲液的热稳定性低且熔融温度(Tm)最低，而pH 7的组氨酸和磷酸盐缓冲液最稳定且Tm最高。

如表2阐述的外观结果所示，在pH 7的25mM磷酸盐缓冲液中添加25mM L-精氨酸，约100mg/mL的ALXN1210透明且无色。

表2：ALXN1210100mg/mL样品的外观

如图5所示，使用DLS获得的10mg/mL和114mg/mLALXN1210在有和没有L-精氨酸掺入物的情况下的结果显示，将25mM L-精氨酸添加到至少100mg/mL样品中与10mg/mL参比非常相当。没有添加L-精氨酸的至少100mg/mL的样品产生了更高级的物质，表明存在自我缔合。

表3中阐述的摩尔渗透压浓度的结果显示，在含8％蔗糖或4.5％山梨糖醇的pH7.2的25mM组氨酸中的ALXN1210在275-320的所需摩尔渗透压浓度范围内。在补充有7％蔗糖或4％山梨糖醇的pH 7的25mM磷酸盐、25mM L-精氨酸中的ALXN1210的摩尔渗透压浓度也落在所需的摩尔渗透压浓度范围内。

表3：各种制剂的ALXN1210的摩尔渗透压浓度

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表4中阐述的粘度结果显示，随着ALXN1210浓度的增加，对于ALXN1210在组氨酸和磷酸盐缓冲液中的溶液而言，粘度也增加。表4中阐述的密度结果显示，随着浓度的变化，组氨酸和磷酸盐缓冲液的密度没有显著变化。

表4：不同浓度的ALXN1210样品的粘度和密度

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如表5所示，添加L-精氨酸碱显著增加了样品的pH。掺入样品中的含磷酸二氢钠的L-精氨酸QS使pH升高1个pH单位。掺入样品中的L-精氨酸HCl使pH降低约0.25个pH单位。但是，外观在乳浊度上从L-精氨酸HCl掺入物到L-精氨酸QS掺入物到L-精氨酸碱掺入物减少。

表5：用于25mM L-精氨酸渗入物的L-精氨酸缓冲液的pH以及对ALXN1210的外观影响

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3.长期稳定性

图6-21显示了初始稳定性研究的结果。这些结果显示处于2-8℃、23-27℃和37℃下2个月后，组氨酸制剂最不稳定而磷酸盐制剂最稳定。同样，正如通过尺寸排阻色谱法证明的，处于2-8℃和23-27℃下2个月后，在磷酸盐制剂中山梨糖醇和蔗糖相当。然而，处于37℃下2个月后，与蔗糖相比，山梨糖醇略微更为稳定。动态光散射结果显示，在含25mM L-精氨酸的磷酸盐样品中添加蔗糖或山梨糖醇，处于2-8℃下2个月后，无显著变化。组氨酸样品在T＝2个月时的动态光散射结果因为采集间隔期存在较高的多分散性而无法重叠，表明该制剂的稳定性较磷酸盐制剂差。5天的冻融循环结果在T＝0和5个冻融循环之间没有显示出任何显著变化。

4.原型配方

图22-46显示了稳定性原型研究的结果。

这些结果显示，在2-8℃、-20℃和-80℃的稳定性研究过程中，75mg/mL和100mg/mL的所有磷酸盐制剂(散装原料药(BDS)和药物产品(DP))都稳定。在-20℃和-80℃下进行5次冻融循环后，所有100mg/mL散装原料药制剂均稳定，并且未显示出显著变化。

5.短期降解试验之前的中间结论

根据这些研究的结果，确定了ALXN1210高浓度材料的最佳配方。初步实验表明，添加L-精氨酸会减少100mg/mL的ALXN1210的乳浊性外观。初始稳定性研究导致选择了含＞50mg/mL的L-精氨酸的磷酸盐缓冲液的先导配方。原型稳定性研究的结果确定，在100mg/mL时ALXN1210的初始最佳配方为50mg磷酸盐缓冲液、5％蔗糖、25mM精氨酸，pH 7.4。

6.最终最佳配方的开发

对初始最佳配方(100mg/mL ALXN1210在配制缓冲液(50mM磷酸钠、25mM精氨酸和5％蔗糖，pH 7.4)中的适用性进行短期降解研究，以评估聚山梨醇酯80(PS80)或其他表面活性剂是否是防止降解必需的。PS 80的两个品牌是据报道由＞99％的纯油酸组成的0.05％(w/v)NOF America Corporation POLYSORBATE 80(HX2)^TM，以及AVANTOR^TM4117J.T.

聚山梨醇酯80，是一种广泛使用的表面活性剂，由包括油酸和棕榈酸的脂肪酸掺混物组成。两种产品常常被称为TWEEN/>

并且是源自聚乙氧基化山梨糖醇酐和油酸的，具有源自环氧乙烷聚合物的亲水基团的非离子型表面活性剂。

下表6中列出了用于评价J.T.baker avantor 4117PS80在100mg/mL ALXN1210制剂中的潜在用途的试验方法。有关更多详细信息和方法说明，请参阅各个试验方法。

表6：.T.Baker Avantor 4117PS80的潜在用途的试验方法

目视检查装有100mg/mL ALXN1210和J.T.Baker avantor 4117PS80或HX2 NOFPS80的小瓶。在暴露于45℃的降解储存条件并在2-8℃下再搅拌5天的所有样品中，所有样品均未显示出可见颗粒或明显的颜色变化。结果示于表7中。

表7.装有J.T Baker avantor 4117 PS80或HX2 NOF PS80的5cc小瓶中的100mg/mL ALXN1210的目视检查

ALXN1210 mg/mL的浓度显示由降解条件引起的略微降低。有关所有浓度测量值，请参见表8。

如图2所示，当暴露于相同降解条件时，含有0.05％Avantor PS80或HX2 NOF PS80的ALXN1210100mg/mL制剂的浓度没有显著变化。

表8：浓度测量值

如以上表8所示，当暴露于相同降解条件时，含有0.05％Avantor PS80或HX2 NOFPS80的ALXN1210100mg/mL制剂的浓度没有显著变化。在含有0.05％Avantor PS80或HX2NOF PS80的ALXN1210 100mg/mL制剂之间，浓度保持相当。

通过监测650nm下的吸光度来测量浊度。测量值示于表9中。

含有0.05％Avantor PS80或0.05％HX2 NOF PS80的ALXN1210 100mg/mL制剂没有显著的浊度变化。在该研究中，浊度在所有时间点和降解条件下均保持稳定

表9：通过监测650nm吸光度测得的浊度

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对于在45℃下孵育7天或14天，加上再在2-8℃下振荡(200RPM)的样品，正如预期的那样由于降解条件，观测到单体百分比下降。然而，当暴露于相同的时间点和条件时，在含有0.05％Avantor PS80或0.05％HX2 NOF PS80的两种ALXN1210 100mg/mL制剂之间单体百分比未显示出实质性差异。

单体数据百分比示于表10中。图4显示正如预期的那样在降解条件后单体％降低，并且当暴露于相同的时间点和条件时，在含有0.05％Avantor PS80或0.05％HX2 NOF PS80的两种ALXN1210 100mg/mL制剂之间无显著差异。

表10：在45℃下孵育7天或14天加上再在2-8℃下振荡(200RPM)的样品的单体百分比

将ALXN1210与0.05％J.T.Baker Avantor聚山梨醇酯80或0.05％HX2 NOF聚山梨醇酯80一起在45℃下孵育7天和14天后，如表11所示通过等电点聚焦检测到向酸性物质的转变。对样品再进行振荡对主峰向酸性物质的进一步转变没有显著影响。

表11：通过CE-SDS进行的等电点聚焦

在存在和不存在以0.05％浓度包含在内的两个品牌的PS 80的情况下，对pH 7.4的初始最佳制剂(含50mM磷酸钠、25mM精氨酸和5％蔗糖的100mg/mL ALXN1210配制缓冲液)进行了振荡应力试验。不可见颗粒的形成用于评估降解。将样品在2-8℃之间的温度下以200rpm振荡。测量是否存在不可见颗粒形成的时间点是0、1、3和5天。如表12所示的结果表明，向制剂中添加0.05％的PS80大大减少了当高浓度制剂经受短期应力(诸如200rpm振荡)时不可见颗粒的形成。

表12：通过添加PS80和过滤减少不可见颗粒的出现

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7.结论

总之，100mg/ml的ALXN1210的最佳皮下制剂是含有50mM磷酸钠、25mM精氨酸和5％蔗糖的缓冲液以及0.05％PS80(pH 7.4)。

实施例2：评价健康受试者中皮下施用的相比于静脉施用的单剂量ALXN1210的1期研究

进行1期研究以评价健康受试者中皮下(SC)施用的相比于静脉(IV)施用的抗体BNJ441(也称为ALXN1210)的安全性、耐受性、药代动力学(PK)/药效学(PD)功效以及免疫原性。

1.目的

该研究的主要目的是(1)正如通过身体检查结果、生命体征测量、免疫原性、实验室分析和评估不良事件(AE)所评估的那样，评价健康受试者中皮下施用的单剂量ALXN1210与静脉施用的单剂量ALXN1210相比的安全性和耐受性并且(2)测定皮下施用的ALXN1210的绝对生物利用率。

次要目的是正如通过游离C5和鸡红细胞(cRBC)溶血水平所评估的那样，评价皮下施用的ALXN1210相比于静脉施用的ALXN1210的PD效果。

2.研究设计

总体研究设计如图47所描绘的那样进行。这是设计为评价在42名健康受试者中皮下施用的400mg单剂量的ALXN1210与静脉施用的400mg单剂量的ALXN1210或皮下施用的安慰剂相比的安全性、耐受性、PK、PD和免疫原性的1期研究。筛选所有受试者的资格。除非导致不合格的情况是暂时性的，自限性的且易于治疗的，并且预计在给药时会得以解决，否则不重新筛选未能满足资格标准的受试者参加研究。

最初以盲法形式将六名受试者按2∶1的比率随机分配到组群1a中，以接受皮下400mg单剂量的ALXN1210或皮下单剂量的安慰剂。在开始向组群1b或2招募之前，对组群1a中的受试者评价了给药后前48小时的临床安全性数据。然后将三十六名受试者以2∶1的比率随机分配到组群1b(N＝24)或组群2(N＝12)中。在组群1b中，进一步以5∶1的比率和盲法形式随机分配24名受试者，分别接受皮下400mg单剂量的ALXN1210(20名受试者)或皮下单剂量的安慰剂(4名受试者)。组群2中的12名受试者以开放标签的形式静脉接受400mg单剂量的ALXN1210。

视情况，将招募的所有受试者纳入分析中。将组群1a和1b中的受试者组合进行分析。受试者参加了长达39周的研究，包括长达70天的筛查期，然后是在研究药物施用后进行安全性、PK、PD和免疫原性评估的200天随访期。

在该研究中针对主要和次要目的对42名受试者进行了评价：组群1a中的6名受试者(4名皮下接受ALXN1210，2名皮下接受安慰剂)；组群1b中的24名受试者(20名皮下接受ALXN1210，4名皮下接受安慰剂)，以及组群2中的12名受试者(ALXN1210 IV)。

3.剂量基本原理

通过在腹部区域注射4x1mL，皮下施用400mg单剂量(相当于4mL)。预计施用400mg单剂量的ALXN1210 SC具有可接受的安全性。预期如该方案所述施用400mg单剂量的ALXN1210 SC和安慰剂SC会提供可以从中产生多剂量模拟的数据，以便设计在患者中达到治疗血清浓度(＞50μg/mL)所需的给药方案。

基于来自组群1a中6名受试者的给药后前48小时的临床安全性数据的审查，将36名受试者平行随机分组到组群1b和组群2。如表13所述，进行向组群1b和组群2的招募。

分组毒性规则如下。毒性是指临床上显著的药物相关性不良反应。“群组进展”是指符合剂量进展规则和最低数据要求的连续剂量/给药方案的进展。“暂停”是指不再按有关的剂量水平/给药方案施用IMP，并且进一步的组群进展暂停。

表13：毒性规则

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缩写：CTCAE＝不良事件常用术语标准；SAE＝严重不良事件；SOC＝系统器官分类。

4.评估时间表

表14-15提供了所用研究程序的时间安排。

表14：评估时间表：筛查至第1次就诊

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1研究操作手册中描述了容许的研究评估窗口。

2输注结束(EOI)是在输注开始(SOI)后大约15分钟。

3完成第5天所有评估后，受试者从临床研究单位离开。向受试者提供了“研究参与者ID卡”，其中具有医疗保健提供者和参与者有关脑膜炎感染症状的信息。

4在进行任何研究特定的筛查程序之前先获得已签署并注明日期的知情同意书。

5对于没有足够的先前MCV4免疫或血清组B型接种记录的受试者，在第1天第一剂前至少56天进行MCV4免疫，并在第1天给药前至少56天施用针对血清组B型脑膜炎球菌感染的疫苗接种，在第1天给药前至少28天施用加强剂。

6筛查时进行补体活性确认(通过合适的测定法诸如补体替代途径(CAP)ELISA/C5(溶血)抑制来确认)，以确认受试者没有补体缺乏。

7如果给药后的样品表明补体尚未正常化，则储存第-1天抽取的样品以供将来分析。

8对所有女性受试者进行血清妊娠试验，以确认女性受试者未妊娠。

9第1天，在给药前(SOI前15分钟内)，以及在输注结束时，输注结束后30分钟，输注开始后2小时，输注开始后4小时和输注开始后8小时对生命体征测量值进行评估。

10在第1天，在给药前以及输注结束后大约15分钟，获得三份12导联ECG。

11给药前到IV输注持续期间(群组2)以及给药前直至SC注射后3小时(群组1a和1b)，进行连续心脏记录。

12在开始输注/注射15分钟内和第1天其他预定时间的±15分钟内进行输注或注射部位评价。除非持续超过24小时，否则不将＜1cm的硬结或反应列为不良事件。使用视觉模拟量表(0-10)评估输注或注射部位的疼痛。给药前未进行疼痛评估。

13每次就诊时，研究人员或指定人员与受试者见面，讨论ALXN1210的潜在安全性风险，并解决就受试者而言的任何安全性问题。

14从知情同意书签署时开始收集不良事件(AE)和严重不良事件(SAE)。

15从第-1天夜间开始对受试者施用预防性抗生素治疗，口服青霉素V 500mg，每天两次(相当于1×106个单位)，直至通过CH50测定法确定补体活性正常化。

缩写：ADA＝抗药抗体；BMI＝体重指数；cRBC＝鸡红细胞；CRU＝临床研究单位；ECG＝心电图；EOI＝输注/注射结束；HIV＝人免疫缺陷病毒；ICF＝知情同意书；MCV4＝四价脑膜炎球菌联合疫苗；OP＝门诊；SOI＝输注/注射开始；TB＝肺结核

表15：评估时间表：第2次就诊至第14次就诊

1在第57天后采集其他样品。

2每次就诊时，研究人员或指定人员与受试者见面，讨论ALXN1210的潜在安全性风险，并解决就受试者而言的任何安全性问题。

3从知情同意书签署时开始收集不良事件。

4对受试者施用预防性抗生素治疗，口服青霉素V 500mg，每天两次(相当于1×10⁶个单位)，直至通过CH50测定法确定补体活性正常化。

缩写：ADA＝抗药抗体；cRBC＝鸡红细胞；CRU＝临床研究单位；ECG＝心电图；ICF＝知情同意书；OP＝门诊

5.受试者的选择和退出

受试者必须满足以下所有条件才符合研究资格：

1.给药时年龄为25至55岁(包括端值)的健康受试者。

2.体重指数(BMI)为18至29.9kg/m²(包括端值)，且体重为50至100kg(包括端值)。

3.在筛查时和第1天给药前，使用Fridericia公式(QTcF)校正男性的QT间隔≤450毫秒，女性≤470毫秒。

4.愿意并且能够给出书面知情同意书并遵守研究就诊时间表。

5.有记录的MCV4接种是在给药前至少56天且不超过3年。记录必须包括阳性抗体滴度，以在研究药物施用前确认免疫反应。

6.在第1天给药前至少56天接种血清组B型脑膜炎球菌疫苗，在第1天给药前至少28天施用加强剂，第一次和第二次注射间隔至少28天。

7.有生育能力的女性受试者，如果异性性行为活跃，则必须使用如下定义的高效或可接受的避孕法，从筛查开始并且持续到研究药物施用后至少6个月。在该研究中需要抗生素预防，这可能会损害激素避孕法的功效。因此，建议在激素预防持续期间，使用激素避孕法的受试者也使用屏障避孕法(例如，含杀精子剂的避孕套或隔膜)。男性受试者，如果异性性行为活跃并且具有有生育能力的女性配偶或伴侣或妊娠或正母乳喂养的配偶或伴侣，则必须同意在治疗期间以及研究药物施用后至少6个月使用屏障避孕法(男性避孕套)。即使输精管结扎手术成功的医学评估有记录，也需要采取屏障避孕法。有生育能力的男性受试者的女性配偶或伴侣必须使用如以上定义的高效避孕法，或如以下定义的可接受的避孕法，从筛查开始并且持续到研究药物施用后至少6个月。男性受试者在筛查和治疗期间以及研究药物施用后至少6个月不得捐赠精子。

满足以下任何排除标准的受试者没有资格参加该研究：

1.与2岁以下或65岁以上的人密切长期接触(定义为在同一屋檐下生活或为其提供个人护理)的受试者，或者免疫力低下或具有以下其中一项潜在医学状况的受试者：解剖或功能性无脾(包括镰状细胞疾病)；先天性补体、备解素、D因子或一抗缺乏；获得性补体缺乏(例如，接受依库珠单抗的受试者)；或人免疫缺陷病毒(HIV)。

2.是以下之一的受试者：暴露于脑膜炎球菌疾病较高风险环境中的专业人员；经常暴露于脑膜炎奈瑟菌(N meningitides)的研究、工业和临床实验室人员；处于新兵训练期的军事人员(军事人员在近距离居住时可能有更高的脑膜炎球菌感染风险)；日托中心的工作人员；住在学院或大学校园的人；以及计划在研究过程中到脑膜炎球菌性脑膜炎流行地区(例如印度、撒哈拉以南非洲，去沙特阿拉伯朝圣)旅行或在给药前6个月内已经旅行的那些人员。

3.任何奈瑟氏菌(Neisseria)感染史。

4.无法解释的复发性感染史，或需要在给药前90天内用全身性抗生素治疗的感染史。

5.HIV感染(通过HIV-1或HIV-2抗体滴度证明)。

6.急性或慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染。招募前所有受试者均需进行乙型肝炎表面抗原(HBsAg)试验。将不会招募HBsAg阳性的受试者。对于HBsAg阴性的受试者，需要以下试验算法：如果乙型肝炎核心抗体(HBcAb)为阴性，则该受试者符合招募条件。如果HBcAb为阳性，则测试乙型肝炎表面抗体(HBsAb)。如果HBcAb和HBsAb均为阳性，则该受试者符合招募条件。如果HBcAb为阳性而HBsAb为阴性，则不招募该受试者。

7.急性或慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染(通过抗体滴度证明)。

8.给药前14天内有活动性全身病毒或真菌感染。

9.

-TB试验呈阳性或不确定，表明可能感染了结核(TB)。

10.筛查就诊前8周内有潜伏性或活动性TB史或暴露于流行区。

11.正母乳喂养或异性性行为活跃且不愿实行避孕并且非绝经后的女性受试者。绝经后定义为无其他原因≥12个月连续闭经，并且在研究药物施用之前的6个月内，有记录的血清促卵泡激素水平≥40mIU/mL且雌二醇浓度≤110pmol/L。

12.筛查时或第-1天血清妊娠试验为阳性。

13.筛查时或第1天，血清肌酸酐高于试验实验室参考范围的正常值上限(ULN)。

14.筛查时，丙氨酸氨基转移酶(ALT)或天冬氨酸氨基转移酶(AST)＞试验实验室参考范围的ULN，或在第-1天＞1.5×试验实验室参考范围的ULN。

15.以下任何血液学结果：筛查时或第-1天，男性血红蛋白＜130g/L，女性血红蛋白＜115g/L，男性血细胞比容＜0.37L/L，女性血细胞比容＜0.33L/L，白细胞(WBC)计数＜3.0×10³/μL，绝对中性粒细胞计数＜2.0×10³/μL，以及血小板计数＜150或＞400×10³/μL。第-1天时全血计数(CBC)临床实验室结果被研究人员认为是临床相关且无法接受的。

16.筛查时通过CAP ELISA评价有补体缺乏或补体活性低于正常参考范围的历史。

17.恶性病史，除了已经治疗且无复发迹象的非黑素瘤皮肤癌或子宫颈原位癌以外。

18.在第1天开始给药前30天内参加了临床研究，或在第1天给药前30天内使用了任何实验性小分子疗法。

19.参加了一项以上的mAb临床研究，或在筛查之前的12个月内参加了一项mAb临床研究，在此期间受试者暴露于活性研究药物。仅参加一项mAb研究的受试者如果在筛查前超过12个月完成了该研究，则可以考虑招募。

20.先前暴露于ALXN1210。

21.给药前90天内进行了大手术或住院治疗。

22.对ALXN1210的赋形剂(例如，聚山梨醇酯80)有过敏史。

23.有记录的青霉素或头孢菌素过敏史。

24.对任何产品(食品、药品等)有严重过敏反应(过敏症或血管性水肿)的历史。

25.目前每天吸烟＞10支烟(可以由研究人员决定允许招募曾吸烟者)。

26.非法药物滥用史，在筛查就诊前1年内有严重酗酒史，或在筛查就诊前6个月内经常饮酒(每周超过14单位酒精[1单位＝150mL葡萄酒，360mL啤酒或45mL的40％酒精])。

27.筛查时或第-1天尿液药物毒理学筛查为阳性。

28.在研究药物施用前48小时内饮酒或第-1天时酒精呼气试验为阳性。

29.给药前7天内捐赠了血浆。给药前30天内捐赠或损失(不包括筛查时抽取的血量)超过50mL血液，或给药前56天内捐赠或损失血液超过499mL血液。

30.研究药物施用前90天内有连续局部、吸入或全身使用类固醇＞28天的历史，或任何吸入或局部免疫抑制疗法的历史。

31.在研究药物施用前14天内使用处方药(不包括口服避孕药)，除非经申办方事先批准。

32.在研究药物施用前14天内，定期使用非处方、柜台可以买到的药物，包括草药和补充剂。允许服用多种维生素剂，每天≤2g的对乙酰氨基酚，以及没有显著全身吸收的皮肤局部外用产品。

33.任何自身免疫性或风湿性疾病(例如全身性红斑狼疮、类风湿性关节炎)的临床诊断。

34.在研究过程中，在给药前或计划疫苗接种前28天，用减毒活疫苗进行免疫(研究方案计划的疫苗接种除外)。容许用灭活或重组流感疫苗进行免疫。

35.给药前14天内出现发烧(确认体温＞37.6℃)(例如，与有症状的病毒或细菌感染相关的发烧)。

36.具有研究人员认为可妨碍受试者全面参与研究或对方案的依从性，或者可给受试者带来任何其他风险或混淆对受试者或研究结果的评估的任何病史、情况或风险的受试者。

6.感染

为了减轻与末端补体抑制相关的感染风险，为本研究的受试者施用以下治疗：

1.在第1天ALXN1210给药之前至少56天进行MCV4疫苗接种(如果在过去3年内未接种过MCV4，或者如果受试者先前已经接种过，但没有足够记录来证实先前的疫苗接种)。

2.注射血清组B型脑膜炎球菌疫苗两次。第一次注射必须在第1天给药前至少56天施用，在第1天给药前至少28天施用加强剂，第一次和第二次注射间隔至少28天。

3.预防性抗生素治疗，口服青霉素V 500mg，每天两次(相当于1×10⁶个单位)，直至补体活性正常化(通过CH50测定法确定)。

在研究药物的第1天(剂量施用)之前，在第-1天夜间口服施用第一剂抗生素。对于研究的门诊部分，指示受试者在每个预定日期大约同时(每天两次)服用抗生素。使用合适的系统(诸如发送短信)每天监测受试者对抗生素预防方案的依从性。

以下观测结果支持在该项单剂量研究中施用抗生素预防：

1.青霉素是根除携带者中脑膜炎奈瑟菌(N meningitidis)的首选药物。

2.在2至4年期间，每月接受注射苄星青霉素G作为对复发性脑膜炎球菌病的预防的补体缺乏症患者与未接受预防的缺乏症个体相比，经历的奈瑟菌(Neisseria)感染发作次数明显更少(Figueroa JE等人，Clin.Microbiol.Rev.1991Jul；4(3)：359-95)。

3.在脑膜炎球菌菌株中很少遇到由质粒编码的β-内酰胺酶引起对青霉素的高水平抗性(Yazdankhah SP等人，J.Med.Microbiol.2004年9月；53(Pt9)：821-32)。

4.一些医师已经在用依库珠单抗治疗PNH和aHUS患者时提供了每天两次口服施用青霉素V 500mg的抗生素预防(Kelly RJ等人，Blood 2011年6月23日；117(25)：6786-92andLeeds Teaching Hospitals NHS Trust，Kings College Hospital NHS FoundationTrust.National Specialised Commissioning Team(NSCT)Service SpecificationParoxysmal Nocturnal Haemoglobinuria(PNH).2013)。

5.疫苗在免疫力低下患者中有效性的不确定性已促使几个国家(诸如法国)建议在PNH和aHUS患者中在依库珠单抗治疗持续期间进行连续的抗生素预防(Zuber J，Fakhouri F，Roumenina LT，Loirat C，Fremeaux-Bacchi V.Use of eculizumab foratypical haemolytic uraemic syndrome and C3 glomerulopathies.Nat.Rev.Nephrol.2012Nov；8(11)：643-57)。

7.先前和伴随的药物和程序

将先前药物(在受试者签署ICF前14天内直到研究药物施用为止，受试者服用的任何药物或物质)和伴随药物(在研究药物施用之后直到最后一次研究就诊完成为止，受试者服用的任何药物或物质)记录在受试者的电子病例报告表(eCRF)中。将先前程序(在受试者签署知情同意书前14天内直到研究药物施用为止，进行的任何治疗性干预[例如，外科手术/活检、物理疗法])和伴随程序(在研究药物施用之后直到最后一次研究就诊完成为止，进行的任何治疗性干预[例如，外科手术/活检、物理疗法])记录在受试者的eCRF上。

伴随疗法是指从筛查受试者进行研究开始到最后一次研究就诊完成为止所施用的任何药物或物质。研究持续期间，除非受试者获得研究人员的许可，否则应指示受试者不要开始服用任何新药物，包括非处方药和草药制剂。在研究期间允许偶尔使用非处方退热剂或镇痛药(例如，对乙酰氨基酚)。

伴随程序是从受试者签署知情同意书开始到最后一次研究就诊为止进行的任何治疗性干预(例如，手术/活检、物理疗法)或非研究诊断评估(例如，血气测量、细菌培养)。除非有医学上的说明，否则不允许有伴随程序。

8.随机分组和盲法

为满足纳入和排除标准的合格受试者分配唯一编号以便招募和随机分组。

这是一项部分盲法研究，使得：

·组群1a。剂量是双盲的(400mg单剂量的ALXN1210 SC或安慰剂SC)。组群1a中的受试者以2：1的比率随机分配(4名接受ALXN1210 SC，2名接受安慰剂SC；N＝6)。

·组群1b。剂量是双盲的(400mg单剂量的ALXN1210 SC或安慰剂SC)。组群1b中的受试者以5∶1的比率随机分配(20名接受ALXN1210 SC，4名接受安慰剂SC；N＝24)。

·组群2。给药(400mg单剂量的ALXN1210 IV)是开放标签的(N＝12)。

在组群2给药期间，受试者和现场医疗/护理人员都知道所施用的药物/剂量。

在组群1a和1b给药期间，受试者和研究中心的现场医疗/护理人员对研究药物分配不知情。制备SC注射剂的药房人员并非不知情，研究药物施用人员也并非不知情，而参与安全性评价的所有其他研究中心人员仍然对研究药物分配不知情。申办方人员根据需要(例如，为了监测适当制备SC注射剂，确定SAE的可报告性)而并非不知情，并且禁止与研究中心人员共享有关研究药物分配的任何信息。

9.研究药物说明

表16中描述了研究产品。

表16：研究产品

¹每小瓶ALXN1210 IV药物产品均包括标称过量填充物，以确保可以吸取出15mL(150mg的ALXN1210)进行施用。

²每小瓶ALXN1210 SC药物产品均包括标称过量填充物，以确保可以吸取出1mL(100mg的ALXN1210)进行施用。

缩写：BP＝《英国药典》；IV＝静脉；NA＝不适用；Ph Eur＝《欧洲药典》；SC＝皮下

10.ALXN1210和安慰剂

每小瓶ALXN1210SC含有100mg在50mM磷酸钠、25mM精氨酸、5％蔗糖和0.05％聚山梨醇酯80中的ALXN1210(100mg/mL)。将ALXN1210 SC配制为pH 7.4，并且作为在2mL一次性小瓶中供给的完全配制的无菌、无防腐剂的100mg/mL ALXN1210水溶液提供。每小瓶ALXN1210 SC均包括标称过量填充物，以确保可以吸取出1mL(100mg的ALXN1210)进行施用。

每个剂量的安慰剂SC均含0.9％氯化钠注射液(Ph Eur或BP)，其体积与群组1a和1b规定的相同。

每小瓶的ALXN1210 IV含有150mg在10mM磷酸钠、150mM氯化钠、0.02％聚山梨醇酯80和注射用水中的ALXN1210。将ALXN1210 IV配制为pH 7.0，并且作为在20mL一次性小瓶中供给的完全配制的无菌、无防腐剂的10mg/mL ALXN1210水溶液提供。将ALXN1210 IV稀释于0.9％氯化钠注射液(Ph Eur或BP)中，并通过IV输注以333mL/小时的最大速率施用，出于安全性或技术原因的中断除外。

将ALXN1210小瓶储存在2℃至8℃(36°F至46°F)的冷藏条件下，并避光保存。未冷冻或振荡ALXN1210小瓶。

在注射器中以盲法制备ALXN1210 SC和安慰剂SC用于SC施用。没有稀释ALXN1210SC或安慰剂SC。将ALXN1210 SC和安慰剂SC直接置于注射器中。

将ALXN1210 IV设计成通过稀释于市售盐水(0.9％氯化钠注射液；Ph Eur或BP)中，以333mL/小时的最大速率进行IV输注，出于安全性或技术原因的中断除外。

施用(给药溶液)之前，用0.9％氯化钠注射液(Ph Eur或BP)稀释ALXN1210 IV。给药溶液的使用保质期在室温15℃至25℃(59°F至77°F)下为4小时。给药溶液的有效日期和时间是从打破第一小瓶开始计算的。在有效日期和时间内施用该剂量。吸取的每1-mL注射器的ALXN1210 SC或安慰剂SC(每名受试者4个注射器)一旦从小瓶中吸取到注射器中就在1小时内施用。

11.施用

所有剂量的ALXN1210 SC或安慰剂SC均在腹部区域通过100-mg SC注射四次(各1mL)(表17)进行施用。四次1mL注射全部在15分钟内施用，从一名受试者注射结束到下一名受试者注射开始应至少间隔15分钟。

表17：ALXN1210 SC和安慰剂SC制剂的给药参考表

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所有剂量的ALXN1210 IV均使用带有串联过滤器的IV套件以333mL/小时的最高速率通过IV输注进行施用，出于安全性或技术原因的中断除外。从一名受试者输注结束到下一名受试者输注开始应至少间隔15分钟。

表18：ALXN1210 IV制剂的给药参考表

¹输注持续时间为近似值。

12.研究药物施用期间的潜在不良事件管理

经IV输注单克隆抗体治疗的一些受试者经历了输注相关的并发反应，其体征或症状可分类为急性过敏反应/超敏反应或细胞因子释放综合征。

在研究药物施用期间和之后，密切监测受试者过敏症和其他超敏反应的任何症状，包括循环和/或呼吸变化或停止，或风疹、关节痛、肌痛或相关反应的其他体征。可立即使用适当治疗。可发生输注相关的不良事件，并且根据其类型和严重程度，可能需要中断输注。告知受试者超敏反应的早期症状和体征，包括荨麻疹，面部、眼睑、唇或舌肿胀或呼吸困难。使用急性输注反应算法管理输注相关的反应。在这项研究中，进行定期评估以监测输注反应和输注部位反应。为了确保可以及时处理反应，从一名受试者输注/注射结束到下一名受试者输注/注射开始至少间隔15分钟。每天不超过6名受试者给药。治疗任何反应并在剂量持续/递增和毒性规则中予以考虑。如果发生过敏反应，则遵循英国复苏协会(UKResuscitation Council)现行的“英国过敏反应治疗指南(UK Treatment Guideline forAnaphylactic Reactions)”。

13.药代动力学(PK)和药效动力学(PD)评估

在研究药物施用后，在以下时间点收集用于测定血清ALXN1210浓度以及分析总的和游离C5浓度、cRBC溶血和可能的其他C5活化量度的血清样品，并记录实际血清取样日期和时间并用于PK和PD计算：

·从以下取样时间点开始测定ALXN1210的血清浓度：给药前(输注/注射开始[SOI]前15分钟内)；第1天输注/注射结束(EOI)时，EOI后30分钟，以及SOI之后的以下时间点：2小时、4小时和8小时；第2天(24小时)；第3天(48小时)；第5天(96小时)；第8天(168小时)；第15天(336小时)；第22天(504小时)；第29天(672小时)；第36天(840小时)；第43天(1008小时)；第50天(1176小时)；第57天(1344小时)；第71天(1680小时)；第90天(2136小时)；第120天(2856小时)；第150天(3576小时)；和第200天(4776小时)。

所有提供足够数目的血清PK样品以表征浓度-时间曲线的受试者都包括在PK分析群体中。所有提供PD样品的受试者都包括在PD分析群体中。

14.免疫原性评估

在以下时间点收集血清样品：给药前(SOI前15分钟内)，以及第15天(336小时)、第29天(672小时)、第57天(1344小时)、第90天(2136小时)、第120天(2856小时)、第150天(3576小时)和第200天(4776小时)，并分析针对ALXN1210的ADA。视情况基于ALXN1210的PK/PD和安全性数据，进行了抗体反应的进一步表征。

所有提供ADA的给药前和给药后样品的受试者都包括在免疫原性分析群体中。

免疫原性测定评价了针对ALXN1210的抗药抗体(ADA)。实验室手册中提供了有关收集、加工、储存和运输用于免疫原性分析的血清样品的程序的详细说明。

15.安全性评估

安全评估包括TB试验、身体检查结果、生命体征测量、免疫原性(ADA)试验、实验室评价、ECG、输液部位和注射部位评价(例如，出血、瘀伤、红斑、肿胀、硬结和疼痛)以及不良事件监测。根据2010年6月14日公开的美国国家癌症研究所不良事件常用术语标准v4.03(CTCAE v4.03)对不良事件进行分级。实验室评价包括血液学、化学和凝血小组；分类的CBC；尿分析；和女性受试者的血清妊娠试验。

进行临床和实验室评估以评估ALXN1210的安全性。在评估时间表中描述了评估的时间安排。跟踪异常结果，直到消退或稳定。

如评估表中所述，进行对人口统计参数的审查，包括年龄、性别、人种和种族。获得完整的病史。

受试者以仰卧位或半卧位休息至少5分钟后进行生命体征测量，包括温度(℃；口腔温度)、呼吸速率、仰卧血压和脉搏。在评估时间表中描述了生命体征测量的时间安排。由研究人员决定，重复超出范围的血压或脉搏测量。将任何确认的，临床上显著的生命体征测量值均记录为不良事件。

如评估时间表中所述，记录体重、身高和BMI。每次检查都包括以下评估：总体外观；皮肤；头部、耳朵、眼睛、鼻子和喉咙；颈部；淋巴结；胸腔；心脏；腹腔；四肢；中枢神经系统；和肌肉骨骼系统。

受试者休息至少5分钟后，获得三份12导联ECG。在评估时间表中描述了ECG的时间安排。另外，在组群2a中从给药前到IV输注结束，以及在组群1a和1b中从给药前到SC注射结束后3小时，在每个剂量施用时都进行连续心脏记录。测量心率、PR、QRS、RR和QT，并计算校正的QTcF间隔。

如评估时间表中所述，收集用于血液学、临床化学、凝血和病毒血清学分析的血液样品，以及用于尿分析、尿液化学分析以及药物和酒精筛查的尿液样品。

分析血液样品的以下血液学参数：血小板、红细胞(RBC)计数和WBC计数；自动分类(中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)；血红蛋白；血细胞比容；和RBC指数(平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白和平均红细胞血红蛋白浓度)。在评估时间表中描述了血液学评估的时间安排。

分析血液样品的以下临床化学参数：血液尿素氮；肌酸酐；葡萄糖；钠；磷；钾；氯化物；总二氧化碳；总钙；镁；AST；ALT；γ-谷氨酰转移酶；碱性磷酸酶；乳酸脱氢酶；总胆红素、直接和间接胆红素；尿酸；白蛋白；和总蛋白。考虑到间接胆红素是根据总胆红素值和直接胆红素值计算的，如果直接胆红素低于定量限值，则无法获得间接胆红素结果。

在对绝经后女性受试者进行筛查时测量血清促卵泡激素水平和雌二醇浓度，以确认其绝经后状态。

在评估时间表中描述了化学评估的时间安排。

分析血液样品中的凝血酶原时间、国际标准化比率和部分凝血活酶时间。在评估时间表中描述了凝血评估的时间安排。

尿分析包括比重、pH、葡萄糖、蛋白质、血液和酮。仅对异常结果进行了尿液样品的显微镜检查。还将尿液样品送往病理实验室以测量蛋白质和肌酸酐，以便计算尿液蛋白质：肌酸酐的比率。在评估时间表中描述了尿分析和尿液化学评估的时间安排。

分析筛查时收集的血液样品的HIV-1、HIV-2、HBsAg和HCV抗体滴度。招募前所有受试者均需进行乙型肝炎表面抗原试验。不招募HBsAg阳性的受试者。对于HBsAg阴性的受试者，需要以下试验算法：

1.如果HBcAb为阴性，则该受试者符合招募条件。

2.如果HBcAb为阳性，则测试乙型肝炎表面抗体(HBsAb)。

a.如果HBcAb和HBsAb均为阳性，则该受试者符合招募条件。

b.如果HBcAb为阳性而HBsAb为阴性，则不招募该受试者。

分析用于药物筛查的尿液样品中的以下化合物：安非他明(amphetamines)、巴比妥酸盐(barbiturate)、苯二氮卓类(benzodiazepine)、可卡因(cocaine)、美沙酮(methadone)、阿片制剂(opiate)、苯环利定(phencyclidine)、去氧麻黄碱(methamphetamine)、3，4-亚甲二氧基-去氧麻黄碱和四氢大麻酚(大麻素)。进行了酒精呼气试验。如果在给药前为阳性，则不进行给药。在评估时间表中描述了尿液药物和酒精呼气试验的时间安排。

在所有女性受试者中进行了妊娠试验(β人绒毛膜促性腺激素)。在评估时间表中描述了妊娠试验的时间安排。

如评估时间表中所述，收集用于QuantiFERON-TB试验的血清样品。

在筛查时进行了测定补体活性，诸如CAP ELISA/C5(溶血)抑制作用的合适测定，以确认受试者没有补体缺乏症。排除发现补体缺乏的受试者不参加研究。

在基线和随访期间收集血清样品，以使用体外LIA测量CH50活性以确认补体活性的正常化。如果从随访期间收集的受试者的第一份CH50样品中获得了正常的CH50结果，则可以停止抗生素预防，并且不需要第二份预定的CH50样品。如果第一和第二份CH50样品不正常，则可以分析基线样品，并获取其他CH50样品，直到补体活性恢复。

在筛查时获得针对血清组A、C、W135和Y型脑膜炎球菌的血清杀菌抗体(SBA)滴度。滴度测量值用于排除没有免疫反应的受试者不进行给药。

进行皮下注射或IV输注部位评价。使用视觉模拟量表(0-10)评估SC注射或IV输注部位的疼痛。给药前未进行疼痛评估。除非持续超过24小时，否则不将尺寸1cm的硬结或反应列为不良事件。

分析血清样品中的抗药抗体(ADA)。评估时间表中描述了ADA血清样品收集的时间安排。

16.不良事件管理

研究人员负责检测、评估、记录和报告所有不良事件(AE)。从签署知情同意书开始直到研究完成，记录所有AE。对于认为是因果相关的SAE没有时间限制。

不论因果关系如何，所有观测到的或自愿提供的AE均报告并记录在数据捕获系统中。收集并记录由受试者和/或父母或法定监护人报告的不良事件，和/或根据研究人员提出的开放性问题鉴定的不良事件，或通过观测、身体检查或其他研究程序揭示的不良事件。

AE定义为临床研究过程中出现的与使用医药产品或程序暂时相关的任何不利和意外体征(例如，包括异常的实验室结果)、症状或疾病，而无论是否认为与医药产品或程序有关。

将慢性或间歇性既存病状的恶化，包括该病状的频率和/或强度增加全部视为AE。

将异常的试验结果视为AE。如果鉴定出异常的实验室值，则强烈建议研究人员报告诊断、体征或症状，而不是单独的异常试验值。如果满足以下任何条件，则将异常的试验结果记录为AE：与体征或症状相关；需要附加诊断试验(重复试验不视为附加试验)；需要医疗或手术干预；导致研究给药变化超出方案限定的给药范围或导致研究中断；需要大量附加治疗；不满足以上任何条件。

该定义还包括以下原因引起的体征或症状：药物过量、药物戒断、药物误用、药物相互作用、外渗、妊娠期间暴露、通过母乳喂养暴露、药物错投和职业暴露

AE不一定包括以下：

·医疗或外科程序(例如，外科手术、内窥镜检查、拔牙、输液)；导致该程序的条件是AE(例如，腹腔镜胆囊切除术是坏死性胆囊SAE的程序或治疗)

·在筛查评价时存在的或在筛查评价之前检测到的并未恶化的既存疾病或病状

·尚未发生不幸医疗事故的情形(例如，如果在研究开始之前已计划，则住院治疗以择期手术；社会和/或便利入院)

满足以下所列任何1个标准的任何AE都应记录为SAE。

将SAE描述为在任何剂量下产生以下结果的任何不幸医疗事故：

1.导致死亡

2.危及生命a

3.需要住院治疗或延长住院治疗^b。住院治疗不一定包括以下：

·康复/临终关怀/护理设施

·不到24小时的急诊室就诊

·择期或预先计划的入院/手术/当日手术

·方案指定的入院

·因与新AE或既存AE恶化不相关的既存病状入院

4.导致持续性或显著性残疾/能力丧失

5.先天性异常/出生缺陷

6.重要医疗事件^c

^a在“严重”的定义中术语“危及生命”是指在事件发生时受试者有死亡风险的事件；它不是指假设如果更为严重则可能导致死亡的事件。

^b住院治疗要求住院患者入院或延长现有住院治疗。与住院治疗或延长住院治疗相关的AE被视为SAE。

^c重要医疗事件：在决定加速报告在其他情形下是否适当时，应行使医学和科学判断，所述其他情形诸如可能不会立即危及生命或导致死亡或住院治疗，但可能危害受试者或可能需要干预以预防以上定义中列出的其他后果中的1种的重要医疗事件。这些通常也应该视为是严重的。此类事件的实例包括在急诊室或在家中对过敏性支气管痉挛的强化治疗；未导致住院治疗的血质不调或惊厥；或药物依赖性的发展或药物滥用。

严重程度和严重性应加以区分。严重程度描述AE的强度，而术语严重性是指已经满足如上所述的SAE标准的AE。

根据来自2010年6月14日公开的CTCAE v4.03的以下标准对所有AE进行分级。

·1级：轻度(意识到体征或症状，但容易忍受)

·2级：中度(不适感足以引起对正常活动的干扰)

·3级：重度(丧失能力，无法进行正常活动)

·4级：危及生命

·5级：致命

记录AE严重程度的变化，以便评估待评价的每个强度水平下的AE持续时间。如果间歇性事件的严重程度变化，则表征为间歇性的不良事件需要记录每次发作的开始和持续时间。

对所有AE(非严重性和严重性)均提供了研究人员因果关系评估。将该评估记录在数据捕获系统中，并视情况记录在任何其他表格上。因果关系评估的定义如下：

·不相关(无关)：这种关系表明研究产品与所报告的事件之间没有关联。

·不太可能相关：这种关系表明临床表现与除研究产品以外的原因高度一致，但不能绝对确定地作出归因，并且不能完全肯定地排除研究产品与AE之间的关系。

·可能相关：这种关系表明用研究产品进行治疗可能已经引起或促成AE；即，该事件遵循从研究药物施用之时起的合理时间顺序，和/或遵循对研究产品已知的反应模式，但也可能是由其他因素产生的。

·很可能相关：这种关系表明事件与研究产品施用存在合理的时间顺序，以及事件与研究产品可能关联。这将基于研究产品的已知药理作用，已知或先前报告的对研究产品或药物类别的不良反应，或基于研究人员的临床经验的判断。

·明确相关：与研究产品的时间关系。其他情况(并发疾患、并发药物反应或疾病状态的进展/表现)似乎不能解释这一事件；该事件与已知药物特性；中断时的改善；再激发时的重新出现相对应。

如果受试者经历有死亡后果的SAE，则进行以下程序：导致死亡的SAE具有记录为死亡/致命的后果，结束日期为死亡日期。如果受试者在死亡时有持续存在的其他AE/SAE，则将这些事件记录为持续存在，没有结束日期。除非尸检报告或研究人员另有说明，否则仅有1个事件具有死亡/致命后果。

17.统计

在锁定数据库之前，制定并最后确定正式统计分析计划(SAP)。

安全性群体由接受至少1个剂量的研究药物的所有受试者组成。该群体中的受试者用于安全性分析。

PK群体由具有足够血清浓度数据以使得能够计算PK参数的所有受试者组成。PK群体用于PK汇总。

PD群体由具有足够的总C5和游离C5浓度数据以及cRBC溶血数据的所有受试者组成。PD群体用于PD汇总。

免疫原性分析群体由收集了给药前和给药后的ADA样品的所有受试者组成。

36名受试者的总可评价样本量(来自组群1的24名ALXN1210 SC受试者和来自组群2的12名ALXN1210 IV受试者)提供了＞80％的功效，以推断假设绝对生物利用率为0.6且变异系数为0.35，ALXN1210 SC与IV的生物利用率比的90％置信区间下限＞0.4。另外，6名受试者接受安慰剂SC，组群1中有2名而组群1b中有4名。以2：1的比率对组群1a进行随机分组，并且以5∶1的比率对组群1b进行随机分组，以接受ALXN1210 SC或安慰剂SC。这使受试者总计划数达到N＝42。

一般而言，连续变量的描述性统计信息包括非缺失值的数目、算术平均值、标准偏差、中位数、最小值和最大值。PK参数的描述性统计信息包括观测次数、算术平均值、标准偏差、算术变异系数(％CV)、中位数、最小值、最大值、几何平均值和几何％CV。按组群和时间点，使用百分比和频率计数汇总分类变量。

所有受试者均包括在受试者处理的概要中，该概要按组群汇总了接受筛查和治疗的完成或中断研究的受试者的频率和百分比，以及中断原因。按每个组群和总体汇总了所有受试者的人口统计状况和基线特征。

对安全性群体进行安全性分析，并按每个组群进行报告。安全性分析包括对所有AE、ECG、临床实验室数据、身体检查和生命体征测量的分析，并使用描述性统计数据呈现。没有对该研究的安全性参数计划推断性统计分析。按每个组群和整体的系统器官分类和优先项，按与研究药物的关系，汇总治疗中出现的AE和SAE的发生率。还按组群和整体，按严重程度汇总了治疗中出现的AE。列出了严重AE和导致退出研究的AE。具有一个类别(例如，总体、系统器官分类、优先项)中的多个AE的受试者在该类别中计数一次。对于严重程度表，对受试者在一个类别中最严重的事件计数。

按每个组群汇总生命体征测量和实验室评估(例如，化学、分类的CBC和尿分析)相对于基线的变化。实验室参数值根据CTCAE分级。针对这些实验室参数，按组群生成转变表。这些表汇总了具有相对于参考范围的每个基线等级的受试者数目，以及向研究期间给药后评估的最差最高等级的变化。

在指定时间点测量ECG参数，包括心率、PR、RR、QRS、QT和校正的QTcF间隔。计算收集的各时间点的三份ECG读数的平均值，并按每个组群评估相对于治疗前基线值的变化。

进行离群值分析，按组群汇总了每次就诊满足以下任何离群值标准的受试者的频率和百分比：

·QT，QTcF间隔＞450毫秒

·QT，QTcF间隔＞480毫秒

·QT，QTcF间隔＞500毫秒

·QT，QTcF间隔相对于基线增加＞30毫秒

·QT，QTcF间隔相对于基线增加＞60毫秒

所有伴随药物均使用《世界卫生组织药物词典》(WHO Drug Dictionary)进行编码，并汇总了伴随药物的频率和百分比。

使用Phoenix WinNonlin 6.3或更高版本，通过非房室分析方法，将ALXN1210治疗的受试者的个体血清浓度数据(含实际取样日期和时间)用于得出PK参数。

得出以下PK参数：最大观测血清浓度(C_max)，达到最大观测血清浓度的时间(T_max)，从零时到最后可量化浓度的血清浓度-时间曲线下面积(AUC_t)从零时到时间无穷大的曲线下面积(AUC_∞)，终末消除速率常数(λ_z)，终末消除半衰期(T_1/2)，总清除率(CL或CL/F)和分布体积(V_d或V_d/F)。

针对C_max、AUC_t和AUC_∞计算几何平均值比率(ALXN1210 SC/ALXN1210 IV)及其90％CI，并将其制成表格。使用受试者间的方差计算CI。呈现了随时间推移的浓度评估。

通过评估血清总C5和游离C5浓度、cRBC溶血和C5活化随时间变化的其他量度来评价ALXN1210 SC和IV的PD效果。如评估时间表中所述，对收集的样品进行分析。

按组群和受试者列表以表格形式汇总通过ADA测量的免疫原性。

实施例3：评价健康受试者中皮下施用的相比于静脉施用的单剂量ALXN1210的1期研究的结果

以下是基本上如实施例2所述进行的单剂量1期研究的数据汇总。具体地，该研究设计为评价在42名健康受试者中皮下施用的400-mg单剂量的ALXN1210与静脉施用的400-mg单剂量的ALXN1210或皮下施用的安慰剂相比的安全性、耐受性、药代动力学(PK)、药效学(PD)和免疫原性。

1.受试者的处理

在筛选的161名受试者中，将42名(26.09％)受试者随机分配接受研究药物：安慰剂SC(n＝6)，ALXN1210 SC(n＝24)和ALXN1210 IV(n＝12)(图48)。随机分组的受试者均未提前中断研究。

2.方案偏差

对于36名受试者，报告了至少一例方案偏差(安慰剂SC：n＝6；ALXN1210 SC：n＝20；和ALXN1210 IV：n＝10)。方案偏差的类别包括时间窗口偏差、受试者依从性、未进行评估、排除标准和剂量施用。

在ALXN1210 IV组的两名受试者中，将方案偏差评估为重大偏差。在一名受试者中，未进行第29天的ADA、PK、PD和实验室评估，因为该受试者未参加随访就诊。在另一受试者中，未收集第71天的PK和PD样品，因为该受试者未参加随访就诊。虽然由于研究设计的性质(PK相关的主要终点)而将这些偏差评估为重大偏差，但不认为这些偏差对结果的解释有影响。认为其他方案偏差均不会影响结果的解释或受试者的安全性。在研究期间，在所有受试者中血清妊娠试验结果均为阴性。

3.药代动力学、药效学和免疫原性评价

所有42位随机分组的受试者均接受了研究药物，并且纳入安全性组中(表19)。根据定义，所有这些受试者也都纳入PD组和免疫原性分析组中。安全性组中接受ALXN1210 SC或ALXN1210 IV的36名受试者具有足够的血清浓度数据以能够计算PK参数，并且纳入PK组中(表19)。

表19：分析群体(所有随机分组的受试者)

注：百分比(％)等于n/N×100。

缩写：IV＝静脉；N＝受试者总数；n＝受试者数；SC＝皮下。

4.人口统计状况和其他基线特征

在所有治疗组中，大多数受试者为男性(66.7％)和白人(69.0％)，平均(±SD)年龄为35.0(±7.65)岁。总群体的平均(±SD)BMI为24.035(±3.1582)。一般而言，各治疗组之间人口统计状况均衡(表20)。

表20：人口统计数据-按治疗的描述性统计(安全性组)

注：百分比(％)等于n/N×100。

缩写：BMI＝体重指数；IV＝静脉；max＝最大值；min＝最小值；N＝受试者总数；n＝受试者数；SC＝皮下；SD＝标准偏差。

在ALXN1210 SC组中，有5(20.8％)名受试者报告使用了先前药物。在安慰剂SC组和ALXN1210 IV组中未报告使用先前药物。安慰剂SC组、ALXN1210 SC组和ALXN1210 IV组分别有3名(50.0％)、13名(54.2％)和8名(66.7％)受试者报告使用了伴随药物。最常用的伴随药物是用于治疗AE的酰苯胺类，诸如对乙酰氨基酚/扑热息痛(15名受试者)，其次是孕激素和雌激素，这是用于避孕的固定组合(7名受试者)。预计报告的伴随药物都不会影响研究结果。

没有受试者接受任何非药物疗法和程序。所有剂量的ALXN1210 SC或安慰剂SC均在腹部区域通过100-mg SC注射四次(各1mL)进行施用。所有剂量的ALXN1210 IV均使用带有串联过滤器的IV套件通过IV输注进行施用。所有受试者均接受其分配的剂量。

5.药代动力学、药效学和免疫原性结果及个体受试者数据制表

对PK组进行PK分析，PK组由来自安全性组的所有受试者组成，这些受试者接受了ALXN1210 SC或ALXN1210 IV，并且具有足够的血清浓度数据以能够计算PK参数。

图49-50说明了SCX和IV施用ALXN1210后健康受试者的平均(±SD)血清浓度-时间曲线(线性和对数线性标度)。分别使用线性标度(图49)和对数线性标度(图50)呈现了各个ALXN1210血清浓度与标称时间的关系图。

表21中汇总了SC和IV施用后ALXN1210的药代动力学参数。共有24名受试者接受了ALXN1210 SC施用；SC注射后中位(范围)t_max为169.8(96.0至508.1)小时。分别对于ALXN1210 SC和IV施用而言，几何平均值(CV％)t_1/2在31.3(13.6)天和29.9(15.4)天相似。IV和SC途径之间ALXN1210的消除相似(图49)。

表21：ALXN1210药代动力学参数汇总(药代动力学组)

^a呈现了t_max的中位数。

注：对于ALXN1210 SC治疗，CL和V_d栏分别表示CL/F和V_d/F。

缩写：AUC_t＝从0时到最后可量化浓度的血清浓度-时间曲线下面积；AUC_∞＝从0时外推至时间无穷大的血清浓度-时间曲线下面积；CL或CL/F＝药物从血清中的全身清除率；C_max＝最大观测血清浓度；CV＝变异系数；h＝小时；IV＝静脉；L＝升；max＝最大值；min＝最小值；n＝受试者数；NA＝不适用；SC＝皮下；t_1/2＝终末消除半衰期；t_max＝达到最大观测血清浓度的时间；V_d或V_d/F＝分布体积；λ_z＝终末消除速率常数。

表22汇总了ALXN1210 SC的绝对生物利用率。在数据对数转换后，通过使用混合模型进行统计分析，将ALXN1210 SC的PK参数(C_max、AUCt和AUC_∞)与参考(ALXN1210 IV)进行比较。ALXN1210(SC/IV)的C_max的GMR为26.1％(95％CI：21.3，32.0)。基于AUC∞估计值的GMR(SC/IV)测定的ALXN1210 SC的绝对生物利用率为60.4％(95％CI：49.7，73.3)。

表22：ALXN1210绝对生物利用率的统计分析

皮下(药代动力学组)

注：比率定义为ALXN1210 SC组的几何平均值除以ALXN1210 IV组的几何平均值×100。使用具有受试者固定和随机效应的线性混合模型。

缩写：AUC_t＝从0时到最后可量化浓度的血清浓度-时间曲线下面积；AUC_∞＝从0时外推至时间无穷大的血清浓度-时间曲线下面积；CI＝置信区间；C_max＝最大观测血清浓度；GMR＝几何平均值比率；h＝小时；IV＝静脉；n＝受试者数；SC＝皮下。

对PD组进行PD分析，该PD组由来自安全性组的所有受试者组成，这些受试者具有足够的游离C5和总C5浓度数据以及cRBC溶血数据。

图51描绘了施用安慰剂SC、ALXN1210 SC和ALXN1210 IV的受试者的游离C5血清浓度随时间推移相对于基线的平均(±SD)百分比变化。SC施用安慰剂后，平均游离C5保持相对恒定。施用单剂量的ALXN1210 IV 400mg引起对游离C5(≥99％)的立即且几乎完全的抑制，直到IV施用后第8天。施用单剂量的ALXN1210SC 400mg也引起游离C5减少，但未达到在IV施用后所见到的相同程度或发作不那么迅速。ALXN1210SC施用后，在给药后1周出现游离C5的最大平均抑制(77％)。

平均游离C5浓度降低的持续时间和程度取决于暴露。图52描绘了施用安慰剂SC、ALXN1210 SC和ALXN1210 IV的受试者的总C5血清浓度随时间推移相对于基线的平均(±SD)百分比变化。SC施用安慰剂后，平均总C5浓度保持相对恒定。然而，施用单剂量的ALXN1210400mg导致分别在SC和IV给药后，总C5相对于基线最大平均增加82％和107％。

图53描绘了施用安慰剂SC、ALXN1210 SC和ALXN1210 IV的受试者的鸡红细胞(cRBC)溶血随时间推移相对于基线的平均(±SD)百分比变化。SC施用安慰剂后，平均cRBC溶血保持相对恒定。施用单剂量的ALXN1210IV 400mg在平均cRBC溶血方面引起立即抑制，最大平均降低率为88％。施用单剂量的ALXN1210 SC 400mg也引起cRBC溶血的抑制，但与IV施用相比未达到相同程度或发作不那么迅速。在ALXN1210 SC给药后大约1周，出现29％的cRBC溶血的最大平均抑制。cRBC抑制的持续时间和程度取决于暴露。

对免疫原性分析组进行免疫原性分析，该免疫原性分析组由来自安全性组中收集了给药前和给药后ADA样品的所有受试者组成。在给药前和给药后第15、29、57、90、120、150和200天进行抗药抗体试验。

ALXN1210 SC治疗组中的一名受试者(受试者0344-185)在基线(给药前)时具有确认为ADA阳性的样品并且所有给药后样品也为ADA阳性。该受试者的所有给药后抗体滴度均低于给药前滴度值。在该受试者中，不认为抗药抗体阳性反应是临床上显著或与ALXN1210有关的。因此，该受试者未纳入下面提供的免疫原性汇总中。

共有4名受试者(ALXN1210 SC组：3/23[13％]的受试者和ALXN1210 IV组：1/12[8.3％]的受试者)发展出治疗中出现的ADA。在ALXN1210 SC组中：第一名受试者在第57、90、120、150和200天时为ADA阳性。所有ADA阳性值的依库珠单抗交叉反应均为阳性。第二名受试者在第29、57、90、120、150和200天时为ADA阳性。除第90天为阴性外，所有ADA阳性值的依库珠单抗交叉反应均为阳性。第三名受试者在第90、120、150和200天时为ADA阳性。所有ADA阳性值的依库珠单抗交叉反应均为阳性。

在ALXN1210 IV组中：一名受试者在第15、29、90、120、150和200天时为ADA阳性。所有ADA阳性值的依库珠单抗交叉反应均为阴性。

对于SC和IV给药而言，给药后最早的阳性ADA反应分别见于第29天和第15天。ADA阳性样品的ADA滴度较低，范围从＜1.0到27。在SC施用后的大多数ADA阳性样品中，ADA与依库珠单抗交叉反应。IV施用后，ADA不与依库珠单抗交叉反应。直到随访期结束，所有ADA阳性受试者均保持阳性。由于ADA阳性受试者的数目少，因此无法正式评估ADA对PK和PD的影响。在这些受试者中对有限的个体PK和PD结果的检查表明，免疫原性对ALXN1210的PK或PD没有明显影响。

6.药代动力学、药效学和免疫原性结论

SC注射后中位(范围)t_max为169.8(96.0至508.1小时)。在ALXN1210 SC和IV施用之后，几何平均值终末消除半衰期分别在31.3天和29.9天相似。

C_max估计值的GMR(SC/IV)为26.1％(95％CI：21.3，32.0)。基于AUC。。估计值的GMR(SC/IV)，ALXN1210 SC的绝对生物利用率为60.4％(95％CI：49.7，73.3)。

通过游离C5和总C5血清浓度及cRBC溶血评估的PD反应程度和持续时间取决于暴露。施用单剂量的ALXN1210IV 400mg引起对游离C5(≥99％)的立即且几乎完全的抑制，直到研究药物施用后第8天。施用单剂量的ALXN1210 SC 400mg(作为四次100mg SC注射进行施用)也引起游离C5减少，但未达到与IV施用相同的程度或发作不那么迅速。游离C5的最大平均抑制为77％，出现于SC施用后大约1周。施用400mg ALXN1210导致分别在SC和IV给药后，总C5相对于基线最大平均增加82％和107％。施用单剂量的ALXN1210 IV 400mg在平均cRBC溶血方面引起立即抑制，最大平均降低率为87％。施用单剂量的ALXN1210 SC 400mg也引起cRBC溶血的抑制，但与IV施用相比未达到相同程度或发作不那么迅速。在SC施用后大约第8天，出现29％的cRBC溶血的最大平均抑制。

ALXN1210 SC和ALXN1210 IV组中分别有3/23(13％)的受试者和1/12(8.3％)的受试者报告治疗中出现的ADA，ADA滴度值低，范围从＜1.0到27。对于SC和IV给药而言，最早的给药后ADA反应分别见于第29天和第15天。SC施用后，在大多数ADA阳性样品中ADA与依库珠单抗交叉反应。IV施用后，ADA不与依库珠单抗交叉反应。直到随访期结束，所有ADA阳性受试者均保持阳性。免疫原性对ALXN1210的PK或PD没有明显影响。

ALXN1210 SC治疗组中的另一名受试者在基线(给药前)时具有确认为ADA阳性的样品并且所有给药后样品也为ADA阳性。该受试者的所有给药后抗体滴度均低于给药前滴度值。在该受试者中，抗药抗体阳性反应与ALXN1210无关。

7.暴露程度

所有接受单剂量研究药物的受试者都纳入安全性组中(N＝42)：安慰剂SC(n＝6)；ALXN1210 SC(n＝24)；和ALXN1210 IV(n＝12)。在分配接受ALXN1210 IV的每名受试者中，施用总输注体积(80mL)的研究药物。在一名受试者中，因为向泵中编程的时间不足以完全输注，所以输注中断一分钟。在接受ALXN1210 SC或安慰剂SC的每名受试者中施用总体积的研究药物(4mL)。

8.不良事件

在三个治疗组中，有35/42(83.3％)的受试者经历了75个TEAE(全部为1级)。在ALXN1210 IV组、安慰剂SC组和ALXN1210 SC组中，具有至少1个TEAE的受试者比例分别为91.7％、83.3％和79.2％。在研究期间没有报告死亡或SAE。没有受试者因TEAE中断研究药物或退出研究(表23)。在研究过程中，所有TEAE均消退。大多数TEAE不需要任何药物，而且任何时候受试者都不需要非药物干预。

表22：治疗中出现的不良事件(TEAE)-总体汇总(安全性组)

注：百分比(％)等于n/N×100。

1级＝轻度；2级＝中度；3级＝重度；4级＝危及生命或致残；5级＝与TEAE相关的死亡。

相关TEAE＝可能相关，很可能相关或明确相关的TEAE；无关TEAE＝不相关或不太可能相关的TEAE。

^a对于ALXN1210 IV而言，如果输注期间发生TEAE，则认为在研究药物施用期间发生了TEAE；对于安慰剂SC和ALXN1210 SC而言，如果在第一次注射和最后一次注射之间发生了不良事件，则认为在研究药物施用期间发生了不良事件。

缩写：E＝事件数；IV＝静脉；N＝有风险的受试者总数；n＝具有AE的受试者数；SC＝皮下；SAE＝严重不良事件；TEAE＝治疗中出现的不良事件。

35名受试者总共报告了75个TEAE。在各治疗组中，最常报告的TEAE是鼻咽炎(23/42的受试者，54.8％)和头痛(7/42的受试者，16.7％)。表23中按系统器官分类(SOC)和治疗的优先项汇总了所有TEAE。

表23：治疗中出现的不良事件-按系统器官分类和优先项列出的频率表(安全性组)

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注：百分比(％)等于n/N×100。

对于给定的SOC和“优先项”，每名受试者仅计数一次，无论发生的不良事件的实际数量如何。

SOC和“优先项”的分类根据MedDRA v20.0。

缩写：E＝事件数；IV＝静脉；MedDRA＝《监管活动医学词典》；N＝有风险的受试者总数；n＝具有不良事件的受试者数；SC＝皮下；SOC＝系统器官分类；TEAE＝治疗中出现的不良事件。

大多数TEAE(72/75的TEAE，96％)被认为与ALXN1210治疗无关。在治疗组中，3/42(7.1％)的受试者报告了3个TEAE，研究人员将这3个TEAE评估为与ALXN1210治疗相关(“可能相关”)且为1级(轻度)：(1)来自ALXN1210 SC组的一名受试者的上呼吸道感染，(2)ALXN1210 SC中一名受试者的偏头痛，和(3)ALXN1210 IV组中一名受试者的头痛。所有75个TEAE均分类为1级(轻度)。没有受试者死亡，经历SAE或因TEAE而中断研究药物或中断研究。

一般而言，血液学、凝血、血液化学、尿分析和尿液化学分析的平均值在参考范围内，并且相对于基线的平均值变化无明显趋势。

大多数受试者进入研究时具有血液学、尿分析、凝血、血液化学和尿液化学参数正常值(即，在各自的参考范围内)。在治疗组间未观测到明显的转变趋势。对于一些实验室参数，观测到在研究过程中从基线时的正常值转变为异常值(1级[轻度]或2级[中度])，但是，认为这些异常值在临床上不显著。大多数转变是暂时性的并且在研究期间可以消退。

在研究期间，ALXN1210 SC组中3名受试者报告转变为3级异常值。向3级异常值的转变均未报告为AE。

首先，一名受试者报告了中性粒细胞计数减少。该受试者在基线时的中性粒细胞计数为3.77×10^9/L。在第43天评估的中性粒细胞计数为0.95×10^9/L(正常范围：2.0至7.5×10^9/L)。第57天中性粒细胞计数在正常范围内。

两名受试者报告钾水平升高(正常范围：3.5至5.1mmol/L)。在基线钾水平为4.5mmol/L的1名受试者中，第150天评估的钾水平为6.1mmol/L。同一天(计划外就诊)重复钾水平在正常范围内。在基线钾水平为4.6mmol/L的另一名受试者中，第90天评估的钾水平为6.4mmol/L。该受试者在筛查时(在不同的筛查就诊期间范围为5.2至6.2mmol/L)和大多数研究就诊中呈现出异常钾值。钾水平的升高是暂时性的；第150天和第200天记录的值在正常范围内。

生命体征测量值相对于基线没有任何可观测到的变化，对于个体受试者持续观测到的生命体征也没有任何临床上显著的异常。

除了报告为AE的那些结果外，没有受试者的身体检查结果具有临床意义。ECG或遥测监测结果相对于基线均无明显变化。

使用Fridericia的公式(QTcF)校正QT间隔的变化。在安慰剂SC组中的一名受试者中，在筛查时(510.0毫秒)和在第2天(508.7毫秒)、第150天(516.6毫秒)和第200天(612.9毫秒)观测到平均QT间隔＞500毫秒。在筛查时和在第2、150和200天，同一受试者的平均QTcF间隔分别为449.7毫秒、443.7毫秒、451.9毫秒和501.3毫秒。认为QT和QTcF间隔的增加在这名服用安慰剂的女性受试者中无临床显著性。也未将这些变化报告为AE。在研究期间，未观测到平均QT和QTcF间隔相对于基线的显著变化。

在SOI的15分钟内以及在30分钟、2小时、4小时、8小时的±15分钟内，以及在第2天(48小时)、第3天(72小时，总共进行6次评估)进行输注或注射部位评价。＜1cm的硬结或反应除非持续24小时以上，否则不将其视为AE。在ALIN1210 SC组中5/24的受试者中，在EOI后30分钟观测到红斑，并且在1名受试者中，注射后2小时2/4的注射部位具有最小的红斑(3mm)且在最后的时间点没有红斑。在ALXN1210 SC组中，1/24的受试者在EOI后30分钟报告了最小的硬结或肿胀(10mm)，在最后评估时未观测到硬结或肿胀。但是，这些都不满足方案定义的标准而不被视为AE。受试者使用VAS(0至100mm)对输注或注射部位的疼痛进行评级。对于大多数输注和注射，在所有评估时将输注部位的疼痛评级为0mm。SC组的两名受试者在第1天报告了3-5mm的暂时性疼痛，而IV组的3名受试者在输注后报告了最小程度的疼痛(1-5mm)。

9.安全性结论

所有接受单剂量研究药物(安慰剂SC、ALXN1210 SC或ALXN1210 IV)的受试者都纳入安全性组中(N＝42)。在3个治疗组中，有35/42的受试者(83.3％)经历了75个TEAE。仅3/75的TEAE(4％)被认为与ALXN1210相关，而72/75(96％)被认为与ALXN1210治疗无关。所有TEAE均为轻度(1级)并且在研究过程中消退。大多数TEAE不需要任何药物，而且任何时候受试者都不需要非药物干预。最常报告的TEAE是鼻咽炎(23/42的受试者，54.8％)和头痛(7/42的受试者，16.7％)。

研究期间无死亡或SAE。报告的TEAE均未导致研究药物中断或受试者退出研究。一般而言，在研究或随访期间，实验室参数、生命体征、身体检查、ECG或遥测没有临床上显著的变化。在任何单剂量的SC注射或IV输注期间或之后都没有超敏反应的临床迹象。在具有ADA阳性结果的受试者中，未注意到与过敏反应或超敏反应相关的临床体征或症状。

10.讨论和总体结论

这项1期研究的目的是评价在健康受试者中单剂量的ALXN1210 SC400mg与单剂量的ALXN1210 IV 400mg或安慰剂SC注射相比的安全性、耐受性、PK、PD和免疫原性。将总共42名受试者随机分组并接受研究药物：安慰剂SC(n＝6)；ALXN1210 SC(n＝24)；和ALXN1210IV(n＝12)。

在健康受试者中，通过SC施用途径以400mg剂量施用ALXN1210可以良好耐受。基于AUC。。估计值的GMR(SC/IV)，ALXN1210 SC的绝对生物利用率为60.4％(95％CI：49.7，73.3)。ALXN1210 SC和IV施用后，几何平均t_1/2估计值分别为31.3天和29.9天。通过游离C5和总C5血清浓度及cRBC溶血评估的PD反应程度和持续时间取决于暴露。

ALXN1210 SC和ALXN1210 IV组中分别有3/23(13％)的受试者和1/12(8.3％)的受试者报告抗药抗体，ADA阳性滴度值范围从＜1.0到27。对于SC和IV给药而言，给药后最早的反应分别见于第29天和第15天。在SC施用后的大多数ADA阳性样品中，ADA与依库珠单抗交叉反应。在显示出阳性ADA反应的受试者中，没有与过敏反应或超敏反应(包括过敏症)一致的临床体征或症状。另外，未能鉴定出对ALXN1210的PK或PD有明显影响。

在研究期间，任何治疗组中都没有意外的安全性问题。在研究期间未出现死亡或SAE，没有受试者经历任何导致研究药物中断或退出研究的TEAE。

序列汇总

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更具体地，本申请提供以下各项：

1.一种稳定水溶液，其包含：

(a)浓度为约100mg/mL的抗C5抗体，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；

(b)约50mM磷酸盐缓冲液；

(c)约5％蔗糖；和

(d)约25mM精氨酸。

2.一种稳定水溶液，其包含：

(a)抗C5抗体，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ IDNO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；

(b)约50mM磷酸盐缓冲液；

(c)约5％蔗糖；

(d)约0.05％聚山梨醇酯80；和

(e)约25mM精氨酸。

3.如项1所述的稳定水溶液，其还包含表面活性剂。

4.如项3所述的稳定水溶液，其中所述表面活性剂为约0.05％聚山梨醇酯80。

5.如项2所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体的浓度为

约100mg/mL。

6.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体还包含与人新生儿Fc受体(FcRn)结合的变体人Fc恒定区，其中所述变体人Fc CH3恒定区在对应于天然人IgG Fc恒定区的甲硫氨酸428和天冬酰胺434的残基处包含Met-429-Leu和Asn-435-Ser取代，各自按照EU编号。

7.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体包含SEQ ID NO：12中描绘的重链可变区和SEQ ID NO：8中描绘的轻链可变区。

8.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体包含SEQ ID NO：13中描绘的重链恒定区。

9.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：14中描绘的氨基酸序列的重链多肽和含有SEQ ID NO：11中描绘的氨基酸序列的轻链多肽。

10.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体是ALXN1210(雷武珠单抗)。

11.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中所述溶液的pH在7.2至7.6之间。

12.如项11所述的稳定水溶液，其中所述溶液的pH为7.4。

13.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中所述溶液是无菌的。

14.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中正如通过SEC-HPLC所测定的，所述抗C5抗体在2℃至8℃下储存至少六个月期间保持至少97％为单体。

15.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中正如通过SEC-HPLC所测定的，所述抗C5抗体在2℃至8℃下储存至少一年期间保持至少97％为单体。

16.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中正如通过SEC-HPLC所测定的，所述溶液中少于3％的所述抗C5抗体聚集。

17.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中正如通过SEC-HPLC所测定的，所述溶液中少于2％的所述抗C5抗体聚集。

18.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中正如通过SEC-HPLC所测定的，所述溶液中少于1％的所述抗C5抗体聚集。

19.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中与储存之前的所述抗C5抗体相比，在2℃至8℃下储存至少六个月期间，所述抗C5抗体保持其C5结合活性的至少90％。

20.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中与储存之前的所述抗C5抗体相比，在2℃至8℃下储存至少六个月期间，所述抗C5抗体保持其抑制溶血的活性的至少95％。

21.如前述项中任一项所述的稳定水溶液，其中所述溶液适于皮下施用。

22.如项1-21中任一项所述的稳定水溶液，其中所述溶液适于静脉施用。

23.一种用于产生稳定浓缩抗体溶液的方法，所述溶液包含：浓度为100mg/mL的抗C5抗体，所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：23中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；50mM磷酸盐缓冲液；5％蔗糖；和25mM精氨酸，所述方法包括：

24.一种治疗患有补体相关病状的人类患者的方法，其包括以有效治疗所述补体相关病状的量向所述患者施用如项1-21中任一项所述的稳定水溶液。

25.如项23所述的方法，其中所述补体相关病状选自类风湿性关节炎、抗磷脂抗体综合征、狼疮性肾炎、缺血再灌注损伤、非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)、典型溶血性尿毒症综合征、阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)、致密物沉积病、视神经脊髓炎、多灶性运动神经病、多发性硬化、黄斑变性、HELLP综合征、自发性流产、血栓性血小板减少性紫癜、寡免疫性血管炎、大疱性表皮松解症、复发性流产、创伤性脑损伤、心肌炎、脑血管病症、周围血管病症、肾血管病症、肠系膜/肠血管病症、血管炎、过敏性紫癜性肾炎、全身性红斑狼疮相关血管炎、类风湿性关节炎相关血管炎、免疫复合血管炎、高安氏病、扩张型心肌病、糖尿病血管病变、川崎病、静脉空气栓塞，支架置入、冠状动脉旋磨术、经皮腔内冠状动脉成形术后再狭窄，重症肌无力、冷凝集素病、皮肌炎、阵发性寒冷性血红蛋白尿、抗磷脂综合征、格雷夫斯病、动脉粥样硬化、阿尔茨海默氏病、全身性炎性反应败血症、败血性休克、脊髓损伤、肾小球肾炎、移植排斥、桥本甲状腺炎、I型糖尿病、银屑病、天疱疮、自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜、古德帕斯彻综合征、迪戈斯病和灾难性抗磷脂综合征。

26.如项24所述的方法，其中所述补体相关病状是非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)。

27.如项24所述的方法，其中所述补体相关病状是阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)。

28.如项24-26中任一项所述的方法，其中将所述稳定水溶液皮下施用给所述患者。

29.如项24-26中任一项所述的方法，其中将所述稳定水溶液静脉施用给所述患者。

30.一种治疗试剂盒，其包含：(i)根据项1-21中任一项所述的稳定水溶液和(ii)用于向人递送所述稳定水溶液的工具。

31.如项28所述的治疗试剂盒，其中所述工具是注射器。

Claims

1.一种稳定水溶液，其包含：

(a)浓度为约100mg/mL的抗C5抗体，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；

(b)约50mM磷酸盐缓冲液；

(c)约5％蔗糖；和

(d)约25mM精氨酸。

2.一种稳定水溶液，其包含：

(a)抗C5抗体，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ ID NO：19中描绘的氨基酸序列的重链CDR1，含有SEQ ID NO：18中描绘的氨基酸序列的重链CDR2，含有SEQ ID NO：3中描绘的氨基酸序列的重链CDR3，含有SEQ ID NO：4中描绘的氨基酸序列的轻链CDR1，含有SEQ ID NO：5中描绘的氨基酸序列的轻链CDR2，和含有SEQ ID NO：6中描绘的氨基酸序列的轻链CDR3；

(b)约50mM磷酸盐缓冲液；

(c)约5％蔗糖；

(d)约0.05％聚山梨醇酯80；和

(e)约25mM精氨酸。

3.如权利要求1所述的稳定水溶液，其还包含表面活性剂。

4.如权利要求3所述的稳定水溶液，其中所述表面活性剂为约0.05％聚山梨醇酯80。

5.如权利要求2所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体的浓度为

约100mg/mL。

6.如前述权利要求中任一项所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体还包含与人新生儿Fc受体(FcRn)结合的变体人Fc恒定区，其中所述变体人Fc CH3恒定区在对应于天然人IgGFc恒定区的甲硫氨酸428和天冬酰胺434的残基处包含Met-429-Leu和Asn-435-Ser取代，各自按照EU编号。

7.如前述权利要求中任一项所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体包含SEQ ID NO：12中描绘的重链可变区和SEQ ID NO：8中描绘的轻链可变区。

8.如前述权利要求中任一项所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体包含SEQ ID NO：13中描绘的重链恒定区。

9.如前述权利要求中任一项所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体包含含有SEQ IDNO：14中描绘的氨基酸序列的重链多肽和含有SEQ ID NO：11中描绘的氨基酸序列的轻链多肽。

10.如前述权利要求中任一项所述的稳定水溶液，其中所述抗C5抗体是ALXN1210(雷武珠单抗)。