CN116098973B - 一种中药组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种中药组合物及其应用，涉及水产动物疾病防治领域。该中药组合物的有效成分主要由以下重量份比的原料制备而成：0.8‑1.2份五味子，0.8‑1.2份杜仲，1.8‑2.2份土茯苓，0.8‑1.2份金钱草，1.8‑2.2份鱼腥草，1.8‑2.2份鸡骨草，0.8‑1.2份蒲公英，1.8‑2.2份荷叶。该中药组合物能在细胞水平上对大嘴鲈鱼病毒(LMBV病毒)具有阻断作用和杀灭作用，同时在鳜鱼等肉食性鱼类的人工配合饵料饲养过程中，改善鱼的生长，提高血清和肝脏的免疫指标，改善肠道消化，促进脾肾相关免疫基因的表达。
Description
技术领域
本发明涉及水产动物疾病防治领域，特别是涉及一种中药组合物及其应用。
背景技术
肉食性鱼类在渔业集约化养殖趋势下存在许多问题，如鲜活饵料供应困难、转化率低、水体负担过重及病原传播途径多等。因此，通过对肉食性鱼类进行驯化，改变食性，使用人工配合饲料养殖具有重要的实际生产意义。一方面，能够切断病原通过鲜活饵料鱼进行传播的途径，降低鱼类的发病风险；另一方面，能够提高饲料转化率，降低生产成本，提高经济效益。目前，已经驯化成功且在国内外形成一定养殖规模的肉食性鱼类主要有鲈鱼、鳢、黄鳝等。
鳜鱼(Sinipercachuatsi)在分类学上属于鲈形目(Perciformes)真鲈科(Percichthyidae)鳜属，具有肉质鲜美、无肌间刺、营养价值高等优点，深深地受到消费者的喜爱。作为中国本土的一种名贵水产品，经济价值高，养殖产业发展迅速。然而，鳜鱼属于凶猛肉食性鱼类，主要食物来源于活饵，鳜鱼这一食性给人工养殖过程中产生了许多问题，如饵料系数低、水环境污染严重、病害频繁等，这给当鳜鱼人工养殖产业大规模推广造成了很大的阻碍。此外，对鳜鱼进行人工配合饲料驯化，改变食性，来替代活饵养殖是鳜鱼行业未来发展方向之一。研究表明通过使用人工配合饲料养殖鳜鱼能够降低饵料系数，提高养殖效率和增加收益。但人工配合饲料养殖鳜鱼同样产生许多问题，如抗病力下降、植物性饲料原料消化吸收困难等。同时，抗病力的下降更容易导致疾病的发生。其中病毒性疾病因发病率高、流行快、无有效控制措施等特点，成为危害鳜鱼健康的主要病害之一，而大嘴鲈鱼病毒(LMBV病毒)是一种已知的、唯一能引起大嘴鲈鱼致死性疾病的病毒。因此，如何去解决上述问题成为人工配合饲料养殖模式普遍推广的主要技术难题。
发明内容
针对上述问题，本发明提供一种中药组合物，能在细胞水平上对大嘴鲈鱼病毒(LMBV病毒)具有阻断作用和杀灭作用，同时在鳜鱼等肉食性鱼类的人工配合饵料饲养过程中，改善鱼的生长，提高血清和肝脏的免疫指标，改善肠道消化，促进脾肾相关免疫基因的表达。
为了达到上述目的，本发明提供了一种中药组合物，该中药组合物的有效成分主要由以下重量份比的原料制备而成：
目前，针对饲料鳜鱼养殖过程中产生的抗病力差、植源性饲料吸收困难等特点仍无较好的解决方案，常用语水产用药的抗生素虽然具有提高鱼类免疫力、治疗疾病等作用，但容易使病原微生物产生耐药性，具有巨大的潜在生物安全风险。而本发明人在研究过程中发现，中草药中含有多种抗病毒活性成分，如多糖、黄酮、生物碱等，同时因其价格低廉、毒性小、无残留等优势，有利于防治病毒性疾病。另一方面，中草药在促进鱼类消化吸收、提高抗病力和免疫力均有不错的效果。因此，本发明人通过上述配方制备得到一种中药组合物，该中药组合物能在细胞水平上对大嘴鲈鱼病毒(LMBV病毒)具有阻断作用和杀灭作用，同时在鳜鱼等肉食性鱼类的人工配合饵料饲养过程中，改善鱼的生长，提高血清和肝脏的免疫指标，改善肠道消化，促进脾肾相关免疫基因的表达。且该中药组合物，具有抗病毒、促生长、提高消化及免疫力，且具有经济有效、毒性小及无残留等优点。
在其中一个实施例中，所述中药组合物的有效成分主要由以下重量份比的原料制备而成：
本发明还提供了一种鱼饲料，该鱼饲料包括所述中药组合物，所述中药组合物的工作浓度为0.15-0.25％。
在其中一个实施例中，所述中药组合物的工作浓度为0.2％。
所述工作浓度为上述成分在使用时能够达到预期效果的浓度，可以理解的，本领域技术人员在配制上述中药组合物时，可以配制浓度更高的母液或者储备液，待使用时再稀释，所述母液或者储备液及其浓度均在本发明的保护范围之内。
在其中一个实施例中，所述鱼饲料为鳜鱼的人工配合饵料。
本发明还提供了所述中药组合物的应用。
在其中一个实施例中，所述应用包括用于制备鳜鱼的人工配合饵料。
本发明还提供了所述鱼饲料的应用。
本发明还提供了一种鳜鱼的饲养方法，采用所述鱼饲料进行喂养。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明的一种中药组合物及其应用，该中药组合物能在细胞水平上对大嘴鲈鱼病毒(LMBV病毒)具有阻断作用和杀灭作用，同时在鳜鱼等肉食性鱼类的人工配合饵料饲养过程中，改善鱼的生长，提高血清和肝脏的免疫指标，改善肠道消化，促进脾肾相关免疫基因的表达。且该中药组合物，具有抗病毒、促生长、提高消化及免疫力，且具有经济有效、毒性小及无残留等优点。
附图说明
图1为实施例中对照组的鳜鱼中后肠组织形态的HE染色图；
图2为实施例中中药组合物组的鳜鱼中后肠组织形态的HE染色图。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的较佳实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。
定义：
本发明所述的肉食性鱼类：海洋或淡水中以动物作为主要饵料的鱼类。
人工配合饲料：指根据动物的生长阶段、生理要求、生产用途的营养需要，以饲料营养价值评定的实验和研究为基础，按科学配方把不同来源的饲料，依一定比例均匀混合，并按规定的工艺流程生产以满足各种实际需求的饲料。
饲料鳜鱼：通过对活饵鳜鱼进行人工配合饲料驯化，改变食性，来替代活饵养殖的养殖鱼类。
来源：
LMBV毒株(中国水产科学研究院珠江水产研究所)，EPC细胞(中国水产科学研究院珠江水产研究所)，M199培养基、胎牛血清、双抗、胰蛋白酶(购自Gibco)，CCK8试剂(日本同仁化学)，基础饲料(中国佛山市南海区杰大饲料有限公司)。
本实施例所用试剂、材料、设备如无特殊说明，均为市售来源；实验方法如无特殊说明，均为本领域的常规实验方法。
实施例1
一种中药组合物。
该中药组合物的制备方法具体如下。
一、材料与方法。
1、试验材料。
LMBV毒株和EPC细胞由中国水产科学研究院珠江水产研究所鱼病室提供。M199培养基、胎牛血清、双抗、胰蛋白酶均从Gibco购买。CCK8试剂从日本同仁化学购买。动物试验用鱼为600尾同批次健康、大小一致鳜鱼；规格大小为1.3*1.5*1.3的网箱；基础日粮(中国广东省佛山市杰大饲料)。
2、设备。
电磁炉；数显恒温水浴锅；低温离心机；新世纪普析紫外分光光度计；溶菌酶检测试剂盒，超氧化物歧化酶检测试剂盒，过氧化氢酶检测试剂盒；新世纪普析紫外分光光度计；SCIENTZ-48高通量组织研磨器；GM-05控温仪；试剂；反转录试剂盒；荧光定量试剂盒；PBS缓冲液；氯仿，异丙醇，无水乙醇；超微量核酸蛋白测定仪；ABI7500型实时荧光定量PCR仪器。
3、中药组合物水提液及单种中草药水提液的制备。
将五味子、杜仲、土茯苓、金钱草、鱼腥草、鸡骨草、蒲公英、荷叶这八味中药，按照如下重量份数称取：1份五味子、1份杜仲、2份土茯苓、1份金钱草、2份鱼腥草、2份鸡骨草、1份蒲公英、2份荷叶。混合后用粉碎机粉碎后，过80目筛，制成中药组合物制剂，然后称取一定量的中药组合物，用脱脂棉纱包好，加入适当的水，浸泡0.5h，烧开，文火煎煮0.5h后，用纱布进行过滤，滤药渣再次进行煎煮，将两次滤液混合，蒸发浓缩、至浓缩液浓度为lg/mL，4℃保存备用。
分别称取1份五味子、1份杜仲、2份土茯苓、1份金钱草、2份鱼腥草、2份鸡骨草、1份蒲公英、2份荷叶，分别用粉碎机粉碎后，过80目筛，得到单方中药制剂，然后采用和上述中药组合物水提液相同的制备方法，分别制备得到五味子、杜仲、土茯苓、金钱草、鱼腥草、鸡骨草、蒲公英、荷叶各自的单方中药水提液。
二、实验设计。
1、LMBV病毒滴度的测定。
将待测病毒经10倍梯度稀释后，按100ul/孔的剂量加入到长满EPC细胞的96孔板中，每个稀释度8个重复。同时设正常细胞对照为阴性对照，28℃吸附1.5h后弃去病毒液，加入含5％血清的细胞维持液，放置5％CO2培养箱培养，连续观察7d，按Karber氏法计算半数组织培养感染剂量。
2、中药组合物安全浓度的测定。
采用CPE法测定上述中药组合物水提液、8种单方中药水提液对EPC细胞的最大安全浓度。将经0.22mm无菌滤膜过滤后的药物倍比稀释后接种于长满单层EPC细胞的96孔板中的，每个稀释度做4个重复，另设1组正常细胞对照，28℃培养96h，取不引起细胞病变的最大浓度为该药物的安全浓度。
3、中药组合物对LMBV的阻断作用测定。
在安全浓度基础上将上述中药组合物水提液、8种单方中药水提液，分别倍比稀释成5个稀释度，加到长成单层EPC的96孔板中，按每孔100μL添加各浓度药物，每个稀释度做4孔重复孔。在28℃孵育4h后吸走各孔药物，另加入100μL100 TCID50的病毒液，于28℃吸附1.5h，随后吸去病毒液，加入细胞维持液，另设细胞对照和病毒对照。28℃细胞培养箱中培养，每日观察CPE，当病毒对照CPE达到“+++”“++++”时，记录CPE情况，使用CCK8法测定96孔板中细胞的存活率。
4、中药组合物对LMBV的抑制作用测定。
待96孔细胞培养板中的EPC细胞长成单层后，按每孔100μL的添加量接种100TCID50的病毒液，于28℃吸附1.5h，弃去病毒液，加入安全浓度范围内倍比稀释的中药组合物水提液、8种单方中药水提液，每孔100μL，每个稀释度做4孔重复，另设细胞对照和病毒对照。28℃细胞培养箱中培养，每日观察CPE，当病毒对照CPE达到“+++”“++++”时，记录CPE情况，使用CCK8法测定96孔板中细胞的存活率。
5、中药组合物对LMBV的杀灭作用测定。
将安全浓度范围内5个稀释度的中药组合物水提液、8种单方中药水提液分别与等体积100TCID50病毒液混合，28℃作用2h，加到长成单层EPC细胞的96孔细胞培养板上，每孔100μL，每个稀释度做4孔重复，另设细胞对照和病毒对照。28℃细胞培养箱中培养，每日观察CPE，当病毒对照CPE达到“+++”“++++”时，记录CPE情况，使用CCK8法测定96孔板中细胞的存活率。
6、试验用鱼和饲养管理。
选取450尾健康、大小均匀(29.4±0.20g)的的鳜鱼，分2个组，每组设置3个重复，共饲养在6个网箱中，每个网箱饲养30尾鳜鱼，网箱规格为1.3×1.5×1.3m，养殖周期为8周。日投喂量3％-5％，每日投喂饲料两次(6：30和18：30)。各组饲料配制如下表。
表1对照组及中草药组饲料添加组成
注：上表的中草药组中，中药组合物的工作浓度为0.2％，即每100g添加了中药组合物水提液后的鱼饲料中，含有0.2g中药组合物的有效成分。
7、样品采集与处理。
试验开始前取样，试验进行8周。取样时每个组随机取样6尾，每个重复2尾鱼，麻醉后，先测量体长和体重，然后尾静脉采血，血液室温凝固2h，全血样本以4000r/min、4℃离心10min收集血清，保存于-80℃冰箱中，待检测。血液采集结束后无菌条件下，取出内脏，内脏团及肝脏分别称重，记录数据。收集每尾鱼的肝脾肾组织分别放入含有1mLTrizol的2mL离心管中，肝脾肾组织分别置于2mL离心管中，用于免疫基因mRNA相对表达量的测定以及肝脏蛋白酶、淀粉酶和免疫酶活的测定，所有样品于-80℃保存，每尾的中后肠，用无菌水冲洗内容物，测菌群丰度以及淀粉酶和蛋白酶活。
8、生长指标的测定。
测定特定生长率、增重率、成活率、饲料系数、脾指数、肝体比、肥满度、脏体比等生长指标。
9、肠道、肝脏消化酶活力的测定。
取每条鳜鱼0.1g肠道或肝脏，加入1ml PBS缓冲液和磁珠若干匀浆，制作组织悬浮液，4℃，6100×g离心15min清除的上清液转移到一个干净的10mL管中，用于淀粉酶和蛋白酶活性的定量测定。
蛋白酶活力测定：取1.0mL肠道或肝脏的上清液与5.0mL、0.7％(W/V)酪蛋白溶液混合于37℃孵育15min。随后，加入3mL、110mmol/L三氯乙酸，4℃、12000×g离心15min，取2mL上清液转移到新的10mL管中，将1.0mL、0.5mmol/L福林苯酚和5mL、500mmol/LNa2CO3加入上清液中于37℃孵育30min。以酪氨酸为标准品，紫外可见分光光度计在440nm处测定吸光度，建立校准曲线。每分钟释放1μmoL酪氨酸的酶的量为一个蛋白酶活力单位。
淀粉酶活力测定：DNS方法测定。取0.5mL肠道或肝脏的上清液与0.5mL、1％的可溶性淀粉溶液混合于37℃孵育30min。随后，加入1mLDNS试剂，煮沸5min，冷却至室温，定容至25mL，用紫外可见分光光度计在540nm处测定吸光度。以葡萄糖为标准品建立标准曲线，一个淀粉酶活力单位为每分钟释放1μg还原糖的酶。
脂肪酶活力测定：采用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定，具体操作详见试剂盒说明书。
10、肠道组织形态分析。
中后肠在Bouin's溶液中固定24小时，然后脱水，嵌入石蜡，沿肠腔轴线切成4微米的横向切口。应用苏木精和伊红(H.E.)进行染色，并使用光学显微镜(尼康，东京，日本)和数码相机(尼康，东京，日本)对样品进行组织学检查。使用Image-Pro软件测量每段肠绒毛的高度和基底膜的厚度。
11、血清及肝脏免疫酶活力的测定。
溶菌酶(Lysozyme，LZM)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)、过氧化氢酶(Catalase，CAT)、丙二醛含量(MDA)、谷丙转氨酶(GOT)及谷草转氨酶(GPT)等免疫指标，采用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定，具体操作详见试剂盒说明书。
12、鳜鱼脾脏和肾脏免疫相关基因测定。
采用TRIzol试剂提取鳜鱼脾脏和肾脏组织的总RNA，具体步骤详见说明书。以反转录cDNA为模板，以β-actin为内参基因，检测HSP70、TNF-α和IL-8基因在脾脏和肾脏的相对表达量，荧光定量引物如下表。
表2实时定量PCR的引物对序列
荧光定量PCR反应体系：2×TransStrartTopGreenqPCRSuperMix，10μL；上游引物0.4μL；下游引物0.4μL；cDNA模板2μL；RNaseFreedH2O，6.8μL；ROX1.0μL；Total20μL。反应程序：94℃30s，94℃5s，60℃15s，72℃10s，40个循环，退火温度根据目的基因改变，每个组的3个重复样品作为3个生物重复，每个生物重复设置3个技术重复。
13、数据分析。
数据用SPSS进行T检验分析(T-Test)，差异显著水平为0.05表示差异显著，数据具有统计学意义。采用2-ΔΔCT方法计算免疫基因的相对表达量，以不同时间点的对照组定义为1。
三、实验结果。
1、LMBV的病毒滴度及中药组合物对EPC的安全浓度。
LMBV的滴度为10-4.48TCID50/ml；中药组合物对EPC细胞的安全浓度为12.50mg/ml。
2、中药组合物的抗LMBV作用。
(1)中药组合物的抗LMBV作用。
表3中药组合物的抗LMBV作用
注：数据肩标无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异(P<0.05)。
结果显示，中药组合物对LMBV病毒有良好的阻断作用和杀灭作用。其中，阻断作用效果研究中，中药组合物浓度为6.25mg/ml和12.5mg/ml的细胞存活率显著高于病毒对照组(P＜0.05)，并且随着浓度的增大，细胞存活率存在逐步递增的趋势。此外，杀灭作用效果研究中，中药组合物浓度大于0.78125mg/ml的细胞存活率均显著高于对照组(P＜0.05)，同时随着中药组合物浓度的不断增大而升高。然而，结果表明中药组合物对病毒的抑制作用效果不明显，各组间差异并不显著(P＞0.05)。
(2)中药组合物、8种单方中药对EPC细胞的安全浓度。
表4中药组合物、8种单方中药对EPC细胞的安全浓度
结果显示：从上表可见，将上述8种单方中药经一定比例配比后制备得到的中药组合物，对EPC细胞拥有更大的安全性。
(3)中药组合物、单方中药对LMBV的阻断作用。
表5中药组合物、8种单方中药对LMBV的阻断作用
结果显示：从上表可见，在最大安全浓度时，只有中药组合物和鸡骨草的细胞存活率高于100％，对LMBV阻断作用最强的为鸡骨草，其次为复方中草药，当稀释倍数为20和21时，两者的细胞存活率均明显高于其它中草药及病毒对照。
(4)中药组合物、8种单方中药对LMBV的抑制作用。
表6中药组合物、8种单方中药对LMBV的抑制作用
结果显示：在最大安全浓度时，仅有鸡骨草的细胞存活率高于病毒对照，其余各种中药单方及中药组合物对LMBV均无明显的抑制作用。
(5)中药组合物、8种单方中药对LMBV的杀灭作用。
表7中药组合物、8种单方中药对LMBV的杀灭作用
结果显示：在最大安全浓度时，中药组合物、荷叶、鸡骨草、金钱草、蒲公英、土茯苓、五味子和鱼腥草的细胞存活均明显高于病毒对照，其中中药组合物对LMBV的杀灭作用最强，并且经过4次倍比稀释后，细胞存活率仍然高于100％。
综上所述，8种不同的中药经过合理配比后得到的中药组合物对EPC细胞的安全性得到明显的提高，同时相对于大多数单方中药而言，对LMBV的阻断作用和杀灭作用也得到了协同增效的作用。
3、中药组合物对鳜鱼生长性能的影响。
表8中药组合物对鳜鱼生长性能的影响
注：数据肩标无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异(P<0.05)。
结果显示，日粮中添加中药组合物相对于对照组而言能够显著提高鳜鱼的增重率(P＜0.05)，而试验组相对于对照组的特定生长率、脏体比有一定的改善，但各组间并没有显著差异(P＞0.05)。
4、中药组合物对鳜鱼消化酶的影响。
表9中药组合物对鳜鱼消化酶的影响
注：数据肩标无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异(P<0.05)。
结果显示，日粮中添加了中药组合物组别的蛋白酶活力及淀粉酶活性均显著高于对照组(P＜0.05)。
5、中药组合物对鳜鱼血清生理生化指标的影响。
表10中药组合物对鳜鱼血清生理生化指标的影响
注：数据肩标无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异(P<0.05)。
结果显示，中草药组血清中的甘油三脂含量显著低于对照组(P＜0.05)，溶菌酶活性显著高于对照组(P＜0.05)，而过氧化氢酶活性、总胆固醇含量、谷草转氨酶活力及谷丙转氨酶活力均无显著性差异(P＞0.05)。
6、中药组合物对鳜鱼肝脏抗氧化指标的影响。
表11中药组合物对鳜鱼肝脏抗氧化指标的影响
注：数据肩标无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异(P<0.05)。
结果显示，中草药组别肝脏的过氧化氢酶活性显著高于对照组(P＜0.05)，而超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量有一定的改善，但无显著性差异(P＞0.05)。此外，谷草转氨酶活力和谷丙转氨酶活力无显著性差异(P＞0.05)。
7、中药组合物对鳜鱼脾脏相关免疫表达量的影响。
表12中药组合物对鳜鱼脾脏相关免疫表达量的影响
注：数据肩标无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异(P<0.05)。
结果显示，中草药组别中脾脏的TNF-α、IL-8、HSP-70的相对表达量均显著高于对照组(P＜0.05)。
8、中药组合物对鳜鱼肾脏相关免疫表达量的影响。
表13中药组合物对鳜鱼肾脏相关免疫表达量的影响
注：数据肩标无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异(P<0.05)。
结果显示，中草药组别中肾脏的HSP-70的相对表达量显著高于对照组(P＜0.05)，而TNF-α、IL-8无显著性差异(P＞0.05)。
9、中药组合物对鳜鱼中后肠组织形态的影响。
表14中药组合物对鳜鱼中后肠组织形态的影响
注：数据肩标无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异(P<0.05)。
结果显示，中草药组别的中后肠绒毛长度和基层厚度均显著高于对照组(P＜0.05)，而绒毛宽度无显著性差异(P＞0.05)，如图1、图2所示，其中图1为对照组的鳜鱼中后肠组织形态的HE染色图，图2为中草药组的鳜鱼中后肠组织形态的HE染色图。
综上所述，通过在基础日粮中添加中药组合物水提液，使鱼饲料中中药组合物的工作浓度为0.2％，改善了鳜鱼生长，促进了肠道发育及提高了肠道蛋白酶和淀粉酶活性，降低了血清中甘油三酯的含量，提高了血清中溶菌酶及谷草转氨酶的活性，提高了肝脏中的过氧化氢酶活性和超氧化物歧化酶活性，降低了丙二醛含量，促进了脾脏的TNF-α、IL-8、HSP-70以及肾脏的HSP-70的相对表达量。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (7)
1.一种中药组合物，其特征在于，该中药组合物的有效成分由以下重量份比的原料制备得到：
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物的有效成分由以下重量份比的原料制备得到：
3.一种鱼饲料，其特征在于，该鱼饲料包括权利要求1-2中任一项所述的中药组合物，所述中药组合物的工作浓度为0.15-0.25％。
4.根据权利要求3所述的鱼饲料，其特征在于，所述中药组合物的工作浓度为0.2％。
5.根据权利要求3所述的鱼饲料，其特征在于，所述鱼饲料为鳜鱼的人工配合饵料。
6.权利要求1-2中任一项所述中药组合物的应用，所述应用包括用于制备鳜鱼的人工配合饵料。
7.一种鳜鱼的饲养方法，其特征在于，采用权利要求3-5中任一项所述的鱼饲料进行喂养。
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Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101124945A (zh) * | 2007-09-27 | 2008-02-20 | 天津农学院 | 淡水鱼类传染性疾病专用中药组合物 |
| CN102845647A (zh) * | 2012-09-28 | 2013-01-02 | 河北科技师范学院 | 改善鲤鱼肉质的中草药饲料添加剂及其制备方法 |
| CN103404737A (zh) * | 2013-08-20 | 2013-11-27 | 张黎明 | 一种复合型鸡饲料添加剂及其制备和使用方法 |
| CN104840590A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-08-19 | 新昌县大成生物科技有限公司 | 治疗甲鱼烂嘴病的药物 |
| CN106819604A (zh) * | 2015-12-05 | 2017-06-13 | 天津市茂林水产养殖有限公司 | 一种鲫鱼饲料的中草药添加剂 |
| CN107319197A (zh) * | 2017-07-20 | 2017-11-07 | 通化师范学院 | 一种预防金鳟传染性胰腺坏死病（ipn）的中草药饲料添加剂及其用途 |
| CN108714196A (zh) * | 2018-07-11 | 2018-10-30 | 温联标 | 一种巴巴果液 |
| CN109497310A (zh) * | 2018-12-24 | 2019-03-22 | 吉林省尚易养殖农业发展科技有限公司 | 一种猪用中草药组合富硒饲料 |
| CN110664950A (zh) * | 2019-10-24 | 2020-01-10 | 安徽科技学院 | 一种甲鱼中草药饲料添加剂 |
| CN110840963A (zh) * | 2019-09-27 | 2020-02-28 | 珠海容川饲料有限公司 | 一种改善泥鳅肠道健康的中草药添加剂和人工配合饲料及其制备方法 |
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2023
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Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101124945A (zh) * | 2007-09-27 | 2008-02-20 | 天津农学院 | 淡水鱼类传染性疾病专用中药组合物 |
| CN102845647A (zh) * | 2012-09-28 | 2013-01-02 | 河北科技师范学院 | 改善鲤鱼肉质的中草药饲料添加剂及其制备方法 |
| CN103404737A (zh) * | 2013-08-20 | 2013-11-27 | 张黎明 | 一种复合型鸡饲料添加剂及其制备和使用方法 |
| CN104840590A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-08-19 | 新昌县大成生物科技有限公司 | 治疗甲鱼烂嘴病的药物 |
| CN106819604A (zh) * | 2015-12-05 | 2017-06-13 | 天津市茂林水产养殖有限公司 | 一种鲫鱼饲料的中草药添加剂 |
| CN107319197A (zh) * | 2017-07-20 | 2017-11-07 | 通化师范学院 | 一种预防金鳟传染性胰腺坏死病（ipn）的中草药饲料添加剂及其用途 |
| CN108714196A (zh) * | 2018-07-11 | 2018-10-30 | 温联标 | 一种巴巴果液 |
| CN109497310A (zh) * | 2018-12-24 | 2019-03-22 | 吉林省尚易养殖农业发展科技有限公司 | 一种猪用中草药组合富硒饲料 |
| CN110840963A (zh) * | 2019-09-27 | 2020-02-28 | 珠海容川饲料有限公司 | 一种改善泥鳅肠道健康的中草药添加剂和人工配合饲料及其制备方法 |
| CN110664950A (zh) * | 2019-10-24 | 2020-01-10 | 安徽科技学院 | 一种甲鱼中草药饲料添加剂 |
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